Biochemie und Pathobiochemie 8. Auflage

Springer-Lehrbuch

Georg Löffler (Hrsg.) Petro E. Petrides (Hrsg.) Peter C. Heinrich (Hrsg.)

Biochemie und Pathobiochemie 8., völlig neu bearbeitete Auflage Mit 1192 vierfarbigen Abbildungen und 192 Tabellen

123

Professor Dr. Georg Löffler

Professor Dr. Peter C. Heinrich

Institut für Biochemie Genetik und Mikrobiologie Universität Regensburg Universitätsstraße 31 93053 Regensburg E-Mail: [email protected]

Institut für Biochemie Universitätsklinikum RWTH Aachen Pauwelsstraße 30 52074 Aachen E-Mail: [email protected]

Professor Dr. Petro E. Petrides Hämatologisch-onkologische Praxis am Isartor und Medizinische Fakultät der Ludwig-Maximilians-Universität München Zweibrückenstraße 2 80331 München E-Mail:[email protected]

ISBN-10 3-540-32680-4 8. Auflage Springer Medizin Verlag Heidelberg ISBN-13 978-3-540-32680-9 8. Auflage Springer Medizin Verlag Heidelberg Bibliografische Information der Deutschen Nationalbibliothek Die Deutsche Nationalbibliothek verzeichnet diese Publikation in der Deutschen Nationalbibliografie; detaillierte bibliografische Daten sind im Internet über http://dnb.d-nb.de abrufbar. Springer Medizin Verlag Heidelberg Dieses Werk ist urheberrechtlich geschützt. Die dadurch begründeten Rechte, insbesondere die der Übersetzung, des Nachdrucks, des Vortrags, der Entnahme von Abbildungen und Tabellen, der Funksendung, der Mikroverfilmung oder der Vervielfältigung auf anderen Wegen und der Speicherung in Datenverarbeitungsanlagen, bleiben, auch bei nur auszugsweiser Verwertung, vorbehalten. Eine Vervielfältigung dieses Werkes oder von Teilen dieses Werkes ist auch im Einzelfall nur in den Grenzen der gesetzlichen Bestimmungen des Urheberrechtsgesetzes der Bundesrepublik Deutschland vom 9. September 1965 in der jeweils geltenden Fassung zulässig. Sie ist grundsätzlich vergütungspflichtig. Zuwiderhandlungen unterliegen den Strafbestimmungen des Urheberrechtsgesetzes. Springer Medizin Verlag. springer.com © Springer Medizin Verlag Heidelberg 1975, 1979, 1985, 1990, 1997, 1998, 2003, 2007 Printed in Germany Produkthaftung: Für Angaben über Dosierungsanweisungen und Applikationsformen kann vom Verlag keine Gewähr übernommen werden. Derartige Angaben müssen vom jeweiligen Anwender im Einzelfall anhand anderer Literaturstellen auf ihre Richtigkeit überprüft werden. Die Wiedergabe von Gebrauchsnamen, Warenbezeichnungen usw. in diesem Werk berechtigt auch ohne besondere Kennzeichnung nicht zu der Annahme, dass solche Namen im Sinne der Warenzeichen- und Markenschutzgesetzgebung als frei zu betrachten wären und daher von jedermann benutzt werden dürfen. Planung: Renate Scheddin, Kathrin Nühse, Heidelberg Projektmanagement: Rose-Marie Doyon, Heidelberg Umschlaggestaltung & Design: deblik Berlin Abbildung Umschlag: Dr. Serge Haan, Institut für Biochemie, RWTH Aachen. Die Abbildung zeigt ein Detail der Bindung des Transkriptionsfaktors STAT3 (gelb dargestellt) an sein response element (7 Abb. 25.29b; Literaturstelle zur Kristallstruktur: Becker et al. 1998, Nature 394, 145–51). Einige für die Interaktion mit der doppelsträngigen DNA wichtige Aminosäuren (Lys340, Asn 466, Ser 465 und Gln469) sind abgebildet. Zeichnungen: BITmap Mannheim SPIN 10912935 Satz: Fotosatz-Service Köhler GmbH, Würzburg Druck- und Bindearbeiten: Stürtz GmbH, Würzburg Gedruckt auf säurefreiem Papier 15/2117 rd – 5 4 3 2 1 0

V

Vorwort Gegenstand der Biochemie ist die Aufklärung der molekularen Grundlagen des Lebens. Die Biochemie ist insbesondere aufgrund einer Vielzahl neuer innovativer Techniken und Forschungsansätze sehr stark in ihre Nachbardisziplinen wie die Molekularbiologie, Zellbiologie, Zellphysiologie, Genetik, molekulare Pharmakologie, Anatomie, Physiologie, aber auch Medizin hineingewachsen, so dass heute eine exakte Abgrenzung der Biochemie von diesen Nachbardisziplinen sehr schwierig ist. In Zukunft werden die genannten Fächer sich vielleicht alle unter dem Dach Lebenswissenschaften wieder finden. Die seit Jahren mit ungebrochener Geschwindigkeit ablaufende Zunahme unserer Kenntnisse in den Biowissenschaften, und hier speziell in der Biochemie, Molekular- und Zellbiologie hat für die Medizin wichtige Konsequenzen ergeben. Sie haben zum tieferen Verständnis pathobiochemischer Zusammenhänge geführt, aber auch neue diagnostische Verfahren und Fortschritte der Arzneimitteltherapie ermöglicht. Diese rasante Entwicklung ist der Grund dafür, dass nur vier Jahre nach dem Erscheinen der 7. Auflage unseres Lehrbuches der Biochemie und Pathobiochemie nun eine gründlich überarbeitete und aktualisierte 8. Auflage vorgelegt wird. In Anbetracht dieser Tatsache war es uns besonders wichtig, auf der einen Seite das moderne biochemische Grundwissen zu aktualisieren und möglichst kompakt darzustellen. Darüber hinaus werden Themen wie die molekularen Grundlagen der Regulation zellulärer Aktivitäten vertieft behandelt. Andererseits sollten die Kapitel über spezifische Stoffwechselleistungen einzelner Organe und Organsysteme möglichst umfassend präsentiert werden, da sie von besonderer medizinischer Relevanz sind und die Darstellung der vielfältigen Bezüge zur Pathobiochemie ermöglichen. Um diese Ziele zu erreichen, haben wir den mit der 7. Auflage beschrittenen Weg der Erweiterung unserer Kompetenz durch Einbeziehung neuer Autoren weiter verfolgt, wobei das bisherige didaktische Konzept mit straffer Gliederung der einzelnen Kapitel, Zusammenfassungen nach jedem größeren Abschnitt, Überschriften in Satzform und Infoboxen unverändert blieb. Ebenso wurde die bisherige Gliederung des Buches mit geringen Veränderungen beibehalten. Von entscheidender Bedeutung für das Zustandekommen der vorliegenden Ausgabe war auch die Erweiterung des Herausgebergremiums. Peter C. Heinrich hat sich als Chemiker sehr früh zum Biochemiker spezialisiert und sich als Forschungsgebiet mit Untersuchungen zum Wirkungsmechanismus von Zytokinen einem Thema von höchster medizinischer Relevanz gewidmet. Seit Jahren ist er darüber hinaus in seiner Eigenschaft als Lehrstuhlinhaber mit den Problemen des Biochemieunterrichtes für Medizinstudenten bestens vertraut. Seine Tätigkeit als Herausgeber hat eine umfassende Durchsicht der einzelnen Kapitel und damit deren notwendige Abstimmung ermöglicht. Außerdem wurde das umfangreiche Bildmaterial kritisch gesichtet und verbessert. Darüber hinaus sind durch Peter C. Heinrich neue Kompetenzen in das Lehrbuch eingebracht worden. Die in den ersten 6 Kapiteln behandelten Themen Bausteine des Organismus, Enzymologie und Grundzüge der Zellbiologie wurden von den Kollegen Kalbitzer, Kriegel, Schellenberger und Hasilik aktualisiert und z. T. neu gefasst. Dasselbe gilt für den Abschnitt Weitergabe und Aktualisierung der Erbinformation, der durch die Kollegen Montenarh, Hasilik und Modrow sehr gründlich überarbeitet und in weiten Teilen neu verfasst wurde. Die folgenden 13 Kapitel beschreiben verschiedene Aspekte des Zellstoffwechsels. Von Herrn Kollegen Röhm ist der Abschnitt über den Aminosäurestoffwechsel neu gestaltet worden, Herr Brandt hat die Kapitel Citratzyklus sowie Atmungskette und oxidative Phosphorylierung überarbeitet, Frau Löffler das Kapitel Purin- und Pyrimidinstoffwechsel. Frau Daniel hat das Ernährungskapitel neu geschrieben und Frau BrigeliusFlohé das Vitaminkapitel gründlich überprüft. Das Kapitel 25, Kommunikation zwischen Zellen, wurde weitgehend neu geschrieben. Die letzten 12 Kapitel des Buches beschäftigen sich mit den für die Medizin besonders relevanten Stoffwechselleistungen spezifischer Gewebe oder Organe. Alle Kapitel wurden intensiv überarbeitet bzw. neu gefasst, wofür den Kollegen Ansorge, Becker, Betz, Bruckner, Deutzmann, Fürst, Gautel, Häring, Häussinger, Kurtz und Mössner und ihren jeweiligen Mitarbeitern gedankt sei. Für die Überlassung der medizinhistorischen Fallbeispiele möchten wir Herrn Kollegen Bankl, besonders danken.

VI

Danksagung

Die Inhalte des Gegenstandkatalogs werden selbstverständlich in der vorliegenden 8. Auflage des Lehrbuchs Biochemie und Pathobiochemie voll abgedeckt. Auch das in der neuen Approbationsordnung geforderte Zusammenwachsen von Biochemie und Molekularbiologie auf der einen und eine stärkere Verzahnung der vorklinischen Fächer mit der Klinik auf der anderen Seite spiegeln sich in der 8. Auflage wider. Die Benutzung unseres Biochemie/Pathobiochemie-Lehrbuches sollte die Studierenden der Medizin in die Lage versetzen, den »1. Abschnitt der ärztlichen Prüfung« erfolgreich zu bestehen. Es sollte aber auch eine Orientierungshilfe für die in der Klinik und Praxis tätigen Ärztinnen und Ärzte sein. Für Biologen, Biochemiker, Pharmakologen, Pharmazeuten und Psychologen stellt das vorliegende Werk eine wertvolle Informationsquelle dar. Ein Buch ist niemals perfekt. Es lebt von der Kritik und den Anregungen seiner Leser. Wir sind daher – wie in der Vergangenheit – auch künftig dankbar für Kommentare, Korrekturen und Verbesserungsvorschläge. Wir wünschen unseren Lesern viel Freude an dem spannenden Fach Biochemie/Pathobiochemie, auch wenn die Lektüre zeitweise recht anspruchsvoll sein kann. September 2006 Die Herausgeber

Danksagung Folgenden Kolleginnen und Kollegen möchten die Herausgeber ganz herzlich für die kritische und kompetente Durchsicht der verschiedenen Kapitel danken. Ihre konstruktive Kritik hat zweifellos zur Verbesserung der Qualität und Klarheit der folgenden Kapitel beigetragen: Institut für Biochemie, Universitätsklinikum RWTH Aachen: Alexandra Dreuw, (Kapitel 34); Serge Haan, (Kapitel 2, 3, 10, 13, 28, 33); Heike Hermanns, (Kapitel 2, 11, 14, 16, 17, 26); Gerhard Müller-Newen, (Kapitel 1, 2, 9, 12, 15, 18, 21, 23, 24, 32); Fred Schaper, (Kapitel 4, 5, 7, 8, 19); Ulrike Sommer, (Kapitel 6); Pia Müller, Georg Munz, Michael Sommerauer, (Kapitel 25); Marcus Thelen, Institute for Research in Biomedicine, Bellinzona (Kapitel 25); Andreas Lückhoff, Institut für Physiologie, Universitätsklinikum RWTH Aachen (Kapitel 25); Institut für Neuropathologie, Universitätsklinikum RWTH Aachen: Alexander Krüttgen, Joachim Weis, (Kapitel 31); Peter Freyer, Institut für Biochemie, RWTH Aachen, gebührt Dank und Anerkennung für die zahlreichen graphischen Darstellungen des Kapitels 25, Kerstin Paus und Elke Broekmeulen, Institut für Biochemie, RWTH Aachen für die unermüdliche und tatkräftige organisatorische Hilfe. Mit Dieter Enders, Institut für Organische Chemie der RWTH Aachen, wurden zahlreiche Reaktionsmechanismen diskutiert und deren Darstellung verbessert. Ebenso wie für die vergangenen Auflagen war auch für diese der unermüdliche Einsatz der Lehrbuchabteilung des Springer-Verlages von großer Bedeutung: ganz besonders möchten wir in diesem Zusammenhang Rose-Marie Doyon und Kathrin Nühse danken. Bärbel Bittermann und ihrem Team sind wir für die graphische Umsetzung der nahezu 1000 Abbildungen zu großem Dank verpflichtet und schließlich Ursula Osterkamp-Baust für die Erstellung des umfangreichen Sachverzeichnisses. Auch für diese Auflage waren die zahlreichen Hinweise und Verbesserungsvorschläge von Kollegen und Studierenden eine große Hilfe. Ganz besonders sei an dieser Stelle Renate Lüllmann, Anatomisches Institut der Universität Kiel, Michael Fischer, IMPP Mainz, sowie Andrej Hasilik, Institut für Physiologische Chemie der Universität Marburg, gedankt.

VII

Biographien Georg Löffler studierte Medizin an der Universität München. Nach der Promotion über die Regulation der Ketonkörpersynthese folgte eine dreijährige klinische Tätigkeit bei Hans Peter Wolff in Homburg/ Saar. Anschließend ging er als Oberassistent an das Biochemische Institut der Medizinischen Hochschule Hannover, wo auch die Habilitation für Physiologische Chemie und Klinische Biochemie mit einer Arbeit über die Regulation der Lipolyse im Fettgewebe erfolgte. 1969 wurde er Leiter der Biochemischen Abteilung der von Otto Wieland und Helmut Mehnert gegründeten Forschergruppe Diabetes in München, wo Arbeiten über die Regulation des Pyruvatdehydrogenasekomplexes und die Insulinsekretion im Vordergrund standen. 1975 wechselte Georg Löffler an das Institut für Biochemie, Genetik und Mikrobiologie an der Universität Regensburg, von 1991 bis 2001 war er Inhaber des Lehrstuhls Biochemie III. Sein wichtigstes Arbeitsgebiet ist die Differenzierung des Fettgewebes und die Analyse sekretorischer Funktionen der Fettzelle. Petro E. Petrides studierte Medizin in Freiburg und München, 1975 deutsches und amerikanisches Staatsexamen, Promotion mit einer biochemischen Arbeit bei Otto Wieland und Beginn der internistischen Ausbildung. Von 1978 bis 1980 Postdoktorand bei Medizinnobelpreisträger R. Guillemin am Salk-Institut für Biologische Studien in La Jolla, anschließend Tätigkeit bei E.M. Shooter an der Medizinischen Hochschule Stanford in Palo Alto, Kalifornien. Von 1984 bis 1998 am Klinikum Großhadern der Ludwig-Maximillians-Universität München, an dieser Fakultät Habilitation über akute Leukämien und Ernennung zum Professor für Innere Medizin mit Schwerpunkt Hämatologie und Onkologie. Von 1998 bis 2000 Professor für Innere Medizin und Leiter der onkologischen Ambulanz und Tagesklinik an der Charité der Humboldt-Universität Berlin. Im Jahre 2000 Aufgabe der Professur und Einrichtung einer Schwerpunktpraxis für Hämato-Onkologie in München mit Lehrauftrag an der Ludwig-Maximilians-Universität. Außerdem Gründung der InnovaMedBiotech, die sich mit der Erforschung chronisch myeloproliferativer Erkrankungen beschäftigt. Regelmäßige wissenschaftliche Veröffentlichungen auf den Gebieten der Hämatologie und Onkologie (chronisch myeloproliferative Erkrankungen, Eisenstoffwechsel, Porphyrien) sowie Durchführung DFG-geförderter internationaler Symposien (www.innova-med.de). Peter C. Heinrich studierte Chemie an den Universitäten in Frankfurt und Marburg. Promotion bei K. Dimroth an der Universität Marburg. Von 1967–68 research associate im Institut für Biochemie der Yale University (JS. Fruton) in New Haven, im Anschluss wissenschaftlicher Assistent am Biochemischen Institut der Universität Freiburg (H. Holzer). Von 1970–73 wissenschaftlicher Mitarbeiter in der Grundlagenforschung der Firma Hoffmann LaRoche, Basel. Von 1973–74 assistant professor für Pharmakologie an der Indiana University in Indianapolis, USA. 1975 Habilitation für das Fach Biochemie an der Universität Freiburg. 1980 Professur für Biochemie an der Universität Freiburg. 1986 visiting professor an der Stanford University Medical School (G. Ringold). Seit 1987 Inhaber des Lehrstuhls für Biochemie und Molekularbiologie und Geschäftsführender Direktor des Institutes für Biochemie an der RWTH Aachen. 1994–2004 Sprecher der DFG-Forschergruppe und des anschließenden/Sonderforschungsbereichs 542 »Molekulare Mechanismen Zytokin-gesteuerter Entzündungsprozesse: Signaltransduktion und pathophysiologische Konsequenzen«. Von 1994–2001 Editorial Board Member des Biochemical Journal. 2003–heute Editorial Board Member des Journal of Biological Chemistry. Wichtige wissenschaftliche Beiträge: Identifikation des Hepatozyten-stimulierenden Faktors als Interleukin-6; Entdeckung des Transkriptionsfaktors APRF/STAT3; Aufklärung der molekularen Mechanismen der Interleukin-6 Signaltransduktion über den Jak/STAT-Weg und deren Signalabschaltung. Professor Heinrich hat langjährige Erfahrung in Lehre und Betreuung von Medizin-, Biologieund Biochemiestudenten.

Beitragsautoren Prof. Dr. Siegfried Ansorge

Prof. Dr. Rainer Deutzmann

Dr. Heike Hermanns

IMTM GmbH ZENIT-Technologiepark Leipziger Straße 44 D-39120 Magdeburg

Lehrstuhl für Biochemie I Universität Regensburg Universitätsstraße 31 93053 Regensburg

Institut für Biochemie Universitätsklinikum RWTH Aachen Pauwelstr. 30 52074 Aachen

Prof. Dr. Cord M. Becker

Prof. Dr. Dieter O. Fürst

Prof. Dr. Dr. Hans R. Kalbitzer

Institut für Biochemie Universität Erlangen-Nürnberg Fahrstr. 17 91054 Erlangen

Institut für Zellbiologie Universität Bonn Ulrich Haberlandstraße 61a 53121 Bonn

Lehrstuhl für Biologie III Universität Regensburg Universitätsstraße 31 93053 Regensburg

Prof. Dr. Heinrich Betz

Prof. Dr. Matthias Gautel

Prof. Dr. Monika Kellerer

Max-Planck-Institut für Hirnforschung Deutschordenstraße 46 D-60528 Frankfurt/Main

Muscle Cell Biology, The Randall Centre New Hunt’s House, Kings College London Guy’s Campus, London SE1 1UL Great Britain

Zentrum für Innere Medizin I Marienhospital Stuttgart Böheimstr. 37 70199 Stuttgart

Institut für Biochemie I, Zentrum f. Biologische Chemie Universitätsklinikum Theodor-Stern-Kai 7, Haus 25B 60590 Frankfurt

PD Dr. Serge Haan

Prof. Dr. Josef Köhrle

Institut für Biochemie Universitätsklinikum RWTH Aachen Pauwelstr. 30 52074 Aachen

Prof. Dr. Regina Brigelius-Flohé

Prof. Dr. Hans-Ulrich Häring

Institut für Experimentelle Endokrinologie Charité – Universitätsmedizin Berlin Campus Charité Mitte Schumannstr. 20/21 10117 Berlin

Prof. Dr. Ulrich Brandt

Deutsches Institut für Ernährungsforschung Potsdam-Rehbrücke Arthur-Scheunert-Allee 114 - 116 14558 Nuthetal

Medizinische Universitätsklinik Klinische Chemie, Stoffwechselkrankheiten und Endokrinologie Otfried-Müller-Straße 10 72076 Tübingen

Prof. Dr. Peter Bruckner

Prof. Dr. Andrej Hasilik

Prof. Dr. Armin Kurtz

Institut für Physiologische Chemie und Pathobiochemie Universitätsklinikum Münster Waldeyerstr. 15 48129 Münster

Institut für Physiologische Chemie Karl-von-Frisch-Str.1 35043 Marburg

Lehrstuhl f. Physiologie I Universität Regensburg Universitätsstraße 31 93053 Regensburg

Prof. Dr. Leena Bruckner-Tuderman Abt. Dermatologie und Venerologie mit Poliklinik Universitätsklinikum Freiburg Hugstetter Strasse 49 79095 Freiburg

Technische Universität München Lehrstuhl für Ernährungsphysiologie Hochfeldweg 2 85350 Freising-Weihenstephan

Medizinische Fakultät Carl Gustav Carus Institut für Physiologische Chemie Technische Universität Dresden Fetscherstr. 74, D-01307 Dresden

Prof. Dr. Dieter Häussinger Klinik für Gastroenterologie, Hepatologie und Infektiologie Medizinische Einrichtungen der Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf Postfach 10 10 07 40001 Düsseldorf

Prof. Dr. Georg Löffler Institut für Biochemie Universität Regensburg Universitätsstraße 31 93053 Regensburg

Prof. Dr. Monika Löffler Prof. Dr. Peter C. Heinrich

Prof. Dr. Hannelore Daniel

Prof. Dr. Thomas Kriegel

Institut für Biochemie Universitätsklinikum RWTH Aachen Pauwelstraße 30 52074 Aachen

Institut für Physiologische Chemie Universität Marburg Karl-von-Frisch-Str. 1 35033 Marburg

IX Beitragsautoren

Prof. Dr. Susanne Modrow

Dr. Harald Staiger

Institut für Medizinische Mikrobiologie und Hygiene Universität Regensburg Franz-Josef-Strauß-Allee 11 93053 Regensburg

Department für Innere Medizin Abteilung IV Medizinische Klinik und Poliklinik Eberhard-Karls-Universität Tübingen Otfried-Müller-Str. 10 72076 Tübingen

Prof. Dr. Mathias Montenarh Institut für Medizinische Biochemie Universitätskliniken des Saarlandes 66421 Homburg/Saar

Prof. Dr. Joachim Mössner Medizinische Klinik und Poliklinik II Gastroenterologie/Hepatologie und Hämatologie/Onkologie Philipp-Rosenthal-Str. 27 04103 Leipzig

PD Dr. Gerhard Müller-Newen Institut für Biochemie Universitätsklinikum RWTH Aachen Pauwelstr. 30 52074 Aachen

Prof. Dr. Petro E. Petrides Hämatologisch-onkologische Schwerpunktpraxis am Isartor Zweibrückenstr. 2 80331 München

Prof. Dr. Klaus-Heinrich Röhm Institut für Physiologische Chemie Universität Marburg Karl-von-Frisch-Straße 1 35043 Marburg

Prof. Dr. Fred Schaper Institut für Biochemie Universitätsklinikum RWTH Aachen Pauwelstr. 30 52074 Aachen

Prof. Dr. Wolfgang Schellenberger Institut für Biochemie Medizinische Fakultät Universität Leipzig Liebigstr. 16 04103 Leipzig

Dr. Astrid Scheschonka Max-Planck-Institut für Hirnforschung Deutschordenstraße 46 60528 Frankfurt/Main

Dr. Norbert Stefan Department für Innere Medizin Abteilung IV Medizinische Klinik und Poliklinik Eberhard-Karls-Universität Tübingen Otfried-Müller-Str. 10 72076 Tübingen

Dr. Uwe Wenzel Lehrstuhl für Ernährungsphysiologie Technische Universität München Am Forum 5 85350 Freising-Weihenstephan

Biochemie und Pathobiochemie: das neue Layout

4

Leitsystem: Orientierung über die Kapitel 1–35 und Anhang

Einleitung: thematischer Einstieg ins Kapitel

Inhaltliche Struktur: klare Gliederung durch alle Kapitel

1

Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

> > Einleitung Nur 25 chemische Elemente kommen in den verschiedenen Lebensformen und damit auch im menschlichen Körper vor. Man nimmt heute an, dass in der präbiotischen Phase der Erde, also vor etwa 4 Milliarden Jahren, organische Moleküle spontan entstanden sind, deren funktionelle Gruppen eine Assoziation zu Makromolekülen und übergeordneten Strukturen ermöglichte, aus denen schließlich das Leben in seiner heutigen Form entstanden ist. Die heutigen Lebensformen werden in die kernlosen Prokaryoten (Bakterien und Archaeen) sowie die kernhaltigen Eukaryoten eingeteilt, zu denen auch höhere Pflanzen und Tiere gehören. Wasser ist vom quantitativen und qualitativen Gesichtspunkt aus für alle biochemischen Prozesse von außerordentlicher Bedeutung. Aufgrund seiner physikalisch-chemischen Eigenschaften nimmt Wasser an vielen zellulären Reaktionen teil und bestimmt nahezu alle biochemischen Prozesse.

1.1

Biomoleküle, Zellen und Organismen

1.1.1 Elemente in lebenden Systemen

Verweis auf Abbildungen, Tabellen und Kapitel: deutlich herausgestellt und leicht zu finden

Infobox: vertieft interessante Aspekte

Analysiert man die verschiedenen auf der Erde vorkommenden Lebensformen, so finden sich in ihnen etwa 25 chemische Elemente (. Tabelle 1.1). Von diesen kommen allerdings 14 nur als Spurenelemente (7 Kap. 22.1.1) vor. Infobox Chemische Evolution im Labor Der Student Stanley Miller füllte im Jahre 1953 im Labor von Harold Urey ein Gasgemisch aus Ammoniak (NH3), Methan (CH4), Wasserdampf, Wasserstoff (H2), Kohlendioxyd (CO2) und Blausäure (HCN) in einen Glaskolben und setzte dieses Gemisch bei 80°C mehr als eine Woche lang ständigen elektrischen Entladungen aus. Mit dieser Versuchsanordnung wollte er die Uratmosphäre unseres Planeten vor mehr als 4 Milliarden Jahren imitieren und ging dabei von der Annahme aus, dass zu dieser Zeit relativ hohe Temperaturen und permanente elektrische Entladungen in der Atmosphäre herrschten. Unter dieser Behandlung entstanden Hunderte von organischen Verbindungen, z.B. 10 der natürlich vorkommenden Aminosäuren, Mono-, Di- und Tricarbonsäuren, Formaldehyd, Adenin, Zucker und sogar Nucleotidpolymere. In jüngerer Zeit hat Günter Wächtershäuser die Annahme vertreten, dass Biomoleküle möglicherweise bei noch höheren Temperaturen an Eisensulfid-Oberflächen entstanden sind, die als Katalysatoren gewirkt haben. In Modellversuchen konnte jüngst die Synthese von Pyruvat aus Formiat in derartigen Systemen nachgewiesen werden. Insgesamt zeigen diese Experimente, dass die einfachen Bausteine lebender Systeme ohne weiteres abiotisch gebildet werden können.

Den größten Anteil an der Masse lebender Zellen hat der Kohlenstoff mit etwa 60%, gefolgt von Stickstoff und Sauerstoff mit jeweils etwa 10%. Wasserstoff, Calcium, Phosphor machen je 3–6% aus, während Kalium, Schwefel, Chlor, Natrium und Magnesium Anteile von etwa 1% und weniger haben. Chemisch können die in biologischen Systemen vorkommenden Elemente in Metalle und Nichtmetalle eingeteilt werden. Metalle sind in Form ihrer Kationen 4 Träger von Ladungen 4 Stabilisatoren von Strukturen sowie 4 Katalysatoren von verschiedener Reaktionen Eine Einteilung der Metall-Ionen nach ihrer biologischen Funktion findet sich in . Tabelle 1.2. ! Die Nichtmetalle Wasserstoff, Kohlenstoff, Sauerstoff und Stickstoff bilden bevorzugt untereinander chemische Bindungen.

Diese vier Elemente haben ihre besondere Bedeutung deshalb erlangt, weil sie covalente chemische Bindungen ausbilden können. Diese Fähigkeit beruht darauf, dass sie Elektronen mit anderen Atomen teilen können, was die Möglichkeit zur Ausbildung stabiler großer Moleküle bietet.

1.1.2 Präbiotische Entstehung

von Biomolekülen mit funktionellen Gruppen Man nimmt an, dass in der präbiotischen Phase der Erde vor etwa vier Milliarden Jahren aus den damaligen Bestandteilen der Atmosphäre unter dem Einfluss von ultraviolettem Licht und elektrischen Entladungen ein Satz einfacher organischer Verbindungen wie Ameisensäure, Milchsäure, Propionsäure, Essigsäure, Harnstoff und Aminosäuren entstanden sind. Diese Verbindungen weisen bereits funktionelle reaktive Gruppen auf.

Schlüsselbegriffe: sind fett hervorgehoben

1192 farbige Abbildungen: veranschaulichen komplizierte und komplexe Sachverhalte

Navigation Seitenzahl und Kapitelnummer für die schnelle Orientierung

5 1.1 · Biomoleküle, Zellen und Organismen

1

. Tabelle 15.3. Fließgleichgewichtszustände der Atmungskette Im Überschuss vorhanden

Atmungsgeschwindigkeit begrenzt durch

Zustand 1

O2

ADP und Substrat

Zustand 2

O2, ADP

Substrat

Zustand 3 »aktiv«

O2, ADP, Substrat

Δμ˜H

Zustand 4 »kontrolliert«

O2, Substrat

ADP

Zustand 5

ADP, Substrat

O2

Entkoppelt

O2, Substrata

Maximalgeschwindigkeit des Elektronentransports

a

In diesem Zustand hat ADP keinen Einfluss auf die Atmungsgeschwindigkeit.

! Der Protonengradient treibt eine Drehbewegung im FO-Teil.

. Abb. 15.11. Aufbau der F1/FO-ATP-Synthase. Eine α- und eine β-Untereinheit ist nicht gezeigt, um die Sicht auf den zentralen Stiel freizugeben. Außerdem fehlen in dieser Darstellung acht weitere Untereinheiten, die für die Funktion der ATP-Synthase nicht unmittelbar von Bedeutung sind. (Einzelheiten 7 Text) (Nach Junge et al. 1997)

zusammen, wobei zwei mitochondrial codiert werden (. Abb. 15.11). Diese Untereinheiten, von denen einige in mehreren Kopien vorkommen, bilden den membranständigen FO-Teil, durch den die Protonen fließen, und den in die Matrix hineinragenden F1-Teil, welcher die Nucleotid-Bindungsstellen enthält. Der FO-Teil besteht aus der Untereinheit a und 10 Kopien der Untereinheit c. Neben weiteren nicht gezeigten kleinen Untereinheiten

Tabelle: klare Übersicht der wichtigsten Fakten

Merke: das Wichtigste auf den Punkt gebracht

Der sich drehende Teil der ATP-Synthase (»Rotor«) besteht aus dem Ring aus c-Untereinheiten im FO-Teil und dem zentralen Stil aus den Untereinheiten γ und ε. Jede c-Untereinheit trägt einen essentiellen Asparaginsäure-Rest im hydrophoben Bereich. Man nimmt an, dass immer eine dieser sauren Gruppen durch die a-Untereinheit »maskiert« wird. Untereinheit a besitzt außerdem zwei Protonenkanäle, die Protonen an die saure Gruppe heran und wieder weg führen können. Induziert nun ein Proton, das sich durch diese Kanäle von einer Seite der Membran zur anderen bewegt, das Weiterrücken des Rings um eine c-Untereinheit, so entsteht eine Drehbewegung, die über den zentralen Stil in den F1-Teil übertragen wird. Wie bei jedem Motor muss verhindert werden, dass sich der F1-Teil (»Stator«) als Ganzes mitdreht. Diese Aufgabe übernimmt der periphere Stil, der auch die a-Untereinheit festhält. Damit entspricht die Funktionsweise des FO-Teils der eines Flagellenmotors, der ebenfalls durch einen Protonengradienten angetrieben werden.

In Kürze Die strukturelle und funktionelle Komplexität der Organismen kann nur durch eine kontinuierliche Zufuhr freier Enthalpie (ΔG) aufrechterhalten werden. Diese Notwendigkeit ergibt sich aus den Gesetzen der Thermodynamik, die auch für lebende Systeme Gültigkeit besitzen. Quelle der erforderlichen freien Enthalpie ist die sauerstoffabhängige biologische Oxidation komplexer organischer Verbindungen. Die Änderung der freien Enthalpie hat bei exergonem Reaktionsverlauf einen negativen Wert. Exergone Reaktionen laufen spontan (freiwillig) ab und können unter isotherm-isobaren Bedingungen Arbeit leisten. Ist ΔG hingegen positiv, handelt es sich um eine endergone Reaktion, die nicht freiwillig abläuft.

In der Zelle werden endergone Reaktionen durch Kopplung mit exergonen Prozessen ermöglicht. Die energetische Kopplung wird wirkungsvoll durch »energiereiche« Phosphate vermittelt. ATP ist die wichtigste Verbindung mit hohem Gruppenübertragungspotential. Die Synthese der energiereichen Phosphate ist funktionell mit dem Ablauf von Redoxreaktionen verbunden: 4 direkt durch Substratkettenphosphorylierung 4 indirekt durch den Ausgleich eines chemiosmotischen Potentials bei der Atmungskettenphosphorylierung sowie bei Transphosphorylierungsreaktionen

In Kürze: fasst das Wichtigste des Kapitels zusammen

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Lerncenter 7 kurze Einleitungen in verschiedene Themen der Biochemie mit weiterführenden Links

7 Original IMPP MC-Fragen als Quiz 7 Memocards – unser virtuelles Lernkartenspiel

Chemie Basics 7 Alles vergessen? Das Wichtigste zum Wiederholen in 60 min

Weitere Websites unter www.lehrbuch-medizin.de 7 Anatomisches Bilderquiz 7 Anatomie in der Klinik 7 Anatomie-Lexikon

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7 Antwortkommentare zu MC-Fragen 7 Praktikumsversuche 7 Formelsammlung

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Fragen? [email protected]

XV

Inhaltsverzeichnis 5.6

I Bausteine und Strukturelemente 6 1

Grundlagen der Lebensvorgänge . . . . . . Georg Löffler, Petro E. Petrides

3

1.1 1.2

Biomoleküle, Zellen und Organismen . . . . . . Wasser . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

4 8 20

2

Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren Georg Löffler

21

2.1 2.2 2.3

Kohlenhydrate . Lipide . . . . . . Aminosäuren . Literatur . . . . .

. . . .

22 32 45 53

3

Proteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Hans R. Kalbitzer, Petro E. Petrides

55

3.1

Klassifizierung und Eigenschaften von Proteinen . . . . . . . . . . . . . . . . . Charakterisierung von Proteinen . . . . . Die räumliche Struktur der Proteine . . . Denaturierung, Faltung und Fehlfaltung von Proteinen . . . . . . . . . . . . . . . . . Methoden zur Strukturbestimmung von Proteinen . . . . . . . . . . . . . . . . . Synthese von Peptiden und Proteinen . . Genomik und Proteomik . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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56 59 69

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86

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90 92 94 98

4

Bioenergetik und Enzymologie . . . . . . . . Thomas Kriegel, Wolfgang Schellenberger

99

4.1

Thermodynamik und allgemeine Bioenergetik . . . . . . . . . . . . . . . Katalyse in biologischen Systemen . Mechanismen der Enzymkatalyse . Enzymkinetik . . . . . . . . . . . . . . Regulation der Enzymaktivität . . . Enzyme in der Medizin . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . .

3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7

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. . . . . . .

. . . . . . .

Zelluläre Kompartimente, Membranen und Transport . . . . . . . . . . . . . . . . Organellen und Partikel . . . . . . . . . Cytoskelett . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . .

. . . .

. . . .

. . . .

. . . .

173

174 187 207 215

7

Replikation und Gentechnik . . . . . . . . . . Mathias Montenarh

219

7.1 7.2 7.3 7.4

Der Zellzyklus . . . . . . . . . . . . . Die Replikation der DNA . . . . . . Veränderungen der DNA-Sequenz Gentechnik . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . .

220 228 236 241 253

8

Transkription und posttranskriptionale Prozessierung der RNA . . . . . . . . . . . . . . Mathias Montenarh

255

8.1 8.2 8.3 8.4 8.5

5

Nucleotide und Nucleinsäuren . . . . . . . . . Matthias Montenarh, Georg Löffler

141

9.1 9.2

5.1 5.2

Nucleoside und Nucleotide . . . . . . . . . . . . Zusammensetzung und Primärstruktur der Nucleinsäuren . . . . . . . . . . . . . . . . . . Aufbau der DNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . DNA als Trägerin der Erbinformation . . . . . . . Struktur und biologische Bedeutung der RNA

142

9.3

146 147 158 162

Zelluläre Organellen, Strukturen und Transportvorgänge . . . . . . . . . . . . . Andrej Hasilik

165 172

II Stoffwechsel der Zelle: Weitergabe und Realisierung der Erbinformation

100 107 117 121 129 134 139

5.3 5.4 5.5

. . . . . . .

. . . .

6.2 6.3

. . . . . . .

4.2 4.3 4.4 4.5 4.6

. . . . . . .

. . . .

6.1

Chemische und physikalische Eigenschaften von Nucleinsäuren . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

9

. . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

Allgemeiner Mechanismus der Transkription Transkription bei Prokaryoten . . . . . . . . . . Transkription bei Eukaryoten . . . . . . . . . . Regulation der Transkription bei Prokaryoten Regulation der Genexpression bei Eukaryoten . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . .

256 257 259 271

. .

271 283

Biosynthese, Modifikation und Abbau von Proteinen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Andrej Hasilik

285

Biosynthese von Proteinen . . . . . . . . Faltung, Transport und Modifikation von Proteinen . . . . . . . . . . . . . . . . Proteinolyse und Abbau von Proteinen Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . .

287

. . . . . . . . . . . . . . .

301 314 324

10

Viren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Susanne Modrow

325

10.1

Aufbau und Einteilung der Viren . . . . . . . . .

326

XVI

Inhaltsverzeichnis

10.2 10.3 10.4 10.5

Virusvermehrung und Replikation . . . . . . . . Folgen der Virusinfektion für Wirtszelle und Wirtsorganismus . . . . . . . . . . . . . . . . Diagnostik von Virusinfektionen . . . . . . . . . Prophylaxe und Therapie von Virusinfektionen Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

330 342 346 348 353

III Stoffwechsel der Zelle: Intermediärstoffwechsel 11

Stoffwechsel von Glucose und Glycogen . . Georg Löffler

357

11.1 11.2 11.3 11.4

Abbau der Glucose . . . . . . . . . . . . . . . . . . Der Glycogenstoffwechsel . . . . . . . . . . . . . Die Gluconeogenese . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulation von Glucoseaufnahme und -phosphorylierung . . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulation des Glycogenstoffwechsels . . . . . Regulation von Glycolyse und Gluconeogenese Pathobiochemie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

358 368 372

11.5 11.6 11.7

12

12.1 12.2 12.3 12.4 12.5

Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Georg Löffler Stoffwechsel der Triacylglycerine . . . . . . . . Stoffwechsel der Fettsäuren . . . . . . . . . . . Regulation des Stoffwechsels von Fettsäuren und Triacylglycerinen . . . . . . . . . . . . . . . Ungesättigte Fettsäuren und Eikosanoide . . Pathobiochemie . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

375 380 386 393 396

. . . . .

490 506 509 512 514

16

Koordinierung des Stoffwechsels . . . . . . . Georg Löffler

515

16.1 16.2

Nahrungszufuhr und Nahrungskarenz . . . . . Muskelarbeit . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

516 531 536

17

Biosynthese von Kohlenhydraten . . . . . . . Georg Löffler

17.1

Biosynthese und Stoffwechsel von Monosacchariden . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biosynthese der Zuckerbausteine von Glycoproteinen und Glycosaminoglycanen . . . . . Biosynthese von Oligosacchariden und Heteroglycanen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

17.3

. . . .

414 418 425 425

Stoffwechsel des Stickstoffs . . . . . . . . . . . . Stickstoffhaushalt des Menschen . . . . . . . . . Reaktionen und Enzyme im Aminosäurestoffwechsel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Übersicht über den menschlichen Aminosäurestoffwechsel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Aminosäurestoffwechsel der Organe . . . . . . Stoffwechsel einzelner Aminosäuren . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

428 430 432 438 444 454 476

14

Der Citratzyklus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Georg Löffler, Ulrich Brandt

477

14.1 14.2 14.3 14.4

Stellung des Citratzyklus im Stoffwechsel Reaktionsfolge des Citratzyklus . . . . . . . Regulation des Citratzyklus . . . . . . . . . Amphibole Natur des Citratzyklus . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

478 479 484 486 488

. . . . .

. . . . .

IV Stoffwechsel der Zelle: Biosynthese von Speicher- und Baustoffen

398 403

13.1 13.2 13.3

. . . . .

Energieumwandlung in den Mitochondrien Oxidoreduktasen . . . . . . . . . . . . . . . . . Oxidativer Stress . . . . . . . . . . . . . . . . . Pathobiochemie . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. .

427

. . . . .

15.1 15.2 15.3 15.4

17.2

Stoffwechsel der Aminosäuren . . . . . . . . Klaus-Heinrich Röhm

13.5 13.6

Redoxreaktionen, Sauerstoff und oxidative Phosphorylierung . . . . . . . . . . . . . . . . . 489 Ulrich Brandt

397

13

13.4

15

18

18.1 18.2 18.3

539

.

540

.

543

. .

546 552

Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin. . . . . . . . Georg Löffler

553

. . . . . . . . . . . . . .

554 559

. . . . .

. . . . .

564 571 572 580 583

19

Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine . . Georg Löffler, Monika Löffler

585

19.1

Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Wiederverwertung von Purinen und Pyrimidinen Abbau von Nucleotiden . . . . . . . . . . . . . . . Pathobiochemie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

18.4 18.5 18.6

19.2 19.3 19.4

Stoffwechsel der Phosphoglyceride Stoffwechsel der Sphingolipide . . . Stoffwechsel der Isoprenlipide und des Cholesterins . . . . . . . . . . . . Lipide und Signalmoleküle . . . . . . Transport der Lipide im Blut . . . . . Pathobiochemie . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

586 597 599 602 605

20

Häm und Gallenfarbstoffe . . . . . . . . . . . . Petro E. Petrides

607

20.1

Biosynthese des Häms . . . . . . . . . . . . . . . .

608

XVII Inhaltsverzeichnis

20.2 20.3 20.4

Pathobiochemie: Störungen der Hämbiosynthese. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Abbau des Häms zu Gallenfarbstoffen . . . . . . Pathobiochemie: Störungen des Bilirubinstoffwechsels. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

614 621 624 626

24.5 24.6 24.7 24.8

21.1 21.2 21.3 21.4 21.5 21.6

Ernährung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Hannelore Daniel, Uwe Wenzel

655

22.1 22.2

Allgemeine Grundlagen . . . . . . . . . . . . . . Die einzelnen Spurenelemente . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

656 658 678

23

Vitamine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Georg Löffler, Regina Brigelius-Flohé

679

23.1 23.2 23.3 23.4

Allgemeine Grundlagen und Pathobiochemie Fettlösliche Vitamine . . . . . . . . . . . . . . . . . Wasserlösliche Vitamine . . . . . . . . . . . . . . Vitaminähnliche Substanzen . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

680 683 697 711 712

VI Stoffwechsel des Organismus: spezifische Gewebe

25.3 25.4 25.5 25.6 25.7

25.9 25.10

24.1 24.2 24.3 24.4

Zusammensetzung der extrazellulären Matrix (ECM) . . . . . . . . . . . . . . . . . Kollagene . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Elastische Fasern . . . . . . . . . . . . . . Proteoglykane . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . .

. . . .

. . . .

. . . .

. . . .

716 716 724 727

760 763 769 777 779 785 791 801 804 807

Die schnelle Stoffwechselregulation . . . . . 809 Harald Staiger, Norbert Stefan, Monika Kellerer, Hans-Ulrich Häring

26.1 26.2 26.3 26.4

Insulin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Glucagon . . . . . . . . . . . . . . . . . Katecholamine . . . . . . . . . . . . . Pathobiochemie: Diabetes mellitus Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . .

810 823 826 832 838

27

Hypothalamisch-hypophysäres System und Zielgewebe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Josef Köhrle, Petro E. Petrides

841

27.1 27.2

Binde- und Stützgewebe . . . . . . . . . . . . . 715 Rainer Deutzmann, Leena Bruckner-Tuderman, Peter Bruckner

757

26

27.3

24

737 747 754

Extrazelluläre Signalmoleküle und die Kommunikation zwischen Zellen . . . . . . . . . Stoffwechsel und Analyse von Hormonen und Cytokinen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rezeptoren für Hormone und Cytokine . . . . . Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren . . . . . . . . . . . . . . . . . Einteilung der Cytokine . . . . . . . . . . . . . . . Signaltransduktion G-Protein-gekoppelter Rezeptoren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen . . . . . . Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen . . . . . . . . . . . . . . . . . Besondere Aktivierungsmechanismen . . . . . Regulation der Signaltransduktion . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

25.2

Spurenelemente . . . . . . . . . . . . . . . . . . Petro E. Petrides

. . .

25.1

25.8

22

730 736

Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion . . . . . . . . . . . . . 755 Peter C. Heinrich, Serge Haan, Heike M. Hermanns, Georg Löffler, Gerhard Müller-Newen, Fred Schaper

631

Energiebilanz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 632 Der Ernährungszustand . . . . . . . . . . . . . . . 638 Veränderungen der Energiebilanz . . . . . . . . 639 Kontrollmechanismen der Nahrungsaufnahme, Energie- und Nährstoffzufuhr . . . . . . . . . . . 642 Die Stoffwechselbedeutung einzelner Nährstoffe und ihre Beteiligung an der Homöostase . . . . 644 Besondere Ernährungserfordernisse . . . . . . . 652 Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 654

. .

25

V Stoffwechsel des Organismus: Bedeutung von Nahrungskomponenten 21

Nichtkollagene, zelladhäsive Glycoproteine . Abbau der extrazellulären Matrix . . . . . . . . Biochemie und Pathobiochemie des Skelettsystems . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biochemie der Haut . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

27.4 27.5 27.6 27.7 27.8

. . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

. . . . .

Hypothalamisch-hypophysäre Beziehungen . Hypothalamus-Hypophysen-Schilddrüsenhormonachse . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Hypothalamus-Hypophysen-Nebennierenrinden-(Zona fasciculata-)Achse . . . . . . . . . Hypothalamus-Hypophysen-Gonadenachse . Zielgewebe der Gonadotropine beim Mann . Zielgewebe der Gonadotropine bei der Frau . Die Wachstumshormon-IGF-Achse . . . . . . . Antidiuretisches Hormon (Vasopressin) und Oxytocin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

.

843

.

847

. . . . .

862 870 874 878 885

. .

890 891

XVIII

Inhaltsverzeichnis

28

Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts . . . . Armin Kurtz

893

28.1 28.2 28.3 28.4 28.5 28.6 28.7 28.8

Die Niere . . . . . . . . . . . . . . . . . . Der Endharn (Urin) . . . . . . . . . . . . Der Wasserhaushalt . . . . . . . . . . . Der Natriumhaushalt . . . . . . . . . . Der Kaliumhaushalt . . . . . . . . . . . Der Calcium- und Phosphathaushalt . Der Magnesium- und Sulfathaushalt . Der Säure-Basen-Haushalt . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . .

895 914 917 921 928 930 939 942 950

29

Blut . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Petro E. Petrides

951

29.1 29.2 29.3 29.4 29.5 29.6

Korpuskuläre Elemente des Bluts Erythrozyten . . . . . . . . . . . . . Leukozyten . . . . . . . . . . . . . . Thrombozyten . . . . . . . . . . . Blutstillung . . . . . . . . . . . . . . Plasmaproteine . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . .

952 953 972 976 979 991 999

. . . . . . .

. . . . . . .

. . . . . . .

. . . . . . . . .

. . . . . . .

. . . . . . . . .

. . . . . . .

. . . . . . . . .

. . . . . . .

. . . . . . . . .

. . . . . . .

. . . . . . . . .

. . . . . . .

. . . . . . .

30

Muskelgewebe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1001 Dieter O. Fürst, Matthias Gautel, Petro E. Petrides

30.1 30.2 30.3

Feinstruktur der Muskulatur . . . . . . . . . . . . Die Proteine des kontraktilen Apparats . . . . . Molekularer Mechanismus der Muskelkontraktion und -relaxation . . . . . . . . . . . . Regeneration der Muskelzelle . . . . . . . . . . . Pathobiochemie: Angeborene und erworbene Muskelerkrankungen . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

30.4 30.5

31

31.1 31.2 31.3 31.4 31.5 31.6

1002 1004 1009 1015 1017 1022

Nervensystem . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1023 Astrid Scheschonka, Heinrich Betz, Cord-Michael Becker Stoffwechsel des Gehirns . . . . . . . . . . . Neuronale Zellen . . . . . . . . . . . . . . . . Chemische Signalübertragung zwischen Neuronen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Nicht-neuronale Zellen . . . . . . . . . . . . Neurodegenerative Krankheiten . . . . . . Neuronale Stammzellen und neurotrophe Faktoren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . 1024 . . . 1029 . . . 1036 . . . 1045 . . . 1048 . . . 1051 . . . 1051

32

Gastrointestinaltrakt. . . . . . . . . . . . . . . . 1053 Georg Löffler, Joachim Mössner

32.1 32.2

Gastrointestinale Sekrete . . . . . . . . . . . . . . 1054 Verdauung und Resorption einzelner Nahrungsbestandteile . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1068 Das Immunsystem des Intestinaltrakts . . . . . 1079 Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1080

32.3

33

Leber . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1083 Dieter Häussinger, Georg Löffler

33.1

Die zellulären Bestandteile der Leber und ihre anatomischen Beziehungen . . . . . . Funktionen der Leberparenchymzellen . . Biotransformation . . . . . . . . . . . . . . . Die Leber als Ausscheidungsorgan . . . . . Funktionen der Nichtparenchymzellen der Leber . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Pathobiochemie . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

33.2 33.3 33.4 33.5 33.6

. . . .

. . . .

. . . .

1084 1086 1090 1096

. . . 1098 . . . 1099 . . . 1102

34

Immunsystem . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1103 Siegfried Ansorge

34.1 34.2

Angeborene Immunantwort . . . . . . . . . . . Molekulare Instrumente der adaptiven Immunantwort . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Komplementsystem . . . . . . . . . . . . . . . . Wechselwirkungen zwischen unspezifischer und spezifischer Immunantwort . . . . . . . . Immunabwehr von Mikroorganismen . . . . . Pathobiochemie . . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

34.3 34.4 34.5 34.6 34.7

. 1104 . 1105 . 1109 . 1130 . . . .

1133 1134 1136 1139

35

Tumorgewebe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1141 Petro E. Petrides

35.1

Fehlregulation des Wachstums und der Differenzierung bei Tumoren . . . . . . . . . . . Tumorentstehung (Cancerogenese) . . . . . . . Onkogene. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Antionkogene . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Kumulative Aktivierung von Onkogenen und Inaktivierung von Antionkogenen beim Mehrschrittprozess der Tumorigenese . . . . . Entstehung von Fusionsgenen durch Translokationen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Mechanismen der Invasion und Metastasierung Tumorentstehung durch Cancerogene . . . . . Stoffwechsel von Tumorgeweben . . . . . . . . . Früherkennung von Tumoren . . . . . . . . . . . Krebstherapie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Gentherapeutische Ansätze bei Krebserkrankungen. . . . . . . . . . . . . . . . . . Literatur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

35.2 35.3 35.4 35.5

35.6 35.7 35.8 35.9 35.10 35.11 35.12

1142 1143 1143 1145

1150 1154 1155 1157 1159 1159 1160 1161 1162

Anhang Häufige Abkürzungen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1164 Sachverzeichnis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1167

XIX

Vorbemerkungen Maßeinheiten

Die IFCD (International Federation for Clinical Chemistry) und die IUPAC (International Union of Pure and Applied Chemistry) haben gemeinsame Empfehlungen zur Vereinheitlichung von Maßeinheiten verabschiedet, die sog. SIEinheiten (Système International d‘unités). Das Maßsystem basiert auf den Grundeinheiten: Meter (m), Kilogramm (kg), Sekunde (s), Ampère (A), Kelvin (K), Mol (mol), Candela (cd) (. Tab. 1). Die Einheiten für z. B. Volumen, Konzentration, Kraft und Druck werden von diesen Grundeinheiten abgeleitet (. Tab. 2).

. Tabelle 1. SI-Basiseinheiten, Namen und Symbole SI-Basisgröße

SI-Einheit

Symbol

Bemerkungen

Länge

Meter

m

1 Ångström (Å) = 10–10 m = 0,1 nm

Masse

Kilogramm

kg

Zeit

Sekunde

s

Stromstärke

Ampère

A

Temperatur

Kelvin

K

Temp. in °C = Temp. in K – 273,2

Stoffmenge

Mol

mol

1 mol = 6,022 · 1023 Teilchen (Avogadro-Konstante)

Lichtstärke

Candela

cd

1 min = 60 s 1 h = 3600 s 1 d = 86400 s

. Tabelle 2. Abgeleitete Basiseinheiten, Namen und Symbole Abgeleitete Größe

Einheit

Symbol

Ableitung

Bemerkungen

Volumen

Liter

l

10–3 m3

1 l = 1 dm3 1 ml = 1 cm3 1 μl = 1 mm3 1 nl = 1 μm3

Konzentration

Molarität

M

mol l–1

1 mmol l–1 = 1 mol m–3 1 μmol l–1 = 1mmol m–3 Angaben in g%, g/100 ml, mg/100 ml sowie mol%, mval/l oder äq/l, mäq/l sollten nicht mehr verwendet werden

molare Masse, Molmasse (früher: Molekulargewicht)

Dalton

Da

g mol–1

Molekulare Masse (M) = Masse (m)/Stoffmenge (n)

Masse

–

m

g

Kraft

Newton

N

kg m s–2

Druck

Pascal

Pa

N m2

1 Bar = 105 Pa = 750 mm Hg 1 mm Hg = 133,3 Pa 1 atm = 1,0133 bar 1 Torr = 1,3332 mbar

Energie, Arbeit, Wärmemenge

Joule

J

Nm

1 Kalorie (cal) = 4,1868 J 1 Elektronenvolt (eV) = 1,602 10-19 J

Frequenz

Hertz

Hz

s–1

Leistung

Watt

W

J s–1

Elektrische Ladung

Coulomb

C

As

Spannung

Volt

Reaktionsgeschwindigkeit

–

v

mol s–1

Katalytische Aktivität

Einheit

U

μmol min–1

Sedimentationskoeffizient

Svedberg

S

10–13 s

Radioaktivität

Bequerel

Bq

1 Zerfall s–1

W A–1

1 Curie (Ci) = 3,7 1010 Bq

XX

Vorbemerkungen

. Tabelle 3. Häufig verwendete Zehnerpotenzen, Präfixe und Symbole Faktor

Präfixum

Symbol

15

10

Peta

P

1012

Tera

T

9

Giga

G

6

10

Mega

M

103

Kilo

k

10

2

10

Hekto

h

10

Deka

da

10–1

Dezi

d

–2

10

Centi

c

10–3

Milli

m

10–6

Mikro

μ

10–9

Nano

n

–12

10

Pico

p

10–15

Femto

f

tiefen oder einarbeiten will, sollte zu den Übersichtsarbeiten greifen, in denen oft über 100 Originalarbeiten zu dem betreffenden Thema zitiert werden, so dass man einen Überblick über die verschiedenen Hypothesen oder Theorien sowie die historische Entwicklung der Bearbeitung des Themas gewinnt. Handbücher und Monographien geben die Möglichkeit, die Information in größeren Zusammenhängen oder auch aktueller (z.B. Kongressberichte mit Diskussionsbeiträgen) zu erhalten. Die biochemische Literatur ist heute auf mehrere hundert verschiedene Journale verstreut, da die Biochemie als interdisziplinäre Fachrichtung Eingang in die verschiedensten Disziplinen gefunden hat. Übersichtsarbeiten findet man in den genannten Zeitschriften oder in sog. Fortschrittsberichten (Advances in…, Annual Review of …, International Review of …, Trends in Biochemical Siences). Am schnellsten findet man heute aktuelle Informationen zu einzelnen Fragen in elektronischen Datenbanken. Am einfachsten sind Veröffentlichungen in der National Library of Medicine (pubmed: www.pubmed.org) zu finden. Normwertbereiche

Reaktionsschemata

Es bedeuten: A B Hin- und Rückreaktion werden von verschiedenen Enzymen katalysiert. A B Hin- und Rückreaktion werden von demselben Enzym katalysiert. C

A

B

C reguliert die Reaktion von A nach B über eine Hemmung; D reguliert die Reaktion von B nach A über eine Aktivierung.

D Induktion Repression Hinweise zum Literaturverzeichnis

Der Abschnitt Literatur am Ende jedes Kapitels listet wissenschaftliche Publikationen auf, in denen wichtige Aspekte des jeweiligen Kapitels behandelt werden. Häufig wird zwischen Einzel- oder Originalarbeiten, Übersichtsarbeiten und Lehr- bzw. Handbüchern (auch Monographien) unterschieden. Einzelarbeiten weisen auf Erstbeschreibungen oder auf Informationen hin, die an dieser Stelle besonders gut nachgelesen werden können. Für den Anfänger sind Originalarbeiten schwer zu lesen. Wer sich in ein Gebiet ver-

Da in diesem Buch bei einigen biologisch-chemischen Größen, wie z. B. bei der Konzentration der Glucose, den Aminosäuren oder Lipiden im Blut, quantitative Angaben gemacht werden, soll kurz einiges zum Begriff des Normbereiches gesagt werden. Bestimmt man in einem größeren, klinisch nichtkranken Kollektiv z. B. die Blutzuckerkonzentration, so erhält man eine wichtige Größe, den Mittelwert, als das arithmetische Mittel der Werte aller untersuchten Personen: dabei wird die Summe aller Einzelwerte durch die Anzahl der durchgeführten Untersuchungen dividiert: 6xi x– = 8 n wobei x– (gelesen »x quer«) den Mittelwert, xi die Einzelmessung und n die Anzahl der untersuchten Personen (bzw. Untersuchungen) darstellt. Die Kenntnis des Mittelwertes reicht jedoch nicht aus, da er nichts über die Streubreite, d. h. die Differenz zwischen dem höchsten und niedrigsten Wert aussagt. Die Angabe der Streu- oder Variationsbreite ist wiederum unbefriedigend, da 1. nur die beiden Extremwerte berücksichtigt werden und 2. die Variationsbreite durch die Anzahl der Messungen bestimmt wird. Je mehr Messwerte vorliegen, desto höher wird die Differenz zwischen den beiden Extremwerten. Aus diesen Gründen berechnet man die Standardabweichung (s) oder Variabilität nach der Formel:

s=

冑

08 6(xi – –x)2 08 n–1

XXI Vorbemerkungen

Sie stellt ein Maß für die Streuung der Einzelwerte um den Mittelwert dar. Ermittelt man die Häufigkeitsverteilung der einzelnen Messgrößen in einem Kollektiv, so kann diese eine beliebige Kurvenform haben. Im Idealfall gruppieren sich die Messwerte in Form einer Normalverteilung (GAUSS-Verteilung) um den Mittelwert (x–). Die GAUSSVerteilung entspricht einer Glockenkurve, wobei die beiden Wendepunkte von entscheidender Bedeutung sind: der Abstand zwischen x– und dem Wendepunkt ist der Wert s, die Standardabweichung. Um die Normalwerte von den pathologischen Resultaten deutlich zu trennen, muss man auf beiden Seiten der Kurve Grenzen zwischen den bei Gesunden häufigen bzw. den seltenen Werten ziehen. Als Grenze des sog. Normwertbereiches definiert man im Allgemeinen – beim Vorliegen einer Normalverteilung – die Spanne innerhalb der doppelten Standardabweichung (x– ± 2s) zu beiden Seiten des Mittelwertes. Dieser Bereich schließt die mittleren 95% der Verteilung ein (Vertrauensbereich oder Normbereich).

I

I Bausteine und Strukturelemente 1

Grundlagen der Lebensvorgänge – 3 Georg Löffler, Petro E. Petrides

2

Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren – 21 Georg Löffler

3

Proteine – 55 Hans R. Kalbitzer, Petro E. Petrides

4

Bioenergetik und Enzymologie – 99 Thomas Kriegel, Wolfgang Schellenberger

5

Nucleotide und Nucleinsäuren – 141 Matthias Montenarh, Georg Löffler

6

Zelluläre Organellen, Strukturen und Transportvorgänge – 173 Andrej Hasilik

1 1 Grundlagen der Lebensvorgänge Georg Löffler, Petro E. Petrides

1.1

Biomoleküle, Zellen und Organismen – 4

1.1.1 Elemente in lebenden Systemen – 4 1.1.2 Präbiotische Entstehung von Biomolekülen mit funktionellen Gruppen 1.1.3 Organisationsstufen biologischer Systeme – 5

1.2

Wasser

1.2.1 1.2.2 1.2.3 1.2.4 1.2.5 1.2.6 1.2.7

Wasser als Lösungsmittel – 8 Wasser als Reaktionspartner – 10 Kolligative Eigenschaften von Lösungen Dissoziation von Wasser, pH-Wert – 12 Säuren und Basen – 14 Puffersysteme – 15 Die Säure-Basenkatalyse – 18

–8

Literatur – 20

– 10

–4

4

1

Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

> > Einleitung Nur 25 chemische Elemente kommen in den verschiedenen Lebensformen und damit auch im menschlichen Körper vor. Man nimmt heute an, dass in der präbiotischen Phase der Erde, also vor etwa 4 Milliarden Jahren, organische Moleküle spontan entstanden sind, deren funktionelle Gruppen eine Assoziation zu Makromolekülen und übergeordneten Strukturen ermöglichte, aus denen schließlich das Leben in seiner heutigen Form entstanden ist. Die heutigen Lebensformen werden in die kernlosen Prokaryoten (Bakterien und Archaeen) sowie die kernhaltigen Eukaryoten eingeteilt, zu denen auch höhere Pflanzen und Tiere gehören. Wasser ist vom quantitativen und qualitativen Gesichtspunkt aus für alle biochemischen Prozesse von außerordentlicher Bedeutung. Aufgrund seiner physikalisch-chemischen Eigenschaften nimmt Wasser an vielen zellulären Reaktionen teil und bestimmt nahezu alle biochemischen Prozesse.

1.1

Biomoleküle, Zellen und Organismen

1.1.1 Elemente in lebenden Systemen Analysiert man die verschiedenen auf der Erde vorkommenden Lebensformen, so finden sich in ihnen etwa 25 chemische Elemente (. Tabelle 1.1). Von diesen kommen allerdings 14 nur als Spurenelemente (7 Kap. 22) vor. Den . Tabelle 1.1. 25 Elemente des Periodensystems bauen die verschiedenen Lebensformen auf. S Spurenelemente Element

Symbol

Häufigkeit [%]

Kohlenstoff

C

62

Stickstoff

N

11

Sauerstoff

O

9

Wasserstoff

H

5,7

Calcium

Ca

5

Phosphor

P

3

Kalium

K

1,3

Natrium

Na

1

Schwefel

S

1

Chlor

Cl

1

Magnesium

Mg

0,3

Bor

B

S

Fluor

F

S

Silicium

Si

S

Vanadium

V

S

Chrom

Cr

S

Mangan

Mn

S

Eisen

Fe

S

Kobalt

Co

S

Kupfer

Cu

S

Zink

Zn

S

Selen

Se

S

Molybdän

Mo

S

Zinn

Sn

S

Jod

I

S

größten Anteil an der Masse lebender Zellen hat der Kohlenstoff mit etwa 60%, gefolgt von Stickstoff und Sauerstoff mit jeweils etwa 10%. Wasserstoff, Calcium, Phosphor machen je 3–6% aus, während Kalium, Schwefel, Chlor, Natrium und Magnesium Anteile von etwa 1% und weniger haben. Chemisch können die in biologischen Systemen vorkommenden Elemente in Metalle und Nichtmetalle eingeteilt werden. Metalle sind in Form ihrer Kationen 4 Träger von Ladungen 4 Stabilisatoren von Strukturen sowie 4 Katalysatoren von verschiedener Reaktionen Eine Einteilung der Metall-Ionen nach ihrer biologischen Funktion findet sich in . Tabelle 1.2. ! Die Nichtmetalle Wasserstoff, Kohlenstoff, Sauerstoff und Stickstoff bilden bevorzugt untereinander chemische Bindungen.

Diese vier Elemente haben ihre besondere Bedeutung deshalb erlangt, weil sie covalente chemische Bindungen ausbilden können. Diese Fähigkeit beruht darauf, dass sie Elektronen mit anderen Atomen teilen können, was die Möglichkeit zur Ausbildung stabiler großer Moleküle bietet.

1.1.2 Präbiotische Entstehung

von Biomolekülen mit funktionellen Gruppen Man nimmt an, dass in der präbiotischen Phase der Erde vor etwa vier Milliarden Jahren aus den damaligen Bestandteilen der Atmosphäre unter dem Einfluss von ultraviolettem Licht und elektrischen Entladungen ein Satz einfacher organischer Verbindungen wie Ameisensäure, Milchsäure, Propionsäure, Essigsäure, Harnstoff und Aminosäuren entstanden sind. Diese Verbindungen weisen bereits funktionelle reaktive Gruppen auf.

5 1.1 · Biomoleküle, Zellen und Organismen

. Tabelle 1.2. Einteilung der Metallionen nach ihren biologischen Funktionen Na+, K+

Mg2+, Ca2+

Zn2+

Fe-, Cu-, Ca-, Mo-Ionen

Funktion

Träger von Ladungen

Stabilisatoren von Strukturen; Infromationsüberträger

Katalysatoren

Redoxkatalysatoren

Beweglichkeit

Hoch

Mittel

Immobil

Immobil

Bevorzugte Ligandenatome

Sauerstoff

Sauerstoff

Schwefel, Stickstoff

Schwefel, Stickstoff

Komplexbildung

Wenig stabil

Durchschnittlich

Sehr stabil

Sehr stabil

! Funktionelle Gruppen zeichnen sich chemisch durch polare Bindungen von Kohlenstoff- oder Wasserstoffatomen mit Sauerstoff, Schwefel oder Stickstoff aus.

Sowohl die in der präbiotischen Phase entstandenen, wie auch viele der heute in biologischen Systemen vorkommenden Verbindungen, enthalten funktionelle Gruppen (. Abb. 1.1), die dadurch zustande kommen, dass elektronegative Atome wie Sauerstoff, Schwefel oder Stickstoff mit Kohlenstoff oder Wasserstoffatomen polare und damit reaktionsfähige Bindungen eingehen. Von besonderer Bedeutung sind folgende funktionelle Gruppen: 4 Carboxylgruppe. Die Elektronegativität der Sauerstoffatome bewirkt eine Polarisierung der OH-Gruppe, die deshalb ihr Proton leicht abgeben kann, wobei die negativ geladene Carboxylatgruppe entsteht 4 Carbonyl- oder Ketogruppe. Durch die starke Elektronegativität werden die Elektronen zum Sauerstoffatom gezogen und die Bindung stark polarisiert. Damit können auch benachbarte Gruppen polarisiert und reaktionsfähiger werden. So sind die im Stoffwechsel vorkommenden D-Ketocarbonsäuren Pyruvat, α-Ketoglutarat und Oxalacetat besonders reaktionsfähig. Carbonsäuren, bei denen die Ketogruppe in E-Stellung steht, neigen zur spontanen Decarboxylierung

4 Hydroxylgruppe. Die Hydroxylgruppe enthält eine polare OH-Bindung, die wesentlich reaktionsfreudiger ist als eine C-H-Bindung, da sie wie Wasser Protonen aufnehmen oder abgeben kann Infobox Chemische Evolution im Labor Der Student Stanley Miller füllte im Jahre 1953 im Labor von Harold Urey ein Gasgemisch aus Ammoniak (NH3), Methan (CH4), Wasserdampf, Wasserstoff (H2), Kohlendioxyd (CO2) und Blausäure (HCN) in einen Glaskolben und setzte dieses Gemisch bei 80°C mehr als eine Woche lang ständigen elektrischen Entladungen aus. Mit dieser Versuchsanordnung wollte er die Uratmosphäre unseres Planeten vor mehr als 4 Milliarden Jahren imitieren und ging dabei von der Annahme aus, dass zu dieser Zeit relativ hohe Temperaturen und permanente elektrische Entladungen in der Atmosphäre herrschten. Unter dieser Behandlung entstanden Hunderte von organischen Verbindungen, z.B. 10 der natürlich vorkommenden Aminosäuren, Mono-, Di- und Tricarbonsäuren, Formaldehyd, Adenin, Zucker und sogar Nucleotidpolymere. In jüngerer Zeit hat Günter Wächtershäuser die Annahme vertreten, dass Biomoleküle möglicherweise bei noch höheren Temperaturen an Eisensulfid-Oberflächen entstanden sind, die als Katalysatoren gewirkt haben. In Modellversuchen konnte jüngst die Synthese von Pyruvat aus Formiat in derartigen Systemen nachgewiesen werden. Insgesamt zeigen diese Experimente, dass die einfachen Bausteine lebender Systeme ohne weiteres abiotisch gebildet werden können.

1.1.3 Organisationsstufen biologischer

Systeme

. Abb. 1.1. Funktionelle Gruppen von Biomolekülen. R und R´ = Alkylreste

Die verschiedenen Organisationsstufen biologischer Systeme sind in . Abb. 1.2 dargestellt. 4 Organische Moleküle wie Aminosäuren, Glucose, andere Zucker, Fettsäuren u.a. entstehen aus den niedermolekularen Bausteinen

1

6

Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

1

. Abb. 1.2. Hierarchische Organisation biologischer Strukturen (Molekülmasse in Da)

4 Makromoleküle entstehen durch Polymerisation der organischen Moleküle überwiegend durch Kondensationsreaktionen unter Abspaltung von Wasser 4 Viele Makromoleküle verfügen über sehr spezifische Mechanismen der Selbstorganisation, sodass sich aus ihnen supramolekulare Assoziate wie Multienzymkomplexe, Ribosomen, Chromosomen und Membranen bilden 4 Aus ihnen entstehen schließlich die Zellen als die allgemeinen Bausteinen aller lebenden Systeme ! Zellen sind die morphologische Einheit aller Organismen.

Der Übergang von der präbiotischen zur biotischen Ära geschah vermutlich vor etwa 3,5 Milliarden Jahren. Ein entscheidender Vorgang hierbei war das Auftreten von Membranvesikeln, durch die ein intravesikulärer Reaktionsraum der Umgebung abgetrennt wurde. Dieser erlaubte die Konzentrierung der in ihm enthaltenen Verbindungen, ermöglichte deren Reaktivität und damit die Polymerisierung und erlaubt schließlich das Fernhalten unerwünschter Verbindungen. Man nimmt an, dass im Verlauf der Evolution der Organismen aus einem Progenoten die Vielzahl der heute lebenden Organismen entstanden ist. Durch Vergleich von Makromolekülen, vor allen Dingen von ribosomaler RNA, ist es möglich, einen Stammbaum der verschiedenen Lebensformen aufzustellen (. Abb. 1.3). Dieser Stammbaum hat drei Hauptäste, die Bakterien, die den Bakterien verwandten Archaeen sowie die Eukaryoten.

Infobox Die Reiche des Lebens Mit zunehmender Akzeptanz der Evolutionstheorie von Charles Darwin wurde immer klarer, dass sich die aus morphologischen Kriterien abgeleitete Verwandtschaft der Arten auch molekular nachweisen lassen müsste. Carl Woese ging von dem Gedanken aus, dass sich hierfür am ehesten Makromoleküle mit essentieller Funktion für alle Lebensformen eignen und schlug deswegen die ribosomale RNA hierfür vor. Mit einer auf dieser Idee basierenden Methodik wurde der in der . Abb. 1.3 dargestellte Stammbaum der verschiedenen Lebensformen von Karl Otto Stetter und Hans Huber zusammengestellt. Offensichtlich stammen alle Lebensformen von einem gemeinsamen Vorläufer ab. Die erste Verzweigung des Stammbaums trennt Bakterien von Archaeen, von diesen haben sich dann die Eukaryoten abgetrennt, deren Evolution schließlich zu vielzelligen Pflanzen und Tieren mit verschiedenen Organen führte. Thermophile Organismen, deren Wachstumsoptimum bei 80°C und darüber liegt, finden sich in der Nähe der ersten Verzweigung. Möglicherweise ist dies ein Hinweis dafür, dass die frühesten Organismen an ein wesentlich heißeres Klima adaptiert waren.

7 1.1 · Biomoleküle, Zellen und Organismen

. Abb. 1.3. Von rRNA-Analysen abgeleiteter Stammbaum der Lebensformen der Erde. Von einem wenig definierten gemeinsamen Vorfahren zweigen zunächst die Bakterien, danach Archaeen und Eukaryoten ab. Thermophile Organismen (rot) gehören zu den frühes-

ten Lebensformen, was Rückschlüsse auf die frühen Lebensbedingungen ermöglicht. (Freundlicherweise zur Verfügung gestellt von K.O. Stetter und LH. Huber, Regensburg)

Bakterien und Archaeen gehören zu den sog. prokaryoten Organismen. Diese sind Einzeller mit einer relativ einfachen Struktur, deren DNA nicht in einem Zellkern kondensiert ist, sondern als ringförmiges Chromosom im Cytosol vorliegt. Auch andere subzelluläre Organellen sind nicht oder nur ansatzweise bei Prokaryoten nachzuweisen. Eukaryote Zellen sind im Gegensatz zu den prokaryoten Zellen wesentlich größer und enthalten intrazelluläre Organellen wie den Zellkern, Mitochondrien, endoplasma-

tisches Retikulum und Golgi-Apparat sowie bei photosynthetischen Zellen die Chloroplasten (7 Kap. 4.1.1). Zu den Eukaryoten gehören zahlreiche Einzeller, Flagellaten und Ciliaten, Hefen, Schleimpilze aber auch die höheren Pflanzen und Tiere.

1

8

Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

In Kürze

1

25 chemische Elemente sind für den Aufbau lebender Strukturen notwendig. Neben den v. a. als Ladungsträger dienenden Metallen Natrium, Kalium, Calcium und Magnesium sind zum Aufbau lebender Strukturen Wasserstoff, Kohlenstoff, Sauerstoff, Stickstoff, Phosphor und Schwefel notwendig. Diese bilden einfache organische Moleküle, aus denen durch Kondensationsreaktionen Makromoleküle wie Nucleinsäuren, Proteine, Polysaccharide und Lipide hervorgehen. Diese aggregieren zu übergeordneten Strukturen, welche die Bauteile von Zellen als den allen Lebensformen zugrunde liegenden Grundeinheiten bilden.

1.2

Wasser

Ohne Wasser sind die bekannten Lebensformen nicht vorstellbar. Die Bedeutung des Wassers für das Leben beruht auf einer Reihe von sehr spezifischen Eigenschaften dieses Moleküls.

1.2.1

Wasser als Lösungsmittel

! Wasser ist keine typische Flüssigkeit.

Im Vergleich zu anderen Dihydriden wie H2S oder H2Se weist Wasser eine höhere Schmelz- und Siedetemperatur auf, was ihm eine Reihe besonderer physikalisch-chemischer Eigenschaften verleiht: Polarität. Wasser ist ein polares Molekül (. Abb. 1.4). Der

O-H-Abstand beträgt 0,958 Å, der Winkel zwischen den beiden OH-Bindungen beträgt 104,5°. Im Wassermolekül trägt das Sauerstoffatom eine negative, die beiden Wasserstoffatome je eine positive Partialladung. Das Wassermolekül ist also ein Dipol, was für biologische Systeme von besonderer Bedeutung ist. Aufgrund ihrer Polarität orientieren sich benachbarte Wassermoleküle so, dass die H-Atome mit der positiven Partialladung sich zu den benachbarten O-Atomen mit der negativen Partialladung orientieren. Daraus ergeben sich geordnete Strukturen, die z.B. bei der Kristallstruktur von Eis besonders augenfällig sind. Diese Bindungen heißen Wasserstoffbrückenbindungen.

. Abb. 1.4. Atomare Struktur des Wassermoleküls. G–, G+ = negative bzw. positive Partialladung

Die Lebensformen lassen sich aufgrund von Verwandtschaftsuntersuchungen in die drei Reiche Bakterien, Archaeen und Eukaryote einteilen. Nur bei den Eukaryoten ist die DNA als informationstragendes Molekül im Zellkern lokalisiert, außerdem verfügen eukaryote Zellen über eine größere Zahl zellulärer Organellen, die ihnen die Kompartimentierung von Lebensvorgängen ermöglichen. Eukaryote haben schließlich als Einzige die Fähigkeit, vielzellige Organismen mit unterschiedlich differenzierten Zellen zu bilden.

Wärmekapazität. Wasser besitzt mit 1 cal (4,186 J)/

Grad u Gramm nach Ammoniak die höchste spezifische Wärme oder Wärmekapazität. Damit kann Wasser eine relativ große Wärmemenge zugeführt oder entzogen werden, ohne dass sich seine Temperatur wesentlich ändert. Für den menschlichen Organismus ist diese hohe Wärmekapazität deshalb wichtig, weil im Stoffwechsel ständig Wärme erzeugt wird, die zur Konstanthaltung der Körpertemperatur von Wasser aufgenommen wird und schließlich abgeführt werden muss. Verdunstungswärme. Durch eine zweite thermische Ei-

genschaft, die hohe Verdunstungswärme, kann durch Verdunstung von Wasser Wärme abgeben werden, was z.B. besonders bei Muskelarbeit von Bedeutung ist. ! Wegen der Polarität von Wasser sind Ionen in Lösungen von einer Hydrathülle umgeben und können sich unabhängig voneinander bewegen.

Hydrathüllen. Ionenkristallgitter lösen sich wegen ihrer Polarität gut in Wasser. Dabei orientieren sich die geladenen Dipole der umgebenden Wassermoleküle entsprechend der Ladung der jeweiligen Ionen und bilden auf diese Weise Hydrathüllen. Dadurch können sich die geladenen Teilchen unabhängig voneinander bewegen, was eine der Voraussetzungen für die durch Natrium- und Kaliumionen vermittelte Erregungsleitung entlang biologischer Membranen ist. Hydratationsradius. Für biologische Eigenschaften eines Ions wie Diffusionsgeschwindigkeit oder Permeationsvermögen ist der Hydratationsradius entscheidend. Während der Atomradius von Kalium (0,133 nm) größer ist als der von Natrium (0,098 nm), sind Größenverhältnisse der Hydratationsradien der beiden Ionen (0,17 nm für Kalium und 0,24 nm für Natrium) genau umgekehrt. Deshalb können Kaliumionen die meisten biologischen Membranen besser permeieren als Natriumionen.

9 1.2 · Wasser

. Abb. 1.5. Ausbildung von Wasserstoffbrückenbindungen zwischen den Carboxylgruppen von 2 Carbonsäuren. In Klammern (+ und –) sind die ungleichen Ladungsverteilungen (Polarisierung) angegeben, die die elektrostatischen Wechselwirkungen (= Wasserstoffbrückenbindungen, die in dieser und allen folgenden Abbildungen durch senkrechte blaue Striche dargestellt sind) verursacht

! Wasserstoffbrückenbindungen verschaffen als Bindungen mit geringer Energie Makromolekülen Flexibilität ihrer räumlichen Anordnung.

Allgemeiner formuliert handelt es sich bei Wasserstoffbrückenbindungen um Bindungen besonderer Art. Sie wirken zwischen einem Wasserstoffatom, das an ein stark elektronegatives Atom (in biologischen Systemen fast immer Stickstoff oder Sauerstoff) covalent gebunden ist und dadurch positiv polarisiert wird, und einem weiteren elektronegativen Atom mit einem freien Elektronenpaar (. Abb. 1.5). Je nachdem ob das Wasserstoffatom und das andere elektronegative Atom zum gleichen oder zu verschiedenen Molekülen gehören, wird zwischen intra- und intermolekularen H-Brücken unterschieden. Außer im Wasser kommen diese Bindungen in Proteinen und Nucleinsäuren vor, weil sie viele polarisierte Gruppen wie –OH, >NH, >C=O und =O enthalten, die derartige Brücken leicht ausbilden. Zur Spaltung einer Wasserstoffbrückenbindung müssen etwa 21–42 kJ/mol (5–10 kcal/mol) aufgewendet werden. Im Vergleich dazu ist die Bindungsenergie einer covalenten Einfachbindung mit 210–420 kJ/mol (50–100 kcal/ mol) um eine Zehnerpotenz höher. Gerade ihre niedrige Bindungsenergie befähigt die Wasserstoffbrücken, in biologischen Systemen Funktionen zu übernehmen, die von den viel stärkeren covalenten Bindungen nicht wahrgenommen werden können. In Proteinen und Nucleinsäuren stabilisieren Wasserstoffbrückenbindungen die räumliche Anordnung dieser Makromoleküle. Diese Stabilisierung durch leicht lösbare Wasserstoffbrückenbindungen verschafft den Molekülen eine relativ große Flexibilität ihrer räumlichen Konformation, was eine Grundvoraussetzung für die Ausübung ihrer Funktionen darstellt. ! Hydrophobe Wechselwirkungen entstehen durch Unverträglichkeit hydrophiler und hydrophober Gruppen.

Ionen und Moleküle mit polaren Gruppen lösen sich gut in Wasser, da sie aufgrund ihrer Polarität Wasserstoffbrückenbindungen mit Wasser ausbilden können. Sie werden deshalb als hydrophil (wasserliebend) bezeichnet. Im Gegensatz dazu sind Moleküle, die nur aus Kohlenstoff und Wasserstoff bestehen (Kohlenwasserstoffe) we-

. Abb. 1.6. Vereinfachtes Modell zur Erläuterung der hydrophoben Wechselwirkungen in wässrigen Lösungen. Das in Wirklichkeit ungeordnete räumliche Netzwerk der Wasserstoffbrücken in der Lösung ist zu einer regelmäßigen flächigen Anordnung (blaue Punkte) vereinfacht, die jeweils durch vier Wasserstoffbrücken verknüpft sind. Hydrophobe Teilchen (orange Kugeln) in der Lösung, die keine Wasserstoffbrücken mit den Wassermolekülen ausbilden können, haben die Neigung, sich zusammenzulagern, da so weniger Wasserstoffbrücken gelöst werden müssen

gen der Unpolarität der C-H-Bindung nicht oder nur in begrenztem Umfang mit Wasser mischbar. Sie werden daher als hydrophob (wasserfeindlich) oder lipophil (fettliebend) bezeichnet. Soll ein hydrophobes Teilchen in der von den polaren Wassermolekülen gebildeten dreidimensionalen Netzstruktur untergebracht werden (. Abb. 1.6), müssen Wasserstoffbrückenbindungen, über die Wassermoleküle mit ihrer Umgebung verbunden sind, unter Energieverbrauch gelöst werden. Wenn das hydrophobe Teilchen den Platz besetzt hat, kann sich das Netz an dieser Stelle nicht wieder schließen. Werden nun zwei hydrophobe Teilchen in eine wässrige Lösung gebracht, so treten sie in einer gemeinsamen Flüssigkeitslücke zusammen. Weil dadurch weniger Wasserstoffbrücken gelöst werden müssen, wird also auch weniger Energie aufgewendet. Damit ist die Anordnung der beiden Teilchen in einer gemeinsamen Wasserlücke energetisch günstiger und stabiler als die getrennte Verteilung in der Lösung. Bei den Wechselwirkungen zwischen hydrophoben Teilchen, die die Zusammenlagerung dieser Gruppen im wässrigen Milieu hervorruft, handelt es sich also nicht um eine chemische Bindung im üblichen Sinn, sondern um ein Phänomen, das sich anschaulich auf die Unverträglichkeit hydrophiler und hydrophober Gruppen zurückführen lässt. Hydrophobe Wechselwirkungen spielen bei der Selbstorganisation biologischer Strukturen eine Rolle: 4 Ausbildung der dreidimensionalen Proteinstruktur. Während die Sekundärstrukturelemente in Proteinen im Wesentlichen durch Wasserstoffbrückenbindungen fixiert werden, sind für die Ausbildung der Tertiär-

1

10

1

Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

struktur von Proteinen hydrophobe Wechselwirkungen von großer Bedeutung (7 Kap. 3.3.3) 4 Selbstorganisation von Makromolekülen. Auch bei der Selbstorganisation von Makromolekülen zu übergeordneten Komplexen wie der Quartärstruktur von Proteinen, der Assoziation von Multienzymkomplexen, Virusmantelproteinen, Ribosomen und biologischen Membranen spielen hydrophobe Wechselwirkungen eine große Rolle (7 Kap. 3.3.4) Da Zellmembranen einen hohen Lipidanteil besitzen, der eine durchgehende nichtwässrige Phase darstellt, können sie von lipophilen Stoffen leicht passiert werden. Deshalb gelangen diese Stoffe i. Allg. schnell durch die Zellen des Magen-Darm-Trakts ins Blut und werden von dort rasch in das Innere der Gewebezellen aufgenommen. Daher werden auch manche Arzneimittel bei der Herstellung mit einer zusätzlichen Methyl (CH3)- oder Ethyl(CH3-CH2)-Gruppe zur Verbesserung ihrer Lipidlöslichkeit und damit Erhöhung der Resorptionsgeschwindigkeit versehen. Im Zellstoffwechsel kommt eine Vielzahl von Reaktionen vor, durch die Moleküle wasser- oder fettlöslich(er) gemacht werden können. Verbindungen, die aus dem Organismus ausgeschieden werden sollen, werden v.a. in der Leber durch Einführung polarer Hydroxyl- oder Sulfatgruppen wasserlöslicher gemacht, wodurch die renale bzw. biliäre Ausscheidungsrate erhöht wird.

1.2.2 Wasser als Reaktionspartner Wasser ist ein wichtiger Partner vieler biochemischer Reaktionen, weil es wegen seiner Dipolnatur eine hohe Polarität aufweist und in einer Konzentration von 55,5 mol/l vorliegt (Molekülmasse von H2O = 18 Da, Konzentration 1000 g/l, molare Konzentration 1000/18 = 55,5 mol/l). Aufgrund seiner physikalischen und chemischen Eigenschaften nimmt Wasser an einer großen Zahl biochemischer Reaktionen teil. Von besonderer Bedeutung sind: 4 Hydrolyse- und Kondensationsreaktionen sowie 4 Hydratisierungsreaktionen Hydrolyse und Kondensation. Die meisten Nahrungsstoffe,

die von tierischen Organismen aufgenommen werden, sind . Abb. 1.7. Hydrolytische Spaltung von Estern, glycosidischen Bindungen und Säureamiden. Man beachte, dass die Rückreaktion als Kondensationsreaktion zur Ausbildung von Oligomeren führt

Biopolymere, die sich aus monomeren Bauteilen zusammensetzen. Das Gleiche gilt für die große Zahl von Makromolekülen, welche die Bestandteile von Zellen ausmachen. Am Anfang jeden Abbaus dieser Verbindungen steht immer die hydrolytische Spaltung der Bindungen, mit denen die einzelnen Untereinheiten verknüpft sind (. Abb. 1.7). Solche Bindungen sind i. Allg. Ester- oder glycosidische Bindungen oder Säureamidbindungen. Es ist verständlich, dass es eine außerordentlich große Zahl mehr oder weniger spezifischer Enzyme gibt, die derartige Bindungen in Makromolekülen zu spalten imstande sind. Formal beruht die Biosynthese der genannten Makromoleküle auf dem umgekehrten Vorgang, nämlich einer Kondensation monomerer Bauteile unter Wasserabspaltung. Da ganz überwiegend das Gleichgewicht dieser Reaktionen auf der Seite der Hydrolyse liegt, benützen lebende Systeme für Kondensationsreaktionen aktivierte Verbindungen. Hydratisierung von Doppelbindungen. Diese Reaktion

spielt im Zellstoffwechsel eine bedeutende Rolle. Grundlage ist, dass sich Doppelbindungen zwischen zwei Kohlenstoffatomen leicht polarisieren lassen und andere Atome sich deshalb anlagern können. In der in . Abb. 1.8 dargestellten Reaktionsfolge wird zunächst eine C-C-Einfachbindung zu einer Doppelbindung dehydriert. An diese wird anschließend Wasser angelagert und im nächsten Teilschritt die entstandene Hydroxyverbindung ein zweites mal dehydriert, sodass jetzt eine Ketogruppe entstanden ist. Derartige Reaktionen spielen eine Rolle bei der E-Oxidation der Fettsäuren (7 Kap. 12.2.1) sowie im Citratzyklus (7 Kap. 14).

1.2.3 Kolligative Eigenschaften

von Lösungen Als kolligative Eigenschaften einer verdünnten Lösung werden alle Eigenschaften bezeichnet, die nur von der Anzahl, nicht aber von der Art der gelösten Teilchen bestimmt werden. Dazu gehören im Einzelnen: 4 der osmotische Druck einer Lösung 4 die Erniedrigung ihres Gefrierpunkts und ihres Dampfdrucks sowie 4 die Erhöhung des Siedepunkts

11 1.2 · Wasser

. Abb. 1.8. Reversible Anlagerung von Wasser an eine Kohlenstoffdoppelbindung. Eine C–C-Bindung wird zunächst zur Doppel-

bindung dehydriert. An diese kann Wasser angelagert werden, was eine nochmalige Dehydrierung erlaubt

! Lösungsmitteldiffusion durch selektiv permeable Membranen wird als Osmose bezeichnet.

Für den Austausch von Wasser zwischen dem Zellinneren und dem extrazellulären Raum sind osmotische Kräfte von großer Bedeutung, da die meisten Zellmembranen für Wasser frei permeabel sind. Diese Tatsache führt zur Entstehung des osmotischen Druckes. Dieser entsteht immer dann, wenn 2 Lösungsmittelräume mit unterschiedlicher Teilchenkonzentration durch eine nur für das Lösungsmittel (i. Allg. Wasser) permeable Membran getrennt sind. Die dabei ablaufenden Vorgänge sind schematisch in . Abb. 1.9 dargestellt. Befinden sich zwei Lösungen mit unterschiedlicher Teilchenkonzentration in zwei durch eine semipermeable Membran getrennten Kammern, so strömt Wasser von der Kammer mit der niedrigen Teilchenkonzentration in die mit der höheren. Der Grund hierfür ist, dass ein Ausgleich der unterschiedlichen Wasserkonzentrationen in den beiden Kammern gesucht wird. Der Volumenanstieg in der Kammer mit der ursprünglich höheren Teilchenkonzentration kann aber durch einen entsprechenden hydrostatischen Druck verhindert werden, der den Durchtritt der Lösungsmittelmoleküle unterbindet. Dieser Druck wird auch als osmotischer Druck bezeichnet. In dem in . Abb. 1.9 dargestellten Beispiel führen die osmotischen Kräfte zu identischen Teilchenkonzentrationen in beiden Kammern, d.h. zu einem vollständigen Konzentrationsausgleich. Dies ist unter physiologischen Bedingungen auch mit wenigen Ausnahmen der Fall. Sind die Konzentrationsunterschiede jedoch sehr groß (beispielsweise nur Wasser in der einen, konzentrierte Salzlösung in der anderen Kammer), so verhindert der durch die Volumenerhöhung alleine entstehende hydrostatische Druck den vollständigen Konzentrationsausgleich des Wassers. Man sollte auch beachten, dass eine Lösung als solche keinen osmotischen Druck besitzt, ganz gleich, ob sie eine hohe oder niedrige Teilchenkonzentration aufweist. Osmotische Kräfte werden erst dann wirksam, wenn man die Lösung mit einer zweiten Lösung mit anderer Teilchenkonzentration in Kontakt

. Abb. 1.9. Vorgänge bei der Osmose. Zwei durch eine semipermeable (nur für Wasser durchgängige) Membran getrennte Kammern enthalten jeweils Teilchenlösungen unterschiedlicher Konzentration (im Beispiel 10 bzw. 20 Teilchen/120 Volumeneinheiten). Um die Wasserkonzentration in den beiden Kammern auszugleichen, strömt Wasser so lange aus der Kammer mit der niedrigen Teilchenkonzentration in die mit der hohen, bis sich die Teilchenkonzentrationen und damit die Wasserkonzentrationen in beiden Kammern angeglichen haben (im Beispiel je 10 Teilchen/80 Volumeneinheiten). (Weitere Einzelheiten 7 Text)

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12

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Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

bringt, von der sie durch eine semipermeable Membran getrennt ist. Die Grundlagen für die Berechnung des osmotischen Drucks wurden Ende des vergangenen Jahrhunderts von dem holländischen Physikochemiker Jacobus Henricus van’t Hoff (1852–1911) erarbeitet. Bei seinen Untersuchungen fand er, dass der osmotische Druck mit der Temperatur ansteigt und bei konstanter Temperatur mit der Teilchenkonzentration zunimmt. Daraus schloss er, dass sich die gelösten Teilchen in idealen hochverdünnten Lösungen wie ideale Gase verhalten. In Analogie zur allgemeinen Gasgleichung pV = nRT n = Anzahl der Mole, R = Gaskonstante, T = Grad Kelvin stellte er für den osmotischen Druck S idealer Lösungen folgende Zustandsgleichung auf: πV = nRT oder π=

n RT = cRT V

n/V = c (molare Konzentration aller gelösten Teilchen) Das Einsetzen der entsprechenden Werte ergibt, dass eine Lösung der Konzentration 1 mol/l bei 0°C einen osmotischen Druck von 22 bar aufweist. ! Osmotische Kräfte entstehen bei Wasserbewegungen zwischen Intra- und Extrazellulärraum.

Zelluläre Membranen sind für die meisten polaren Verbindungen, nicht jedoch für Wasser impermeabel. Einige spezialisierte Zellen wie Nierenepithelien und Erythrozyten besitzen zusätzlich Proteinporen, die als Wasserkanäle dienen. Mit diesen Aquaporinen wird der Wassertransport durch die Zellmembran erleichtert und regulierbar (7 Kap. 6.1.4, 28.1.4). An der Grenze zwischen Extrazellulär- und Intrazellulärraum, den Zellmembranen, bestehen also unterschiedliche Permeabilitäten für gelöste Stoffe und das Lösungsmittel Wasser sowie unterschiedliche Konzentrationen der gelösten Stoffe, sodass eine Osmose eintreten kann. In den meisten Geweben halten allerdings eine Reihe von Mechanismen die Teilchenkonzentrationen im Extra- und Intrazellulärraum gleich, sodass osmotische Kräfte nicht auftreten. Diese sind jedoch wichtig für die Regulation der Flüssigkeitsausscheidung durch die Nieren (7 Kap. 28.1.4) sowie unter pathologischen Bedingungen (z.B. hyperosmolares diabetisches Koma). ! Das osmotische Verhalten einer Lösung gegenüber reinem Wasser kann über die Gefrierpunktserniedrigung bestimmt werden.

. Tabelle 1.3. Osmolalität und Gefrierpunktserniedrigung verschiedener Körperflüssigkeiten Erniedrigung des Gefrierpunkts (GPE) von 0 °C auf Normales Blutserum

–0,558

Osmolalität

300 mosm/kg H2O

Verdünnter Urin

–0,372

200 mosm/kg H2O

Konzentrierter Urin

–2,600

1400 mosm/kg H2O

Der Gefrierpunkt von reinem Wasser liegt bei 0 °C. Löst man in 1 kg Wasser 1 mol einer Substanz wird der Gefrierpunkt um 1,86 °C erniedrigt. Diese Lösung wird als 1 osmolal bezeichnet, d.h. sie enthält 1 mol (6,023 u 1023 Moleküle) einer nicht dissoziierenden Substanz in 1 kg Lösungsmittel. Wird dagegen 1 mol Substanz in 1 l Lösungsmittel gelöst, so ist die Lösung 1 osmolar. Bei kolligativen Effekten wie der Gefrierpunktserniedrigung oder dem osmotischen Druck ist entscheidend, ob die gelöste Substanz dissoziiert oder nicht. Eine 1 molare Lösung von Glucose oder einer anderen nicht dissoziierenden Verbindung enthält 6,023 u 1023 Moleküle. Diese Lösung ist 1 osmolar. 1 mol NaCl besteht zwar ebenfalls aus 6,023 u 1023 NaCl-Einheiten, die Lösung ist aber 2 osmolar, da NaCl in wässriger Lösung in 2 Ionen, Na+ und Cl-, dissoziiert. Man muss deshalb bei der Ermittlung der Osmolalität einer Lösung eine etwaige Dissoziation der gelösten Substanz berücksichtigen. Aus apparativen Gründen hat es sich eingebürgert, statt der Osmolarität einer Lösung deren Gefrierpunktserniedrigung zu bestimmen. Einige für Werte der menschlichen Körperflüssigkeiten sind in . Tabelle 1.3 zusammengestellt.

1.2.4 Dissoziation von Wasser, pH-Wert Die chemischen und die physikalischen Eigenschaften von Wasser sowie die Tatsache, dass es, wenn auch in geringem Umfang, in seine Ionen zerfällt, beeinflussen das chemische Verhalten einer großen Zahl anderer Moleküle. In diesem Zusammenhang sind besonders wichtig: 4 der pH-Wert 4 die Säure/Baseneigenschaften sowie 4 die Puffersysteme ! Wasser dissoziiert in Protonen und Hydroxylionen.

Aus Messungen der elektrischen Leitfähigkeit von Wasser muss geschlossen werden, dass auch in reinstem Wasser geringe Mengen freier Ionen als Ladungsträger enthalten sein müssen. Sie entstehen durch folgende Reaktion: H2O  OH − + H +

13 1.2 · Wasser

In wässriger Lösung assoziiert das entstandene Proton sofort mit einem weiteren Molekül H2O nach H2O + H +  H3O+ Zur Vereinfachung wird dieser Teil der Reaktion meist weggelassen. Die Gleichgewichtskonstante K dieser Reaktion ist temperaturabhängig und beträgt bei 25 °C 1,8 u 10–16. Die Reaktionsgleichung kann umgewandelt werden zu 1

oder ⎡⎣H + ⎤⎦ × ⎡⎣OH − ⎤⎦ = K × [H2O] Da die Konzentration der Wassermoleküle in verdünnten Lösungen mit 55,5 mol/l konstant ist, kann sie in die Gleichgewichtskonstante einbezogen werden. ⎡⎣H + ⎤⎦ × ⎡⎣OH − ⎤⎦ = 1, 8 × 10 −16 × 55, 5 = 10 −14 = K W 2 2 Die dadurch entstandene neue Konstante wird als das Ionenprodukt von Wasser bezeichnet. Aus dem Wert der Konstante von 10–14 folgt, dass die Konzentrationen von H+ und OH– in reinem Wasser und auch verdünnten wässrigen Lösungen neutraler Substanzen je 10–7 mol/l betragen. Es folgt weiterhin, dass bei einem Anstieg der Protonenkonzentration (in sauren Lösungen) die Hydroxylionenkonzentration abfallen und umgekehrt beim Abfall der Protonenkonzentration (in basischen Lösungen) die Hydroxylionenkonzentration zunehmen muss. Zur Charakterisierung einer verdünnten wässrigen Lösung genügt daher die Angabe einer der beiden Konzentrationen. Man hat sich auf die der Protonen geeinigt und verwendet nach einem Vorschlag von Soeren Soerensen den negativen dekadischen Logarithmus der mit c0 = 1mol/ l normierten Protonenkonzentration: pH = − log ⎣⎡H + ⎤⎦ Bei einer Protonenkonzentration von 10–7 mol/l ist demnach der pH gleich 7, die Lösung ist neutral. 1

Die Konstante kann hier als dimensionslose Zahl angegeben werden, wenn man sich auf folgende Definition einigt: Symbol [X] bedeutet in normierter Konzentration [X] = c(X)/c0 mit c0 = 1 mol/l

2

Dieser Wert ist für die Normierungs- (bzw. Bezugs-)Konzentration ist allgemein verbindlich und liegt allen in Tabellenwerken angegebenen K-Werten zugrunde. Genauer ist KW wie alle Gleichgewichtskonstanten eine Funktion der Temperatur. Der angegebene Wert gilt bei 25°C, während bei 37°C der Wert 2,5 x 10–14 beträgt.

. Abb. 1.10. pH-Werte allgemein bekannter Flüssigkeiten

Steigt die Konzentration auf 10–6 mol/l, so wird der pH 6 und die Lösung sauer, fällt die Konzentration auf 10–8 mol/l, so wird der pH 8 und die Lösung alkalisch. Am Neutralpunkt des Wassers beträgt die Konzentration der Wassermoleküle 55,5 mol/l und die Konzentration der Hydroxylionen und Protonen je 100 nmol/l (10–7 mol/l), d.h. es kommen je 1 H+-Ion und 1 OH–-Ion auf 555 Millionen Wassermoleküle. In . Abb. 1.10 sind die pH-Werte einiger bekannter Flüssigkeiten zusammengestellt. Auch in biologischen Systemen wird ein weiter Bereich von pH-Werten umspannt. Während der pH-Wert des Blutplasmas bei 7,4 liegt, erstreckt sich derjenige des Pankreassaftes ins Alkalische, wohingegen Magensaft pH-Werte unter 2 erreichen kann. Dabei ist immer zu beachten, dass es sich bei der pH-Skala um eine logarithmische Skala handelt und die Protonenkonzentrationen beim Magensaft etwa 10–2 mol/l, beim

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14

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Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

Pankreassaft dagegen 10–8 mol/l betragen und damit um sechs Größenordnungen niedriger liegen. ! Der pH-Wert des Intra- und Extrazellulärraumes wird genau reguliert.

Bei 37 °C beträgt der pH-Wert der Extrazellulärflüssigkeit 7,4. Damit ist die Protonenkonzentration im Vergleich zu anderen Kationen des Blutplasmas, deren Konzentration im millimolaren Bereich liegt, äußerst gering. Zu diagnostischen Zwecken wird der pH-Wert – zusammen mit den Blutgasen (O2, CO2) – im arteriellen Blut bestimmt. Der pH-Wert im Intrazellulärraum ist im Gegensatz zu dem im Extrazellulärraum nicht leicht messbar, obwohl ihm wahrscheinlich die größere Bedeutung zukommt, da er das wichtigere Kompartiment darstellt und in ihm die wesentlichen Stoffwechselreaktionen ablaufen. Mit Hilfe der Magnetresonanzspektroskopie (NMR) konnte jedoch inzwischen nachgewiesen werden, dass im Zellinneren im Vergleich zur extrazellulären Flüssigkeit ein niedriger pH, d.h. eine höhere Wasserstoffionenkonzentration vorliegt. So herrscht z.B. in der Muskulatur ein pH-Wert von 6,6. Eine Ausnahme macht die Tubuluszelle der Niere mit einem pH von 7,32 – wahrscheinlich deshalb, weil diese Zellen Protonen sezernieren. Die Wasserstoffionenkonzentrationen im Extrazellulärraum und im Intrazellulärraum unterliegen einer genauen Regulation, da Änderungen der Protonenkonzentration all diejenigen Vorgänge beeinflussen, die auf elektrostatischen Wechselwirkungen basieren (7 Kap. 3.3.3). Durch Änderung der Protonenkonzentration kann die Protonenanlagerung bzw. Protonenabspaltung und damit der Ladungscharakter eines Moleküls wesentlich beeinflusst werden. Von großer Bedeutung ist dies bei den Enzymen, deren Wechselwirkung mit ihrem Substrat von elektrostatischen Kräften bestimmt wird (7 Kap. 4.3). Darüber hinaus wirken Säuren und Basen als Katalysatoren (7 Kap. 1.2.7), sodass eine Erhöhung ihrer Konzentration bei der Zelle unerwünschte Reaktionen verursachen kann.

1.2.5

Säuren und Basen

Protonen und Hydroxylionen als die Dissoziationsprodukte des Wassers sind für die Biochemie von größter Bedeutung, u.a. da die meisten Biomoleküle über chemische Gruppen verfügen, die Protonen oder Hydroxylionen anlagern oder abgeben können. Dadurch wird nicht nur der pH-Wert verändert, sondern auch viele Eigenschaften der betreffenden Biomoleküle selbst. ! Säuren spalten Protonen ab, Basen lagern Protonen an.

Für die Definition von Säuren und Basen existiert eine Reihe von Konzepten, von denen das des dänischen Physikochemikers Johann N. Broensted (1879–1947) für viele Zwecke geeignet ist:

4 Säuren sind Protonendonatoren, d.h. sie spalten Protonen in Anwesenheit eines Protonenakzeptors ab 4 Basen sind Protonenakzeptoren, d.h. sie lagern Protonen in Anwesenheit eines Protonendonators an In wässrigen Lösungen ist der allgemeine Protonenakzeptor das Wasser, sodass eine typische Säure-Basenreaktion folgendermaßen geschrieben werden kann: AH + H2O  A − + H3O+ Sehr häufig (und auch in diesem Buch) werden Gleichungen dieser Art unter Weglassen des Wassers geschrieben: AH  A − + H + Die bei der Protonenabgabe oder Dissoziation einer Säure (Protolyse) entstehende Verbindung wird als (die zur Säure) konjugierte Base bezeichnet. Säure HCl + H2O NH4 + H2O H2CO3 + H2O HCO3– + H2O H3PO4 + H2O H2PO4– + H2O

o o o o o o

Konjugierte Base Cl– + H3O+ NH3 + H3O+ – HCO3 + H3O+ CO32- + H3O+ H2PO4– + H3O+ HPO42- + H3O+

Säuren, die wie Kohlensäure und Phosphorsäure mehrere Protonen abgeben können, spalten diese stufenweise ab. Ihre konjugierten Basen (die Anionen HCO3– und H2PO4–) können nochmals Protonen abgeben, wirken also einer Base gegenüber als Säure. Von einer Säure können sie jedoch auch Protonen übernehmen und wirken diesen gegenüber somit als Basen. Derartige Verbindungen, zu denen auch Wasser zählt, werden als Ampholyte bezeichnet. ! Die Stärke einer Säure wird durch die Dissoziationskonstante bestimmt.

Ob das Gleichgewicht einer Protonenübertragung mehr auf der Seite der Ausgangssubstanzen oder mehr auf der Seite der Reaktionsprodukte liegt, wird dadurch bestimmt, wie leicht die protonenspendende Säure H+-Ionen abgibt bzw. die protonenaufnehmende Base H+-Ionen aufnimmt, mit anderen Worten von der Stärke der Säure bzw. Base. Eine starke Säure ist definiert als eine, die vollständig oder nahezu vollständig dissoziiert ist. Eine Säure die nur teilweise dissoziiert, wird als schwach (Essigsäure, Kohlensäure) bezeichnet. Diese Angaben beziehen sich auf Wasser als biologisches Lösungsmittel. Dies ist entscheidend, da z.B. Salzsäure in Benzol praktisch nicht, in Wasser dagegen vollständig dissoziiert und damit als starke Säure gilt. Eine quantitative Bestimmung der Säure- bzw. Basenstärken kann durch die Bestimmung der Gleichgewichts-

15 1.2 · Wasser

Säurekonstanten zwischen 10–1 und 10–5, während KS bei schwachen Säuren kleiner als 10–5 ist. In . Tabelle 1.4 sind die Dissoziationskonstanten einiger in der Biochemie wichtiger Säuren aufgeführt. Es handelt sich dabei um die KS -Werte in wässriger Lösung. Da die Angabe der Dissoziationskonstante in Zehnerpotenzen umständlich ist, verwendet man für Berechnungen häufig den negativen (dekadischen) Logarithmus der Dissoziationskonstante, der als pKS bezeichnet wird.

konstante oder Dissoziationskonstante erfolgen. Für die obige Reaktion AH + H2O  A − + H3O+ gilt nach dem Massenwirkungsgesetz: ⎡H3O+ ⎤⎦ × ⎡⎣ A − ⎤⎦ K∗ = ⎣ [AH ]× [H2O]

pK S = − log K Wenn also unter Gleichgewichtsbedingungen die Konzentrationen der Reaktionsteilnehmer bekannt sind, kann daraus die Gleichgewichtskonstante errechnet werden. Da die Konzentration der Wassermoleküle im Vergleich zu der der übrigen Reaktanden mit 55,5 mol/l unverändert bleibt, kann man [H2O] in die Konstante einbeziehen und erhält:

Damit ergeben sich Säuren, deren pK-Wert geringer als 1 ist, als starke Säuren, Säuren deren pK-Wert 5 überschreitet, als schwache. Die meisten Säuren, die im Stoffwechsel der Zelle von Bedeutung sind, gehören zu den schwachen bis mittelstarken Säuren.

⎡H + ⎤ × ⎡ A − ⎤ K= ⎣ ⎦ ⎣ ⎦ [AH ]

1.2.6 Puffersysteme ! Schwache Säuren und ihre konjugierten Basen bilden Puffersysteme und halten den pH-Wert in den Körperflüssigkeiten konstant.

Diese Größe, die als Dissoziationskonstante einer Säure oder als Säurekonstante KS bezeichnet wird, ist temperaturabhängig (7 Kap. 1.2.4). Je stärker eine Säure dissoziiert ist, desto höher sind die Konzentrationen im Zähler und desto kleiner ist die Konzentration der verbleibenden undissoziierten Säure im Nenner der Gleichung. Säuren, deren Dissoziationskonstante größer als 10–1 ist, bezeichnet man als starke Säuren. Mittelstarke Säuren besitzen

Die Aufrechterhaltung einer relativ konstanten Wasserstoffionenkonzentration im Zellinneren und im Extrazellulärraum wird durch Puffer erreicht. Darunter versteht man im einfachsten Fall Lösungen aus einer schwachen Säure und ihrer konjugierten Base. Diese zeichnen sich durch einen stabilen pH-Wert aus, der sich auch beim Zusatz erheb-

. Tabelle 1.4. Dissoziationskonstanten und pKS-Werte einiger Säuren mit biochemischer Bedeutung (bei 25° C) pKSb = – IogK

Säure/Base-Paar

Dissoziationskonstante K

Brenztraubensäure/Pyruvat

3,16 u 10–3

2,5

–3

2,9

Milchsäure/Lactat

4 u 10

Kohlensäure/HCO3–

1,32 u 10–4 a

–7

3,88

CO2/Hydrogencarbonat

4,45 u 10

Hydrogencarbonat/Carbonat

4,79 u 10–11

Dihydrogenphosphat/Hydrogenphosphat

6,34 u 10–8

7,20

Hydrogenphosphat/Phosphat

4,37 u 10–13

12,36

Acetessigsäure/Acetacetat

2,60 u 10–4

3,58

–5

6,35 10,32

β-Hydroxybuttersäure/β-Hydroxybutyrat

4,07 u 10

4,39

Ammonium/Ammoniak

4,39 u 10–10

9,21

a

b

Die Kohlensäure dissoziiert als zweiprotonige Säuren in 2 Stufen. Für die erste Stufe (Kohlensäure/Hydrogencarbonat) sind aus folgendem Grund 2 pK-Werte angegeben: in einer wässrigen Lösung von Kohlendioxid treten folgende Gleichgewichte auf: (1) CO2 + H2O H2CO3 (2) H2CO3 + H2O HCO3– + H3O+ aus (1) und (2) ergibt sich (2a) CO2 + 2H2O HCO3– + H3O+ Kohlensäure ist eine mittelstarke Säure (pK = 3,88); da jedoch aus CO2 und H2O nur sehr wenige H2CO3-Moleküle entstehen, wirkt sie als schwache Säure. Durch Zusammenfassung der Gleichgewichte (1) und (2) zu (2a) erhält man die übliche Säurekonstante (pK = 6,35), d.h. die Säurekonstante bezogen auf gelöstes CO2 (und nicht auf H2CO3!). Die hier angegebenen pKS-Werte gelten für verdünnte Lösungen. In biologischen Lösungen z.B. in Körperflüssigkeiten verändern sie sich z.T. beträchtlich. Sie werden dann als pKc oder pKSc bezeichnet.

1

16

Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

nach [H+] errechnet:

1

[AH ] ⎡⎣H + ⎤⎦ = K − ⎡⎣ A ⎤⎦ Um den pH-Wert dieses Systems auszurechnen, bildet man den negativen dekadischen Logarithmus der Gleichung und erhält: − log ⎣⎡H + ⎤⎦ = − log K − log

[AH ] ⎡⎣ A − ⎤⎦

oder, da –log K = pK (7 Kap. 1.2.5) . Abb. 1.11. Titrationskurve der Essigsäure. pH-Wert bei Titration von 10 ml 0,1 mol/l Essigsäure mit 0,1 mol/l Natronlauge. Wenn die Hälfte der Essigsäure nach Zugabe von 5ml 0,1 mol/l NaOH neutralisiert ist, ist die Konzentration von Essigsäure gleich der Konzentration von Acetat und damit pH = pK = 4,7.

licher Mengen von Säuren oder Basen, die im Stoffwechsel der Zelle entstehen, nicht wesentlich ändert. Die puffernde Wirkung schwacher Säuren ist in . Abb. 1.11 am Beispiel der Titrationskurve der Essigsäure dargestellt. Versetzt man diese schwache Säure (Dissoziationskonstante 1,7 u 10–5; pK = 4,76) mehrfach mit kleinen Mengen einer starken Base (z.B. NaOH) fängt diese bei jeder Zugabe die freien Protonen der Säure mit ihren Hydroxylionen ab. Durch den Protonenentzug wird das System Essigsäure/H+ + Acetat– aus dem Gleichgewicht gebracht. Zur Wiederherstellung des Gleichgewichtes dissoziiert die Essigsäure im verstärkten Maße und setzt dabei Protonen frei, die sich ebenfalls mit den Hydroxylionen der Natronlauge zu Wasser verbinden. Dabei werden Hydroxylionen und Essigsäure verbraucht, bis die Essigsäure vollständig in Natriumacetat umgewandelt ist. Beachtenswert an der Kurve ist, dass über einen relativ weiten Bereich NaOH der Essigsäurelösung zugesetzt werden kann, ohne dass sich der pH-Wert stark ändert. Dieser Vorgang wird auch als Pufferung bezeichnet. Die Pufferung in biologischen Flüssigkeiten (z.B. Extrazellulärraum) erfolgt nicht durch einen, sondern durch mehrere, gleichzeitig wirkende Puffer. ! Die Henderson-Hasselbalch-Gleichung verknüpft pH-Wert, pK-Wert und das Konzentrationsverhältnis von konjugierter Säure und Base miteinander.

Die Konzentration der H+-Ionen in einem Puffersystem (schwache Säure HA und konjugierte Base A–) wird durch Auflösung der auf S. 15 abgeleiteten Gleichung ⎡H + ⎤ × ⎡ A − ⎤ K= ⎣ ⎦ ⎣ ⎦ [AH ]

und –log [H+] = pH (7 Kap. 1.2.5) ⎡A − ⎤ pH = pK + log ⎣ ⎦ , [AH ] ⎡ konjugierte Base ⎤⎦ pH = pK + log ⎣ [Säure] Bei diesem Ausdruck, der die mathematische Grundlage zur Rechnung mit Puffersystemen bildet, handelt es sich um die Gleichung nach Lawrence J. Henderson und Karl Albert Hasselbalch. Aus dieser Gleichung, in der der pHund der pK-Wert sowie das Konzentrationsverhältnis von konjugierter Base zu Säure miteinander verknüpft sind, lassen sich folgende Gesetzmäßigkeiten ableiten: 4 Der pH-Wert eines Puffersystems wird von dem Konzentrationsverhältnis von konjugierter Base und Säure bestimmt 4 Bei bekanntem pK und bekanntem Konzentrationsverhältnis von konjugierter Base zur Säure kann der pHWert ausgerechnet werden 4 Bei bekanntem pH und pK kann der Quotient der Konzentration von konjugierter Base und Säure errechnet werden Setzt man in die Gleichung die pK-Werte für Brenztraubensäure bzw. Milchsäure (. Tabelle 1.4) ein, so lässt sich berechnen, ob die betreffenden Carbonsäuren vorwiegend als Säuren oder Säureanionen in der Zelle vorliegen. In der Muskelzelle mit einem pH-Wert von 7,1 beträgt das Verhältnis von Brenztraubensäure zu Pyruvat etwa 1 : 40000 und das von Milchsäure zu Lactat etwa 1 : 16000. Dies gilt für eine große Zahl von im Stoffwechsel vorkommenden Säuren, weswegen in diesem Buch generell die dissoziierten Formen von Verbindungen benutzt werden. Die Kenntnis des Quotienten [A–]/[AH]ist besonders wichtig, wenn man wissen will, wie stark eine Säure beim

17 1.2 · Wasser

pH-Wert von Körperflüssigkeiten, wie z.B. der Extrazellulärflüssigkeit (pH 7,4), dissoziiert ist. Da die Aufnahme bzw. Abgabe von Protonen mit einer Änderung des Ladungscharakters des aufnehmenden bzw. abgebenden Moleküls verbunden ist und ungeladene Stoffe Zellmembranen wegen der Unpolarität besser durchdringen können, ist der Dissoziationsgrad beispielsweise für die Resorption, Verteilung und Ausscheidung von Arzneimitteln mit Säure- oder Basencharakter oder für Stoffwechselstörungen, bei denen sich organische Säuren und Basen anhäufen, von Bedeutung. Aus der Gleichung von Henderson und Hasselbalch lässt sich Folgendes ableiten: 4 Je mehr der pK-Wert einer Säure nach unten vom pHWert der Lösung abweicht (pKpH), desto stärker steigt der Anteil der Säureform an Als Beispiele seien zwei Säuren angeführt, deren Konzentration im Blut bei Stoffwechselkrankheiten stark erhöht sein kann: die β-Hydroxybuttersäure beim Diabetes mellitus und die Ammoniumionen bei der schweren Leberinsuffizienz. Setzt man die pK-Werte der beiden Säuren (. Tabelle 1.4) in die Gleichung ein, so ergibt sich, dass in einer wässrigen Lösung mit einem pH-Wert von 7,4 das Verhältnis von β-Hydroxybuttersäure zu β-Hydroxybutyrat 1 : 1000 (pK-Wert niedriger als pH!) und das vom Ammoniumion zu Ammoniak 100 : 1 (pK höher als pH!) beträgt. Sind die Konzentrationen von konjugierter Base und Säure gleich groß, so wird – da der Logarithmus von 1 Null ist – der logarithmische Ausdruck Null und man erhält pK = pH, d.h. der pK einer schwachen Säure entspricht dem pH-Wert, bei dem Säure und konjugierte Base in gleichen Konzentrationen vorliegen oder – mit anderen Worten – bei dem die Säure zur Hälfte dissoziiert ist. Ist der pK-Wert eines Puffersystems unbekannt, so kann er bestimmt werden, indem man die Konzentration von konjugierter Base und Säure gleich groß wählt. Die Messung des resultierenden pH-Werts ergibt den pK des betreffenden Systems. Liegen konjugierte Base und Säure in gleichen Konzentrationen vor, so sind also pH- und pK-Wert gleich. Ist das Verhältnis von konjugierter Base zu Säure gleich 10 : 1 bzw.100 : 1, so beträgt der pH-Wert pK + 1 bzw. pK + 2. Trägt man in einem Koordinatensystem auf der Abszisse die pH-Werte und auf der Ordinate die entsprechenden Mengen Säure (HA) und konjugierte Base (A–) auf, so ergibt sich das in . Abb. 1.12 gezeigte Kurvenbild, aus dem für jeden bekannten pH-Wert das Konzentrationsverhältnis A– zu HA und für jedes bekannte Konzentrationsverhältnis A– zu HA der entsprechende pH-Wert abgelesen werden kann. Das Bild dieser Kurve, an deren Wendepunkt der pK liegt, sieht bei allen schwachen Säuren gleich aus. Die Kurven unterscheiden sich lediglich durch die Lage des Wende-

. Abb. 1.12. Titrationskurve einer schwachen Säure

punkts (und damit des pK-Werts), d.h. sie sind entweder nach links oder rechts verschoben. Wie aus dem Kurvenbild in . Abb. 1.12 zu ersehen ist, ändert sich in einem bestimmten Bereich (pH gleich pK ± 1) trotz einer starken Verschiebung des Molverhältnisses A– zu HA (von 1 : 10 bis 10 : 1) der pH-Wert nur wenig. In diesem – in der Abbildung rot hinterlegten – Bereich ist also die Kapazität des Puffers, Säuren oder Basen ohne starke pH-Änderung aufzunehmen, am größten. Man wird deshalb bei experimentellen Arbeiten ein Puffersystem wählen, dessen pK-Wert mit dem pH-Wert übereinstimmt, den die Lösung enthalten soll – oder zumindest einen Puffer, dessen pK-Wert nicht mehr als eine Einheit nach oben oder unten vom einzustellenden pHWert abweicht. Außerdem wird die Kapazität eines Puffersystems durch seine Gesamtkonzentration bestimmt, d.h. ein 0,5molares System puffert etwa 5 mal so viele Protonen oder Hydroxylionen wie ein 0,1-molares (7 unten). Wichtige Puffersysteme des menschlichen Organismus sind im Intra- und Extrazellulärraum (7 Kap. 28.8): 4 das Dihydrogenphosphat/Hydrogenphosphat-System (pK’ = 6,80) 4 das Kohlendioxid/Hydrogencarbonat-System (pK’ = 6,10) und 4 die Proteine sowie im Urin (7 Kap. 28.2): 4 das Dihydrogenphosphat/Hydrogenphosphat-System (pK’ = 6,80) und 4 das Ammonium/Ammoniak-System (pK’ = 9,40) ! Das Hydrogencarbonat-Puffersystem ist das wichtigste Puffersystem des Extrazellulärraums.

Der pH-Wert im Extrazellulärraum wird im Wesentlichen durch das Kohlendioxid/Hydrogencarbonat-Puffersystem konstant gehalten (Bicarbonat = Hydrogencarbonat).

1

18

1

Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

Die Plasmakonzentrationen von Hydrogencarbonat (HCO3–) und Kohlendioxid (CO2) betragen 24 mmol/l bzw. 1,2 mmol/l. Dabei steht Kohlendioxid für die Summe von CO2 und H2CO3, da bei 37 °C nur 1/400 des gesamten Kohlendioxids in hydratisierter Form als H2CO3 vorliegt. Deshalb gilt: [CO2 + H2CO3 ] ≅ [CO2 ]. Der pKS’-Wert des CO2/H2CO3-Systems im Blutplasma liegt bei 6,10. Da der Extrazellulärraum als verdünnte wässrige Lösung einer idealen Lösung nahe kommt, lässt sich die Gleichung von Henderson und Hasselbalch auf ihn anwenden und der pH-Wert des Extrazellulärraums berechnen: pH = pK ′ + log pH = 6,10 + log

[konjugierte Base] [Säure] 24 mmol / l 1, 2 mmol / l

pH = 6,10 + log 20, pH = 6,10 + 1, 30, pH = 7, 40. Durch das Kohlendioxid-/Hydrogencarbonat-System wird also ein pH-Wert von 7,40 im Extrazellulärraum eingestellt. Die Bedeutung dieses Puffersystems scheint im Widerspruch zu der Feststellung zu stehen, dass ein Puffer seine Funktion optimal im Bereich pK ± 1 erfüllt. Es ist nicht ohne weiteres verständlich, dass ein Puffersystem mit einem pK’-Wert von 6,10 für die Konstanthaltung des pH-Werts von 7,40 sorgt. Dass dieses Puffersystem trotzdem das wichtigste Puffersystem des Extrazellulärraumes ist, hat – wie Lawrence Henderson bereits 1914 betont hat – folgende Ursachen: 4 Es handelt sich um ein offenes Puffersystem, dessen Kapazität auf 2 Gleichgewichten beruht: CO2 + H2O  H2CO3  HCO3− + H + 4 CO2 ist entsprechend seinem Partialdruck von 40 mm Hg im Blutplasma physikalisch gelöst 4 Das Verhältnis von konjugierter Base (Hydrogencarbonat) zu Säure (CO2) ist sehr hoch (20 : 1), im Gegensatz zu anderen Puffern, deren Pufferfähigkeit am besten bei einem Verhältnis von 1 : 1 ist Diese Tatsachen haben wichtige Konsequenzen: 4 Fällt der pH-Wert des Bluts, weil durch Stoffwechselprozesse Protonen erzeugt werden, verlagert sich das Gleichgewicht von Hydrogencarbonat und Kohlensäure in Richtung der Kohlensäure. Diese kann zu CO2 dehydratisiert und anschließend abgeatmet werden

4 Sinkt dagegen die Protonenkonzentration ab, nimmt also der pH-Wert zu, so resultiert dies in einer gesteigerten Bildung von Hydrogencarbonat aus Kohlensäure. Diese kann durch Hydratisierung von CO2 aus der Atemluft gewonnen werden Störungen des Blutpuffersystems führen zur Azidose oder Alkalose und werden in Kapitel 29 ausführlich besprochen.

1.2.7 Die Säure-Basenkatalyse ! Nach der Lewis-Definition besitzen Säuren eine Elektronenpaarlücke und Basen ein freies Elektronenpaar.

Zum Verständnis organisch- und biologisch-chemischer Reaktionen muss die Säure-Basen-Definition von Broensted, der die Abgabe bzw. Aufnahme von Protonen zugrunde liegt, noch weiter verallgemeinert werden. Nach der von dem amerikanischen Physikochemiker Gilbert N. Lewis (1875–1946) entwickelten Definition ist 4 eine Säure ein Molekül oder Ion, das eine Elektronenpaarlücke aufweist (Lewis-Säure) 4 eine Base eine Molekül oder Ion, das ein freies Elektronenpaar besitzt (Lewis-Base) Säuren können also Elektronen aufnehmen (Elektronenakzeptoren) und werden deshalb als elektrophil bezeichnet, Basen können Elektronen abgeben (Elektronendonatoren). Sie greifen immer an besonders elektronenarmen Stellen des Reaktionspartners an, wo sie möglichst nahe an einen Atomkern (Nucleus) herankommen, und werden deshalb als nucleophil bezeichnet. (. Tabelle 1.5). Als Beispiel einer Reaktion zwischen einem elektrophilen (Lewis-Säure) und einem nucleophilen Teilchen (Lewis-Base) sei die Bildung eines Esters durch Reaktion einer Carbonsäure mit einem Alkohol angeführt. Die Carbonsäure enthält eine Carboxylgruppe, die durch die hohe Elektronegativität des Sauerstoffatoms stark polar ist. An das dadurch partiell positive (und damit elektronenarme) Kohlenstoffatom lagert sich das nucleophile Alkoholmolekül (freies Elektronenpaar!) an (. Abb. 1.13). Die gebildete Zwischenverbindung wird durch den Übergang eines Protons und die Abspaltung von Wasser stabilisiert und es entsteht ein Ester. . Tabelle 1.5. Lewis-Säuren und Lewis-Basen Lewis-Säuren Elektrophil

Lewis-Basen Nucleophil

CO2

H2O, NH3

–NH3+

–NH2

C=O Mg2+, Mn2+, Zn2+ Fe3+

–OH, –SH

19 1.2 · Wasser

. Abb. 1.13. Reaktion einer Carbonsäure mit einem Alkohol

Diese Reaktion kann auch in umgekehrter Richtung verlaufen, d.h. durch den Angriff des nucleophilen Wassermoleküls (zwei freie Elektronenpaare) auf das elektrophile Kohlenstoffatom wird der Ester gespalten. ! Säuren und Basen wirken als Katalysatoren bei biochemischen Reaktionen.

Bestimmte Verbindungen können die Einstellung des Gleichgewichts einer Reaktion beschleunigen. Sie werden als Katalysatoren bezeichnet und die durch sie ausgelöste Erhöhung der Reaktionsgeschwindigkeit als Katalyse. Entscheidend ist, dass der Katalysator unverändert aus der katalysierten Reaktion hervorgeht. Wichtige Katalysatoren organisch-chemischer Reaktionen sind Säuren oder Basen. Wird eine Reaktion durch eine Säure oder Base katalysiert, so bedeutet dies nach der Definition eines Katalysators, dass bei der Reaktion keine Säure bzw. Base verbraucht wird. Wenn also die Säure auf einen Reaktionspartner übertragen wird, so muss sie später wieder entfernt werden, und zwar durch eine Base. Säurekatalyse. Das oben angeführte Beispiel, die Veresterung einer Carbonsäure mit einem Alkohol lässt sich durch Säuren katalysieren: Dabei wird – wie . Abb. 1.14 zeigt – zunächst ein Proton an die zum elektronegativen Sauerstoffatom gezogenen Elektronen der Carbonylgruppe addiert. Das bewirkt eine Verstärkung der positiven Polarisierung des C-Atoms und erleichtert den nucleophilen Angriff

. Abb. 1.14. Durch Säure katalysierte Veresterung einer Carbonsäure mit einem Alkohol. (Oben links): Die Carbonsäure übernimmt ein Proton vom Katalysator und wird dadurch polarisiert. Das polarisierte Zwischenprodukt reagiert mit dem Alkohol (in rot), wobei nach Abgabe des Protons an den Katalysator der Ester und Wasser entstehen. Alle Reaktionen sind reversibel

des Alkoholmoleküls. Die gebildete Zwischenverbindung spaltet Wasser und das Proton wieder ab. Die katalytische Wirkung der Säure liegt darin, dass sie durch Addition des Protons die Anlagerung eines nucleophilen Alkoholmoleküls (bzw. nucleophilen Wassermoleküls bei Umkehrung der Reaktion) an das C-Atom der Carbonylgruppe der Carbonsäure (bzw. des Esters) erleichtert. Basenkatalyse. Als Beispiel einer basenkatalysierten organisch-chemischen Reaktion sei die Aldoladdition (. Abb. 1.15), eine im Stoffwechsel der Zelle häufig vorkommende Reaktion, angeführt: die Base entzieht der Methylgruppe des Aldehyds ein Proton, wodurch ein Anion entsteht. Dieses wirkt wegen seines negativ geladenen CAtoms nucleophil und addiert sich an das positiv polarisierte C-Atom der Carbonylgruppe eines anderen Aldehydmoleküls an. Das durch die Addition entstandene Anion wird durch Aufnahme eines Protons stabilisiert und die Base dadurch regeneriert. Bei beiden Reaktionen führt also der Angriff eines Protons bzw. einer Hydroxylgruppe zu einem Zwischenprodukt, in welchem es zu einer Neuverteilung der Bindungselektronen kommt, die den nucleophilen bzw. elektrophilen Angriff erleichtert. Diese beiden Beispiele zeigen das grundsätzliche Prinzip aller katalysierten Reaktionen, die zur Bildung oder Spaltung einer covalenten Bindung führen: Ziel der Katalyse ist die Neuverteilung der Bindungselektronen zur Polarisierung der Bindungen, d.h. zur Erhöhung der Elektronendichte an einem Atom und zur Erniedrigung am an-

. Abb. 1.15. Durch eine Base katalysierte Aldolreaktion. (Oben links): Der Aldehyd wird durch Abgabe eines Protons polarisiert und reagiert deshalb leichter mit einem weiteren Aldehydmolekül (in rot). Das Zwischenprodukt nimmt das Proton wieder auf und wird dadurch zum Alkohol

1

20

1

Kapitel 1 · Grundlagen der Lebensvorgänge

deren Atom. Das wird dadurch erreicht, dass entweder nucleophile (Basekatalyse) oder elektrophile Verbindungen (Säurekatalyse) oder beide Arten gleichzeitig als SäureBasen-Katalyse die Atome der zu polarisierenden Bindung angreifen. Die Polarisierung versetzt das Molekül in einen thermodynamisch instabilen Zustand oder macht es reaktionsfähig(er), was sich in einer Erniedrigung der Aktivierungs-

energie der Reaktion niederschlägt. Gerade diese Erniedrigung der Aktivierungsenergie der Reaktion ist vom energetischen Standpunkt ein wesentliches Merkmal der Katalyse. Das gilt ebenso für die – in Kapitel 4 (7 Kap. 4.2) besprochenen – Enzyme, die als Biokatalysatoren die Reaktionen im Stoffwechselgeschehen der Zelle beschleunigen und deren Wirkung sehr häufig auf einer Säure-Basenkatalyse beruht.

In Kürze Ohne Wasser sind Organismen nicht lebensfähig. Wasser bestimmt praktisch alle biochemischen Prozesse. Durch seine Polarität ermöglicht es die Ausbildung von Wasserstoffbrückenbindungen, die für die Strukturbildung biologischer Makromoleküle wie Proteine oder Nucleinsäuren von größter Bedeutung sind. Andere Strukturen werden durch wasserabhängige hydrophobe Wechselwirkungen

Literatur Adam G, Läuger P, Stark, G (2003) Physikalische Chemie und Biophysik. 3. Vollst. überarb. u. erw. Aufl. 2003. Springer Heidelberg Cody GD, Boctor NZ, Filley TR, Hazen RM, Scott JH, Sharma A, Yoder HS Jr. (2000) Primordial carbonylated iron-sulfur compounds and the synthesis of pyruvate. Science 289:1337–1340 Frieden E (1972) The chemical elements of life. Sci Amer 226:52 Funck T (1970) Physikalische Chemie des Wassers. In: Schröder B (Hrsg) Wasser Suhrkamp, Frankfurt, S. 1ff

stabilisiert. Viele Reaktionen finden unter Beteiligung von Wasser statt. Durch Wasserbewegung zwischen Intra- und Extrazellulärraum entstehen osmotische Kräfte, die für den Wasserhaushalt von großer Bedeutung sind. Vom Wasser hängt der pH-Wert des Intra- und Extrazellulärraums ab, darüber hinaus ist Wasser an den unterschiedlichen Puffersystemen des Intra- und Extrazellulärraums beteiligt.

Miller SJ, Orgel LE (1974) The origins of life on earth. Prentice – Hall Wächtershäuser G (1997) The origin of life and its methodological challenge. J theor Biol 187:483–494 Woese CR (2002) On the evolution of cells. Proc Natl Acad Sci USA 99:8742–8747 Links im Netz 7 www.lehrbuch-medizin.de/biochemie

2 2 Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren Georg Löffler

2.1

Kohlenhydrate

2.1.1 2.1.2 2.1.3 2.1.4

Klassifizierung und Funktionen – 22 Monosaccharide – 22 Disaccharide – 25 Oligosaccharide und Polysaccharide – 26

– 22

2.2

Lipide

2.2.1 2.2.2 2.2.3 2.2.4 2.2.5 2.2.6

Klassifizierung und Funktionen – 32 Fettsäuren – 33 Glycerolipide – 35 Sphingolipide – 37 Isoprenlipide – 38 Lipide in wässrigen Lösungen – 39

2.3

Aminosäuren – 45

2.3.1 2.3.2 2.3.3 2.3.4

Klassifizierung und Funktionen – 45 Proteinogene Aminosäuren – 45 Nichtproteinogene Aminosäuren – 48 Säure-Baseneigenschaften von Aminosäuren – 48

– 32

Literatur – 53

22

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

> > Einleitung

2

Lebende Organismen synthetisieren und verwerten Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren. Die Funktionen dieser Verbindungen sind vielfältig. Kohlenhydrate kommen als rasch metabolisierbare Substrate oder Speicherstoffe hoher Energiedichte vor. Sie sind Gerüstsubstanzen, bilden wichtige Komponenten der extrazellulären Matrix und sind Bestandteil vieler Proteine. Triacylglycerin sind die energiedichtesten Speicherverbindungen. Die amphiphilen Phospholipide und Sphingolipide bilden Membranstrukturen von Zellen. Wegen ihrer Fähigkeit zur Polymerisation sind Isoprene zur Bildung der besonders umfangreichen Gruppe der Isoprenlipide imstande. Zu diesen gehören u.a. fettlösliche Vitamine, Cholesterin, die von Cholesterin abgeleiteten Steroidhormone sowie die für die Fettverdauung wichtigen Gallensäuren. Als D-Aminocarbonsäuren sind Aminosäuren formal Derivate von Fettsäuren. Von den etwa einhundert bekannten Aminosäuren kommen lediglich 20, die sog. proteinogenen Aminosäuren, in Proteinen vor. Außer dieser wichtigen Funktion dienen Aminosäuren als Stickstofflieferanten bei Biosynthesen, liefern das Substrat für die Gluconeogenese, und bilden als sog. biogene Amine wichtige Signalstoffe.

2.1

Kohlenhydrate

2.1.1 Klassifizierung und Funktionen Kohlenhydrate oder Saccharide sind mengenmäßig die häufigsten von Lebewesen synthetisierten Verbindungen unseres Planeten. Im Vergleich zu Lipiden und Aminosäuren ist das Prinzip ihrer Struktur vergleichsweise einfach, da sie alle Abkömmlinge von Verbindungen der Grundstruktur

ranten dienen. Daneben werden Polysaccharide in tierischen und pflanzlichen Zellen als Energiespeicher verwendet. Polysaccharide sind in der extrazellulären Matrix der Gewebe aller höheren Lebewesen der entscheidende Bestandteil und unter anderem für deren Differenzierung zuständig. Außerdem ist eine große Zahl von Proteinen mit spezifischen Oligosaccharid-Strukturen ausgestattet, die Bedeutung für die Proteinfunktion haben. Im Wesentlichen handelt es sich hierbei um Membranproteine sowie sezernierte Proteine.

(HCOH)n sind, wobei n t 3 sein muss. ! Je nach ihrer Zusammensetzung werden Kohlenhydrate in Monosaccharide sowie Di-, Oligo- und Polysaccharide eingeteilt.

Monosaccharide. Monosaccharide sind durch Hydrolyse

nicht mehr weiter zerlegbare Kohlenhydrate. Formal handelt es sich um Aldehyde bzw. Ketone mehrwertiger Alkohole, also um Aldosen bzw. Ketosen. Wegen des gehäuften Vorkommens asymmetrischer C-Atome gibt es eine große Zahl von stereoisomeren Formen von Monosacchariden (Einzelheiten 7 Lehrbücher der organischen Chemie). Di-, Oligo- und Polysaccharide. Dank der besonders reaktionsfähigen Aldehyd- bzw. Ketogruppen von Monosacchariden haben diese die Fähigkeit, weitere Monosaccharide mit Hilfe glycosidischer Bindungen (7 Kap. 2.1.2) anzulagern und auf diese Weise eine Vielzahl der verschiedensten Verbindungen zu bilden. So entstehen u.a. Di- bzw. Oligosaccharide bzw. als Makromoleküle die Polysaccharide. ! Kohlenhydrate sind Energielieferanten, Energiespeicher und Strukturbestandteile.

Die Funktionen von Kohlenhydraten sind außerordentlich vielfältig. Schon lange ist bekannt, dass sie nahezu allen Organismen als rasch zur Verfügung stehende Energieliefe-

2.1.2 Monosaccharide Bezüglich ihrer Umsatzraten und ihrer quantitativen Bedeutung spielen die Hexosen und Pentosen im Stoffwechsel die größte Rolle. Außerdem kommen in geringem Umfang als Zwischenprodukte des Hexosemonophosphatweges der Glucose (7 Kap. 11.1.2) der aus der 4-C-Atomen bestehende Zucker Erythrose sowie der aus 7-C-Atomen bestehende Zucker Seduheptolose, jeweils in Form von Phosphorsäureestern, vor (7 Abb. 11.9 in Kap. 11.1.2). ! Hexosen sind wichtige Bestandteile von Nahrungskohlenhydraten.

Die für den tierischen Stoffwechsel wichtigsten Hexosen sind in . Tabelle 2.1 und . Abbildung 2.1 zusammengestellt. Unter ihnen kommt der Glucose die größte Bedeutung zu (7 Kap. 11; 7 Kap. 17): 4 Fast alle mit der Nahrung aufgenommenen Kohlenhydrate müssen in Glucose umgewandelt werden, bevor sie unter Energiegewinn abgebaut werden können 4 Alle im Organismus vorkommenden Monosaccharide können aus Glucose synthetisiert werden 4 Das Kohlenstoffskelett der Glucose kann als Ausgangsmaterial für die Synthese der nichtessentiellen Aminosäuren (7 Kap. 13.4.2) sowie der Lipide (7 Kap. 12) verwendet werden.

23 2.1 · Kohlenhydrate

. Tabelle 2.1. Biochemisch wichtige Hexosen (Auswahl) Name

Vorkommen und biologische Bedeutung

D-Glucose

Fruchtsäfte; Bestandteil von Stärke, Glycogen, Saccharose, Lactose. Wichtigstes vom Organismus verwertetes Monosaccharid; Blutzucker

D-Galactose

Bestandteil der Lactose. Wird vom Organismus in Sphingolipide und Glycoproteine eingebaut. Abbau nur nach Umwandlung in Glucose möglich

D-Mannose

Bestandteil von tierischen und pflanzlichen Glycoproteinen. Dient zur Adressierung lysosomaler Proteine. Abbau erst nach Umwandlung in Glucose

D-Fructose

Fruchtsäfte; Bestandteil der Saccharose; Biosynthese aus Glucose in verschiedenen Geweben; Abbau erst nach Umwandlung in Glucose, in der Leber jedoch direkter Abbau möglich

! Pentosen sind Bestandteile von Nucleotiden und Nucleinsäuren. . Tabelle 2.2 fasst die häufigsten vorkommenden Monosaccharide mit 5-C-Atomen zusammen. Pentosen werden nicht in größeren Mengen mit der Nahrung aufgenommen, sondern im Verlauf des Glucosestoffwechsels intrazellulär synthetisiert und dann als wichtige Bestandteile von Nucleotiden und Nucleinsäuren verwendet (7 Kap. 19.1). ! Die OH-Gruppen von Monosacchariden werden in vielfältiger Weise modifiziert.

Alle Hexosen und Pentosen können vielfältig modifiziert werden, wie es in . Abbildung 2.2 am Beispiel der Glucose dargestellt ist: 4 Hydroxylgruppen von Monosacchariden können verestert werden (7 Lehrbücher der organischen Chemie). Von biochemischem Interesse sind die Phosphorsäureester, da intrazellulär hauptsächlich phosphorylierte Monosaccharide umgesetzt werden (7 Kap. 11.1.1) 4 Durch Oxidation der endständigen –CH2-OH-Gruppe von Monosacchariden entstehen Uronsäuren, die u.a. Bestandteile wichtiger Polysaccharide sind (7 Kap. 2.1.4). An Glucuronsäure werden ausscheidungspflichtige körpereigene sowie auch körperfremde Substanzen gekoppelt . Tabelle 2.2. Biochemisch wichtige Pentosen (Auswahl) Name

Vorkommen und biologische Bedeutung

D-Ribose

Vorkommen in Nucleinsäuren; Biosynthese aus Glucose; Strukturelement von Coenzymen und RNA

D-Desoxyribose

Vorkommen in Nucleinsäuren; Biosynthese aus Glucose; Strukturelement der DNA

D-Ribulose

Stoffwechselzwischenprodukt im Glucoseabbau über Pentosephosphatweg

D-Arabinose, D-Xylose

Vorkommen in Proteoglycanen

. Abb. 2.1. Häufige Monosaccharide. Die in Form ihrer E-Anomeren dargestellten Monosaccharide werden nicht nur zur Energiegewinnung abgebaut, sondern auch zum Aufbau von Oligo- und Polysacchariden verwendet

4 Die durch den Ringschluss gebildete halbacetalische Hydroxylgruppe am C-Atom 1 von Monosacchariden ist besonders reaktionsfähig und geht die glycosidische Bindung ein 4 Durch Reduktion am C-Atom 1 entstehen aus Monosacchariden die entsprechenden mehrwertigen Alkohole (aus Glucose Sorbitol, aus Mannose Mannitol usw.) 4 Durch Oxidation am C-Atom 1 wird die glycosidische Hydroxylgruppe zum Lacton dehydriert, das durch Wasseranlagerung in die entsprechende Carbonsäure übergeht. Diese wird i. Allg. durch die Endung -on gekennzeichnet (aus Glucose entsteht Gluconsäure)

2

24

2

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

. Abb. 2.2. Die wichtigsten Derivate der αD-Glucose. a Durch Mutarotation entsteht E-DGlucose. b Durch Reduktion am C-Atom 1 entsteht Sorbitol. c Durch Oxidation am C-Atom 6 entsteht Glucuronsäure (Glucuronat). d Durch Veresterung der OH-Gruppe am C-Atom 6 mit Phosphorsäure entsteht Glucose-6-phosphat. e Ersatz der Hydroxylgruppe am C-Atom 2 durch eine Aminogruppe führt zum Glucosamin. f Glucosamin kann an der Aminogruppe acetyliert werden, sodass N-Acetylglucosamin entsteht. g Durch Oxidation am C-Atom 1 entsteht Gluconolacton, welches hydrolytisch zu Gluconat gespalten werden kann

4 Aminozucker entstehen durch den Ersatz einer Hydroxylgruppe durch eine Aminogruppe. Bei den physiologischerweise vorkommenden Aminozuckern Glucosamin, Galactosamin und Mannosamin ist die Aminogruppe mit dem C-Atom 2 des Monosaccharids verbunden. Häufig ist die NH2-Gruppe acetyliert. Die Aminozucker und ihre N-acetylierten Derivate kommen in verschiedenen Glycoproteinen, als Bestandteile der Proteoglykane, in bakteriellen Zellwänden sowie im Chitin vor ! Die halbacetalische Hydroxylgruppe am C-Atom 1 von Monosacchariden ist besonders reaktionsfähig.

Analog der Bildung eines Vollacetals kann die halbacetalische Hydroxylgruppe am C-Atom 1 von Monosacchariden mit OH- bzw. NH2-Gruppen unterschiedlichster Verbindungen unter Wasserabspaltung reagieren, wobei Glycoside gebildet werden: 4 Stammt die OH-Gruppe von einem weiteren Monosaccharid, so entstehen Di- oder Polysaccharide

4 Handelt es sich dagegen um Nichtkohlenhydrate, so entstehen Substanzen, die als O- bzw. N-Glycoside bezeichnet werden 4 Die Verbindung wird nach dem die glycosidische Bindung eingehenden Zucker benannt (Glucosid, Galactosid usw.), der Nichtkohlenhydratanteil der entstehenden Verbindung wird auch als Aglycon bezeichnet Der D- und E-Anomerie bei den Monosacchariden entspricht die α- und β-Isomerie bei den Glycosiden. Allerdings ist hier nicht mehr das Phänomen der Mutarotation (7 Lehrbücher der organischen Chemie) möglich, da die Hydroxylgruppe am C-Atom 1 durch den angelagerten Rest verschlossen ist (. Abb. 2.3). ! Glycosidische Bindungen kommen häufig in Verbindungen mit besonderen biologischen Funktionen vor.

Viele der im Tier- und Pflanzenreich vorkommenden Ound N-Glycoside gehören zu den biologisch wirksamsten

25 2.1 · Kohlenhydrate

. Abb. 2.3. Entstehung von α-Methylglucosid und β-Methylglucosid. D- und E-Glucose stehen durch Mutarotation miteinander im Gleichgewicht. Durch Umsetzung mit Methanol entsteht unter den entsprechenden Bedingungen D- bzw. E-Methyl-Glucosid, die allerdings nicht mehr ineinander überführt werden können

. Abb. 2.5. Struktur des Streptomycins. Das aus Streptomyces gewonnene Antibiotikum besteht aus den beiden Zuckern N-MethylL-Glucosamin und Streptose. Diese ist mit dem modifizierten Inositol Streptidin verknüpft. Die glycosidischen Bindungen sind rot hervorgehoben

Aglycon ist ein Stickstoff-haltiges Inositol, als Zucker finden sich die verzweigte Streptose und das N-MethylL-Glucosamin

2.1.3 Disaccharide ! Disaccharide entstehen durch Knüpfung einer glycosidischen Bindung zwischen zwei Monosacchariden. . Abb. 2.4. Struktur des Herzglycosids Strophantin g (Ouabain). Die pharmakologisch wirksame Komponente ist das Pflanzensteroid Digitoxigenin. Mit einer glycosidischen Bindung ist dieses an das Monosaccharid L-Rhamnose geknüpft

Disaccharide entstehen dadurch, dass eine glycosidische Bindung zwischen der besonders reaktionsfähigen glycosidischen Hydroxylgruppe am C-Atom 1 eines Monosaccharids mit einer Hydroxylgruppe eines weiteren Monosaccharidmoleküls geknüpft wird.

Substanzen und werden infolgedessen zum Teil als Pharmaka verwendet (7 Lehrbücher der Pharmakologie): 4 Zu den N-Glycosiden gehören vor allem die Nucleotide und Polynucleotide, die als Coenzyme bzw. informationstragende Makromoleküle wichtige Funktionen haben (7 Kap. 5.1.1) 4 Herzwirksame Glycoside sind von großer Bedeutung für die Therapie der Herzinsuffizienz. . Abbildung 2.4 zeigt die Struktur von Strophantin g (Ouabain). Das Aglycon ist das Pflanzensterol Digitoxigenin, dessen Seitenkette als 5-gliedriges ungesättigtes Lacton vorliegt. Digitoxin geht eine glycosidische Bindung mit dem Zucker L-Rhamnose ein 4 Streptomycin ist ein aus verschiedenen StreptomycesArten gewonnenes Antibiotikum (. Abb. 2.5). Sein

Disaccharide vom Maltosetyp. Disacchariden vom Malto-

setyp liegt die Struktur der Maltose zugrunde (. Abb. 2.6). Die Bindung ist hier zwischen dem glycosidischen C-Atom 1 eines Zuckermoleküls und der Hydroxylgruppe des CAtoms 4 des zweiten Glucosemoleküls geknüpft. Dementsprechend ist Maltose ein D-Glucosyl-(1o4)-glucosid und enthält eine α-1,4-glycosidische Bindung. Das Molekül enthält noch eine glycosidische Hydroxylgruppe. Es zeigt deswegen die Fähigkeit zur Mutarotation und kann weitere glycosidische Bindungen eingehen. Ein anderes, ernährungsphysiologisch wichtiges Disaccharid dieses Typs ist die Lactose (E-Galactosyl(1o4)-glucosid). Lactose ist das wichtigste Kohlenhydrat der Milch (menschliche Muttermilch: 5–7 g Lactose/ 100 ml).

2

26

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

! Polysaccharide setzen sich aus einer großen Zahl glycosidisch verknüpfter Monosaccharide zusammen.

Polysaccharide sind Verbindungen, die sich aus einer großen Zahl von Monosacchariden zusammensetzen, wobei das schon bei den Disacchariden verwendete Bauprinzip der Verknüpfung über glycosidische Verbindungen beibehalten wird. Man unterscheidet zwischen 4 Homoglycanen, die nur ein Monosaccharid als Baustein enthalten und 4 Heteroglycanen, in denen eine Reihe unterschiedlicher Monosaccharide zum Aufbau verwendet werden

2

! Stärke, Glycogen, Cellulose und Dextran sind ausschließlich aus Glucose aufgebaute Homoglycane.

Stärke. Stärke ist das wichtigste pflanzliche Homoglycan.

. Abb. 2.6. Struktur wichtiger Disaccharide

Disaccharide vom Trehalosetyp. Trehalose ist ein in Pilzen und Hefen vorkommendes Disaccharid. Bei ihr sind die glycosidischen Hydroxylgruppen am C-Atom 1 zweier Glucosereste miteinander verknüpft. Aus diesem Grund sind die Gruppeneigenschaften von Monosacchariden, die auf der besonderen Reaktionsfreudigkeit der glycosidischen Hydroxylgruppe beruhen, verschwunden (Mutarotation, reduzierende Eigenschaften, Fähigkeit zur glycosidischen Bildung). Das für die menschliche Ernährung wichtigste Disaccharid aus dieser Gruppe ist die Saccharose (sucrose) (. Abb. 2.6). Saccharose ist D-Glucosyl-(1o2)-E-fructosid.

2.1.4 Oligosaccharide und Polysaccharide ! Oligosaccharide sind Verbindungen, die 3 bis maximal 20 glycosidisch verknüpfte Monosaccharide enthalten.

Freie Oligosaccharide kommen im Pflanzenreich vor; im Tierreich trifft man sie nur in geringen Konzentrationen an. Eine Ausnahme machen die vier bis sechs Monosaccharide enthaltenden Oligosaccharide der Milch, welche die charakteristischen Strukturen des Kohlenhydratanteils der Blutgruppenglycoproteine enthalten und in geringen Mengen auch im Urin ausgeschieden werden. In gebundener Form haben Oligosaccharide dagegen als Bestandteile der Glycoproteine (7 u.) und der Ganglioside eine weite Verbreitung. Sie werden bei den Heteroglycanen besprochen (7 u.).

Sie wird in Form von Stärkekörnern in vielen Pflanzen abgelagert und enthält zwei Bestandteile, die Amylose (20– 30%) und das Amylopectin (70–80%): 4 Amylose ist ein aus mehreren tausend Glucoseresten bestehendes Kettenmolekül (. Abb. 2.7a). Die Glucosereste sind wie bei der Maltose durch D (1o4)-glycosidische Bindungen verknüpft. Dadurch ergibt sich eine schraubenförmige Windung des Amylosemoleküls mit ca. 6 Glucoseeinheiten pro Schraubengang 4 Amylopectin besteht ebenfalls aus D- (1o4)-glycosidisch verknüpften Glucoseresten. Es enthält jedoch zusätzlich Verzweigungsstellen über die Hydroxylgruppe am C-Atom 6 (D(1o6)-glycosidische Bindung); . Abb. 2.7c). Da sich die Seitenketten ihrerseits wieder verästeln können, bilden sich stark verzweigte Riesenmoleküle. Im Amylopectin kommt es im Mittel bei jedem 25. Glucoserest zu einer Verzweigung. Die molekulare Masse des Amylopectins ist mit etwa 106 Da sehr hoch Glycogen. Glycogen ist das tierische Reservekohlenhydrat.

In seiner Struktur entspricht es weitgehend dem Amylopectin, allerdings ist es mit einer Verzweigung pro 6– 10 Glucoseresten noch stärker verzweigt (. Abb. 2.7b,c). Die Molekülmasse des Glycogens kann zwischen 1u106 und 20u106 Da schwanken. In besonders hoher Konzentration kommt Glycogen in der Leber (maximal 10 g/100 g Frischgewicht) und im Muskel (ca. 1 g/100 g Frischgewicht) vor. Über den Stoffwechsel des Glycogens orientiert 7 Kap. 11.2. Cellulose. Cellulose ist die auf der Erde am weitesten verbreitete organische Substanz. Sie besteht aus Glucosemolekülen, die E-1,4-glycosidisch miteinander verknüpft sind. Infolge der E-glycosidischen Bindungen liegt das Molekül als fadenförmiges Kettenmolekül vor, das lange Fasern ausbildet, die durch Wasserstoffbrückenbindungen verknüpft sind. Cellulose ist die wichtigste pflanzliche Stützsubstanz.

27 2.1 · Kohlenhydrate

Dextrane. Dextrane sind aus Glucose bestehende Ho-

moglycane, die vor allem in Bakterienmembranen vorkommen. Die Glucosereste sind 1,6-glycosidisch verbunden. Verzweigungsstellen kommen in 1,2-, 1,3- oder 1,4-glycosidischen Bindungen vor. Dextrane werden vor allem als Molekularsieb bei der Dextrangel-Chromatographie (7 Kap. 3.2.1) verwendet. Außerdem dient Dextran als Blutplasmaersatz bei starken Blutverlusten. ! Heteroglycane sind Oligo- bzw. Polysaccharide aus mehreren unterschiedlichen Monosaccharid-Bausteinen.

Heteroglycane enthalten neben verschiedenen einfachen Monosacchariden auch von diesen abgeleitete Verbindungen wie Aminozucker und Uronsäuren. Gelegentlich handelt es sich um verzweigte Moleküle. Fast ausnahmslos treten Heteroglycane in covalenter Verknüpfung, meist mit Proteinen, aber auch mit Lipiden auf. Heteroglycane werden eingeteilt in 4 Glycoproteine 4 Proteoglycane 4 Peptidoglycane 4 Glycolipide . Tabelle 2.3 fasst wichtige Eigenschaften von Heteroglyca-

nen zusammen. ! Glycoproteine sind überwiegend Export- und Membranproteine.

. Abb. 2.7. Aufbau von Stärke und Glycogen. a Amylose, b Glycogen c Ausschnitt eines Amylopectin- bzw. Glycogenmoleküls mit einer Verzweigungsstelle

Glycoproteine sind Proteine, an die über glycosidische Bindungen Oligosaccharide aus 2 bis maximal 20 verschiedenen Monosacchariden geknüpft sind. Glycoproteine sind sehr weit verbreitet. Als Regel gilt, dass alle Exportproteine sowie Membranproteine Glycoproteine sind oder wenigstens während ihrer Biosynthese die Stufe von Glycoproteinen durchlaufen haben. Von der großen Zahl der aus dem menschlichen Plasma isolierten Plasmaproteine tragen nur Albumin und Transthyretin (Präalbumin) keine Zuckerreste. Bezogen auf die Masse kann der Kohlenhydratanteil der Glycoproteine weniger als 5% (Immunglobulin G) bis zu 85% bei Blutgruppensubstanzen variieren. Die biologische Aktivität von Glycoproteinen wird vor allem durch das zugrunde liegende Protein bestimmt. Beispiele sind 4 Strukturproteine (z.B. Kollagen) 4 Enzyme (z.B. Ribonuclease, Amylase, Acetylcholinesterase, Glucocerebrosidase) 4 Transportproteine (z.B. Caeruloplasmin, Transferrin) 4 Peptidhormone (z.B. Luteinisierungshormon, Follikelstimulierendes Hormon) 4 Immunglobuline 4 Fibrinogen 4 Blutgruppenantigene

2

28

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

. Tabelle 2.3. Einteilung der Heteroglycane

2

Bezeichnung

Kohlenhydrat

Nichtkohlenhydrat

Funktion

Glycoproteine

Oligosaccharide aus 2–20 verschiedenen Monosacchariden

Verschiedenste Proteine

Vielseitig, vom Protein abhängig

Proteoglycane

Glycosaminoglycane mit sich wiederholenden Disacchariden; Molekülmasse 2 u 103 bis 3 u 106 Da

Einfach aufgebaute Proteinskelette (core protein)

Bildung der extrazellulären Matrix

Peptidoglycane

Disaccharid aus N-Acetylglucosamin und N-Acetylmuraminsäure

Peptide aus 4–5 Aminosäuren

Bildung der bakteriellen Zellwand

Glycolipide

Oligosaccharide

Ceramid, Diacylglycerin Polyprenole

Bauteile zellulärer Membranen, Zwischenprodukt bei der Glycoproteinbiosynthese

! Die Heteroglycanketten sind in N- bzw. O-glycosidischer Bindung an die jeweiligen Proteine geknüpft.

In den Glycoproteinen eukaryoter Zellen kommen als Monosaccharidbausteine vor: 4 Glucose 4 Galactose 4 Mannose 4 N-Acetylglucosamin 4 N-Acetylgalactosamin 4 L-Fucose 4 Neuraminsäure Die covalente Verknüpfung zwischen Kohlenhydratanteil und Peptidkette erfolgt dabei: 4 in N-glycosidischer Bindung über Asparaginylseitenketten (. Abb. 2.8a) 4 in O-glycosidischer Bindung über Hydroxylgruppen der Threonyl- oder häufiger Serylseitenketten (. Abb. 2.8b) sowie 4 im Kollagen über Hydroxylysin . Abbildung 2.9 stellt einige typische Strukturmerkmale der

N- bzw. O-glycosidisch gebundenen Oligosaccharide von Glycoproteinen dar:

4 Der innerste Zucker der O-glycosidisch an Seryl- oder Threonylreste gebundenen Oligosaccharide ist meist ein N-Acetyl-Galactosamin, an welches weitere Saccharidreste geknüpft sind 4 Der innerste Zucker der N-glycosidisch an Asparaginylreste gebundenen Oligosaccharide ist ein N-AcetylGlucosamin. Auf dieses folgt ein weiteres N-AcetylGlucosamin. Danach verzweigt sich je nach Typ des Oligosaccharids die Zuckerkette, die Mannose-, Galactose, N-Acetyl-Glucosamin-, Neuraminsäure - bzw. Fucosereste enthält Über Biosynthese und Funktion von Glycoproteinen 7 Kapitel 17.3. ! Glycosaminoglycane sind lange, unverzweigte Heteroglycanketten aus repetitiven Disaccharideinheiten.

Im Gegensatz zu den meist verzweigten OligosaccharidKetten der Glycoproteine bestehen Glycosaminoglycane aus langen, unverzweigten Heteroglycanketten, die aus sich wiederholenden identischen Disaccharideinheiten zusammengesetzt sind (. Tabelle 2.4, . Abb. 2.10). Diese Disaccharide bestehen immer 4 aus einem Hexosamin bzw. dessen N-acetyliertem Derivat sowie 4 aus einer Uronsäure, meist Glucuronsäure Zusätzliche Sulfatgruppen sind über Esterbindungen mit verschiedenen Hydroxylgruppen der Monosaccharide verknüpft. Eine ältere, heute weniger gebräuchliche Bezeichnung für Glycosaminoglycane ist Mucopolysaccharide. Keratansulfat enthält statt einer Uronsäure Galactose ! Mit Ausnahme der Hyaluronsäure sind alle Glycosaminoglycane an spezifische Proteine gebunden.

. Abb. 2.8. In Glycoproteinen vorkommende Verknüpfungen mit der Oligosaccharidkette. a N-glycosidische Bindung zwischen dem Asparaginylrest der Peptidkette und einem N-Acetylglucosamin. b O-glycosidische Bindung zwischen einem Serylrest der Peptidkette und N-Acetylgalactosamin

Mit Ausnahme der Hyaluronsäure sind die Heteroglycanketten der Glycosaminoglycane an sog. core-Proteine gebunden, und werden deswegen als Proteoglycane bezeichnet. Die Verknüpfung der repetitiven Disaccharideinheiten an die zugehörigen Peptidketten erfolgt O-glycosidisch über ein Serin und beginnt mit der Zuckersequenz: Xylose-

29 2.1 · Kohlenhydrate

. Abb. 2.9a–d. Strukturen typischer O- bzw. N-glycosidisch verknüpfter Oligosaccharide von Glycoproteinen. a Struktur aus dem Sialoglycoprotein der Erythrozytenmembran des Menschen. Eine gleichartige Struktur kommt auch im Kininogen vor. b Struktur einer im Mucin vorkommenden Oligosaccharidkette. c high-mannose-type-Oligosaccharid aus Eialbumin. d Komlexe Oligosaccharidkette, die in vielen Glycoproteinen nachweisbar ist. Nana = N-Acetyl-Neuraminsäure. Die Ziffern geben die Lokalisation und Richtung der glycosidischen Bindungen an

Galactose-Galactose-Glucuronat, an die sich die Disaccharidkette anschließt. Die wichtigsten in Proteoglycanen nachweisbaren Glycosaminoglycane sind: Chondroitinsulfate. Chondroitinsulfate erreichen Moleku-

larmassen zwischen 20 und 50 kDa. Sie kommen unter anderem in großen Mengen im Knorpel vor, wo sie bis zu 40% des Trockengewichtes ausmachen. Dermatansulfat. Dermatansulfat unterscheidet sich von den Chondroitinsulfaten dadurch, das 10–20% der Glucu-

ronsäure durch L-Iduronsäure ersetzt ist. Dermatansulfate finden sich in großen Mengen in der Haut, im Bindegewebe und in den Herzklappen. Keratansulfat. Keratansulfat ist ein Glycosaminoglycan, bei dem anstelle der Uronsäuren Galactosylreste vorkommen. Heparin und Heparansulfat. Wichtige Glycosaminoglycane sind schließlich Heparansulfat und Heparin, bei denen im Gegensatz zu den anderen Glycosaminoglycanen Disaccharide auch durch D-glycosidische Bindungen verknüpft sind. Ihre Molekularmasse beträgt etwa 5–30 kDa. Heparin

. Tabelle 2.4. Disaccharide der Glycosaminoglycane Molekülmasse (Da)

Hexosen

Stellung des Sulfats

Bindung

Vorkommen

Hyaluronsäurea

1–3 u 106

N-Acetylglucosamin, Glucuronsäure

–

β(1 o 4) β(1 o 3)

Synovialflüssigkeit, Glaskörper, Nabelschnur

Chondroitin-4-Sulfat (Chondroitinsulfat A)

2–5 u 104

N-Acetylgalactosamin, Glucuronsäure

4

β(1 o 4) β(1 o 3)

Knorpel, Aorta

Chondroitin-6-Sulfat (Chondroitinsulfat C)

2–5 u 104

N-Acetylgalactosamin, Glucuronsäure

6

β(1 o 4) β(1 o 3)

Herzklappen

Dermatansulfat (Chondroitinsulfat B)

2–5 u 104

N-Acetylgalactosamin, Iduronsäure oder Glucuronsäure

4

β(1 o 4) α(1 o 3)b β(1 o 3)

Haut, Blutgefäße, Herzklappen

Heparin

0,5–3 u 104

Glucosamin, Glucuronsäure oder Iduronsäure

3, 6, N

α(1 o 4) β(1 o 4) α(1 o 4)b

Lunge, Mastzellen

Heparansulfat (Heparitinsulfat)

2–10 u 103

Glucosamin oder N-Acetylglucosamin, Glucuronsäure oder Iduronsäure

N 3,6

α(1 o 4) β(1 o 4) α(1 o 4)b

Blutgefäße, Zelloberfläche

Keratansulfat

5–20 u 103

N-Acetylglucosamin, Galactose

6 6

β(1 o 3) β(1 o 4)

Cornea, Nucleus pulposus, Knorpel

a b

2

Eine Bindung von Hyaluronsäure an Protein ist nicht nachgewiesen. Diese glycosidische Bindung der L-Iduronsäure entspricht sterisch der β-glycosidischen Bindung der D-Glucuronsäure, wird jedoch wegen der L-Konfiguration der Iduronsäure als α-glycosidisch bezeichnet.

2

30

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

kein als Skelett dienendes Protein enthält und deswegen nicht zu den Proteoglycanen gezählt wird. ! Proteoglykane sind wichtige Bestandteile der extrazellulären Matrix.

2

Proteoglycane kommen ausschließlich in der extrazellulären Matrix vor und ihre Variabilität ist für deren funktionelle Vielfalt verantwortlich (7 Kap. 24.1). Sie haben die Fähigkeit zu assoziieren und geordnete Strukturen auszubilden (7 Kap. 24.4). Dabei spielen sowohl die Glycosaminoglycan-Ketten als auch die core-Proteine eine wichtige Rolle: 4 Entscheidende Eigenschaften aller Proteoglycane werden durch die strukturellen Besonderheiten der Glycosaminoglycane geprägt. Infolge der Häufungen von negativen Ladungen wirken sie als Polyanionen. Sie tragen deswegen wesentlich zu den Ladungsverhältnissen an Zelloberflächen bei und sind imstande, die unterschiedlichsten Moleküle reversibel zu binden. Neben Wasser gehören hierzu u.a. Kationen (Ca2+, Mg2+), Peptidhormone (7 Kap. 26.1, 26.2, 27.7) oder Cytokine (z.B. transforming growth factor β (TGFE), 7 Kap. 25.7.2) 4 Inzwischen sind auch die den verschiedenen Proteoglycanen zugrunde liegenden core-Proteine näher charakterisiert worden. Sie bilden eine umfangreiche Genfamilie aus mehr als 100 Mitgliedern. Sie erlauben die Einteilung von Proteoglycanen in verschiedenen Gruppen, die wichtige Funktionen im Rahmen von Wachstums- und Differenzierungsvorgängen wahrnehmen (7 Kap. 24.4) Störungen in der normalen Verteilung der Synthese sowie des Abbaus von Proteoglycanen führen zu schweren Abnormitäten. ! Peptidoglycane sind Bestandteile der Zellwand von Bakterien. . Abb. 2.10. Struktur der wichtigsten Glycosaminoglycane. Um eine bessere Übersicht über die räumliche Struktur zu ermöglichen, wurde zur Darstellung der pyranoiden Ringe die den natürlichen Verhältnissen näher kommende Sesselform gewählt. Die funktionellen Gruppen sind rot hervorgehoben

ist als einziges Glycosaminoglycan kein Bestandteil der extrazellulären Matrix (7 u.), sondern wird in Mastzellen gespeichert. Es wirkt gerinnungshemmend (7 Kap. 29.5.3) und steigert die intravasale Lipoproteinhydrolyse durch Aktivierung der Lipoproteinlipase (7 Kap. 12.1.3). Hyaluronsäure. Hyaluronsäure nimmt unter den Glycosa-

minoglycanen eine Sonderstellung ein. Sie besteht aus langkettigen, unverzweigten Molekülen aus bis zu 25.000 Disaccharideinheiten (Molekülmasse ca. 1–4u103 kDa) und ist damit wesentlich größer als andere Glycosaminoglycane. Sie unterscheidet sich von diesen auch dadurch, dass sie

Unter den verschiedenen Bestandteilen der bakteriellen Zellwand ist das für das Überleben der Bakterien wichtigste das Peptidoglycan Murein, das auch als Glycopeptid oder Mucopeptid bezeichnet wird. Murein findet sich mit wenigen Ausnahmen in allen Prokaryoten. Es ist ein einziges, sehr großes Makromolekül, welches eine käfigartige Hülle um die Bakterien bildet. Grundbaustein des Mureins ist ein aus N-Acetylglucosamin und N-Acetylmuraminsäure bestehendes Disaccharid (. Abb. 2.11a). Formal ist Muraminsäure ein 3-O-Ether des Glucosamins mit Lactat. An der Carboxylgruppe jedes Lactatrestes hängt ein Tetrapeptid, das über die ε-Aminogruppe eines Lysylrestes mit einem Pentaglycinpeptid verknüpft ist. Verbindungen zwischen dem terminalen Alanin der Tetrapeptide und den Pentaglycinpeptiden führen zur Quervernetzung der Polysaccharidketten und zur Bildung eines netzförmigen Riesenmoleküls (. Abb. 2.11b).

31 2.1 · Kohlenhydrate

überwiegend als Membranbestandteile vorkommen und spezifische Funktionen ausüben. Je nach der in ihnen vorkommenden Lipidstruktur unterscheidet man 4 Sphingoglycolipide 4 Polyprenolglycolipide 4 Glyceroglycolipide Sphingoglycolipide. Grundbaustein der Sphingoglycolipide ist das Ceramid, an das glycosidisch Saccharidketten angeheftet werden (7 Kap. 2.2.4). Infobox

. Abb. 2.11. Struktur des Mureins. a Ausschnitt aus dem repetitiven Disaccharid aus N-Acetyl-Glucosamin und N-Acetyl-Muraminsäure. R = Peptidkette b Schematische Darstellung der Mureinstruktur. Die Vernetzungsstellen sind rot hervorgehoben. G = NAc-Glucosamin; M = NAc Muraminsäure

Analytik von Kohlenhydraten Indische, chinesische und japanische Ärzte kannten schon vor mehr als 2000 Jahren eine Krankheit, die süßen Harn erzeugt. Es wurde beobachtet, dass dieser süße Urin den Hunden schmeckte, Fliegen wurden angelockt und man nannte die Krankheit »Honigharn«. Der Ausdruck »Diabetes« (griechisch: das Hindurchgehende) wurde von Aretheios aus Kappadokien (81–128 n. Chr.) in den medizinischen Sprachgebrauch eingeführt, um die großen Harnmengen, den Harndrang und das häufige Wasserlassen zu charakterisieren. Das Prüfen des süßen Geschmacks von Diabetikerharn wurde noch im 20. Jahrhundert den Studenten in der Vorlesung eindrucksvoll demonstriert. Der Professor ließ sich ein mit Harn gefülltes Glas reichen, steckte einen Finger hinein, zog die Hand wieder zurück und kostete am Finger. Es ging alles ziemlich schnell und die Zuschauer waren fassungslos. Erst später wurde geklärt, was geschehen war. Der Professor hatte den Zeigefinger in das Uringlas gesteckt, aber seinen Mittelfinger abgeschleckt. Niemand im Zuhörerkreis hat das bemerkt. Die heute gebräuchlichen Verfahren zum Glucosenachweis in Körperflüssigkeiten verlangen vom Untersucher weniger Einsatz und sind deutlich weniger störanfällig. Die Glucosebestimmung erfolgt im Allgemeinen mit Hilfe optisch-enzymatischer Tests (7 Kap. 4.2.5), meist mit Hilfe von Hexokinase und Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase: Glucose + ATP o Glucose-6-phosphat + ADP

Muraminsäureketten werden spezifisch durch Muraminidase gespalten. Dieses auch als Lysozym (7 Kap. 4.3) bezeichnete Enzym ist im Tierreich weit verbreitet. Es findet sich v.a. in der Nasenschleimhaut und der Tränenflüssigkeit und hat die Aufgabe, die mit der Luft eindringenden Mikroorganismen zu zerstören. Wichtige Antibiotika, z.B. Bacitracin und Penicillin, entfalten ihre bakteriostatische Wirkung durch eine Hemmung der Mureinbiosynthese (7 Kap. 17.2.7). ! Glycolipide sind Membranbestandteile.

Als Glycolipide werden Verbindungen von meist komplex aufgebauten Oligosacchariden mit Lipiden bezeichnet, die

Glucose-6-phosphat + NADP+ o 6-Phosphogluconat + NADPH + H+ Messgröße ist dabei die spezifische Absorption von NADPH bei 340 nm (7 Abb. 4.8 in Kap. 4.2.5). Gemische von komplexen Kohlenhydraten können durch dieselben Techniken, die auch bei der Trennung von Proteinen und Aminosäuren eingesetzt werden, getrennt werden. Für die Identifikationen der einzelnen Bestandteile von komplexen Kohlenhydraten eignet sich die Kernresonanz-Spektroskopie sowie die Massenspektroskopie (7 Lehrbücher der biochemischen Analytik).

2

32

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

Polyprenolglycolipide. Sie spielen eine wichtige Rolle

2

bei der Biosynthese der Polysaccharide bakterieller Zellwände sowie der Oligosaccharide von Glycoproteinen tierischer Zellen. Die hierfür benötigten Oligosaccharide werden nämlich zunächst auf Polyprenole und von diesen erst auf die Akzeptorpeptide bzw. Proteine übertragen. In tierischen Geweben ist das verwendete Polyprenol das Dolichol (7 Kap. 2.2.5), bei Prokaryoten über-

nimmt diese Aufgabe das sehr ähnlich aufgebaute Baktoprenol. Glyceroglycolipide. Der Lipidanteil der v.a. in Bakterien

und Pflanzen vorkommenden Glceroglycolipide besteht aus Diacylglycerin. Seine freie OH-Gruppe ist in glycosidischer Bindung mit Oligosacchariden unterschiedlicher Größe verknüpft.

In Kürze Alle Kohlenhydrate leiten sich von Aldehyden bzw. Ketonen mehrwertiger Alkohole ab, die als Aldosen bzw. Ketosen bezeichnet werden. Sie sind imstande, miteinander Verbindungen einzugehen und auf diese Weise Makromoleküle zu bilden. Im Einzelnen unterscheidet man 4 Monosaccharide 4 Disaccharide 4 Oligo- und Polysaccharide Von besonderer Bedeutung im Stoffwechsel sind: 4 Hexosen (Glucose, Galactose, Mannose, Fructose) 4 Pentosen (Ribose, Desoxyribose, Ribulose, Xylose) Monosaccharide können unter Ausbildung glycosidischer Bindungen mit OH- bzw. NH2 -Gruppen reagieren. Die

2.2

Lipide

2.2.1 Klassifizierung und Funktionen ! Eine Klassifizierung von Lipiden beruht auf dem Vorhandensein von Esterbindungen.

Eine gebräuchliche Klassifizierung für die chemisch sehr unterschiedlichen Lipide teilt diese in zwei Hauptgruppen ein, die einfachen, nicht durch Alkalibehandlung hydrolysierbaren Lipide und die zusammengesetzten, Esterbindungen enthaltenden und damit hydrolysierbaren Lipide (. Tabelle 2.5). Zu den nicht hydrolysierbaren Lipiden gehören: 4 Fettsäuren und 4 Isoprenderivate, deren wichtigste Vertreter Terpene und Steroide sind Die hydrolysierbaren Lipide enthalten immer 1–3 Fettsäurereste (Acylreste), die mit einem Alkohol verestert sind. Als Alkohole kommen infrage 4 Glycerin 4 Glycerin-3-phosphat 4 Sphingosin 4 Cholesterin ! Lipide dienen der Energiespeicherung, dem Membranaufbau und der Signaltransduktion.

dabei entstehenden Verbindungen werden Glycoside genannt. Wird die glycosidische Bindung zwischen 2 Monosacchariden geknüpft, entstehen Disaccharide (Maltose, Lactose, Saccharose). Saccharide aus 3–20 Monosacchariden werden als Oligosaccharide, solche mit mehr als 20 als Polysaccharide bezeichnet: 4 Homoglycane enthalten nur ein einziges Monosaccharid 4 Heteroglycane dagegen mehrere unterschiedliche Monosaccharide Das wichtigste tierische Homoglycan ist das Glycogen. Heteroglycane kommen in Glycoproteinen, Proteoglycananen und im Murein der bakteriellen Zellwand vor.

. Tabelle 2.5a. Klassifizierung der Lipide Nicht hydrolysierbare Lipide Fettsäuren und Derivate

Isoprenderivate Terpene

Steroide

Fettsäuren Prostaglandine

Retinol Phyllochinone Tocopherol Dolichol

Cholesterin Steroidhormone D-Vitamine Gallensäuren

. Tabelle 2.5b. Klassifizierung der Lipide Hydrolysierbare zusammengesetzte Lipide Acylreste

Verestert mit

Weitere Komponenten

Bezeichnung

1

Langkettigen Alkoholen

–

Wachse

1–3

Glycerin

–

Acylglycerine

1–2

Glycerin-3Phosphat

Serin, Ethanolamin, Cholin, Inositol

Phosphoglyceride

1

Sphingosin

Phosphorylcholin, Galactose, Oligosaccharide

Sphingolipide

1

Cholesterin

–

Cholesterinester

33 2.2 · Lipide

. Abb. 2.12. Aufbau von gesättigten und ungesättigten Fettsäuren. Die Abbildung zeigt die funktionellen Gruppen von Fettsäuren, die Möglichkeiten der Zählung der einzelnen C-Atome und die Regeln zur Festlegung der Position von Doppelbindungen

Lipide haben eine Vielzahl von Funktionen, besonders bei 4 der Energiespeicherung 4 beim Aufbau von Membranen und 4 bei der Signalvermittlung Energiespeicherung. Lipide sind ein wichtiger Nahrungs-

bestandteil. Die Fettverbrennung ergibt im Vergleich mit anderen Nahrungsstoffen die höchste Energieausbeute (39,7 kJ/g Fett) (7 Kap. 21.1). Neben ihrem energetischen Wert haben Nahrungslipide auch deshalb Bedeutung, weil sie die essentiellen Fettsäuren und die fettlöslichen Vitamine Retinol, Calciferol, Tocopherole sowie Phyllochinone enthalten (7 Kap. 23.2). Im tierischen Organismus findet sich die höchste Lipidkonzentration im Fettgewebe. Hier werden Triacylglycerine als Energiespeicher, zur Wärmeisolierung (subkutanes Fettgewebe) oder als Druckpolster (Fett der Nierenlager, der Fußsohle, der Orbita) gespeichert. Durch die Fettspeicherung im Fettgewebe ist über längere Zeit die Unabhängigkeit von der Nahrungszufuhr gewährleistet. Ein Erwachsener speichert etwa 10.000 g Fett (bei Übergewicht wesentlich mehr!), aber nur maximal 500 g Kohlenhydrate in Form von Glycogen. Membranaufbau. Eine besondere Bedeutung haben Phos-

phoglyceride, Sphingolipide und Cholesterin, da aus ihnen die Lipidphase der Plasmamembran und der intrazellulären Membranen, z.B. der Mitochondrien, der Lysosomen und des endoplasmatischen Retikulums gebildet wird (7 Kap. 6.1.2). Signalvermittlung. Lipide sind an die Regulation des Stoff-

wechsels, des Wachstums und der Differenzierung beteiligt. Die Steroidhormone der Nebennierenrinde und der Gonaden (7 Kap. 27.3, 27.4) sind ebenso Lipide wie Prostaglandine und Leukotriene, die als Gewebshormone weit verbreitet sind (7 Kap. 12.4.2). Darüber hinaus sind Lipide an der Signaltransduktion beteiligt.

2.2.2 Fettsäuren ! Fettsäuren bestehen aus einer Kohlenwasserstoffkette und einer Carboxylgruppe.

Fettsäuren sind Bausteine von Acylglycerinen, Phosphoglycerinen, Sphingolipiden und Cholesterinestern. Als unveresterte sog. freie Fettsäuren kommen sie in den Geweben in geringen Mengen vor, im Blutplasma beträgt ihre Konzentration etwa 0,5–1 mmol/l. . Abbildung 2.12 zeigt den allgemeinen Aufbau von Fettsäuren. Sie enthalten 4 entsprechend ihrer Biosynthese aus Acetylresten meist eine gerade Anzahl von C-Atomen 4 eine Carboxylgruppe sowie 4 im Falle von ungesättigten Fettsäuren eine oder mehrere Doppelbindungen In der chemischen Nomenklatur werden Fettsäuren nach den analogen Kohlenwasserstoffen mit gleicher Kettenlänge benannt. So heißt beispielsweise eine gesättigte Fettsäure mit sechs C-Atomen Hexansäure, eine mit 18 C-Atomen Octadecansäure. Für die meisten Fettsäuren sind jedoch Trivialnamen üblich, die häufig den Organismus oder das Gewebe wiedergeben, aus dem die Fettsäure ursprünglich isoliert worden ist (. Tabelle 2.6). ! Ungesättigte Fettsäuren enthalten eine oder mehrere Doppelbindungen.

Mehr als die Hälfte der in tierischen bzw. pflanzlichen Zellen vorkommenden Fettsäuren enthalten eine oder mehrere Doppelbindungen. . Abbildung 2.12 gibt die Regeln für die Benennung gesättigter und ungesättigter Fettsäuren wieder: 4 Die Kohlenstoffatome von Fettsäuren werden, beginnend mit der Carboxylgruppe, mit arabischen Ziffern nummeriert 4 Ein alternatives Zählverfahren benennt die einzelnen CH2-Gruppen von Fettsäuren mit griechischen Buchstaben. Die der Carboxylgruppe benachbarte CH2Gruppe wird mit D bezeichnet, die nächstfolgende mit E usw. Die CH3-Gruppe am Ende einer Fettsäure ist immer das Z-C-Atom

2

34

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

. Tabelle 2.6. Wichtige Fettsäuren A. Gesättigte Fettsäuren: Summenformel CnH2n + 1COOH

2

Trivialname

Chemischer Name

Formel

Mol.-Gew.

Vorkommen

Essigsäure

Ethansäure

C2H4O2

60,0

Endprodukt des bakteriellen Kohlenhydratabbaus; als Acetyl-CoA im Intermediärstoffwechsel

Propionsäure

Propansäure

C3H6O2

74,1

Endprodukt des bakteriellen Kohlenhydratabbaus; als Propionyl-CoA im Intermediärstoffwechsel; Endprodukt beim Abbau ungeradzahliger Fettsäuren

n-Buttersäure

Butansäure

C4H8O2

88,1

In Fetten, z.B. Butter

Isovaleriansäure

Isopentansäure

C5H10O2

102,1

Als Isovaleryl-CoA Intermediat beim Abbau verzweigtkettiger Aminosäuren

Myristinsäure

Tetradecansäure

C14H28O2

228,4

Anker für Membranproteine

Palmitinsäure

Hexadecansäure

C16H32O2

256,4

Bestandteil tierischer und pflanzlicher Lipide

Stearinsäure

Octadecansäure

C18H36O2

284,5

Bestandteil tierischer und pflanzlicher Lipide

Lignocerinsäure

Tetracosansäure

C24H48O2

368,6

Bestandteil der Cerebroside und Sphingomyeline

B. Einfach ungesättigte Fettsäuren: Summenformel CnH2n – 1COOH Trivialname

Chemischer Name

Formel

Mol.-Gew.

Vorkommen

Crotonsäure

trans-Butensäure

C4H6O2

86,1

Als Crotonyl-CoA Metabolit beim Fettsäureabbau

Palmitoleinsäure

cis-'9-Hexadecensäure

C16H30O2

254,4

In Milchfett und Depotfett, Bestandteil der Pflanzenöle

Ölsäure

cis-'9-Octadecensäure

C18H34O2

282,5

Hauptbestandteil aller Fette und Öle

Nervonsäurea

cis-'15-Tetracosensäure

C24H46O2

366,6

In Cerebrosiden

C. Mehrfach ungesättigte Fettsäuren Trivialname

Chemischer Name

Formel

Mol.-Gew.

Vorkommen

Linolsäurea

'9,12-Octadecadiensäure

C18H32O2

280,4

In Pflanzenölen und Depotfett

C18H30O2

278,4

In Fischölen

C20H32O2

304,5

In Fischölen, Bestandteil vieler Phosphoglyceride

a

Linolensäure

Arachidonsäure a

9,12,15

'

-Octadecatriensäure

5,8,11,14

'

-Eicosatetraensäure

Essentielle Fettsäuren.

4 Die Stellung einer Doppelbindung in einer Fettsäure wird durch ein Delta angegeben ('). So bezeichnet '3 eine Doppelbindung zwischen den C-Atomen 3 und 4 einer Fettsäure (. Abb. 2.12). Die '9 -Position kommt bei den ungesättigten Fettsäuren tierischer und pflanzlicher Zellen relativ häufig vor 4 Sind zwei oder mehr Doppelbindungen in einer Fettsäure enthalten, so sind diese immer durch zwei C-CBindungen getrennt, es handelt sich also um isolierte Doppelbindungen 4 Die Doppelbindungen in ungesättigten Fettsäuren fixieren die räumliche Anordnung der Kohlenstoffkette. Wenn gleichartige Substituenten auf derselben Seite der Doppelbindungen liegen, spricht man von cis-Isomerie, andernfalls von trans-Isomerie. Fast alle in der Natur vorkommenden ungesättigten Fettsäuren liegen in der cis-Form vor Wegen des Fehlens einer entsprechenden Enzymausstattung können mehrfach ungesättigte Fettsäuren, welche Doppelbindungen enthalten, die mehr als 9 C-Atome von der Carboxylgruppe entfernt sind, vom tierischen Organismus nicht synthetisiert werden (7 Kap. 12.4.1). Da sie je-

doch eine Reihe wichtiger Funktionen erfüllen, müssen sie mit der Nahrung zugeführt werden und werden deshalb auch als essentielle Fettsäuren bezeichnet (. Tabelle 2.6, mehrfach ungesättigte Fettsäuren). Eine wichtige essentielle Fettsäure ist die Linolsäure oder '9,12-Octadecadiensäure mit 18 C-Atomen. Die zweite Doppelbindung ist hier 12 CAtome von der Carboxylgruppe entfernt und liegt demzufolge 6 C-Atome vor dem endständigen Z-C-Atom. Man rechnet die Linolsäure daher auch zu den Z-6-Fettsäuren. Eine ebenfalls essentielle Fettsäure ist die Linolensäure ('9,12,15-Octadecatriensäure). Sie findet sich vorwiegend in maritimen Organismen und wird wegen der spezifischen Position der am weitesten von der Carboxylgruppe entfernten Doppelbindungen auch zur Gruppe der ω-3-Fettsäuren gerechnet (über die ernährungsphysiologische Bedeutung Z-6- und Z-3-Fettsäuren 7 Kap. 21.5.3). Wichtige Fettsäurederivate sind Prostaglandine, Thromboxane und Leukotriene. Sie entstehen aus mehrfach ungesättigten Fettsäuren, besonders der Arachidonsäure (20 C-Atome) und werden deswegen auch als Eikosanoide (eikosa = griech. 20) bezeichnet. Wegen ihrer Wirkung auf den Zellstoffwechsel in geringsten Konzentrationen (10–10–10–8 mol/l) werden sie zu den Gewebshormonen

35 2.2 · Lipide

gerechnet. Über Biosynthese, Struktur und Wirkungsweise der Eikosanoide 7 Kapitel 12.4.2.

2.2.3 Glycerinlipide Glycerinlipide enthalten als gemeinsame Struktur den dreiwertigen Alkohol Glycerin. Wenn wenigstens eine der drei Hydroxylgruppen des Glycerins mit Fettsäuren verestert ist, handelt es sich um Acylglycerine. ! Bei Triacylglycerinen sind alle drei Hydroxylgruppen des Glycerins mit Fettsäuren verestert.

Sind alle drei Hydroxylgruppen des Glycerins mit Fettsäuren verestert, spricht man von Triacylglycerinen (Triglyceriden) (. Abb. 2.13): 4 Sind alle drei Hydroxylgruppen des Glycerins durch dieselbe Fettsäure besetzt, handelt es sich um einfache Triacylglycerine (z.B. Tristearoylglycerin, Tripalmitoylglycerin). Gemischte Triacylglycerine sind allerdings, besonders in tierischen Geweben, wesentlich häufiger. Hier sind die drei Hydroxylgruppen des Glycerins mit Fettsäuren verschiedener Kettenlänge und unterschiedlichem Sättigungsgrad verestert. Mehrfach ungesättigte Fettsäuren finden sich häufig in der Position 2 4 Monoacyl- bzw. Diacylglycerine (nur eine oder zwei der drei OH-Gruppen des Glycerins verestert) kommen in geringen Mengen in den Geweben vor, als Zwischenprodukte beim Auf- und Abbau der Triacylglycerine In der höchsten Gewebskonzentration kommen Triacylglycerine im Speicherfett des Fettgewebes vor. Die Zusammensetzung der Triacylglycerine ist von großer Bedeutung für ihre Konsistenz: 4 Je länger die Kohlenwasserstoffketten der Fettsäurereste sind, umso höher liegt der Schmelzpunkt der Triacylglycerine 4 Je mehr Doppelbindungen die Fettsäurereste in Triacylglycerinen enthalten, umso niedriger liegt der Schmelzpunkt

Dementsprechend findet man beispielsweise einen besonders hohen Anteil an mehrfach ungesättigten Fettsäuren mit besonders niedrigem Schmelzpunkt im subkutanen Fettgewebe von Meeressäugern. Ein gutes Beispiel hierfür ist der Waltran. ! Phosphoglyceride sind Derivate des Glycerin-3 Phosphats.

Phosphoglyceride sind die mengenmäßig bedeutendsten Membranbestandteile tierischer Gewebe (7 Kap. 2.2.6). Sie zeichnen sich durch folgende Strukturmerkmale aus: 4 Wie bei Triacylglycerinen ist das Rückgrat der Phosphoglyceride der dreiwertige Alkohol Glycerin 4 Zwei der Hydroxylgruppen des Glycerins sind mit langkettigen Fettsäuren verestert, die dritte mit Phosphorsäure. Aus diesem Grund können Phosphoglyceride auch als Derivate des Glycerin-3-phosphats angesehen werden 4 Phosphatidsäure (Phosphatidat, . Abb. 2.14) ist der einfachste Vertreter der Phosphoglyceride, der jedoch nur in Spuren in den Geweben vorkommt. Alle anderen Phosphoglyceride sind Phosphorsäurediester, da der Phosphatrest der Phosphatidsäure mit einem weiteren Alkohol verknüpft ist Wie aus der . Abbildung 2.14 hervorgeht, wird das C-Atom 2 durch die Veresterung der Hydroxylgruppen 1 und 3 des Glycerins mit verschiedenen Substituenten asymmetrisch. Alle natürlichen Phosphoglyceride gehören der L-Reihe an. Von besonderer Bedeutung für den Aufbau von Membranen (7 Kap. 18) sind Phosphatidylcholin, Phosphatidylethanolamin, Phosphatidylserin und Phosphatidylinositol (. Abb. 2.14). Phosphatidylcholin. Phosphatidylcholin (Lecithin) ist

mengenmäßig das häufigste Phosphoglycerid. Es ist ein Phosphorsäurediester der Phosphatidsäure mit dem Aminoalkohol Cholin. Phosphatidylethanolamin und Phosphatidylserin. Beide

Phosphoglyceride entsprechen strukturell dem Phosphatidylcholin, jedoch ist das Cholin durch Ethanolamin bzw. Serin ersetzt. Phosphatidylinositol. Im Phosphatidylinositol, dem eine besondere Bedeutung im Rahmen der Signaltransduktion zukommt (7 Kap. 25.6.3), ist der Phosphorsäurediester mit dem zyklischen sechswertigen Alkohol Inositol geknüpft.

. Abb. 2.13. Tripalmitoylglycerin als Beispiel für ein Triacylglycerin. Die Fettsäurereste (Acylreste) sind grün, der Glycerinanteil blau dargestellt

Lysophosphoglyceride. Unter Einwirkung von Phospholipasen entstehen aus Phosphoglyceriden durch Abspaltung einer Fettsäure die entsprechenden Lysophosphoglyceride. Der bekannteste Vertreter dieser Gruppe ist das Lysophosphatidylcholin, welches schon in geringen Mengen hämo-

2

36

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

2

. Abb. 2.14. Aufbau von Phosphoglyceriden. Zwei der drei Hydroxylgruppen des Glycerin-3-phosphats sind mit langkettigen Fettsäuren verestert (zur Vereinfachung in der Abbildung 2 Palmitylreste). Die dritte Hydroxylgruppe ist mit Phosphorsäure verestert, welche außer

lytisch wirkt, d.h. eine Auflösung der Erythrozytenmembran bewirkt. Phospholipasen, die zur Bildung von Lysophosphoglyceriden führen können, kommen u.a. in Schlangengiften vor und sind mit ein Grund für die Gefährlichkeit dieser Gifte (7 Kap. 18.1.2). Glycosyl-Phosphatidyl-Inositol-Anker. Glycosyl-Phos-

phatidyl-Inositol-Anker oder GPI-Anker sind wichtige Membranbestandteile, die auf der Grundstruktur des Phosphatidylinositols basieren (. Abb. 2.15). Sie dienen der Verankerung von Rezeptoren oder Enzymen, z.B. der Acetylcholin-Esterase (7 Kap. 9.2.4) oder der alkalischen Phosphatase (7 Kap. 9.2.4), in der Membran. Für den Aufbau des GPI-Ankers werden Glucosamin und 3 Mannosen mit glycosidischen Bindungen an das Inositol geknüpft, das mit einer dritten Fettsäure verestert sein kann. Die terminale . Abb. 2.15. Aufbau von GPI-Ankern. Diese Verankerung von 7 Proteinen in der Membran erfolgt durch ein PhosphatidylinositolMolekül, an welches ein Tetrasaccharid aus Glucosamin und 3 Mannoseresten geknüpft ist. Der terminale Mannoserest trägt ein Ethanolaminphosphat, welches mit einer Säureamidbindung mit dem CTerminus des jeweiligen Proteins verbunden ist. Dieses Grundgerüst ist bei den verschiedenen GPI-Ankern modifiziert. R1 = ein weiterer Fettsäurerest, der mit der OH-Gruppe am C-Atom 3 des Inositols verestert ist; R2 = die erste Mannose kann zusätzlich mit Phosphoethanolamin, Galactose oder N-Acetyl-Galactosamin verknüpft sein; R3 = die zweite Mannose kann zusätzlich einen Phosphoethanolaminrest tragen; R4 = ein weiterer Mannoserest

beim Phosphatidat in Form eines Diesters mit weiteren Alkoholen verknüpft ist. Die Ketten der Fettsäuren sind für die hydrophoben, die übrigen Teile der Phosphoglyceride für die hydrophilen Eigenschaften verantwortlich

37 2.2 · Lipide

. Abb. 2.16. Struktur des Cardiolipins

. Abb. 2.17. Aufbau von Plasmalogenen

Mannose trägt einen Phosphoethanolaminrest, der mit dem der C-Terminus des jeweiligen Proteins mit einer Säureamidbindung verbunden ist. Die Mannosereste können weitere Ethanolamine und andere Saccharide tragen.

Ceramid, das einfachste Sphingolipid (. Abb. 2.18). Vom Ceramid leiten sich weitere Sphingolipide ab 4 Sphingomyeline tragen an der endständigen Hydroxylgruppe des Ceramidanteils einen Phosphorylcholinoder einen Phosphorylethanolaminrest (. Abb. 2.19).

Cardiolipin. Cardiolipin oder Diphosphatidylglycerin ist

ein besonders in Mitochondrienmembranen in hoher Konzentration vorkommendes Phosphoglycerid (. Abb. 2.16). Auch hier ist das Rückgrat des Moleküls ein Glycerin, bei dem die Hydroxylgruppen der C-Atome 1 und 3 mit je einer Phosphatidsäure verestert sind. Plasmalogene. Plasmalogene stehen strukturell dem Phos-

phatidylcholin- bzw. dem Phosphatidylethanolamin nahe. Sie machen z.B. mehr als 10% der Phospholipide des Gehirns und der Muskeln aus. Der Unterschied zu den eigentlichen Phosphoglyceriden beruht darauf, dass am C-Atom 1 des Glycerins anstelle einer Fettsäure ein Fettsäurealdehyd als Enolether gebunden ist. Die zweite, als Ester gebundene Fettsäure ist immer ungesättigt. Als stickstoffhaltige Alkohole dienen in der Regel Ethanolamin oder Cholin (. Abb. 2.17).

2.2.4 Sphingolipide Den Sphingolipiden liegt strukturell der Aminodialkohol Sphingosin (. Abb. 2.18) zugrunde: 4 Wenn die Aminogruppe des Sphingosins mit einer Fettsäure in Säureamidbindung verknüpft ist, entsteht

. Abb. 2.18. Sphingosin und Ceramid. Sphingosin besitzt neben 2 Hydroxylgruppen eine Aminogruppe. Geht diese eine Säureamid-Bindung mit einer, meist ungesättigten, Fettsäure ein, entsteht Ceramid

2

38

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

bevorzugten Bausteinen des Nervengewebes, insbesondere der grauen Substanz des Gehirns. Sie finden sich daneben aber auch in den Membranen anderer Zellen. . Abbildung 2.20 zeigt den Aufbau des Gangliosides GM-1 als Beispiel für diese etwa 60 Mitglieder umfassende Gruppe von Sphingolipiden

2

2.2.5 Isoprenlipide Der Grundbaustein der Isoprenlipide ist das Isopren (2Methyl-1,3-Butadien) (. Abb. 2.21a). Durch Kondensation mehrerer Isoprenreste entstehen einkettige Moleküle, welche die Grundlage einer großen Zahl von Naturstoffen bilden. ! Isoprenoide entstehen durch mehrfache Kondensation von Isoprenresten.

Isoprenoide sind Kondensationsprodukte von Isoprenresten: 4 Terpene sind Verbindungen aus 10 C-Atomen, die formal durch Kondensation zweier Isoprenreste entstanden sind. Viele pflanzliche ätherische Öle gehören in die Gruppe der Terpene 4 Sesquiterpene sind Verbindungen mit 15 C-Atomen, die aus drei Isoprenen zusammengesetzt sind 4 C20-Verbindungen werden als Diterpene bezeichnet, C30-Verbindungen als Triterpene . Abb. 2.19. Struktur von Sphingomyelin und Cerebrosid. Durch Verknüpfung einer Hydroxylgruppe des Ceramids mit Phosphorylcholin oder Phosphorylethanolamin entsteht Sphingomyelin. Cerebroside enthalten stattdessen Galactose oder Glucose

Häufig kommen ungesättigte Fettsäuren vor, u.a. die Lignocerinsäure mit 24 C-Atomen und ihre ungesättigten Derivate. Der Name Sphingomyelin leitet sich vom typischen Vorkommen dieser Lipide in den Myelinscheiden des Nervengewebes ab 4 Cerebroside (. Abb. 2.19) kommen in besonders hoher Konzentration im Zentralnervensystem vor, finden sich jedoch auch in anderen Geweben. Im Gegensatz zum Sphingomyelin ist bei ihnen die terminale Hydroxylgruppe des Ceramids glycosidisch an das C-Atom 1 einer Galactose oder Glucose gebunden (Galactosylbzw. Glucosyl-Cerebrosid). Untereinander unterscheiden sich Cerebroside besonders durch die Fettsäurereste 4 Sulfatide sind Cerebroside, bei denen der Glycosylrest am C-Atom 3 mit Schwefelsäure verestert ist 4 Ganglioside enthalten anstelle eines Monosaccharids einen komplexen, häufig verzweigten Oligosaccharidrest, der glycosidisch an das Ceramid gebunden ist. Als Kohlenhydratreste werden Glucose, Galactose, Galactosamin und N-Acetylneuraminsäure (Sialinsäure) (7 Kap. 17.2.2) verwendet. Ganglioside gehören zu den

Isoprenoide mit besonderer Bedeutung für den tierischen Organismus sind die fettlöslichen Vitamine Retinol, Tocopherol sowie Phyllochinon (7 Kap. 23.2). Ebenfalls ein Isoprenderivat ist das aus 19 Isopreneinheiten bestehende Dolichol (. Abb. 2.21b), das auch in phosphorylierter Form als Dolicholphosphat vorkommt. Es dient bei der Biosynthese von Glycoproteinen im endoplasmatischen Retikulum dazu, die synthetisierten Oligosaccharidketten in den Membranen des endoplasmatischen Retikulums zu verankern (7 Kap. 17.3.2, 9.2.4). ! Steroide entstehen durch Zyklisierung des Triterpens Squalen.

Steroide sind ähnlich wie die Isoprenoide Derivate des Isoprens, da sie durch Zyklisierung des Triterpens Squalen entstehen. Chemisch leiten sie sich vom CyclopentanoPerhydrophenanthren (Syn.: Gonan, Steran, . Abbildung 2.22a) ab. Formal sind alle in tierischen Geweben vorkommenden Steroide Derivate des Cholestans (. Abb. 2.22b). Cholesterin, das Ausgangspunkt für die Biosynthese aller in tierischen Organismen vorkommenden Steroide (7 u.) ist, unterscheidet sich vom Cholestan durch eine Hydroxylgruppe am C-Atom 3 des Rings A sowie durch eine Doppelbindung zwischen den C-Atomen 5 und 6 des Rings B (. Abb. 2.22c).

39 2.2 · Lipide

. Abb. 2.20. Struktur des Gangliosides GM-1

Anstelle des Cholesterins enthalten Pflanzen v.a. E-Sitosterol, das sich von diesem nur durch seine aliphatische Seitenkette unterscheidet (. Abb. 2.22d). Über die Probleme bei der Resorption von Cholesterin und E-Sitosterol 7 Kap. 32.2.2). ! Cholesterin kommt in beträchtlicher Menge in allen tierischen Zellen vor.

Cholesterin hat eine Reihe wichtiger Funktionen: 4 Es ist Bestandteil aller zellulärer Membranen mit Ausnahme der mitochondrialen Innenmembran

4 Es ist die Muttersubstanz für die Biosynthese der zahlreichen Steroidhormone, die in der Nebennierenrinde sowie in den Gonaden gebildet werden (7 Kap. 27.3, 27.4) 4 Es ist der Ausgangspunkt für die Biosynthese der DHormone (D-Vitamine) (7 Kap. 23.2.2) 4 Es ist der Ausgangspunkt für die Biosynthese der für die Verdauungsvorgänge unerlässlichen Gallensäuren (7 Kap. 32.1.4) Von besonderem pharmakologischem Interesse sind die vielen Pflanzensteroide, die neben Hydroxylgruppen auch Äther- und Lactongruppierungen enthalten können und häufig als Glycoside vorkommen. Beispiele hierfür sind die Herzglycoside (. Abb. 2.4).

2.2.6 Lipide in wässrigen Lösungen ! Triacylglycerine sind apolar und in Wasser unlöslich.

. Abb. 2.21. Isopren und Isoprenoide. a Isopren (2-Methyl-1,3Butadien) ist der Grundbaustein der Isoprenoide; b Dolichol entsteht durch Kondensation von 19 Isoprenresten

Triacylglycerine mit langkettigen Fettsäuren, die den Hauptteil des sog. Speicherfettes des Fettgewebes darstellen, sind wasserunlöslich, da alle drei Hydroxylgruppen des Glycerins verestert sind. Aus diesem Grund sind sie nicht imstande, an wässrigen Grenzflächen geordnete Strukturen (7 u.) auszubilden.

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40

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

2

. Abb. 2.22. Strukturen von Steroiden. a Cyclopentano-Perhydrophenanthren (Syn. Gonan, Steran); b Cholestan; c Cholesterin; d E-Sitosterol

Im Gegensatz zu den Triacylglycerinen verfügen Mono- bzw. Diacylglycerine über freie Hydroxylgruppen. Diese sind deswegen z.B. imstande, an Grenzflächen Mizellen zu bilden und spielen eine wichtige Rolle bei der Emulgierung von Lipiden während der duodenalen Resorption (7 Kap. 32.2.2). ! Phosphoglyceride und Sphingolipide bilden an Grenzflächen oder in Wasser geordnete Strukturen aus.

Im Gegensatz zu den Triacylglycerinen enthalten Phosphoglyceride und Sphingolipide viele geladene bzw. polare Gruppen: 4 Alle Phosphoglyceride tragen eine negative Ladung an der Phosphatgruppe (pK’ = 1–2) 4 Phosphatidylethanolamin und Phosphatidylcholin haben bei physiologischem pH eine positive Ladung am Stickstoff 4 Wegen der zusätzlichen Carboxylgruppen besitzt Phosphatidylserin zwei negative und eine positiv geladene Gruppe Ähnliche Eigenschaften haben die geladenen »Kopfteile« des Sphingomyelins. Kohlenhydratreste von Phosphoglyceriden und Sphingolipiden haben zwar keine elektrische Ladung, sind jedoch wegen ihrer vielen Hydroxylgruppen polar und ebenfalls hydrophil. Da die sowohl bei den Phosphoglyceriden als auch den Sphingolipiden vorkommenden Kohlenwasserstoffketten der langkettigen Fettsäuren hydrophob sind, gehören Phosphoglyceride und Sphingolipide zu den sog. amphiphilen Verbindungen. Für sie ist typisch, dass in einem Molekül sowohl hydrophobe als hydrophile Regionen vorkommen. Amphiphile Lipide ordnen sich an Grenzflächen oder im Wasser in typischer Weise an (. Abb. 2.23):

4 An Wasser-Luft-Grenzschichten breiten sich amphiphile Lipide in Form von monomolekularen Filmen aus, in denen der polare Anteil des Moleküls ins Wasser ragt, während sich die hydrophoben Kohlenwasserstoffreste zur Luft hin orientieren (. Abb. 2.23a) 4 Eine ähnliche Orientierung findet sich an Wasser-ÖlGrenzschichten, wobei der polare Anteil dem Wasser zugewandt ist, während die apolare, hydrophobe Gruppe in der Ölphase steckt 4 In bestimmten Konzentrationsbereichen ordnen sich amphiphile Lipide in wässrigen Lösungen in Form von Mizellen an. Die hydrophoben Fettsäureketten sind dabei gegeneinander gerichtet und nach außen zur wässrigen Phase hin durch die polaren hydrophilen Anteile der Moleküle abgeschirmt. Andere Lipide, die selbst nicht in der Lage sind Mizellen zu bilden (Triacylglycerine, Cholesterin) können sich an polare Lipide assoziieren und bilden so gemischte Mizellen (. Abb. 2.23b). Diese sind eine entscheidende Voraussetzung für die Lipidresorption im Duodenum 4 Amphiphile Lipide, speziell Phosphoglyceride und Sphingolipide können darüber hinaus sog. Doppelschichten oder bilayers (. Abb. 2.23c)ausbilden. Dieses Phänomen beruht auf der Tatsache, dass sich die hydrophoben Kohlenwasserstoffketten der Fettsäurereste gegeneinander orientieren, während die hydrophilen Teile sich zur wässrigen Phase hin ausrichten 4 Werden Lipiddoppelschichten mit Ultraschall behandelt, so entstehen Liposomen (. Abb. 2.23d), die aufgrund ihrer strukturellen Ähnlichkeit mit zellulären Membranen leicht mit den Plasmamembranen vieler Zellen fusionieren können. Liposomen werden aus diesem Grund gelegentlich mit an sich nicht membrangängigen Wirkstoffen beladen und auf diese Weise als

41 2.2 · Lipide

. Abb. 2.23. Möglichkeiten der Anordnung von amphiphilen Lipiden. a in Grenzschichten, b–d im Wasser. Die (rot) hervorgeho-

Vehikel benutzt, sodass Arzneimittel, Enzyme, DNA u.a. in den intrazellulären Raum transportiert werden können ! Lipiddoppelschichten sind die Grundstruktur aller zellulären Membranen.

Die strukturelle Grundlage aller zellulären Membranen sind Lipiddoppelschichten, die im Wesentlichen aus folgenden amphiphilen Lipiden bestehen: 4 den Phosphoglyceriden Phosphatidylcholin, Phosphatidylethanolamin, Phosphatidylserin, Phosphatidylinositol 4 den Sphingolipiden Sphingomyelin und Glycosphingolipiden sowie 4 Cholesterin. Die mitochondriale Innenmembran ist die einzige zelluläre Membran, in der Cholesterin nicht vorkommt . Abbildung 2.24 gibt eine schematische Darstellung des Aufbaus einer Lipiddoppelschicht wieder. Trotz dieses, auf den ersten Blick relativ einfachen Aufbaus zellulärer Membranen aus einer sehr begrenzten Anzahl von amphiphilen Molekülen ist deren funktionelle Vielfalt beeindruckend. Hierfür sind vor allem drei Phänomene verantwortlich:

benen Teile der Phospholipidmoleküle stellen die hydrophilen Bereiche, die (schwarz) gezeichneten die hydrophoben Bereiche dar

4 In die zelluläre Membranen bildenden Lipiddoppelschichten sind Membranproteine (7 Kap. 6.1.2) eingelagert 4 Die jeweilige Fettsäurezusammensetzung bestimmt die sog. Fluidität und damit die Eigenschaften biologischer Membranen 4 Die Verteilung der einzelnen amphiphilen Lipide ist nicht statistisch sondern asymmetrisch und damit an spezifische Membranfunktionen angepasst Membranproteine. Der Proteingehalt verschiedener zellulärer Membranen schwankt zwischen 20% bei Myelinmembranen und 80% bei der mitochondrialen Innenmembran. Im Prinzip lassen sich drei Typen von Membranproteinen unterscheiden (. Abb. 2.25), 4 Integrale Membranproteine gehen vollständig durch Membranen hindurch. Sie besitzen hierzu sog. Transmembrandomänen, welche reich an hydrophoben Aminosäuren sind und so die nötigen Wechselwirkungen mit der Lipidphase der Membranen ermöglichen. Strukturell bestehen Transmembrandomänen aus D-Helices bzw. seltener E-Faltblättern. Integrale Membranproteine lassen sich nur unter Zerstörung der Membran aus dieser lösen, aggregieren dann aber leicht und verlieren ihre biologische Aktivität

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42

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

2

. Abb. 2.24. Lipidstruktur einer Zellmembran. Die schematische Darstellung zeigt die asymmetrische Verteilung von Phospholipiden und Sphingolipiden auf den beiden Seiten einer Lipiddoppelschicht und stellt darüber hinaus einen Ausschnitt aus einem »lipid raft« dar,

der besonders cholesterinreich ist und in dem die Phospho- und Sphingolipide viele gesättigte Fettsäurereste enthalten. Im raft sind außerdem zwei lipidverankerte Proteine dargestellt (nach Simons, K 2001)

4 Periphere Membranproteine sind nur mit einer Hälfte der Lipiddoppelschicht assoziiert. Sie können relativ leicht aus der Membran gelöst werden und behalten dabei ihre biologische Aktivität 4 Lipidverankerte Membranproteine sind durch covalente Verknüpfung mit Lipiden in Membranen verankert. Als derartige Lipide kommen Isoprenoidreste, Fettsäurereste und GPI-Anker infrage (7 Kap. 2.2.3)

Membranproteine ermöglichen u.a.: 4 als Kanäle oder Carrier den Transport von Molekülen durch die Membran 4 als Rezeptoren die Signaltransduktion durch Signalmoleküle 4 als Cadherine oder Integrine Zell-Zell- bzw. ZellMatrixkontakte

Membranproteine sind meist Glycoproteine (7 Kap. 17.2). Die Kohlenhydratketten befinden sich immer auf der zum extrazellulären Raum gerichteten Seite der Membran.

Membranfluidität. Bei tiefen Temperaturen sind die Alkan-

ketten der Fettsäurereste von Membranen dicht gepackt und maximal gestreckt. Bei Temperaturerhöhung kommt es zu einem scharfen Phasenübergang, bei dem die Abstände der Ketten sich vergrößern und die Beweglichkeit der

43 2.2 · Lipide

. Abb. 2.25. Assoziation von Proteinen mit Membranen. a Transmembranproteine; b periphere Membranproteine; c lipidverankerte Membranproteine; e blau = Kohlenhydratseitenketten

Membranlipide deutlich zunimmt. Diese Erhöhung der Membranfluidität wird auch als Schmelzen bezeichnet, die zum Schmelzen benötigte Temperatur als Schmelzpunkt. Der Schmelzpunkt biologischer Membranen liegt zwischen 10 °C und 40 °C. Er steigt mit zunehmender Kettenlänge und abnehmender Zahl der Doppelbindungen der Fettsäureanteile. Darüber hinaus wird der Schmelzpunkt durch Natrium-, Kalium- und Calciumionen sowie auch durch Membranproteine verändert. Cholesterin als wichtiger Bestandteil tierischer Membranen lagert sich zwischen die Alkanketten der Fettsäurereste, wobei seine OH-Gruppe in Richtung der hydrophilen Kopfgruppen der Phospholipide orientiert ist (. Abb. 2.24). Es verbreitert den Temperaturbereich, in dem das Schmelzen der Membranen erfolgt und erhöht so die Stabilität von Membranen. Von besonderem Interesse ist, dass eine Reihe hydrophober organischer Verbindungen sich in die Lipidphase biologischer Membranen einlagern kann und auf diese Weise deren Eigenschaften ändert. Zu ihnen gehören unter anderem eine Reihe gasförmiger Narkotika, z.B. das Halothan. Asymmetrie der Membran. Bei genauer Untersuchung der Lipidzusammensetzung von zellulären Membranen fällt auf, dass die einzelnen, eine Membranstruktur ausbildenden amphiphilen Lipide asymmetrisch verteilt sind. So findet sich z.B. in der Plasmamembran im äußeren Blatt der Doppelschicht bevorzugt Sphingomyelin, Glycosphingolipide und Phosphatidylcholin, im inneren Blatt dagegen Phosphatidylethanolamin, Phosphatidylserin und Phosphatidylinositol. Cholesterin findet man dagegen auf beiden Seiten der Plasmamembran. Ein spontaner Wechsel eines Membranlipids von einer Seite der Membran auf die andere ist ein sehr seltenes Ereignis. Für die Erzeugung der Asymmetrie der Lipidvertei-

lung in den Membranen sind spezifische z.T. ATP verbrauchende Proteine erforderlich (Flippasen, 7 Kap. 18.2.3). Interessanterweise besteht nicht nur eine asymmetrische Lipidverteilung zwischen den beiden Blättern der Lipiddoppelschicht, sondern auch innerhalb eines Blattes. Mit dem Begriff lipid rafts (engl. raft = Floß) werden Membranareale beschrieben, bei denen besonders das äußere Blatt der Membran reich an Sphingolipiden mit gesättigten langkettigen Fettsäuren ist. Dies erleichtert den Einbau von Cholesterin in diese Bereiche, wodurch sich eine dichtere Packung der Lipidphase gegenüber den anderen Bereichen der Membran ergibt (engl. liquid ordered in den rafts gegenüber liquid disordered in den anderen Bereichen). Rafts umfassen einige tausend Lipidmoleküle, haben einen Durchmesser von etwa 50 nm und schwimmen wie Inseln oder »Flöße« in der Lipidphase der Membran (. Abb. 2.24, 2.26). Einige Proteine haben eine hohe Affinität zu rafts. Zu ihnen gehören Caveolin (7 u.), Flotilline, GPI-verankerte Proteine, kleine und heterotrimere G-Proteine, Proteinkinasen der src-Familie, EGF-, PDGF-, Endothelin-Rezeptoren, Adapter-Proteine (Grb2), Proteinkinase C, und die p85-Untereinheit der PI 3-Kinase. Viele der mit rafts assoziierten Proteine sind an der Signaltransduktion beteiligt. Eine derzeit diskutierte Hypothese ist, dass besonders die Ligandenbindung an Rezeptoren zum Verschmelzen einzelner rafts und zur Bildung funktioneller Einheiten, sog. Signalosomen, führt. Wegen ihrer geringen Größe sind rafts schwer nachzuweisen. Für eine besondere Form der rafts trifft dies allerdings nicht zu. Sie enthalten ein als Caveolin bezeichnetes Protein, welches Cholesterin bindet und in der Membrandoppelschicht Haarnadelstrukturen ausbildet. Diese polymerisieren, was zur Ausbildung von Membraninvaginationen führt, die Caveolae genannt werden (. Abb. 2.26). Sie können unter Vesikelbildung abgeschnürt werden und sind an wichtigen zellbiologischen Phänome-

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44

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

nen wie z.B. Fettsäuretransport, Cholesterintransport, vesikulärer Transport (Endozytose, Transzytose), Signaltransduktion, Proliferation aber auch Zelltransformation beteiligt.

2

Infobox Analytik von Lipiden Da Lipide wasserunlöslich sind, erfordert ihre Extraktion aus Geweben und die anschließende Fraktionierung die Anwendung organischer Lösungsmittel. Esterbzw. Amid-gebundene Fettsäuren können durch Behandlung mit Alkali (Verseifung) abgetrennt und anschließend analysiert werden. Für die Auftrennung der einzelnen Komponenten von Lipidgemischen verwendet man Absorptionschromatographie, wobei die stationäre Phase sehr häufig Silikagel (Kieselsäure, SiOH4) ist. Als mobile Phase dienen Gemische unterschiedlicher organischer Lösungsmittel. Einzelne Lipide werden anhand ihrer Beweglichkeit bei derartigen chromatographischen Verfahren identifiziert, ein apparativ aufwendigeres, aber wesentlich empfindlicheres modernes Verfahren ist die Massenspektroskopie von Lipiden (7 Lehrbücher die biochemischen Analytik).

. Abb. 2.26. Organisation von rafts und Caveolae in Membranen. a rafts sind reich an Cholesterin und Sphingolipiden und bilden eine relativ geordnete Phase in der Lipiddoppelschicht. b Caveolin – Monomere verfügen über eine Bindungsdomäne für Cholesterin (blau), mit der sie in die Membran eingebaut werden und oligomerisieren. Dies führt zur Ausbildung von Caveolae und gegebenenfalls zur Abschnürung von Vesikeln (nach Razani et al. 2002)

In Kürze Lipide können nach dem Vorhandensein von Esterbindungen eingeteilt werden. Zu den Lipiden ohne Esterbindungen gehören 4 Fettsäuren sowie deren Abkömmlinge wie Prostaglandine, Thromboxane und Leukotriene 4 Isoprenlipide wie Cholesterin und seine Abkömmlinge, die Vitamine A, K sowie viele andere Naturstoffe Lipide mit Esterbindungen werden nach dem zugrunde liegenden Alkohol eingeteilt. Man unterscheidet: 4 Acylglycerine 4 Phosphoglyceride 4 Sphingolipide 4 Cholesterin-Ester

Wichtige Funktionen von Lipiden sind: 4 Bereitstellung von Substraten für die Energiegewinnung 4 Speicherung von Energie, vor allem in Form von Triacylglycerinen 4 Aufbau von Membranen, vor allem durch Phosphoglyceride, Sphingolipide und Cholesterin sowie 4 Bereitstellung von Signalmolekülen, vor allem Steroidhormonen, Prostaglandinen, Leukotrienen, Thromboxanen

45 2.3 · Aminosäuren

2.3

Aminosäuren

2.3.1 Klassifizierung und Funktionen ! Aminosäuren sind Derivate gesättigter Carbonsäuren.

Aminosäuren sind Derivate von Carbonsäuren, die an dem der Carboxylgruppe benachbarten D-C-Atom eine Aminogruppe tragen. Sie sind also α-Amino-Carbonsäuren (. Abb. 2.27). Der bei den einzelnen Aminosäuren variable Teil, der ihnen unterschiedliche Größe, chemische Reaktivität, Ladung und Molekularmasse verleiht, heißt Seitenkette und ist in . Abbildung 2.27 durch ein »R« gekennzeichnet. Da viele Aminosäuren schon lange bekannt sind, werden sie mit Trivialnamen bezeichnet, während die chemischen Bezeichnungen (z.B. D-Amino-Propionat für Alanin usw.) ungebräuchlich sind. Für die proteinogenen Aminosäuren (7 u.) sind Dreibuchstaben-Abkürzungen üblich, für die Notierung längerer Proteinsequenzen auch Einbuchstabensymbole (. Abb. 2.28). ! Aminosäuren sind Bausteine der Proteinbiosynthese, sie liefern Kohlenstoff für die Gluconeogenese, Stickstoff für Biosynthesen und bilden Signalmoleküle.

Aminosäuren haben vielfältige Stoffwechselfunktionen: 4 20 der über 100 bekannten Aminosäuren dienen bei allen bekannten Lebewesen zum Aufbau der Proteine. Diese Aminosäuren werden auch als proteinogene Aminosäuren bezeichnet. Viele Organismen benutzen darüber hinaus die erst während der Proteinbiosynthese aus Serin gebildete Aminosäure Selenocystein, sodass man eigentlich von 21 proteinogenen Aminosäuren sprechen muss 4 Die anderen Aminosäuren spielen im Stoffwechsel zwar eine wichtige Rolle, werden jedoch nicht für die Proteinbiosynthese verwendet. Derartige Aminosäuren werden auch als nichtproteinogene Aminosäuren bezeichnet 4 Der Abbau der meisten Aminosäuren liefert Kohlenstoff für die Biosynthese von Glucose (Gluconeogenese), weswegen diese auch als glucogene Aminosäuren bezeichnet werden. Ein kleinerer Teil der Aminosäuren, die ketogenen Aminosäuren, wird zu Zwischenprodukten abgebaut, die nicht für die Gluconeogenese, wohl aber für die Biosynthese von Fettsäuren, Ketonkörpern oder Cholesterin verwendet werden können

. Abb. 2.27. Allgemeine Struktur der α-Aminosäuren. (R = Seitenkette)

4 Durch Decarboxylierung entstehen aus Aminosäuren die entsprechenden Amine (7 Kap. 13.3.4), die häufig als Signalmoleküle dienen 4 Aminosäuren sind Stickstoff-Lieferanten für die Biosynthese N-haltiger Verbindungen

2.3.2 Proteinogene Aminosäuren Mit dem Begriff proteinogene Aminosäuren werden diejenigen Aminosäuren bezeichnet, die für die Proteinbiosynthese verwendet werden (nicht die in Proteinen vorkommenden Aminosäuren, da diese posttranslational modifiziert werden können). Proteinogene Aminosäuren, die in unterschiedlicher Häufigkeit in Proteinen vorkommen, zeichnen sich durch ein breites Spektrum unterschiedlicher Seitenketten aus. . Abbildung 2.28 sowie . Tabelle 2.7 fassen wichtige Eigenschaften dieser Aminosäuren zusammen. ! Die Einteilung der proteinogenen Aminosäuren erfolgt nach den Eigenschaften ihrer Seitenketten.

Nach Aufbau und Eigenschaften der Seitenketten, die weitere funktionelle Gruppen (OH-, SH-, Carboxyl- oder Guanidinogruppen) enthalten können, werden proteinogene Aminosäuren (. Abb. 2.28) eingeteilt in: Neun Aminosäuren mit apolaren Seitenketten. Zu den

Aminosäuren mit apolaren Seitenketten gehören: 4 Aminosäuren mit aliphatischen Seitenketten: Glycin, Alanin, Valin, Leucin, Isoleucin, Methionin und Prolin. Diese leiten sich direkt von den entsprechenden Fettsäuren ab (Glycin ist D-Amino-Acetat, Alanin D-Amino-Propionat usw.) 4 Aminosäuren mit aromatischen Seitenketten: Phenylalanin und Tryptophan Sieben Aminosäuren mit ungeladenen polaren Seitenketten. Zu dieser Gruppe von Aminosäuren gehören:

4 Asparagin und Glutamin mit einer Säureamid-Gruppe in der Seitenkette 4 Serin, Threonin und Tyrosin mit einer OH-Gruppe in der Seitenkette 4 Cystein und Selenocystein mit einer SH- bzw. SeHGruppe in der Seitenkette Fünf Aminosäuren mit geladenen polaren Seitenketten.

Hierzu gehören. 4 Aspartat und Glutamat mit einer Carboxylgruppe in der Seitenkette 4 Histidin mit einer Imidazolgruppe in der Seitenkette 4 Lysin mit einer ε-Aminogruppe in der Seitenkette, und 4 Arginin mit einer Guanidinogruppe in der Seitenkette

2

46

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

2

. Abb. 2.28. Die proteinogenen Aminosäuren. Die Aminosäuren sind nach chemischen Eigenschaften ihrer Seitenketten geordnet.

Unter den Formeln stehen jeweils die Trivialnamen sowie die 3- und 1Buchstaben-Abkürzungen

! Die Hydrophobizität der Aminosäure-Seitenketten ist eine wesentliche Determinante für Struktur und Funktion von Proteinen

+4.5 für die hydrophobste Aminosäure Isoleucin bis –4.5 für die hydrophilste Aminosäure Arginin. Bei einem Vergleich mit . Abbildung 2.28 fällt auf, dass sich 6 der 9 Aminosäuren mit apolaren Seitenketten durch einen positiven Hydropathie-Index auszeichnen, also besonders hydrophob sind. Umgekehrt sind alle 5 Aminosäuren mit geladenen Seitenketten besonders hydrophil. Proteinregionen, an denen diese Aminosäuren gehäuft vorkommen, werden für Wechselwirkungen mit einer wässrigen Umgebung verantwortlich sein, Regionen mit hydrophoben Aminosäuren werden dagegen bevorzugt an Stellen des Proteins lokalisiert sein, an denen Wasser keinen Zutritt haben soll.

Für Struktur und biologische Aktivität von Proteinen ist deren Wechselwirkung mit dem meist wässrigen Lösungsmittel von großer Bedeutung. Diese wiederum hängt wesentlich von der Art und Sequenz der Seitenketten der Aminosäuren ab, aus denen sich das Protein zusammensetzt. In . Tabelle 2.7 sind 20 proteinogene Aminosäuren nach ihrem Hydropathie-Index geordnet. Dieser ist ein relatives Maß für Hydrophobizität einer Aminosäure. Er variiert von

47 2.3 · Aminosäuren

. Tabelle 2.7. Wichtige Eigenschaften von 20 proteinogenen Aminosäuren Aminosäure

Abkürzungen

Molekülmasse (Da)

Häufigkeit in Proteinen (%)

pI

HydropathieIndex

Isoleucin

Ile

I

131

5,8

6,02

4,5

Valin

Val

V

117

6,6

5,97

4,2

Leucin

Leu

L

131

9,5

5,98

3,8

Phenylalanin

Phe

F

165

4,1

5,48

2,8

Cystein

Cys

C

121

1,6

5,07

2,5

Methionin

Met

M

149

2,4

5,74

1,9

Alanin

Ala

A

89

7,6

6,02

1,8

Glycin

Gly

G

75

6,8

5,97

–0,4

Threonin

Thr

T

119

5,6

5,87

–0,7

Serin

Ser

S

105

7,1

5,68

–0,8

Tryptophan

Trp

W

204

1,2

5,89

–0,9

Tyrosin

Tyr

Y

181

3,2

5,66

–1,3

Prolin

Pro

P

115

5,0

6,48

–1,6

Histidin

His

H

155

2,2

7,59

–3,2

Asparagin

Asn

N

132

4,3

5,41

–3,5

Glutamin

Gln

Q

146

3,9

5,65

–3,5

Aspartat

Asp

D

133

5,2

2,97

–3,5

Glutamat

Glu

E

147

6,5

3,22

–3,5

Lysin

Lys

K

146

6,0

Arginin

Arg

R

174

5,2

9,74 10,8

–3,9 –4,5

Die Aminosäuren sind in der Tabelle nach ihrem Hydropathie-Index geordnet. Dieser variiert zwischen 4,5 für die Aminosäure mit der größten Hydrophobizität und –4,5 für diejenige mit der geringsten (Daten nach Kyte, J. and Doolittle, R.F., J. Mol. Biol., 157: 105–132 (1982).

! Außer Glycin besitzt jede Aminosäure wenigstens ein asymmetrisches Kohlenstoffatom.

Bei allen Aminosäuren mit Ausnahme von Glycin trägt das D-C-Atom vier unterschiedliche Liganden und bildet deswegen ein Asymmetriezentrum. Dies ist in . Abbildung 2.29 am Beispiel des L- bzw. D-Alanins dargestellt. Aufgrund der tetraedrischen Anordnung der Bindungsorbitale am D-CAtom kommen zwei Formen des Alanins vor, die untereinander nicht durch Spiegeln zur Deckung gebracht werden können. Beim L-Alanin steht in der üblichen Darstellungsweise die Aminogruppe links vom D-C-Atom, wenn die Carboxylgruppe nach oben zeigt. Alle proteinogenen Aminosäuren sind L-α-Aminosäuren. Es ist nicht bekannt, warum von allen Organismen der Erde für den Proteinaufbau nur L-D-Aminosäuren (und für den Aufbau von Nucleinsäuren nur Nucleotide mit Zuckern aus der D-Reihe) verwendet werden. Einige D-D-Aminosäuren (D-Alanin, D-Glutamin) kommen in bakteriellen Zellwänden und außerdem als Bestandteile mancher Antibiotika und Pilzgifte vor.

. Abb. 2.29. Die beiden optischen Isomeren der Aminosäure Alanin

2

48

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

2.3.3 Nichtproteinogene Aminosäuren

2

Als nicht proteinogene Aminosäuren werden diejenigen Aminosäuren bezeichnet, die nicht unmittelbar für die Biosynthese von Proteinen verwendet werden. Im Prinzip lassen sie sich in Aminosäuren einteilen, die 4 im Proteinverband modifiziert werden und nach Proteinhydrolyse isoliert werden können sowie 4 solche Aminosäuren, die bei Stoffwechselreaktionen auftreten, die nichts mit Proteinbiosynthese zu tun haben ! Einzelne Aminosäuren werden nach dem Einbau in Proteine derivatisiert.

Eine Reihe von Aminosäuren sind Derivate der proteinogenen Aminosäuren, die erst nach deren Einbau in Proteine durch entsprechende Modifikationen gebildet werden. Sie können danach durch chemische Verfahren isoliert werden. Beispiele hierfür sind (. Abb. 2.30): 4 die nach Phosphorylierung der Hydroxylgruppe entstehenden Aminosäuren Phosphoserin und Phosphothreonin (nicht dargestellt)

4 das durch Phosphorylierung der Hydroxylgruppe entstehende Phosphotyrosin 4 das durch Hydroxylierung von Lysin bzw. Prolin entstehende δ-Hydroxylysin bzw. γ-Hydroxyprolin 4 das durch Methylierung von Histidin entstehende 3Methylhistidin 4 das durch J-Carboxylierung entstehende γ-Carboxyglutamat Insgesamt sind heute über 100 Aminosäurederivate in Proteinen bekannt. Die meisten derartigen Seitenkettenmodifikationen sind irreversibel. Reversible Modifikationen haben meist regulatorische Bedeutung, z.B. die Phosphorylierung von Serin-, Threonin- und Tyrosinresten in Proteinen (7 Kap. 25). ! Viele nichtproteinogene Aminosäuren haben wichtige Stoffwechselfunktionen.

In der . Tabelle 2.8 findet sich eine Auswahl aus den über 100 Aminosäuren, die nicht in Proteine eingebaut werden, sondern Stoffwechselfunktionen haben. Es handelt sich sehr häufig um Derivate der proteinogenen Aminosäuren, welche vor allem eine Rolle spielen 4 bei der Biosynthese von Harnstoff (7 Kap. 13.5.2) 4 als Zwischenprodukte im Stoffwechsel der proteinogenen Aminosäuren (7 Kap. 13.4) und 4 als Vorstufen niedermolekularer Verbindungen (Pigmente, biogene Amine (7 Kap. 13.3.4))

2.3.4 Säure-Baseneigenschaften

von Aminosäuren ! Aminosäuren sind Ampholyte.

Da Aminosäuren Protonen aufnehmen und abgeben können, verhalten sie sich wie Basen und Säuren und zählen damit zur Gruppe der Ampholyte: 4 die Aminogruppen von Aminosäuren sind schwache Basen. In aliphatischen Aminen z.B. der Seitenkette von Lysin (R - NH2 + H +  R - NH3+ ) besitzen sie einen pK-Wert von etwa 10,5 (Definition des pK-Wertes 7 Kap. 1.2.5 (. Tabelle 2.9)) 4 Carboxylgruppen von Aminosäuren sind schwache Säuren. Als Endgruppe von Carbonsäuren, z.B. Seitenkette von Glutamat (R - COOH  R - COO − + H + ) weisen sie einen pK-Wert von etwa 4,5 auf 4 Bei D-Amino-Carbonsäuren liegen die Amino- und Carboxylgruppe am selben C-Atom. Durch die Wechselwirkung der beiden funktionellen Gruppen wird die Azidität der Carboxylgruppe auf pK-Werte zwischen 1,7 und 2,4 erhöht und die Basizität der Aminogruppe auf pK-Werte zwischen 9 und 10,5 erniedrigt . Abb. 2.30. Derivate proteinogener Aminosäuren

2

49 2.3 · Aminosäuren

. Tabelle 2.8. Beispiele nichtproteinogener D- (sowie E- und J-) Aminosäuren Aminosäure (Trivialname) mit chemischen Namen, Entstehung und Bedeutung im Zellstoffwechsel

Strukturformel

Ornithin (α, δ-Aminovalerianat) entsteht durch Abspaltung der Guanidinogruppe von Arginin; ist Zwischenprodukt bei der Harnstoffbiosynthese

–

Homocystein (α-Amino-γ-Mercaptobutyrat) entsteht durch Abspaltung der Methylgruppe von Methionin; ist Zwischenprodukt des Methioninstoffwechsels

–

+

OOC – CH – CH2 – CH2 – CH2 – NH3 +

NH3 OOC – CH – CH2 – CH2 – SH +

NH3

5-Hydroxytryptophan (α-Amino-β-(5-hydroxy)-Indolylpropionat) entsteht durch Hydroxylierung von Tryptophan; ist Vorstufe von Serotonin, einem Gewebshormon

OH

–

OOC – CH – CH2 +

NH3

3,4-Dihydroxyphenylalanin (α-Amino-β-(3,4-dihydroxy)-Phenylpropionat) entsteht durch Hydroxylierung von Tyrosin; ist Vorstufe von Melanin, einem Pigment in den Haaren und der Haut

N H

–

OOC – CH – CH2

OH

+

NH3 OH

β-Alanin (β-Aminopropionat) entsteht durch Abspaltung der α-Carboxylgruppe von Aspartat; ist Teil von Pantothensäure (Coenzym A)

CH2 – CH2 – COO

γ-Aminobutyrat entsteht durch Abspaltung der α-Carboxylgruppe von Glutamat; ist Überträgerstoff im Gehirn

CH2 – CH2 – CH2 – COO–

–

+

NH3

+

NH3

. Tabelle 2.9. pK-Werte und isoelektrische Punkte von Alanin, Aspartat und Lysin Aminosäure

Art der Seitenkette

pK-Werte

Isoelektrischer Punkt = arithmetisches Mittel von +

+

α-COOH

α-NH3

γ-COOH

ε-NH3

Aliphatisch

2,35

9,69

–

–

α-COOH und D-NH3

Aspartat

Carboxylgruppe enthaltend

2,09

9,82

3,86

–

α-COOH und γ-COOH = 2,97

Lysin

Aminogruppe enthaltend

2,18

8,95

–

10,53

α-NH3+ und ε-NH3

Alanin

Außer den Amino- und Carboxylgruppen kommen als weitere dissoziable Gruppen vor 4 die Sulfhydrylgruppe von Cystein (R - SH  RS − + H + ; pK - Wert 8 − 9) 4 die Hydroxylgruppe von Tyrosin (R - OH  RO − + H + ; pK - Wert 10,1) 4 die Guanidinogruppe von Arginin (R = NH2 +  R = NH + H + ; pK - Wert 12, 5) 4 die Iminogruppe des Pyrrolidinringes von Prolin (R = NH2 +  R = NH + H + ; pK - Wert 10, 6) Die pK-Werte der genannten funktionellen Gruppen sind weit vom physiologischen pH-Wert entfernt, weswegen diese Gruppen nur in einer Form, protoniert oder nicht protoniert vorliegen. Anders ist dies beim Histidin, da es als einzige Aminosäure eine dissoziable Gruppe besitzt, deren pK-Wert etwa 6 beträgt und damit in die Nähe des physiologischen pH-Bereiches kommt. Die Imidazolseitenkette des Histidins ändert ihren Dissoziationsgrad bei physiologischen pH-Werten und nimmt daher in Proteinen eine Sonderstellung ein, die sich an der Beteili-

+

+

= 6,02

= 9,74

gung an vielen enzymatischen Reaktionen widerspiegelt (7 Kap. 4.3). Aus der Henderson-Hasselbalch-Gleichung (7 Kap. 1.2.6) kann bei Kenntnis des pK-Wertes für jeden pH-Wert der Dissoziationsgrad einer schwach sauren Gruppe errechnet werden (. Abb. 2.31). Im Fall des Alanins liegen 4 bei pH 1,0 beide funktionellen Gruppen (pK-Werte in . Tabelle 2.9) in der protonierten Form vor, Alanin ist also ein Kation 4 Bei pH 6,02 ist die Carboxylgruppe vollständig dissoziiert und deprotoniert, die Aminogruppe bleibt dagegen unverändert protoniert. In dieser Form wird eine Aminosäure auch als Zwitterion bezeichnet. Der pH-Wert, in dem die Aminosäure keine Nettoladung trägt und deshalb auch nicht im elektrischen Feld wandert, heißt isoelektrischer Punkt (IP). Bei Alanin ist der IP das arithmetische Mittel der pK-Werte der Carboxyl- und Aminogruppe. Die isoelektrischen Punkte anderer Aminosäuren finden sich in . Tabelle 2.7 4 Bei pH 11,0 befinden sich beide Gruppen in deprotonierter Form, Alanin liegt also als Anion vor

50

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

2

. Abb. 2.31. Dissoziationsverhalten der Carboxyl- und Aminogruppen von Alanin, Aspartat und Lysin bei verschiedenen pH-Werten

Aus . Abbildung 2.31 und . Tabelle 2.7 geht weiter hervor, dass Aminosäuren bei physiologischem pH-Wert (in Körpersäften pH 7,4, im Cytosol der Körperzellen pH 6,0–7,0) überwiegend die geladenen funktionellen Gruppen enthalten. Deshalb wird diese Form für die Darstellung der Aminosäuren gewählt. ! Die Titrationskurven für Aminosäuren setzen sich aus denen ihrer funktionellen Gruppen zusammen.

Die Titrationskurve von Alanin ist aus den Titrationskurven der Carboxyl- und Aminogruppe dieser Aminosäure zusammensetzt, die jeweils den charakteristischen Verlauf schwacher Säuren zeigen (. Abb. 2.32). Aminosäuren mit mehreren dissoziablen Gruppen zeigen entsprechend kompliziertere Kurven. Aus . Abbildung 2.31 und 2.32 sowie . Tabelle 2.9 geht hervor, dass die Dissoziation der beiden Carboxylgruppen von Aspartat in einem Bereich zwischen pH 1 und pH 6,6 abläuft. Bei diesem Vorgang ändert sich der Dissoziationsgrad der Aminogruppe nicht, weswegen der isoelektrische Punkt von Aspartat dem arithmetischen Mittel der beiden pK-Werte der Carboxylgruppen entspricht. Für Lysin gilt das Entsprechende. In dem Bereich, in dem die Dissoziation der Aminogruppen stattfindet, bleibt die D-Carboxylgruppe in der dissoziierten Form. Sie nimmt deshalb keinen Einfluss auf den isoelektrischen Punkt. ! Viele Eigenschaften von Aminosäuren sind pH-abhängig.

Die Protonierung funktioneller Gruppen von Aminosäuren ist von Bedeutung für: 4 chemische und biochemische Reaktionen, die Aminosäuren eingehen können, beispielsweise bei Nachweismethoden

4 die Trennung von Aminosäuregemischen durch Chromatographie an Ionenaustauscherharzen und vor allem 4 die Struktur und die Funktion von Proteinen (7 Kap. 3 und 4) Infobox Nachweisreaktionen von Aminosäuren Bei Störungen des Aminosäurestoffwechsels sowie proteinanalytischen Fragestellungen kommt es darauf an, das Vorhandensein und die Konzentration einzelner Aminosäuren zu bestimmen. Nachweisverfahren für Aminosäuren können 4 spezifisch für einzelne Aminosäuren sein oder 4 die Summe aller in einer Probe vorhandenen Aminosäuren erfassen Nur für sehr wenige Aminosäuren existieren spezifische Nachweisverfahren, so z.B. der Nachweis der Phenolgruppe im Tyrosin oder der Sulfhydrylgruppe im Cystein. Wichtiger als die spezifischen Nachweisverfahren für Aminosäuren sind solche, die auf der Derivatisierung der funktionellen Gruppen am D-C-Atom beruhen. In aller Regel handelt es sich um Reaktionen mit der -NH3+-Gruppe, die zu fotometrisch nachweisbaren Produkten führt. Besondere Bedeutung haben die Umsetzung mit Dansylchlorid bzw. Ninhydrin (. Abb. 2.33). Die Verwendung jeder der beiden Methoden zum quantitativen Nachweis einzelner Aminosäuren setzt die Abtrennung dieser Aminosäuren aus den meist vorliegenden Aminosäuregemischen voraus.

51 2.3 · Aminosäuren

Infobox Chromatographische Methoden zur Trennung von Aminosäuren Chromatographische Verfahren beruhen auf der unterschiedlichen Affinität der zu trennenden Stoffe eines Gemisches zu zwei verschiedenen Phasen, die nicht oder nur im begrenzten Umfang miteinander mischbar sind. Eine der Phasen, die stationäre Phase, ist an einen festen Träger gebunden, die andere mobile Phase ist in Bewegung. Dadurch stellt sich immer wieder ein neues Gleichgewicht zwischen beiden Phasen ein, was zu einer Trennung des Stoffgemisches führt. Je nach Art der Kräfte, die bei der Entstehung der Gleichgewichte wirken, lassen sich Verteilungs-, Absorptions-, Ionenaustausch- und Hohlraumdiffusionschromatographie unterscheiden, nach der Anordnung des Trägermaterials Dünnschicht- bzw. Säulenchromatographie (. Abb. 2.34). Die Trennung von Aminosäuregemischen erfolgt meist durch Ionenaustauschchromatographie oder Umkehrphasen-Flüssigkeitschromatographie. Ionenaustauschchromatographie. Ionenaustauscher sind polymere Kunstharze, die aus Elektrolytlösungen Ionen im Austausch gegen eigene Ionen gleicher Ladung aufnehmen und bei Änderung des pH-Wertes der Umgebung wieder abgeben können. Sie finden unter anderem Anwendung bei der Wasserenthärtung oder in der klinischen Medizin bei der Behandlung von Störungen des Ionenhaushaltes (7 Kap. 28.5.2). Zur Trennung von Aminosäuregemischen werden meist Kunstharze mit Sulfonsäuregruppen (HSO3–) benutzt. Wegen ihrer negativen Ladung können sie mit Kationen Salze bilden und heißen deswegen auch Kationenaustauscher. Da Aminosäuren im sauren . Abb. 2.32. Titrationskurven der Aminosäuren Alanin, Aspartat und Lysin

. Abb. 2.33. Derivatisierung von Aminosäuren mit Dansylchlorid (a) bzw. Ninhydrin (b). Die entstehenden Derivate können fluorimetrisch bzw. colorimetrisch nachgewiesen werden

6

2

52

2

Kapitel 2 · Kohlenhydrate, Lipide und Aminosäuren

. Abb. 2.34. Prinzip der Verteilungschromatographie. Das Beispiel stellt die Verteilungschromatographie als Dünnschichtchromatographie dar. Das Stoffgemisch wird zunächst auf die Dünnschichtplatte mit der stationären Phase aufgetragen und anschließend in einen Trog mit der mobilen Phase gestellt. Diese wandert nun an der Dünnschichtplatte hoch, wobei die verschiedenen Komponenten des Substanzgemisches je nach ihrer Affinität zur stationären Phase langsamer als die Lösungsmittel transportiert und auf diese Weise aufgetrennt werden

Milieu als Kationen vorliegen (7 o.) binden sie an Kationenaustauscher. Durch Elution mit Puffern von steigendem pH und steigender Salzkonzentration können Aminosäuren schrittweise von dem Kationenaustauscher eluiert werden. Sie nehmen nämlich bei jeweils für jede Aminosäure typischen pH-Werten die Zwitterionenform an, bei der sie vom Ionenaustauscher nicht mehr gebunden werden. Die schrittweise eluierten Aminosäuren werden meist mit der Ninhydrinmethode nachgewiesen. Für die Auftrennung von Aminosäuregemischen durch Ionenaustauschchromatographie stehen entsprechende Automaten zur Verfügung. Umkehrphasenflüssigkeitschromatographie. Die Umkehrphasenflüssigkeitschromatographie (englisch: reversed phase liquid chromatography (RPLC)) ist wegen der besonderen Trennschärfe und Empfindlichkeit ein sehr gut etabliertes Verfahren zur Auftrennung von Aminosäuregemischen. Bei der RPLC dienen in eine Chromatographiesäule gepackte Kieselgelteilchen, an die hydro-

phobe Substanzen covalent gebunden sind, als Träger der stationären Phase. Die mobile Phase besteht aus einer pufferhaltigen wässrigen Lösung, die mit einem wasserlöslichen organischen Lösungsmittel gemischt ist. Das Aminosäuregemisch wird in wässriger Phase auf die Trennsäule gegeben. In Abhängigkeit von der jeweiligen Hydrophobizität der Aminosäureseitenkette werden Aminosäuren in der stationären Phase zurück gehalten. Die Auftrennung kommt dadurch zustande, dass sich die Aminosäuren auf Grund ihrer hydrophoben Eigenschaften unterschiedlich in den beiden Phasen verteilen und damit mit unterschiedlicher Geschwindigkeit durch die Säule wandern. Die Verteilung der Aminosäuren kann zusätzlich dadurch beeinflusst werden, dass der hydrophile Charakter der mobilen Phase während des Laufes durch kontinuierliche Erhöhung des Anteils des organischen Lösungsmittels verändert wird. Für die Auftrennung von Aminosäuregemischen durch RPLC werden die Aminosäuren meist vor der Auftrennung derivatisiert, z.B. mit Phenylisothiocyanat (7 Kap. 3.2.3)

In Kürze Formal sind Aminosäuren Derivate von Fettsäuren, die am D-C-Atom eine Aminogruppe tragen. Nach der Wasserlöslichkeit ihrer Seitenketten kann zwischen hydrophilen und hydrophoben Aminosäuren unterschieden werden. Bei neutralem pH liegt die Carboxylgruppe von Aminosäuren deprotoniert als Anion und die Aminogruppe protoniert als Kation vor. Nichtessentielle Aminosäuren können im Organismus synthetisiert werden, essentielle Aminosäuren jedoch nicht, weswegen die letzteren mit der Nahrung zugeführt werden müssen.

Die Funktionen von Aminosäuren sind vielfältig: 4 Die 20 proteinogenen Aminosäuren stellen die Bausteine aller Proteine dar 4 Nichtproteinogene Aminosäuren entstehen entweder durch Modifikation von Aminosäureresten in Proteinen bzw. nehmen an den verschiedensten StoffwechselVorgängen teil (Harnstoffzyklus) 4 Aminosäuren dienen als Stickstoff-Lieferanten für eine Reihe von Biosynthesen 4 Durch Decarboxylierung von Aminosäuren entstehen Amine, die als Signalmoleküle dienen

53 Literatur

Literatur Bücher und Monographien Ernst B, Hart GW, Sinay B (2000) (eds) Carbohydrates in Chemistry and Biology. Vol I–IV, Wiley VCH Haines AH (2003) Carbohydrates: Structure and Biology VCH Verlagsgesellschaft Katsaras J, Gutberlet T (2001) Lipid Bilayers: Structure and Interactions. Springer Vance DE, Jean E, Vance JE (1996) (eds): Biochemistry of Lipids, Lipoproteins and Membranes. Elsevier Varki A, Cummings R, Esko J, Freeze H, Hart G, Marth J (2002) Essentials of Glycobiology. Cold Spring Harbor Laboratory Press Übersichten und Originalarbeiten Bernfield M et al. (1999) Functions of cell surface heparan sulphate proteoglycans. Annu Rev Biochem 68:729–777 Iozzo RV (1998) Matrix proteoglycans: From molecular design to cellular function. Annu Rev Biochem 67: 609-652

Lagerholm BC, Weinreb GE, Jacobson K, Thompson NL (2005) Detecting microdomains in intact cell membranes. Annu Rev Phys Chem 56:309–336 Le Roy C, Wrana JL (2005) Clathrin- and non-clathrin-mediated endocytic regulation of cell signalling. Nat Rev Mol Cell Biol 6(2):112–26 Pike LJ (2004) Lipid rafts: heterogeneity on the high seas. Biochem J 378:281–292 Razani B, Woodman SE, Lisanti MP (2002) Caveolae: From cell biology to animal physiology. Pharmacol Rev 54:431–467 Simons K, Ehehalt R (2002) Cholesterol, lipid rafts, and disease. J Clin Invest 110:597–603 Simons K, Ikonen E (2000) How cells handle cholesterol. Science 290: 1722–1726 Simons K, Vaz WL (2004) Model systems, lipid rafts, and cell membranes. Annu Rev Biophys Biomol Struct 33:269–295 Stadtman TC (1996) Selenocysteine. Annu Rev Biochem 65:83–100 Woods RJ (1995) Three-dimensional structures of oligosaccharides. Curr Opin Struct 5:591–598 Links im Netz 7 www.lehrbuch-medizin.de/biochemie

2

3 3 Proteine Hans R. Kalbitzer, Petro E. Petrides

3.1

Klassifizierung und Eigenschaften von Proteinen – 56

3.1.1 Klassifizierung von Proteinen – 56 3.1.2 Die Peptidbindung – 57 3.1.3 Protonierungs-Deprotonierungsgleichgewichte in Proteinen

3.2

– 58

Charakterisierung von Proteinen – 59

3.2.1 Isolierung von Proteinen – 59 3.2.2 Bestimmung von Molekülmasse und isoelektrischem Punkt 3.2.3 Bestimmung von Aminosäurezusammensetzung und Aminosäuresequenz – 65

– 62

3.3

Die räumliche Struktur der Proteine – 69

3.3.1 3.3.2 3.3.3 3.3.4 3.3.5

Primärstruktur und Peptidbindung – 69 Sekundärstrukturen von Proteinen – 70 Tertiärstruktur von Proteinen – 75 Quartärstruktur von Proteinen – 78 Die Strukturebenen und Eigenschaften von Myoglobin und Hämoglobin – 79

3.4

Denaturierung, Faltung und Fehlfaltung von Proteinen – 86

3.4.1 Denaturierung und Faltung 3.4.2 Pathobiochemie – 89

3.5

– 86

Methoden zur Strukturbestimmung von Proteinen – 90

3.5.1 Röntgenkristallographie – 90 3.5.2 Kernresonanzspektroskopie – 91

3.6

Synthese von Peptiden und Proteinen – 92

3.6.1 Chemische Peptidsynthese – 92 3.6.2 Gentechnische Proteinsynthese – 93

3.7

Genomik und Proteomik – 94

3.7.1 Funktionelle Proteomik – 94 3.7.2 Protein-Evolution – 95

Literatur – 98

56

Kapitel 3 · Proteine

> > Einleitung

3

Proteine machen in vielen Zellen, Geweben und Organen mit mehr als 20% des Feuchtgewichts den bedeutendsten Anteil organischer Makromoleküle aus. Sie bestehen immer aus linearen Ketten ihrer Grundbausteine, der Aminosäuren. Das menschliche Genom enthält etwa 30.000 für Proteine codierende Gene. Allerdings ist die Zahl der Proteine des Menschen wohl wesentlich höher, da alternatives Spleißen bei den bisherigen Auswerteverfahren nicht ausreichend berücksichtigt werden kann. Proteine kommen häufig in Großfamilien vor, deren Mitglieder verwandt sind, aber spezialisierte Funktionen besitzen. Proteine sind als Membran- und Cytoskelett-Bausteine für die Zellarchitektur verantwortlich und bestimmen durch die Zusammensetzung der extrazellulären Matrix Aufbau und Funktion von Geweben. Sie sorgen dafür, dass chemische Reaktionen katalysiert und reguliert werden (Enzyme), übermitteln Signale von Zelle zu Zelle (Hormone und Cytokine), erkennen Signale und leiten sie dem Zellinneren zu (Rezeptoren und Signaltransduktionssysteme), transportieren schlecht wasserlösliche Stoffe wie Sauerstoff (Hämoglobin) oder Eisen (Transferrin) und leiten oder pumpen Ionen durch Zellmembranen (Ionenkanäle und -pumpen). Die enorme strukturelle und funktionelle Vielfalt der Proteine kommt durch die unterschiedliche Kombination der 20 proteinogenen Aminosäuren über Peptidbindungen zu Polymeren und die Assoziation mit verschiedenen Nicht-Proteinbestandteilen (wie Metallionen) zustande. Die Aminosäuresequenz bestimmt auch die räumliche Struktur (Konformation) der Proteine, die normalerweise nicht starr ist und sich verändernden Anforderungen anpassen kann.

3.1

Klassifizierung und Eigenschaften von Proteinen

3.1.1 Klassifizierung von Proteinen Der menschliche Körper verfügt über etwa 30000 Gene für verschiedene Proteine, die u.a. für Struktur, Katalyse, Informationsvermittlung, Abwehr und Motilität verantwortlich sind. Eine Einteilung dieser großen und heterogenen Gruppe von Makromolekülen kann nach den verschiedensten Gesichtspunkten erfolgen. ! Einfache Proteine bestehen nur aus Aminosäuren, zusammengesetzte Proteine enthalten einen Nichtproteinanteil.

Man kann grundsätzlich unterscheiden zwischen einfachen Proteinen, deren hydrolytische Spaltung nur L-D-Aminosäuren oder deren Derivate ergibt, und zusammengesetzten Proteinen, die zusätzlich noch einen Nichtproteinanteil, die sog. prosthetische Gruppe, enthalten. Bei den zusammengesetzten Proteinen bestimmt der Nichtproteinanteil die Bezeichnung. So enthalten 4 Nucleoproteine Nucleinsäuren 4 Glycoproteine Zuckerketten 4 Chromoproteine chromophore Gruppen, z.B. Porphyrine 4 Lipoproteine Lipide und 4 Metalloproteine Metalle Der Nichtproteinanteil, dessen Verbindung mit dem Protein covalenter oder nichtcovalenter Natur sein kann, variiert bei den zusammengesetzten Proteinen sehr stark (90% bei den VLDL-Lipoproteinen, 5% bei einzelnen Glycoproteinen)

! Fibrilläre und globuläre Proteine unterscheiden sich durch ihre Gestalt.

Globuläre Proteine. Eine grobe Einteilung der Proteine lässt sich nach der Teilchengestalt vornehmen. Globuläre Proteine sind kompakt gebaut und haben eine kugelähnliche Form. Das Achsenverhältnis sollte geringer als 10:1 sein, gewöhnlich findet man kleinere Achsenverhältnisse ( 0, kommt es nur dann zum Reaktionsablauf, wenn dem System Wärmeenergie zugeführt wird. Es handelt sich um eine endotherme Reaktion ! Zweiter Hauptsatz der Thermodynamik: Die Entropie des Universums nimmt zu.

Entropie. Der erste Hauptsatz der Thermodynamik liefert mit der Energiebilanz eine Rahmenbedingung für physikalische und chemische Prozesse. Er trifft keine Aussage darüber, ob eine Reaktion stattfindet oder nicht und welcher von vielen möglichen Zuständen gleicher Energie der wahrscheinlichste ist. Der im 2. Hauptsatz der Thermodynamik eingeführte Begriff der Entropie hat sich als ein wertvolles Instrument zur Beantwortung dieser Fragen erwiesen. In der statistischen Thermodynamik ist die Entropie ein Maß für die Wahrscheinlichkeit des Auftretens eines Zustandes. Isolierte Systeme streben eine möglichst gleichmäßige Verteilung ihrer Energie auf alle möglichen mikroskopischen Bewegungsformen an. Die Energie verteilt sich dabei auf dem Weg zum thermodynamischen Gleichgewicht möglichst »unordentlich« auf die Freiheitsgrade des Systems.

. Abb. 4.2. Zunahme der Entropie in einem thermodynamisch geschlossenen System

Die Entropie eines isolierten Systems bleibt bei völlig reversiblen Prozessen konstant. Bei irreversiblen Prozessen kommt es zu einer Entropiezunahme. Prominente Beispiele für irreversible Prozesse, die von einer Zunahme an Entropie angetrieben werden, sind der Wärmeaustausch zwischen zwei Körpern verschiedener Temperatur oder der Konzentrationsausgleich zweier Lösungen durch Diffusion. Der letztgenannte Prozess ist in . Abb. 4.2 illustriert. In dem durch eine permeable Membran unterteilten Gefäß kommt es zu einem Fluss der gelösten Moleküle vom Ort hoher Konzentration in Richtung niedriger Konzentration. Obwohl es keinen Verstoß gegen den 1. Hauptsatz der Thermodynamik darstellen würde, findet niemals eine spontane (freiwillige) Anreicherung der Moleküle in einer Hälfte des Gefäßes statt. Der spontane und irreversible Konzentrationsausgleich geht mit einer Zunahme der Entropie des Systems einher, die dann ihren Maximalwert erreicht, wenn die gelösten Moleküle gleichmäßig im Lösungsraum beider Kammern verteilt sind. Das Universum stellt ein isoliertes System dar. Betrachtet man ein in das Universum eingebettetes offenes System, so kann man die durch einen Prozess im offenen System verursachte Entropieänderung in einen Anteil, der die Veränderung der Entropie im offenen System und einen weiteren Anteil, der die Veränderungen in der Umgebung beschreibt, zerlegen: (2) Genau dann, wenn 'Sgesamt>0 ist, kann der Prozess spontan ablaufen. Die Entropie der Umgebung steigt dabei vor allem durch die von dem System abgegebene Wärme. ! Lebewesen sind notwendigerweise offene Systeme.

102

4

Kapitel 4 · Bioenergetik und Enzymologie

Die Entropie eines offenen Systems kann dann abnehmen, wenn der Export von Entropie pro Zeiteinheit den Betrag der Entropieproduktion im Inneren übersteigt. Ein Entropieexport kommt aber nicht spontan zustande, sondern erfordert eine »Entropiepumpe«, für deren Betrieb Energie benötigt wird. Der Betrag der zuzuführenden Energie muss dabei die Änderung der inneren Energie und die innere Entropieproduktion ausgleichen. Nach Erwin Schrödinger (1944) besteht das Wesen des Stoffwechsels in einem Entropieexport, dessen Betrag sowohl die Änderung der Enthalpie als auch die Entropieerzeugung im System abdecken muss. Lebewesen sind deshalb notwendigerweise offene Systeme. Erst durch den Austausch von Energie und Materie mit der Umgebung wird die Schaffung und Erhaltung komplexer biologischer Strukturen möglich. Freie Enthalpie. Der 2. Hauptsatz der Thermodynamik

gibt Antwort auf die Frage nach der Freiwilligkeit eines Prozesses: Die Entropie muss zunehmen. Bei der Anwendung dieser einprägsamen Aussage auf offene Systeme muss allerdings die Entropieänderung des Systems und die der Umgebung beachtet werden (Gl. 2). In der Gibbs-Helmholtz-Gleichung (Gl. 3) wird mit der Gibbs’schen freien Enthalpie 'G (Gibbs energy) eine Zustandsgröße eingeführt, die unter isotherm-isobaren Bedingungen stattfindende Veränderungen ausschließlich durch Veränderungen von Zustandsgrößen des Systems beschreibt: (3) 'H bedeutet die Änderung der Enthalpie des Systems, T die absolute Temperatur und 'S die Änderung der Entropie des Systems. Die thermodynamischen Größen 'G, 'U und 'H werden auf die bei einer Reaktion umgesetzte Stoffmenge bezogen und in der Einheit kJ/mol angegeben. ! Bei spontan (freiwillig) ablaufenden Reaktionen ist die Änderung der freien Enthalpie negativ ('G > Einleitung Lipide haben vielfältige und für das Leben unerlässliche Funktionen. Sie bilden die Grundstruktur sämtlicher zellulärer Membranen und ermöglichen auf diese Weise erst die Existenz von Zellen, deren Inneres gegen die Außenwelt abgeschirmt ist. Über diese entscheidende Funktion hinaus spielen Lipide in Form der Triacylglycerine eine große Rolle als intrazelluläre Energiespeicher. Sie kommen in nahezu allen Zellen vor, werden jedoch in großen Mengen in einem spezifischen Gewebe, dem Fettgewebe gespeichert. Biosynthese und Abbau von Fettsäuren und Triacylglycerinen stehen in ganz engem Zusammenhang mit dem Energiestoffwechsel des Organismus und werden sehr genau an die jeweiligen energetischen Bedürfnisse der Zellen angepasst. Lipide bilden den Ausgangspunkt für die Biosynthese verschiedener Signalmoleküle. Als Gewebshormone sind die Eikosanoide als die Derivate ungesättigter Fettsäuren von besonderer Bedeutung.

12.1

Stoffwechsel der Triacylglycerine

12.1.1

Funktionen von Triacylglycerinen

! Triacylglycerine sind ein wesentlicher Bestandteil der Nahrungslipide.

Unter den in Europa und Nordamerika vorherrschenden Ernährungsbedingungen besteht mehr als 40% der zugeführten Energie aus Lipiden. Zu diesen gehören: 4 Triacylglycerine 4 Phospholipide 4 Sphingolipide sowie 4 Cholesterin und Cholesterinester

12

Triacylglycerine machen mengenmäßig den größten Anteil der Nahrungslipide aus. Vor ihrer Resorption werden sie durch die Pankreaslipase gespalten (7 Kap. 32.1.3). Dieses Enzym wird in den Acinuszellen des Pankreas synthetisiert und sezerniert. Es dient der Umwandlung von Triacylglycerinen der Nahrung in ein Gemisch von Fettsäuren, Monoacylglycerinen und Glycerin, welches nach Mizellenbildung mit Gallensäuren durch die Enterozyten resorbiert werden kann (7 Kap. 32.2.2). In den Epithelzellen des Intestinaltrakts erfolgt aus den resorbierten Produkten der Pankreaslipase eine Resynthese von Triacylglycerinen. Diese werden mit den entsprechenden Apolipoproteinen verpackt und als Chylomikronen in die Lymphgänge abgegeben. Von dort werden sie auf die verschiedenen Gewebe verteilt. ! Triacylglycerine sind mengenmäßig der bedeutendste Energiespeicher des Organismus.

Die meisten Zellen des Organismus sind imstande, Triacylglycerine zu speichern, allerdings überwiegend in relativ geringen Mengen. Sie dienen hier, neben dem Glycogen, als rasch verfügbare Energiespeicher. Einen besonders umfangreichen Energiespeicher stellen die Triacylglycerine des Fettgewebes dar. Fettzellen sind auf die Triacylglycerin-Synthese und -Speicherung spezialisierte Zellen; bei ihnen machen Triacylglycerine etwa 95% der Zellmasse aus. Triacylglycerine können v.a. bei Nah-

rungskarenz rasch durch hormonelle Regelkreise mobilisiert werden, womit die gespeicherte Energie der überwiegenden Zahl der Gewebe des Organismus zur Verfügung steht (7 Kap. 16.1). Bei Normalgewichtigen macht das Fettgewebe zwischen 10 und 15% des Körpergewichtes aus, woraus sich leicht errechnen lässt, dass die hier gespeicherte Energie diejenige des Glycogens bei weitem übertrifft.

12.1.2

Intrazellulärer Abbau der Triacylglycerine

! Durch Lipolyse entstehen aus Triacylglycerinen Fettsäuren und Glycerin.

Die gespeicherten Triacylglycerine werden durch die in . Abb. 12.1 dargestellten drei Reaktionsschritte zu Fettsäuren und Glycerin hydrolysiert und diese Spaltprodukte zur Deckung des Energiebedarfs oxidiert oder im Fall des Fettgewebes in die Zirkulation abgegeben. Dieser Vorgang wird als Lipolyse bezeichnet und die daran beteiligten Enzyme als Lipasen. Es handelt sich um Esterasen mit einer hohen Spezifität für die in Acylglycerinen vorkommenden Esterbindungen zwischen den Hydroxylgruppen des Glycerins und der Carboxylgruppe von Fettsäuren. ! An der Lipolyse im Fettgewebe sind drei unterschiedliche Lipasen beteiligt.

Die Behandlung von Fettgewebe mit Katecholaminen löst eine Steigerung der Freisetzung von Fettsäuren und Glycerin um bis das Einhundertfache aus. Diese Tatsache hat zu dem Konzept geführt, dass die an der Lipolyse beteiligten Enzyme durch Hormone reguliert werden können. Bis heute konnten drei unterschiedliche Lipasen identifiziert werden, die an der hormonellen Regulation der Lipolyse beteiligt sind: 4 die hormonsensitive Lipase (HSL) 4 die Triacylglycerin-Lipase des Fettgewebes (adipose triglyceride lipase, ATGL) 4 die Monoacylglycerin-Lipase

399 12.1 · Stoffwechsel der Triacylglycerine

. Abb. 12.1. Mechanismus der Lipolyse von Triacylglycerinen. Zur vollständigen Spaltung von Triacylglycerinen in Fettsäuren und Glycerin sind die Aktivitäten der Fettgewebs-TriacylglycerinLipase, der hormonsensitiven Lipase sowie der MonoacylglycerinLipase notwendig. TG = Triacylglycerin; DG = Diacylglycerin; MG = Monoacylglycerin

Die hormonsensitive Lipase. Die hormonsensitive Lipase

(HSL) ist das bis jetzt am besten charakterisierte lipolytische Enzym. Sie zeichnet sich durch folgende Eigenschaften aus: 4 sie kommt im Fettgewebe, Skelett- und Herzmuskel, Gehirn, in pankreatischen β-Zellen, der Nebenniere, den Ovarien, den Testes und Makrophagen vor 4 Die HSL hat eine Molekülmasse von etwa 75 kDa und zeigt eine breite Substratspezifität. Sie katalysiert die Hydrolyse von Tri-, Di- und Monoacylglycerinen, Cholesterin- und Retinsäure-Estern 4 Die HSL gehört in die Gruppe der interkonvertierbaren Enzyme. Sie wird durch cAMP-abhängige Phosphorylierung aktiviert und durch Dephosphorylierung inaktiviert (7 Kap. 4.5.3)

identifiziert. Es handelt sich um die Triacylglycerin-Lipase des Fettgewebes (adipose tissue triglyceride lipase, ATGL). Sie zeichnet sich durch folgende Eigenschaften aus: 4 Die ATGL kommt in hoher Aktivität im weißen und braunen Fettgewebe vor, mit wesentlich geringerer Aktivität im Skelett- und Herzmuskel sowie in den Testes. Das Enzym spaltet Triacylglycerine mit hoher Aktivität zu Diacylglycerinen, zeigt jedoch nur eine sehr geringe Aktivität gegenüber Diacyl- und Monoacylglycerinen 4 Außer der Lipaseaktivität verfügt die ATGL auch über eine Transacylase-Aktivität. Sie katalysiert dabei folgende Reaktionen: Diacylglycerin + Diacylglycerin → Monacylglycerin + Triacylglycerin

Die Triacylglycerin-Lipase des Fettgewebes. Zunächst war

angenommen worden, dass die HSL das einzige, für die Katecholamin-stimulierte Lipolyse verantwortliche Enzym sei. Zweifel an der Richtigkeit dieser Vorstellungen kamen allerdings auf, als sich zeigte, dass die gentechnische Ausschaltung der HSL (HSL-knock-out) zwar eine Reihe unerwarteter Nebeneffekte hat (7 Infobox), jedoch nur eine geringfügige Reduktion der Lipolyse auslöst, wobei besonders auffällig war, dass die Diacylglycerin-Konzentration im Fettgewebe der Tiere ohne HSL gegenüber den Kontrollen deutlich erhöht war. Es führte zu der Vermutung, dass die HSL bevorzugt Diacylglycerine spaltet und für die Triacylglycerin-Hydrolyse, den ersten Schritt der Lipolyse, ein anderes Enzym verantwortlich ist. Dieses wurde vor Kurzem

Diacylglycerin + Monoacylglycerin → Triacylglycerin + Glycerin 4 Überexpression des Enzyms führt zu einer deutlichen Steigerung der basalen und durch Katecholamine stimulierten Lipolyse 4 Bei Nahrungskarenz nimmt die Aktivität der ATGL stark zu 4 Ein gleichzeitiger knock-out von ATGL und HSL vermindert die basale und stimulierte Lipolyse um mehr als 90%

12

400

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

Die Monoacylglycerin-Lipase. Dass im Fettgewebe eine

Monoacylglycerin-Lipase-Aktivität vorkommt, ist seit langem bekannt. Es ist jedoch schwierig, dieses Enzym von Esterasen mit breiter Substratspezifität abzutrennen. Infobox

12

Nicht alles was in Lehrbüchern steht ist richtig oder: Die gezielte Genausschaltung kann zu überraschenden Erkenntnissen führen Die hormonsensitive Lipase HSL des Fettgewebes wurde zwischen 1970 und 1980 genauer charakterisiert und ihre Regulation durch Phosphorylierung/Dephosphorylierung beschrieben. Der damals verwendete Test beruhte auf der Spaltung von radioaktiv markierten Triacylglycerinen und ergab eine hohe Aktivität des Enzyms gegenüber Triacylglycerin, sodass man in der Folge davon ausging, dass das Enzym eine durch cAMP-abhängige Phosphorylierung aktivierbare Triacylglycerinlipase ist. Diese Erkenntnisse wurden so in alle Lehrbücher der Biochemie aufgenommen und sind Gegenstand unzähliger Prüfungsfragen gewesen. Mit der Entwicklung gentechnischer Methoden wurde natürlich auch das Gen für die HSL isoliert und charakterisiert. Seine Überexpression in Mäusen führte erwartungsgemäß zu Tieren mit verminderter Fettmasse und gesteigerter Lipolyse. Gänzlich unerwartet waren jedoch Ergebnisse, die mit Hilfe von HSL-Gen knock-out Tieren (HSL(–/–) zustande kamen: 4 Zwar waren die Adipozyten im weißen Fettgewebe der Tiere vergrößert, jedoch war die Fettmasse gegenüber dem Wildtyp nicht verändert 4 Die Fettsäurefreisetzung nach Behandlung von Fettgewebe mit Katecholaminen war in den HSL(–/–)-Mäusen nur geringfügig vermindert 4 Im Fettgewebe der HSL(–/–)-Mäuse war die Diacylglycerin-Konzentration gegenüber dem Wildtyp um ein Mehrfaches erhöht 4 Die männlichen Tiere waren wegen einer Oligospermie steril

. Abb. 12.2. Einschleusung von Glycerin in den Glucosestoffwechsel

Aus den bisher vorliegenden Daten muss der Schluss gezogen werden, dass für den ersten Schritt der Lipolyse sowohl die ATGL als auch die HSL, für den zweiten Schritt nur noch die HSL verantwortlich ist. Weitere Einzelheiten zur Regulation der Lipolyse 7 Kap. 12.3.1. ! Bei der Lipolyse freigesetztes Glycerin wird in der Leber weiter verwertet.

Die durch Lipolyse freigesetzten Fettsäuren sind für die meisten Gewebe ein gutes Substrat zur Deckung ihres Energiebedarfes. Eine Ausnahme machen die Zellen des Zentralnervensystems sowie die ausschließlich auf Glycolyse eingestellten Zellen des Nierenmarks und die Erythrozyten. Bei der lipolytischen Spaltung von Triacylglycerinen entsteht außer Fettsäuren als weiteres Produkt Glycerin. Dieses wird überwiegend von der Leber, in geringerem Umfang auch von den Mukosazellen des Intestinaltraktes verwertet (. Abb. 12.2): 4 Durch die nur in Leber und intestinalen Mukosazellen vorkommende Glycerokinase wird Glycerin ATP-abhängig zu α-Glycerophosphat phosphoryliert 4 α-Glycerophosphat wird durch die α-Glycerophosphat-Dehydrogenase zu Dihydroxyacetonphosphat oxidiert und dieses dann in die Glycolyse oder Gluconeogenese eingeschleust

12.1.3

Abbau von Triacylglycerinen in Lipoproteinen

! Für die Spaltung der im Plasma in Form von Chylomikronen und VLDL transportierten Triacylglycerine ist die Lipoproteinlipase verantwortlich.

Beim Gesunden lassen sich im Serum Triacylglycerine in einer Konzentration zwischen 50–150 mg/100 ml nachweisen. Diese stammen überwiegend aus der Triacylglycerin-Resorption der Nahrungslipide (7 Kap. 32.2.2) bzw. aus der Triacylglycerin-Synthese der Leber (7 Kap. 16.1.1).

401 12.1 · Stoffwechsel der Triacylglycerine

. Abb. 12.3. Lipoproteinlipase und die Aufnahme von Fettsäuren durch die Plasmamembran. Durch die Lipoproteinlipase (LPL) werden die in Chylomikronen und VLDL transportierten Triacylglycerine (TG) gespalten. Die Aufnahme der freigesetzten Fettsäuren

erfolgt zu einem großen Teil durch FATP-Transporter (FATP = fatty acid transport protein), zu kleineren Anteilen durch die CD36 Fettsäuretranslokase sowie durch freie Diffusion. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

Im Serum werden sie in Form von Triacylglycerin-reichen Lipoproteinen, v.a. Chylomikronen und VLDL (7 Kap. 18.5), transportiert und müssen von vielen Geweben, v.a. dem Fettgewebe, dem Skelettmuskel und dem Herzmuskel als Substrate zur Deckung des Energiebedarfs verwertet oder als Energiespeicher angelegt werden. Triacylglycerine können nur in einem zweistufigen Vorgang von Zellen aufgenommen werden: 4 extrazelluläre Spaltung der Triacylglycerine zu Fettsäuren und Glycerin 4 Aufnahme der auf diese Weise freigesetzten Fettsäuren und gegebenenfalls des Glycerins

4 Die Lipoproteinlipase erlangt ihre Aktivität nach Dimerisierung und Bindung an Heparansulfat-Proteoglykane (7 Kap. 2.1.4) auf der Außenseite der Plasmamembran vieler Zellen, besonders der Endothelzellen der Blutkapillaren

Für die Spaltung der Triacylglycerine in Lipoproteinen ist die Lipoproteinlipase notwendig. Dieses Enzym zeichnet sich durch folgende Eigenschaften aus: 4 Die Lipoproteinlipase ist eine Lipase breiter Spezifität, die die Triacylglycerine in Lipoproteinen zu Fettsäuren und Glycerin spalten kann 4 Die Lipoproteinlipase wird überwiegend von Fettgewebe und Skelettmuskulatur synthetisiert und von diesen Geweben sezerniert

. Abb. 12.3 stellt die Funktionsweise und die Lokalisation der Lipoproteinlipase dar. In der Leber kommt außer der Lipoproteinlipase ein weiteres Enzym ähnlicher Funktion vor, die sog. hepatische Lipase. ! Fettsäuren gelangen durch Diffusion und mit Hilfe spezifischer Transportproteine durch die Membran.

In der extrazellulären Flüssigkeit liegen Fettsäuren zum allergrößten Teil als Komplexe mit Albumin vor. Analysiert man die Kinetik ihrer Aufnahme in die Zellen verschiedenster Gewebe, so lässt sich neben der Diffusion durch die Lipiddoppelschicht eine weitere, Carrier-vermittelte Komponente nachweisen. In . Abbildung 12.3 sind die heutigen Vorstellungen über die beteiligten Mechanismen skizziert. Eine Diffusion von Fettsäuren durch die Plasmamembran der Zelle ist besonders bei hohen Fettsäurekonzentrationen

12

402

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

12

. Abb. 12.4. Biosynthese von Triacylglycerinen aus α-Glycerophosphat und Acyl-CoA. (Einzelheiten 7 Text)

wichtig. Für die Carrier-vermittelte Fettsäureaufnahme stehen verschiedene Transportproteine zur Verfügung: 4 Das Fettsäuretransportprotein (fatty acid transport protein, FATP) wurde ursprünglich aus Adipozyten isoliert und gehört zu einer Familie von bis jetzt sechs Mitgliedern (FATP 1-6), die außer bei Säugern auch bei Invertebraten wie Caenorhabditis Elegans, Drosophila oder der Hefe nachgewiesen werden konnten. FATPs sind in Säugetiergeweben weit verbreitet, ihre gen-

technische Ausschaltung (knock-out) führt zu einer Verminderung der Fettsäureaufnahme, ihre Überexpression zu einer entsprechenden Steigerung. Interessanterweise sind alle bisher untersuchten FATP’s mit Acyl-CoA-Synthetase-Aktivität assoziert. Man nimmt deshalb an, dass diese Proteine nicht nur den Fettsäuretransport durch die Plasmamembran vermitteln, sondern bevorzugt deren Aktivierung zum entsprechenden Acyl-CoA-Derivat katalysieren

403 12.2 · Stoffwechsel der Fettsäuren

4 Die Fettsäuretranslokase (fatty acid translocase, FAT) wurde ursprünglich als ein Oberflächenprotein von Thrombozyten isoliert und CD 36 benannt. Es handelt sich um ein integrales Membranprotein, das vor allem im Herz- und Skelettmuskel, im Fettgewebe, und den Enterozyten des Intestinaltraktes vorkommt. Eine gentechnische Ausschaltung des FAT-Gens führte zu einer drastischen Abnahme der Fettsäureaufnahme in Skelett- und Herzmuskel, Fettgewebe und Intestinaltrakt, nicht jedoch in der Leber 4 Das Fettsäurebindeprotein der Plasmamembran (fatty acid binding proteinPM (FABPPM), in . Abb. 12.3 nicht dargestellt) ist ein ebenfalls ubiquitär vorkommendes Membranprotein, das Fettsäuren mit hoher Affinität bindet. Seine genaue Funktion beim Fettsäuretransport ist noch unklar

12.1.4

Triacylglycerin-Biosynthese

Zur Biosynthese von Triacylglycerinen müssen zunächst sowohl die Fettsäuren als auch das Glycerin in ATP-abhängigen Reaktionen aktiviert werden. Für das Glycerin stehen hierfür zwei Stoffwechselwege zur Verfügung. 4 α-Glycerophosphat kann durch Reduktion von Dihydroxyacetonphosphat mit der α-Glycerophosphat-Dehydrogenase gewonnen werden. Seine Verfügbarkeit steht damit in direkter Verbindung zum Glucoseabbau in der Glycolyse (7 Kap. 11.1.1). In den meisten Geweben wird α-Glycerophosphat auf diese Weise gewonnen 4 Die Leber, die Niere, die Darmmukosa sowie die laktierende Milchdrüse verfügen als Alternativweg zur

α-Glycerophosphat-Synthese aus Dihydroxyacetonphosphat über die Möglichkeit, Glycerin durch direkte ATP-abhängige Phosphorylierung in α-Glycerophosphat umzuwandeln. Sie sind hierzu mit einer entsprechend hohen Aktivität des Enzyms Glycerokinase ausgestattet Die für die Triacylglycerin-Biosynthese verwendeten Fettsäuren müssen mit Hilfe der ATP-abhängigen Acyl-CoASynthetase (7 Kap. 12.2.1) in Acyl-CoA umgewandelt werden. Im ersten Schritt der Biosynthese von Triacylglycerinen (. Abb. 12.4) katalysiert das Enzym GlycerophosphatAcyltransferase (GPAT) die Verknüpfung von zwei Molekülen Acyl-CoA mit α-Glycerophosphat zu einem zweifach acylierten Glycerophosphat, der Phosphatidsäure. Die Acyltransferase zeigt nur eine geringe Kettenlängenspezifität, obgleich sie ihre höchsten Umsatzraten für Fettsäuren mit einer Kettenlänge von 16–18 C-Atomen besitzt. Aus der Phosphatidsäure wird durch eine Phosphatase, die Phosphatidat-Phosphohydrolase, ein α, β-Diacylglycerin gebildet. Durch eine Diacylglycerin-Acyltransferase wird nun durch Anheftung eines dritten Acyl-CoA die Bildung des Triacylglycerins abgeschlossen. Die höchsten Aktivitäten der Acyl-CoA-Glycerin-3-phosphat-Acyltransferase sowie der Diacylglycerin-Acyltransferase befinden sich im endoplasmatischen Retikulum. Die ersten Schritte der Triacylglycerin-Biosynthese sind mit denen der Phospholipidbiosynthese (7 Kap. 18.1.1) identisch. Wie aus . Abb. 12.4 hervorgeht, ist der Verzweigungspunkt der beiden Stoffwechselwege das Diacylglycerin. Infolgedessen ist die Diacylglycerin-Acyltransferase das für die Triacylglycerinbiosynthese spezifische Enzym.

In Kürze Mengenmäßig macht die Fraktion der Triacylglycerine, die auch den größten Energiespeicher des Organismus darstellen, den größten Anteil der Lipide aus. Durch Lipolyse werden Triacylglycerine zu Fettsäuren und Glycerin gespalten. Die hierfür verantwortlichen Enzyme sind die Triacylglycerin-Lipase des Fettgewebes,

12.2

Stoffwechsel der Fettsäuren

12.2.1

Fettsäureabbau

! Fettsäuren werden durch β-Oxidation abgebaut.

Der größte Teil der im tierischen Organismus vorkommenden Fettsäuren besitzt eine gerade Zahl von C-Atomen. Daraus kann geschlossen werden, dass Biosynthese sowie Abbau von Fettsäuren durch Kondensation bzw. Abspal-

die hormonsensitive Lipase sowie die MonoacylglycerinLipase. Die Triacylglycerin-Biosynthese beginnt durch die Biosynthese von Lysophosphatidat aus α-Glycerophosphat und Acyl-CoA., gefolgt von der nochmaligen Acylierung und Phosphatabspaltung, sodass Diacylglycerin entsteht. Dieses wird zu Triacylglycerin acyliert.

tung von Bruchstücken aus zwei C-Atomen erfolgt. Diese Vorstellung wurde durch die von Friedrich Knoop schon 1905 durchgeführten Untersuchungen gestützt. Er verfütterte Hunden ω-Phenylfettsäuren mit gerader bzw. ungerader Zahl von Kohlenstoffatomen (. Abb. 12.5). Dabei war das Endprodukt beim Abbau geradzahliger, ω-phenylierter Fettsäuren die Phenylessigsäure, während ungeradzahlige, ω-phenylierte Fettsäuren auf die Stufe der Benzoesäure abgebaut wurden. Daraus konnte der Schluss gezogen werden, dass Fettsäuren durch sukzessiven Abbau am

12

404

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

. Abb. 12.5. Der Stoffwechsel ω-Phenyl-markierter Fettsäuren. Verfüttert man Hunden geradzahlige, ω-Phenyl-markierte Fettsäuren, scheiden sie Phenylessigsäure, bei der Verfütterung ungeradzahliger ω-phenylierter Fettsäuren dagegen Benzoesäure aus. Dies legt die Vermutung nahe, dass Fettsäuren durch Oxidation am β-C-Atom abgebaut werden

12

β-C-Atom verkürzt werden. Dieser auch als β-Oxidation bezeichnete Mechanismus des Fettsäureabbaus ist u.a. durch die Untersuchungen von Feodor Lynen aufgeklärt worden. Die für die β-Oxidation benötigten Enzyme sind in der mitochondrialen Matrix lokalisiert. Sie befinden sich so in der Nähe der in der mitochondrialen Innenmembran gelegenen Enzyme der Atmungskette. ! Fettsäuren können nur als Thioester mit Coenzym A verstoffwechselt werden.

Da Fettsäuren chemisch relativ reaktionsträge Moleküle sind, müssen sie vor ihrem Abbau zunächst in einer ATPabhängigen Reaktion zu einem aktiven Zwischenprodukt, dem Acyl-CoA, aktiviert werden. Für diese Umwandlung zu »aktivierten« Fettsäuren ist eine Acyl-CoA-Synthetase (Syn. Thiokinase) notwendig. Wie . Abb. 12.6 zeigt, katalysiert diese eine zweistufige Reaktion, in deren ersten Teil die Carboxylgruppe der Fettsäure mit ATP unter Bildung eines Acyladenylates (AcylAMP) und Freisetzung von anorganischem Pyrophosphat aus den β- und γ-Phosphaten des ATP reagiert. Da die Hydrolyseenergie der Acyladenylat-Bindung ungefähr derjenigen einer energiereichen Phosphatbindung entspricht, liegt das ΔGo’ der Reaktion bei etwa 0. Nur die Tatsache, dass anorganisches Pyrophosphat durch die in allen Zellen vorkommenden Pyrophosphatase in zwei anorganische Phosphate gespalten wird, verlagert das Gleichgewicht der

. Abb. 12.6. Aktivierung von Fettsäuren zu Acyl-CoA durch die Acyl-CoA-Synthetase

Reaktion auf die Seite der Acyladenylat-Bildung. Im zweiten Teil der Reaktion wird das Acyladenylat mit Coenzym A gespalten, sodass Acyl-CoA und AMP entstehen. Auf diese Weise wird die energiereiche Anhydridbindung des Acyladenylates in eine energiereiche Thioesterbindung umgewandelt. Acyl-CoA-Synthetasen finden sich sowohl intra- als auch extramitochondrial und unterscheiden sich in ihrer Substratspezifität hinsichtlich der Kettenlänge der zu aktivierenden Fettsäuren. ! Die β-Oxidation der Fettsäuren besteht aus vier Einzelreaktionen.

405 12.2 · Stoffwechsel der Fettsäuren

. Abb. 12.7. Abbau geradzahliger Fettsäuren durch β-Oxidation. (Einzelheiten 7 Text)

Die β-Oxidation der Fettsäuren beginnt mit Acyl-CoA und läuft in folgenden Schritten ab (. Abb. 12.7): 4 Durch die Acyl-CoA-Dehydrogenase wird Acyl-CoA an den C-Atomen 2 und 3 (α und β) dehydriert, wobei ein Δ2-trans-Enoyl-CoA entsteht. Der Wasserstoffakzeptor dieser Reaktion ist FAD. Das entstehende FADH2 gibt seine Reduktionsäquivalente an ein anderes Flavoprotein weiter, das auch als ETF (electron transfering flavoprotein) bezeichnet wird. Dieses reagiert direkt mit dem Ubichinon der Atmungskette (7 Kap. 15.1.2) 4 Unter Katalyse durch die Enoyl-CoA-Hydratase wird an das Δ2-Enoyl-CoA Wasser angelagert, wobei L-3-Hydroxyacyl-CoA entsteht 4 Die L-3-Hydroxyacyl-CoA-Dehydrogenase katalysiert nun die zweite Oxidationsreaktion der β-Oxidation der Fettsäuren. Das Oxidationsmittel ist diesmal NAD+, Reaktionsprodukte sind 3-Ketoacyl-CoA und NADH/H+ 4 Im letzten Schritt der β-Oxidation wird unter Katalyse der β-Ketothiolase ein Molekül Acetyl-CoA vom

3-Ketoacyl-CoA abgespalten. Die Reaktionsprodukte sind Acetyl-CoA und ein um zwei C-Atome verkürztes Acyl-CoA. Dieses kann erneut in die β-Oxidation eintreten, sodass auf diese Weise die vollständige Zerlegung geradzahliger Fettsäuren zu Acetyl-CoA möglich ist Alle Enzyme für die β-Oxidation werden von nucleären Genen in Form von Präkursorproteinen exprimiert. Ihre N-terminal gelegenen Signalsequenzen erlauben die Translokation in die mitochondriale Matrix, wo sie mit Hilfe entsprechender Chaperone ihre endgültige Raumstruktur erhalten. ! Fettsäuren werden als Carnitinester durch die innere Mitochondrienmembran transportiert.

Die Enzyme der β-Oxidation der Fettsäuren sind ausschließlich im mitochondrialen Matrixraum lokalisiert. Der weitaus größte Teil des für die β-Oxidation verwendeten Acyl-CoA entsteht jedoch im Cytosol, sei es als Folge der Aufnahme von Fettsäuren aus dem extrazellulären

12

406

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

der experimentellen Beobachtung hervor, dass die Geschwindigkeit der β-Oxidation in einer Mitochondriensuspension, der langkettige Fettsäuren als Substrat angeboten werden, durch Carnitin beträchtlich beschleunigt werden kann. Auf der Innenseite der mitochondrialen Innenmembran findet der umgekehrte Vorgang statt. Der Fettsäurerest des Acyl-Carnitins wird durch die Carnitin-Acyltransferase 2 auf Coenzym A übertragen, wobei Acyl-CoA entsteht und freies Carnitin regeneriert wird. Carnitin kommt in den meisten Organen vor. Die Muskelzelle, deren Kapazität zur β-Oxidation beträchtlich ist, besitzt auch einen besonders hohen Carnitingehalt. ! Beim Abbau ungeradzahliger Fettsäuren entsteht Propionyl-CoA.

. Abb. 12.8. Reversible Bildung von Acylcarnitin aus Acyl-CoA und Carnitin

12

Raum, sei es durch intrazelluläre Lipolyse. Da Acyl-CoA die mitochondriale Innenmembran nicht passieren kann, muss ein Transportsystem eingeschaltet werden: Mit der Carnitin-Acyltransferase 1 (Synonym: Carnitin-Palmitoyltransferase 1, CPT1) wird der Thioester durch Kopplung an L-Carnitin (γ-Trimethylamino-β-hydroxybutyrat) zum Acyl-Carnitin umgeestert und CoA freigesetzt (. Abb. 12.8). Acyl-Carnitin kann im Gegensatz zu Acyl-CoA mit Hilfe eines entsprechenden Transportsystems, der Carnitin-Acylcarnitin-Translokase, die innere Mitochondrienmembran passieren (. Abb. 12.9). Dies geht u.a. aus

. Abb. 12.9. Carnitin als Carrier im Transport langkettiger Fettsäuren durch die mitochondriale Innenmembran

Beim Abbau von Fettsäuren mit einer ungeraden Zahl von C-Atomen erfolgt die β-Oxidation nach demselben Mechanismus wie bei geradzahligen Fettsäuren. Dabei bleibt allerdings beim letzten Durchgang der β-Oxidation anstelle eines Acetyl-CoA ein aus drei C-Atomen bestehendes Acyl-CoA, das Propionyl-CoA, übrig. Für die Einschleusung dieses Produktes in den Citratzyklus sind insgesamt drei weitere Enzyme notwendig, die die in . Abb. 12.10 dargestellte Reaktionsfolge katalysieren. 4 Zunächst wird Propionyl-CoA durch die biotinabhängige Propionyl-CoA-Carboxylase (7 Kap. 23.3.7) zum D-Methylmalonyl-CoA carboxyliert 4 Durch eine Racemase erfolgt die Umlagerung zum L-Methylmalonyl-CoA. Aus diesem entsteht durch eine Vitamin-B12-katalysierte Umgruppierung (7 Kap. 23.3.9) der Substituenten am C-Atom 2 das SuccinylCoA, welches als Zwischenprodukt des Citratzyklus leicht oxidiert werden kann

407 12.2 · Stoffwechsel der Fettsäuren

! Für den Abbau ungesättigter Fettsäuren werden Hilfsenzyme benötigt.

Da in den natürlichen Fettsäuren die Doppelbindung in der cis-, bei den Zwischenprodukten der β-Oxidation der Fettsäuren jedoch in der trans-Konfiguration auftreten, ergeben sich für den Abbau ungesättigter Fettsäuren gewisse Schwierigkeiten. Sie können durch die Enzyme der β-Oxidation abgebaut werden, bis ein Δ3-cis- oder ein Δ4-cisEnoyl-CoA in Abhängigkeit von der jeweiligen Position der Doppelbindung entsteht. Δ3-cis-Enoyl-CoA wird durch eine Δ3-cis-Δ2-trans-Enoyl-CoA-Isomerase zu Δ2-transEnoyl-CoA umgelagert (. Abb. 12.11, linker Teil). Da jetzt eine trans-Konfiguration an den C-Atomen 2 und 3 erzielt ist, verläuft der weitere Abbau in der β-Oxidation ohne Schwierigkeiten. Das Δ4-cis-Enoyl-CoA wird zunächst von der AcylCoA-Dehydrogenase zum Δ2-trans-Δ4-cis-Dienoyl-CoA oxidiert (. Abb. 12.11, rechter Teil). Dieses wird in einer NADPH-abhängigen Reaktion zum Δ3-cis-Enoyl-CoA reduziert. Durch die oben erwähnte Isomerase entsteht dann aus Δ3-cis-Enoyl-CoA das Δ2-trans-Enoyl-CoA, das durch die Enzyme der β-Oxidation weiter abgebaut werden kann. ! Bei der β-Oxidation der Fettsäuren entstehen große Mengen von NADH/H+ und FADH2.

Vom Stearyl-CoA aus, lässt sich ein einmaliger Durchgang durch die β-Oxidation nach Gleichung (1) formulieren. Für die komplette Oxidation von Stearyl-CoA ergibt sich dann Gleichung (2). (1) CH3-(CH2)16-CO-S-CoA + FAD + NAD+ + H2O + CoA-SH → CH3-(CH2)14-CO-S-CoA + CH3-CO-S-CoA + FADH2 + NADH + H+

. Abb. 12.10. Carboxylierung von Propionyl-CoA zu Methylmalonyl-CoA und anschließende Umlagerung zu Succinyl-CoA

(2) Stearyl-CoA + 8 FAD + 8 NAD+ + 8 H2O + 8 CoA-SH → 9 Acetyl-CoA + 8 FADH2 + 8 NADH + 8H+

. Tabelle 12.1. Maximale Energieausbeute bei der β-Oxidation von 1 mol Stearyl-CoA und der Oxidation des gebildeten Acetyl-CoA im Citratzyklus (Alle Angaben in mol) Gebildete Reduktionäquivalente

ATP-Gewinn bei der Reoxidation vona

NADH/H+

FADH2

NADH/H+

FADH2

Stearyl-CoA o 9 Acetyl-CoA

8

8

18,4

11,2

–

9 Acetyl-CoA o 18 CO2 + 18 H2O

27

9

62,1

12,6

9

Schritt

ATP-Gewinn (Summe) a b c

ATP-Gewinn durch SubstratkettenPhosphorylierungb

c

113.3

über die ATP-Ausbeute bei der Reoxidation von NADH/H+ und FADH2 in der oxidativen Phosphorylierung 7 Kap. 15.1.4. energiereiche Phosphate, die zunächst bei der Substratkettenphosphorylierung im Citratzyklus als GTP gebildet werden. Bezogen auf Stearinsäure müssen von diesem Wert noch 2 energiereiche Phosphate abgezogen werden, die bei der Aktivierung von Stearinsäure zu Stearyl-CoA verbraucht werden.

12

408

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

So ist die Einschleusung von Acyl-CoA in die Peroxisomen offensichtlich nicht Carnitin-abhängig. Die peroxisomale Acyl-CoA-Dehydrogenase katalysiert folgende Reaktion: Acyl-CoA + O2 → trans-Δ2-Enoyl-CoA + H2O2

. Abb. 12.11. Für die Oxidation ungesättigter Fettsäuren benötigte Hilfsmechanismen. Die benötigten Enzyme sind rot hervorgehoben. (Einzelheiten 7 Text)

12

Bei der vollständigen Oxidation von Stearyl-CoA zu Acetyl-CoA fallen 8 × 2 [H] als FADH2 sowie 8 × 2 [H] als NADH+H+ an. Beide Wasserstoff-übertragenden Coenzyme werden in der Atmungskette reoxidiert. Da hierbei pro NADH 2,3 ATP und pro FADH2 1,4 ATP gebildet werden (7 Kap. 15.1.4), ist die Energieausbeute der Fettsäureoxidation im Vergleich zur Oxidation von Glucose bzw. Aminosäuren beträchtlich. . Tabelle 12.1 gibt eine Übersicht über die maximal mögliche Energieausbeute bei der β-Oxidation der Fettsäuren. Die β-Oxidation kann nur unter aeroben Bedingungen erfolgen, da es in den Mitochondrien keinerlei Hilfsreaktionen gibt, die FADH2 bzw. NADH/H+ in Abwesenheit von Sauerstoff reoxidieren könnten. ! In Peroxisomen findet in beträchtlichem Umfang Fettsäureoxidation statt.

Außer in Mitochondrien können Fettsäuren in den Peroxisomen der Leber und wahrscheinlich auch anderer Gewebe oxidiert werden. Im Prinzip laufen dabei die gleichen Reaktionen wie bei der mitochondrialen β-Oxidation ab, allerdings ergeben sich einige Einschränkungen und für einzelne Enzyme beträchtliche mechanistische Unterschiede.

Das Enzym benötigt FAD als Cofaktor. Das entstehende H2O2 wird durch eine entsprechende peroxisomale Katalase (7 Kap. 15.2.1) eliminiert. Der weitere Verlauf der peroxisomalen β-Oxidation entspricht der der Mitochondrien. Allerdings gibt es in Peroxisomen keinerlei Mechanismen zur NADH/H+-Reoxidation, sodass dieses über die Abgabe von Reduktionsäquivalenten in den cytosolischen Raum reoxidiert werden muss. Eine weitere Schwierigkeit liegt darin, dass Peroxisomen nicht die Enzyme des Citratzyklus enthalten und daher Acetyl-CoA nicht zu CO2 abbauen können. Hierzu wird ein Transfer von Acetyl-Resten in den mitochondrialen Matrixraum benötigt. Im Gegensatz zur mitochondrialen β-Oxidation verläuft die peroxisomale nur über zwei bis maximal fünf Zyklen. Offensichtlich dient sie eher der Verkürzung langkettiger Fettsäuren als der vollständigen Oxidation zu Acetyl-CoA. Interessanterweise führt ein erhöhter Lipidgehalt der Nahrung zu einer Vergrößerung von Peroxisomen sowie zu einer vermehrten Biosynthese von Enzymen der peroxisomalen β-Oxidation der Fettsäuren. Verbindungen, die die Enzyme der mitochondrialen β-Oxidation hemmen, sind häufig Induktoren der peroxisomalen β-Oxidation. Hierzu gehört eine große Zahl von Xenobiotica.

12.2.2

Biosynthese und Abbau der Ketonkörper

Schon Ende des 19. Jahrhunderts war bekannt, dass in Blut und Urin von Diabetikern Aceton, β-Hydroxybuttersäure und Acetessigsäure nachweisbar sind. Wegen ihrer strukturellen Verwandtschaft zum Aceton wurden die letzteren beiden Verbindungen auch als Ketonkörper bezeichnet und die diabetische Hyperketonämie als entscheidendes Ereignis beim Zustandekommen der diabetischen Stoffwechselentgleisung erkannt (7 Kap. 26.4). Heute weiß man, dass die Biosynthese von Ketonkörpern ein auch unter physiologischen Bedingungen ablaufender Vorgang ist, der in enger Beziehung zum Fettsäurestoffwechsel steht. Auch im Blut des Gesunden sind Ketonkörper nachweisbar und ihre Oxidation in extrahepatischen Geweben, besonders in der Muskulatur, kann u.U. beträchtliche Ausmaße annehmen. ! Ketonkörper werden ausschließlich in der Leber synthetisiert.

409 12.2 · Stoffwechsel der Fettsäuren

Die Leber hat als einziges Organ die Fähigkeit zur Ketonkörperbiosynthese, kann Ketonkörper allerdings nicht verwerten. Daher besteht ein ständiger Fluss von Ketonkörpern von der Leber zu den extrahepatischen Geweben hin. . Abbildung 12.12 gibt den Ablauf der mitochondrial lokalisierten Ketonkörperbiosynthese wieder. Sie erfolgt in einer dreistufigen Reaktion: 4 Durch Umkehr der Reaktion der β-Ketothiolase, des letzten Enzyms der β-Oxidation der Fettsäuren, entsteht aus zwei Molekülen Acetyl-CoA AcetacetylCoA 4 Unter Katalyse durch die β-Hydroxy-β-Methylglutaryl-CoA-Synthase wird ein weiteres Molekül AcetylCoA an den Carbonyl-Kohlenstoff des Acetacetyl-CoA geheftet. Hierbei entsteht β-Hydroxy-β-Methylglutaryl-CoA (HMG-CoA) (über die Bedeutung des cytosolischen HMG-CoA für die Cholesterinbiosynthese 7 Kap. 18.3.1) 4 In einer dritten Reaktion spaltet die HMG-CoA-Lyase unter Freisetzung von Acetacetat ein Acetyl-CoA ab. Je zwei der C-Atome des Acetacetates stammen aus dem Acetyl-CoA bzw. dem Acetacetyl-CoA Acetacetat wird durch eine NADH/H+-abhängige D-βHydroxybutyrat-Dehydrogenase, die außer in der Leber auch in vielen anderen Geweben vorkommt, zu D-β-Hydroxybutyrat reduziert. Durch spontane nichtenzymatische Decarboxylierung kann aus Acetacetat auch Aceton entstehen. D-β-Hydroxybutyrat macht den Hauptanteil der Ketonkörper in Blut und Urin aus.

. Abb. 12.12. Biosynthese der Ketonkörper Acetacetat, β-Hydroxybutyrat und Aceton aus Acetacetyl-CoA und Acetyl-CoA

! Die Verwertung der Ketonkörper erfordert ihre Aktivierung mit Coenzym A. . Abbildung 12.13 stellt die zur Verwertung von Ketonkör-

pern in extrahepatischen Geweben benötigten Reaktionen zusammen. D-β-Hydroxybutyrat wird zunächst zu Acetacetat oxidiert. Anschließend erfolgt eine Transacylierung, bei der der Succinylrest eines Succinyl-CoA gegen Acetacetat ausgetauscht wird. Das hierfür verantwortliche Enzym ist die Succinyl-CoA-Acetacetyl-CoA-Transferase. Das dabei gebildete Acetacetyl-CoA kann in die β-Oxidation eingeschleust werden. Von wesentlich geringerer Bedeutung ist eine direkte, ATP-abhängige Aktivierung von Acetacetat mit Hilfe der Acetacetat-Thiokinase: Acetacetat + ATP + CoA-SH → Acetacetyl-CoA + AMP + Pyrophosphat Durch Decarboxylierung von Acetacetat entstandenes Aceton kann nicht in nennenswertem Umfang verwertet werden. . Abb. 12.13. Succinyl-CoA-abhängige Aktivierung von Ketonkörpern zu Acetacetyl-CoA

12

410

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

12.2.3

Biosynthese gesättigter Fettsäuren

! Die Biosynthese gesättigter Fettsäuren findet im Cytosol statt und benötigt Malonyl-CoA.

12

In den meisten Zellen können zum Teil in beträchtlichem Umfang langkettige Fettsäuren mit einer geraden Anzahl von C-Atomen aus Acetylresten synthetisiert werden. Dieser Vorgang ist keine Umkehr der β-Oxidation der Fettsäuren, da bei allen Eukaryoten die Fettsäurebiosynthese im Cytosol stattfindet und von der Anwesenheit von CO2 abhängt. Den Arbeitsgruppen von Feodor Lynen und Roy Vagelos ist die Aufklärung der einzelnen bei der Fettsäurebiosynthese beteiligten Reaktionen gelungen. Sie konnten zeigen, dass die energetisch ungünstige Umkehr des β-KetoThiolaseschritts bei der β-Oxidation dadurch bewerkstelligt wird, dass für die Kondensation der Acetylreste an die wachsende Fettsäurekette nicht Acetyl-CoA sondern Malonyl-CoA, also das CoA-Derivat einer aus drei C-Atomen bestehenden Dicarbonsäure, benutzt wird. Die bei der zur Kettenverlängerung notwendigen Decarboxylierungen freiwerdende Energie verschiebt dann das Gleichgewicht der Reaktion auf die Seite der Kondensation. Außerdem fanden sie, dass die Einzelreaktionen der Fettsäurebiosynthese an einem Multienzymkomplex ablaufen, an den alle Zwischenprodukte covalent gebunden sind. Das für die Kondensationsreaktion benötigte MalonylCoA wird durch eine Carboxylierungsreaktion aus AcetylCoA und CO2 unter Katalyse der Biotin-abhängigen AcetylCoA-Carboxylase bereitgestellt (. Abb. 12.14). Der Mechanismus der Acetyl-CoA-Carboxylase entspricht damit dem anderer Biotin-abhängiger Carboxylierungen (7 Kap. 23.3.7). ! Die Fettsäuresynthase katalysiert sämtliche Teilreaktionen der Fettsäurebiosynthese.

Bei der Fettsäurebiosynthese werden an ein als Startermolekül dienendes Acetyl-CoA sukzessive Bruchstücke aus zwei C-Atomen gehängt, die vom Malonyl-CoA abstammen. Das bedeutet, dass zur Synthese von Palmitat 7 mol, zur Synthese von Stearat 8 mol Malonyl-CoA pro mol synthetisierter Fettsäure verbraucht werden. Die Teilreaktionen der Fettsäuresynthase. Die verschiedenen für die Fettsäurebiosynthese aus Acetyl-CoA und Malonyl-CoA notwendigen Reaktionsschritte werden . Abb. 12.15. 4ⴕ-Phosphopantethein als prostetische Gruppe des Acyl-CarrierProteins

. Abb. 12.14. Biotinabhängige Carboxylierung von Acetyl-CoA zu Malonyl-CoA

durch den dimeren Multienzymkomplex der Fettsäuresynthase (7 u.) katalysiert. Im Fettsäuresynthase-Komplex kommen in jedem Monomer zwei für seine Funktion essentielle SH-Gruppen vor, eine sog. zentrale und eine periphere. Die zentrale Sulfhydrylgruppe gehört zu einem Molekül, das sich auch als Bestandteil des Coenzym A findet. Es handelt sich um das 4ⴕ-Phosphopanthetein (. Abb. 12.15). Dieses ist covalent mit einem Serylrest der Acyl-Carrier-Domäne der Fettsäuresynthase verknüpft, die gelegentlich auch als Acyl-Carrier-Protein (ACP) bezeichnet wird. Die periphere Sulfhydrylgruppe gehört zu einem Cysteinylrest im aktiven Zentrum der kondensierenden Domäne. Die Fettsäurebiosynthese mit Hilfe der Fettsäuresynthase läuft in folgenden Schritten ab (. Abb. 12.16): 4 Ein Acetylrest des Startermoleküls Acetyl-CoA wird an der zentralen Sulfhydrylgruppe gebunden 4 Der Acetylrest wird auf die periphere Sulfhydrylgruppe übertragen 4 Die jetzt wieder freie zentrale Sulfhydrylgruppe übernimmt einen Malonylrest vom Malonyl-CoA. Für diese Reaktionen ist die Malonyl/Acetyltransferase-Domäne (MAT) der Fettsäuresynthase (. Abb. 12.17) verantwortlich 4 Die Ketoacyl-Synthase-Domäne (kondensierende Domäne) der Fettsäuresynthase katalysiert die Kondensation des Acetyl- mit dem Malonylrest, wobei unter Decarboxylierung ein Acetacetyl-Rest entsteht, der an die zentrale SH-Gruppe gebunden ist. Bei allen weiteren Reaktionen bleibt dieser Acylrest als Thioester an dieser Stelle. 4 Die erste Reduktion besteht in einer NADPH/H+-abhängigen Reaktion zum D-β-Hydroxybutyrylrest. Die zugehörige Domäne wird als β-Ketoacylenzym-Reduktase-Domäne (Ketoreduktase, KR) bezeichnet 4 Durch eine Dehydratase-Domäne (DH) wird ein Δ2Enoylrest erzeugt

411 12.2 · Stoffwechsel der Fettsäuren

. Abb. 12.16. Einzelreaktionen der Biosynthese langkettiger, geradzahliger Fettsäuren aus Acetyl-CoA. SHp = periphere SH-Gruppe; SHz = zentrale SH-Gruppe (Einzelheiten 7 Text)

4 Die zweite Reduktion, die wiederum NADPH/H+-abhängig verläuft, wandelt den ungesättigten in einen gesättigten Acylrest um. Dieser wird im folgenden Zyklus von der zentralen auf die periphere SH-Gruppe übertragen, die nun freie zentrale Sulfhydrylgruppe übernimmt den nächsten Malonylrest und der Zyklus beginnt erneut Die oben beschriebenen Zyklen wiederholen sich, bis der Acylrest auf eine Länge von 16–18 C-Atomen angewachsen ist, anschließend wird er durch die Thioesterase-Domäne abgespalten. Die Summengleichung dieser in . Abb. 12.16 dargestellten Reaktion beträgt demnach für die Synthese der Palmitinsäure: CH3-CO-S-CoA + 7 HOOC-CH2-CO-S-CoA + 14 NADPH + 14 H+ → CH3-(CH2)14-COOH + 7 CO2 + 6 H2O + 8 CoA-SH + 14 NADP+

Abspaltung und Aktivierung der synthetisierten Fettsäure. In der Hefe und in einigen Mikroorganismen wird

die Palmitin- bzw. Stearinsäure von der zentralen Sulfhydrylgruppe direkt auf freies Coenzym A übertragen und somit als Acyl-CoA aus dem Synthasekomplex entlassen. Bei der Fettsäurebiosynthese in tierischen Organen wird die Fettsäure durch Hydrolyse aus dem Enzymkomplex freigesetzt. Danach muss sie zu ihrer weiteren Verwendung im Stoffwechsel in einer ATP-abhängigen Reaktion durch eine Acyl-CoA-Synthetase (7 Kap. 12.2.1) zum Acyl-CoA aktiviert werden. Prinzipiell gleichen also die Reaktionsschritte der Fettsäurebiosynthese denen der β-Oxidation, allerdings ist die Reihenfolge umgekehrt. Ein Unterschied ist, dass als Zwischenprodukte die D-Isomeren anstelle der bei der β-Oxidation auftretenden L-Isomeren entstehen und dass die beiden Reduktionsschritte NADPH/H+ als Wasserstoffdonator benutzen.

12

412

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

. Abb. 12.17. Aufbau der tierischen Fettsäuresynthase. Die tierische Fettsäuresynthase liegt als dimeres Protein vor, wobei jede Untereinheit die für die vollständige Synthese von Fettsäuren aus Acetyl-CoA und Malonyl-CoA benötigten Untereinheiten als funktionelle Domänen trägt. KS Ketoacyl-Synthase; MAT Malonyl/AcetylTransferase; DH Dehydratase; ER Enoylreduktase; KR Ketoreduktase; ACP Acyl-Carrier-Domäne (-Protein); TE Thioesterase. Das Protein hat eine Größe von etwa 200 Å u 150 Å. Der Pantetheinrest der zentralen SH-Gruppe ist durch die gezackte Linie angedeutet, die periphere SH-Gruppe befindet sich in der KS-Domäne. Die blauen Doppelpfeile geben die möglichen Reaktionspartner des ACP bei der Beladung wieder. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

! Die tierische Fettsäuresynthase besteht aus einem dimeren Komplex zweier multifunktioneller Proteine.

12

Bei vielen Bakterien, Pflanzen und einigen Einzellern finden sich die Teilaktivitäten der Fettsäuresynthase als individuelle, katalytisch einzeln wirksame Enzymproteine zusammen mit dem Acyl-Carrier-Protein als Multienzymkomplex, der durch geeignete Behandlung in seine Einzelkomponenten zerlegt werden kann. Anders ist es dagegen mit der Fettsäuresynthase tierischer Organismen. Diese liegt als dimeres multifunktionelles Protein vor, das sämtliche zu einem vollständigen Reaktionszyklus benötigte Enzymaktivitäten als Domänen auf einer Peptidkette enthält (. Abb. 12.17). N-terminal befindet sich die Domäne der Ketoacylsynthase, gefolgt von der Malonyl/Acetyltransferase, der Dehydratase, der Enoyl-Reduktase, der Ketoreduktase, des Acyl-Carrier-Proteins sowie schließlich der für die Abspaltung der fertigen Fettsäure benötigten Thioesterase. Die beiden das funktionelle Enzym bildenden identischen Untereinheiten sind so assoziiert, dass zwei katalytische Zentren entstehen (. Abb. 12.17). Diese bestehen jeweils aus der Dehydratase-, Enoylreduktase-, Ketoreduktase- und Thioesterasedomäne einer Untereinheit. Die Acyl-Carrier-Domäne einer Untereinheit kann mit der Malonyl/Acetyltransferase- und der Ketoacylsynthasedomäne der eigenen und auch der anderen Untereinheit reagieren. Wie aus . Abbildung 12.17 hervorgeht, ist also

die Beladung des dimeren Fettsäuresynthase-Komplexes für jedes katalytische Zentrum prinzipiell von beiden Seiten möglich. Nach erfolgter Kondensation kann dann nur noch das zur jeweiligen Acyl-Carrier-Domäne gehörige aktive Zentrum benutzt werden. Der Phosphopantheteinrest der Acyl-Carrier-Domäne jeder Untereinheit dient als Schwingarm, der die wachsende Fettsäurekette trägt. Interessanterweise ist eine einzelne isolierte Untereinheit nicht aktiv, wahrscheinlich weil im monomeren Zustand die korrekte Konformation nicht aufrechterhalten werden kann. Damit stellt der Fettsäuresynthase-Komplex tierischer Zellen eine vollautomatische biologische Produktionsanlage dar, bei der ein größtmöglicher Wirkungsgrad mit der geringsten Störanfälligkeit durch konkurrierende enzymatische Nebenreaktionen verbunden ist. Der oben dargestellte Mechanismus macht verständlich, dass sich der Kohlenstoff des Acetyl-CoA, das als Starter für die Fettsäurebiosynthese diente, beispielsweise im Palmitat als die C-Atome 15 und 16 wiederfindet. Alle anderen Kohlenstoffeinheiten werden über Malonyl-CoA eingebracht. Wirkt dagegen Propionyl-CoA als Startermolekül, so entsteht eine langkettige Fettsäure mit einer ungeraden Zahl von C-Atomen. Derartige Fettsäuren werden besonders bei Wiederkäuern gefunden, da in ihrem Magen durch bakteriellen Abbau neben Acetat auch Propionat entsteht. ! Die für die Fettsäurebiosynthese benötigten Substrate entstammen der Glycolyse oder dem Citratzyklus. . Abbildung 12.18 stellt die Beziehungen zwischen Fettsäurebiosynthese und Kohlenhydratstoffwechsel dar. Dieser kann sowohl den für die Fettsäurebiosynthese benötigten Wasserstoff als auch den Kohlenstoff liefern.

Herkunft des Wasserstoffs. Für die beiden während der

Fettsäurebiosynthese ablaufenden Reduktionsschritte wird Wasserstoff in Form von NADPH/H+ benötigt. Dieser stammt zu einem großen Teil aus dem oxidativen Abbau der Glucose über den Hexosemonophosphatweg (7 Kap. 11.1.2). Bezeichnenderweise sind diejenigen Gewebe, die über eine beträchtliche Aktivität dieses Stoffwechselwegs verfügen, auch im Besitz einer besonders aktiven Lipogenese. Zu ihnen gehören die Leber, das Fettgewebe und die laktierende Milchdrüse. Da sowohl der Hexosemonophosphatweg als auch die Fettsäurebiosynthese im Cytoplasma ablaufen, können beide Prozesse den cytoplasmatischen NADPH/H+-Pool ohne Behinderung durch Permeabilitätsschranken benutzen. Läuft die Fettsäurebiosynthese mit maximaler Geschwindigkeit ab, so genügt der aus dem Hexosemonophosphatweg zur Verfügung gestellte Wasserstoff nicht mehr. In diesem Fall kann NADPH/H+ über die extramitochondriale Isocitratdehydrogenase erzeugt werden (7 Kap. 14.2). Wichtiger ist aber die dehydrierende Decarboxylierung von Malat zu Pyruvat, die durch das ebenfalls im Cytosol lokalisierte Malatenzym (7 Kap. 14.4) katalysiert wird. Da

413

12.2 · Stoffwechsel der Fettsäuren

. Abb. 12.18. Wechselbeziehungen zwischen Glucoseabbau und Fettsäurebiosynthese. Die für die Fettsäurebiosynthese aus Glucose wichtigen Zwischenprodukte sind rot gerastert. Geschwindigkeitsbestimmende Enzyme dieses Prozesses unterliegen einer hormona-

len bzw. metabolischen Regulation, die durch die grünen und roten Pfeile dargestellt ist. HMP-Weg = Hexose-Monophosphat-Weg. (Einzelheiten 7 Text)

das für diese Reaktion benötigte extramitochondriale Malat aus Oxalacetat stammt, ergibt das Zusammenspiel von Malatdehydrogenase ① und Malatenzym ② in der Bilanz eine Wasserstoffübertragung von NADH/H+ auf NADP+ ③:

Herkunft des Kohlenstoffs. Acetyl-CoA ist die Kohlenstoff-

Malat + NAD+ ① Oxalacetat + NADH + H+ + Pyruvat + CO2 + NADPH + H+ ② Malat + NADP ③ Oxalacetat + NADH + H+ + NADP+

Pyruvat + CO2 + NAD+ + NADPH + H+

quelle für die Biosynthese der Fettsäuren, da es sowohl das Startermolekül wie auch die Ausgangssubstanz für die Biosynthese von Malonyl-CoA darstellt. Ein Teil des AcetylCoA entsteht durch dehydrierende Decarboxylierung von Pyruvat durch die Pyruvatdehydrogenase (7 Kap. 14.2). Pyruvat ist das Endprodukt des glycolytischen Abbaus der Kohlenhydrate unter aeroben Bedingungen. Die für die Glycolyse benötigten Enzyme sind im Cytosol der Zelle

12

414

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

lokalisiert. Da die Pyruvatdehydrogenase ein mitochondriales Enzym ist, muss Pyruvat durch einen entsprechenden Transporter von Mitochondrien aufgenommen werden. In der mitochondrialen Matrix wird durch die Pyruvatdehydrogenase aus Pyruvat Acetyl-CoA erzeugt. Um seinen Kohlenstoff für die cytosolische Fettsäurebiosynthese nutzbar zu machen, muss dieses wieder aus dem mitochondrialen Matrixraum ausgeschleust werden. Da jedoch Acetyl-CoA die mitochondriale Innenmembran nicht permeieren kann, wird es durch Reaktion mit Oxalacetat zu Citrat umgewandelt, wofür die Citratsynthase zur Verfügung steht. Citrat kann nun durch ein spezifisches Transportsystem (7 Kap. 15.1.1) aus dem mitochondrialen in den cytosolischen Raum transportiert werden. Durch die hier lokalisierte ATP-Citratlyase wird Citrat in Oxalacetat und Acetyl-CoA umgewandelt: Citrat + ATP + CoA-SH → Oxalacetat + Acetyl-CoA + ADP + Pi

Auf diese Weise kann Glucosekohlenstoff über den Umweg der mitochondrialen Citratbildung in Form von AcetylCoA der cytosolischen Fettsäurebiosynthese zur Verfügung gestellt werden. Das dabei entstehende Oxalacetat wird durch die NADH/H+-abhängige Malatdehydrogenase zu Malat reduziert, welches ohne Schwierigkeit durch den Dicarboxylat-Carrier in den mitochondrialen Raum zurücktransportiert werden kann. Eine weitere Möglichkeit für das cytosolische Oxalacetat besteht in der oben erwähnten Umwandlung zu Pyruvat und CO2 durch Einschalten des Malatenzyms. Insulin führt in zweifacher Weise zu einer raschen Stimulation der Lipogenese: 4 es stimuliert die Glucoseaufnahme und die Glycolyse (7 Kap. 11.4, 11.6) und 4 überführt die Pyruvat-Dehydrogenase von der inaktiven in die aktive Form (7 Kap. 14.2)

In Kürze Fettsäuren werden intramitochondrial durch β-Oxidation zu Acetyl-CoA abgebaut, das dann der Energiegewinnung oder den verschiedensten Biosynthesen zur Verfügung steht. In den Peroxisomen sind Teilstrecken der β-Oxidation lokalisiert, die v.a. der Fettsäureverkürzung dienen. Bei stark gesteigerter β-Oxidation entstehen in der Leber aus Acetyl-CoA die Ketonkörper als wasserlösliche

12.3

Regulation des Stoffwechsels von Fettsäuren und Triacylglycerinen

12.3.1

Regulation der Synthese und des Abbaus von Triacylglycerinen

12

Derivate von Fettsäuren, die gute Substrate für eine Reihe extrahepatischer Gewebe sind. Auch die Fettsäurebiosynthese geht vom Acetyl-CoA aus. Sie ist im Cytosol lokalisiert und findet an einem Multienzymkomplex, der Fettsäuresynthase, statt. Ihr eigentliches Substrat ist jedoch das durch Carboxylierung von Acetyl-CoA entstehende Malonyl-CoA.

In Anbetracht der Bedeutung von Triacylglycerinen für den Energiehaushalt des Organismus ist es verständlich, dass ihr Stoffwechsel sehr genau reguliert werden muss. Die hierfür bekannten Mechanismen sind in den . Abb. 12.19 und 12.20 zusammengestellt. ! Die hormonsensitive Lipase wird durch Interkonvertierung reguliert.

Obwohl im Fettgewebe eine Reihe von Lipasen vorkommen (. Abb. 12.1), ist bisher nur für die hormonsensitive Lipase (HSL) eine hormonelle Regulation beschrieben worden, die für die Dynamik der Lipolyse unter verschiedenen metabolischen Zuständen verantwortlich sein kann. . Abb. 12.19 stellt die beteiligten Mechanismen dar. Im dephosphorylierten, inaktiven Zustand liegt das Enzym im Cytosol vor. Die Fetttröpfchen, welche die Substrate für die HSL enthalten (z.B. Triacylglycerine in Adipozyten oder Cholesterin-

. Abb. 12.19. cAMP-abhängige Phosphorylierung von Perilipin und hormonsensitiver Lipase bei der Lipolyse. HSL = Hormonsensitive Lipase; PKA = Proteinkinase A. (Einzelheiten 7 Text)

415 12.3 · Regulation des Stoffwechsels von Fettsäuren und Triacylglycerinen

. Abb. 12.20. Regulation von Lipolyse und Lipogenese. AMP-PK = AMP-abhängige Proteinkinase; DGAT = Diacylglycerin-Acyltransferase; DHAP = Dihydroxyacetonphosphat; GPAT = Glycerophosphat-Acyltransferase; HSL = hormonsensitive Lipase; PH = Phosphatidat-Phosphohydrolase; PKA = Proteinkinase A; SREBP = sterol response element binding

protein. Dicke Pfeile bedeuten Induktion (grün) bzw. Repression (rot), dünne Pfeile Aktivierung (grün) bzw. Hemmung (rot). Die gestrichelt dargestellte Phosphorylierung von Glycerin kommt nur in der Leber und im Intestinaltrakt vor. (Einzelheiten 7 Text)

ester in der Nebennierenrinde, den Ovarien oder in Testes) sind mit einer »Hülle« aus dem Protein Perilipin umgeben, die die Wechselwirkung zwischen HSL und Substrat verhindert. Phosphorylierung des Perilipins durch die cAMPabhängige Proteinkinase (PKA) führt zu dessen Abdissoziation vom Lipidtropfen. Gleichzeitig wird die HSL durch die PKA phosphoryliert; sie wird aus dem Cytosol zum Fetttropfen transloziert und beginnt nun mit der Spaltung ihres jeweiligen Substrates. Sinkt der cAMP-Spiegel, z.B. bei erhöhten Insulinkonzentrationen, so werden Perilipin und HSL durch Proteinphosphatase PP1 dephosphoryliert und damit die Lipolyse abgeschaltet. Über die Regulation der Fettgewebs Triacylglycerinlipase ATGL ist zur Zeit noch wenig bekannt, außer dass ihre Aktivität bei Nahrungsmangel steigt.

Viele experimentelle Daten haben eindeutig gezeigt, dass die Aktivität der Triacylglycerinbiosynthese in vielen Geweben vom Ernährungszustand abhängig ist. Bei Nahrungskarenz werden keine Triacylglycerine mehr synthetisiert. Füttert man jedoch Versuchstiere nach längerer Nahrungskarenz für einige Tage mit kohlenhydratreicher Kost, so steigt die Lipogenese dramatisch an. Da die einzelnen, für die Lipogenese verantwortlichen Enzyme erst seit kurzer Zeit charakterisiert sind, ist über ihre Regulation im Gegensatz zur hormonsensitiven Lipase noch relativ wenig bekannt (. Abb. 12.20): 4 Die Glycerophosphat-Acyltransferase (GPAT) wird durch Insulin induziert, wobei die Beteiligung des Transkriptionsfaktors SREBP-1c (7 Kap. 11.6.1) gesichert ist. Außerdem wird das Enzym durch Interkonvertierung reguliert, es kann durch Proteinkinasen phosphoryliert und damit inaktiviert werden. Gesichert scheint dies für die Proteinkinase A, darüber hinaus

! Die Enzyme der Lipogenese werden durch den Ernährungszustand und Hormone reguliert.

12

416

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

gibt es Hinweise dafür, dass auch die AMP-abhängige Proteinkinase (AMP-PK, 7 Kap. 16.1.4) zur Inaktivierung der GPAT imstande ist. Die Funktion der AMPPK besteht darin, anabole Stoffwechselwege durch Phosphorylierung der entsprechenden Schlüsselenzyme dann zu inaktivieren, wenn die Energieversorgung von Zellen danieder liegt und deswegen die AMPKonzentration ansteigt 4 Die Phosphatidat-Phosphohydrolase (PH) wird durch Acyl-CoA aktiviert 4 Da Diacylglycerin an einer Verzweigungsstelle der Lipidbiosynthese steht, muss angenommen werden, dass auch die Diacylglycerin-Acyltransferase (DGAT) reguliert wird

12.3.2

Regulation von Synthese und Abbau von Fettsäuren

! Die Geschwindigkeit der β-Oxidation der Fettsäuren wird hauptsächlich durch die Aktivität der CarnitinAcyltransferase reguliert.

12

Intrazelluläre Fettsäuren liegen, unabhängig davon ob sie durch die Plasmamembran aufgenommen bzw. durch Lipolyse oder Biosynthese erzeugt wurden, zunächst im Cytoplasma vor. Sie werden dort durch die Acyl-CoA-Synthetase in Acyl-CoA umgewandelt und verschiedenen Stoffwechselwegen zugeführt. Für ihre Oxidation ist der Transfer in die mitochondriale Matrix erforderlich, da dort die Enzyme der β-Oxidation der Fettsäuren lokalisiert sind. Hierfür ist eine Umesterung auf Carnitin unter Bildung von Acylcarnitin mit der Carnitin-Acyltransferase-1 (7 Kap. 12.2.1) notwendig. Dies ist der geschwindigkeitsbestimmende Schritt der β-Oxidation der Fettsäuren. Das Enzym wird durch folgende Mechanismen reguliert (. Abb. 12.21): 4 Malonyl-CoA ist ein Inhibitor der Carnitin-Acyltransferase-1. Hohe Spiegel von Malonyl-CoA treten immer bei gesteigerter Fettsäurebiosynthese auf (7 Kap. 12.2.3). Unter diesen Umständen wäre es sinnlos, die synthetisierten Fettsäuren der Oxidation zuzuführen 4 Langkettige Fettsäuren steigern die Expression der Carnitin-Acyltransferase-1. Hierfür ist der Transkriptionsfaktor PPARα (peroxisome proliferator activated receptor) verantwortlich, der möglicherweise durch Metaboliten von langkettigen Fettsäuren aktiviert wird. PPARα wird außerdem durch eine als Fibrate bezeichnete Gruppe von Arzneimitteln aktiviert, die zur Bekämpfung von Hyperlipidämien (7 Kap. 18.6.2) eingesetzt werden 4 Schilddrüsenhormone induzieren die Expression der Carnitin-Acyltransferase. Dies dient dazu, den unter dem Einfluss von Schilddrüsenhormonen erhöhten Energiebedarf durch Steigerung der β-Oxidation der Fettsäure zu decken

Die in die mitochondriale Matrix translozierten Fettsäuren werden überwiegend von den dort lokalisierten Enzymen der β-Oxidation zu Acetyl-CoA abgebaut, das in den Citratzyklus eingeschleust wird. Es gibt experimentelle Hinweise dafür, dass auch einige der Enzyme der β-Oxidation durch PPARα induziert werden. ! Die Fettsäurebiosynthese wird auf der Stufe der Pyruvatdehydrogenase, der Acetyl-CoA-Carboxylase und der Fettsäuresynthase reguliert.

Pyruvatdehydrogenase. Bei fettarmer Ernährung findet

in beträchtlichem Umfang eine Fettsäurebiosynthese aus Glucose statt. Dabei muss das durch Glycolyse erzeugte Pyruvat intramitochondrial durch dehydrierende Decarboxylierung in Acetyl-CoA umgewandelt werden, wonach der Acetylkohlenstoff in Form von Citrat aus den Mitochondrien ausgeschleust werden kann (7 Kap. 12.2.3). Der reaktionsgeschwindigkeitsbestimmende Schritt in dieser Reaktionsfolge ist die Pyruvatdehydrogenase, die in einer phosphorylierten inaktiven und einer dephosphorylierten aktiven Form vorkommt (7 Kap. 14.2). In Geweben, die eine aktive Lipogenese betreiben, besteht eine direkte Proportionalität zwischen dem aktiven Anteil der Pyruvatdehydrogenase sowie der Geschwindigkeit der Fettsäurebiosynthese. Am besten untersucht ist in dieser Beziehung das Fettgewebe, wo eine lebhafte Lipogenese aus Kohlenhydraten stattfinden kann. Hier spielt Insulin (7 Kap. 26.1.6) eine entscheidende Rolle: 4 Es beschleunigt den Glucosetransport in die Fettzelle und erhöht dadurch das Pyruvatangebot als Substrat für die mitochondriale Pyruvatdehydrogenase 4 Unter dem Einfluss von Insulin wird die Pyruvatdehydrogenase aus der inaktiven in die aktive Form überführt. Ohne Insulin, also im Hunger oder bei Diabetes mellitus, liegen weniger als 10% der Pyruvatdehydrogenase des Fettgewebes in der aktiven Form vor Außer dieser hormonellen findet sich auch eine metabolische Regulation der Pyruvatdehydrogenase. Die im Hunger und bei Insulinmangel auftretende Lipolyse (7 Kap. 16.1.4) führt zu einer Beschleunigung der βOxidation mit Erhöhung der intramitochondrialen Quotienten Acetyl-CoA/CoA-SH sowie NADH/NAD+. Änderungen dieser Quotienten führen zu einer Hemmung der Aktivität des Pyruvatdehydrogenase-Komplexes (7 Kap. 14.2). Acetyl-CoA-Carboxylase. Die Acetyl-CoA-Carboxylase ist

das geschwindigkeitsbestimmende Enzym der Fettsäurebiosynthese aus Acetyl-CoA. Es unterliegt einer komplexen Regulation durch allosterische Effektoren, covalente Modifikation und Beeinflussung seiner Genexpression (. Abb. 12.21):

417 12.3 · Regulation des Stoffwechsels von Fettsäuren und Triacylglycerinen

. Abb. 12.21. Regulation der β-Oxidation der Fettsäuren sowie der Fettsäurebiosynthese. AMP-PK = AMP-abhängige Proteinkinase; SREBP = sterol response element binding protein; PPAR = Peroxisomen Proliferator Aktivator Rezeptor; PUFA = mehrfach ungesättigte lang-

kettige Fettsäuren; PDH = Pyruvatdehydrogenase. Dicke Pfeile bedeuten Induktion (grün) bzw. Repression (rot), dünne Pfeile Aktivierung (grün) bzw. Hemmung (rot). (Einzelheiten 7 Text)

4 Die Acetyl-CoA-Carboxylase kommt in einer inaktiven monomeren Form und einer aktiven polymeren Form vor. Das aktive polymere Enzym setzt sich aus 10–20 Protomeren zusammen und erscheint im Elektronenmikroskop als filamentöse Struktur. Der Übergang in die aktive, polymere Form wird in vitro durch Tricarboxylatanionen, besonders Citrat, stimuliert 4 Acyl-CoA ist ein Inhibitor der Acetyl-CoA-Carboxylase. Das Auftreten dieses Metaboliten bedeutet, dass der Acyl-CoA-Pool aufgefüllt ist und eine weitere Fettsäuresynthese nicht notwendig ist 4 Die Acetyl-CoA-Carboxylase kann durch die AMPabhängige Proteinkinase (7 Kap. 16.1.4) phosphoryliert und inaktiviert werden. Damit wird verhindert, dass bei einem zellulären Energiemangel mit Erhöhung der AMP-Spiegel Fettsäuren synthetisiert werden

4 Schließlich wird die Acetyl-CoA-Carboxylase durch Glucose und Insulin induziert und durch Acyl-CoA reprimiert. Diese Regulation gewährleistet, dass bei überschüssiger Zufuhr von Nahrungsstoffen, insbesondere von Kohlenhydraten, eine Speicherung dieser Nahrungsstoffe in Form von Fettsäuren und Triacylglycerinen erfolgen kann Fettsäuresynthase. Anders als bei der Pyruvatdehydroge-

nase und der Acetyl-CoA-Carboxylase ist für die Fettsäuresynthase keine Regulation durch allosterische Effektoren oder Interkonvertierung bekannt. Das Enzym wird aber durch eine Reihe unterschiedlicher Faktoren induziert oder reprimiert (. Abb. 12.21): 4 Insulin ist zusammen mit Glucose ein starker Induktor der Fettsäuresynthase, wobei wiederum der Transkriptionsfaktor SREBP-1c beteiligt ist. Dies erklärt die starke Zunahme der Fettsäurebiosynthese bei kohlenhydratreicher Ernährung

12

418

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

4 Hormone, die zu einer Steigerung der cAMP-Konzentration führen, z.B. Katecholamine oder Glucagon, reprimieren die Fettsäuresynthase 4 Langkettige, mehrfach ungesättigte Fettsäuren sind starke Repressoren der Fettsäuresynthase

Diese Regulationsmechanismen erlauben eine wirkungsvolle Anpassung der Fettsäurebiosynthese und damit der Lipogenese an das Nahrungsmittelangebot und gewährleisten eine Hemmung der Fettsäuresynthese bei Nahrungskarenz.

In Kürze Substratzufuhr bzw. Substratmangel bestimmen das Verhältnis von Lipogenese bzw. Lipolyse. Nahrungskarenz führt zu einer Inaktivierung der lipogenetischen Enzyme und zu einem Überwiegen der lipolytischen. Die cAMP-abhängige Proteinkinase A phosphoryliert und aktiviert die hormonsensitive Lipase und stimuliert die Lipolyse. Für die Lipogenese ist das Insulin als Aktivator der α-Glycerophosphat-Acyltransferase wichtig. Dieses Enzym wird außerdem durch Phosphorylierung inaktiviert, wofür die Proteinkinase A sowie die AMP-aktivierte Proteinkinase verantwortlich sind. Die PhosphatidatPhosphohydrolase wird durch Acyl-CoA aktiviert, über die Regulation der Diacylglycerin-Acyltransferase ist wenig bekannt. Die Translokation von Acylresten durch die innere Mitochondrienmembran stellt den geschwindigkeitsbe-

12

12.4

Ungesättigte Fettsäuren und Eikosanoide

12.4.1

Biosynthese ungesättigter Fettsäuren

Sowohl der Schmelzpunkt von Triacylglycerinen als auch die Membranfluidität (7 Kap. 2) hängen vom Anteil einoder mehrfach ungesättigter Fettsäuren in den entsprechenden Lipiden ab. Ungesättigte Fettsäuren sind darüber hinaus Vorläufer essentieller Signalmoleküle wie beispielsweise der Eikosanoide. Aus diesem Grund überrascht es nicht, dass die Einführung von Doppelbindungen in die durch die Fettsäuresynthase gebildeten gesättigten Fettsäuren eine außer-

stimmenden Schritt der β-Oxidation der Fettsäuren dar. Die hierfür verantwortliche Carnitin-Acyltransferase-1 wird durch Malonyl-CoA gehemmt und durch Schilddrüsenhormone und Aktivatoren des Transkriptionsfaktors PPARα induziert. Die Acetyl-CoA-Carboxylase ist das geschwindigkeitsbestimmende Enzym der Fettsäuresynthese. Sie wird durch Acyl-CoA gehemmt und durch Citrat aktiviert. Reversible Phosphorylierung durch die AMP-abhängige Proteinkinase führt zur Inaktivierung. Insulin und Glucose sind starke Induktoren, Acyl-CoA ist ein Repressor des Enzyms. Insulin und Glucose induzieren die Fettsäuresynthase, cAMP und mehrfach ungesättigte Fettsäuren reprimieren sie.

ordentlich wichtige Funktion ist, die im Tier- und Pflanzenreich sowie bei Mikroorganismen vorkommt. Die für den Stoffwechsel des Säugerorganismus wichtigen ungesättigten Fettsäuren sind in . Tabelle 12.2 zusammengestellt. Wegen der spezifischen Eigenschaften der tierischen Fettsäuredesaturasen (7 u.) können lediglich Palmitolein- und Ölsäure in tierischen Zellen synthetisiert werden. Linol- und Linolensäure müssen dagegen mit der Nahrung zugeführt werden, sind also essentielle Fettsäuren. Die in . Tabelle 12.2 angeführte Arachidonsäure, die für die Biosynthese von Eikosanoiden von besonderer Bedeutung ist, kann zwar durch Kettenverlängerung und Desaturierung synthetisiert werden, benötigt jedoch Linolsäure als Ausgangsmaterial.

. Tabelle 12.2. Für den Säuger wichtige ungesättigte Fettsäuren (Auswahl) Einfach ungesättigte Fettsäuren: Summenformel CnH2n–1COOH Trivialname

Chemischer Name 9

Formel

Mol.-Gew.

Vorkommen

Palmitoleinsäure

cis-Δ -Hexadecensäure

C16H30O2

254,42

In Milchfett und Depotfett, Bestandteil der Pflanzenöle

Ölsäure

cis-Δ9-Octadecensäure

C18H34O2

282,47

Hauptbestandteil aller Fette und Öle

Nervonsäure

cis-Δ15-Tetracosensäure

C24H46O2

366,63

In Cerebrosiden

Formel

Mol.-Gew.

Vorkommen

Mehrfach ungesättigte Fettsäuren Trivialname

Chemischer Name 9, 12

Linolsäure

Δ

C18H32O2

280,45

In Pflanzenölen und Depotfett

Linolensäure

Δ9, 12, 15-Octadecatriensäure

-Octadecadiensäure

C18H30O2

278,44

In Pflanzenölen

Arachidonsäure

Δ5, 8, 11, 14-Eicosatetraensäure

C20H32O2

304,48

In Fischölen, Bestandteil vieler Phosphoglyceride

419 12.4 · Ungesättigte Fettsäuren und Eikosanoide

. Abb. 12.22. Mechanismus der durch Desaturasen katalysierten Biosynthese ungesättigter Fettsäuren aus gesättigten Fettsäuren. Die dargestellte Reaktionsfolge findet unter Katalyse eines Membran-gebundenen Enzymkomplexes aus NADPHCytochrom b5-Reduktase, Cytochrom b5 und Desaturase statt. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

! Für die Biosynthese ungesättigter Fettsäuren aus gesättigten Fettsäuren werden Desaturasen benötigt.

Desaturasen sind an das endoplasmatische Retikulum gebundene Enzymkomplexe aus einer NADPH/H+-Cytochrom b5-Reduktase, Cytochrom b5 und der eigentlichen Desaturase (. Abb. 12.22). Ihr Reaktionsmechanismus entspricht dem mischfunktioneller Oxygenasen. Zunächst werden Elektronen von NADPH/H+ auf FAD übertragen, das als Coenzym der NADPH-Cytochrom b5-Reduktase dient. Das Hämeisen des Cytochrom b5 wird dadurch zur zweiwertigen Form reduziert. Von ihm werden Elektronen auf ein binucleäres Eisenzentrum der Desaturase übertragen. Zwei Elektronen reagieren danach mit dem Sauerstoff und dem gesättigten Acyl-CoA. Dabei entsteht eine Doppelbindung und zwei Moleküle Wasser werden freigesetzt. Zwei der Elektronen entstammen dem NADPH/H+, zwei weitere der Einfachbindung des Acyl-CoA. ! In tierischen Zellen kommen nur Δ9-, Δ6- und Δ5-Desaturasen vor.

Die Desaturasen tierischer Zellen zeichnen sich dadurch aus, dass sie nur Doppelbindungen erzeugen können, die nicht weiter als 9 C-Atome von der Carboxylgruppe entfernt sind. Man unterscheidet im Einzelnen: Δ9-Desaturasen. Sie bilden eine Gruppe von Enzymen, die

als Substrate Palmityl- und v.a. Stearyl-CoA verwerten, weswegen sie auch als Stearyl-CoA-Desaturasen bezeichnet werden. Wie ihr Name sagt, führen sie eine Doppelbindung am C-Atom 9 dieser Fettsäuren ein, sodass als Reaktionsprodukte Palmitoleyl-CoA bzw. Oleyl-CoA entstehen. Beide Fettsäuren werden in Triacylglycerine und die verschiedenen Membranlipide eingebaut. Man kennt inzwischen vier Isoformen der Δ9-Desaturasen, die sich durch unterschiedliche Organverteilungen auszeichnen. Δ6- und Δ5-Desaturasen. Diese Gruppe von Enzymen führt

Doppelbindungen an den C-Atomen 5 bzw. 6 von ungesättigten Fettsäuren ein. Bevorzugte Substrate sind LinoleylCoA (Δ9,12-Octadecadienoyl-CoA) bzw. Linolenyl-CoA (Δ9,12,15-Octadecatrienoyl-CoA). In diese Fettsäuren, die

von tierischen Organismen nicht synthetisiert werden können und deshalb als essentielle Fettsäuren bezeichnet werden, fügen die Δ6- und Δ5-Desaturasen weitere Doppelbindungen ein, sodass weitere mehrfach ungesättigte Fettsäuren (polyunsaturated fatty acids, PUFA) entstehen. Auch diese werden in Phospholipide eingebaut, denen jedoch v.a. der Biosynthese einer wichtigen Gruppe von Signalmolekülen, der Eikosanoide ! Mehrfach ungesättigte Fettsäuren entstehen durch Kettenverlängerung und Desaturierung.

Durch Kombination von Desaturierung und Kettenverlängerung können mehrfach ungesättigte Fettsäuren synthetisiert werden. Die hierfür benötigten Linolsäure und Linolensäure stammen v.a. aus dem Pflanzenreich, wo entsprechende Desaturasen vorkommen. In tierischen Organismen können sie nicht synthetisiert werden und gehören damit zu den essentiellen Fettsäuren. Diese liefern die für die Biosynthese der sog. Eikosanoide benötigten Substrate, v. a. die Arachidonsäure, deren Biosynthese aus Linolsäure in . Abb. 12.23 dargestellt ist. In einem ersten Schritt wird dabei in Linoleyl-CoA durch die Δ6-Desaturase eine neue Doppelbindung eingeführt, wobei ein Δ6,9,12-Octadecatrienoyl-CoA gebildet wird. Dieses kann nun um zwei C-Atome verlängert werden. Hierfür ist ein im endoplasmatischen Retikulum lokalisiertes Kettenverlängerungssystem notwendig. Es benutzt Malonyl-CoA als Substrat, der Mechanismus entspricht demjenigen der Fettsäurebiosynthese, allerdings befinden sich die einzelnen hierfür notwendigen Enzyme im endoplasmatischen Retikulum und die Substrate liegen als Thioester mit Coenzym A vor. Das Reduktionsmittel ist jedoch NADPH/H+. Auf diese Weise entsteht aus der dreifach ungesättigten C 18-Fettsäure das Δ8,11,14-Eikosatrienoyl-CoA mit 20 C-Atomen. In diese Verbindung wird durch die Δ5-Desaturase eine weitere Doppelbindung eingeführt, sodass das Δ5,8,11,14-Eikosatetraenoyl-CoA, das Arachidonyl-CoA, entsteht. Mit Hilfe ähnlicher Reaktionen gelingt auch die Biosynthese anderer, mehrfach ungesättigter Fettsäuren. Allerdings kann im tierischen Organismus jede neue Doppelbindung nur zwischen bereits vorhandenen Doppelbin-

12

420

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

. Abb. 12.24 zeigt die einzelnen Schritte der Biosynthese

von Prostanoiden: 4 Das wichtigste Substrat für die Prostanoidsynthese ist Arachidonat. Dieses ist häufig mit der OH-Gruppe 2 des Glycerinteils von Membran-Phosphoglyceriden (z.B. Phosphatidyl-Cholin, Phosphatidyl-Serin) verestert. Für seine Freisetzung wird deshalb eine Phospholipase A2 (7 Kap. 18.1.2) benötigt 4 In einer sauerstoffabhängigen Reaktion entsteht unter Katalyse der Prostaglandin H-Synthase (PGHS) das Prostaglandin H2 (PGH2) als Muttersubstanz der Prostaglandine (PG) I2, E2 und F2 sowie des Thromboxans A2 (aus Eikosatriensäure entstehen die Prostaglandine der Serie 1 (PG1), aus Eikosapentaensäure diejenigen der Serie 3 (PG3)) 4 Es gibt zwei Isoformen der Prostaglandin H-Synthase, die als PGHS-1 und PGHS-2 bezeichnet werden 4 Beide PGHS-Isoformen enthalten eine Cyclooxygenasesowie eine Peroxidaseaktivität. Erstere ist für die Umwandlung von Arachidonsäure zu Prostaglandin G2 verantwortlich, letztere für die anschließende Reduktion der 15-Hydroperoxylgruppe des Prostaglandins G2 zur 15-Hydroxylgruppe des Prostaglandins H2 4 PGHS-1 wird konstitutiv in vielen Zellen exprimiert, PGHS-2 unterliegt dagegen einer vielfältigen Regulation. Als allgemeine Regel gilt, dass die Aktivität der PGHS-2 durch Wachstumsfaktoren und Entzündungsmediatoren wie Interleukin-1 oder TNFα induziert wird. Dagegen reprimieren Glucocorticoide und antiinflamatorische Cytokine die PGHS-2-Expression 4 Jeweils spezifische Prostaglandin-Synthasen führen zu den weiteren Prostaglandinen (PGD2, PGE2, PGF2α, PGI2) sowie zum Thromboxan A2

12 . Abb. 12.23. Biosynthese von Arachidonyl-CoA aus LinoleoylCoA

! Prostaglandine und Thromboxane haben vielfältige Wirkungen als Signalmoleküle.

dungen und der Carboxylgruppe der Fettsäure eingeführt werden (7 o.).

Die Gewebsverteilung der PGHS sowie der ProstaglandinSynthasen, die an der Biosynthese der anderen Prostaglan-

12.4.2

Prostaglandine, Thromboxane und Leukotriene

Prostaglandine, Thromboxane und Leukotriene sind Derivate mehrfach ungesättigter Fettsäuren, insbesondere der Arachidonsäure. Sie entstehen in den meisten tierischen Geweben, wo sie eine große Zahl hormoneller und anderer Stimuli modulieren. Darüber hinaus spielen sie eine wichtige Rolle bei Überempfindlichkeits- und Entzündungsreaktionen. Sie werden unter der Summenbezeichnung Eikosanoide zusammengefasst. Thromboxane und Prostaglandine werden auch als Prostanoide bezeichnet. ! Prostaglandin H-Synthasen sind die geschwindigkeitsbestimmenden Enzyme für die Prostanoidsynthese.

. Tabelle 12.3. Überblick über die biologischen Effekte von Prostaglandinen und Thromboxanen Verbindung

Wichtigste biologische Aktivität

Prostaglandin E2

Bronchodilatation, Vasodilatation, Hemmung der Cl–-Sekretion im Magen, Antilipolyse im Fettgewebe, Erzeugung von Fieber, Entzündungsreaktion, Entzündungsschmerz, Aktivierung von Osteoklasten

Prostaglandin D2

Bronchokonstriktion, Schlaferzeugung

Prostaglandin F2α

Bronchokonstriktion, Vasokonstriktion, Konstriktion der glatten Muskulatur

Thromboxan A2

Bronchokonstriktion, Vasokonstriktion, Plättchenaggregation

Prostaglandin I2 (Prostacyclin)

Vasodilatation, Zunahme der Gefäßpermeabilität, Hemmung der Plättchenaggregation, Entzündungsreaktion

421 12.4 · Ungesättigte Fettsäuren und Eikosanoide

. Abb. 12.24. Biosynthese der Prostaglandine und Thromboxane aus Arachidonat. Durch eine Phospholipase A2 wird Arachidonat aus Phospholipiden abgespalten. Die Prostaglandin H-Synthase (PGH-Synthase) führt zum Prostaglandin H2 als Muttersubstanz der weiteren Prostaglandine und des Thromboxans A2. PG = Prostaglandin; Tx = Thromboxan

dine beteiligt sind, zeigt, dass nahezu alle Gewebe zur Prostaglandin-Biosynthese befähigt sind. Allerdings haben die sezernierten Prostaglandine Halbwertszeiten zwischen einigen Sekunden und wenigen Minuten. Man geht infolgedessen davon aus, dass sie im Wesentlichen para- bzw. autokrin wirken und damit eine Funktion als Gewebshormone haben. Ihr Wirkungsprofil hängt dabei entscheidend davon ab, welche Prostaglandinrezeptoren (7 u.) in der unmittelbaren Nachbarschaft der Prostaglandin-synthetisierenden Zellen exprimiert werden.

Prostaglandineffekte sind außerordentlich vielfältig und schwer unter dem Aspekt eines einheitlichen Wirkungsmechanismus zu verstehen (. Tabelle 12.3) 4 Prostaglandin D2 führt zu einer Bronchokonstriktion und ist, wie andere Prostaglandine auch, mit der Entstehung von Asthma bronchiale in Verbindung gebracht worden 4 In vielen, allerdings nicht allen bis jetzt untersuchten Geweben führt Prostaglandin E2 zu einer Zunahme des cAMP-Gehalts, was z.B. eine Relaxierung der glatten

12

422

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

Muskulatur hervorruft (7 Kap. 26.3.4). Dies zeigt sich besonders deutlich an der Uterusmuskulatur, an einer allgemeinen Vasodilatation sowie einer Erweiterung des Bronchialsystems. Im Magen hat Prostaglandin E2 einen cytoprotektiven Effekt, da es die Mucinsekretion stimuliert. Am Fettgewebe ist Prostaglandin E2 nach Insulin die am stärksten wirksame antilipolytische Verbindung, da es hier eine Senkung des cAMP-Spiegels auslöst 4 Prostaglandin F2α hat in vielen Aspekten einen zum Prostaglandin E2 antagonistischen Effekt. So führt es zu einer Bronchokonstriktion und Vasokonstriktion sowie zu einer auch klinisch ausgenützten Kontraktion der Uterusmuskulatur 4 Von besonderem Interesse sind die Beziehungen zwischen dem Prostaglandin I2 (Syn. Prostacyclin) und Thromboxan A. Das Letztere entsteht bevorzugt in Blutplättchen aus Prostaglandin H2. Es induziert die Plättchenaggregation sowie die damit verbundene Freisetzungsreaktion (7 Kap. 29.5.2) und spielt somit eine wichtige Rolle bei der Blutstillung. Seine Wirkung wird über einen Abfall der cAMP-Konzentration in Thrombozyten vermittelt. Ein Thromboxanantagonist ist das Prostaglandin I2, das in Gefäßendothelzellen aus Prostaglandin F2α entsteht. Es ist ein Aktivator der Adenylatcyclase in vielen Geweben und damit auch in Blutplättchen und hemmt somit die Plättchenaggregation

12

Störungen im Verhältnis von Thromboxan A2 und Prostaglandin I2 scheinen bei einer Reihe von pathologischen Zuständen eine wichtige Rolle zu spielen. So findet sich bei Diabetes mellitus mit Gefäßkomplikationen eine Hemmung der Prostaglandin I2-Bildung und eine Steigerung der Thromboxan-Biosynthese. Auch für die Entstehung der Arteriosklerose wird eine Störung des Gleichgewichts zwischen Thromboxanen und Prostaglandin I2 verantwortlich gemacht. Auf jeden Fall muss angenommen werden, dass das arteriosklerotisch geschädigte Gefäßendothel eine verringerte Kapazität zur Prostaglandin I2-Synthese hat, weswegen allein schon die Plättchen-aggregierende Wirkung der Thromboxane überwiegt. Dies ist die Basis für die durch zahlreiche Studien bekräftigte Therapie der Coronarsklerose mit Hemmstoffen der Cyclooxygenase (7 u.). In . Tabelle 12.4 sind die bis heute bekannten Prostaglandin-Rezeptoren zusammengefasst. Es handelt sich in jedem Falle um Rezeptoren mit sieben Transmembrandomänen, die an große, heterotrimere G-Proteine gekoppelt sind (7 Kap. 25.6). Sie führen je nach Typ zu einer Stimulierung bzw. Hemmung der Adenylatcyclase mit entsprechenden Veränderungen der cAMP-Konzentration oder beeinflussen die zelluläre Calciumkonzentration über den Phosphatidylinositol-Zyklus (7 Kap. 25.6.3). Prostaglandine sind eine vielfältige Gruppe von Gewebshormonen, die von sehr vielen Zellen synthetisiert

. Tabelle 12.4. Rezeptoren für Prostaglandine Rezeptor für

Effekt

Nachgewiesen in

PG D2

Anstieg von cAMP

Ileum

Subtyp EP 1

Zunahme von IP3

Nieren

Subtyp EP 2

Zunahme von cAMP

Thymus, Lunge, Myokard, Milz, Ileum, Uterus

Subtyp EP 3

Abfall von cAMP

Fettgewebe, Magen, Nieren, Uterus

PG F2D

Zunahme von IP3

Nieren, Uterus

Thromboxan A2

Abfall von cAMP

Thrombozyten, Thymus, Lunge, Nieren, Myokard

Prostaglandin I2

Zunahme von cAMP

Thrombozyten, Thymus, Myokard, Milz

PG E2

werden können. Allerdings zeigen unterschiedliche Zellen ausgeprägte Unterschiede bezüglich ihrer Fähigkeit zur Synthese spezifischer Prostaglandine und, was noch wichtiger ist, zur Spezifität ihrer Prostaglandinrezeptoren. Hier zeichnet sich ein besonders fein differenziertes Bild ab. So konnte z.B. durch in situ-Hybridisierung gezeigt werden, dass in der Niere der Subtyp EP3 der Prostaglandin-ERezeptoren vornehmlich in den medullären Tubulusepithelien lokalisiert ist, der Subtyp EP1 in den Sammelrohren der Papille und der Subtyp EP2 in den Glomeruli. Man nimmt an, dass diese Verteilung die durch Prostaglandin E2 ermittelten Regulationen von Ionentransport, Wasserreabsorption und glomerulärer Filtrationsrate ermöglicht. Bei der Analyse der Prostaglandin E2-Rezeptoren des Nervensystems hat sich gezeigt, dass der Subtyp EP3 des Prostaglandin E-Rezeptors in kleinen Neuronen der Ganglien der dorsalen Wurzel besonders hoch exprimiert ist. Man spekuliert, dass sich hierin die durch Prostaglandin E2 vermittelte Hyperalgesie (Schmerzempfindlichkeit) widerspiegelt. ! Für die Erzeugung von Leukotrienen aus Arachidonsäure sind Lipoxygenasen verantwortlich.

Eine alternative Modifikation der Arachidonsäure wird durch Lipoxygenasen erzeugt. Die 5-Lipoxygenase führt zur Bildung einer Hydroperoxydstruktur am C-Atom 5 der Arachidonsäure, aus der durch Umlagerung der Doppelbindungen eine Verbindung mit drei konjugierten Doppelbindungen, das Leukotrien A4 entsteht (. Abb. 12.25, Reaktion (2)). Dieses ist der Ausgangspunkt für die Biosynthese der anderen Leukotriene. Durch die Leukotrien A4-Epoxyd-Hydrolase entsteht Leukotrien B4 (. Abb. 12.25, Reaktion (3)). Alternativ heftet die Leukotrien C4-Synthase über eine Thioetherbrücke Glutathion an das Leukotrien A4, wodurch Leukotrien C4 entsteht (. Abb. 12.25, Reaktion (4)). Durch schrittweise Abtrennung von Glutamat und Glycin entstehen aus dem Leukotrien C4 die Leukotriene

423 12.4 · Ungesättigte Fettsäuren und Eikosanoide

. Abb. 12.25. Biosynthese der Leukotriene aus Arachidonat. Aus Arachidonat entsteht durch die Lipoxygenase das 5-Hydroperoxyeikosatetraenoat (5-HPTE), das durch Umlagerung das Leukotrien A4 liefert. Durch eine Epoxyd-Hydrolase entsteht das Leukotrien B4, durch Anlagerung von Glutation das Leukotrien C4. Die Leukotriene D4 und E4 werden durch schrittweise Abspaltung von Glutamat und Glycin gebildet. 1 Phospholipase A2; 2 5-Lipoxygenase; 3 LeukotrienA4-Epoxydhydrolase; 4 Leukotrien-C4-Synthase; 5 J-Glutamyl-Transpeptidase; 6 Cysteinyl-Glycin-Dipeptidase; GSH = Glutathion

D4 und E4 (. Abb. 12.25, Reaktionen (5) und (6)). Außer der 5-Lipoxygenase ist in verschiedenen Geweben eine 12- bzw. 15-Lipoxygenase nachgewiesen worden. Sie ist für die Bildung von 12- bzw. 15-Hydroperoxyeikosatetraen-Säuren (12-, 15-HPETE) verantwortlich. Über die biologische Bedeutung dieser Arachidonsäurederivate ist noch relativ wenig bekannt.

! Leukotriene sind Mediatoren der Entzündungsreaktion.

Schon Mitte des letzten Jahrhunderts wurde beobachtet, dass aus mit Kobragift behandelter Lunge eine Substanz freigesetzt wird, die die glatte Muskulatur zur Kontraktion bringt. Später ergab sich, dass diese als slow reacting substance (SRS) bezeichnete Verbindung zusammen mit an-

12

424

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

deren Mediatoren bei durch Immunglobulin E vermittelten Überempfindlichkeitsreaktionen entsteht und dass es sich bei ihr um ein Gemisch aus den Leukotrienen C4, D4 und E4 handelt. Sie gehören zu den stärksten Constrictoren der Bronchialmuskulatur. Das Leukotrien C4 ist beispielsweise 100–1000 mal wirksamer als Histamin und spielt bei der Entstehung von Asthmaanfällen eine entscheidende Rolle. Auch in eine Reihe von entzündlichen Phänomenen sind Leukotriene eingeschaltet. Sie erhöhen die Kapillarpermeabilität und führen zu Ödemen. Das Leukotrien B4 hat dagegen einen chemotaktischen Effekt auf Leukozyten. Man vermutet aus diesem Grund, dass es an der Wanderung von weißen Blutzellen in Entzündungsgebiete beteiligt ist. Die eigentliche physiologische Funktion der Leukotriene ist allerdings nach wie vor ungeklärt. KnockoutMäuse (7 Kap. 7.4.5), bei denen das 5-Lipoxygenase-Gen ausgeschaltet wurde, waren erwartungsgemäß nicht mehr zur Leukotrienbiosynthese imstande, entwickelten sich jedoch normal und überstanden eine Reihe von experimentell ausgelösten Entzündungs- und Schockreaktionen besser als die Wildtypmäuse. ! Natürliche und pharmakologische Hemmstoffe von Eikosanoiden haben vielfältige Wirkungen.

12

Die Bedeutung von Arachidonsäuremetaboliten besonders für die Vermittlung von Entzündungs- und Überempfindlichkeitsreaktionen, aber auch für die Schmerzperzeption, geht aus dem Wirkungsspektrum spezifischer Hemmstoffe, ihrer Biosynthese bzw. der von Rezeptorantagonisten hervor. . Abb. 12.26 fasst die verschiedenen Angriffspunkte derartiger Medikamente zusammen: 4 Nichtsteroidale Entzündungshemmer (NSAIDs, non steroidal antiinflammatory drugs). Unter dieser Bezeichnung fasst man Wirkstoffe zusammen, die die Prostaglandinbiosynthese durch Hemmung der PGHS vermindern. Dieser Gruppe von Arzneimitteln ist gemeinsam, dass beide Isoformen des Enzyms in gleicher Weise in ihrer Aktivität reduziert werden. Das bekannteste derartige Arzneimittel ist das Aspirin (Acetylsalicylsäure), das die beiden PGHS-Isoformen an einem Serylrest acetyliert und damit die Bindung des Substrats Arachidonsäure hemmt. Ein anderer Wirkstoff aus dieser Gruppe ist das Indomethacin, das als kompetitiver Hemmstoff an der Arachidonsäure-Bindungsstelle wirkt. Nichtsteroidale Entzündungshemmer haben vielfältige Effekte. Sie wirken vermutlich durch eine Hemmung der Biosynthese von Prostaglandin E2 schmerzstillend und dämpfen Entzündungsreaktionen. Außerdem hemmen sie die Thromboxanbiosynthese und vermindern damit die Plättchenaggregation, während die ebenfalls ausgelöste Hemmung der Prostaglandin I2-Synthese demgegenüber weniger ins Gewicht fällt. Dies ist die Grundlage der Aspirindauerbehandlung bei der Bekämpfung der mit einer

. Abb. 12.26. Pharmakologische Hemmung der Eikosanoidbiosynthese. Glucocorticoide führen zu einer Hemmung der cytosolischen Phospholipase A2, die auch durch Hemmung der intrazellulären Calciumakkumulation negativ beeinflusst werden kann. Nichtsteroidale Entzündungshemmer (Aspirin, Indomethazin) sind dagegen Hemmstoffe der Cyclooxygenasen

Coronarsklerose einhergehenden coronaren Herzerkrankung, bei der eine Störung des Gleichgewichts zwischen Thromboxanen und Prostaglandin I2 vorliegt. Eine allen nicht-steroidalen Entzündungshemmern gemeinsame Nebenwirkung betrifft die Mucinproduktion des Magens, die durch Prostaglandin E2 gesteigert wird (7 Kap. 32.1.6). Jede Hemmung der Prostaglandinsynthese führt also zu einer verminderten Mucinsynthese und damit zum Wegfall eines wichtigen Faktors, der die Magenmukosa vor der Selbstverdauung v.a. durch die Salzsäure schützt. Immerhin erkranken etwa 1% der Patienten, die diese Arzneimittel in Dauermedikation nehmen, an Magengeschwüren und anderen schweren gastrointestinalen Komplikationen 4 COX 2-Inhibitoren. Eine neue Gruppe von Inhibitoren der Prostaglandinbiosynthese sind die sog. COX 2-Inhibitoren. Diese Verbindungen hemmen spezifisch die Cyclooxygenaseaktivität der PGHS-2. Da dieses Enzym in der Magenschleimhaut nicht vorkommt, fällt bei Verwendung von COX 2-Inhibitoren die oben beschriebene Nebenwirkung weg, während die erwünschten Wirkungen weitgehend erhalten bleiben 4 Phospholipase A2-Inhibitoren. Die sog. nicht-steroidalen Entzündungshemmer beeinflussen aufgrund ihres Wirkungsspektrums nicht die Leukotrienbiosynthese. Für die Hemmung der Biosynthese aller Eikosanoide muss die durch die cytosolische Phospholipase A2 (cPLA2) ausgelöste Arachidonsäurefreisetzung gehemmt werden. Hier spielen Glucocorticoide eine wichtige Rolle: Sie reprimieren die cPLA2 und induzieren Lipocortin-1. Dieses zur Annexin-Familie gehörende Protein hemmt die durch Phospholipase A2 katalysierte Arachidonsäurefreisetzung.

425 Literatur

Eine weitere Möglichkeit zur Beeinflussung der Phospholipase A2-Aktivität, außer der Verwendung direkter Hemmstoffe für das Enzym, beruht auf der Tatsache, dass es in einer inaktiven Form im Cytosol lokalisiert ist. Sämtliche Signale, die zu einer Erhöhung der intrazellulären Calciumkonzentration führen, katalysieren die Translokation der cPLA2 an die Plasmamembran, wo es zu seiner Aktivierung kommt. Außerdem wird das Enzym durch Phosphorylierung aktiviert. Wirkstoffe, die in diese Vorgänge eingreifen, beeinflussen die Eikosanoidproduktion, jedoch sind die bisher entwickelten Verbindungen zu unspezifisch und eignen sich nicht für den klinischen Einsatz ! Mangel an essentiellen Fettsäuren löst ein unspezifisches Krankheitsbild aus.

Versucht man im Tierexperiment durch Weglassen essentieller Fettsäuren in der Nahrung Mangelerscheinungen zu erzeugen, so beobachtet man 4 eine Wachstumsverlangsamung 4 Schäden des Hautepithels und der Nieren sowie 4 Fertilitätsstörungen Alle diese Änderungen bilden sich nach Zusatz von essentiellen Fettsäuren wieder zurück. Beim Menschen lassen sich Ausfallerscheinungen, die auf einen Mangel an essentiellen Fettsäuren zurückzuführen sind, nicht so deutlich nachweisen. Man hat jedoch beobachtet, dass Hautveränderungen bei Kleinkindern, die mit einer speziell fettarmen Diät ernährt wurden, nach Zugabe von Linolsäure verschwinden.

In Kürze In gesättigte Fettsäuren können Doppelbindungen eingefügt werden, allerdings nicht weiter als 9 C-Atome von der Carboxylgruppe entfernt. Aus essentiellen Fettsäuren wird durch Einführung neuer Doppelbindungen und Kettenverlängerung die Arachidonsäure synthetisiert. Sie ist Ausgangspunkt für die Biosynthese der Eikosanoide.

12.5

Pathobiochemie

Störungen des Stoffwechsels von Triacylglycerinen und Fettsäuren sind häufige Begleiterscheinungen oder Folgen von unterschiedlichsten Erkrankungen. Diese werden in anderen Kapiteln besprochen (. Tabelle 12.5)

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Diese bilden eine Gruppe sehr wirkungsvoller Gewebshormone, die Prostanoide und Leukotriene. Prostanoide wirken über heptahelicale Rezeptoren und beeinflussen u.a. die Entzündungs- und Schmerzreaktion sowie die Kontraktion der glatten Muskulatur.

. Tabelle 12.5. Hinweise zur Pathobiochemie Erkrankung

Siehe

Adipositas

Kap. 21.1

Fettleber

Kap. 33.6.1

Diabetes mellitus

Kap. 26.4

Dyslipidämie

Kap. 18.6.2

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12

426

Kapitel 12 · Stoffwechsel von Triacylglycerinen und Fettsäuren

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13 13

Stoffwechsel der Aminosäuren Klaus-Heinrich Röhm

13.1

Stoffwechsel des Stickstoffs – 428

13.1.1 13.1.2 13.1.3 13.1.4

Stickstoffkreislauf in der Natur – 428 Ammonium-Assimilation – 428 Stickstoffausscheidung – 429 Funktionen der Aminosäuren im Organismus

13.2

Stickstoffhaushalt des Menschen – 430

13.2.1 13.2.2

Stickstoffhomöostase – 430 Stickstoffbilanz – 431

13.3

Reaktionen und Enzyme im Aminosäurestoffwechsel – 432

13.3.1 13.3.2 13.3.3 13.3.4

Stoffwechsel der α-Aminogruppe Transaminierungen – 433 Desaminierung – 434 Weitere Reaktionen – 436

13.4

Übersicht über den menschlichen Aminosäurestoffwechsel – 438

13.4.1 13.4.2 13.4.3 13.4.4 13.4.5

Aminosäurebedarf des Menschen – 438 Stoffwechsel der nicht essentiellen Aminosäuren im Überblick – 439 Abbau der essentiellen Aminosäuren im Überblick – 439 Subzelluläre Lokalisation des Aminosäureabbaus – 442 Biosynthese der essentiellen Aminosäuren im Überblick – 442

13.5

Aminosäurestoffwechsel der Organe

13.5.1 13.5.2 13.5.3 13.5.4 13.5.5 13.5.6

Überblick – 444 Aminosäurestoffwechsel der Leber – 445 Aminosäurestoffwechsel des Darms – 451 Aminosäurestoffwechsel der Nieren – 451 Aminosäurestoffwechsel der Muskulatur – 453 Aminosäurestoffwechsel des Zentralnervensystems – 453

13.6

Stoffwechsel einzelner Aminosäuren – 454

13.6.1 13.6.2 13.6.3 13.6.4 13.6.5 13.6.6 13.6.7

Alanin, die sauren Aminosäuren und deren Amide Serin, Glycin und Threonin – 457 Prolin, Ornithin und Arginin – 459 Schwefelhaltige Aminosäuren – 462 Verzweigtkettige Aminosäuren – 466 Aromatische Aminosäuren – 468 Histidin und Lysin – 473

Literatur

– 476

– 429

– 432

– 444

– 454

428

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

> > Einleitung Die Aminosäuren dienen nicht nur als Bausteine zur Synthese von Proteinen, sondern erfüllen im Stoffwechsel weitere Aufgaben: 4 Für einige Gewebe stellen sie bevorzugte Substrate zur ATP-Produktion dar 4 Sie sind die wichtigsten Vorstufen zur Neubildung von Glucose 4 Sie liefern chemische Gruppen zur Biosynthese von Purinen, Pyrimidinen, Phospholipiden und vielen weiteren Biomolekülen 4 Sie wirken selbst als Signalstoffe oder dienen als Vorstufen für solche Moleküle Wegen der großen Zahl der Aminosäuren und ihrer sehr unterschiedlichen Struktur sind die Stoffwechselwege zu ihrem Auf-, Ab- und Umbau weniger übersichtlich als dies z.B. bei Kohlenhydraten der Fall ist. Trotzdem zeigen auch die Wege des Aminosäurestoffwechsels viele Gemeinsamkeiten.

13.1

Stoffwechsel des Stickstoffs

13.1.1

Stickstoffkreislauf in der Natur

Stickstoff ist ein Hauptbestandteil von Proteinen, Nucleotiden und anderen Biomolekülen und damit ein unentbehrliches Makroelement. Als N2-Molekül steht Stickstoff in der Erdatmosphäre in fast unbegrenzten Mengen zur Verfügung, kann in dieser Form aber nur von wenigen Lebewesen genutzt werden. Der Stickstoffkreislauf in der Natur ist in . Abb. 13.1 in vereinfachter Form dargestellt. ! Nur Mikroorganismen können elementaren Stickstoff nutzen.

13

Die Fähigkeit zur Stickstoff-Fixierung – d.h. zur Reduktion von N2 zu NH4+ – ist auf einige Bakterien beschränkt, die häufig in Symbiose mit Pflanzen leben. N2-fixierende Organismen stellen einen großen Teil der für die Landwirtschaft wichtigen Ammoniumsalze bereit und sind deshalb ökologisch sehr wichtig. Für Pflanzen und bestimmte Bakterien stellen Nitrate (NO3–) und Nitrite (NO2–) alternative Stickstoffquellen dar, die ebenfalls zu Ammoniak (NH3) reduziert werden müssen, bevor sie in organische Moleküle eingebaut werden können (Nitratreduktion, Ammonifizierung). Andere Bakterien oxidieren NH3 zu Nitrat und wandeln dieses weiter in N2 um. Diese Prozesse (Nitrifizierung und Denitrifizierung) entziehen der Biosphäre leicht nutzbaren Stickstoff. ! Unter physiologischen Bedingungen liegt Ammoniak zu 99% protoniert vor.

NH3 und NH4+. Im tierischen Stoffwechsel kommt Stick-

stoff fast ausschließlich auf der Oxidationsstufe von Ammoniak (NH3) vor (eine der wenigen Ausnahmen ist NO, 7 Kap. 13.6.3). Tiere können Stickstoff nur in Form von Ammoniumionen verwerten und sind deshalb auf die Anwesenheit vorgefertigter Aminosäuren in ihrer Nahrung angewiesen (7 Kap. 13.4.1). Ammoniak ist eine mittelstarke Base mit einem pKaWert von 9.2. Beim pH-Wert des Blutes (7,40) liegen demnach etwa 98,5% des Ammoniaks als Ammonium-Ionen

. Abb. 13.1. Stickstoffkreislauf. (Einzelheiten 7 Text)

(NH4+) vor. Im Zellinneren wo der pH-Wert zwischen 6,0 und 7,1 liegt, ist dieser Prozentsatz sogar noch höher. Das Protonierungsgleichgewicht zwischen NH3 und der konjugierten Säure NH4+ ist mit dem CO2/ Hydrogencarbonat-System (7 Kap. 28.1.7) gekoppelt, d.h.

In der Literatur wird häufig vereinfachend von »Ammoniak« gesprochen, auch wenn das physiologische Gleichgewichtsgemisch von 99% NH4+ und 1% NH3 gemeint ist. Hier wird die Bezeichnung »Ammoniak« nur dann verwendet, wenn es tatsächlich um die freie Base NH3 geht.

13.1.2

Ammonium-Assimilation

! Pflanzen und Bakterien fixieren Ammoniumionen in Form der Aminosäure Glutamat.

429 13.1 · Stoffwechsel des Stickstoffs

Ammonium-Assimilation. Prozesse, bei denen Ammonium-

ionen in organischer Bindung fixiert werden, bezeichnet man als »Ammonium-Assimilation«. In Bakterien und Pflanzen ist der wichtigste Assimilationsweg die Bildung der Aminosäure Glutamat aus D-Ketoglutarat und NH4+. Dazu gibt es zwei Möglichkeiten: 4 die reduktive Aminierung von D-Ketoglutarat und 4 den GS/GOGAT-Weg Bei hohem NH4+-Angebot dominiert die Glutamat-Dehydrogenase (GLDH, 7 Kap. 13.3.3), die Glutamat durch NAD(P)H-abhängige reduktive Aminierung von D-Ketoglutarat erzeugt

Bei niedrigen Ammoniumkonzentrationen wird vorwiegend der GS/GOGAT-Weg beschritten. Dabei aminiert zunächst die Glutamin-Synthetase (GS) in einer ATP-abhängigen Reaktion Glutamat zu Glutamin, das daraufhin von der Glutamatsynthase (GOGAT) mit einem weiteren Molekül D-Ketoglutarat zu zwei Molekülen Glutamat umgesetzt wird (das für Reaktion 2 notwendige Glutamat wird also regeneriert). Netto entsteht im GS/GOGAT-Wegwie bei der GLDH-Reaktion – Glutamat aus D-Ketoglutarat und NH4+, mit dem Unterschied dass zusätzlich ATP verbraucht wird.

13.1.3

! Landlebende Tiere wandeln NH4+ in weniger giftige Ausscheidungsprodukte um.

Ausscheidungsformen. Die Art und Weise, wie Tiere Stick-

stoff ausscheiden, ist sehr unterschiedlich und wird vor allem von ihrer Lebensweise bestimmt. Fische und andere wasserlebende Tiere geben NH4+ über Haut oder die Kiemen direkt ins Wasser ab. Diese ammonotelische Form der Exkretion steht landlebenden Tieren nicht zur Verfügung. Sie integrieren NH4+ in weniger toxische Verbindungen, wie Harnstoff, Harnsäure, Guanin oder Kreatinin und geben diese Substanzen über Nieren oder Kloaken nach außen ab. Die Bildung von Harnsäure (die so genannte uricotelische Form der Ausscheidung) wird u.a. von Vögeln und Reptilien genutzt. Sie ist besonders wassersparend, weil die schwer lösliche Harnsäure in fester Form abgegeben werden kann. Deshalb können uricotelische Tiere auch in extrem trockenen Umgebungen überleben. Die ureotelische Form (d.h. die Ausscheidung von Harnstoff mit dem Urin) ist zwangsläufig mit beträchtlichen Wasserverlusten verbunden. Deshalb kann es vorkommen, dass sich während der Individualentwicklung die Art der Stickstoffausscheidung ändert. So verwandeln sich ammonotelische Kaulquappen in ureotelische Frösche. Auch beim Menschen entwickelt sich die Fähigkeit zur Harnstoffbildung erst kurz vor der Geburt.

13.1.4

Die GOGAT kommt nur in Mikroorganismen und Pflanzen vor, während Tiere diesen Weg nicht nutzen können. Auch die Stickstoffassimilation über die GLDH-Reaktion (Reaktion 1) spielt im Stoffwechsel der Säugetieren quantitativ kaum eine Rolle, weil der KM-Wert der GLDH für NH3 relativ hoch ist und der NH4+-Spiegel im Organismus ständig sehr niedrig gehalten wird (7 Kap. 13.5.2). Säugetiere benötigen deshalb in ihrer Nahrung vorgefertigte Aminogruppen in Form von Proteinen und Aminosäuren. Die der Nahrung entnommenen Aminosäuren werden entweder in eigene Proteine eingebaut oder in D-Ketosäuren und NH4+ zerlegt. Während D-Ketosäuren wertvolle Metabolite darstellen, ist NH4+ toxisch und wird deshalb zum größten Teil ausgeschieden.

Stickstoffausscheidung

Funktionen der Aminosäuren im Organismus

Aminosäuren haben im Organismus eine Vielzahl von Funktionen, die in . Tabelle 13.1 in einer Übersicht zusammengestellt sind. Aminosäuren oder von ihnen abgeleitete Verbindungen dienen u.a. 4 als Substrate des Energiestoffwechsels. So decken z.B. Leukozyten und die Enterozyten des Darms ihren hohen ATP-Bedarf überwiegend durch die Oxidation von Aminosäuren (7 Kap. 13.5.3) 4 als Bausteine von Biomolekülen, z.B. Peptiden, Proteinen und Lipiden 4 als Vorläufer von Monosacchariden z.B. in der Gluconeogenese 4 als Vorstufen für die Synthese von Nucleotiden, Aminozuckern und Porphyrinen 4 als Transportmoleküle für Aminogruppen 4 als Signalstoffe und Neurotransmitter bzw. als Vorläufer solcher Substanzen 4 als Antioxidantien oder Vorläufer für diese 4 als Regulatoren des Säure/Basenhaushalts Die Tabelle nennt für jede dieser Funktionen Beispiele.

13

430

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

. Tabelle 13.1. Stoffwechselbedeutung der Aminosäuren im Überblick Funktion

Organ(e)

Produkt(e)

Vorläufer

Energiestoffwechsel

Darm Muskel, Niere, Leber

ATP Kreatin

Glu, Gln, Asp Gly, Arg, Met

Intermediär- und Baustoffwechsel

alle

Proteine Nucleotide Phospho- und Sphingolipide Aminozucker

proteinogene Aminosäuren Gln, Gly, Asp Ser Gln

Leber, Niere

Glucose

v.a. Gln, Ala, Asp

Stickstofftransport

Blut

Gln, Ala

andere Aminosäuren

Signalübertragung

Hormondrüsen

Hormone Peptide Katecholamine Jodthyronine

proteinogene Aminosäuren Tyr Tyr

Neurotransmitter Peptide Aminosäuren biogene Amine

proteinogene Aminosäuren Glu, Gly Glu, Tyr,Trp

Gehirn

Gefäßsystem

NO

Arg

Oxidationsschutz

viele Muskulatur

Glutathion Taurin

Glu, Cys, Gly Cys

Säure/Basen-Haushalt

Niere, Leber

NH3, H+

Glu, Gln

verändert nach Reeds, 2000

13.2

13

Stickstoffhaushalt des Menschen

In höheren Organismen sind Aufnahme und Ausscheidung stickstoffhaltiger Substanzen genau geregelt. Dies gilt insbesondere für den Aminostickstoff von Aminosäuren, Peptiden und Proteinen. Die Steuerung von Proteinaufbau und -abbau ist so präzise, dass bei Erwachsenen die so genannte fettfreie Körpermasse (lean body mass) über Jahrzehnte hinweg in engen Grenzen konstant bleibt, obwohl die Proteinaufnahme zeitlich und mengenmäßig in weiten Grenzen schwankt.

13.2.1

Stickstoffhomöostase

In den Industriestaaten der westlichen Welt liegt die tägliche Proteinzufuhr bei mindestens 100 g. Zu diesen Nahrungsproteinen kommen 70 g Protein hinzu, die mit den Verdauungssäften in den Darm sezerniert werden oder aus abgeschilferten Darmmukosazellen stammen. Die Darmschleimhaut gehört zu den wenigen Geweben des erwachsenen Organismus, die ihre Zellen ständig erneuern müssen. Die Pools an freien Aminosäuren in den Geweben und im Blut machen zusammen 70–100 g aus. Sie stehen in ständigem Austausch mit den Körperproteinen. Regulation. Komplexe Mechanismen sorgen dafür, dass in

unterschiedlichen Stoffwechselsituationen (Resorptionsund Postresorptionsphase, Hunger) die Geschwindigkeiten

! Die Stickstoffhomöostase wird vor allem über den Aminosäureabbau geregelt.

Der Körper eines Erwachsenen enthält etwa 10 kg Protein, von denen etwa 2,5 kg auf das inerte Kollagen entfallen. Da die meisten anderen Proteine relativ kurzlebig sind (7 Kap. 9.3), werden täglich 250–300 g Protein ab- und etwa die gleiche Menge wieder aufgebaut. Besonders intensiv ist die Proteinsynthese in der Muskulatur (bis zu 100 g/ Tag), in der Leber (etwa 50 g/Tag, davon entfallen allein 12 g auf Albumin) sowie in Immunzellen, die u.a. Antikörper bilden. Auch die Neusynthese von Hämoglobin im Knochenmark macht mit etwa 8 g/Tag einen erheblichen Teil der Gesamtsynthese aus (. Abb. 13.2).

. Abb. 13.2. Stickstoffhaushalt des Menschen. Beim Aminosäurepool des Erwachsenen halten sich die Zuflüsse und Abflüsse die Waage. Die Werte sind auf einen Erwachsenen von 70 kg Körpergewicht bezogen

431 13.2 · Stickstoffhaushalt des Menschen

von Proteinsynthese sowie von Protein- und Aminosäureabbau und Stickstoffausscheidung den jeweiligen Erfordernissen angepasst werden. Da Menge und Qualität der Proteinzufuhr von den physiologischen Regulationssystemen des Körpers nicht zu beeinflussen sind, sind es vor allem der Abbau und die Ausscheidung von Aminosäuren, die zum Ausgleich der Stickstoffbilanz herangezogen werden. Weniger wichtige Angriffspunkte sind die Biosynthese und der Abbau körpereigener Proteine. Stickstoffverluste. Die Ausscheidung von Stickstoff erfolgt

vor allem in Form von Harnstoff über den Urin (etwa 85%) und in den Faeces (10–15%). Kleinere Mengen von Stickstoff (1000 μM) Therapie: Arginin, Benzoat, Phenylacetat

Argininosuccinaturie

7cen-q11.2 ArgininosuccinatLyase

NH3 n Citrullin n (100–300 μM), Argininosuccinat n Therapie: Arginin, Benzoat

Hyperargininämie

6q23 Arginase

Selten NH3 n Arginin n Therapie: Argininund proteinarme Diät

N-Acetylglutamatsynthetasemangel

17q21.31 N-AcetylglutamatSynthetase

NH3 n Therapie: Carbamylglutamat zur Aktivierung der CPS-I

Citrullinämie Typ II

– »Citrin« (GlutamatAspartat-Antiporter)

»late onset« NH3 n Citrullin n Arginin p

zeitig erkannt und behandelt werden. Heterozygote Träger zeigen in der Regel keine oder nur geringfügige Symptome, da die verbliebene Aktivität von 50% für eine wirksame Entgiftung ausreicht. Patienten mit Restaktivitäten unter 50% sind während der Neugeborenenphase weitgehend symptomfrei, erkranken aber oft in der Jugend oder im frühen Erwachsenenalter (late onset). Zu den typischen Spätfolgen von Zyklusdefekten gehören Entwicklungsstörungen und Minderungen der Intelligenz. Unter Stress können auch immer wieder Schübe von Hyperammoniämie auftreten. Molekulare Ursachen. Wichtige Defekte des Harnstoff-

zyklus, ihre Ursachen und ihre Auswirkungen sind in . Tabelle 13.6 zusammengestellt. Nicht nur Enzyme des Zyklus können betroffen sein, sondern auch die Synthese des Aktivators N-Acetylglutamat und Transportsysteme, die Vor- und Zwischenstufen des Zyklus durch die innere Mitochondrienmembran schleusen. Bei Neugeborenen sind die ersten Symptome einer gestörten NH4+-Entgiftung (Lethargie, Appetitlosigkeit, Erbrechen, Krämpfe) wenig charakteristisch und könnten

z.B. auch auf eine Azidose zurückgehen. Ist eine Azidose auszuschließen, müssen zur Sicherung der Diagnose unbedingt die Plasmaspiegel wichtiger Zyklusmetabolite (NH4+, Citrullin, Argininosuccinat) bestimmt werden. Wie bei Enzymdefekten üblich, stauen sich auch bei Störungen im Harnstoffzyklus Substrate der betroffenen Enzyme an. So kann z.B. bei der Citrullinämie I, bei der die Argininosuccinat-Synthase defekt ist, der Citrullinspiegel im Serum von 50 μmol/l auf über 1000 μmol/l ansteigen, während sich beim Fehlen der Argininosuccinat-Lyase neben kleineren Mengen von Argininosuccinat (es kann über die Nieren ausgeschieden werden) auch Citrullin ansammelt. Beim Ausfall der Ornithin-Carbamyltransferase sind die Spiegel beider Metabolite unverändert, dafür taucht im Blut und im Urin die Pyrimidinvorstufe Orotat auf. Da Carbamylphosphat in diesem Fall nicht mehr zur Synthese von Citrullin dienen kann, wird es im Cytosol zur Synthese von Pyrimidinbasen verwendet (7 Kap. 19). Bei Defekten des Eingangsenzyms Carbamylphosphat-Synthetase-I treten außer einer starken Hyperammoniämie keine anderen Metabolitveränderungen auf. Auch der seltene Arginase-Mangel fällt eher durch neurologische Symptome auf. ! Zur Therapie von Harnstoffzyklusdefekten werden alternative Wege der Stickstoffausscheidung genutzt.

Therapie. Zur Behandlung der akuten Phasen von Störungen der Harnstoffbildung gibt es mehrere Ansätze, die meist gleichzeitig verfolgt werden 4 die rasche Erniedrigung des NH4+-Spiegels im Blut durch Hämodialyse 4 die Verabreichung einer möglichst stickstoffarmen, dafür aber fett- und kohlenhydratreichen Diät 4 die Substitution fehlender Metabolite (v.a. in Form von Arginin) und 4 die Gabe von Substanzen, die zusätzliche Wege zur Stickstoffausscheidung eröffnen (7 u.)

Langfristig geht es darum, die neurologischen Folgen der Hyperammoniämie zu mildern. Zur Substitution der fehlenden Metabolite verabreicht man in der Regel Arginin, das nicht nur Ornithin bilden sondern auch als Proteinbaustein dienen kann. Um dem Organismus zusätzlichen Stickstoff zu entziehen, gibt man außerdem Substanzen, die in der Leber mit Glycin oder Glutamin konjugiert werden können. Beide Aminosäuren werden in freier Form in der Niere rückresorbiert, als Konjugate jedoch mit dem Urin ausgeschieden. Wirksame Konjugationspartner sind Benzoesäure, die mit Glycin Hippursäure liefert (7 Kap. 28.2.2) und Phenylacetat, das mit Glutamin zu Phenylacetylglutamin konjugiert wird. Sie werden über Wochen in relativ hohen Dosen von 300– 500 mg/kg/d verabreicht. Gaben von Phenylbutyrat, das durch E-Oxidation zu Phenylacetat abgebaut wird, haben die gleiche Wirkung.

451 13.5 · Aminosäurestoffwechsel der Organe

. Abb. 13.17. Aminosäurestoffwechsel der Enterozyten. Enzyme: 1 = Glutaminase; 2 = Alanin-Aminotransferase; 3 = Aspartat-Amino-

transferase; 4 = Ornithintranscarbamylase; 5 = CarbamylphosphatSynthetase. (Einzelheiten 7 Text)

Auch Defekte der N-Acetylglutamat-Synthetase können die Ursache von Hyperammoniämien sein. Hier können Gaben von Carbamylglutamat helfen, das wie N-Acetylglutamat die CPS-I aktiviert, im Gegensatz zu diesem aber in den Hepatozyten nicht enzymatisch abgebaut wird. Eine Heilung von Defekten des Harnstoffzyklus ist zurzeit nur durch eine Lebertransplantation (in Zukunft vielleicht auch durch Gentherapie) möglich.

satz zur Energiegewinnung genutzt. Nützlich ist die aufgenommene Glucose dagegen als Vorstufe zur Bildung von Pyruvat, das überwiegend zu Alanin transaminiert wird. In dieser Form verlässt der größte Teil des Stickstoffs der abgebauten Aminosäuren die Darmschleimhaut (. Abb. 13.17). Etwa ¼ des in der Leber gebildeten Harnstoffs gelangt nicht in den Urin sondern durch Diffusion aus dem Blut ins Darmlumen. Dort wird er durch die Urease der Darmbakterien zu einem großen Teil wieder in NH4+ und HCO3– gespalten. Die Enterozyten können diese Produkte wieder in organischer Bindung fixieren, indem sie mit Hilfe der CPS-I Citrullin bilden. Das dazu notwendige Ornithin wird aus Glutamat hergestellt (. Abb. 13.24). Vom Darm produziertes Citrullin wird nicht von der Leber aufgenommen sondern dient vor allem der renalen Argininsynthese (7 Kap. 13.5.4).

13.5.3

Aminosäurestoffwechsel des Darms

Auch die Enterozyten des Dünndarms betreiben einen sehr aktiven Aminosäurestoffwechsel. ! Enterozyten decken ihren Energiebedarf vor allem durch Oxidation der sauren Aminosäuren.

Die Zellen der Darmschleimhaut haben wegen der zahlreichen dort ablaufenden aktiven Transportprozesse einen hohen Bedarf an ATP. Sie decken ihn überwiegend durch den oxidativen Abbau von Glutamin, Glutamat und Aspartat (. Abb. 13.17). Diese Aminosäuren werden dem Blut fast vollständig entnommen und auch die aus dem Darm resorbierten Mengen der drei Aminosäuren erreichen den Systemkreislauf nur zu einem geringen Teil. Glutamin wird nach Desaminierung zu Glutamat über D-Ketoglutarat und den Citratzyklus abgebaut und so zur ATP-Synthese genutzt. Aspartat nimmt nach Transaminierung zu Oxalacetat denselben Weg. Auch einige der essentiellen Aminosäuren wie Threonin, Leucin, Lysin und Phenylalanin werden von Enterozyten verstoffwechselt.

Die Nieren beteiligen sich am Aminosäurestoffwechsel des Gesamtorganismus durch die Synthese von Arginin aus Citrullin sowie von Serin aus Glutamin und Glycin. Zusätzlich sind sie in der Lage, zur Neutralisierung von saurem Urin den beim Aminosäureabbau gebildeten Ammoniak in das Tubuluslumen abzugeben und beteiligen sich auf diese Weise maßgeblich an der Regulation des Säure-Basenhaushalts (. Abb. 13.18). Das Kohlenstoffskelett des Glutamins wird zur Gluconeogenese genutzt, die nicht nur in der Leber sondern auch in den Tubuluszellen der Niere ablaufen kann (7 Kap. 11.3).

! Die Darmschleimhaut produziert Alanin und fixiert NH4+ in Form von Citrullin.

! Extrahepatisch gebildetes Arginin stammt überwiegend aus den Nieren.

Von der Glucose, die mit dem Blut oder durch Resorption die Enterozyten erreicht, wird nur ein geringer Prozent-

Leberzellen enthalten wegen des dort lokalisierten Harnstoffzyklus eine sehr hohe Arginase-Aktivität und geben

13.5.4

Aminosäurestoffwechsel der Nieren

13

452

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

. Abb. 13.18. Aminosäurestoffwechsel der Nieren. Enzyme: 1 = Glutaminase; 2 = Glutamatdehydrogenase; 3 = PEP-Carboxykinase. (Einzelheiten 7 Text)

13

deshalb kaum Arginin ins Blut ab. Das Arginin, das extrahepatisch zur Proteinbiosynthese und zur Bildung von NO und Polyaminen benötigt wird (7 Kap. 13.6.3) stammt überwiegend aus den Nieren. Zur Synthese nehmen sie das vor allem im Darmepithel gebildete Citrullin auf und bauen es durch zwei Enzyme des Harnstoffzyklus über Argininosuccinat in Arginin um. Die täglich von den Nieren synthetisierte Argininmenge von 2–4 g entspricht etwa derjenigen, die im gleichen Zeitraum durch Abbau von Nahrungsproteinen freigesetzt wird. Strikten Fleischfressern fehlen die Enzyme zur intestinalen Synthese von Citrullin. Für sie ist Arginin deshalb eine essentielle Aminosäure. ! Die renale Freisetzung von NH3 aus Glutamin dient der Kompensation metabolischer Azidosen.

Nieren und Säure-Basenhaushalt. Beim Vorliegen einer metabolischen Azidose setzen die Nieren durch Desaminierung von Glutamin und Glutamat verstärkt NH3 frei und geben es zum größten Teil in den Urin ab. Dort dient es der Abpufferung von H+-Ionen, die bei Azidosen über den H+/Na+-Antiport und andere Wege in großen Mengen ausgeschieden werden, um den gestörten Säure-BasenStatus auszugleichen. Die gleichzeitige NH3-Ausscheidung verhindert eine Übersäuerung des Urins und fördert damit die H+-Sekretion (7 Kap. 28.8). Auch der Abbau von Glycin durch das »Glycin spaltende System« (. Abb. 13.22 Reaktion (6)) kann zur NH3-

Sekretion der Nieren beitragen. Die Glycinspaltung liefert außerdem N5,N10-Methylen-THF, das zur Umwandlung von Glycin in Serin benötigt wird. Eine alternative Vorstufe für Serin ist 3-Phosphoglycerat, ein Intermediat der Gluconeogenese, das aus dem Abbau des Glutamins stammt (7 Kap. 13.6.2). Bei normalem Säure-Basen-Status extrahieren die Nieren kaum Glutamin aus dem Plasma, und auch das aus dem Tubuluslumen rückresorbierte Glutamin gelangt fast vollständig wieder zurück ins Blut. Beim Eintritt einer metabolischen Azidose (7 Kap. 28.8.6) ändert sich dies schlagartig: Durch verstärkte Freisetzung von Glutamin (vor allem aus der Muskulatur) steigt der Plasmaspiegel innerhalb weniger Stunden um bis zu 100%, und die Nieren beginnen, dem Blut erhebliche Mengen Glutamin zu entnehmen. Bei chronischen Azidosen kann die renale Aufnahme auf mehr als 1/3 der Gesamtmenge ansteigen. Dann wird auch die Synthese von Glutamin in der Leber (7 Kap. 13.5.2) gesteigert und der Verbrauch von Glutamin durch die Enterozyten (7 Kap. 13.5.3) reduziert. ! Zur Steigerung der renalen NH4+-Freisetzung werden Glutaminase, GLDH und PEPCK induziert.

Regulation. Um die Kapazität der Niere zur NH3-Ausscheidung zu steigern, werden bei Azidosen pH-abhängig nicht nur die beiden Desaminasen Glutaminase und Glutamat-

453 13.5 · Aminosäurestoffwechsel der Organe

Dehydrogenase (. Abb. 13.18, Reaktionen (1) und (2)) induziert, sondern auch die PEP-Carboxykinase, ein Schlüsselenzym der Gluconeogenese (Reaktion (3)). Dies ist sinnvoll, weil das durch die zweifache Desaminierung gebildete D-Ketoglutarat vor allem der Gluconeogenese dient. Auch der bereits erwähnte Na+/H+-Antiporter wird bei Azidosen verstärkt exprimiert. Die für diese pH-abhängige Induktion verantwortlichen Signaltransduktionswege sind noch nicht vollständig aufgeklärt, es scheint jedoch, dass die gesteigerte Synthese beider Desaminasen auf der längeren Lebensdauer der entsprechenden mRNAs beruht. In diesen mRNAs fand man aus 8 Nucleotiden bestehende »pH-response elements«. Unter azidotischen Bedingungen synthetisiert das Tubulusepithel spezielle Proteine, die an diese Elemente binden und dadurch die mRNAs vor Abbau schützen. Im Gegensatz dazu beruht die Induktion der PEPCK auf der Phosphorylierung bestimmter Transkriptionfaktoren, die durch Rekrutierung weiterer Faktoren die Transkription des PEPCK-Gens verstärken. An beiden Prozessen scheint die MAPK-Kaskade (7 Kap. 25.4.3) beteiligt zu sein, der eigentliche pH-Sensor ist noch nicht identifiziert.

aus verzweigtkettigen Aminosäuren (BCAA: Valin, Leucin, Isoleucin), auf deren Abbau die Muskulatur spezialisiert ist (. Abb. 13.19). Die Glutaminsynthese wird u.a. durch Glucocorticoide reguliert, die die Glutamin-Synthetase induzieren. Andererseits beschleunigen hohe Glutaminkonzentrationen den proteolytischen Abbau des Glutamin-Synthetase-Proteins und verhindern so die überschießende Bildung von Glutamin. Der Abbau von Valin und Isoleucin liefert u.a. Succinyl-CoA, dessen anaplerotische (den Citratzyklus auffüllende) Wirkung sicherstellt, dass genügend D-Ketoglutarat für die Transaminierung der verzweigtkettigen Aminosäuren zur Verfügung steht (. Abb. 13.19). Die Synthese von Alanin im Muskel und die Rolle des Alaninzyklus wird in Abschnitt 13.5.1 besprochen.

13.5.6

Aminosäurestoffwechsel des Zentralnervensystems

! Im ZNS dienen Aminosäuren als Vorstufen von Neurotransmittern.

Aminosäuren als Neurotransmitter. Im Vergleich zu ande-

13.5.5

Aminosäurestoffwechsel der Muskulatur

! Die Muskulatur ist der wichtigste Glutaminproduzent.

Glutamin- und Alanin-Biosynthese. Die Muskulatur liefert mehr als die Hälfte des im Blut zirkulierenden Glutamins und ist damit der wichtigste Glutaminproduzent (der Rest stammt überwiegend aus Lungen und Fettgewebe). Ein großer Teil des im Muskel gebildeten Glutamins stammt

ren Organen ist der Aminosäurestoffwechsel des Gehirns quantitativ unbedeutend. Seine Relevanz beruht vor allem auf der Tatsache, dass einige Aminosäuren (Glu, Gln, Gly, Tyr, Trp) entweder selbst als Neurotransmitter (Glu, Gly) oder als Vorstufen von Transmittern dienen (Tyr, Trp). Die Blut-Hirn-Schranke trennt deshalb den Aminosäurepool des Blutplasmas weitgehend von dem des zentralen Nervensystems. Besonders wichtig ist auch im Gehirn der Stoffwechsel von Glutamin und Glutamat. Glutamin wird v.a. in Gliazellen synthetisiert und von diesen an Neuronen weitergegeben, die daraus Glutamat oder J-Aminobuttersäure (GABA) herstellen. Beide Transmitter werden nach der Ausschüttung rückresorbiert und wieder in Glutamin umgewandelt. Diese Zusammenhänge werden in 7 Kapitel 31 ausführlich dargestellt. Eine durch O2-Mangel ausgelöste überschießende Ausschüttung von Glutamat ist einer der wichtigsten Faktoren bei der Pathogenese cerebraler Ischämien. ! Pathobiochemie: Die Ursachen der Neurotoxizität von Ammoniak sind noch nicht völlig geklärt.

. Abb. 13.19. Aminosäurestoffwechsel der Muskulatur. Enzyme: 1 = Verzweigtketten-Aminotransferase; 2 = Alanin-Aminotransferase; 3 = Glutamin-Synthetase. (Einzelheiten 7 Text)

Ammoniakvergiftung. Wie in Abschnitt 13.5.2 besprochen, fixieren höhere Tiere Ammoniak durch Bildung von Harnstoff, Glutamin oder anderer Verbindungen. In den Körperflüssigkeiten des Menschen wird der Spiegel an freiem Ammoniak durch diese Reaktionen normalerweise bei Werten unter 35 μmol/l gehalten. Ein starker NH4+-Anstieg im Blut, wie er bei Leberversagen, als Folge von erblichen Störungen der Harnstoffsynthese (7 Kap. 13.5.2) oder beim Einatmen von gasförmigem Ammoniak auftritt, kann das

13

454

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

Gehirn in kurzer Zeit irreversibel schädigen. Typische Symptome einer Ammoniakvergiftung sind 4 ein Flattertremor der Hände 4 eine verwaschene Sprache 4 Sehstörungen 4 Verwirrung und 4 in schweren Fällen Koma und Tod Im Gehirn sind vor allem die Astrozyten betroffen, die als Zellen der Makroglia u.a. für die Verstoffwechselung von NH4+-Ionen verantwortlich sind. Trotz intensiver Bemühungen sind die Ursachen für die Neurotoxizität von Ammoniumionen noch nicht geklärt. Diskutiert werden u.a. Stoffwechselveränderungen als Folge des zu hohen Angebots an NH3 bzw. NH4+: 4 Eine Verarmung der Zellen an Glutamat und/oder D-Ketoglutarat auf Grund einer verstärkten Glutaminsynthese 4 Ein ATP-Mangel durch Stimulation der Na+/K+-ATPase oder Hemmung der Atmungskette 4 Änderungen des intramitochondrialen Redoxzustands der wasserstoffübertragenden Coenzyme und 4 die gesteigerte Permeabilität der inneren Mitochondrienmembran (ein so genannter mitochondrialer Permeabilitätsübergang, mitochondrial permeability transition, MPT), gefolgt vom Anschwellen der Mitochondrien und oxidativem Stress

13

Nach anderen Vorstellungen ist in erster Linie die Signalweiterleitung im ZNS betroffen, z.B. durch 4 Störungen der Transmitterbiosynthese 4 Interferenz der NH4+-Ionen mit der Funktion der ähnlich großen K+-Ionen und damit Beeinträchtigungen der Erregungsleitung oder 4 Störungen von Signaltransduktionswegen, vor allem solcher, die von NMDA-Rezeptoren (7 Kap. 31.3.2) ausgehen Am wahrscheinlichsten ist, dass alle diese Vorgänge (und weitere noch unbekannte Effekte) zur Neurotoxizität von Ammoniak und Ammoniumionen beitragen.

13.6

Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

Im Folgenden werden wichtige Wege des menschlichen Aminosäurestoffwechsels im Detail besprochen. Die einzelnen Aminosäuren sind dabei zu Gruppen zusammengefasst, deren Einteilung an Wechselbeziehungen im Stoffwechsel orientiert ist. Bei essentiellen Aminosäuren werden nur die Abbauwege berücksichtigt.

13.6.1

Alanin, die sauren Aminosäuren und deren Amide

Die Aminosäuren dieser Gruppe zeichnen sich dadurch aus, dass sie sich durch eine oder höchstens zwei Reaktionen in D-Ketosäuren überführen lassen, die als Vorstufen oder Zwischenprodukte des Citratzyklus im Zwischenstoffwechsel von zentraler Bedeutung sind. Entsprechend vielfältig sind auch die physiologischen Funktionen dieser Aminosäuren (. Tabelle 13.7). Stoffwechselbedeutung. Alanin ist neben Glutamin das wichtigste Transportmolekül für Aminostickstoff im Blut (7 Kap. 13.5.1) und ein bedeutendes Substrat der Gluconeogenese in der Leber. Aspartat, Glutamat und das von Glutamat abgeleitete GABA wirken im Gehirn als Neurotransmitter, wobei die beiden letztgenannten aus Glutamin gebildet werden (7 Kap. 31.1.1). Im Stoffwechsel beteiligen sich Aspartat, Glutamat und Glutamin als NH2-Donoren an zahlreichen Reaktionen. Aspartat und Glutamat fungieren außerdem als Ausgangssubstanzen für die Biosynthese weiterer Aminosäuren (. Abb. 13.9). ! Alanin, Aspartat und Glutamat lassen sich durch Aminotransferasen ineinander überführen.

Biosynthese und Abbau. Alanin, Aspartat und Glutamat

stehen über zwei ubiquitär vorkommende Transaminierungsreaktionen miteinander im Gleichgewicht (7 Kap. 13.3.2 und . Abb. 13.20). Sowohl die Aspartat-Aminotransferase (in der Klinik mit »ASAT«, »AST«, oder »GOT« abgekürzt) wie auch die Alanin-Aminotransferase (»ALAT«, »ALT«, »GPT«) kommen als cytosolische und mitochondriale Isoenzyme vor. Wichtig ist dies u.a. für den Transport von Reduktionsäquivalenten über den Malat-Shuttle, an dem die beiden ASAT-Isoenzyme beteiligt sind. Während die ASAT in den meisten Geweben vertreten ist, findet sich die ALAT vorwiegend in der Leber, wo sie im Rahmen des Alaninzyklus (7 Kap. 13.5.1) eine besondere Rolle spielt. ! Pathobiochemie: Enzyme des Glutamatstoffwechsels in der klinischen Diagnostik.

Serumenzymdiagnostik. ASAT und ALAT gehören zu den Enzymen, deren Übertritt ins Blut diagnostische Hinweise auf Gewebeschädigungen liefern kann. Zusammen mit der Glutamat-Dehydrogenase (GLDH) und der γ-Glutamyltransferase (J-GT, 7 Kap. 13.6.4) sind beide Aminotransferasen vor allem zur Erkennung und Differentialdiagnose von Lebererkrankungen nützlich. Mit Ausnahme der ASAT, die auch im Herzen und in der Skelettmuskulatur in hohen Aktivitäten vorkommt, sind die erwähnten Enzyme weitgehend leberspezifisch. Zur weiteren Differenzierung der Befunde kann man das Verhältnis der Serumaktivitäten von ASAT und ALAT (den de-Ritis-Quotienten) heranziehen. Bei leichteren Leberzellschäden ist der Quo-

455 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

. Tabelle 13.7. Stoffwechselbedeutung von Alanin, der sauren Aminosäuren und ihrer Amide Aminosäure

Produkt

Funktion als/bei

in/im

siehe

NH2-Transport (Alaninzyklus)

Blut

Kap. 13.5.1, 16.2.3

o Pyruvat

Gluconeogenesevorstufe

Leber

Kap. 11.3

o Selenocystein

Vorstufe

Alanin

Aspartat

Kap. 9.1.5

Neurotransmitter

Gehirn

o Oxalacetat

Gluconeogenesevorstufe

Leber

Kap. 11.3, 13.3.1

o Argininosuccinat

NH2-Donor (Harnstoffzyklus)

Leber

Kap. 13.5.2

o Carbamylaspartat

NH2-Donor (Pyrimidinsynthese)

Kap. 19.1.2

o AICAR

NH2-Donor (Purinsynthese)

Kap. 19.1.1

o Adenylosuccinat

NH2-Donor (Nucleotidsynthese)

Kap. 19.1.1

o Asparagin

Vorstufe

o Lysin, Methionin,

Vorstufe

Pflanzen,

o Threonin o E-Alanin Glutamat o J-Aminobutyrat

Mikrorganismen Vorstufe

Mikrorganismen

Neurotransmitter

Gehirn

Kap. 31.3.2

Neurotransmitter-Vorstufe

Gehirn

Kap. 31.3.4

o andere Aminosäuren

NH2-Donor (Transaminierung)

o NH4+/NH3

Vorstufe (Desaminierung)

Leber, Niere

Kap. 13.3.3

o D-Ketoglutarat

Gluconeogenesevorstufe

Leber, Niere

Kap. 28.1.9, 13.3.1

o Glutamin, Prolin, Ornithin, Arginin

Vorstufe

o N-Acetylglutamat

Vorstufe

Leber

Stickstoffspeicher

Pflanzen

Asparagin o Aspartat

Kap. 13.6.1

Kap. 13.6.3

Gluconeogenesevorstufe

Kap. 13.5.2

Kap. 13.4.2, 13.6.1

NH2-Transport

Blut

Kap. 13.5.1

o Glutamat

Gluconeogenesevorstufe

Leber, Niere

Kap. 13.5.4

o Glutathion

Vorstufe

Kap. 13.6.4

o Asparagin

NH2-Donor

Kap. 13.3.3

o Glucosamin-6-P

NH2-Donor (Aminozuckersynthese)

Kap. 17.2.2

o Carbamylphosphat

NH2-Donor (Pyrimidinsynthese)

Kap. 19.1.2

o Phosphoribosylamin

NH2-Donor (Purinsynthese)

Kap. 19.1.1

o Formylglycinamidin-Ribonucleotid

NH2-Donor (Purinsynthese)

Kap. 19.1.1

o GMP

NH2-Donor (Nucleotidsynthese)

Kap. 19.1.1

o NAD+

NH2-Donor (NAD+-Synthese)

Kap. 23.3.4

o Glutaminkonjugate

Biotransformation (Phase II)

Glutamin

tient in der Regel < 1 weil die vorwiegend cytosolisch lokalisierte hepatische ALAT leichter ins Blut übertritt als die hauptsächlich mitochondrial lokalisierte ASAT-Aktivität. Bei schweren Leberschäden mit Zerfall der Mitochondrien und ganz besonders bei Myokardinfarkten und schweren Muskeltraumen dominiert die ASAT, sodass der Quotient auf Werte bis über 2 ansteigen kann. ! Die Amide Glutamin und Asparagin werden ATP-abhängig gebildet und durch Hydrolasen abgebaut.

Leber

Kap. 33.3.1

Glutamin und Asparagin. Wie in Abschnitt 13.5.2 besprochen, ist neben der CPS-1-Reaktion die Bildung von Glutamin aus Glutamat die zweite wichtige Reaktion zur NH4+-Fixierung. Katalysiert wird sie durch die GlutaminSynthetase, die die J-Carboxylgruppe von Glutamat ATPabhängig amidiert. Als Zwischenprodukt tritt enzymgebundenes J-Glutamylphosphat auf. Im menschlichen Organismus läuft die Glutaminsynthese vor allem in der Muskulatur, in den Lungen und im Fettgewebe ab. Die Umkehrreaktion wird durch die mitochondriale phosphat-

13

456

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

. Abb. 13.20. Stoffwechsel von Alanin, der sauren Aminosäuren und ihrer Amide. (Einzelheiten 7 Text)

13

abhängige Glutaminase katalysiert, die aus Glutamin durch hydrolytische Desaminierung wieder NH4+ freisetzt (. Abb. 13.20). Ähnlich wie Glutamat und Glutamin werden auch Aspartat und Asparagin ineinander umgewandelt. Im Gegensatz zur Glutamin-Synthetase verwendet die Asparagin-Synthetase allerdings als NH2-Donor nicht NH4+ sondern Glutamin. Da Asparagin – anders als Glutamin – nicht dem Stickstofftransport dient, sind die Blutspiegel von Asparagin und Aspartat und die Aktivitäten von Asparagin-Synthetase und Asparaginase im tierischen Organismus vergleichsweise niedrig. ! Pathobiochemie: Mikrobielle Asparaginasen werden zur Behandlung von Leukämien eingesetzt.

Zu den wenigen Enzymen, die einen festen Platz in der Therapie von Tumorerkrankungen gefunden haben, gehören bakterielle Asparaginasen, die zusammen mit anderen Cytostatika seit über 30 Jahren erfolgreich gegen die akute lymphatische Leukämie (ALL) eingesetzt werden. Die Wirkung der Asparaginasen (heute wird klinisch nur noch ein Enzym aus Escherichia coli eingesetzt) beruht auf der Tatsache, dass die für ALL verantwortlichen transformierten Leukozytenvorläufer (Blasten) kaum Asparagin-Synthetase-Aktivität enthalten und deshalb auf die Zufuhr von Asparagin angewiesen sind. Die Gabe von Asparaginase

senkt die Asparaginkonzentration im Blut so weit, dass die Proliferation der Blasten massiv gehemmt wird. Ein schwerwiegender Nachteil der Asparaginasetherapie sind immunologische Reaktionen gegen das bakterielle Protein, die allergische Reaktionen auslösen und das verabreichte Enzym unwirksam machen können. ! Die menschliche GLDH unterliegt einer komplexen Regulation.

Wie unter 7 Kap. 13.3.3 besprochen, sind Desaminierungen beim Abbau von Aminosäuren die Ausnahme. Die wichtigste Reaktion dieser Art ist die dehydrierende Desaminierung von Glutamat, die nicht nur NH4+ freisetzt, sondern mit NAD(P)H+H+ und D-Ketoglutarat zwei weitere Produkte bildet, die zur mitochondrialen ATP-Synthese beitragen. Regulation der GLDH. Die menschliche GLDH ist in der

Mitochondrienmatrix lokalisiert und besteht aus 6 identischen Untereinheiten. Sie kommt in allen Geweben vor, die weitaus höchsten Aktivitäten finden sich jedoch in der Leber (. Abb. 13.21). Obwohl das Gleichgewicht der GLDH-Reaktion auf der Seite der Glutamatbildung liegt, dominiert in der Leber unter physiologischen Bedingungen wahrscheinlich die Desaminierungsreaktion weil

13

457 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

. Abb. 13.21. Aktivitäten der Glutamatdehydrogenase (GLDH) in menschlichen Organen. (nach Schmidt E, Schmidt FW 1969)

4 der KM-Wert der GLDH für Ammoniak mit etwa 3 mmol/l relativ hoch ist, während die NH4+-Konzentration in Hepatozyten durch Glutamin-Synthetase und CPS I sehr niedrig gehalten wird (7 Kap. 13.5.2) 4 ATP und GTP die GLDH allosterisch hemmen, während ADP und Leucin das Enzym aktivieren Die Tatsache, dass die GLDH-Aktivität durch den Energiestatus der Zelle (d.h. vom ATP/ADP-Verhältnis) kontrolliert wird, legt nahe, dass die Reaktion nicht in erster Linie der Freisetzung oder Fixierung von NH4+ dient, sondern der Bereitstellung von Vorstufen für die ATP-Bildung (d.h. D-Ketoglutarat und NADH+H+). ! Pathobiochemie: Mutationen der GLDH können eine Hyperinsulinämie auslösen.

Die Vorstellung, dass die Desaminierung von Glutamat zu D-Ketoglutarat der ATP-Synthese dient, wird durch die Symptome der seltenen Hyperininsulinämischen Hypoglykämie des Kindesalters (HHI) gestützt. Bei dieser erblichen Stoffwechselerkrankung ist die Regulation der Insulinausschüttung aus den E-Zellen des Pankreas gestört (7 Kap. 26.1.3). Als eine der möglichen Ursachen wurden Mutationen im Glutamat-Dehydrogenase-Gen identifiziert, die das Enzym gegen die allosterische Hemmung durch ATP und GTP unempfindlich und dadurch aktiver machen. In der Folge kommt es nicht nur zu einer (in der Regel milden) Hyperammoniämie (mit Blutspiegeln um 100 μmol/l), sondern auch zu einer Hypoglykämie. Offenbar führt die höhere GLDH-Aktivität zur Erhöhung des ATP-Spiegels in den E-Zellen und damit zur verstärkten Insulinausschüttung. Die bei der HHI beobachtete Hyperammoniämie resultiert nicht allein aus der gesteigerten NH4+-Freisetzung durch die höhere GLDH-Aktivität, sondern indirekt auch aus der verminderten Synthese von N-Acetylglutamat als Folge geringerer Glutamatkonzentrationen in der Mitochondrienmatrix. Dies senkt die Aktivität der CPS-1 und damit die Fähigkeit der Leber zur NH4+-Fixierung.

13.6.2

Serin, Glycin und Threonin

Zusammen mit den metabolisch eng verwandten Aminosäuren Serin und Glycin wird auch das essentielle Threonin besprochen, weil dessen wichtigster Abbauweg durch ein Enzym eingeleitet wird, das auch beim Abbau von Serin die entscheidende Rolle spielt.

. Tabelle 13.8. Stoffwechselbedeutung von Glycin, Serin und Threonin Aminosäure

Produkt

Funktion als/bei

in/im

siehe

Neurotransmitter

Gehirn

Kap. 31.3.4

o Serin

Gluconeogenesevorstufe

Leber

Kap. 13.6.2

o N5,N10-CH2-THF

C1-Donor

o Guanidinoacetat

Kreatinvorstufe

o Glutathion

Vorstufe

Kap. 13.6.4

o G-Aminolaevulinat

Häm-Vorstufe

Kap. 20.1.2

Glycin

Serin

Threonin

Kap. 23.3.8 Niere

Kap. 16.2.2

o Glycinamid-Ribonucleotid

Purin-Vorstufe

o Glycocholsäure

Gallensäurebaustein

Leber

Kap. 32.1.4

o Glycinkonjugate

Biotransformation (Phase II)

Leber

Kap. 33.3.1

o Pyruvat

Gluconeogenesevorstufe

Leber

o Cystein

Vorstufe

Kap. 13.6.4

o Glycin

Vorstufe

Kap. 13.6.2

o Phosphatidylserin

Phospholipidbaustein

Kap. 18.1.1

o Ethanolamin

Vorstufe

Kap. 18.1.1

o Succinyl-CoA

Gluconeogenesevorstufe

Kap. 19.1.1

Leber

Kap. 13.6.2

Kap. 13.6.2

458

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

Stoffwechselbedeutung. Unter den drei Aminosäuren

dieser Gruppe ist Glycin die vielseitigste. Es wirkt als hemmender Transmitter im Zentralnervensystem und dient als Vorstufe oder Baustein wichtiger Biomoleküle (. Tabelle 13.8). Der Abbau von Serin und Glycin versorgt außerdem den C1-Pool mit N5,N10-Methylen-THF (7 u.). ! Glycin und Serin lassen sich leicht ineinander umwandeln.

Enzym aus 4 unterschiedlichen Komponenten, von denen eine einen Liponamid-«Arm« trägt wie er auch in D-Ketosäuredehydrogenasen zu finden ist (7 Kap. 14.2). Biosynthese von Glycin. Die GCS-abhängige Bildung von

Serin aus Glycin ist vermutlich im Mitochondrium lokalisiert. Die Bildung von Glycin aus Serin wird dagegen durch ein cytosolisches SHMT-Isoenzym katalysiert. Es liefert außerdem N5,N10-Methylen-THF, das im Cytosol u.a. zur Bildung von dTMP aus UMP und zur Remethylierung von Homocystein (7 Kap. 13.6.4) benötigt wird.

Biosynthese von Serin. Der wichtigste Weg zum Serin geht von 3-Phosphoglycerat aus, einem Zwischenprodukt von Glycolyse und Gluconeogenese (. Abb. 13.22, Reaktionen (1), (2) und (3)). Nach Oxidation der D-OHGruppe zur Ketogruppe wird die D-Aminogruppe durch Transaminierung eingeführt. Die Hydrolyse der Phosphorsäureesterbindung in 3-Stellung schließt die Synthese ab. Alternativ dazu kann Serin durch die PALP-abhängige Serin-Hydroxymethyltransferase (SHMT) aus Glycin gebildet werden(. Abb. 13.22, Reaktion (5)). Die dazu notwendige Hydroxymethylgruppe stammt aus N5,N10Methylen-THF, das beim Abbau eines weiteren Glycinmoleküls zu CO2 und NH4+ entsteht. Für die letztere Reaktion ist das so genannte »Glycin spaltende System« (GCS, . Abb. 13.22, Reaktion (6)) verantwortlich, ein komplexes

Abbau. Wie oben besprochen, wird Glycin durch das GCS gespalten und/oder in Serin umgewandelt. Zum Abbau von Serin gibt es mehrere Möglichkeiten: 4 die direkte Desaminierung zu Pyruvat (. Abb. 13.22, Reaktion (4)) 4 die Transaminierung zu Hydroxypyruvat (. Abb. 13.22, Reaktion (9)) 4 den durch die SHMT katalysierten Abbau zu Glycin (. Abb. 13.22, Reaktion (5)) und 4 die Umwandlung in Cystein (. Abb. 13.27)

. Abb. 13.22. Stoffwechsel von Serin, Threonin und Glycin. Enzyme: 1 = Phosphoglycerat-Dehydrogenase; 2 = PhosphoserinTransaminase; 3 = Phosphoserin-Phosphatase; 4, 4’ = Serin/Threonin-

Dehydratase; 5 = Serin-Hydroxymethyltransferase; 6 = Glycin spaltendes System; 7 = Threonin-Dehydrogenase; 8 = D-Amino-E-ketobutyrat-CoA Ligase. (Einzelheiten 7 Text)

! Serin und Threonin werden über mehrere Wege abgebaut.

13

459 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

Die eliminierende Desaminierung von Serin zu Pyruvat durch die Serindehydratase (. Abb. 13.22, Reaktion (4)) wird in Abschnitt 13.3.3 im Einzelnen dargestellt. Alternativ dazu wandelt eine kurz als Serin-Pyruvat-Transaminase (SPT) bezeichnete Aminotransferase Serin und Pyruvat in Alanin und Hydroxypyruvat um, das über weitere Zwischenstufen (nicht dargestellt) in Glyoxylat oder in Pyruvat übergehen kann. Welcher dieser beiden Wege zum Serinabbau dominiert, hängt vom Organismus und vom untersuchten Organ ab. Threonin wird im menschlichen Organismus zu einem geringen Anteil zu D-Amino-E-ketobutyrat dehydriert und anschließend zu Acetyl-CoA und Glycin zerlegt (. Abb. 13.22, Reaktionen (7) und (8)). Der überwiegende Teil wird jedoch zu D-Ketobutyrat desaminiert (. Abb. 13.22, Reaktion (4c)). Verantwortlich für diese Reaktion ist dieselbe Lyase, die auch Serin desaminiert und deshalb statt Serindehydratase zutreffender als Serin/Threonindehydratase bezeichnet werden sollte. Das gebildete D-Ketobutyrat wird zunächst oxidativ zu Propionyl-CoA decarboxyliert (. Abb. 13.11). Die anschließende dreistufige Umwandlung von Propionyl-CoA in Succinyl-CoA stellt den Anschluss an den Citratzyklus her und wird als gemeinsame Endstrecke von mehreren katabolen Wegen genutzt (. Abb. 13.23). Diese sind 4 die Abbauwege der Aminosäuren Threonin, Methionin, Isoleucin, und Valin 4 der Abbau ungeradzahliger Fettsäuren und 4 der Abbau von Thymin Zunächst wird Propionyl-CoA zu D-Methylmalonyl-CoA carboxyliert (. Abb. 13.23, Reaktion (1)), das nach Isomerisierung zum L-Epimeren (. Abb. 13.23, Reaktion (2)) durch eine Coenzym-B12-abhängige Isomerase in SuccinylCoA umgelagert wird. Diese Methylmalonyl-CoA-Mutase (. Abb. 13.23, Reaktion (3)) ist neben der MethioninSynthase (7 Kap. 13.6.4), das einzige menschliche Enzym, das ein Cobalamid als Coenzym benötigt (7 Kap. 23.3.9). ! Pathobiochemie: Störungen des Propionyl-CoA-Stoffwechsels.

Propionacidämie Patienten mit einem Defekt der Propionyl-CoA-Carboxylase (. Abb. 13.23, Reaktion (1)) weisen hohe Plasmaspiegel von Propionsäure auf, die durch Hydrolyse von Propionyl-CoA entsteht. Zu den therapeutischen Maßnahmen zählen eine Beschränkung der Proteinzufuhr und die Beseitigung der durch Propionsäure bedingten metabolischen Azidose. Methylmalonacidämie und -urie Genetische Defekte der Methylmalonyl-CoA-Mutase (. Abb. 13.23, Reaktion (2)) führen zum Anstieg von Methylmalonat im Plasma und zur Ausscheidung in den Urin. Da Vitamin B12-Mangel ähnliche Auswirkungen hat, ist die Methylmalonat-Konzentration im Plasma ein Kriterium zur Bewertung der Versorgung mit diesem Vitamin.

. Abb. 13.23. Stoffwechsel von Propionyl-CoA. Enzyme: 1 = Propionyl-CoA-Carboxlase; 2 = Methylmalonyl-CoA-Epimerase; 3 = Methylmalonyl-CoA-Mutase. (Einzelheiten 7 Text)

13.6.3

Prolin, Ornithin und Arginin

Die Aminosäuren dieser Gruppe bilden zusammen mit Glutamin die Glutamatfamilie. Alle können aus Glutamat synthetisiert und durch Umkehrung der Syntheseschritte wieder zu Glutamat abgebaut werden. Stoffwechselbedeutung. Die zyklische Aminosäure Prolin

ist vor allem als Proteinbestandteil und als Vorstufe von posttranslational gebildetem Hydroxyprolin wichtig (7 Kap. 24.2.1). Ornithin und Arginin sind Intermediate im Harnstoffzyklus. Arginin dient außerdem als Vorstufe für Stickstoffmonoxid (NO) und Kreatin, während Ornithin die Muttersubstanz der so genannten Polyamine ist (. Tabelle 13.9). ! Glutamat, Arginin und Prolin lassen sich leicht ineinander überführen.

Biosynthese und Abbau. Die Stoffwechselschritte, die

Ornithin bzw. Arginin und Prolin mit Glutamat verknüpfen, sind weitgehend reversibel und dienen deshalb sowohl der Biosynthese wie auch dem Abbau der betreffenden Aminosäuren. Gemeinsame Zwischenprodukte beider Wege sind Glutamat-γ-semialdehyd bzw. dessen unter Wasserabspaltung gebildete zyklische Form Δ1-Pyrrolincarboxylat. Während der freie Semialdehyd über eine Transaminierungsreaktion mit Ornithin in Beziehung steht (. Abb. 13.24, Reaktion 2), lassen sich '1-Pyrrolincarboxylat und Glutamat durch eine Dehydrogenase ineinander überführen (. Abb. 13.24, Reaktion (1)). Eine weitere Dehydrogenase

13

460

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

. Abb. 13.24. Stoffwechsel von Prolin, Ornithin und Arginin. Enzyme: 1 = Pyrrolincarboxylat-Dehydrogenase; 2 = Ornithin-Transaminase; 3 = Pyrrolincarboxylat-Reduktase. (Einzelheiten 7 Text)

13

(. Abb. 13.24, Reaktion (3)) katalysiert die Gleichgewichtseinstellung zwischen '1-Pyrrolincarboxylat und Prolin. Arginin kann deshalb sowohl zu Glutamat als auch zu Prolin abgebaut werden. Ein weiterer (nicht im Detail dargestellter) Abbauweg des Arginins führt über das biogene Amin Agmatin und das Polyamin Putrescin (7 u.) zum Succinat. Die Biosynthese von Arginin findet überwiegend extrahepatisch statt, weil in der Leber keine größeren Argininmengen aus dem Harnstoffzyklus abgezweigt werden können. Die Argininsynthese teilen sich die Enterozyten des Darms (Umwandlung von Glutamat in Citrullin, . Abb. 13.17) und die Niere (Citrullin in Arginin, . Abb. 13.18). Das extrahepatisch gebildete Arginin wird u.a. zur Synthese von Kreatin und NO sowie zur Bereitstellung von Glutamat in perivenösen Hepatozyten genutzt.

! Der Mediator Stickstoffmonoxid (NO) wird aus Arginin gebildet.

NO-Synthese. Stickstoffmonoxid (NO) ist ein kurzlebiges Radikal mit Signalfunktion (7 Kap. 25.9.1). Es reguliert u.a. die Blutgefäßweite, wirkt als Neurotransmitter und beeinflusst das Immunsystem sowie die Hämostase. Wegen seiner begrenzten Lebensdauer muss NO in der Nähe des jeweiligen Wirkorts gebildet werden. Das dafür verantwortliche Enzym, die NO-Synthase (NOS), kommt in mehreren Formen vor: Konstitutiv gebildet werden das neuronale (nNOS) und das endotheliale Isoenzym (eNOS). Beide werden durch Ca2+- Calmodulin aktiviert, während die so genannte induzierbare NOS (iNOS) durch diverse Stimuli calciumunabhängig induziert wird.

. Tabelle 13.9. Stoffwechselbedeutung von Prolin, Ornithin und Arginin Aminosäure

Produkt

Prolin

Ornithin

Arginin

Funktion als/bei

in/im

siehe

o Glutamat

Gluconeogenesevorstufe

Leber

Kap. 13.6.3

o Hydroxyprolin

Vorstufe

Kap. 24.2.1

o Glutamat

Gluconeogenesevorstufe

Leber

o Citrullin

Harnstoffzyklusintermediat

Leber

Kap. 13.5.2

o Putrescin

Polyaminvorstufe

o Glutamat

Gluconeogenesevorstufe

Leber

Kap. 13.6.3

o Harnstoff

Harnstoffzyklusintermediat

Leber

Kap. 13.5.2

o Guanidinoacetat

Kreatinvorstufe

Niere

o NO

Vorstufe

Kap. 13.6.3

o Agmatin

Vorstufe

Kap. 13.6.3

Kap. 13.6.3

Kap. 16.2.2

461 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

. Abb. 13.25. Umwandlungsreaktionen von Arginin. Enzyme: 1 = Glycinamidinotransferase; 2 = Guanidinoacetat-Transmethylase; 3 = NO-Synthase; 4 = Ornithin-Decarboxylase; 5 = Spermidin-Syn-

thase; 6 = Adenosylmethionin-Decarboxylase; 7 = Spermin-Synthase; SAH = S-Adenosylhomocystein. Zu Reaktion ③ 7 auch Abb. 13.26. (Einzelheiten 7 Text)

Mechanismus. Die Biosynthese von NO aus Arginin ist ein komplizierter, noch nicht völlig verstandener Prozess, der zwei Oxidationsschritte vom Monooxygenasetyp umfasst. Als enzymgebundenes Intermediat tritt Nω-Hydroxyarginin auf (. Abb. 13.25, Reaktion (3)). Die N-terminale Oxygenasedomäne der NO-Synthese (NOS) (. Abb. 13.26)

enthält eine Hämgruppe sowie als weiteren Cofaktor Tetrahydrobiopterin (BH4) (. Abb. 13.32). Die C-terminale Reduktasedomäne, die im Falle von nNOS und eNOS auch den Aktivator Ca2+-Calmodulin bindet, überträgt Reduktionsäquivalente von NADPH+H+ über FAD und FMN zum Oxygenasezentrum.

13

462

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

13.6.4

Schwefelhaltige Aminosäuren

Stoffwechselbedeutung. Der Stoffwechsel der schwefel-

. Abb. 13.26. Struktur der NO-Synthase. (Einzelheiten 7 Text)

! Polyamine regulieren Zellproliferation und Apoptose.

Polyamine. Putrescin, Spermidin und Spermin (. Abb. 13.25) sind di-, tri- bzw. tetravalente organische Kationen,

die in tierischen Zellen in millimolaren Konzentrationen vorkommen und für den normalen Ablauf der Zellproliferation notwendig sind. Ihre Wirkung beruht auf ihren amphipathischen Eigenschaften: Während die Methylengruppen (-CH2-) hydrophobe Wechselwirkungen eingehen können, interagieren die positiv geladenen N-Atome mit negativen Ladungen, z.B. den Phosphatresten der DNA. Auf Grund dieser Eigenschaften sind die Polyamine in der Lage, DNA-Protein- und Protein-Proteinwechselwirkungen zu modifizieren und dadurch in die Regulation von Zellzyklus und Apoptose einzugreifen (7 Kap. 7.1.5).

13

Biosynthese. Die Synthese der Polyamine geht von Ornithin aus, das von der Ornithindecarboxylase (ODC) (. Abb. 13.25, Reaktion (4)) zu Putrescin (1,4-Diaminobutan) decarboxyliert wird. Mit Halbwertszeiten von wenigen Stunden ist die ODC eines der kurzlebigsten zellulären Proteine. An den beiden nachfolgenden Reaktionen, der Umwandlung von Putrescin in Spermidin und von Spermidin in Spermin ist ein ungewöhnlicher Cofaktor beteiligt, nämlich decarboxyliertes S-Adenosylmethionin, das als Donor für 3-Aminopropylreste fungiert. Über Synthese und Funktion von Kreatin informiert 7 Kap. 30.5.

haltigen Aminosäuren Cystein und Methionin ist eng verzahnt. Cystein gehört zu den bedingt essentiellen Aminosäuren, weil seine SH-Gruppe aus dem Abbauweg des essentiellen Methionins stammt. Methionin ist gleichzeitig Vorstufe für S-Adenosylmethionin, das wichtigste methylierende Coenzym im Stoffwechsel (7 u.). Aus Cystein entstehen u.a. die nichtproteinogene Aminosäure Taurin, das nicht-enzymatisch oder posttranslational gebildete Disulfid Zystin und das als Antioxidans wirksame Tripeptid Glutathion (. Tabelle 13.10). Abbau von Methionin. Der Abbauweg des Methionins

(. Abb. 13.27) durchläuft zunächst Teile des so genannten Methioninzyklus (7 u.) wobei die S-Methylgruppe entfernt wird. Das dabei gebildete Homocystein wird im nächsten Schritt durch die PALP-abhängige CystathioninE-Synthase auf Serin übertragen wobei Cystathionin entsteht. Dessen Spaltung durch die ebenfalls PALP-abhängige Cystathionin-J-Lyase (. Tabelle 13.2) liefert Cystein und α-Ketobutyrat (»Transsulfurierung«). Menschliche Föten und Frühgeborene besitzen noch keine ausreichende Cystathionin-J-Lyase-Aktivität. Für sie gehört Cystein deshalb zu den essentiellen Aminosäuren. Das aus Methionin gebildete D-Ketobutyrat wird zu Succinyl-CoA abgebaut (. Abb. 13.23) oder in peripheren Geweben, denen die D-Ketobutyrat-Dehydrogenase fehlt, zunächst zu D-Aminobutyrat transaminiert, das in der Leber weiter verstoffwechselt wird. ! Der Methioninzyklus liefert aktivierte CH3-Gruppen für Methylierungsreaktionen.

S-Adenosylmethionin. Der Methioninzyklus (. Abb. 13.28) ist ein geschlossener Kreislauf, in dessen Verlauf zunächst aus Methionin das Coenzym S-Adenosylmethionin (SAM, AdoMet) gebildet wird, der wichtigste Cofaktor bei Methylierungsreaktionen an Stickstoff- und Sauerstoffatomen. Bis heute wurden mehr als 40 SAM-abhängige Methyltransferasen identifiziert. Wichtige Beispiele sind in . Tabelle 13.11 zusammengestellt. Nach Decarboxylierung von S-Adeno-

. Tabelle 13.10. Stoffwechselbedeutung von Cystein und Methionin Aminosäure

Produkt

Cystein

Methionin

Funktion als/bei

in/im

siehe

o Pyruvat

Gluconeogenesevorstufe

Leber

o Taurin

Vorstufe

Kap. 13.6.4

o Cystin

Vorstufe

Kap. 13.6.4

Kap. 13.6.4

o Glutathion

Vorstufe

o Succinyl-CoA

Gluconeogenesevorstufe

o Cystein

Vorstufe

Kap. 13.6.4

o S-Adenosylmethionin

Vorstufe, CH3-Donor

Kap. 13.6.3, 13.6.4

Kap. 13.6.4 Leber

463 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

. Abb. 13.27. Abbau von Methionin. (Einzelheiten 7 Text)

sylmethionin kann auch der entstehende Aminopropylrest für Biosynthesen verwendet werden (. Abb. 13.25). Die meisten Enzyme des Methioninstoffwechsels sind auch in extrahepatischen Geweben zu finden, da Methylgruppen für Methylierungen überall benötigt werden. Transmethylierung. Zur Bildung von S-Adenosylmethionin wird durch eine Transferase der Adenosylrest von ATP auf das Schwefelatom von Methionin übertragen (. Abb. 13.28, Reaktion (1)). Die CH3-Gruppe gelangt dadurch auf hohes chemisches Potential und kann leicht auf andere Moleküle übertragen werden (»Transmethylierung«). Außerdem werden anorganisches Phosphat und Pyrophosphat frei. Da letzteres noch durch eine Pyrophosphatase gespalten wird, »kostet« die Methioninaktivierung zwei energiereiche Bindungen.

. Tabelle 13.11. Verbindungen, deren Methylgruppe von S-Adenosylmethionin stammt (Auswahl) Ausgangssubstanz

Methyliertes Produkt

Methylierung von Mikromolekülen Ethanolamin

Cholin (dreifache Methylierung)

Guanidinoacetat

Creatin

N-Acetylserotonin

N-Acetyl-5-methoxyserotonin (Melatonin)

Noradreanlin

Adrenalin

Pharmaka

Methylierte Pharmaka

Methylierung von Makromolekülen Basen der DNA und RNA (im Nucleinsäurenverband)

Methylierte Basen

Histidin (im Proteinverband)

3-(oder τ-)Methylhistidin

13

464

13

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

. Abb. 13.28. Methioninzyklus. Enzyme: 1 = Methionin-Adenosyltransferase; 2 = diverse Methyltransferasen; 3 = Adenosyl-Homo-

cysteinhydrolase; 4 = Methioninsynthase; 5 = Methylen-THF-Reduktase; 6 = Betain-Homocystein-Transmethylase. (Einzelheiten 7 Text)

Bei Transmethylierungen geht SAM in S-Adenosylhomocystein über (. Abb. 13.28 Reaktion (2)), das im nächsten Schritt hydrolytisch in Adenosin und das im Vergleich zu Cystein um eine CH2-Gruppe verlängerte Homocystein gespalten wird (. Abb. 13.28, Reaktion (3)). Adenosin wird über mehrere Schritte wieder zu ATP rephosphoryliert und steht dann erneut für die Methioninaktivierung zur Verfügung. Remethylierung Homocystein wird entweder in Methionin zurückverwandelt (»remethyliert«) oder durch Transsulfurierung (7 o.) weiter abgebaut. Zur Remethylierung von Homocystein gibt es zwei Möglichkeiten 4 Die Methionin-Synthase (. Abb. 13.28, Reaktion (4)) enthält als Cofaktor Methylcobalamin (B12-Coenzym). Primärer CH3-Donor ist N5-Methyltetrahydrofolat (5-CH3-THF), das durch die Methylen-THFReduktase (MTHFR, . Abb. 13.28, Reaktion (5)) unter NADPH-Verbrauch aus N5,N10-Methylen-THF hergestellt wird 4 Die Betain-Homocysteinmethylase (. Abb. 13.28, Reaktion (6)) bezieht die Methylgruppe von Betain (N-Trimethylglycin), das dabei in Dimethylglycin übergeht

Die Methionin-Synthase ist neben der MethylmalonylCoA-Mutase (. Abb. 13.23) das einzige Vitamin B12-abhängige Enzym im tierischen Stoffwechsel. ! Pathobiochemie: Erhöhte Homocystein-Spiegel sind ein Risikofaktor für cardiovaskuläre Erkrankungen und M. Alzheimer.

Homozystinurie. Homocystein findet sich im Plasma normalerweise in Konzentrationen um 10 μmol/l. Es liegt dort hauptsächlich in Form des Disulfids Homozystin oder gebunden an Albumin vor. Schon geringfügige Erhöhungen der Homozystinkonzentration im Blut führen zu Schäden an den Gefäßendothelien und dadurch zu einem deutlich höheren Risiko für kardiovaskuläre Erkrankungen. Auch das Risiko, an der Alzheimer’schen Krankheit zu erkranken, ist signifikant erhöht. Neben einem Mangel der Vitamine, die für die Remethylierung oder Transsulfurierung von Homocystein benötigt werden (Folsäure, B6 oder B12), kann eine Homozystinurie auch auf einen autosomal-rezessiv vererbten Defekt der Cystathionin-E-synthase zurückgehen. Die Methionin-Synthase oder das Hilfsenzym Methylen-THFReduktase (7 o.) können ebenfalls betroffen sein. In allen Fällen staut sich Homozystin im Blut und in den Geweben

465 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

. Abb. 13.29. Abbau von Cystein. (Einzelheiten 7 Text)

an und verursacht bei homozygoten Formen schwere Endothelschäden, die schon im frühen Alter zu Gefäßverschlüssen und damit zu Myokardinfarkten und Gehirnschlägen (Apoplexien) führen können. Cystein, das beim Menschen zu den bedingt essentiellen Aminosäuren zählt, wird durch diese Enzymdefekte absolut essentiell. Verantwortlich für die Endothelschädigung bei Homozystinämie ist wahrscheinlich die Bildung des äußerst zytotoxischen Metaboliten Homocysteinthiolacton. Die Therapie der Homozystinurie besteht in einer Diät, die wenig Methionin enthält dafür aber mit Cystein und Vitaminen angereichert ist. ! Cystein wird über mehrere Wege zu Pyruvat abgebaut.

Cysteinabbau. Zum Abbau von Cystein gibt es mehrere Wege (. Abb. 13.29). Im menschlichen Stoffwechsel vorherrschend ist die O2-abhängige Oxidation zu Cysteinsulfinat, das durch die ubiquitär vorhandene AspartatAminotransferase (7 Kap. 13.6.1) unter Bildung von Glutamat zu Sulfinylpyruvat transaminiert wird. Dieses Intermediat zerfällt schließlich in Pyruvat und Sulfit (SO32–), das durch Oxidation mit Hilfe der Sulfitoxidase in Sulfat (SO42–) übergeht. Cystein lässt sich außerdem durch die Abspaltung von Hydrogensulfid (HS-) über Aminoacrylat in Pyruvat überführen (vgl. . Abb. 13.7). ! In vielen Geweben gehört Taurin zu den häufigsten Aminosäuren.

Taurinsynthese. Im menschlichen Stoffwechsel wird etwa 1/3 des Cysteins zu Taurin abgebaut. Diese nichtproteinogene Aminosäure (eine E-Aminosulfonsäure) wird durch Decarboxylierung und nachfolgende Oxidation der Sulfinatgruppe aus Cysteinsulfinat gebildet (. Abb. 13.29). Während die Konzentrationen von Taurin im

Blut gering sind (. Tab. 13.5), kann es intrazellulär Konzentrationen bis 50 mmol/l erreichen. In Muskulatur, Gehirn und Leukozyten ist es sogar die häufigste Aminosäure. In den Zellen entfaltet Taurin vor allem cytoprotektive Wirkungen. Unter anderem wirkt es als Osmolyt und puffert die Auswirkungen osmotischer Schwankungen der Körperflüssigkeiten ab. Taurin schützt außerdem vor oxidativen Zellschäden, hemmt Entzündungsreaktionen und aktiviert bestimmte Immunzellen. Diese noch nicht voll verstandenen Wirkungen werden teilweise durch Taurinchloramin vermittelt, das bei der Reaktion von Taurin mit hypochloriger Säure entsteht. Schon länger bekannt ist die Rolle des Taurins als Baustein konjugierter Gallensäuren (7 Kap. 32.1.4). ! Glutathion (GSH) ist das wichtigste intrazelluläre Antioxidans.

Cystin. Wie alle Thiole wird Cystein durch Luftsauerstoff

und andere Oxidationsmittel rasch zum Disulfid Cystin oxidiert. In Proteinen stellen Disulfidbrücken aus zwei verknüpften Cysteinresten die einzigen konformationsstabilisierenden Wechselwirkungen covalenter Art dar. Cystin kann auf nichtenzymatischem Wege durch Disulfidaustausch wieder zu Cystein reduziert werden, es gibt aber auch Enzyme, die es in NH4+, Pyruvat und Thiocystein zerlegen (. Abb. 13.30, Reaktion (5)). Das letztere zerfällt spontan zu Cystein und H2S. Glutathion. Das cysteinhaltige Tripeptid Glutathion (GSH, J-Glu-Cys-Gly) ist mit intrazellulären Konzentrationen zwischen 0,5 und 10 mmol/l das wichtigste Antioxidans des menschlichen Organismus. Seine Funktion beruht auf der stark reduzierenden Wirkung der Thiolgruppe, die

13

466

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

. Abb. 13.30. Umwandlungsreaktionen von Cystein. Enzyme: 1 = Glutamylcystein-Synthetase; 2 = Glutathionsynthetase; 3 = J-Glutamyltransferase; 4 = Aminopeptidase N; 5 = CystathioninJ-Lyase. (Einzelheiten 7 Text)

13

leicht mit freien Radikalen und reaktiven Sauerstoffspezies (reactive oxygen species, ROS) reagiert. Dabei entsteht das Glutathion-Disulfid GSSG, das in einer NADPH-abhängigen Reaktion wieder zu GSH reduziert werden kann (7 Kap. 15.3). Das Redoxpaar GSSG/ 2 GSH sorgt für das stark reduktive Milieu im Inneren der Zellen und bestimmt ihre antioxidative Kapazität. Außerdem dient GSH als Bestandteil von Leukotrienen (7 Kap. 12.4.2), als Konjugationspartner bei Biotransformationen in der Leber (7 Kap. 33.3), und unterstützt den Aminosäuretransport (7 u.). Die ATP-abhängige Synthese von GSH aus Glutamat, Cystein und Glycin wird durch zwei cytosolische Synthetasen katalysiert. Zunächst verknüpft die γ-Glutamylcystein-Synthetase (. Abb. 13.30, Reaktion (1)) die J-Carboxylgruppe von Glutamat mit der D-Aminogruppe von Cystein (Isopeptidbindung), dann wird durch die GSHSynthetase (Reaktion (2)) der Glycinrest angefügt. Die in . Abb. 13.30 dargestellten Reaktionen (3) und (4) sind Teile des γ-Glutamylzyklus, über den Aminosäuren in die Zellen aufgenommen werden können.

13.6.5

Verzweigtkettige Aminosäuren

Die verzweigten aliphatischen Aminosäuren Valin, Leucin und Isoleucin (branched-chain amino acids, BCAA) sind für den Menschen essentiell. Ihre Abbauwege zeigen Übereinstimmungen und werden deshalb gemeinsam besprochen. Stoffwechselbedeutung. Wie in Abschnitt 13.5.5 bespro-

chen, werden die BCAA vor allem von der Muskulatur verstoffwechselt und tragen so zur Versorgung anderer Gewebe mit Alanin und Glutamin bei. Als ketogene Aminosäure

ist Leucin eine Vorstufe für Ketonkörper und Fettsäuren. Die BCAA-Konzentration im Plasma stellt vermutlich ein globales Signal für den Ernährungszustand des Organismus dar. Sicher ist, dass Leucin zusammen mit Glucose die Insulinausschüttung aus dem Pankreas fördert (7 Kap. 26.1.3) und offenbar auch in andere Signaltransduktionswege eingreift. Im Einzelnen sind diese Effekte noch nicht geklärt. ! Die Abbauwege für Valin, Leucin und Isoleucin zeigen viele Gemeinsamkeiten.

Abbauwege. In . Abb. 13.31 sind die Abbauwege von Va-

lin, Isoleucin und Leucin in einer Übersicht dargestellt. Die einleitenden Schritte sind in allen drei Fällen die gleichen, nämlich 4 eine Transaminierung (katalysiert durch ein- und dasselbe Enzym für alle drei Aminosäuren) gefolgt von der 4 oxidativen (dehydrierenden) Decarboxylierung der gebildeten D-Ketosäuren zu Acyl-CoA-Derivaten Auch für diese zweite Reaktion gibt es nur ein Enzymsystem, den so genannten Verzweigtketten-Dehydrogenase-Komplex. In Aufbau und Reaktionsmechanismus ähnelt die Verzweigtketten-Dehydrogenase den Pyruvatdehydrogenase- bzw. D-Ketoglutaratdehydrogenase-Komplexen (7 Kap. 14.2). Die Bezeichnungen der dabei gebildeten Acyl-CoA-Derivate finden sich in . Abb. 13.11. Es folgen 4 die FAD-abhängige Reduktion der jeweiligen AcylCoA-Verbindungen zu Enoyl-CoA-Derivaten und 4 die Hydratisierung der Enoyl-CoA’s zu Alkoholen (im Abbauweg von Leucin ist zuvor noch eine Carboxylierung eingeschoben)

467 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

. Abb. 13.31. Abbau der verzweigtkettigen Aminosäuren. Roter Balken Enzymdefekt bei der Ahornsirupkrankheit. (Einzelheiten 7 Text)

13

468

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

. Tabelle 13.12. Stoffwechselbedeutung der aromatischen Aminosäuren Aminosäure

Produkt

Funktion als/bei

in/im

siehe

Phenylalanin

o Tyrosin

Gluconeogenesevorstufe

Leber

Kap. 13.6.6

o Tyrosin

Lipidvorstufe

Tyrosin

Tryptophan

Kap. 13.6.6

o Fumarat

Gluconeogenesevorstufe

o Acetacetat

Lipidvorstufe

o DOPA

Melaninvorstufe

o DOPA

Katecholaminvorstufe

o 3-Iodotyrosin

Hormonvorstufe (T3, T4)

Leber

Kap. 13.6.6

Kap. 27.2.4

o

Gluconeogenesevorstufe

o Acetyl-CoA

Lipidvorstufe

Kap. 13.6.6

o Chinolinat

NAD+-Vorstufe

Kap. 13.6.6

o 5-Hydroxytryptophan

Vorstufe für Serotonin und Melatonin

Kap. 32.3.6

Leber

Kap. 13.6.6

DOPA = Dihydroxyphenylalanin

Von hier an unterscheidet sich der Valinabbau deutlich von dem der beiden anderen Aminosäuren. In drei Schritten wird das Intermediat 3-Hydroxyisobutyryl-CoA zu Propionyl-CoA abgebaut. Beim Abbau von Leucin und Isoleucin folgt auf die Hydratisierung die Abspaltung von Acetyl-CoA (C-CSpaltung), wobei im Falle des Isoleucins das hydratisierte Enoyl-CoA vorher noch oxidiert wird. Zurück bleiben Propionyl-CoA (aus Valin und Isoleucin) bzw. Acetacetat (aus Leucin). Da Leucin nur Acetyl-CoA und Acetat liefert ist es neben Lysin die einzige rein ketogene Aminosäure. Die weitere Umwandlung von Propionyl-CoA in Succinyl-CoA ist in . Abb. 13.23 im Einzelnen dargestellt.

13

! Pathobiochemie: Verzweigtkettenkrankheit (»Ahornsirupkrankheit«).

Bei dieser Störung liegt ein Defekt der oxidativen Decarboxylierung der drei aus BCAA gebildeten D-Ketosäuren vor. Da die Verzweigtketten-Dehydrogenase aus drei Komponenten besteht, können Mutationen in allen drei Genen zu Aktivitätsänderungen des Multienzymkomplexes führen. Entsprechend stark ist die molekulare Heterogenität der Erkrankung. Eine frühe Diagnose ist äußerst wichtig. Erste Hinweise gibt der seltsame Geruch von Urin und Schweiß, der an den Sirup des amerikanischen Zuckerahorns oder – bei uns besser bekannt – an Maggi-Würze erinnert. Neben den drei Aminosäuren werden auch die entsprechenden D-Ketosäuren und die durch Hydrierung entstehenden D-Hydroxysäuren vermehrt im Urin ausgeschieden. Außerdem tritt im Plasma und Urin die ungewöhnliche Aminosäure L-Alloisoleucin auf. Falls nicht sofort mit einer Diät begonnen wird, die arm an (aber nicht frei von) Valin, Leucin und Isoleucin ist, treten schwere zentralnervöse Schädigungen (verbunden mit

Atemnot und Cyanose) und eine Azidose auf, die meist schon in den ersten Lebenswochen zum Tode führen.

13.6.6 Aromatische Aminosäuren Stoffwechselbedeutung. Tyrosin und Tryptophan sind Vorstufen für eine Reihe wichtiger Signalstoffe (. Tabelle 13.12). Dazu gehören die von Tyrosin abgeleiteten Katecholamine Dopamin, Noradrenalin und Adrenalin, die als Neurotransmitter bzw. Hormone wirken. Tyrosin ist zudem Vorstufe der braunen oder roten Melanine, die in Haut und Haaren abgelagert werden und vor den Auswirkungen von UV-Strahlung schützen. Aus Tryptophan entsteht Serotonin und Melatonin, welches den circadianen Rhythmus reguliert. In begrenzten Mengen kann aus Tryptophan auch der Nicotinamidring von NAD(P)+ synthetisiert werden. ! Tyrosin entsteht durch Hydroxylierung von Phenylalanin.

Phenylalanin-Hydroxylase. Da der menschliche Stoffwechsel (mit Ausnahme des aromatischen Rings der Östrogene, 7 Kap. 27.6.2) keine aromatischen Ringsysteme aufbauen kann, sind Tryptophan und Phenylalanin essentielle Aminosäuren. Im Gegensatz dazu ist Tyrosin nur bedingt essentiell, weil es unter normalen Stoffwechselbedingungen in ausreichenden Mengen aus Phenylalanin gebildet werden kann. Die Tyrosinbildung verbraucht normalerweise etwa ¾ des mit der Nahrung aufgenommenen Phenylalanins, der Rest wird zum größten Teil in Proteine eingebaut. Für die Tyrosinsynthese verantwortlich ist die Phenylalanin-Hydroxylase (PAH, . Abb. 13.32, Reaktion (1)), eine hauptsächlich in der Leber vorkommende, eisenhaltige Monooxygenase, die molekularen Sauerstoff (O2) und als Cofaktor 5,6,7,8-Tetrahydrobiopterin (BH4) benötigt.

469 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

. Abb. 13.32. Umwandlungsreaktionen des Phenylalanins. (Einzelheiten 7 Text)

Das Gen für die PAH liegt auf Chromosom 12. Während die mRNA 2,4 kb lang ist, weist das PAH-Gen eine Länge von über 90 kbp auf. Der für das Enzymprotein codierende Bereich ist auf 13 Exons verteilt (. Abb. 13.33). Die Phenylalanin-Hydroxylase gewinnt ihre volle Aktivität erst nach der Geburt, in der Leber menschlicher Feten sind nur geringe Mengen nachweisbar. Reaktionsmechanismus. Wie bei allen Monooxygenasen

baut die PAH eines der beiden Sauerstoffatome von O2 unter Bildung von p-Hydroxyphenylalanin (Tyrosin) in das Substrat Phenylalanin ein. Das zweite O-Atom erscheint zunächst als Hydroxylgruppe im Biopterincofaktor bevor es als Wassermolekül freigesetzt wird. Der oxidierte Cofaktor, das so genannte chinoide Biopterin, wird schließlich wieder zu BH4 reduziert. Die beiden regenerierenden Reaktionen werden durch spezielle Hilfsenzyme (Reaktionen (2) und (3)) katalysiert.

! Pathobiochemie: Die Phenylketonurie ist die häufigste genetisch bedingte Störung des Aminosäurestoffwechsels.

Phenylketonurie. Defekte der Phenylalanin-Hydroxylase stellen die häufigste genetische Anomalie des Aminosäurenstoffwechsels dar. Allein in Deutschland werden jährlich etwa 100 Kinder mit homozygoter Phenylketonurie geboren (1 Fall auf 10 000 Neugeborene). Die Häufigkeit heterozygoter Träger in der Bevölkerung beträgt etwa 1:50. Auf Grund der fehlenden Phenylalanin-Hydroxylase-Aktivität wird Phenylalanin nicht mehr oder nur noch langsam in Tyrosin überführt und häuft sich deshalb in den Zellen und im Blut an. Die Plasmakonzentration des Phenylalanins, die normalerweise bei 50–100 μmol/l (1–2 mg/dl) liegt, kann bei den Patienten auf das 50-Fache erhöht sein. Durch den Defekt der Phenylalanin-Hydroxylase wird Tyrosin zur essentiellen Aminosäure. Da der vorherrschende

13

470

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

. Abb. 13.33. Mutationen im Phenylalaninhydroxylase-Gen. Oben sind die in Europa häufigsten Mutationen dargestellt, unten eine Auswahl aus den fast 500 bekannten Polymorphismen

Abbauweg über Tyrosin ausfällt, wird Phenylalanin bei den Patienten über alternative Stoffwechselwege abgebaut, die bei Gesunden wegen ihrer geringen Aktivität kaum ins Gewicht fallen (. Abb. 13.32): 4 Durch Transaminierung entsteht aus Phenylalanin die D-Ketosäure Phenylpyruvat, deren Auftreten in Blut und Urin der Krankheit ihren Namen verliehen hat 4 Das gebildete Phenylpyruvat wird entweder zu Phenyllactat reduziert oder durch dehydrierende Decarboxylierung in Phenylacetyl-CoA überführt, das nach Konjugation mit Glutamin als Phenylacetylglutamin im Urin nachgewiesen werden kann 4 Ein Teil des Phenylalanins wird außerdem zu Phenylethylamin decarboxyliert und anschließend zu Phenylacetat dehydriert und desaminiert

13

Symptome. Die schwerwiegendsten Symptome der un-

behandelten Krankheit sind eine geistige Retardierung bis hin zum Schwachsinn und progressiv verlaufende neurologische Ausfälle. Die biochemischen Ursachen sind noch nicht abschließend geklärt. Diskutiert werden u.a. 4 Eine durch Phenylalanin bedingte Hemmung des Transports anderer Aminosäuren durch die Blut-HirnSchranke und daraus resultierende Störungen der Proteinbiosynthese im Gehirn 4 Defekte in der Biosynthese der Neurotransmitter Dopamin, Noradrenalin und Serotonin und 4 Störungen der Myelinisierung bzw. Demyelinisierung von Nervenfasern durch Phenylalaninmetabolite ! Mindestens 500 verschiedene Mutationen im Phenylalanin-Hydroxylase-Gen können eine Phenylketonurie auslösen.

Durch molekularbiologische Analysen des PhenylalaninHydroxylase-Gens von Patienten wurden bisher fast 500 verschiedenen Mutationen identifiziert (. Abb. 13.33). Die meisten Patienten sind gemischt heterozygot, d.h. die bei-

den Phenylalanin-Hydroxylase-Allele weisen unterschiedliche Mutationen auf. Bei einzelnen Patienten erklären die beobachteten Genotypen die individuelle Ausprägung der Krankheit. Manche Individuen weisen überhaupt keine Enzymaktivität mehr auf, andere besitzen noch Restaktivitäten bis zu etwa 30%. Unterschiede in der Verteilung und Häufigkeit der Mutationen sprechen für verschiedene geographische und ethnische Ursprünge der Phenylketonurie. In Europa herrschen fünf Mutationen vor: die Substitution von Arginin durch Glutamin in den Positionen 158 oder 261 (R158Q bzw. R261Q), die Substitution R408W sowie Mutationen in den Introns 10 und 12 (Int10nt546 bzw. Int12nt1). Die letztere Mutation führt – ähnlich wie bei E-Thalassämien – zu einer abnormen mRNA-Prozessierung (7 Kap. 8.3). Bei Orientalen dominiert dagegen die Substitution R243Q. ! Die frühzeitige Diagnose der Phenylketonurie durch Reihenuntersuchungen erlaubt eine wirkungsvolle Behandlung.

Diagnose. An Phenylketonurie erkrankte Säuglinge werden

ohne erkennbare Störungen geboren. Erst durch die Trennung vom mütterlichen Stoffwechsel und nach der ersten Nahrungszufuhr kommt es zum drastischen Anstieg des Phenylalaninspiegels. Da eine phenylalaninarme Diät die Entwicklung des Schwachsinns bei den Patienten verhindern kann, ist eine frühzeitige Diagnose unerlässlich. Reihenuntersuchungen zur Erkennung der Phenylketonurie werden in der Regel zwischen dem 4. und 6. Lebenstag durchgeführt. Inzwischen werden diese statt mit dem klassischen mikrobiologischen Phenylalaninnachweis durch den Guthrie-Test mit Hilfe der Tandem-Massenspektrometrie durchgeführt. Dies hat den Vorteil, mit einer Messung ein ganzes Spektrum von Störungen des Aminosäure- und Fettstoffwechsels diagnostizieren zu können. Phenylalaninkonzentratio-

471 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

. Abb. 13.34. Abbau von Tyrosin. (Einzelheiten 7 Text)

nen über 240 μmol/l (3,5 mg/dl) gelten als verdächtig und ziehen weitere Untersuchungen nach sich. Therapie. Die Therapie, die mindestens 10 Jahre lang

durchgeführt werden muss, besteht in einer speziellen phenylalaninarmen, aber nicht phenylalaninfreien Diät (Phenylalanin ist eine essentielle Aminosäure). Da der Phenylalaninanteil natürlicher Proteine mit 4–5% relativ hoch ist, wird der Proteinbedarf der Patienten durch spezielle – im Handel erhältliche – Produkte gedeckt, denen das Phenylalanin weitgehend entzogen wurde. Die sonstige Nahrung sollte möglichst proteinfrei sein. Mit einer solchen Kost gelingt es in den meisten Fällen, die Blutphenylalaninspiegel dauerhaft unter 500 μmol/l (10 mg/dl) zu halten und damit die Folgen der Phenylketonurie zu verhindern. ! Die aromatischen Ringe von Tyrosin und Tryptophan werden durch Dioxygenasen aufgespalten.

Tyrosinabbau. Wie bei vielen anderen Aminosäuren auch,

leitet eine Transaminierung den Tyrosinabbau ein (. Abb.

13.34). Der aromatische Ring des gebildeten p-Hydroxy-

phenylpyuvats wird dann in zwei aufeinander folgenden oxidativen Schritten aufgespalten. Diese Schritte werden durch Dioxygenasen katalysiert, d.h. Enzyme, die (im Gegensatz zu den Monooxygenasen) beide Sauerstoffatome eines O2-Moleküls in ihre Substrate einbauen. Im ersten Schritt, an dem Ascorbinsäure (Vitamin C) als Cofaktor beteiligt ist, wird die Ringspaltung vorbereitet: ein- und dasselbe Enzym decarboxyliert und hydroxyliert p-Hydroxyphenylpyruvat und verschiebt die Seitenkette innerhalb des Moleküls. Dann spaltet eine zweite Dioxygenase das gebildete (immer noch aromatische) Homogentisat unter Bildung von Maleylacetacetat. Nach Isomerisierung des cis-konfigurierten Maleylacetacetats in die trans-Verbindung Fumarylacetacetat setzt eine abschließende hydrolytische Spaltung die Endprodukte, den Ketonkörper Acetacetat und die Gluconeogenesevorstufe Fumarat, frei. Tyrosin (und natürlich auch seine Vorstufe Phenylalanin) gehören deshalb zu den Aminosäuren, die gleichzeitig glucogen und ketogen sind.

13

472

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

13

. Abb. 13.35. Abbau von Tryptophan. (Einzelheiten 7 Text)

Tryptophanabbau. Im Menschen wird Tryptophan fast

ausschließlich über den so genannten Kynureninweg abgebaut. Im Gegensatz zu den anderen Abbauwegen enthält er keinen Transaminierungs- oder Desaminierungsschritt, weil der aliphatische Teil des Tryptophanmoleküls während des Abbaus in unveränderter Form als Alanin freigesetzt wird (. Abb. 13.35). In der Leber beginnt der Tryptophanabbau mit der oxidativen Spaltung des Pyrrolanteils des fünfgliedrigen Indolrings durch die Tryptophan-Dioxygenase. Das Produkt der Reaktion, N-Formylkynurenin, wird zunächst zu Kynurenin deformyliert und dann im Ring hydroxyliert,

bevor die schon erwähnte Abspaltung von Alanin erfolgt. Der aromatische Sechsring des Reaktionsprodukts 3-Hydroxyanthranilat wird durch eine zweite Dioxygenase in Acroleyl-β-aminofumarat gespalten, das schließlich über eine Reihe weiterer Reaktionen D-Ketoadipat liefert, wie es auch beim Abbau von Lysin entsteht. Der weitere Abbau verläuft über Glutaryl-CoA (. Abb. 13.11) und AcetacetylCoA zu Acetyl-CoA. ! Pathobiochemie: Bei Pyridoxinmangel werden Kynurensäure und Xanthurensäure gebildet.

473 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

Bei Mangel an Vitamin B6 (Pyridoxin) weicht der Tryptophanabbau auf einen sonst nicht benutzten Weg aus, der auch in einer Reihe extrahepatischer Gewebe (v.a. den Nieren) abläuft. Sinkt die Kynureninase-Aktivität wegen des Fehlens von Pyridoxalphosphat stark ab, stauen sich Kynurenin und 3-Hydroxykynurenin an und zyklisieren nach Transaminierung durch eine vom PALP-Mangel weniger betroffene Kynurenin-Aminotransferase spontan zu Kynurensäure bzw. Xanthurensäure (. Abb. 13.35). Diese Reaktionen bilden die Grundlage eines klinischen Funktionstests, bei dem zum Nachweis einer B6-Hypovitaminose die Xanthurensäure-Ausscheidung im Urin nach oraler Tryptophangabe bestimmt wird. ! Tryptophan ist Provitamin für die Nicotinsäuresynthese.

NAD+-Synthese. Von Acroleyl-β-aminofumarat zweigt

der Biosyntheseweg der Nicotinsäure ab (. Abb. 13.35). Die Isomerisierung zum cis-Isomeren und dessen nicht enzymatische Kondensation führen zum Pyridinderivat Chinolinsäure (Pyridin-2,3-dicarbonsäure), das nach Verknüpfung mit Phosphoribosylpyrophosphat (PRPP) und Decarboxylierung die NAD+-Vorstufe Nicotinsäuremononucleotid (NMN) liefert. Angesichts dieses Stoffwechselwegs kann man Nicotinsäure nur bedingt zu den Vitaminen zählen. Der Mensch benötigt etwa 4 mmol Tryptophan in der Nahrung, um 0,1 mmol Nicotinsäure zu ersetzen. Die empfohlene tägliche Tryptophanzufuhr reicht im Allgemeinen zur Deckung des Nicotinsäurebedarfs aus. Nahrungsbedingte Mangelzustände wie die Pellagra (7 Kap. 23.3.4) sind deshalb eher als Kombinationen aus Protein-(d.h. Tryptophan-) und Vitaminmangel zu betrachten. ! Pathobiochemie: Tryptophan und seine Metabolite beeinflussen Zellproliferation, Immunantwort und Transmitterfunktionen im Zentralnervensystem.

Die physiologische Bedeutung von Tryptophan beruht nicht nur auf seiner Eigenschaft als Vorstufe für Serotonin und Melatonin – auch die Aminosäure selbst und die beim Abbau entstehenden Metabolite haben wichtige physiologische Wirkungen. Schon lange ist bekannt, dass hohe intrazelluläre Tryptophan-Konzentrationen die Proteinsynthese und die Zellproliferation stimulieren. Umgekehrt wirkt eine Verarmung der Zellen an Tryptophan cytostatisch – ein Effekt, der auch im Organismus von Bedeutung zu sein scheint. Während die Tryptophan-Dioxygenase auf die Leber beschränkt und für die Regulation des Tryptophanspiegels im Plasma verantwortlich ist, exprimieren periphere Gewebe ein zweites Enzym mit ähnlicher Wirkungsspezifität, die so genannte Indolamin-2,3-Dioxygenase (IDO). Man geht heute davon aus, dass die cytostatische Wirkung von Interferon-J ganz oder teilweise auf einer Aktivierung der Indolamin-2,3-Dioxygenase und nachfolgender Tryptophan-

verarmung in den Tumorzellen beruht. Hinzu kommt, dass einige Tryptophanmetabolite, z.B. 3-Hydroxykynurenin, zytotoxische Wirkung haben. Ein zweiter Prozess, bei dem die Indolamin-2,3-Dioxygenase eine Rolle zu spielen scheint, ist die T-Zell-Aktivierung durch Antigen präsentierende Zellen (7 Kap. 34.3.3). Die lange rätselhafte Tatsache, dass das Immunsystem der Mutter während einer Schwangerschaft den Fötus toleriert, beruht zumindest teilweise darauf, dass über die Aktivierung der Indolamin-2,3-Dioxygenase die Proliferation und Reaktivität der mütterlichen T-Zellen herabgesetzt ist. Tatsächlich ließ sich zeigen, dass Indolamin-2,3-DioxygenaseHemmstoffe wie 1-Methyltryptophan zur Abstoßung des Fötus führen können. Schließlich beeinflussen Tryptophanmetabolite auch die Funktion des Nervensystems. So interagieren Chinolinsäure (als Agonist) und Kynurensäure (als Antagonist) mit Glutamatrezeptoren vom NMDA-Typ. Man schreibt diesen Verbindungen deshalb eine Rolle bei der Pathogenese verschiedener neurologischer Erkrankungen zu.

13.6.7

Histidin und Lysin

Die essentiellen Aminosäuren Lysin und Histidin werden über besondere Wege abgebaut, die keine Beziehungen zueinander und zu den Abbauwegen der anderen Aminosäuren erkennen lassen. Stoffwechselbedeutung. N-Trimethyllysin ist die Vorstufe

des Acylcarriers Carnitin (7 Kap. 12.2.1). Posttranslational gebildetes 5-Hydroxylysin ist neben Hydroxyprolin ein typischer Baustein von Kollagen (7 Kap. 24.2). Da Hydroxylysin – ebenso wie Hydroxyprolin – für die Kollagenbiosynthese nicht wiederverwendet werden kann, wird es entweder unverändert im Urin ausgeschieden oder über D-Aminoadipat abgebaut. Das Aktin aller Muskelfasern und das Myosin der weißen Fasern enthält die ungewöhnliche Aminosäure 3-Methylhistidin (S-Methylhistidin) (7 Kap. 30.2.2), die ebenfalls posttranslational gebildet und nach dem Abbau der Muskelproteine nicht reutilisiert wird. Die mit dem Urin ausgeschiedene Menge von 3-Methylhistidin dient deshalb als Indikator für den Proteinumsatz in der Muskulatur. ! Histamin ist ein vielseitiger Mediator zellulärer Funktionen.

Biosynthese und Abbau. Die PALP-abhängige Decarboxy-

lierung von Histidin führt zum biogenen Amin Histamin. Für diese Decarboxylierung gibt es zwei Enzyme: 4 die in Gehirn, Nieren und Leber vorkommende aromatische L-Aminosäuredecarboxylase hat ein breites Substratspektrum (Phenylalanin, Tyrosin, 3,4-Dihydroxyphenylalanin (DOPA), Tryptophan, 5-Hydroxytryptophan) während

13

474

Kapitel 13 · Stoffwechsel der Aminosäuren

13 . Abb. 13.36. Abbau von Histidin. (Einzelheiten 7 Text)

4 die Histidin-Decarboxylase (in Mastzellen, basophilen Granulozyten, den ECL-Zellen der Magenmukosa und weiteren Geweben) für Histidin spezifisch ist

Die Aktivitäten aller Enzyme des Histamin-Aufbaus und -Abbaus werden durch mehrere Hormone und Cytokine kontrolliert.

Der Abbau von Histamin kann ebenfalls zwei Wege nehmen: 4 die oxidative Desaminierung durch die kupferhaltige Diaminoxidase (Histaminase) ergibt den entsprechenden Aldehyd, dessen Dehydrierung durch AldehydDehydrogenase Imidazolacetat liefert (. Abb. 13.36) oder 4 durch N-Methylierung des Imidazolrings und anschließende Oxidation des Produkts zu N(W)-Methylimidazolacetat (nicht gezeigt)

Funktionen. Histamin ist ein Mediator mit vielen Wirkungen. Über H1-Rezeptoren führt es zur Kontraktion der glatten Muskulatur im Respirations- und Gastrointestinaltrakt. In Gefäßendothelzellen fördert es dagegen die Freisetzung von NO (. Abb. 13.25), welches sekundär die Relaxation glatter Muskelzellen und damit eine Gefäßerweiterung verursacht. Auf den Belegzellen der Magenschleimhaut bindet Histamin an G-Protein-gekoppelte H2Rezeptoren und stimuliert so die Freisetzung von Magensäure (7 Kap. 32.1.2). Die Funktionen der Rezeptoren vom

475 13.6 · Stoffwechsel einzelner Aminosäuren

. Abb. 13.37. Abbau von Lysin. Im Inset ist der Mechanismus der Saccharopin-Dehydrogenase im Detail dargestellt. (Einzelheiten 7 Text)

Typ H3 und H4 sind noch wenig untersucht. Histaminantagonisten (Antihistaminika) werden zur Behandlung von allergischen Reaktionen und Magengeschwüren eingesetzt. ! Histidin wird zu Glutamat abgebaut.

Histidinabbau. Beim Histidinabbau (. Abb. 13.36) wird

zunächst die D-Aminogruppe durch eliminierende Desaminierung als Ammoniumion freigesetzt. Im Gegensatz zur Serin/Threonindehydratase (. Abb. 13.22) benötigt die dafür verantwortliche Lyase (Histidase) kein Pyridoxalphosphat. Im nächsten Schritt wird das gebildete Urocanat zu Imidazolonpropionat hydratisiert, dessen Amidbindung hydrolytisch gespalten werden kann. Die Formiminogruppe des Zwischenprodukts »Figlu« wird von Tetrahydrofolsäure (THF, 7 Kap. 23.3.8) übernommen und Glutamat bleibt zurück. Das gebildete Formimino-THF wird schließlich durch eine Desaminase in das Folsäurederivat N5,N10Methenyl-THF überführt.

Bei Patienten mit einem Folsäuremangel ist die Abspaltung der Formiminogruppe gestört. Ein derartiger Mangel lässt sich deshalb durch Bestimmung von Formiminoglutamat im Urin nach Histidingabe diagnostizieren (Histidinbelastungstest). ! Der Lysinabbau beginnt mit einer besonderen Transaminierung.

Lysin kann über verschiedene Wege abgebaut werden. Im menschlichen Stoffwechsel ist der Saccharopin-Weg (. Abb. 13.37) vorherrschend. ε-Transaminierung. Die einleitende Reaktion des Saccharopinweges entspricht im Ergebnis einer Transaminierung, nimmt aber einen völlig anderen Verlauf. Das verantwortliche Enzym, die Saccharopin-Dehydrogenase (eine neuere Bezeichnung ist Aminoadipat-Semialdehyd-Synthase) findet sich in hoher Konzentration in der Leber und in geringeren Mengen auch in anderen Geweben.

13

476

Literatur

Zunächst wird die H-Aminogruppe des Lysins unter Wasserabspaltung mit der Ketogruppe von D-Ketoglutarat kondensiert (. Abb. 13.37, Inset). Durch Hydrierung dieser Schiffschen Base entsteht eine Zwischenverbindung namens Saccharopin. Durch eine NAD+-abhängige Oxidation wird die Stickstoff-Kohlenstoff-Doppelbindung vom D-C-Atom des ehemaligen D-Ketoglutarats zum H-C-Atom des Lysinanteils hin verschoben. Die hydrolytische Spaltung dieser neu gebildeten C = N-Bindung lässt schließlich D-Aminoadipat-G-semialdehyd und Glutamat entstehen. Zusammengenommen bewirken Synthese und Spaltung von Saccharopin die irreversible Transaminierung der H-Aminogruppe des Lysins. Warum diese Reaktionsfolge in der Evolution einer einfachen Transaminierung vorgezogen wurde ist unklar, zumal im Peptidverband (Kollagen, 7 Kap. 24.2) die direkte Desaminierung von Lysin möglich ist. Weiterer Abbau. Der entstandene Semialdehyd wird – wie

bei Semialdehyden üblich – zunächst zur Dicarbonsäure dehydriert und anschließend zu α-Ketoadipat (einem Homologen von D-Ketoglutarat) transaminiert. Als D-Ketocarbonsäure kann D-Ketoadipat durch dehydrierende Decarboxylierung (. Abb. 13.11) in Glutaryl-CoA überführt werden, das nach einer weiteren decarboxylierenden Dehydrierung Crotonyl-CoA liefert. Als Intermediat der E-Oxidation lässt sich diese Verbindung auf dem üblichen Weg zu Acetyl-CoA abbauen. Da Acetyl-CoA das einzige Reaktionsprodukt darstellt, ist Lysin – wie auch Leucin – eine rein ketogene Aminosäure.

13

Ein weiterer (hier nicht im Einzelnen dargestellter) Abbauweg des Lysins führt über L-Pipecolinsäure, die sich ebenfalls D-Aminoadipat-G-semialdehyd überführen lässt. Regulation. Ein erhöhter Proteingehalt der Nahrung bewirkt eine Steigerung der Lysinoxidation. Dabei wird der Abbau wahrscheinlich durch das einleitende Enzym (die Saccharopin-Dehydrogenase), und den Lysintransport vom Cytoplasma in das Mitochondrium reguliert, da die intramitochondriale Lysinkonzentration wesentlich geringer ist als die des Cytoplasmas.

Literatur Brosnan JT (2003) Interorgan amino acid transport and its regulation. J Nutr 133:2068S–2072S Jungas RL, Halperin ML, Brosnan JT (1992) Quantitative analysis of amino acid oxidation and related gluconeogenesis in humans. Physiol Rev 72:419–448 Katagiri M, Nakamura M (2003) Reappraisal of the 20th-century version of amino acid metabolism. Biochem Biophys Res Commun 312: 205–208 Reeds PJ (2000) Dispensable and indispensable amino acids for humans. J Nutr 130:1835S–1840S Taylor L, Curthoys NP (2004) Glutamine Metabolism. Role in Acid-Base Balance. Biochem Mol Biol Education (BAMBED) 32:291–304 Waterlow JC (1999) The mysteries of nitrogen balance. Nutrition Research Reviews, 12:25–54 Watford (2003) The urea cycle: teaching intermediary metabolism in a physiological setting. Biochem Mol Biol Education (BAMBED) 31:289–297 Links im Netz 7 www.lehrbuch-medizin.de/biochemie

14 14

Der Citratzyklus Georg Löffler, Ulrich Brandt

14.1

Stellung des Citratzyklus im Stoffwechsel – 478

14.2

Reaktionsfolge des Citratzyklus – 479

14.3

Regulation des Citratzyklus – 484

14.4

Amphibole Natur des Citratzyklus – 486 Literatur – 488

478

Kapitel 14 · Der Citratzyklus

> > Einleitung Acetyl-CoA wird bei vielen katabolen Stoffwechselvorgängen gebildet. Es entsteht aus Pyruvat, dem Produkt der Glycolyse, bei der E-Oxidation der Fettsäuren sowie beim Abbau vieler Aminosäuren. Der Mechanismus des Abbaus von Acetyl-CoA wurde von Hans Adolf Krebs aufgeklärt. Er fand heraus, dass hierfür ein zyklischer Prozess verantwortlich ist, in dessen Verlauf der Acetyl-Rest unter Bildung von Citrat zunächst auf Oxalacetat übertragen wird. Citrat wird danach schrittweise bis zur Rückgewinnung des Oxalacetats oxidiert und decarboxyliert. Die dabei gewonnenen Reduktionsäquivalente werden in der Atmungskette unter ATP-Gewinn auf Sauerstoff übertragen.

14.1

14

Stellung des Citratzyklus im Stoffwechsel

Die Stoffwechselwege für den Abbau von Kohlenhydraten, Fetten und Aminosäuren enden auf der Stufe des AcetylCoA oder der α-Ketosäuren mit drei bis fünf C-Atomen (Propionyl-CoA, Pyruvat, Oxalacetat, D-Ketoglutarat) (7 Kap. 11.1.1, 12.2.1). Große Teile des Kohlenstoffskeletts der abgebauten Verbindungen bleiben somit erhalten, energieliefernde Redoxreaktionen sind nur in beschränktem Umfang möglich, und die Energieausbeute ist relativ gering. Eine wesentliche Steigerung des Energiegewinns ist nur zu erwarten, wenn die abgebauten Substrate möglichst vollständig zerlegt werden. In . Tabelle 14.1 ist die verfügbare freie Energie am Beispiel des Glucoseabbaus angegeben. Erfolgt der Glucoseabbau z.B. unter anaeroben Bedingungen über die Glycolyse bis auf die Stufe des Lactats (7 Kap. 11.1.1), entspricht dies einer Änderung der freien Energie von –197 kJ pro mol Glucose. Die vollständige Zerlegung des Glucosemoleküls in CO2 und H2O, die allerdings nur in Anwesenheit von Sauerstoff möglich ist, geht dagegen mit einer um mehr als das zehnfache höheren Änderung der freien Energie einher. Unter diesen Bedingungen steht der Zelle also ein ungleich größerer Energiebetrag für die zu leistende Arbeit zur Verfügung. Ähnliches gilt für den Abbau von Lipiden und Aminosäuren (7 Kap. 12 und 13). Dabei entstehende Endprodukte sind entweder Acetyl-CoA, Propionyl-CoA, Pyruvat (D-Ketopropionat), Succinyl-CoA, Oxalacetat (D-Ketosuccinat) oder D-Ketoglutarat. Nachdem Albert Szent-Györgyi, Franz Knoop und Carl Martius gezeigt hatten, dass Citrat in D-Ketoglutarat und Succinat in Oxalacetat überführt werden können, gebührt dem deutsch-englischen Biochemiker Sir Hans Adolf Krebs das Verdienst, als erster Licht in das Dunkel der gemeinsamen oxidativen Endstrecke des Substratabbaus gebracht zu haben,. In einer Serie von eleganten Untersuchungen, die Ende der 30er Jahre begonnen und nach dem 2. Weltkrieg

abgeschlossen wurden, konnte er zeigen, dass der Substratabbau im Rahmen eines zyklischen Prozesses abläuft, bei dem Citrat als charakteristisches Zwischenprodukt auftritt. Der danach Citratzyklus (Krebs-Zyklus, Tricarbonsäurezyklus) genannte Prozess übernimmt die Aufgabe einer zentralen Drehscheibe zwischen Substratabbau und oxidativer Phosphorylierung und führt bei einem Durchgang formal zur Zerlegung eines Moleküls Acetat in 2 Moleküle CO2 und 8 Wasserstoffatome (. Abb. 14.1). Die besondere Bedeutung des Citratzyklus für den oxidativen Stoffwechsel wird durch die Tatsache unterstrichen, dass kein anderes Bindeglied zwischen Substratabbau und Endoxidation nachgewiesen werden konnte. In allen bisher untersuchten aerob arbeitenden Zellen wurde die enzymatische Ausstattung für den Citratzyklus gefunden. Reaktionen, die einzelne Schritte des Zyklus umgehen, werden in vielen Organismen zu besonderen, meist biosynthetischen Zwecken verwendet.

. Tabelle 14.1. Änderung der freien Energie bei anaerobem (glycolytischem) und aerobem Abbau von Glucose Abbauweg

ΔG0

Glucose o 2 Lactat

– 197 kJ/mol

Glucose + 6 O2 o 6 CO2 + 6 H2O

–2881 kJ/mol

. Abb. 14.1. Beziehungen des Citratzyklus zum Kohlenhydrat-, Fett- und Proteinstoffwechsel sowie zur biologischen Oxidation

479 14.2 · Reaktionsfolge des Citratzyklus

Innerhalb der Zelle enthalten die Mitochondrien im Matrixraum den vollständigen Satz der für den Citratzyklus notwendigen Enzyme. Er befindet sich somit in engster Nachbarschaft zu der in 7 Kapitel 15.1 geschilderten Ener-

giewandlung durch oxidative Phosphorylierung, die in der inneren Mitochondrienmembran abläuft. Diese Tatsache hat für die Regulation des Citratzyklus zentrale Bedeutung (7 u.).

In Kürze Beim Stoffwechsel von Kohlenhydraten, Lipiden und in gewissem Umfang von Proteinen entsteht Acetyl-CoA. Dieses wird im Citratzyklus oxidiert und decarboxyliert, wobei 2 Moleküle CO2 freigesetzt und 8 Wasser-

14.2

Reaktionsfolge des Citratzyklus

In . Abb. 14.2 ist die Reaktionsfolge des Citratzyklus dargestellt. Die Abbildung zeigt auch die für den Anschluss an die Glycolyse erforderliche Reaktion: Das bereitgestellte Pyruvat wird zunächst durch dehydrierende Decarboxylierung zu Acetyl-CoA. Der Citratzyklus selbst lässt sich formal in zwei Teile einteilen: 4 Bildung von Citrat aus Oxalacetat (●-Ketosuccinat) und Acetyl-CoA, und anschließende Wiedergewinnung einer C-4 Dicarbonsäure (Succinat) durch zweimalige Oxidation und zweimalige Decarboxylierung 4 Regenerierung von Succinat zu Oxalacetat, das damit wieder zur Reaktion mit Acetyl-CoA zur Verfügung steht (7 Kap. 12.2.1). Die dabei beschrittene Reaktionssequenz hat formal Ähnlichkeit mit den ersten drei Reaktionen der Fettsäureoxidation ! Acetyl-CoA entsteht aus Pyruvat durch dehydrierende Decarboxylierung von Pyruvat.

Die Oxidation von Kohlenhydraten deckt den Hauptteil des Energiebedarfs der Zelle. Um Kohlenhydrate in den Citratzyklus einschleusen zu können, muss Pyruvat als Endprodukt der Glycolyse in Acetyl-CoA umgewandelt werden. Dies geschieht in einer mehrstufigen, als dehydrierende Decarboxylierung von Pyruvat bezeichneten Reaktion. Sie wird von einem kompliziert aufgebauten Multienzymkomplex, dem Pyruvatdehydrogenasekomplex (PDHKomplex) katalysiert. Die dehydrierende Decarboxylierung von D-Ketosäuren wie Pyruvat wird auch als oxidative Decarboxylierung bezeichnet. Der erste Ausdruck beschreibt die molekularen Vorgänge jedoch besser, da Sauerstoff an der Reaktion nicht beteiligt ist, sondern dem Substrat Wasserstoff entzogen wird (Dehydrierung). Die Einzelreaktionen der durch den PDH-Komplex katalysierten Reaktionen sind in . Abb. 14.3 dargestellt: 4 Pyruvat wird decarboxyliert. Hierzu ist die Addition des dem Stickstoff benachbarten, sehr reaktionsfähigen C-Atom des Thiazolrings im Thiaminpyrophosphat an die Carbonylgruppe des Pyruvates notwendig. Die für

stoffatome für die Endoxidation bereitgestellt werden. Der vollständige Satz der für den Citratzyklus notwendigen Enzyme befindet sich in der mitochondrialen Matrix.

die Decarboxylierung zum Hydroxyethylthiaminpyrophosphat erforderliche Elektronenverschiebung wird dadurch erleichtert, dass dieser Ring das Intermediat mesomer stabilisieren kann. Diese Reaktion wird durch die Pyruvatdecarboxylase-Untereinheit katalysiert 4 Hydroxyethylthiaminpyrophosphat kann als »aktiver« Acetaldehyd betrachtet werden. Durch die an das Enzym gebundene oxidierte D-Liponsäure wird er zum Acetylrest oxidiert und dabei auf die Liponsäure übertragen. Diese ist außerdem der Akzeptor des bei der Oxidation frei werdenden Elektronenpaares. Die Energie der Redoxreaktion wird zur Bildung des energiereichen Thioesters im S-Acetylhydrolipoat genutzt 4 Der als energiereicher Thioester an das Enzym gebundene Acetylrest wird auf CoenzymA übertragen, wobei Acetyl-CoA und reduziertes Lipoat entsteht. Die für die Oxidation sowie Transacetylierung verantwortliche Untereinheit des Pyruvat-Dehydrogenase-Komplexes wird als Lipoattransacetylase bezeichnet 4 Das reduzierte Lipoat wird durch Dihydrolipoatdehydrogenase reoxidiert. Dieses FAD-haltige Enzym, kann seine Reduktionsäquivalente im Gegensatz zu anderen FAD-Enzymen auf NAD+ übertragen, da das Redoxpotential des Flavins aufgrund der spezifischen Proteinumgebung negativer als das des Nicotinamid-Cosubstrates ist In der Thioesterkonfiguration des Acetyl-CoA liegt eine sog. »energiereiche Verbindung« vor. Der bei Oxidation des Acetaldehyds zum Acetylrest freiwerdende Energiebetrag ist jedoch so groß, dass die Pyruvatdehydrogenase trotz der Bildung eines Thioesters mit einem 'G0’ von – 34 kJ/mol stark exergon und damit unter physiologischen Bedingungen praktisch irreversibel arbeitet. In . Abb. 14.4 ist schematisch der Aufbau der für Säugergewebe typischen Form des PDH-Komplexes dargestellt. Insgesamt sind am Aufbau des Enzymkomplexes die 4 Komponenten, E1, E2, E3 und E3BP beteiligt. 4 Die E1-Komponente ist ein Tetramer der Zusammensetzung D2E2, die die geschwindigkeitsbestimmende Teilreaktion der PDH katalysiert. Die E1D-Untereinheiten tragen das Thiaminpyrophosphat. Wahrscheinlich

14

480

Kapitel 14 · Der Citratzyklus

14

. Abb. 14.2. Reaktionsfolge des Citratzyklus. Die beiden vom Acetyl-CoA abstammenden C-Atome sind rot hervorgehoben. Die Asymmetrie der Aconitase führt dazu, dass der bei den beiden Decarboxylierungsreaktionen in Form von CO2 abgespaltene Kohlenstoff

nicht dem Acetyl-CoA-Kohlenstoff entstammt. Dieser findet sich nach einmaligem Durchlauf des Zyklus im Oxalacetat wieder, ist hier jedoch auf alle 4C-Atome verteilt, da Succinat eine symmetrische Verbindung ist

481 14.2 · Reaktionsfolge des Citratzyklus

. Abb. 14.3. Mechanismus der dehydrierenden Decarboxylierung von Pyruvat durch den Pyruvatdehydrogenasekomplex. Die Atome des Pyruvats sind rot und blau hervorgehoben. Aus Platzgründen ist lediglich der Thiazolring des Thiaminpyrophosphats dargestellt

. Abb. 14.4. Die Beteiligung der PDH-Untereinheiten am Reaktionszyklus. In der Reaktion1 erfolgt die Bindung des Substrates an Thiaminpyrophosphat (TPP) sowie die Decarboxylierung. Die Oxidation zum Acetylrest durch Liponsäure geschieht in Reaktion 2. Den Reaktionen 3 und 4 entspricht die Übertragung des Acetylrestes auf CoA, in den Reaktionen 5, 6 und 7 wird das reduzierte Lipoat reoxidiert, wobei letztlich NADH gebildet wird. (Einzelheiten 7 Text) (Nach Patel MS, Roche TE, 1990)

14

482

Kapitel 14 · Der Citratzyklus

wird die Decarboxylierung des Pyruvates zum Thiaminpyrophosphat-gebundenen Hydroxyethylrest durch die Untereinheit E1E katalysiert 4 Die Untereinheit E2 trägt zwei Lipoatreste, das dihydrolipoamide binding protein E3BP einen Lipoatrest. Während des Katalysezyklus wird der Hydroxyethylrest (7 o.) unter Oxidation zunächst auf das erste Lipoat der E2-Untereinheit übertragen, wobei dort ein Acetylrest entsteht, der durch eine Thiotransferaseaktivität auf den zweiten Lipoatrest gelangt. Von diesem wird er mit CoenzymA unter Bildung von Acetyl-CoA abgespalten. Der Lipoatrest auf der Untereinheit E3BP ist das unmittelbare Oxidationsmittel für den Lipoatrest der Untereinheit E2 4 Die Untereinheit E3, an welche FAD gebunden ist, reoxidiert nun den Lipoatrest im E3BP, wobei das FAD der Untereinheit E3 reduziert wird. Dieses wird mit Hilfe von NAD+ reoxidiert, womit der Ausgangszustand des Komplexes wieder hergestellt ist

14

Der tierische PDH-Komplex hat eine sehr hohe molekulare Masse. Er besteht aus etwa 22 E1-Tetrameren, etwa 60 E2Komponenten sowie je 6 E3BP- und E3-Komponenten. Die primär biliäre Lebercirrhose, eine relativ seltene Form der Lebercirrhose ist wahrscheinlich eine Autoimmunerkrankung. Man findet bei den betroffenen Patienten regelmäßig Autoantikörper, die meist gegen die E2-und E3Bp-Untereinheit des PyruvatdehydrogenaseKomplexes gerichtet sind. Man hat allerdings noch keine Vorstellung darüber, wie diese Autoimmunreaktion mit der Entwicklung der biliären Cirrhose in Zusammenhang zu bringen ist. Die D-Untereinheit von E1 kann durch eine spezifische Kinase phosphoryliert und inaktiviert, sowie durch eine spezifische Phosphatase dephosphoryliert und aktiviert werden. Die Phosphorylierung findet sequenziell an drei Serylresten der D-Untereinheit statt, wobei die Phosphorylierung des ersten Serylrestes bereits mit einer Inaktivierung um 60–70% der Ausgangsaktivität einhergeht. Sowohl die Kinase wie auch die Phosphatase sind Bestandteil des PDH-Komplexes, beide Enzyme können durch spezifische Effektoren aktiviert oder gehemmt werden (. Abb. 14.5). Der Pyruvatdehydrogenasekomplex gehört damit in die Gruppe der sog. interconvertierbaren Enzyme (7 Kap. 4.2.1). Der biologische Vorteil dieses weit verbreiteten Prinzips besteht darin, dass durch die Phosphorylierung bzw. Dephosphorylierung die Aktivität des Enzymkomplexes sehr rasch »ab- bzw. angeschaltet« werden kann. ! Durch die Reaktion von Acetyl-CoA mit Oxalacetat entsteht Citrat, aus dem durch zweimalige Decarboxylierung Succinat entsteht.

Nachdem in der Eingangsreaktion aus Oxalacetat (D-Ketosuccinat) und einem Acetylrest Citrat entstanden ist, wird dieses in der ersten Teilsequenz des Citratzyklus oxidativ

. Abb. 14.5. Regulation der Pyruvatdehydrogenase durch Interconversion. (Einzelheiten 7 Text)

um ein Kohlenstoffatom zu α-Ketoglutarat verkürzt. Dieses wird anschließend weiter oxidiert und ebenfalls decarboxyliert, sodass mit Succinat wieder eine Dicarbonsäure mit vier Kohlenstoffatomen entsteht. Dabei finden folgende Reaktionen statt (. Abb. 14.2): 4 Katalysiert von der Citratsynthase reagiert Oxalacetat mit Acetyl-CoA unter Bildung von Citrat. Bei dieser Reaktion handelt es sich formal um eine Aldoladdition, da sich die durch die Thioester-Bindung aktivierte, »CH-azide« CH3-Gruppe des Acetyl-CoA nucleophil an die polarisierte Carbonylgruppe des Oxalacetats addiert. Da die Thioesterbindung dabei gelöst und CoenzymA freigesetzt wird, liegt das Gleichgewicht der Reaktion ganz auf der Seite der Citratbildung 4 Unter Katalyse durch das Enzym Aconitase erfolgt die Umwandlung von Citrat zu Isocitrat, wobei intermediär enzymgebundenes cis-Aconitat entsteht. Citrat ist eine prochirale Verbindung, da sich die beiden CH2-COOHGruppen des Moleküls wie Bild und Spiegelbild verhalten. Die Aconitase erkennt die Prochiralität des Citrats und bindet ihr Substrat so, dass die Hydroxylgruppe nur auf den vom Oxalacetat stammenden CH2-COOHRest übertragen werden kann 4 Durch die Isocitratdehydrogenase wird Isocitrat zu enzymgebundenem Oxalsuccinat dehydriert und dann sofort zu D-Ketoglutarat decarboxyliert. Die meisten tierischen und pflanzlichen Gewebe sowie Mikroorganismen enthalten zwei verschiedene Isocitratdehydrogenasen, die die Reaktion

katalysieren. Während die NADP+-abhängige Isocitratdehydrogenase in den Mitochondrien und im Cytosol

483 14.2 · Reaktionsfolge des Citratzyklus

Infobox Die Aconitase ist ein bifunktionelles Protein Schon 1973 wurde neben der mitochondrialen eine cytosolische Aconitase entdeckt. Die beiden Proteine sind außerordentlich ähnlich, die Aminosäuresequenz zeigt etwa 31% Identität. Die Funktion der cytosolischen Aconitase besteht allerdings weniger in der Bildung von Isocitrat aus Citrat. Es hat sich vielmehr gezeigt, dass dieses Enzym identisch mit einem Protein ist, welches als transaktivierender Faktor eisenabhängige Gene aktiviert. Es wird infolgedessen auch als IRE-Bp (iron responsive element binding protein) bezeichnet (7 Kap. 22.2.1). Wie die mitochondriale Aconitase kann auch die cytoplasmatische Aconitase ein EisenSchwefel-Zentrum enthalten. Dieses ist für ihre Funktion als Aconitase notwendig. Für die Funktion der cytoplasmatischen Aconitase als IRE-Bp ist allerdings die Abspaltung des Eisen-Schwefel-Zentrums erforderlich. Die cytosolische Aconitase ist das am besten untersuchte Beispiel für sog. bifunktionelle Proteine. Andere Proteine mit zweierlei Funktionen sind die Thymidylatsynthase (7 Kap. 19.1.4), die Dihydrofolatreduktase (7 Kap. 19.1.3), die Glycerinaldehyd-3-Phosphatdehydrogenase (7 Kap. 11.1.1) und die Glutamatdehydrogenase (7 Kap. 13.6.1).

gefunden wird, kommt das NAD+-abhängige Enzym ausschließlich in den Mitochondrien vor. Man nimmt an, dass das NAD+-abhängige Enzym für den Citratzyklus benutzt wird, während die NADP+-abhängige Isocitratdehydrogenase eine Nebenstrecke des Zyklus darstellt (7 Kap. 14.4) 4 Das Enzym α-Ketoglutarat-Dehydrogenase setzt D-Ketoglutarat durch dehydrierende Decarboxylierung in Succinyl-CoA um. Der Reaktionsmechanismus der D-Ketoglutaratdehydrogenase entspricht demjenigen der Pyruvatdehydrogenase. Das Enzym benötigt Thiaminpyrophosphat, D-Liponsäure, Coenzym A, NAD+ und FAD als Cofaktoren. Ähnlich wie bei der Pyruvatdehydrogenase sind die einzelnen, für die Reaktionssequenz verantwortlichen Enzyme, in einem Multienzymkomplex zusammengefasst. Dieser wird jedoch im Gegensatz zur Pyruvatdehydrogenase nicht per Interconversion durch reversible Phosphorylierung reguliert. Die Änderung der freien Energie der D-Ketoglutaratdehydrogenasereaktion liegt wie bei der dehydrierenden Decarboxylierung von Pyruvat bei –34 kJ/mol 4 In der nächsten, durch die Succinyl-CoA-Synthetase katalysierten Reaktion wird aus Succinyl-CoA durch Abspaltung von CoA mit Phosphat das energiereiche Succinylphosphat gebildet. Dieses wird anschließend unter Erhaltung einer energiereichen Bindung auf einen spezifischen Histidylrest des Enzyms übertragen und

. Abb. 14.6. Reaktionsmechanismus der Succinyl-CoA-Synthetase. (Einzelheiten 7 Text)

anschließend von hier aus zur Bildung eines GTP aus GDP verwendet (. Abb. 14.6) 4 Durch Phosphatgruppentransfer nach der Gleichung

kann ATP aus GTP erzeugt werden. Diese Reaktion wird von der Nucleosiddiphosphatkinase katalysiert Bei der Succinyl-CoA-Synthetase-Reaktion wird also die in der vorangegangenen Redoxreaktion gewonnene, freie Energie in Form von GTP konserviert, das leicht in ATP überführt werden kann. Im Gegensatz zur oxidativen Phosphorylierung wird diese Form der ATP-Gewinnung auch als Substratkettenphosphorylierung bezeichnet (7 Kap. 4.1.2). ! Succinat wird zu Oxalacetat oxidiert.

14

484

Kapitel 14 · Der Citratzyklus

. Tabelle 14.2. Energiebilanz der einzelnen Schritte des Citratzyklus ATP-Ausbeutea

Schritt

H-Akzeptor

Isocitrat o D-Ketoglutarat

NAD+ o NADH+H+ +

2,3

+

D-Ketoglutarat o Succinyl-CoA

NAD o NADH+H

2,3

Succinyl-CoA o Succinat

(Substratkettenphosphorylierung)

1

Succinat o Fumarat

FAD o FADH2

1,4

Malat o Oxalacetat

a

+

+

NAD o NADH+H

2,3

Summe

9,3

Über die ATP-Ausbeute bei der oxidativen Phosphorylierung 7 Kap. 15.1.4

Die Rückgewinnung von Oxalacetat aus Succinat erfolgt in einer Serie von Schritten, die große Ähnlichkeit mit denjenigen der Fettsäureoxidation (7 Kap. 12.2.1) haben: 4 Durch die Succinat-Dehydrogenase wird Succinat zu Fumarat oxidiert. Die Succinat-Dehydrogenase ist Teil des Komplexes II der Atmungskette, der die Reduktionsäquivalente über FAD auf Ubichinon überträgt (7 Kap. 15.1.2) 4 Durch Katalyse des Enzyms Fumarase wird Wasser in einer reversiblen Reaktion an Fumarat angelagert, sodass Malat entsteht 4 Durch die Malatdehydrogenase wird Malat schließlich unter Gewinnung eines weiteren Reduktionsäquivalentes zu Oxalacetat oxidiert ! Die Energieausbeute des Citratzyklus beträgt rund 9 ATP pro oxidiertem Acetylrest.

Die Summengleichung des Citratzyklus lautet:

Damit dient der Zyklus formal der vollständigen Dehydrierung von Acetat zu CO2 und H2. Der Acetatabbau erfolgt durch Bindung an ein Trägermolekül (Oxalacetat), an dem die Dehydrierung stattfindet (7 auch Harnstoffbiosynthese, 7 Kap. 13.5.2). . Tabelle 14.2 gibt die energetische Ausbeute der Acetatdehydrierung im Citratzyklus bei Kopplung an die oxidative Phosphorylierung wieder. Die hohe Energieausbeute im Citratzyklus kommt also nur durch die enge Verbindung des Zyklus mit der oxidativen Phosphorylierung zustande. Ohne diese Kopplung könnte Energie im Verlauf des Citratzyklus nur durch die Substratkettenphosphorylierung konserviert werden.

In Kürze

14

Der Citratzyklus dient dem oxidativen Abbau von AcetylCoA. Eine wichtige Acetyl-CoA-liefernde Reaktion ist neben der E-Oxidation der Fettsäuren die dehydrierende Decarboxylierung von Pyruvat. Der hierfür verantwortliche Multienzymkomplex der Pyruvatdehydrogenase ist intramitrochondrial lokalisiert und benötigt die Vitamine Thiamin, Pantothensäure, Riboflavin und Nicotinamid sowie das Lipoat in Form ihrer jeweiligen Coenzyme.

14.3

Regulation des Citratzyklus

! Die PDH wird durch Acetyl-CoA und NADH gehemmt und durch Pyruvat aktiviert.

Das für den Citratzyklus notwendige mitochondriale Acetyl-CoA wird vor allem durch Fettsäureoxidation oder dehydrierende Decarboxylierung von Pyruvat bereitgestellt. Während die Geschwindigkeit des ersten Vorgangs im Wesentlichen durch das mitochondriale Fettsäureangebot bestimmt wird, wird die Geschwindigkeit der Pyru-

Die Reaktionssequenz des Citratzyklus umfasst folgende Schritte: Acetyl-CoA wird unter Abspaltung von CoA-SH auf Oxalacetat übertragen, wobei Citrat entsteht. Citrat wird nach Umlagerung zu Isocitrat zweimal oxidiert und decarboxyliert, wobei schließlich aus Succinyl-CoA unter Gewinnung eines GTP Succinat entsteht. Succinat wird durch zweimalige Oxidation in Oxalacetat, das Trägermolekül des Citratzyklus, umgewandelt.

vatoxidation zu Acetyl-CoA komplex reguliert. Dabei kommt der Tatsache, dass die Pyruvatdehydrogenase ein interconvertierbares und zugleich allosterisch regulierbares Enzym ist, besondere Bedeutung zu (7 Kap. 4.5). Die aktive dephosphorylierte Form des Enzyms wird durch Acetyl-CoA und NADH gehemmt (. Abb. 14.5). Andere Effektoren regulieren die Enzymaktivität durch Beeinflussung des Gleichgewichts zwischen aktiver dephosphorylierter und inaktiver phosphorylierter Form des Enzyms. Eine Aktivierung wird durch Erhöhung der Konzentration von Pyruvat, ADP und Pyrophosphat erreicht, da

485 14.3 · Regulation des Citratzyklus

. Tabelle 14.3. Aktivatoren und Inhibitoren einzelner Enzyme des Citratzyklus in tierischen Zellen Enzymatischer Schritt

Aktivierung

Citratsynthase

Hemmung ATP, NADH, Citrat

NAD-Isocitratdehydrogenase

ADP, Mg2+, Ca2+

ATP, NADH

Succinatdehydrogenase

Succinat, Fumarat

Oxalacetat

Pyruvatdehydrogenase

Pyruvat, ADP, Mg2+

Acetyl-coA, ATP, NADH

diese Metabolite die Kinase hemmen. So führt beispielsweise eine gesteigerte Fettsäureoxidation (Hunger, Nahrungskarenz, Diabetes) über die Erhöhung des Acetyl-CoASpiegels und indirekt über die vermehrte Umwandlung von ADP in ATP zu einer weitgehenden Abschaltung des Enzyms (. Tabelle 14.3). Dies hat beispielsweise zur Folge, dass Pyruvat nicht mehr in Acetyl-CoA umgewandelt werden kann und so die Glucosevorräte geschont werden. Umgekehrt führt ein Anstieg der Ca2+ – Ionenkonzentration, der häufig mit einem erhöhten Energiebedarf einhergeht, über die Aktivierung der Phosphatase zur vermehrten Bildung der aktiven PDH. ! Der zelluläre Energiebedarf ist der wichtigste Regulator des Citratzyklus.

Die Geschwindigkeit der Acetyl-CoA-Oxidation im Citratzyklus muss sehr genau dem zellulären Energiebedarf angepasst sein. Im Einzelnen spielen dabei folgende Faktoren eine wichtige Rolle: 4 Kinetische Kontrolle der Citratsynthase. Die Konzentrationen von Acetyl-CoA und Oxalacetat liegen in der Regel weit unterhalb der Substratsättigung, sodass die Citratsynthase weit unter ihrer Vmax arbeitet. Daraus folgt unmittelbar, dass die Geschwindigkeit, mit der das Substrat Acetyl-CoA aus der dehydrierenden Decarboxylierung von Pyruvat (7 Kap. 14.2) bzw. aus der E-Oxidation der Fettsäuren (7 Kap. 12.2.1) angeliefert wird, den metabolischen Fluss durch den Citratzyklus direkt bestimmt

4 Hemmung durch NADH. Ein Anstieg der NADHKonzentration signalisiert, dass die durch das ADPAngebot limitierte Geschwindigkeit der Atmungskette (7 Kap. 15.1.5) nicht ausreicht, um das gebildete NADH zu reoxidieren. Dies ist gleichbedeutend mit einem generellen Überschuss an energiereichen Verbindungen. Deshalb drosselt NADH die Geschwindigkeit des Citratzyklus indem es die Citratsynthase, die Isocitratdehydrogenase, die D-Ketoglutaratdehydrogenase sowie die Pyruvatdehydrogenase hemmt 4 Hemmung durch ATP. Ähnlich wie NADH signalisiert ATP ein hohes Angebot energiereicher Verbindungen. Es ist deshalb folgerichtig, dass die Citratsynthase, die Isocitratdehydrogenase sowie die Pyruvatdehydrogenase durch ATP gehemmt werden 4 Aktivierung durch ADP. ADP signalisiert Energiemangel. Entsprechend aktiviert ADP die Isocitratdehydrogenase, sowie die Pyruvatdehydrogenase 4 Aktivierung durch Calcium. Calcium ist ein Aktivator vieler zellulärer Funktionen (7 Kap. 25.4.5) und erhöht so den Energiebedarf. Es ist daher sinnvoll, dass Calcium durch Aktivierung der PyruvatdehydrogenasePhosphatase (7 Kap. 14.2), der Isocitratdehydrogenase und der D-Ketoglutaratdehydrogenase den Substratumsatz im Citratzyklus und damit die Energiebereitstellung stimuliert 4 Hemmung durch Zwischenprodukte. Die D-Ketoglutaratdehydrogenase wird durch Succinyl-CoA, die Succinatdehydrogenase durch Oxalacetat gehemmt. Succinat führt dagegen zu einer Aktivierung der Succinatdehydrogenase Eine Reihe von Stoffwechselgiften hemmt verschiedene Enzyme des Citratzyklus. Sie haben sich als wertvolle Hilfsmittel bei der Erforschung der Reaktionssequenz des Zyklus erwiesen. So blockieren Fluoracetat bzw. Fluorcitrat die Aconitase, Malonat die Succinatdehydrogenase und Fluoroxalacetat bzw. Fluormalat die Malatdehydrogenase.

In Kürze Die Geschwindigkeit der Acetyl-CoA-Oxidation im Citratzyklus ist eng mit dem zellulären Energiehaushalt verknüpft: NADH und ATP hemmen den Citratzyklus. ADP und Calcium sind Aktivatoren des Citratzyklus.

Die Pyruvatdehydrogenase als wichtigstes Acetyl-CoA lieferndes Enzym wird außer durch die genannten Faktoren durch reversible Phosphorylierung/Dephosphorylierung reguliert.

14

486

Kapitel 14 · Der Citratzyklus

14.4

Amphibole Natur des Citratzyklus

Bald nach der Aufklärung der Reaktionssequenz des Citratzyklus wurde klar, dass er nicht einfach als Endstrecke des oxidativen Abbaus der Substrate aufgefasst werden kann, sondern dass er neben dieser »katabolen« Funktion auch Ausgangspunkt für eine Vielzahl biosynthetischer »anaboler« Reaktionssequenzen ist. In . Abb. 14.7 sind die Beziehungen des Citratzyklus zu anderen Stoffwechselwegen dargestellt. Da die meisten Biosynthesen im cytosolischen und nicht im mitochondrialen Raum ablaufen, ist der Transport von Zwischenprodukten durch die mitochondriale Membran notwendig. Unter bestimmten Bedingungen werden nicht alle Intermediate mit ausreichender Geschwindigkeit transportiert, sodass Teilsequenzen des Citratzyklus auch im extramitochondrialen Raum mit Hilfe cytosolischer Isoenzyme ablaufen können. Es handelt sich um die Strecken Citrat o D-Ketoglutarat sowie Fumarat o Oxalacetat. Besondere Bedeutung als anabole Reaktionssequenz hat der Citratzyklus für:

4 4 4 4

die Fettsäurebiosynthese die Hämbiosynthese die Gluconeogenese sowie die Biosynthese nicht essentieller Aminosäuren

Fettsäurebiosynthese. Von besonderer Bedeutung für die

im Cytosol stattfindende Fettsäurebiosynthese ist das Acetyl-CoA. Diese Verbindung entsteht in der mitochondrialen Matrix, kann aber nicht über die innere Mitochondrienmembran transportiert werden. Um Acetyl-CoA im Cytosol bereitzustellen, muss es daher zunächst im ersten Schritt des Citratzyklus auf Oxalacetat übertragen werden. Das mitochondriale Citrat wird dann mit Hilfe eines spezifischen Transportsystems (7 Kap. 15.1.1) in das Cytosol transportiert und dort nach der Reaktion

durch die ATP-Citratlyase gespalten. Wegen seiner Fähigkeit zur Erzeugung von cytosolischem Acetyl-CoA kommt

14

. Abb. 14.7. Beziehungen des Citratzyklus zu anderen Stoffwechselwegen. (Rot) biosynthetische (»anabole«) Reaktionen; (grün) abbauende (»katabole«) Reaktionen

487 14.4 · Amphibole Natur des Citratzyklus

diesem Enzym eine Schlüsselrolle bei der Fettsäurebiosynthese zu. Tatsächlich findet es sich in hoher Aktivität in Geweben mit großer Kapazität zur Fettsäurebiosynthese, z.B. in der Leber oder dem Fettgewebe. Gewebe ohne die Fähigkeit zur Fettsäurebiosynthese, wie z.B. die Muskulatur, haben dagegen nur geringe ATP-Citratlyaseaktivität. Die Bedeutung der extramitochondrialen NADP+Isocitratdehydrogenase liegt in der Erzeugung cytosolischen D-Ketoglutarats mit seinen vielfältigen Beziehungen zum Stoffwechsel der Aminosäuren (7 Kap. 13.4.2). Gleichzeitig werden Reduktionsäquivalente in Form von NADPH bereitgestellt, die für cytosolische Biosynthesen, v.a. der Fettsäurebiosynthese, benötigt werden. Hämbiosynthese. Succinyl-CoA ist der Startpunkt für die

Hämbiosynthese (7 Kap. 20.1). Durch Kondensation mit Glycin nach der Reaktion

entsteht G-Aminolävulinat, von dem die weitere Hämsynthese ausgeht. Gluconeogenese. Für die Gluconeogenese aus glucoge-

nen Aminosäuren (7 Kap. 13.4.3) bzw. aus Lactat/Pyruvat ist die Bildung von Oxalacetat aus diesen Verbindungen erforderlich. Die hierfür notwendigen Reaktionen sind in 7 Kap. 13.3 und 7 Kap. 14.2 beschrieben. Die erste für die Gluconeogenese spezifische Reaktion wird durch die Phosphoenolpyruvat-Carboxykinase katalysiert:

Biosynthese nicht essentieller Aminosäuren. Die Bio-

Anaplerotische Reaktionen. Die Konzentrationen der verschiedenen Zwischenprodukte des Citratzyklus sind mit 10–5–10–4 mol/l relativ gering. Da sie alle mit Ausnahme von Acetyl-CoA eine katalytische Funktion haben, d.h. bei einmaligem Durchgang durch den Zyklus regeneriert werden, ist eine optimale Durchsatzgeschwindigkeit trotzdem gewährleistet. Dies trifft allerdings nur zu, wenn der ständige Abfluss von Zykluszwischenprodukten für Biosynthesen wieder ausgeglichen wird. Die hierfür verantwortlichen Reaktionen werden nach einem Vorschlag von Hans Leo Kornberg als anaplerotische Reaktionen (griech.: auffüllende Reaktionen) bezeichnet. Neben den Transaminierungsreaktionen vor allem von Pyruvat mit Aspartat bzw. Glutamat, bei denen Oxalacetat bzw. D-Ketoglutarat (7 Kap. 13.3) gebildet werden, ist die wichtigste anaplerotische Reaktion die Oxalacetatbiosynthese durch Carboxylierung von Pyruvat nach

Das für die Reaktion verantwortliche Enzym, die Pyruvatcarboxylase, ist biotinabhängig und kommt in besonders hoher Aktivität in der Leber vor. Das Enzym wird durch Acetyl-CoA bereits in sehr geringen Konzentrationen aktiviert, sodass das für die Citratbildung notwendige Oxalacetat gebildet werden kann. Anaplerotisch wirken kann ferner das cytosolische Malatenzym, das die Malatbildung aus Pyruvat nach

katalysiert. Malat kann dann in die Mitochondrien transportiert werden. Die eigentliche Bedeutung des Enzyms liegt jedoch wahrscheinlich eher in der Bildung von cytosolischem NADPH in der Rückreaktion.

synthese der nicht essentiellen Aminosäuren startet von Pyruvat bzw. den beiden D-Ketosäuren des Citratzyklus, Oxalacetat und D-Ketoglutarat (7 Kap. 13.4.2). In Kürze Eine Reihe von Zwischenprodukten des Citratzyklus liefern Bausteine für folgende wichtige Biosynthesen: 4 Fettsäurebiosynthese 4 Hämbiosynthese 4 Gluconeogenese 4 Biosynthese nicht essentieller Aminosäuren

Diese Biosynthesen führen zum Verlust wichtiger Zwischenprodukte des Citratzyklus. Durch die sog. anaplerotischen Reaktionen wird dieser Abfluss kompensiert. Neben der Bildung von Oxalacetat und D-Ketoglutarat aus Aminosäuren ist die wichtigste anaplerotische Reaktion die Biosynthese von Oxalacetat durch Carboxylierung von Pyruvat.

14

488

Kapitel 14 · Der Citratzyklus

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14

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15 15

Redoxreaktionen, Sauerstoff und oxidative Phosphorylierung Ulrich Brandt

15.1

Energieumwandlung in den Mitochondrien – 490

15.1.1 15.1.2 15.1.3 15.1.4 15.1.5

Voraussetzungen der oxidativen Phosphorylierung – 490 Elektronen- und Protonentransport in der Atmungskette – 494 ATP-Synthese – 500 Energiebilanz der oxidativen Phosphorylierung – 502 Kontrolle und Regulation der oxidativen Phosphorylierung – 503

15.2

Oxidoreduktasen – 506

15.2.1 15.2.2

Klassifizierung der Oxidoreduktasen – 506 Monooxygenasen – 507

15.3

Oxidativer Stress – 509

15.4

Pathobiochemie – 512

15.4.1 15.4.2 15.4.3

Pathogenese von Störungen im OXPHOS-System Angeborene Störungen – 513 Degenerative Erkrankungen und Altern – 513

Literatur

– 514

– 512

490

Kapitel 15 · Redoxreaktionen, Sauerstoff und oxidative Phosphorylierung

> > Einleitung Alle bekannten Lebensformen müssen aus ihrer Umgebung ständig Energie wie Nährsubstrate oder Licht aufnehmen, um ihre hoch geordneten, komplexen Strukturen aufrecht zu erhalten und die unterschiedlichen biologischen Aktivitäten zu entfalten. Wachstum und Vermehrung und somit die Fähigkeit einer Lebensform, sich durchzusetzen, hängen deshalb von der Effizienz und Anpassungsfähigkeit der Versorgung ihrer Zellen mit Energie ab. Außer bei photosynthetischen Organismen sind es letztlich immer exergone Redoxreaktionen, die für die Bereitstellung der beiden »Energiewährungen« der Zelle, der reduzierten wasserstoffübertragenden Coenzyme und ATP, verantwortlich sind. Durch Oxidation der Nahrung werden Elektronen freigesetzt, die direkt als Reduktionsäquivalente für Biosynthesen oder als Energiequelle genutzt werden können. Zur oxidativen Bildung von ATP werden die Elektronen auf ein niedermolekulares Oxidationsmittel übertragen. Dieser terminale Elektronenakzeptor ist bei aeroben Zellen molekularer Sauerstoff. Einige Mikroorganismen verwenden alternativ z.B. Schwefel oder einfache organische Säuren wie Fumarsäure. Neben der an die Reduktion von Sauerstoff gekoppelten besonders hohen Energieausbeute bildet die auf der wasserspaltenden Photosynthese der Pflanzen beruhende universelle Verfügbarkeit und quasi unerschöpfliche Regenerierbarkeit des Sauerstoffs die Grundlage des großen evolutionären Erfolges aerober Zellen. In Eukaryonten sind es die Mitochondrien, die sich auf die Oxidation von Nahrungsstoffen und die sauerstoffabhängige Energiekonservierung spezialisiert haben. Sie stammen mit großer Wahrscheinlichkeit von aeroben, heterotrophen Prokaryonten ab. Der stark exergone Charakter von Umsetzungen des Sauerstoffs mit organischen Verbindungen birgt jedoch auch erhebliche Gefahren für die Zellen. Die hohe Reaktivität radikalischer Zwischenstufen der Sauerstoffreduktion kann zur unkontrollierten Oxidation zellulärer Verbindungen und Strukturen mit weit reichenden Folgen führen. Aerobe Zellen haben deshalb ein ganzes Arsenal von Schutzmechanismen zur Bewältigung dieses »oxidativen Stresses« entwickelt.

15.1

15

Energieumwandlung in den Mitochondrien

Der mitochondriale Energiestoffwechsel ist der Hauptlieferant der Zelle für das als universelle Energiequelle eingesetzte ATP. Die grundlegende Erkenntnis, dass diese Energieversorgung auf einer Art »kalter Verbrennung« der Nahrung beruht, lässt sich bis in das 18. Jahrhundert auf Antoine Laurent de Lavoisier zurückverfolgen. Lavoisier wies nach, dass tierische Organismen Luftsauerstoff aufnehmen und Kohlendioxid und Wasser abgeben. Otto Warburg leitete aus der Hemmbarkeit der Zellatmung durch Cyanid die Existenz eines eisenhaltigen Atmungsferments zur Aktivierung des Sauerstoffs ab und erkannte damit als Erster, dass es sich bei der »Verbrennung« der Nahrung um einen enzymatischen Prozess handelt. David Keilin entdeckte die Cytochrome als Träger dieses katalytisch aktiven Eisens, denen erst viel später von Helmut Beinert und Kollegen die Eisen-Schwefel-Proteine an die Seite gestellt wurden. Heinrich Wieland zeigte, dass den Nährsubstraten durch spezifische Enzyme, den Dehydrogenasen, zunächst Wasserstoff entzogen wird. Es war wiederum Warburg, der nachwies, dass das von Karl Lohmann entdeckte ATP durch die Oxidation von Glycolyseprodukten gebildet werden konnte. Damit war das grundlegende Prinzip der oxidativen Phosphorylierung (»OXPHOS«) formuliert, welche besonders durch grundlegende Arbeiten von Albert L. Lehninger und David Green bald den Mitochondrien zugeordnet wurde. Lange Zeit blieb jedoch unklar, wie zwei so unterschiedliche Prozesse wie die Oxidation des Substratwasserstoffs und die Kondensation von

ADP und anorganischem Phosphat energetisch aneinander gekoppelt sind. Erst in den sechziger Jahren des 20. Jahrhunderts setzte sich die von Peter Mitchell formulierte chemiosmotische Hypothese durch, welche die Kopplung der ATP-Synthese an den Elektronentransport mittels eines elektrochemischen Protonengradienten über die innere Mitochondrienmembran beschreibt.

15.1.1

Voraussetzungen der oxidativen Phosphorylierung

! Die Endstrecken des katabolen Stoffwechsels von Nahrungsstoffen liefern an Coenzyme gebundenen Wasserstoff.

Wie in den vorherigen Kapiteln besprochen, werden die Nahrungsbestandteile im katabolen Stoffwechsel letztlich zu Kohlendioxid oxidiert. Dies geschieht jedoch nicht durch direkte Reaktion mit molekularem Sauerstoff. Vielmehr wird ihnen während ihres Abbaus schrittweise Wasserstoff entzogen, bis schließlich über die Zwischenstufe einer Carboxylgruppe die Kohlenstoffatome einzeln als CO2 abgespalten werden. Der Sauerstoff der Carboxylgruppe stammt dabei entweder aus der ursprünglichen Verbindung, z.B. dem Kohlenhydrat, oder aus der Wasseranlagerung an eine vorher durch Dehydrierung gebildete Doppelbindung. Nach diesem grundlegenden Schema verlaufen insbesondere die Reaktionen der Pyruvatdehydrogenase, des Citratzyklus und der E-Oxidation (7 Kap. 14, 12).

491 15.1 · Energieumwandlung in den Mitochondrien

Da Wasserstoff sehr klein und flüchtig ist, muss er zunächst als sog. Reduktionsäquivalent in Form von NADH und FADH2 zwischengespeichert werden. Dies ist ein sehr effizientes Verfahren, denn das für den Energiegehalt entscheidende Redoxpotential dieser beiden Coenzyme ist nur wenig positiver als das des Wasserstoffs. Die Umsetzung des so gebundenen Wasserstoffs mit molekularem Sauerstoff in der Atmungskette entspricht damit formal annähernd der Knallgasreaktion:

Während NADH ein reversibel an das jeweilige Enzym bindendes Cosubstrat ist, liegt FADH2 immer als fest gebundene prosthetische Gruppe vor. Die Folge sind grundsätzliche Unterschiede im Transport und in der Verwertung der Reduktionsäquivalente bei der oxidativen Phosphorylierung. ! Die in den Reduktionsäquivalenten gespeicherte Energie wird zur Erzeugung einer PhosphorsäureanhydridBindung im ATP benutzt.

ATP entsteht in einer stark endergonen Reaktion durch Kondensation von ADP und anorganischem Phosphat. Die gebildete »energiereiche« Phosphorsäureanhydrid-Bindung besitzt ein sehr hohes Gruppenübertragungspotential. Die in den Reduktionsäquivalenten gespeicherte Energie muss also im Verlauf der oxidativen Phosphorylierung in eine chemisch völlig verschiedene Energieform umgewandelt werden. Die Mitochondrien lösen dieses Problem dadurch, dass sie die Redoxenergie in Form eines elektrochemischen Protonengradienten über ihre innere Membran zwischenspeichern (. Abb. 15.1). Dieser Gradient wird durch die Atmungskettenkomplexe gebildet, welche die Elektronen der Reduktionsäquivalente schrittweise bis auf den Sauerstoff übertragen, und dann zur ATP-Synthese genutzt. Daraus folgt, dass eine sehr dichte Membran, über die sich ein ausreichend stabiler Protonengradient ausbilden kann, unbedingte Voraussetzung für die oxidative Phosphorylierung ist. ! Die mitochondrialen Membranen bilden funktionelle Kompartimente.

Aufbau und Organisation der Mitochondrien (7 Kap. 6.2.9) sind in hervorragender Weise an die bisher skizzierten Aufgaben angepasst: Wahrscheinlich als Relikt ihres evolutionären Ursprungs als eigenständige Organismen sind die Mitochondrien von zwei Membranen umgeben, die mehrere Kompartimente definieren: 4 Im Inneren der Mitochondrien, der mitochondrialen Matrix, findet v.a. die Endoxidation der Nahrungsmetabolite statt 4 Für den Elektronentransport auf den Sauerstoff und die daran gekoppelte ATP-Synthese sind Enzyme zuständig, die in die vielfach gefaltete innere Mitochondrienmembran integriert sind (. Abb. 15.1)

. Abb. 15.1. Übersicht über die oxidative Phosphorylierung. Vom NADH stammende Elektronen werden vom Atmungskettenkomplex I auf Ubichinon (Q) übertragen. Der Komplex III transportiert sie zum Cytochrom c (C), von wo sie über den Komplex IV zum Sauerstoff gelangen und diesen unter Wasserbildung reduzieren. Der Elektronentransport über die Komplexe I, III und IV geht mit einer Translokation von Protonen aus dem Matrixraum in den Intermembranraum einher. Die F1/FO-ATP-Synthase nutzt den Protonengradienten zur Synthese von ATP aus ADP und anorganischem Phosphat. Der Komplex II ist nicht dargestellt, da er keine Protonentranslokation katalysiert. IMM = Innere Mitochondrienmembran

4 Die äußere Mitochondrienmembran markiert die Grenze zum Cytoplasma 4 Der zwischen den beiden Membranen angesiedelte Intermembranraum beherbergt zwei Proteine, die wichtig für die oxidative Phosphorylierung sind: Cytochrom c, ein wasserlöslicher Elektronenüberträger der Atmungskette, und die Adenylat-Kinase (»Myokinase«), die über die Reaktion

im anabolen Stoffwechsel entstandenes AMP der oxidativen Phosphorylierung zuführt ! Spezifische Transportsysteme sind für den Stoffaustausch zwischen dem Intermembranraum und der mitochondrialen Matrix verantwortlich.

Aus dem bisher Gesagten ergibt sich, dass zur Endoxidation Substrate wie Pyruvat und Fettsäuren aus dem Cytoplasma über zwei Membranen in die mitochondriale Matrix transportiert werden müssen. Da die ATP-Synthese an der Innenseite der inneren Mitochondrienmembran stattfindet, gilt dies auch für ADP und anorganisches Phosphat. Das gebildete ATP muss anschließend zurück in das Cytoplasma gelangen.

15

492

Kapitel 15 · Redoxreaktionen, Sauerstoff und oxidative Phosphorylierung

Infobox Protonen, Puffer, Potentiale Eine Besonderheit der oxidativen Phosphorylierung (»OXPHOS«) besteht darin, dass die aus der Oxidation der Reduktionsäquivalente stammende Energie als Protonengradient zwischengespeichert wird, der dann für Transportvorgänge und v.a. die ATP-Synthese genutzt wird. Wie z.B. beim Aufbau neuronaler Aktionspotentiale ist dabei zunächst der Ladungsgradient, also das über die Membran aufgebaute elektrische Potential entscheidend. Allerdings gibt es einen wesentlichen Unterschied, der sich aus dem besonderen Verhalten von Protonen in wässriger Lösung ergibt: Im Gegensatz zu Ionen wie Na+ oder K+ ist die freie Konzentration von Protonen in der Zelle extrem gering, denn bei einem pH-Wert von 7,0 ist die H+-Konzentration definitionsgemäß 0,1 μmol/l. Wenn Protonen über die innere Mitochondrienmembran gepumpt werden, ändert sich deshalb ihr Konzentrationsverhältnis auf beiden Seiten signifikant, sodass auch ihr osmotischer Gradient berücksichtigt werden muss. Man spricht deshalb von einem chemiosmotischen Potential 'μ˜H, das sich aus einer elektrischen Komponente '< (dem Ladungsgradienten) und einer osmotischen Komponente 'pH (dem Konzentrationsgradienten) wie folgt zusammensetzt:

F ist die Faraday-Konstante, die Umkehrung des Vorzeichens und der Faktor 2,3 ergeben sich aus pH –log [H+].

15

Die äußere Mitochondrienmembran ist mit einem Porin genannten Protein besetzt, das sie für kleine Moleküle ( > Einleitung Der Stoffwechsel in einem aus verschiedenen Organen und Geweben zusammengesetzten Organismus ist davon abhängig, dass die Stoffwechselleistungen einzelner Gewebe und Organe optimal aufeinander abgestimmt sind. Dies setzt komplexe Wechselwirkungen zwischen Geweben und Organen voraus, deren Störungen Krankheitswert besitzen. Anhand von zwei Beispielen soll in diesem Kapitel dieses Netzwerk von Organ- und Gewebsbeziehungen geschildert werden. Im Einzelnen sind dies: 4 Stoffwechsel bei Nahrungsaufnahme und Nahrungskarenz 4 Stoffwechseländerungen beim Übergang von der Ruhe in den Zustand körperlicher, muskulärer Aktivität

16.1

Nahrungszufuhr und Nahrungskarenz

Beim Menschen erfolgt wie bei allen anderen höheren Organismen die Nahrungszufuhr diskontinuierlich. Ein wichtiges Prinzip des Stoffwechsels ist daher, dass während der Nahrungszufuhr im Überschuss aufgenommene Nahrungsstoffe in dafür spezialisierten Geweben des Organismus gespeichert werden, um dann während Phasen der Nahrungskarenz dem Organismus zur Verfügung zu stehen. Als Speicherorgane bzw. Substratverbraucher sind für diese Vorgänge die Leber, die Skelettmuskulatur und das Fettgewebe von besonderer Bedeutung.

16.1.1

Leber und extrahepatische Gewebe bei Nahrungszufuhr

! Über die Pfortader kommt der größte Teil der resorbierten Nahrungsstoffe zunächst mit der Leber in Kontakt.

16

Die besondere Funktion der Leber während der Resorptionsphase (Nahrungszufuhr) erklärt sich aus ihrer anatomischen Lage. Sie nimmt die über den Intestinaltrakt resorbierten Nahrungsstoffe, Vitamine und Elektrolyte auf. Eine Ausnahme hiervon machen die Nahrungslipide, die über die Lymphbahnen des Intestinaltrakts gesammelt und über den Ductus thoracicus in den großen Kreislauf verteilt werden und dementsprechend in größerer Verdünnung zur Leber gelangen. Damit ist die Leber als einziges Organ daran angepasst, ein sowohl von der Quantität als auch von der Qualität her sehr variables Stoffangebot zu bewältigen. Die während der Resorptionsphase angefluteten Substrate können von der Leber zu einem beträchtlichen Teil gespeichert werden. ! In der Leber wird ein großer Teil der Nahrungskohlenhydrate zur Glycogensynthese verwendet.

Die Tatsache, dass die Leber in der Resorptionsphase Glucose aufnimmt, in der Postresorptionsphase (7 Kap. 11.4) diese dagegen abgibt, erfordert einen Mechanismus zur Unterscheidung zwischen oral aufgenommener, resorbierter und endogen produzierter Glucose. Hierfür ist das sog.

portale Signal verantwortlich. Resorbierte und über die Pfortader aufgenommene Glucose löst in den Hepatozyten nicht nur eine Steigerung der Glucoseaufnahme, sondern auch eine Stimulierung der Glycolyse und vor allem der Glycogenbiosynthese aus. Gleichzeitig wird die endogene Glucoseproduktion supprimiert. Die intravenöse Gabe einer äquivalenten Glucosemenge zeigt diese Effekte nicht. Die molekulare Natur des portalen Signals ist noch nicht bekannt. Für seine Auslösung ist die Differenz der Glucosekonzentrationen in der Arteria hepatica und der Pfortader verantwortlich. Diese benützen intrahepatische Nerven zur Erzeugung eines cholinergen Signals (7 Kap. 31.3). Die Aufnahme und Speicherung von Glucose durch die Hepatozyten ist bereits in allen Einzelheiten beschrieben (7 Kap. 11.4) und läuft in folgenden Schritten ab: 4 Glucoseaufnahme unter Vermittlung des Glucose-Carriers GLUT-2 4 Phosphorylierung von Glucose durch die Glucokinase sowie 4 Einschleusung eines großen Teils des dabei entstehenden Glucose-6-phosphats in die Glycogenbiosynthese Neben einer gesteigerten Glycogenbiosynthese führt die enterale Zufuhr von Kohlenhydraten in den Hepatozyten auch zu einer Steigerung der Glycolyse und dem anschließenden oxidativen Abbau. Ihr Ausmaß hängt sehr stark von der metabolischen Situation ab, z.B. von der Fettsäurekonzentration, dem Insulinspiegel (7 Kap. 16.1.3) und der körperlichen Aktivität. Ein signifikanter Teil der zu Lactat abgebauten Glucose wird allerdings als sog. indirekte Glycogenbiosynthese wieder für die Glucose- und Glycogenbiosynthese verwendet. Die Ursache für dieses Phänomen beruht auf der metabolischen Zonierung des Leberparenchyms (7 Kap. 33.1.2). Glucose wird durch perivenöse Hepatozyten des Leberazinus aufgenommen und zunächst für die Glycogenbiosynthese verwendet. Mit zunehmender Füllung der Glycogenspeicher wird Glucose auch glycolytisch abgebaut, wobei allerdings wegen der relativen Sauerstoffarmut in diesem Areal überwiegend Lactat gebildet wird. Dieses gelangt an die periportalen Hepatozyten, wo es über gesteigerte Gluconeogenese in Glucose-6-phosphat umgewandelt und anschließend in Glycogen eingebaut wird.

517 16.1 · Nahrungszufuhr und Nahrungskarenz

! Die de novo Lipogenese aus Nahrungskohlenhydraten ist von untergeordneter Bedeutung.

Die vollständige Biosynthese von Triacylglycerinen aus Nichtlipidvorstufen, vor allem aus Glucose, wird als de novo Lipogenese bezeichnet. Hierbei muss sowohl der Glycerin- als auch der Fettsäureanteil der Triacylglycerine aus Glucosekohlenstoff synthetisiert werden. Wie durch eine Reihe von Messungen mit stabilen Isotopen gezeigt werden konnte, lässt sich beim Menschen unter physiologischen Bedingungen weder in der Leber noch im Fettgewebe eine nennenswerte de novo Lipogenese nachweisen. Als allgemeine Regel lässt sich ableiten, dass – solange die Kohlenhydratzufuhr niedriger als der Gesamtenergieverbrauch ist – Kohlenhydrate bevorzugt oxidativ abgebaut bzw. als Glycogen gespeichert werden. Eine Lipidneusynthese wird immer aus den zugeführten Nahrungslipiden gedeckt. Diese Beziehung ändert sich erst, wenn extrem kohlenhydratreiche Kost zugeführt wird. In einer kontrollierten Studie an schwerstkranken, über eine enterale Sonde ernährte Patienten, konnte gezeigt werden, dass die de novo Lipogenese in der Leber vom relativen Kohlenhydratgehalt der infundierten Nahrungsstoffe abhängt und bei 75% Kohlenhydraten einem Wert von etwa 20% der zugeführten Kohlenhydrate entsprach. Der Grund für die Unfähigkeit zur de novo Lipogenese bei der üblichen lipidreichen Alltagskost liegt offensichtlich darin, dass die Expression einiger an diesem Vorgang beteiligter Enzyme wie Pyruvatdehydrogenase, Acetyl-CoACarboxylase und v.a. Fettsäuresynthase durch mehrfach ungesättigte Fettsäuren der Nahrung reprimiert wird (7 Kap. 12.3.2). ! Triacylglycerine der Nahrung werden nach Spaltung durch die hepatische Lipase von der Leber aufgenommen. . Abb. 16.1 gibt eine schematische Übersicht über die

Rolle der Leber bei der Metabolisierung der Nahrungslipide, die ihr v.a. in Form von Chylomikronen und Chylomikronen-Remnants (7 Kap. 18.5.2) angeboten werden. Die in diesen Lipoproteinen enthaltenen Triacylglycerine werden durch die hepatische Lipase gespalten. Außerdem können Hepatozyten diese Lipoproteine mit Hilfe spezifischer Rezeptoren aufnehmen und dann weiter verwerten. Die durch hepatische Lipase freigesetzten Fettsäuren werden von den Hepatozyten mit Hilfe von FettsäureTransportproteinen (FATP, 7 Kap. 12.1.3) aufgenommen. Intrazellulär erfolgt dann eine Aktivierung zum entsprechenden Acyl-CoA. Die jeweilige Stoffwechsellage bestimmt das Schicksal der aufgenommenen Fettsäuren. Durch β-Oxidation können sie zur Deckung des Energiebedarfs der Hepatozyten dienen. Hierzu müssen sie als Carnitinester in die mitochondriale Matrix transportiert werden. Die dazu benötigte Carnitin-Palmityltransferase 1 wird durch Malonyl-CoA

. Abb. 16.1. Die Aufnahme von triacylglycerinreichen Lipoproteinen und Fettsäuren durch die Leber. Durch Katalyse der hepatischen Triacylglycerin-Lipase werden die Triacylglycerine in verschiedenen Lipoproteinen gespalten und deren Fettsäuren vom Hepatozyten aufgenommen. Diese Fettsäuren können entweder abgebaut oder aber zu Triacylglycerinen und Phospholipiden verestert werden. Außerdem werden bei allen Zuständen mit gesteigerter Lipolyse im Fettgewebe Fettsäuren vermehrt durch die Leber aufgenommen. CPT-1 = Carnitin-Palmityltransferase 1; PH = Phosphatidat-Phosphohydrolase. (Einzelheiten 7 Text)

gehemmt, dessen Konzentration von der Aktivität der Fettsäurebiosynthese abhängt. Wesentlich wichtiger ist allerdings in der Resorptionsphase die Veresterung der aufgenommenen Fettsäuren zu Triacylglycerinen. Die hierfür benötigte Phosphatidat-Phosphohydrolase wird durch hohe Konzentrationen an Acyl-CoA stimuliert (7 Kap. 12.3.1). Neu synthetisierte Triacylglycerine werden in VLDL-Lipoproteine eingebaut, die anschließend sezerniert werden. An der Bindung von Triacylglycerinen an das für die VLDL typische Apolipoprotein B100 ist das TriacylglycerinTransfer-Protein beteiligt. Seine experimentelle Überexpression führt zu einer drastisch gesteigerten VLDL-Synthese und -Sekretion.

16

518

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

! Aminosäuren der Nahrung dienen als Substrate für die Protein- und Glycogenbiosynthese.

! Das Fettgewebe ist das wichtigste Organ der Energiespeicherung.

Etwa 20% der von der Leber aufgenommenen Aminosäuren werden für die Biosynthese der verschiedenen, von der Leber synthetisierten und zumeist auch sezernierten Proteine verwendet (7 Kap. 33.2.3). Ungefähr ein Viertel der resorbierten Aminosäuren gelangt in den systemischen Kreislauf. Mehr als 50% der resorbierten Aminosäuren werden demnach in der Leber für folgende Vorgänge verwendet: 4 Die glucogenen Aminosäuren werden transaminiert und dienen als Substrate der Gluconeogenese (7 Kap. 11.3, 13.5.2) 4 Die Kohlenstoffskelette der essentiellen Aminosäuren Leucin und Lysin sowie Teile des Kohlenstoffskeletts des Isoleucins, Phenylalanins und Tryptophans liefern Acetyl-CoA. Dieses kann für Acetyl-CoA-abhängige Biosynthesen (Cholesterin, Fettsäuren, Ketonkörper) verwendet werden 4 Speziell die Aminosäuren Glutamin und Aspartat spielen eine besondere Rolle bei der Biosynthese stickstoffhaltiger Verbindungen. Zu diesen gehören Harnstoff, Purin- und Pyrimidinbasen, Aminozucker sowie Asparagin 4 Außerdem werden einige Aminosäuren durch Pyridoxalphosphat-abhängige Decarboxylierung in die entsprechenden Amine umgewandelt, die wichtige Funktionen als Gewebshormone und Neurotransmitter (7 Kap. 13.3.4) besitzen

Die Fähigkeit des Organismus zur Substratspeicherung in Form von Kohlenhydraten und Proteinen ist begrenzt. Rechnet man die Glycogenvorräte in Leber und Muskulatur zusammen, so ergibt sich eine maximale Menge von 400 g, deren Oxidation die Energie für wenig mehr als 24 Stunden ergeben würde. Wesentlich größer ist die Menge des im Organismus gespeicherten Proteins. Dieses kann jedoch nur teilweise zur Deckung des Energiebedarfs herangezogen werden. Die Körperproteine bilden schließlich u.a. die kontraktilen Elemente, Enzyme, Plasmaproteine und Immunglobuline und gehören deswegen zu den essentiellen Bauteilen des Organismus. Ganz anders ist dagegen die Situation bei der Energiespeicherung in Form von Triacylglycerinen. Der Körper verfügt über ein spezialisiertes Gewebe, dessen einzige Aufgabe die Speicherung von Triacylglycerinen ist, das Fettgewebe. Beim normalgewichtigen Menschen macht das Fettgewebe etwa 12% des Körpergewichts aus. Da es zu 95% aus Triacylglycerin besteht, ergibt dies eine Fettmasse von etwa 8 kg, entsprechend etwa 308000 kJ. Bei einem durchschnittlichen Energieverbrauch von täglich 8400 kJ würde diese Menge den Energiebedarf des menschlichen Körpers für 37 Tage decken. Bedenkt man, dass bei schweren Formen des Übergewichts 50 kg Fett und mehr gespeichert werden, so lässt sich leicht errechnen, für welche Zeiträume dieser Energiespeicher theoretisch ausreicht. Das Fettgewebe ist ein sehr stoffwechselaktives Organ. Lipogenese (Triacylglycerin-Biosynthese) sowie Lipolyse (Triacylglycerin-Hydrolyse) laufen nebeneinander ab. Sie benutzen getrennte Stoffwechselwege, die einer unterschiedlichen Regulation unterliegen (7 u.). Außerdem wird ein nicht unbeträchtlicher Teil der durch die Fettzellen während der Lipolyse gebildeten Fettsäuren erneut aktiviert und im Reveresterungszyklus mit α-Glycerophosphat verestert. Der Spiegel an nicht veresterten Fettsäuren in der Fettzelle ist demnach das Resultat aus der Geschwindigkeit von Lipogenese, Lipolyse und Reveresterung. Das Verhältnis dieser drei Größen wird sehr genau reguliert. Es ist von Ernährungsgewohnheiten, der Nahrungszusammensetzung und von hormonellen Einflüssen abhängig. Der Spiegel an nicht veresterten Fettsäuren in der Fettzelle wiederum ist von ausschlaggebender Bedeutung für die Konzentration der Fettsäuren im Blut, da das Fettgewebe die einzige Quelle der Serumfettsäuren darstellt. Die Tatsache, dass Fettsäuren im Blut nur eine Halbwertszeit von 1–2 Minuten haben, macht ihren raschen Umsatz im Organismus deutlich. Sie dienen vielen Organen, v.a. der Muskulatur, der Leber, dem Myokard oder der Nierenrinde als gut oxidierbares Substrat und werden von diesen Geweben gegenüber der Glucose bevorzugt oxidiert.

! Die Skelettmuskulatur speichert Glycogen und Triacylglycerine.

16

In der Resorptionsphase, besonders nach kohlenhydratreichen Mahlzeiten, kommt es zu einem Anstieg der Blutglucosekonzentration (7 Kap. 26.1.3). Die vermehrt angebotene Glucose wird im Ruhezustand von den Skelettmuskelzellen aufgenommen und in Glycogen eingebaut. Erst wenn die Glycogenkonzentration in der Skelettmuskelzelle den maximal möglichen Wert (1-1,5% Glycogen pro Gramm Skelettmuskulatur) erreicht hat, kommt es zu einer Rückkopplungshemmung der Glycogenbiosynthese durch vorhandenes Glycogen. Glucose-6-phosphat wird jetzt vermehrt zu Lactat bzw. CO2 abgebaut. Aus den Nahrungslipiden werden in der Resorptionsphase Chylomikronen gebildet, die über die enteralen Lymphwege in die Blutbahn gelangen (7 Kap. 32.2.2). Auch im Kapillarendothel der Skelettmuskulatur befindet sich die Lipoproteinlipase, die die Triacylglycerine in triacylglycerinreichen Lipoproteinen, v.a. Chylomikronen und VLDL, zu Fettsäuren und Glycerin spaltet (7 Kap. 12.1.3). Fettsäuren werden über Fettsäuretransportsysteme von den Skelettmuskelzellen aufgenommen und im Ruhezustand vorwiegend für die Synthese von Triacylglycerinen verwendet.

519 16.1 · Nahrungszufuhr und Nahrungskarenz

. Abb. 16.2. Metabolische Aktivitäten der Fettzelle. Obere Hälfte Lipogenese: Insulin induziert die Biosynthese der Lipoproteinlipase und stimuliert die Glucoseaufnahme, was zu vermehrter Triacylglycerin-Biosynthese führt. Untere Hälfte Lipolyse: Lipolytische Hormone (wie Glucagon, Adrenalin) aktivieren dagegen die Adenylatcyclase

und damit die Lipolyse. DHAP = Dihydroxyacetonphosphat; GLUT 4 = Glucose-Carrier-4; FATP = Fettsäuretransporter; HSL = hormonsensitive Lipase; PDE = Phosphodiesterase; LPL = Lipoproteinlipase. (Einzelheiten 7 Text)

! Das wichtigste Substrat für die Lipogenese sind in Lipoproteinen enthaltene Triacylglycerine.

von Dihydroxyacetonphosphat bereitgestellt und stammt somit aus dem Glucoseabbau. Nur unter ganz bestimmten Bedingungen ist das Fettgewebe zur Triacylglycerin-Biosynthese ausschließlich aus Glucose imstande. Hierzu wird Glucose vollständig zu Pyruvat abgebaut und durch dehydrierende Decarboxylierung (Pyruvatdehydrogenase) in Acetyl-CoA umgewandelt. Nach dem Transport von Acetyl-CoA aus den Mitochondrien in den cytoplasmatischen Raum (7 Kap. 12.2.1) dient Acetyl-CoA zur Biosynthese von Fettsäuren. Die hierfür benötigten Reduktionsäquivalente in Form von NADPH/H+ können durch Abbau von Glucose im Hexosemonophosphatweg erzeugt werden. Der Anteil dieser de novo Lipogenese (DNL, 7 o.) aus Glucose an der Gesamtlipogenese des Fettgewebes variiert von Spezies zu Spezies beträchtlich und hängt außerdem vom Fettgehalt der Nahrung ab. Bei unter Laborbedingungen gehaltenen Nagern, die eine besonders fettarme Kost erhalten, spielt die Lipogenese aus Kohlenhydraten eine große Rolle. Die Bedeutung der Kohlenhydratmast für den Fettansatz ist seit langer Zeit für viele Nutztiere bekannt. Im Gegensatz dazu sind im menschlichen Fettgewebe die für die Fettsäuresynthese aus Kohlenhydraten benötigten Enzyme Pyruvatdehydrogenase, ATP-Citratlyase,

. Abbildung 16.2 stellt die wesentlichen metabolischen

Aktivitäten der Fettzelle zusammen. Eine ihrer wichtigsten Funktionen ist die Aufnahme von Fettsäuren aus den Triacylglycerinen, die extrazellulär als Chylomikronen bzw. VLDL (7 Kap. 18.5.2) zum Fettgewebe transportiert werden. Diese Triacylglycerine entstehen als Folge der Fettresorption im Intestinaltrakt oder einer gesteigerten Synthese durch die Leber im Plasma, gelangen zur Fettzelle und werden entweder bereits am Endothel der das Fettgewebe versorgenden Kapillaren oder an der Außenseite der Plasmamembran der Fettzellen selbst zu Glycerin und Fettsäuren hydrolysiert. Das hierfür verantwortliche Enzym ist die Lipoproteinlipase. Wegen ihrer äußerst geringen Glycerokinase-Aktivität kann das beim extrazellulären Triacylglycerin-Abbau entstehende Glycerin von der Fettzelle nicht verwertet werden. Dagegen werden die Fettsäuren sehr rasch durch verschiedene Transportsysteme (7 Kap. 12.1.3) aufgenommen, durch die Thiokinase in Acyl-CoA überführt und zur Triacylglycerin-Biosynthese verwendet. Das benötigte α-Glycerophosphat wird durch Reduktion

16

520

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

Acetyl-CoA-Carboxylase sowie Fettsäuresynthase nur in sehr geringen Aktivitäten nachweisbar. Da auch in der Leber des Menschen nur sehr geringe Aktivitäten dieser Lipogeneseenzyme nachweisbar sind, ist eine Triacylglycerin-Biosynthese aus Kohlenhydraten für den Menschen normalerweise ohne große Bedeutung. Da der Fettgehalt der menschlichen Nahrung, zumindest in den höher entwickelten Ländern, etwa 40% der zugeführten Kalorien beträgt, wird der Fettsäurebedarf des Menschen nahezu vollständig durch das Nahrungsfett gedeckt.

16.1.2

Leber und extrahepatische Gewebe bei Nahrungskarenz

Der Übergang von der Resorptionsphase zur Nahrungskarenz bedeutet eine dramatische Umstellung des Stoffwechsels. Der für die Deckung des Energiebedarfs benötigte Substratnachschub kann nun nicht mehr aus den resorbierten Nahrungsstoffen bezogen werden, sondern muss durch Abbau der körpereigenen Reserven gedeckt werden. Das dabei auftretende Problem ist die adäquate Deckung des Substratbedarfs der verschiedenen Gewebe, wobei es nicht nur auf die Substratmenge, sondern auch auf jeweils spezifische Substrate ankommt. Gewebe, die obligat auf die Zufuhr von Glucose angewiesen sind, sind das Nierenmark und die Erythrozyten. Auch das Nervengewebe benötigt normalerweise ausschließlich Glucose, kann allerdings nach länger anhaltendem Fasten auch Ketonkörper zur Deckung seines Energiebedarfs oxidieren (7 Kap. 31.1.1). Alle anderen Gewebe und Organe benötigen Glucose nicht als obligatorisches Substrat zur Deckung ihres Energiebedarfs, sondern können ebenso auf Fettsäuren oder Aminosäuren zurückgreifen. Zur Deckung des Energiebedarfs der obligaten Glucoseverbraucher müssen in 24 Stunden etwa 200 g Glucose bereitgestellt werden. Geht man davon aus, dass der Energiebedarf der restlichen Gewebe überwiegend mit Fettsäuren oder den aus ihnen stammenden Ketonkörpern (7 Kap. 12.2.2) gedeckt wird, so ergibt sich ein Verbrauch von etwa 150–160 g Fettsäuren.

16

! Das Fettgewebe ist die einzige Quelle der Plasmafettsäuren.

Im Fettgewebe werden erhebliche Mengen an Triacylglycerinen gespeichert. Diese stehen bei Nahrungskarenz dem Organismus zur Deckung des Energiebedarfs der nicht ausschließlich auf Glucose angewiesenen Gewebe zur Verfügung. Allerdings ist hierzu die vorherige Spaltung der Triacylglycerine in Fettsäuren und Glycerin notwendig. Die hierfür verantwortlichen Lipasen sind in 7 Kapitel 12.1.2 beschrieben. Vom Fettgewebe abgegebene Fettsäuren werden in Bindung an Serumalbumin zu den Geweben transportiert, dort aufgenommen und überwiegend in den

Mitochondrien oxidiert. Das ebenfalls abgegebene Glycerin wird von der Leber für die Gluconeogenese verwertet. ! Im braunen Fettgewebe werden Fettsäuren unter Thermogenese abgebaut.

Eine besondere Form des Fettgewebes ist das so genannte braune Fettgewebe. Der Grund für seine gelb-bräunliche Farbe besteht darin, dass es besonders viele Mitochondrien enthält, cytochromreich und außerdem sehr gut vaskularisiert ist. Braunes Fettgewebe zeichnet sich dadurch aus, dass es nach Stimulierung der Lipolyse mit den Katecholaminen Adrenalin bzw. Noradrenalin die entstehenden Fettsäuren selber oxidiert und die dabei freiwerdende Energie zur Wärmeproduktion (Thermogenese) heranzieht. Der zugrunde liegende Mechanismus ist die regulierbare Entkopplung der oxidativen Phosphorylierung durch ein als Thermogenin (Synonym: UCP, uncoupling protein) bezeichnetes Protein, welches in der inneren Mitochondrienmembran einen Protonenkanal bildet (7 Kap. 15.1.4). Adrenalin und Noradrenalin stimulieren nicht nur die Lipolyse im braunen Fettgewebe, sondern dienen auch als Induktoren für Thermogenin. Der Katecholamineffekt am braunen Fettgewebe wird über den adrenergen β3-Rezeptor, eine Isoform der β-Rezeptoren (7 Kap. 25.6, 26.3.4), vermittelt. Das braune Fettgewebe enthält eine bemerkenswert hohe Aktivität an Glycerokinase, sodass es, im Gegensatz zum weißen Fettgewebe, das während der Lipolyse freigesetzte Glycerin phosphoryliert, und entweder zur Reveresterung oder zur Oxidation benutzen kann. Braunes Fettgewebe findet sich bei allen Säugern einschließlich des Menschen während der Neugeborenenphase. Es dient hier der Aufrechterhaltung der Körpertemperatur, da andere Mechanismen, die im adulten Leben für eine Konstanz der Körpertemperatur sorgen (z.B. Wärmeisolierung durch subcutanes Fettgewebe, Muskelzittern), noch nicht funktionsfähig sind. Nagetiere, besonders Ratten, können auch im adulten Zustand lange Kältephasen besonders gut überstehen. Sie sind imstande, unter Einwirkung von Katecholaminen, weiße Fettzellen in braune Fettzellen umzuwandeln und somit ihr Fettgewebe zur Thermogenese zu benutzen. Ein ähnlicher Mechanismus konnte beim Menschen bisher nicht gefunden werden. Für Winterschläfer, z.B. Igel, ist das braune Fettgewebe von ganz besonderer Bedeutung. Da sie während des Winterschlafs in regelmäßigen Abständen unter Anhebung ihrer Körpertemperatur aufwachen müssen, werden erhebliche Anforderungen an ihre Thermogenese-Kapazität gestellt. ! Während der Nahrungskarenz oxidiert die Leber Fettsäuren und produziert Glucose und Ketonkörper.

Die Leber kann maximal 150 g Glycogen speichern. Im Zustand der Nahrungskarenz wird dieses Glycogen zunächst abgebaut und als Glucose freigesetzt, die den obli-

521 16.1 · Nahrungszufuhr und Nahrungskarenz

. Abb. 16.3. Die Bedeutung gesteigerter Lipolyse im Fettgewebe für die Substratversorgung verschiedener Gewebe. Rote Pfeile =

beschleunigt ablaufende Reaktionen; schwarze Pfeile = verlangsamt ablaufende Reaktionen. (Einzelheiten 7 Text)

gaten Glucoseverbrauchern, vor allem dem Nervensystem, zur Verfügung steht (7 Kap. 31.1.1). Angesichts eines täglichen Glucosebedarfs von etwa 200 g kann das Leberglycogen den Glucosebedarf für weniger als 24 Stunden decken. Da aber mehrere Wochen gehungert werden kann, ist es logisch, dass Glucose neu synthetisiert werden muss. Auch hierfür ist das Hauptorgan die Leber. Sie verfügt über die enzymatische Ausstattung der Gluconeogenese, wobei als Substrate aus der Muskulatur und anderen Organen Lactat und glucogene Aminosäuren sowie aus dem Fettgewebe Glycerin geliefert wird. Während der Nahrungskarenz deckt die Leber ihren eigenen Energiebedarf vorwiegend durch Oxidation von Fettsäuren, die unter diesen Umständen überwiegend aus dem Fettgewebe stammen. Sie ist jedoch imstande, mehr Fettsäuren zu oxidieren als ihrem Energiebedarf entspricht und wandelt im Überschuss aufgenommene Fettsäuren in Ketonkörper um (Acetacetat und β-Hydroxybutyrat) (7 Kap. 12.2.2). Diese werden von der Leber an das Blut abgegeben und tragen zur Erhöhung der metabolisierbaren Substratkonzentration im Blut bei.

. Abbildung 16.3 stellt die während der Nahrungskarenz

auftretenden metabolischen Beziehungen zwischen Fettgewebe, Leber und Skelettmuskulatur dar. Ähnlich wie für die Leber sind auch für die Skelettmuskulatur aus dem Fettgewebe stammende Fettsäuren die wichtigsten Substrate zur Deckung des Energiebedarfs während der Nahrungskarenz. Daneben spielen die von der Leber bereitgestellten Ketonkörper eine bedeutende Rolle. Unter den Bedingungen der Nahrungskarenz wird in der Skelettmuskulatur die Proteolyse stimuliert und die dabei frei werdenden Aminosäuren ebenso wie das bei der Glycolyse entstehende Lactat an das Blut abgegeben. Aminosäuren und Lactat gelangen zur Leber und dienen dort als Substrate für die Gluconeogenese (7 auch Corizyklus, 7 Kap. 16.2.3). Dies bedeutet, dass mit der Nahrungskarenz ein Schwund der Proteinvorräte des Organismus, vor allem derjenigen in der Muskulatur, einhergeht. Da Proteine wesentliche Strukturelemente des Organismus darstellen, ist dadurch die Fähigkeit des Organismus zur Proteolyse und Bereitstellung glucogener Aminosäuren limitiert. Deswegen hinterlassen sehr lange Hungerperioden bleibende Schäden.

! Während der Nahrungskarenz oxidiert die Muskulatur Fettsäuren und Ketonkörper und produziert Aminosäuren für die Gluconeogenese.

! Durch die gesteigerte Fettsäureoxidation werden Glucoseaufnahme und Glycolyse der Muskelzelle gehemmt.

16

522

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

. Abb. 16.4. Glucose-Fettsäurezyklus. PDH = Pyruvatdehydrogenase; PFK = Phosphofructokinase. (Einzelheiten 7 Text)

Die vermehrte Fettsäureoxidation im Muskel hemmt die Aufnahme und den Abbau der Glucose in der Glycolyse. Damit wird erreicht, dass die Blutglucose bevorzugt zur Deckung des Energiebedarfs der obligaten Glucoseverwerter, z.B. des Zentralnervensystems, zur Verfügung steht. Dieser glucosesparende Effekt einer gesteigerten Fettsäureoxidation wird als Glucose-Fettsäure-Zyklus bezeichnet (. Abb. 16.4). Die Oxidation von Fettsäuren führt zu einer Erhöhung der Konzentration von Acetyl-CoA und Citrat. Beide Metabolite wirken als allosterische Effektoren. Acetyl-CoA hemmt die Pyruvatdehydrogenase, Citrat die Phosphofructokinase-1. Durch Rückstau kommt es zu einer Erhöhung der Glucose-6-phosphat-Konzentration, wodurch die Hexokinase gehemmt wird.

16

16.1.3

Hormonelle Regulation des Stoffwechsels bei Nahrungszufuhr

! Gemischte Mahlzeiten lösen Änderungen der Metabolit- und Hormonkonzentrationen im Blutplasma aus.

Nach den üblichen gemischten Mahlzeiten ändert sich die Zusammensetzung des Blutplasmas, d.h.: 4 Anstieg der Konzentrationen von Glucose und in geringerem Umfang von Aminosäuren 4 Zunahme des Gehalts an Chylomikronen 4 Anstieg der Konzentration an Insulin

! Insulin ist der wichtigste Koordinator der Substratspeicherung in der Resorptionsphase.

Die oben besprochenen Vorgänge der Substratspeicherung müssen koordiniert erfolgen und setzen eine der Nahrungszufuhr adäquate Bereitstellung von Insulin voraus. Wie in 7 Kap. 26.1.3 ausführlich dargestellt, wird diese v.a. durch die mit der Kohlenhydratresorption einhergehende Erhöhung der Blutglucosekonzentration ausgelöst, die allerdings auch noch durch andere Nahrungsbestandteile wie Aminosäuren oder Fettsäuren beeinflusst wird. Der Anstieg der Insulinkonzentration hat spezifische Effekte auf den Stoffwechsel von Leber, Skelettmuskulatur und Fettgewebe, die in . Tabelle 16.1 zusammengestellt sind. Sie betreffen alle Bereiche des Stoffwechsels und machen verständlich, dass ein Mangel oder Fehlen von Insulin zu dem rasch lebensbedrohlichen Krankheitsbild des Typ I Diabetes mellitus (7 Kap. 26.4.1) führt. ! Mit Belastungstests kann die Fähigkeit zur Insulininduzierten Glucoseverwertung überprüft werden.

Die durch die resorptive Hyperglykämie ausgelöste Insulinsekretion bewirkt, dass beim Gesunden jede Steigerung der Blutglucosekonzentration, auch durch exzessive alimentäre Zufuhr, rasch durch die blutzuckersenkende Wirkung des Insulins abgefangen wird (. Abb. 26.4). Die Blutzuckerreaktion des Organismus auf eine Kohlenhydratbelastung ist dabei so zuverlässig, dass sie die Grundlage von Suchtests

523 16.1 · Nahrungszufuhr und Nahrungskarenz

. Tabelle 16.1. Spezifische Effekte von Insulin auf den Stoffwechsel von Leber, Fettgewebe und Muskulatur. + Stimulierung; – Hemmung; Ø kein Effekt Vorgang

Leber

Fettgewebe

Muskulatur

Glucoseaufnahme

+ (indirekt)

+

+

Glycogen-Biosynthese

+

Ø

+

Glycogenolyse

–

Ø

–

Glycolyse

+

+

+

Gluconeogenese

–

Ø

Ø

Aminosäureaufnahme

+

Ø

+

Proteinbiosynthese

+

Ø

+

Induktion der Lipoproteinlipase

Ø

+

+

Triacylglycerinsynthese

+

+

Ø

Lipolyse

Ø

–

Ø

VLDL-Synthese und Sekretion

+

Ø

Ø

nach Kohlenhydratstoffwechselstörungen in Form des Glucosetoleranz-Tests darstellt. . Abbildung 16.5 zeigt den Verlauf der Blutglucosekonzentration bei einem oralen Glucosetoleranz-Test (OGTT), bei dem der Proband 100 g Glucose als Trinklösung zu sich nimmt. Es kommt zunächst zu einem raschen Anstieg der Blutglucose innerhalb der ersten 30 Minuten, wonach die insulininduzierte Gegenreaktion einsetzt und sich bis spätestens zwei Stunden nach Beginn der Belastung eine weitgehende Normalisierung des Blutzuckers einstellt. Bei Patienten mit einer Insulinresistenz (7 Kap. 26.4.2) oder beim Diabetes mellitus (7 Kap. 26.4) ist neben einem steileren Anstieg des Blutzuckers in der ersten Phase der Belastung vor allem der Abfall stark verzögert. Man spricht in diesem Fall von gestörter Glucosetoleranz. Der OGTT erlaubt allerdings keine Aussage darüber, ob der Defekt auf einem Fehlen des Insulins oder auf einer Insulinresistenz beruht.

. Abb. 16.5. Oraler Glucosetoleranztest. Blaue Linie Verlauf der Blutglucosekonzentration bei Gesunden; rote Linie pathologischer Verlauf der Blutglucosekonzentration, z.B. bei Diabetes mellitus

. Abb. 16.6. Fettsüchtige ob/ob-Maus. Die rechts dargestellte Maus kann infolge einer Punktmutation im Leptingen kein Leptin produzieren. Sie leidet an einer dadurch ausgelösten Hyperphagie, die zur Fettsucht führt. Links: ein Wurfgeschwister ohne Defekt. (Freundlicherweise zur Verfügung gestellt von Prof. Dr. L. Herberg, Düsseldorf )

! Das Fettgewebe ist ein endokrines Organ.

Ungeachtet eines sehr variablen und vielfältigen Nahrungsangebotes und der nahezu unbegrenzten Fähigkeit zur Insulin-induzierten Triacylglycerinspeicherung im Fettgewebe wird bei normalgewichtigen Personen die Fettmasse des Organismus erstaunlich konstant gehalten. Mit der 1994 erfolgten Entdeckung des von Fettzellen sezernierten Peptidhormons Leptin ist man der Frage nach dem Mechanismus dieser Regulation ein gutes Stück näher gekommen. Ausgangspunkt für die Entdeckung des Leptins war die Identifizierung des Gens, das für die Entstehung der Fettsucht bei genetisch fettsüchtigen (engl. obese) ob/ob-Mäusen (. Abb. 16.6) verantwortlich ist. Sein Genprodukt ist ein vom Fettgewebe produziertes und sezerniertes Protein aus 167 Aminosäuren inklusive der für Sekretproteine typischen Signalsequenz. Durch eine zu einem Stopcodon führende Mutation wird dieses Protein bei der ob/ob-Maus nicht mehr produziert. Behandlung derartiger Mäuse mit rekombinantem Leptin führt innerhalb kurzer Zeit zu einer deutlichen Gewichtsabnahme, die auf einer Einschränkung der Nahrungsaufnahme und einer Erhöhung des Energieverbrauchs beruht. Damit ergibt sich das in . Abb. 16.7 dargestellte Schema der Gewichtsregulation durch Leptin: 4 Leptin wird vom Fettgewebe besonders während aktiver Lipogenese und Zunahme der Fettmasse an das Blut abgegeben. Es bindet an einen im Hypothalamus lokalisierten Leptinrezeptor, der zur Familie der Rezeptoren mit assoziierten Proteinkinasen (7 Kap. 25.8.3) gehört. Dies führt zu einer verminderten Produktion von Neurohormonen, welche die Nahrungsaufnahme stimulieren. Zu diesen gehört u.a. das Neuropeptid Y 4 Über Leptinrezeptoren in anderen Geweben, vor allem dem Fettgewebe, wird in diesem der Energieverbrauch

16

524

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

. Tabelle 16.2. Vom Fettgewebe produzierte und sezernierte Mediatoren und Hormone (Auswahl) Mediator/Hormon

. Abb. 16.7. Regulation der Nahrungsaufnahme durch Leptin. (Einzelheiten 7 Text)

gesteigert (erhöhte Energiedissipation). Die hierbei zugrunde liegenden Mechanismen sind noch nicht endgültig geklärt 4 Die verminderte Nahrungsaufnahme zusammen mit dem gesteigerten Energieverbrauch löst eine Abnahme der Lipogenese und eine Verringerung der Fettmasse aus. Dies führt zu einem Rückgang der Leptinsekretion durch das Fettgewebe

16

Da unter den in Europa und Nordamerika herrschenden Ernährungsbedingungen die Fettsucht außerordentlich häufig ist, ergibt sich die Frage, ob hieran ein Defekt in dem oben geschilderten Regulationssystem beteiligt ist. Nach den bis jetzt vorliegenden Untersuchungen korrelieren die Leptinspiegel im Plasma, auch bei übergewichtigen Patienten, deutlich mit der Körperfettmasse. Ein Defekt der Leptingenexpression scheint also bei menschlichen Fettsuchtsformen nicht vorzuliegen. Es wird aber vermutet, dass eine Resistenz des Leptinrezeptors eine mögliche Ursache für die menschliche Fettsucht ist. Die Entdeckung des Hormons Leptin hat gezeigt, dass das Fettgewebe nicht nur durch Triacylglycerinbiosynthese bei Nahrungszufuhr und Lipolyse bei Nahrungskarenz in den Energiestoffwechsel des Organismus eingeschaltet ist. Es nimmt darüber hinaus aktiv an der Regulation der Körper- und Fettmasse teil. Eine Suche nach weiteren endokrinen Faktoren, die vom Fettgewebe produziert werden, hat zu der überraschenden Erkenntnis geführt, dass das Fettgewebe eine Art endokrines Organ ist. Eine Auswahl der vom Fettgewebe synthetisierten und sezernierten Faktoren ist in . Tabelle 16.2 zusammengestellt. Fettgewebe produziert einmal eine Reihe von parakrin wirkenden Faktoren. Zu diesen gehört der insulinähnliche Wachstumsfaktor IGF-1 (insulin like growth factor-1), welcher als parakriner Faktor bei der Bereitstellung neuer Fettzellen aus den entsprechenden Vorläuferzellen, den Präadipozyten, wirkt. Auch das vom Fettgewebe sezernierte TNFα (tumor necrosis factor α) wirkt primär lokal, aller-

Wirkungsweise

Produziert von

IGF-1

parakrin

Adipocyten

TNFα

parakrin

Adipocyten

Estrogene

systemisch

Stromazellen

Leptin

systemisch

Adipocyten

Adiponectin

systemisch

Adipocyten

Angiotensinogen

systemisch

Adipocyten, Stromazellen

dings als Antagonist zum IGF-1. Es führt zu einer Hemmung der Lipogenese und einer Steigerung der Lipolyse. Darüber hinaus hemmt es die Differenzierung von Präadipozyten und kann eine Apoptose bereits existierender Adipozyten auslösen. Außer parakrinen Faktoren sezerniert das Fettgewebe weitere Hormone oder deren Präkursoren. Es ist beim Mann während des ganzen Lebens und bei der Frau nach der Menopause die einzige Produktionsstätte für Estrogene. Da Estrogenrezeptoren auf den Fettzellen selbst nicht nachweisbar sind, muss man annehmen, dass Fettgewebe zur Estrogenversorgung des Organismus beiträgt. Das vom Fettgewebe freigesetzte Peptidhormon Adiponectin wirkt ebenfalls systemisch. Es hemmt v.a. durch Repression der PEP-CK die Gluconeogenese und damit die Glucosefreisetzung in der Leber und stimuliert die Oxidation von Fettsäuren in der Skelettmuskulatur. Auf diese Weise kann es die Folgen einer mit einem metabolischen Syndrom einhergehenden Insulinresistenz beheben (7 Kap. 26.4.2). Ob die Angiotensinogen-Produktion und -sekretion des Fettgewebes etwas mit der beim metabolischen Syndrom häufig anzutreffenden Hypertonie zu tun hat, ist noch unklar. ! Die Steigerung der Proteinbiosynthese als Antwort auf den Proteingehalt der Nahrung wird durch die Proteinkinase mTOR koordiniert.

. Abb. 16.8. Struktur des Rapamycin

525 16.1 · Nahrungszufuhr und Nahrungskarenz

Infobox Auf der Suche nach neuen Antibiotika wurden Anfang der 70er Jahre des vergangenen Jahrhunderts in einer von der Osterinsel stammenden Bodenprobe der Bakterienstamm Streptomyces hygroscopicus isoliert. Dieser produzierte einen Metaboliten, der sich als sehr wirkungsvoll gegen Pilzinfektionen erwies. Die Osterinsel heißt in der Eingeborenensprache Rapanui, der neue Metabolit, ein makrozyklisches Lacton (. Abb. 16.8), wurde infolgedessen als Rapamycin bezeichnet. In den folgenden Jahren stellte sich heraus, dass Rapamycin ein potentes Immunsuppressivum ist und außerdem Wachstum und Proliferation vieler Zellen hemmt. Es ist unter dem Handelsnamen Sirolimus£ erhältlich. Der wachstumshemmende Effekt von Rapamycin wird auch in der Kardiologie ausgenutzt. Beschichtet man nämlich die zum Offenhalten verengter Koronargefäße verwendeten Stents (kleine Gitterröhrchen) mit Rapamycin, so ist die Häufigkeit einer durch übersteigertes Zellwachstum ausgelösten Restenosierung wesentlich geringer. Die biochemische Untersuchung der Rapamycinwirkung hat zu der Entdeckung geführt, dass seine einzige molekulare Wirkung die Bindung an eine Proteinkinase ist, die dadurch inaktiviert wird. Dementsprechend wird diese Proteinkinase auch als TOR (target of rapamycin) bezeichnet.

. Abb. 16.9. Regulation und Wirkungsweise der Proteinkinase mTOR. PI3 K = Phosphatidylinositid-3-Kinase; PDK1 = phospholipid-

TOR ist eine Proteinkinase, die sich bei allen Eukaryoten von der Hefe bis zu den komplexen Zellen von Säugetieren nachweisen lässt. Sie ist immer für die Koordinierung des Stoffwechsels bei Nahrungsangebot, speziell bei Angebot von Aminosäuren, verantwortlich. Bei einzelligen Organismen löst TOR hauptsächlich eine Steigerung der Proteinbiosynthese sowie daran anschließend der Proliferation aus. Auch bei den Zellen höherer Organismen steht dieser Effekt der Proteinkinase TOR im Vordergrund, allerdings ist ihr Wirkungsspektrum ebenso wie die Regulation ihrer Aktivität wesentlich komplexer (. Abb. 16.9): Bei Säugetieren ist die Proteinkinase mTOR (mammalian TOR) nur im Komplex mit assoziierten Proteinen aktiv. Substrate von mTOR sind Proteine, deren Phosphorylierung eine Steigerung der zellulären Translationsaktivität, Ribosomenbiogenese, aber auch der Zelldifferenzierung und gegebenenfalls der Proliferation auslöst. Diese Erkenntnisse beruhen überwiegend auf der Hemmwirkung von Rapamycin, da die entsprechenden molekularen Mechanismen nur im Einzelfall aufgeklärt sind. Angesichts des vielfältigen Wirkungsspektrums von mTOR ist es nicht verwunderlich, dass die Aktivität dieser Proteinkinase genau reguliert wird (. Abb. 16.9). Für die mTOR-Aktivität ist das kleine G-Protein Rheb essentiell. Dieses unterliegt einer komplexen Regulation durch Wachstumsfaktoren oder Insulin auf der einen und Nahrungsbestandteile, besonders Aminosäuren, auf der anderen

dependent kinase-1; PKB = Proteinkinase B; AMPK = AMP-abhängige Proteinkinase. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

16

526

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

Seite. Im Zentrum dieser Regulation steht das heterodimere Tumorsuppressorprotein TSC1/TSC2: 4 TSC1/TSC2 wirkt als GTPase-aktivierendes Protein auf Rheb/GTP und inaktiviert es damit 4 Phosphorylierung von TSC1/TSC2 durch die Proteinkinase B (PKB) führt zu dessen Inaktivierung 4 PKB wird über beschriebene Reaktionskaskaden (7 Kap. 25.7.1 und 26.1.7) unter Zwischenschaltung der Kinasen PI3-Kinase und PDK-1 durch Insulin, IGF-1 bzw. solche Wachstumsfaktoren aktiviert, die über Rezeptoren mit Tyrosinkinaseaktivität verfügen Besonders die aus den Nahrungsproteinen gewonnenen Aminosäuren führen ebenfalls zu einer Aktivierung der Proteinkinase mTOR. Dabei stehen zwei Effekte im Vordergrund, allerdings sind die molekularen Mechanismen noch nicht bekannt. Aminosäuren hemmen einerseits TSC1/ TSC2, aber zusätzlich gibt es auch Hinweise dafür, dass sie das G-Protein Rheb direkt stimulieren. Energiemangel, der zu einer Aktivierung der AMP-abhängigen Proteinkinase (s.u.) führt, löst ebenso wie Hypoxie eine Aktivierung des TSC1/TSC2-Proteins und damit eine Hemmung von Rheb aus, die zur Inaktivierung von mTOR führt. Die TSC17TSC2Proteine haben damit eine wichtige Funktion bei der Regulation von mTOR. Die Phosphorylierung von TSC17TSC2Proteinen durch die PKB führt zu ihrer Inaktivierung, die alternative, an einer anderen Stelle erfolgende Phosphorylierung durch AMPK zu ihrer Aktivierung. Damit steht die Proteinkinase mTOR im Zentrum eines komplexen Regulationssystems, das in allen Zellen nachweisbar ist. Es ist für die Steigerung von Translation und Zellwachstum sowie auch für die Zellproliferation bei Überschuss an Nahrungsstoffen und entsprechender Stimulation durch Wachstumsfaktoren und Insulin verantwortlich.

16.1.4

Die hormonelle Regulation der Substratmobilisierung bei Nahrungskarenz

! Das Fehlen von Nahrungsstoffen führt in allen Zellen zu einer Aktivierung der AMP-abhängigen Proteinkinase.

16

In Abwesenheit von oxidierbaren Nahrungsstoffen ergibt sich für alle Zellen das Problem, dass sie ihre biologischen Aktivitäten aufrechterhalten müssen, obwohl ihnen als oxidierbare Substrate nur die im Einzelfall geringen Mengen an Energiespeichern wie Glycogen oder Triacylglycerine zur Verfügung stehen. Ein Mangel an Nahrungsstoffen wird deshalb eine Verlangsamung der ATP-liefernden Vorgänge durch die oxidative Phosphorylierung zur Folge haben. Da die energieverbrauchenden Prozesse aber weiterlaufen, kommt es zu einer Erniedrigung der ATP- und Erhöhung der ADP-Konzentration. Durch die in allen Zellen vorkom-

. Abb. 16.10. Funktion der Adenylatkinase bei gesteigertem Energieverbrauch. (Einzelheiten 7 Text)

mende Adenylatkinase kann der ATP-Mangel durch die Bildung von ATP aus 2 ADP unter Bildung von AMP gebessert werden. Wegen des damit verbundenen Anstiegs der AMP-Konzentration nimmt der Quotient ATP/AMP deutlicher ab als das Verhältnis ATP/ADP (. Abb. 16.10). Ein in allen eukaryoten Zellen von der Hefe bis zu Säugetierzellen vorhandener Regulationsmechanismus gewährleistet unter den Bedingungen des zellulären Energiemangels eine Reduktion der Biosynthesevorgänge gleichzeitig mit einer Stimulierung kataboler Stoffwechselreaktionen, die für eine Auffüllung des zellulären ATP-Bestands sorgen können. Er beruht auf der Verwendung von AMP als Signal für zellulären Energiemangel. Die Einzelheiten dieses Mechanismus sind in . Abb. 16.11 dargestellt und beruhen auf der Aktivierung einer spezifischen Proteinkinase durch AMP, der AMP-abhängigen Proteinkinase (AMPK) sowie der Phosphorylierung eines ganzen Satzes von Proteinen durch dieses Enzym. Aktivierung der AMP-abhängigen Proteinkinase. AMPK kommt in einer inaktiven dephosphorylierten und einer aktiven phosphorylierten Form vor. Die Bindung von AMP an die nicht phosphorylierte inaktive AMPK macht diese zu einem Substrat der konstitutiv aktiven Proteinkinase LKB1 und löst auf diese Weise die Bildung der aktiven, phosphorylierten AMPK aus. Hohe ATP-Konzentrationen hemmen dagegen die AMPK-Phosphorylierung. Für die Inaktivierung der phosphorylierten AMPK ist eine Phosphoproteinphosphatase verantwortlich, über deren Regulation noch nichts bekannt ist. Effekte der aktiven AMP-abhängigen Proteinkinase. Die aktive AMPK phosphoryliert eine Reihe von Enzymen und Transkriptionsfaktoren und ändert auf diese Weise in einer »konzertierten Aktion« deren Aktivität in dem Sinne, dass energieverbrauchende Synthesevorgänge wie Glycogenbiosynthese, Fettsäurebiosynthese, Cholesterinbiosynthese und Proteinbiosynthese abgeschaltet und dafür energieliefernde Vorgänge wie Glycolyse und ß-Oxidation der Fettsäuren angeschaltet werden.

527 16.1 · Nahrungszufuhr und Nahrungskarenz

. Tabelle 16.3. Metabolische Konsequenzen einer Aktivierung der AMP-abhängigen Proteinkinase AMPK (Auswahl). ChREBP carbohydrate response element binding protein Enzym/Protein

Effekt

Organ

Biologische Bedeutung

HMG-CoA-Reduktase

Enzymaktivität p

Leber

Cholesterinbiosynthese p

Acetyl-CoA-Carboxylase

Enzymaktivität p

Leber, Muskulatur

Fettsäurebiosynthese p Fettsäureoxidation n

Glycogensynthase

Enzymaktivität p

Muskulatur

Glycogenbiosynthese p

Fructose-6-Phosphat-2-Kinase

Enzymaktivität n

Muskulatur

Glycolyse n

TSC1/TSC2

Aktivität n

Verschiedene Zelllinien

mTOR-Aktivität p; Proteinbiosynthese p

ChREBP

DNA-Bindung p

Leber

Expression von Glycolyse-Enzymen p

PEP-CK

Genexpression p

Leber

Gluconeogenese p

GLUT 4

Translokation in Plasmamembran n Muskulatur

Glucoseaufnahme n

Hexokinase

Enzymaktivität n

Glycolyse n

Direkte Phosphorylierung:

Indirekte Wirkungen

. Abb. 16.11. Regulation und Wirkungsweise der AMP-abhängigen Proteinkinase. AMPK = AMP-abhängige Proteinkinase; LKB1 = Proteinkinase LKB1. (Einzelheiten 7 Text)

Wie den in . Tabelle 16.3 zusammengestellten Daten zu entnehmen ist, kommen die Effekte der aktivierten AMPK zum Teil durch direkte Phosphorylierung von Schlüsselenzymen der betreffenden Stoffwechselwege zustande. Die Glycogensynthase und HMG-CoA-Reduktase werden durch Phosphorylierung gehemmt, sodass Glycogen- und Cholesterinbiosynthese nur noch mit verminderter Geschwindigkeit ablaufen. Die durch Phosphorylierung der Acetyl-CoA-Carboxylase ausgelöste Verminderung der Enzymaktivität führt wegen des dadurch ausgelösten Abfalls der Konzentration von Malonyl-CoA zu einem Rückgang der Fettsäurebiosynthese. Da Malonyl-CoA gleichzeitig ein starker Inhibitor der Carnitin-Palmityl-CoA-Transferase ist, führt jede Verminderung seiner Konzentration zu einem ge-

Muskulatur

steigerten Einstrom von Acyl-Carnitin in die mitochondriale Matrix und damit zu gesteigerter β-Oxidation der Fettsäuren (7 Kap. 12.3.2). Die Phosphorylierung der Fructose-6-phosphat-2-Kinase in der Muskulatur löst eine gesteigerte Bildung von Fructose-2,6-bisphosphat und damit eine Stimulierung der Glycolyse aus (7 Kap. 11.6.2). Von besonderem Interesse ist die Phosphorylierung des TumorsuppressorProteins TSC1/TSC2. Sie aktiviert dieses Protein und führt damit zu einer Hemmung der Proteinkinase mTOR (7 Kap. 16.1.3). Die Folge ist ein Rückgang der Proteinbiosynthese. Der Mechanismus einer Reihe weiterer Effekte der aktivierten AMPK ist eher indirekt. Er betrifft die Änderung der Genexpression verschiedener Enzyme, in der Regel durch Phosphorylierung entsprechender Transkriptionsfaktoren oder die Änderung der zellulären Lokalisation von Transportproteinen. Die AMP-abhängige Proteinkinase AMPK steht damit im Zentrum eines Netzwerks von Stoffwechselreaktionen, die Zellen das Überleben bei Energiemangel erlaubt. Außer durch Mangel an Nahrungsstoffen wird das Enzym auch durch Hypoxie und eine Reihe von Stresssituationen aktiviert. Von besonderem Interesse ist die Aktivierung der AMPK durch das vom Fettgewebe sezernierte Protein Adiponectin, das in 7 Kapitel 26.4.2 besprochen ist. ! Die Stoffwechsellage bei Nahrungskarenz ist durch das Überwiegen insulinantagonistischer Hormone gekennzeichnet.

Die oben geschilderte Aktivierung der AMPK sichert das Überleben von Zellen, wenn ein absoluter Mangel an Nahrungsstoffen besteht. Dies ist jedoch bei der Nahrungskarenz höherer Organismen zunächst nicht der Fall. Diese verfügen über einen beträchtlichen Vorrat an gespeicherten Energieträgern und sind außerdem imstande, für manche Organe essentielle Nahrungsstoffe (z.B. Glucose für das Zentralnervensystem) zu synthetisieren. Die Stoffwechsellage bei Nahrungskarenz muss deshalb folgende Gegebenheiten berücksichtigen:

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528

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

4 Für die obligaten Glucoseverbraucher muss Glucose bereitgestellt werden und 4 für alle anderen Gewebe Fettsäuren und Ketonkörper

. Tabelle 16.4. Wirkung insulinantagonistischer Hormone auf Leber, Fettgewebe und Muskulatur. + Stimulierung; – Hemmung; Ø kein direkter Effekt Vorgang

Damit ist klar, dass bei Nahrungskarenz eine koordinierte Umstellung der Stoffwechselaktivitäten von Fettgewebe, Leber und Skelettmuskulatur erfolgen muss. Hierfür ist eine Änderung der Sekretion der an der schnellen Stoffwechselregulation beteiligten Hormone notwendig, sodass sich: 4 niedrige Konzentrationen von Insulin sowie 4 leicht bis mäßig erhöhte Konzentrationen von Adrenalin, Noradrenalin sowie Glucagon einstellen Insgesamt ergibt sich damit ein Überwiegen der insulinantagonistischen Hormone in Fettgewebe, Leber und Skelettmuskulatur (. Abb. 16.12, . Tabelle 16.4). Fettgewebe. Das Überwiegen insulinantagonistischer Hormone, vor allem der Katecholamine, führt über eine Aktivierung von β2-Rezeptoren (7 Kap. 26.3.4) zu erhöhten cAMP-Spiegeln und einer vermehrten Aktivität der hormonsensitiven Lipase. Die niedrigen Insulinspiegel im Plasma lösen eine Hemmung der cAMP-spezifischen Phosphodiesterase aus, was zusätzlich zu der Stimulierung der Adenylatcyclase und zu hohen cAMP-Spiegeln führt. Insgesamt ergibt sich damit für das Fettgewebe eine Situation, die durch das Überwiegen lipolytischer Prozesse gekennzeichnet ist. Beim Menschen zeigt das Fettgewebe eine deutlich unterschiedliche Verteilung zwischen den Geschlechtern. Diesem morphologischen Unterschied entspricht auch ein funktioneller. So zeigen Fettzellen aus den gynoiden Prädilektionsstellen an den Oberschenkeln und am Gesäß außer den β2-Rezeptoren für Katecholamine auch α2-Rezeptoren. Diese führen über die Stimulierung eines inhibitorischen G-Proteins (7 Kap. 25.6.1) zur Hemmung der Adenylatcyclase. Dadurch wird das spezifisch weibliche,

16

. Abb. 16.12. Konzertierte Wirkung insulinantagonistischer Hormone auf den Stoffwechsel von Fettgewebe, Leber und Muskulatur. Entscheidend ist das jeweilige Verhältnis der Insulinantagonisten zu Insulin. Nimmt dieses zu, so kommt es im Fettgewebe zur Lipolyse, in der Leber zu β-Oxidation der Fettsäuren und Ketonkörperproduktion sowie in der Muskulatur zu einer Hemmung der Glucoseaufnahme und Steigerung der β-Oxidation der Fettsäuren. Bei länger dauernder Nahrungskarenz kann das Zentralnervensystem auch Ketonkörper oxidieren

Leber

Fettgewebe

Muskulatur

Glycogen-Biosynthese

–

Ø

–

Glycogenolyse

+

Ø

+

Glycolyse

–

Ø

+

Gluconeogenese

+

Ø

Ø

Triacylglycerinsynthese

–

–

Ø

Lipolyse

Ø

+

Ø

Proteinbiosynthese

Ø

Ø

–

Proteolyse

Ø

Ø

+

gynoide Fettgewebe relativ unempfindlich gegenüber der lipolytischen Wirkung von Katecholaminen. Die Zahl der α2-Rezeptoren vermindert sich jedoch während der Schwangerschaft und der Lactationsphase und man nimmt an, dass die dann vermehrt freigesetzten Fettsäuren für die Biosynthese der Milchfette bereitgestellt werden. Einen wesentlichen Einfluss auf die lipolytische Aktivität des Fettgewebes übt das sympathische Nervensystem aus, dessen Nervenendigungen im Fettgewebe jeder Fettzelle verbunden sind. Bei seiner Erregung wird durch Noradrenalin die Lipolyse im Fettgewebe stimuliert. Denervierung, Ganglienblockade oder pharmakologische Entleerung der Noradrenalinspeicher bringen die Sympathikuswirkung zum Verschwinden. Die Bedeutung der hormonellen Regulation der Lipolyse des Fettgewebes wird bei der Untersuchung der tief greifenden Stoffwechseländerung beim Diabetes mellitus des Menschen sowie beim experimentellen Diabetes des Tiers deutlich. Bei Insulinmangel kommt es zu einem be-

529 16.1 · Nahrungszufuhr und Nahrungskarenz

. Abb. 16.13. Regulation von Proteinbiosynthese und Proteolyse in der Muskulatur. PI3K = Phosphatidylinositid-3-Kinase; PDK1 = phospholipid-dependent kinase-1; PKB = Proteinkinase B. (Einzelheiten 7 Text)

sonders raschen Abbau der Fettspeicher. Der Blutspiegel an nicht veresterten Fettsäuren steigt auf ein Mehrfaches an, mit ihm eng verbunden ist eine Beschleunigung der Ketonkörperbildung in der Leber. Die hiermit verbundene Azidose ist für einen großen Teil der daraus resultierenden und letztendlich zum Tod führenden Stoffwechseländerungen verantwortlich (7 Kap. 26.4.1). Sowohl beim Tier als auch beim Menschen gehen diese Veränderungen nach Insulingabe rasch auf die Norm zurück, womit diesem Hormon als Gegenspieler der Katecholamine ein ganz entscheidender Einfluss auf den Fettgewebsstoffwechsel zukommt. Leber. Auch in der Leber überwiegen die insulinantago-

nistischen Hormone, wobei hier das aus den α-Zellen der Langerhans’schen Inseln des Pankreas freigesetzte Glucagon (7 Kap. 26.2.3) eine besondere Rolle spielt. Durch Aktivierung der Adenylatcyclase sowie Hemmung der Phosphodiesterase kommt es in der Leber 4 zu einer gesteigerten Glycogenolyse zusammen mit einer Hemmung der Glycogensynthese 4 zu einer gesteigerten Gluconeogenese sowie 4 zu einer Steigerung der β-Oxidation der Fettsäuren und der Ketonkörpersynthese mit Freisetzung von Acetacetat und β-Hydroxybutyrat Bei Nahrungskarenz setzt die Leber damit Glucose und Ketonkörper in die Zirkulation frei. Skelettmuskulatur. Ketonkörper und Fettsäuren sind das

bevorzugte Substrat der Skelettmuskulatur bei Nahrungs-

karenz. Der besondere von der Skelettmuskulatur für die Bewältigung der Nahrungskarenz geleistete Beitrag besteht jedoch in der Steigerung der muskulären Proteolyse. Dies führt zu einer Abgabe von Aminosäuren an das Blutplasma, zu deren Transport zur Leber und zu ihrer Einschleusung in die Gluconeogenese. Das Phänomen der gesteigerten Proteolyse in der Skelettmuskulatur tritt nicht nur bei Nahrungskarenz, sondern auch bei einer Reihe von pathologischen Zuständen wie Inaktivitätsatrophie, Cachexie oder Sepsis auf und führt zur Muskelatrophie. Obwohl schon lange bekannt, herrscht über den molekularen Mechanismus der gesteigerten Proteolyse noch keine Klarheit. Fest stehen folgende Tatsachen: 4 Eine Voraussetzung der gesteigerten Proteolyse ist die Ubiquitinylierung (7 Kap. 9.3.5) der abzubauenden Proteine 4 Die Proteolyse erfolgt in den Proteasomen (7 Kap. 9.3.5) 4 Bei Nahrungskarenz wird vor allem die UbiquitinLigase Atrogin-1 induziert und man nimmt an, dass dies ein entscheidender Faktor für die Proteolyse ist Die Regulation des Atrogin-1 Gens ist komplex und Teil eines regulatorischen Netzwerks, welches in der Skelettmuskulatur das Gleichgewicht zwischen Proteinbiosynthese und Proteolyse steuert. Überwiegt die Erstere, so kommt es zur Hypertrophie der Muskulatur, überwiegt die Letztere zur Atrophie. Glucocorticoide und Wachstumsfaktoren, v.a. IGF-1 und Insulin, spielen dabei eine wichtige Rolle als Antagonisten (. Abb. 16.13). Im Zentrum steht

16

530

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

die durch Insulin, IGF-1 und andere Wachstumsfaktoren stimulierte Proteinkinase B (PKB). Sie 4 aktiviert über die schon oben beschriebenen Wege (7 Kap. 16.1.3) die Proteinkinase mTOR und löst damit eine gesteigerte Proteinbiosynthese aus, und 4 phosphoryliert den im Cytosol lokalisierten Transkriptionsfaktor FoxO und verhindert damit dessen Translokation in den Zellkern. FoxO gelangt nur unphosphoryliert in den Zellkern, wo er als starker Aktivator der Transkription des Atrogin-1 Gens wirkt

Bei Nahrungskarenz und anderen zur Atrophie führenden Zuständen sind die Spiegel an Insulin und IGF-1 deutlich erniedrigt. Wegen der dann fehlenden PKB wird mTOR inaktiviert und gleichzeitig FoxO nicht mehr phosphoryliert. Die Folgen sind eine Hemmung der Proteinbiosynthese und Aktivierung der Proteolyse. Die Expression des Atrogin-1-Gens wird außer durch FoxO durch Glucocorticoide stimuliert. Dieser Effekt ist allerdings indirekt, da im Atrogin-1-Gen kein glucocorticoid response element nachweisbar ist.

In Kürze Nahrungszufuhr bzw. Nahrungskarenz sind durch sehr unterschiedliche Anforderungen an das Stoffwechselverhalten des Organismus gekennzeichnet. Besondere Anforderungen werden an Leber, Skelettmuskulatur und Fettgewebe gestellt, da sie von ihrer Masse her die bedeutendsten Substratverbraucher sind. Allerdings können sie auch in größerem Umfang Substrate speichern. Die Leber verwendet während der Resorption von Nahrungsstoffen: 4 Glucose der Nahrungskohlenhydrate zur Glycogenbiosynthese und zu einem relativ kleinen Teil zum Abbau in der Glycolyse 4 Fettsäuren aus den Nahrungslipiden überwiegend zur Triacylglycerin-Biosynthese und der Abgabe an die Zirkulation in Form von VLDL und 4 Aminosäuren aus den Nahrungsproteinen überwiegend für die Biosynthese von der Leber genutzter bzw. von ihr in die Zirkulation abgegebener Proteine. Der darüber hinausgehende Anteil wird ebenfalls für die Glycogensynthese verwendet, soweit es sich um glucogene Aminosäuren handelt.

16

In der Skelettmuskulatur werden Kohlenhydrate zur Glycogensynthese und Lipide zur Triacylglycerinsynthese verwendet. Das Fettgewebe ist das quantitativ wichtigste Organ der Energiespeicherung. Die Nahrungslipide werden nach Transport in Form triacylglycerinreicher Lipoproteine durch die Lipoproteinlipase in Fettsäuren und Glycerin gespalten. Fettsäuren werden aufgenommen und zu Triacylglycerinen verestert und auf diese Weise gespeichert. Da das Fettgewebe eine außerordentlich große Kapazität zur Expansion hat, sind die Möglichkeiten zur Triacylglycerinspeicherung sehr groß. Für die genannten Stoffwechselumstellungen ist das Hormon Insulin von besonderer Bedeutung, da es Glucoseaufnahme und Glycogensynthese in Leber und Muskulatur sowie die Bereitstellung von Fettsäuren aus Chylomikronen und deren Einbau in Acylglycerine im Fettgewebe stimuliert. Für die Steigerung von Pro-

teinbiosynthese und Zellwachstum sind neben Aminosäuren Insulin und Wachstumsfaktoren mit ähnlichem Wirkungsspektrum verantwortlich. Bei Nahrungskarenz muss für die obligaten Glucoseverbraucher Zentralnervensystem, Nierenmark und Erythrozyten Glucose bereitgestellt werden und die Nichtglucoseverbraucher müssen mit Fettsäuren bzw. von diesen abgeleiteten Ketonkörpern versorgt werden. Für die Bereitstellung ausreichender Glucosemengen stehen zwei Mechanismen zur Verfügung: 4 Die Glycogenolyse, wobei im Wesentlichen die Glycogenvorräte der Leber eine Rolle spielen, sowie 4 die Gluconeogenese, vornehmlich in der Leber. Substrate hierfür sind Lactat aus den verschiedensten Geweben, Glycerin aus dem Fettgewebe sowie glucogene Aminosäuren vor allem aus der Muskulatur Die Bereitstellung der benötigten Substrate für die NichtGlucoseverbraucher erfolgt durch: 4 Lipolyse im Fettgewebe mit Freisetzung von Fettsäuren und Glycerin sowie 4 Umwandlung von Fettsäuren in Ketonkörper in der Leber Die für die Gluconeogenese benötigten glucogenen Aminosäuren stammen überwiegend aus der Muskulatur, wo das Gleichgewicht von Proteinbiosynthese und Proteolyse zugunsten der Letzteren verschoben ist. Die verstärkte Aminosäurefreisetzung beruht auf einer Stimulierung der Proteolyse im Proteasom. Bei der Koordinierung der genannten Stoffwechselvorgänge spielen neben einer Aktivierung der AMP-abhängigen Proteinkinase ein Anstieg der Konzentrationen von Katecholaminen und Glucagon sowie ein Abfall der Insulinkonzentration eine wichtige Rolle. Hierdurch kommt es zu einer Steigerung der 4 Lipolyse im Fettgewebe, 4 Glycogenolyse und Gluconeogenese in der Leber, 4 Fettsäureoxidation in vielen Geweben, sowie 4 Biosynthese der Ketonkörper und Abgabe durch die Leber

531 16.2 · Muskelarbeit

16.2

Muskelarbeit

16.2.1

Stoffwechsel der Muskelzelle in Ruhe

! In der Skelettmuskulatur werden bevorzugt Glucose und Fettsäuren als Substrate oxidiert.

Glucose und nichtveresterte Fettsäuren sind die wichtigsten Substrate für den Stoffwechsel des Muskels. In Gegenwart von Sauerstoff werden beide zu CO2 und Wasser oxidiert. Bei Sauerstoffmangel kann das in der Glycolyse gebildete Pyruvat in Lactat überführt werden, sodass eine beschränkte ATP-Bildung auch unter anaeroben Bedingungen möglich ist (7 Kap. 11.1.1). Die Oxidation von Aminosäuren zur Deckung des Energiebedarfs spielt nur eine untergeordnete Rolle, da auch bei länger dauernder Arbeit die Harnstoffausscheidung des Organismus nicht zunimmt. Nur verzweigtkettige Aminosäuren wie Leucin werden vor allem in den Typ-I-Fasern der Skelettmuskulatur oxidiert, die die von diesen Aminosäuren abstammenden Aminogruppen als Alanin oder Glutamin abgeben.

16.2.2

Herkunft des für den Kontraktions-Relaxations-Vorgang benötigten ATP

! Der begrenzte ATP-Vorrat des Muskels wird durch das energiereiche Kreatinphosphat ergänzt.

Sowohl bei der Kontraktion als auch bei der Relaxation der Muskelzelle wird ATP hydrolysiert (7 Kap. 30.3). Da der ATP-Vorrat des Muskels jedoch begrenzt ist, muss für jede längere Muskeltätigkeit durch oxidative Phosphorylierung ATP aus ADP und Phosphat regeneriert werden. Die hierfür benötigten Reduktionsäquivalente entstehen durch den oxidativen Abbau von Glucose, Fettsäuren und in geringem Umfang von Aminosäuren. Diese Substrate werden entweder durch Mobilisierung muskeleigener Speicher (Glycogen, Triacylglycerine) gewonnen oder von der Muskelzelle aus dem Blutplasma aufgenommen. Zur schnellen Überbrückung der Energieversorgung enthalten Muskeln als zusätzliches energiereiches Phosphat das Kreatinphosphat (. Abb. 16.14). Kreatinphosphat steht mit ADP über die Kreatinkinase in folgender Beziehung:

Bei dem im Cytosol der Muskelzelle herrschenden leicht sauren pH liegt das Gleichgewicht der Kreatinkinasereaktion ganz auf der Seite der ATP-Bildung. Dies ermöglicht die Aufrechterhaltung des ATP-Spiegels in einem großen Bereich (7 u.).

. Abb. 16.14. Regeneration von ATP durch Kreatinphosphat. (Einzelheiten 7 Text)

In der Erholungsphase erfolgt eine rasche Rephosphorylierung des Kreatins zu Kreatinphosphat (. Abb. 16.14). Hierfür ist nicht die cytosolische, sondern die an der Außenseite der Innenmembran der Muskelmitochondrien lokalisierte mitochondriale Kreatinkinase verantwortlich. Durch ihre spezifische Lokalisation ist eine rasche Kreatinrephosphorylierung durch ATP aus der oxidativen Phosporylierung gewährleistet. Die Kreatinkinase besitzt eine besondere Bedeutung bei der Diagnose des Herzinfarkts. Dabei hat sich die Bestimmung des herzmuskelspezifischen Enzyms der Kreatinkinase (CK-MB) bewährt (7 Kap. 4.6.4). ! Die Kreatinbiosynthese startet mit der Aminosäure Glycin.

Die Biosynthese von Kreatin vollzieht sich in zwei Schritten (. Abb. 16.15): 4 Im ersten Schritt der Kreatinbiosynthese wird die Guanidinogruppe von Arginin auf Glycin übertragen und 4 anschließend wird im zweiten Schritt das entstandene Guanidinoacetat methyliert. Als Methylgruppendonator dient S-Adenosylmethionin (7 Kap. 13.6.4). Die beiden dazu notwendigen Enzyme Transaminidase und die Transmethylase kommen beim Menschen in Leber, proximalen Nierentubuli, Pankreas und Milz vor. Da die Transmethylase nicht in der Muskelzelle nachweisbar ist, wird der Kreatinstoffwechsel in der Muskelzelle durch die Aufnahme von Kreatin aus dem Blut bestimmt ! Kreatin wird als Kreatinin mit dem Urin ausgeschieden.

Der zur Bildung von Kreatinin aus Kreatin notwendige Ringschluss erfolgt unter Abspaltung von anorganischem

16

532

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

. Tabelle 16.5. Sauerstoff- und Energieverbrauch bei Ruhe, beim Gehen und Joggen (Daten nach Coyle 2000). Die angegebenen Daten beziehen sich auf einen Probanden mit einem maximalen O2-Verbrauch von 3 l/min und einem Körpergewicht von 66 kg Tätigkeit

% des maximalen O2-Verbrauchs (%)

VO2 (l/min)

Energieverbrauch (MJ/h)

8

0,22

0,25

Gehen

33

1,0

1,25

Joggen

65

2,0

2,5

Ruhe

lichen Aktivität ab. Die energetischen und metabolischen Anforderungen sind bei einem 10-km-Lauf ganz andere als beim Gewichtheben. Da Ausdauerleistungen wie Dauerlaufen und ähnliche Sportarten in der Medizin für die Prävention von Kreislauferkrankungen von großer Bedeutung sind, sollen die mit ihnen einhergehenden Stoffwechselumstellungen an dieser Stelle besprochen werden. Aus den in . Tabelle 16.5 zusammengestellten Daten geht hervor, dass bei einem 10-km-Lauf, der zu einem Sauerstoffverbrauch von etwa 65% des maximal Möglichen führt, der Energieverbrauch gegenüber dem Grundumsatz etwa um den Faktor 10 zunimmt. Darin spiegelt sich die vermehrte, der muskulären ATP-Gewinnung dienende O2abhängige Substratoxidation in den Mitochondrien wider. ! In der Arbeitsphase verwertet die Muskulatur neben Substraten aus dem Blutplasma zelleigene Speicher.

. Abb. 16.15. Biosynthese und Ausscheidung von Kreatin. Die Biosynthese erfolgt aus Glycin, der Guanidinogruppe des Arginins und der Methylgruppe des Methionins. Für seine Ausscheidung zyklisiert Kreatinphosphat unter Phosphatabspaltung zu Kreatinin, welches im Urin ausgeschieden wird

16

Phosphat aus Kreatinphosphat (. Abb. 16.15). Kreatinin wird in den Nieren glomerulär filtriert und ausgeschieden. Da die Geschwindigkeit der Ausscheidung nur von der Muskelmasse abhängt, ist bei normaler Muskelfunktion die Erhöhungen des Kreatinins im Plasma ein Zeichen für Nierenfunktionsstörungen.

16.2.3

Mobilisierung der für Muskelarbeit benötigten Substrate

! Mäßige körperliche Arbeit führt zu einer etwa 10-fachen Steigerung des Energieumsatzes.

Welche Auswirkungen körperliche Arbeit auf die metabolische Aktivität hat, hängt sehr stark von der Art der körper-

Im Prinzip stehen der Skelettmuskulatur zur Deckung des gesteigerten Energiebedarfs als Substrate zelleigene Glycogen- und Triacylglycerinvorräte sowie aus dem Blutplasma angebotene Glucose und nichtveresterte Fettsäuren zur Verfügung. Die Letzteren entstammen vor allem der Leber und dem Fettgewebe. Erst bei sehr langen körperlichen Belastungen reichen diese Vorräte nicht mehr aus. Unter diesen Bedingungen müssen kohlenhydratreiche Mahlzeiten zugeführt werden. In . Abb. 16.16 ist der Anteil der genannten Substrate an dem Energieumsatz in Ruhe sowie bei körperlicher Arbeit von 25 bzw. 65% des maximal möglichen O2-Verbrauchs zusammengestellt. In Ruhe sind Fettsäuren und Plasmaglucose die Hauptenergieträger. Der Anteil der Glucose am Energieumsatz nimmt bei körperlicher Aktivität zu, insgesamt ist jedoch ihr Anteil relativ gering. Als Substrat zur Deckung des Energiebedarfs sind dagegen die Plasmafettsäuren von wesentlich größerer Bedeutung. Allerdings kann ihr Anteil beim Übergang von leichter bis mittelschwerer körperlicher Arbeit nicht gesteigert werden. Der hierfür notwendige zusätzliche Energiebedarf entstammt dem Abbau von muskeleigenen Substratspeichern, nämlich von Glycogen und Triacylglycerinen. Bei länger dauernder Arbeitsbelastung (5–6 Stunden) ändert sich zwar das Verhältnis von Kohlenhydraten und Lipiden als Substrate zur Deckung des Energiebedarfs nur wenig, da aber die endogenen Glycogen- und Triacylglycerin-

533 16.2 · Muskelarbeit

Diese Daten wurden an Probanden nach 12-stündiger Nahrungskarenz erhoben. Interessanterweise lässt sich wenigstens während der ersten zwei Stunden nach Beginn mittelschwerer körperlicher Belastung die Oxidation von Lipiden zur Deckung des Energiebedarfs dadurch supprimieren, dass vor der körperlichen Belastung eine kohlenhydratreiche Mahlzeit eingenommen wird. ! Das Verhältnis von Katecholaminen und Insulin beeinflusst die Substratoxidation im arbeitenden Muskel.

. Abb. 16.16. Substratverbrauch nüchterner Probanden in Ruhe sowie nach Arbeitsbelastung mit 25 bzw. 65% der maximalen Sauerstoffaufnahme. (Einzelheiten 7 Text. Nach Coyle 2000)

. Abb. 16.17. Substratverbrauch nüchterner Probanden bei einer Arbeitsbelastung von 65–75% der maximalen Sauerstoffaufnahme während längerer Arbeitsbelastung. (Nach Coyle 2000)

vorräte der Muskulatur während dieser Zeit stark abnehmen, gewinnt der aus dem Blutplasma bezogene Teil an Substraten entsprechend an Bedeutung (. Abb. 16.17). Die Aufnahme von Fettsäuren aus dem Blutplasma in die Muskelzelle erfolgt über die schon beschriebenen Fettsäuretransportproteine (7 Kap. 12.1.3) entlang eines Konzentrationsgradienten. Der größte Teil der gesteigerten Glucoseaufnahme erfolgt über den GLUT 4-Glucosetransporter. Dieser wird nämlich nicht nur durch Insulin aus intrazellulären Vesikeln in die Plasmamembran verlagert (7 Kap. 11.4.1), sondern auch durch Muskelkontraktion, wahrscheinlich über eine Aktivierung der AMPK (7 u.). Angesichts der sehr hohen Aufnahme von Glucose aus dem Blutplasma muss dafür gesorgt werden, dass die Blutglucosekonzentration nicht zu sehr absinkt. Sind die Glycogenspeicher der Leber aufgebraucht, was nach einigen Stunden Arbeit der Fall ist, müssen Nahrungskohlenhydrate zugeführt werden, andernfalls kommt es zu schweren Ermüdungserscheinungen (»Hungerast«).

Die in den . Abbildungen 16.16 und 16.17 dargestellten Zusammenhänge zwischen Substratoxidation und Arbeitsleistung führen zu der Frage nach den Signalen, die für die Auswahl der jeweiligen Substrate benötigt werden. Für den Fall der Arbeitsleistung nach Nahrungskarenz kann man dabei: 4 von niedrigen Plasmainsulinspiegeln sowie 4 von erhöhten Plasmakatecholaminspiegeln ausgehen Diese lösen im Fettgewebe eine Steigerung der Lipolyse sowie in der Leber eine Steigerung der Glycogenolyse aus. Hiermit werden die aus dem Blutplasma angelieferten Substrate (7 o.) bereitgestellt. Die Einnahme von kohlenhydratreichen Mahlzeiten vor der Arbeitsleistung ändert die Verhältnisse insofern dramatisch, als unter diesen Bedingungen die Insulinkonzentration ansteigt und damit eine Reihe von Stoffwechseländerungen auslöst. Von großer Bedeutung ist hierbei, dass Insulin über schon besprochene Mechanismen (7 Kap. 16.1.1) die Lipolyse im Fettgewebe sowie die Glycogenolyse in der Leber und auch in der Skelettmuskulatur hemmt. Dies führt dazu, dass ein großer Teil der aufgenommenen Kohlenhydrate vom Muskel aufgenommen und oxidiert wird. Unter ungünstigen Bedingungen kann das sogar zu einem Abfall der Blutglucosekonzentration zu Beginn der körperlichen Aktivität führen. Nach den gängigen Vorstellungen spielen die Katecholamine eine wichtige Rolle als primäre Auslöser der für gesteigerte körperliche Aktivität benötigten Stoffwechselumstellungen. Es wird jedoch immer wieder diskutiert, ob nicht die Muskelzellen in Abhängigkeit von ihrer jeweiligen Belastung Signalstoffe abgeben, die dafür sorgen, dass im Fettgewebe und in der Leber die entsprechenden Mechanismen der Mobilisierung von Speichersubstraten stattfinden. Der Vorteil eines derartigen Mechanismus wäre, dass die Substratmobilisierung aus diesen Geweben direkt von der jeweiligen muskulären Aktivität abhängen würde. Tatsächlich gibt es Hinweise dafür, dass Muskelzellen besonders unter starker Arbeitsbelastung imstande sind, das Cytokin Interleukin 6 zu synthetisieren und an die Zirkulation proportional zur Arbeitsbelastung abzugeben. Von Interleukin 6 ist bekannt, dass es im Fettgewebe Lipolyse stimuliert und in der Leber die Glycogenolyse aktiviert. Es sind jedoch noch weiterführende Untersuchungen notwendig, um diese Vorstellung der »muskelinduzierten Substratmobilisierung« in Fettgewebe und Leber abzusichern.

16

534

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

! Muskelarbeit geht mit einer Aktivitätserhöhung der AMP-abhängigen Proteinkinase einher.

Die Beobachtung, dass Muskelarbeit zu einer Aktivitätserhöhung der AMPK führt, liefert eine wenigstens teilweise Erklärung für die dabei auftretenden Stoffwechselumstellungen. Für die Steigerung der muskulären Glycogenolyse ist mit großer Wahrscheinlichkeit eine Aktivierung der Glycogenphosphorylase durch AMP oder anorganisches Phosphat verantwortlich. Darüber hinaus wird die Glycogenbiosynthese durch AMPK-abhängige Phosphorylierung der Glycogensynthase abgeschaltet. Die kontraktionsabhängige Translokation von GLUT-4 in die muskuläre Plasmamembran wird wenigstens teilweise durch die AMPK vermittelt, allerdings sind die beteiligten Signalwege noch unbekannt. Über die Signale, die zu einer Lipolyse intramuskulärer Triacylglycerinspeicher bei Muskelarbeit führen, ist noch wenig bekannt. Es gibt bis jetzt keinerlei gesicherte Hinweise auf eine Beteiligung der AMPK. Dagegen ist eine AMPK-abhängige Phosphorylierung der Acetyl-CoA-Carboxylase nachgewiesen worden, die zu einer gesteigerten β-Oxidation der Fettsäuren führt.

Lactat abgebaut. Dieses wird dann in großen Mengen von der Muskulatur abgegeben und gelangt auf dem Blutweg zur Leber, wo es im Zug der Gluconeogenese wieder zu Glucose resynthetisiert wird. Da diese wiederum der Muskulatur als Brennstoff zur Verfügung gestellt werden kann, ergibt sich ein Kreislauf des Glucosekohlenstoffs zwischen Muskelzelle und Leber, der nach seinem Erstbeschreiber Carl Cori als Cori-Zyklus bezeichnet wird (. Abb. 16.18). Eine Variante dieses Zyklus besteht darin, dass im Verlauf der Glycolyse in der Muskulatur gebildetes Pyruvat durch Transaminierung in die Aminosäure Alanin überführt wird (Alaninzyklus, 7 Kap. 13.5.1). Ähnlich wie Lactat gelangt dieses über den Blutweg zur Leber, wo es ebenfalls der Gluconeogenese dient. ! Muskeltraining erhöht die Zahl der Mitochondrien und verbessert die Kapazität zur Lipidoxidation.

Bei plötzlich notwendiger maximaler Arbeitsleistung durch die Muskelzelle reicht die Sauerstoffzufuhr nicht mehr zur vollständigen Oxidation der Glucose aus. In diesem Fall wird Glucose zusätzlich durch anaerobe Glycolyse bis zum

Schon vor vielen Jahren wurde aufgrund von morphometrischen Untersuchungen gezeigt, dass Training zu einer Zunahme der Mitochondrienzahl in der Muskelzelle führt. Ein 6-wöchiges regelmäßiges Training löst beispielsweise, gemessen an mitochondrialen Leitenzymen, eine Stimulierung der Mitochondrienbiogenese bis zu einer Verdoppelung der Mitochondrienzahl in der Skelettmuskulatur aus. Damit geht eine deutliche Zunahme der oxidative Kapazität der Skelettmuskelfaser einher. Ein Hauptproblem bei der Mitochondrienbiogenese ist, dass sowohl die kerncodierten als auch die mitochondrial codierten Proteinuntereinheiten der mitochondrialen Enzymkomplexe von Atmungskette und oxidativer Phosphorylierung in konzertierter Weise synthetisiert werden müssen. Dabei spielt

. Abb. 16.18. Cori-Zyklus und Alaninzyklus. In der Muskulatur wird, besonders bei schwerer Arbeit, Glucose zu Pyruvat und Lactat abgebaut. Diese verlassen, evtl. nach Transaminierung zu Alanin, die Muskelzelle und gelangen auf dem Blutweg zur Leber, wo sie als

Substrate für die Gluconeogenese dienen. Hierbei entstehende Glucose wird von der Leber an das Blut abgegeben und dient in der Muskulatur wieder als Substrat zur Deckung des Energiebedarfs oder der Glycogensynthese

! Bei maximaler Muskelarbeit wird ein Teil der verwerteten Glucose anaerob abgebaut.

16

535 16.2 · Muskelarbeit

. Abb. 16.19. Stimulierung der Expression von Cytochrom c durch Muskelarbeit. Muskelkontraktion führt zur Aktivierung der AMPK. Diese stimuliert über ein noch nicht bekanntes Signal die Transkription des Transkriptionsfaktors NRF-1. Nach dessen Translokation in den Zellkern aktiviert dieser die Transkription des Cytochrom-c-Gens

möglicherweise wiederum die AMPK eine koordinierende Rolle. Ihre Stimulierung ist jedenfalls als Auslöser für folgende Vorgänge beschrieben worden: 4 Durch die Muskelkontraktion und die damit einhergehende Aktivierung der AMPK wird der Transkriptionsfaktor NRF-1 (nuclear respiratory factor-1) induziert. Die mRNA dieses Transkriptionsfaktors wird im Cytosol zum entsprechenden Protein translatiert und gelangt anschließend durch Proteinimport in den Zellkern, wo sie die Transkription mitochondrialer, kerncodierter Gene induziert. Besonders gut ist dies am Beispiel des Cytochrom c beschrieben worden (. Abb. 16.19) 4 Für die im mitochondrialen Genom codierten Proteine ist der wichtigste Transkriptionsfaktor Tfam (mitochondrialer Transkriptionsfaktor A). Dieses kern-

codierte Protein wird ebenfalls bei Muskelarbeit mit Aktivitätssteigerung der AMPK verstärkt exprimiert und danach durch entsprechende Transportsysteme in die Mitochondrien transloziert. Hier stimuliert es die Transkription der mitochondrialen Gene Eine wichtige Konsequenz der erhöhten Mitochondriendichte in trainierten Muskelzellen ist, dass deren Kapazität zur Lipidoxidation im Vergleich zur nichttrainierten Muskelzelle deutlich ansteigt. Dies ist eine Erklärung dafür, dass vor allem die intramuskulären Triacylglycerinspeicher, die im trainierten Muskel höher als im nichttrainierten sind, effektiver zur Deckung des Energieverbrauchs benutzt werden können. Dies ist u.a. eines der Ziele, die bei der sportmedizinischen Betreuung von Leistungssportlern angestrebt werden.

In Kürze In Ruhe ist der Substratverbrauch der Muskulatur relativ gering. Je nach Stoffwechsellage werden Glucose bzw. Fettsäuren aus der Zirkulation aufgenommen und oxidiert. Beim Übergang von Ruhe zur Arbeit muss die Muskelzelle das für die Kontraktion wichtige ATP bereitstellen. Hierfür gibt es prinzipiell zwei Möglichkeiten: 4 Kurzfristig kann durch die Kreatinkinase ATP aus ADP und Phosphokreatin gebildet werden 4 Im Wesentlichen wird das für die Muskelkontraktion benötigte ATP in der Atmungskette durch Oxidation von Kohlenhydraten und Lipiden erzielt. Bei Arbeitsleistungen bis etwa 65% der maximalen Sauerstoff-

aufnahme werden hierfür überwiegend das muskuläre Glycogen und die in Muskelzellen gespeicherten Triacylglycerine verwendet. Länger dauernde Arbeitsleistungen machen eine gesteigerte Aufnahme von Fettsäuren und Glucose aus der Zirkulation notwendig Training führt zu einer Zunahme der Mitochondrienzahl in der Muskelzelle. Hierfür spielen spezifische, durch die vermehrte Kontraktionsarbeit aktivierte Transkriptionsfaktoren eine große Rolle, die die Biosynthese der mitochondrialen Proteine induzieren. Die gesteigerte Ausstattung mit Mitochondrien ermöglicht der trainierten Muskelzelle eine bessere Verwertung von Triacylglycerinen.

16

536

Kapitel 16 · Koordinierung des Stoffwechsels

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IV

IV Stoffwechsel der Zelle: Biosynthese von Speicher und Baustoffen 17

Biosynthese von Kohlenhydraten – 539 Georg Löffler

18

Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin – 553 Georg Löffler

19

Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine – 585 Georg Löffler, Monika Löffler

20

Häm und Gallenfarbstoffe Petro E. Petrides

– 607

17 17

Biosynthese von Kohlenhydraten Georg Löffler

17.1

Biosynthese und Stoffwechsel von Monosacchariden – 540

17.1.1 17.1.2 17.1.3 17.1.4

Bedeutung von Nucleosiddiphosphat-Monosacchariden – 540 Stoffwechsel des Glucuronats – 540 Stoffwechsel von Lactose und Galactose – 542 Pathobiochemie: Stoffwechsel einzelner Monosaccharide – 543

17.2

Biosynthese der Zuckerbausteine von Glycoproteinen und Glycosaminoglycanen – 543

17.2.1 17.2.2

Biosynthese von Galactose, Mannose und Fucose – 543 Biosynthese von Aminozuckern – 544

17.3

Biosynthese von Oligosacchariden und Heteroglycanen – 546

17.3.1 17.3.2 17.3.3 17.3.4

Allgemeine Prinzipien – 546 Biosynthese N-glycosidisch verknüpfter Glycoproteine – 546 Biosynthese O-glycosidisch verknüpfter Glycoproteine – 547 Biologische Bedeutung der Proteinglycosylierung sowie der Glycoproteine – 548 Biosynthese der Proteoglycane – 549 Biosynthese der Hyaluronsäure – 550 Penicillin und die Glycopeptidbiosynthese der bakteriellen Zellwand – 550 Pathobiochemie: Defekte des Aufbaus von Zuckerstrukturen – 552

17.3.5 17.3.6 17.3.7 17.3.8

Literatur – 552

540

Kapitel 17 · Biosynthese von Kohlenhydraten

> > Einleitung Glucose dient dem Aufbau von Glycogen als Energiespeicher sowie dem oxidativen Abbau zur Deckung des zellulären Energiebedarfes. Weiterhin ist Glucose Baustein für die Biosynthese der verschiedensten Monosaccharide, da diese bis auf Fructose und Galactose nur in geringen Konzentrationen in der Nahrung vorkommen. Monosaccharide werden als solche – sowie nach Modifikation zu Uronsäuren, Aminozuckern sowie deren N-acetylierten Derivaten – für die Biosynthese von Oligosacchariden und Heteroglycanen benötigt. Diese sind Bestandteile von Glycoproteinen, Proteoglycanen sowie der Hyaluronsäure. Fehler in der Biosynthese führen zu schweren Störungen, da sie essentielle Funktionen für Wachstum, Differenzierung und viele zelluläre Funktionen haben.

17.1

Biosynthese und Stoffwechsel von Monosacchariden

17.1.1

Bedeutung von Nucleosiddiphosphat-Monosacchariden

Glucose stellt die Ausgangssubstanz für die Biosynthese der verschiedenen in Disacchariden und Heteroglycanen vorkommenden Monosaccharide bzw. deren Derivate dar. Im Wesentlichen handelt es sich dabei um 4 Galactose 4 Mannose 4 Fucose 4 einige Uronsäuren sowie 4 die verschiedenen Aminozucker Die Strukturen dieser Verbindungen wurden bereits in 7 Kapitel 2 besprochen. ! Monosaccharide müssen zu NucleosiddiphosphatDerivaten aktiviert werden.

In tierischen Zellen ist das bevorzugte Nucleosidtriphosphat zur Zuckeraktivierung das UTP. Daneben finden das GTP im Mannosestoffwechsel und das CTP im Acetyl-Neuraminsäurestoffwechsel Verwendung. Auf diese Weise aktivierte Monosaccharide können vielfältige Reaktionen eingehen. Die wichtigsten sind 4 Oxidationen 4 Reduktionen 4 Epimerisierungen sowie 4 Übertragung auf andere Zucker oder Zuckerpolymere

17.1.2

Stoffwechsel des Glucuronats

! UDP-Glucuronat entsteht durch Oxidation von UDPGlucose.

Biosynthese. Uronsäuren (oder besser Uronate) entstehen durch Oxidation der Hydroxylgruppe am C-Atom 6 von Hexosen. Die Biosynthese der aus Glucose abgeleiteten Glucuronsäure (des Glucuronats) ist in . Abb. 17.1 dargestellt:

Sowohl die Biosynthese der obigen Zucker sowie deren weitere Reaktionen erfordern die vorherige Aktivierung der jeweiligen Monosaccharide. Sie erfolgt durch Reaktion eines Monosaccharid-1-phosphats mit einem Nucleosidtriphosphat (NTP):

17

Ein Beispiel für eine derartige Reaktion ist die schon besprochene Bildung von UDP-Glucose aus Glucose-1-phosphat und UTP, die für die Biosynthese von Glycogen und Glucuronsäure benötigt wird (7 Kap. 11.2.1). Die für solche Reaktionen verwendeten Enzyme werden allgemein als Glycosyl-1-phosphat-Nucleotid-Transferasen oder Glycosyl-Pyrophosphorylasen bezeichnet. Die Bildung des NDP-Monosaccharids erfolgt in einer frei reversiblen Reaktion. Erst die Hydrolyse des dabei gebildeten Pyrophosphats zu zwei anorganischen Phosphaten mit Hilfe der in jedem Gewebe vorkommenden Pyrophosphatasen verschiebt das Gleichgewicht der Reaktion in Richtung der Biosynthese des aktivierten Zuckers.

. Abb. 17.1. Biosynthese von UDP-Glucuronsäure aus Glucose-6phosphat

541 17.1 · Biosynthese und Stoffwechsel von Monosacchariden

4 4 4 4 4 . Abb. 17.2. Biosynthese von Glucuroniden aus UDP-Glucuronat

4 Glucose-6-phosphat wird nach Überführung in Glucose-1-phosphat mit UTP unter Bildung von UDPGlucose umgesetzt (7 Glycogenbiosynthese, Kap. 11.2.1) 4 Oxidation von UDP-Glucose am C-Atom 6 in zwei Schritten zu UDP-Glucuronat durch die NAD+-abhängige UDP-Glucose-Dehydrogenase UDP-Glucuronat stellt die aktive Form des Glucuronats dar und wird für deren weitere Reaktionen benötigt. ! Viele Verbindungen werden durch Glucuronidierung ausscheidungsfähig gemacht.

Glucuronide. Viele körpereigene und körperfremde

Verbindungen reagieren mit UDP-Glucuronat unter Bildung von Glucuroniden. Diese enthalten Glucuronat in E-glycosidischer Bindung mit den entsprechenden Aglykonen verknüpft (. Abb. 17.2). Als Substrate kommen

Alkohole Phenole Thiole primäre Amine, aber auch Verbindungen mit Carboxylgruppen infrage

Dabei handelt es sich um körpereigene (Steroide, Bilirubin) Verbindungen, aber auch Nahrungsbestandteile, Arzneimittel und viele Xenobiotica. Die Zahl der möglichen Substrate geht in die Tausende. Glucuronat-Transferasen. Die für diese Reaktionen ver-

antwortlichen Enzyme werden als UDP-Glucuronat-Transferasen (UGT’s) bezeichnet. Sie bilden eine Großfamilie mit beim Menschen insgesamt 16 Mitgliedern, die sich von zwei Vorläufern, dem UGT1 und dem UGT2 ableiten. Die einzelnen Mitglieder der Großfamilie weisen zwar unterschiedliche Spezifitäten auf. Diese erstrecken sich allerdings mehr auf chemische Gruppen als auf definierte Moleküle, was das außerordentlich breite Substratspektrum erklärt. UGT’s kommen im Intestinaltrakt und in besonders hoher Aktivität in der Leber vor, wo sie für die zweite Phase der Biotransformation von besonderer Bedeutung sind (7 Kap. 33.3.1). ! Aus Glucuronsäure werden andere Uronsäuren, Ascorbinsäure und Pentosen synthetisiert.

. Abb. 17.3. Synthese von UDP-D-Galacturonat und L-Iduronat. Die Epimerisierung von Iduronat aus Galacturonat erfolgt erst nach Einbau in Heparan- bzw. Dermatansulfat

17

542

Kapitel 17 · Biosynthese von Kohlenhydraten

Abkömmlinge des Glucuronats. Aus UDP-Glucuronat werden weitere Verbindungen gebildet (. Abb. 17.3): 4 Durch Epimerisierung am C-Atom 4 entsteht aus UDPD-Glucuronat UDP-D-Galacturonat 4 Nach Einbau von UDP-Glucuronat in Heparan- bzw. Dermatansulfat (7 Kap. 17.3.5) kann dieses durch Epimerisierung am C-Atom 5 in L-Iduronat umgewandelt werden 4 Durch hydrolytische Abspaltung von UDP bzw. unter Einwirkung von lysosomalen Glucuronidasen entsteht aus UDP-Glucuronat bzw. Glucuroniden das Glucuronat

Aus diesem entsteht D-Xylitol, welches mit NAD+ zu D-Xylulose oxidiert und damit in den Pentosephosphatweg eingeschleust werden kann. Außer bei Primaten und Meerschweinchen ist Glucuronat auch der Ausgangspunkt für die AscorbinsäureSynthese (7 Kap. 23.3.1).

4 ATP-abhängige Phosphorylierung von Galactose durch eine spezifische Galactokinase zu Galactose-1-phosphat 4 Reaktion von Galactose-1-Phosphat mit UDP-Glucose unter Bildung von UDP-Galactose und Glucose-1phosphat. Diese durch das Enzym Galactose-1-phosphat-Uridyltransferase vermittelte Reaktion besteht also in einem Austausch von Galactose und Glucose am Uridindiphosphat 4 Epimerisierung von UDP-Galactose am C-Atom 4. Das hierfür verantwortliche Enzym ist die UDP-Galactose-4-Epimerase. Ihr Produkt ist UDP-Glucose. Die entstandene UDP-Glucose kann in Glycogen eingebaut und auf dem Weg der Glycogenolyse in den Stoffwechsel eingeschleust werden ! Für die Lactosesynthese in der Brustdrüse wird Lactalbumin als Cofaktor benötigt.

Biosynthese von Lactose. Lactose ist das Hauptkohlen-

17.1.3

Stoffwechsel von Lactose und Galactose

hydrat der Milch aller Säuger. Ihre Biosynthese erfolgt durch Übertragung von UDP-Galactose auf Glucose unter Bildung von Lactose nach der Gleichung:

! Galactose wird nach Aktivierung über UDP-Galactose zu UDP-Glucose epimerisiert.

Stoffwechsel von Lactose. Das Hauptkohlenhydrat der

Milch ist das Disaccharid Lactose. Sein Stoffwechsel ist v.a. beim Säugling und Kleinkind von größter Bedeutung. Wie andere Disaccharide wird Lactose im Intestinaltrakt durch die dort anwesenden Disaccharidasen (7 Kap. 32.2.1) hydrolytisch gespalten und die der Lactose zugrunde liegenden Monosaccharide Glucose und Galactose in die Pfortader resorbiert. Der Galactoseabbau findet im Wesentlichen in der Leber statt (. Abb. 17.4):

Das hierfür benötigte Enzym ist die Lactosesynthase. Sie ist ein heterodimeres Enzym aus den beiden Untereinheiten A und B. Die Untereinheit A ist eine außer in den Epithelzellen der Brustdrüse in vielen anderen Zellen vorkommende Galactosyltransferase, welche die Reaktion:

17

. Abb. 17.4. Stoffwechsel der Galactose. (Einzelheiten 7 Text) Der rote Balken gibt den Stoffwechseldefekt bei der hereditären Galactosämie wieder

543 17.2 · Biosynthese der Zuckerbausteine von Glycoproteinen und Glycosaminoglycanen

katalysiert. Diese Untereinheit gehört damit zu den für die Heteroglycansynthese (7 Kap. 17.3.2) verantwortlichen Enzymen. Zur Biosynthese von Lactose ist sie alleine nicht imstande, weil ihre KM für Glucose als Akzeptor außerordentlich groß ist. Erst zusammen mit der Untereinheit B, dem α-Lactalbumin, wird die Spezifität der Untereinheit A derart modifiziert, dass Glucose als Akzeptor bevorzugt wird. Während der Schwangerschaft werden die Zellen der Milchdrüse durch die Hormone Insulin (7 Kap. 26.1), Cortisol (7 Kap. 27.3.7) und Prolactin (7 Kap. 27.7.3) in sekretorische Zellen umgewandelt und dabei die Biosynthese der Untereinheit A induziert. Im Gegensatz dazu wird die Biosynthese der Untereinheit B durch Progesteron gehemmt. Mit dem unmittelbar vor der Geburt einsetzenden Progesteronabfall erlischt diese Hemmung, sodass mit Beginn der Milchbildung Lactose in benötigtem Umfang synthetisiert werden kann.

17.1.4

Pathobiochemie: Stoffwechsel einzelner Monosaccharide

Hereditäre Störungen des Stoffwechsels einzelner Monosaccharide haben interessante Einblicke in die regulatorischen Mechanismen geliefert (7 Kap. 11): Galactosämien. Es handelt sich um Erkrankungen, die sich durch erhöhte Serum-Galactosespiegel bereits unmittelbar nach der Geburt auszeichnen. Sie kommen mit einer Häufigkeit von etwa 1:40000 vor. Bei der leichten Form der Erkrankung ist die Galactokinase defekt. Die sich anhäufende Galactose wird mit

einer Aldosereduktase (7 Kap. 11.1.1) zu Galactitol reduziert, welches die Entstehung von frühkindlichen Linsenkatarakten auslöst. Die schwere Form der Erkrankung wird auch als »klassische Galactosämie« bezeichnet. Ihr liegt ein Mangel der Galactose-1-phosphat-Uridyl-Transferase zugrunde. Da die Aktivität der Galactokinase normal ist, kommt es zu einem beträchtlichen Anstieg des Galactose-1-phosphats. Dieses hemmt die Phosphoglucomutase, Glucose-6-Phosphatase und Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase, führt also zu einer schweren Störung des Glucosestoffwechsels. Die hohe Galactose-1-phosphat-Konzentration bindet darüber hinaus einen großen Teil des zellulären Phosphats. Deswegen wird die mitochondriale ATP-Regenerierung aus ADP und Pi und damit der gesamte Energiestoffwechsel schwer beeinträchtigt. Die Betroffenen erkranken unmittelbar nach der Geburt an Erbrechen, Durchfällen, Gewichtsabnahme und Ikterus. Bei Belastung mit Galactose kommt es zu schweren, protrahierten Hypoglykämien, die auf eine Hemmung der Gluconeogenese zurückzuführen sind. Die Synthese von UDP-Galactose verläuft bei den Patienten ungestört, da die UDP-Gal-4-Epimerase ja in normaler Aktivität vorhanden ist. Die Betroffenen sind also auch bei galactosefreier Kost, die die einzig erfolgreiche Therapie des Leidens darstellt, zur Synthese der Galactose enthaltenden Glycoproteine und Ganglioside befähigt. Gilbert Syndrom und Crigler-Najjar Syndrom. Bei diesen Erkrankungen handelt es sich um angeborene Störungen der Bilirubin-Glucuronidierung. Sie beruhen auf jeweils unterschiedlichen Defekten der Uridindiphosphat-Glucuronyltransferase 1A1. Weiteres 7 Kap. 20.4.2.

In Kürze Die im Stoffwechsel benötigten Monosaccharide werden überwiegend aus Glucose synthetisiert: 4 UDP-Glucose ist der Ausgangspunkt für die Biosynthese von Glucuronat, den Glucuroniden und, mit Ausnahme der Primaten und des Meerschweinchens, der Ascorbinsäure

17.2

Biosynthese der Zuckerbausteine von Glycoproteinen und Glycosaminoglycanen

17.2.1

Biosynthese von Galactose, Mannose und Fucose

! Nucleosiddiphosphat-Derivate sind die Zwischenprodukte für die Synthese von Galactose, Mannose und Fucose.

4 UDP-Glucose wird zu UDP-Galactose epimerisiert und dient der Lactosesynthese 4 Aus Lactose stammende Galactose wird zu UDP-Galactose aktiviert und anschließend zu UDP-Glucose epimerisiert

Biosynthese von Galactose. Galactose ist Bestandteil einer Reihe von Heteroglycanen (7 Kap. 2.1.4). Daraus ergibt sich die Notwendigkeit, diesen Zucker auch dann zur Verfügung zu haben, wenn die Nahrung galactosefrei ist. Da die UDP-Galactose-4-Epimerase (. Abb. 17.4) frei reversibel ist, kann die benötigte Galactose leicht aus UDP-Glucose hergestellt werden, wobei UDP-Galactose entsteht. Biosynthese von Mannose und Fucose. Mannose und

Fucose sind wichtige Bestandteile vieler Glycoproteine und

17

544

Kapitel 17 · Biosynthese von Kohlenhydraten

plizierte, mehrstufige Prozess eine mit einer Wasserabspaltung einhergehende Reduktion der CH2OH-Gruppe des C-Atoms 6 zu einer Methylgruppe (. Abb. 17.5):

17.2.2

Biosynthese von Aminozuckern

! Die NH2-Gruppe der Aminozucker wird durch Glutamin bereitgestellt.

Sowohl in den Oligosacchariden der Glycoproteine als auch in Glycosaminoglycanen kommen häufig Monosaccharide mit Aminogruppen vor, die meist zusätzlich acetyliert sind. Diese befinden sich immer am C-Atom 2 des zugrunde liegenden Monosaccharides. Die Grundzüge der Biosynthese dieser Aminozucker sind in . Abb. 17.6 zusammengestellt. N-Acetyl-Glucosamin. Da es sich um eine Substitution am C-Atom 2 handelt, beginnt die Biosynthese mit der Isomerisierung von Glucose-6-phosphat zu Fructose-6phosphat. Dieses reagiert anschließend mit dem AmidStickstoff des Glutamins unter Bildung von Glucosamin6-phosphat (GlcN-6-P). Eine zweite Möglichkeit der Glucosamin-6-phosphat-Biosynthese besteht in der direkten Phosphorylierung von Glucosamin. Durch Acetylierung mit Acetyl-CoA entsteht aus Glucosamin-6-phosphat das N-Acetylglucosamin-6-phosphat (GlcNAc-6-P). Nach Verlagerung der Phosphatgruppe zum GlcNAc-1-P reagiert dieses mit UTP zum UDP-GlcNAc, das für die Glycoproteinbiosynthese verwendet wird. . Abb. 17.5. Biosynthese von GDP-Mannose und GDP-Fucose aus Glucose-6-phosphat. (Einzelheiten 7 Text)

17

werden mit folgenden Reaktionen aus Glucose synthetisiert (. Abb. 17.5, 17.6): 4 Isomerisierung von Glucose-6-Phosphat zu Fructose6-phosphat mit Hilfe des Glycolyseenzyms Phosphohexose-Isomerase 4 Unter sterischer Umkehr am C-Atom 2 Bildung von Mannose-6-phosphat durch eine zweite Isomerase 4 Umwandlung zu Mannose-1-phosphat 4 Aktivierung von Mannose-1-phosphat mit GTP zu GDP-Mannose. Der Mechanismus gleicht demjenigen der Bildung von UDP-Glucose aus Glucose-1Phosphat GDP-Mannose ist nicht nur Substrat für die Biosynthese von mannosehaltigen Glycoproteinen, sondern auch für die des 6-Desoxyzuckers L-Fucose, der ebenfalls in Glycoproteinen vorkommt (7 Kap. 2.1.4). Formal ist dieser kom-

N-Acetyl-Galactosamin und N-Acetyl-Neuraminsäure.

N-Acetyl-Galactosamin entsteht durch Epimerisierung von UDP-GlcNAc zu UDP-GalNAc in einer Reaktion, die der Epimerisierung von UDP-Glc zu UDP-Gal entspricht (. Abb. 17.4) Die Biosynthese der N-Acetyl-Neuraminsäure (Sialinsäure, 7 Kap. 17.1.1) beginnt mit der ATP-abhängigen Umwandlung von UDP-GlcNAc zu N-Acetyl-Mannosamin6-phosphat (ManNAc-6-P), das anschließend mit Phosphoenolpyruvat reagiert. Dabei addiert sich das nach Phosphatabspaltung entstehende Enolat-Ion des Pyruvats an das Carbonyl-C-Atom des N-Acetylmannosamin-6phosphats, sodass N-Acetylneuraminat-9-Phosphat entsteht. Dieses wird analog zu schon geschilderten Reaktionen diesmal mit CTP zu CMP-N-Acetyl-Neuraminat aktiviert und steht damit der Glycoprotein-Biosynthese zur Verfügung (7 Kap. 17.3.2).

545 17.2 · Biosynthese der Zuckerbausteine von Glycoproteinen und Glycosaminoglycanen

. Abb. 17.6. Biosynthese wichtiger Zuckerbausteine in Glycoproteinen und Glycosaminoglycanen. Glc = Glucose, Fru = Fructose, Man = Mannose, Fuc = Fucose, Gal = Galactose, GlcN = Glucosamin, GlcNAc = N-Acetyl-Glucosamin, GalNAc = N-Acetyl-Galactosamin, ManNAc =

N-Acetyl-Mannosamin, NeuAc = N-Acetyl-Neuraminsäure (Sialinsäure) grüne Pfeile = Epimerisierungen; rote Pfeile = Aktivierungen; blaue Pfeile = Einbau in Heteroglycane; unmittelbare Substrate für die Heteroglycansynthese sind rot hervorgehoben (Einzelheiten 7 Text)

In Kürze Die Biosynthese der Zuckerbausteine von Heteroglycanen und Glycosaminoglycanen geht von Glucose aus: 4 Glucose-6-phosphat liefert UDP-Glucose und UDP-Galactose, 4 Fructose-6-phosphat liefert GDP-Mannose und GDPFucose,

4 Fructose-6-phosphat ist Ausgangspunkt für die Biosynthese der Aminozucker UDP-GlcNAc, UDP-GalNAc und CMP-N-Acetyl-Neuraminsäure.

17

546

Kapitel 17 · Biosynthese von Kohlenhydraten

17.3

Biosynthese von Oligosacchariden und Heteroglycanen

17.3.1

Allgemeine Prinzipien

Im Gegensatz zur Biosynthese von Nucleinsäuren (7 Kapitel 7, 8) oder Proteinen (7 Kapitel 9) erfolgt die Biosynthese von Oligosacchariden und Heteroglycanen nicht nach einem in einer Matrize (DNA für Nucleinsäuren oder mRNA für Proteine) codierten Plan. Sie beginnt vielmehr mit der Anheftung des ersten Glycosylrestes, der dazu in Nucleosiddiphosphat-aktivierter Form vorliegen muss, an einen Akzeptor (. Abb. 17.7). Die hierfür nötige Glycosyltransferase hat jeweils die erforderliche Spezifität hinsichtlich des Akzeptors sowie des Nucleosiddiphosphatzuckers. Weitere Glycosyltransferasen mit jeweils genau erforderlichen Spezifitäten übernehmen danach die schrittweise Verlängerung der wachsenden Kohlenhydratkette. Häufig verzweigte Oligosaccharide kommen in Glycoproteinen, Heteroglycanen, Proteoglycanen und in der Hyaluronsäure vor, außerdem in den in Kapitel 18 besprochenen Glycolipiden.

17.3.2

Biosynthese N-glycosidisch verknüpfter Glycoproteine

In Glycoproteinen kommen zwei Typen von Sacchariden vor. Zum größeren Teil sind sie über N-glycosidische Bindungen mit einem Asparaginylrest des Glycoproteins verknüpft, zum kleineren Teil über O-glycosidische Bindungen mit Seryl- bzw. Threonyl-Resten. ! Die N-glycosidisch an Glycoproteine gebundenen Oligosaccharidketten werden an einem Lipidanker synthetisiert.

Ein großer Teil der in tierischen Organismen vorkommenden, N-glycosidisch verknüpften Glycoproteine ist vom komplexen Typ und trägt damit verzweigte Oligosaccharide (7 Kap. 2.1.4). Die Fertigstellung derartiger Glycoproteine ist ein mehrstufiger Vorgang: Synthese der Oligosaccharide. Die Biosynthese der N-gly-

17

cosidisch verknüpften Oligosaccharide von Glycoproteinen erfolgt in einem zweistufigen Prozess am endoplasmatischen Retikulum sowie im Golgi-Apparat. An den Membranen des endoplasmatischen Retikulums wird die innere Kernregion (Core-Region) der Saccharidkette zusammengesetzt. Der Akzeptor für die schrittweise Anheftung Nucleosiddiphosphat-aktivierter Zucker ist allerdings zunächst nicht das jeweilige Protein, sondern das Isoprenderivat Dolicholphosphat (7 Kap. 2.2.5), welches für eine Verankerung der wachsenden Saccharidkette in den Membranen des endoplasmatischen Retikulums sorgt

. Abb. 17.7. Schema der Biosynthese von Heteroglycanen. An einen Akzeptor wird mit Hilfe der ersten Glycosyltransferase das innerste Monosaccharid der wachsenden Polysaccharidkette geheftet. Weitere Glycosyltransferasen mit jeweils verschiedener Spezifität übernehmen die Verknüpfung mit den nächsten Monosaccharidresten

(. Abb. 17.8). Dolicholphosphat ist dabei so in die Membran des endoplasmatischen Retikulums integriert, dass der Phosphatrest auf die cytosolische Seite ragt. An diese Phosphatgruppe wird zunächst ein aus UDP-GlcNAc stammendes N-Acetylglucosamin-1-phosphat geknüpft, sodass ein N-Acetyl-Glucosaminyl-Pyrophosphoryl-Dolichol (Dol-PP-GlcNAc) entsteht. In den nächsten Schritten werden an dieses ein weiteres GlcNAc sowie fünf Mannosereste geheftet. Anschließend erfolgt mit Hilfe einer »Flippase« eine Translokation des Dol-PP-Saccharides durch die Membran, sodass der Pyrophosphat-Rest mit der angehefteten Saccharidkette jetzt ins Lumen des endoplasmatischen Retikulums ragt. Hier erfolgt die Anheftung weiterer Saccharidketten aus Mannose- bzw. Glucoseresten. Übertragung des Oligosaccharids. Nachdem das Oligosaccharid fertig gestellt ist, wird es in einem Schritt auf einen spezifischen Asparaginylrest der Polypeptidkette übertragen. Das hierfür verantwortliche membrangebundene Enzym erkennt u.a. die Aminosäuresequenz AsnX-Ser/Thr in Proteinen. Von dem während der Übertragungsreaktion entstehenden Dolicholpyrophosphat wird Phosphat abgespalten, der Dolichyl-Rest wird durch die Membran transloziert und steht damit dem nächsten Zyklus zur Verfügung. Trimmen des Glycoproteins. Noch in den Membranen des endoplasmatischen Retikulums, aber auch im GolgiApparat, erfolgt nun das sog. Trimmen des noch unfertigen Glycoproteins (. Abb. 17.9). Es beginnt mit der schrittweisen Entfernung von Glucose- und Mannoseresten und der Anheftung eines N-Acetyl-Glucosamins,

547 17.3 · Biosynthese von Oligosacchariden und Heteroglycanen

. Abb. 17.8. Biosynthese N-glycosidisch verknüpfter Zuckerstrukturen in Glycoproteinen. In den Membranen des endoplasmatischen Retikulums wird an Dolicholphosphat als Lipidanker die dargestellte Oligosaccharidstruktur synthetisiert. Für jeden Verknüpfungsschritt sind besondere Glycosyltransferasen notwendig. Der biologische Vorteil dieses Verfahrens besteht darin, die wachsende Saccharidkette mit dem Dolicholphosphatrest in der Lipidphase der Membran zu verankern. (Einzelheiten 7 Text)

sodass schließlich eine Kernregion übrig bleibt, die nur noch N-Acetylglucosamin- und Mannosereste trägt. An diese werden nun, hauptsächlich im medialen und transGolgi-Apparat, mit Hilfe spezifischer Glycosyltransferasen die für das jeweilige Glycoprotein typischen peripheren Saccharidreste angeheftet. Im Einzelnen handelt es sich um N-Acetyl-Glucosamin-, Galactose-, Fucose- und Sialinsäurereste.

. Abb. 17.9. Prozessierung N-glycosidisch verknüpfter Zuckerstrukturen von Glycoproteinen. Dieser auch als Trimmen bezeichnete Schritt findet während der Passage des Glycoproteins vom endoplasmatischen Retikulum durch die Zisternen des Golgi-Apparates statt. Schrittweise werden Glucose- und Mannosereste entfernt, sodass schließlich eine Kernregion übrig bleibt, an die hauptsächlich im medialen und trans-Golgi-Apparat die für das jeweilige Glycoprotein typischen peripheren Saccharidreste angeheftet werden

17.3.3

Biosynthese O-glycosidisch verknüpfter Glycoproteine

! O-glycosidisch an Glycoproteine geknüpfte Saccharidketten werden im Golgi-Apparat schrittweise aufgebaut.

Die Biosynthese O-glycosidisch verknüpfter Glycoproteine findet anders als bei den N-glycosidisch verknüpften Glycoproteinen posttranslational in den Zisternen des GolgiApparates statt. Die Anheftung der Glycosylreste erfolgt mit Hilfe jeweils spezifischer Glycosyltransferasen zunächst auf den betreffenden Seryl- bzw. Threonylrest der Peptidkette, danach auf das wachsende Saccharid. Substrate sind in jedem Fall die Nucleosiddiphosphat-Derivate der jeweiligen Zucker.

17

548

Kapitel 17 · Biosynthese von Kohlenhydraten

17.3.4

Biologische Bedeutung der Proteinglycosylierung sowie der Glycoproteine

Die Glycosylierung von Proteinen ist die häufigste Proteinmodifikation. Glycoproteine kommen besonders in eukaryoten Zellen vor, finden sich aber auch in Archaebakterien und Viren. Sie sind häufig sezernierte Proteine bzw. Membranproteine, wobei dann der Kohlenhydratanteil auf die extrazelluläre Seite gerichtet ist. Die von Glycoproteinen ausgeübten Funktionen sind vielfältig und hängen ganz überwiegend vom jeweiligen Proteinanteil ab.

4

Sezernierte Proteine. Mit Ausnahme des Albumins sind

alle im Blutplasma vorkommenden Proteine Glycoproteine. Sie dienen im Blutplasma 4 als Immunglobuline der körpereigenen Abwehr 4 als Bindeproteine für Vitamine, Lipide usw. dem Transport im Plasma 4 als Hormone der extrazellulären Signalübertragung sowie 4 als Plasmaenzyme dem Blutgerinnungs-, Fibrinolyseoder Komplementsystem

4

Extrazelluläre Matrix. Glycoproteine der extrazellulären

Matrix sind Kollagen bzw. Elastin. In Form von Mucinen wirken Glycoproteine als Schmiermittel sowie wichtige Schutzfaktoren auf epithelialen Oberflächen. Membranglycoproteine. Die Funktionen von Membran-

glycoproteinen sind vielfältig. Sie bilden u.a. 4 Rezeptoren für extrazelluläre Liganden, z.B. für Hormone, Cytokine und Wachstumsfaktoren 4 Adhäsionsmoleküle für Zell-Zell- bzw. Zell-MatrixWechselwirkungen sowie 4 Transportproteine

17

Obwohl die Biosynthese der Heteroglycan-Bestandteile von Glycoproteinen vom Organismus einen besonderen Aufwand verlangt (für jede glycosidische Bindung wird ein spezifisches Enzym benötigt), weiß man über die eigentlichen Funktionen des Saccharidanteils von Glycoproteinen relativ wenig. Folgende Tatsachen sind gesichert: 4 Die vollständige Abtrennung der Glucosereste während des Trimmens (7 o.) ist nur bei korrekt gefalteten Proteinen möglich. Einzelne Glucosylreste an fehlgefalteten Glycoproteinen dienen noch im rauen endoplasmatischen Retikulum als Retentionssignale, die eine erneute Wechselwirkung des Glycoproteins mit Chaperonen auslösen, sodass sich die korrekte Faltung einstellen oder das fehlgefaltete Protein abgebaut werden kann (7 Kap. 9.2.1) 4 Von besonderer Bedeutung sind die terminalen Sialinsäurereste. Werden diese von im Blutplasma zirkulie-

4

4

4

renden Glycoproteinen abgespalten, so werden sie sehr rasch von der Leber aufgenommen und abgebaut, da Hepatozyten einen spezifischen Rezeptor für Oligosaccharidketten mit einem terminalen Galactoserest besitzen, den sog. Asialoglycoprotein-Rezeptor. Somit erkennen Hepatozyten sialinsäurefreie Glycoproteine. Auch intakte Zellen, z.B. Erythrozyten werden nach Verlust der terminalen Sialinsäurereste ihrer Zelloberflächenkomponenten von Kupfferzellen der Leber oder Milzmakrophagen phagozytiert Einige Mikroorganismen und Viren benutzen sialinsäurehaltige Membrankomponenten der Wirtszellen als Eintrittspforte. Das Hämagglutinin des InfluenzaVirus verwendet derartige Komponenten zum Andocken an die Epithelzellen des Respirationstraktes. Diese Viren verfügen als weiteres Protein über eine Neuraminidase. Diese entfernt Sialinsäuren, die während der Infektion auch an Virusproteine angehängt werden. Damit wird die Autoagglutinierung der Nachkommenviren über das Hämagglutinin verhindert. Hemmstoffe dieser Neuraminidase sind potente Arzneimittel für die Therapie der Influenza Der Oligosaccharidanteil beeinflusst häufig die biologische Aktivität von Glycoproteinhormonen. Entfernt man z.B. die Kohlenhydratketten des Choriongonadotropins (7 Kap. 27.6.9), so verhält sich das deglycosylierte Hormon noch gegenüber den entsprechenden Antikörpern wie ein natives Hormon und bindet mit derselben Kinetik und Affinität an die spezifischen Rezeptoren der Zielzellen. Es zeigt jedoch keine biologische Wirkung mehr. Ähnliche Untersuchungen sind mit dem thyreotropen Hormon (7 Kap. 27.2) durchgeführt worden Oligosaccharidketten dienen als Erkennungsregionen und sind für die Verteilung synthetisierter Proteine auf intrazelluläre Organellen (7 Kap. 9.2) wichtig. Glycoproteine, die am äußersten Ende des Kohlehydratrestes Mannose-6-phosphat tragen, werden in Lysosomen aufgenommen (7 Kap. 6.2.7). Bei Fehlen dieses Mannose-6-phosphat-Restes infolge eines hereditären Enzymdefektes wird dieses Protein nicht in Lysosomen aufgenommen, sondern in großem Umfang von den entsprechenden Zellen sezerniert (I-Zellenkrankheit, 7 Kap. 6) Lectine sind zelluläre Proteine, die spezifische Kohlenhydratstrukturen erkennen und binden können. Dies trifft auch für die sog. Selectine zu, die auf Endothelien vorkommen, Saccharidketten auf Leukozyten bzw. Lymphozyten erkennen und diese Zellen an Endothelien binden Bei einer Reihe von Proteinen des Zellkerns, aber auch des Cytosols ist eine Glycosylierung mit nur einem N-Acetyl-Glucosaminrest an Seryl- oder ThreonylResten beschrieben worden. Da diese Modifikation rasch reversibel ist und häufig an den Stellen erfolgt, die

549 17.3 · Biosynthese von Oligosacchariden und Heteroglycanen

auch phosphoryliert werden können, hat sie mit großer Wahrscheinlichkeit eine regulatorische Bedeutung

17.3.5

Biosynthese der Proteoglycane

Die Variabilität der zugehörigen Proteine ist außerordentlich groß. Bis heute sind mehr als 100 Gene für die in Proteoglycanen vorkommenden sog. Core-Proteine beschrieben worden (7 Kap. 2.1.4). Biosynthese. Das Prinzip der Proteoglycansynthese ist in

Proteoglycane sind essentielle Bestandteile der extrazellulären Matrix. Ihre im Einzelnen spezifischen Funktionen werden in 7 Kapitel 24 besprochen. ! In Proteoglycanen sind Ketten aus repetitiven Disacchariden mit einem Core-Protein verknüpft.

Aufbau und Einteilung. Proteoglycane bestehen aus einem

sog. Core-Protein, an das lange unverzweigte Polysaccharidketten aus repetitiven Disaccharideinheiten (7 Kap. 2.1.3, 2.1.4) geheftet sind. Sie werden in 4 Chondroitinsulfat 4 Dermatansulfat 4 Keratansulfat 4 Heparin und 4 Heparansulfat unterteilt.

. Abb. 17.10 dargestellt:

4 An eine Serylgruppe innerhalb einer spezifischen Sequenz des Core-Proteins wird ein aus vier Monosacchariden bestehendes Oligosaccharid geknüpft. Die Struktur Xyl – Gal – Gal – GlcUA ist allen Proteoglycanen gemeinsam 4 Dieses Tetrasaccharid wird nun durch alternierende Addition von zwei Monosacchariden verlängert, einem Aminozucker und Glucuronat, jeweils als UDP-aktivierte Verbindung (7 Kap. 17.1.1) 4 Im Heparin und Heparansulfat kommt der Aminozucker N-Acetylglucosamin, im Chondroitin- und Dermatansulfat N-Acetyl-Galactosamin vor Durch jeweils unterschiedliche Epimerisierung von Glucuronat zu Iduronat (7 Kap. 17.1.2; 2.1.4) und unterschiedliche Sulfatierung kommen Unterschiede zwischen

. Abb. 17.10. Biosynthese von Proteoglycanen. Xyl = Xylose; Gal = Galactose; GlcUA = Glucuronat; GalNAc = N-Acetyl-Galactosamin; GlcNAc = N-Acetyl-Glucosamin. (Einzelheiten 7 Text)

17

550

Kapitel 17 · Biosynthese von Kohlenhydraten

den einzelnen Saccharidketten zustande. Substrat für die Sulfatierungsreaktionen, die durch gesonderte Enzymaktivitäten katalysiert werden, ist 3ⴕ-Phosphoadenosyl-5ⴕPhosphosulfat (PAPS, 7 Kap. 28.7.2). Zusammen mit der großen Zahl unterschiedlicher Core-Proteine entsteht dadurch eine nahezu unüberschaubare Vielzahl von Proteoglycanen. Die Proteoglycan-synthetisierenden Enzyme sind im endoplasmatischen Retikulum oder Golgi-Apparat lokalisiert.

17.3.6

Biosynthese der Hyaluronsäure

! Hyaluronsäure ist ein proteinfreies Glycosaminoglycan besonderer Größe.

Aufbau und Vorkommen. Hyaluronsäure ist ein Hetero-

glycan, in dem Glucuronat und N-Acetylglucosamin alternierend vorkommen und eine lineare Struktur bilden (7 Kap. 2.1.4). Die Zahl der repetitiven Disaccharide kann bei über 30000 liegen, woraus sich eine Molekülmasse von mehr als 107 Da ergibt. Hyaluronat kommt in tierischen Geweben ubiquitär vor und bildet einen wichtigen Bestandteil der extrazellulären Matrix, wird jedoch auch von verschiedenen Bakterien als Bestandteil ihrer Zellwand gebildet. Seine Funktionen sind vielfältig: 4 Es moduliert die Zellwanderung und Differenzierung während der Embryogenese 4 reguliert die Organisation der extrazellulären Matrix und 4 nimmt an der Metastasierung, der Wundheilung und der Entzündung teil In verschiedenen Geweben variiert die Halbwertszeit von Hyaluronsäure von weniger als einem Tag in der Epidermis bis zu 1–3 Wochen im Knorpel.

17

Biosynthese. Hyaluronsäure enthält kein Protein und ihre Biosynthese unterscheidet sich grundsätzlich von der der Proteoglycane. Die repetitiven Disaccharideinheiten werden Schritt für Schritt in Form ihrer Nucleosiddiphosphat aktivierten Monosaccharide an die wachsende Zuckerkette angeheftet. Die hierfür verantwortliche HyaluronatSynthase verfügt über zwei Bindungsstellen für die beiden UDP-Monosaccharide. Beim Menschen kommen drei unterschiedliche Hyaluronat-Synthasen vor, die untereinander beträchtliche Ähnlichkeiten aufweisen. Sie sind mit sieben Transmembranhelices in der Plasmamembran verankert, das aktive Zentrum ist zum Cytosol gerichtet. Über die Funktion von Proteoglycanen 7 auch Kapitel 2 und 24.

17.3.7

Penicillin und die Glycopeptidbiosynthese der bakteriellen Zellwand

Penicillin (. Abb. 17.11) ist das erste Antibiotikum, welches zur Bekämpfung von Infektionskrankheiten eingesetzt werden konnte. Der bakteriostatische Effekt des Penicillins beruht auf einer Hemmung der Biosynthese der bakteriellen Zellwand. Diese auch als Murein (7 Kap. 2.1.4) bezeichnete Struktur stellt ein netz- oder käfigartiges Makromolekül mit Glycopeptidstruktur dar. Es besteht aus einer linearen Kette eines repetitiven Disaccharids aus N-Acetyl-Glucosamin und N-Acetyl-Muraminsäure. Die N-Acteyl-Muraminsäurereste sind covalent mit je einem Tetrapeptid der Struktur Ala – D-Gln – Lys – D-Ala verknüpft. Pentaglycinbrücken zwischen dem Lysylrest in Position 3 des einen Tetrapeptides und dem Alanylrest in Position 4 des nächstfolgenden sind für die Quervernetzung zwischen den Zuckerketten verantwortlich (. Abb. 17.12a). Wie Jack Strominger zeigen konnte, hemmt Penicillin die letzte Reaktion der MureinBiosynthese, nämlich die Quervernetzung. Diese Reaktion wird durch das Enzym Glycopeptid-Transpeptidase, das einen für die Reaktion essentiellen Serylrest besitzt, katalysiert und läuft in folgenden Teilschritten ab (. Abb. 17.12a): 4 An die N-Acetyl-Muraminsäurereste wird zunächst nicht das spätere Tetrapeptid, sondern ein um ein D-Alanin verlängertes Peptid aus insgesamt 5 Aminosäuren synthetisiert. Es hat die Struktur Ala – D-Gln – Lys – D-Ala – D-Ala (in . Abb. 17.12a hervorgehoben) 4 Das Enzym Glycopeptid-Transpeptidase greift die Peptidbindung zwischen den zwei D-Alaninresten des an die Zuckerkette geknüpften Peptids an. Unter Abspaltung des terminalen D-Alanins wird ein AcylEnzym-Zwischenprodukt gebildet. (. Abb. 17.12b) 4 Die so entstandene Esterbindung zwischen Alanin und Enzym wird durch die terminale Aminogruppe des Pentaglycins gespalten. Dabei wird das Enzym regeneriert und die für die Quervernetzung verantwortliche Peptidbindung gebildet Penicillin ist ein außerordentlich wirksamer Inhibitor der Glycopeptid-Transpeptidase. Der für alle Penicillin-Antibiotika typische, sehr reaktive β-Lactamring ähnelt in seiner Raumstruktur der terminalen D-Ala-D-Ala-Einheit. Aus diesem Grund ist das Penicillin ein gutes Substrat der Glycopeptid-Transpeptidase. Mit Hilfe ihrer reaktiven OH-Gruppe spaltet sie den E-Lactamring und bildet einen Penicilloyl-Enzym-Komplex, der die Glycopeptid-Transpeptidase irreversibel inaktiviert und damit die Biosynthese der bakteriellen Zellwand verhindert (. Abb. 17.13).

551 17.3 · Biosynthese von Oligosacchariden und Heteroglycanen

. Abb. 17.11. Das Antibiotikum Penicillin. Penicillin besteht aus einem Thiazolidinring, an den ein viergliedriger E-Lactamring geknüpft ist. Dieser trägt zusätzlich eine variable Gruppe, z.B. eine Benzylgruppe beim Benzyl-Penicillin

. Abb. 17.13. Struktur des enzymatisch inaktiven PenicilloylEnzym-Komplexes. Dieser Komplex kann nicht mehr gespalten werden, sodass das Enzym irreversibel inaktiviert wird

Infobox

. Abb. 17.12a,b. Mechanismus der Biosynthese des Mureinmoleküls. a Das Mureinmolekül ist ein Glycopeptid und besteht aus einer linearen Sequenz eines repetitiven Disaccharids. An jeden zweiten Zucker ist ein Tetrapeptid geknüpft. Die Tetrapeptide sind über Pentaglycinketten quervernetzt. Diese Quervernetzung stellt den letzten Schritt der Mureinbiosynthese dar. b Für die Quervernetzung ist die Glycopeptid-Transpeptidase verantwortlich. Das Enzym reagiert zunächst mit den an die Zuckerreste geknüpften Peptiden, die teminal zunächst mit einen Dialanylrest synthetisiert werden. Die die beiden Alaninreste verknüpfende Peptidbindung wird durch das Enzym unter Bildung eines Acyl-Enzym-Zwischenproduktes gespalten, das anschließend durch die Aminogruppe des Pentaglycinpeptides unter Bildung der Quervernetzung angegriffen wird. G = N-Acetyl-Glucosamin; M = N-Acetyl-Muraminsäure (Einzelheiten 7 Text)

Penicillin: »That is funny!« Der englische Mikrobiologe Alexander Fleming (1881–1955) hatte 1922 das Lysozym entdeckt. Danach arbeitete er weiter auf der Suche nach einer Bakterien tötenden Substanz. 1928 erhielt er den Auftrag, einen Handbuchartikel über Staphylokokken zu schreiben. Dazu untersuchte er im Auflichtmikroskop Staphylokokkenkolonien, die er in Petrischalen auf Gallertnährböden gezüchtet hatte. Die Petrischalen lagen dabei längere Zeit unbedeckt unter dem Mikroskop, öfters wurden durch den Luftzug Schimmelpilze auf die Nährböden verfrachtet. Das war bekannt. Er klagte seinem Kollegen Melvin Pryce »Immer fällt etwas aus der Luft herein«, ergriff eine solche Schale und wollte sie herzeigen. Plötzlich hielt er inne, blickte lange auf die Bakterienkolonie und sagte dann die historischen Worte »That is funny!« In dieser Schale war der Nährboden ebenso mit Schimmel bedeckt wie in den anderen, aber hier waren rings um den Schimmelpilz die Staphylokokkenkolonien zugrunde gegangen. Fleming versuchte den Pilz zu bestimmen und kam zu dem Schluss, es sei Penicillium chrysogenum. Erst zwei Jahre später wurde dieser Schimmelpilz in den USA als Penicillium notatum identifiziert. Er wurde zum Ausgangspunkt für die Penicillinproduktion. 1945 erhielt Sir Alexander Fleming den Nobelpreis für Medizin, gemeinsam mit dem Biochemiker Ernst Boris Chain und dem Pathologen Sir Howard Walter Florey.

17

552

Kapitel 17 · Biosynthese von Kohlenhydraten

17.3.8

Pathobiochemie: Defekte des Aufbaus von Zuckerstrukturen

Glycoproteine, Proteoglycane und Hyaluronsäure gehören zu den am vielfältigsten modifizierten Makromolekülen vielzelliger Organismen. Sie haben für das Leben essentielle Funktionen. Im Prinzip kann jedes der vielen bei der Biosynthese der entsprechenden Moleküle beteiligte Enzym von einer Mutation betroffen sein und dann schwere Krankheitsbilder auslösen. Durch die Möglichkeiten der modernen Molekularbiologie ist die gezielte Ausschaltung einzelner für die Biosynthese verantwortlicher Gene möglich geworden (7 Kap. 7.4.4). Sehr häufig ergeben sich dabei Missbildungen, die bereits in der Embryonalzeit tödlich sind. . Tabelle 17.1 fasst einige beim Menschen vorkommende Erkrankungen zusammen, die auf Enzymdefekten der Heterosaccharidsynthese beruhen. Im Allgemeinen handelt es sich um zwar seltene, aber äußerst schwer verlaufende Krankheitsbilder, die mit schweren Entwicklungsstörungen der Betroffenen einhergehen und meist tödlich verlaufen.

. Tabelle 17.1. Kongenitale Defekte der Heterosaccharidsynthese (Auswahl) Name

Betroffener Stoffwechselweg

Kapitel

Kongenitale Glycosylierungsdefekte (CGD´s)

Biosynthese der Mannose

17.2.1

Biosynthese von Dolicholphosphat -gebundenen Oligosacchariden

17.3.2

Fehlerhaftes Trimmen der N-glycosidisch verknüpften Oligosaccharide

17.3.2

Störung der Mannose6-phosphat Bildung (I-Zellkrankheit)

6.2.7

Defekte der Glycosaminoglycan-Sulfatierung (Chondrodystrophien)

Sulfattransport

28.7.2

Mucopolysaccharidosen

Sulfataktivierung

28.7.2

Sulfatierung der Glycosaminoglycan-Ketten

17.3.5

Defekte des Abbaus von Glycosaminoglycanen

6.2.5

In Kürze Heteroglycane kommen vor in 4 den Kohlenhydratketten der Glycoproteine 4 den repetitiven Disaccharidsequenzen von Proteoglycanen 4 der Hyaluronsäure Der Biosyntheseweg der Heteroglycane verläuft jeweils unterschiedlich: 4 Für die Biosynthese von N-glycosidisch verknüpften Oligosaccharidketten in Glycoproteinen werden Grundstrukturen der Saccharideinheiten an Dolicholphosphat synthetisiert und dann in einem Stück auf die Peptidkette übertragen. O-glycosidisch verknüpfte Zuckerketten werden dagegen Schritt für

Literatur

17

Lander AD, Selleck SB (2000) The Elusive Functions of Proteoglycans: In Vivo Veritas. J Cell Biol 148:227–232 Parodi AJ (2000) Protein glucosylation and its role in protein folding. Annu Rev Biochem 69:69–93 Prydz K, Dalen KT (2000) Synthesis and Sorting of proteoglycans. J Cell Sci 113:193–205 Pummill PE, DeAngelis PL (2002) Evaluation of Critical Structural Elements of UDP-Sugar Substrates and Certain Cysteine Residues of a Vertebrate Hyaluronan Synthase. J Biol Chem 277:21610–21616 Schauer R (2004) Victor Ginsburg’s influence on my research of the role of sialic acids in biological recognition. Arch Biochem Biophys 426:132–141

Schritt unter Verwendung der Nucleosiddiphosphataktivierten Zucker durch spezifische Enzyme auf das jeweilige Protein übertragen 4 Proteoglycane werden an sog. Core-Proteinen synthetisiert. Dieses erhält zunächst eine Tetrasaccharideinheit, an die dann die repetitiven Disaccharideinheiten angefügt werden. Diese werden durch Epimerisierung und Sulfatierung noch modifiziert 4 Hyaluronsäure enthält kein Core-Protein und wird durch die Hyaluronat-Synthase direkt unter Verwendung der aktivierten Monosaccharide synthetisiert 4 Für die genannten Biosynthesen ist die Aktivierung des jeweiligen Monosaccharides zu einem NDP-Monosaccharid notwendig

Taylor ME, Drickamer K (2003) Introduction to Glycobiology. Oxford University Press Tukey RH, Strassburg CP (2001) Genetic Multiplicity of the Human UDPGlucuronosyltransferases and Regulation in the Gastrointestinal Tract. Mol Pharmacol 59:405–414 Yoshida M, Itano M, Yamada Y, Kimata K (2000) In Vitro Synthesis of Hyaluronan by a Single Protein Derived from Mouse HAS1 Gene and Characterization of Amino Acid Residues Essential for the Activity. J Biol Chem 275:497–506 Links im Netz 7 www.lehrbuch-medizin.de/biochemie

18 18

Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin Georg Löffler

18.1

Stoffwechsel der Phosphoglyceride – 554

18.1.1 18.1.2

Biosynthese der Phosphoglyceride – 554 Abbau der Phosphoglyceride – 558

18.2

Stoffwechsel der Sphingolipide – 559

18.2.1 18.2.2 18.2.3

Biosynthese der Sphingolipide – 559 Abbau der Sphingolipide – 561 Biosynthese von Membranen – 562

18.3

Stoffwechsel der Isoprenlipide und des Cholesterins

18.3.1 18.3.2 18.3.3

Biosynthese des Cholesterins – 564 Stoffwechsel und Abbau des Cholesterins – 568 Regulation der Cholesterinbiosynthese – 568

18.4

Lipide und Signalmoleküle – 571

18.5

Transport der Lipide im Blut – 572

18.5.1 18.5.2

Aufbau der Lipoproteine – 572 Stoffwechsel der Lipoproteine – 575

18.6

Pathobiochemie – 580

18.6.1 18.6.2

Pathobiochemie der Phosphoglyceride und Sphingolipide – 580 Pathobiochemie des Lipoproteinstoffwechsels – 581

Literatur

– 583

– 564

554

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

> > Einleitung Eine wichtige Funktion von Lipiden ist ihre Beteiligung am Aufbau sämtlicher zellulärer Membranen, wodurch die Existenz von Zellen ermöglicht wird, deren Inneres gegen die Außenwelt abgeschirmt ist. Für diese Aufgabe sind amphiphile Lipide wie Phosphoglyceride und Sphingolipide besonders geeignet, die neben den für Lipide typischen hydrophoben Alkanketten auch über hydrophile, polare und geladene Gruppen verfügen und somit die für alle zellulären Membranen typischen Doppelschichten ausbilden können. Auch Cholesterin ist ein essentieller Bestandteil aller tierischen Membranen. Lipide sind darüber hinaus Ausgangspunkt für die Biosynthese einer großen Zahl biologisch aktiver Moleküle. So leiten sich vom Cholesterin sämtliche Steroidhormone ab, aus Phosphoglyceriden und Sphingolipiden werden wichtige Signalmoleküle gebildet, Derivate ungesättigter Fettsäuren bilden die Gruppe der als Eikosanoide bezeichneten Gewebshormone. Diesen vielfältigen Funktionen der Lipide steht ein Problem gegenüber, das gelegentlich pathobiochemische Konsequenzen hat. Lipide müssen im Organismus im Blut und der extrazellulären Flüssigkeit transportiert werden, was wegen der wässrigen Natur dieser Transportmedien naturgemäß schwierig ist. Der Transport erfolgt in Form von Lipoproteinen, Komplexen aus spezifischen Proteinen mit definierten Mischungen der einzelnen Lipide. Überschreiten derartige Lipoproteine die normalen Konzentrationen, so kann es zu Ablagerungen von Lipiden in Blutgefäßen, zur Verengung des Lumens der Blutgefäße und damit zu einer Reihe bedrohlicher Krankheitsbilder kommen.

18.1

Stoffwechsel der Phosphoglyceride

Unter dem Begriff amphiphile Moleküle werden Verbindungen zusammengefasst, die sich sowohl durch hydrophile als auch durch hydrophobe Eigenschaften auszeichnen. Phosphoglyceride und Sphingolipide gehören, wie schon in 7 Kapitel 2.2 ausgeführt, in die Kategorie der amphiphilen Lipide, da ihre Kopfgruppen hydrophil, die Alkanketten ihrer Fettsäurereste jedoch hydrophob sind. Dies erklärt ihre besondere Bedeutung für die Synthese von zellulären Membranen, deren strukturelle Basis eine Lipiddoppelschicht ist (7 Kap. 2.2.6). In Membranen vorkommende Lipide sind 4 Phosphoglyceride 4 Sphingolipide und 4 Cholesterin Unter dem gelegentlich verwendeten Begriff der Phospholipide fasst man die phosphathaltigen amphiphilen Lipide zusammen. Es handelt sich dabei um die Phosphoglyceride und das Sphingomyelin.

18.1.1

Biosynthese der Phosphoglyceride

! Für die Biosynthese von Phosphoglyceriden werden CDP-aktivierte Zwischenprodukte benötigt.

18

In den ersten Reaktionen gleichen sich die Biosynthesewege von Phosphoglyceriden und Triacylglycerinen. Zunächst muss durch Veresterung von zwei Hydroxylgruppen des D-Glycerophosphats mit zwei Molekülen Acyl-CoA eine Phosphatidsäure hergestellt werden (7 Kap. 12.1.4). Aus ihr entsteht durch Abspaltung von anorganischem Phosphat ein 1,2-Diacylglycerin.

Dieses verfügt über eine freie OH-Gruppe, an die über eine Phosphorsäurediester-Bindung die für Phosphoglyceride typischen hydrophilen Gruppen geknüpft werden. Im Einzelnen handelt es sich dabei um 4 Cholin 4 Ethanolamin 4 Serin oder 4 den zyklischen Alkohol Inositol Diese Verbindungen müssen jeweils über eine Phosphorsäurediesterbindung mit dem Diacylglycerin verknüpft werden. Die hierzu verwendeten Biosynthesewege unterscheiden sich beträchtlich (. Abb. 18.1). Im Fall der Biosynthese von Phosphatidylcholin bzw. -ethanolamin werden zunächst die stickstoffhaltigen Verbindungen Cholin bzw. Ethanolamin aktiviert. Zu diesem Zweck werden sie in einer ATP-abhängigen Reaktion phosphoryliert, sodass Phosphorylcholin bzw. Phosphorylethanolamin entstehen. Ähnlich der Aktivierung bei der Biosynthese von Zuckern (7 Kap. 17.1.1) wird jetzt im nächsten Schritt ein Nucleotidderivat von Cholin bzw. Ethanolamin hergestellt. Phosphorylcholin bzw. Phosphorylethanolamin reagieren hierbei unter Pyrophosphat-Abspaltung mit Cytidintriphosphat (CTP), sodass Cytidindiphosphatcholin bzw. Cytidindiphosphatethanolamin (CDP-Cholin, CDP-Ethanolamin) entstehen. Das dabei beteiligte Enzym ist die CTP-Phosphocholin- (bzw. Phosphoethanolamin-)Cytidyltransferase. Im letzten Schritt der Biosynthese reagieren diese »aktivierten« Verbindungen mit dem 1,2-Diacylglycerin, sodass unter CMP-Abspaltung Phosphatidylcholin bzw. Phosphatidylethanolamin gebildet werden. Bei der Biosynthese von Phosphatidylinositol wird nicht der Alkohol, sondern das Diacylglycerin aktiviert. Die Phosphatidsäure reagiert mit Cytidintriphosphat, wobei wiederum unter Abspaltung von Pyrophosphat ein CDP-

555 18.1 · Stoffwechsel der Phosphoglyceride

. Abb. 18.1. Biosynthese der Phosphoglyceride. (Einzelheiten 7 Text)

18

556

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

Diacylglycerin entsteht. Dieses reagiert unter Abspaltung von CMP mit Inositol, sodass Phosphatidylinositol gebildet wird. Damit spielt das CTP bei der Biosynthese der Phosphoglyceride eine ähnlich entscheidende Rolle wie das UTP bei der Biosynthese von Polysacchariden (7 Kap. 17.1.1). Entsprechende Nucleotidderivate müssen als aktivierte Zwischenprodukte vorliegen, damit die Biosynthese erfolgen kann. Ein Phosphoglycerid, das in besonders großer Menge in Mitochondrienmembranen, daneben aber auch in der Wand von Bakterien vorkommt, ist das Diphosphatidylglycerin oder Cardiolipin (7 Kap. 2.2.3). Es entsteht durch Reaktion von CDP-Diacylglycerin mit D-Glycerophosphat unter Bildung von Phosphatidylglycerophosphat und Abspaltung von CMP. Im Phosphatidylglycerophosphat liegt nun eine Phosphatidsäure vor, bei der der Phosphatrest als Diester mit einem Molekül Glycerophosphat verbunden ist. Durch hydrolytische Abspaltung des Phosphats entsteht Phosphatidylglycerin, welches mit einem weiteren Molekül CDP-Diacylglycerin unter Bildung des Diphosphatidylglycerins reagiert (. Abb. 18.2). ! Phosphoglyceride können ineinander überführt werden.

. Abb. 18.2. Biosynthese von Cardiolipin

Phosphoglyceride stellen integrale Bauteile aller biologischen Membranen dar. Dabei ist das Verhältnis der verschiedenen Phosphoglyceride untereinander von großer Bedeutung für den Funktionszustand der jeweiligen Membranen. Um jederzeit ausreichende Mengen von Phosphoglyceriden zur Verfügung zu haben, besteht außer der

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. Abb. 18.3. Umwandlungen der N-haltigen Phosphoglyceride. SAM = S-Adenosyl-Methionin; SAH = S-Adenosyl-Homocystein

557 18.1 · Stoffwechsel der Phosphoglyceride

. Abb. 18.4. Acylierungszyklus des Phosphatidylcholins. Durch eine Phospholipase wird Phosphatidylcholin in Lysophosphatidylcholin umgewandelt, welches wiederum mit Acyl-CoA acyliert werden kann. R1, R2, R3 = Alkanketten von Fettsäuren

oben geschilderten de novo-Synthese aus den einzelnen Bauteilen die Möglichkeit der Umwandlung einzelner Phosphoglyceride ineinander, was in . Abb. 18.3 dargestellt ist. Hier nimmt das Phosphatidylethanolamin eine zentrale Position ein. Es kann durch dreifache Methylierung am Stick-

stoff in Phosphatidylcholin umgewandelt werden. Der Reaktionspartner ist das S-Adenosylmethionin (7 Kap. 13.6.4), das dabei in Adenosylhomocystein umgewandelt wird. Durch Austausch von Ethanolamin gegen Serin kann aus Phosphatidylethanolamin Phosphatidylserin entstehen. In einer weiteren Reaktion kann schließlich Phosphatidylserin decarboxyliert werden, wobei Phosphatidylethanolamin entsteht. In manchen Organen wie Nervengewebe oder Leber haben Phosphoglyceride einen besonders hohen Umsatz. Dieser wird dann nicht nur durch de novo-Synthese aus den einzelnen Bauteilen oder durch Überführung einzelner Phosphoglyceride ineinander gedeckt, sondern zum Teil auch durch Resynthese aus nur teilweise abgebauten Phosphoglyceriden betrieben. Diesem Zweck dient der in . Abb. 18.4 am Beispiel des Phosphatidylcholins dargestellte Acylierungszyklus. Unter Einwirkung einer Phospholipase (s.u.) entsteht das entsprechende Lysophosphoglycerid, in diesem Fall das Lysophosphatidylcholin. Dieses kann durch direkte Acylierung mit Acyl-CoA wieder zu Phosphatidylcholin umgewandelt werden. Auf diese Weise ist ein rascher Austausch von Acylresten in Phosphoglyceriden möglich. Ein weiteres, den Acylaustausch katalysierendes Enzym ist die im Blut vorkommende Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT), die folgende Reaktion katalysiert:

(Über die physiologische Bedeutung der LCAT 7 Kap. 18.5.1, 18.5.2). ! Ätherlipide sind Phosphoglyceride mit besonderen chemischen Eigenschaften.

. Abb. 18.5. Biosynthese von 1-Alkyl-Phosphatidylcholin und des zugehörigen Plasmalogens. (Einzelheiten 7 Text)

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558

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

. Abb. 18.6. platelet activating factor (PAF = 1-Octadecyl-2-AcetylPhosphatidylcholin)

Für die Biosynthese der Ätherlipide wird ein grundsätzlich anderer Weg benutzt (. Abb. 18.5). Dihydroxyacetonphosphat wird zunächst in Position 1 mit Acyl-CoA acyliert. In einer in ihren molekularen Einzelheiten noch nicht völlig geklärten Reaktion wird die Esterbindung mit einem langkettigen Alkohol (meist C16 oder C18) unter Einführung einer Ätherbindung gespalten. Nach Reduktion der Ketogruppe erfolgt die Acylierung sowie die Anheftung einer Cholin- bzw. Ethanolamin-Gruppe. Derartige Alkylphosphoglyceride können durch Einführung einer der Ätherbindung vicinalen Doppelbindung in Alkenylphosphoglyceride oder Plasmalogene umgewandelt werden. Über die physiologische Bedeutung von Ätherlipiden, die beispielsweise im Zentralnervensystem, dem Herzmuskel oder der Skelettmuskulatur 20–30% der Phospholipide stellen, ist wenig bekannt. Der in . Abb. 18.6 dargestellte Blutplättchen aktivierende Faktor platelet activating factor (PAF) ist ein derartiges Ätherlipid und löst bereits in einer Konzentration von 10–11 mol/l (!) die Aggregation von Thrombozyten aus. Neben dieser Wirkung ist er als Mediator an Entzündungsreaktionen sowie an der Regulation des Blutdrucks beteiligt.

18.1.2

Abbau der Phosphoglyceride

Für den Abbau von Phosphoglyceriden sind in allen Geweben vorkommende Phospholipasen verantwortlich. . Abbildung 18.7 zeigt dies am Beispiel des Phosphatidylcholin-Abbaus. In einer ersten, durch Phospholipase A2 katalysierten Reaktion wird die am C-Atom 2 (E-C-Atom) des Glycerins veresterte Fettsäure hydrolytisch abgespalten. Dabei entsteht Lysophosphatidylcholin. Dieses wird durch eine Lysophospholipase weiter in Glycerinphosphorylcholin gespalten. Durch den Angriff einer spezifischen Esterase entstehen schließlich D-Glycerophosphat und Cholin.

18 . Abb. 18.7. Abbau von Phosphatidylcholin

. Abb. 18.8. Spaltstellen der Phospholipasen A1, A2, C und D am Phosphatidylcholin. Als Phospholipase B wird ein Gemisch aus den Phospholipasen A1 und A2 bezeichnet

559 18.2 · Stoffwechsel der Sphingolipide

Extrazelluläre Phospholipasen des Typs A kommen außer im Intestinum u.a. im Bienen- und Schlangengift vor. Unter ihrer Einwirkung entstehende Lysophosphoglyceride, besonders Lysophosphatidylcholin, hämolysieren die Membranen der roten Blutkörperchen. Ein Teil der biologischen Wirkung der genannten Gifte lässt sich mit der in großem Umfang stattfindenden Lysophosphoglycerid-Bildung in den biologischen Membranen erklären. Am intrazellulären Abbau von Phosphoglyceriden beteiligte Phospholipasen sind in . Abbildung 18.8 dargestellt.

4 Die Phospholipasen A1 bzw. A2 spalten die entsprechenden Fettsäurereste ab 4 Phospholipasen des Typs C spalten die Phosphorsäurediester-Bindung zum Glycerinrest 4 Phospholipasen des Typs D spalten die Phosphorsäurediester-Bindung zur hydrophilen Kopfgruppe Neben dieser Spezifität hinsichtlich der gespaltenen Esterbindung (Stellungsspezifität) zeigen die verschiedenen Phospholipasen auch eine hohe Spezifität für die jeweils durch ihre Kopfgruppen charakterisierten Phosphoglyceride (7 Kap. 18.4).

In Kürze Phosphoglyceride sind für den Aufbau aller zellulären Membranen unerlässlich. Für ihre Biosynthese 5  reagieren Diacylglycerine mit CDP-aktiviertem Cholin bzw. Ethanolamin unter Bildung von Phosphatidycholin bzw. -ethanolamin und 5 reagiert Inositol mit CDP-aktiviertem Diacylglycerin zu Phosphatidylinositol

18.2

Stoffwechsel der Sphingolipide

18.2.1

Biosynthese der Sphingolipide

! Sphingolipide enthalten als Alkohol Sphingosin.

1874 entdeckte der deutsche Arzt Johann Ludwig Thudichum in Nervengewebe eine neue Lipidart, die er wegen ihrer für ihn rätselhaften Funktion nach der griechischen Sagenfigur Sphinx als Sphingolipide bezeichnete. In den Sphingolipiden ist das Glycerin der Phosphoglyceride durch den Aminodialkohol des Sphingosin ersetzt (über die Zusammensetzung der verschiedenen Sphingolipide 7 Kap. 2.2.4). Die Sphingolipidbiosynthese erfolgt im endoplasmatischen Retikulum sowie im Golgi-Apparat, wobei allerdings Sphingosin nicht als Zwischenprodukt auftritt. Zunächst wird nämlich an der cytosolischen Seite des endoplasmatischen Retikulums als gemeinsames Zwischenprodukt Ceramid synthetisiert (. Abb. 18.9): 4 Palmityl-CoA reagiert in einer Pyridoxalphosphat-abhängigen Reaktion unter CO2-Abspaltung mit Serin, wobei 3-Ketosphinganin entsteht 4 Dieses wird an der Ketogruppe reduziert und reagiert dann mit Acyl-CoA, wobei das Dihydroceramid entsteht 4 In einer FAD-abhängigen Reaktion wird dieses zu Ceramid oxidiert Ceramid ist der Ausgangspunkt für die Biosynthese aller Sphingolipide, die z.T. im endoplasmatischen Retikulum, z.T. im Golgi-Apparat stattfindet:

Die amphiphilen Lipide in Membranen befinden sich in einem dynamischen Zustand. Sie unterliegen einem permanenten Umbau, der auch ihren Abbau durch Phospholipasen beinhaltet. Für jede der 4 Esterbindungen von Phosphoglyceriden kommen jeweils spezifische Phospholipasen vor.

4 Sphingomyeline werden nach dem Transfer von Ceramid in das Lumen des Golgi-Apparats synthetisiert, wobei zwei Möglichkeiten bestehen (. Abb. 18.10). Entweder reagiert Ceramid mit CDP-Cholin unter CMP-Abspaltung oder es findet alternativ eine Austauschreaktion mit Phosphatidylcholin statt, wobei Sphingomyelin und Diacylglycerin entstehen 4 Die Biosynthese der Ganglioside, die in besonders hohen Konzentrationen im Nervensystem vorkommen, findet im Golgi Apparat statt. Zunächst wird an der cytosolischen Seite des Golgi-Apparats ein aus UDPGlucose stammender Glucosylrest an das Ceramid geheftet. Das entstandene Glucosyl-Ceramid wird anschließend auf die luminale Seite des Golgi-Apparats transloziert, wo die weitere Anheftung von Monosaccharidresten zur Biosynthese von Gangliosiden erfolgt (. Abb. 18.11). Wie bei den Heteropolysacchariden dienen UDP-aktivierte Zucker, im Fall der N-Acetylneuraminsäure die CMP-N-Acetylneuraminsäure, als aktivierte Bausteine 4 Nach der Translokation von Ceramid auf die luminale Seite des Golgi-Apparats werden Galactosyl-Cerebroside synthetisiert. Dabei reagiert Ceramid mit UDPGalactose (7 Kap. 17.1.3) unter Abspaltung von UDP. Dabei entsteht das mit Galactose substituierte Sphingolipid, das Cerebrosid (. Abb. 18.12) 4 Für die Sulfatidbiosynthese ist schließlich noch die Einführung eines Sulfatrests, im Allgemeinen an das CAtom 3 der Galactose, notwendig. Für diese Sulfatierung wird das aktive Sulfat 3c-Phosphoadenosin-5cPhosphosulfat (7 Kap. 28.7.2) verwendet

18

560

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

. Abb. 18.10. Biosynthese von Sphingomyelin. Sphingomyelin entsteht aus Ceramid durch Übernahme eines Phosphorylcholinesters. Dieser stammt entweder von CDP-Cholin oder von Phosphatidylcholin

. Abb. 18.9. Biosynthese von Ceramid aus Palmityl-CoA und Serin

18

. Abb. 18.11. Biosynthese von Gangliosiden. Cer = Ceramid; Glc = Glucose; Gal = Galactose; GalNAc = N-Acetyl-Galactosamin; NANA = N-Acetyl-Neuraminsäure. (Einzelheiten 7 Text)

561 18.2 · Stoffwechsel der Sphingolipide

. Abb. 18.12. Biosynthese von Cerebrosid und Sulfatid. PAPS = 3’-Phosphoadenosin-5’-Phosphosulfat, PAMP = 3’-Phosphoadenosin-5’Monophosphat

18.2.2

Abbau der Sphingolipide

! Der Abbau der Sphingolipide erfolgt hauptsächlich in den Lysosomen.

Ähnlich wie die Phosphoglyceride haben auch Sphingolipide einen raschen Umsatz, der die Dynamik der Zellmembranstrukturen widerspiegelt. Für ihren Abbau sind eine Reihe lysosomaler Hydrolasen verantwortlich. Bei Glycosphingolipiden und Gangliosiden erfolgt der Abbau von der Kohlenhydratseitenkette aus, wobei z.B. 4 durch E-Galactosidasen die Galactosylreste 4 durch Neuraminidasen die Neuraminsäurereste sowie 4 durch Hexosaminidasen die acetylierten Galactosaminreste gespalten werden

Bei den Sulfatiden sind spezifische Sulfatidasen für die Sulfatabspaltung verantwortlich. Das Problem, wie die genannten wasserlöslichen Enzyme mit den Sphingolipiden in den Membranen und Membranvesikeln interagieren, wird von der Zelle offensichtlich so gelöst, dass hierfür zusätzliche Sphingolipidaktivatorproteine (SAP’s) benötigt werden. Es handelt sich um Glycoproteine, die die abzubauenden Sphingolipide binden und damit erst den Angriff der oben genannten lysosomalen Hydrolasen ermöglichen. Der Abbau der Sphingomyeline wird durch spezifische Sphingomyelinasen katalysiert, die unter Abspaltung des Phosphorylcholinrests Ceramid bilden (. Abb. 18.13). Man unterscheidet 4 saure Sphingomyelinasen für den lysosomalen Sphingomyelinabbau

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562

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

4 alkalische Sphingomyelinasen, die zu den Verdauungsenzymen des Intestinaltrakts gehören 4 neutrale, membrangebundene Sphingomyelinasen, die in verschiedenen Isoformen vorkommen Das durch Sphingomyelinasen gebildete Ceramid kann durch die Ceramidase deacyliert werden, wobei Sphingosin entsteht (. Abb. 18.13). Nach Phosphorylierung zu Sphingosin-1-phosphat wird dieses durch die Sphingosin-1-phosphat-Lyase zu Palmitaldehyd und Phosphorylcholin gespalten.

18.2.3

Biosynthese von Membranen

! Im glatten endoplasmatischen Retikulum werden Membranlipide und damit alle zellulären Membranen synthetisiert.

Sämtliche für die Phospholipidsynthese benötigten Enzyme sind in den Membranen des glatten endoplasmatischen Retikulums verankert, allerdings bewirkt ihre Lokalisation eine asymmetrische Verteilung der neu synthetisierten Lipide. So ist beispielsweise: 4 die Sphingomyelin-Biosynthese auf der luminalen Seite des ER lokalisiert. Da neu synthetisierte Sphingomyeline in Vesikeln zu ihren Zielmembranen transportiert werden, erscheinen sie nach Membranfusion im äußeren Blatt der Plasmamembran (7 u.) 4 dagegen sind die Enzyme der Phosphoglyceridbiosynthese auf der cytosolischen Seite des ER lokalisiert, sodass die neu synthetisierten Phosphoglyceride bevorzugt auf der cytosolischen Seite der Plasmamembran erscheinen

. Abb. 18.13. Entstehung von Ceramid, Sphingosin und Sphingosin-1-phosphat beim Abbau von Sphingomyelin. (Einzelheiten 7 Text)

18

Diese durch die Topologie der Enzymverteilung vorgegebene Asymmetrie muss der jeder einzelnen Membran entsprechenden Lipidverteilung dadurch angepasst werden, dass einzelne Lipide von einem Blatt der Doppelschicht in das andere wechseln. Weil dabei die polaren Kopfgruppen durch die Alkanphase der Lipiddoppelschicht bewegt werden müssen, tritt dieser Vorgang spontan nur selten auf. Für den benötigten raschen Austausch sorgt im endoplasmatischen Retikulum ein auch als Scramblase (to scramble = verquirlen, vermischen) bezeichnetes Transportprotein (7 u.). ! Lipidtransferproteine und Membranvesikel sind die wichtigsten Transportmöglichkeiten für Membranlipide.

Nachdem das endoplasmatische Retikulum der einzige Ort der Membranbiosynthese ist, ergibt sich die Frage, auf welche Weise die dort synthetisierten Phosphoglyceride in andere Membranen wie die Plasmamembran, die Mitochondrienmembran oder die Membranen des Golgi-Apparats kommen. Die hierfür grundsätzlich in Frage kommenden

563 18.2 · Stoffwechsel der Sphingolipide

. Abb. 18.14. Mechanismen für den Austausch von Phosphoglyceriden zwischen dem endoplasmatischen Retikulum und anderen Membranen. a Transport durch Diffusion; b Transport mit löslichen Carrierproteinen; c Vesikeltransport; d Membranfusion

Mechanismen sind in . Abb. 18.14 zusammengestellt. In Anbetracht der relativ geringen Löslichkeit von Phospholipiden in wässrigen Medien ist die Diffusion von monomeren Phosphoglyceriden wahrscheinlich ein eher seltenes Ereignis. Gut charakterisiert ist jedoch der Austausch von Phospholipiden zwischen der Membran des endoplasmatischen Retikulums und beispielsweise den mitochondrialen Membranen durch Lipidtransferproteine. Diese sind imstande, einzelne Phosphoglyceridmoleküle zu binden und zu den Mitochondrien zu transportieren. Der Austausch zwischen den Membranen des endoplasmatischen Retikulums, des Golgi-Apparats und der Plasmamembran erfolgt über den Transport durch Membranvesikel (7 Kap. 6.2). Einzelne Membranbestandteile lassen sich außerdem noch während der reversiblen Fusion zweier Doppelmembranen austauschen. ! ATP-abhängige Phospholipidtransporter sind für die Asymmetrie der Plasmamembran verantwortlich. . Abbildung 18.15a zeigt die für Plasmamembranen typische asymmetrische Verteilung der Phospholipide. Sphingomyelin ist ganz überwiegend auf dem zur extrazellulären Seite gelegenen Blatt der Lipid-Doppelschicht lokalisiert, Phosphatidylethanolamin, -serin und -inositol dagegen auf dem cytosolischen Blatt. Diese Asymmetrie wird durch spezifische Transporter aufrechterhalten (. Abb. 18.15b):

. Abb. 18.15a,b. Asymmetrische Verteilung von Phosphoglyceriden der Plasmamembran. a Verteilung von Phosphatidylcholin, -serin, -ethanolamin und -inositol sowie Sphingomyelin auf die beiden Seiten der Plasmamembran. b Wirkungsweise von Flippasen, Floppasen und Scramblasen. (Einzelheiten 7 Text)

4 Flippasen sind Phospholipidtransporter, die in einer ATP-abhängigen Reaktion Phospholipide vom äußeren Blatt zum cytosolischen Blatt der Plasmamembran transportieren. Von besonderer Bedeutung hierbei ist die Aminophospholipid-Translocase, die Phosphatidylserin und mit geringerer Aktivität Phosphatidylethanolamin transportiert 4 Floppasen katalysieren dagegen den ATP-abhängigen Transport von Phospholipiden vom inneren zum äußeren Blatt der Plasmamembran. Strukturell gehören sie zur Familie der MDR-Proteine (multi drug resistance proteins) (7 Kap. 6.1.5) 4 Unter dem Begriff Scramblasen fasst man eine Gruppe von nicht-ATP-abhängigen Transportern zusammen, die den Transport in beide Richtungen katalysieren und somit zu einer gleichmäßigen Verteilung der Membranphospholipide führen. Scramblasen kommen im endoplasmatischen Retikulum, aber auch in der Plasmamembran und anderen zellulären Membranen vor. Bisher sind vier verschiedene Scramblasen beschrieben worden, die sich durch unter-

18

564

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

schiedliche Verteilung in den zellulären Membranen auszeichnen Die tatsächliche in einer Zelle vorhandene Asymmetrie der Lipidverteilung wird durch das jeweilige Gleichgewicht der o.g. Transporter bestimmt. Der Zusammenbruch der Asymmetrie hat unterschiedliche Folgen. Er ist z.B.:

4 eine Voraussetzung der Thrombozytenaktivierung (7 Kap. 29.5.2) 4 ein frühes Zeichen der Erythrozytenalterung 4 am Substraterkennungsvorgang von Makrophagen (7 Kap. 29.3.1, 34) oder 4 an der Auslösung der Apoptose beteiligt

In Kürze Ceramid, das aus Palmityl-CoA, Serin und einem Acyl-CoA synthetisiert wird, ist der Ausgangspunkt für die Biosynthese folgender Sphingolipide: 5 Sphingomyelin 5 Cerebroside 5 Sulfatide und 5 Ganglioside Hierbei reagiert Ceramid jeweils mit den entsprechenden aktivierten Bestandteilen.

18.3

Stoffwechsel der Isoprenlipide und des Cholesterins

Vom menschlichen Organismus wird täglich etwa 1 g Cholesterin in Form von Gallensäuren ausgeschieden, eine ebenso große Menge muss infolgedessen nachgeliefert werden. Der größte Teil davon entsteht durch Neusynthese, da bei ausgeglichener Ernährung nur etwa 0,3 g Cholesterin/ Tag mit den Nahrungsmitteln aufgenommen werden. Cholesterin ist ein typisches Produkt des tierischen Stoffwechsels und kommt daher in größeren Mengen nur in Nahrungsmitteln tierischen Ursprungs wie Muskelfleisch, Leber, Hirn und Eigelb vor.

18.3.1

18

Der Sphingolipidabbau erfolgt lysosomal durch entsprechende Hydrolasen, die jeweils spezifisch für die in Sphingolipiden vorkommenden Ester- bzw. Glycosidbindungen sind. Das durch Sphingomyelinasen gebildete Ceramid wird weiter zu Sphingosin und dieses nach Phosphorylierung zu Palmitaldehyd und Phosphorylcholin gespalten. Die Biosynthese der Membranlipide erfolgt in den Membranen des glatten endoplasmatischen Retikulums. Durch z.T. ATP-abhängige Translocasen wird die für jede Membran typische Verteilung von Lipiden im inneren bzw. äußeren Blatt der Doppelschicht eingestellt.

Biosynthese des Cholesterins

In Anbetracht der Tatsache, dass Cholesterin ein essentieller Bestandteil tierischer Membranen ist, muss man davon ausgehen, dass alle Zellen des Organismus zur Cholesterinbiosynthese befähigt sind. Alle Schritte der Cholesterinbiosynthese sind mit Ausnahme der ersten Reaktionen im endoplasmatischen Retikulum der Zellen lokalisiert. Sämtliche C-Atome des Cholesterins stammen vom Acetyl-CoA ab (. Abb. 18.16). Inkubiert man Cholesterin synthetisierende Zellen mit Methyl- bzw. Carboxyl-markiertem Acetat, so findet man, dass sich in dem aus Acetat synthetisierten Cholesterin in sehr regelmäßiger Folge Methyl- und Carboxyl-C-Atome des Acetats abwechseln. Daraus folgt, dass ein lineares, aus Acetylresten aufgebautes Molekül ein Präkursor des Cholesterins ist. Die einzelnen

. Abb. 18.16. Herkunft der C-Atome des Cholesterins. Inkubiert man Cholesterin-synthetisierende Zellen mit Methyl- bzw. Carboxylmarkiertem Acetat, finden sich im Cholesterinmolekül in regelmäßiger Folge Methyl- und Carboxyl-C-Atome des Acetats

Schritte der Cholesterinbiosynthese wurden in den Arbeitsgruppen von Konrad Bloch und Feodor Lynen aufgeklärt. Entscheidend war bei ihren Arbeiten die Erkenntnis, 4 dass das aus fünf C-Atomen bestehende Isopren (2Methyl-1,3-Butadien, . Abb. 2.21) der Grundkörper nicht nur für die Biosynthese der Isoprenlipide, sondern auch des Cholesterins ist, wobei als Zwischenprodukt das lineare, aus 30 C-Atomen bestehende Squalen auftritt und 4 dass Isopren aus Acetyl-CoA synthetisiert werden kann, wobei das aus sechs C-Atomen bestehende Mevalonat (Mevalonsäure) ein Zwischenprodukt ist Dem entsprechend wird die Cholesterinbiosynthese in vier Phasen eingeteilt:

565 18.3 · Stoffwechsel der Isoprenlipide und des Cholesterins

. Abb. 18.17. Biosynthese von Mevalonat aus Acetyl-CoA. Die dargestellte Reaktionsfolge findet im Cytosol statt. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

4 aus Acetyl-CoA entsteht Mevalonat (Mevalonsäure) 4 aus Mevalonsäure wird das »aktive Isopren« Isopentenylpyrophosphat gebildet 4 aus Isopentenylpyrophosphat kondensiert Squalen 4 Squalen zyklisiert zum zu Cholesterin ! Für die Biosynthese von Mevalonsäure werden drei Acetyl-CoA benötigt.

Bildung von Mevalonat. . Abb. 18.17 stellt die erste Phase der Cholesterinbiosynthese, nämlich die Bildung von Mevalonat dar. Zunächst kondensieren zwei Acetyl-CoA unter Abspaltung von CoA-SH zu Acetacetyl-CoA. An dieses lagert sich ein weiteres Acetyl-CoA an, sodass β-Hydroxy-βMethylglutaryl-CoA (HMG-CoA) entsteht. Diese Reaktionssequenz findet sich auch bei der mitochondrial lokalisierten Biosynthese der Ketonkörper (7 Kap. 12.2.2). Im Gegensatz zur Ketonkörperbiosynthese wird allerdings das für die Mevalonatsynthese benötigte HMG-CoA im Cytosol erzeugt. Durch die HMG-CoA-Reduktase wird HMGCoA unter Verbrauch von 2 NADPH reduziert. Die Reduktion erfolgt an der den Thioester tragenden Carboxylgruppe des HMG-CoA unter Abspaltung von CoA-SH, das Produkt ist Mevalonat. ! Aktives Isopren wird aus Mevalonat synthetisiert.

. Abb. 18.18. Biosynthese von »aktivem Isopren« aus Mevalonat. (Einzelheiten 7 Text)

Bildung von aktivem Isopren. Die zweite Phase der Choles-

terinbiosynthese besteht in der Herstellung des aktiven Isoprens Isopentenylpyrophosphat (. Abb. 18.18), welches sich formal vom 2-Methyl-1,3-Butadien herleitet. Isopentenylpyrophosphat ist Ausgangsprodukt nicht nur für die Biosynthese des Cholesterins, sondern auch für die der Terpene, die die verschiedensten Funktionen in der Natur übernehmen (7 Kap. 2.2.5, 18.3.2). Die vom Mevalonat zum aktiven Isopren führenden Reaktionen sind in . Abbildung 18.18 zusammengestellt. Die für sie verantwortlichen Enzyme sind sowohl im Cytosol als auch in den Peroxisomen nachweisbar. 4 Mevalonat wird durch zweimalige ATP-abhängige Phosphorylierung an der CH2OH-Gruppe über das Zwischenprodukt 5c-Phosphomevalonat in 5c-Pyrophosphomevalonat umgewandelt

18

566

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

4 Eine dritte, ATP-abhängige Phosphorylierung führt zur Veresterung auch der Hydroxylgruppe am C-Atom 3 des Mevalonats, sodass das Zwischenprodukt 3c-Phospho-5c-Pyrophosphomevalonat entsteht 4 Dieses wird decarboxyliert und unter Mitnahme des aus der Hydroxylgruppe stammenden Sauerstoffs dephosphoryliert, sodass als Zwischenprodukt Isopentenylpyrophosphat, das sog. aktive Isopren, entsteht ! Vom Isopentenylpyrophosphat gehen Kondensationsreaktionen aus, die zu den Isoprenlipiden und zum Squalen führen.

Bildung von Squalen. Squalen entsteht durch eine Serie von

Kondensationsreaktionen, die vom Isopentenylpyrophosphat ausgehen. Die Kondensationsreaktion von aktiven Isoprenresten erfolgt in folgenden Schritten unter Katalyse der Isopentenylpyrophosphat-Isomerase und der Prenyltransferase (. Abb. 18.19). Zunächst wird Isopentenylpyrophosphat durch die Isopentenylpyrophosphat-Isomerase zu Dimethylallylpyrophosphat isomerisiert und damit ein weiteres aktives Isopren erzeugt. Grundlage der folgenden Kondensationsreaktionen ist eine Kopf-Schwanz-Kondensation: 4 Vom enzymgebundenen Dimethylallylpyrophosphat wird Pyrophosphat eliminiert 4 An das dadurch als Intermediat entstehende Carbokation kondensiert Isopentenylpyrophosphat, wobei ein neues Carbokation gebildet wird, aus dem durch Abspaltung eines Protons Geranylpyrophosphat entsteht 4 Die Prenyltransferase katalysiert nach einem gleichartigen Mechanismus die Kondensation von Geranylpyrophosphat mit Isopentenylpyrophosphat. Das Reaktionsprodukt ist das aus 15 C-Atomen bestehende Farnesylpyrophosphat Durch Kondensation von zwei Molekülen Farnesylpyrophosphat entsteht unter Katalyse der Squalensynthase das aus insgesamt 30 C-Atomen bestehende Squalen. Bei dieser Reaktion handelt es sich um eine Kopf-Kopf-Kondensation, bei der ebenfalls nach Pyrophosphat-Eliminierung ein Carbokation als Intermediat auftritt. Außerdem ist eine NADPH-abhängige Reduktion des Zwischenprodukts Präsqualen-Pyrophosphat erforderlich. ! Die durch Kondensation von aktiven Isoprenresten gebildeten Zwischenprodukte sind Ausgangspunkt für die Biosynthese einer großen Zahl von Naturstoffen.

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Aus den bei der Kondensation der aktiven Isoprene entstehenden Verbindungen werden außer dem Squalen viele Naturstoffe gebildet (. Abb. 18.20). Zu ihnen gehören u.a. 4 Das Cholesterin und seine Abkömmlinge 4 das Dolichol (7 Kap. 2.2.5) 4 das Ubichinon (7 Kap. 15.1.2) 4 die Carotinoide (Vitamin A, 7 Kap. 23.2.1) 4 das Tocopherol (Vitamin E, 7 Kap. 23.2.3)

. Abb. 18.19. Reaktionsmechanismus der Prenyltransferase. Durch Pyrophosphateliminierung entsteht ein Carbokation aus dem Dimethylallylpyrophosphat. An dieses kondensiert Isopentenylpyrophosphat. An das entstehende Geranylpyrophosphat kann unter Farnesylpyrophosphat-Bildung ein weiteres Isopentenylpyrophosphat ankondensieren. (Einzelheiten 7 Text)

567 18.3 · Stoffwechsel der Isoprenlipide und des Cholesterins

. Abb. 18.20. Biosynthese wichtiger Verbindung aus »aktivem Isopren« in Säugerzellen. (Einzelheiten 7 Text)

4 die Phyllochinone (Vitamin K, 7 Kap. 23.2.4), aber auch 4 eine große Zahl pflanzlicher Metabolite, u.a. Kautschuk Darüber hinaus werden einige vor allem an Regulationsvorgängen beteiligte Proteine durch Geranylierung oder Farnesylierung mit den entsprechenden Gruppen covalent verknüpft und erhalten damit einen Membrananker (7 Kap. 9.2.4). ! Cholesterin entsteht in 22 Teilreaktionen aus Squalen.

Synthese von Cholesterin aus Squalen. Squalen ist ein Vor-

läufer des Cholesterins (. Abb. 18.21). Zunächst entsteht in einer mehrstufigen Reaktion unter Ringschluss Lanosterin. Dabei wandert eine Methylgruppe auf das C-Atom 13 und eine weitere auf das C-Atom 14. In einer Sauerstoffabhängigen Reaktion wird schließlich am C-Atom 3 eine Hydroxylgruppe eingeführt. Durch dreimalige Demethylierung an den C-Atomen 4 und 14 entsteht aus Lanosterin das Zymosterin. Es unterscheidet sich von Cholesterin nur noch durch die Lage der Doppelbindung sowie durch eine weitere Doppelbindung in der Seitenkette.

. Abb. 18.21. Biosynthese von Cholesterin aus Squalen. Die Nummerierung der C-Atome in den Zwischenprodukten entspricht der Nummerierung im Cholesterin. (Einzelheiten 7 Text)

18

568

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

18.3.2

Stoffwechsel und Abbau des Cholesterins

Cholesterin kann von allen Zellen synthetisiert werden. Allerdings ist es auch ein Bestandteil der Nahrung, sodass die Biosynthese auf die Zufuhr abgestimmt sein muss, um eine Cholesterinüberladung zu vermeiden (7 Kap. 18.3.3). In Form von Cholesterinestern wird darüber hinaus Cholesterin in vielen Zellen gespeichert. Cholesterin ist eine Verbindung, die im Zellstoffwechsel an lebenswichtigen Vorgängen beteiligt ist (. Abb. 18.22): 4 Cholesterin ist ein unerlässlicher Bestandteil zellulärer Membranen (7 Kap. 2.2.6) 4 Aus Cholesterin werden alle Steroidhormone einschließlich der D-Hormone synthetisiert (Vitamin D, 7 Kap. 23.2.2) 4 Aus Cholesterin entstehen Gallensäuren, die für eine geordnete Lipidverdauung essentiell sind (7 Kap. 32.1.4) Da alle aus Cholesterin entstehenden Verbindungen, aber auch das Cholesterin in den Membranen einem raschen Umsatz unterliegen, sind Abbau und Ausscheidung von Cholesterin wichtige Vorgänge. Das Steranskelett kann allerdings im Organismus nicht gespalten werden. Cholesterin selbst wird hauptsächlich über die Galle ausgeschieden. Die einzige Modifikation des Steranskeletts, die dem Organismus möglich ist, ist die Umwandlung von Cholesterin in Gallensäuren (7 Kap. 32.1.4). Beim Menschen wird etwa 1 g Cholesterin/24 h in der Leber in Gallensäuren umgewandelt. Ein großer Teil des

intestinalen Gallensäurepools wird rückresorbiert und gelangt wieder in die Leber, um erneut via Galle in den Darm ausgeschieden zu werden (enterohepatischer Kreislauf der Gallensäuren, 7 Kap. 32.1.4). Etwa 1 g Gallensäuren pro 24 h gelangt in die tieferen Darmabschnitte und wird nach bakterieller Zersetzung ausgeschieden. Dorthin gelangtes Cholesterin wird teilweise mit Hilfe von Darmbakterien zu Koprosterin reduziert und ausgeschieden. Steroidhormone werden oxidativ modifiziert und anschließend sulfatiert oder glucuronidiert und in den Urin abgegeben.

18.3.3

Regulation der Cholesterinbiosynthese

Es ist schon lange bekannt, dass die Geschwindigkeit der Cholesterinbiosynthese von der Menge des Nahrungscholesterins abhängt. Innerhalb einzelner Spezies findet man große Unterschiede hinsichtlich der Bedeutung der Leber als Quelle des endogenen Cholesterins. Während bei Hund und Ratte die Leber für den Großteil der Biosynthese verantwortlich ist, überwiegt beim Menschen die extrahepatische Biosynthese (über den Einfluss von LDL auf die extrahepatische Cholesterinbiosynthese 7 Kap. 18.5.2). Ungeachtet dieser Tatsache ist auch beim Menschen der Cholesteringehalt des Plasmas von der Menge des mit der Nahrung aufgenommenen Cholesterins abhängig. Durch Reduktion der Cholesterinaufnahme lässt sich deswegen der Cholesterinspiegel im Plasma senken. Umgekehrt führt eine Mehraufnahme von 100 mg Cholesterin/Tag zu einer Erhöhung des Cholesterinspiegels um etwa 5 mg/100 ml (0,13 mmol/l) Plasma. Cholesterin ist ein für viele Lebensvorgänge unerlässliches Molekül (7 Kap. 18.3.2). Es ist praktisch unlöslich in wässrigen Medien und zeigt u.a. bei erhöhter Plasmakonzentration die Tendenz zur Ablagerung, z.B. in der Wand von Blutgefäßen mit entsprechenden Konsequenzen (7 Kap. 18.6.2). Aus diesem Grund müssen endogene Cholesterinsynthese und Cholesterinzufuhr mit der Nahrung möglichst gut aufeinander abgestimmt werden. ! Cholesterin hemmt die Transkription der Enzyme der Cholesterinbiosynthese.

18

. Abb. 18.22. Übersicht über den Stoffwechsel von Cholesterin. Zellen gewinnen ihr Cholesterin entweder durch Biosynthese oder durch Aufnahme aus Lipoproteinen. Intrazellulär wird Cholesterin entweder durch die ACAT (Acyl-CoA-Cholesterin-Acyltransferase) als Ester gespeichert oder, je nach Gewebe, für weitere Reaktionen verwendet

Das die Reaktionsgeschwindigkeit der Cholesterinbiosynthese bestimmende Enzym ist die HMG-CoA-Reduktase. Bei Nahrungskarenz ist die Aktivität dieses Enzyms deutlich reduziert, was das Absinken des Cholesterinspiegels beim Fasten erklärt. Ähnlich niedrige HMG-CoA-Reduktaseaktivitäten finden sich auch beim Diabetes mellitus. Hier können allerdings die Cholesterinspiegel im Blut hoch sein, wahrscheinlich wegen einer Verlangsamung des Cholesterinumsatzes und der Cholesterinausscheidung. Eine dem Diabetes mellitus ähnliche Konstellation findet man bei der Schilddrüsenunterfunktion, der Hypothyreose (7 Kap. 27.2.9). Die Hyperthyreose geht dagegen trotz Erhö-

569 18.3 · Stoffwechsel der Isoprenlipide und des Cholesterins

hung der HMG-CoA-Reduktaseaktivität mit erniedrigten Cholesterinspiegeln im Blut einher, wahrscheinlich weil gleichzeitig Cholesterinumsatz und -ausscheidung gesteigert sind. Auch Gallensäuren hemmen die Cholesterinbiosynthese (7 Kap. 32.1.4). Wird die Rückresorption der Gallensäuren im Darm durch die Bindung an einen nicht resorbierbaren Ionenaustauscher unterbunden, so kommt es zu einer Steigerung der Cholesterinbiosynthese in der Leber. Da jedoch gleichzeitig die Gallensäureneubildung aus Cholesterin beträchtlich beschleunigt ist, sinkt der Serumcholesterinspiegel trotzdem ab. Auf molekularer Ebene ist die Regulation der HMGCoA-Reduktase außerordentlich komplex und hängt mit der Expression anderer Enzyme bzw. Proteine zusammen: 4 Zufuhr von Nahrungscholesterin oder Gabe von Sterolen und Mevalonsäure zu kultivierten Zellen führt zu einer raschen Abnahme der mRNA aller an der Cholesterinsynthese beteiligter Gene, besonders der HMGCoA-Reduktase, der HMG-CoA-Synthase, der Prenyltransferase, aber auch des LDL-Rezeptors (7 Kap. 18.5.2) 4 Bei Cholesterinmangel nimmt dagegen die Transkription dieser Gene zu Die Gene der genannten Proteine haben in ihrer Promotorregion in mehreren Kopien ein aus acht Nucleotiden bestehendes sog. Sterolregulationselement 1 (SRE-1, sterol regulatory element). Die Entfernung dieser Elemente bringt die Transkriptionsabhängigkeit von Cholesterin und anderen Sterolen zum Verschwinden. SRE-1 ist ein enhancer (7 Kap. 8.5.2), der die Transkription der o.g. Gene dann aktiviert, wenn Transkriptionsfaktoren an ihn binden, die als SREBPs (sterol response element binding protein) bezeichnet werden. SREBPs kommen in drei Isoformen, SREBP-1a, -1c und -2 vor. Für die Regulation der Gentranskription durch Cholesterin ist v.a. SREBP-2 zuständig. Seine Aktivierung erfolgt in folgenden Schritten: (. Abb. 18.23): 4 SREBP-2 ist ein aus drei Domänen bestehendes Protein, das haarnadelartig in die Membran des endoplasmatischen Retikulums integriert ist. Die N-terminale sowie die C-terminale Domäne ragt ins Cytosol. Die N-terminale Domäne ist ein Transkriptionsfaktor der Helix-Loop-Helix-Familie (7 Kap. 8.5.2), die C-terminale Domäne hat eine regulatorische Funktion 4 Die C-terminale Domäne bindet an ein als Scap (SREBP cleavage-activating protein) bezeichnetes, mit 8 Transmembrandomänen im endoplasmatischen Retikulum verankertes Protein 4 5 der 8 Transmembransegmente von Scap wirken als Sensoren für in die Membran eingebautes Cholesterin 4 Ist die Cholesterinkonzentration hoch, so bindet der Komplex aus SREBP-2 und Scap an ein als Insig-Protein (insulin induced gene) bezeichnetes Membranprotein des endoplasmatischen Retikulums und fixiert auf diese Weise SREBP-2

. Abb. 18.23. Regulation der Cholesterinbiosynthese durch proteolytische Aktivierung von SREBP-2. SREBPs und damit auch SREBP-2 sind integrale Membranproteine des endoplasmatischen Retikulums, die dort einen Komplex mit Scap (SREBP cleavage-activating protein) bilden. Scap hat eine Cholesterin-bindende Domäne. Bei hohen Cholesterinkonzentrationen wird der SREBP-2/Scap-Komplex an das Insig-Protein (insulin induced gene) gebunden. Die Freisetzung der als Transkriptionsfaktor dienenden N-terminalen Domäne des SREBP-2 erfolgt bei niedrigen Cholesterinkonzentrationen nach Translokation in den Golgi-Apparat. Sie wird durch eine Spaltung durch die Protease S1P eingeleitet. Nach der ersten Spaltung wird die Protease S2P aktiv und spaltet den DNA-bindenden Teil des SREBPs ab. Dieser gelangt in den Zellkern und wirkt als Transkriptionsfaktor. (Einzelheiten 7 Text)

18

570

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

. Tabelle 18.1. Proteine, deren Expression durch SREBPs aktiviert wird (Auswahl) SREBP-2 Aktiviert durch Cholesterinmangel

SREBP-1a Aktiviert durch Mangel an ungesättigten Fettsäuren

SREBP-1c Aktiviert durch Insulin

HMG-CoA Synthase HMG-CoA Reductase Alle Enzyme bis zum Isopentenylpyrophosphat Prenyltransferase Squalensynthase Enzyme vom Squalen bis zum Cholesterin LDL-Rezeptor

Acetyl-CoA-Carboxylase Fettsäuresynthase Fettsäure-Elongasen Fettsäure-Desaturasen

GLUT-2 Glucokinase Malatenzym Acetyl-CoA-Carboxylase Fettsäuresynthase Glycerophosphat-Acyltransferase

4 Bei niedrigen Cholesterinkonzentrationen bindet das Scap kein Cholesterin, löst sich von der Bindung an Insig und der SREBP/Scap-Komplex wird vesikulär zum Golgi-Apparat transportiert 4 Durch eine als S1P bezeichnete Protease wird dort SREBP-2 in der luminalen Domäne gespalten. Beide cytosolische Domänen sind danach noch in die ERMembran integriert 4 Erst durch die S2P-Protease wird die N-terminale Domäne freigesetzt, in den Zellkern transloziert und wirkt dann als Transkriptionsfaktor. S2P ist nur aktiv, wenn S1P die luminale Domäne geschnitten hat 4 Die Transkription aller an der Cholesterinbiosynthese beteiligter Gene wird durch SREBP-2 gesteigert Dieser Mechanismus gewährleistet, dass die für die Cholesterinbiosynthese benötigten Gene nur dann aktiviert werden, wenn die Zelle arm an Cholesterin ist (. Tabelle 18.1). SREBPs sind nicht nur an der Regulation des Cholesterinstoffwechsels beteiligt, sondern greifen auch in die Fettsäure- und Triacylglycerinsynthese, die Aufnahme von Cholesterin und Fettsäuren in Zellen und sogar in den Glucosestoffwechsel ein (. Tabelle 18.1). Die Aktivierung ist in diesem Fall allerdings nicht cholesterin-, sondern insulinabhängig (7 Kap. 11.6.1). ! Eine Erhöhung des zellulären Cholesteringehalts senkt die Halbwertszeit der HMG-CoA-Reduktase.

Die HMG-CoA-Reduktase ist ebenfalls ein Protein des endoplasmatischen Retikulums. Eine cytosolische Domäne trägt die Enzymaktivität. In die Membran ist das Enzym mit acht Transmembrandomänen integriert. Diese sind eng mit den acht Transmembrandomänen von Scap verwandt, dienen also auch als Cholesterinsensor. Bindung von Cholesterin an diese Domänen löst einen gesteigerten Abbau von HMG-CoA-Reduktase und damit eine Verminderung der Cholesterinbiosynthese aus.

18

Effekt rückgängig. AMP als der Aktivator der AMPK fällt immer dann an, wenn in Zellen Energiemangel herrscht. In diesem Zustand erscheint es sinnvoll, Energie verbrauchende Biosynthesen wie die Fettsäure- oder Cholesterinbiosynthese abzuschalten. ! Zur Behandlung von Hypercholesterinämien werden Inhibitoren der HMG-CoA-Reduktase verwendet.

Von besonderer Bedeutung für die Behandlung von Hypercholesterinämien (7 Kap. 18.6.2) sind eine Reihe spezifischer Pilzmetabolite. Es handelt sich um Verbindungen wie Mevinolin oder Compactin, deren Derivate als Statine bezeichnet und für die Behandlung von Hypercholesterinämien verwendet werden (. Abb. 18.24). Wegen einer dem Mevalonat entsprechenden Gruppe sind sie kompetitive Inhibitoren der HMG-CoA-Reduktase. Da sie eine besonders hohe Affinität zu diesem Enzym besitzen, kann mit ihnen die Biosynthese von Isoprenderivaten und Cholesterin vollständig gehemmt werden. Interessanterweise nimmt allerdings die Menge der immunologisch nachweisbaren HMG-CoA-Reduktase unter Behandlung mit den genannten Inhibitoren um ein bis zwei Größenordnungen zu. Dies beruht auf einer durch die erniedrigten zellulären Cholesterinspiegel ausgelösten Steigerung der Expression der HMGCoA Reduktase sowie einer Verlangsamung ihres Abbaus (7 o.). Ihre Halbwertszeit beträgt normalerweise etwa zwei Stunden und verlängert sich in Gegenwart von Mevinolin ungefähr auf 11 Stunden, während die Zugabe von Mevalonsäure und Hydroxysterolen die Halbwertszeit auf weniger als 40 Minuten verkürzen.

! Die HMG-CoA-Reduktase wird durch reversible Phosphorylierung inaktiviert.

Durch die AMP-aktivierte Proteinkinase (AMPK), die auch die Acetyl-CoA-Carboxylase phosphoryliert und inaktiviert (7 Kap. 16.1.4), wird die HMG-CoA-Reduktase inaktiviert. Eine Phosphoproteinphosphatase macht diesen

. Abb. 18.24. Struktur von Compactin und Mevinolin. Der zum Mevalonat strukturhomologe Teil ist hervorgehoben

571 18.4 · Lipide und Signalmoleküle

In Kürze Die Isopren-Lipide bilden eine eigene Gruppe von Lipiden mit eminenter biologischer und medizinischer Bedeutung. Sie entstehen durch Kondensation von aktiven Isopreneinheiten, dem Dimethylallylpyrophosphat und Isopentenylpyrophosphat. Durch diese Kondensationsreaktion entsteht eine große Zahl von Naturstoffen, zu denen viele Vitamine, aber auch das intrazellulär synthetisierte Ubichinon gehören. Ein besonders wichtiges Isoprenderivat ist das Cholesterin, das ein essentieller Bestandteil zellulärer Membranen ist, daneben aber auch den Ausgangspunkt für die Biosynthese der Steroidhormone sowie der Gallensäuren darstellt. Das Ringsystem des Cholesterins sowie der anderen Steroide kann vom tierischen Organismus nicht ge-

18.4

Lipide und Signalmoleküle

Phospholipide, Sphingolipide und Cholesterin sind nicht nur die für den Membranaufbau benötigten Lipidbausteine, sondern erfüllen wichtige Funktionen im Bereich der Signaltransduktion, d.h. der Umsetzung extrazellulärer Signale in intrazelluläre Änderungen des Stoffwechsels und anderer zellulärer Aktivitäten (. Tabelle 18.2). Phosphoglyceride. Die Spaltprodukte von Phosphoglyceriden durch spezifische Phospholipasen liefern: 4 Inositoltrisphosphat, das die cytosolische Calciumkonzentration erhöht (7 Kap. 25.4.5) 4 Diacylglycerin als Aktivator der Proteinkinase C (7 Kap. 25.7.1) sowie 4 Arachidonsäure, die den Ausgangspunkt für die Biosynthese der Eikosanoide darstellt (7 Kap. 12.4.1)

spalten werden. Deswegen wird Cholesterin als solches oder nach Umwandlung in Gallensäuren ausgeschieden. Da Cholesterin sowohl mit der Nahrung zugeführt als auch endogen synthetisiert wird, muss seine Synthese genau reguliert werden. Dabei sind folgende Prinzipien wirksam: 5 Cholesterin hemmt die Aktivierung von SREBP-2, das als Transkriptionsfaktor das geschwindigkeitsbestimmende Enzym der Cholesterinbiosynthese (HMG-CoAReduktase), andere Enzyme der Cholesterinsynthese, aber auch der Lipidspeicherung induziert 5 Cholesterin verkürzt die Halbwertszeit der HMG-CoAReduktase 5 Die HMG-CoA-Reduktase wird durch reversible Phosphorylierung inaktiviert

Phosphatidylinositol-Bisphosphat kann durch die PI3-Kinase phosphoryliert werden. Das entstehende Phosphatidylinositol-(3,4,5)trisphosphat bleibt in der Membran verankert. Es dient als Andockplatz für spezifische Proteine, v.a. die 3-Phosphoinositid-abhängige Kinase-1 (PDK1) sowie die Proteinkinase B (PKB). Diese Kinasen spielen eine wichtige Rolle bei der Signaltransduktion von Wachstumsfaktoren (7 Kap. 25.7.1) und Insulin. Für alle aus Phosphoglyceriden gebildeten Signalstoffe gilt natürlich, dass ihre Biosynthese einer genauen Regulation unterliegt. Sphingolipide. Die in . Abb. 18.13 dargestellten Möglich-

keiten des Sphingolipidabbaus liefern Zwischenprodukte, die verschiedene zellbiologische Phänomene beeinflussen: 4 Ceramid, das durch de novo Biosynthese (. Abb. 18.9) oder aus Sphingomyelin durch die Sphingomyelinase

. Tabelle 18.2. Lipide und Lipidderivate, die für die zelluläre Signalvermittlung eine Rolle spielen (Auswahl) Molekül

Synthetisiert aus

Beteiligtes Enzym

Zelluläre Effekte

Kapitel

IP3

PIP2

Phospholipase Cβ bzw. Cγ

Calciummobilisierung aus ER

25.4.5

Diacylglycerin

Phosphoglyceride

Phospholipase Cβ bzw. Cγ Phospholipase C; Phospholipase D mit Phosphohydrolase

Aktivierung der Proteinkinase C

25.4.5

Aktivierung der Proteinkinase C

25.7.1

Arachidonat

Phosphoglyceride

Phospholipase A2

Synthese von Eikosanoiden

12.4.2

PIP3

PIP2

PI3-Kinase

Aktivierung der PDK1 und der PK B

25.7.1, 26.1.7

Ceramid

Sphingomyelin

Spingomyelinase

Auslösung der Apoptose Hemmung der Proteinkinase C

18.4

Sphingosin

Ceramid

Ceramidase

Hemmung der Apoptose

18.4

Sphingosin-1-Phosphat

Sphingosin

Sphingosin-1-Kinase

Proliferation

18.4

Cholesterin

Acetyl-CoA

–

Hemmung der Expression von Enzymen der Cholesterin-Biosynthese

18.3.3

IP3 = Inositoltrisphosphat; PIP2 = Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat; PIP3 = Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphat.

18

572

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

entsteht, ist in vielen Zellen an der Auslösung der Apoptose (7 Kap. 7.1.5) beteiligt 4 Sphingosin entsteht durch die Ceramidase aus Ceramid und ist ein Inhibitor der Proteinkinase C (7 Kap. 25.7.1) 4 Sphingosin-1-phosphat wird durch die Sphingosinkinase gebildet und durch die Sphingosin-1-phosphatPhosphatase zu Sphingosin abgebaut. Es lässt sich extrazellulär nachweisen und wirkt über spezifische Sphingosin-1-phosphat-Rezeptoren. Es stimuliert in vielen Zellen die Proliferation und wirkt antiapoptotisch 4 Die an Bildung und Abbau der genannten Sphingolipide beteiligten Enzyme werden in komplizierter Weise

durch Wachstumsfaktoren, Ca2+ und verschiedene Proteinkinasen reguliert Cholesterin. Auch das Cholesterin greift an verschiedenen Stellen in Vorgänge der Signaltransduktion ein oder ist Ausgangspunkt für die Herstellung von Signalmolekülen. Cholesterin 4 bildet den Ausgangspunkt für die Biosynthese aller Steroidhormone 4 hemmt die Aktivierung von SREBP-1a und 4 vermindert die Halbwertszeit der HMG-CoA-Reduktase

In Kürze Im Lipidstoffwechsel entstehen wichtige Signalmoleküle. Aus dem Stoffwechsel der Phosphoglyceride sind dies 5 verschiedene Phosphatidylinositolphosphate 5 Inositoltrisphosphat 5 Diacylglycerin 5 Eikosanoide

18.5

Transport der Lipide im Blut

Extrahiert man die Lipide des Blutplasmas mit geeigneten organischen Lösungsmitteln oder trennt sie mit chemischen Methoden auf, so finden sich hauptsächlich 4 Cholesterin und Cholesterinester 4 Phosphoglyceride sowie 4 Triacylglycerine und 4 in geringeren Mengen unveresterte langkettige Fettsäuren (. Tabelle 18.3) Bei Lipiden überwiegen die hydrophoben Eigenschaften. Es ist deswegen verständlich, dass ihr Transport im wässrigen Medium Blutplasma schwierig ist. Für die mengenmäßig unbedeutende Fraktion der nicht veresterten Fettsäuren steht als Transportvehikel das Serumalbumin zur Verfügung. Alle anderen Lipide des Plasmas müssen durch Bindung an spezifische Transportproteine in Form der Lipoproteine transportiert werden.

. Tabelle 18.3. Konzentrationsbereiche der im Serum von Gesunden vorkommenden Lipide Lipid

18

Konzentrationsbereich [mg/100 ml]

Triacylglycerine

[mmol/l]

50–200

0,62–2,5

Phosphoglyceride

160–250

2,2–3,4

Cholesterin (frei + verestert)

150–220

3,9–6,2

Nichtveresterte Fettsäuren

14–22

0,5–0,8

Aus dem Stoffwechsel der Sphingolipide entstehen: 5 Ceramid 5 Sphingosin 5 Sphingosin-1-phosphat

18.5.1

Aufbau der Lipoproteine

! Aufgrund ihrer Dichte können Lipoproteine in vier Hauptklassen eingeteilt werden.

Die im Plasma vorkommenden Lipoproteine werden nach einer Reihe unterschiedlicher Kriterien eingeteilt, die in . Abb. 18.25 zusammengestellt sind. Zunächst einmal können sie entsprechend ihrer Dichte in der präparativen Ultrazentrifuge (7 Kap. 3.2.2) klassifiziert werden. Nach ansteigender Dichte werden Lipoproteine in folgende Klassen eingeteilt: 4 Chylomikronen 4 very low density lipoproteins (VLDL) 4 low density lipoproteins (LDL) und 4 high density lipoproteins (HDL) Diese Lipoproteine unterscheiden sich sowohl bezüglich ihres Lipidgehalts als auch bezüglich des Verhältnisses von Lipiden zu Proteinen. In den Chylomikronen beträgt dieses Verhältnis 98:2, 90% der Lipide sind Triacylglycerine, 6% Cholesterin und nur 4% Phospholipide. Über VLDL, LDL und HDL nimmt das Lipid-Protein-Verhältnis bis auf etwa 50:50 bei den HDL ab. In der gleichen Reihenfolge sinkt auch der Anteil von transportierten Triacylglycerinen. Den höchsten Cholesteringehalt zeigt die LDL-Fraktion, den höchsten Phosphoglyceridgehalt die HDL-Fraktion (. Tabelle 18.4). Dass sich die einzelnen Lipoproteinklassen auch bezüglich ihrer Proteinzusammensetzung unterscheiden, wird

573 18.5 · Transport der Lipide im Blut

. Abb. 18.25. Einteilung und Eigenschaften der Serumlipoproteine. (Einzelheiten 7 Text)

aus ihrem elektrophoretischen Verhalten klar, welches eine weitere Einteilungsmöglichkeit liefert (. Abb. 18.25). Während Chylomikronen keine elektrophoretische Beweglichkeit haben, wandern LDL mit der E-Globulin-Fraktion und HDL mit der D-Globulin-Fraktion. Sie werden dementsprechend als E- bzw. D-Lipoproteine bezeichnet. VLDL wandern dagegen in der Elektrophorese den E-Globulinen

voraus und werden dementsprechend als Prä-β-Lipoproteine bezeichnet. ! Für die verschiedenen Lipoproteinklassen sind spezifische Apolipoproteine charakteristisch.

Inzwischen ist es gelungen, die einzelnen auch als Apolipoproteine bezeichneten, in Lipoproteinen vorkommenden

. Tabelle 18.4. Physikalische Eigenschaften, chemische Zusammensetzung und Hauptapolipoproteine der verschiedenen Lipoproteinklassen Chylomikronen

VLDL

LDL

HDL

Dichte [g/ml]

0,93

0,93–1,006

1,019–1,063

1,063–1,21

Durchmesser [nm]

75–1200

30–80

18–25

5–12

Triacylglycerine [%]

86

55

6

4

Cholesterin und Cholesterinester [%]

5

19

50

19

Phospholipide [%]

7

18

22

34

Apolipoproteine [%] davon Apo A I Apo A II Apo A IV *Apo B48 *Apo B100 Apo C I Apo C II Apo C III Apo D Apo E

2

8

22

42

+ + + + (48%) – (+) + + – (+)

– – – – + (25 %) + + + – +

– – – – + (95 %) – – – – (+)

+ + + – – + + + + +

* Nicht austauschbare Apolipoproteine. Nur für diese ist in Klammern der prozentuale Anteil an der Gesamtmenge der Apolipoproteine angegeben.

18

574

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

. Tabelle 18.5. Klassifizierung und Funktion der Apolipoproteine des menschlichen Serums Apolipoprotein

Lipoprotein

Molekülmasse [kDa]

Funktion

AI

Chylomikronen, HDL

29

Aktivator der LCAT

A II

Chylomikronen, HDL

17

Strukturelement, Aktivator der hepatischen Lipase

A IV

Chylomikronen, HDL

46

Unbekannt

B100a

VLDL, LDL

513

Ligand des ApoB100-Rezeptors

B48a

Chylomikronen

241

Strukturelement

CI

Chylomikronen, VLDL, HDL

7,6

Aktivator der LCAT

C II

Chylomikronen, VLDL, HDL

8,9

Aktivator der LPL

C III

Chylomikronen, VLDL, HDL

8,7

Inhibitor der LPL

D

HDL

33

Aktivator der LCAT, Strukturelement

E

VLDL, HDL, (LDL)

34

Ligand des ApoE-Rezeptors

a

Nicht austauschbare Apolipoproteine. LCAT = Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase; LPL = Lipoproteinlipase

Proteine zu klassifizieren und wenigstens teilweise strukturell aufzuklären (. Tabelle 18.5). VLDL enthalten im Wesentlichen die Apolipoproteine CI–CIII sowie die Apolipoproteine B100 und E. Chylomikronen besitzen darüber hinaus das Apolipoprotein B48 sowie AI und AIV. LDL enthalten hauptsächlich das Apolipoprotein B100, daneben das Apolipoprotein E. In der Gruppe der HDL finden sich außer den Apolipoproteinen der C-Gruppe auch die Apolipoproteine AI, AII, AIV und E. Strukturell können die Apolipoproteine in zwei Gruppen eingeteilt werden: 4 ApoB100 und ApoB48 werden als nicht austauschbare Apolipoproteine bezeichnet, die nicht zwischen den verschiedenen Lipoproteinen wechseln können. Sie sind praktisch unlöslich in Wasser 4 Die Apolipoproteine der Gruppen A, C, D und E sind in freier Form wasserlöslich und werden zwischen Lipoproteinen ausgetauscht (s.u.)

18

Die Primärstruktur der entsprechenden Apolipoproteine ist inzwischen aus den zugehörigen cDNA-Sequenzen ermittelt worden. Wie aus physikalisch-chemischen Untersuchungen hervorgeht, nehmen Apolipoproteine erst in Gegenwart von Phosphoglyceriden ihre endgültige räumliche Konformation an. Diese zeichnet sich durch einen relativ großen Gehalt an D-helicalen Bereichen aus, die häufig als so genannte amphiphile Helices organisiert sind. Dies bedeutet, dass sich auf der einen Hälfte der Helixoberfläche überwiegend hydrophile und auf der anderen Hälfte dagegen überwiegend hydrophobe Aminosäureseitenketten befinden. Grundlage aller Strukturmodelle von Lipoproteinen bildet die Annahme, dass der Kern jedes Lipoproteins aus Lipiden besteht. Die Apolipoproteine »schwimmen« mit ihren hydrophoben Strukturen auf der Lipidphase und treten mit ihren hydrophilen Domänen mit der wässrigen Umgebung in Wechselwirkung.

Für den Aufbau der LDL-Klasse bestehen experimentell einigermaßen gesicherte Vorstellungen (. Abb. 18.26), die auf der Strukturaufklärung des Apolipoproteins B100 (ApoB100) beruhen. Dieses außerordentlich große Protein besteht aus 4527 Aminosäureresten und lässt sich in fünf Domänen einteilen (. Abb. 18.26a). Beginnend vom NTerminus findet sich zunächst eine Lipovitellin-ähnliche Domäne. Lipovitellin ist das Lipoprotein des Eidotters und es wird angenommen, dass diese Domäne für die Lipidbeladung des LDL verantwortlich ist. In den folgenden vier Domänen bis zum C-Terminus wechseln sich amphipathische β-Faltblattstrukturen mit ebenfalls amphipathischen α-Helices ab. In . Abb. 18.26b,c ist der Aufbau des LDL schematisch dargestellt: 4 In einem Kernbereich des LDL befinden sich apolare Lipide wie Triacylglycerine und Cholesterinester. Um diesen herum legt sich eine Schale aus Cholesterin und amphiphilen Lipiden, v.a. Phosphoglyceriden 4 Ein Molekül ApoB100 ist um das kugelförmige Lipidpartikel gewunden. Dabei tauchen die β-Faltblattstrukturen β1 und β2 in die Phosphoglyceridstruktur ein Außer ihrer strukturgebenden Funktion haben Apolipoproteine wichtige Aufgaben im Rahmen des Metabolismus der Lipoproteine zu erfüllen (. Tabelle 18.5). So sind die Apolipoproteine B100 sowie E Liganden für spezifische Rezeptoren, die die Internalisierung der Lipoproteine und damit ihren weiteren Stoffwechsel vermitteln. Das Apolipoprotein CII ist ein unerlässlicher Aktivator der Lipoproteinlipase (LPL), die Apolipoproteine AI, CI und D aktivieren die Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT).

575 18.5 · Transport der Lipide im Blut

. Abb. 18.26a,b,c. Aufbau eines LDL-Lipoproteins. a. Domänen des Apolipoprotein B100 (Apo B100). N-terminal befindet sich eine dem Lipovitellin ähnliche Domäne, die wegen ihrer Zusammensetzung auch als ED1-Domäne bezeichnet wird. Die als E1 und E2 bezeichneten Domänen zeichnen sich durch einen hohen Gehalt an E-FaltblattStruktur aus, während die Domänen D2 und D3 (C-Terminus) überwiegend D-helicale Elemente aufweisen. b Querschnitt durch ein LDLPartikel. Man erkennt den inneren, aus Triacylglycerinen und Cholesterinestern zusammengesetzten Kern (gelb); die ihn umgebenden

18.5.2

Stoffwechsel der Lipoproteine

! Triacylglycerinreiche Lipoproteine entstehen in Darm und Leber.

Chylomikronen und VLDL sind die besonders triacylglycerinreichen Lipoproteine. Die ersteren sind für den Transport mit der Nahrung aufgenommenen Triacylglycerine, die letzteren für den Transport der in der Leber aus endogenen Quellen synthetisierten Triacylglycerine verantwortlich. Chylomikronen. Chylomikronen entstehen in den Mukosa-

zellen der duodenalen Schleimhaut: 4 Im rauen endoplasmatischen Retikulum der Mukosazellen assoziieren Phospholipide cotranslational mit

amphiphilen Lipide sind orange dargestellt, Phospholipide in der Nachbarschaft des blau gezeichneten Faltblattanteils von ApoB100 sind grün. c LDL in der Aufsicht. Man erkennt, wie sich ApoB100 mit Dhelicalen und E-Faltblatt-Anteilen um den Lipidkern windet. Die hell dargestellten Anteile sind hinter dem Lipidkern gelegen. Prd1– prd3 = Prolinreiche Domänen, die für die Bindung an den LDL-Rezeptor wichtig sind. (Mit freundlicher Genehmigung von Jere P. Segrest und Journal of Lipid Research)

dem Apolipoprotein B48, wobei kleine, unreife Chylomikronen entstehen 4 Die bei der Resorption durch die Pankreaslipase gespaltenen Triacylglycerine werden im glatten endoplasmatischen Retikulum zu Triacylglycerinen resynthetisiert (7 Kap. 32.2.2) 4 Mit Hilfe eines Triacylglycerin-Transferproteins assoziieren unreife Chylomikronen und Triacylglycerine. Die Reifung von Chylomikronen wird durch Aufnahme weiterer Lipide wie Cholesterin und Phosphoglyceride sowie der Apolipoproteine AI und AII abgeschlossen 4 Vom rauen endoplasmatischen Retikulum gelangen die Chylomikronen in den Golgi-Apparat, wo sie in Sekretgranula gespeichert und (7 Kap. 6.2.4) durch Exocytose in den extrazellulären Raum abgegeben werden

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Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

4 Hier sammeln sie sich in den intestinalen Lymphgängen und gelangen über den Ductus thoracicus in den Blutkreislauf VLDL. Prinzipiell gleichartig wie die der Chylomikronen

erfolgt die Bildung der VLDL: 4 die Lipide werden im glatten endoplasmatischen Retikulum synthetisiert 4 durch Lipidtransfer-Proteine gelangen sie zum rauen endoplasmatischen Retikulum und assoziieren mit dem Apolipoprotein B100 4 Die Assemblierung mit den Apolipoproteinen CI–III, B100 und E erfolgt ebenfalls im Golgi-Apparat, von wo aus VLDL-Partikel in Sekretgranula gespeichert und von Hepatozyten sezerniert werden. ! Triacylglycerinreiche Lipoproteine werden durch die Lipoproteinlipase abgebaut.

Am Abbau der triacylglycerinreichen Lipoproteine sind in besonderem Umfang die extrahepatischen Gewebe beteiligt. Allerdings bestehen beträchtliche Unterschiede in den Abbauwegen für Chylomikronen und VLDL (. Abb. 18.27). Chylomikronen. Unmittelbar nach ihrem Erscheinen im

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Blut ändert sich die Oberfläche der Chylomikronen (. Abb. 18.27a). In Abhängigkeit von der Konzentration von HDL, besonders der Untergruppe HDL2 (7 u.), erfolgt ein Austausch der Apolipoproteine des Typs C und E zwischen HDL und Chylomikronen. Besonders wichtig ist das Apolipoprotein CII als ein Cofaktor der Lipoproteinlipase. Dieses lipolytisch wirksame Enzym (7 Kap. 12.1.3) ist an den Endothelzellen der Kapillaren sowie an der Plasmamembran der extrahepatischen Gewebe lokalisiert und katalysiert die Spaltung von Triacylglycerin zu Glycerin und Fettsäuren. Die Fettsäuren werden von den extrahepatischen Geweben aufgenommen und verstoffwechselt (7 Kap. 16.1.1), dagegen gelangt Glycerin zur Leber, um dort phosphoryliert und anschließend in den Stoffwechsel eingeschleust zu werden. Beim Abbau der Chylomikronen durch die Lipoproteinlipase gehen 70–90% des Triacylglyceringehalts verloren. Gleichzeitig werden ein beträchtlicher Teil der Apolipoprotein AI-Moleküle sowie Cholesterin auf HDL-Vorstufen, so genannte discoidale HDL, übertragen, wobei die Fraktion HDL3 entsteht. Das Überbleibsel des Chylomikronenabbaus, welches auch als remnant (engl. Überbleibsel) bezeichnet wird, gelangt zur Leber. Dort erfolgen über spezifische Rezeptoren für die Apolipoproteine B und E eine Internalisierung und damit schließlich ein Abbau dieses Restpartikels. VLDL. Im Gegensatz zu Chylomikronen werden VLDL in

der Leber synthetisiert. Nach der Sekretion erfolgt durch Wechselwirkung mit HDL-Partikeln eine Anreicherung

. Abb. 18.27a,b. Abbau der Triacylglycerin-reichen Lipoproteine. a Abbau von Chylomikronen. b Abbau von VLDL. (Einzelheiten 7 Text)

mit den Apolipoproteinen E und C, besonders CII (. Abb. 18.27b). Aus diesem Grund werden VLDL-Partikel am Kapillarendothel durch die dort vorhandene Lipoproteinlipase zu Glycerin und Fettsäuren abgebaut, wobei ein Partikel intermediärer Dichte, das IDL (IDL, intermediate density lipoprotein) entsteht. Auf einem in seinen Einzelheiten nicht aufgeklärten Weg werden in der Leber aus IDL die LDL-Partikel gebildet. Die letzteren enthalten überwiegend das Apolipoprotein B100. Die auf dem IDL-Partikel noch vorhandenen Apolipoproteine C und der größte Teil der Apolipoproteine E gehen bei dieser Umwandlung verloren. Zum Teil erfolgt dies durch Austausch mit HDLPartikeln, jedoch ist auch eine Wechselwirkung mit dem Apolipoprotein B- und E-Rezeptor der Hepatozyten notwendig. Damit kommt den triacylglycerinreichen Lipoproteinen eine klare Funktion im Lipidstoffwechsel zu. Als

577 18.5 · Transport der Lipide im Blut

. Abb. 18.28a,b. Beziehung zwischen der Plasmacholesterinkonzentration und der Aktivität der HMG-CoA-Reduktase. a Kultiviert man humane Fibroblasten in Anwesenheit von LDL-haltigem Serum, so ist die Aktivität der HMG-CoAReduktase sehr gering. Entfernt man die LDL aus dem Serum und damit das Serumcholesterin, so steigt die HMG-CoA-Reduktase-Aktivität und die Cholesterinbiosynthese stark an. b Gibt man zu einer serumfreien Kultur humaner Fibroblasten LDLhaltiges Serum, fällt die Aktivität der HMG-CoAReduktase rasch ab. (Mit freundlicher Genehmigung von J.L. Goldstein)

Chylomikronen transportieren sie Nahrungstriacylglycerine, als VLDL endogen synthetisierte Triacylglycerine vom Darm bzw. der Leber in das Kapillarendothel und extrahepatische Gewebe. Dort erfolgt der Abbau eines großen Teils ihrer Acylglycerine, was mit einer Formänderung sowie mit einem Apolipoproteinaustausch, vor allem mit HDL-Lipoproteinen, einhergeht. Hierbei entstehen im Fall der Chylomikronen die HDL3 sowie von der Leber abgebaute remnants, im Fall der VLDL über die Zwischenstufe der IDL schließlich die LDL. ! Die LDL transportieren Cholesterin zu den extrahepatischen Geweben und regulieren deren Cholesterinbiosynthese.

Von den Plasmalipoproteinen enthalten die LDL am meisten Cholesterin und Cholesterinester, die entsprechend der Herkunft der LDL aus der Leber stammen und von dort zu den extrahepatischen Geweben transportiert werden, wo sie meist als Membranbauteil Verwendung finden. Besondere Mechanismen sind allerdings notwendig, um die Cholesterinzufuhr mit LDL und die endogene Cholesterinsynthese aufeinander abzustimmen. Untersucht man die Aktivität der HMG-CoA-Reduktase und damit indirekt die Geschwindigkeit der Cholesterinbiosynthese in extrahepatischen Geweben in vivo oder in Zellkultur unter dem üblichen Serumzusatz (jedes Serum enthält LDL), so findet sich nur ein sehr niedriger Wert. Entfernt man jedoch die LDL aus dem Kulturmedium durch Delipidierung des Serums, so steigt die Aktivität der HMG-CoA-Reduktase sehr deutlich an (. Abb. 18.28a). Diese Beziehung zwischen der LDL-Konzentration in der extrazellulären Flüssigkeit und der Aktivität der HMG-CoA-Reduktase zeigt sich auch bei Zusatz von cholesterinhaltigem LDL zu Zellkulturen in delipidiertem Serum (. Abb. 18.28b). Je mehr LDL zugesetzt werden, umso niedriger ist die Aktivität der HMG-CoAReduktase.

Dieser Befund führte zur Entdeckung der in . Abb. 18.30 dargestellten Beziehung zwischen dem in den LDL transportierten Cholesterin und der Cholesterinbiosynthese extrahepatischer Gewebe. Entscheidend hierfür ist, dass zunächst die LDL-Partikel an einen spezifischen, in der Plasmamembran der Zielzelle gelegenen Rezeptor, den LDL-Rezeptor, binden. Sein Ligand ist das Apolipoprotein B100. Die 1985 mit dem Nobel-Preis für Medizin ausgezeichneten Arbeiten von Joseph Goldstein und Michael Brown haben zur Strukturaufklärung des LDL-Rezeptors und zur Aufklärung seiner Wirkungsweise geführt. Der LDL-Rezeptor (. Abb. 18.29) besteht aus 839 Aminosäuren und ist

. Abb. 18.29. Aufbau des LDL-Rezeptors aus verschiedenen Domänen

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Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

. Abb. 18.30. Der intrazelluläre Kreislauf des LDL-Rezeptors. ACAT = AcylCoA-Cholesterin-Acyltransferase. (Einzelheiten 7 Text)

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ein Membranprotein mit fünf für seine Funktion wichtigen Domänen. Der N-Terminus des Rezeptorproteins entspricht dem extrazellulären Anteil. Es enthält zunächst eine aus 292 Aminosäuren bestehende Domäne, die die Bindungsstelle für Apolipoprotein B100 und Apolipoprotein E enthält. Wie bei vielen Rezeptoren finden sich hier gehäuft Cysteinreste, darüber hinaus eine Anhäufung negativer Ladungen. An diese Ligandenbindungsdomäne schließt eine weitere aus 400 Aminosäuren bestehende Domäne an, die Homologie zum EGF-Rezeptor-Präkursor zeigt. Auf sie folgt eine aus etwa 58 Aminosäuren bestehende Domäne, die zahlreiche O-glycosidische Zuckereste enthält und die Verbindung zur Transmembrandomäne darstellt, die aus 22 hydrophoben Aminosäuren besteht und den LDL-Rezeptor in der Plasmamembran verankert. Im Cytosol liegt schließlich das C-terminale Ende des Rezeptors, das aus 50 Aminosäuren besteht. Der LDL-Rezeptor wird im rauen endoplasmatischen Retikulum in Form eines Präkursorproteins synthetisiert und wie alle Glycoproteine dort sowie im Golgi-Apparat prozessiert (. Abb. 18.30). Etwa 45 Minuten nach seiner Synthese erscheint er in korrekter Orientierung auf der Zelloberfläche. Der cytoplasmatische Teil des Rezeptorproteins kann über das Adaptorprotein AP2 mit Clathrin in Wechselwirkung (7 Kap. 6.2.5) treten, sodass sich der Rezeptor in coated pits sammelt. Nach Bindung von LDL

an den LDL-Rezeptor kommt es innerhalb von 3–5 Minuten zur Endocytose der LDL/LDL-Rezeptor-Komplexe, wobei coated vesicles entstehen. Nach Verlust der Clathrinschicht fusionieren diese mit frühen Endosomen. In diesen sinkt der pH-Wert wegen des Vorhandenseins einer ATP-getriebenen Protonenpumpe (7 Kap. 6.2.7) auf Werte unter 6,5, sodass es zur Dissoziation von LDL und Rezeptor kommt. Dieser kehrt in Form kleiner Vesikel wieder zur Zelloberfläche zurück (receptor recycling) und steht für die Bindung weiterer Lipoproteine zur Verfügung. Die für einen derartigen Transportzyklus benötigte Zeit beträgt etwa 10 Minuten. Die LDL werden in Lysosomen abgebaut. Die in den LDL-Partikeln enthaltenen Cholesterinester werden durch eine lysosomale saure Lipase hydrolysiert, wonach das freie Cholesterin das Lysosom verlässt. An den Membranen des endoplasmatischen Retikulums beeinflusst Cholesterin nun zwei Vorgänge: 4 zum einen reduziert es die Aktivität sämtlicher an der Cholesterinbiosynthese beteiligter Enzyme durch eine Reduktion der Transkription der zugehörigen Gene 4 zum anderen aktiviert es hauptsächlich über einen allosterischen Effekt die Acyl-CoA-Cholesterin-Acyltransferase (ACAT), was zu einer Veresterung des Cholesterins mit Speicherung der entstehenden Cholesterinester in den Lipidtropfen der Zelle führt

579 18.5 · Transport der Lipide im Blut

. Abb. 18.31. Die Funktion der HDL beim reversen Cholesterintransport. LCAT = Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase; SR-B1 = hepatischer scavenger-receptor-B1. (Einzelheiten 7 Text)

Auf diese Weise spielt der LDL-Rezeptor extrahepatischer Gewebe eine bedeutende Rolle im Cholesterinstoffwechsel. Er ist für die Bindung und Aufnahme der cholesterinreichen LDL-Partikel verantwortlich und sorgt damit für eine Senkung des Cholesterinspiegels im Plasma. Zusätzlich vermittelt er eine Hemmung der Cholesterinbiosynthese extrahepatischer Gewebe und verhindert so eine Überschwemmung der Zellen mit Cholesterin. (Über die Bedeutung der LDL-Rezeptoren bei der familiären Hypercholesterinämie 7 Kap. 18.6.2). ! Die HDL sind für den reversen Cholesterintransport verantwortlich.

Im Gegensatz zu anderen Lipoproteinen ist die Fraktion der HDL nicht einheitlich. Aufgrund eines unterschiedlichen Gehalts an Apolipoproteinen sowie unterschiedlichem Lipidgehalt können mindestens drei HDL-Gruppen unterschieden werden, die als HDL1, HDL2 und HDL3 bezeichnet werden. . Abbildung 18.31 fasst die Vorstellungen über die Funktion der HDL zusammen. Es gilt als gesichert, dass beim Abbau von Chylomikronen in extrahepatischen Geweben discoidale HDL-Partikel entstehen, welche bevorzugt das Apolipoprotein A, Phospholipide und Cholesterinester enthalten. Außerdem liefern auch der Darm und die Leber entsprechende HDL-Vorstufen. Dank ihres Gehalts an Apolipoprotein AI sind solche Partikel imstande, das von der Leber synthetisierte und sezernierte Enzym Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT) zu binden.

Das Enzym katalysiert die Reaktion:

Durch die Einwirkung der LCAT nimmt der Gehalt der HDL an Cholesterinestern zu, gleichzeitig verringert sich ihr Gehalt an Phosphoglyceriden, da das gebildete Lysophosphatidylcholin wegen seiner besseren Wasserlöslichkeit von den HDL-Partikeln abdiffundiert. Hierdurch nehmen die HDL ihre runde Form als mizelläre Partikel an. Da die durch LCAT gebildeten Cholesterinester in den apolaren Kern der HDL-Partikel wandern, entsteht auf der HDLOberfläche Platz, in den das aus den Membranen extrahepatischer Gewebe stammende Cholesterin eingelagert werden kann. Für den Cholesterintransport durch die Plasmamembran wird der ATP-abhängige Transporter ABC-1 benötigt. Dadurch entsteht zunächst die Fraktion der HDL3, durch weiteren Angriff der LCAT und Übernahme von Material, welches beim Abbau der VLDL entsteht (Phospholipide, Apolipoproteine C, E) auch die HDL2 und HDL1. Die Aufnahme von HDL in die Leber erfolgt durch Bindung an einen Rezeptor, der als SR-B1-Rezeptor (Scavenger Receptor-B1) bezeichnet wird. Das internalisierte Cholesterin wird direkt oder nach Umwandlung in Gallensäuren ausgeschieden. Dieser Mechanismus steht mit der Vorstellung in Übereinstimmung, dass eine der Hauptfunktionen der HDL im reversen Cholesterintransport besteht, nämlich dem Transport von extrahepatischem Cholesterin zur Leber als dem Hauptausscheidungsort des Cholesterins.

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580

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

In Kürze Im Blutplasma erreichen die Lipide Konzentrationen, die ihre Löslichkeit weit übersteigen. Sie werden infolgedessen als Proteinkomplexe in Form von Lipoproteinen transportiert: 5 Chylomikronen sind für den Transport von mit der Nahrung aufgenommenen Triacylglycerinen und anderen Lipiden verantwortlich 5 VLDL transportieren im Wesentlichen in der Leber synthetisierte Triacylglycerine sowie Phospholipide und Cholesterin

18.6

Pathobiochemie

18.6.1

Pathobiochemie der Phosphoglyceride und Sphingolipide

! Autoantikörper gegen Phospholipide führen zum Antiphospholipidsyndrom.

Von Graham Hughes wurde 1983 ein Krankheitsbild beschrieben, das durch Thrombosen, Thrombozytopenie und immer wiederkehrende Aborte gekennzeichnet ist und als Antiphospholipidsyndrom bezeichnet wird. Für die Erkrankung ist typisch, dass hohe Titer von Autoantikörpern gegen verschiedene, meist negativ geladene Phospholipide auftreten. Am häufigsten handelt es sich um Antikörper gegen das mitochondriale Phospholipid Cardiolipin. Über die pathogenetischen Mechanismen, die die beschriebene Symptomatik mit den Autoantikörpern verknüpfen, herrscht noch keine Klarheit.

5 Beim VLDL-Abbau durch die Lipoproteinlipase entstehen LDL als Cholesterin-reiche Lipoproteine, die rezeptorvermittelt v.a. von extrahepatischen Geweben aufgenommen werden 5  Für den reversen Cholesterintransport zur Leber und damit zum Ort der Ausscheidung sind die HDL verantwortlich

Nachweis des entsprechenden Enzymdefekts, häufig mit molekularbiologischen Methoden, in Gewebeproben von Haut, Leber, Dünndarm und auch in den Leukozyten gesichert werden. Selbst beim noch ungeborenen Kind können durch Amniocentese aus dem Fruchtwasser Zellen gewonnen und angezüchtet werden, in denen der Lipidosenachweis durch Enzymbestimmung oder Genanalyse durchgeführt wird. Für die Behandlung einer der Sphingolipidosen, des Morbus Gaucher, gibt es inzwischen ein gut eingeführtes Verfahren. Die Erkrankung, die mit einer Häufigkeit von 1:40 000 vorkommt, beruht auf dem Mangel einer spezifischen Glucocerebrosidase. Sie geht mit der Ablagerung großer Mengen an Glucocerebrosid in den Makrophagen einher und befällt verschiedene Organe und Gewebe. Im Knochenmark kommt es zu einer schweren Störung der

! Enzymdefekte des Sphingolipidabbaus verursachen Lipidspeicherkrankheiten.

18

Eine Reihe von erblichen Stoffwechseldefekten ist durch pathologische Lipidansammlungen in verschiedenen Geweben charakterisiert, weswegen für diese Erkrankungen auch der Sammelbegriff Lipidspeicherkrankheiten oder Lipidosen verwendet wird. Häufig ist das Zentralnervensystem, nicht selten aber auch Leber und Niere betroffen. Die spezielle Bezeichnung Sphingolipidose wird auf bestimmte, in der Regel autosomal-rezessiv vererbte Stoffwechseldefekte angewendet, die meist schon im Kindesalter auftreten. Bei diesen Erkrankungen finden sich abnorme Ablagerungen von gelegentlich falsch aufgebauten Sphingolipiden in den betroffenen Geweben. Die Ursache dieser Sphingolipidspeicherung lässt sich auf genetisch bedingte Defekte der spezifischen, für den Abbau der betreffenden Lipide verantwortlichen Hydrolasen zurückführen, seltener auch auf Defekte der Sphingolipidaktivatorproteine. . Abbildung 18.32 stellt die wichtigsten heute bekannten Sphingolipidosen zusammen. Die Diagnose kann durch die Bestimmung des gespeicherten Lipids und v.a. durch den

. Abb. 18.32. Enzymdefekte, die Sphingolipidosen verursachen (Auswahl). Cer = Ceramid; Gal = Galactose; GalNac = N-Acetyl-Galactosamin; Glc = Glucose; NANA = N-Acetyl-Neuraminat. Der schwarze Balken gibt die Lokalisation des Enzymdefekts beim Sphingolipidabbau an, aus dem sich die pathologisch gespeicherte Verbindung ableitet

581 18.6 · Pathobiochemie

Hämatopoese, am Knochen treten Nekrosen und Frakturen auf, Leber und Milz können extrem vergrößert sein. Für die Therapie injiziert man den Patienten die ihnen fehlende Glucocerebrosidase. In nativer Form wird dieses Enzym allerdings eher von Hepatozyten als von Makrophagen aufgenommen und ist deswegen ziemlich wirkungslos. Besser ist die Verwendung modifizierter Glucocerebrosidasen, die vermehrt mannosehaltige Kohlenhydratseitenketten aufweisen und deswegen viel besser von Makrophagen internalisiert werden können. Hiermit sind bei einer Reihe von Patienten gute Erfolge erzielt worden.

18.6.2

Pathobiochemie des Lipoproteinstoffwechsels

Sehr häufig sind Erkrankungen, die durch Veränderungen im Lipoproteinmuster des Plasmas gekennzeichnet sind. Generell kann man Hypo- und Hyperlipoproteinämien unterscheiden. Neben primären Lipoprotein-Stoffwechselstörungen, die auf genetischen Defekten beruhen, kommen wesentlich häufiger sekundäre Lipoprotein-Stoffwechselstörungen vor, die durch Diätfehler oder andere Primärerkrankungen verursacht werden. ! Hypolipoproteinämien beruhen meist auf genetischen Defekten.

A-β-Lipoproteinämie. Die A-E-Lipoproteinämie ist charak-

terisiert durch eine Verminderung oder das Fehlen der LDL und anderer, das Apolipoprotein B tragender Lipoproteine im Plasma. Ursache dieser Erkrankung ist entweder eine Störung der Apolipoprotein-B-Biosynthese oder Mutationen im Bereich des Triacylglycerin-Transferproteins (7 Kap. 18.5.2). Da beide Proteine für die Freisetzung von Apolipoprotein B enthaltenden Lipoproteine notwendig sind, findet sich bei den Patienten eine Verminderung der Chylomikronen, VLDL und LDL. Nach oraler Fettbelastung kommt es nicht zu einer Freisetzung von Chylomikronen. Als Ausdruck der Transportstörung findet sich eine ausgeprägte Erhöhung des Triacylglyceringehalts der Darmmukosa und der Leber. Die Patienten haben zwar ein erniedrigtes Risiko für kardiovaskuläre Erkrankungen, jedoch ein erhöhtes Risiko für Karzinome und Erkrankungen des Gastrointestinaltraktes sowie der Lungen, das derzeit nicht erklärt werden kann. Hypo-α-Lipoproteinämie (Tangier-Erkrankung). Diese Erkrankung wurde erstmalig bei Geschwistern, die auf der Tangier-Insel in Virginia lebten, entdeckt. Im Plasma dieser Patienten sind der Spiegel an HDL und damit auch der Cholesteringehalt extrem erniedrigt; es kommt dagegen zu einer Cholesterinspeicherung in den Zellen des retikuloendothelialen Systems. Die Ursache dieser Erkrankung besteht in einer Mutation des ABC-1-Transporters. Dies führt

. Tabelle 18.6. Risikofaktoren bei koronarer Herzerkrankung und arterieller peripherer Verschlusskrankheit Koronare Herzerkrankung

Hyper-. und Dyslipoproteinämie Zigarettenrauchen Hypertonie Diabetes mellitus Übergewicht

Arterielle periphere Verschlusskrankheit

Zigarettenrauchen Hyper- und Dyslipoproteinämie Diabetes mellitus

zu einer Unfähigkeit, HDL-Vorstufen entsprechend mit Cholesterin zu beladen. Dem entsprechend finden sich Cholesterinablagerungen bei den betroffenen Patienten im retikuloendothelialen System. Eine Erhöhung des Risikos für kardiovaskuläre Erkrankungen ist nicht bei allen Patienten nachweisbar. ! Hyperlipoproteinämien stellen ein schweres Gesundheitsrisiko dar.

In Deutschland starben 2004 etwa 370 000 Personen an Krankheiten des Herz-Kreislauf-Systems, was ungefähr 45% aller Todesfälle ausmacht. Die Häufigkeit dieser Erkrankungen steigt von Jahr zu Jahr, wobei die koronare Herzerkrankung ein besonderes Gewicht hat. Diese beruht auf einer arteriosklerotischen Erkrankung der Koronararterien und führt u.a. zum Herzinfarkt (7 Kap. 11.5, 18.6.2). Untersucht man die Betroffenen, so finden sich außerordentlich häufig die in . Tabelle 18.6 zusammengestellten Risikofaktoren. Neben Adipositas, Diabetes mellitus, Hypertonie oder Homocysteinämie und Zigarettenrauchen nehmen Hyper- und Dyslipoproteinämien einen ganz besonders hohen Rang ein. In einer Reihe von Studien konnte gezeigt werden, dass eine Korrelation zwischen der Höhe des Cholesterinspiegels und der Mortalität an koronarer Herzerkrankung besteht. Darüber hinaus haben mehrere prospektive Langzeitstudien zu der Erkenntnis geführt, dass eine Senkung des Cholesterinspiegels in der Tat das Koronarrisiko vermindert. Natürlich sind über den Faktor Hyperlipidämie hinaus noch eine Reihe weiterer pathophysiologischer Mechanismen entscheidend an der Entstehung der koronaren Herzerkrankung beteiligt (. Abb. 18.33). Zu diesen gehören Störungen der Plättchenaggregation und die Hypertonie mit ihren Folgeerkrankungen. ! Primäre Hyperlipoproteinämien beruhen auf genetischen Defekten des Lipoproteinstoffwechsels.

Man weiß heute zwar, dass die einzelnen Lipoproteine nicht statische, für den Transport einer bestimmten Lipidart spezialisierte Transporteinheiten sind, sondern in einem dynamischen Gleichgewicht untereinander stehen und ineinander übergehen können. Trotzdem lassen sich Krankheitsbilder definieren, bei denen häufig nur ein Lipoproteintyp eine erhöhte Konzentration gegenüber der Norm aufweist.

18

582

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

. Abb. 18.33. An der Entstehung der koronaren Herzkrankheit beteiligte Risikofaktoren

Soweit es sich dabei um primäre, d.h. genetisch fixierte Defekte handelt, ist die Zuordnung zu bestimmten Apoproteindefekten wenigstens teilweise möglich. Aufgrund ihres Erscheinungsbildes lassen sich fünf Typen von primären Hyperlipoproteinämien unterscheiden. Hyperlipoproteinämie Typ I. Bei der Hyperlipoproteinämie

Typ I sind auch nach 12-stündiger Nahrungskarenz Chylomikronen im Plasma nachweisbar. Aus dem trüben, lipämischen Serum setzt sich beim Stehen eine dicke Fettschicht ab. Der Triacylglyceringehalt des Serums ist entsprechend erhöht, jedoch kann auch der Cholesteringehalt gesteigert sein. Der Grund für diesen Anstieg der Plasmatriacylglycerine ist ein Mangel an Lipoproteinlipase, der autosomalrezessiv vererbt wird. In manchen Fällen fehlt auch das Apolipoprotein C II, sodass es nicht zur Aktivierung der Lipoproteinlipase kommt. Dieser Mangel an Lipoproteinlipase-Aktivität führt dazu, dass Nahrungsfette zwar resorbiert und als Chylomikronen in das Blut eingespeist, aber nicht rasch genug verwertet werden können. Die Therapie der Erkrankung besteht in einer Reduktion der Fettzufuhr auf weniger als 3 g/Tag. Dabei sollten Triacylglycerine mit Fettsäuren kurzer und mittlerer Kettenlänge bevorzugt werden, da diese direkt an das Pfortaderblut abgegeben und nicht in Chylomikronen eingebaut werden (7 Kap. 21.6.2). Hyperlipoproteinämie Typ II (familiäre Hypercholesterinämie). Diese autosomal-dominant vererbte Erkrankung ist

18

durch eine sehr starke Erhöhung der Cholesterinkonzentration des Serums gekennzeichnet, die mit einer Erhöhung der LDL-Fraktion einhergeht. Die Triacylglycerinkonzentration kann normal (Typ IIa) bzw. leicht erhöht (Typ IIb) sein. Heterozygote kommen mit einer Häufigkeit von 1:500 vor und machen etwa 5% der Patienten aus, die jünger als 60 Jahre sind und bereits einen Myocardinfarkt hinter sich haben. Homozygote Träger der Erkrankung kommen mit

einer Frequenz von 1:1 000 000 vor und leiden schon in der Kindheit an einer schweren Arteriosklerose mit koronarer Herzerkrankung und Cerebralsklerose. Die Ursache des Defektes liegt in einem Funktionsdefekt des LDL-Rezeptors. Aufgrund molekularbiologischer Untersuchungen des LDL-Rezeptors bzw. seines Gens an einer großen Zahl homozygoter Patienten konnten vier Klassen von Mutationen definiert werden, die das Krankheitsbild auslösen können. Am häufigsten (ca. 50% der Fälle) findet sich ein Rezeptormangel. In anderen Fällen wird der Rezeptor zwar synthetisiert jedoch nicht posttranslational prozessiert und glycosyliert, sodass er nicht in die Membran eingebaut werden kann. Gelegentlich fanden sich Defekte der LDL-Bindungsstellen des Rezeptors oder infolge von Mutationen am C-terminalen Teil des Rezeptors, eine Störung der Assoziation mit Clathrin und damit der Bildung der für die Rezeptorinternalisierung wichtigen coated pits. Die genannten Defekte führen ohne Ausnahme zu einer Hemmung der LDL-Aufnahme und damit zum Anstieg des Serumcholesterins. Auf der anderen Seite fällt die Hemmung der endogenen Cholesterinbiosynthese der extrahepatischen Gewebe durch die LDL-Aufnahme (7 Kap. 18.5.2) weg, sodass es zur überschüssigen Cholesterinbiosynthese kommt. Dies erhöht die Serumcholesterinkonzentration und damit das Arterioskleroserisiko weiter. Die Behandlung besteht bei Homozygoten darin, das Plasma in regelmäßigen Abständen durch Affinitätschromatographie an einer mit einem Apolipoprotein B-Antikörper dotierten Matrix zu behandeln. Daneben muss die Cholesterinzufuhr gesenkt und der Cholesterinspiegel durch Gaben von Cholestyramin (7 Kap. 32.1.4) und Nicotinsäure gesenkt werden. Ein weiteres Therapieprinzip, das bei heterozygoten Patienten eingesetzt werden kann, besteht in der Behandlung mit Hemmstoffen der HMG-CoA-Reduktase (Mevinolin, . Abb. 18.23), die außerdem zu einer vermehrten Synthese von LDL-Rezeptoren führen. Bei Homozygoten ist wegen des Befalls beider Allele des LDL-Rezeptor-Gens eine derartige Therapie nicht sinnvoll. Hyperlipoproteinämie Typ III. Kennzeichnend für diese Erkrankung ist das Auftreten einer besonders breiten Lipoproteinbande im E-Globulinbereich der Lipidelektrophorese. Die in dieser Bande wandernden Lipoproteine gehören ihrer Dichte nach zu den VLDL. Aus der gegenüber normalen VLDL geänderten elektrophoretischen Wanderungsgeschwindigkeit kann geschlossen werden, dass es sich um ein atypisches VLDL mit geänderter Apolipoprotein-Zusammensetzung handelt. Die Patienten sind homozygot für eine als Apo E2 bezeichnete Variante des Apolipoprotein E. Lipoproteine mit diesem Protein werden nicht vom LDL-Rezeptor erkannt, weswegen sich im Blut relativ cholesterinreiche Apolipoproteine ansammeln, die von einem spezifischen, als Scavenger Rezeptor bezeichneten Makrophagenrezeptor gebunden werden. Dies führt zur Interna-

583 Literatur

lisierung und zur Umwandlung von Makrophagen in lipidreiche Schaumzellen. Im Serum finden sich erhöhte Triacylglycerin- und Cholesterinspiegel, außerdem lagert sich Cholesterin in der Haut der Erkrankten ab. Das Arterioskleroserisiko ist extrem hoch. Die Behandlung besteht in einer Reduktion der Cholesterinzufuhr. Hyperlipoproteinämie Typ IV. Diese Form der Hyperlipo-

proteinämie zeichnet sich durch eine deutliche Zunahme der Triacylglycerine mit einem geringgradigen Anstieg des Cholesteringehalts im Serum aus. Das Serum ist in Abhängigkeit vom Ausmaß der Triacylglycerinvermehrung klar bis milchig trüb. Vermehrt sind die VLDL. Die Konzentration der Lipoproteine wird durch eine kohlenhydratreiche Mahlzeit deutlich erhöht, weswegen die Erkrankung auch als kohlenhydratinduzierte Hyperlipämie bezeichnet wird. Der metabolische Defekt der Erkrankung ist nicht bekannt, häufig handelt es sich um Patienten mit auffallendem Übergewicht, Diabetes mellitus und Hyperurikämie. Die Therapie besteht in einer Reduktion der Energie- und Kohlenhydratzufuhr. Hyperlipoproteinämie Typ V. In ihrem Erscheinungsbild entspricht diese Form der Hyperlipoproteinämie einer Mischform der Typen I und IV. Charakteristisch sind eine exzessive Vermehrung der Triacylglycerine und eine mäßige Vermehrung des Cholesterins im Serum. In der Elektrophorese findet sich eine Zunahme der Chylomikronen

und der VLDL. Der primäre Defekt der Erkrankung ist nicht bekannt, das Krankheitsbild ist außer der Änderung der Blutfettkonzentrationen durch Ablagerung von Cholesterin in der Haut gekennzeichnet. Ein besonderes Arterioskleroserisiko besteht nicht. ! 20–25% der erwachsenen Bevölkerung leiden an sekundärer Hypercholesterinämie.

Sekundäre Hypercholesterinämie. 20–25% der erwachse-

nen Bevölkerung Deutschlands leiden an einer Erhöhung der Serum-Cholesterinkonzentration über den Normalbereich. Man nimmt an, dass bei diesen Patienten eine genetische Disposition zu erhöhten LDL-Konzentrationen besteht, die jedoch durch zusätzliche exogene Faktoren wie Übergewicht oder Bewegungsmangel verstärkt werden muss. Sekundäre Hyperlipoproteinämien können die verschiedensten Ursachen haben. Bei einer Reihe von Erkrankungen wie Diabetes mellitus, Übergewicht, Verschlussikterus, nephrotisches Syndrom, Gicht, Pankreatitis, Alkoholismus, Schwangerschaft und Hypothyreose entstehen Hyperlipoproteinämien, bei denen häufig spezifische Lipoproteine vermehrt vorkommen. Am häufigsten handelt es sich um Hyperlipoproteinämien des Typs IV, gelegentlich auch des Typs II. Eine sekundäre Hyperlipoproteinämie des Typs I findet sich nur bei unbehandeltem Diabetes Typ 1 und ist dementsprechend heute sehr selten. Beim Verschlussikterus sowie der Hyperthyreose finden sich darüber hinaus atypische Lipoproteine.

In Kürze Störungen im Stoffwechsel von Phosphoglyceriden und Sphingolipiden, z.B. das Antiphospholipidsyndrom oder die Lipidspeicherkrankheiten, sind seltene Erkrankungen. Häufig sind dagegen Störungen der Lipoproteinzusammensetzung oder des Lipoproteinstoffwechsels. Man unterscheidet Hypo- und Hyperlipidämien, die letzteren werden auch als Dyslipidämien bezeichnet. Genetische Formen dieser Erkrankungen betreffen Mutationen in den Genen für:

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Apolipoproteine die Assemblierung von Lipoproteinen lipolytische Enzyme sowie Rezeptoren, die für die Lipoproteinaufnahme benötigt werden

Erworbene Hyperlipoproteinämien betreffen häufig das Verhältnis von LDL zu HDL und sind von einer Hypercholesterinämie begleitet. Sie gelten als Risikofaktoren für Arteriosklerose und koronare Herzerkrankung.

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18

584

Kapitel 18 · Stoffwechsel von Phosphoglyceriden, Sphingolipiden und Cholesterin

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18

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19 19

Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine Georg Löffler, Monika Löffler

19.1

Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden – 586

19.1.1 19.1.2 19.1.3 19.1.4 19.1.5

Biosynthese von Purinnucleotiden – 586 Biosynthese von Pyrimidinnucleotiden – 590 Biosynthese von Desoxyribonucleotiden – 591 Regulation der Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden – 593 Hemmstoffe der Purin- und Pyrimidinbiosynthese – 596

19.2

Wiederverwertung von Purinen und Pyrimidinen – 597

19.3

Abbau von Nucleotiden – 599

19.3.1 19.3.2

Abbau von Purinnucleotiden – 599 Abbau von Pyrimidinnucleotiden – 601

19.4

Pathobiochemie – 602

19.4.1 19.4.2

Purinstoffwechsel – 602 Pyrimidinstoffwechsel – 604

Literatur

– 605

586

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

> > Einleitung Purine und Pyrimidine haben als Bausteine von Coenzymen wichtige Aufgaben, darüber hinaus dienen sie in Form ihrer zugehörigen Nucleinsäuren der Informationsspeicherung und -weitergabe in biologischen Systemen. Für die Biosynthese der Purinund Pyrimidinbasen werden einfache Bausteine als Substrate verwendet, wobei häufig als Zwischenprodukte die reaktionsfreudigeren Nucleotide benutzt werden. Die Kenntnis der Biosynthesewege hat nicht nur zu einem tieferen Verständnis der Regulation der beteiligten Vorgänge geführt, sondern lieferte auch die Ansatzpunkte zur erfolgreichen Entwicklung von Arzneimitteln, die durch Beeinträchtigung der Purin- bzw. Pyrimidinbiosynthese als Cytostatica verwendet werden. Darüber hinaus hat sich die Möglichkeit zur Entwicklung von Arzneimitteln eröffnet, die zur Behandlung der Gicht als einer der klassischen, seit Jahrtausenden bekannten und gefürchteten Erkrankungen des Menschen eingesetzt werden können.

19.1

Biosynthese von Purinund Pyrimidinnucleotiden

19.1.1

Biosynthese von Purinnucleotiden

! Das Puringerüst wird aus Glutamin, Aspartat, Glycin sowie Formiat und HCO3– aufgebaut.

Schon in den fünfziger Jahren konnte experimentell durch Einsatz isotopenmarkierter Verbindungen die Herkunft der einzelnen, am Aufbau des Puringerüstes beteiligten C- und N-Atome nachgewiesen werden (. Abb. 19.1). ! Purine werden als Ribonucleotide synthetisiert.

Der Mechanismus dieser Biosynthese wurde erst verständlich, als gezeigt werden konnte, dass entgegen den Erwartungen nicht zuerst das Puringerüst synthetisiert und danach die N-glycosidische Bindung mit Ribose geknüpft wird. Die Biosynthese erfolgt vielmehr von der ersten Reaktion an in Form eines zunächst offenen, später ringförmigen Ribonucleotids. Dazu ist zunächst die Biosynthese eines reaktionsfreudigen Derivats des Ribose-5-phosphats notwendig.

dem E- und J-Phosphat des ATP bestehende Pyrophosphatgruppe in D-Stellung auf das C1-Atom des Ribose-5-phosphats übertragen wird. Die für diese Reaktion verantwortliche PRPP-Synthetase ist nicht ausschließlich für die Biosynthese von Purinnucleotiden spezifisch, sondern wird auch bei der Biosynthese von Pyrimidinnucleotiden benötigt. Biosynthese von Inosinmonophosphat. Durch schrittweise Anlagerung der einzelnen C- und N-Atome an das PRPP wird nun der Purinring aufgebaut. In insgesamt 10 Reaktionsschritten entsteht Inosinmonophosphat (IMP) (. Abb. 19.3): 4 Anlagerung des N-Atoms 9 des Puringerüsts. Der Stickstoff entstammt dem Amid-Stickstoff des Glutamins und wird unter Abspaltung der Pyrophosphatgruppe und gleichzeitiger Inversion am C-Atom 1 der Ribose angelagert, sodass 5-Phosphoribosyl-1β-Amin (PRA) entsteht (Schritt (1)) 4 Anlagerung der Atome 4, 5 und 7 des Puringerüsts. An PRA wird in einer ATP-abhängigen Reaktion Glycin unter Bildung einer Säureamidbindung zwischen seiner Carboxylgruppe und der Aminogruppe des 5-Phosphoribosylamins angelagert, wobei Glycinamidribonucleotid (GAR) entsteht (Schritt (2))

Biosynthese von 5-Phosphoribosyl-1-α-Pyrophosphat.

Um die reaktionsfähige Verbindung 5-Phosphoribosyl-1α-Pyrophosphat (PRPP) herzustellen, wird ein Zwischenprodukt des Hexosemonophosphatwegs (7 Kap. 11.1.2), nämlich Ribose-5-phosphat, pyrophosphoryliert (. Abb. 19.2). Diese Reaktion ist insofern ungewöhnlich, als eine aus

19 . Abb. 19.1. Herkunft der Kohlenstoff- und Stickstoffatome im Puringerüst. THF = Tetrahydrofolat

. Abb. 19.2. Pyrophosphorylierung von D-Ribose-5-Phosphat

587 19.1 · Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden

. Abb. 19.3. Reaktionen der Purinbiosynthese bei Vertebraten. (Einzelheiten 7 Text)

19

588

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

4 Anlagerung des C-Atoms 8 des Puringerüsts an die freie Aminogruppe des GAR. Es wird als Formylrest durch N10-Formyltetrahydrofolat übertragen, wobei Formylglycinamid-Ribonucleotid (FGAR) entsteht (Schritt (3)) 4 Anlagerung des N-Atoms 3 des Puringerüsts. In einer ATP-abhängigen Reaktion wird das C-Atom 4 amidiert. Der Stickstoff stammt wiederum vom Amid-Stickstoff des Glutamins, das dabei in Glutamat übergeht. Es entsteht Formylglycinamidin-Ribonucleotid (FGAM) (Schritt (4)) 4 Bildung des Imidazolrings des Puringerüsts. Diese erfolgt in einer wiederum ATP-abhängigen Reaktion durch Ringschluss zwischen dem C-Atom 8 und NAtom 9. Es entsteht Aminoimidazol-Ribonucleotid (AIR) (Schritt (5)) 4 Anlagerung des C-Atoms 6 des Puringerüsts. An AIR wird in einer reversiblen Reaktion CO2 angelagert, womit auch das C-Atom 6 des Purinkörpers gebildet ist und das 4-Carboxy-5-Aminoimidazol-Ribonucleotid (CAIR) entsteht. Auffallenderweise erfolgt die Carboxylierung ohne Einschaltung von Biotin. Im Gegensatz zu Mikroorganismen benötigen Vertebraten dazu kein ATP (Schritt (6)) 4 Anlagerung des N-Atoms 1 des Puringerüsts. Hierfür werden zwei Reaktionen benötigt. Zunächst wird in einer ATP-abhängigen Reaktion am C-Atom 6 Aspartat angelagert, sodass 5-Aminoimidazol-4-N-Succinocarboxamidribonucleotid (SAICAR) entsteht (Schritt (7)) 4 Von dieser Verbindung wird Fumarat abgespalten, sodass 5-Aminoimidazol-4-Carboxamidribonucleotid (AICAR) entsteht. Diese Art der Übertragung einer Aminogruppe kommt auch bei verschiedenen Reaktionen des Aminosäurestoffwechsels und beim Harnstoffzyklus (7 Kap. 13.5.2) vor. Aspartat stellt gewissermaßen das Trägermolekül für die Aminogruppe dar (Schritt (8)) 4 Anheftung des C-Atoms 2 des Puringerüsts. Das noch fehlende C-Atom 2 wird wieder als Formylrest durch N10-Formyltetrahydrofolat an das Atom 3 angelagert, sodass 5-Formamidoimidazol-4-Carboxamid-Ribonucleotid (FAICAR) entsteht (Schritt (9)) 4 Durch einfache Wasserabspaltung zwischen dem CAtom 2 und dem N-Atom 1 erfolgt ohne ATP der Schluss des zweiten Rings, wobei Inosinmonophosphat (IMP, Inosinsäure) gebildet wird (Schritt (10)) ! IMP ist der Startpunkt der Biosynthese von AMP und GMP.

19

Vom IMP startet die Biosynthese der beiden anderen Purinnucleotide Adenosinmonophosphat (AMP, Adenylsäure) und Guanosinmonophosphat (GMP, Guanylsäure) (. Abb. 19.4).

. Abb. 19.4. Biosynthesen von AMP und GMP aus IMP. (Einzelheiten 7 Text)

AMP-Biosynthese. Zur AMP-Biosynthese ist der Ersatz des

Sauerstoffs am C-Atom 6 des IMP durch eine Aminogruppe notwendig, der in einer zweistufigen Reaktion erfolgt, wobei Aspartat wieder der Donor der Aminogruppe ist: 4 Aspartat wird in einer GTP-abhängigen Reaktion unter Wasserabspaltung an das C-Atom 6 des IMP geheftet. Es entsteht das Adenylosuccinat oder Succinoadeninnucleotid 4 Durch Abspaltung von Fumarat wird nun Adenosinmonophosphat (AMP) gebildet GMP-Biosynthese. Auch die Biosynthese des GMP erfolgt

in einer zweistufigen Reaktion: 4 Zunächst wird IMP am C-Atom 2 oxidiert, wobei Xanthosinmonophosphat (Xanthylsäure) entsteht 4 An dieses wird in einer ATP-abhängigen Reaktion unter Bildung von Guanosinmonophosphat eine

19

589 19.1 · Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden

Aminogruppe geheftet. Der Stickstoff entstammt dem Amid-Stickstoff des Glutamins Bildung von Nucleosiddi- und -triphosphaten. Für die

Überführung von AMP und GMP in die entsprechenden Di- und Triphosphate steht eine Reihe von transphosphorylierenden Reaktionen zur Verfügung: 4 die Nucleosidmonophosphat-Kinase

4 sowie die Nucleosiddiphosphat-Kinase (Adenylatkinase, weitere Bedeutung. 7 Kap. 25.6.2)

! Drei multifunktionelle Enzyme sind bei Vertebraten an der IMP-Biosynthese beteiligt.

Die oben geschilderten Reaktionssequenzen für die Biosynthese von Purinnucleotiden sind bei Pro- und Eukaryoten identisch. Bei Prokaryoten sind inzwischen sämtliche Enzyme für die 10 benötigten Reaktionen isoliert und charakterisiert worden. Wie aus . Tabelle 19.1 zu entnehmen ist, sind beim Menschen und anderen Vertebraten drei multifunktionelle Enzyme an der Purinnucleotidbiosynthese beteiligt, deren Gene auf unterschiedlichen Chromosomen lokalisiert sind: 4 Das GART-Gen codiert für ein multifunktionelles Protein mit einer GAR-Synthetase-, GAR-Transformylaseund AIR-Synthetase-Aktivität (Enzyme 2–5) 4 Das AIRC-Gen codiert für ein multifunktionelles Protein mit einer AIR-Carboxylase- und SAICAR-Synthetase-Aktivität (Enzyme 6–7) 4 Das IMPS-Gen codiert für ein multifunktionelles Protein mit einer die AICAR-Transformylase- und IMP-Cyclohydrolase-Aktivität (Enzym 9–10) Lediglich der erste Schritt der Biosynthesekette, die Glutamin-PRPP-Amidotransferase, und die Adenylosuccinat-Synthetase stellen monofunktionelle Proteine dar. Die Adenylosuccinatlyase katalysiert jedoch außer der Reaktion 8 der IMP-Biosynthese die Umwandlung von Adenylosuccinat zu AMP, ist also für zwei Reaktionen verantwortlich. Die Enzyme der Purinbiosynthese sind damit ein weiteres eindrucksvolles Beispiel für die in höheren Eukaryoten zu findende Tendenz, die Enzyme für längere Biosynthesen als multifunktionelle Proteine zusammenzufassen und damit unter die Kontrolle nur eines oder weniger Promotoren zu bringen (7 Kap. 12.2.3, 19.1.2). Außerdem ermöglichen multifunktionelle Enzyme die allosterische Regulation der einzelnen Domänen und halten die beteiligten Aktivitäten in genau gleichen stöchiometrischen Ver-

. Tabelle 19.1. Gene und Enzyme der IMP-Biosynthese. Die Angaben über die chromosomale Lokalisation beziehen sich auf die humanen Gene Gen

Chromosom

Schritt

Enzym

GPAT

4

1

Glutamin-PRPP-Amidotransferase

GART

21

2

GAR-Synthetase

GART

21

3

GAR-Transformylase

GART

21

5

AIR-Synthetase

FGAMS

14

4

FGAM-Synthetase

AIRC

4

6

AIR-Carboxylase

AIRC

4

7

SAICAR-Synthetase

ASL

22

8

Adenylosuccinatlyase

IMPS

2

9

AICAR-Transformylase

IMPS

2

10

IMP-Cyclohydrolase

GAR Glycinamid-Ribonucleotid; AIR 5-Aminoimidazol-Ribonucleotid; FGAM Formyl-Glycinamidin-Ribonucleotid; SAICAR 5-Aminoimidazol-4-N-Succinocarboxamid-Ribonucleotid; AICAR 5-Aminoimidazol-4-Carboxamid-Ribonucleotid.

. Tabelle 19.2. Energieverbrauch bei der Purinbiosynthese kJ/mol

Biosynthese von

Benötigtes Zahl der Nucleotid benötigten energiereichen Bindungen

PRPP

ATP

2

60

Glycinamidribonucleotid

ATP

1

30

N-FormylglycinamidinRibonucleotid

ATP

1

30

5-AminoimidazolRibonucleotid

ATP

1

30

5-Aminoimidazol-4-NSuccinocarboxamidRibonucleotid

ATP

1

30

Adenylosuccinat

GTP

1

30

Guanosinmonophosphat

ATP

2

60

Gesamtverbrauch für die Biosynthese von IMP

5 ATP

6

180

Gesamtverbrauch für die Biosynthese von AMP

5 ATP + 1 GTP

7

210

Gesamtverbrauch für die Biosynthese von GMP

6 ATP

8

240

hältnissen zueinander. Sie bieten zudem instabilen Substraten/Zwischenprodukten einen Schutz vor Zerfall oder Abbau. ! Sechs bzw. sieben ATP werden für die Biosynthese von AMP bzw. GMP benötigt.

In . Tabelle 19.2 ist der für die Purinbiosynthese benötigte Energieverbrauch zusammengestellt. Für die de novo-Biosynthese von IMP werden insgesamt 5 mol ATP benötigt,

590

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

von denen jedoch eines zu AMP und Pyrophosphat (entsprechend 2 Pi) gespalten wird. Um zum AMP zu kommen, wird eine weitere energiereiche Bindung in Form von GTP benötigt, die Biosynthese von GMP aus IMP erfordert ein ATP, das jedoch wieder zu AMP und Pyrophosphat (entsprechend 2 Pi) gespalten wird.

19.1.2

Biosynthese von Pyrimidinnucleotiden

! Aspartat und Carbamylphosphat liefern die C- und N-Atome des Pyrimidingerüsts.

Das Pyrimidingerüst wird aus Aspartat und Carbamylphosphat aufgebaut (. Abb. 19.5): 4 Durch Kondensation von Aspartat mit Carbamylphosphat entsteht Carbamylaspartat (Ureidosuccinat), das damit bereits die Atome 1–6 des Pyrimidinskeletts enthält 4 Durch Wasserabspaltung zwischen dem N-Atom 1 sowie dem C-Atom 6 des Carbamylaspartats wird Dihydroorotat gebildet, womit das Grundskelett der Pyrimidine synthetisiert ist 4 Durch die Dihydroorotat-Dehydrogenase entsteht Orotat 4 Orotat reagiert mit PRPP zum Orotidin-5ⴕ-monophosphat (OMP). Im Gegensatz zur Purinbiosynthese, die ja von Anfang an in Form des entsprechenden Nucleotids erfolgt, kommt es also bei der Pyrimidinbiosynthese erst relativ spät zur Anlagerung eines Ribosephosphats 4 Durch Decarboxylierung von OMP wird Uridinmonophosphat (UMP) gebildet, das den Grundbaustein für die anderen Nucleotide der Pyrimidinreihe abgibt ! Aus UMP entstehen die weiteren Pyrimidinnucleotide. . Abb. 19.6 gibt einen Überblick über die Biosynthese der weiteren Pyrimidinnucleotide aus UMP. Dieses kann in zwei ATP-abhängigen Reaktionen zu Uridindiphosphat (UDP) und Uridintriphosphat (UTP) phosphoryliert werden. In einer Glutamin-abhängigen Reaktion wird durch die CTP-Synthetase eine Aminogruppe an das CAtom 4 des UTP geheftet, wobei Cytidintriphosphat (CTP) entsteht. Über die Biosynthese von Thyminnucleotiden 7 Kap. 19.1.3. ! Auch für die Pyrimidinbiosynthese werden multifunktionelle Enzyme verwendet.

19

Im Gegensatz zu Prokaryonten und niederen Eukaryonten werden bei Vertebraten für die sechs Reaktionen der Pyrimidinbiosynthese lediglich drei Enzymproteine benötigt, von denen zwei multifunktionelle Proteine sind: 4 Das vom sog. CAD-Gen codierte trifunktionale CADEnzym ist im Cytosol lokalisiert und enthält in seinen

. Abb. 19.5. Reaktionen der Pyrimidinbiosynthese. (Einzelheiten 7 Text)

591 19.1 · Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden

nutzt das Ubichinon der Atmungskette als Elektronenakzeptor 4 Für die letzten beiden Teilreaktionen wird ein von einem Gen codiertes, diesmal bifunktionales Enzym verwendet, das als UMP-Synthase bezeichnet wird. Es verfügt über eine Orotat-Phosphoribosyltransferase – sowie eine OMP-Decarboxylase- Domäne und ist wiederum im Cytosol lokalisiert

19.1.3

Biosynthese von Desoxyribonucleotiden

! Die Ribonucleotid-Reduktase katalysiert die Reduktion des Riboserestes von Ribonucleotiden zum Desoxyriboserest.

Bilanzgleichung der Ribonucleotid-Reduktase. Ein ent-

scheidender Schritt für alle Reaktionen, bei denen DNA synthetisiert wird (7 Kap. 7.2, 7 Kap. 6.2.9) ist die Umwandlung von Ribonucleotiden zu Desoxyribonucleotiden, die von der Ribonucleotid-Reduktase katalysiert wird:

Ungeachtet dieser relativ einfachen Summengleichung handelt es sich um eine komplizierte Reaktionssequenz, bei der sowohl der Reaktionsmechanismus als auch die Herkunft des benötigten Wasserstoffes von besonderem Interesse sind. . Abb. 19.6. Biosynthese von Uridin- und Cytidinnucleotiden. (Einzelheiten 7 Text)

drei Domänen eine Carbamylphosphat-Synthetase-, eine Aspartattranscarbamylase- und eine Dihydroorotase-Aktivität. Von besonderem Interesse ist die Carbamylphosphat-Synthetase-Aktivität, die auch als Carbamylphosphat-Synthetase II bezeichnet wird. Im Gegensatz zu der Carbamylphosphat-Synthetase I des Harnstoffzyklus ist bei ihr der Donor für die NH3Gruppe des Carbamylphosphats nicht Ammoniak, sondern die Amidgruppe der Aminosäure Glutamin, sodass die Carbamylphosphat-Synthetase II eine Glutaminase als zusätzliche Domäne enthält. Die von diesem Enzym katalysierte Reaktion lautet

4 Die Dihydroorotat-Dehydrogenase ist ein aus einer Peptidkette bestehendes Flavin-Enzym. Es ist in der inneren Mitochondrienmembran lokalisiert und be-

Reaktionsmechanismus der Ribonucleotid-Reduktase.

Die Ribonucleotid-Reduktase ist ein tetrameres Enzym aus je zwei R1- und R2-Untereinheiten, die zusammen zwei katalytische Zentren bilden. Die R1-Untereinheiten tragen Bindungsstellen für allosterische Effektoren und andere Regulatoren, außerdem die zwei für die Katalyse wichtigen Thiolgruppen. Die R2-Untereinheit ist an der Substratbindung beteiligt und enthält ein Tyrosylradikal, dessen ganz ungewöhnliche Stabilität durch einen Eisencofaktor hervorgerufen wird. Der Mechanismus der RibonucleotidReduktase ist in vereinfachter Form in . Abb. 19.7 dargestellt. 4 Das Tyrosylradikal greift an der Position 3c des Riboserestes an, sodass ein 3c-Ribonucleotid-Radikal entsteht, welches das am C-Atom 2c nach Austritt von OH– entstehende Kation stabilisiert 4 Dieses wird zweimal reduziert, wobei die beiden Thiole zum Disulfid oxidiert werden 4 Der letzte Schritt der Reaktion besteht nun in der Rückgewinnung des Tyrosylradikals, der Abgabe des Desoxynucleosiddiphosphats und der Reduktion des Disulfids mit Thioredoxin

19

592

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

. Abb. 19.7. Mechanismus der Ribonucleotidreduktase. Die Ribonucleotidreduktase besteht aus zwei Untereinheiten R1 und R2. R1 besitzt zwei für die Reaktion essentielle Cysteinylreste, R2 ein stabiles Tyrosylradikal. Dieses stabilisiert die in der Abbildung dargestellten Zwischenstufen der Reaktion. Am Ende der Reaktionssequenz

wird das Desoxyribonucleosiddiphosphat abgegeben, allerdings liegen die beiden Cysteinylreste als Disulfid vor. Sie werden mit Hilfe des Hilfsproteins Thioredoxin reduziert. Für die Reduktion des dabei entstehenden Thioredoxindisulfids wird NADPH/H+ und FAD benötigt. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

Herkunft des für die Ribonucleotid-Reduktase benötigten Wasserstoffes. Der für die Reduktion der Ribose zur Des-

19.1.1) in die Desoxyribonucleosidtriphosphate umge-

oxyribose benötigte Wasserstoff entstammt zwar dem NADPH/H+, jedoch wird dieses nicht direkt für die Reduktionsreaktion benutzt (. Abb. 19.7): 4 NADPH/H+ dient primär dazu, FAD zu FADH2 zu reduzieren 4 Dieses überführt anschließend eine Disulfidbrücke in einem als Thioredoxin bezeichneten Protein in zwei SH-Gruppen (ein Dithiol) 4 Reduziertes Thioredoxin dient dazu, eine Disulfidbrücke der Ribonucleotid-Reduktase in zwei SHGruppen umzuwandeln, die dann für die eigentliche Reduktionsreaktion verwendet werden

19

Die durch die Ribonucleotid-Reduktase gebildeten Desoxyribonucleosiddiphosphate werden mit Hilfe von ATP durch entsprechende Nucleosiddiphosphat-Kinasen (7 Kap.

wandelt:

! Thyminnucleotide entstehen durch Methylierung von Desoxyuridinmonophosphat.

Bezeichnend für den Unterschied zwischen DNA und RNA ist nicht nur, dass die erstere 2c-Desoxyribose enthält, sondern auch die Base Thymin (5-Methyluracil) anstelle des in der RNA vorkommenden Uracils (7 Kap. 5.1.1). Das für die Biosynthese der Thyminnucleotide verantwortliche Enzym ist die Thymidylatsynthase, die folgende Reaktion katalysiert:

593 19.1 · Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden

. Abb. 19.8. Mechanismus der Thymidylatsynthase. Bei der Umwandlung des Methylenrestes des N5, N10-Methylentetrahydrofolats (N5, N10-THF) in die Methylgruppe des Thymidylats werden Reduktionsäquivalente aus der Tetrahydrofolsäure benötigt. Dies

führt zur Oxidation der Tetrahydrofolsäure zu Dihydrofolsäure (DHF), welche deswegen durch die Dihydrofolatreduktase zu Tetrahydrofolat (THF) regeneriert werden muss. (Einzelheiten 7 Text)

. Abb. 19.8 zeigt die bei der Thymidylatsynthese ablaufenden Teilreaktionen: 4 Der Donor der Methylgruppe ist das N5, N10-MethylenTetrahydrofolat (N5, N10-THF). Da dieses jedoch eine höhere Oxidationsstufe aufweist als eine Methylgruppe, liefert das reduzierte Pteridingerüst des N5, N10-Methylen-Tetrahydrofolats auch noch Wasserstoff und Elektronen, sodass es nach der Desoxythymidinsynthese als Dihydrofolat (DHF) vorliegt 4 Durch die als Hilfsenzym wirkende DihydrofolatReduktase wird DHF mit Hilfe von NADPH/H+ in Tetrahydrofolat (THF) umgewandelt 4 THF kann unter Katalyse der Serin-HydroxymethylTransferase einen –CH2OH-Rest des Serins aufnehmen und liegt nach Wasserabspaltung wieder als N5, N10Methylen-Tetrahydrofolat vor (7 Kap. 23.3.8)

19.1.4

Damit ist die Geschwindigkeit der ThyminnucleotidBiosynthese eng mit dem Stoffwechsel der Folsäure (7 Kap. 23.3.8) verknüpft. Bei jeder Verminderung des Folsäureangebotes bzw. der zur Verfügung stehenden Folsäure muss es zu einer Störung der Thyminnucleotid-Biosynthese und damit v.a. der DNA-Replikation kommen.

Dieser komplexe Mechanismus gewährleistet eine sehr genaue Anpassung der de novo-Biosynthese von Purinen an die Bedürfnisse des Organismus, ist aber auch zugleich die pathobiochemische Grundlage einiger schwerer Störungen des Purinstoffwechsels (7 Kap. 19.4.1).

Regulation der Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden

! Die Purinbiosynthese wird allosterisch reguliert.

Regulation der IMP-Biosynthese. Das geschwindigkeits-

bestimmende Enzym der IMP-Biosynthese ist die PRPPAmidotransferase (7 Kap. 19.1.1), welche die Glutaminabhängige Bildung von 5-Phosphoribosylamin katalysiert. Das Enzym unterliegt der Regulation durch allosterische Aktivatoren und Inhibitoren (. Abb. 19.9): 4 PRPP, der Akzeptor der vom Glutamin abgespaltenen Amidgruppe, erniedrigt die KM des Enzyms für Glutamin und führt so zu einer beträchtlichen Aktivierung 4 Alle Purinnucleotide als Endprodukte der Biosynthesekette sind allosterische Inhibitoren

19

594

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

. Abb. 19.10. Regulation der Pyrimidinbiosynthese. CAD = multikatalytisches Enzym mit Carbamylphosphatsynthetase, Aspartattranscarbamylase- und Dihydroorotaseaktivität; DHO-Dehydrogenase; Dihydroorotat-Dehydrogenase; UMP = multikatalytisches Enzym mit Orotat-Phosphoribosyltransferase- und OMP-Decarboxylaseaktivität. (Einzelheiten 7 Text) . Abb. 19.9. Regulation der Purinbiosynthese. PRPP = 5c-Phosphoribosylpyrophosphat. (Einzelheiten 7 Text)

Regulation der Biosynthese von Adenin- und Guaninnucleotiden. Auch die Umwandlung von IMP zu AMP

bzw. GMP wird reguliert (. Abb. 19.9): 4 Die IMP-Dehydrogenase wird durch GMP und GDP gehemmt, die Adenylosuccinat-Synthetase durch AMP und ADP 4 Hohe Konzentrationen von GTP fördern die AMPBildung, hohe Konzentrationen von ATP die GMPBildung ! Die Pyrimidinbiosynthese wird auf der Stufe des trifunktionalen CAD-Enzyms reguliert.

Regulation der Dihydroorotat-Biosynthese. Bei Prokaryonten ist das hierfür verantwortliche allosterisch regulierte Enzym die Aspartattranscarbamylase (7 Kap. 19.1.2), bei Eukaryonten ist es dagegen das erste für die Pyrimidinbiosynthese spezifische Enzym, die CarbamylphosphatSynthetase II-Aktivität des CAD-Proteins (. Abb. 19.10). Diese wird durch UTP als Endprodukt der Biosynthesekette gehemmt. PRPP ist dagegen ein wirksamer allosterischer Aktivator. Für eine Koordination von Purin- und Pyrimidinbiosynthese sorgt auch die CTP-Synthase, die durch GTP allosterisch aktiviert und durch ihr Produkt CTP gehemmt wird.

19

! Um die Biosynthese von Nucleinsäuren zu gewährleisten, müssen Purin- und Pyrimidinbiosynthese koordiniert ablaufen.

Regulation der Purin- und Pyrimidinbiosynthese. In ruhenden oder voll differenzierten Zellen ist die Geschwindigkeit der de novo Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden relativ gering, da ein großer Teil des Bedarfs über die Wiederverwertungsmechanismen (7 Kap. 19.2) gedeckt werden kann. Für proliferierende Zellen muss beim Übergang von der G1-Phase in die S-Phase des Zellzyklus gewährleistet sein, dass Nucleinsäurevorstufen in erhöhtem Umfang und in richtigen Proportionen zueinander synthetisiert werden können. Dem PRPP kommt dabei nicht nur die Rolle eines Substrates, sondern auch die eines allosterischen Aktivators für die Pyrimidin- und Purinbiosynthese zu. Besonders gut ist dies für die Pyrimidinbiosynthese untersucht. So konnte gezeigt werden, dass für den Übergang von der G1- in die S-Phase benötigte Wachstumsfaktoren (z.B. EGF, 7 Kap. 7.1.2) über die Aktivierung von MAP-Kinasen eine Phosphorylierung des CAD-Enzyms bewirken. Dadurch wird seine Stimulierbarkeit durch PRPP erhöht und die Hemmbarkeit durch UTP erniedrigt. Eine deutliche Aktivitätszunahme der Enzyme der Purinbiosynthese, der Ribonucleotid-Reduktase, der Dihydrofolat-Reduktase, der Thymidinkinase sowie der Thymidylatsynthase findet ebenfalls beim Übergang in die S-Phase des Zellzyklus statt. Hierbei spielen zu diesem Stadium des Zellzyklus aktivierte Transkriptionsfaktoren eine wichtige Rolle (7 Kap. 7.1.3). Regulation der Ribonucleotid-Reduktase. Die Ribonuc-

leotid-Reduktase zeigt unter den o.g. Enzymen die Beson-

595 19.1 · Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden

derheit, dass sie die für die DNA-Biosynthese benötigten Desoxyribonucleosidtriphosphate im richtigen Verhältnis zur Verfügung stellen muss. Sie unterliegt deswegen einer besonders komplexen Regulation, die auf dem Vorhandensein eines regulatorischen Aktivitäts- sowie eines regulatorischen Spezifitätszentrums beruht: 4 Ein allgemeiner allosterischer Inhibitor am regulatorischen Aktivitätszentrum des Enzyms ist dATP, während ATP ein allgemeiner Aktivator ist 4 Am Spezifitätszentrum steigert ATP die Reduktion von Pyrimidinnucleotiden, TTP die von GDP und dGTP die von ADP 4 TTP und dGTP hemmen die Reduktion von Pyrimidinnucleotiden

. Abb. 19.11. Regulation der Thymidylatsynthase. p53 = Tumorsuppressorprotein p53. (Einzelheiten 7 Text)

Regulation der Thymidylatsynthase. Thymin ist die einzige Base, die nahezu ausschließlich in DNA vorkommt. Thyminmangel führt zum Zelltod durch Apoptose, Thyminüberschuss zum Stopp des Zellzyklus. Eine wichtige Rolle hierbei spielt offenbar, dass die Thymidylatsynthase sehr spezifisch an ihre eigene mRNA sowie an die mRNA des Tumor-Suppressor-Proteins p53 (7 Kap. 35.4.2) bindet

midinnucleotidsynthese vermieden und zum anderen der durch p53 verursachte Stopp am G1/S-Übergang des Zellzyklus aufgehoben und gegebenenfalls die Einleitung einer Apoptose verhindert.

. Abb. 19.12. Hemmstoffe der Pyrimidin- und Purinbiosynthese. a 3-Deazauridin; b Cyclopentenylcytosin; c Leflunomid; d Atovaquone;

e Ribavirin; f Mycophenolsäure; g 5c-Fluoro-Uracil; h Aminopterin, Amethopterin; i Hydroxyharnstoff

und so die Translation beider Proteine vermindert (. Abb. 19.11). Hierdurch wird einmal eine überschießende Thy-

19

596

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

19.1.5

Hemmstoffe der Purinund Pyrimidinbiosynthese

In . Abb. 19.12 sind wichtige Hemmstoffe der Purin- und Pyrimidinbiosynthese zusammengestellt, die klinische Verwendung in der Tumortherapie, der Behandlung von Viruserkrankungen oder bei der Immunsuppression finden. Es handelt sich überwiegend um Strukturanaloge von Nucleosiden, die mehr oder weniger spezifisch einzelne enzymatische Schritte der Purin- bzw. Pyrimidinbiosynthese hemmen und deswegen auch als Antimetabolite bezeichnet werden. Nach ihrem Angriffspunkt lassen sie sich in verschiedene Gruppen einteilen. Hemmstoffe der Pyrimidinbiosynthese (. Abb. 19.12a–d). 3-Deazauridin (a) sowie Cyclopentenylcytosin (b) werden nach Aufnahme in die Zielzellen phosphoryliert und sind dann kompetitive Hemmstoffe der OMP-Decarboxylase bzw. CTP-Synthetase. Sie werden v.a. in Kombination mit anderen Cytostatica zur Tumortherapie eingesetzt. Die klinisch angewendeten Hemmstoffe der Dihydroorotat-Dehydrogenase (. Abb. 19.12c,d) sind keine Strukturanalogen. Leflunomid (c) dient zur Behandlung von Autoimmunerkrankungen, wie z.B. von rheumatoider Arthritis und Atovaquone (d) wirkt gegen den Malariaerreger Plasmodium falciparum und Infektionen mit Pneumocystis carinii. Hemmstoffe der Purinbiosynthese (. Abb. 19.12e,f). Für die

spezifische Hemmung der Biosynthese von Purinen sind hochwirksame Antimetabolite entwickelt worden.

So führen Hemmstoffe der Inosinmonophosphat Dehydrogenase (IMPDH) zu einer Verarmung der Zellen an Guaninribo- und -desoxyribonucleotiden. Beispiele sind das Ribavirin (e), das nach intrazellulärer Phosphorylierung als kompetitiver Hemmstoff der IMPDH wirkt und zur Therapie von Viruserkrankungen verwendet wird. Mycophenolsäure (f) hemmt ebenfalls die IMPDH und wird in der Tumortherapie eingesetzt. Hemmstoffe der Thymidylatsynthese ( . Abb. 19.12g,h) . Diese bilden einen inaktiven Komplex mit dem Enzym Thymidylatsynthase. Besonders gut ist in dieser Beziehung das 5-Fluoro-Uracil (g) untersucht, welches durch die in proliferierenden Zellen in hoher Aktivität vorkommende Orotatphosphoribosyl-Transferase zu 5-Fluoro-UMP umgesetzt wird. Für die Zytotoxizität ist sowohl die Bildung von 5-dFluoro-UMP als Inhibitor der Thymidylatsynthase als auch die Bildung von 5-Fluoro-UTP zum Einbau in die RNA notwendig. Hemmstoffe der Dihydrofolat-Reduktase und damit der Biosynthese von Thyminnucleotiden sind die Folsäureanaloga Aminopterin bzw. Amethopterin (h). Hemmstoffe der Ribonucleotid-Reduktase (. Abb. 19.12i). Derartige Verbindungen führen zu einer Verarmung der Zellen an Desoxyribonucleotiden. Bei Tumorzellen löst dies i. Allg. eine Wachstumsverlangsamung aus, seltener eine Redifferenzierung der Tumorzellen. Der Hauptvertreter dieser Gruppe von Arzneimitteln ist der Hydroxyharnstoff (i).

In Kürze Bei Eukaryoten liegen die für die Purin- und Pyrimidinbiosynthese benötigten Enzymaktivitäten überwiegend als Domänen multifunktioneller Proteine vor. Die Purinbiosynthese startet mit Ribose-5-Phosphat und umfasst folgende Schritte: 4 Bildung von 5-Phosphoribosyl-1-D-Pyrophosphat (PRPP) 4 Biosynthese von IMP durch schrittweise Anheftung der C- bzw. N-Atome des Puringerüsts an PRPP 4 Biosynthese von AMP bzw. GMP aus IMP

19

Die Biosynthese von Pyrimidinnucleotiden läuft in verschiedenen Zellkompartimenten ab. Sie ist im Vergleich zu derjenigen von Purinnucleotiden einfacher, Energie sparender, jedoch sauerstoffabhängig. 4 Aus Carbamylphosphat und Aspartat entsteht Carbamylaspartat, aus dem unter Wasserabspaltung und Oxidation Orotat gebildet wird 4 Orotat reagiert mit PRPP zum OMP, aus dem durch Decarboxylierung UMP entsteht 4 UTP übernimmt den Amid-N des Glutamins, wobei CTP entsteht

4 dUMP wird mit N5, N10-Methylen-THF zu dTMP methyliert Die NADPH-abhängige Reduktion von Ribonucleotiden zu Desoxyribonucleotiden wird durch die RibonucleotidReduktase katalysiert. Die Purin- und Pyrimidinnucleotid-Biosynthese wird durch allosterische Mechanismen reguliert: 4 Das Schlüsselenzym für die Purinbiosynthese ist die Glutamin-PRPP-Amidotransferase. Sie wird durch PRPP aktiviert sowie durch Adenin bzw. Guaninnucleotide inhibiert 4 Die Carbamylphosphat-Synthetase II ist das Schlüsselenzym der Pyrimidinbiosynthese. UTP ist ein allosterischer Inhibitor, PRPP ein allosterischer Aktivator Eine große Zahl von Inhibitoren für spezifische Reaktionen der Purin- bzw. Pyrimidinbiosynthese wird zur Therapie von Tumoren, Viruserkrankungen und zur Immunsuppression verwendet.

597 19.2 · Wiederverwertung von Purinen und Pyrimidinen

19.2

Wiederverwertung von Purinen und Pyrimidinen

Purin- und Pyrimidinbasen bzw. die entsprechenden Nucleoside fallen beim intrazellulären Abbau von Nucleinsäuren an, außerdem werden sie bei der intestinalen Resorption von Nahrungsstoffen in den Organismus aufgenommen. Wiederverwertungsreaktionen gewährleisten, dass diese unter hohem Energieaufwand synthetisierten Verbindungen dem Organismus nicht verloren gehen. ! Durch den salvage pathway werden Purinbasen in die entsprechenden Mononucleotide umgewandelt.

Für die Wiederverwertung (Reutilisierung; salvage pathway) der Purinbasen Adenin, Hypoxanthin und Guanin stehen zwei Enzyme zur Verfügung (. Abb. 19.13). 4 Durch die Adenin-Phosphoribosyltransferase (APRT, (1)) wird Adenin in einer PRPP-abhängigen Reaktion zu Adenosinmonophosphat umgewandelt. Das Enzym wird durch die Adeninnucleotide (insbesondere AMP) gehemmt 4 Die Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase (HGPRT, (2)) ist für die Wiedereinführung von Hypoxanthin und Guanin verantwortlich. Wieder ist PRPP der Donor des Phosphoribosylrestes. Das Enzym wird durch seine Endprodukte IMP und GMP gehemmt In Anbetracht der biologischen Bedeutung der Purinnucleotide muss gewährleistet sein, dass der Zelle unter allen Umständen ausreichende Mengen der einzelnen Vertreter dieser Substanzklasse zur Verfügung stehen. Zu diesem Zweck dient ein aus mehr als 15 Enzymen bestehendes System, mit dessen Hilfe es gelingt, Purine, Purinnucleoside und Purinnucleotide vollständig ineinander zu überführen. Da auf diese Weise eine gewisse Unabhängigkeit der Purinnucleotid-Neubildung von der Biosynthesegeschwindigkeit aus den Grundbausteinen gewährleistet wird, ist die biologische Bedeutung dieses »enzymatischen Netzwerkes« beträchtlich.

. Abb. 19.13. Wiederverwertung von Adenin, Hypoxanthin und Guanin. 1 Adenin-Phosphoribosyltransferase (APRT); 2 HypoxanthinGuanin-Phosphoribosyltransferase (HGPRT)

Die biologische Bedeutung des Purinnucleotidzyklus beruht auf der Umwandlung von Aspartat in Fumarat, wodurch der Citratzyklus im Sinne einer anaplerotischen Reaktion (7 Kap. 14.4) mit Substrat beschickt wird. Eine direkte Überführung – in Analogie zur Glutamat-Dehydrogenase katalysierten oxidativen Desaminierung (7 Kap. 19.2) des Aspartats zu Oxalacetat – scheint aufgrund des Fehlens von Aspartat-Dehydrogenase nicht möglich zu sein. Die schon in den späten 20er Jahren gemachte Beobachtung, dass gesteigerte Muskelarbeit mit einer gesteigerten NH3Produktion im Muskelgewebe einhergeht, wird durch die Existenz des Purinnucleotidzyklus erklärt. Er verhindert darüber hinaus, dass bei starker Muskelkontraktion anfallendes AMP zu Adenosin gespalten wird, da er die AMPKonzentrationen niedrig hält. Dass dieser Zyklus für den Muskelstoffwechsel von großer Bedeutung ist, geht aus den gelegentlich zu beobachtenden schweren Störungen der Muskelfunktion bei einem Mangel an AMP-Desaminase oder Adenylosuccinatlyase hervor (7 Kap. 19.4.1).

! Der Purinnucleotidzyklus liefert Fumarat für den Skelettmuskel.

Die einzelnen Schritte des sog. Purinnucleotidzyklus sind in . Abb. 19.14 dargestellt: 4 IMP wird, wie schon bei der Biosynthese der Adeninnucleotide beschrieben, unter Aufnahme von Aspartat mit Hilfe der Adenylosuccinat-Synthetase in Adenylosuccinat umgewandelt 4 Adenylosuccinat wird durch die AdenylosuccinatLyase in AMP überführt und dabei das C-Skelett des Aspartats als Fumarat freigesetzt 4 Der Zyklus wird durch die AMP-Desaminase geschlossen, die unter NH3-Abspaltung AMP in IMP überführt

. Abb. 19.14. Der Purinnucleotidzyklus. Der Purinnucleotidzyklus wird durch die Enzyme AMP-Desaminase, Adenylosuccinat-Synthetase und Adenylosuccinat-Lyase gebildet und hängt mit einer Reihe anderer Enzyme des Purinstoffwechsels zusammen. (Einzelheiten 7 Text)

19

598

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

allerdings in ganz unterschiedlichem Umfang. Eine besonders schlechte Enzymausstattung zur Purinbiosynthese hat z.B. das Zentralnervensystem. Hier findet sich jedoch die höchste Aktivität der Hypoxanthin-Guanin- und der Adenin-Phosphoribosyltransferase. Möglicherweise ist dies die Ursache für die ausgeprägte cerebrale Symptomatik beim Lesch-Nyhan-Syndrom (7 Kap. 19.4.1). ! Für die Wiederverwertung von Purinen und Pyrimidinen spielen Nucleosidtransporter eine große Rolle. . Abb. 19.15. Nucleosidtransporter der Plasmamembran. a Äquilibrierender Nucleosidtransporter; b konzentrierender Nucleosidtransporter. Nuc = Nucleosid. (Einzelheiten 7 Text)

! Pyrimidine können nur als Nucleoside wiederverwertet werden.

Pyrimidinnucleotide kommen in den Nucleinsäuren in etwa den gleichen Mengen vor wie Purinnucleotide. Ihre tägliche Biosyntheserate liegt beim Menschen mit etwa 400–700 mg in der gleichen Größenordnung wie die der Purinnucleotide. Beim Abbau von Nucleinsäuren aus der Nahrung werden im Darm Pyrimidinnucleoside gebildet und resorbiert (7 Kap. 5.1.1). Für die Nucleoside gibt es effektive Wiederverwertungssysteme. Uridin, Cytidin, Desoxycytidin und Thymidin werden mit ATP durch Kinasen zu den entsprechenden Mononucleotiden umgesetzt und dem Zellstoffwechsel verfügbar gemacht. ! Die Wiederverwertung von Purinen und Pyrimidinen ist für manche Gewebe von besonderer Bedeutung.

Im Prinzip sind alle kernhaltigen Zellen zur de novo-Biosynthese von Purin- und Pyrimidinnucleotiden imstande,

Beim Stoffwechsel von Purin- und Pyrimidinnucleosiden sowie bei den Reaktionen des Wiederverwertungszyklus für Purine und Pyrimidine spielen Nucleoside eine wichtige Rolle. Außerdem sind einige Nucleoside, v.a. das Adenosin, als Signalmoleküle von erheblicher Bedeutung. Für ihren Import in bzw. den Export aus Zellen sind entsprechende Transportsysteme in den Plasmamembranen von großer Bedeutung. Diese kommen in zwei Formen vor: 4 Transport durch erleichterte Diffusion entlang eines Konzentrationsgradienten (. Abb. 19.15a). Derartige Transporter finden sich in allen Zellen 4 Transport durch sekundär aktiven, natriumabhängigen Transport gegen einen Konzentrationsgradienten (. Abb. 19.15b). Transporter dieses Typs sind vor allen Dingen im Intestinaltrakt, renalen Epithelien und der Leber vorhanden Nucleosidtransporter spielen eine erhebliche Rolle bei der Verwendung der für die Therapie von Tumorerkrankungen eingesetzten Nucleosidanaloga (7 Kap. 19.1.5). Eine weitere Voraussetzung für ihre Wirksamkeit ist die anschließende Umsetzung durch die Wiederverwertungs-Enzyme, die nicht alle streng spezifisch für ihre physiologischen Substrate sind.

In Kürze Purine und Pyrimidine, die beim Nucleotidabbau entstehen bzw. bei der intestinalen Resorption aufgenommen werden, können wieder verwertet werden: 4 Für die Wiederverwertung von Purinbasen sind die Adenin-Phosphoribosyltransferase sowie die Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase verantwortlich

19

4 Pyrimidine können nur als Nucleoside wieder verwertet werden. Die hieran beteiligten Enzyme sind die Uridin-Cytidinkinase, Desoxycytidinkinase und die Thymidinkinase 4 Für die Wiederverwertung spielt die Familie der Nucleosidtransporter eine große Rolle, die in verschiedenen Isoformen vorkommen

599 19.3 · Abbau von Nucleotiden

19.3

Abbau von Nucleotiden

19.3.1

Abbau von Purinnucleotiden

! Purinnucleotide werden zu freien Basen abgebaut und anschließend unter Bildung von Harnsäure oxidiert.

Der Abbau der Purinnucleotide läuft nach einer anderen Reaktionssequenz als ihre Biosynthese ab (. Abb. 19.16, (1)–(5)): 4 Durch entsprechende 5c-Nucleotidasen (1) werden die Purinmononucleotide in die entsprechenden Nucleoside überführt 4 Adenosin wird durch die Adenosin-Desaminase (2) in Inosin überführt 4 Die Purinnucleoside Inosin, Xanthosin und Guanosin werden mit anorganischem Phosphat unter Katalyse entsprechender Nucleosid-Phosphorylasen (3) gespalten. Dadurch werden die Purinbasen Hypoxanthin

aus Inosin, Xanthin aus Xanthosin und Guanin aus Guanosin gebildet, außerdem entsteht Ribose-1-phosphat 4 Unter Abspaltung von NH3 wird Guanin durch die Guanase (4) in Xanthin überführt 4 Die Xanthin-Oxidoreduktase (5) wandelt Hypoxanthin in Xanthin und dieses in Harnsäure um. Das komplex aufgebaute Enzym liegt als Homodimer vor. Jede Untereinheit enthält als Cofaktor Molybdän in Form von Molybtopterin, Schwefel-Eisenzentren sowie FAD. Es kommt in zwei Formen vor: Unter physiologischen Bedingungen liegt das Enzym als Xanthindehydrogenase vor. Es katalysiert die Reaktionen

. Abb. 19.16. Reaktionen des Purinabbaus. 1 5c-Nucleotidase; 2 Adenosin-Desaminase; 3 Nucleosid-Phosphorylase; 4 Guanase; 5 Xanthindehydrogenase. (Einzelheiten 7 Text)

19

600

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

Interessanterweise kann die Xanthindehydrogenase in eine O2-abhängige Xanthinoxidase umgewandelt werden. Sie katalysiert dann die gleichen Reaktionen, verwendet allerdings O2 als Oxidationsmittel, wobei das Superoxidradikal O2•. entsteht. Dieses wird durch die Superoxid-Dismutase in H2O2 umgewandelt. Die Umwandlung der Xanthindehydrogenase in eine Xanthinoxidase kann entweder reversibel durch Oxidation von Cysteinylresten des Enzymproteins erfolgen oder irreversibel durch limitierte Proteolyse. Es gibt einige Hinweise dafür, dass die Xanthinoxidase eine Rolle bei der Entstehung reaktiver Sauerstoffspezies (7 Kap. 15.3) spielt 4 Harnsäure ist ein Enol und kann in die Ketoform tautomerisieren. Ihr Säurecharakter erklärt sich aus dem pK-Wert von 5,4 der OH-Gruppe am C-Atom 8 ! Harnsäure ist bei Primaten, Vögeln und einigen Reptilien das Endprodukt des Purinabbaus.

Harnsäure kann von Primaten und damit auch dem Menschen, außerdem von Vögeln und einigen Reptilien nicht weiter metabolisiert werden und ist deswegen das Endprodukt des Purinabbaus. Andere Lebewesen können Harnsäure zu besser wasserlöslichen Produkten abbauen. Die meisten Säuger exprimieren das Enzym Uricase, welches die Harnsäure zu dem wesentlich besser löslichen Allantoin spaltet, Fische sind in der Lage, Allantoin nach Ringspaltung zu Allantoinsäure in Harnstoff und Glyoxylsäure umzuwandeln und marine Invertebraten spalten schließlich Harnstoff mit Hilfe der Urease zu Ammoniak und CO2. Im Gegensatz zur Oxidation von Kohlenhydraten, Fetten oder Aminosäuren kann der Purinabbau von der Zelle nicht zur Energiegewinnung herangezogen werden, da weder eine Substratkettenphosphorylierung noch die Gewinnung von Reduktionsäquivalenten zur Energiegewinnung in der Atmungskette möglich sind. ! Die Nieren sind das Hauptorgan der Harnsäureausscheidung.

In zwei Organen wird die Hauptmenge der im Organismus entstehenden Harnsäure gebildet: 4 In der Leber wird der größte Teil der im Stoffwechsel entstehenden und abzubauenden Purine in Harnsäure umgewandelt und 4 im Darm werden die in der Nahrung enthaltenen Purine in Harnsäure umgewandelt, die dann über den Blutweg zur Leber gelangt

19

Die Gesamtmenge der durch intrazellulären Purinabbau entstandenen und an die Körperflüssigkeit abgegebenen Harnsäure beträgt beim Menschen etwa 4–6 mmol/Tag entsprechend etwa 0,65–1 g/Tag. Von dieser Menge wird der größte Teil (gut 2/3) mit dem Urin ausgeschieden (a0,4– 0,7 g/24 Std.). Die kalkulierte Geschwindigkeit der Purin-

. Abb. 19.17. Tubuläre Reabsorption von Harnsäure. Glomerulär filtrierte Harnsäure wird mit Hilfe des Anionen-Antiporters URAT1 in den renalen Tubuli reabsorbiert. SLC5A8 = Na+-abhängiger Anionentransporter. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

biosynthese (7 o.) entspricht somit ziemlich genau der täglichen Harnsäureausscheidung. Bis zu 1/3 kann über den Gastrointestinaltrakt ausgeschieden werden. ! Beim Menschen wird die renale Harnsäureausscheidung durch das Verhältnis von glomerulärer Filtration und tubulärer Reabsorption bestimmt.

Die von der Leber an das Blut abgegebene Harnsäure wird zunächst glomerulär filtriert. Anschließend erfolgt jedoch eine tubuläre Reabsorption der Harnsäure, sodass schließlich weniger als 10% der filtrierten Menge ausgeschieden werden. Für die Reabsorption der Harnsäure ist ein spezifisches Anionen-Austauschprotein verantwortlich, das URATProtein (. Abb. 19.17). Dieses reabsorbiert luminale Harnsäure im Austausch gegen eine Reihe verschiedener organischer Anionen, z.B. Lactat, Butyrat, oder Acetacetat. Die letzteren werden durch sekundär aktiven, Na+-abhängigen Transport wieder in die Tubulusepithelien aufgenommen. Es ist noch nicht bekannt, auf welchem Weg Harnsäure auf der basolateralen Seite die Tubulusepithelien verlässt. Die bei manchen Säugern nachgewiesene tubuläre Sekretion von Harnsäure spielt beim Menschen wenn überhaupt dann nur eine sehr geringe Rolle. Infolge des Fehlens von Uricase und der damit einhergehenden hohen Serumharnsäurespiegel bestünde sonst die Gefahr, dass Harnsäure im Tubuluslumen während der Urinkonzentrierung ausfällt. Das URAT1-Protein ist mit 12 Transmembranhelices in der apicalen Membran der Tubulusepithelien verankert. Auf der cytosolischen Seite sind Sequenzmotive vorhanden, die die Phosphorylierung durch die Proteinkinasen A und C und damit eine spezifische Regulation des Transporters ermöglichen.

601 19.3 · Abbau von Nucleotiden

19.3.2

Abbau von Pyrimidinnucleotiden

Der Pyrimidinabbau erfolgt im Wesentlichen in der Leber und in den Nieren. Cytidin wird mit Hilfe der CytidinDesaminase zu Uridin desaminiert. Anschließend erfolgt – ähnlich wie bei den Purinnucleosiden – die Phosphorolyse der Nucleoside Uridin und Thymidin zu Ribose-1phosphat und den Basen Uracil bzw. Thymin, deren weiterer Abbau in . Abb. 19.18 dargestellt ist. In einem zweistufigen Mechanismus erfolgt die Ringspaltung. Zunächst kommt es durch Reduktion zu Dihydrouracil bzw. Dihydrothymin. Durch Wasseranlagerung können nun die Pyrimidinringe zwischen den Positionen 1 und 6 gespalten werden. Es entstehen Ureidopropionat aus Dihydrouracil bzw. Ureidoisobutyrat aus Dihydrothymin. Von beiden Verbindungen können CO2 und NH3 abgespalten werden, sodass E-Alanin bzw. E-Aminoisobutyrat entstehen, die zu Malonyl-CoA bzw. Methylmalonyl-CoA abgebaut werden. Im Gegensatz zum Purinabbau entstehen beim Pyrimidinabbau also oxidierbare Verbindungen, sodass für die Zelle der Abbau der Pyrimidinbasen mit einem gewissen Energiegewinn verbunden ist. Berücksichtigt man, dass auch während der Pyrimidinbiosynthese die Oxidation des Dihydroorotats durch die Verknüpfung mit der Atmungskette ATP liefert (7 Kap. 19.1.2), stellt sich der gesamte Pyrimidinstoffwechsel als sehr ökonomisch dar. In Kürze Der Abbau von Purinnucleotiden führt über eine Reihe von Reaktionen zur Harnsäure, die bei Primaten, Vögeln und einigen Reptilien das Endprodukt des Purinabbaus ist: 4 Durch Nucleotidasen werden Nucleotide in die entsprechenden Nucleoside überführt. Aus diesen entstehen durch die Nucleosid-Phosphorylasen die Basen Hypoxanthin, Xanthin und Guanin 4 Die Xanthinoxidoreduktase wandelt diese in einer NAD+- abhängigen Reaktion in Harnsäure um Pyrimidinnucleotide werden zu CO2 und Ammoniak abgebaut.

. Abb. 19.18. Reaktionen des Pyrimidinabbaus. (Einzelheiten 7 Text)

19

602

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

19.4

Pathobiochemie

19.4.1

Purinstoffwechsel

Es ist klar, dass Störungen des Purinstoffwechsels den Zellstoffwechsel erheblich beeinträchtigen. So verursachen beispielsweise durch Metabolitanaloga hervorgerufene Hemmungen der Purinnucleotidbiosynthese deswegen den Zelltod, weil die Biosynthese der Nucleinsäuren mangels Vorstufen oder infolge von Imbalanzen zwischen Purinund Pyrimidinnucleotiden blockiert wird. Jede Überproduktion von Purinnucleotiden wird dagegen eine Zunahme ihrer Abbaugeschwindigkeit und damit der Harnsäureproduktion nach sich ziehen. ! Hyperurikämien können zur Gicht führen.

Infolge ihrer geringen Wasserlöslichkeit sind dem Transport der Harnsäure im Blut relativ enge Grenzen gesetzt. Schon der normale Serumharnsäurespiegel (ca. 0,4 mmol/l entsprechend 7 mg/dl)) ist nur deshalb möglich, weil ein Teil der Serumharnsäure an Proteine gebunden ist. Vermindert sich die renale Ausscheidung oder fällt Harnsäure vermehrt im Stoffwechsel an, so kommt es zur Hyperurikämie. Da ein niedriger pH-Wert und erniedrigte Temperatur die Löslichkeit noch weiter herabsetzen, kann es zur Entstehung von Natrium-Urat-Kristallen in bradytrophen Geweben mit einem hohen Gehalt an sauren Proteoglykanen und Kollagen kommen. Uratablagerungen in Gelenkflüssigkeit, Bindegewebe, Sehnenscheiden, Ohrknorpel, peripheren Gelenken und im Nierenmark bestimmen die klinische Symptomatik der Gicht, die häufig von akuten, mit erheblichen Schmerzen verbundenen Entzündungsschüben begleitet ist. Man nimmt an, dass in der Bundesrepublik Deutschland etwa 1–2% der männlichen und bis zu 0,4% der weiblichen Erwachsenen an einer häufig unerkannten Gicht leiden. Bezeichnenderweise sinkt, ähnlich wie beim Diabetes mellitus (7 Kap. 26.4) die Gichthäufigkeit in Notzeiten auf Werte von 0,1–0,2% der Bevölkerung. Offenbar führt Luxuskonsum nicht nur zu einer Zunahme

. Tabelle 19.3. Ursachen der primären Hyperurikämie Ursache

19

Häufigkeit

Überproduktion von Harnsäure

PRPP-Synthetase: Zunahme der Ak- 20–25% der tivität; Glutamin-PRPP-Amidotrans- Gichtfälle ferase: Aufhebung der Rückkoppelungshemmung; Xanthinoxidoreduktase: Zunahme der Aktivität; Hypoxanthin-GuaninPhosphoribosyltransferase: Abnahme oder Fehlen der Aktivität; Adeninphosphoribosyltransferase: Fehlen des Enzyms

Hemmung der renalen Ausscheidung

Steigerung der Reabsorption von Harnsäure

75–80% der Gichtfälle

der Kohlenhydratstoffwechselstörungen, sondern – wahrscheinlich wegen des überhöhten Fleischkonsums – zu einem hohen Angebot an Purinbasen, deren Abbau bei entsprechender genetischer Konstellation eine Gicht auslösen kann. Man unterscheidet primäre (familiäre) und sekundäre Hyperurikämien: 4 Bei der primären Hyperurikämien handelt es sich um hereditäre Störungen des Purinstoffwechsels, wobei sowohl die Biosynthese als auch die Ausscheidung betroffen sein kann 4 Bei den sekundären Hyperurikämien liegt keine Störung im Bereich des Purinstoffwechsels vor. Hier ist das Krankheitsbild die Folge von Erkrankungen, bei denen durch vermehrten Zelluntergang ein Übermaß an Purinbasen zum Abbau gelangt oder aber durch erworbene Nierenerkrankungen die Harnsäureausscheidung beeinträchtigt ist Primäre Hyperurikämie. Die primäre Hyperurikämie ist durch eine allmähliche Zunahme der Gesamtmenge der im Körperwasser gelösten Harnsäure, also des Harnsäurepools, von normal 6 mmol (entsprechend ca. 1 g, 7 o.) bis auf 180 mmol und mehr gekennzeichnet. Mehrere ursächliche Faktoren sind als Auslöser dieses Krankheitsbildes bekannt (. Tabelle 19.3): Bei einem großen Teil der Betroffenen (75–80%) handelt es sich um eine renale Störung der Harnsäureausscheidung. Im Vordergrund steht dabei eine gesteigerte tubuläre Rückresorption von Harnsäure. Da diese im Wesentlichen von der Aktivität des Urat-Austauschers URAT 1 abhängt, werden Regulationsstörungen diskutiert, die die Aktivität dieses Proteins erhöhen. Eine sehr seltene Erkrankung ist die familiäre juvenile hyperurikämische Nephropathie. Es handelt sich um eine autosomal-dominant vererbte Erkrankung, die mit Hyperurikämie, verminderter Uratausscheidung im Urin und einer chronischen Nephropathie einhergeht und zum Nierenversagen führt. Bei dem anderen, etwa 20–25% umfassenden Teil der Patienten mit Hyperurikämie beruht die Erkrankung nicht auf einer Störung der renalen Ausscheidung, sondern vielmehr auf einer gesteigerten Biosynthese von Purinen aufgrund verschiedener Enzymdefekte: 4 Am häufigsten ist ein Gendefekt der HypoxanthinGuanin-Phosphoribosyltransferase, der zur verminderten Aktivität des Enzyms führt. Deshalb kommt es zu einem durch einen Minderverbrauch ausgelösten Anstieg der PRPP-Konzentration und in der Folge zu einer Aktivierung der PRPP-Amidotransferase (7 Kap. 19.1.4) mit einer Steigerung der Purinbiosynthese. Insgesamt führt der Enzymdefekt zu einer schon im juvenilen Alter auftretenden Gicht, die sich dadurch auszeichnet, dass die Harnsäurekonzentrationen im Serum auch bei purinarmer Ernährung nicht absinken 4 Vollständiges Fehlen der Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase liegt beim Lesch-Nyhan-Syn-

603 19.4 · Pathobiochemie

drom vor. Das Krankheitsbild ist durch eine schwere Gicht und Nephrolithiasis gekennzeichnet, zusätzlich findet sich ein neurologisches Krankheitsbild mit Spastik, verzögerter geistiger und motorischer Entwicklung und einer auffallenden Tendenz zur Selbstverstümmelung 4 Eine sehr seltene Enzymopathie ist eine Erhöhung der Harnsäurebildung infolge einer gesteigerten Aktivität der PRPP-Synthetase 4 Darüber hinaus gibt es Fälle, bei denen die Rückkoppelungshemmung der Glutamin-PRPP-Amidotransferase durch Endprodukte der Biosynthese, Adeninund Guaninnucleotide, gestört ist Infobox Gichtfamilien Die primäre Hyperurikämie ist eine hereditäre Stoffwechselstörung. Es gibt daher sog. »Gichtfamilien«, wobei die Vererbung vornehmlich vom Vater auf den Sohn erfolgt. Dazu gehören die Medici, englische Könige und auch die Familie Hohenzollern: Friedrich Wilhelm (1620–1688), der Große Kurfürst. Mit 40 Jahren hatte er seinen ersten Gichtanfall. Seit dieser Zeit musste er wegen quälender Gelenkschmerzen pelzgefütterte Juchtenstiefel tragen. Er strapazierte seinen Stoffwechsel durch ein Übermaß von »köstlichen Speisen und edlen Weinen« sowie durch »Bechergelage, des Podagra nicht achtend«. Friedrich I. (1657–1713), der erste Preußenkönig. Beim Feiern, im Essen wie im Trinken, entwickelte er dieselbe Leidenschaft wie sein Vater. Seit der Jugend hatte er Gichtanfälle. Friedrich Wilhelm I. (1688–1740), der Soldatenkönig. Die Gicht bereitete ihm derartige Qualen, dass er oftmals an den Rollstuhl gefesselt war und sich mit Abdankungsgedanken trug, denn »dieses leiden unertreglich, aber viehisch ist.« Friedrich II. (1712–1786), der Große. Als Neunundzwanzigjähriger bekam er den ersten Gichtanfall, die Krankheit begleitete ihn sein ganzes Leben lang.

Sekundäre Hyperurikämien. Wie aus . Tabelle 19.4 her-

vorgeht, können sekundäre Hyperurikämien viele Ursachen haben. Sie kommen zustande durch Überproduktion von Harnsäure infolge gesteigerten Nucleinsäureumsatzes. Dies tritt z.B. bei lymphatischen und myeloischen Leukämien, chronisch hämolytischen Anämien und der Psoriasis auf. Eine gesteigerte de novo-Biosynthese findet sich beim hereditären Glucose-6-Phosphatase-Mangel, der Glycogenose Typ 1 (7 Kap. 11.7.2). Die Verwertungsstörung des

. Tabelle 19.4. Ursachen der sekundären Hyperurikämie Überproduktion durch Zunahme des Nucleinsäureumsatzes

Psoriasis, lymphatische und myeloische Leukämien, chronischhämolytische Anämien

Überproduktion durch gesteigerte De-novo-Biosynthese

Glucose-6-Phosphatasemangel

Verminderung der renalen Ausscheidung

Chronische Nierenerkrankungen, Bleivergiftung, Berylliumvergiftung, Alkoholintoxikation, Schwangerschaftstoxikose, diabetische Ketose, Dehydratation, Behandlung mit Diuretika, Salicylaten

Glucose-6-phosphats führt zu einer vermehrten Überführung von Glucose in den Pentosephosphatweg und damit zur gesteigerten PRPP-Bildung. Eine Verminderung der renalen Ausscheidung als Ursache für die sekundäre, d.h. erworbene Hyperurikämie findet sich bei verschiedenen Nierenerkrankungen, so z.B. bei chronischen Nephropathien, bei Schwermetallvergiftungen oder der Schwangerschaftstoxikose. Die bei fortgeschrittenem Alkoholabusus oftmals bestehende metabolische Azidose wird als Mitursache für die ebenfalls häufig beobachteten Gichterkrankungen dieses Personenkreises angesehen, da hohe Lactatund Ketosäure-Spiegel durch Stimulation des URAT1Transporters die Harnsäureeliminierung vermindern können (. Abb. 19.17). Auch bei nichtbehandeltem Typ I Diabetes ist das Risiko einer Gichterkrankung stark erhöht. ! Hyperurikämien werden mit Diät und spezifischen Arzneimitteln behandelt.

Zur korrekten Diagnose von Harnsäure bedingten Erkrankungen, sollte nicht nur der Harnsäurespiegel im Blut sondern auch die Harnsäure-Clearance geprüft werden. Konzentrationsänderungen in Plasma und Urin müssen nicht immer gleichartig verlaufen. Die Feststellung einer erniedrigten Harnsäurekonzentration im Blut kann anderweitige Störungen im Purinstoffwechsel anzeigen, wie z.B. einen Mangel an Purinnucleotidase, Purinphosphorylase, Xanthindehydrogenase oder Molybdän-Cofaktor. Auch hereditäre Defekte im Harnsäurerücktransportsystem können eine Hypourikämie bedingen. Folgende Maßnahmen eignen sich für die Behandlung von Hyperurikämien: 4 Diätetische Einschränkung der Purinzufuhr, die durch Nahrungsmittel wie mageres Fleisch, Wild, Innereien, Krustentiere, und Hülsenfrüchte besonders hoch ist 4 Gabe von sog. Uricosurica. Diese (z.B. Probenecid) hemmen die tubuläre Reabsorption von Harnsäure und führen auf diese Weise zu einem Anstieg der Uratausscheidung 4 Therapie mit Allopurinol (. Abb. 19.19). Dieses Strukturanaloge des Hypoxanthins ist »Suicid«-Hemmstoff

19

604

Kapitel 19 · Stoffwechsel der Purine und Pyrimidine

19.4.2

. Abb. 19.19. Hypoxanthin und Allopurinol

der Xanthinoxidase (7 Kap. 4.4.2, 4.6.2). Wird es in therapeutischen Dosen gegeben, so kommt es zu einer weitgehenden Hemmung der Harnsäurebildung. Endprodukte des Purinabbaus sind nunmehr Xanthin und Hypoxanthin. Die Serum- und Urinkonzentrationen dieser beiden Purinbasen steigen auch tatsächlich stark an. Da sie sich jedoch von der Harnsäure durch ihre bessere Löslichkeit unterscheiden, können sie wesentlich leichter über die Nieren ausgeschieden werden ! Der hereditäre Adenosindesaminase-Mangel geht mit einem schweren Immundefekt einher.

Die Adenosindesaminase katalysiert die Desaminierung von Adenosin und 2c-Desoxyadenosin zu den entsprechenden Inosinnucleosiden. Als relativ seltener hereditärer Enzymdefekt (Häufigkeit etwa 1:100000 Geburten) kommt ein Mangel dieses Enzyms vor. Die Erkrankung ist meist mit einem schweren Immundefekt vergesellschaftet, dessen Ursache auf einer Proliferationshemmung der Lymphozyten beruht. Durch den Enzymdefekt kommt es nämlich zur Akkumulierung von Adenosin und 2c-Desoxyadenosin in den Lymphozyten. Beide Verbindungen werden jedoch durch die Nucleosidkinasen rasch phosphoryliert, sodass sich schließlich ATP und dATP anhäufen. Die letztere Verbindung ist der wichtigste allosterische Inhibitor der Ribonucleotid-Reduktase (7 Kap. 19.1.4), sodass in den Lymphozyten die zur Proliferation benötigten Desoxyribonucleotide nicht mehr erzeugt werden können. Am Adenosindesaminase-Mangel herrscht derzeit großes Interesse, da weltweit eine Reihe von Protokollen zur Gentherapie dieser Erkrankung existiert.

Pyrimidinstoffwechsel

Im gesamten Pyrimidinstoffwechsel gibt es bisher neun erkannte genetische Defekte. . Tabelle 19.5 fasst die wichtigsten von ihnen zusammen. Die am besten beschriebene genetische Erkrankung des Pyrimidinstoffwechsels ist die hereditäre Orotacidurie. Es handelt sich um eine relativ seltene Erkrankung, zu deren Symptomatik eine megaloblastäre Anämie, Leukopenie, Verlangsamung von Wachstum und geistiger Entwicklung und massive Ausscheidung von Orotsäure im Urin gehören. Die Ursache der Erkrankung ist ein Enzymdefekt der UMP-Synthase (. Abb. 19.10). Dabei sind die Aktivitäten der Orotatphosphoribosyltranferase sowie der OMPDecarboxylase (. Abb. 19.5) nur noch in Spuren nachweisbar. Dies führt zu einem beträchtlichen Anstau von Orotsäure, die im Urin ausgeschieden werden muss. Durch den Enzymdefekt kommt es zusätzlich zu einem Sistieren der Bildung von Uridinnucleotiden, was eine Verminderung des UTP-Spiegels zur Folge hat. Dadurch wird die für die Pyrimidinbiosynthese geschwindigkeitsbestimmende Carbamylphosphat-Synthetase II enthemmt. Es kommt zur verstärkten Orotsäurebildung ohne nennenswerte Hemmung der Dihydroorotat-Dehydrogenase durch ihr Produkt. Schwere Störungen des Zellstoffwechsels infolge des UTP-Mangels sind unvermeidlich. Entwicklungsstörungen, Anämie und Immundefizienz führten bei den betroffenen Kindern zum frühen Tod. Eine Therapie der Erkrankung ist jedoch dadurch möglich, dass Uridin in Dosen von mehreren Gramm pro Tag lebenslang zugeführt wird. Das Nucleosid kann durch die Uridin-Cytidin-Kinase in UMP umgewandelt werden und zum Aufbau der anderen Pyriminnucleotide verwendet werden. Durch den angeborenen Enzymdefekt ist somit das Uridin, das sonst leicht durch Biosynthese hergestellt werden könnte, zu einer essentiellen Substanz geworden, die wie essentielle Aminosäuren mit der Nahrung zugeführt werden muss. Der häufigste Defekt des Pyrimidinstoffwechsels ist die gesteigerte Ausscheidung von β-Aminoisobutyrat, einem Zwischenprodukt des Thyminabbaus (. Abb. 19.18). Zu-

. Tabelle 19.5. Hereditäre Störungen des Pyrimidinstoffwechsels (Auswahl)

19

Defektes Enzym

Symptome

Häufigkeit

Orotatphosphoribosyltransferase und OMP-Decarboxylase

Orotacidurie, hämatologische Störungen, Verlangsamung der geistigen Entwicklung

selten

E-Aminoisobutyrat-Transaminase

Ausscheidung von E-Aminoisobutyrat

5–50% der Bevölkerung

Dihydropyrimidin-Dehydrogenase

Neurologische Symptome, Epilepsie, Ausscheidung von Thymin und Uracil

selten

Dihydropyrimidinase

Neurologische Symptome

selten

Ausscheidung von Dihydrouracil und Pyrimidinbasen Thymidinphosphorylase, mitochondrial

mitochondrial neurogastrointestinal encephalomyopathy

selten

Thymidinkinase 2, mitochondrial

Schwere Myopathie

selten

605 Literatur

grunde liegt wahrscheinlich eine Störung der Transaminierung von E-Aminoisobutyrat zu Methylmalonsäuresemialdehyd. 5–10% der weißen Bevölkerung sowie bis zu 50% der Asiaten sind Träger dieses Merkmals, das jedoch keinerlei pathologische Bedeutung hat. Andere eher seltene Störungen im Abbauweg, wie der Mangel an Dihydropyrimidinase oder Ureidopropionase sind mit schweren körperlichen und geistigen Entwicklungsstörungen der betroffenen Kinder verbunden. Der ursächliche Zusammenhang ist nicht geklärt. Auch bei asymptomatischen Trägern eines Dihydropyrimidin-Dehydrogenase- oder Dihydropyrimidinasemangels kommt es bei Behandlung mit 5-Fluorouracil, welches ebenfalls über diesen Weg abgebaut wird, zu unerwartet hohen Nebenwirkungen. Erst in neuerer Zeit hat man Störungen im mitochondrialen Desoxyribonucleotid-Stoffwechsel diagnostiziert. Infolge von Mutationen im Thymidinphophorylase-Gen kommt es zu verheerenden Störungen der Mitochondrienfunktion (mitochondrial neurogastrointestinal encephalomyopathy), die sich in Muskelatrophie, Malabsorption, und

einer Myopathie der Augen- und Skelettmuskeln äußert. Eine defekte mitochondrienspezifische Thymidinkinase 2, die sowohl Thymidin, als auch Desoxycytidin und Desoxyuridin phosphoryliert und somit die DNA-Synthese in Mitochondrien ermöglicht, verursacht ebenfalls schwere Myopathien. Ähnlich wie bei der Pathobiochemie des Purinstoffwechsels gibt es auch sekundäre Störungen des Pyrimidinstoffwechsels. So kommt es bei gesteigertem Nucleinsäureumsatz zu einer Steigerung der Orotsäureausscheidung. Eine Orotacidurie ist bei Kindern mit Ornithintranscarbamylase-Mangel (7 Kap. 13.5.3) beobachtet worden. Offenbar kann unter diesen Umständen auch das von der Carbamylphosphat-Synthetase I zum Zweck der Harnstoffbildung bereitgestellte mitochondriale Carbamylphosphat für die cytosolische Pyrimidinbiosynthese verwendet werden. Schließlich führt eine Reihe von Pharmaka zur Orotacidurie. Es handelt sich v.a. um die oben besprochenen Antimetaboliten 6-Azauridin und Allopurinol. So kommt es aufgrund der Bildung von Oxopurinol-Ribose-Phosphat aus Allopurinol zu Störungen der UMP-Synthase Aktivität.

In Kürze Störungen im Purin- bzw. Pyrimidinstoffwechsel kommen als primäre, genetisch verursachte bzw. erworbene Erkrankungen vor: 4 Die primäre Hyperurikämie ist die Folge einer verminderten Ausscheidung oder Überproduktion von Harnsäure infolge genetischer Erkrankungen. 20–25% werden durch eine Überproduktion von Harnsäure ausgelöst und beruhen auf Defekten der Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase, der PRPPSynthetase sowie der Glutamin-PRPP-Amidotransferase. 75–80% der Fälle primärer Hyperurikämie beruhen auf Störungen der renalen Ausscheidung

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4 Sekundäre Hyperurikämien führen zu einer Harnsäureüberproduktion bzw. verminderten Ausscheidung auf Grund von Störungen, die nicht im Bereich des Purinstoffwechsels liegen Die wichtigste genetische Erkrankung des Pyrimidinstoffwechsels ist die hereditäre Orotacidurie. Abbaustörungen können die Entgiftung von Antimetabolit-Pharmaka stark verändern. Das klinische Bild der Pyrimidin- und Purin-Stoffwechselstörungen ist sehr breit, heterogen und oft von neurologischen Erkrankungen begleitet. Die Diagnose ist deswegen erheblich erschwert.

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20 20

Häm und Gallenfarbstoffe Petro E. Petrides

20.1

Biosynthese des Häms – 608

20.1.1 20.1.2 20.1.3 20.1.4

Übersicht über die Hämbiosynthese – 608 Einzelschritte der Hämbiosynthese – 608 Regulation der Hämbiosynthese – 611 Ausscheidung von Porphyrinen und Porphyrinvorstufen – 614

20.2

Pathobiochemie: Störungen der Hämbiosynthese – 614

20.2.1 20.2.2 20.2.3

Sideroblastische Anämie – 614 Angeborene Porphyrien – 614 Erworbene Porphyrien – 619

20.3

Abbau des Häms zu Gallenfarbstoffen – 621

20.3.1 20.3.2 20.3.3 20.3.4

Abbau zu Bilirubin – 621 Nachweismethoden für Bilirubin im Blutplasma – 622 Abbau des Bilirubins im Darm – 622 Hämoglobin- und Bilirubinumsatz – 623

20.4

Pathobiochemie: Störungen des Bilirubinstoffwechsels – 624

20.4.1 20.4.2

Erworbene Hyperbilirubinämien – 625 Angeborene Hyperbilirubinämien – 625

Literatur

– 626

608

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

> > Einleitung Porphyrine sind farbige Verbindungen, die ubiquitär im Pflanzen- und Tierreich auftreten. Strukturell bestehen sie aus 4 Pyrrolringen, die über Methinbrücken zu einem Tetrapyrrolsystem verbunden sind. Dieses konjugierte Ringsystem mit 11 Doppelbindungen bildet leicht Komplexe mit Übergangsmetallen. Erfolgt die Komplexbildung mit Eisenionen, entsteht die Hämgruppe, die im Stoffwechsel nahezu aller Organismen als prosthetische Gruppe von Hämproteinen eine essentielle Bedeutung hat. Der Proteinanteil seinerseits bestimmt, welche Funktionen das Eisenporphyringerüst im Proteinverband übernimmt: so den Transport, die Speicherung oder Aktivierung von Sauerstoff im Hämoglobin, Myoglobin bzw. Cytochrom P450, den Abbau von H2O2 in den Enzymen Katalase und Peroxidase oder den Transport von Elektronen durch die verschiedenen Cytochrome der Atmungskette. Im Pflanzenreich erfolgt eine Komplexbildung mit Magnesium unter Bildung des für die Photosynthese notwendigen Chlorophyll. Beim Menschen werden die Porphyrine in praktisch allen Zellen in einer Sequenz von acht enzymatischen Schritten aus Glycin und Succinyl-CoA synthetisiert und kommen dort als Bestandteile der verschiedenen Hämproteine vor. Quantitativ am bedeutendsten ist die Porphyrinsynthese in den Erythroblasten des Knochenmarks, dem Ort der Hämoglobin-Synthese. Aufgrund der elementaren Funktionen der Porphyrine ist das vollständige Fehlen eines der Enzyme der Porphyrinbiosynthese mit dem Leben nicht vereinbar. Partielle Defekte einzelner Enzyme der Hämbiosynthese treten jedoch auf und verursachen neuroviszerale oder neuropsychiatrische Symptomenkomplexe, die bei Nichterkennung lebensbedrohlichen Charakter annehmen können.

20.1

Biosynthese des Häms

20.1.1

Übersicht über die Hämbiosynthese

Die Hämgruppe ist ein essentieller Bestandteil der so genannten Häm-Proteine. Hierzu gehören u.a. 4 die Cytochrome der Atmungskette 4 die das Cytochrom P450 enthaltenden Monooxigenasen 4 die Fettsäuredesaturasen 4 Katalase und Peroxidase sowie 4 die Sauerstoff transportierenden Proteine Hämoglobin und Myoglobin

20

Hieraus folgt, dass alle Zellen die Fähigkeit zur Biosynthese der Hämgruppe besitzen müssen. Allerdings haben die höchste Kapazität zur Hämbiosynthese die erythroiden Vorläuferzellen der Erythrozyten im Knochenmark (ca. 85% der gesamten Hämbiosynthese), da diese für die Biosynthese des Hämoglobins verantwortlich sind. Jeder Schritt der Hämbiosynthese wird durch ein spezifisches Enzym katalysiert. Dabei finden sich keinerlei Unterschiede in den Biosynthesewegen von erythroiden Vorläuferzellen des Knochenmarks und denjenigen in anderen Geweben. Allerdings unterliegt die Hämbiosynthese im Knochenmark einer anderen Regulation als diejenige in den übrigen Geweben. Dies wird durch die organspezifische Existenz von Isoenzymen gewährleistet. Die Biosynthese von Porphyrinen ist ähnlich wie die des Harnstoffs auf die mitochondriale Matrix und das Cytosol verteilt. Intramitochondrial erfolgt aus Succinyl-CoA und Glycin die Synthese von δ-Aminolaevulinat, das in das Cytosol transportiert wird, in dem über verschiedene Zwischenstufen das für die Hämgruppe typische TetrapyrrolRingsystem synthetisiert wird. Die Fertigstellung der Hämgruppe, zu der Decarboxylierungen und Dehydrierungen

sowie der Einbau von Eisen gehören, erfolgt wiederum intramitochondrial.

20.1.2

Einzelschritte der Hämbiosynthese

Für die Biosynthese der Hämgruppe sind acht enzymatische Schritte notwendig. Ihr Reaktionsmechanismus ist in allen Geweben identisch, jedoch werden die Einzelschritte teilweise durch gewebsspezifisch exprimierte Isoenzyme katalysiert. ! Die Hämgruppe wird aus Glycin und Succinyl-CoA synthetisiert.

Synthese von δ-Aminolävulinat. Ausgehend von Succinyl-

CoA und Glycin entsteht in der mitochondrialen Matrix unter Abspaltung von CoA das labile Zwischenprodukt D-Amino-E-ketoadipat, das als E-Ketosäure spontan zu δ-Aminolävulinat (G-ALA) decarboxyliert. Dieser Schritt wird durch die δ-Aminolävulinatsynthase (G-ALA-Synthase) katalysiert (. Abb. 20.1). Da dieses Enzym Pyridoxalphosphat-abhängig ist, führt ein Vitamin B6-Mangel (7 Kap. 23.3.5) zu einer Verringerung der Hämbiosynthese. Die G-ALA-Synthase-Reaktion ist der geschwindigkeitsbestimmende Schritt der Porphyrinbiosynthese, da das Enzym eine sehr kurze Halbwertszeit von nur 30 Minuten aufweist. Beim Menschen codieren zwei Gene für zwei G-ALASynthasen: 4 das G-ALA-S1-Gen (Chromosom 3p21) trägt die Information für ein in allen Geweben vorkommendes ProEnzym (house keeping enzyme) 4 das G-ALA-S2-Gen (X-Chromosom p11–21) codiert für ein Pro-Enzym, das nur in den Erythroblasten vorkommt

609 20.1 · Biosynthese des Häms

. Abb. 20.1. Bildung von δ-Aminolävulinat (δ-ALA) aus Glycin und Succinyl-CoA. Die durch die G-Aminolaevulinatsynthase katalysierte Reaktion beginnt mit der Bildung einer Schiff´schen Base zwischen Pyridoxalphosphat und der Aminosäure Glycin. Dadurch wird die Bildung einer Bindung zwischen dem D-C-Atom des Glycins mit

der CO-S-CoA-Gruppe des Succinyl-CoA ermöglicht. Anschließend werden CoA und CO2 abgespalten und das gebildete G-Aminolaevulinat freigesetzt. Die Reihenfolge der zur Hämsynthese benötigten Reaktionen ist in den Abb. 20.1 bis 20.3 durch die Zahlen 1–8 angezeigt. Dies ist Reaktion 1

Synthese von Porphobilinogen. Nach dem Übertritt ins Cytosol kondensieren zwei Moleküle G-Aminolävulinat zu Porphobilinogen (PBG), der Pyrrolvorstufe (der Porphyrine (. Abb. 20.2). Diese Reaktion wird durch die Porphobilinogensynthase (G-Aminolävulinatdehydratase) katalysiert. Das Enzym kommt in zwei Isoformen vor, von denen die eine in allen Geweben, die andere nur in Erythroblasten nachweisbar ist. Synthese von Hydroxymethylbilan. Unter dem katalytischen Einfluss der PBG-Desaminase kondensieren sukzessive vier Porphobilinogenmoleküle unter Abspaltung von vier Molekülen Ammoniak und Bildung von Hydroxymethylbilan. Seine Pyrrolringe werden mit A, B, C, D bezeichnet, wobei als Ring A derjenige bezeichnet wird, der über eine CH2OH-Gruppe verfügt (. Abb. 20.3). Beim

. Abb. 20.2. Bildung des Monopyrrols Porphobilinogen (PBG). Durch Kondensation von zwei Molekülen G-Aminolävulinat durch die Porphobilinogen-Synthase (oder G-ALA-Dehydratase) wird unter Abspaltung von 2 H2O Porphobilinogen gebildet. Die Reihenfolge der zur Hämsynthese benötigten Reaktionen ist in den Abb. 20.1 bis 20.3 durch die Zahlen 1–8 angezeigt. Dies ist Reaktion 2

20

610

20

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

. Abb. 20.3. Biosynthese von Häm aus Porphobilinogen. Durch sukzessive Kondensation von 4 Molekülen PBG (3,4), mehrfache Decarboxylierung der Seitenketten (5,6), Dehydrierung des Ringsystems (7) und anschließendem Einbau von zweiwertigem Eisen entsteht

Häm (8). Die Reaktionssequenz ist auf das cytosolische und mitochondriale Kompartiment verteilt. Die Reihenfolge der zur Hämsynthese benötigten Reaktionen ist in den Abb. 20.1 bis 20.3 durch die Zahlen 1–8 angezeigt. (Einzelheiten 7 Text)

611 20.1 · Biosynthese des Häms

Menschen wird die PBG-Desaminase durch ein 10 kb-Gen mit 15 Exons auf Chromosom 11q24 codiert. Die bei der Transkription entstehende prä-mRNA kann unterschiedlich gespleißt werden, sodass aus einem Gen zwei Isoenzyme entstehen: 4 das Erythroblasten-Isoenzym mit einer Molekülmasse von etwa 42 kDa enthält den 3c-Anteil von Exon 3 sowie die Exons 4 bis 15 4 das »House-Keeping«-Isoenzym mit einer Molekülmasse von etwa 44 kDa besteht aus Exon 1 sowie den Exons 3 bis 15 Wie sich diese Enzyme funktionell voneinander unterscheiden, ist noch nicht bekannt. Je nachdem in welchem Genabschnitt eine Mutation auftritt, wird die Bildung eines der beiden Enzyme oder beider Isoformen beeinflusst. Synthese von Uroporphyrinogen III. Hydroxymethylbilan

(Pro-Uroporphyrinogen) wird unter Katalyse der Uroporphyrinogen III-Synthase zyklisiert. Dabei findet im Ring D ein Austausch der Acetat- und Propionatseitenketten statt, sodass das durch die asymmetrische Reihenfolge seiner Substuenten charakterisierte Uroporphyrinogen III entsteht (. Abb. 20.3). Nicht von der Uroporphyrinogen III-Synthase umgesetztes Hydroxymethylbilan zyklisiert spontan zu Uroporphyrinogen I, in dem die Sequenz der Acetat- und Propionatseitenkette derjenigen im Hydroxymethylbilan entspricht. Synthese von Koproporphyrinogen III. Die Acetatgruppen

aller vier Ringe des Uroporphyrinogen III werden unter Katalyse der im Cytosol lokalisierten UroporphyrinogenDecarboxylase zu Methylgruppen decarboxyliert, wobei Koproporphyrinogen III entsteht (. Abb. 20.3). Synthese von Protoporphyrinogen IX. Durch die mit der

mitochondrialen Innenmembran assoziierte Koproporphyrinogen-Oxidase (. Abb. 20.3) werden die Propionatseitenkette der Ringe A und B des Koproporphyrinogen III zu Vinylseitenketten dehydriert und decarboxyliert. Bei dieser Reaktion wirkt molekularer Sauerstoff als Wasserstoffakzeptor. Im Vergleich zum Uroporphyrinogen III ist das bei dieser Reaktion entstandene Protoporphyrinogen IX wegen der Abspaltung von insgesamt sechs Carboxylgruppen wesentlich hydrophober geworden. Synthese von als Protoporphyrin IX. In dieser durch die Protoporphyrinogen-Oxidase (. Abb. 20.3) katalysierten Reaktion kommt es zur Dehydrierung der die einzelnen Ringe verbindenden Methylengruppen zu Methingruppen. Aus einem nicht konjugierten farblosen System mit acht Doppelbindungen ist damit ein konjugiertes farbiges Tetrapyrrolsystem mit 11 Doppelbindungen gebildet worden. Es wird als Protoporphyrin IX bezeichnet.

Synthese der Hämgruppe. Durch den Einbau von Eisen in das Protoporphyrin wird die Hämbiosynthese abgeschlossen. Die Reaktion wird durch die Ferrochelatase katalysiert, die zweiwertiges Eisen benötigt (. Abb. 20.3). Das Enzym ist an die zur mitochondrialen Matrix zeigenden Seite der inneren Mitochondrienmembran gebunden. Von den 8 enzymatischen Schritten der Hämbiosynthese verbraucht nur der Erste wegen der Spaltung des CoA-Thioesters im Succinyl-CoA Energie. Alle übrigen Schritte verlaufen spontan, sind allerdings z. T. von der Anwesenheit von molekularem Sauerstoff abhängig. Inwieweit die Transportvorgänge zwischen Cytosol und Mitochondrium (und umgekehrt) für die einzelnen Zwischenprodukte der Biosynthese Energie erfordern, ist noch unbekannt.

20.1.3

Regulation der Hämbiosynthese

! Die Hämbiosynthese in Leber und Knochenmark wird unterschiedlich reguliert.

Wegen der allgemeinen Bedeutung der Hämgruppe für die korrekte Funktion der lebensnotwendigen Häm-Proteine muss die Hämbiosynthese in den Geweben sehr genau auf die jeweiligen zellulären Bedürfnisse abgestimmt sein. Untersuchungen zur Regulation der Hämbiosynthese sind aus experimentellen Gründen bevorzugt an der Leber, daneben auch an zahlreichen Mikroorganismen durchgeführt worden. Eine prinzipiell andere Regulation der Hämbiosynthese ist in den Erythroblasten notwendig, da hier die für die Hämoglobinbiosynthese notwendigen Hämgruppen bereitgestellt werden müssen. Regulation in der Leber. Die Regulation der Häm-Biosynthese in der Leber (und anderen Geweben) erfolgt über eine Rückkoppelungshemmung des ersten Enzyms, der G-Aminolävulinat-Synthase (G-ALA-Synthase-1). Häm kann seine Wirkung über drei unterschiedliche Mechanismen entfalten (. Abb. 20.4a): 4 Häm reprimiert die Transkription des G-ALA-Synthase-1-Gens. Für Enzyme mit regulatorischer Funktion ist eine hohe Umsatzrate Voraussetzung, wenn die Regulation über eine Änderung der Biosynthese- oder Abbaugeschwindigkeit des Enzyms erfolgen soll. So besitzt die G-ALA-S1 auch nur eine sehr kurze Halbwertszeit von 30 Minuten. Bei Hämmangel kann die Enzymkonzentration durch Derepression bis auf das fünfzigfache gesteigert werden. 4 Häm hemmt den Transport des neu synthetisierten Proenzyms in das Mitochondrium. Das δ-ALA-S1-Gen codiert für ein Proenzym (Pro-G-ALA-S1), welches in der für den mitochondrialen Import verantwortlichen N-terminalen Sequenz über ein hämregulatorische

20

612

20

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

. Abb. 20.4. Regulation der Hämbiosynthese. a Hämbiosynthese in Leber und anderen Geweben. b Hämbiosynthese in Erythroblasten. G-ALA = G-Aminolaevulinat; Epo = Erythropoietin; EpoR = Erythro-

poietin-Rezeptor; JAK2 = Januskinase 2; Stat = signal tranducer and activator of transcription; IRE = iron responsive element; IRP = iron regulatory protein. (Einzelheiten 7 Text)

Element mit der Sequenz Cys-Pro-X-Asp-His verfügt. Ist ausreichend Häm im Cytosol vorhanden, bindet es an dieses hämregulatorische Element des Proenzyms und hemmt dessen Import in das Mitochondrium, welches an diesem Enzym verarmt. 4 Häm hemmt die Enzymaktivität über einen allosterischen Effekt.

Daneben wird die Enzymaktivität durch Nahrungskarenz (Fasten) erhöht bzw. Glucose reduziert. Dieser Effekt kommt dadurch zustande, dass bei Nahrungskarenz in der Leber PGC-1D (PPRJ Coactivator 1D) unter Vermittlung des CREB/cycloAMP-Systems (7 Kap. 16.1.2) vermehrt exprimiert wird. PGC-1D aktiviert die Traskriptionsfaktoren FOXO1 und NRF1, die ihrerseits die Expression der ALASynthase 1 stimulieren. Vermehrte Glucosezufuhr hemmt

613 20.1 · Biosynthese des Häms

dagegen diese Stoffwechselwege und damit die Expression der ALA-Synthase 1, was therapeutisch ausgenutzt wird (7 Kap. 20.2.2). Die Konzentration an freiem Häm wird außer durch die Biosyntheserate auch durch den Einbau in Hämoproteine wie Cytochrom P450 und den Abbau durch die Hämoxygenase (7 u.) bestimmt. Deshalb beeinflussen diese Faktoren ebenfalls die Regulation der Hämbiosynthese. So stimulieren Stoffe, welche die Synthese von Cytochrom P450-Proteinen induzieren, über nucleäre Rezeptoren (z. B. den konstitutive Androstanrezeptor CAR sowie den Pregnan-X-Rezeptor PXR, 7 Kap. 33.3.1) die Expression des δ-ALA-S1-Gens. Regulation in den Erythroblasten des Knochenmarks. Die

Erythroblasten des Knochenmarks sind die Hauptproduzenten an Häm im Organismus. Während die Hämsynthese in übrigen Geweben auf schnelle Veränderungen des Bedarfs reagiert, ist die Synthese im Knochenmark eher auf die kontinuierliche Produktion sehr großer Mengen für die Produktion von Hämoglobin im Erythrozyten mit einer Lebensdauer von 120 Tagen angelegt (7 Kap. 29.2.3). Hierbei spielen zwei Faktoren eine besondere Rolle: 4 Proliferation und Differenzierung der Erythroblasten des Knochenmarks wird durch die Aktivität des Hormons Erythropoietin reguliert, das in der Niere bei Abfall der Sauerstoffspannung freigesetzt wird (7 Kap. 28.1.10)

4 Die Verfügbarkeit von Eisen für die Häm-Biosynthese Beide Faktoren beeinflussen auf unterschiedliche Weise die G-ALA-Synthase-2 (. Abb. 20.4b): 4 Stimulierung der Transkription. Erythropoietin stimuliert die Transkription des ALA-Synthase-2-Gens. Nach Bindung an seinen Rezeptor in der Erythroblastenmembran wird eine JAK2-Kinase aktiviert, was außer der Globinsynthese die Synthese der Enzyme der Hämbildung induziert (. Abb. 22.6). Insbesondere wird – unter Vermittlung des Transkriptionsfaktors GATA 1 – die Transkription des G-ALA-Synthase-2Gens erhöht 4 Stimulierung der Translation. In der mRNA der δALA-Synthase befindet sich ein sog. eisenregulatorisches Element (IRE, iron responsive element, 7 Kap. 22.2.1). An dieses bindet bei niedrigen zellulären Eisenkonzentrationen ein eisenregulatorisches Protein (IRP, iron regulatory protein) und verhindert damit die Translation der δ-ALA-Synthase-2 mRNA. Gleichzeitig wird die Transferrin-Rezeptor-mRNA vermehrt translatiert, was die Eisenaufnahme in den Erythroblasten fördert. Durch Erhöhung der zellulären Eisenkonzentration kommt es zur Bildung von Eisen-Schwefel-Clustern (7 Kap. 22.2.1), die an das IRP binden, damit seine Struktur ändern. Es ist nicht mehr zur Wechselwirkung mit der δ-ALA-Synthase-2-mRNA imstande, sodass die Translation nun nicht mehr gehemmt ist

. Abb. 20.5. Bildung von Uroporphyrin III (mit Acetatseitenketten) und Koproporphyrin III (mit Methylseitenketten) aus Uroporphyrinogen III bzw. Koproporphyrinogen III

20

614

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

20.1.4

Ausscheidung von Porphyrinen und Porphyrinvorstufen

! Der Ausscheidungsweg wird durch die Wasserlöslichkeit bestimmt.

In geringen Mengen können die Porphyrinvorstufen GAminolävulinat (G-ALA) und Porphobilinogen (PBG) die Zellen verlassen, in das Blutplasma gelangen und in den Urin ausgeschieden werden. Uroporphyrinogen und Koproporphyrinogen sollten als Zwischenprodukte der Hämbiosynthese ebenfalls über die Nieren in den Urin und/oder über die Galle in den Stuhl ausgeschieden werden. Tatsächlich sind im Urin jedoch vorzugsweise Uroporphyrin und Koproporphyrin (. Abb. 20.5) nachweisbar, die aus den beiden Zwischenprodukten entweder durch enzymatische

Oxidation im Organismus oder – was wahrscheinlicher ist – spontan nach Exposition an Luftsauerstoff entstehen. Zu diagnostischen Zwecken werden deshalb Urin- und Stuhlextrakte mit Verbindungen versetzt, die eine vollständige Oxidation der Porphyrinogene zu den entsprechenden Porphyrinen bedingen. Die relative Verteilung eines Porphyrins zwischen Urin- und Stuhlausscheidung wird durch die Anzahl der Carboxylgruppen und damit die Wasserlöslichkeit der Verbindung bestimmt. Uroporphyrin, das 8 Carboxylgruppen und damit die höchste Wasserlöslichkeit aufweist, wird vorzugsweise in den Urin ausgeschieden. Koproporphyrin besitzt vier Carboxylgruppen und wird sowohl in den Urin als auch in den Stuhl ausgeschieden (griech. kopros, Stuhl). Protoporphyrin, welches mit zwei Carboxylgruppen nur schwach wasserlöslich ist, wird nur mit der Galle ausgeschieden.

In Kürze 4 Häm (Eisenporphyrin) kommt in einer Vielzahl von Proteinen des Organismus vor, in denen es am Sauerstoff- und Elektronentransport oder am Abbau von Wasserstoffperoxid beteiligt ist 4 In der Zelle wird das Hämgerüst in einer auf das cytosolische und mitochondriale Kompartiment verteilten Reaktionskette aus Succinyl-CoA und Glycin synthetisiert 4 Die Regulation der Hämbiosynthese unterscheidet sich in der Leber (und anderen Geweben) und im Knochenmark, da bei der Hämoglobinbildung in den Erythroblasten eine Koordination mit der Synthese

20.2

Pathobiochemie: Störungen der Hämbiosynthese

Störungen des ersten und geschwindigkeitsbestimmenden Schritts der Hämbiosynthese, der G-ALA-Synthase-2 im Knochenmark, führen zur sideroblastischen Anämie, wohingegen angeborene genetische Veränderungen anderer Enzyme der Hämbiosynthese primäre Porphyrien verursachen. Erworbene Porphyrien werden als sekundäre Porphyrien bezeichnet.

20.2.1

Sideroblastische Anämie

! Eine Störung der G-ALA-Synthase-2 im Knochenmark führt zur Akkumulation von Eisen in den Erythroblasten.

20

Diese Anämie hat ihren Namen von der Akkumulation von Eisen in den Mitochondrien erhalten, die ringförmig um den Zellkern angeordnet sind (. Abb. 20.6). Der relative Eisenüberschuss kommt durch die verringerte Protopor-

der D- und E-Globinketten und dem Eisenstoffwechsel erforderlich ist 4 Ermöglicht wird dies dadurch, dass das erste Enzym der Hämbiosynthese, die G-ALA-Synthase, in zwei Isoenzymformen (S1 und S2) vorkommt 4 In allen Geweben wird die δ-ALA-Synthase 1 durch Häm gehemmt 4 Im Knochenmark stehen die Synthese von Häm und Globin unter dem Einfluss von Erythropoietin. Die mRNA des knochenmarkspezifischen S 2-Isoenzyms verfügt außerdem über eisenempfindliche Elemente, die die Hämsynthese mit dem Eisenstoffwechsel koordinieren

phyrinbiosynthese aufgrund eines Defekts der G-ALA-Synthase-2 zustande. Bisher sind mehr als 20 unterschiedliche Mutationen des Gens beschrieben worden, die zu der Erkrankung führen. Die genetische Analyse einer betroffenen Familie hat gezeigt, dass hier eine Punktmutation von Threonin zu Serin (Thr388Ser) vorliegt, wodurch die Bindung des essentiellen Cofaktors Pyridoxalphosphat an das Enzym reduziert wird. Ein vermehrtes Pyridoxinangebot kann bei diesen Patienten zu einer Steigerung der G-ALA-S2-Aktivität führen.

20.2.2

Angeborene Porphyrien

! Die Reduktion der Bildung des Endprodukts Häm führt zu einer Enthemmung der G-ALA-Synthase.

Die Porphyrien stellen eine Gruppe genetischer Erkrankungen dar, die durch spezifische Defekte einzelner Enzyme der Hämbiosynthese verursacht werden (. Tabelle 20.1). Sie werden entweder autosomal rezessiv oder dominant vererbt. Bei den dominanten Varianten der Erkrankungen

615 20.2 · Pathobiochemie: Störungen der Hämbiosynthese

. Abb. 20.8. Strukturelle Ähnlichkeit von δ-ALA und GABA

. Abb. 20.6. Bildung von Ringsideroblasten bei der sideroblastischen Anämie (Berliner Blau-Färbung). (Aufnahme von R. Baumgart, Klinikum Großhadern, München)

. Abb. 20.7. Molekularpathogenese der erhöhten Bildung von Porphyrinvorstufen: ein partieller Enzymdefekt (1), führt zu einem Abfall der Hämkonzentration (2), der eine Stimulierung der G-ALASynthase (3) bewirkt, wodurch der Defekt kompensiert wird. Wird die G-ALA-Synthase (3) durch erhöhten Hämbedarf aber stark stimuliert, dann werden G-ALA (4) und PBG (5) in solch hohen Mengen gebildet, dass sie durch den »Flaschenhals« des Enzymdefekts (1) nicht vollständig weiter verwertet werden können und deshalb die Zelle verlassen müssen (6)

ist ein Allel durch eine Mutation defekt; durch die Expression des anderen Allels wird die Enzymaktivität zwar aufrechterhalten, ist aber auf 50% reduziert. Diese Reduktion der Enzymaktivität (z. B. der PBG-Desaminase, . Abb. 20.7) führt über eine Verminderung der Konzentration von Häm, das die G-ALA-Synthase hemmt, zu einer Aktivitätssteigerung dieses Schrittmacherenzyms der Hämbiosynthese. Dadurch wird die Hämbiosynthese unter Normalbedingungen aufrechterhalten. Wird sie aber durch einen vermehrten Verbrauch (z. B. durch Induktion von Cytochrom P450-Enzymen) deutlich gesteigert, dann können die Porphyrinvorstufen (δ-ALA und PBG) aufgrund der auf 50%

reduzierten PBG-Desaminase-Aktivität nur noch teilweise verwertet werden. Sie treten deshalb aus den produzierenden Zellen in den Extrazellulärraum aus und gelangen über diesen in den übrigen Organismus und in den Urin. ! Die Art der akkumulierenden Zwischenprodukte bestimmt die klinische Symptomatik.

Neurologische Symptome und Hauterscheinungen bestimmen die Klinik der Porphyrien. Sind bei den Erkrankungen δ-ALA und PBG erhöht, so treten meist neurologische Symptome auf. Erhöhungen der Uro- und Koproporphyrine sind durch Hautläsionen an lichtexponierten Stellen charakterisiert. Zu den neurologischen Dysfunktionen zählen neuroviszerale Beschwerden (akutes Abdomen, Obstipation, Übelkeit, Erbrechen, Rückenschmerzen) sowie neuropsychiatrische Symptome (Krampfanfälle, Koma, Halluzinationen, Lähmungen, Areflexien). Obwohl abdominelle Beschwerden im Vordergrund stehen, kann jeder Teil des Nervensystems betroffen sein. Als Ursache der neurologischen Manifestationen kommt ein Überschuss an G-Aminolävulinat oder Porphobilinogen oder ein Mangel an Häm in Frage. Da G-Aminolävulinat strukturell mit J-Aminobutyrat verwandt ist und einen partiellen Agonisten der GABA-Wirkung (7 Kap. 32.3.4) darstellt, wird eine Wirkung über eine Bindung an den Rezeptor dieses inhibitorischen Neurotransmitters diskutiert (. Abb. 20.8). Symptome wie Koma oder Krampfanfälle wären damit erklärbar. Auf der anderen Seite könnte ein Mangel an Häm z. B. die Biosynthese mitochondrialer Cytochrome beeinträchtigen und damit einen ATP-Mangel hervorrufen. ! Erhöhungen der Porphyrinkonzentration verursachen Hautläsionen.

Während die Porphyrinogene (G-Aminolävulinat, Porphobilinogen, Uroporphyrinogen I und III, Koproporphyrinogen I und III und Protoporphyrinogen IX) ungefärbt sind, sind die Porphyrine (Uroporphyrin I und III, Koproporphyrin I und III sowie Protoporphyrin IX und Häm) aufgrund der konjugierten Doppelbindungen farbig. Sie zeigen sowohl im sichtbaren (800–380 nm) als auch im ultravioletten (380–180 nm) Bereich des Spektrums ein spezifisches Absorptionsverhalten. Charakteristisch ist die Absorption bei etwa 400 nm, die nach ihrem Entdecker als Soret-Bande

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616

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

bezeichnet wird. Bei Bestrahlung mit UV-Licht zeigen Porphyrine eine rote Fluoreszenz, die auch als Grundlage für Nachweisreaktionen dienen kann. Kopro- und Uroporphyrine besitzen andere Absorptionsspektren als Häm, da mit der Komplexbildung mit Metallionen eine Änderung der Absorption im sichtbaren Bereich des Spektrums einhergeht. Diese Eigenschaften der Porphyrine erklären auch, warum ihre Ablagerung in der Haut zu lokalen Schädigungen durch Photosensibilisierung führt. Die Porphyrininduzierte Photosensibilität manifestiert sich normalerweise auf zwei Wegen: 4 einer erhöhten Fragilität der lichtexponierten Haut, insbesondere der Regionen, die den Handrücken und die Unterarme bedecken und 4 einer akuten Rötung, Brennen und Jucken der lichtexponierten Haut, besonders im Gesicht und den Handinnenflächen Diese unterschiedlichen Manifestationen sind wahrscheinlich darauf zurückzuführen, dass das hydrophobe Protoporphyrin in anderen subzellulären Strukturen der Zelle akkumuliert als die hydrophilen Uro- und Koproporphyrine. Protoporphyrin häuft sich vorwiegend in Mitochondrien an, in denen es normalerweise unter Aufnahme von Eisen in Häm überführt wird. Aufgrund seiner Hydrophobizität

soll Protoporphyrin in biologischen Membranen interkalieren. Im Gegensatz dazu akkumulieren Uroporphyrine vorwiegend in Lysosomen. Die photosensibilisierenden Wirkungen der Porphyrine sind auf ihre Eigenschaft, Licht zu absorbieren, zurückzuführen. Am wirksamsten ist die Wellenlänge im UV-A-Bereich um 400 nm, durch die die Elektronen des Porphyrins in einen angeregten Zustand überführt werden, von dem sie auf ihr ursprüngliches Niveau zurückfallen und dabei einen Teil der Energie auf molekularen Sauerstoff übertragen. Aktivierter Sauerstoff kann die Zelle über verschiedene Mechanismen schädigen, wie z. B. die Peroxidation von Membranlipiden, die Vernetzung von Proteinen oder Schädigung von Nucleinsäuren (7 Kap. 15.3). Die Schädigung von Membranen der Lysosomen, die Uroporphyrine enthalten, kann zu einer Freisetzung von Hydrolasen und Proteasen in das Cytosol und damit zu einer Selbstverdauung der Zelle führen. Das Licht mit einer Wellenlänge um 400 nm, welches Porphyrine anregt, durchdringt normales Fensterglas, sodass die Photosensibilisierung durch Fenster von Häusern, Büros und Automobilen erfolgen kann. Die Wellenlänge des UV-BBereiches (um 280–315 nm) wird dagegen durch Fensterglas absorbiert. Damit können sich Patienten mit Porphyrien vor einer Photosensibilisierung nicht dadurch schützen, dass sie sich vorwiegend in Häusern aufhalten.

. Tabelle 20.1. Angeborene Porphyrien (die Zahlen geben die Enzymschritte in den Abb. 20.2 und 20.3 an)

20

617 20.2 · Pathobiochemie: Störungen der Hämbiosynthese

! Die Molekularpathologie der Porphyrien wird zunehmend besser verstanden.

Genetisch determinierte Defekte aller Enzyme der Hämbiosynthese sind bekannt (. Tabelle 20.1). Seitdem es allerdings gelungen ist die Gene der beteiligten Enzyme zu klonieren, kann auch die Molekularpathologie dieser Erkrankungen besser analysiert werden. Die bisherigen Analysen zeigen, dass sich – in Einklang mit den klinischen Beobachtungen – die molekularen Veränderungen von Patient zu Patient erheblich unterscheiden können. Ähnlich wie bei den Thalassämien (7 Kap. 29.2.4) findet sich auf molekularer Ebene eine extreme Heterogenität: die Mutationsanalyse zeigt eine Fülle verschiedener Mutationen bei Genträgern dieser Erkrankungen. Während früher zwischen erythropoetischen und hepatischen Porphyrien unterschieden wurde, werden die einzelnen Porphyrien heute nach dem verursachenden Enzymdefekt besprochen. Es handelt sich um Krankheiten, die den gesamten Organismus betreffen. Bei der Mehrzahl der Patienten wird die genetische Disposition zur Porphyrie erst dann klinisch manifest, wenn eine bestimmte Umweltexposition (wie mit Medikamenten) erfolgt (niedrige Penetration). Warum sich zudem die phänotypische Expression einer genetischen Störung der Hämbiosynthese von Genträger zu Genträger unterscheiden kann, ist noch unbekannt. ! PBG-Synthase-Mangel tritt nur selten auf.

Bei dieser extrem seltenen Porphyrie treten schwere anfallsartige Beschwerden auf, im Rahmen derer große Mengen an G-Aminolävulinat und Koproporphyrin in den Urin ausgeschieden werden. Die Aktivität der PBG-Synthase ist auf deutlich unter 50% der Norm reduziert, was dafür spricht, dass offenbar nur homozygote Zustände klinisch manifest werden. ! PBG-Desaminase-Mangel verursacht die akut intermittierende Porphyrie (AIP).

Dieser Erkrankung liegt ein partieller Defekt der PBG-Desaminase zugrunde. Bei betroffenen Individuen beträgt die Aktivität des Enzyms etwa 50%, was den autosomal dominanten Charakter der Erkrankung anzeigt. Die meisten Menschen mit dieser genetischen Enzymkonstellation bleiben jedoch asymptomatisch (geringe Penetranz). Klinische Manifestationen in Form akuter Anfälle werden auf auslösende Faktoren wie Medikamente, Alkohol oder Stress zurückgeführt. Auf der anderen Seite können die Attacken durch Gabe von Glucose behandelt werden, da diese die δ-ALA-Synthase hemmt (7 Kap. 20.1.3). Bisher sind über 230 Mutationen in den 15 Exons und 14 Introns des PBGDesaminase-Gens nachgewiesen worden. Die Position der Mutation bestimmt, ob die klassische AIP vorliegt, bei der house keeping und Erythroblastenenzym betroffen sind, oder die variante Form, bei der nur das house keepingenzyme mutiert ist, sodass die Bestimmung der PBG-Des-

aminase im Erythrozyten einen Normalwert ergibt. Leitsymptome der akuten intermittierenden Porphyrie sind neurologische und psychiatrische Veränderungen: am häufigsten sind eine autonome Neuropathie, die abdominelle Koliken (akutes Abdomen), Erbrechen und Obstipation verursacht, eine Tachykardie und ein labiler Hochdruck. Motorische Lähmungen können auftreten, die die Bulbärund Atem-Muskulatur betreffen und damit lebensbedrohlich werden. In selten Fällen treten epileptische Anfälle auf, die entweder auf δ-ALA oder eine Hyponatriämie [bedingt durch eine inadäquate ADH-Sekretion (7 Kap. 28.3.2)] zurückzuführen sind. Im akuten Anfall führt die deutlich erhöhte Synthese von G-Aminolävulinat und Porphobilinogen wegen der langsamen Überführung in Uroporphyrinogen III zu einer Akkumulation im Cytosol der Zelle, sodass die beiden Zwischenprodukte ins Blut übertreten und in den Urin ausgeschieden werden. Behandelt werden akute Attacken durch das Weglassen der auslösenden Medikamente sowie die intravenöse Gabe von Glucose und/oder Häm (das als Medikament Hämarginat verfügbar ist), die beide die δ-ALA-Synthase hemmen. ! Uroporphyrinogen III-Synthase-Mangel führt bei Kleinkindern zur Rotverfärbung der Windeln.

Diese Porphyrie wurde als Erste 1874 von Schultz in Greifswald beschrieben. Bei Kleinkindern ist die Rotfärbung der Windeln (hauptsächlich durch Uroporphyrin I bedingt) der erste Hinweis auf das Vorliegen dieser Erkrankung. Die klinischen Manifestationen sind sehr unterschiedlich und reichen von milden Hautreaktionen über Rotverfärbung der Zähne (Ablagerung von Porphyrinen im Dentin) bis hin zur schweren hämolytischen Anämie (aufgrund hoher intraerythrozytärer Porphyrinspiegel, die die Erythrozytenmembran schädigen). Bisher sind 35 verschiedene Mutationen sind im defekten Gen beschrieben worden. Infobox Porphyrie Es ist bis heute ungeklärt, ob der mythischen Vorstellung eines Blut saugenden Vampirs, etwa in der Gestalt von »Dracula«, vielleicht bestimmte Krankheitssymptome zugrunde liegen. Eine originelle Hypothese geht davon aus, es könnte sich um Manifestationen einer kutanen Porphyrie gehandelt haben: 4 Lichtempfindlichkeit der Haut, daher erwacht der Vampir erst in der Nacht 4 Verstümmelungen an Gesicht und Händen 4 Weißfärbung der Haut infolge Anämie, deshalb auch Bluthunger 4 Rotfärbung der Zähne Die Wurzel des Vampirglaubens liegt in der Vorstellung vom fortlebenden Toten und seiner Gier nach Leben, welches er durch Blutsaugen zurück zu gewinnen sucht

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618

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

! Uroporphyrinogendecarboxylase-Mangel verursacht Blasen an Hand- und Fingerrücken.

Die durch einen Defekt der Uroporphyrinogendecarboxylase verursachte autosomal dominante Porphyria cutanea tarda (PCT) ist die häufigste Porphyrie. Sie ist durch die Ablagerung von Porphyrinen in der Haut gekennzeichnet. Durch den Einfluss der Sonnenstrahlung (etwa 400 nm) treten Hautsymptome einige Tage nach Sonnenexposition auf: charakteristisch sind Blasen an Hand- und Fingerrücken (. Abb. 20.9) sowie leichte Verletzbarkeit der Haut und Hypertrichosis (»Affenmensch«) . ! Koproporphyrinogen III- und Protoporphyrin-oxidasemangel bedingen neurologische und kutane Symptome.

Durch einen hetero- oder homozygoten (Manifestation bereits in der Kindheit) Defekt der Koproporphyrinogenoxidase kommt es zu einem mäßig bis deutlichen Anstieg der Koproporphyrin III-Ausscheidung in den Stuhl und zu einem geringeren Ausmaß in den Urin. Gleichzeitig ist bei akuten Anfällen auch die Urinausscheidung von G-ALA und PBG erhöht. Aufgrund dieses Ausscheidungsmusters treten bei dieser hereditären Koproporphyrie sowohl neurologische (wie bei der akut intermittierenden Porphyrie) als auch kutane Manifestationen (ähnlich wie bei der Porphyria cutanea tarda) auf. Der Porphyria variegata liegt ein partieller Defekt der Protoporphyrinogenoxidase zugrunde. Asymptomatische Träger der Erkrankung weisen eine normale Urinausscheidung von Porphyrinen und Porphyrinvorstufen auf, während akuter Anfälle kommt es zu einer deutlichen Zunahme der Stuhlausscheidung von Koproporphyrinen und Protoporphyrin und der Urinausscheidung von G-ALA und PBG. Daraus lassen sich die klinischen Manifestationen (neurologische Dysfunktion, Photodermatitis) ableiten. ! Ferrochelatase-Mangel bedingt eine Akkumulation von Protoporphyrin IX in den Erythrozyten.

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Ursache der erythropoetischen Protoporphyrie ist ein heterozygoter Ferrochelatase-Mangel. Die Diagnose wird durch den Nachweis eines erhöhten Spiegels von Protoporphyrin IX in Erythrozyten, Plasma und Stuhl gestellt, in den es bevorzugt wegen seiner schlechten Wasserlöslichkeit (Verlust von 6 Carboxylgruppen, . Abb. 20.3) ausgeschieden wird. Die hauptsächliche klinische Manifestation der Protoporphyrie stellt die Photosensibilität dar. Die Patienten klagen über Brennen, Jucken oder Schmerz in der Haut nach Sonnenexposition, manchmal innerhalb einiger Minuten. Dies wird von einem Erythem und Ödem im Bereich der sonnenexponierten Haut gefolgt. Blasen treten nur dann auf, wenn die Sonnenexposition länger anhält, sodass die Hautläsionen von denen bei der Porphyria cutanea tarda unterschieden werden können. Die unterschiedlichen Hautmanifestationen sind durch die Hydrophobi-

. Abb. 20.9. Hautveränderungen bei Porphyria cutanea tarda (Aufnahme von I. Frank, Maastricht)

zität des Protoporphyrins bedingt, das sich vorzugsweise in Mitochondrien anhäuft (7 Kap. 20.1.2). Da die Protoporphyrine auch im Hepatozyten abgelagert werden können, treten bei einzelnen Betroffenen auch Störungen der Leberfunktion auf. Die molekularpathologische Analyse der Protoporphyrie zeigt über 70 verschiedene Mutationen als Ursache des Enzymdefekts. ! Die biochemische Diagnose der Porphyrien erfolgt über die Analyse von Porphyrin(vorstuf )en im Urin und Stuhl.

Bei klinischem Verdacht auf eine Porphyrie (akute Attacken, Rotverfärbung des Urins, Hautveränderungen) wird zunächst der Schnelltest nach Samuel Schwartz und Cecil Watson durchgeführt, der auf der Zugabe eines Aldehydreagens zu Patientenurin beruht. Enthält der Urin im akuten Anfall die Porphyrinvorstufe Porphobilinogen, so führt die Zugabe des Reagens zu einer intensiven Rotfärbung. PBG und G-ALA können im Urin auch nicht-enzymatisch zu Uroporphyrinogen kondensieren, das dann zu Uroporphyrin oxidiert und den Urin bei längerem Stehen unter Lichteinfluss rot werden lässt. Eine weitere Differenzierung ist durch Analyse der einzelnen Porphyrine im Stuhl (Koproporphyrine) und Urin (Uroporphyrine) möglich (. Abb. 20.10). Die Bestätigung der Verdachtsdiagnose erfolgt durch die Enzymbestimmung. Nach Diagnose einer Porphyrie können heute zudem mögliche Genträger in der Familie des Patienten durch molekularbiologische Methoden ermittelt werden.

619 20.2 · Pathobiochemie: Störungen der Hämbiosynthese

. Abb. 20.10. Urinausscheidungsmuster bei den einzelnen Porphyrien. Der Nachweis von PBG erfolgt im akuten Anfall mit dem Schwartz-Watson-Schnelltest, ansonsten im 24-Stunden-Urin. Die

20.2.3

Erworbene Porphyrien

! Erworbene Porphyrien sind nicht durch einen Anstieg der G-ALA- und PBG-Urinausscheidung gekennzeichnet.

Bei verschiedenen Erkrankungen lässt sich eine mittelgradige Erhöhung der Urin-Porphyrinausscheidung (weniger als drei- bis vierfache Erhöhung gegenüber dem Normwert), insbesondere von Koproporphyrinen nachweisen. Patienten mit erhöhter Porphyrinausscheidung können sowohl abdominelle Beschwerden, Übelkeit, Erbrechen als auch andere Symptome entwickeln, die auf eine akute Porphyrie hinweisen. Aufgrund der erhöhten Porphyrinausscheidung in den Urin wird häufig fälschlicherweise eine primäre Porphyrie diagnostiziert. Die primären akuten Porphyrien sind jedoch immer mit einer Erhöhung der Urinausscheidung von G-ALA und/oder PBG vergesellschaftet. Mit Ausnahme einer Bleivergiftung, bei der Blei andere Metalle von aktiven Zentren von Enzymen verdrängt oder mit SH-Gruppen reagiert, sind sekundäre Porphyrien da-

Zahlen geben den Enzymdefekt an G-ALA = G-Aminolävulinat; PBG = Porphobilinogen; URO = Uroporphyrin; KOPRO = Koproporphyrin; PROTO = Protoporphyrin

gegen nicht mit einem Anstieg der Urinausscheidung von G-ALA und PBG vergesellschaftet. Blei hemmt die Enzyme Porphobilinogen-Synthase und Ferrochelatase, sodass im Urin eine Erhöhung der G-Aminolävulinat-Konzentration auftritt (7 Kap. 22.2.12). Da die Galle einen wesentlichen Ausscheidungsweg für die Porphyrine darstellt, steigen die Urin-Porphyrinspiegel bei verschiedenen hepatobiliären Erkrankungen an, wenn die Gallebildung gestört ist. Bei einer extrahepatischen Galle-Obstruktion (7 Kap. 20.3.1) wird der Anstieg der Urin-Koproporphyrinausscheidung von einem höheren Anteil des Typ-I-Isomers begleitet. Dies spiegelt die Tatsache wider, dass das Typ-I-Isomer, welches normalerweise vorzugsweise in die Galle ausgeschieden wird, den Organismus dann über die Niere verlässt. Die sekundären Porphyrien können von den asymptomatischen Formen der hereditären Koproporphyrie und der Porphyria variegata durch die quantitative Bestimmung der Stuhlporphyrine unterschieden werden: während bei den sekundären Porphyrien die Stuhlporphyrine normal oder nur geringgradig erhöht sind, sind sie bei den primären Porphyrien deutlich erhöht.

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620

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

In Kürze 4 Partielle Defekte einzelner Enzyme der Hämbiosynthese verursachen die Porphyrien: je nach Enzymdefekt wird zwischen akuten und chronischen Porphyrien unterschieden 4 Bei den akuten Porphyrien sind die Porphyrinvorstufen G-Aminolävulinat (G-ALA) und Porphobilinogen (PBG) erhöht, die aufgrund der Ähnlichkeit von G-ALA mit J-Aminobutyrat zu neuroviszeralen und -psychiatrischen Symptomen führen. Zudem sind sie durch intermittierende Attacken gekennzeichnet, die durch bestimmte Medikamente oder Stress ausgelöst werden können

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. Abb. 20.11. Abbau von Häm zu Bilirubin. (Einzelheiten 7 Text)

4 Bei den chronischen Porphyrien hingegen akkumulieren Porphyrine, die aufgrund ihrer konjugierten Doppelbindungen photosensibilisierend sind, in der Haut und verursachen Hautreaktionen 4 Durch die Klonierung der Gene aller Enzyme der Hämbiosynthese ist die genetische Analyse von Patienten mit diesen Erkrankungen möglich geworden: bei der akut intermittierenden Porphyrie sind inzwischen über 230 verschiedene Mutationen identifiziert worden, die auch die schnelle Erkennung von asymptomatischen Genträgern erlauben

621 20.3 · Abbau des Häms zu Gallenfarbstoffen

20.3

Abbau des Häms zu Gallenfarbstoffen

20.3.1

Abbau zu Bilirubin

! Häm wird über Biliverdin zu Bilirubin abgebaut und anschließend mit Glucuronat verestert.

Die beim Abbau von Hämoglobin und anderen Hämproteinen freiwerdenden Aminosäuren sowie das Eisen werden wiederverwertet, nicht jedoch das Porphyringerüst. Stattdessen wird es im Monozyten-Makrophagen-System von Leber, Milz und Knochenmark in zwei Reaktionen zunächst oxidativ zu Biliverdin gespalten und anschließend zu Bilirubin reduziert (prähepatische Phase des Hämabbaus, . Abb. 20.11). Dieses wird über die Galle (sein Name leitet sich vom lat. Bilis, Galle ab) ausgeschieden. Die einzelnen Reaktionen sind: 4 Bildung von Biliverdin. Unter Katalyse der Häm-Oxygenase wird der Eisenporphyrinring des Häms selektiv an der Methinbrücke zwischen den Pyrrolringen A und B gespalten. Der Reaktionsmechanismus der HämOxygenase entspricht dem einer mischfunktionellen Oxygenase. Die Ringspaltung erfolgt also oxidativ, die Methingruppe wird als CO freigesetzt und das Reduktionsmittel für die Wasserbildung ist NADPH/H+. Bei der Ringspaltung können theoretisch eine Reihe isomerer Formen entstehen. Die bei Säugern und damit auch beim Menschen vorkommende Häm-Oxigenase bildet als Produkt das Biliverdin IXa. Es zeichnet sich durch eine grüne Farbe aus (lat. viridis, grün) 4 Bildung von Bilirubin. Biliverdin IXa wird unter Katalyse einer cytosolischen Biliverdin-Reduktase zu dem aufgrund seiner rot-orangen Farbe als Bilirubin IXa (lat. ruber, rot) bezeichneten Molekül reduziert. Dabei wird die Methingruppe zwischen den Ringen C und D in eine Methylengruppe umgewandelt. Von den möglichen isomeren Formen überwiegt dabei die in . Abb. 20.12 dargestellte Z,Z-Form Bilirubin ist trotz der Existenz der zwei polaren Carboxylgruppen in den Propionat-Seitenketten schlecht wasserlöslich. Dies ist darauf zurückzuführen, dass diese mit den NH-Gruppen und dem in Lactamkonfiguration vorliegenden Sauerstoff (–NH–C=O) der Pyrrolringe intramolekulare Wasserstoffbrückenbindungen bilden (. Abb. 20.12). Warum Biliverdin in das schlechter lösliche Bilirubin umgewandelt wird, ist zunächst unverständlich. Die hydrophoben Eigenschaften des Bilirubins bergen nämlich eine Reihe von Nachteilen, z. B. seine Neurotoxizität, Neigung zur Bildung von Gallensteinen und vor allen Dingen die Notwendigkeit einer weiteren Metabolisierung. Sie werden aber offensichtlich dadurch wettgemacht, dass Bilirubin ein wichtiges lipophiles Antioxidans (7 Kap. 15.3) ist.

. Abb. 20.12. Bildung von Wasserstoffbrücken im Bilirubin. Die übliche Darstellung des Z,Z-Bilirubin IXa (oben) gibt keine Erklärung für die Unlöslichkeit des Moleküls in Wasser. Das Raummodell dagegen (Mitte) zeigt, dass die Propionsäureseitenketten der Pyrrolringe D und C über Wasserstoffbrückenbindungen (blau gestrichelte Linien) mit Sauerstoff- und Stickstoffatomen der Ringe B und A (B zu D; A zu C) in Verbindung treten. Dadurch ist das Molekül unpolar und unlöslich. Die covalente Bindung von Glucuronidgruppen zur Bildung des Bilirubindiglucuronids (unten) verhindert diese intramolekulare Wasserstoffbrückenbindungen und erhöht damit stark die Löslichkeit des Moleküls in Wasser

Da der weitere Stoffwechsel von Bilirubin in der Leber stattfindet (intrahepatische Phase), muss in Knochenmark und Milz gebildetes Bilirubin über das Blut dorthin transportiert werden. Aufgrund seiner schlechten Löslichkeit im Plasma erfolgt dieser Transport in Bindung an Albumin. Der normale Plasmaspiegel an Albumin gebundenen Bilirubins liegt zwischen 1,7 und 20,5 μmol/l (0,1–1,2 mg/ 100 ml). Im Dissé-Raum der Leber oder an der sinusoidalen Oberfläche der Hepatozyten dissoziiert das Bilirubin von seinem Trägerprotein, welches nicht in die Leberzelle eintritt (. Abb. 20.13).

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622

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

durch das MRP3-System der lateralen Membran in das Blut abgegeben und über die Nieren eliminiert.

20.3.2

Nachweismethoden für Bilirubin im Blutplasma

! Die beiden Bilirubinspecies im Plasma reagieren unterschiedlich schnell mit dem Diazoreagens.

. Abb. 20.13. Der Transport von Bilirubin aus dem Plasma in das Gallengangsystem. A = Albumin; OATP = organic anion transport protein; B = Bilirubin; L = Ligandin oder anderer Carrier; BdG = Bilirubin-Diglucuronid; MRP = multidrug resistance related protein. (Einzelheiten 7 Text)

20

Nach Abkoppelung von Albumin wird Bilirubin über Membrantransporter der OATP-Familie (organic anion transport protein), möglicherweise auch durch einfache Diffusion, in die Leberzelle aufgenommen und dort an intrazelluläre Trägerproteine (z. B. Ligandin) gebunden (. Abb. 20.13). Dieses transportiert Bilirubin in das endoplasmatische Retikulum. Dort erfolgt die Veresterung der Propionatreste von Bilirubin mit Glucuronat durch eine UDP-Glucuronat-Transferase (7 Kap. 17.1.2), die zur Phase 2 des Biotransformationssystems, (7 Kap. 33.3.1) gehört. Hierdurch werden die intramolekularen Wasserstoffbrücken gelöst und das Molekül wird wasserlöslicher (. Abb. 20.12). Das Gen für die Bilirubin-UDP-Glucuronyltransferase trägt die Information für drei mRNAs, die durch alternierendes Spleißen entstehen: sie unterscheiden sich in der 5c-Region, sind in der 3c-Region identisch und codieren für zwei Bilirubin-konjugierende Isoenzyme und ein Phenolkonjugierendes Enzym. Einzelne Enzyme werden auch in extrahepatischen Geweben gebildet, wo das Ausmaß der Glucuroniderung erheblich sein kann. Als Mono- und Diglucuronid wird Bilirubin-Glucuronid ATP-abhängig durch das MRP2 (multidrug resistance related protein 2)-System (7 Kap. 33.4.1) aus der Leberzelle in die Galle ausgeschieden (Beginn der posthepatischen Phase). Bei Verlegung der Gallenwege wird es aktiv

Da Bilirubinkonjugate aufgrund ihrer leichten Oxidierbarkeit relativ instabil sind, erfolgt ihre quantitative Bestimmung vorwiegend über die stabilen Dipyrrolderivate, die in der sog. Diazoreaktion gebildet werden. In dieser Reaktion wird die Methylengruppe zwischen den Ringen C und D unter Freisetzung zweier diazotierter Dipyrrole gespalten und als Formaldehyd freigesetzt. Plasma enthält zwei Bilirubinspecies: Die eine reagiert mit dem Diazoreagens innerhalb von Minuten, die andere mit der gleichen Geschwindigkeit nur in Gegenwart von »Beschleunigern« wie z. B. Methanol. Diese Stoffe wirken dabei wahrscheinlich über eine Lösung der intramolekularen Wasserstoffbrückenbindungen im Bilirubinmolekül (. Abb. 20.14). Das schnell reagierende Bilirubin, das auch als direkt reagierendes oder konjugiertes bezeichnet wird, stellt glucuronidiertes Bilirubin dar, das langsam reagierende – auch als indirekt reagierendes bezeichnet – das Albumin gebundene oder unkonjugierte Bilirubin im Plasma. Normalerweise macht das glucuronidierte Bilirubin etwa 10–20% des Gesamtbilirubins im Plasma aus, d. h. 80–90% des Bilirubins sind an Albumin gebunden.

20.3.3

Abbau des Bilirubins im Darm

! Durch Bakterien wird Bilirubin im Darm in Stercobilin überführt.

Nach Passage des Dünndarms wird Bilirubin im Dickdarm durch anaerobe Bakterien weiter abgebaut (. Abb. 20.15). Nach Abspaltung der Glucuronatreste durch eine E-Glucuronidase erfolgt die schrittweise Reduktion zum Stercobilinogen (lat. stercus, Stuhl). Zuerst entstehen durch Hydrierung der Vinylgruppen zu Ethylgruppen das Zwischenprodukt Mesobilirubin (griech. mesos, zwischen) und durch Hydrierung der Methingruppen (– CH =) zwischen den Ringen A und D sowie B und C zu Methylengruppen das Zwischenprodukt Mesobilirubinogen. Diese Überführung von Doppel- in Einfachbindungen ist mit einem Verlust der Farbe verbunden. Durch einen weiteren Hydrierungsschritt (an den Pyrrolringen A und B) entsteht Stercobilinogen, das durch Dehydrierung der Methylengruppe am Ring D zu einer Methingruppe in Stercobilin überführt wird (Ausscheidung etwa 40–280 mg/Tag). Bei Sterilisierung des Darms unter hochdosierter oraler Antibiotikatherapie kann die Vernichtung der Anaerobier die Ausscheidung von

623 20.3 · Abbau des Häms zu Gallenfarbstoffen

chemisch unverändertem Bilirubin verursachen, das durch Oxidation bei Zutritt von Luftsauerstoff in Biliverdin umgewandelt wird (grünliche Verfärbung des Stuhls). Ein Teil des Stercobilinogens wird durch bakterielle Enzyme weiter in Dipyrrole zerlegt (Mesobilifuchsin, Bilifuchsin). Stercobilin und diese Dipyrrole tragen zur normalen Stuhlfarbe bei. Bis zu 20% der im Darm aus Bilirubin entstehenden Produkte werden reabsorbiert und über die Pfortader der Leber zugeführt, wo sie erneut ausgeschieden werden (enterohepatischer Kreislauf). Ein geringer Teil gelangt über das Blut zu den Nieren, wo es als Urobilin oder Urobilinogen im Harn nachgewiesen werden kann den (im Mittel etwa 0,64 mg, maximal 4 mg/24-h-Urin). Bei Leberfunktionsstörungen werden diese Produkte vermehrt in den Urin ausgeschieden.

20.3.4

Hämoglobin- und Bilirubinumsatz

! Täglich werden etwa 250 mg Gallenfarbstoffe produziert.

Geringe Mengen von Hämoglobin werden ständig aus gealterten, im Blut zirkulierenden Erythrozyten in das Plasma freigesetzt und dort an D2-Haptoglobin gebunden. Dieses Protein besteht aus 2D- (83 Aminosäuren) und E(245 Aminosäuren) Untereinheiten, von denen die E-Untereinheit eine Homologie mit Serinproteasen aufweist. Der Hämoglobin-Haptoglobin-Komplex wird schnell durch Aufnahme in das retikuloendotheliale System aus dem Blut entfernt (Halbwertszeit 10–30 min), wohingegen die Halbwertszeit freien Haptoglobins etwa 5 h beträgt. Aus Hämoglobin freigesetztes Häm wird im Blut an das Protein Hämopexin gebunden und langsam eliminiert (Halbwertszeit 7–8 h). Da Hämoglobin den bei weitem größten Teil des Häms im Organismus enthält, entspricht die tägliche Ausscheidung an Gallenfarbstoffen ungefähr der Menge an Hämoglobin, das täglich gebildet und abgebaut wird. Im Hämoglobin entspricht der Porphyrinanteil (nach Abzug des Eisens) 3,5% des Hämoglobingewichts, d. h. beim Abbau von 1 g Hämoglobin entstehen 35 mg Bilirubin. Bei einem Erwachsenen mit 70 kg Körpergewicht beträgt der tägliche Hämoglobinumsatz etwa 90 μmol (6,25 g) oder 1,3 mmol/ kg Körpergewicht. Das bedeutet, dass täglich etwa 220 mg oder 380 mmol Bilirubin beim Abbau von Hämoglobin entstehen. Dazu kommen das beim Abbau von anderen Hämoproteinen (Myoglobin, Cytochrome) freigesetzte Bilirubin sowie die Nebenprodukte der Hämbiosynthese, womit sich die Gesamtproduktion von Gallenfarbstoffen beim Menschen auf etwa 250 mg erhöht. . Abb. 20.14. Abbau von Bilirubin zu Stercobilin. (Einzelheiten 7 Text)

20

624

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

. Abb. 20.15. Photoinduzierte Änderung der Konformation des unkonjugierten Bilirubins. Die Ausscheidung unkonjugierten Bilirubins IXa in die Galle wird durch die Bestrahlung mit blauem Licht im Wellenbereich von 400 bis 500 nm erleichtert. Das natürlich vorkommende Z,Z-Isomer ist schwer löslich. Photoisomere dagegen, die durch eine Umstellung von Ring A (zur Bildung des E,Z-Isomers),

20.4

Pathobiochemie: Störungen des Bilirubinstoffwechsels

! Ein Ikterus tritt als Folge einer Hyperbilirubinämie auf.

20

Steigt der Gehalt an Gesamtbilirubin über eine Konzentration von 2–3 mg/100 ml (34–51 μmol/l) Plasma an, so liegt eine Hyperbilirubinämie vor und das Bilirubin tritt in die Gewebe über. Die damit verbundene Gelbverfärbung der Haut und Skleren bezeichnet man als Gelbsucht oder Ikterus. Eine Gelbsucht kann die Folge

Ring B (zur Bildung des Z,E-Isomers) oder der Ringe A und B (um das E,E-Isomer zu bilden) entstehen, sind polarer. Deshalb können sie ohne vorherige Konjugation durch den Hepatozyten transportiert und in die Galle ausgeschieden werden. In der Galle bilden sich diese Photoisomere leicht zur Z,Z-Form zurück

4 einer gesteigerten Bildung von Bilirubin sein, die die Ausscheidungskapazität der gesunden Leber übersteigt, oder 4 einer Störung der Bilirubinkonjugation bzw. Ausscheidung in der Leber sein oder 4 auf einem Verschluss der ableitenden Gallenwege beruhen, der zu einer Unterbrechung des Gallenflusses und damit der Bilirubinausscheidung führt Je nachdem, welcher Mechanismus der Bilirubinerhöhung zugrunde liegt, wird zwischen prä-, intra- und posthepatischem Ikterus unterschieden. Oft gibt es auch Misch-

625 20.4 · Pathobiochemie: Störungen des Bilirubinstoffwechsels

formen dieser Gelbsuchtarten. Beim Vorliegen eines Ikterus wird als Erstes untersucht, ob die Bilirubinämie direkter oder indirekter Natur ist. Dadurch können Hämolysen oder gestörte hepatische Konjugationen von hepatobiliären Erkrankungen unterschieden werden.

20.4.1

Erworbene Hyperbilirubinämien

! Der erhöhte Abbau von Erythrozyten kann zum Ikterus führen.

Alle Zustände, die mit einem erhöhten Abbau von Erythrozyten (hämolytische Krisen) einhergehen, führen zu einer gesteigerten Bildung der Abbauprodukte des Häms, d. h. der Gallenfarbstoffe. Übersteigt die Bilirubinbildung die Glucuronidierung und anschließende Ausscheidung in die Galle, so kommt es zur Hyperbilirubinämie und damit zum hämolytisch bedingten Ikterus, bei dem das nichtkonjugierte (d. h. an Albumin gebundene) Bilirubin im Plasma erhöht ist (prähepatischer Ikterus). ! Schädigung der Hepatozyten beeinträchtigt den Bilirubinexport, Blockade der Gallenwege führt zum Stau.

Medikamente oder Hepatitisviren (7 Kap. 10.3) können zu einer Schädigung der Leberparenchymzelle mit Störungen des Bilirubinexports in die Gallenkapillaren (Erhöhung des konjugierten Bilirubins) führen. Oft verursachen dabei die akut entzündlichen Veränderungen auch eine mechanische Beengung intrahepatischer Gallenkapillaren mit nachfolgendem intrahepatischem Gallenstau (intrahepatischer Ikterus). Bei einer Blockade der ableitenden Gallenwege in bzw. nach der Leber kommt es in den Leberzellen zu einem Stau des Bilirubins, das weiterhin von der arteriellen Seite her aufgenommen und glucuronidiert wird. Durch Rückstau tritt das glucuronidierte Bilirubin in die Interzellulärspalten, die Lymphgefäße und die ableitenden Lebervenen über (posthepatischer Ikterus). Bei Neugeborenen können spezielle Ikterusformen auftreten. Verglichen mit dem Erwachsenen hat jedes Neugeborene eine Hyperbilirubinämie, und etwa 50% aller Neugeborenen sind innerhalb der ersten 5 Lebenstage ikterisch. Normalerweise steigt bei Neugeborenen der Bilirubinspiegel innerhalb der ersten 3 Tage von 1 bis 2 mg/100 ml (17–34 μmol/l) auf 5–6 mg/100 ml (85–102 μmol/l) (vorwiegend an Albumin gebunden) an und fällt dann innerhalb von einer Woche auf Normalwerte ab. Dieser physiologische Ikterus ist das Resultat einer erhöhten Produktion (infolge des Abbaus von HbF-haltigen Erythrozyten), die der Reifung der Ausscheidungsmechanismen in der Leber zeitlich vorangeht. Kommt es während dieser Periode jedoch zu einer stärkeren Hämolyse (z. B. bei einer Rh-Inkompatibilität, 7 Kap. 29.2.3), so tritt ein pathologischer Neugeborenenikterus auf, der bei Nichtbehandlung mit Aus-

tauschtransfusionen zur Schädigung bestimmter Hirnkerne (deshalb auch als Kernikterus bezeichnet) führen kann. ! Durch photochemische Behandlung kann Bilirubin in ein polareres Derivat überführt werden.

Die Phototherapie Neugeborener zur Behandlung der unkonjugierten Hyperbilirubinämie hat sich als sicher und wirkungsvoll erwiesen, wenn die Serumbilirubinkonzentrationen über 5 mg/100 ml liegen. Die Bestrahlung mit blauem Licht einer Wellenlänge von 400 bis 500 nm führt zu einer Photoisomerisierung des Bilirubins und zu einer nachfolgenden Ausscheidung des unkonjugierten Bilirubins in die Galle. Die Konformation der Methinbrücken eines oder beider äußeren Pyrrolringe des Bilirubins IXa (Z,Z, . Abb. 20.15) – des natürlich auftretenden Isomers – schlägt um, was zur Bildung einer Mischung relativ instabiler Isomere führt (Z,E; E,Z; E,E). Diese Photoisomere, die man insgesamt als Photobilirubin bezeichnet, können keine intramolekularen Wasserstoffbindungen bilden, wie sie für das Z,Z-Isomer charakteristisch sind. Demzufolge ist Photobilirubin polarer als Bilirubin und kann deshalb leicht in die Galle ausgeschieden werden, ohne dass es dafür mit Glucuronsäure konjugiert werden müsste. Die photochemische Umwandlung des Bilirubins in Photobilirubin durch blaues Licht erfolgt wahrscheinlich direkt in der Haut und in subcutanen Geweben und nicht in der Mikrozirkulation. Während Photoisomere nach Photoaktivierung aus der Haut in das Blut freigesetzt werden, werden sie gleichzeitig durch Bilirubin IXa (Z,Z-Isomer) aus dem Plasma ersetzt, sodass schließlich die Gesamtplasmabilirubinkonzentration abfällt. Der relative Anteil der einzelnen unter der Phototherapie entstehenden Isomere ist zwar nicht bestimmt worden, aber insgesamt machen sie etwa 15% des Gesamtbilirubingehalts bei ikterischen Neugeborenen aus. Photobilirubin wird an Albumin im Plasma gebunden, in der Leber aufgenommen und ohne Konjugierung in die Gallenwege sezerniert. In der Galle fallen die instabilen geometrischen Isomere wieder in die stabile Bilirubin XD (Z,Z)-Form zurück, die Wasserstoffbrückenbindungen aufweist, und gelangen dann in den enterohepatischen Kreislauf. Da Photobilirubin sogar bei der niedrigen Intensität des normalen Tageslichts gebildet wird, werden geringe Mengen der Photoisomere wahrscheinlich stets gebildet und von ikterischen Kindern und Patienten mit unkonjugierter Hyperbilirubinämie, wie z. B. bei der Crigler-Erkrankung (7 u.), ausgeschieden.

20.4.2

Angeborene Hyperbilirubinämien

! Ein genetischer Defekt der UDP-Glucuronyltransferase führt zur Hyperbilirubinämie.

Beim Morbus Meulengracht (in Frankreich 1906 von Gilbert beschrieben, deshalb auch als Gilbert-Syndrom be-

20

626

Kapitel 20 · Häm und Gallenfarbstoffe

zeichnet) tritt eine vorwiegend unkonjugierte Hyperbilirubinämie (bis 6 mg/100 ml) auf, wobei das Gesamtbilirubin oft erst unter Belastung (Nahrungskarenz, Infekte, Medikamente) ansteigt. Ursachen dieser Hyperbilirubinämie sind bei Europäern Mutationen im Bereich des Promotoranteils des UDP-Glucuronyltransferase I-Gens. Es wird geschätzt, dass der Morbus Meulengracht bei 3–10% der Bevölkerung vorkommt. Möglicherweise haben die Betroffenen eine höhere Empfindlichkeit gegenüber bestimmten Medikamenten. Sind die 5 Exonregionen des Gens von Mutationen betroffen, so liegt das Crigler-Najjar-Syndrom vor, das in zwei Formen (I und II) vorkommt: 4 Die extrem seltene autosomal-rezessive Form I mit residueller Enzymaktivität von Einleitung Ernährung beschreibt die für das Wachstum, die Reproduktion sowie die Aufrechterhaltung aller Körperfunktionen und der Gesundheit notwendige Aufnahme und Verwertung von Nahrung durch den Organismus. Um dies zu gewährleisten, müssen Wasser, Kohlenhydrate, Proteine oder Aminosäuren, Lipide, Vitamine, Mineralstoffe und Spurenelemente mit Lebensmitteln und Getränken zugeführt werden. Aufgrund der im Vergleich zu Vitaminen und Mineralstoffen erforderlichen hohen Zufuhr an Kohlenhydraten, Proteinen und Fetten werden diese als Makronährstoffe oder Hauptnährstoffe bezeichnet. Während Kohlenhydrate und Lipide vor allem als Energielieferanten dienen, können Proteine bzw. Aminosäuren zwar auch energetisch verwertet werden, besitzen jedoch im menschlichen Körper vor allem eine Bedeutung als strukturelle und funktionelle Komponenten. Das Stoffwechselgeschehen ist Ausdruck einer beständigen Anpassung an variable Ernährungsbedingungen und beinhaltet alle Prinzipien der biologischen Regulation. Nicht nur die Aufnahme von Nahrung als solche sowie Menge und Verhältnis der Energie liefernden Makronährstoffe, sondern auch diverse Vitamine und Spurenelemente beeinflussen Genexpression und Biosynthese von Proteinen und deren katalytische oder strukturelle Funktionen. Ernährung umfasst somit die Bedeutung der Nährstoffe als Energieträger, ihre spezifische Rolle für Syntheseleistungen des Organismus und ihre Funktion bei der Kontrolle des Stoffwechselgeschehens.

21.1

Energiebilanz

21.1.1

Grundlagen der Energiebilanz des Körpers

! Im menschlichen Organismus wird Energie für mechanische, chemische, osmotische und elektrische Arbeit benötigt.

Zur Aufrechterhaltung der biologischen Arbeitsleistungen werden bevorzugt Kohlenhydrate und Fettsäuren im Zellstoffwechsel unter ATP-Bildung oxidiert. Teile der über die Nahrung zugeführten Energie werden in Form von Glycogen in Leber und Muskel und als Fettsäuren in den Triacylglycerinen des Fettgewebes gespeichert. In Phasen der Nahrungskarenz können diese Energiereservoirs genutzt werden. Beim Erwachsenen ist für die Aufrechterhaltung eines konstanten Körpergewichts das Gleichgewicht zwischen Energieaufnahme und Energieverbrauch eine notwendige Voraussetzung. Ist die Energieaufnahme langfristig höher als der Energieverbrauch, so wird die überschüssige Energie in Form von Triacylglycerinen im Fettgewebe gespeichert (7 Kap. 21.3.2). Dies führt in Abhängigkeit von der Höhe des Energieüberschusses und der Dauer einer positiven Energiebilanz zu Übergewicht und Adipositas (Fettsucht). Ist die Energieaufnahme langfristig geringer als der Energieverbrauch, so kommt es zum fortschreitenden Gewichtsverlust, der in schweren Fällen zur Protein-Energie-Malnutrition führt (7 Kap. 21.3.3). ! Die Energiebilanz des Organismus ist die Summe aller Energie verbrauchenden und Energie erzeugenden Reaktionen, die in individuellen Zellen und Organsystemen ablaufen.

Der überwiegende Teil der durch biologische Oxidationsprozesse gewonnenen Energie wird in die Form energiereicher Phosphate überführt. Dies ist neben Adenosintriphosphat (ATP) als wichtigstem Energieträger des Zell-

stoffwechsels vor allem Kreatinphosphat, das durch die Kreatinkinase aus ATP und Kreatin gebildet wird und somit eine Speicherform von ATP darstellt. Ein Teil der aus der Substratoxidation hervorgegangenen Energie wird nicht in die Synthese von ATP eingeleitet, sondern in Form von Wärme abgegeben. Dieser Prozess dient vornehmlich der Aufrechterhaltung der Körpertemperatur. Die Umwandlung der in Nahrungsmitteln enthaltenen chemischen Energie in ATP und Wärme wird als Energieumsatz bezeichnet (. Abb. 21.1). Die Wärmeproduktion im Zellstoffwechsel hat eine essentielle, eine obligatorische und eine regulatorische Komponente. Die essentielle Wärmeproduktion ist eine Konsequenz des Verbrauchs und der Resynthese von ATP und erfolgt damit innerhalb anaboler und kataboler Zyklen, die u.a. für die Erneuerung von Geweben notwendig sind. Die obligatorische Wärmeproduktion resultiert vor allem aus Energie verbrauchenden molekularen Transportprozessen. Einen großen Beitrag zur obligatorischen Wärmeproduktion liefert die in allen Zellen des Säugers vorkommende Na+/K+-ATPase. Deren Transportaktivität hält den von extrazellulär nach intrazellulär gerichteten Na+-Gradienten aufrecht und liefert damit die Voraussetzung für die Erregbarkeit von Nervenzellen oder die zelluläre Aufnahme von Nährstoffen wie Aminosäuren oder Intermediaten, die häufig im Cotransport mit Na+-Ionen erfolgt (7 Kap. 32.2.3). Die Aktivität der Na+/K+-ATPase ist nach Schätzungen für 20–40% des Ruheumsatzes verantwortlich, d.h. für den Energieverbrauch, der zur Aufrechterhaltung der Vitalfunktionen, wie Körpertemperatur, Kreislauf, Atmung und Ausscheidung benötigt wird. In homöothermen Organismen, wie dem Menschen, stellt die regulatorische Wärmeproduktion eine dritte Komponente dar, die der Aufrechterhaltung der Körpertemperatur bei variierenden Umgebungstemperaturen dient. Zittern als Antwort gegenüber einer Kälteexposition bedeutet eine erhebliche Zunahme der Kontraktion der Skelettmuskulatur, die in einem stark gestiegenen ATP-Umsatz und damit der Wärmeproduktion

633 21.1 · Energiebilanz

. Abb. 21.1. Biochemische Prozesse der Wärmeproduktion. (Einzelheiten 7 Text)

einhergeht. Höhere Umgebungstemperaturen führen zur Schweißbildung mit den Folgen der Wärmeabgabe durch erhöhte Evaporation. Die Wärmeproduktion innerhalb von Zellen wird durch zahlreiche neurale und endokrine Faktoren beeinflusst. So stimulieren z.B. Schilddrüsenhormone die Na+/K+-ATPase und zahlreiche Komponenten der mitochondrialen Elektronentransportkette. Sie fördern ebenso den Fett-, Kohlenhydrat- und Proteinmetabolismus und den O2-Verbrauch und erhöhen damit die Wärmeproduktion (. Abb. 21.1). ! Die Maßeinheit für die Energie ist nach Einführung der SI-Einheiten das Kilojoule (kJ).

Die Maßeinheit Kilojoule (kJ) hat die früher gebräuchliche Kilokalorie (kcal) ersetzt, die in der Praxis aber noch sehr häufig verwendet wird. Zwischen Kalorie und Joule besteht folgende Beziehung:

21.1.2

Physiologische Verbrennung der Makronährstoffe

! Die Makronährstoffe haben unterschiedliche physiologische Brennwerte.

Der Netto-ATP-Gewinn bei der Oxidation der Makronährstoffe hängt einerseits davon ab, wie viel Energie der Organismus aufwenden muss, um die Energieträger zu metabolisieren, andererseits davon, wie viel Energie in der Substratkettenphosphorylierung und oxidativen Phospho-

rylierung (7 Kap. 15.1) des jeweiligen Nährstoffs gewonnen wird. Im Vergleich zum physikalischen Brennwert der Nahrung, d.h. der Energie die bei vollständiger Verbrennung im Kalorimeter als Wärme freigesetzt wird, ist der physiologische Brennwert, d.h., die dem Organismus tatsächlich zur Verfügung stehende Energie, geringer. So gehen etwa 5– 10% des physikalischen Brennwerts durch unvollständige Verdauung und Resorption der Kohlenhydrate, Lipide und Proteine der Nahrung im Magen-Darm-Trakt verloren. Entsprechend bezeichnet man die in den Körper gelangende Energiemenge als »verdauliche oder resorbierte Energie«. Weitere 5–10% der aufgenommenen Energie werden für den Transport, die Speicherung und die biochemischen Umwandlungsprozesse der verschiedenen Nährstoffe benötigt (. Abb. 21.2). Ein nicht unerheblicher Teil der physikalischen Energie geht letztlich als Wärme bei der Nährstoffoxidation und dem Umsatz von ATP verloren, während der Rest in Form energiereicher Phosphate konserviert wird (. Abb. 21.2). Wird die durch Ausscheidung über Urin und Faeces verlorene Energie berücksichtigt, ergeben sich mittlere physiologische Brennwerte von 4, 9 und 4 kcal/g für Kohlenhydrate, Fette und Proteine wenn diese Makronährstoffe über eine gemischte Kost zugeführt werden. Der physiologische Brennwert von Alkohol beträgt etwa 7 kcal/g. Da die Kost in Menge, Art und Zusammensetzung extrem variabel ist und Verdaulichkeit wie Metabolismus auch variabel sind, weichen die realen physiologischen Brennwerte zum Teil beträchtlich von den genannten Mittelwerten ab. Während sich die physiologischen Brennwerte für Kohlenhydrate und Lipide kaum von den physikalischen Brennwerten unterscheiden, ist er im Fall der

21

634

Kapitel 21 · Ernährung

21

. Abb. 21.2. Die Umwandlung absorbierter Nahrungsenergie in Wärme und Arbeit. Ein Teil der mit der Nahrung aufgenommenen Energie wird für Digestionsprozesse verbraucht. Der Rest der Energie

wird für die Aufrechterhaltung metabolischer Prozesse verwendet. Wie bei allen Formen der Energieumsetzung geht ein Teil der Energie als Wärme verloren

Proteine um bis zu 1,65 kcal/g niedriger als der physikalische Brennwert. Dies ist darin begründet, dass bei der biologischen Oxidation der Protein-Stickstoff unter Energieverlust in Harnstoff überführt und ausgeschieden werden muss.

raum ohne die Erzeugung von ATP erlaubt, sodass das chemiosmotische Potential des Protonengradienten als Wärme verloren geht. Während Erwachsene kaum noch braunes Fettgewebe und damit kaum UCP1 besitzen, kommen seine Varianten UCP2 und UCP3 in vielen Geweben des Menschen vor und unterliegen einer nutritiven Kontrolle ihrer Synthese. Bei Nagern führt eine fettreiche Diät zu verstärkter UCP2-Expression, wodurch in Folge der Energieverbrauch bei erhöhter Energiezufuhr über Wärmebildung reguliert werden kann. Das UCP2 des Menschen wurde auf dem Chromosom 11 lokalisiert. Interessanterweise lassen sich in verschiedenen Spezies die Genloci für UCP-Proteine mit der Entwicklung von Hyperinsulinämie und Adipositas assoziieren. Veränderungen der Funktion oder der Expressionshöhe dieser, die Effizienz der Energieausbeute regulierenden, Faktoren könnten somit die Suszeptibilität zur Entwicklung von Adipositas beeinflussen. Wenngleich Assoziationen zwischen bestimmten Polymorphismen, besonders in der Promotorregion von UCP2, und dem Auftreten von Adipositas belegt werden konnten, ist bislang unklar, welchen Beitrag UCPs für die genetisch bedingte Komponente der Adipositas liefern. Unabhängig davon, ob UCP2 beim Menschen für die Adaptation der ATP-Ausbeute bei der Oxidation der Nährstoffe bedeutsam ist, lässt sich zeigen, dass die Thermogenese und damit der Ruheumsatz an die Energiezufuhr angepasst werden kann. Unterzieht man gesunde Versuchspersonen einer längeren Restriktion der Nahrungszufuhr, so erfolgt neben der Abnahme des Körpergewichts auch eine Reduktion des (auf das Körpergewicht bezogenen) Grundumsatzes, was als Verbesse-

! Die Effizienz der Energieausbeute bei der Nährstoffoxidation ist beeinflussbar.

Die Energieausbeute bei der Oxidation der Nährstoffe, d.h. die Effizienz mit welcher der mitochondriale Elektronentransport an die ATP-Synthese gekoppelt wird, kann durch pharmakologische Wirkstoffe wie Dinitrophenol, Koffein, Nikotin und Amphetamine beeinflusst werden. Sie können den transmembranären Protonengradienten der inneren mitochondrialen Membran und damit die treibende Kraft für die ATP-Synthese reduzieren. Die damit einhergehende Verminderung des ATP/ADP-Quotienten führt kompensatorisch zu erhöhtem O2-Verbrauch bei gleichzeitig gesteigerter Oxidation von NADH/H+ und FADH2. Diese Entkopplung der oxidativen Phosphorylierung bedeutet, dass ein größerer Teil der bei der Oxidation freiwerdenden Energie nicht als chemische Energie konserviert wird, sondern in Wärme umgewandelt wird. In gleicher Weise dient die physiologische Entkopplung bei Säugetieren in kalten Klimaregionen und beim Neugeborenen zur Aufrechterhaltung der Körpertemperatur. Die innere Mitochondrienmembran des braunen Fettgewebes von Neugeborenen enthält dafür größere Mengen des auch uncoupling protein 1 (UCP1) genannten Proteins Thermogenin, das den Rückfluss von Protonen in den mitochondrialen Matrix-

635 21.1 · Energiebilanz

. Abb. 21.3. Nahrungsaufnahme, Körpergewicht und Grundumsatz bei kalorisch restriktiver Ernährung und Realimentierung im Langzeitexperiment. Versuchspersonen wurden während der angegebenen Zeiten zuerst kalorisch restriktiv ernährt und anschließend realimentiert. Der adaptative Grundumsatz wurde für Veränderungen in fettfreier Körpermasse und Fettmasse adjustiert. (Einzelheiten 7 Text)

rung der Effizienz bei der Oxidation von Nahrungsstoffen aufgefasst werden kann. Realimentierung führt umgekehrt zur Zunahme von Körpergewicht und Grundumsatz (. Abb. 21.3).

21.1.3

Energieverbrauch und Energiebedarf

! Der Energiebedarf wird durch den Energieverbrauch determiniert.

Der größte Teil des täglichen Energieverbrauchs (metabolische Rate) entsteht durch den Grundumsatz, der dazu dient, metabolische Funktionen aufrecht zu erhalten. Zur Abschätzung des Grundumsatzes dienen folgende Näherungen: 4 Grundumsatz = 4,2 kJ/kg Körpergewicht × Stunde oder 4 Grundumsatz = 1 kcal/kg Köpergewicht × Stunde Der Grundumsatz ist in der Praxis schwierig exakt zu bestimmen. Es wird daher in der Regel der sog. Ruheenergieumsatz bestimmt. Dieser liegt etwa 5–15% über dem Grundumsatz und macht bei einer sitzenden Person etwa 60–75% des täglichen Gesamtenergieumsatzes aus. Metabolisch besonders aktive Organe wie Gehirn, Leber, Niere und Herz, die nur 5–6% des Körpergewichts ausmachen, sind für mehr als 50% des Ruheenergieumsatzes verantwortlich (. Abb. 21.4). Auf Gramm bezogen ist die metabolische Rate (kcal/g Organmasse) dieser Organe 15–40 mal höher als die des ruhenden Muskels und 50–100 mal höher als die des Fettgewebes. Die Skelettmuskulatur trägt aufgrund ihrer vergleichsweise hohen Masse ebenfalls signifikant zum Ruheenergieumsatz bei. . Abb. 21.4 dokumentiert die unterschiedlichen Anteile einzelner Organe am Ruheumsatz der Energie in Abhängigkeit vom Lebensalter.

Zum Gesamtenergiebedarf des Körpers tragen außer dem Ruheenergieumsatz der Erhaltungsbedarf und der Leistungsbedarf bei. Der Erhaltungsbedarf entspricht der zusätzlichen Energiemenge, die für Nahrungsaufnahme, Verdauung und Resorption, die Regeneration von Geweben sowie für alltägliche Bewegungsabläufe wie z.B. Aufstehen, Waschen, Anziehen notwendig ist. Der Erhaltungsbedarf ist außerdem von der Umgebungstemperatur abhängig. Ein beachtlicher Teil des Erhaltungsbedarfs wird durch die in Folge der Nahrungsaufnahme ausgelösten Thermogenese verursacht. Diese postprandiale Thermogenese entspricht etwa 18–24% der mit Proteinen, 4–7% der mit Kohlenhydraten und 2–4% der mit Fett aufgenommenen Energiemenge. Unter üblichen Ernährungsbedingungen sind 8– 15% des täglichen Energieumsatzes auf die postprandiale Thermogenese zurückzuführen. Der Leistungsbedarf entsteht durch körperliche Aktivität oder besondere physiologische Leistungen während

. Abb. 21.4. Der Anteil verschiedener Organe am Ruheenergieumsatz in Abhängigkeit vom Alter

21

636

21

Kapitel 21 · Ernährung

Wachstum, Schwangerschaft und Stillzeit. Physische Aktivitäten können je nach Intensität und Dauer für 30-50% des Gesamtenergieumsatzes verantwortlich sein. Spontane motorische Aktivitäten (non-exercise activity thermogenesis) tragen mit großer individueller Variabilität zum Energieverbrauch bei. Experimentell lässt sich zeigen, dass Individuen täglich zwischen 200 kcal und 900 kcal nur aufgrund spontaner motorischer Aktivität verbrauchen. Diese Unterschiede sind für die zum Teil beträchtlich unterschiedliche Körpergewichtsentwicklung von Individuen mit annähernd gleicher Konstitution bei gleicher Energieaufnahme verantwortlich. ! Die metabolische Rate wird durch eine Vielzahl neuronaler und hormoneller Faktoren beeinflusst.

Durch Aktivierung des sympathischen Nervensystems bei Stress wird durch die Katecholamine Adrenalin und Noradrenalin der Glycogenabbau gefördert und die Fettsäurefreisetzung stimuliert. Im Zusammenspiel mit anderen Hormonen, wie z.B. den Schilddrüsenhormonen (7 Kap. 21.1.1) wird dann die Verwertung von Glucose und Fettsäuren und damit die metabolische Rate erhöht. Insulin und Glucagon beeinflussen die metabolische Rate in antagonistischer Weise. Während Insulin die Glycogensynthese, aber auch die Glycolyse und Glucoseoxidation fördert, führt Glucagon in der Leber zur Glycogenolyse und Gluconeogenese mit erhöhter Abgabe der Glucose ins Blut. Steroide wie Estrogene und Progesteron erhöhen die Speicherung von Triacylglycerinen im Fettgewebe während Testosteron hier antagonistisch wirkt. Die Bedeutung der hormonellen Konstellation für die metabolische Rate wird nach Stress mit einer Erhöhung des Katecholaminspiegels beispielsweise bei Verletzungen, Fieber, Infektionen oder im Hungerstoffwechsel erkennbar. So führt die Steigerung der Körpertemperatur um 1°C zu einer Zunahme der metabolischen Rate um etwa 13%. Bei Infektionen ist insbesondere eine erhöhte zelluläre Aufnahme von Trijodthyronin festzustellen, das im Gegensatz zu den Katecholaminen eine längerfristige Erhöhung der metabolischen Rate bewirken kann. Die meisten Erkrankungen sind mit einem erhöhten Umsatz und

. Abb. 21.5. 24-Stunden Registrierung des Energieverbrauchs bei einem Probanden, der sich in einem indirekten Kalorimeter oder in einer Respirationskammer aufhält. Der Energieverbrauch beträgt

somit auch Bedarf an Energie verbunden. Dies beruht vor allem auch auf der vermehrten Bildung von Cytokinen und deren Wirkungen auf das Immunsystem und den Intermediärstoffwechsel (7 Kap. 25.5).

21.1.4

Experimentelle Ermittlung des Energieumsatzes

! Der Energieverbrauch wird vorwiegend durch direkte und indirekte Kalorimetrie bestimmt.

Bei der direkten Kalorimetrie wird die Wärmeabgabe von Zellen, Geweben oder Gesamtkörpern in geschlossenen Kammern (Kalorimetern) gemessen. Die indirekte Kalorimetrie nimmt dagegen den O2-Verbrauch als Maß der Wärmeproduktion, da dieser in aerob lebenden Organismen nahezu vollständig die Oxidation der Nährstoffe unter O2-Verbrauch widerspiegelt (. Abb. 21.5). Am Beispiel der vollständigen Oxidation von Glucose lässt sich ableiten: 4 Der Glucoseoxidation liegt folgende Beziehung zugrunde:

4 Pro Mol Glucose werden demnach 6 × 22,4 l (pro g Glucose 0,75 l) Sauerstoff verbraucht und 4 Beim Verbrauch von 1 l Sauerstoff wird eine Wärmemenge von = 21,6 kJ (5,1 kcal) freigesetzt (7 Oxidationsgleichung für Glucose). Diese beim Verbrauch von 1 l Sauerstoff freigesetzte Energiemenge bezeichnet man als energetisches Äquivalent von Sauerstoff für Glucose. Entsprechende Gleichungen bestehen für die Oxidation von Fettsäuren oder Aminosäuren (. Tabelle 21.1). Da das energetische Äquivalent von Sauerstoff für die drei wichtigsten Nährstoffe in der Nahrung des Menschen fast gleich ist (. Tabelle 21.1), verwendet man für die Be-

4,2 kJ (1 kcal/min) während des Schlafens (dunkelblau) und ist während körperlicher Aktivität (hellblau) und nach Mahlzeiten (grün) erhöht

21

637 21.1 · Energiebilanz

. Tabelle 21.1. Respiratorischer Quotient und energetisches Äquivalent für Sauerstoff für die einzelnen Nährstoffe. RQ respiratorischer Quotient RQ

Freigesetzte Wärme (kJ/g bzw. kcal/g)

Energetisches Äquivalent (kJ bzw. kcal/l O2)

6/6 = 1,00

16,8

4,0

21,0

5,0

C57H104O6 + 80 O2 o 57 CO2 + 52 H2O

57/80 = 0,71

39,7

9,46

19,7

4,7

2 C3H7O2N + 6 O2 o (NH2)2CO + 5 CO2 + 5 H2O

5/6 = 0,83

18,1

4,32

19,3

4,6

Nährstoff

Beispiel

Gleichung

Kohlenhydrat

Glucose

C6H12O6 + 6 O2

Fett

Triolein

Protein

Alanin

o 6 CO2 + 6 H2O

rechnung des Energieumsatzes aus dem Sauerstoffverbrauch einen Durchschnittswert von 20 kJ (4,8 kcal)/l O2. Beträgt der Sauerstoffverbrauch in Ruhe z.B. 250 ml/min, so errechnet sich der Grundumsatz pro 24 Stunden wie folgt:

Aufgrund des unterschiedlichen Gehalts an Kohlenstoff, Wasserstoff und Sauerstoff in den einzelnen Nährstoffen ergeben sich im Verhältnis von gebildeten Mol CO2 pro Mol an verbrauchtem O2 bei der Verbrennung unterschiedliche respiratorische Quotienten (VCO2/VO2). Diese betragen 1,00 für Kohlenhydrate, 0,80 für Proteine und 0,71 für Fette. Für Alkohol beträgt der respiratorische Quotient 0,67. Anhand des experimentell ermittelten respiratorischen Quotienten lässt sich somit auch auf den primär oxidierten Nährstoff schließen. Für eine Mischkost beträgt der respiratorische Quotient etwa 0,85.

Eine andere indirekte Methode zur Bestimmung des Energieverbrauchs, die Isotopendilutionsmethode, bedient sich der Isotope 2H und 18O in doppelt markiertem Wasser. Der Vorteil dieser Technik besteht darin, dass sie bei normal lebenden Menschen den Energieverbrauch über 10–14 Tage erfassen kann. Während das Isotop 2H den Organismus als Wasser verlässt, verteilt sich 18O auf Wasser und CO2. Die Bildung von CO2 und damit der Einbau von 18 O in CO2 wird dabei durch die Carboanhydrasereaktion katalysiert. Durch Bestimmung der Isotopverteilung im Wasseranteil der Körperflüssigkeiten kann der Energieverbrauch anhand der Differenzen der Verlustraten ermittelt werden (. Abb. 21.6). Nach Bestimmung der Größe des Körperwasserpools mit derselben Methode kann man bei Kenntnis der Zusammensetzung der Kost oder unter Annahme eines mittleren respiratorischen Quotienten von 0,85 aus der ermittelten CO2-Produktion den Sauerstoffverbrauch und daraus den Gesamtenergieumsatz berechnen.

. Abb. 21.6. Prinzip der Isotopendilutionsmethode. Doppelt markiertes Wasser 2H218O markiert den Wasserpool und wird mit der Atemluft als CO2 abgeatmet. Aus den unterschiedlichen Verlustraten

von 2H und 18O im Körperwasser lässt sich berechnen, wie viel CO2 aus der Nährstoffverbrennung gebildet bzw. wie viel O2 verbraucht wurde und damit auf den Energieverbrauch schließen

0,250×60×24×20 = 7200 kJ (1721 kcal)

638

21

Kapitel 21 · Ernährung

In Kürze Von der mit der Nahrung zugeführten Energie 5 werden etwa 40% in chemische Energie in Form von ATP umgewandelt 5 der Rest dient der Wärmeproduktion oder Thermogenese Die Thermogenese wird eingeteilt in 5 essentielle 5 regulatorische und 5 obligate Thermogenese Die einzelnen Nährstoffe sind als Energiequellen bis zu einem gewissen Grad austauschbar, bei gleichzeitigem Angebot von Glucose und Fettsäuren in der Nahrung hat die Glucose unter dem Einfluss von Insulin Vorrang bei der Oxidation.

21.2

Der Ernährungszustand

! Der Ernährungszustand eines Individuums lässt sich anhand des Körpergewichtes und der Mengenverteilung von Körperfett und Muskelmasse beschreiben.

Einkompartiment-Modell: Das Einkompartiment-Modell bedient sich des Körpergewichts, als einfachstem Parameter zur Erfassung des Ernährungszustands. Da das Körpergewicht auch von der Körpergröße bestimmt wird, verwendet man das relative Körpergewicht, d.h. die Körpermasse in Bezug zur Körpergröße, den Body-Mass-Index (BMI = Körpergewicht/Körpergröße2 [kg/m2]. Der Normalbereich liegt für Männer und Frauen zwischen 18,5 und 24,9 kg/m2. Von Übergewicht spricht man bei BMI-Werten von 25,0–29,9 kg/m2. Bei der Adipositas unterscheidet man anhand des BMI drei Grade: Grad I liegt vor bei BMIWerten von 30–34,9 kg/m2, Grad II bei Werten von 35– 39,9 kg/m2 und Grad III bei einem BMI-Wert über 40 kg/ m2. Basierend auf dieser Klassifizierung lässt sich in Deutschland Übergewicht bei etwa 40–50% und Adipositas bei etwa 16–20% der Erwachsenen diagnostizieren. Moderate Tag zu Tag Schwankungen in Körpergewicht und BMI sind normal. Änderungen des Körpergewichts von mehr als 500 g pro Tag sind neben Änderungen des Gewebebestands meist durch Alterationen des Wassergehalts bedingt. Zweikompartiment-Modell: Für die Definition von Fettsucht oder auch für die Beurteilung von Trainingseffekten im Leistungssport ist es notwendig, das Zweikompartiment-Modell anzuwenden, das den Körper in die Kompartimente Körperfett und fettfreie Masse (Magermasse) unterteilt. Das Körperfett kann nochmals in Struktur- und Depotfett unterteilt werden. Strukturfett bildet z.B. die Auskleidung der Augenhöhlen oder des Nierenlagers. Seine

Der Energiegehalt der Makronährstoffe lässt sich durch zwei Parameter ausdrücken: 5 den physikalischen Brennwert, ein Maß der außerhalb des Körpers bei vollständiger Verbrennung des Nährstoffs freiwerdenden Energie 5 den physiologischen Brennwert, ein Maß der innerhalb des Körpers bei der Verbrennung des Nährstoffs freiwerdenden Energie Der Energieumsatz des Menschen setzt sich zusammen aus: 5 Grundumsatz, durch den im Ruhezustand lebensnotwendige Funktionen aufrechterhalten werden 5 Erhaltungsbedarf, durch den Verdauung, Regeneration und alltägliche Bewegungsabläufe ermöglicht werden 5 Leistungsbedarf, der alle über den Ruheumsatz und Erhaltungsbedarf hinausgehenden Aktivitäten ermöglicht

Masse beträgt etwa 5 kg und ist weitgehend unabhängig vom Ernährungszustand. Das Depotfett liegt im Unterhautfettgewebe und im Bauchraum, seine Masse beträgt beim Mann >15 kg und bei der Frau >20 kg. Da etwa 70% des Körperfetts subkutan gespeichert ist, kann durch Bestimmung der Hautfaltendicke an charakteristischen Messpunkten (Biceps, Triceps, subscapular, suprailiacal, am Abdomen, am Oberschenkel) und mit Hilfe empirisch ermittelter Faktoren auf den Körperfettgehalt geschlossen werden. Aus diesem wird nach Bestimmung des Körpergewichts die fettfreie Körpermasse berechnet. Die fettfreie Masse hat den größten Energieumsatz und bestimmt den Energiebedarf des Menschen. Dreikompartiment-Modell: Dieses Modell unterscheidet die Kompartimente Fett und fettfreie Körpermasse und unterteilt diese nochmals in Zellmasse und Extrazellulärmasse. Heute dient die Bioelektrische Impedanzanalyse (BIA), eine nichtinvasive Methode, der Messung der drei Kompartimente Gesamtkörperfett, fettfreie Körpermasse und Gesamtkörpermasse. Die BIA basiert auf der unterschiedlichen Leitfähigkeit der Gewebe bei einer angelegten elektrischen Spannung. In fettfreiem Gewebe ist die Leitfähigkeit durch den hohen Anteil an Wasser und Elektrolyten im Gegensatz zum Fettgewebe höher, während Zellmembranen sich wie elektrische Kondensatoren verhalten und eine geringe Leitfähigkeit aufweisen. Die Leitfähigkeit ist umgekehrt proportional zum elektrischen Widerstand (Impedanz), der durch Anlegen von zwei Elektroden am Hand- und Fußgelenk gemessen wird und aus dem mittels empirischer Formeln die Fettmasse, die fettfreie Masse und das Gesamtwasser berechnet werden können.

639 21.3 · Veränderungen der Energiebilanz

In Kürze Die Verwendung von Kompartimentmodellen ermöglicht die Beurteilung des Ernährungszustands. 5 Beim Einkompartiment-Modell wird das Körpergewicht zugrunde gelegt. Der body mass index BMI ermöglicht eine sichere Beurteilung des Ernährungszustands

21.3

Veränderungen der Energiebilanz

21.3.1

Ausgeglichene Energiebilanz auf niedrigem Niveau (Kalorienrestriktion)

! Eine kalorisch restriktive Ernährung bei sonst ausreichender Zufuhr aller essentiellen Nährstoffe verlängert die Lebensspanne nahezu aller Spezies.

Eine Reduktion der normal zugeführten Energiemenge um 30% zeigt ausgeprägte Effekte auf die Verlangsamung von Alterungsprozessen. Vor allem bei Nagern zeigten sich unter kalorisch restriktiver Ernährung Besserungen der altersbedingten Fehlregulation des Blutglucosespiegels sowie positive Wirkungen auf Aktivitäten antioxidativer Enzymsysteme, Reparaturmechanismen der DNA, Immunfunktionen, Lernfähigkeit, sowie Proteinsynthese und Erhalt der Muskelmasse. Gleichzeitig zeigte sich eine verminderte Oxidation langlebiger Proteine, eine reduzierte Bildung freier Radikale in Mitochondrien, sowie eine Reduktion oxidativer Gewebeschädigungen. Bei ausreichender Zufuhr aller essentiellen Nährstoffe, zeigte sich ein deutlich verzögertes Auftreten typischer Krankheiten reiferen Alters, wie Autoimmunerkrankungen, Krebs, grauer Star, Diabetes, Hypertonie oder Nierenversagen. Auch bei Rhesusaffen war die langfristige Kalorienrestriktion mit signifikant erniedrigten Spiegeln oxidativ veränderter Proteine und einer Verbesserung der Insulinsensitivität assoziiert. Zwei 1989 und 1994 begonnene Studien an Rhesusaffen sollen prüfen, inwieweit auch die maximale Lebensspanne der Primaten durch kalorisch restriktive Kost erhöht werden kann. Mit ersten Ergebnissen dazu wird ca. 2020 gerechnet. ! Sirtuine vermitteln die Effekte einer Kalorienrestriktion auf Alterungsprozesse.

Als gemeinsames Bindeglied in der Regulation von Alterungsprozessen wurden in Organismen wie Saccharomyces cerevisiae und Drosophila die Sirtuine (silent information regulators) identifiziert. In der Hefe wird SIR2 und in der Nematode C. elegans SIR2.1 für die alterungsverzögernden Wirkungen einer Kalorienrestriktion verantwortlich gemacht. Das Säugetier-Ortholog SIRT1 reprimiert u.a. im Fettgewebe die durch PPAR-J vermittelte Transaktivierung von Genen, deren Produkte beispielsweise an der Fettsäu-

5 5

Beim Zweikompartiment-Modell wird zwischen fettfreier Masse und Körperfett unterschieden Das Dreikompartiment-Modell unterteilt die fettfreie Masse in Zellmasse und extrazelluläre Masse

rebiosynthese beteiligt sind (7 Kap. 21.5.3). Angesichts der Tatsache, dass die Fettgewebsmasse negativ mit der Lebensspanne und positiv mit dem Auftreten von Insulinresistenz und Arteriosklerose in verschiedenen Säugetierspezies korreliert, kann vermutet werden, dass den Sirtuinen auch beim Menschen entsprechende Wirkungen in der Verzögerung von Alterungsprozessen zugeschrieben werden können. Sirtuine sind NAD+-abhängige Histon-Deacetylasen, die dann aktiviert werden, wenn die Substratoxidation niedrig und damit der NAD+/NADH-Quotient hoch ist. Ihre Aktivierung führt u.a. zu verminderter Acetylierung von Histonen und zur Hemmung der Transkription von Genen wie z.B. dem Apoptose-induzierenden p53-Gen. SIRT1 hemmt in Herzmuskelzellen die p53-vermittelte Apoptose und seine Expression in Myozyten und Gehirn könnte mit der Regulation der Zellmasse, die besonders in diesen Organen durch Stress-induzierte Apoptose altersabhängig abnimmt, in Zusammenhang stehen.

21.3.2

Positive Energiebilanz

! Übergewicht und Adipositas sind die Folgen einer langfristig positiven Energiebilanz.

Bereits eine Nahrungsaufnahme, die über längere Zeit um 1–2% über dem Energieverbrauch liegt, führt mit der Zeit zu einer nennenswerten Gewichtszunahme. An der Entwicklung von Übergewicht und Adipositas sind genetische Faktoren maßgeblich beteiligt. Dies lässt sich anhand von Zwillingsexperimenten, Familienuntersuchungen und Adoptionsstudien gut belegen. Nur etwa 33% der Variabilität des BMI lässt sich nicht-genetischen Faktoren zuschreiben. Insbesondere für die intraabdominelle Ansammlung von Fettgewebe wird eine sehr starke genetische Prädisposition angenommen. Allerdings sind die beteiligten Gene noch nicht identifiziert. Auch wenn der Mensch offenbar eine multi-genetische Prädisposition für Adipositas besitzt, kann sich diese nur in einer Ernährungsumwelt mit einem Überangebot an Nahrungsenergie bei gleichzeitig niedriger körperlicher Aktivitätsrate auswirken. Nur in sehr seltenen Fällen ist die Adipositas als monogene Erkrankung zu diagnostizieren. So sind bisher nur wenige Menschen als homozygote Träger von Mutationen im Leptingen, im Leptinrezeptor-Gen (7 Kap. 16.1.3), oder im Melanocortin-4-Rezeptor-Gen identifiziert wor-

21

640

21

Kapitel 21 · Ernährung

. Tabelle 21.2. Begleiterkrankungen der Adipositas Stoffwechselstörungen

Erkrankungen

Dyslipoproteinämie

Diabetes Typ 2

Fibrinogen erhöht

Koronare Herzerkrankung

Insulinresistenz

Hypertonie

Hyperinsulinämie

Schlaganfall

Glucoseintoleranz

Angina pectoris

Hyperurikämie

Gallensteine Gicht Schlafapnoe Brustkrebs (postmenopausal)

das Gesundheitsrisiko infolge eines erhöhten BMI und wendet sich ins Gegenteil: Bei Menschen über 70 Jahren ist die restliche Lebenserwartung bei einem um 10% erhöhten BMI größer als bei normalem oder gar um 10% vermindertem BMI. Offensichtlich sind im Alter ausreichende Energie- bzw. Nährstoffreserven von Vorteil.

21.3.3

Negative Energiebilanz

! Fortschreitende Nahrungskarenz führt zu einer Reihe von Änderungen im Interorganstoffwechsel und den Metabolitflüssen des Organismus.

den. Störungen endokriner Funktionen können sekundär zur Entwicklung von Übergewicht und Adipositas beitragen, so z.B. eine Hypothyreose oder eine Behandlung mit Glucocorticoiden. Auch in der Schwangerschaft kommt es gelegentlich zu einer sehr starken Gewichtszunahme, die häufig zu einer bleibenden Gewichtserhöhung auch nach der Entbindung führt. In Folge von Übergewicht und vor allem von Adipositas treten gehäuft eine Reihe weiterer Erkrankungen auf (. Tabelle 21.2). Dies ist auch der Grund, warum Adipositas mit einer statistisch eindeutigen Verkürzung der Lebenserwartung einhergeht. Sehr häufig findet sich bei einer Adipositas, besonders bei androidem, abdominellem Fettverteilungsmuster, ein Metabolisches Syndrom (7 Kap. 26.4.2). Hierunter versteht man die Kombination von pathologischer Glucosetoleranz, peripherer Insulinresistenz, Dyslipoproteinämie und Hypertonie. Das Metabolische Syndrom geht außerdem mit der Entwicklung einer vorzeitigen Arteriosklerose einher. Erst mit zunehmendem Alter sinkt

Der Substratumsatz von etwa 7560 kJ (1800 kcal) eines gesunden, fastenden Menschen ist in . Abb. 21.7 dargestellt. Da es obligate Glucose-verbrauchende Zellen und Gewebe gibt, müssen hinreichende Glucosemengen bereitgestellt werden. Für das Nervensystem, das in 24 Stunden 144 g Glucose oxidiert sowie die Erythrozyten stellt die Leber die benötigten 180 g Glucose bereit, zum Teil durch Glycogenolyse, zum Teil durch Gluconeogenese (7 Kap. 11.3). Hierfür werden die glucogenen Aminosäuren aus dem Abbau von etwa 75 g Muskelprotein, 16 g des bei der Lipolyse im Fettgewebe entstandenen Glycerins sowie etwa 36 g Lactat (Pyruvat) verwendet, welches durch Glycolyse in den Erythrozyten gebildet wird. Die Energieversorgung aller anderen Gewebe des Organismus wird durch die freien Fettsäuren aus der Lipolyse des Fettgewebes bereitgestellt. Etwa ein Viertel der Fettsäuren werden in der Leber in Ketonkörper umgewandelt, die dann ebenfalls der Energieversorgung extrahepatischer Gewebe dienen. Die Glucoseoxidation der peripheren Gewebe ist während der Nahrungskarenz sehr niedrig, da Muskulatur und Fettgewebe

. Abb. 21.7. Herkunft, Umwandlung und Verbrauch von Nährstoffen beim fastenden gesunden Menschen, bezogen auf einen Energieumsatz von 7560 kJ (1800 kcal)/ 24 h. Muskel- und Fettgewebe

stellen die beiden Quellen der Substrate dar, die von Nerven, Erythrozyten, Leukozyten und dem Rest des Organismus verbraucht werden. (Nach Cahill G, 1970 New Engl. J of Med 282:6–8)

641 21.3 · Veränderungen der Energiebilanz

. Abb. 21.8. Nach fünf- bis sechswöchiger Nahrungskarenz sinkt der Energiebedarf auf etwa 6300 kJ (1500 kcal)/24 h, wobei vorwiegend die Gluconeogenese aus Aminosäuren eingeschränkt wird.

Das Nervensystem gewinnt die Fähigkeit zur Verwertung von Ketonkörpern. (Nach Cahill 1970)

die Glucose nur in Gegenwart von Insulin aufnehmen und oxidieren können, die Nahrungskarenz jedoch durch sehr niedrige Insulinkonzentrationen gekennzeichnet ist (7 Kap. 16.1.4, 26.1.3). Eine fortschreitende Nahrungskarenz (Hungern, Fasten) führt zu einer Reihe bemerkenswerter Änderungen im Interorganstoffwechsel und den Metabolitflüssen des Organismus (. Abb. 21.8). Von besonderer Bedeutung ist die Adaption des Gehirns an die Verwertung von Ketonkörpern, die jetzt etwa 70% des Energiebedarfs des Zentralnervensystems decken. Dies wird dadurch ermöglicht, dass die Enzyme für die Verwertung von β-Hydroxybutyrat und Acetacetat während längerer Nahrungskarenz induziert werden. Hierdurch vermindert sich die vom Organismus bereitzustellende Glucosemenge von 180 g/24 Std

bei kurzfristiger Nahrungskarenz auf ca. 80 g/24 Std. Da die Lipolyserate des Fettgewebes und damit die Glycerinproduktion etwa gleich bleibt, ebenso wie die Lactat(Pyruvat) Freisetzung für die Gluconeogenese, wird eine Reduktion der Proteolyse in der Skelettmuskulatur auf etwa 20 g/24 Std ermöglicht. Erst diese Anpassung erlaubt ein mehrwöchiges Hungern, dessen Dauer natürlich durch die Protein- und vor allem Fettreserven bestimmt wird. Einhergehend mit einer reduzierten Harnstoffbiosynthese der Leber verlagert sich die Gluconeogenese zunehmend von der Leber in die Niere begleitet von einer vermehrten renalen Elimination von Ammoniak. Die Bedeutung einzelner Aminosäuren für die renale Gluconeogenese und Stickstoffelimination wurde in 7 Kapitel 13 diskutiert.

In Kürze Eine kalorisch restriktive Kost bei sonst ausreichender Zufuhr essentieller Nährstoffe bewirkt eine Verzögerung von Alterungsprozessen. Eine anhaltend positive Energiebilanz führt zu Übergewicht und Adipositas. Deren Klassifizierung als Risikofaktor erfolgt auf der Grundlage des body mass-Indexes und bei der Adipositas zusätzlich anhand des Fettverteilungsmusters. Übergewicht und vor allem Adipositas gehen häufig mit einem Metabolischen Syndrom als Kombination von pathologischer Glucosetoleranz, peripherer Insulinresistenz, Dyslipoproteinämie, Hypertonie, Gicht und erhöhtem Arterioskleroserisiko einher.

Eine nur kurzfristig negative Energiebilanz (kurzfristige Nahrungskarenz) führt vor allem zur Mobilisierung von Proteinen des Muskels und Triacylglycerinen des Fettgewebes. Als Energiesubstrate werden verwertet: 5 in obligat Glucose verwertenden Geweben Glucose (aerob im Gehirn, anaerob in Erythrozyten u.a.) 5 in den übrigen Geweben Fettsäuren und Ketonkörper Die Leberzelle wirkt dabei als Energietransformator: Sie betreibt Gluconeogenese aus den Vorstufen Glycerin, Lactat und den Ketosäuren des Aminosäureabbaus. Die dafür not6

21

642

21

Kapitel 21 · Ernährung

wendige Energie gewinnt sie aus der Oxidation von Fettsäuren und Ketonkörpern. Eine länger andauernde Nahrungskarenz ist mit markanten Änderungen der Metabolitflüsse verbunden und führt zur:

21.4

Kontrollmechanismen der Nahrungsaufnahme, Energie- und Nährstoffzufuhr

! Vielfältige neuronale und humorale Faktoren regulieren die Nahrungsaufnahme.

Die Kontrolle der Nahrungsaufnahme über Hunger- und Sättigungswahrnehmungen wird über eine Vielzahl von Faktoren gesteuert, die nicht nur den Energiestatus des Organismus abbilden, sondern ebenso seine Versorgung mit einzelnen Nährstoffgruppen. Die Kalorienzufuhr durch die Nahrung wird dem Energieverbrauch angepasst und zum Erhalt der Energiehomöostase über mehrere sensorische Systeme erfasst und reguliert. Als zentrales Steuerungselement dient das Gehirn, wo alle Informationen über den Ernährungszustand integriert werden und eine koordinierte Antwort auf die eingehenden Signale erfolgt. Afferente Signale können neuronaler oder humoraler Art sein, während efferente Signale des Gehirns zu einer motorischen Steigerung der Aktivität zur Nahrungsaufnahme führen. ! Sensorische Wahrnehmungen wie Geruch, Geschmack und Aussehen der Nahrung haben unmittelbare Wirkung auf die Nahrungsaufnahme.

Afferente Signale mit unmittelbarer Wirkung auf die Nahrungsaufnahme sind z.B. die sensorischen Wahrnehmungen wie Geruch, Geschmack und Aussehen der Nahrung, sowie die präabsorptiven und postprandialen Signale, die durch Verdauung, Absorption und Metabolismus der Nährstoffe erzeugt werden (. Tab. 21.3). Dem Gastrointestinaltrakt kommt dabei die Rolle des multiplen Sensorsystems zu. So wird z.B. die Menge der aufgenommenen Nahrung über Dehnungsrezeptoren im Magen registriert und die Zusammensetzung der Nahrung durch ein Spektrum gastrointestinaler Peptide erfasst, die über Nahrungsbestandteile im Darmlumen spezifisch freigesetzt und ins Blut abgegeben werden. Die Sekretion von Cholecystokinin wird u.a. durch Produkte der Protein- und Fettverdauung ausgelöst und verursacht durch Aktivierung vagaler afferenter Nerven im Gehirn Signale, die zu einer Reduktion der Nahrungszufuhr führen. Ghrelin ist ein erst kürzlich entdecktes Peptidhormon, das beim Fasten und vor der Nahrungsauf-

5 Fähigkeit des Gehirns zur Ketonkörperverwertung 5 Verminderung der Glucoseoxidation und vermehrter Utilisation von Fettsäuren 5 Verminderung der Proteolyse und insgesamt reduzierter Stickstoffausscheidung 5 Reduktion der Harnstoffbiosynthese und vermehrter renaler Ammoniakausscheidung

nahme verstärkt vom Fundus des Magens sezerniert wird und die Nahrungsaufnahme zu initiieren scheint (. Abb. 21.9, 7 Kap. 27.7.1, 32.1.6). Neben den neuronalen und humoralen afferenten Signalen werden auch von den in die Blutbahn resorbierten Nährstoffen selbst Informationen ans Gehirn vermittelt, die Nahrungszufuhr und Appetit reduzieren. ! Auch das Fettgewebe ist beteiligt an der langfristigen Regulation der Nahrungsaufnahme.

Afferente Signale, die der Langzeitregulation, der Energiehomöostase und der Kalorienzufuhr dienen, gehen beispielsweise von den Energiespeichern des Organismus, also hauptsächlich vom Fettgewebe aus. Mit der Entdeckung des Peptidhormons Leptin (7 Kap. 16.1.3) gelang es einen maßgeblichen Faktor zu identifizieren, der das Gehirn über die Größe der vorhandenen Fettgewebsspeicher und damit Energiereservoirs informiert. Seine Bildung ist unmittelbar abhängig von der Fettsäuresynthese bzw. den Wirkungen des Insulins. Leptin reduziert nicht nur die Nahrungsaufnahme nach Bindung an Leptinrezeptoren im Gehirn, sondern erhöht über periphere Rezeptoren auch den Ener-

. Tabelle 21.3. Afferente Signale mit Beteiligung an der Kontrolle der Nahrungsaufnahme Sensorisch

Aussehen Geruch Geschmack

Gastrointestinal

Cholecystokinin Bombesin gastric-insulinotropic peptide (GIP) Enterostatin Ghrelin

Metabolisch

Glucose Aminosäuren Fettsäuren Ketonkörper Insulin Glucagon Leptin

643 21.4 · Kontrollmechanismen der Nahrungsaufnahme, Energie- und Nährstoffzufuhr

. Abb. 21.9. Das Gehirn als Sensor und Signalgeber für die Kontrolle der langfristigen Energiebilanz. Neben der Erfassung der Größe der Energiespeicher vor allem des Fettgewebes (u.a. durch Leptin) werden durch die Nahrungsaufnahme zahlreiche gastrointestinale Peptidhormone (Grehlin, Cholecystokinin (CCK), glucagon like peptide-1 (GLP-1), Gastroinhibitorisches Peptid (GIP), Peptid YY (PYY) freigesetzt, die zusammen mit Insulin dem Gehirn den Ernährungsstatus vermitteln. Nach Integration vor allem in hypothalamischen Zentren erfolgt die Steuerung der Nahrungsaufnahme und des Energieverbrauchs. Die Größe der Energiereservoirs (Fettgewebe) ist auch für die reproduktive Kompetenz des Organismus von Bedeutung

gieumsatz, trägt also bei Zunahme der Fettgewebsmasse zu deren Reduktion durch erhöhten Energieverbrauch bei. So war es nahe liegend zu vermuten, dass bei der Adipositas ursächlich eine Fehlregulation in der Bildung des Leptins oder auf Ebene seiner Interaktion mit Leptinrezeptoren vorliegt. Heute wird davon ausgegangen, dass die bei Adipositas fast proportional zur Fettmasse erhöhten zirkulierenden Leptinspiegel zu einer chronischen peripheren Desensibilisierung des Rezeptorwegs (ähnlich zur peripheren Insulinresistenz) führen sowie mit einer unzureichenden Aufnahme von Leptin ins Gehirn assoziiert sind.

. Tabelle 21.4. Neuromodulatoren der Nahrungsaufnahme Neuromodulatoren mit hemmender Wirkung auf die Nahrungsaufnahme Neurotransmitter

Peptidhormone

Serotonin

Neurotensin

Dopamin

Cholecystokinin

Noradrenalin

Somatostatin

Adrenalin

Enterostatin

GABA

Anorectin

! Die Steuerung der Nahrungsaufnahme erfolgt vom Hypothalamus aus.

Bombesin

Innerhalb des ventromedialen Bereichs stellt der paraventrikuläre Nukleus die Region dar, welche Sättigungssignale integriert, während im lateralen Hypothalamus die Region lokalisiert ist, die die Stimulation der Nahrungsaufnahme auslöst. Vor allem tierexperimentelle Studien haben eine Vielzahl von Neuromodulatoren identifiziert, die veränderte Aktivitäten in diesen Hirnregionen herbeiführen und somit die Nahrungsaufnahme beeinflussen (. Tabelle 21.4). Die vom Gehirn ausgehenden Signale auf die Nahrungsaufnahme werden durch das sympathische und parasympathische Nervensystem geleitet. Während das sympathische Nervensystem die Nahrungsaufnahme inhibierend beeinflusst, wird sie durch den Parasympathikus stimuliert. Appetitzügler wie die Amphetamine wirken beispielsweise durch Stimulation des Sympathikus. Die Komplexizität der

Calcitonin

Glucagon

Arginin-Vasopressin CRH Neuromodulatoren mit stimulierender Wirkung auf die Nahrungsaufnahme (nach Injektion in das Gehirn von gesättigten Tieren) Neurotransmitter

Peptidhormone

Serotonin

Grehlin

GH-RH

Opioide, E-Endorphin,

GABA

Galanin

Noradrenalin

Neuropeptid Y Peptid YY pancreatic polypeptide

21

644

21

Kapitel 21 · Ernährung

Kontrollmechanismen der Nahrungsaufnahme stellt einen besonders interessanten Forschungsbereich der modernen Neurowissenschaften dar. In Kürze Die Nahrungsaufnahme wird reguliert durch 5 Sensorische Wahrnehmungen wie Geruch und Geschmack der Nahrungsstoffe 5 dem Fettgewebshormon Leptin 5 aus dem Gastrointestinaltrakt stammenden Hormonen, v.a. Cholecystokinin und Ghrelin 5 sowie einer großen Zahl von Neuromodulatoren

21.5

Die Stoffwechselbedeutung einzelner Nährstoffe und ihre Beteiligung an der Homöostase

21.5.1

Aminosäuren und Proteine

! Die Aminosäuren der Nahrungsproteine dienen der Biosynthese von Körperproteinen und als Energiesubstrate für die Oxidation.

Primär dienen die Aminosäuren der Nahrungsproteine als Bauelemente für die Biosynthese der Körperproteine und in Form ihrer Kohlenstoffgerüste als Energiesubstrate für die Oxidation. Die glucogenen Aminosäuren tragen auch zur Aufrechterhaltung des Glucosespiegels bei. Darüber hinaus sind die Aminosäuren die dominanten Nahrungsquellen von Stickstoff und organischem Schwefel für eine Vielzahl spezifischer Synthesen im Intermediärstoffwechsel (Purine, Pyrimidine, Porphyrine, sulfatierte Proteine u.a.). Der tägliche Umsatz von Aminosäuren im Rahmen der Proteinsynthese und -degradation überwiegt mit etwa 37 mmol/kg Körpergewicht (4,4 g/kg Körpergewicht) pro Tag den der Lipide um 30% und den der Kohlenhydrate um 40%. Am Energiegewinn aus der Substratoxidation partizipieren die Aminosäuren jedoch – abhängig von der Stoffwechsellage – nur mit etwa 15 bis 20%. ! Bei ausgeglichener Stickstoff-Bilanz ersetzt das über die Nahrung zugeführte Protein den Stickstoff-Verlust des Körpers.

Die beständige Synthese der körpereigenen Proteine erfordert die Verfügbarkeit aller Aminosäuren, vor allem aber der essentiellen Aminosäuren (7 Kap. 13.4). Der zelluläre Pool an Aminosäuren für die Proteinbiosynthese wird dabei einerseits aus dem endogenen Proteinabbau, andererseits durch die alimentär zugeführten Proteine gespeist. Die Bilanz zwischen Proteinabbau- und Proteinbiosyntheserate wird durch eine Vielzahl anabol und katabol wirkender Hormone determiniert und kann somit an unterschiedliche Stoffwechsel- und Versorgungsstadien angepasst werden.

Für eine ausgeglichene Proteinbilanz ist sowohl der Ersatz derjenigen Proteinmenge notwendig, die abgebaut und nach Oxidation der Aminosäuren meist als Harnstoff renal eliminiert wird, als auch eine hinreichende Energiezufuhr um die Verwendung von Aminosäuren für die Energiegewinnung zu unterdrücken. Der tägliche Proteinumsatz eines stoffwechselgesunden 70 kg schweren Erwachsenen beträgt etwa 300 g pro Tag und überschreitet damit mehr als 10-fach den minimalen Proteinbedarf von 0,376 g/kg Körpergewicht und Tag, d.h., von etwa 26 g. Die Proteinsyntheserate ist beim Säugling am höchsten und sinkt mit zunehmendem Alter; entsprechend sinkt auch der Bedarf an Nahrungsprotein und an essentiellen Aminosäuren. Bei einer mittleren täglichen Proteinzufuhr mit der Nahrung von etwa 100 g in Deutschland wird heute der Proteinbedarf mehrfach überschritten. Die Nahrungsproteine unterscheiden sich im Gehalt von nicht-essentiellen und essentiellen Aminosäuren zum Teil beträchtlich und können damit nicht in gleicher und idealer Weise für die Proteinbiosynthese beim Menschen genutzt werden. Die Qualität eines Nahrungsproteins für eine optimale endogene Proteinsyntheserate wird als biologische Wertigkeit bezeichnet. Sie beschreibt in welchem Maße das resorbierte Nahrungsprotein im Körper retiniert werden kann. Meist ist die biologische Wertigkeit pflanzlicher Proteinquellen geringer als die tierischer Produkte. Als Bezugsgröße wird aus historischen Gründen das Volleiprotein mit einer biologischen Wertigkeit von 100 verwendet. Basierend auf Bilanzstudien am Gesunden kann die biologische Wertigkeit verschiedener Proteinquellen ermittelt und verglichen werden (. Tabelle 21.5). Die Kombination unterschiedlichster Proteinquellen – was bei moderner Ernährungsweise die Regel ist – sichert eine hohe biologische Wertigkeit, sodass die Proteinversorgung in industrialisierten Ländern heute weder quantitativ noch qualitativ ein Problem darstellt. . Tabelle 21.5. Die biologische Wertigkeit (B.W.) verschiedener Proteinkombinationen Prozentuales Mengenverhältnis (N-Prozente)

B.W.

36 % Vollei

plus 64 % Kartoffel

136

70 % Lactalbumin

plus 30 % Kartoffel

134

75 % Milch

plus 25 % Weizenmehl

125

60 % Vollei

plus 40 % Soja

124

68 % Vollei

plus 32 % Weizen

123

76 % Vollei

plus 24 % Milch

119

51 % Milch

plus 49 % Kartoffel

114

88 % Vollei

plus 12 % Mais

114

78 % Rindfleisch

plus 22 % Kartoffel

114

36 % Vollei

plus 65 % Bohnen

109

52 % Bohnen

plus 48 % Mais

99

84 % Rindfleisch

plus 16 % Gelatine

98

645 21.5 · Die Stoffwechselbedeutung einzelner Nährstoffe und ihre Beteiligung an der Homöostase

! Eine Kachexie ist stets mit massivem Proteinabbau verbunden.

Proteinmangelzustände treten bei schweren Maldigestions- und Malabsorptionssyndromen sowie bei Kachexie in Folge von schweren Verletzungen, Tumorerkrankungen oder chronischen Infektionen und AIDS auf. Die Kachexie geht einher mit einem vermehrten Proteinabbau, vor allem in der Muskulatur. Dies ist mit einer Aktivierung des Calpainwegs und der ubiquitinabhängigen proteasomalen Proteindegradation verbunden (7 Kap. 9.3.5). Die calciumabhängige Calpain-regulierte Ablösung der Myofilamente vom Sarkomer ist eine frühe und vermutlich auch die geschwindigkeitsbestimmende katabole Antwort der Muskulatur. Die Myofilamentproteine werden in der Folge ubiquitiniert und im 26S Proteasom abgebaut (7 Kap. 6.2.7, 30.4). In Entwicklungsländern finden sich noch immer, meist bei Kindern, die klassischen Proteinmangelzustände mit den Krankheitsbildern des Marasmus als einem kombinierten Protein- und Energiemangel und Kwashiokor als selektivem Proteinmangel bei sonst ausreichender Energiezufuhr. Die in Folge des Proteinmangels auftretende Hypoalbuminämie bedingt beim Kwashiokor die ausgeprägten Ödeme. Bei Marasmus kommt es neben Hypoalbuminämie und Ödemen auch zu Fett-Infiltrationen der Leber, zu Wachstumsretardierungen, Anämien, erhöhter Infektionsanfälligkeit, Anorexie und Apathie. ! Das Gleichgewicht zwischen Proteinsynthese und degradation unterliegt der hormonellen Regulation.

Unter den Organen zeigt die Leber die höchste fraktionelle Proteinsyntheserate gefolgt von Herz- und Skelettmuskulatur. Die Halbwertszeit der Proteine schwankt zwischen Minuten (Signalproteine), Stunden (Plasmaproteine, Enzyme) und Monaten (Strukturproteine wie Kollagen). Der beständige Abbau von Proteinen erfolgt vorwiegend in Proteasomen und Lysosomen (7 Kap. 6.2.7) und speist den zellulären Pool an essentiellen und nicht-essentiellen Aminosäuren. Dieser wird durch die aus dem Blut bzw. der Nahrung stammenden Aminosäuren ergänzt. Da ein Mangel an essentiellen Aminosäuren sofort die Proteinbiosynthese zum Erliegen bringen würde, wird die Neusynthese von Proteinen zunächst aus dem zellulären Aminosäurepool gespeist und dieser dann durch fortschreitende Proteolyse, vor allem der Muskelproteine ergänzt, um essentielle Funktionsproteine synthetisieren zu können. Ein länger bestehender alimentärer Mangel an essentiellen Aminosäuren führt somit in kurzer Zeit zu einer fortschreitenden negativen Proteinbilanz durch verminderte Proteinsynthese bei gleichzeitig erhöhtem Abbau. Das Gleichgewicht zwischen Proteinsynthese und -degradation unterliegt der hormonellen Regulation durch Peptidhormone, Steroide und Schilddrüsenhormone. Die stärksten Effekte, z.B. auf die Proteinbilanz des Muskels,

üben Insulin und Wachstumshormon aus, letzteres vorwiegend über IGF-1 (7 Kap. 27.7.2). Auch die Spiegel der zirkulierenden IGF-Bindeproteine unterliegen einer Kontrolle durch den Ernährungsstatus und regulieren damit sekundär die verfügbare Menge an IGF-1 für die Interaktion mit den Wachstumsfaktor-Rezeptoren. Während Insulin zunächst eine anti-proteolytische Wirkung zeigt, ist eine starke Zunahme der Proteinsyntheserate und damit anabole Insulinwirkung dann zu beobachten, wenn das Angebot von Aminosäuren im Extrazellulärraum steigt. Dies mag vor allem mit den ausgeprägten akuten Wirkungen von Insulin auf die Transportsysteme für Aminosäuren in der Plasmamembranen zusammenhängen, die nur dann einen erhöhten Influx von Aminosäuren in die Zelle herbeiführen können, wenn das Angebot aus dem Blut entsprechend groß ist. Da der zelluläre Aminosäurepool aus dem endogenen Proteinabbau und der Aufnahme aus dem Extrazellulärraum gespeist wird, müssen die Wirkungen der extrazellulären Signalgeber (Hormonspiegel) mit der Größe des Pools an verfügbaren Aminosäuren in der Zelle synchronisiert werden. Daher verfügt die Zelle offenbar über ein eigenes Rezeptorsystem für Aminosäuren, das mit den intrazellulären Insulin/IGF1-Signalketten und der AMP-aktivierten Proteinkinase (AMPK) verknüpft ist (. Abb. 21.10). Zentrales zelluläres Sensor-Element des intrazellulären Aminosäurestatus ist das Protein mTOR (mammalian target of rapamycin), eine Kinase, die das ursprünglich als bakterielles Makrolid identifizierte Rapamycin bindet und dadurch inhibiert wird (7 Kap. 16.1.3). Ein Ausschalten des mTOR-Gens bei Mäusen ist lethal und zeigt damit seine überragende Bedeutung als zellulärer Sensor des Aminosäurestatus. Der mTOR-Weg wird bei einem entsprechend hohen Angebot an Aminosäuren in der Zelle – vor allem durch Leucin – aktiviert und vernetzt letztlich diese Information mit den intrazellulären Signalkaskaden der Tyrosinrezeptorkinasen der Zellmembran. Die integrierte Zellantwort besteht in einer erhöhten Ribosom-Genese und erhöhter mRNA-Translationsrate von Zielproteinen. Durch mTOR werden vor allem die Signalwege der ribosomalen sog. p70 S6 Kinase aktiviert und eine Hemmung des eukaryoten Translations-Repressor-Bindeproteins (4E-BP1) herbeigeführt, was die Bildung von Initiationskomplexen fördert, die dann die 40S-Ribosomenuntereinheiten zu den 5c-Enden der mRNA rekrutieren und die vermehrte Proteinsynthese ermöglichen (. Abb. 21.10). Die Proteinabbauprozesse werden am stärksten durch die Kombination der Stresshormone Glucagon, Adrenalin und Glucocorticoide bei gleichzeitig abfallendem Insulinspiegel gefördert, wobei jedes Hormon alleine meist nur sehr schwache Wirkungen entfaltet. Sowohl im Falle einer sistierenden Hypo- wie auch einer Hyperthyreose wird eine negative Proteinbilanz beobachtet.

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Kapitel 21 · Ernährung

. Abb. 21.10. Der mTOR-Signalweg. Dargestellt ist ein Modell für die über den mTOR-Signalweg vermittelte Erfassung des zellulären Aminosäurestatus und seine Einbettung in die Signalketten der Tyrosinrezeptorkinasen und der AMP-Kinase. (Einzelheiten 7 Text)

21.5.2

Kohlenhydrate

! Kohlenhydrate sind die primären Energiesubstrate.

Kohlenhydrate sind die primären Energiesubstrate, die mit über 50% der täglichen Substratoxidation in die Energiebilanz eingehen. Im Gegensatz zum Fett und Protein sind die Körperpools der Kohlenhydrate sehr begrenzt und stehen daher auch nur zur Überbrückung kurzer Zeiten der Nahrungskarenz für die Aufrechterhaltung des Glucosespiegels des Bluts zur Verfügung. Danach erfolgt die Bereitstellung der Glucose durch Förderung der Gluconeogenese aus den Ketosäuren des Aminosäureabbaus und aus dem Glycerin des Triacylglycerinabbaus. Die Zufuhr der Kohlenhydrate über die Nahrung erfolgt in erster Linie in Form von Stärke pflanzlicher Lebensmittel und in geringerem Umfang als Glycogen des Muskelfleischs. Die Aufnahme von Disacchariden (Saccharose und Maltose) sowie der Monosaccharide (Glucose, Fructose) ist vor allem durch die breite Verwendung gesüßter Getränke gestiegen. Als einzige verfügbare Kohlenhydratquelle der Milch besitzt die Lactose in der Säuglingsernährung naturgegeben eine besondere Bedeutung. Die in der Humanmilch enthaltenen hochmolekularen Oligosaccharide, deren Gehalt bis zu 8 g/Liter betragen kann, gelten als unverdaulich und dienen vor allem als Substrate für die Fermentation durch Bakterien im Dickdarm des Säuglings. In diesem Sinne können sie als lösliche Ballaststoffe der Muttermilch angesehen werden. Ein expliziter Bedarf an Kohlenhydraten kann nicht definiert werden. Eine mittlere Zufuhr von ca. 120 g pro Tag

wird aber als ausreichend erachtet, um einer ketoazidotischen Stoffwechsellage vorzubeugen. Auch um die Fettzufuhr zu reduzieren empfehlen Fachgesellschaften eine Kohlenhydratzufuhr, die etwa 50% der Nahrungsenergie liefert. Diese sollte in Form komplexer Kohlenhydrate aus Vollkornprodukten, Kartoffeln, Gemüse und Obst erfolgen. Der Vorteil ist hierbei, dass diese Quellen gleichzeitig zu einer erhöhten Zufuhr an Ballaststoffen, Vitaminen sowie Spurenelementen führen. ! Die Blutzuckerwirksamkeit der Nahrungskohlenhydrate ist unterschiedlich.

Die Blutzuckerwirksamkeit der Nahrungskohlenhydrate, d.h., die Dynamik der Anflutung von Glucose aus dem intestinalen Abbau der Kohlenhydrate in das Blut und die Kinetik der Insulinfreisetzung, sind je nach Quelle und Matrix, d.h. dem physikalischen Zustand der Stärke (roh, gekocht) sowie dem Vorhandensein anderer Begleitstoffe, stark unterschiedlich. Dies wird im sog. glykämischen Index erfasst, der die AUC (area under the curve) des Blutglucoseverlaufs als Funktion der Zeit bei Gabe gleicher Mengen an Glucose aus verschiedenen Nahrungsquellen beschreibt. So führt die gleiche Menge an Glucose als Monosaccharid oder Stärke verabreicht zu recht stark unterschiedlichen Blutzuckerverläufen, da die Stärke – abhängig von ihrem Quellzustand – unterschiedlich schnell gespalten wird und damit die Resorption der Glucose entsprechend langsamer erfolgt. Auch der Fettgehalt der Nahrung bewirkt über die Verzögerung der Magenentleerung einen flacheren Anstieg des Blutzuckerspiegels bei gleichzeitiger Gabe mit Kohlenhydraten. Inwieweit auch die gastroin-

647 21.5 · Die Stoffwechselbedeutung einzelner Nährstoffe und ihre Beteiligung an der Homöostase

testinalen Peptidhormone GIP (gastric insulinotropic polypeptide) bzw. GLP-1 (glucagon like peptide 1), die nur nach oraler Gabe von Kohlenhydraten aus enteroendokrinen Zellen ins Blut freigesetzt werden und die Insulinsekretion fördern, für die unterschiedlichen glykämischen Indices unterschiedlicher Kohlenhydratquellen verantwortlich sind, bleibt zu klären. Es sei hier aber darauf hingewiesen, dass nur für wenige definierte Lebensmittel verlässliche Werte über den glykämischen Index vorliegen. ! Nahrungsfett hemmt die Lipacidogenese aus Kohlenhydraten.

In der Resorptionsphase wird die Glucose unter der Wirkung von Insulin durch vermehrte Insertion des Glucosetransporters GLUT-4 in die Plasmamembran der Muskelund Fettgewebszellen schnell aus dem Blut extrahiert. In der Leber dient die Glucose der Auffüllung der Glycogenspeicher, der Aufrechterhaltung des Blutzuckerspiegels und, wie in anderen Körperzellen auch, als primäres Substrat der Oxidation. Die Lipacidogenese, d.h., die de novo Biosynthese von Fettsäuren bei einem hohen Angebot an Acteyl-CoA aus dem Glucoseabbau scheint beim Menschen in Leber und Fettgewebe nur in sehr begrenztem Umfang stattzufinden. Selbst bei Kohlenhydratzufuhrrarten von 500 g/Tag über längere Zeiträume bleibt die Neubildung von Fett bei weniger als 10 g/Tag. Eine Fettzufuhr von nur 4% der Nahrungsenergie bewirkt bereits eine Hemmung der de-novo Fettsäurebildung durch Hemmung der AcetylCoA-Carboxylase, des Schlüsselenzyms der Fettsäurebiosynthese (7 Kap. 12.2.3). Die endogene Fettsäuresyntheserate liegt daher bei einer normalen Kost mit Fettzufuhren von 100 g pro Tag bei weniger als 1 bis 2 g/Tag. Bei einer hyperkalorischen Ernährung werden dem entsprechend Fettsäuren bevorzugt in die körpereigenen Depots des Fettgewebes eingelagert und die Kohlenhydrate oxidiert. ! Der Glucoseumsatz unterliegt einer komplexen hormonellen und neuronalen Kontrolle.

Der gesamte Kohlenhydratstoffwechsel, vor allem aber der Glucoseumsatz, unterliegt bekanntlich einer komplexen Kontrolle. Dies betrifft gleichermaßen die schnellen Stoffwechselantworten unter Insulin-, Glucagon- und Katecholaminwirkungen als auch die langsameren Effekte durch Wirkungen der Steroide und Schilddrüsenhormone. Bisher gelten die extrazellulären Signalgeber als primäre Steuerungsgrößen der adaptiven Veränderungen des Glucosestoffwechsels, die am Ende in akute Veränderungen der Aktivitäten von Zielenzymen und in veränderte Transkriptionsraten der für sie codierenden Gene münden. Dabei hat sich die zelluläre AMP-aktivierte Proteinkinase (AMPK) als ein zentrales intrazelluläres Zielprotein für die koordinierte Stoffwechselantwort herausgestellt (7 Kap. 16.1.4). Sie kann den zellulären Energiestatus anhand des AMP/ATP-Quotienten direkt in veränderte Aktivitätszustände übersetzen und steht somit als zelluläres Signalprotein an der Schnitt-

stelle zwischen den Signalketten der Hormone und dem Energiestatus. Die AMPK kann durch Phosphorylierung entsprechender Schlüsselenzyme und durch Beeinflussung ihrer Transkription die Energie verbrauchenden Biosynthesewege ab- und Energie liefernden Abbauprozesse anschalten (7 Kap. 16.1.4). Zahlreiche neuere Studien lassen vermuten, dass auch Metabolite des Glucosestoffwechsels, vor allem Glucose-6phosphat, direkt an der Transkriptionskontrolle einiger Gene des Kohlenhydrat- und Fettstoffwechsels teilhaben. So lässt sich die Induktion der L-Pyruvatkinase (L-PK), der Acetyl-CoA-Carboxylase und Fettsäuresynthase der Leber auch in Abwesenheit von Insulin zeigen, wenn Glucose-6phosphat vermehrt durch die Glucokinase bereitgestellt wird. Die Induktion der Glucokinase und der Enzyme der Lipacidogenese unterliegen ihrerseits jedoch der Regulation durch SREBP-1c (sterol-regulatory element binding protein; isoform 1c) und der Insulinwirkung (7 Kap. 11.6.1). Promotorstudien haben in den Genen der L-PK sowie der Acetyl-CoA-Carboxylase und Fettsäuresynthase auch ChRE (carbohydrate response element) nachgewiesen, das reziprok durch Glucose und cAMP reguliert wird. Dazu dient ein ChREBP (carbohydrate response element binding protein), das an ChRE im Kern bindet. ChREBP wird bei niedrigem zellulärem Glucosespiegel durch die AMP-aktivierte Proteinkinase bzw. durch die cAMP-abhängige Proteinkinase A phosphoryliert, was seine Translokation in den Zellkern blockiert. Wenn der zelluläre Spiegel an Glucose steigt aktiviert ein Glucosemetabolit die Proteinphosphatase 2A, was eine Dephosphorylierung und Aktivierung von ChREBP auslöst. Auch Xylulose-5-phosphat aus dem Pentosephosphatweg scheint über diesen Mechanismus an der Transkriptionskontrolle von Genen der Glycolyse und Lipacidogenese zu partizipieren (7 Kap. 11.1.2). Weiterhin wirkt auch der zelluläre Zinkstatus auf die Expression der Gene von Glycolyse und Gluconeogenese sowie des Fettauf- und Abbaus durch die Zinkfingerproteine, die als Transkriptionsfaktoren fungieren. . Abb. 21.11 zeigt vereinfacht die Integration der Signalketten, die den Hormonspiegel (vor allem von Insulin) mit den zellulären Metabolitkonzentrationen (vor allem des Glucose-6-phosphats) in eine koordinierte Genexpressionskontrolle und Stoffwechselanpassung übersetzen.

21.5.3

Lipide

! Die Fettfraktion der Nahrung ist komplex zusammengesetzt.

Der größte Teil der Nahrungslipide wird dem Körper in Form von Triacylglycerinen zugeführt. Darüber hinaus sind Phospholipide, Sphingolipide, Cholesterin sowie die pflanzlichen Sterole und Carotinoide und die fettlöslichen Vitamine Bestandteile der Fettfraktion der Nahrung. Die

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Kapitel 21 · Ernährung

. Abb. 21.11. Regulation von Enzymen der Glycolyse und der Fettsäuresynthese durch regulierte Transkriptionsfaktoren. Dargestellt ist die Regulation der Transkriptionsfaktoren ChREBP (carbohydrate responsive element binding) und SREBP1c (sterol regulatory element binding protein-1c) durch Insulin und Glycolysezwischenprodukte. (Einzelheiten 7 Text)

durchschnittliche tägliche Fettaufnahme beträgt heute etwa 100–130 g. Hiermit werden etwa 40–45 g gesättigte, 30–40 g einfach ungesättigte und 20–25 g mehrfach ungesättigte Fettsäuren aufgenommen. Von Befunden epidemiologischer Studien, die den Zusammenhang zwischen quantitativer und qualitativer Fettaufnahme und Erkrankungshäufigkeiten, vor allem des kardiovaskulären Systems, untersuchten sind die Empfehlungen von Fachgesellschaften zur Fettaufnahme abgeleitet. Danach sollte Fett nicht wesentlich mehr als 30% der täglichen Energieaufnahme (derzeit etwa 40%) liefern und dabei sollte die Zufuhr von ungesättigten Fettsäuren bei etwa 20%, die der gesättigten Fettsäuren bei etwa 10% der Nahrungsenergie liegen. Von den mehrfach ungesättigten Fettsäuren zeichnen sich die ω-3-Fettsäuren durch eine besondere Gefäß-protektive Wirkung aus. Daher ist ein Verhältnis der ω-6- zu ω-3-Fettsäuren von 5:1 anzustreben. Nach der intestinalen Resorption werden die Lipidkomponenten vor allem über die Chylomikronen in Lymphe und Blut verteilt und den Zellen zugeführt. Die Triacylglycerine werden nach Hydrolyse in die Adipozyten aufgenommen und nach Reveresterung gespeichert. Ein Kilogramm Fettgewebe hält eine Energiereserve von etwa 29 000 kJ (7000 kcal) vor und kann bei Nahrungskarenz und einem mittleren täglichen Energieumsatz von 2500 kcal den Energiebedarf etwa 3 Tage lang decken. Die Mobilisierung des Depotfetts unterliegt vielfältiger hormoneller und neuronaler Kontrolle und freigesetzte Fettsäuren werden als bevorzugte Energiesubstrate im katabolen Stoffwechsel von den meisten Geweben utilisiert. In der Leber dient das

aus der β-Oxidation der Fettsäuren hervorgegangene Acetyl-CoA bei ausgelasteter Oxidationsrate der Bildung der Ketonkörper (7 Kap. 12.2.2). ! Die unterschiedlichen Fettsäureklassen besitzen unterschiedliche nutritive Bedeutung.

Die unterschiedlichen über die Nahrung zugeführten Fettsäuren nehmen im Stoffwechsel verschiedene Funktionen wahr: 4 Langkettige gesättigte Fettsäuren sind vor allem Energieträger als Substrate der β-Oxidation 4 Ungesättigte Fettsäuren besitzen als Bestandteile der Phospholipide der Plasma- und Organellmembranen strukturgebende Bedeutung und beeinflussen damit die Fluidität und Funktionalität der Membranen 4 Die essentiellen Fettsäuren dienen vor allem als Substrate für die Synthese der unterschiedlichen Eikosanoidklassen und beeinflussen damit inflammatorische Prozesse 4 Triacylglycerine mit mittelkettigen Fettsäuren (Kettenlängen von 8 bis 12 C-Atomen) werden im Darm weitgehend unabhängig von der Anwesenheit von Gallensäuren schnell und überwiegend ohne Hydrolyse resorbiert und gelangen vorwiegend direkt über die Portalvene zur Leber. Hier werden sie durch Lipasen gespalten und die freigesetzten Fettsäuren unter Umgehung des Carnitin-Acyl-Carrier-Systems der mitochondrialen Oxidation zugeführt. Aufgrund dieser Eigenschaften finden sie im Rahmen der klinischen Ernährung in parenteralen Lösungen und oral bei

649 21.5 · Die Stoffwechselbedeutung einzelner Nährstoffe und ihre Beteiligung an der Homöostase

. Abb. 21.12. Transkriptionelle Regulation von ausgewählten Zielgenen durch PPARs im Zusammenspiel mit RXR. PPAR = Peroxisomen-Proliferation-Aktivierte Rezeptoren; RXR= = Retinoid-X-Rezeptor (Einzelheiten 7 Text)

Fettresorptionsstörungen als effiziente Energiequellen Einsatz. 4 Bei den sog. Transfettsäuren stehen die Wasserstoffatome von Doppelbindungen nicht wie bei natürlichen Fettsäuren in cis-Position, sondern in trans-Position (7 Kap. 2.2.2). Sie entstehen in größerem Umfang vor allem bei der Raffination von Speisefetten. Aufgrund epidemiologischer Studien und anhand ihrer Wirkungen auf den Anstieg des Plasma-LDL-Cholesterins bzw. Abfall des HDL-Cholesterins werden Transfettsäuren als kardiovaskuläre Risikofaktoren eingestuft. Fachgesellschaften empfehlen daher, dass die Nahrung nicht mehr als 1% Transfettsäuren enthalten sollte. Eine Besonderheit bildet die cis-9, trans-11 konjugierte Linolsäure (CLA), die etwa 90% der Linolsäurefraktion in Milch und anderen Produkten von Wiederkäuern ausmacht. Auch wenn ihr eine Reihe gesundheitsfördernder Eigenschaften zugesprochen werden, scheint eine abschließende Beurteilung ihrer gesundheitlichen Bedeutung gegenwärtig nicht möglich. ! Fettsäuren aktivieren Transkriptionsfaktoren.

In Abhängigkeit von der Nahrungsaufnahme und den davon abhängigen Hormonspiegeln, werden Fettsäuren im Interorganstoffwechsel zwischen Fettgewebe, Leber und peripheren Geweben der Speicherung oder der Oxidation zugeführt. Fettsäuren selbst regulieren aber ebenfalls den Stoffwechsel indem sie die Genexpression von Funktionsproteinen des Lipid- und Energiestoffwechsels beeinflussen. Dabei stehen die Transkriptionsfaktoren SREBP-1c (sterol responsive element binding protein 1c) (7 Kap. 21.5.2, 11.6.1) sowie die verschiedenen Isoformen des Peroxisomen-Proliferator-aktivierten-Rezeptors (PPAR) im Mittelpunkt. Die Aktivierung von SREBP-1c induziert ein Spektrum von lipogenen Enzymen in der Leber. Mehrfach ungesättigte Fettsäuren hemmen im Gegensatz dazu deren Expression und beeinflussen die Prozessierung von SREBP-1c.

Die Wirkungen freier Fettsäuren auf die Genexpression werden vorwiegend über PPARs vermittelt. PPARs sind Transkriptionsfaktoren, die in hetereodimeren Komplexen mit den Retinoatrezeptoren der RXR-Klasse vor allem die Genexpression von Proteinen für die zelluläre Fettsäureaufnahme, die mitochondriale und peroxisomale Fettsäureoxidation und die de novo Fettsäuresynthese (Lipacidogenese) beeinflussen (. Abb. 21.12). In der Leber führt die Aktivierung des dort vorkommenden PPAR-α durch mehrfach ungesättigte Fettsäuren mit Ausnahme von Linolsäure zur vermehrten Bildung von Enzymen für die Verwertung der Fettsäuren und Ketonkörperbildung sowie einer verminderten Synthese der Proteine für die Lipacidogenese (. Abb. 21.13). Auch Prostaglandine (u.a. PGE2) wirken als Liganden von PPAR-α. Im Fettgewebe findet sich vor allem PPAR-γ, der nach Aktivierung eine erhöhte Insulinwirksamkeit herbeiführt, die die Fettsäureaufnahme und deren Reveresterung begünstigt und die Fettsäureabgabe unterdrückt (. Abb. 21.13). Im Muskelgewebe findet sich PPARG, der nach Ligandenbindung die vermehrte Synthese von Proteinen für die Oxidation der Fettsäuren und deren Veresterung bedingt (. Abb. 21.13). Aufgrund ihrer Wirkungen sind die PPARs pharmakologische Zielproteine u.a. für die Therapie des Typ-II Diabetes und der Ateriosklerose mit spezifischen Agonisten wie den Fibraten für PPAR-α oder den Thiazolidindionen für PPAR-γ.

21.5.4

Alkohol

! Alkohol ist eine bedeutende Energiequelle.

Zwar wird Ethanol (Ethylalkohol) vorwiegend über Genussmittel zugeführt und ist im klassischen Sinne kein Nährstoff, doch wird er häufig in Mengen aufgenommen, die seine Berücksichtigung in der Energiebilanz des Körpers notwendig machen. So decken männliche Erwachsene in Deutschland ihren Energiebedarf im Durchschnitt zu 5%

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Kapitel 21 · Ernährung

21

. Abb. 21.13. Gewebespezifische Wirkungen der verschiedenen PPAR-Isoformen auf den Kohlenhydrat- und Fettstoffwechsel. (Einzelheiten 7 Text)

mit alkoholischen Getränken. Damit trägt auch die Ethanolaufnahme zur zunehmenden Überernährung der Bevölkerung bei. Der Alkoholgehalt wird in Volumenprozent angegeben. Die Alkoholmenge in g/100 ml lässt sich mit dem Korrekturfaktor von 0,79 (Dichte des Alkohols) berechnen (. Tabelle 21.6). Der Energiegehalt von 1 g Alkohol beträgt 30 kJ (7,1 kcal). In Getränken muss im Hinblick auf den Energiegehalt auch der Kohlenhydratgehalt, z.B. in Likören, Weinen und Bieren, berücksichtigt werden. Die Resorption von Alkohol beginnt bereits im Mund (Mundschleimhaut), erfolgt aber großteils im oberen Magen-Darm-Trakt. Es sind erhebliche interindividuelle Schwankungen zu beobachten. Eine vorherige Nahrungsaufnahme kann die Alkoholresorption verlangsamen, während Alkohol in warmen Getränken (Glühwein, Punsch, Grog), in Kombination mit Kohlensäure (Sekt) und im Nüchternzustand schneller resorbiert wird. Da Ethanol beständig auch von einigen Bakterienspezies der Darmflora produziert wird, die ihre Energie aus der Vergärung von Zucker zu Ethanol gewinnen, findet sich in der Portalvene stets eine geringe Menge Alkohol.

! Isoformen der Alkoholdehydrogenase bestimmen die Geschwindigkeit des Ethanolabbaus.

Das Vorkommen der unterschiedlichen Isoformen der Alkoholdehydrogenase und deren genetische Heterogenität in verschiedenen ethnischen Gruppen und Individuen bedingt eine recht variable Geschwindigkeit der Elimination des Ethanols und seiner Überführung in Acetaldehyd. Auch das mikrosomale Ethanol oxidierende NADPH-abhängige System und die Peroxidase partizipieren am Ethanolabbau. Nach Reduktion des Acetaldehyds zu Acetat kann dieses in Acetyl-CoA überführt und in den Stoffwechsel eingeschleust werden. In der Leber führt Ethanol wahrscheinlich wegen der Produktion großer Mengen an NADH/H+ bei seiner Metabolisierung zu einer Hemmung der β-Oxidation der Fettsäuren. Gleichzeitig wird die Triacylglycerinbiosynthese stimuliert. Ein Teil der Triacylglycerine wird als VLDL in die Zirkulation abgegeben, ein Teil in der Leber abgelagert. Hieraus ergeben sich die pathobiochemischen Veränderungen der Leber bei chronischem Alkoholkonsum (7 Kap. 33.6.1).

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651 21.5 · Die Stoffwechselbedeutung einzelner Nährstoffe und ihre Beteiligung an der Homöostase

. Tabelle 21.6. Alkoholgehalt verschiedener Getränke g/100 ml Leichtbier

2

Weißbier

3

Export

4

Märzen, Bock

4,5–5,5

Porter, Ale

6–7

Apfelwein

5–6

deutsche Tafelweine (Mosel, Rhein, Pfalz)

7–10

Spätlesen

9–12

Burgunder, Bordeaux Schaumweine Wermut

10–12 7–10 14

Portwein

15–17

Liköre

24–42

Cognac

38

Steinhäger, Obstwässer

35–45

Whisky

40–45

Wodka

40–50

Arrak

50–52

Rum

40–70

21.5.5

Ballaststoffe

! Ballaststoffe können als Quellstoffe oder als Substrate des intestinalen bakteriellen Metabolismus dienen.

Als Ballaststoffe (häufig auch als Nahrungsfasern bezeichnet) werden die in den Lebensmitteln pflanzlicher Herkunft enthaltenen Gerüst- und Speichersubstanzen bezeichnet,

die von den Enzymen des Magen-Darm-Trakts des Menschen nicht gespalten werden können. Es handelt sich um Polysaccharide (Zellulose, Hemizellulose, Lignin und Pektin), um Nicht-Stärkepolysaccharide (Inulin, Methylcellulose) und resistente Stärke (Stärke in kristalliner Struktur). Man unterscheidet wasserlösliche (Inulin, Pektine und andere Quellstoffe sowie lösliche Hemizellulosen) und wasserunlösliche Ballaststoffe (Zellulose, unlösliche Hemizellulose, Lignin). Manche Ballaststoffe quellen im Darm auf und beeinflussen somit die Viskosität des Chymus und der Faeces und regen darüber die Darmmotilität an. Außerdem besitzen einige die Eigenschaften von Ionenaustauschern und binden Gallensäuren. Lösliche Ballaststoffe sind wichtige Energiesubstrate für den mikrobiellen Stoffwechsel im Dickdarm. Dieser liefert kurzkettige Fettsäuren (Acetat, Propionat, Butyrat, Lactat), die ihrerseits als Energiesubstrate im menschlichen Stoffwechsel genutzt werden. Nach ihrer Resorption werden Propionat und Acetat ins Pfortaderblut abgegeben, während Butyrat als Substrat bevorzugt dem Stoffwechsel der Dickdarmmukosa dient und die Proliferation der Epithelzellen fördert. Die kurzkettigen Fettsäuren senken den pH-Wert des Darminhalts ab und verbessern dadurch u.a. die Verfügbarkeit von Calcium und anderen Elektrolyten sowie von Spurenelementen. Die energetische Verwertung der von der Flora gebildeten kurzkettigen Fettsäuren bedingt beim Menschen einen physiologischen Brennwert der löslichen und fermentierbaren Ballaststoffe von etwa 1,5 bis 2 kcal pro g. Der Energiegehalt (bzw. die Energiedichte) ballaststoffreicher Lebensmittel ist generell geringer als der von ballaststoffarmen Lebensmitteln. Dagegen ist der Sättigungseffekt ballaststoffreicher Lebensmittel meist höher. Aufgrund ihrer gesundheitsfördernden Wirkungen auf Darmfunktionen und der geringeren Energiedichte ballaststoffreicher Lebensmittel wird von Fachgesellschaften eine hohe alimentäre Ballaststoffzufuhr empfohlen.

In Kürze Proteine: liefern Aminosäuren für die körpereigene Proteinbiosynthese 5 sind Energiesubstrate 5 stellen Stickstoff und Schwefel für andere Synthesen bereit Proteine sollten in einer Menge von 0,8 g/kg Körpergewicht zugeführt werden, wobei deren unterschiedliche biologische Wertigkeit beachtet werden muss. Der Proteinumsatz des Organismus wird durch Hormone in vielfältiger Weise reguliert. Als zellulärer Sensor des Aminosäurestatus dient die Proteinkinase mTOR, die mit den Insulin/IGF-1 Signalketten und der AMP-aktivierten Proteinkinase verknüpft ist.

Kohlenhydrate sind: 5 Energielieferanten und dienen in Form von Glycogen als Energiespeicher 5 Kohlenstoffquellen für die Biosynthese von Fettsäuren und einzelnen Aminosäuren 5 Bausteine der Heteroglykan-Komponenten von Protein- und Lipidkomplexen Der Kohlenhydratstoffwechsel wird vor allem durch Insulin und Glucagon reguliert. Als intrazelluläre Bindeglieder dienen die AMP-aktivierte Proteinkinase, SREBP-1c und ChREBP, welche die koordinierte Stoffwechselantwort u.a. durch die Transkription von Schlüsselenzymen des Glucose- und Fettsäurenstoffwechsels regulieren. 6

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Kapitel 21 · Ernährung

Lipide sind: 5 Als Triaclyglycerine und Fettsäuren Energielieferanten 5 Integrale, strukturgebende Bestandteile von Membranen und Vorläufer von Signalmolekülen 5 In Form der essentiellen ω-3- und ω-6-Fettsäuren Vorstufen für die Synthese von Prostanoiden und Leukotrienen Fettsäuren beeinflussen durch Aktivierung von PPARs (Peroxisomen-Proliferator Aktivierter-Rezeptor) u.a. die Genexpression von Proteinen für die zelluläre Fettsäureaufnahme, die mitochondriale und peroxisomale Fettsäureoxidation und die Lipacidogenese.

21.6

Besondere Ernährungserfordernisse

21.6.1

Ernährung in speziellen Lebenssituationen

! Schwangerschaft, Stillen, Wachstum, Alter und akute Erkrankungen stellen besondere Ansprüche an die Nährstoffzufuhr.

Schwangerschaft und Stillzeit gehen mit erhöhten Syntheseleistungen und Veränderungen im Stoffwechselgeschehen einher. Die Zufuhr von essentiellen Nährstoffen sollte entsprechend in diesen Lebensabschnitten höher sein. Der Mehrbedarf an Energie liegt in der zweiten Schwangerschaftshälfte bei etwa 1300 kJ (300 kcal) pro Tag. Für die Stillzeit gilt als Orientierungsgröße eine zusätzliche Aufnahme von etwa 420 kJ (100 kcal) pro 100 ml sezernierter Muttermilch. Die Muttermilchmenge liegt im Durchschnitt bei 750 ml pro Tag. Im Wachstum ist neben einer erhöhten Energiezufuhr auch eine ausreichende Versorgung mit essentiellen Nährstoffen wichtig. Als Richtwerte des Energieaufwands für das Wachstum nennt die WHO 21 kJ (5 kcal) pro g Gewebezuwachs. Kinder und Jugendliche nehmen von Tag zu Tag je nach Freizeitbeschäftigung und Belastung sowie Nahrungspräferenzen unterschiedliche Mengen an Nahrung und damit Energie auf. Da sich diese Unterschiede jedoch über längere Zeiträume ausgleichen, kann auch in diesem Alter das Körpergewicht zur Kontrolle des Ernährungsstatus dienen. Im Alter treten quantitative und qualitative Änderungen des Stoffwechsels und der Organfunktionen auf. Mäßigkeit, Regelmäßigkeit und Vielseitigkeit spielen bei der Ernährung des älteren Menschen eine große Rolle. Gleichzeitig sollte für eine angemessene körperliche und geistige Betätigung sowie hinreichende soziale Kontakte Sorge getragen werden. Der Bedarf an Nährstoffen ist in aller Regel

Alkohol: hat einen physiologischen Brennwert von 29,4 kJ (7 kcal) und wird überwiegend in der Leber oxidiert. Ballaststoffe sind: 5 Bestandteile der pflanzlichen Kost 5 Einflussfaktoren der Motilität des Darms 5 Substrate für die Fermentation durch Darmbakterien und stellen darüber kurzkettige Fettsäuren zur Verfügung

nicht erhöht, die Resorption einzelner Nährstoffe kann jedoch reduziert sein. Wegen des geringeren Energiebedarfs im Alter ist eine höhere Nährstoffdichte der verzehrten Lebensmittel notwendig. Die Nahrung alter Menschen sollte leicht verdaulich, besonders appetitanregend und mild gewürzt sein. Bei alten Menschen ist besonders auf die Wasseraufnahme zu achten, da mit zunehmendem Alter das Empfinden für Durst abnimmt. Eine Exsikkose führt bei alten Menschen nicht selten zu Verwirrungszuständen. Neuere Studien zeigen, dass für den alten Menschen ein Körpergewicht von 10% über dem Sollwert mit einer größeren Lebenserwartung einhergeht. Diese Beziehung gilt nicht für den jungen Menschen (7 Kap. 21.3.1). Die Veränderung des Stoffwechsels bei akuten Erkrankungen verursacht in der Regel einen erhöhten Bedarf an Energie und essentiellen Nährstoffen. So steigt auch der Bedarf an Vitaminen, die Coenzymfunktion haben. Der mit erhöhter Körpertemperatur verbundene Verlust von Wasser und Mineralstoffen muss ebenfalls zeitnah ersetzt werden. Bei diversen Krankheiten ergeben sich Nährstoffund Wasserverluste durch Störungen der intestinalen Resorption, durch Diarrhö oder über Wundsekrete und Drainagen, die entsprechend eine Substitution notwendig machen. Eine kalorisch wie an essentiellen Nährstoffen unzureichende Ernährung führt auch zu Funktionseinbußen des humoralen und zellulären Immunsystems, was den weiteren Krankheitsverlauf bzw. die Prognose negativ beeinträchtigen kann.

21.6.2

Klinische Ernährung

! Bei bestimmten Krankheitsbildern muss die orale Nahrungsaufnahme umgangen werden.

Als künstliche Ernährung bezeichnet man jegliche Form von Nahrungszufuhr auf nicht-physiologischem Weg. In aller Regel werden dazu die Patienten, die nicht normal es-

653 21.6 · Besondere Ernährungserfordernisse

. Tabelle 21.7. Vergleich des oralen und parenteralen Bedarfs an Aminosäuren insgesamt und an essentiellen Aminosäuren. (Nach Munro 1974) Zugeführt auf

Gruppe

Bedarf [mg/kg Körpergewicht] Aminosäuren insgesamt

Oralem Weg

Essentielle Aminosäuren

Prozentualer Anteil der essentiellen Aminosäuren

Kindera

1600

680

43

10–12 Jahrea

700

260

36

Erwachsenea

425

80

19

a

Parenteralem Weg

Erwachsene (normal)

6,4

Leberkupfer [μmol/g Trockengewicht]

< 1,6

> 8(16)

Urinaminostickstoff [mg/24 h]

< 400

> 500

Bei der Krankheit ist das Gesamtkupfer des Serums erniedrigt, da der Caeruloplasminspiegel reduziert ist. Das an Albumin locker gebundene Kupfer (»freies Kupfer«) ist dagegen erhöht. Durch eine Beeinträchtigung der Nierenfunktion ist außerdem die Ausscheidung von Kupfer (über 100 μg im 24 Std. Urin) und daneben auch die von Aminosäuren und Harnsäure mit dem Urin erhöht (. Tabelle 22.5). Ursache der Erkrankung ist eine Mutation im Gen für die ATPase7B (Chromosom 13q14.3) zugrunde (. Abb. 22.10), das vor allem in der Leber und exprimiert wird. Über 200 verschiedene Mutationen (Insertionen, Deletionen, Missense-, Nonsense-, Spleißmutationen) können die Erkrankung hervorrufen. Die häufigste in Europa sind die His1069Gln und in Asien die Arg778Leu-Mutationen (www.lehrbuch-medizin.de). Die meisten Patienten sind gemischt-heterozygot. Durch die Mutation wird der Import von Kupfer ins trans-Golgi-Netzwerk und v.a. der Export von überschüssigem Kupfer in die Galle beeinträchtigt. Die Therapie hat das Ziel, die Kupferzufuhr zu reduzieren, die

. Abb. 22.12 D-Penicillamin (β,β-Dimethylcystein), das durch zwei hydrophobe Methylgruppen substituierte D-Isomer des Cysteins

vorhandenen Kupferablagerungen durch Steigerung der Kupferausscheidung zu mobilisieren und dann eine erneute Überladung zu vermeiden. Das wird durch eine kupferarme Kost, durch medikamentösen Kupferentzug mit Chelatbildnern wie dem Cysteinderivat D-Penicillamin und die Gabe von Zink (das die Kupferaufnahme kompetitiv hemmt) erreicht. D-Penicillamin ist ein Cystein, das in ßStellung zwei Methylgruppen enthält (β,β-Dimethylcystein, . Abb. 22.12), wodurch seine Lipidlöslichkeit und damit die Permeationsfähigkeit durch Membranen erhöht wird. Menkes-Erkrankung. Diese X-chromosomal vererbte neu-

rodegenerative Erkrankung wird durch Mutationen im Gen der ATPase ATP7A verursacht. Dem entsprechend ist nicht nur die Kupferresorption beeinträchtigt, sondern auch der Einbau von Kupfer in die Proteine, deren Synthese die im trans-Golgi-Netzwerk abgeschlossen wird. Zusätzlich ist der Kupfertransport ins Zentralnervensystem gestört. Die Symptome der Menkes Erkrankung entsprechen einem schweren Kupfermangel. Es kommt zu 4 einer fortschreitenden Nervendegeneration (Dopaminβ-Hydroxylase-Mangel) 4 Hypopigmentierung (Tyrosinasemangel) 4 Bindegewebsdefekten (Cutis laxa, Lysyloxidasemangel, 7 Kap. 24.8.5) und dadurch 4 frühem Tod in der Kindheit

In Kürze 5 Fast alle kupferhaltigen Enzyme sind Oxidasen, d.h. sie übertragen Elektronen auf das Sauerstoffmolekül. Wie Eisen ist auch freies Kupfer toxisch, sodass Transportsysteme existieren, die verhindern, dass Kupfer in ungebundener Form auftritt 5 Zu den genannten Transportsystemen gehören der Kupfertransporter Ctr1, verschiedene Metallochaperone und die beiden Cu-ATPasen ATP7A und ATP7B

22.2.3

Molybdän

! Auch Molybdän ist an Elektronenübertragungen beteiligt.

Molybdän ist am Elektronentransferprozess der Flavoenzyme wie Xanthin-, Aldehyd- oder Sulfitoxidase beteiligt. Auch die Stickstofffixierung, d.h. die Umwandlung atmo-

5 Der durch Mutationen ausgelöste partielle Ausfall von ATP7B in der Leber ist die Grundlage der Wilson-Erkrankung, bei der das Metall im Hepatozyten akkumuliert und dadurch die Leberfunktion – bis hin zum kompletten Ausfall – stört 5 Durch Chelatbildner kann Kupfer aus dem Organismus bei Patienten mit M. Wilson entfernt werden

sphärischen Stickstoffs in Ammoniak durch bestimmte Prokaryote (7 Kap. 1.1), ist ein Redoxvorgang, der an die Gegenwart von Molybdän gebunden ist. Wegen des stufenweisen Ablaufs der Redoxreaktion überrascht es nicht, dass für manche Vorgänge mehrere Metalle notwendig sind. So sind die meisten Molybdänenzyme auf die Gegenwart von Eisen (Xanthinoxidase und Aldehydoxidase) angewiesen.

22

672

Kapitel 22 · Spurenelemente

Wahrscheinlich werden bei der enzymatischen Reaktion die Elektronen vom Substrat über Molybdän und Flavin auf Eisen übertragen.

22

! Über den Molybdänstoffwechsel ist bisher nur wenig bekannt.

Die Molybdänkonzentration in den Geweben ist sehr gering. Da dieses Metall nur eine geringe praktische Bedeutung in der Ernährung des Menschen besitzt, liegen bisher nur wenige Untersuchungen über seinen Stoffwechsel vor.

22.2.4

Kobalt

! Kobalt- und Vitamin-B12-Stoffwechsel sind eng verbunden.

Die Funktion dieses Metalls ist an die von Vitamin B12 gebunden, in dessen Corrinring es fest eingebaut ist (7 Kap. 23.3.9). Dieses Vitamin ist als Coenzym an der Isomerisierung von Methylmalonyl-CoA zur Succinyl-CoA und der Methylierung von Homocystein zu Methionin (7 Kap. 23.3.9) beteiligt. ! Kobalt wird im Organismus schnell umgesetzt.

Der Kobaltbestand des Menschen beträgt etwa 1,1 mg (19 mmol). Mit der Nahrung aufgenommenes Kobalt wird beim Menschen – im Gegensatz zu Tieren – zu 70–100% resorbiert, dann jedoch schnell wieder mit dem Urin ausgeschieden. Bei Versuchstieren sowie gesunden Versuchspersonen führt die Gabe von Kobaltionen (z.B. in Form von Kobaltchlorid) zu einer Steigerung der Erythrozytenproduktion, als deren Ursache eine vermehrte Biosynthese von Erythropoetin in den Nieren diskutiert wird (7 Kap. 28.1.10).

22.2.5

Zink

! Zink ist Cofaktor von mehr als 300 Enzymen.

Zink ist Bestandteil und Cofaktor von mehr als 300 Enzymen (z.B. Carboanhydrase, Pankreascarboxypeptidase, verschiedene Dehydrogenasen (Alkohol-, Glutamat-, Malat-, Lactat-, Retinol-), alkalische Phosphatase und MatrixMetalloproteinasen), in denen es – anders als Eisen und Kupfer – zwei Wirkungen besitzt: 4 es hält durch koordinative Bindungen mehrere Aminosäureseitenketten des Enzymproteins in einer Anordnung fest, die zur Einleitung der chemischen Reaktion günstig ist (strukturunterstützende Funktion) 4 darüber hinaus kann es selbst durch weitere koordinative Bindungen das Substrat festhalten, polarisieren und zur Reaktion aktivieren (katalytische Funktion)

Zink wirkt weiterhin als Stabilisator biologischer Membranen und ist Bestandteil genregulatorischer Transkriptionsfaktoren. Diese weisen bestimmte Domänen auf, die für die Bindung des Proteins an die DNA verantwortlich sind. Das Architekturprinzip dieser Proteinabschnitte beruht auf dem Verbund von Cysteinylresten oder Cysteinylund Histidylresten und zwei oder drei Zinkatomen. Je nach der Zahl der beteiligten Cystein- und Histidinresten unterscheidet man zwischen C2H2-Zinkfingern, C4-Zinkfingern und C6-Zinkfingern. In den ß-Zellen des endokrinen Pankreas nimmt Zink an der Speicherform des Insulin teil (7 Kap. 26.1.1). Die Verteilung von Zink in eukaryoten Organismen erfolgt unter Vermittlung von zwei Zinktransport-Systemen: der CDF- (cation diffusion facilitator) und Transportern der der ZIP-Familie. CDF-Transporter (Synonym SLC30) enthalten 6 Transmembrandomänen mit intrazellulären N- und C-Termini, die histidinreiche Bezirke zur Zinkbindung aufweisen. Sie sind für den Export von Zink oder die intrazelluläre Verpackung in Vesikel und Vakuolen verantwortlich. ZIPTransporter (Synonym SLC39) vermitteln die Aufnahme von Zink in die Zelle oder die Freisetzung von gespeichertem Zink. Sie enthalten 8 membranassoziierte Domänen mit extracytoplasmatischen N- und C-Termini. ! Zink wird im Plasma an Albumin gebunden.

Ein gesunder Erwachsener enthält etwa 2–3 g (30–45 mmol) Zink. Davon befinden sich 99% im Intrazellulärraum. Verhältnismäßig hohe Konzentrationen weisen 4 die Inselzellen des Pankreas (Insulinspeicher) 4 Iris und Retina des Auges (Retinoldehydrogenase) und 4 Leber, Lungen und Zähne auf 4 besonders hoch ist die Zinkkonzentration in Prostata, Epididymis, Testes [und damit Spermien (Chromatinstabilisierung)] und Ovarien Zink wird im Jejunum und Ileum unter Vermittlung der Zinktransporter ZnT1 (aus der CDF-Familie) und ZIP 5 (aus der ZIP-Familie) resorbiert. Resorbiertes Zink wird im Blut an Albumin gebunden, von dem es zur Aufnahme in die Gewebe wieder freigesetzt wird. Das im α2-Makroglobulin nachweisbare Zink ist nicht leicht austauschbar und repräsentiert – ähnlich wie Caeruloplasmin für Kupfer – damit kein transportiertes Zink. Das albumingebundene Zink macht 22% des Zinks im Blut aus, der Rest findet sich in den Erythrozyten (75%, Carboanhydrase) und Leukozyten (3%, alkalische Phosphatase, Calprotectin). Die Normalkonzentration im Plasma beträgt 100–140 μg/100 ml (15–20 μmol/l). Der Plasmazinkspiegel unterliegt einer circadianen Rhythmik. Er wird durch Hormone und Cytokine beeinflusst: Glucocorticoide stimulieren die Zinkaufnahme in die Leber, Interleukin-1 und -6 führen im Rahmen der Akutphaseantwort (7 Kap. 29.6.4) zu einem Abfall

673 22.2 · Die einzelnen Spurenelemente

des Zinkspiegels durch Aufnahme in verschiedene Gewebe. Die Ausscheidung von Zink aus dem Organismus erfolgt vorwiegend über den Stuhl. Der tägliche Zinkbedarf liegt bei 10 bis 15 mg und wird mit der in den Industriestaaten üblichen Ernährung gedeckt. ! Zinkmangel kann das Immunsystem beeinträchtigen.

Angeborener Zinkmangel (Acrodermatitis enteropathica).

Für diese Krankheit sind – wie ihr Name sagt – u.a. Hauteffloreszenzen (Vesikel- und Pustelbildung durch gestörte Basalzellproliferation) sowie gastrointestinale Symptome (Diarrhö) charakteristisch. Zugrunde liegt ein genetischer Defekt des Zinktransportsystems ZIP 4 in den Mukosazellen, der über einen Abfall des Plasmazinkspiegels zu den genannten Symptomen führt. Durch hohe Zinkgaben kann eine komplette klinische Remission erzielt werden, da bei hohem Zinkangebot offenbar andere Transportsysteme aktiviert werden. Erworbener Zinkmangel. Ein Zinkmangel kann in vielen Fällen an einer Erniedrigung des Plasmazinkspiegels erkannt werden. Ein Abfall ist für die Diagnose eines Zinkmangels jedoch nicht ausreichend, da dieser auch bei akuten Entzündungen (als Teil der Akutphaseantwort) und als Antwort auf Stresssituationen auftreten kann. Leichter ist die Diagnose bei chronischen Zuständen wie langzeitiger parenteraler Ernährung (unzureichende Zufuhr), Malabsorptionssyndromen (unzureichende Resorption) oder Leberzirrhose (persistierende Funktionsstörung). Erworbener Zinkmangel kann sich ebenfalls an Haut und Schleimhäuten manifestieren und mit Störungen der humoralen und zellulären Immunantwort (reduzierte Thymulinaktivität, 7 o.) verbunden sein.

22.2.6

Mangan

! Mangan spielt eine wichtige Rolle als Coenzym glucogenetischer Enzyme.

Eine Reihe von Enzymen kann in vitro durch Mangan aktiviert werden. Diese Funktion kann jedoch auch von anderen zweiwertigen Kationen übernommen werden. Die Pyruvatcarboxylase und die PEP-Carboxykinase, zwei wichtige Enzyme der Gluconeogenese, sowie die Arginase und die Mn-Superoxiddismutase sind Manganproteine. Eine spezifische Funktion besitzt Mangan bei der Biosynthese von Mucopolysaccharid-Protein-Komplexen (Proteoglykanen, 7 Kap. 17.3.5) des Knorpels. ! Mitochrondrien enthalten viel Mangan.

Mangan wird im Gastrointestinaltrakt auf noch unbekannte Weise in geringem Ausmaß resorbiert. Nach Bindung an ein β1-Globulin im Blut wird es schnell von den Geweben und dort v.a. von den Mitochondrien aufgenommen. Mi-

tochondrienreiche Gewebe weisen deshalb meist eine höhere Mangankonzentration auf. Der Gesamtmanganbestand des Organismus beträgt 10–20 mg (180–360 mmol) und damit 1/5 des Kupfer- und 1/100 des Zinkbestands. Die Manganausscheidung erfolgt fast vollständig in den Darm, v.a. über die Galle, aber auch über den Pankreassaft. ! Ein Manganmangel ist bisher nur bei Tieren beschrieben worden.

Tierexperimenteller Manganmangel führt zu Wachstumsund Fertilitätsstörungen sowie Skelettdeformierungen, denen die Beeinträchtigung des manganabhängigen Knorpelstoffwechsels zugrunde liegt.

22.2.7

Fluorid

Fluor ist ein Halogen, das aufgrund seiner Reaktivität in der Natur fast ausschließlich als Fluorid vorkommt. Ob Fluorid als für den Menschen lebensnotwendiges Spurenelement angesehen wird, hängt von den angewendeten Kriterien zur Beantwortung dieser Frage ab. Fluorid ist zwar nicht zum Überleben notwendig, fördert aber unter den derzeitigen Lebensbedingungen Gesundheit und Wohlbefinden, da optimale Fluoridgaben das Ausmaß der Karies, d.h. die Zersetzung der Zähne, reduzieren. Bei den für die Herstellung von Zahnpasta verwendeten Fluoriden wird zwischen anorganischen Fluoriden (Natriumfluorid, NaF; Natriummonofluorphosphat, Na2PO3F; Zinnfluorid, SnF2) und organischen Fluoriden, bei denen das Fluoridion an einen organischen Fettsäureaminrest gebunden ist, unterschieden. Letztere Kombination einer hydrophoben Kohlenwasserstoffkette mit einem hydrophilen Kopf ist typisch für Tenside, die sich an Oberflächen schnell und geordnet anreichern. ! Fluorid besitzt eine hohe Affinität zum Knochen- und Zahnhartgewebe.

Fluorid ist ein beim Menschen gut untersuchtes Spurenelement. Die in Nahrungsmitteln (Fleisch, Fisch, fluoridiertem Speisesalz, Fluoridtabletten), Getränken (Tee, Bier oder Fruchtsäfte), verschiedenen Medikamenten (z.B. Fluorosteroide) oder Zahnpasta enthaltenen Fluoride werden im Magen-Darm-Trakt bis zu 100% resorbiert. Die Resorption hängt von der jeweiligen Fluoridverbindung ab: leicht lösliche Verbindungen wie NaF oder SnF2 werden schnell und nahezu komplett, schwer lösliche wie CaF2 langsam und unvollständig resorbiert. Die Konzentration des im Plasma vorwiegend frei vorliegenden Fluorids beträgt 0,01–0,02 mg/100 ml (5– 10 μmol/l). Nach oraler Fluoridgabe steigt der Spiegel innerhalb von Minuten rasch an, um nach Erreichen eines Spitzenwerts nach etwa 30 Minuten innerhalb einer Stunde wieder abzufallen. Die Plasmakonzentration wird dadurch konstant gehalten, dass Fluorid rasch in das Knochensystem

22

674

22

Kapitel 22 · Spurenelemente

(Skelett und Zähne) und langsamer in Weichgewebe (Herz, Leber) aufgenommen wird. Eine rasche Ausscheidung erfolgt über die Nieren, in geringen Mengen auch mit dem Stuhl, Schweiß und Speichel der Parotis- und Submandibularis-Drüsen. Beim Erwachsenen finden sich 99% der Gesamtfluorkonzentration im Skelett und in den Zähnen, der Rest in den übrigen Geweben und im Extrazellulärraum. Im Skelett wird es als schwer löslicher Fluorhydroxylapatit gebunden, der durch Austausch von Fluoridionen gegen Hydroxylionen im Apatitkristallgitter entsteht (7 Kap. 24.7.1). Aus der Verteilung im Organismus geht hervor, dass Fluorid eine ausgesprochene Affinität zum Knochen- und Zahnhartgewebe besitzt. Bis zur Hälfte des resorbierten Fluorids kann vom Skelett retiniert werden, wenn die vorausgegangene Fluorzufuhr sehr niedrig war. Bei anhaltender täglicher Zufuhr kleiner Fluoridmengen, wie sie z.B. bei der unten beschriebenen Trinkwasserfluoridierung vorliegen, bildet sich ein Gleichgewicht zwischen Skelett und extrazellulärem Körperwasser aus, d.h. es kommt nicht zu einem ständigen Anstieg der Fluoridkonzentration des Skeletts. Beim erwachsenen Menschen werden durchschnittlich 30% des aufgenommenen Fluorids im Skelett eingelagert, der Rest mit dem Urin ausgeschieden. Gleichzeitig wird durch die Aktivität der Osteoklasten ebenso viel Fluorid mobilisiert und durch die Nieren ausgeschieden, wie durch den Knochenanbau fixiert wird. Bei höherer Fluoridaufnahme stellt sich die Fluoridkonzentration im Knochen auf ein höheres Niveau ein, jedoch bleibt die Fluoridbilanz selbst beim Konsum eines Trinkwassers mit einem Gehalt von 6–8 mg (315 bis 420 mmol) Fluorid/Liter noch ausgeglichen. Eine Fluoridakkumulation in Organen und anderen Weichgeweben findet nicht statt. ! Karies entsteht durch Demineralisierung der Zahnoberfläche.

Die Zahnhartsubstanz (Schmelz und Dentin) stellt ein schwer lösliches Salz in einer wässrigen Lösung (Speichel) dar. Normalerweise besteht an der Zahnoberfläche ein Gleichgewicht zwischen De- und Remineralisierung. Dieses Gleichgewicht geht jedoch bei Plaquebesiedelung und zuckerreicher Ernährung verloren. Die Plaques bestehen aus Ablagerungen hochmolekularer Dextrane, in denen säurebildende Bakterien am Zahnschmelz haften. Die Dextrane werden hauptsächlich durch bestimmte anaerobe Streptokokken synthetisiert, denen Saccharose (7 Kap. 2.1.3) als Substrat dient. Der wesentliche zweite Schritt bei der Kariesbildung beruht auf der Bildung von Säuren (Lactat) aus niedermolekularen Kohlenhydraten wie Saccharose durch Streptokokken und Lactobacillen (anaerobe Glycolyse) in der Plaque. Aufgrund der Säureproduktion überwiegt die Demineralisierung, sodass sich zunächst eine kariöse Läsion bildet, die schließlich in eine Kavität übergeht. Die Demineralisierung wird durch die Protonierung des Phosphats im Apatit von Schmelz und/oder Dentin ein-

geleitet (PO43– + H+ → HPO42–). Dadurch kann Calcium nicht mehr gebunden werden und wird freigesetzt. Daran schließt sich die Zersetzung des Dentins und des Zements durch den bakteriellen Abbau der Proteinmatrix an. ! Fluorid wirkt über eine direkte Reaktion mit dem Zahnschmelz kariesprotektiv.

Fluorid wirkt vor allem über eine Reaktion mit der Schmelzoberfläche, auf der es sich als calciumfluoridähnliches Präzipitat einlagert. Dadurch werden Protonen entfernt und eine Wiedereinlagerung des Calciums ermöglicht. Die früher angenommene systemische Wirkung auf die Apatitbildung [Ca5OH(PO4)3] des Zahnmaterials über eine Verdrängung des Hydroxylions (aus Hydroxylapatit) durch Fluorid (unter Bildung von Fluorapatit) wird heute eher als von untergeordneter Bedeutung angesehen. Physiologische Fluoriddosen fördern die Remineralisierung um das Mehrfache. Der kariostatische Effekt von Fluorid kommt vor allem über eine direkte Wirkung auf die Zahnoberfläche durch die Applikation fluoridierter Zahnpasta und Mundpflegepräparate zustande. Daneben gelangt Fluorid nach seiner Resorption über das Blut in den Speichel. In diesen wird es zwar nur in geringeren Konzentrationen, dafür aber ständig freigesetzt. Daneben kann Fluorid den bakteriellen Kohlenhydratstoffwechsel hemmen, indem es als Flusssäure in das Bakterium eindringt und zu einer Übersäuerung des Cytoplasmas führt. Dies kann zu einer Hemmung der Glykolyse und des Zuckertransports in das Bakterium führen. Die Weltgesundheitsorganisation (WHO) empfiehlt die generelle Fluoridanwendung zur Prophylaxe der Karies, die die häufigste chronische und progressive Krankheit bei Kindern und Jugendlichen darstellt. Nach den Erfahrungen in Nordamerika, Holland, Schweden und der ehemaligen DDR scheint die Trinkwasserfluoridierung die wirkungsvollste Form der systematischen Fluoridverabreichung zu sein. Auch in der Bundesrepublik Deutschland wurde schon 1974 die gesetzliche Grundlage zur Einführung der Trinkwasserfluoridierung geschaffen. Da diese jedoch nicht realisiert worden ist, erfolgt die individuelle Kariesprophylaxe durch Fluoridtabletten, fluoridiertes Speisesalz und lokale Fluoridapplikation durch fluoridhaltige Zahnpasta. ! Fluorid wird auch zur Behandlung der Osteoporose eingesetzt.

Ein Teil der Wirkung von Fluorid wird über die Verdrängung von Hydroxyl- durch Fluoridionen erzielt, gleichzeitig hemmt Fluorid aber auch eine spezifische PhosphotyrosinPhosphatase in den Osteoblasten, die neue Knochenmatrix synthetisieren. Die Zahnfluorose ist die häufigste Nebenwirkung einer erhöhten Fluoridzufuhr. Infolge einer Störung der Ameloblastentätigkeit kommt es zu einer fleckenförmigen Unterentwicklung des Zahnschmelzes (gesprenkelte Zähne). Die Zahnfluorose tritt nur bei Fluoridzufuhr während der

675 22.2 · Die einzelnen Spurenelemente

Zahnbildung auf, also innerhalb der ersten 8–10 Lebensjahre; ältere Kinder und Erwachsene können nicht mehr an Zahnfluorose erkranken.

22.2.8

Jod

Die einzig bekannte Funktion von Jod ist die eines essentiellen Bestandteils der Schilddrüsenhormone Tri- und Tetrajodthyronin (Thyroxin, 7 Kap. 27.2.4). ! 75% des Gesamtkörperjods finden sich in der Schilddrüse.

In der Nahrung liegt Jod vorwiegend als anorganisches Jodid vor und wird in dieser Form fast vollständig im MagenDarm-Trakt resorbiert. Die meisten Nahrungsmittel mit Ausnahme von Meerfisch enthalten wenig Jod. Im Blut ist die Konzentration des anorganischen Jodids sehr niedrig [0,08–0,60 μg/100 ml (6–47 nmol/l)], der Hauptteil ist organisches Jod in Form der Schilddrüsenhormone, von denen nur etwa 1‰ nicht an Trägerproteine des Plasmas gebunden sind. Etwa 75% des gesamten Körperjods [10– 20 mg (79–158 μmol)] finden sich in der Schilddrüse. Damit ist eine einzigartige Anreicherung eines Spurenelements in einem Organ gegeben, da die Schilddrüse nur etwa 0,05% des Körpergewichts ausmacht. Diese Anreicherung wird durch die Gegenwart von Jodidtransportern wie dem Natrium/Iodid-Symporter (NIS) oder Pendrin ermöglicht (7 Kap. 27.2.4). Interessanterweise wird der NIS auch in der laktierenden Mamma (Jodidausscheidung in die Milch) und beim Mammakarzinom stark exprimiert. Der Rest des Jods findet sich in der Muskulatur, Galle, Hypophyse, in Speicheldrüsen und bestimmten Teilen des Auges, insbesondere dem Fettgewebe der Augenhöhle und dem M. orbicularis. Beim Abbau der Schilddrüsenhormone freigesetztes Jod kann für die Biosynthese dieser Hormone reutilisiert werden. Die Jodausscheidung erfolgt hauptsächlich mit dem Urin, daneben auch mit dem Schweiß und den Faeces. Bei ausreichender Jodzufuhr [100–200 μg (0,79–1,58 μmol)/ Tag] mit der Nahrung soll die Jodausscheidung im Urin zwischen 75 und 150 μg (0,59 und 1,18 μmol)/Tag liegen. ! Der Jodmangel ist weit verbreitet.

Jodmangel, der in Deutschland wegen des niedrigen Jodidgehalts der Böden und damit auch der Agrarprodukte häufig auftritt, führt zu einer als endemische Struma bezeichneten Störung der Schilddrüsenfunktion (7 Kap. 27.2.9), da der Schilddrüse nicht genügend Bausteine angeboten werden. Daher wurde in verschiedenen Staaten die Strumaprophylaxe durch jodiertes Kochsalz (Vollsalz) gesetzlich eingeführt. Zur Erfassung des Jodstatus ist die Jodausscheidung in den Urin ein wichtiger Parameter, da sie eng mit der Jodzu-

fuhr korreliert. Der Sollwert der Jodausscheidung liegt bei 150 μg/Tag. Tatsächlich liegt die mittlere Jodausscheidung in Deutschland nur bei etwa 60 μg/Tag. Eine besondere Bedeutung besitzt die ausreichende Jodversorgung während der Schwangerschaft und der Stillzeit, da eine Steigerung des mütterlichen Grundumsatzes auftritt und die fetale Schilddrüse etwa ab der 12. Schwangerschaftswoche mit der eigenen Hormonsynthese beginnt. Experten plädieren deshalb für die gesetzliche Einführung der Jodprophylaxe mit Hilfe von jodiertem Kochsalz. Solange hierfür noch keine gesetzliche Grundlage existiert, sollen alle Ärzte an der Aufklärung der Bevölkerung aktiv teilnehmen, das jodierte Kochsalz freiwillig zu benutzen. Mit Jodid angereichertes Kochsalz enthält 15–25 μg/g, d.h. bei einem täglichen Salzverbrauch von 5 g beträgt die Jodidzufuhr 75–125 μg. Es besteht auch keine Gefahr einer jodinduzierten Überfunktion der Schilddrüse, die erst bei täglichen Dosen von mehr als 500 μg (4 mmol) auftritt.

22.2.9

Chrom

! Chrom verbessert die Glucosetoleranz.

Über die biochemische Funktion von Chrom ist bisher nur wenig bekannt. Bei Ratten, die chromarm ernährt werden, tritt eine Beeinträchtigung der Glucosetoleranz (7 Kap. 16.1.3) auf, die sich durch Chromgaben wieder beheben lässt. Es wurde spekuliert, dass ein chromhaltiger Glucosetoleranzfaktor existiert; dieser konnte aber bisher nicht isoliert werden. Tierexperimenteller Chrommangel führt zu Wachstumsstörungen und Beeinträchtigungen des Glucose-, Fettund Proteinstoffwechsels. Beim Menschen werden Störungen der Glucosetoleranz beobachtet. ! Chrom kann zur Markierung von Erythrozyten verwendet werden.

Chrom wird nur in geringem Ausmaß resorbiert, wobei die Resorption von sechswertigem Chrom besser als die von dreiwertigem ist. 4 Das resorbierte sechswertige Chromanion tritt durch die Erythrozytenmembran und bindet an den Globinanteil des Hämoglobins 4 Dagegen kann das dreiwertige Chromkation nicht die Erythrozytenmembran durchdringen und bindet an β-Globulin und Transferrin Diese Beobachtungen führten zur Entwicklung von Methoden, mit denen durch Chrommarkierung die Lebensdauer von Erythrozyten und Plasmaproteinen bestimmt werden kann. Die Chromausscheidung erfolgt vorwiegend mit dem Urin, in kleinen Mengen auch mit der Galle, durch den Darm und die Haut. Über die Chromverteilung in Geweben ist nur wenig bekannt. Interessanterweise nimmt

22

676

Kapitel 22 · Spurenelemente

der Chromgehalt des Organismus [normal etwa 6 mg (115 μmol)] – im Gegensatz zu den meisten anderen Spurenelementen – mit zunehmendem Alter ab.

22 22.2.10 Selen ! Selen ist als Selenocystein Bestandteil von Proteinen.

Beim Menschen sind mindestens 30 Selenoproteine bekannt: dazu gehören die Familien der Glutathion-Peroxidasen (GPX), Thioredoxin-Reduktasen und Thyroxin-Dejodasen (7 Kap. 27.2.6). In diesen kommt Selen als Selenocystein vor, das bei physiologischem pH-Wert vollständig ionisiert ist und damit als sehr effektiver Redox-Katalysator wirkt. Die Biosynthese von Selenocystein unterscheidet sich von der aller anderen Aminosäuren. Zunächst wird die für den Einbau von Selenocystein in Proteine benötigte tRNAsec mit der Aminosäure Serin beladen, sodass SertRNAsec entsteht. Dieses wird in einer weiteren, komplexen Reaktion unter Verwendung von Selenphosphat in SectRNAsec umgewandelt und in Selenoproteine eingebaut. Bei der Biosynthese der Selenoproteine verwendet Sec-tRNAsec das Codon UGA, welches normalerweise als Stopcodon dient (7 Kap. 9.1.2). Beispiele für Selenoenzyme sind: 4 Die Glutathionperoxidasen sind wichtige Bestandteile des antioxidativen Schutzsystems aller Zellen, kommen aber auch im Extrazellulärraum vor (GPX 3) (. Abb. 22.13). Ihre besondere Bedeutung liegt in der Eliminierung von Lipidperoxiden, die durch Protonierung von organischen Dioxyl-Radikalen entstehen (7 Kap. 15.3). Das Enzym kommt in verschiedenen Isoformen (GPX 1–6) vor, von denen einige mit durch Peroxidation geschädigten Membranphospholipiden, andere dagegen mit oxidierten Lipiden in Lipoproteinen reagieren 4 Thioredoxin-Reduktasen sind Proteine, die Thiol-Disulfid- Austauschreaktionen katalysieren. Sie spielen z.B. für die Ribonucleotidreduktase (7 Kap. 19.1.3), aber auch für die Ausbildung von Disulfidbrücken bei der Proteinfaltung eine wichtige Rolle 4 Thyroxin-Dejodasen katalysieren die Entfernung von Jod aus der 5- bzw. 5’-Position von Thyroxin und spielen somit eine wichtige Rolle bei Biosynthese und Abbau der Schilddrüsenhormone in verschiedenen Geweben (7 Kap. 27.2.6) ! Selen besitzt eine relativ geringe therapeutische Breite.

Die Resorption von Selen wird durch die Wertigkeit und Verbindung, in der es vorliegt (gute bei Natrium-Selenit, schlechter bei Selenocystein und Selenmethionin), sowie die Menge des zugeführten Elements bestimmt. Im Blut erfolgt der Transport durch die Bindung an Plasmaproteine (Selenoprotein P), wonach Selen in alle Gewebe einschließlich Knochen, Haare, Erythrozyten und Leukozyten ge-

. Abb. 22.13. Funktion der Glutathionperoxidase bei der Eliminierung von Lipidperoxiden. Die Glutathionperoxidase reduziert organische Peroxide, z.B. Lipidperoxide. Für die Glutathionregenerierung wird als Hilfsenzym die Glutathion-Reduktase benötigt, für die NADPH+/Regenerierung beispielsweise die Glucose-6-phosphatdehydrogenase. GSH Glutathion, reduziert; GS-SG Glutathiondisulfid

langt. Am höchsten sind die Selenkonzentrationen in der Schilddrüse, darauf folgen Nierenrinde, Pankreas, Hypophyse und Leber. Ausgeschieden wird Selen mit den Faeces, dem Urin und mit der Ausatmungsluft. Die Deutsche Gesellschaft für Ernährung empfiehlt eine tägliche Selenzufuhr von 100 μg, die jedoch mit den mit der Nahrung aufgenommenen Mengen nicht gedeckt wird. Nahrungsmittel mit hohem Selengehalt sind Eigelb, Fisch und Fleisch. Selen besitzt im Vergleich zu anderen Spurenelementen eine relativ geringe therapeutische Breite, da bereits ab der zehnfach empfohlenen Tagesdosis toxische Wirkungen auftreten. ! Selenmangel beeinträchtigt die Schilddrüsenfunktion.

Da Selen essentieller Bestandteil eines wichtigen Enzyms des Schilddrüsenhormonstoffwechsels ist, führt ein Selenmangel zur Beeinträchtigung der Bildung von Trijodthyronin. Auf der anderen Seite hemmt die orale Verabreichung von Selen die Produktion von Autoantikörpern gegen die Thyreoperoxidase (7 Kap. 7.4.2). Wie die Schädigung der Herz- und Skelettmuskulatur zustande kommt, die bei den in China endemischen Selenmangelerkrankungen (Keshan- und Kashin-Beckkrankheit) beobachtet wird, ist noch unklar. Selenmangel wird auch als Folge langandauernder parenteraler Ernährung und bei Malabsorptionen beobachtet. Da Selen immunmodulierende Wirkungen aufweist, wird die Gabe von Selen zur Krebsprophylaxe und Unterstützung von Tumortherapien propagiert.

22.2.11 Cadmium ! Cadmium gehört zu den in geringen Mengen toxischen Spurenelementen.

Bisher sind keine cadmiumenthaltenden Metallenzyme beschrieben worden. In Leber, Nieren und anderen Organen des Menschen findet sich eine Familie von Proteinen, die Cadmium und Zink binden und als Metallothioneine be-

677 22.2 · Die einzelnen Spurenelemente

zeichnet werden. Metallothionein enthält 20 Cysteinylreste (bei insgesamt 62 Aminosäuren). Es bindet 7 Atome Cadmium und/oder Zink pro Proteinmolekül. Daneben werden auch Kupfer und Quecksilber gebunden. Da Cadmiumionen die Biosynthese des Metallothioneins aktivieren, wird diesem Protein eine Funktion bei der Bindung überschüssiger Cadmiummengen zugeschrieben. Dabei werden die schädlichen Cadmiumionen durch die Bindung an das Protein eingekapselt und nur sehr langsam wieder ausgeschieden. Daneben induzieren auch 4 andere Metalle wie Zink, Kupfer oder Wismut 4 Hormone (Cortisol, Adrenalin) und 4 Cytokine (Interleukin-1, Interleukin-6) die Metallothioneinsynthese, d.h. das Protein wird im Rahmen einer allgemeinen Stressantwort vermehrt gebildet. ! Der Stoffwechsel des Cadmiums interferiert mit dem ähnlicher Metalle.

Über Aufnahme und Ausscheidung von Cadmium liegen bisher keine gesicherten Erkenntnisse vor. Der Gesamtbestand des Organismus an Cadmium beträgt etwa 30 mg (270 μmol), davon findet sich 1/3 in den Nieren und etwa 4 mg (36 μmol) in der Leber (Metallothionein), der Rest in Pankreas, Milz, Placenta und Milchdrüsen. Cadmium beeinflusst aufgrund seiner chemischen Ähnlichkeit den Stoffwechsel von Zink, Kupfer und anderen Metallen. ! Cadmium ist ein Kumulationsgift.

Im Tierexperiment ist Cadmium – wahrscheinlich auch aufgrund seiner zink- und kupferantagonistischen Wirkung – toxisch: Beschrieben wurden kardiovaskuläre Erkrankungen (Bluthochdruck), Nierenleiden, Hodennekrose, Fehlgeburten und angeborene Missbildungen. In Japan trat Ende der 50er Jahre eine cadmium-induzierte tödliche Krankheit auf, die durch Decalcifikation der Skelettknochen und Frakturen (Itai-Itai-Krankheit) gekennzeichnet war. Nach epidemiologischen Studien sind in Gebieten mit hohem Cadmiumgehalt der Luft (Industrieabgase) Todesfälle an hypertonischen, kardiovaskulären Leiden signifikant höher, da das Metall offenbar in die Nahrungskette gelangt. Cadmiumverbindungen werden auch für Dekors von Porzellan- und Keramikgeschirr verwendet. Dieses Cadmium kann von der Geschirrglasur beim Kochen abgegeben werden, sich im Magen mit der Salzsäure zum giftigen Cadmiumchlorid umsetzen und in den Organismus eintreten. Da Cadmium im Meerwasser enthalten ist, nehmen z.B. auch Miesmuscheln, die pro Stunde bis zu 40 l Wasser filtern, dieses Schwermetall auf. Von allzu häufigem Verzehr von Muscheln wird deshalb abgeraten. Cadmium ist ein typisches Kumulationsgift, das erst nach Jahren oder Jahrzehnten manifeste Organschäden hervorruft. Zielorgan sind die Nieren, in denen es aufgrund seiner langen Halbwertszeit angereichert und praktisch nicht mehr ausgeschieden wird.

22.2.12 Blei Blei ist in Pflanzen und Böden weit verbreitet. In den Menschen gelangt es über Nahrungsmittel, die praktisch nicht mehr bleifrei sind, und die Atemluft. In der Bundesrepublik beträgt die tägliche Bleizufuhr mit der Nahrung etwa 250 μg (1,2 μmol). Dazu kommt das mit der Atemluft aufgenommene Blei, dessen Menge dank der Verwendung bleifreier Kraftstoffe seit 1970 auf etwa ein Zehntel zurückgegangen ist. Dem entsprechend sind auch die Bleispiegel im Blut zurückgegangen und liegen jetzt bei etwa 33 μg/l (0,15 μmol/l) bei Kindern und 45,3 μg/l (0,21 μmol/l) bei Erwachsenen. Als Grenzwert, ab dem mit gesundheitlichen Schädigungen zu rechnen ist, gelten Werte über 150 μg/l (0,7 μmol/l). Die Wirkung von Blei kommt durch Bindung an Sulfhydrylgruppen von Enzymen und Struktur-Proteinen zustande. Viele der toxischen Wirkungen dieses zweiwertigen Kations beruhen zudem auf seiner Ähnlichkeit mit Calcium, dessen Effekte es hemmen oder auch imitieren kann. Die wichtigsten toxischen Wirkungen spielen sich am Gehirn und peripheren Nervensystem ab. Da die δ-ALA-Dehydratase, ein Schlüsselenzym der Porphyrinbiosynthese (7 Kap. 20.1.2), durch Blei gehemmt wird, ist die Ausscheidung von δ-Aminolävulinat in den Urin ein wichtiger Indikator einer Bleivergiftung. Die Bleiausscheidung aus dem Organismus erfolgt über die Nieren, ein Teil des Bleis wird auch im Knochen gespeichert. Die akute Bleivergiftung (hohe Blut-Bleispiegel verursacht durch bleihaltiges Geschirr, bestimmte Kosmetika) ist durch Anämie (Beeinträchtigung der Porphyrinsynthese verursacht Hämoglobinmangel), Koliken, Lähmungen und Bewusstseinseinschränkungen gekennzeichnet. Die Behandlung der Vergiftung erfolgt mit Komplexbildnern, die Blei zur Ausscheidung in den Urin mobilisieren.

22.2.13 Quecksilber Quecksilber wird industriell als Katalysator verwendet. Mit Abwässern in Seen und Flüsse gelangtes metallisches Quecksilber wird von Mikroorganismen in Dimethylquecksilber überführt, das über den Fischverzehr in den Menschen gelangt. Aufgrund seiner Lipidlöslichkeit (hydrophobe Methylgruppen!) kann es die Blut-Hirn-Schranke passieren und damit im ZNS akkumulieren. Quecksilber ist zu etwa 50% in dem Zahnfüllmaterial Amalgam enthalten (der Rest besteht aus einer Mischung von Silber, Zinn, Kupfer und Zink). Amalgamfüllungen setzen kontinuierlich kleine Mengen Quecksilberdampf frei, der durch Nasen- und Mundschleimhäute und alveolar resorbiert wird. Wie Dimethylquecksilber kann Quecksilber-Dampf in das Gehirn gelangen, wo es zu der toxischen Form Hg2+ oxidiert wird, die – wie Blei – an Thiolgruppen bindet. Damit trägt Amalgam wesentlich zur Quecksilberbelastung des Menschen bei.

22

678

Kapitel 22 · Spurenelemente

In Kürze

22

5 Zink ist Cofaktor von mehr als 300 Enzymen. Dazu gehören Metalloproteinasen, die Komponenten der extrazellulären Matrix abbauen, und Transkriptionsfaktoren. Ein Zinkmangel, der z.B. bei parenteraler Ernährung oder Resorptionsstörungen auftritt, kann die Immunantwort beeinträchtigen 5 Fluorid besitzt eine kariesprotektive Wirkung und wirkt durch Einbau in die anorganische Substanz im Knochen der Osteoporose entgegen 5 Jodid ist obligater Bestandteil der Schilddrüsenhormone, sodass in Jodmangelgebieten wie Deutschland

Literatur Übersichtsarbeiten Aschner JL, Aschner M (2005) Nutritional aspects of manganese homeostasis. Mol Aspects Med 26:353–362 Bertinato J, L’Abbe MR (2004) Maintaining copper homeostasis: regulation of copper trafficking proteins in response to copper deficiency or overload. J Nutr Biochem 15:316–322 Beckett GJ, Arthur JR (2005) Selenium and endocrine systems. J Endocrin 184:455–465 Cazzola M (2005) Role of Ferritin and ferroportin genes in unexplained hyperferritinaemia. Best Practice & Research Haematology 18:251– 263 Eide DJ (2004) The SLC39 family of metal ion transporters. Pflügers Arch – Eur J Physiol 447:796–800 Ferenci P (2004) Pathophysiology and clinical features of Wilson disease. Metabolic Brain Dis 19:229–239 Fleming RE, Bacon B (2005) Iron homeostasis. New Engl J Med 352:1741– 1744 Ford D (2004) Intestinal and placental zinc transport pathways. Proc Nutr Soc 63:21–29 Ganz T, Nemeth E (2006) Iron imports. IV. Hepcidin and regulation of body iron metabolism. Am J Physiol Gastrointest Liver. Physiol 290: G199–G203 Harris ED (2003) Basic and clinical aspects of Copper. Crit Rev Clin lab Sci 40:547–586 Hellwig E, Lennon AM (2004) Systemic versus topical fluoride. Caries Res 38:258–262 Hentze MW, Muckenthaler MU, Andrews NC (2004) Balancing acts: Molecular control of mammalian iron metabolism. Cell 117:285– 297 Miret S, Simpson RJ, McKie AT (2003) Physiology and molecular biology of dietary iron absorption. Annu Rev Nutr 23:283–301

Mangelzustände häufig zu einer Beeinträchtigung der Schilddrüsenfunktion führen 5 Chrom soll die Glucosetoleranz verbessern und Selen ist Bestandteil antioxidativer Schutzsysteme 5 Einige Spurenelemente, die vom Menschen nicht benötigt werden, sind bereits in geringen Mengen schädlich. Dazu gehören Cadmium, Blei und Quecksilber, die bei chronischer Exposition im Körper akkumulieren und dadurch toxisch wirken

Mutter J, Naumann J, Walach H, Daschner F (2005) Amalgam: eine Risikobewertung unter Berücksichtigung der neuen Literatur bis 2005. Gesundheitswesen 67:204–216 Needleman H (2005) Lead poisoning. Annu Rev Med 55:209–222 Petrides PE, Beutler E (2002) Molecular and clinical aspects of human iron metabolism. Blood Cells Mol & Dis 29:296–573 Petris MJ (2004) The SLC31 (Ctr) copper transporter family. Pflugers Arch – Eur J Physiol 447:752–755 Pietrangelo A (2004) Medical Progress: Hereditary hemochromatosis – a new look at an old disease: New Engl J Med 350:2383–2397 Prohaska JR, Gybina AA (2004) Intracellular copper transport in mammals. J Nutr 134:1003–1006 Roetto A, Camaschella C (2005) New Insights into iron homeostasis through the study of non-HFE hereditary haemochromatosis. Best Pract & Res Haematology 18:235–250 Safaei R, Howell SB (2005) Copper transporters regulalute the cellular pharmacology and sensivity to Pt drugs. Crit Revs Onc/Hem 53:13– 23 Selverstone Valentine J, Doucette PA, Zittin Potter S (2005) Copper zinc superoxide dismutase and amyotrophic lateral sclerosis. Annu Rev Biochem 74:563–593 Zimmer S, Jahn K-R, Roxane Barthel C (2003) Empfehlungen zur Kariesprophylaxe mit Fluorid. Prophylaxe Impuls 7:11–17 Monographien Kritzinger EE, Wright BE (1985) Auge und Allgemeinkrankheiten. 1. Auflage. Springer, Berlin Heidelberg New York Testa U (2002) Proteins of Iron metabolism. CRC Press, Boca Rato Links im Netz 7 www.lehrbuch-medizin.de/biochemie

23 23

Vitamine Georg Löffler, Regina Brigelius-Flohé

23.1

Allgemeine Grundlagen und Pathobiochemie – 680

23.1.1 23.1.2 23.1.3

Definition und Einteilung – 680 Täglicher Bedarf an Vitaminen – 680 Pathobiochemie – 680

23.2

Fettlösliche Vitamine – 683

23.2.1 23.2.2 23.2.3 23.2.4

Vitamin A Vitamin D Vitamin E Vitamin K

23.3

Wasserlösliche Vitamine – 697

23.3.1 23.3.2 23.3.3 23.3.4 23.3.5 23.3.6 23.3.7 23.3.8 23.3.9

Vitamin C – 697 Vitamin B1 – 699 Vitamin B2 – 700 Niacin und Niacinamid – 700 Vitamin B6 – 703 Pantothensäure – 704 Biotin – 705 Folsäure – 707 Vitamin B12 – 709

23.4

Vitaminähnliche Substanzen Literatur

– 683 – 688 – 691 – 695

– 712

– 711

680

Kapitel 23 · Vitamine

> > Einleitung

23

Bei den großen Seefahrten zu Beginn der Neuzeit wurde beobachtet, dass Menschen unter lang dauernder, einseitiger Ernährung spezifische Krankheitsbilder entwickeln. Aber erst Ende des 19. Jahrhunderts wurde die Entstehung dieser Krankheiten tierexperimentell durch das Verfüttern so genannter Mangeldiäten untersucht, was letztendlich zur Disziplin der modernen Ernährungswissenschaft führte. Versuchstiere starben trotz ausreichender Energiezufuhr, wenn sie mit einer nur aus hoch gereinigten Kohlenhydraten, Fetten, Proteinen und Elektrolyten bestehenden Diät ernährt wurden. Die Erkenntnis, dass das Fehlen einer bestimmten Komponente in der Nahrung krank machen kann, war insofern eine Revolution, als man hierfür bis zu diesem Zeitpunkt nur giftige oder verdorbene Nahrungsbestandteile verantwortlich machte. Die für das Überleben fehlenden Bestandteile wurden Vitamine genannt, weil man annahm, dass es sich ausschließlich um stickstoffhaltige Verbindungen handle. Später zeigte sich allerdings, dass viele Vitamine keinen Stickstoff enthalten, dass Vitamine untereinander keinerlei chemische Verwandtschaft aufweisen und ihr Wirkungsspektrum alle Aspekte der Biochemie höherer Zellen umfasst.

23.1

Allgemeine Grundlagen und Pathobiochemie

23.1.1

Definition und Einteilung

! Vitamine sind organische, in Mikromengen benötigte essentielle Nahrungsbestandteile.

Vitamine sind Verbindungen, die in geringen Konzentrationen für die Aufrechterhaltung fast aller physiologischen Funktionen benötigt werden. Pflanzen und Mikroorganismen können diese Verbindungen selbst produzieren, höher organisierte Lebensformen haben im Zuge der Evolution diese Fähigkeit eingebüßt. Ihnen fehlen die für die Biosynthese von Vitaminen benötigten Enzyme, sodass für sie Vitamine zu essentiellen Nahrungsbestandteilen geworden sind [vgl. essentielle Aminosäuren (7 Kap. 13.4), essentielle Fettsäuren (7 Kap. 12.4.1)]. Dem mengenmäßig geringen täglichen Bedarf an Vitaminen entspricht ihre katalytische bzw. regulatorische Funktion. Vitamine 4 wirken als Coenzyme oder 4 Hormone 4 sind Wasserstoff- Donoren bzw. Akzeptoren 4 sind an Redoxprozessen beteiligt 4 sind an der Modifizierung und damit der Regulation der Aktivität von Proteinen beteiligt 4 sind Liganden für Transkriptionsfaktoren Nach ihren chemischen Eigenschaften werden die Vitamine in wasser- bzw. fettlösliche Vitamine eingeteilt (. Tabelle 23.1). Diese Einteilung hat aber keinerlei Bezug zur biochemischen Funktion.

23.1.2

Täglicher Bedarf an Vitaminen

! Der tatsächliche Vitaminbedarf hängt von individuellen Gegebenheiten ab.

Exakte Zahlen für den täglichen Minimalbedarf wurden an Versuchspersonen für einige Vitamine ermittelt. Die opti-

male Versorgung ist jedoch in den meisten Fällen nicht genau bekannt. Man begnügt sich daher mit Empfehlungen für die wünschenswerte Höhe der Zufuhr, bei denen 4 die individuellen Schwankungen 4 der veränderte Bedarf bei erhöhtem/erniedrigtem Kalorienverbrauch 4 Wachstum 4 Schwangerschaft und Stillzeit sowie ein angemessener Sicherheitszuschlag berücksichtigt sind (. Tabelle 23.2). Wegen der üblich gewordenen Einnahme großer Mengen an Vitaminen mit Nahrungsergänzungsmitteln, wurden im Jahr 2000 für einige Vitamine eine obere tolerierbare Zufuhr (tolerable upper intake level,) eingeführt, welche die Menge eines Vitamins angibt, die täglich aufgenommen werden kann, ohne dass es zu unerwünschten Nebenwirkungen kommt (. Tabelle 23.2).

23.1.3

Pathobiochemie

! Hypo- und Hypervitaminosen führen zu unterschiedlichen Krankheitsbildern.

Die mangelhafte Versorgung mit einem Vitamin führt in der leichten Form zur Hypovitaminose, in der schweren, voll ausgebildeten zur Avitaminose. Ein Vitaminmangel kann bedingt sein durch 4 eine unzureichende Zufuhr 4 gestörte intestinale Resorption oder 4 genetische Defekte Da viele Vitamine, besonders diejenigen aus der Gruppe der wasserlöslichen, Coenzyme der Enzyme von Hauptstoffwechselwegen sind, ist die Symptomatik von Hypovitaminosen häufig unspezifisch, da meist der gesamte Intermediärstoffwechsel gestört ist. Betroffen sind vor allem Gewebe mit hoher Stoffwechselleistung (z. B. Myocard, Gastrointestinaltrakt) oder hoher Zellteilungsrate (Blut bildende Gewebe des Knochenmarks, epitheliale Gewebe).

681 23.1 · Allgemeine Grundlagen und Pathobiochemie

. Tabelle 23.1. Einteilung der Vitamine nach ihrer Löslichkeit Fettlösliche Vitamine Buchstabe

Name

Biologisch aktive Form

Biochemische Funktion

A

Retinol

Retinoat bzw. Retinal

Photorezeption, Stabilisierung von Membranen, Glycoproteinbiosynthese, Genexpression, Kontrolle von Wachstum und Differenzierung

D

Cholecalciferol

1,25-Dihydroxycholecalciferol

Regulation der extrazellulären Calciumkonzentration

E

α-Tocopherol

Tocopherol

Schutz von Membranlipiden vor (Per-)Oxidation, Rolle in der Reproduktion und bei der neuromuskulären Signalübertragung

K

Phyllochinon

Difarnesylnaphthochinon

Carboxylierung von Glutamylresten in Proteinen (Coenzym)

Wasserlösliche Vitamine Buchstabe

Name

Biologisch aktive Form

Biochemische Funktion

C

Ascorbinsäure

Ascorbinsäure

Redoxsystem, Hydroxylierungen

B1

Thiamin

Thiaminpyrophosphat

Dehydrierende Decarboxylierungen (Coenzym)

B2

Riboflavin

FMN, FAD

Wasserstoffübertragungen (Coenzym)

Niacin(amid)

NAD+, NADP+

Wasserstoffübertragungen (Coenzym)

Pyridoxin

Pyridoxalphosphat

Transaminierungen, Decarboxylierungen, Transsulfurierung (Coenzym), Aldolspaltungen

Pantothensäure

CoA-SH, Phosphopantethein

Acylübertragungen (Coenzym)

Biotin

Biocytin (Biotin an Carboxylase gebunden)

Carboxylierungen (Coenzym)

Folsäure

Tetrahydrofolsäure

1-Kohlenstoffatomübertragungen (Coenzym)

Cobalamin

5c-Desoxyadenosylcobalamin Methylcobalamin

C-C-Umlagerungen (Coenzym) 1-Kohlenstoffatomübertragungen (Coenzym)

B6

B12

. Tabelle 23.2. Referenzwerte für die tägliche Vitaminzufuhr für gesunde Erwachsene (linke Spalte) und obere tolerierbare Zufuhr (rechte Spalte) jeweils in mg. Fettlösliche Vitamine Vitamin A

0,8–1,1a, D/0,7–0,9F

Vitamin D

0,005

Vitamin E

12–15

Vitamin K

3F

b

0,05F 1000f, F D

F

0,06–0,08 /0,09–0,12

Wasserlösliche Vitamine B1, Thiamin

1,0–1,3

B2, Riboflavin

1,2–1,50/1,0–1,1F

Niacin

13–17

B6, Pyridoxin

1,2–1,6 D

100F

F

Pantothensäure

6 /5

Biotin

0,03–0,06D/0,03F

Folsäure

0,4d

1F D

F

B12, Cobalamin

0,003 /0,0024

Vitamin C, Ascorbinsäure

100e

a b d e f

D F

2000F

mg Retinol-Äquivalente ab 65 Jahre bis zu 0,015 mg/Tag Frauen mit Kinderwunsch: zusätzlich 0,4 mg Raucher: 150 mg von der europäischen Kommission wurde hier ein Wert von 300 eingesetzt Empfehlungen der Deutschen Gesellschaft für Ernährung Empfehlungen des »Food and Nutrition Board« der USA

Ein Vitaminmangel kann – besonders auch im präklinischen Stadium – durch die Bestimmung einer vitaminabhängigen biochemischen Funktion erfasst werden: So z. B. die Ausscheidung eines Metaboliten im Urin, wenn das Vitamin für dessen enzymatische Umsetzung fehlt. Durch orale Gabe der umzusetzenden Substanz in Belastungstests kann die Ausscheidung des Metaboliten noch provoziert werden. Weiterhin ist die Aktivitätsminderung bestimmter Enzyme in Erythrozyten nachweisbar, wenn die aus Vitaminen gebildeten Coenzyme nicht in ausreichender Konzentration vorliegen (. Tabelle 23.3). Zu den durch Vitaminmangel bedingten Störungen mit unspezifischer Symptomatik kommen mit fortschreitender Dauer des Mangels morphologische Veränderungen an den verschiedensten Organen. Nach dem Aufbrauchen der Speicher treten Störungen des Zellstoffwechsels auf, die graduell abgestuft sein können. Danach folgen klinische Symptome und anatomische Veränderungen (. Abb. 23.1). Die Erkennung und Behandlung eines Vitaminmangels ist von außerordentlicher praktischer Bedeutung. Zurzeit sind zwar die Bewohner der sog. westlichen Länder durch ein ausreichendes und vielseitiges Nahrungsangebot sowie von Vitaminpräparaten vor Hypovitaminosen weitgehend geschützt. Wegen der oft einseitigen Ernährung sind ältere Menschen eher von Vitaminmangelsituationen bedroht. Auch während der Gravidität und Stillperiode, bei einseitigen Ernährungsformen oder Abmagerungskuren kann es zu Vitaminman-

23

682

Kapitel 23 · Vitamine

. Tabelle 23.3. Biochemische Tests zur Erfassung von Vitaminmangelzuständen Vitamin

23

Beobachtung bei Mangelzuständen

Phyllochinone

Verlängerung der Gerinnungszeit

L-Ascorbinsäure

Ausscheidung von p-Hydroxyphenylpyruvat im Urin nach Belastung mit Tyrosin

Thiamin

Verminderung der Aktivität der Transketolase in den Erythrozyten

Riboflavin

Vermehrte Ausscheidung von Kynurenin und 3-Hydroxykynurenin im Urin nach Belastung mit Tryptophan

Pyridoxin

Verringerte Aktivität von Transaminasen in den Erythrozyten; vermehrte Ausscheidung von Xanthurensäure, Hydroxykynurenin und Kynurensäure im Urin nach Belastung mit Tryptophan

Folsäure

Vermehrte Ausscheidung von N-Formiminoglutamat im Urin nach Belastung mit Histidin

Cobalamin

Ausscheidung von Methylmalonsäure im Urin

gel kommen. Infolge der weltweit zunehmenden Nahrungsmittelknappheit ist anzunehmen, dass in nicht allzu ferner Zukunft die Hypovitaminosen in erschreckendem Umfang zunehmen werden und entsprechend ärztlicher Behandlung bedürfen. Während überschüssige Mengen wasserlöslicher Vitamine mit dem Urin ausgeschieden werden, trifft dies nicht für alle fettlöslichen Vitamine zu. So können Hypervitaminosen nach hoher Gabe Vitamin A oder D-Supplemente auftreten. Abgesehen von den Beobachtungen, dass der Genuss größerer Mengen Eisbärenleber (bei Eskimos) oder die bevorzugte Ernährung mit Karottensäften zu einer Vitamin A-Hypervitaminose führen kann, sind Hypervitaminosen durch einseitige Ernährungsformen nicht bekannt geworden. ! Störungen im Vitaminstoffwechsel gehen häufig mit der Symptomatik eines Vitaminmangels einher.

Viele Vitamine fungieren als Coenzyme bei enzymatischen Reaktionen . Tabelle 23.1. . Abbildung 23.2 fasst dabei die einzelnen Schritte zusammen, die von der Aufnahme eines Vitamins in den Organismus bis zu seinem Einbau in ein Apoenzym durchlaufen werden müssen. Vitamine werden in meist spezifischen Prozessen intestinal resorbiert. Ihr Transport über das Blut zu den Zielzellen erfolgt häufig in Bindung an spezifische Transportproteine. Nach Aufnahme in die Zielzellen erfolgt die Umwandlung des Vitamins zum entsprechenden Coenzym, das an das Apoenzym assoziiert, und das fertige Holoenzym entsteht. Wie klinisch-biochemische Untersuchungen gezeigt haben, lassen sich eine Reihe von Erkrankungen mit der Symptomatik eines Vitaminmangels auf Defekte im Vitaminstoffwechsel zurückführen, sind also nicht durch Fehlernährung verursacht. Solche Defekte beruhen häufig auf Mutationen in Genen für Proteine bzw. Enzyme des Stoffwechsels des

. Abb. 23.1. Zeitlicher Verlauf der durch einen Vitaminmangel verursachten Störungen am Beispiel des Thiamins

. Abb. 23.2. Überblick über die einzelnen Schritte des Vitaminstoffwechsels

betreffenden Vitamins. Sie sind bisher für die Vitamine Biotin, Cobalamin, Tocopherol, Folsäure, Pyridoxin, Riboflavin und Thiamin beschrieben worden und können jeden individuellen Schritt im Vitaminstoffwechsel betreffen. Es handelt sich um relativ seltene Erkrankungen, deren Symptomatik durch Zufuhr supra-nutritiver Mengen des betroffenen Vitamins behoben werden kann. ! Antivitamine sind Derivate von Vitaminen, die deren biochemischen Wirkungsmechanismus hemmen.

Bereits geringfügige strukturelle Änderungen der für die Wirkung eines Vitamins verantwortlichen Struktur können zum Verlust der biologischen Aktivität führen. Wenn derartige Verbindungen das eigentliche Vitamin wegen ihrer strukturellen Ähnlichkeit von seinem Wirkort, meist einem Enzym, verdrängen, spricht man von Antivitaminen. Diese werden erfolgreich in der klinischen Medizin verwendet, z. B. als Folsäureantagonisten bei der Behandlung von Tumorerkrankungen.

683 23.2 · Fettlösliche Vitamine

In Kürze Vitamine sind essentielle Nahrungsbestandteile, die dem Organismus täglich in Mikromengen zugeführt werden müssen und ohne die der normale Ablauf der Stoffwechselprozesse nicht möglich ist. Ihrer chemischen Natur nach kann man sie in fett- bzw. wasserlösliche Vitamine einteilen. Vitaminmangelzustände (Hypovitaminosen

23.2

Fettlösliche Vitamine

23.2.1

Vitamin A

! Retinolderivate sind für den Sehvorgang, und für die Regulation von Zellwachstum und -differenzierung wichtig.

Chemische Struktur. Die Bezeichnung Vitamin A umfasst

alle Verbindungen, die qualitativ die gleiche biologische . Abb. 23.3. Vom β-Carotin abgeleitete Vitamin A-Derivate. E-Carotin wird durch die 15,15'-Dioxygenase zu all-transRetinal gespalten, welches zu 11-cisRetinal isomerisieren kann. Durch Oxidation der Aldehydgruppe entsteht aus alltrans-Retinal das all-trans-Retinoat, das zu 9-cis-Retinoat isomerisiert werden kann. Durch Reduktion der Aldehydgruppe des all-trans-Retinals kommt man zum alltrans-Retinol, die Reduktionsäquivalente werden vom NADPH/H+ geliefert. Oxidation von Retinal liefert in einer nicht reversiblen Reaktion Retinsäure bzw. Retinoat. REH = Retinylesterase; ARAT = Acyl-CoA: Retinol-Acyltransferase; LRAT = Lecithin: Retinol-Acyltransferase

bzw. Avitaminosen) führen zu oft schweren Krankheitsbildern mit meist unspezifischer Symptomatik. Hyper vitaminosen sind lediglich für fettlösliche Vitamine beschrieben worden und werden in aller Regel nicht durch Fehlernährung, sondern durch zu hohe Supplementierung ausgelöst.

Aktivität wie Retinol besitzen. Die Bezeichnung Retinoide schließt alle natürlichen Formen von Vitamin A und zusätzlich synthetische Analoga ein. Vitamin A besteht aus 4 Isopreneinheiten (20 C Atomen), von denen die Atome 1–6 zu einem Iononring geschlossen sind. Es hat 5 Doppelbindungen und eine polare Gruppe am azyklischen Ende, die ein Alkohol (Retinol), ein Aldehyd (Retinal) oder eine Säure (Retinsäure) sein kann (. Abb. 23.3). Als Pro-Vitamin A werden Carotinoide bezeichnet, die 8 Isoprenein-

23

684

Kapitel 23 · Vitamine

heiten aufweisen und von denen β-Carotin die ergiebigste Vitamin A-Vorstufe ist. Vorkommen. Tierische Quellen – wie Leber, Milch, Eier

23

oder Fisch – enthalten Retinoide, die als langkettige Fettsäureester von Retinol, bevorzugt als Retinylpalmitat, vorliegen. Pflanzliche Quellen sind vor allem gelbe Gemüse und Früchte (z. B. Karotten und gelbe Pfirsiche) sowie die Blätter der grünen Gemüse (Spinat, Fenchel, Grünkohl), die Carotinoide, also Provitamin A enthalten. Resorption und Verteilung. Retinylester werden im Darmlumen durch Pankreaslipasen oder Esterasen, an der Mukosamembran durch eine Retinylesterase (REH) gespalten. Für die intestinale Resorption ist eine Mizellenbildung nötig, für die Gallensäuren einen unerlässlichen Cofaktor darstellen. Die Resorption erfolgt analog der Fettresorption (7 Kap. 32.2.2). Für den intrazellulären Transport wird Vitamin A an Rezeptoren gebunden, die in . Tabelle 23.4 zusammengefasst sind. Retinol- und RetinoatBindeproteine gehören zu einer Gruppe von Lipid-Transportproteinen, die als Lipocaline bezeichnet werden. In den Mukosazellen des Intestinaltrakts (Enterozyten) wird Retinol wieder verestert. Die beteiligten Enzyme sind die Lecithin: Retinol Acyltransferase (LRAT) oder die AcylCoA: Retinol Acyltransferase (ARAT). Die LRAT verestert nur an CRBP-II (. Tab. 23.4) gebundenes Retinol, während die ARAT auch freies Retinol akzeptiert. Dies stellt sicher, dass auch bei hohen Konzentrationen, wenn die zellulären Bindeproteine gesättigt sind, kein freies Retinol vorliegt. E-Carotin wird zu Retinal gespalten, eine Reaktion, die von der 15,15c-Dioxygenase katalysiert wird. (. Abb. 23.3). Das entstehende Retinal wird zu Retinol reduziert und verestert. Retinylester werden in Chylomikronen eingebaut und in die Lymphe sezerniert. Daneben besteht die Möglichkeit des Transports von freiem Retinol über die V. portae zur Leber.

An der Plasmamembran werden Retinylester wieder gespalten und freigesetztes Retinol an CRBP-I (. Tab. 23.4) gebunden. In dieser Form wird Retinol zu den metabolisierenden Enzymen transportiert (. Abb. 23.3) oder zur Speicherung mit Palmitat verestert. Die Speicherung in der Leber erfolgt in den sog. Stern- oder Ito-Zellen (7 Kap. 33.5). Die in diesen Zellen gespeicherte Vitamin A-Menge ist beträchtlich und sichert den Bedarf für mehrere Monate. Zur Verteilung in periphere Zellen wird Retinol an das Retinolbindende Protein (RBP) gebunden und ins Blut abgegeben. Da RBP nur 21,2 kDa groß ist und deshalb über die Niere ausgeschieden würde, wird der RBP-Retinol Komplex im Blut an Transthyretin assoziiert. Leber- und periphere Zielzellen haben einen Rezeptor, der RBP erkennt und RBPgebundenes Retinol aufnimmt. Metabolismus. In den Zellen wird Retinol in die benötigte funktionelle Form umgewandelt, wobei die Oxidation von Retinal zu Retinsäure irreversibel ist (. Abb. 23.3). Retinaldehyd und Retinsäure werden isomerisiert, Retinol und Retinsäure hydroxyliert oder zum Zweck der Ausscheidung glucuronidiert. Funktion. Die verschiedenen Formen von Vitamin A haben spezifische biologische Funktionen: 4 verestertes Retinol dient als Speicherform von Vitamin A 4 Retinal ist für den Rhodopsinzyklus im Auge essentiell 4 Retinsäure steuert über die Regulation von Genaktivitäten Wachstum und Entwicklung von Zellen Molekulare Vorgänge bei der Photorezeption. Vitamin A ist in Form des 11-cis- bzw. all-trans-Retinals Bestandteil des Sehpigments Rhodopsin in den Stäbchen der Retina. Rhodopsin (Molekulargewicht ca. 27 kD) besteht aus dem Transmembranprotein Opsin und Retinal, das covalent an die H-Aminogruppe eines Lysylrests des Opsins gebunden ist.

. Tabelle 23.4. Extra- und intrazelluläre Retinolbindeproteine Name

Natürlicher Ligand

Wirkort

Funktion

Retinol-Bindeprotein RBP

all-trans-Retinol

Blut

Extrazellulärer Transport von Retinol

Zelluläres Retinol-Bindeprotein, Typ 1 CRBP-I

all-trans-Retinol

In Zellen Vitamin A-empfindlicher Gewebe

intrazellulärer Transport von Retinol zu den veresternden Enzymen (LRAT)

Zelluläres Retinol-Bindeprotein, Typ II CRBP-II

all-trans-Retinol all-trans-Retinal

Intestinale Mukosazellen

Intrazellulärer Transport von Retinol zu den metabolisierenden Enzymen. Schutz vor Oxidation. Schutz der Zelle vor freiem Retinol, das die Struktur von Membranen stören kann

Zelluläres RetinsäureBindeprotein, Typ I CRABP-I

all-trans-Retinoat

In Zellen Vitamin A-empfindlicher Gewebe

Intrazellulärer Transport von Retinsäure in den Zellkern

Zelluläres RetinsäureBindeprotein, Typ II CRABP-II

all-trans-Retinoat

Hautzellen

Intrazellulärer Transport von Retinsäure in den Zellkern

685 23.2 · Fettlösliche Vitamine

Opsin gehört zu den heptahelicalen G-Protein-gekoppelten Rezeptoren für chemische Signalstoffe (7 Kap. 25.6). Der Einbau des Pigments Retinal wandelt also einen Rezeptor für chemische Signalstoffe einen solchen für Lichtquanten um. Die in den für das Farbsehen verantwortlichen Zapfen (7 u.) vorkommenden lichtempfindlichen Pigmente mit Absorptionsmaxima von 4 420 nm (Blau-empfindlich) 4 530 nm (Rot-empfindlich) und 4 560 nm (Grün-empfindlich) sind grundsätzlich gleichartig aufgebaut. Nur minimale Unterschiede in der Primärstruktur des Opsins führen zu drastischen Veränderungen der jeweiligen Absorptionsmaxima. Diese Befunde haben zur Aufklärung der molekularen Grundlagen der Rot-Grün-Blindheit geführt. Durch Southern-Blot-Hybridisierung der genomischen DNA von Patienten mit angeborener Rot-Grün-Blindheit mit den klonierten Genen für die Rot- bzw. Grün-empfindlichen Photopigmente wurde nachgewiesen, dass die Erkrankung Folge einer Genkonversion bzw. nichtreziproken Rekombination ist. Dies führt entweder zum völligen Verlust oder zu . Abb. 23.5. Rhodopsin-Spaltung und Zyklus des Retinals bei der Belichtung der Photorezeptormembran. Die cis- bzw. trans-Doppelbindungen sind gelb unterlegt (Einzelheiten 7 Text)

. Abb. 23.4. Schematisierte Darstellung von Stäbchen und Zapfen der Retina. (Einzelheiten 7 Text). Modifiziert nach Schmidt, Lang, Thews (2005)

Strukturdefekten im Bereich des für das rotempfindliche bzw. grünempfindliche Pigment codierenden Gens. Stäbchen und Zapfen, die Sehzellen der Wirbeltiere, sind morphologisch und funktionell in mehrere Abschnitte gegliedert (. Abb. 23.4). Das Außensegment eines Stäbchens ist mit flachen Membransäcken oder -scheiben angefüllt, die wie Münzen einer Geldrolle innerhalb der Hüllmembran gestapelt sind. Sie enthalten ebenso wie die Hüllmembran das Rhodopsin. Ein Stäbchenaußensegment besteht z. B. bei der Ratte aus etwa 1000 derartigen Membransäckchen. Im Innensegment des Stäbchens befinden sich in großer Zahl Mitochondrien und endoplasmatisches

23

686

23

Kapitel 23 · Vitamine

Retikulum, an dem u.a. die Biosynthese des Opsins stattfindet. Darauf folgen der Abschnitt mit dem Zellkern und ein längerer Fortsatz, der mit der nachfolgenden Nervenzelle eine Synapse bildet. Über diese Schaltstelle wird die Erregung aus der Lichtsinneszelle weitergeleitet. Die Zapfen unterscheiden sich von den Stäbchen durch ihre konische Form und den abweichenden Aufbau des Membransystems im Außensegment. Die flachen Einfaltungen der Photorezeptormembran werden nicht als flache Säckchen abgeschnürt, sondern behalten ihre Verbindung zur Außenmembran. Statt Rhodopsin enthalten Zapfen die oben geschilderten farbempfindlichen Photopigmente. Im Dunkeln, sind in den Plasmamembranen der Stäbchen und Zapfen Natriumkanäle geöffnet, was eine Depolarisierung dieser Zellen bewirkt. Dies hat die Öffnung von spannungsregulierten Calciumkanälen zur Folge. Die nach Calciumeinstrom erhöhte intrazelluläre Calciumkonzentration löst die Freisetzung des Transmitters Glutamat an der Synapse zwischen der Photorezeptorzelle und den afferenten Neuronen, den Bipolarzellen der Retina, aus. Diese verfügen über unterschiedliche Glutamatrezeptoren, die das »Dunkelsignal« weitergeben. Bei Belichtung der Photorezeptormembran kommt es zu einer photoinduzierten Stereoisomerisierung der 11cis- zur all-trans-Form des Retinals, und zur schrittweisen Konformationsänderungen des Opsins, bis schließlich Retinal vom Opsin abgespalten wird (. Abb. 23.5). Eine der Zwischenverbindungen wird als Metarhodopsin II (aktives Rhodopsin, R*) bezeichnet und ist für die in . Abb. 23.6 dargestellte Signalübermittlung verantwortlich. Metarhodopsin II bindet an Transducin, ein oligomeres Membranprotein, das zur Gruppe der heterotrimeren G-Proteine gehört (7 Kap. 25.6.1). Es löst den Austausch des an die D-Untereinheit von Transducin gebundenen GDP durch GTP aus. Die GTP-beladene D-Untereinheit wird freigesetzt und übernimmt die inhibitorische J-Untereinheit einer cGMP-spaltenden Phosphodiesterase (PDE). Diese wird dadurch aktiviert, was zu einem außerordentlich raschen Abfall des cGMP-Spiegels im Stäbchen bzw. Zapfen führt. Da cGMP die für die Depolarisierung notwendigen Ionenkanäle offen hält, schließen sich diese, und es kommt zu einer mit einem Abfall der intrazellulären Calciumkonzentration einhergehenden Hyperpolarisierung der Sehzelle. Die Glutamatfreisetzung an der Synapse wird beendet, was als »Lichtsignal« dient. Für die erforderliche schnelle Löschung des Lichtsignals sind v.a. zwei Vorgänge verantwortlich: 4 GTP wird an der D-Untereinheit des Transducins durch dessen intrinsische GTPase-Aktivität hydrolysiert. Die D-Untereinheit erlangt so eine Konformation, in der sie die Transducin E/J-Untereinheiten erneut binden kann. Die inhibitorischen J-Untereinheiten der cGMP-spaltenden PDE assoziieren anschließend an das Enzym und inaktivieren es. Die Guanylatzyklase wird aktiviert, die cGMP-Spiegel steigen an, die Ionenkanäle werden

. Abb. 23.6. Reaktionskaskaden bei der Reizübertragung in photosensiblen Zellen. (Einzelheiten 7 Text)

geöffnet, die intrazelluläre Calciumkonzentration steigt an und das »Dunkelsignal« ist wieder aktiv 4 Auch am Opsin finden Abschaltreaktionen statt. Während der Lichtreaktion kommt es mit der Abnahme der Ca2+-Konzentration zur Aktivierung einer Rhodopsinkinase und damit zur Phosphorylierung des Metarhodopsins II, die mit Dauer und Stärke des Lichtreizes zunimmt. Das phosphorylierte Metarhodopsin II bindet Arrestin (7 Kap. 6.2.5), was eine erneute Aktivierung von Transducin verhindert. Die anschließende Dephosphorylierung führt zu Dissoziation von Arrestin (Dunkeladaptation), wonach Metarhodopsin II in Opsin und all-trans-Retinal zerfällt. Anschließend wird Rhodopsin regeneriert Dieser Vorgang erfolgt durch die enzymatische Isomerisierung des all-trans- zum 11-cis-Retinal mit anschließender Assoziation an das Opsin. Bei sehr starker Belichtung kommt es zusätzlich zur Reduktion von Retinal zu Retinol, das wieder oxidiert werden muss. Unter normalen Umständen sind in der Retina die Geschwindigkeiten der Rhodopsinspaltung und -regeneration gleich groß. Bei Retinolmangel ist jedoch die Regeneration des Rhodopsins verlangsamt, was mit Nachtblindheit assoziiert ist.

687 23.2 · Fettlösliche Vitamine

Regulation der Genexpression. Eine Vielzahl essentieller

biologischer Vorgänge ist Vitamin A-abhängig. Hier sind vor allem zu nennen: 4 Reproduktion 4 Embryogenese 4 Morphogenese 4 Wachstum und Differenzierung von Zellen Die Notwendigkeit von Vitamin A für die Differenzierung von Zellen ist Grund für seine Funktion in der Immunabwehr sowie in der Aufrechterhaltung der Integrität epithelialer Barrieren im Gastrointestinaltrakt, in der Lunge und im Genitaltrakt. Eine besondere Rolle spielt Vitamin A in der Reproduktion. Retinsäure, in geringem Maß auch Retinol, ist unerlässlich für eine ungestörte Implantation des Embryos bis zur Geburt lebensfähiger Nachkommen. Speziell ist die Entwicklung von Herz, Lunge, Skelett, Gefäßund Nervensystem Retinsäure-abhängig. Die Ausbildung von Extremitäten und die Polarisierung der Körperachse sind abhängig von Konzentrationsgradienten von Retinsäure und/oder seiner metabolisierenden Enzyme. Retinsäure sorgt auch für eine ungestörte Spermatogenese, was die Essentialität von Vitamin A für die Reproduktion generell deutlich macht. Retinsäure übt ihre genregulatorischen Funktionen über Liganden-aktivierte nukleäre Rezeptoren aus. Nukleäre Rezeptoren, zu denen auch die Steroidhormonrezeptoren (7 Kap. 25.3.1) gehören, besitzen charakteristische Domänen: eine variable N-terminale Region, eine konservierte DNA-bindende Domäne (DBD) mit 2 Zinkfingern (7 Kap. 8.5.2) und eine Liganden-Bindedomäne (LBD). An beiden Enden befinden sich Regionen, die für die Transkriptionsaktivierung erforderlich sind, AF-1 am N-Terminus und AF-2 am C-Terminus. Während sich AF-1 in einer hypervariablen Region befindet und unabhängig von einer Ligandenbindung agieren kann, ist AF-2 am C-Terminus konserviert und Liganden-abhängig (. Abb. 23.7). Der Ligand stabilisiert eine Konformation des Rezeptors, die in der Lage ist, mit Co-Aktivatoren zu interagieren. Dies geschieht über ein Leu-X-X-Leu-Leu-Motiv in der Sequenz von AF-2. In dieser aktiven Konformation wird die Bindung eines Co-Repressors verhindert. Der Ligandenbeladene nukleäre Rezeptor bildet Dimere (7 unten) und bindet an bestimmte Sequenzen in den Promotoren der regulierten Gene, die als Hormon-responsive Elemente bezeichnet werden. Ihre Sequenz (Consensus-Sequenz) kommt häufig in einer hintereinander geschalteten Wiederholung, DR (direct repeat) vor, die je nach Promotor und Rezeptortyp durch 1–5 Basenpaare getrennt ist (. Abb. 23.8). Die Retinsäurerezeptoren lassen sich in zwei Gruppen mit jeweils verschiedenen Isoformen einteilen: 4 Der natürliche Ligand für die klassischen RetinsäureRezeptoren RAR (retinoic acid receptor) mit den Isoformen D, E und J ist die all-trans-Retinsäure

. Abb. 23.7. Domänenaufbau von nukleären Rezeptoren. AF1 = Liganden-unabhängige Transaktivierungsdomäne; DBD = DNABindedomäne mit 2 Zinkfingern; hinge = Scharnier- Domäne; LBD = Ligandenbindedomäne AF-2 = Liganden-abhängige Transaktivierungsdomäne; P = für die Erkennung des responsiven Elements nötige P-Box; D = für die Dimerisierung benötigte D-Box; CTE = für eine Monomer-Bindung benötigte C-terminale Extension. Die Zinkatome in den Zinkfingern der DBD sind an je 4 Cysteinen koordiniert

. Abb. 23.8. Mit RXR homo- oder heterodimerisierende nukleäre Rezeptoren und ihre DNA-Erkennungssequenzen. Die DNA-Erkennungssequenzen sind oft direkte Wiederholungen von z. B. AGGTCA. Sie sind je nach Promotor bzw. nukleärem Rezeptor durch ein bis fünf Nucleotide getrennt. Homo- bzw. Heterodimerisierungspartner für RXR (RXR = 9-cis-Retinsäure-X-Rezeptor) sind RXR selbst, RAR (RAR = all-trans-Retinsäurerezeptor), VDR (VDR = Vitamin D-Rezeptor), TR (TR = T3-Rezeptor), PPAR (PPAR = Peroxisomen Proliferator-aktivierter Rezeptor (peroxisome proliferator-activated receptor)) oder CRABPI (CRABPI = zelluläres Retinsäure-bindendes Protein I (. Tabelle 23.4)). (Weitere Einzelheiten 7 Text)

4 Der Retinsäure-X-Rezeptor (RXR), welcher ebenfalls in drei Isoformen D, E und J vorkommt, wird durch 9-cisRetinsäure aktiviert Während Steroidhormon-Rezeptoren als Homodimere an die DNA binden, binden nicht-steroidale Rezeptoren als Homo- oder Heterodimere an ihre Erkennungssequenz. Der häufigste Partner für nukleäre Rezeptoren ist RXR. Insofern kann RXR selbst als mit 9-cis-Retinsäure beladenes Homodimer die Transkription aktivieren oder als Heterodimerisierungspartner für RAR, für Rezeptoren für Schilddrüsenhormone (TR, 7 Kap. 27.2.2; 27.2.6), Vitamin D (VDR, 7 Kap. 23.2.2) oder PPARs (7 Kap. 21.5.3) dienen. Über 500 Gene werden direkt oder indirekt von Retinsäure reguliert. Zu den direkt regulierten Genen gehören solche, die Retinoide selbst transportieren, metabolisieren oder für die Retinoidfunktion nötig sind oder Homeobox Gene. Beispiele sind: 4 die Retinolbindeproteine (7 Kap. 23.2.1) 4 Alkoholdehydrogenase 1C 4 DE-Crystallin (beteiligt an der Photorezeption) 4 Dopamin D2 Rezeptor

23

688

Kapitel 23 · Vitamine

Bei indirekt regulierten Genen ist u.a. die Regulation der RNA-Stabilität oder die Aktivierung anderer nucleärer Rezeptoren Vitamin A-abhängig. Beispiele sind 4 Apolipoprotein AI (7 Kap. 18.5.1) 4 die PEP-Carboxykinase (7 Kap. 11.3) 4 sowie verschiede Keratine (7 Kap. 24.8.2)

23

Pathobiochemie. Hypovitaminose: Das klassische Früh-

Symptom eines Vitamin A-Mangels ist die Nachtblindheit (Hemeralopie). Es handelt sich um eine mehr oder weniger ausgeprägte Störung der Rhodopsinregenerierung. Ist der Retinolmangel so weit fortgeschritten, dass es zu einer Abnahme der Plasmakonzentration kommt, macht sich die fehlende Wirkung von Retinol auf die Epithelien bemerkbar. Normales sekretorisches Epithel wird durch ein trockenes verhorntes Epithel ersetzt, das besonders leicht von Mikroorganismen angegriffen wird. Die Xerophthalmie, eine zur Blindheit führende Verhornung der Cornea, ist ein spätes Symptom des Retinolmangels. Sie ist besonders bei Kindern in Entwicklungsländern eine der Hauptursachen der Blindheit.Bei Jugendlichen treten zusätzliche Störungen des Wachstums und der Knochenbildung auf. Hypervitaminose: Hypervitaminosen wurden nach Aufnahme hoher Dosen synthetischer Vitamin A-Präparate bei Kindern und Heranwachsenden beobachtet. Hauptsymptome sind Schmerzattacken, Verdickung des Periosts der langen Knochen sowie Verlust der Haare (Alopezie). Nach Vitamin A-Überdosierung während der Schwangerschaft sind auch teratogene Wirkungen bekannt geworden.

23.2.2

Vitamin D

! Vitamin D ist an der Regulation der Calciumhomöostase und der Expression von Genen beteiligt.

. Abb. 23.9. Biosynthese von 1,25-Dihydroxycholecalciferol aus 7-Dehydrocholesterin. (Einzelheiten 7 Text)

Chemische Struktur. Die D-Vitamine oder Calciferole gehören zur Gruppe der Steroide (7 Kap. 2.2.1, 2.2.5). Die beiden wichtigsten Calciferole sind: 4 Vitamin D2 (Ergocalciferol) und 4 Vitamin D3 (Cholecalciferol)

Stoffwechsel. 7-Dehydrocholesterin (Provitamin D3) kann

Sie entstehen aus ihren Provitaminen Ergosterol bzw. 7Dehydrocholesterin durch eine Spaltung des Rings B des Steranskeletts, die durch die UV-Strahlung des Sonnenlichts katalysiert wird (. Abb. 23.9). Ergocalciferol (nicht gezeigt) unterscheidet sich vom Cholecalciferol lediglich durch den Besitz einer Doppelbindung zwischen C22 und C23 sowie einer zusätzlichen Methylgruppe an C24 in der Seitenkette. Vorkommen. In hoher Konzentration kommen Calciferole

in Meeresfischen vor (Lebertran). Daneben finden sich beträchtliche, allerdings mit der Jahreszeit schwankende, Mengen auch in Milchprodukten und Eiern.

im Organismus (Leber) aus Squalen (7 Kap. 18.3.1) synthetisiert werden. Calciferole sind deshalb keine Vitamine im eigentlichen Sinn und könnten auch den Hormonen zugerechnet werden (7 u.). Durch Bestrahlung mit ultraviolettem Licht wird das in der Haut abgelagerte Provitamin in das Vitamin D3, das Cholecalciferol, umgewandelt. Tatsächlich ist ein Vitamin D-Mangel bei Naturvölkern, die mit minimaler Bekleidung im Wesentlichen im Freien leben, unbekannt. Erst die durch die Zivilisation und Industrialisierung geänderte Lebensweise hat die durch die Sonnenbestrahlung begrenzte Kapazität des Organismus zur Vitamin D-Biosynthese gezeigt. Das Auftreten des Vitamin D-Mangelsyndroms Rachitis bei Kindern, der erhöhte Vitaminbedarf in der Wachstumsphase, der Schwangerschaft und der Lactationsperiode macht eine adäquate Substitution mit Vitamin D notwendig. Auch Cholecalciferol stellt noch nicht die biologisch aktive Form der D-Vitamine dar, sondern wird – nach dem

689 23.2 · Fettlösliche Vitamine

. Abb. 23.10. Regulation der Bildung von 1,25-Dihydroxycholecalciferol in den Epithelien der proximalen Tubuli der Nieren. (Einzelheiten 7 Text). DBP = Vitamin D-Bindeprotein; VDR = Vitamin D-Rezeptor; PTH = Parathormon; PTHR = PTH-Rezeptor; 25(OH)D3 = 25-Hydroxycholecalciferol; 1,25(OH)2D3 = 1,25-Dihydroxycholecalciferol

Transport in die Leber – zu 25-Hydroxycholecalciferol hydroxyliert (. Abb. 23.9). 25(OH)D3 verlässt die Leber und gelangt über das Blut zu den Nieren, wo es durch ein mitochondriales Enzym erneut – diesmal in Position 1 – hydroxyliert wird. Es entsteht 1,25-Dihydroxycholecalciferol (1,25(OH)2D3, Calcitriol), die biologisch aktive Form von Vitamin D. In der Niere wird auch 24,25-Dihydroxycholecalciferol gebildet, das als Ausscheidungsform gilt, aber auch eigene Wirkungen zu haben scheint. Wegen der Bedeutung der Calciferole für die Regulation der extrazellulären Calciumkonzentration (7 Kap. 28.6.3) wird die Biosynthese von 1,25-Dihydroxycholecalciferol sehr genau reguliert. Dies betrifft weniger die hepatische Bildung von 25-Hydroxycholecalciferol, welche lediglich einer einfachen Produkthemmung unterliegt, sondern vielmehr die Biosynthese der für die 1,25Dihydroxycholecalciferol-Bildung notwendigen 1α-Hydroxylase in den proximalen Tubulusepithelien der Niere (. Abb. 23.10): 4 Für den Transport von Calciferolen im Blut wird ein spezifisches Protein, das Vitamin D-Bindungsprotein (DBP) benötigt. Calciferol, besonders 25-Hydroxycholecalciferol, wird als Komplex mit diesem Protein glomerulär filtriert. Um einen Verlust an 25-Hydroxycholecalciferol im Urin zu verhindern, verfügen die proximalen Tubulusepithelzellen über den Megalinrezeptor aus der Familie der Lipoproteinrezeptoren (7 Kap. 18.5). Er bindet den Komplex aus DBP und 25-Hydroxycholecalciferol, was dessen Internalisie-

rung und die intrazelluläre Freisetzung von 25-Hydroxycholecalciferol auslöst 4 Die 1D-Hydroxylase wird auf der Ebene der Genexpression reguliert. cAMP ist der wichtigste Induktor, während Phosphat, Calcium und 1,25(OH)2D3 die Transkription des 1D-Hydroxylasegens hemmen 4 Parathormon (PTH) 7 Kap. 28.6.3) wird bei niedrigem Serum Ca2+-Spiegel von der Nebenschilddrüse ausgeschüttet. Es wird über den PTH-Rezeptor von den renalen Tubulusepithelzellen aufgenommen und ist der wichtigste Aktivator der Adenylatcyclase und deswegen für erhöhte cAMP-Spiegel verantwortlich. Freisetzung von Parathormon führt also zu einer verstärkten Bildung von 1,25(OH)2D3. Ähnlich wie in den Nebenschilddrüsen ist auch in den proximalen Tubulusepithelien ein Calcium-Sensorprotein nachgewiesen worden. Es gehört zur Familie der heptahelicalen Rezeptoren (7 Kap. 25.3.3). Seine Aktivierung durch hohe Serum Ca2+-Konzentrationen führt über entsprechende G-Proteine zu einer Hemmung der Adenylatcyclase sowie zu einer Zunahme der freien intrazellulären Calciumkonzentration der Tubulusepithelzellen und löst somit eine Hemmung der 1D-Hydroxylaseaktivität aus. Dies bedeutet eine verminderte Bildung von biologisch aktivem Vitamin D 4 Steigen die Serum-Ca2+-Spiegel, wird die Ausschüttung von PTH vermindert, die Wirkung auf die Niere bleibt aus, die Produktion von 1,25-Dihydroxycholecalciferol wird gebremst

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Kapitel 23 · Vitamine

Wirkungen von Vitamin D. Wichtige Funktion der Calciferole ist die Regulation der Calciumhomöostase (7 Kap. 28.6.3), an der auch Parathormon (7 o.) und Thyreocalcitonin (7 Kap. 28.6.3) beteiligt sind. Der Nettoeffekt von Vitamin D ist immer eine Erhöhung des Plasmacalciumspiegels. Dies wird erreicht durch: 4 vermehrte intestinale Calciumresorption 4 gesteigerte renale Calciumreabsorption und 4 gesteigerte Calciummobilisation aus dem Skelettsystem

Hauptzielorgane von Vitamin D sind demnach Darm, Niere und Knochen (. Abb. 28.32). Wirkung von Calciferolen auf die intestinale Calciumresorption: Für die intestinale Calciumresorption ist ein transzellulärer Transport von Calciumionen von der luminalen auf die basolaterale Seite notwendig. Dieser benötigt folgende Komponenten: 4 einen elektrogenen Calciumkanal auf der luminalen Seite der Enterozyten, der für die Calciumaufnahme in die Mukosazellen verantwortlich ist 4 Calbindin, ein Calcium bindendes Protein mit einer Molekülmasse von 9 kD sowie 4 eine auf der basolateralen Seite der intestinalen Mukosazelle lokalisierte Calcium-ATPase 1,25-Dihydroxycholecalciferol induziert sowohl Calbindin als auch die Calcium-ATPase. Darüber hinaus stimuliert 1,25-Dihydroxycholecalciferol die Phosphatresorption im Intestinaltrakt. Hierbei spielt offensichtlich die gesteigerte Expression eines Na+/Pi-Symporters eine wichtige Rolle. Wirkung von Calciferolen auf die Nieren: Wichtigster Effekt von 1,25-Dihydroxycholecalciferol in den Nieren ist die Steigerung der Calciumrückresorption. Außerdem wird auch die Phosphatrückresorption gesteigert, ein Effekt, der sich allerdings nur dann nachweisen lässt, wenn Parathormon vorhanden ist. Ausreichendes bzw. überschüssiges 1,25(OH)2D3 hemmt die Transkription des 1α-Hydroxylase-Gens, also seine eigene Synthese. Dieser feed back Mechanismus führt zu verminderter Produktion von aktivem Vitamin D. Durch gleichzeitige Stimulierung der 24-Hydroxylase-Aktivität entsteht aus 25-Hydroxycholecalciferol 24,25-Dihydroxycholecalciferol (7 oben). Wirkung von Calciferolen auf den Knochenstoffwechsel: In Osteoblasten induziert 1,25-Dihydroxycholecalciferol eine Reihe von Proteinen, die am Aufbau der Knochenmatrix und der Calcifizierung beteiligt sind (. Tabelle 23.5). In Osteoklasten, in denen keine Gene aktiviert werden, da sie keine Vitamin D Rezeptoren (7 unten) enthalten, wird besonders bei Hypocalcämie die Demineralisierung des Knochens stimuliert. Man nimmt an, dass ein durch Calciferole in Knochenmarksstammzellen und/oder Osteo-

. Tabelle 23.5. Proteine, deren Expression durch 1,25-Dihydroxycholecalciferol reguliert wird (Auswahl); PTH-RP PTH-Related Polypeptide Expression induziert

Expression reprimiert

Protein

Protein

24-Hydroxylase

1α-Hydroxylase

Calbindin

Parathormon

Osteocalcin

PTH-RP

Osteopontin

Kollagen I

p21Ras

c-myc

β3-Integrin

Interleukin-2

Vitamin D-Rezeptor

Calcitonin

blasten gebildeter Faktor für die Differenzierung von Osteoklasten aus Promonozyten des Knochenmarks und für deren Aktivierung verantwortlich ist. Weitere Wirkungen von Calciferolen: Vitamin D-hat eine Reihe weiterer biologischer Effekte. Es reguliert die Expression von Genen, deren Produkte beteiligt sind an der: 4 Stimulierung der Differenzierung von Zellen des hämatopoetischen Systems 4 Stimulierung der Differenzierung epidermaler Zellen 4 Modulation der Aktivität des Immunsystems Damit hat Vitamin D neben seiner Calcium-mobilisierenden Wirkung auch anti-kanzerogene und immunsuppressive Wirkungen. Deren Ausnutzung wird durch die immer auftretenden hypercalcämischen Effekte bei Vitamin D-Gabe erschwert, weswegen man versucht, diese durch Herstellung synthetischer Calciferole für die Therapie zu unterdrücken. Eine Auswahl von Genen, deren Expression durch 1,25-Dihydroxycholecalciferol reguliert wird, ist in . Tabelle 23.5 zusammengestellt. Wirkungsmechanismus von Calciferolen. Die meisten Ef-

fekte von Vitamin D werden durch Aktivierung der Transkription spezifischer Gene bewirkt. 1,25-Dihydroxycholecalciferol bindet an einen im Kern lokalisierten Rezeptor, der wie der Rezeptor von Vitamin A zu den nukleären Rezeptoren gehört (7 dort, . Abb. 23.7 und 23.8). Ähnlich wie der bereits besprochene Retinsäurerezeptor, RAR, oder der Schilddrüsenhormonrezeptor, TR, (7 Kap. 27.2.6) bindet auch der aktive Vitamin D-Rezeptor (VDR) als Heterodimer mit einem Retinsäurerezeptor des Typs RXR an die DNA (7 Kap. 23.2.1). Pathobiochemie. Hypovitaminose: Die bekannteste Hypovitaminose des Vitamin D ist die Rachitis. Es handelt sich um ein im Wachstumsalter auftretendes Krankheitsbild, das durch eine schwere Mineralisierungsstörung des Skelettsystems gekennzeichnet ist. Entscheidend ist der Calciummangel, der durch Fehlen der intestinalen Calciumresorption infolge des Calciferol-

691 23.2 · Fettlösliche Vitamine

. Abb. 23.11. Metabolismus von Vitamin E. a Physiologischer Abbauweg. CEHC = Carboxyethylhydroxychroman (Einzelheiten siehe Text). b Reaktionen als Antioxidans. Tocopherol reagiert mit einem

Radikal (Rx) zum Tocopheroxylradikal. Wenn dieses nicht wieder durch z. B. Ascorbat zum Tocopherol regeneriert wird, wird es abgebaut und ausgeschieden

mangels hervorgerufen wird. Diese Krankheit trat erstmals nach Industrialisierung in England auf und wurde deshalb auch ‚Englische Krankheit‘ genannt. Grund für die Krankheit waren neben unzureichender Zufuhr auch die unzureichende Sonneneinstrahlung durch das Arbeiten in geschlossenen Räumen oder unter Tage sowie die langen Winter. Vitamin D-Mangel beim Erwachsenen wird als Osteomalacie (7 u.) bezeichnet. Sie tritt als Folge von Störungen der Vitamin D-Resorption (z. B. bei chronischem Gallengangverschluss) auf. Bei chronischen Leber- und Nierenerkrankungen kommt es sehr häufig zum Calciumschwund des Skelettsystems, der wahrscheinlich durch eine verminderte Umwandlung von Calciferol in 1,25-Dihydroxycholecalciferol ausgelöst ist (sekundärer Hyperparathyreoidismus, 7 Kap. 28.6.4). Hypervitaminose: Eine Hypervitaminose des Vitamin D durch Fehlernährung ist unbekannt, kann aber bei Überdosierung von Vitamin D-Präparaten vorkommen. Nettoeffekt ist eine Hypercalcämie. Außerdem kommt es zu einer

Osteoporose. Das hierbei freigesetzte Calcium muss über die Nieren ausgeschieden werden. In Extremfällen erreicht es im Nierentubulus eine so hohe Konzentration, dass es zur Ausfällung von Calciumphosphat und damit zur Nephrocalcinose kommt.

23.2.3

Vitamin E

! Vitamin E ist mehr als ein Antioxidans.

Chemische Struktur. Vitamin E ist ein Sammelbegriff für 4

Tocopherole (D, E, J und G) und 4 Tocotrienole (D, E, J und G). Sie gehören zu den Prenyllipiden. Alle bestehen aus einem in 6 Stellung hydroxylierten Chromanring, der in Position 2 mit einer aliphatischen Seitenkette (C16) verknüpft ist, die in Tocopherolen gesättigt ist und in Tocotrienolen 3 Doppelbindungen aufweist (. Abb. 23.11). Die Anzahl und Stellung der Methylgruppen am Chromanring

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Kapitel 23 · Vitamine

. Abb. 23.12. Resorption, Transport und Verteilung von Vitamin E. ABC-A1 = ABC-Transporter A1; Toc = Tocopherol; T3 = Tocotrienol; PLTP = Phospholipid-Transferprotein; SR-B1 = scavenger-Rezeptor B1; LDL = low density lipoprotein; LDL-R = LDL-Rezeptor; LPL = Lipoproteinlipase; VLDL = very low density lipoprotein; HDL = high density lipoprotein. (Einzelheiten 7 Text.)

bestimmt die Zugehörigkeit zu den D-, E-, J-, G-Formen. Tocopherole haben 3 Chiralitätszentren, Tocotrienole eines, die natürlicherweise in der RRR-Konfiguration vorliegen. Synthetische Tocopherole sind Racemate aus den möglichen Kombinationen von R- und S-Konfiguration. Vorkommen. Vitamin E wird nur von Pflanzen und einigen

Cyanobakterien synthetisiert. Oliven, Weizenkeime, Sonnenblumenkerne und Kerne der Färberdistel sind reich an D-Tocopherol, Mais und Sojapflanzen enthalten J-Tocopherol. Tocotrienole findet man in Samen der Ölpalme, in Reis, Weizen, Gerste und Hafer. Resorption und Verteilung. Die Absorption aller Formen

von Vitamin E erfolgt mit den Fetten in die Enterozyten des Dünndarms (. Abb. 23.12). In der Mukosazelle wird Vitamin E an Chylomikronen assoziiert und so, zusammen mit anderen fettlöslichen Vitaminen, Triglyzeriden, Cholesterin und Phospholipiden, in die Lymphe sezerniert. Über Chylomikronen-Remnants gelangt es in die Leber. In der Leber wird D-Tocopherol aus allen ankommenden Tocopherolen und Tocotrienolen mit Hilfe des D-Tocopherol-Transferproteins (D-TTP) aussortiert, in VLDL eingebaut und wieder ins Plasma sezerniert. Die Affinitäten von D-TTP zu nicht-D-Tocopherolen und zu Tocotrienolen ist vergleichsweise niedrig. Sie beträgt für E-Tocopherol 38, J-Tocopherol 9, G-Tocopherol 2 und D-Tocotrienol 12% der Affinität für D-Tocopherol, was die Präferenz des mensch-

lichen und tierischen Organismus für D-Tocopherol entscheidend mitbestimmt. Die Aufnahme von Vitamin E in periphere Zellen erfolgt je nach Zelltyp oder Lipoprotein 4 beim Abbau von Chylomikronen oder VLDL durch die Lipoproteinlipase 4 über Lipidtransferproteine 4 über Rezeptor-vermittelte Endozytose oder 4 über die Aufnahme durch Rezeptoren, die selektiv Lipide innerhalb der Lipoproteine erkennen, wie z. B. über den Scavenger-Rezeptor-B1 (7 Kap. 18.6.2) Die Abgabe von α-Tocopherol aus den peripheren Geweben verläuft wahrscheinlich ähnlich der von Cholesterin und es sind auch hier Transporter der ABC (ATP-binding cassette)-Familie beteiligt. Der D-Tocopherol Plasmaspiegel ist abhängig vom Lipidgehalt des Plasmas. Als Normalwerte für Erwachsene gelten 12–46 μmol/L bzw. 4–7 μmol/mmol Cholesterin oder 0,8 mg/g Gesamtlipid. Die Plasmakonzentration von J-Tocopherol ist etwa 1/10 der Konzentration von D-Tocopherol. D-Tocopherol Plasmaspiegel sind sättigbar. Unabhängig von der Dauer oder Höhe einer Supplementation kann der D-Tocopherol-Plasmaspiegel nur etwa 2–3-fach erhöht werden. Die höchsten Vitamin E Gewebskonzentrationen findet man in der Leber, im Fettgewebe und in der Nebenniere. Der Umsatz im Plasma ist mit einem t1/2 von 5–7 Tagen

693 23.2 · Fettlösliche Vitamine

relativ schnell. Der Umsatz im Fettgewebe ist dagegen langsam. Fettgewebe dient jedoch nicht als Speicher; typische Speicher, wie z. B. für Vitamin A, existieren für Tocopherole nicht. Nicht aufgenommenes Tocopherol wird über Faeces, nicht in peripheres Gewebe eingebaute Tocopherole und Tocotrienole über die Galle eliminiert. Carboxyethylhydroxychromane (CEHCs, 7 u.) werden glucuronidiert oder sulfatiert und im Urin ausgeschieden. Metabolismus. Die ersten Tocopherolmetabolite wurden in

den 50er Jahren beschrieben. Hierbei handelt es sich um Tocopheronsäure und Tocopheronolacton, die durch einen geöffneten Chromanring und eine verkürzte Seitenkette gekennzeichnet sind. Der geöffnete Chromanring wurde als Hinweis dafür genommen, dass Tocopherol als Antioxidanz gewirkt haben musste, und wurde als Beweis für die antioxidative Funktion von Vitamin E in vivo gewertet. Der größte Teil der Metabolite sind aber solche mit verkürzter Seitenkette aber intaktem Chromanring, sie können also nicht aus oxidativ zerstörtem Tocopherol entstanden sein. Der initiale Schritt der Seitenkettenverkürzung ist eine Z-Hydroxylierung, die Oxidation der Hydroxylgruppe zur Carboxylgruppe, und dann eine E-Oxidation, wie sie für Fettsäuren mit Methylverzweigungen oder Doppelbindungen üblich ist. Die Endprodukte sind die entsprechend methylierten Carboxyethylhydroxychromane (CEHC; . Abb. 23.11a), deren Vorstufen die Carboxymethylbutylhydroxychromane (CMBHC). Der Abbauweg ist für alle Formen von Vitamin E gleich. Der Anteil, der verstoffwechselt wird, ist jedoch für die einzelnen Vitamere deutlich verschieden. Während D-Tocopherol nur zu einem geringen Teil abgebaut wird, wird von den anderen Formen ein Anteil von bis zu 50% beschrieben. Vollständige Bilanzen, die auch längerkettige Vorstufen von CEHC berücksichtigen, wurden allerdings bislang nicht beschrieben. Der quantitativ unwesentliche Abbau von D-Tocopherol wird neben der Spezifität des D-TTP als Erklärung für die bevorzugte Nutzung von D-Tocopherol herangezogen. Die hohe Metabolismusrate der anderen Formen von Vitamin E dürfte deren Effizienz in vivo begrenzen (7 u.). Biochemische Funktionen. Antioxidative Funktion: Alle Formen von Vitamin E haben antioxidative Eigenschaften, was im strengen Sinn als die Fähigkeit, mit einem Radikal zu reagieren, definiert wird. Die hierfür nötige Gruppe im Molekül ist die OH-Gruppe an Position 6 des Chromanrings (. Abb. 23.11b). Alle Formen von Vitamin E besitzen diese Gruppe und somit reagieren alle als Antioxidantien, jedoch mit unterschiedlicher Reaktivität und Spezifität. Als lipophiles Molekül wird Vitamin E in Membranen oder Lipoproteine eingebaut und reagiert hauptsächlich mit Lipidradikalen (LOx). Es wird daher als wichtigstes lipophiles Antioxidans bezeichnet, das Membranen vor oxidativer Zerstörung schützt. Tocopherol (TOH) reagiert mit Lipid-

oxy/Alkoxy (LOx (ROx))- und Peroxyl-Radikalen (LOOx (ROOx)) nach folgenden Gleichungen:

Die antioxidativen Eigenschaften nehmen in der Reihenfolge D > E = J > G ab. Eine Regeneration von Tocopherol ist über das Ascorbat/Ascorbylradikal-System möglich, das ein negativeres Redoxpotential (280–320 mV) als das Tocopheroxylradikal/Tocopherol System (480–500 mV) hat. Während die Radikalreaktionen von Tocopherolen in vitro bis ins Detail untersucht und beschrieben sind, gibt es für solche Reaktionen in vivo nur wenig überzeugende Beweise. Das Tocopheroxylradikal kann auch als Radikal weiterreagieren und wirkt so pro-oxidativ, in physiologischen Konzentrationen allerdings mit geringer Effizienz. Die Reaktivität von J-Tocopherol gegenüber StickstoffRadikalen ist weitaus höher als die von D-Tocopherol, da die freie Position 5 im Chromanring eine Nitrierung des Rings erlaubt. Die Bildung von 5-Nitro-J-Tocopherol (JNO2-TOH) ist sowohl durch die Reaktion mit Peroxynitrit (ONOO–) als auch mit NO2x, das aus Peroxynitrit entsteht, möglich. Inwieweit dies mit den beobachteten anti-inflammatorischen und anti-kanzerogenen Effekten von J-Tocopherol in Zusammenhang steht, bedarf der Klärung. Nicht-antioxidative Funktionen: Vitamin E wurde als Faktor entdeckt, der in der Lage war, in Ratten die Resorption von Föten zu verhindern. Diese Eigenschaft wird zur Bestimmung der biologischen Effizienz herangezogen. Im sog. Resorption-Gestations Test ergab sich eine abgestufte Wirksamkeit von D-Tocopherol (100%) > E-Tocopherol (57%) > J-Tocopherol (37%) > D-Tocotrienol (30%) > E-Tocotrienol (5%) > G-Tocopherol (1,4%). Die antioxidative Wirkung individueller Tocopherole und Tocotrienole in vitro korreliert also nicht mit ihrer biologischen Aktivität. Deshalb wird seit einigen Jahren verstärkt nach Funktionen von Vitamin E gesucht, die seine Essentialität besser erklären können. D-Tocopherol hemmt die Blutgerinnung, die Plättchenaggregation, die Expression zellulärer Adhäsionsmoleküle, die Freisetzung von Interleukin-1 aus stimulierten Makrophagen und die Proliferation von glatten Muskelzellen. Auf Enzymebene hemmt D-Tocopherol die Aktivität der NADPH-Oxidase, der Phospholipase A2 und der 5-Lipoxygenase. Somit hemmt es Entzündungsprozesse, stimuliert aber auch die Apoptose und verbessert die Zell-vermittelte Immunität. Viele dieser Effekte lassen sich durch die Hemmung der Proteinkinase C (PKC) erklären, die wiederum durch Stimulierung der Proteinphosphatase 2A (PP2A) erreicht wird. PP2A dephosphoryliert und inaktiviert so PKC. Ein hauptsächlich von J-Tocopherol ausgeübter Effekt ist die Hemmung der Cyclooxygenase 2 (. Tabelle 23.6).

23

694

Kapitel 23 · Vitamine

. Tabelle 23.6. Von Vitamin E beeinflusste biologische Prozesse Hemmung

Aktivierung

Proliferation glatter Muskelzellen, Fibroblasten, einiger Krebszellen

Pathobiochemie. Hypovitaminosen: Einen nahrungsbe-

Plättchenaggregation

23

Aktivität der PKC

zeptor gefunden, der wie im Falle von Vitamin D oder A ein Transkriptionsfaktor wäre.

Phosphoproteinphosphatasen

Aktivität der Cyclooxygenase-2 und der 5-Lipoxygenase

Vitamin E – und hier wiederum hauptsächlich D-Tocopherol – kann die Aktivität von Genen beeinflussen. So wird die Expression einer Reihe von Atherosklerose-relevanten Genen, wie z. B. des Scavenger Rezeptors CD36, von Adhäsionsmolekülen oder Collagen D1(1), inhibiert. Die Expression Apoptose-stimulierender Gene, wie CD95L, wird inhibiert, während Apoptose-hemmende Gene wie Bcl2-L1, induziert werden. Dies entspräche einer anti-inflammatorischen Wirkung. Zellzyklus-stimulierende Gene, wie z. B. CyclinD1 oder E, werden inhibiert. Produkte Zellzyklus-hemmender Gene, wie z. B. p27 werden induziert, Ereignisse, die eher zu den antikanzerogenen zu zählen wären. Die HMG-CoA-Reduktase, der LDL-Rezeptor oder D-TTP, Proteine, die den Lipid- und Vitamin E-Stoffwechsel bestimmen, werden induziert (. Tabelle 23.7). Viele dieser nicht-antioxidativen Funktionen können die viel diskutierte anti-atherosklerotischen und anti-kanzerogenen Funktionen von Vitamin E stützen, erklären aber nicht seine Essentialität. Ein gemeinsamer regulatorischer Mechanismus, der alle genannten Effekte auf die Genexpression erklären könnte, ist bisher nicht beschrieben. Insbesondere wurde noch kein spezifischer Vitamin E-Re-

dingten isolierten Vitamin E-Mangel gibt es beim Menschen praktisch nicht. Eine ausreichende Vitamin E-Zufuhr ist offenbar ohne Supplemente möglich. Vitamin E muss aber zusammen mit Fetten aufgenommen werden. Bei gestörter Fettresorption, wie sie z. B. bei Sprue, cystischer Fibrose, chronischer Pankreatitis oder Cholestase auftritt, kommt es häufig zu Vitamin E Mangel. Schwerer Vitamin E-Mangel tritt auch bei genetisch bedingten Erkrankungen auf. Ein Defekt im Gen für das D-Tocopherol-Transferprotein führt zu extrem niedrigen Plasma-Vitamin E-Spiegeln und zur Entwicklung schwerer neurologischer Störungen, die denen der Friedreich’schen Ataxie ähneln. Symptome sind progressive periphere Neuropathien, die in den typischen Ataxien resultieren. Die Krankheit wird deshalb auch als Ataxia with Vitamin E Deficieny (AVED) oder Familial, Isolated Vitamin E deficieny (FIVE) bezeichnet. Weitere Folgen sind Tremor, Muskelschwäche und geistige Retardierung, manchmal auch Retinitis pigmentosa. D-TTP wurde zuerst in der Leber entdeckt. Es wird aber auch im Gehirn exprimiert, insbesondere in Bergmann-Glia-Zellen, die die Purkinje-Zellen des cerebralen Cortex umgeben und diese mit Nährstoffen versorgen. Die Lokalisation von D-TTP im Gehirn und die Symptome bei seinem Fehlen deuten auf eine Rolle von Vitamin E bei der neuro-muskulären Signalübertragung hin, die aber keinesfalls verstanden ist. Durch sehr hohe Dosen von D-Tocopherol (bis 2 g pro Tag) können die Plasma D-Tocopherol-Spiegel der AVED Patienten auf ein normales Maß gebracht werden und die Progredienz der pathologischen Symptome weitgehend beherrscht werden. Kürzlich wurde D-TTP auch in

. Tabelle 23.7. Beispiele für Proteine, deren Gene von Vitamin E reguliert werden Form von Vitamin E

Induktion

α-Tocopherol:

Repression sog. Scavenger-Rezeptoren: CD36, SR-B1, SR-AI, SR-AII

Cytoskelettprotein:

Proteine der extrarzellulären Matrix:

α-Tropomyosin

E-Selectin, L-Selectin, ICAM-1, einige Integrine, Kollagen α1(I), Glycoprotein IIb

Cytokine und Wachstumsfaktoren: connective tissue growth factor Apoptosehemmer: Bcl2-L1

Cytokine und Wachstumsfaktoren: MCP-1, IL-8, TGF-β, IL-4, IL-1β Apoptoseaktivator: CD95 Ligand

andere: HMG-CoA Reduktase LDL-Rezeptor CRABP-II γ-Glutamyl-Cystein-Synthetase γ-Tocopherol

PPARγ, endotheliale-NO Synthase

α- und γ-Tocopherol

Zellzykluskontrolle: p27

α- und δ-Tocopherol

Vitamin E Metabolismus α-TTP, CYP3A

Zellzykluskontrolle: Cyclin D1, Cyclin E

695 23.2 · Fettlösliche Vitamine

menschlichen Plazenten gefunden. Ein Zusammenhang mit der essentiellen Rolle von Vitamin E im Fertilitätsgeschehen konnte bisher aber noch nicht nachgewiesen werden. Bei Tieren ist Vitamin E für die Reproduktion, die Funktion des Nervensystems, der Muskulatur sowie der endokrinen Drüsen (Hypophyse, Nebennierenrinde) von Wichtigkeit. Bei einer Vitamin E-Unterversorgung kommt es zu degenerativen Veränderungen an Skelett- und Herzmuskulatur, am Bindegewebe, am Gefäßsystem, an den endokrinen Drüsen und der Leber sowie zur Hämolyseneigung (Akanthozytose). Vitamin E-arm ernährte Tiere sind außerdem sehr anfällig für Infektionskrankheiten. Die Symptome sind von Spezies zu Spezies unterschiedlich stark ausgeprägt. Hypervitaminosen: Vitamin E-Hypervitaminosen gibt es praktisch nicht. Nur bei Supplementierung mit sehr hohen Dosen kann es zu Blutungsneigungen kommen, vor allem bei Patienten, die wegen vorausgegangener kardiovaskulären Störungen unter Antikoagulationstherapie stehen.

23.2.4

Vitamin K

! Vitamin K ist Coenzym für die Carboxylierung von Glutamylresten in Proteinen.

Chemische Struktur. Vitamin K ist der Überbegriff für

2-Methyl-1,4-naphthochinon (Menadion)-Derivate mit antihämorrhagischer Aktivität. Die einzelnen Vitamin K Vitamere sind Seitenkettenhomologe (. Abb. 23.13): 4 Vitamin K1 (Phyllochinon) trägt eine Phytylseitenkette 4 Vitamin K2 (Menachinon, MK) besitzt eine Seitenkette mit 4-13 Isopreneinheiten (MK4-13) 4 Vitamin K3 (Menadion) hat keine Seitenkette Für die biologische Wirkung ist die Methylgruppe in Position 2 essentiell. Vorkommen. Phyllochinone kommen in allen grünen

Pflanzen (daher der Name) und vielen Ölen in größeren Mengen vor. Menachinone werden von Mikroorganismen des menschlichen Darms synthetisiert. Stoffwechsel. Als lipophile Verbindungen werden Phyllochinone zusammen mit den Lipiden resorbiert, wofür die Anwesenheit von Gallensäuren notwendig ist. Die biologisch aktive Form der K2-Vitamine ist das Difarnesylnaphthochinon (MK6). Der Difarnesylrest wird in der Leber nach Abspaltung etwaiger anderer Seitenketten angeheftet.

. Abb. 23.13. Strukturen von Vitamin K

γ-Carboxyglutamylreste enthaltende Proteine werden als Vitamin K-abhängige Proteine bzw. VKD-Proteine (VKD, Vitamin K-dependent) oder als Gla-Proteine (Gla = Carboxyglutamat Domäne) bezeichnet. Zu Zeit sind ungefähr 12 Mitglieder der VKD-Proteine bekannt (. Tabelle 23.8). Von besonderer medizinischer Bedeutung sind die für die Blutgerinnung notwendigen J-carboxylierten Faktoren, zu denen die Faktoren VII, IX und X, sowie Prothrombin und die Proteine C und S gehören. Durch die J-Carboxylierung erhalten die Proteine eine größere Anzahl negativer Ladungen, die die Wechselwirkungen der Blutgerinnungsproteine mit den für die Aktivierung notwendigen Phospholipiden und Calcium ermöglichen (7 Kap. 29.5.3). Weitere Gla-Proteine sind Osteocalcin, Matrix Gla Protein und Protein S im Knochen, ein Protein im Zahnschmelz, sowie unter pathologischen Bedingungen das Atherocalcin in arteriosklerotischen Plaques der Arterien und ein Gla-Protein in Nierensteinen. Dies alles sind calcifizierte Matrices, deshalb nimmt man an, dass sie in den Calcifizierungsprozess eingeschaltet sind. . Tabelle 23.8. Vitamin K-abhängige Proteine (Auswahl) Protein

Funktion

Prothrombin

Blutgerinnung

Faktor VII

Blutgerinnung

Faktor IX

Blutgerinnung

Faktor X

Blutgerinnung

Protein C

Antikoagulation

Protein S

Antikoagulation

Osteocalcin

Knochen-Morphogenese

Matrix Gla Protein, Gas 6

hemmt die Calcifizierung von nichtKnochengewebe Ligand für Rezeptortyrosinkinasen, reguliert Zellwachstum?

Protein Z

Koagulationshemmer

Biochemische Funktion. Die einzige bekannte Funktion für

Vitamin K bei höheren Organismen ist die eines Cofaktors für die Carboxylierung von Glutamylresten in Proteinen.

23

696

Kapitel 23 · Vitamine

23

. Abb. 23.14. Reaktionsmechanismus der Vitamin K abhängigen Carboxylierung von J-Glutamylresten. (Einzelheiten 7 Text)

Der Mechanismus der J-Glutamyl-Carboxylierung ist in . Abb. 23.14 zusammengefasst: 4 Vitamin K wirkt in der Hydrochinonform und muss deshalb zunächst über die Chinonreduktase zum Vitamin K-Hydrochinon reduziert werden 4 Dieses reagiert mit Sauerstoff, sodass als starke Base das Vitamin K-Alkoxid entsteht 4 Dieses zieht ein Proton von dem zu modifizierenden Glutamylrest eines VDK-Proteins ab, es entsteht ein Carbanion, an das unter Bildung eines J-Carboxyglutamylrests CO2 angelagert werden kann 4 Außer dem K-Alkaloid entsteht unter Abgabe eines OH– das Vitamin K-Epoxid, das durch eine entsprechende Epoxidreduktase wieder in die Chinonform umgewandelt wird Sowohl die Epoxidreduktase als auch die Chinonreduktase enthalten vicinale SH-Gruppen, die die Reduktionsäquivalente liefern und die bei der Reduktion zu intramolekularen Disulfiden oxidiert werden. Die Reduktion der SHGruppen benötigt Thioredoxin. Vitamin K Antagonisten, wie z. B. Cumarine, blockieren diese SH-Gruppen und verhindern die Regeneration von Vitamin K Hydrochinon. Alternativ kann sowohl das Epoxid als auch das Chinon von entsprechenden NADPH-abhängigen mikrosomalen Dehydrogenasen reduziert werden. Diese Enzyme haben aber einen wesentlich höheren Km-Wert und sind deshalb erst bei hohen Konzentrationen von Epoxid bzw. Chinon aktiv.

Pathobiochemie. Hypovitaminose: Die Entstehung eines

Phyllochinonmangels durch Fehl- oder Mangelernährung ist beim Erwachsenen praktisch nicht möglich, da das Vitamin in ausreichender Konzentration in den Nahrungsmitteln vorkommt und außerdem intestinale Mikroorganismen Menachinone synthetisieren. Bei Vernichtung der gastrointestinalen Mikroorganismen durch lang dauernde orale Therapie mit Antibiotika und gleichzeitiger nutritiver Unterversorgung kann es zu Vitamin K-Mangel kommen. Wie bei anderen fettlöslichen Vitaminen führt eine Störung der intestinalen Fettresorption zur verminderten Resorption von Vitamin K. Ein funktioneller Vitamin K-Mangel kann durch Dauertherapie mit Cumarinderivaten (7 Kap. 29.5.3) ausgelöst werden, die bei allen Zuständen verwendet werden, bei denen die Blutgerinnungszeit verlängert werden soll (Thrombose- und Infarktprophylaxe). Eine Überdosierung mit Vitamin K-Antagonisten kann durch große Mengen an Vitamin K behoben werden. Die durch Cumarinderivate gesenkten Prothrombinspiegel normalisieren sich gewöhnlich 12–36 h nach der Gabe des Vitamins. Eine oft übersehene Folge eines Vitamin K-Mangels ist die verminderte Bildung von Osteocalcin. Der dadurch gestörte Calciumstoffwechsel im Knochen führt zu Osteoporose und vermehrten Knochenbrüchen.

697 23.3 · Wasserlösliche Vitamine

In Kürze Vitamin A ist als Retinal in den Sehvorgang und als Retinoat in die Regulation der Genexpression eingeschaltet. Vitamin D steuert die Calcium-Homöostase, sowie Wachstum und Differenzierung von Zellen überwiegend durch Regulation der hierfür benötigten Gene. Vitamin E hat unabhängig von seiner AntioxidansFunktion essentielle Funktionen bei der Reproduktion

23.3

Wasserlösliche Vitamine

23.3.1

Vitamin C

! Vitamin C wirkt als redoxaktiver Cofaktor von Hydroxylasen bzw. schützt enzymgebundenes Fe2+ vor der Oxidation zu Fe3+.

Chemische Struktur. Vitamin C oder L-Ascorbinsäure wird chemisch als 2,3-Endiol-L-Gulonsäure-γ-Lacton (2,3-didehydro-L-threo-hexano-1,4-lacton) bezeichnet. Die oxidierte Form ist Dehydroascorbinsäure (DHA) (. Abb. 23.15). Vorkommen. Ascorbinsäure kommt in erheblichen Mengen in grünen und roten Paprikaschoten, Petersilie, dem Saft von Tomaten, Zitronen, Apfelsinen und Grapefruit sowie in Spinat, Kartoffeln, Zwiebeln und Rosenkohl vor. Ascorbinsäure wird durch Kochen – besonders in Gegenwart von Kupfer, Eisen und anderen Metallen – leicht zerstört. Mit Ausnahme von Primaten, einschließlich Menschen, und des Meerschweinchens können alle Tierspezies L-Ascorbinsäure aus Glucose synthetisieren (7 Kap. 17.1.2). Menschen und Tieren, die L-Ascorbinsäure nicht bilden können, fehlt das Enzym L-Gulonolacton-Oxidase, das L-Gulonolacton zu 2-Ketogulonolacton oxidiert, aus dem spontan, d. h. nichtenzymatisch, L-Ascorbinsäure entsteht.

und in der Regulation von neuromuskulären Signalübertragungen, deren Mechanismen noch nicht verstanden werden.. Vitamin K ist das Coenzym für die γ-Carboxylierung von Glutamylresten in spezifischen Proteinen, v.a. solchen, die für die Blutgerinnung notwendig sind.

23.15). Diese Reaktionsfähigkeit macht es zu einem effizienten Elektronendonor in vielen biologischen Prozessen, die auch das Abfangen freier Radikale einschließt:

Entsprechend ihrem Redoxpotential kann Ascorbinsäure mit den radikalischen Formen von Tocopherolen und Glutathion reagieren und so regenerieren. Das Ascorbylradikal wird von einer NADPH-abhängigen Reduktase zu Ascorbinsäure reduziert oder durch Reaktion zweier Moleküle Ascorbylradikal zu Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure dismutiert. Dehydroascorbinsäure wird über eine GSH-abhängige DHA-Reduktase, Glutaredoxin oder die NADPH-abhängige Thioredoxinreduktase zu Ascorbinsäure reduziert. Neben generellen antioxidativen Effekten hat Vitamin C – wie alle Vitamine – spezifische Funktionen, die für sei-

Stoffwechsel. Nach der intestinalen Resorption wird L-Ascorbinsäure als Dehydroascorbinsäure über das Blut zu Geweben transportiert, wo sie wieder zu Ascorbinsäure reduziert wird. Fast alle Organe können Ascorbinsäure über Natrium-abhängige Vitamin C Transporter (SVCT, sodium dependent vitamin C transporter) aufnehmen. Wesentlich schneller gelangt Vitamin C als Dehydroascorbinsäure über die Glucosetransporter GLUT1 und GLUT3 in die Zellen wo es wieder zu Ascorbinsäure reduziert wird (7 unten). Den höchsten Ascorbinsäuregehalt weist die Nebennierenrinde auf. Das Vitamin wird entweder als solches, als Diketogulonsäure oder Oxalat über die Nieren ausgeschieden. Biochemische Funktion. Vitamin C ist ein starkes Reduktionsmittel. Ascorbinsäure wird in zwei 1-Elektronenschritten zu Dehydroascorbinsäure oxidiert, als Zwischenstufe entsteht das relativ stabile Ascorbyl-Radikal (. Abb.

. Abb. 23.15. Ascorbinsäure als Redoxsystem

23

698

Kapitel 23 · Vitamine

. Tabelle 23.9. Enzymatische Reaktionen, die durch Ascorbinsäure beeinflusst werden

23

Vorgang

Reaktion

Name des Enzyms

Beteiligtes Metallion

Cosubstrate

Kollagenbiosynthese

Prolinhydroxylierung Prolinhydroxylierung Lysinhydroxylierung

Prolyl-4-Hydroxylase Prolyl-3-Hydroxylase Lysyl-Hydroxylase

Fe2+ Fe2+ Fe2+

α-Ketoglutarat, O2 α-Ketoglutarat, O2 α-Ketoglutarat, O2

Carnitinbiosynthese

Hydroxylierung von Trimethylysin

Trimethyllysin-Hydroxylase

Fe2+

α-Ketoglutarat, O2

2+

O2

Noradrenalinbiosynthese

β-Hydroxylierung von Dopamin

Dopamin-β-Monooxigenase

Cu

Tyrosinabbau

Bildung von Homogentisat aus 4-Hydroxyphenylpyruvat

4-Hydroxyphenylpyruvat-Hydroxylase

Fe2+

O2

Herstellung von Peptidhormonen aus Präkursoren

Amidierung eines Peptids mit C-terminalem Glycin

Peptidylglycin-amidierende Monooxigenase

Fe2+

O2

ne Essentialität entscheidend sind. Ascorbinsäure ist CoFaktor für eine Reihe von Enzymen, die Übergangsmetallionen benötigen. Die Rolle von Vitamin C ist die Aufrechterhaltung des für die Aktivität benötigten reduzierten Zustandes der Metallionen (. Tabelle 23.9). Solche Enzyme sind: 4 die Prolylhydroxylase 4 die Hydroxylasen in der Carnitinbiosynthese 4 die Dopamin-β-Monooxygenase 4 die 4-Hydroxyphenyl-Pyruvathydroxylase sowie 4 die Peptidylglycin α-amidierende Monooxygenase Bei den ersten beiden Enzymen sorgt Vitamin C für die Aufrechterhaltung des zweiwertigen Eisens im aktiven Zen-

. Abb. 23.16. Schema des Mechanismus der Prolylhydroxylierung durch die Prolyl-4-Hydroxylase. Beim normalen Reaktionszyklus (A) entsteht ein Hydroxyprolyl-Peptid unter Decarboxylierung und Oxidation von D-Ketoglutarat zu Succinat. Die Wertigkeit des enzymgebundenen Eisens ändert sich nicht. Bei entkoppeltem Reak-

trum, während es bei den letzten drei als Elektronendonor fungiert. Die Prolyl-4-Hydroxylase hydroxyliert cotranslational Prolinreste in Kollagenmolekülen (. Abb. 23.16). In seiner aktiven Form enthält das Enzym Fe2+. Für die Reaktion werden O2 und D-Ketoglutarat benötigt. Während der Reaktion wird D-Ketoglutarat decarboxyliert und ein Atom des Sauerstoffmoleküls in Prolin eingebaut, das andere zur Oxidation der Carbonylgruppe des nach Decarboxylierung von D-Ketoglutarat entstehenden Succinatsemialdehyds verwendet. Die Prolylhydroxylase ist somit eine Dioxygenase. Als Endprodukte entstehen Succinat und hydroxylierte Prolinreste im Kollagen. Findet der Reaktionszyklus jedoch in Abwesenheit von Kollagen statt, wird nur D-Keto-

tionszyklus (B) kommt es zur Decarboxylierung und Oxidation von D-Ketoglutarat, Sauerstoff wird dabei als Ox– abgespalten und Fe2+ zu Fe3+ oxidiert. Eine Regenerierung des Enzyms mit Fe2+ ist mit Hilfe von Ascorbat möglich. (Nach Padh 1990)

699 23.3 · Wasserlösliche Vitamine

glutarat decarboxyliert, das zweite Sauerstoffmolekül verbleibt als reaktiver Eisen-Oxo-Komplex im Enzym. Der Sauerstoff wird als O– x abgespalten. Dabei wird Fe2+ zu Fe3+ oxidiert und das Enzym so inaktiviert. Fe3+ wird durch Ascorbinsäure reduziert und so reaktiviert. Damit übernimmt Ascorbinsäure beim Kollagenstoffwechsel und analog bei der Carnitinbiosynthese eine Schutzfunktion. Neuere Arbeiten beschreiben darüber hinaus einen direkten Einfluss von Vitamin C auf die Transkription von Kollagen, was seine Rolle bei der Kollagenbiosynthese noch wichtiger macht. Des weiteren ist Ascorbinsäure an der O2-abhängigen Hydroxylierung der D-Untereinheit des Transkriptionsfaktors HIF (hypoxia inducible factor, 7 Kap. 28.1.10) beteiligt, der ein wichtiger Sensor der Sauerstoffhomöostase ist und die Aktivität von Genen für Proteine reguliert, die für die Anpassung von Zellen an ein niedriges Sauerstoffangebot nötig sind. Hierzu gehören z. B. Erythropoietin (7 Kap. 28.1.10), der vasculäre endotheliale Wachstumsfaktor (VEGF), und der Glucosetransporter GLUT-1. Pathobiochemie. Hypovitaminose: Die klassische Vitamin C Mangelkrankheit ist Skorbut. Sie ist vor allem von Seefahrern bekannt, die zu Beginn der Neuzeit ohne ausreichende Versorgung mit Vitamin C-haltigen Lebensmitteln auf lange Seereisen gingen. Die Krankheit beginnt nach einer Latenzzeit von wenigen Monaten mit schweren Störungen des Bindegewebestoffwechsels (mangelnde Bildung von Kollagen in Knochen, Gelenken und Blutgefäßen, 7 Kap. 24.2.1). Es kommt zu Zahnfleischbluten, Zahnausfall, gestörter Wundheilung, Knochen- und Gelenkveränderungen.

23.3.2

Vitamin B1

! Vitamin B1 (Thiamin) ist Coenzym der D-KetosäureDecarboxylasen sowie der Transketolase.

Chemische Struktur. Thiamin (. Abb. 23.17) besteht aus einem mit einer CH3- und NH2-Gruppe substituierten Pyrimidinring, der über eine CH2-Gruppe mit einem 4-Methyl-5-Hydroxyethylthiazol verbunden ist. Ersatz der Methylgruppe am Pyrimidinring durch Ethyl-, Propyl- oder Butylreste führt zu einer weitgehenden Aktivitätseinbuße, der Ersatz der Aminogruppe durch eine Hydroxylgruppe zum vollständigen Verlust der Vitamin B1-Aktivität. Die CH-Gruppe zwischen dem N und S Atom im Thiazolring ist wesentlich saurer als die meisten anderen CH-Gruppen. Durch Dissoziation entsteht ein Carbanion, das leicht an Aldehyde und Ketone addiert, was die biologische Aktivität von Thiamin bestimmt.

desorten, in Leber, Herz, Nieren, Gehirn und magerem Schweinefleisch. Bei langem Kochen geht das Vitamin verloren. Stoffwechsel. In den meisten Nahrungsmitteln liegt Vitamin B1 als biologisch aktives Thiaminpyrophosphat vor und wird gelegentlich auch als Thiamindiphosphat bezeichnet. Da in dieser Form eine Resorption nicht möglich ist, wird der Pyrophosphatrest im Darm durch Pyrophosphatasen abgespalten. Die Resorption im Darm erfolgt über den Thiamintransporter-2 (THTR2), die Abgabe in die Zirkulation über den THTR1. Die Thiamintransporter gehören zur Familie der ›soluble carrier Proteine‹ (SLC19A). Intrazellulär erfolgt die Phosphorylierung zum Thiaminpyrophosphat unter Bildung von AMP durch die mitochondriale Thiaminkinase. Im Blut nachweisbares Thiamin befindet sich zum größten Teil in den Blutzellen. Biochemische Funktion. Thiaminpyrophosphat ist Coenzym der oxidativen Decarboxylierung von D-Ketosäuren [D-Ketopropionat (Pyruvat), D-Ketoglutarat, D-Ketoisovalerianat, D-Ketoisocapronat und D-Keto-E-methylvalerianat], an der außerdem Liponamid, Coenzym A, FAD und NAD+ beteiligt sind (7 Kap. 14.2). Thiaminpyrophosphat ist auch Coenzym der Transketolase, eines Enzyms des Glucoseabbaus über den Hexosemonophosphat-Weg. Bei Thiaminmangel ist als Erstes die Transketolase betroffen. Dies macht sich in einem Anstieg von Pentosephosphaten bemerkbar, der leicht in Erythrozyten gemessen werden kann (. Tabelle 23.3). Erst danach treten schwerere Symptome auf. Pathobiochemie. Hypovitaminosen: Das klassische Vitaminmangelsyndrom ist die Beriberi-Krankheit, die auch heute noch endemisch dort vorkommt, wo polierter Reis das Hauptnahrungsmittel ist (durch Polieren geht die Vitamin B1-enthaltende Keimanlage verloren). Besonders betroffen sind die Gewebe mit hohem Glucoseumsatz (Nervensystem, Gastrointestinaltrakt und kardiovaskuläres System). Die Symptome sind Appetitmangel, Übelkeit, Erbrechen, Müdigkeit, periphere Nervenstörungen, geistige Störungen, Muskelatrophie und gelegentlich eine Enzephalopathie. Die Erkrankung stellt immer noch ein Problem in Entwicklungsländern dar. Ein der Beriberi sehr ähnliches

Vorkommen. Thiamin kommt praktisch in allen pflanz-

lichen und tierischen Nahrungsmitteln vor. Die höchsten Konzentrationen finden sich in ungemahlenen Getrei-

. Abb. 23.17. Thiamin. Der für die Wirkung verantwortliche Teil des Moleküls ist rot hervorgehoben

23

700

Kapitel 23 · Vitamine

Krankheitsbild findet sich häufig bei chronischem Alkoholismus (Wernicke-Korsakoff-Syndrom). Der Vitaminmangel ist dabei auf unzureichende Nahrungszufuhr und erhöhten Bedarf bei Alkoholabusus zurückzuführen. Auch in der Schwangerschaft kommt es gelegentlich zu Thiaminhypovitaminosen.

23 23.3.3

Vitamin B2

! Vitamin B2 (Riboflavin) ist als Bestandteil von Flavinnucleotiden am Wasserstoff- und Elektronentransport beteiligt.

Chemische Struktur. Riboflavin ist ein substituierter Isoalloxazin-Ring, der mit einem Ribitol verbunden ist . Abb. 23.18. Phosphorylierung führt zum Riboflavin-5c-Phosphat oder Flavinmononucleotid (FMN), Verknüpfung von FMN mit AMP (aus ATP) zum Flavin-Adenin-Dinucleotid (FAD). Die Bezeichnung Flavinmononucleotid ist nicht ganz korrekt, da es sich nicht um ein Nucleotid, d. h. ein N-Glycosid des Ribosephosphats, sondern um ein Derivat des Zuckeralkohols Ribitol handelt. Vorkommen. Riboflavin ist im Pflanzen- und Tierreich weit

verbreitet. Milch, Leber, Nieren und Herzmuskel sind gute Quellen. Viele Gemüse enthalten es in ausreichenden Mengen, Getreideprodukte haben jedoch einen niedrigen Riboflavingehalt. Bei der Keimung steigt die Riboflavinkonzentration in Weizen, Gerste und Mais an.

Stoffwechsel. Riboflavin befindet sich als solches oder als Protein-gebundenes FMN oder FAD in der Nahrung. Im Dünndarm wird Riboflavin freigesetzt, in die Mukosazelle aufgenommen und dort wieder phosphoryliert. Der Transport im Plasma erfolgt als Riboflavin oder FMN über Riboflavin-spezifische Plasmaproteine. Die intrazelluläre Umwandlung in FMN wird von der Flavokinase katalysiert, die in FAD von der FAD Synthetase. Biologisch aktive Formen sind FMN und FAD. Biochemische Funktion. Riboflavin ist Baustein der beiden

Coenzyme von Wasserstoff übertragenden Flavoproteine (. Abb. 23.18): 4 Flavinmononucleotid (FMN) ist u.a. Bestandteil des Komplexes I der Atmungskette (7 Kap. 15.1.2) und der L-Aminooxidase (7 Kap. 13.3.4) 4 Flavin-Adenindinucleotid (FAD) ist die prosthetische Gruppe bzw. covalent gebundener Bestandteil einer Reihe von Flavoproteinen Flavoproteine katalysieren 4 oxidative Desaminierungen (z. B. Aminosäureoxidasen, 7 Kap. 13.3.4) 4 Dehydrierungen von CH2-CH2-Gruppen zu CH = CHGruppen (z. B. Acyl-CoA-Dehydrogenase, 7 Kap. 12.2.1) 4 Oxidationen von Aldehyden zu Säuren (z. B. Xanthinoxidase, 7 Kap. 19.3.1) sowie 4 Transhydrogenierungen (Dihydrolipoatdehydrogenase, 7 Kap. 14.2, Glutathionreduktase, 7 Kap. 29.2.1, Thioredoxinreduktase, 7 Kap. 19.1.3) Dabei übernimmt eines der in . Abb. 23.18 hervorgehobenen Stickstoffatome ein Hydridanion, das andere ein Proton. Es können aber auch radikalische Zwischenstufen bei dem Redoxprozess durchlaufen werden. Pathobiochemie. Hypovitaminose: Der seltene isoliert

auftretende Riboflavinmangel ist durch charakteristische Schäden der Lippen, Mundwinkelfissuren (Cheilosis), lokalisierte seborrhoische Dermatitis des Gesichts sowie eine besondere Form der Glossitis (Landkartenzunge) und verschiedene funktionelle und organische Störungen des Auges gekennzeichnet.

23.3.4

Niacin und Niacinamid

! NAD+ und NADP+ enthalten Niacin als den für ihre Funktion essentiellen Bestandteil.

Chemische Struktur. Niacin ist die Bezeichnung für Pyri-

. Abb. 23.18. Riboflavin und die von ihm abgeleiteten Coenzyme FMN und FAD

din-3-Carboxylsäure und Derivate. Die gängigsten Vertreter sind Nicotinsäure und Nicotin(säure)amid (auch Niacinamid genannt). Für die biologische Wirkung ist die Carboxyl- bzw. Säureamidgruppe notwendig, Substitutionen

701 23.3 · Wasserlösliche Vitamine

führen zu wirkungslosen Verbindungen bzw. zu Antivitaminen (3-Acetylpyridin, Isonicotinsäurehydrazid). Vorkommen. Das Vitamin kommt bei Tieren vorwiegend als Nicotinamid, in Pflanzen als Nicotinsäure vor. Besonders reiche Quellen sind Hefe, mageres Fleisch, Leber und Geflügel. Beim Rösten von Kaffee entsteht Nicotinsäure in beträchtlichen Mengen. In Mais liegt Niacin als Niacytin, d. h. an kleine Peptide gebunden, vor und muss durch alkalische Hydrolyse freigesetzt werden (traditionelles Einweichen von Mais in Kalkwasser in der zentralamerikanischen Küche). Stoffwechsel. Niacin wird nach seiner Resorption von allen Geweben des Organismus aufgenommen und zur NAD+bzw. NADP+-Biosynthese (. Abb. 23.19) verwendet. Hierbei kondensiert Nicotinat zunächst mit 5c-Phosphoribosylpyrophosphat, wobei Nicotinat-Mononucleotid entsteht. Dieses reagiert unter Pyrophosphat-Abspaltung mit ATP. Die Nicotinat-Gruppe des dabei entstandenen DesamidoNAD+ wird mit Glutamin unter Verbrauch von ATP zur Nicotinamid-Gruppe aminiert und das so gebildete NAD+ gegebenenfalls mit ATP zu NADP+ umgesetzt. Die N-glycosidische Bindung ist eine energiereiche Bindung, die eine Übertragung der ADP-Ribose ermöglicht (7 unten). Im NADP+ trägt der Adenosinteil in 2c-Stellung einen dritten Phosphatrest (. Abb. 23.19). Das bei der Synthese von NAD+ als Zwischenprodukt auftretende Nicotinatmononucleotid kann auch endogen aus Tryptophan (7 Kap. 13.6.6) gebildet werden. Das Ausmaß der Nutzung von Tryptophan für die Niacinbildung ist abhängig von der Tryptophanzufuhr, von hormonellen und wahrscheinlich von genetischen Faktoren. Außerdem sind zur Niacinsynthese auch Vitamin B6, Riboflavin und Eisen nötig, sodass bei genereller Mangelernährung schwer abzuschätzen ist, inwieweit Tryptophan zur Niacin-Versorgung beiträgt. Als Faustregel gilt, dass aus 60 mg Tryptophan 1 mg Niacin gebildet werden kann. Die Ausscheidung von Niacin erfolgt nach Methylierung zum 1-Methylnicotinsäureamid in der Leber über den Urin. Biochemische Funktion. Als Bestandteil von zwei Wasser-

stoff übertragenden Coenzymen, 4 dem Nicotinamid-Adenindinucleotid (NAD+) und 4 dem Nicotinamid-Adenindinucleotidphosphat (NADP+) ist Niacin an einer Vielzahl von Redoxreaktionen und Wasserstoffübertragungen des Intermediärstoffwechsels beteiligt, was die Essentialität von Niacin in der Ernährung des Menschen verständlich macht. Über die Funktion von NAD+ bzw. NADP+ bei Redoxreaktionen (7 Kap. 4.1.2). Außer als Wasserstoff übertragendes (Hydrid-akzeptierendes) Coenzym wird NAD+ für eine Reihe von Protein-

. Abb. 23.19. Biosynthese von NAD+ und NADP+ aus Niacin

modifikationen sowie bei der Signaltransduktion benötigt. Es ist Substrat für 4 ADP-Ribosylierungen sowie 4 für die Biosynthese von cyclo-ADP-Ribose ADP-Ribosylierung: Bei der Mono-ADP-Ribosylierung wird ein aus dem NAD+ stammender ADP-Ribose-Rest auf entsprechende Akzeptoraminosäuren spezifischer Proteine

23

702

23

Kapitel 23 · Vitamine

übertragen. Niacin wird hierbei freigesetzt (. Abb. 23.20). Die Funktion einer ADP-Ribosyltransferase wurde zuerst bei bakteriellen Toxinen entdeckt. Das bekannteste Beispiel ist die ADP-Ribosylierung der GsD-Untereinheit von an die Adenylatcyclase gekoppelten heterotrimeren G-Proteinen durch das Choleratoxin (7 Kap. 25.6.2). Dies führt zu Hemmung der intrinsischen GTPase-Aktivität der GsD-Untereinheit und damit zur Daueraktivierung der Adenylatcyclase. Die Poly-ADP-Ribosylierung dient zur posttranslationalen Modifizierung von Proteinen des Zellkerns und wird von der Poly(ADP-Ribose)Polymerase (PARP) katalysiert. Diese wird durch DNA Strangbrüche aktiviert. Als Folge werden ADP-Ribose Reste an PARP selbst aber auch an Histone, Topoisomerasen oder DNA Polymerasen geknüpft. Diese Reste können linear oder verzweigt sein. Die dadurch negativ geladenen Proteine verlieren ihre Affinität zu DNA und somit ihre Aktivität. DNA wird dadurch zugänglich. Die Funktion der PARP ist nicht vollständig geklärt. Sie ist beteiligt an Reparaturmechanismen geschädigter Basen in der DNA insbesondere in nicht-transkribierten Bereichen. PARP, ADP-Ribosylierung und damit Niacin kommt somit eine wichtige Funktion bei der Erhaltung der genomischen Integrität zu. ADP-Ribose Polymere werden von der poly (ADPR) Glycohydrolase wieder gespalten. cyclo-ADP-Ribose: cyclo-ADP-Ribose entsteht durch die Aktivität von NAD+-Glycohydrolasen/ADP-Ribosylcyclasen aus NAD+ unter Abspaltung von Nicotinsäureamid (. Abb. 23.21). Cyclo-ADP-Ribose ist ein aktivierender Ligand des Ryanodinrezeptors (7 Kap. 30.3.2) und führt auf diese Weise zu einer Erhöhung der cytosolischen Calciumkonzentration. Nicotinsäure-Adenindinucleotid-Phosphat (NAADP+): NAADP+ (nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate) entsteht durch Austausch von Nicotinamid gegen Nicotinsäure in NADP+. Seine Bildung wird z. B. von Glucose stimuliert. NAADP+ ist der potenteste Mediator einer intrazellulären Erhöhung des Ca2+-Spiegels, wobei die Ca2+Quellen und die Mechanismen der Freisetzung nicht bekannt sind.

. Abb. 23.20. Mechanismus der (Poly)ADP-Ribosylierung. (Einzelheiten 7 Text)

Pathobiochemie. Hypovitaminose: Klassisches Symptom eines Niacinmangels ist die Pellagra (Pelle agra, schwarze oder raue Haut). Niacin-Mangel trat in Europa erstmals nach der Einführung von Mais aus Süd- und Mittelamerika nach Spanien auf. Mais enthält Niacin in Form von Niacytin und ist zudem Tryptophan-arm (7 Vorkommen). Wie bei Vitaminmangelzuständen, die durch eine allgemeine Fehlernährung gekennzeichnet sind, ist auch Niacinmangel mit dem anderer Vitamine (Thiamin, Riboflavin und Pyridoxin) vergesellschaftet. Auch Alkoholismus kann durch Fehlernährung zu Pellagra führen. . Abb. 23.21. Bildung von cyclo-ADP-Ribose aus NAD+. (Einzelheiten 7 Text)

703 23.3 · Wasserlösliche Vitamine

. Abb. 23.22. Pyridoxol, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie das Coenzym Pyridoxalphosphat. Wegen der leicht basischen Natur des

23.3.5

Vitamin B6

! Das vom Pyridoxin abgeleitete Pyridoxalphosphat ist das zentrale Coenzym des Aminosäurestoffwechsels.

Chemische Struktur. Vitamin B6 beschreibt 3-Hydroxy-

2-Methylpyridin Derivate mit der biologischen Aktivität von Pyridoxin. Zur Vitamin B6 Gruppe gehören Pyridoxol (Pyridoxin, Alkohol), Pyridoxamin (Amin) und Pyridoxal (Aldehyd) . Abb. 23.22. Vorkommen. In hoher Konzentration ist das Vitamin in Hefe, Weizen, Mais, Fisch, Leber und in etwas geringerer in Milch, Eiern und grünen Gemüsen enthalten. Stoffwechsel. Resorbiertes Pyridoxol und Pyridoxal werden im Blut zu den Geweben transportiert und dort durch die ATP-abhängige Pyridoxalkinase zu Pyridoxalphosphat (PALP) phosphoryliert. Zur Ausscheidung mit dem Urin wird Pyridoxal in der Leberzelle durch die Aldehydoxidase (7 Kap. 33.6.1) zur biologisch inaktiven Pyridoxinsäure oxidiert.

Pyrimidinstickstoffs und der leicht sauren der OH-Gruppe kommen die beiden tautomeren Formen des PALP vor

In pyridoxalphosphatabhängigen Enzymen ist Pyridoxalphosphat als Schiff ’sche Base an ein Lysin des Enzyms gebunden. Für die zu katalysierende Reaktion wird das Lysin durch die Aminosäure verdrängt. Die Bindung wird durch eine kationische Gruppe des aktiven Zentrums des Enzyms stabilisiert. Durch die Elektronen anziehende Wirkung des Pyridinstickstoffs (und auch der kationischen Gruppe) kommt es zu Elektronenverschiebungen innerhalb des Coenzym-Substrat-Komplexes, die die Schwächung einzelner Bindungen am D-C-Atom der Aminosäure bewirken. Je nachdem, welche Bindung – in Abhängigkeit vom Enzymprotein – labilisiert wird, werden 4 Transaminierungen 4 Decarboxylierungen 4 Eliminierungen unterschieden (. Abb. 23.23) Eine Auswahl Pyridoxalphosphat-abhängiger Reaktionen ist in . Tabelle 23.10 zusammengefasst. Pyridoxalphosphat ist außerdem Bestandteil der Glycogenphosphorylase (7 Kap. 11.2.2) wo es als Säure-Basen-Katalysator fungiert. Pathobiochemie. Hypovitaminose: Die Symptome des

Biochemische Funktion. Pyridoxalphosphat ist das Coen-

zym des Aminosäurestoffwechsels (7 Kap. 13.6.6,13.6.7).

. Abb. 23.23. Reaktionen am D-C-Atom der an Pyridoxalphosphat gebundenen Aminosäure. a Transaminierung; b Decarboxylierung; c Spaltung der D, E-Bindung (Gruppenübertragung, Eliminierung, Isomerisierung). (Einzelheiten 7 Text)

tierexperimentellen Pyridoxinmangels sind uncharakteristisch und unterscheiden sich von Spezies zu Spezies (Dermatitis, Wachstumsstörungen, Anämien (7 Kap. 23.1.3)). Wegen der weiten Verbreitung von Pyridoxin tritt beim Menschen ein Mangel nur selten auf. Sollte er auftreten, kommt es zu ähnlichen Störungen wie bei Tieren, außerdem zu zentralnervösen Funktionsstörungen (Ataxien, Paresen), die vermutlich mit Störungen des Glutamatstoffwechsels zusammenhängen (pyridoxalphosphatabhängige Decarboxylierung von Glutamat zum Neurotransmitter JAminobutyrat, 7 Kap. 31.3.4). Da einige enzymatische Schritte im Tryptophanabbau Pyridoxin-abhängig sind, können verschiedene Zwischen- und Nebenprodukte des Tryptophanabbaus beim Pyridoxinmangel vermehrt im Urin nachgewiesen werden (. Tabelle 23.3). Bei Behandlung der Tuberkulose mit Isonicotinsäurehydrazid (INH) muss gleichzeitig Pyridoxin verabreicht werden, da INH als Pyridoxinantagonist wirkt.

23

704

Kapitel 23 · Vitamine

. Tabelle 23.10. Pyridoxalphosphat-abhängige Enzyme

23

Enzym

Reaktion

Aminotransferasen

Austausch einer Aminogruppe gegen eine Ketogruppe in Aminosäuren

Aminosäure Decarboxylasen

Synthese biogene Amine (Histamin, Tyramin, Tryptamin) und von Neurotransmittern (Dopamin, Serotonin, γ-Aminobuttersäure)

Aminosäurespaltende Enzyme Serinhydroxymethyltransferase

Bildung von Glycin und einer Hydroxymethylgruppe, die auf Tetrahydrofolsäure übertragen wird, aus Serin

Threoninaldolase

Bildung von Glycin und Acetaldehyd aus Threonin

Kynureninase

Bildung von 3-Hydroxyanthranilsäure aus 3-Hydroxy Kynurenin im Tryptophanabbau

Cystathionin-β-Synthase

Bildung con Cystathionin aus Homocystein und Serin bei der Cysteinsynthese im Transsulfurierungsweg

δ-Aminolävulinsäure-Synthase

Bildung von δ-Aminolävulinsäure aus Succinyl-CoA und Glycin (Hämbiosynthese)

Lysyloxidase

Quervernetzung von Kollagenfibrillen

Serin-Palmityl-Transferase

Bildung von 3-Ketosphinganin in der Biosynthese von Ceramid

Glycogenphosphorylase

Phosphorolytische Spaltung von Glucogen, Bildung von Glucose-1-phosphat

23.3.6

Pantothensäure

! Coenzym A und Fettsäuresynthase enthalten Pantothensäure.

Chemische Struktur. Pantothensäure (. Abb. 23.24) entsteht durch Kondensation von E-Alanin mit 2,4-Dihydroxy-3,3-Dimethylbutyrat (Pantoinsäure). Säuger können Pantoinsäure und E-Alanin nicht miteinander verknüpfen. Vorkommen. Pantothensäure ist fast in allen (daher der Name) pflanzlichen und tierischen Nahrungsmitteln enthalten. Besonders hoch ist die Konzentration in Eigelb, Nieren, Leber und Hefe. Außerdem wird Pantothensäure von Darmbakterien gebildet. Stoffwechsel. Die biologisch aktive Form der Pantothen-

säure ist das Coenzym A, das in der Zelle durch Koppelung mit ATP und Cystein entsteht (. Abb. 23.24). Biochemische Funktion. Die Aktivierung von Metaboliten

erfolgt durch Bindung an die Sulfhydrylgruppe von Coenzym A unter Ausbildung eines Thioesters. Thioester gehören zur Gruppe der sog. energiereichen Verbindungen. Die bei der Hydrolyse von Thioestern auftretende Änderung der freien Enthalpie (7 Kap. 4.1.2) liegt bei 30–42 kJ/ mol und damit im Bereich der Hydrolyseenergie von ATP. Wegen der Bedeutung der Sulfhydrylgruppe des Pantetheinrests für den Umsatz des Coenzyms A, hat es sich eingebürgert, neben CoA auch die Abkürzung CoA-SH zu verwenden. CoA-Verbindungen sind zentrale Metabolite im Intermediärstoffwechsel. 4 Acetyl-CoA, das mit Recht als der Drehpunkt des Intermediärstoffwechsels bezeichnet wird, stellt ein Endprodukt des Kohlenhydrat-, Fett- und Aminosäurestoffwechsels dar

4 Acetyl-CoA ist der Ausgangspunkt für die Biosynthese von Ketonkörpern (7 Kap. 12.2.2) sowie des Cholesterins und anderer Isoprenlipide (7 Kap. 18.3.1) 4 Durch Addition von Acetyl-CoA an Oxalacetat werden Kohlenhydrat-, Fett- und Aminosäurekohlenstoffatome in den Citratzyklus (7 Kap. 14) eingeschleust 4 Acetyl-CoA reagiert mit Cholin unter Bildung von Acetylcholin (7 Kap. 31.3.3) oder mit Arzneimitteln, die zu ihrer Ausscheidung acetyliert werden müssen (7 Kap. 33.3.1) 4 Succinyl-CoA, eine weitere wichtige Zwischenstufe im Citratzyklus, reagiert mit Glycin zum G-Aminolävulinat, dem ersten Zwischenprodukt der Hämbiosynthese (7 Kap. 20.1.2). Aus diesem Grund findet sich bei Pantothensäuremangel im Tierversuch häufig eine Anämie 4 Im Lipidstoffwechsel (7 Kap. 12.2.1) ist CoA unabdinglich für die Aktivierung der Fettsäuren durch Bildung des entsprechenden Acyl-CoA-Derivats, dem ersten Schritt in der Fettsäureoxidation 4 In der E-Oxidation wird die Abtrennung von Acetylresten durch thiolytische Spaltung mit Hilfe von Coenzym A bewirkt (7 Kap. 12.2.1) 4 Bei der Fettsäurebiosynthese ist Pantothensäure in proteingebundener Form Bestandteil des Acyl-CarrierProteins (7 Kap. 12.2.3) Weitere Funktionen umfassen: 4 die Acetylierung von Proteinen, wobei besonders die Acetylierung von Histonen, die bei der Regulation von Genaktivitäten eine wichtige Rolle spielt, zu nennen ist, und die 4 Acylierung von Proteinen mit z. B. Palmitinsäure, über die Signalproteine an der Zellmembran verankert werden, Membranrezeptoren reguliert werden oder eine Neuordnung des Cytoskeletts nach Stimulierung bewerkstelligt wird

705 23.3 · Wasserlösliche Vitamine

Somit übernimmt Pantothensäure nicht nur Funktionen im Metabolismus von Zellen, sondern ist auch an der Regulation von Wachstum und Differenzierung beteiligt.

23.3.7

Biotin

! Biotin wird ATP-abhängig carboxyliert und dient als Überträger von Carboxylgruppen durch Carboxylasen.

Chemische Struktur. Biotin ist formal eine Verbindung aus

Harnstoff und einem mit Valeriansäure substituierten Thiophanring (. Abb. 23.25). Vorkommen. Besonders biotinreich sind Leber, Niere, Ei-

gelb und Hefe. Stoffwechsel. Biotin ist covalent in einer Säureamidbin-

dung an die H-Aminogruppe eines Lysylrests an Enzymproteine gebunden. Über die Nahrung gelangt es als Biotinen-

. Abb. 23.24. Biosynthese von Coenzym A aus Pantothensäure

. Abb. 23.25. Biotin und seine Funktion als Coenzym bei Carboxylierungen

23

706

Kapitel 23 · Vitamine

. Abb. 23.26. Der Biotin-Zyklus. (Einzelheiten 7 Text)

23

zym oder nach proteolytischem Abbau desselben als Biocytin (H-N-Biotinyllysin) in den Gastrointestinaltrakt. Dort wird Biotin über die Biotinidase freigesetzt und wahrscheinlich über Natrium-abhängige Multivitamin Transporter (SMVT, sodium dependent multivitamin transporter) oder über ›solute carrier‹ (SLC) resorbiert. Intrazellulär wird Biotin an die entsprechenden Biotin-abhängigen Carboxylasen gebunden. Das hierfür zuständige Enzym ist die Holocarboxylase Synthetase. Durch proteolytischen Abbau entsteht wieder Biocytin, das von der intrazellulären Biotinidase gespalten wird (. Abb. 23.26).

synthese (7 Kap. 12.2.3), letztere gehört zu den sog. anaplerotischen Reaktionen des Citratzyklus (7 Kap. 14.4). In dieser Reaktion wird aus Pyruvat Oxalacetat gebildet, um ausreichende Mengen des Kondensationspartners von Acetyl-CoA zur Citratbildung zur Verfügung zu stellen. Über die Beziehungen der Pyruvatcarboxylasereaktion mit der Gluconeogenese (7 Kap. 11.3). Die Propionyl-CoA-Carboxylase wird beim Abbau ungeradzahliger Fettsäuren und verzweigtkettiger Aminosäuren benötigt, die Methylcrotonyl-CoA-Carboxylase beim Leucinabbau. Pathobiochemie. Hypovitaminose: Ein ernährungsbe-

Biochemische Funktion. Biotin ist das Coenzym für vier

Carboxylasen des Menschen. Es bindet ATP-abhängig eine Carboxylgruppe in Form von HCO3– und überträgt diese auf die zu carboxylierenden Substrate (. Abb. 23.25). Die vier Carboxylasen sind: 4 Acetyl-CoA-Carboxylase (7 Kap. 12.2.3) 4 Pyruvatcarboxylase (7 Kap. 11.3) 4 Propionyl-CoA-Carboxylase (7 Kap. 12.2.1) und 4 Methylcrotonyl-CoA-Carboxylase Davon besitzen beim Warmblüter die quantitativ größte Bedeutung die Acetyl-CoA-Carboxylase und die Pyruvatcarboxylase. Erstere ist die Startreaktion zur Fettsäurebio-

dingter Biotinmangel beim Menschen ist selten, da die Darmbakterien substantielle Mengen Biotin synthetisieren, die aber nicht bedarfsdeckend sind. Nur bei biotinarmer Ernährung mit medikamentöser Stilllegung der Darmflora, z. B. mit Antibiotika, kommt es zu einem Biotinmangel, dessen Symptome in Dermatitiden, Haarausfall, nervösen Störungen und EKG-Veränderungen bestehen. Ein ähnliches Krankheitsbild kann durch Aufnahme größerer Mengen von rohem Hühnereiweiß erzeugt werden. Dieses enthält das Glycoprotein Avidin, das Biotin mit hoher Affinität bindet und biotinkatalysierte Reaktionen hemmt. Genetische Defekte der Holocarboxylase Synthetase oder der Biotinidase führen zu schwerem Biotinmangel

707 23.3 · Wasserlösliche Vitamine

(multipler juveniler Carboxylasemangel), der sich in Methylcrotonylglycinurie, Hautausschlägen, Haarausfall, Muskelschwäche, Entwicklungsrückstand, progressiven neurologischen Symptomen, schweren Azidosen und Krämpfen äußert und der ohne lebenslange Supplementierung mit sehr hohen Dosen Biotin zum Tod führt.

23.3.8

Folsäure

! Folsäure ist das Coenzym für Ein-Kohlenstoffübertragungen.

Chemische Struktur. Folsäure (Pteroylpolyglutamat) ist aus einem Pteridinkern, p-Aminobenzoesäure und L-Glutamat aufgebaut (. Abb. 23.27). In der Nahrung kommen unterschiedliche Formen vor, die sich lediglich in der Anzahl der Glutamylreste, die am Pteridin-p-Aminobenzoesäure-Komplex angeheftet sind, unterscheiden. Vorkommen. Besonders reich an Folsäure sind dunkelgrünes Blattgemüse (lat. folium, das Blatt), Avocados, Bohnen, Spargel, Weizenkeimöl, Leber, Nieren und Hefe. Stoffwechsel. Mikroorganismen bilden Pteroylmonoglutamat aus p-Aminobenzoesäure, Glutamat und dem Pteridinring (. Abb. 23.27). Die antibakterielle Wirkung von Sulfonamiden beruht auf der kompetitiven Hemmung des Einbaus von p-Aminobenzoesäure. Damit kommt die Folsäurebiosynthese pathogener Mikroorganismen zum Erliegen. Mit der Nahrung aufgenommene Folsäure wird über den SLC 19A1 in den Enterozyten resorbiert und im Plasma in Bindung an Folsäure-bindende Proteine transportiert. Die Aufnahme in die Zellen wird durch einen spezifischen Transporter vermittelt, dessen geringe Affinität für Folsäure durch Interaktion mit einem Folatrezeptor, welcher mit Hilfe eines Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-Ankers in die Plasmamembran eingebaut ist, deutlich gesteigert wird. Die biologisch aktive Form der Folsäure ist die Tetrahydrofolsäure (THF), die durch Reduktion der Folsäure zu Dihydrofolsäure und anschließend zu Tetrahydrofolsäure mit Hilfe der NADPH/H+-abhängigen Folatreduktase bzw. Dihydrofolatreduktase entsteht (. Abb. 23.27). Biochemische Funktion. Die Vitamine der Folsäuregruppe sind die Coenzyme für Übertragungen von C1-Gruppen (Methyl-, Formyl-, Formiat-, Hydroxymethylreste). Träger der C1-Gruppen sind die N-Atome in Position5 bzw. 10 des Pteroylrests (. Abb. 23.28). Durch Dehydrogenase- bzw. Isomerasereaktionen können die 1-Kohlenstoffreste ineinander überführt werden. . Abbildung 23.28 gibt gleichzeitig darüber Aufschluss, aus welchen Quellen die 1-Kohlenstoffreste stammen und welche weiteren Reak-

. Abb. 23.27. Die Bildung von Tetrahydrofolat aus Folat

tionsmöglichkeiten ihnen im Intermediärstoffwechsel zur Verfügung stehen. Herkunft der C1-Gruppen: Folsäure übernimmt und überträgt C1-Gruppen unterschiedlicher Oxidationsstufen. Die höchste Oxidationsstufe hat Formiat, das als N5-Formyl-, N10-Formyl-, N5-Formimino- oder N5, N10-Methenyl-Rest an die Tetrahydrofolsäure gebunden ist. Die nächst niedrigere Oxidationsstufe ist die des Formaldehyd in der N5, N10-Methylen-THF, die niedrigste ist die Stufe des Methanol in der N5-Methyl-THF. Formiat kann ATP-abhängig über die Formyl-THF-Synthetase direkt an Tetrahydrofolsäure angelagert werden. Da der Formiatspiegel in der Zelle gering ist, hat diese Reaktion unter physiologischen Bedingungen jedoch nur geringe Bedeutung. Wichtiger ist die Bildung von N5, N10-Methylen-THF durch Übertragung des E-Kohlenstoffs des Serins als Hydroxymethylgruppe (7 Kap. 13.5.4, 13.6.2). Sehr wahrscheinlich erfolgt zunächst eine Anlagerung der Hydroxymethylgruppe an N5 gefolgt von einer intramolekularen Wasserabspaltung, sodass die reaktionsfreudige N5, N10-Methylenkonfiguration entsteht. In ähnlicher Weise werden die Methylgruppen von Methionin, Cholin und Thymin nach Oxidation zur Hydroxymethylgruppe in die Tetrahydrofolsäure eingebaut. Die beim Histidinabbau entstehende Formiminogruppe von Formiminoglutamat wird als N5-Formimino-THF eingebaut,

23

708

Kapitel 23 · Vitamine

23

. Abb. 23.28. Funktion der Tetrahydrofolsäure als Coenzym bei Übertragungen von 1-Kohlenstoffresten. (Einzelheiten 7 Text)

zum N5-Formyl-THF desaminiert und danach in N5, N10Methylen-THF umgewandelt. Schicksal der 1-Kohlenstoffreste: N10-Formyl-THF ist Kohlenstofflieferant für die C-Atome 2 und 8 des Purinkerns (7 Kap. 19.1.1). Außerdem stellt es die Formylgruppe der N-Formylmethionin-tRNA, die bei Prokaryonten die Biosynthese von Proteinen startet. N5, N10-Methylen-THF

liefert den Kohlenstoff für die Methylgruppen von Thymin und Hydroxymethylcytosin, sowie den E-Kohlenstoff des Serins bei der Umwandlung von Glycin in Serin (7 Kap. 13.6.2). In einer NAD+-abhängigen Reaktion wird N5, N10Methylen-THF irreversibel durch die N5,N10-MethylenTHF-Reduktase zu N5-Methyl-THF reduziert. Die Methylgruppe von N5-Methyl-THF wird für die Cholinbiosyn-

709 23.3 · Wasserlösliche Vitamine

these benötigt und bei der Methioninbiosynthese auf Homocystein übertragen (7 Kap. 13.6.2). Letztere Reaktion ist Vitamin B12 abhängig. Methionin wird in S-Adenosylmethionin (SAM) eingebaut, als welches es wie THF als Methylgruppendonor fungiert. SAM hemmt die N5,N10-Methylen-THF-Reduktase. Bei Vitamin B12 Mangel kann N5-Methyl-THF nicht zu THF demethyliert werden. Gleichzeitig wird wenig SAM gebildet, sodass eine Hemmung der N5,N10-Methylen-THF-Reduktase unterbleibt. Es kommt zu ungehinderter Synthese von N5-Methyl-THF, das nicht weiter verstoffwechselt werden kann. So kann es trotz Folsäurezufuhr bei Vitamin B12-Mangel zu einem funktionellen Folsäuremangel kommen. Das Phänomen der Anhäufung von N5-Methyl-THF nennt man auch ›Methylfalle‹. Pathobiochemie. Hypovitaminose: Die Essentialität der Folsäure für die Biosynthese von Purinen und Pyrimidinen wird besonders beim Wachstum und bei der Zellteilung deutlich. Da die blutbildenden Zellen des Knochenmarks eine besonders hohe Teilungsrate haben, sind Störungen des Blutbilds ein frühes Zeichen des Folsäuremangels. Bei länger dauerndem Mangel kommt es zu einer generellen Störung des Zellstoffwechsels. Es ist nicht nur die Nucleinsäuresynthese, sondern auch der Phospholipidstoffwechsel (Cholinbiosynthese) und der Aminosäurestoffwechsel beeinträchtigt. Beim Menschen tritt ein im Blutbild nachweisbarer Folsäuremangel (megaloblastäre Anämie) dann auf, wenn über 6 Monate weniger als 5 μg Folsäure/Tag zugeführt werden. Eine gleichartige Symptomatik zeigt sich auch beim Cobalaminmangel (7 Kap. 23.3.9), die jedoch nur durch Gaben von Cobalamin und nicht durch Folsäure behoben werden kann. Deswegen sollte bei megaloblastären Anämien grundsätzlich der Folsäure- und der Cobalaminspiegel des Serums gemessen werden. Eine Behandlung dieser Anämien nur durch Folsäure würde die durch gleichzeitigen B12-Mangel verursachten neurologischen Schäden irreversibel machen (7 Kap. 23.3.9). Im Histidinbelastungstest kann eine gesteigerte Ausscheidung von Formiminoglutaminsäure im Urin als Folge eines Folsäuremangels nachgewiesen werden (7 o.) (. Tabelle 23.3). Medikamentös kann Folsäuremangel durch Folsäureantagonisten hervorgerufen werden. Durch Substitution der Hydroxylgruppe an Position 4 des Pteridinkerns der Folsäure durch eine Aminogruppe entsteht die 4-Aminofolsäure, das Aminopterin. Wird gleichzeitig an Stellung 10 methyliert, kommt man zum Amethopterin (. Abb. 19.12). Beide Verbindungen wirken als Antivitamine, da sie durch Hemmung der Dihydrofolatreduktase die Bildung von Tetrahydrofolat aus Folsäure blockieren. Durch beide Folsäureantagonisten kommt es zu einer Konzentrationsabnahme besonders von N5,N10-MethylenTHF. Dadurch werden die Biosynthesen von Purin- und Pyrimidinnucleotiden schwer beeinträchtigt (7 Kap. 19.1.1, 11.1.3).

Amethopterin (Methotrexat) ist ein besonders effektiver Hemmstoff der Dihydrofolatreduktase. Deshalb wird Amethopterin als Cytostaticum bei diversen Karzinomen und Sarkomen verwendet. Täglicher Bedarf. Der Folsäuremangel ist der am weitesten

verbreitete Vitaminmangel in Nordamerika und Europa. Besonders Frauen mit Kinderwunsch sollten auf ihren Folsäurestatus achten, da ein Mangel Neuralrohrdefekte bei Neugeborenen zur Folge hat. Häufig kann der Bedarf nicht durch die Nahrung gedeckt werden. Folsäuremangel tritt außerdem bei Alkoholismus, hämolytischer Anämie, tropischer und nichttropischer Sprue sowie bei malignen Erkrankungen auf. Der tägliche Bedarf wird mit 400 μg Folsäure angegeben, während der Schwangerschaft sollten es 600 μg/Tag sein.

23.3.9

Vitamin B12

! Vitamin B12 (Cobalamin) wird für intramolekulare Umlagerung von Alkylresten sowie für die Methylierung von Homocystein benötigt.

Chemische Struktur. Der innere Teil des Cobalamin-(Vitamin-B12-) Moleküls (. Abb. 23.29) besteht aus vier reduzierten und voll substituierten Pyrrolringen, die um ein zentrales Kobaltion gelagert sind, das koordinativ an die Stickstoffatome der Pyrrolringe gebunden ist (CorrinRingsystem). Cobalamin ist der einzige Naturstoff, in dem Kobalt (Name!) bisher nachgewiesen wurde. Im Gegensatz zu den ähnlich aufgebauten Porphyrinen (7 Kap. 22.1.2) sind zwei der Pyrrolringe (I und IV) direkt und nicht durch einen Methinkohlenstoff verbunden. Cobalamin enthält weiterhin ein 5,6-Dimethylbenzimidazol-Ribonucleotid, das über Aminoisopropanol an eine eine Seitenkette des Rings IV gebunden ist. Von dort bildet es eine Brücke zur 5. Koordinationsstelle des Kobaltions. Die 6. Koordinationsstelle kann mit verschiedenen Resten (R) substituiert sein (. Abb. 23.29). Im 5-Desoxyadenosylcobalmin ist der 5-Desoxyadenosylrest (Ado) covalent über das C5-Atom der Desoxyribose an das Kobalt gebunden. Dies ist eine der nur 2 bekannten Kohlenstoff-Metallbindung in der Biologie. Vorkommen. Die besten Quellen für die Versorgung des Menschen mit Cobalamin sind tierische Lebensmittel. Nur Mikroorganismen, zu denen auch die Bakterien der Darmflora gehören, können dieses Vitamin synthetisieren. Eine besonders hohe Vitamin B12-Konzentration findet sich im Pansen von Wiederkäuern, was wahrscheinlich auf den dort vorhandenen Bakterienreichtum zurückzuführen ist. Auch die Leber von Wiederkäuern ist wesentlich reicher an Cobalamin als die von Nichtwiederkäuern.

23

710

Kapitel 23 · Vitamine

im Blutplasma verantwortlich ist. Die Aufnahme von Transcobalamin II-gebundenem Cobalamin in periphere Zellen geschieht über einen weiteren spezifischen Rezeptor ebenfalls durch Endozytose des Komplexes. Transcobalamin II wird lysosomal abgebaut. Das freigesetzte Cobalamin wird im Cytosol in Methylcobalamin oder in den Mitochondrien in 5c-Desoxyadenosylcobalamin umgewandelt.

23

Biochemische Funktion. In Abhängigkeit vom Rest R (.Abb. 23.29) unterscheidet man zwei Coenzymformen des Cobalamins, 4 das 5c-Desoxyadenosylcobalamin und 4 das Methylcobalamin

. Abb. 23.29. Struktur von Cobalamin (Vitamin B12)

Stoffwechsel. In der Nahrung liegt Cobalamin in proteingebundener Form vor. Durch proteolytische Prozesse im Magen und vor allem im Duodenum wird es freigesetzt und bindet an ein von den Belegzellen der Magenschleimhaut gebildetes, speziesspezifisches Glycoprotein mit einem Molekulargewicht von etwa 50 kD, das als intrinsic factor (IF) bezeichnet wird. Das Protein weist einen hohen Neuraminsäuregehalt auf, der es vor dem Abbau durch Pankreasenzyme schützt. Im Gegensatz zu den übrigen Nahrungsbestandteilen erfolgt die Resorption des Cobalamins im unteren Ileum. Die dort lokalisierten Enterozyten enthalten einen spezifischen Rezeptor der den Cobalamin-intrinsicfactor-Komplex bindet, was dessen Endozytose auslöst. In Lysosomen erfolgt die Trennung vom Rezeptor sowie der proteolytische Abbau des intrinsic factors. Freies Cobalamin wird an ein zweites Transportprotein gebunden, das Transcobalamin II, welches für den Transport von Cobalamin

Die Biosynthese des 5c-Desoxyadenosylcobalamins erfolgt in einer zweistufigen Reaktion: Zuerst wird Kobalt FADund NAD+-abhängig in die 1-wertige Form reduziert, danach die aus ATP stammende 5c-Desoxyadenosylgruppe gebunden, wobei die drei Phosphatgruppen des ATP in Form von anorganischem Trimetaphosphat freigesetzt werden. Eine katalytische Funktion des 5c-Desoxyadenosylcobalamins ist die intramolekulare Umlagerung von Alkylresten wie z. B. die Isomerisierung von MethylmalonylCoA zu Succinyl-CoA beim Abbau ungeradzahliger Fettsäuren (7 Kap. 12.2.1). Diese Reaktion erfolgt über einen Mechanismus, der die Bildung freier Radikale einschließt (. Abb. 23.30). Die Reaktion beginnt mit einer homolytischen Spaltung des 5c-Desoxyadenosylrests vom Co3+. Es entsteht Co2+ und ein 5c-Desoxyadenosyl-Radikal (AdoRadikal). Dieses abstrahiert ein H-Atom von der Methylgruppe des Methylmalonyl CoA. Das entstehende Radikal greift das C-Atom der Thioestergruppe an, es entsteht ein indermediäres Radikal am Sauerstoff der Thioestergruppe. Die Bindung zwischen dem D- und E-C-Atom des Malonylteils löst sich, es entsteht das Succinyl-Gerüst. Danach wird wieder das Ado-Radikal gebildet, das mit dem Co2+ reagiert, das Co3+-Ado ist regeneriert. Die Rolle des 5c-Deoxyadenosylrests ist somit die eines Generators, eines Radikals in der Mutase-Reaktion. Bei Cobalaminmangel wird Methylmalonyl-CoA zu Methylmalonsäure hydrolysiert und mit dem Urin ausgeschieden. Die Ausscheidung dieser Säure ist deshalb ein empfindlicher Indikator eines Cobalaminmangels (. Tabelle 23.3). Methylcobalamin ist an der folatabhängigen Remethylierung von Homocystein zu Methionin (Verknüpfung von Folat- und Cobalaminstoffwechsel!, 7 Kap. 23.3.8, 13.6.2), beteiligt. Pathobiochemie. Länger dauernder Cobalaminmangel führt zu perniziöser oder megaloblastärer Anämie (7 Kap. 23.3.8). Der Mangelzustand wird dabei seltener durch einseitige Ernährung (wobei Veganer eher betroffen sind als Vegetarier) ausgelöst. Seine häufigsten Ursachen sind eine verminderte Resorption bei Erkrankungen der Dünndarmmukosa (z. B. Sprue, 7 Kap. 33.2.7) oder eine fehlende

711 23.4 · Vitaminähnliche Substanzen

Darüber hinaus sind eine Reihe hereditärer Störungen des Cobalamin-Transports und intrazellulären Stoffwechsels beschrieben worden, die ebenfalls zur Symptomatik der perniziösen Anämie führen. Die Störungen können dabei in allen Schritten des Cobalamin-Stoffwechsels lokalisiert sein, beginnend mit einem Defekt der Bildung von intrinsic factor oder intrinsic factor-Rezeptoren, von Transcobalamin II-Rezeptoren, Störungen der intrazellulären Prozessierung der aufgenommenen Cobalamin-Transportprotein-Komplexe bis zur Methylierung oder Adenosylierung von Cobalamin. Da die Leber beträchtliche Mengen an Cobalamin speichern kann, vergehen meist Jahre bis zur Manifestation des Krankheitsbildes. Hauptsymptome sind Störungen der Erythropoiese sowie eine Leuko- und Thrombozytopenie. In vielen Fällen treten neurologische Störungen des peripheren und zentralen Nervensystems vor den hämatologischen Veränderungen auf. Es kommt zu funiculärer Myelose, einer herdförmigen Entmarkung der Hinterstrangund Pyramidenbahnen mit ataktisch spastischen Störungen und zu ähnlichen Polyneuropathien an peripheren Nerven. Diese Störungen sind eine Folge der durch den Vitaminmangel ausgelösten Verminderung der Cholin- und damit Phospholipidsynthese sowie der Nucleinsäurebiosynthese. . Abb. 23.30. Postulierter Radikalischer Mechanismus der Vitamin B12-katalysierten Methylmalonyl-CoA-Isomerisierung in der Methylmalonyl-CoA-Mutase-Reaktion. Co3+-Ado = 5c-Desoxyadenosyl-Cobalamin; Ado = 5cDesoxyadenosylrest; Co2+ = Cobalamin mit zweiwertigem Kobaltion (Einzelheiten 7 Text)

oder mangelhafte Sekretion des für die Resorption unerlässlichen intrinsic factor. Diese kommt bei Erkrankungen der Magenschleimhaut, nach Gastrektomie sowie im Gefolge spezifischer Autoimmunerkrankungen vor.

23.4

Vitaminähnliche Substanzen

Außer den eigentlichen Vitaminen gibt es noch einige vitaminähnliche Wirkstoffe, über deren Vitamincharakter, d. h. Biosyntheseweg bzw. Fähigkeit der menschlichen Zelle zur Biosynthese des betreffenden Stoffes, noch keine Klarheit existiert. Dazu zählt man Inositol, Cholin, Carnitin, Ubichinone, Flavonoide und die Liponsäure.

In Kürze Mit Ausnahme von Ascorbinsäure und Thiamin werden alle wasserlöslichen Vitamine nach Überführung in die jeweils biologisch aktive Form als Gruppen-übertragende Coenzyme verwendet. Übertragene Gruppen sind 5 Wasserstoff (Niacin und Riboflavin) 5 CO2 (Biotin) 5 Acyl-Reste (Pantothensäure) und 5 C1-Gruppen (Folsäure, Vitamin B12)

Thiamin ist als Coenzym der oxidativen Decarboxylierung von D-Ketosäuren beteiligt. Ascorbinsäure ist ein effizientes Reduktionsmittel und hält Eisen- bzw. Kupferionen in Enzymen in der für die Katalyse notwendigen reduzierten Form.

23

712

Kapitel 23 · Vitamine

Literatur

23

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VI

VI Stoffwechsel des Organismus: spezifische Gewebe 24

Binde- und Stützgewebe – 715 Rainer Deutzmann, Leena Bruckner-Tuderman, Peter Bruckner

25

Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion – 755 Peter C. Heinrich, Serge Haan, Heike M. Hermanns, Georg Löffler, Gerhard Müller-Newen, Fred Schaper

26

Die schnelle Stoffwechselregulation – 809 Harald Staiger, Norbert Stefan, Monika Kellerer, Hans-Ulrich Häring

27

Hypothalamisch-hypophysäres System und Zielgewebe – 841 Josef Köhrle, Petro E. Petrides

28

Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

– 893

Armin Kurtz

29

Blut

– 951

Petro E. Petrides

30

Muskelgewebe

– 1001

Dieter O. Fürst, Matthias Gautel, Petro E. Petrides

31

Nervensystem

– 1023

Astrid Scheschonka, Heinrich Betz, Cord-Michael Becker

32

Gastrointestinaltrakt – 1053 Georg Löffler, Joachim Mössner

33

Leber

– 1083

Dieter Häussinger, Georg Löffler

34

Immunsystem

– 1103

Siegfried Ansorge

35

Tumorgewebe Petro E. Petrides

– 1141

24 24

Binde- und Stützgewebe Rainer Deutzmann, Leena Bruckner-Tuderman, Peter Bruckner

24.1

Zusammensetzung der extrazellulären Matrix (ECM)

24.2

Kollagene – 716

24.2.1 24.2.2 24.2.3

Fibrilläre Kollagene – 716 Nichtfibrilläre Kollagene – 722 Angeborene Erkrankungen des Kollagen-Stoffwechsels – 723

24.3

Elastische Fasern – 724

24.4

Proteoglykane – 727

24.4.1 24.4.2 24.4.3

Aggrecan – 728 Kleine leucinreiche Proteoglykane – 728 Membrangebundene Proteoglykane – 729

24.5

Nichtkollagene, zelladhäsive Glycoproteine – 730

24.5.1 24.5.2 24.5.3

Fibronectin – 731 Laminine – 732 Integrine – 733

24.6

Abbau der extrazellulären Matrix – 736

24.7

Biochemie und Pathobiochemie des Skelettsystems – 737

24.7.1 24.7.2

24.7.7

Die extrazelluläre Matrix von Knorpel und Knochen – 737 Synthese von Knochen und Knorpel durch Chondrozyten und Osteoblasten – 738 Differenzierung von Osteoklasten und Abbau und Umbau von Knochen und Knorpel – 742 Regulation des Knochenwachstums bis zur Pubertät – 744 Homöostase des Skelettsystems – 744 Osteoporose und Regulation des Knochenumbaus durch Cytokine und Steroidhormone – 745 Knochenerkrankungen – 746

24.8

Biochemie der Haut – 747

24.8.1 24.8.2 24.8.3 24.8.4 24.8.5

Aufbau und Funktionen der Haut – 747 Die Epidermis – 748 Die dermo-epidermale Junktionszone – 749 Die Dermis – 749 Pathobiochemie der Haut – 751

24.7.3 24.7.4 24.7.5 24.7.6

Literatur

– 754

– 716

716

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

> > Einleitung

24

Das Bindegewebe durchzieht den gesamten Organismus. Um den vielfältigen Aufgaben als Gerüst- und Stützsubstanz gerecht zu werden, kommt es in den unterschiedlichsten Ausprägungen vor. Dazu gehören feste Strukturen wie Knorpel, Sehnen und Bänder, aber auch das aus locker gepackten fibrillären Strukturen bestehende interstitielle Bindegewebe, das den Extrazellulärraum ausfüllt und Organe umgibt. Das Bindegewebe ist aber weit mehr als nur das strukturgebende Element des Körpers. Eine Vielzahl von extrazellulären Matrix-Molekülen binden über spezifische Rezeptoren an Zellen und beeinflussen Wachstum, Differenzierung und Funktion fast aller Zellen des Körpers. Eindrucksvoll konnte dies an Mäusen gezeigt werden, bei denen Rezeptoren oder deren extrazelluläre Liganden inaktiviert waren. Im Extremfall kam es nicht einmal zur Ausbildung des zweiblättrigen Keimblatts. Aufgrund des komplexen Aufbaus und der ubiquitären Verteilung ist das Bindegewebe an zahlreichen Krankheiten beteiligt. Dazu gehören angeborene Störungen, die auf Defekten in Genen für Strukturproteine oder Zelladhäsionsmoleküle beruhen. Darüber hinaus spielt das Bindegewebe eine entscheidende Rolle bei vielen atrophisierenden und fibrosierenden Prozessen. Pathologische Veränderungen treten bei entzündlichen Reaktionen wie den rheumatischen Erkrankungen auf. Auch die Metastasierung von Tumoren wird vom Bindegewebe beeinflusst.

24.1

Zusammensetzung der extrazellulären Matrix (ECM)

Die verschiedenen Formen des Bindegewebes leiten sich vom embryonalen Bindegewebe, dem Mesenchym ab. Die Bindegewebszellen im engeren Sinne sind die Fibroblasten/ Fibrozyten. Abkömmlinge sind die Chondroblasten/ Chondrozyten des Knorpels und die Osteoblasten/Osteozyten des Knochens. Diese Zelltypen synthetisieren den größten Teil der extrazellulären Matrix, jedoch produzieren auch Epithel- und Endothelzellen sowie glatte Muskelzellen eine Reihe von extrazellulären Matrix-Molekülen, insbesondere die meisten Bestandteile der Basalmembran. Die von den verschiedenen Zelltypen sezernierten Proteine können in vier Gruppen eingeteilt werden: 4 Kollagene. Sie stellen quantitativ die bedeutendsten Proteine des Organismus dar und sind die strukturgebenden Proteine von Haut, Sehnen, Bändern sowie der organischen Grundsubstanz von Hartgeweben und der Basalmembranen 4 Elastin. Dieses Protein verleiht Strukturen elastische Eigenschaften, z.B. in der Aortenwand 4 Proteoglykane. Diese Proteinklasse ist wesentlich durch ihren Kohlenhydratanteil definiert. Durch Anheften von sauren repetitiven Disaccharid-Einheiten (7 Kap. 2.1.4) stellen sie Polyanionen dar und sind sowohl für die Schaffung von elastischen wassergefüllten Kompartimenten (z.B. Knorpel) notwendig als auch für die Regulation der Kollagenfibrillen-Bildung. Proteoglykane sind als Zelloberflächen-assoziierte Co-Rezeptoren essentiell (z.B. Kooperation von Syndecanen mit Integrinen, Beteiligung verschiedener Heparansulfatproteoglykane an Bindung/RezeptorPräsentation von Wnt und Hedgehog, FGF-α TGFEProteinen) 4 nichtkollagene Glycoproteine. Die Gruppe der nichtkollagenen Glycoproteine umfasst eine Vielzahl von Molekülen, die für die Zellfunktion essentiell sind. Die

bekanntesten Moleküle dieser Gruppe sind die Laminine und das Fibronectin

24.2

Kollagene

! Kollagene sind Moleküle, die aus Polypeptidketten mit vielfach wiederholten Gly-X-Y-Sequenzmotiven bestehen, die sich zu tripelhelicalen Strukturen zusammenlagern. Durch Kombination von tripelhelicalen und globulären Domänen entsteht eine Vielzahl von Proteinen mit unterschiedlichen Eigenschaften.

Das gemeinsame Strukturmerkmal aller Kollagene sind starre stabförmige Abschnitte, die eine tripelhelicale Konformation (7 Kap. 3.3.2) besitzen. Diese Konformation ist durch monoton wiederholte Triplet Sequenzen aus Gly-XY bedingt, wobei X und Y häufig Prolin und Hydroxyprolin sind. Ferner tritt in Y-Position bisweilen das für Quervernetzungen wichtige Hydroxylysin auf (7 u.). Zur Zeit sind wenigstens 40 verschiedene Kollagenketten sequenziert, die zu 27 distinkten trimeren Kollagenmolekülen assemblieren können. Dabei unterscheiden sich die einzelnen Kollagentypen strukturell in der Länge der tripelhelicalen Abschnitte, kurzen Unterbrechungen in der Tripelhelix und/oder in der Existenz zusätzlicher globulärer Domänen. Durch die Kombination dieser Module und Merkmale erhalten die Kollagene ihre spezifischen biologischen Eigenschaften. Einige Vertreter der Familie sind in . Tab. 24.1 aufgelistet.

24.2.1

Fibrilläre Kollagene

! Die fibrillären Kollagene sind die Hauptkollagene des Bindegewebes von Haut, Knochen, Knorpel, Sehnen und Bändern und besitzen charakteristische Faserstrukturen.

717 24.2 · Kollagene

. Tabelle 24.1. Kollagen-Typen (Auswahl) und repräsentative Expressionsorte Typ

typische MolekülZusammensetzung

typisches Vorkommen

charakteristische Merkmale

Fibrillen-bildende Kollagene I

[D1(I)]2 D2(I)

Haut, Knochen, Sehnen, Bänder

häufigstes Kollagen, bildet besonders zugfeste Fibrillen

II

[D1(II)]3

Knorpel, Glaskörper

häufigstes Knorpelkollagen

III

[D1(III)]3

dehnbare Gewebe wie Haut, Gefäße

Vorkommen zumeist zusammen mit Typ-I-Kollagen

V

[D1(V)]2D3(V)

Haut, Cornea,

Nebenkomponente, zusammen mit Typ-I-Kollagen exprimiert

XI

D1(XI)D2(XI)D2(XI), [D1(XI)]2D2(V)

Knorpel, Glaskörper

Nebenkomponente, zusammen mit Typ-II-Kollagen exprimiert

flächiges Netzwerk, Hauptstrukturprotein der Basalmembran

Basalmembrankollagene IV

[D1(IV)]2D2(IV)

fast alle Basalmembranen

D3(IV)D4(IV)D,V)

Nierenglomeruli

[D5(IV)]2D6(IV) + [D1(IV)]2D2(IV)

Bowmannsche Kapsel

Multiplexine, Basalmembran-assoziierte Kollagene XV

[D1(XV)]3

XVIII

[D1(XVIII)]3

vor allem vaskuläre und epitheliale Basalmembranen

C-terminales Fragment hemmt Angiogenese C-terminales Fragment (=Endostatin) hemmt Angiogenese, Mutationen führen zur Erblindung

Fibrillen-assoziierte(FACIT) Kollagene D1(IX)D2(IX)D3(IX)

mit Typ II-Kollagen assoziiert

knock-out-Mäuse entwickeln Arthrose

XII

[D1(XII)]3

XIV

[D1(XIV)]3

hauptsächlich mit Typ I-Kollagen assoziiert

Bindung an ECM-Moleküle (Proteogykane), Regulation der Fibrillenbildung / Modifikation der Interaktion zwischen Fibrillen (?)

IX

Netzwerk-bildende Kollagene VIII X

[D1(VIII)2] D2(VIII)

Endothel, Descemet Membran (Auge)

[D1(X)]3

hypertrophierender Knorpel

Bildung hexagonaler Netzwerke

Transmembrankollagene XIII

[D1(XIII)]3

breite Gewebsverteilung

Zell-Zell- und Zell-Matrix-Verankerung

XVII

[D1(XVII)]3

Hemidesmosomen der Haut

Adhäsion von Keratinozyten an die Basalmembran, Mutationen führen zur Epidermolysis bullosa junctionalis

VI

D1(VI)D2(VI)D3(VI)

ubiquitär

bildet Mikrofibrillen

VII

[D1(VII)]3

Anker-Fibrillen

exprimiert an der Dermis-Epidermis-Grenze, Verankerung der Basalmembran im interstitiellen Bindegewebe

Sonstige

Die wichtigsten fibrillären Kollagene sind die in . Tab. 24.1 aufgelisteten »klassischen« Typen I, II, III, V, und XI. Die Aufgabe der fibrillären Kollagene ist die Bildung von festen Fasern, die Druck- oder Zugbelastungen aushalten. Im Elektronenmikroskop lassen sie einen Aufbau aus quer gestreift erscheinenden Fibrillen mit einer Periodizität von 67 nm erkennen (. Abb. 24.1, . Abb. 24.4), jedoch sind Anordnung und Dicke in verschiedenen Geweben recht unterschiedlich (. Abb. 24.1). Die dreidimensionalen Strukturen sind den Anforderungen entsprechend optimiert. In Sehnen z.B., die überwiegend Typ-I-Kollagen enthalten, sind alle Fibrillen parallel angeordnet, sodass sie maximale Stabilität in Richtung einer Zugbelastung besit-

zen, während sie in der Haut (vor allem Typ-I- und Typ-IIIKollagen) kreuz und quer liegen, um eine Dehnung in alle Richtungen zu ermöglichen. Knorpel hingegen besitzt dünnere Fasern (überwiegend Typ-II-Kollagen), die ein dreidimensionales auf Druckbelastung ausgelegtes Netzwerk ausbilden. Diese morphologischen Befunde beruhen auf unterschiedlichen Eigenschaften der Polypetidketten und Zusammenwirken mit Fibrillendicke-regulierenden Proteinen. Die Polypeptidketten der fibrillären Kollagene besitzen homologe Aminosäuresequenzen und nahezu identische Domänen-Strukturen (. Abb. 24.2). Das charakteristische Strukturmerkmal ist eine große zentrale Domäne. Sie be-

24

718

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

nur noch teilweise vorhanden sind. Zusätzlich besitzen die Ketten noch eine Prä-Sequenz zur Translokation ins endoplasmatische Retikulum.

Biosynthese der fibrillären Kollagene am Beispiel von Typ-I-Kollagen ! In der Zelle wird Prokollagen gebildet, das charakteristische Hydroxylierungen von Prolinen und Lysin aufweist.

24

. Abb. 24.1a,b. Transmissionselektronenmikroskopische Aufnahmen. a Kollagen-Mikrofibrillen aus Rattenschwanzsehnen. b Epiphysenknorpel des Hühnerembryos

steht aus einer tripelhelicalen Domäne von 340 Gly-X-Yrepeats in ununterbrochener Reihenfolge, welche von zwei etwa 20 Aminosäuren langen nichttripelhelicalen Telopeptiden flankiert ist. Diese Telopeptide sind für die Ausbildung von Quervernetzungen essentiell. Neu synthetisierte Kollagenmoleküle enthalten noch zusätzliche Domänen an den Enden, das N-Propetid bzw. C-Propeptid, die je nach Kollagentyp im reifen Molekül jedoch nicht mehr oder

. Abb. 24.2. Schematische Darstellung der Struktur der Polypeptidkette von fibrillären Kollagenen am Beispiel der α1(III)-Kette. Die »tripelhelicalen« Bereiche, d.h. die Bereiche, die mit zwei weiteren Kollagenketten eine Tripelhelix ausbilden, sind hellblau dargestellt,

Intrazelluläre Biosyntheseschritte. Die Kollagenketten werden am rauen endoplasmatischen Retikulum (RER) gebildet. Die Synthese erfolgt in das Lumen des RER, wobei die Signalsequenz (Präsequenz) abgespalten wird. Etwa 50% der Proline und einige Prozent der Lysine werden in der Y-Position des Gly-X-Y-Triplets hydroxyliert (. Abb. 24.3a). Untersuchungen haben gezeigt, dass tripelhelicale Abschnitte keine Substrate der Prolyl-Hydroxylase oder Lysyl-Hydroxylase darstellen, sodass diese Modifikationen vor der Faltung zum Prokollagen abgeschlossen sein müssen. Die beiden Propeptide bilden im ER intramolekulare Disulfidbrücken, das C-Propeptid wird zusätzlich noch mit N-glycosidisch gebundenen Zuckerresten derivatisiert. An die hydroxylierten Lysine werden häufig noch O-glycosidisch verknüpfte Disaccharide aus Galactose und Glucose (-O-Gal-Glc) angehängt. Anschließend assemblieren drei Polypeptidketten zum Prokollagen-Molekül. Dieser Prozess wird durch Aneinanderlagerung der C-terminalen Pro-Domänen eingeleitet. Die Struktur dieser Domänen legt fest, ob Homo- oder Heterotrimere gebildet werden, da nur bestimmte Assoziationen stabil sind. Danach faltet sich die Tripel-Helix vom C-terminalen zum N-terminalen Ende hin (. Abb. 24.3a). Das entstehende Prokollagen ist das Endprodukt der intrazellulären Biosyntheseabschnitte. ! Die Hydroxylgruppen der Hydroxyproline bilden Wasserstoffbrücken zwischen den benachbarten Polypeptidketten, sodass die Tripelhelix bei physiologischen Temperaturen stabil ist.

die Spaltstellen für die N- und C-Propeptidasen sind durch Pfeile gekennzeichnet. Die Zahlen geben die Anzahl der Aminosäuren in den einzelnen Domänen an

719 24.2 · Kollagene

. Abb. 24.3a–c. Biosynthese und Sekretion der fibrillären Kollagene. a Intrazelluläre Schritte: 1 cotranslationale Hydroxylierung von Prolin- und Lysin-Resten; 2 Glycosylierung einzelner HydoxylysinReste; 3 Freisetzung der Polypeptidkette mit disulfidverbrückten und N-glycosylierten Propeptiden; 4 Zusammenlagerung dreier Polypeptidketten über die C-Propeptide und Beginn der Tripelhelix-Bildung; 5 Bildung des fertigen tripelhelicalen Prokollagen-Moleküls. b Extrazelluläre Schritte. 1 Abspaltung der Propeptide; 2 Aggregation zu Mikrofibrillen; 3 covalente Quervernetzung. c Schematische Darstellung der Fusion von Kollagen-Molekülen in extrazellulären Kompartimenten des Fibroblasten

falten und daher abgebaut werden. Durch die Hydroxylierung wird der Schmelzpunkt jedoch auf über 40°C heraufgesetzt. Die Hydroxylierung ist Vitamin-C abhängig (7 23.3.1). Das Auftreten von Skorbut bei Vitamin-CMangel ist im Wesentlichen durch das Fehlen von neu gebildetem Kollagen bedingt. Extrazelluläre Biosyntheseschritte. Im Extrazellulärraum,

z.T. in Einbuchtungen der Plasmamembran (. Abb. 24.3c), erfolgt die Abspaltung der N- und C-Propeptide durch die Aminopropeptidase und die Carboxypropeptidase, und die tripelhelicalen Moleküle lagern sich zu langen Fibrillen aneinander (. Abb. 24.3b). ! Die Assemblierung von Kollagen wird durch die charakteristische Verteilung von hydrophoben und polaren geladenen Aminosäuren gelenkt.

Die miteinander wechselwirkenden Aminosäuren sind in vier homologen, je 67 nm langen Regionen (D1–D4) angeordnet (. Abb. 24.4). Daher lagern sich die Moleküle jeweils um 67 nm versetzt (»D-stagger«=67 nm) aneinander, um maximale hydrophobe und elektrostatische Wechselwirkungen mit den Nachbarmolekülen zu erreichen. Diese Anordnung erklärt auch die elektronenmikroskopisch zu beobachtende Querstreifung. In regulären Abständen von 67 nm treten Lücken zwischen aufeinander folgenden Kollagenmolekülen auf, in die der Farbstoff bei Negativstaining eingelagert wird. Die Hydroxylierung ist absolut essentiell für die Strukturfunktion des Kollagens. Kollagene mit wenig Hydroxyprolin, wie sie bei vielen in kaltem Wasser lebenden Organismen vorkommen, besitzen Schmelzpunkte (= Temperatur, bei der sich die Tripelhelix wieder entfaltet) unter 37 °C. Sie würden sich bei der Biosynthese im Menschen also nicht

! Die Kollagenfibrillen werden zur Stabilisierung miteinander quervernetzt.

Die Quervernetzungen bilden sich zwischen Lysinen/ Hydroxylysinen im N-terminalen Telopeptid und dem benachbarten Bereich der Tripelhelix mit entsprechenden

24

720

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

. Abb. 24.4a–c. Zustandekommen der Querstreifung von Kollagen-Fibrillen. a Kollagen-Moleküle lagern sich um je 67 nm versetzt (= D-stagger) aneinander. Dabei entstehen in periodischen Abständen Lücken. b In diese Lücken wird Phosphowolframsäure bei Negativ-Staining eingelagert und bewirkt die Dunkelfärbung der Fibrillen bei Betrachtung im Elektronenmikroskop. c Elektronenmikroskopische Aufnahme mit Negativkontrast

24

. Abb. 24.5a–d. Grundlegende Quervernetzungsreaktionen zwischen Lysin- und Allysin-Resten von Kollagen-Polypeptidketten. a Bildung von Allysin durch Oxidation von Lysinresten in der Peptidkette durch Lysyloxidase b Bildung von Schiff’schen Basen

zwischen H-Aminogruppen von Lysinen und der Aldehyd-Gruppen von Allysinen. c Stabilisierung von Schiff’schen Basen durch AmadoriUmlagerung im Falle einer Quervernetzung zwischen hydroxylierten Lysinen/Allysinen. d Aldol-Kondensation zweier Allysin-Reste

Resten im C-terminalen Telopeptid und dem davor liegenden Teil der Tripelhelix. Voraussetzung für die Ausbildung der Crosslinks ist die Oxidation eines Teils der Lysin/ Hydroxylysinreste zu Allysin (. Abb. 24.5a) durch das kupferabhängige Enzym Lysyloxidase. Im einfachsten Fall kondensiert ein Allysin mit einem Lysin zu einer Schiff ’schen

Base. Durch die Amadori-Umlagerung kann dieses Produkt zu einem nicht mehr säureempfindlichen Produkt umgelagert werden (. Abb. 24.5c). Daneben sind aber auch erheblich kompliziertere Reaktionen beobachtet worden, bei denen drei Aminosäuren unter Ausbildung von Pyridin-Derivaten beteiligt sind.

721 24.2 · Kollagene

! Prokollagen wird in extrazellulären Kompartimenten von Fibroblasten prozessiert und zu Fibrillen aneinander gelagert.

Die intrazellulär synthetisierten Prokollagen-Moleküle werden nicht einfach in den Extrazellulärraum sezerniert, vielmehr findet die Prozessierung und Bildung fibrillärer Segmente in extrazellulären Kompartimenten des Fibroblasten statt. Wie in . Abb. 24.3c angedeutet, reichen Einbuchtungen bis tief in den Fibroblasten hinein. Sekretorische Vakuolen mit Prokollagen fusionieren miteinander und mit der Zellmembran, sodass lange, enge Kanäle entstehen, in denen die Fibrillenbildung abläuft. Im Extrazellulärraum erfolgt dann eine Aneinanderlagerung der fibrillären Segmente, begleitet von Zusammenlagerung zu Bündeln, die gewebsspezifisch zu weiteren Lagen organisiert werden können (. Abb. 24.1).

Dicke und Zusammensetzung von Kollagenfibrillen ! Natürlich vorkommende Fibrillen sind in der Regel Mischfibrillen.

Da die tripelhelicalen Abschnitte der verschiedenen Kollagentypen die gleiche Länge besitzen, können sie in die gleiche Fibrille eingebaut werden. So bestehen Fibrillen der Cornea z.B. aus einer Mischung von Typ-I- und Typ-VKollagen. Sehnen enthalten fast ausschließlich Typ-I-Kollagen, mit geringen Beimischungen der Typen-III und –V, . Abb. 24.6a–d. Kontraktion von Kollagen-Gelen durch Fibroblasten. Fibroblasten wurden in Petrischalen in Kollagen-Gele eingebettet, die vier Fixpunkte aus Polystyrol enthielten. Anfangs zufällig verteilte Kollagenmoleküle werden durch die Fibroblasten ausgerichtet und gebündelt. Die Abbildung zeigt das Fortschreiten der Kontraktion. a Nach 36 Stunden; b nach 48 Stunden; c nach 3 Tagen; d nach 14 Tagen (ein Fixpunkt wurde bei der Kontraktion herausgerissen). (Aus Stopak u. Harris 1982. Stopak D, Harris AK (1982) Connective Tissue Morphogenesis by Fibroblast Traction. Developmental Biol 90:383–398)

während die Fibrillen der Haut aus den Kollagen-Typen-I und –III aufgebaut sind. Knorpel hingegen enthält Mischfibrillen aus Typ–II und Typ-XI. Typ-XI-Kollagen ist zwar nur eine Nebenkomponente (5–10%), aber notwendig, damit sich überhaupt Fibrillen bilden können. ! Wichtige, die Fibrillendicke regulierende Faktoren sind Mischung verschiedener Kollagentypen, Interaktion mit Proteoglykanen und Fibrillen assoziierten (FACIT)Kollagenen.

Die verschiedenen Kollagentypen unterscheiden sich von Hause aus in der maximal erreichbaren Fibrillendicke. Wenigstens teilweise beruht dies darauf, dass bei den Kollagenen Typ-III, Typ-V und Typ-XI die N-terminalen Propeptide nur zum Teil abgespalten werden, und so die Fibrillenbildung sterisch inhibieren. Es konnte außerdem gezeigt werden, dass die Fibrillenbildung durch das kleine Proteoglykan Decorin (7 Kap. 24.4.2) reguliert wird. Die Bedeutung der FACIT-Kollagene wird im nächsten Abschnitt behandelt. ! Fibroblasten können Kollagenfibrillen organisieren.

Werden in einer Petrischale Fibroblasten in einem Netzwerk aus lockeren Kollagen-Molekülen kultiviert, wird dieses Kollagen-Gel bis auf einen kleinen Bruchteil des Ausgangsvolumens kontrahiert (. Abb. 24.6). Fibroblasten können über Integrin-Rezeptoren in der Plasmamembran sezernierte Kollagene binden und bündeln. Solche Prozesse dürften unter anderem auch für die Kontraktion von Wundrändern essentiell sein.

a

b

c

d

24

722

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

24.2.2

Nichtfibrilläre Kollagene

! Die nichtfibrillären Kollagene bilden eine Vielzahl verschiedener Strukturen mit unterschiedlichen Aufgaben.

24

Im Gegensatz zu den fibrillären Kollagenen bilden die übrigen Kollagene eine sehr heterogene Gruppe. Einige Strukturen, die weiter unten noch diskutiert werden, sind in . Abb. 24.7 dargestellt. Die tripelhelicalen Segmente sind von unterschiedlicher Länge und z.T. durch längere nichttripelhelicale Segmente unterbrochen, die die Moleküle flexibler machen. Ein weiteres Kennzeichen ist die Gegenwart von zahlreichen nichtkollagenen Domänen. z.B. enthält das Kollagen-Typ-VI zahlreiche Kopien von Domänen, die Sequenzabschnitten des von-Willebrand-Faktors homolog sind, während Kollagen-Typ-VII eine Anzahl von Fibronectin-Typ-III-Domänen enthält. Die für die fibrillären Kollagene typische Prozessierung von Propeptiden findet meist nicht statt. Wichtige nichtfibrilläre Kollagene sind: 4 FACIT-Kollagene (fibril associated collagens with interrupted triple helices). Diese Gruppe umfasst neben den in . Tab. 24.1 aufgeführten Kollagenen Typ-IX, -XII und -XIV noch eine Reihe weiterer, z.T. noch nicht näher charakterisierter Kollagene (XVI, XIX bis XXIII). Für Kollagen Typ-IX wurde gezeigt, dass es in regelmäßigen Abständen als monomeres Protein an die Oberfläche von Kollagen-Typ-II-Fibrillen bindet (. Abb. 24.7e). Der größte Teil des Moleküls ist an der Typ-IIFibrille fixiert, während der N-terminale Teil, der in einer nichtkollagenen globulären Domäne endet, von der Fibrille wegzeigt. Zusätzlich trägt Kollagen-Typ-IX häufig noch eine Chondroitinsulfat-ProteoglykanSeitenkette, sodass die Oberfläche der Kollagen-IIFibrille einen hydrophilen Charakter aufweist. Interessanterweise erkrankten Mäuse mit inaktiviertem Kollagen-IX-Gen im Alter von einigen Monaten an Arthrose, sodass Kollagen IX dem Gelenkknorpel sozusagen als Gelenkschmiermittel eine hydrophile Oberfläche verleiht, die ihn vor mechanischer Abnutzung schützt 4 Die beiden Kollagene Typ-XII und Typ-XIV hingegen sind überwiegend mit Typ-I-Kollagen-Fibrillen assoziiert. Sie besitzen eine ähnliche Struktur, bestehend aus einer C-terminalen, Kollagen-bindenden Domäne, und eine große nichtkollagene N-terminale Domäne mit der Fähigkeit an Proteoglykan-Seitenketten und andere ECM-Moleküle zu binden. Man nimmt an, dass die Funktion der beiden Kollagene darin besteht, Wechselwirkungen mit anderen extrazellulären Matrix-Molekülen einzugehen um so mitzuhelfen, den Aufbau der ECM-Struktur zu regulieren. Weiterhin wird eine Rolle bei der Regulation der Fibrillenbildung diskutiert, da Anlagerung an die Oberfläche einer Fibrille ein weiteres Dickenwachstum inhibieren könnte

. Abb. 24.7a–e. Schematische Darstellung der Struktur einiger ausgewählter nichtfibrillärer Kollagene. a Kollagen Typ IV (NC1 = C-terminale nicht-kollagene Domäne; 7 S = N-terminale Quervernetzungsdomäne); b Kollagen Typ VI; c Kollagen Typ VII; d Kollagen Typ X, e Kollagen Typ IX

4 Kollagen-Typ-IV. stellt die Hauptstrukturkomponente der Basalmembran dar und ist für alle tierischen Vielzeller lebenswichtig. Es besitzt eine fast 400 nm lange tripelhelicale Domäne und zusätzlich eine globuläre Domäne (NC1) am C-terminalen Ende. Durch zahlreiche, nur wenige Aminosäuren lange Unterbrechungen der Tripelhelix ist das Molekül flexibler als die fibrillären Kollagene. Kollagen Typ IV bildet ein flächiges Netzwerk: Durch covalente Verknüpfungen über die C-terminalen globulären Domänen werden Dimere gebildet, die lateral miteinander aggregieren können. Zusätzlich können vier Moleküle über die N-terminalen Abschnitte der Tripelhelix (sog. 7S-Domäne) aggregieren, sodass eine Struktur entsteht, wie

723 24.2 · Kollagene

4

4

4

4

4

sie in . Abb. 24.7a dargestellt ist. Insgesamt existieren sechs verschiedene D-Ketten. In den meisten Basalmembranen hat Kollagen IV die Zusammensetzung [D1(IV)2D2(IV)], in einigen Basalmembranen findet man jedoch auch andere Kombinationen (. Tab. 24.1). So enthalten die Basalmembranen der Glomeruli überwiegend Moleküle der Zusammensetzung [D3(IV) D4(IV)D5(IV)], die funktionell nicht durch die D1 und D2-Ketten ersetzt werden können, wie die Analyse von Gendefekten zeigt (7 u.) Mit Basalmembranen assoziiert sind die beiden homologen Kollagene Typ-XV und Typ-XVIII. Sie kommen in den epithelialen und endothelialen Basalmembranen einer Reihe von Geweben vor. Ca. 20 kDa große Spaltprodukte der C-terminalen Domäne (Endostatin im Falle von Col-XVIII) hemmen die Angiogenese. Mutationen im Gen für Col-XVIII führen aus noch unbekannten Gründen zur Makuladegeneration im Auge Kollagen-Typ-VI ist ein in den meisten interstitiellen Bindegeweben vorkommendes Kollagen. Es ist der Hauptbestandteil der gebänderten Mikrofibrillen (. Abb. 24.7b). Diese Strukturen werden in völlig anderer Art und Weise als die Fibrillen der Kollagene I-III und V gebildet. Zunächst lagern sich zwei monomere Moleküle antiparallel zu Dimeren zusammen, die weiter zu Tetrameren aggregieren. Diese Tetramere polymerisieren schließlich über die globulären Enden Kollagen-Typ-VII verankert die Basalmembran von Plattenepithelien mit Ankerplatten im darunter liegenden Gewebestroma. Nach Abspaltung einer C-terminalen, 30 kDa großen globulären Domäne bildet Kollagen VII antiparallele Dimere, die zu Bündeln aggregieren Kollagen-Typ-X wird nur in hypertrophierendem Knorpel exprimiert und stellt daher ein wichtiges Markerprotein dar. Das monomere Molekül besitzt die Form einer Hantel und polymerisiert zu einem hexagonalen Netzwerk. Ähnlich aufgebaut ist Kollagen VIII, das aber eine breitere Verteilung besitzt, und vor allem in der Descemet-Membran und in der subendothelialen Matrix prominent ist Transmembrankollagene. Nicht alle Kollagene werden sezerniert, einige besitzen Transmembrandomänen (Typen XIII, XVII, XXIII, XXV). Eine Funktion der Transmembrankollagene ist die Stabilisierung von Zell-Zell- und Zell-Matrix-Interaktionen. KollagenTyp-XVII ist ein Bestandteil der Hemidesmosomen und bindet an Laminin und D6-Integrin, Mutationen führen zu schweren Erkrankungen (Epidermolysis bullosa junctionalis, 7 u.). Eine interessante Eigenschaft von Kollagen Typ-XXV ist die Bindung an Alzheimer Amyloid-Plaques

24.2.3

Angeborene Erkrankungen des Kollagen-Stoffwechsels

Störungen der Kollagen-Expression können auf unterschiedlichen Ebenen auftreten: 4 Störung der Regulation einzelner Gene, wodurch die gewebsspezifische Zusammensetzung der einzelnen Kollagen-Typen verändert wird 4 Mutationen von Kollagenen und Enzymen für die posttranslationalen Modifikationen. Dies führt meist zu Defekten in der makromolekularen Organisation des Kollagens und somit zur Veränderung der biomechanischen Eigenschaften, die letztlich für die klinischen Symptome verantwortlich sind Osteogenesis imperfecta (OI). Die Erkrankung beruht auf

einer Synthesestörung von Kollagen I. Betroffen sind alle Kollagen-reichen Organe, dominant ist jedoch der Knochen-Phänotyp (wiederholte, zu schweren Skelettdeformationen führende Knochenbrüche bei Belastung). Man unterscheidet verschiedene Formen der OI, die schwerste Form führt zum Tod im Mutterleib oder kurz nach der Geburt. Über 200 verschiedene Mutationen sind beschrieben, darunter Deletionen, Insertionen und Spleiß-Variationen. Die meisten Mutationen bestehen in einer Substitution von Glycinen im Gly-X-Y-Triplet. Dies kann zur Folge haben, dass die Tripelhelix-Bildung verlangsamt wird oder sich überhaupt nicht mehr falten kann, sodass die Ketten im Fibroblasten abgebaut werden. Andere Mutationen verursachen Knicke in der Tripelhelix und interferieren so mit dem Wachstum der Fibrillen. Ehlers-Danlos-Syndrom (EDS). Das Ehlers-Danlos-Syn-

drom ist durch Überdehnbarkeit der Haut und Überstreckbarkeit der Gelenke charakterisiert. Trotz der relativ einheitlichen Symptomatik liegen der Erkrankung sehr heterogene Ursachen zugrunde, und man unterscheidet neun verschiedene Typen, z.B.: 4 Typ-IV beruht auf Defekten in der Kollagen-III-Synthese. Da Blutgefäße, besonders die großen Arterien, einen hohen Anteil an Kollagen-III besitzen, besteht Neigung zu Gefäßrupturen 4 Typ-V beruht auf einer defekten Lysyloxidase, sodass die Quervernetzung von Kollagen gestört ist. Da dieses Enzym Kupfer-abhängig ist, treten ähnliche Effekte auch beim Mencke-Syndrom, einer Resorptionsstörung von Kupfer, auf 4 Typ-VI beruht ebenfalls auf einer Störung der Quervernetzung von Kollagenfibrillen, in diesem Fall jedoch aufgrund einer defekten Lysylhydroxylase 4 Typ-VII beruht auf einer gestörten Abspaltung der Propeptide, indem entweder die Peptidasen inaktiv oder wenig aktiv sind oder die Erkennungsstelle für die Proteasen mutiert ist

24

724

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

Alports-Syndrom. Das Alports-Syndrom stellt eine pro-

gressive Erbkrankheit dar, die durch Mutationen in den D3-, D4-, besonders aber der D-Kette des Typ-IV-Kollagens verursacht wird. Die Folge ist eine Verschlechterung der Nierenfunktion mit Hämaturie und Proteinurie aufgrund von Strukturveränderungen der glomerulären Basalmembran. Zusätzlich ist die Erkrankung durch Innenohrschwerhörigkeit und Augenveränderungen gekennzeichnet.

24

Chondrodysplasien. Eine Vielzahl von Mutationen im

Kollagen-II-Gen korreliert mit einer Reihe von Chondro-

dysplasien, die zu Zwergwuchs, Gelenkdeformationen oder anderen Skelettfehlbildungen führen können, da es aufgrund von Kollagen-II-Synthesestörungen zu Störungen in der Knorpelbildung und damit zu Störungen der enchondralen Ossifikation kommt. Mutationen des Typ X-Kollagens sind die Ursache für die Chondrodysplasia metaphysaria vom Typ Schmid, klinische Symptome sind Verkürzung der Gliedmaßen und verkrümmte Beine. Epidermolysis bullosa dystrophica beruht auf Defekten des Kollagens Typ VII (7 Kap. 24.8.5)

In Kürze Kollagene sind die wichtigsten Strukturproteine des Körpers, inzwischen sind wenigstens 27 verschiedene Typen bekannt. Alle Kollagen-Moleküle bestehen aus drei Polypeptidketten. Gemeinsames Strukturmerkmal sind vielfach wiederholte Gly-X-Y-Sequenzen, wobei X und Y häufig Prolin und Hydroxyprolin darstellen. Hydroyxprolin erhöht den Schmelzpunkt der Tripelhelix auf über 40°C. Die Hydroxylierung von Prolin und Lysin ist Vitamin-C abhängig. Weitere für Kollagen typische modifizierte Aminosäuren sind Hydroxylysin und Allysin. 4 Die größte Gruppe innerhalb der Kollagene sind die fibrillären Kollagene (Typ-I, -II, -III, -V, und -XI), die gebänderte Fibrillen bilden (z.B. in Sehnen, Bändern, Haut und Knorpel). Sie kommen überwiegend in Form von Mischfibrillen vor. Die komplexe Biosynthese der fibrillären Kollagene lässt sich in mehrere Abschnitte unterteilen: – intrazelluläre Schritte: Biosynthese am RER, cotranslationale Hydroxylierung, Assemblierung der drei Polypeptidketten zu Prokollagen

24.3

Elastische Fasern

Aufgrund ihrer starren Tripelhelix sind die Kollagene nur bedingt geeignet, Strukturen (z.B. Wände der großen Arterien, Lunge) elastische Eigenschaften zu verleihen. Dafür haben die Vertebraten spezielle elastische Fasern entwickelt, die je nach Gewebetyp in morphologisch unterscheidbaren Netzwerken vorkommen. Die elastischen Fasern bestehen aus einem Kern aus Elastin, der in elektronenmikroskopischen Aufnahmen keine Struktur aufweist und daher »amorph« genannt wird. Der Elastin-Kern wird von einem Mantel aus Mikrofibrillen umgeben. Letztere bestehen aus Fibrillin-Molekülen, an denen Elastin während der Biosynthese der elastischen Fasern polymerisiert (7 u. und . Abb. 24.8). Zusätzlich enthalten die elastischen Fasern noch eine Reihe weiterer Proteine, wie z.B. Mikrofibrillen-assoziierte Glycoproteine

– Abspaltung der N- und C-Propeptide in extrazellulären Kompartimenten und Assemblierung zu größeren Einheiten – Bildung von Fibrillen und Stabilisierung durch Quervernetzung (zwischen Lysin und Allysin) im Extrazellulärraum – Organisation der Fibrillen durch Fibroblasten 4 Fibrillen-assoziierte Kollagene modifizieren die Oberflächen von Fibrillen. So verleiht das Kollagen Typ IX den Typ-II-Fibrillen des Knorpels den hydrophilen Charakter (wichtig für die Gelenkfunktion) 4 Viele Kollagene bilden keine Fibrillen und sind nicht mit Fibrillen assoziiert. Ein besonders wichtiger Vertreter dieser Gruppe ist das Typ-IV-Kollagen, ein essentieller Bestandteil aller Basalmembranen Defekte in den Kollagen-Genen führen zu einer Reihe von Erkrankungen wie Osteogenesis imperfecta und EhlersDanlos-Syndrom (Mutationen bzw. Defekte in der Prozessierung von Typ-I-Kollagen), Alports Syndrom (Defekte im Typ-IV-Kollagen), Chondrodysplasien (Defekte im Typ-IIKollagen).

(MAGPs), Emiline und Fibuline. Diese Proteine sind für die Bildung der korrekten Architektur der elastischen Fasern wichtig (7 u.). ! Elastin verleiht den Geweben elastische Eigenschaften.

Elastin ist ein unlösliches, quervernetztes Polymer aus monomeren Tropoelastin-Untereinheiten. Dieses 70 kDa große Protein setzt sich zum großen Teil aus alternierenden hydrophoben Bereichen und D-helicalen Quervernetzungs-Domänen zusammen (. Abb. 24.9a). Die hydrophoben Bereiche sind reich an Glycin, Alanin, Valin und Prolin. Sie besitzen einen hohen Anteil an E-Faltblatt-Strukturen und E-Turns. Diese Strukturen können in mehreren, leicht ineinander überführbaren Konformationen vorliegen, besitzen also eine hohe Flexibilität. In dieser Hinsicht ist Tropoelastin ein atypisches Protein, denn normalerweise liegen die hydrophoben Domänen im Inne-

725 24.3 · Elastische Fasern

. Abb. 24.8a,b. Architektur und Biosynthese elastischer Fasern. a Fibrillin-Moleküle (rot) assemblieren an der Zelloberfläche und reifen zu Mikrofibrillen (1), danach werden Tropelastinmoleküle (grün) an die Mikrofibrillen angelagert und durch Lysyloxidase quervernetzt (2). Die Polymere aus Elastin wachsen später zusammen und drängen die

Mikrofibrillen zum Rand (3). b Elektronenmikroskopische Aufnahme nach Rotations-Kegelbedampfung von Fibrillen aus Fibrillin. Der Strich entspricht 100 nm. (Aus Ren ZX 1991. Ren ZX et al. (1991) An Analysis by Rotary Shadowing of the Structure of the Mammalian Vitreous Humor and Zonular Apparatus. J Struct Biol 106:57–63)

ren des Proteins verborgen und besitzen eine feste, kompakte Struktur. Eine zweite atypische Eigenschaft besteht darin, dass die hydrophoben Bereiche des Tropoelastins von einem Wassermantel umgeben sind. Diese Hydratisierung wird als wesentlich für das elastische Verhalten erachtet: Bei Dehnung der Peptidkette werden mehr hydrophobe Seitenketten der Aminosäuren dem Wasser ausgesetzt, sodass das Wasser eine geordnetere Struktur (= Entropieabnahme) einnehmen muss (wie bei der Grenzfläche zu einem Öltröpfchen). Wenn die Zugbelastung nachlässt, können die hydrophoben Seitenketten wieder stärker miteinander interagieren, die geordnete Hydrat-

hülle kann sich wieder statistisch orientieren (= Entropiezunahme), sodass eine elastische Rückstellkraft resultiert. Die Quervernetzungsdomänen enthalten 40 LysinReste, von denen etwa 35 durch Lysyloxidase zu Allysin oxidiert werden, nach dem gleichen Mechanismus wie bei Kollagen (s.o). Die Mehrzahl der Allysinreste bildet Crosslinks mit verbliebenen Lysinresten. Dabei entstehen z.T. die gleichen Produkte wie beim Kollagen, zusätzlich werden aber auch elastinspezifische ringförmige Moleküle wie Desmosin und Isodesmosin aufgebaut (. Abb. 24.9b). Die Quervernetzungen erfolgen intra- und intermolekular. Dabei entsteht ein hochelastisches, inertes Polymer,

24

726

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

24

. Abb. 24.9a,b. Tropoelastin. a Schematische Darstellung der Proteinstruktur, bestehend aus alternierenden hydrophoben Domänen und Quervernetzungsdomänen. Jede Domäne wird von einem separaten Exon kodiert. Die Nummerierung orientiert sich am Tropoelastin des Rindes, die Exons 34 u. 35 fehlen beim Protein des Men-

schen. b Struktur der durch Kondensation von vier Lysin-/Allysinresten entstehenden, Elastin-spezifischen Desmosin- und Isodesmosinmoleküle. Für Desmosin ist angedeutet wie die vier Moleküle interagieren müssen, um die ringförmige Struktur aufzubauen

das bei einem gesunden Menschen zeitlebens erhalten bleibt. Über die Anordnung und Struktur des Tropoelastins im Polymer ist noch nicht viel bekannt. Schon eine Strukturanalyse von monomerem Tropoelastin durch 2D-Kernresonanzspektroskopie oder Röntgenbeugung war aufgrund seiner Flexibilität bisher nicht möglich. Wegen des Fehlens von Strukturdaten ist bisher keine exakte Beschreibung des elastischen Verhaltens möglich. Daher wurden verschiedene Modelle entwickelt, darunter eines, das den gleichen Mechanismus wie bei der Gummielastizität annimmt. Allgemein akzeptiert ist jedoch lediglich die Vorstellung, dass die Elastizität durch Entropieänderungen bei der Dehnung bedingt ist, in Übereinstimmung mit dem oben beschriebenen Verhalten der hydrophoben Domänen.

Fibrillin. Fibrillin besitzt eine Molekülmasse von etwa

! Mikrofibrillen aus Fibrillin sind für die Funktion der elastischen Fasern unentbehrlich.

350 kDa und existiert in mindestens drei Isoformen. Während Elastin nur bei Vertebraten vorkommt, werden Fibrilline auch von allen Invertebraten gebildet, sind also evolutionär viel älter. Fibrillin-Monomere polymerisieren zu charakteristischen Filamenten (. Abb. 24.8b). Die Assemblierung der Monomeren und Reifung der Filamente zu den Fibrillen mit den typischen, periodischen Verdickungen wird durch transiente Bindung der Monomeren an die Zelloberfläche und Interaktion mit Proteinen wie den Mikrofibrillen-assoziierten Glykoproteinen gefördert. Mikrofibrillen aus Fibrillin besitzen bereits für sich alleine elastische Eigenschaften und kommen in geringem Umfang als eigenständige Strukturen im Organismus vor, z.B. in den Zonulafasern des Auges. In der Regel sind sie aber mit Elastin assoziiert. Defekte im Gen für Fibrillin-1 sind die Ursache des Marfan-Syndroms (7 Kap. 24.8.5). Das Marfan-Syndrom

727 24.4 · Proteoglykane

ist durch Hochwuchs, Arachnodaktylie und Linsenveränderungen gekennzeichnet. Entscheidend für den Verlauf der Krankheit sind jedoch Störungen in den Gefäßwänden. Es kommt zur Bildung von Aneurysmen und zu Aortenrupturen. Eine der historischen Persönlichkeiten, die an MarfanSyndrom litten, war wahrscheinlich der amerikanische Präsident Abraham Lincoln. Biosynthese der elastischen Fasern. Zunächst entstehen

Mikrofibrillen, die später mit Elastin zusammenwachsen, das die Hauptkomponente in den ausgereiften elastischen Fasern darstellt (. Abb. 24.8), der Elastinanteil ist allerdings von Gewebe zu Gewebe unterschiedlich. Man nimmt an,

dass die Tropoelastinmoleküle durch Bindung an Mikrofibrillen eine Konformation einnehmen, in der die zu vernetzenden Lysine/Allysine in der richtigen Position für die Quervernetzung durch Lysyloxidase liegen. Wie neueste Untersuchungen gezeigt haben sind für die Assemblierung des Elastins noch weitere Proteine wie die Emiline und Fibuline erforderlich. Auf molekularer Ebene sind diese Prozesse allerdings erst unzureichend charakterisiert. Elastische Fasern werden hauptsächlich während der Wachstumsphase der Organe angelegt, später nur noch in begrenztem Umfang. Dies erklärt, warum bei degenerativen oder entzündlichen Reaktionen, bei denen Elastin durch z.B. von Leukozyten gebildete Elastasen degradiert wird, die elastischen Eigenschaften weitgehend verloren gehen.

In Kürze Elastische Fasern erlauben eine reversible Dehnung und Kontraktion. Elastische Fasern sind im Wesentlichen aus Elastin und Fibrillin aufgebaut: 4 Elastin ist ein Polymer, das durch Quervernetzung von monomeren Tropoelastin-Einheiten entsteht. Die Quervernetzung erfolgt wie beim Kollagen über

24.4

Proteoglykane

! Proteoglykane sind eine heterogene Gruppe von Proteinen, die durch Glycosaminoglykan(GAG)-Seitenketten, modifiziert sind.

Proteoglykane sind ubiquitäre Zelloberflächen- und Extrazelluläre-Matrix-Proteine. Im Unterschied zu den meisten Proteinen, die aufgrund ihrer Aminosäuresequenz in verschiedene Familien eingeteilt werden, sind die Proteoglykane durch covalent mit dem Proteingerüst verknüpfte Glycosaminoglykan-Seitenketten (GAG) definiert. Diese stellen nichtverzweigte Polymere aus repetitiven Disaccharideinheiten dar und werden entsprechend der Struktur der Grundbausteine in Chondroitinsulfat, Keratansulfat, Dermatansulfat und Heparansulfat unterteilt. Zur Darstellung der Strukturen und Biosynthese dieser Kohlenhydrate sei auf 7 Kap. 2.14, und 7 Kap. 17.3.5, verwiesen, wo diese Themen bereits diskutiert worden sind. Die Glycosaminoglykan-Seitenketten können Größen von einigen 10 kDa besitzen und so die Eigenschaften des Proteins bestimmen. Proteoglykane zeigen eine fast unüberschaubare Struktur-Vielfalt (. Tabelle 24.2). Diese ist durch zwei Faktoren bedingt: 4 Modifikation der Glykane. Die Modifikationen umfassen: 5 Anheftung von O-Sulfat-Resten an verschiedenen Positionen

Lysin/Allysin, dabei entstehen u.a. die Elastin-spezifischen Produkte Desmosin und Isodesmosin 4 Fibrillin bildet Mikrofibrillen, die für die Organisation des Elastins notwendig sind Defekte im Gen für Fibrillin-1 führen zum Marfan-Syndrom.

5 Umwandlung von N-Acetylglucosamin in GlucoseN-Sulfat und 5 Isomerisierung von Glucuronsäure zu Iduronsäure Da diese Modifikationen nur sporadisch innerhalb der Ketten erfolgen, ergibt sich ein komplexes Produktspektrum. 4 Vielzahl von Proteingerüsten. Die Core-Proteine der Proteoglykane werden von mehr als einhundert Genen kodiert. Die Größe der Polypeptidketten reicht von etwa 10 kDa bis über 400 kDa, sie besitzen daher eine große Strukturvielfalt Viele Funktionen der Proteoglykane lassen sich mit den biophysikalischen Eigenschaften, dem polaren Charakter und der negativen Ladungen durch Uron- und Sulfonsäuren der Glykanketten, erklären. Aufgrund der negativen Ladungen stellen Proteoglykane eine Filtrationsbarriere in den Glomeruli der Niere dar. Das Heparansulfat-Proteoglykan Perlecan verhindert, vermutlich zusammen mit anderen Proteoglykanen, den Durchtritt anionischer Serumproteine in den Urin. Eine weitere Funktion ist die Bildung wassergefüllter Kompartimente, z.B. im Knorpel. Die GAG-Ketten besitzen je nach Typ eine bis vier Sulfatgruppen pro Disaccharid-Einheit, was eine Ladungsdichte von 1–5 Ladungen pro nm ergibt. Die Sulfatreste sind bei physiologischen pH-Werten voll ionisiert, die fixierten negativen Ladungen ziehen Gegenionen an, vor allem Na+- und Ca2+Ionen. Die hohe lokale Ionenkonzentration verursacht

24

728

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

. Tabelle 24.2. Übersicht über wichtige Proteoglykane (Auswahl) Proteoglykan

Core-Protein (kDa)a

Typ u. Anzahl der GAG-Kettenb

Vorkommen/Funktion

Perlecan

400–470

HS/CS (3)

Integraler Bestandteil der Basalmembran, Filtrationsbarriere

Agrin

225

HS (3)

Aggregation von Acetylcholin-Rezeptoren

Aggrecan

220–250

CS/KS (~130)

Knorpel, Bildung eines hydratisierten Gels

Versican

180–370

CS (~20)

Stroma, hydratisiertes Gel, Modulation v. Zell-Matrix-Interaktionen

Basalmembran-Proteoglykane

Hyalectanec

24

Kleine leuzinreiche Proteoglykane Decorin

36

CS/DS (1)

Bindung an Kollagen I, Rolle in der Fibrillen-Bildung, Bindung an TGFβ

Fibromodulin

42

KS (4)

Bindung an Kollagen I, Rolle in der Fibrillen-Bildung

Membrangebundene Proteoglykane Betaglykan

100–110

HS/CS (2)

Bindung von TGFβ

Syndecane

20–45

HS/CS (3)

FGF-Bindung, Zelladhäsion

a b

c

Die Variationen in den Größen ergeben sich durch Spezies-Unterschiede und alternatives Spleißen. Art und Anzahl der angehefteten Glycosaminoglykan (GAG)-Seitenketten können von Zelltyp zu Zelltyp variieren. HS = Heparansulfat; CS = Chondroitinsulfat; KS = Keratansulfat; Hya = Hyaluronsäure. Komplexe mit Hyaluronsäure und Link-Proteinen.

einen osmotisch bedingten Wassereinstrom aus den umliegenden Regionen. Das Ausmaß hängt stark von der Konzentration ab, die in verschiedenen Kompartimenten sehr unterschiedlich ist. Im Knorpel etwa beträgt die extrazelluläre Na+ -Konzentration 250–350 mM und die Osmolalität 350–450 mosm, verglichen mit etwa 290 mosm der normalen Extrazellulärflüssigkeit. Mit solchen Funktionen sind die Proteoglykane aber nur unzureichend charakterisiert. Sie sind darüber hinaus von Bedeutung als Corezeptoren für Wachstumsfaktoren, als Modulatoren der Zell-Zell- und Zell-MatrixInteraktion und bei der Regulation der Aktivität einiger Proteasen (Heparin-Thrombin-Antithrombin III) (7 Kap. 29.5.3).

24.4.1

Aggrecan

! Aggrecan ist ein lebensnotwendiger Knorpelbaustein. Es ist essentiell für die Funktion des Knorpels als druckelastische Struktur.

Aggrecan ist das wichtigste Proteoglykan des Knorpels. Das Core-Protein hat eine Größe von etwa 250 kDa. Die N- und C-terminalen Bereiche bilden globuläre Domänen, der Mittelteil hingegen besitzt eine elongierte Struktur, die mit etwa 30 Keratansulfat- und ungefähr 100 (!) Chondroitinsulfat-Seitenketten substituiert ist, sodass das komplette Protein eine Molekülmasse von etwa 3 MDa besitzt und eine hohe Konzentration an negativen Ladungen auf-

weist (. Abb. 24.10b). Aggrecan kommt im Knorpel nicht isoliert vor, sondern bildet riesige Aggregate mit Hyaluronsäure (. Abb. 24.10a), die selbst schon ein ungewöhnlich großes lineares Polymer aus bis zu 25000 Disaccharideinheiten von Glucuronsäure und N-Acetyl-Glucosamin darstellt (7 Kap. 2.1.4). Die nichtcovalente Bindung an Hyaluronsäure wird durch die N-terminale globuläre Domäne des Aggrecans vermittelt und durch ein kleines Protein, das so genannte Link-Protein, stabilisiert. Mutationen, die zu einem nichtfunktionellen Protein führen, sind letal. Embryonen von Hühnchen und Maus zeigen eine stark verminderte Knorpelbildung und damit auch eine gestörte Knochenbildung. Unmittelbar letal ist vermutlich der Kollaps der Luftröhre. Ein ähnlicher Phänotyp tritt bei Mangel an Sulfattransferasen auf, weil durch Fehlen der sulfatierten Zucker die Ladungskonzentration erniedrigt ist und so die Bildung eines hyperosmotischen (7 o.), reversibel deformierbaren Gels verhindert wird. Ein strukturell mit Aggrecan verwandtes großes Proteoglykan ist das in vielen extrazellulären Matrices vorkommende Versican. Dieses Proteoglykan schafft ebenfalls eine lockere hydratisierte Matrix. Darüber hinaus kann es auch Prozesse wie Zellwanderung und -Proliferation beeinflussen.

24.4.2

Kleine leucinreiche Proteoglykane

! Proteoglykane wie Decorin, Biglykan und Fibromodulin regulieren die Kollagen-Fibrillenbildung.

729 24.4 · Proteoglykane

. Abb. 24.10a,b. Schematische Darstellung der Aggregate des Proteoglykans Aggrecan mit Hyaluronsäure. a Aggrecan bindet in vielen Kopien entlang des Hyaluronsäure-Fadens und schafft so ein wässriges, elastisches Kompartiment. b Aggrecan-Moleküle binden

über ihre N-terminale globuläre Domäne an Hyaluronsäure. Die Bindung wird durch ein sog. Link-Protein verstärkt. KS = Keratansulfat; CS = Chondroitinsulfat

Die kleinen leucinreichen Proteoglykane besitzen etwa 40 kDa große core-Proteine mit einer N-terminalen, die Glycosaminoglykan-Seitenketten tragenden Domäne, gefolgt von einer Domäne, die aus leucinreichen repeats besteht. Eine wichtige Funktion dieser Proteine ist die Organisation von Kollagenfibrillen. Decorin bindet mit seinem core-Protein an die Gap-Region (. Abb. 24.4) von Kollagen-Fibrillen, während die Glycosaminoglykan-Seitenkette nach außen gerichtet ist. Dies erschwert die weitere Anlagerung von Kollagenmolekülen, verhindert die laterale Fusion von Fibrillen und fördert so die korrekte Fibrillenbildung. Entsprechend besitzen Decorin-Knockout-Mäuse eine gestörte Kollagen-Fibrillen-Morphologie und die Haut zeigt eine deutlich reduzierte mechanische Belastbarkeit.

Heparansulfat-Seitenkette, die für eine hochaffine Bindung noch ein spezielles Sulfatierungsmuster besitzt, bindet zwei Ligand-Rezeptor-Komplexe und hält sie so in der richtigen Konformation, dass die intrazelluläre Tyrosinkinase-Aktivität des FGF-Rezeptors, eines typischen Tyrosinkinase-Rezeptors (7 25.7) durch Autophosphorylierung aktiviert werden kann. Neben FGF sind eine Reihe anderer Wachstum und Differenzierung regulierender Faktoren (TGFE, Wnt, Hedgehog) auf zellgebundene Proteoglykane als Cofaktoren angewiesen. Dies können entweder Membranproteine sein wie Betaglykan und die Syndecane, oder über einen Lipidanker befestigte Moleküle wie Glypican. Betaglykan bildet über sein core-Protein mit TGFE (7 Kap. 25.1.3, 25.7.2) einen Komplex, der mit dem TGFRezeptor interagiert. Die Aktivierung von Wachstumsfaktoren durch Syndecane und Glypicane hingegen erfordert die Interaktion mit den Heparansulfatketten. Nicht nur Zelloberflächenproteine binden Wachstumsfaktoren, sondern auch einige sezernierte Proteoglykane. Seit langem ist z.B. der wachstumshemmende Effekt von Heparin bekannt. Dieser dürfte darauf beruhen, dass Proteoglykane in der extrazellulären Matrix mit Heparin um die Bindung der Wachstumsfaktoren konkurrieren und so die Konzentration an freien Cytokinen regulieren. Andererseits werden auf diese Weise Wachstumsfaktoren in der ECM gespeichert und können bei Bedarf durch Hydrolyse der Bindungspartner wieder freigesetzt werden.

24.4.3

Membrangebundene Proteoglykane

! Viele membrangebundene Proteoglykane sind Corezeptoren für Wachstumsfaktoren.

Zellkulturuntersuchungen aus den frühen 90er Jahren hatten gezeigt, dass die Wirkung von FGF (FibroblastenWachstumsfaktor, 7 Kap. 25.1.3) in Abwesenheit von Heparansulfat drastisch reduziert ist. Röntgenstrukturanalysen haben inzwischen die molekulare Ursache geklärt. Eine

24

730

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

In Kürze

24

Proteoglykane sind eine heterogene Gruppe von Proteinen, die mit Glycosaminoglykan-Seitenketten substituiert sind. Glycosaminoglykane sind aufgrund von sulfatierten Zuckern und Uronsäuren stark negativ geladen. Man unterscheidet 4 Klassen: 4 Chondroitinsulfat 4 Keratansulfat 4 Dermatansulfat 4 Heparansulfat/Heparin

24.5

Nichtkollagene, zelladhäsive Glycoproteine

Die extrazelluläre Matrix besitzt nicht nur Strukturfunktionen, sondern sie reguliert auch zelluläre Funktionen. ! Die extrazelluläre Matrix dient als Substrat für ZellAdhäsion und -Wanderung.

Mit Ausnahme einiger hämatopoetischer Zellen sind alle Zellen des Organismus ständig an Substrate wie die Basalmembran oder das lockere Bindegewebe gebunden, die Bindung erfolgt über spezifische zelluläre Rezeptoren, vor

Viele Funktionen der Proteoglykane ergeben sich aus den biophysikalischen Eigenschaften der negativ geladenen Zuckerketten, z.B.: 4 Filtrationsbarriere in den Glomeruli (z.B. durch Perlecan) 4 wassergefüllte hydrophile Kompartimente (z.B. durch Hyaluronsäure und Aggrecan im Knorpel) Einige Proteoglykane (wie Decorin) sind wichtig bei der Regulation der Kollagen-Fibrillenbildung. Einige membrangebundene Proteoglykane (z.B. Syndecane) sind Corezeptoren für Wachstumsfaktoren (FGF, TGFβ) oder für die Zelladhäsion.

allem die Integrine (7 u.). Je nach Substrat werden die Zellen zur Wanderung angeregt, haften fest oder versuchen sogar, das Substrat zu meiden. Bei der Gastrulation z.B. wandern die Mesoderm-Zellen über eine Schicht aus Fibronectin (7 u.), das gleichsam als Leitschiene für die Zellen dient. Zellwanderungen sind auch im adulten Organismus z.B. im Falle der Fibroblasten und in pathologischen Situationen wie der Wundheilung oder Rekrutierungen von Leukozyten zu Entzündungsherden erforderlich. ! Die extrazelluläre Matrix beeinflusst Zellfunktion, Zelldifferenzierung, Zellproliferation und Apoptose.

. Tabelle 24.3. Matrix-Glycoproteine, die Zellfunktionen beeinflussen (Auswahl) Protein(-Typ)

biologische Wirkungen (Auswahl)

matricellular proteins Proteine, die Zellrezeptoren, ECM-Moleküle, Zytokine und Proteasen binden; Modulatoren der Zell-Matrix-Interaktion; wegen der Vielzahl möglicher Interaktionen unterschiedliche Wirkung an verschiedenen Geweben möglich, Beispiele: SPARC* (= BM40, Osteonectin)

knock-out-Phänotyp: Linsentrübung, erhöhte Adipogenese, Störung der Kollagen-Fibrillenbildung.

Thrombospondine

Aktivierung von TGFE, Regulation der Kollagenfibrillenbildung, Regulation der Angiogenese, Plättchenaggregation

Tenascin-C, -X, -R, -Y, -W

hohe Expression während der Gewebsbildung in der Embryonalentwicklung, Reexpression während Wundheilung und Tumorbildung. Bei Ausfall: geringe neurologische Defekte (TN-C, -R), erhöhte Aktivität an MMPs und verstärkte Tumor-Metastasierung (TN-X)

Osteopontin

Regulation der Calcifizierung, Bindung an Hydroxyapatit

bone sialoprotein

Regulation der Calcifizierung, Bindung an Hydroxyapatit

zelladhäsive Proteine Vitronectin

Vorkommen im Blut und in der ECM, beteiligt an der Regulation der Blutgerinnung und dem proteolytischen Abbau der ECM, bindet mehrere Integrine, vor allem DvE3 (Modulation von Zellwanderung, Angiogenese)

Fibronectin

wichtigstes Zelladhäsionsmolekül in der ECM, Einzelheiten s. Text

Laminine

wichtigstes Zelladhäsionsmolekül der Basalmembran, Einzelheiten s. Text

Agrin

Basalmembranprotein, verschiedene Spleißvarianten mit unterschiedlichen Aktivitäten; notwendig für die Differenzierung der neuromuskulären Synapse (Aggregation der Acetylcholin-Rezeptoren), knock-out letal

* SPARC = secreted protein acidic and rich in cysteine

731 24.5 · Nichtkollagene, zelladhäsive Glycoproteine

Fibronectin

Zellen müssen in der richtigen Umgebung angesiedelt sein und die richtige Polarität (apikal-basale Polarität bei Epithelzellen) besitzen, um ihre korrekten Funktionen auszuüben. Dies erfordert die Ausbildung spezifischer ZellZell- und Zell-Matrix-Kontakte. Die wichtigsten Rezeptoren für extrazelluläre Matrixmoleküle sind die Integrine, ihre Aktivierung ermöglicht in vielen Fällen erst, dass Wachstumsfaktoren/Hormone ihre Wirkung entfalten (Synergismus). Darüber hinaus beeinflussen ECM-Moleküle über Rezeptoren wie die Integrine aber auch direkt die Genexpression. Man kennt inzwischen eine große Anzahl von ECMMolekülen, die eine regulatorische Funktion ausüben, einige sind in . Tab. 24.3 aufgelistet. Aus der Vielfalt an Faktoren sollen im Folgenden die beiden wichtigsten Zelladhäsionsproteine, das Fibronectin und die Laminine, vorgestellt werden. Im Anschluss werden die Integrine, die wichtigste ECM-Rezeptor-Familie besprochen.

24.5.1

. Abb. 24.11a,b. Struktur von Fibronectin. a Schematische Darstellung des modularen Aufbaus einer Fibronectin Untereinheit. Die Polypeptidkette (MG ca. 230 kDa) besteht aus einer Vielzahl von 40–90 Aminosäuren langen Domänen, die aufgrund ihrer Homologie in drei verschiedene Strukturtypen (Typ-I, Typ-II, Typ-III) eingeteilt werden. EDA, EDB und IIICS sind Module, die alternativ gespleißt

werden können. Entlang der Polypeptidkette befinden sich verschiedene Bindungsregionen für weitere ECM- und Zelloberflächen-Moleküle. b Elektronenmikroskopische Aufnahme (Rotary Shadowing Verfahren) einzelner Fibronectin-Moleküle. Zwei Polypeptidketten werden über C-terminale Disulfidbrücken verknüpft. (Aufnahme von J. Engel, Basel)

Fibronectin ist ein Heterodimer aus zwei etwa 230 kDa großen Polypeptidketten, die nahe am C-terminalen Ende durch Disulfidbrücken zusammen gehalten werden (. Abb. 24.11). Durch alternatives »Spleißen« der RNA eines einzigen Gens entstehen Moleküle mit unterschiedlichen Eigenschaften. 4 In der Leber wird die als lösliches Plasma-Fibronectin bezeichnete Spleißvariante synthetisiert. Das Protein liegt im Plasma in einer Konzentration von ca. 300 mg/l vor und spielt eine wichtige Rolle bei der Wundheilung. Bei der Blutgerinnung wird Fibronectin in das FibrinGerinnsel eingebaut, sodass der Blutpfropf nicht nur die defekte Stelle verschließt, sondern gleichzeitig auch ein Zelladhäsionsmolekül enthält, das von Keratinozyten, Fibroblasten und Zellen des Immunsystems erkannt wird, umso gleichzeitig die Regeneration zu stimulieren 4 Fibroblasten hingegen bilden eine andere Spleißvariante (unlösliches Fibronectin), die in die extrazelluläre

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732

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

die Mesodermzellen über eine Matrix aus Fibronectinmolekülen) und die mutanten Embryonen zeigen dramatische Störungen in der Morphogenese mesodermaler Organe (Fehlen stimulierender Signale durch Integrin-vermittelte Signaltransduktion).

24.5.2

Laminine

! Multiple Isoformen verleihen Basalmembranen organspezifische Funktionen.

24

. Abb. 24.12. Auswirkung der Inaktivierung des FibronectinGens auf die Embryonalentwicklung der Maus. Homozygote (–/–) Mäuse zeigen im Vergleich zu normal aussehenden heterozygoten (+/–) Mäusen eine stark verkürzte anteriore/posteriore Achse. Somiten fehlen sowie differenzierte Strukturen im kaudalen Bereich, die Kopffalte ist fehlgebildet (Pfeil). Die Aufnahme wurde im Entwicklungsstadium E8.5 (Tag 8.5 nach Coitus) gemacht. H Herz; Al Allantois; S Somit. (George EL, Georges-Labouesse EN, Patel-King RS, Rayburn H, Hynes RO (1993) Defects in mesoderm, neural tube and vascular development in mouse embryos lacking fibronectin. Development 119:1079– 1091)

Matrix in Form von unlöslichen Fibrillen eingelagert wird. Dieses Fibronectin besitzt eine Brückenfunktion zwischen Kollagenfibrillen und anderen ECM-Molekülen, es dient als Adhäsionsmolekül für verschiedene Zellen, und reguliert dadurch Wanderung und Differenzierung Den verschiedenen biologischen Funktionen entsprechend besitzt Fibronectin eine Reihe von spezifischen Bindungsstellen für extrazelluläre Proteine (Fibrin, Heparin, Kollagen) und je nach Spleißvariante eine oder mehrere Zellbindungsregionen. Letztere binden an Integrine in der Plasmamembran der adhärierenden Zellen und lösen so eine Signaltransduktionkette aus. Der wichtigste FibronectinRezeptor ist das D5E1-Integrin (7 Kap. 24.5.3). Die Bedeutung der Fibronectin-vermittelten ZellMatrix-Interaktion für den Organismus zeigt am deutlichsten die Tatsache, dass die Inaktivierung des Fibronectin-Gens embryonal letal ist (. Abb. 24.12): Die Gastrulation ist gehemmt (bei der normale Gastrulation wandern

Während sich die Fibronectine aus einem Gen durch alternatives Spleißen ableiten und in der ECM deponiert werden, stellen die Laminine eine Multigen-Familie dar und werden in Basalmembranen eingebaut. Die Laminine sind Heterotrimere, bestehend aus je einer D-, E- und J-Kette. Bisher sind fünf D-, vierE- und dreiJ-Ketten bekannt, die zu mehr als einem Dutzend verschiedener Lamininvarianten assembliert werden können. Die Mehrzahl der Moleküle besitzt eine asymmetrische kreuzförmige Struktur aus drei kurzen und einem langen Arm (. Abb. 24.13). Einige Moleküle besitzen jedoch verkürzte Ketten und zeigen daher abweichende Formen. Laminine stellen die nichtkollagene Hauptkomponente in allen Basalmembranen dar. Sie polymerisieren über die drei terminalen Domänen der drei kurzen Arme zu einem Netzwerk, das über linker-Proteine wie das Nidogen mit dem Gerüst des Kollagens Typ IV verknüpft ist. Zusätzlich sind in die Basalmembran noch das Heparansulfatproteoglykan Perlecan und andere Glycosaminoglykane eingelagert, an die Laminin mit seiner Heparinbindungsstelle am Ende des langen Arms binden kann. Die Laminine werden entwicklungs- und organspezifisch exprimiert. Laminin-1 (D1E1J1) ist vorwiegend in embryonalen Basalmembranen zu finden. Laminin-2 (D2E1J1) ist die dominierende Isoform in Muskel und peripheren Nerven, neuromuskuläre Synapsen hingegen enthalten Laminin-4 (D1E2J1). In den Basalmembranen der Haut findet sich Laminin-5 (D3E3J3), in vielen epithelialen Basalmembranen ist Laminin-10 (D5E1J1) die dominierende Isoform. ! Die einzelnen Laminin-Isoformen können sich funktionell nicht gegenseitig ersetzen. Der Ausfall jeder der bisher untersuchten Lamininketten erzeugt schwerste Defekte oder ist embryonal letal.

So führt z.B. das Fehlen der D2-Kette zur Muskeldystrophie, das Fehlen der E2-Kette zur Blockierung der neuromuskulären Signalübertragung, da die Schwannschen Zellen entlang der veränderten Basalmembran in den synaptischen Spalt hineinwachsen. Inaktivierung des Gens der in fast allen Isoformen vorkommenden J1-Kette ist bereits im frühen Blastocysten-Stadium letal. Diese Ergebnisse zeigen, wie wichtig die korrekte Proteinzusammensetzung der Basalmembran für die Entwicklung und die Funktion der adhärierenden Zellen ist.

733 24.5 · Nichtkollagene, zelladhäsive Glycoproteine

. Abb. 24.13a,b. Typische Struktur von Lamininen, dargestellt am Beispiel von Laminin-1. a Elektronenmikroskopische Aufnahme (nach Rotary Shadowing) von Laminin-1 aus einem Maus-Tumor. b Schematische Darstellung des Aufbaus der kreuzförmigen Struktur aus drei unterschiedlichen Polypeptidketten mit Molekulargewichten zwischen 220 und 440 kDa. Alle drei Ketten zeigen einen homologen Aufbau aus sechs unterschiedlichen globulären und stäbchenför-

24.5.3

Integrine

Man kennt eine Reihe von zellulären Rezeptoren, die ECMProteine binden, darunter die vor allem als Corezeptoren agierenden membrangebundenen Proteoglykane und das Dystroglykan (7 Kap. 30.2.3). Die am besten untersuchten und universellsten Rezeptoren stellen jedoch die Integrine dar (. Abb. 24.14). ! Integrine sind die größte Rezeptorfamilie für ECMMoleküle.

Alle Integrine sind heterodimere, aus einer D- und einer E-Untereinheit bestehende Transmembranproteine. Beide Ketten sind nichtcovalent miteinander assoziiert und besitzen Molmassen im Bereich zwischen 100 und 200 kDa. Es gibt wenigstens 18D-Ketten und 8E-Ketten. Aus der Vielzahl der theoretisch möglichen Kombinationen werden jedoch nur 24 verschiedene Integrine gebildet. Die Rezeptoren für ECM-Moleküle sind meist Heterodimere aus der E1-Kette mit verschiedenen D-Ketten. So ist α2β1 ein Kollagen-Rezeptor, α5β1 ein Fibronectin-Rezeptor und α6β1 ein typischer Laminin-Rezeptor. Die Integrine müssen eine Vielzahl von Liganden erkennen. Eine Gemeinsamkeit ist, dass die Liganden einen Aspartat-Rest in der Bindungsregion enthalten müssen. Die

migen Domänen (I–VI). Die stäbchenförmigen Domänen der kurzen Arme sind aus einer Vielzahl je acht Cystein-Reste enthaltender LE-Module (EGF-ähnliche Lamininmodule) aufgebaut. Der Stab des langen Arms besitzt eine coiled-coil Struktur. Zusätzlich enthält die D1-Kette noch eine große C-terminale globuläre Domäne. Einige wichtige biologisch aktive Regionen sind in der Abbildung gekennzeichnet. G-Domäne = globuläre, C-terminale Domäne)

E-Ketten besitzen nämlich ein unvollständig koordiniertes Kation, in der Regel Mg2+, die Koordination wird durch Bindung eines Aspartat-Rests des Liganden vervollständigt (. Abb. 24.14a). Für einige Integrine ist die Erkennung der Tripeptidsequenz Arg-Gly-Asp (so genannte RGD-Sequenz) für die Bindung des Liganden ausreichend. Meist werden aber komplexere Proteinstrukturen des Liganden erkannt, die mit beiden Integrin-Untereinheiten wechselwirken. Nicht alle Integrine sind Rezeptoren für ECM-Moleküle. So ist zum Beispiel DIIb/E3 der wichtigste Rezeptor auf Blutplättchen für Fibrinogen (7 Kap. 29.5.2) und E2-Integrine vermitteln die Interaktion von Lymphozyten mit Endothelzellen, z.B. bei der Extravasation an Entzündungsherden (7 Kap. 34.6.1). Integrine sind bidirektionale Rezeptoren. Viele Integrin-Rezeptoren liegen normalerweise in einer inaktiven Konformation vor, wie z.B. der Plättchenrezeptor DIIb/E3. Erst bei Aktivierung der Thrombozyten nach Gefäßverletzungen (u.a. durch Bindung von subendothelialem Kollagen an das ständig aktive D2E1-Integrin) wird der Rezeptor über eine intrazelluläre Signaltransduktionskette in die bindungskompetente Konformation überführt (inside-outsignaling). Die bedarfsabhängige Aktivierung von DIIb/E3 verhindert in diesem Falle eine unkontrollierte Blutgerin-

24

734

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

C

24

. Abb. 24.14a,b. Struktur und Signaltransduktion der Integrine. a Schematische Darstellung der Struktur eines Integrins, bestehend aus einer D- und einer E-Untereinheit. An der Ligandenbindung sind die N-terminalen Domänen beider Untereinheiten beteiligt, die

. Tabelle 24.4. Effekte von Mutationen in Ingegrin-Genen auf die Mausentwicklung (Beispiele) IntegrinUntereinheit

Phänotyp

α3

Perinatal letal, Defekte in der Nierenentwicklung

α4

Embryonal letal, Defekte in der Plazenta- und Herzentwicklung

α5

Embryonal letal, Defekte in der Mesoderm-Bildung

α6

Perinatal letal, Hautablösung

α7

Lebensfähig, Entwicklung einer Muskeldystrophie

α8

Perinatal letal, Fehlbildung der Nieren

αv

Perinatal letal, Rupturen von Gefäßen

β1

Letal, Degeneration der Inneren Zellmasse der Blastocyste

β7

Fehlen von Lymphozyten im Darmbereich

Ligandenbindungsregion der E-Untereinheit enthält ein zweiwertiges Kation (Mg2+), das einen Aspartatrest in der Bindungsregion des Liganden bindet. b Schematische Darstellung der durch Aktivierung der Integrine ausgelösten Signalwege. (Einzelheiten 7 Text)

nung. Demgegenüber ist das outside-in-signaling der normale Signalübertragungsweg von außen in die Zelle. ! Integrine erfüllen lebensnotwendige Aufgaben.

Inaktivierung der Gene für einzelne Integrin-Untereinheiten verursacht in den meisten Fällen einen charakteristischen Phänotyp (. Tabelle 24.4). Die Befunde reichen von Letalität im Blastocystenstadium (7 u.) bis hin zu relativ milden Effekten wie dem Fehlen der Peyerschen Plaques. ! Integrine organisieren das Cytoskelett und aktivieren eine Vielzahl von Signaltransduktionswegen.

Die Integrine besitzen nur kurze cytoplasmatische Domänen, die keinerlei eigene enzymatische Aktivitäten aufweisen. Entsprechend läuft die Signaltransduktion auch anders ab als bei »konventionellen« Rezeptoren. Die cytoplasmatischen Domänen dienen als Anker für die Assemblierung von Multiprotein-Komplexen. Die wichtigsten Reaktionen sind in . Abb. 26.14b zusammengefasst: 4 Adhärieren Zellen an immobilisierte Moleküle in der ECM, lagern sich die vorher mehr oder weniger frei in der Membran diffusiblen Integrine an den Kontaktstellen zusammen. Über Linker-Proteine wie Vinculin und Talin werden Verbindungen zu Aktin-Filamenten her-

735 24.5 · Nichtkollagene, zelladhäsive Glycoproteine

4

4

4

. Abb. 24.15. Nachweis erhöhter Tyrosin-Phosphorylierung in Fokal-Kontakten durch Doppel-Immunfluoreszenz. Fluoreszeinmarkiertes Phalloidin (Grünfärbung) und Rhodamin-konjugierte Antikörper (Rotfärbung) wurden benutzt, um Aktinfilamente bzw. Phospho-Tyrosin-Reste in Proteinen anzufärben. An den Fokal-Kontakten treffen Rot- und Grünfärbung zusammen, sodass eine Orangefärbung eintritt. (Aus Burridge K et al. 1992. Burridge K et al. (1992) Signals from Focal Adhesions. Curr Biol 2:537-539)

gestellt. Es kommt also sowohl zur cluster-Bildung der Rezeptoren als auch der Aktin-Filamente. Dieser Prozess führt zur Ausbildung der so genannten FokalKontakte (focal adhesions): Dies sind Aggregate von Integrinen mit Cytoskelett-Linkerproteinen und Signaltransduktionsproteinen (7 u.), die sich lichtmikroskopisch (!) darstellen lassen. . Abb. 24.15 zeigt als Beispiel einen Fibroblasten, bei dem die focal adhesions mit einem Rhodamin-gekoppelten, gegen phosphorylierte Tyrosinreste gerichteten Antikörper sichtbar gemacht wurden (Rotfärbung, in focal adhesions werden Tyrosinkinasen aktiviert, 7 u.). Zusätzlich wurden Aktinfasern mit einem Phalloidin-gekoppelten zweiten Antikörper sichtbar gemacht (Grünfärbung, Phalloidin ist ein aktinbindendes Toxin des weißen Knollenblätterpilzes). Man erkennt, dass ein großer Teil der Aktinfasern in den focal adhesions endet. Die Aktinfasern bilden dicke Bündel, die straff aufgespannt erscheinen. Diese Fasern werden Stressfasern genannt. Sie enthalten nicht nur Aktin, sondern auch Myosin. Wie beim glatten Muskel können diese Fasern daher verkürzt werden, sodass die

4

Fasern gespannt werden, was z.B. bei der Zellwanderung wichtig ist, aber auch beim Aufbau der Zellarchitektur Die Bildung von Strukturen wie der Stressfasern erfordert 1) Anheften von Aktin(-Myosin)-Filamenten an Integrine, 2) Neubildung von Aktinfilamenten, und 3) Straffen der Filamente. Diese komplexen Prozesse werden von kleinen G-Proteinen aus der Rho-Familie reguliert, die zu den Kontaktstellen rekrutiert und dort durch Guaninnukleotid-Austauschfaktoren GEFs (7 Kap. 25.4.4) aktiviert werden Durch ähnliche Mechanismen werden bei wandernden Zellen die etwas kleineren fokalen Komplexe gebildet, von denen aus die Aktinfasern zu Strukturen wie Lamellipodien und Filopodien organisiert werden In die Fokal-Kontakte werden weitere Signalmoleküle eingelagert (. Abb. 24.14b). Darunter sind Tyrosinkinasen der Src- Familie und die focal-adhesionKinase (FAK). Letztere kommt nur in Fokal-Kontakten vor, und ihre Aktivierung ist strikt an die Bildung solcher Adhäsionsplaques gekoppelt. Diese Kinasen können Tyrosinreste von Proteinen in den Adhäsionsplaques phosphorylieren. An diese binden (über SH2Domänen) Adapter-Proteine, die häufig mehrere SH2- und SH3-Domänen enthalten und so eine Reihe von Signaltransduktionsprozessen initiieren können (7 Kap. 25.4.2) In Epithelzellen der Haut und einigen anderen Epithelien wird die stabile Verankerung und Signaltransduktion durch einen zweiten Mechanismus, der Bildung von Hemidesmosomen über das D6E4-Integrin (7 Kap. 24.8.4), bewerkstelligt

Dieses etwas ungewöhnliche Zusammenspiel der Rekrutierung von Signaltransduktionsmolekülen und der Wirkungen auf das Cytoskelett resultiert in folgender Besonderheit der Signaltransduktion: ! Typisch für Integrine ist die Kopplung der Signaltransduktion an ein organisiertes Cytoskelett.

Diese Kopplung soll vermutlich sicherstellen, dass eine Zelle nur in dem richtigen Kontext funktioniert. Beispielsweise sollten Epithelzellen nur im Zellverband, d.h. adhäriert an der Basalmembran und im Kontakt zu den Nachbarzellen funktionieren. Losgelöst und vielleicht in der Blutbahn an einen fremden Ort verfrachtet, sollten sie hingegen ihre Funktion einstellen. Der Integrin-vermittelte Kontakt zur Basalmembran ist essenziell für die Ausbildung der korrekten Zellarchitektur und der Zellpolarität. Wird dieser Kontakt verhindert, degeneriert die Zelle. Das eindruckvollste Beispiel ist sicherlich die Degeneration des Embryos, wenn die Integrinabhängige Ausbildung der Basalmembran zwischen dem primitiven Ekto- und Endoderm unterbleibt. Es kommt nicht zur Bildung des zweiblättrigen Keimblatts!

24

736

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

Auch weitere durch Integrine stimulierte Reaktion lassen sich mit der Annahme, dass ein priming der Zelle durch Integrin-abhängige Zelladhäsion erforderlich ist, erklären: 4 Integrine wirken synergistisch mit Wachstumsfaktoren. Einige Integrine können ebenso wie Wachstumsfaktoren (7 Kap. 25.4.3) über SH2/SH3-Adapter-

proteine Ras aktivieren. Die Zellen müssen adhärent sein, damit die Wachstumsfaktoren wirken können. In Suspension teilen sich nichttransformierte Zellen nicht 4 Integrine sind permissiv für die Zelldifferenzierung. In einigen Zelltypen bewirkt die Adhäsion Austritt aus dem Zellzyklus und Differenzierung

In Kürze

24

Nichtkollagene Glycoproteine der ECM wie Fibronectin und Laminin sind wichtige Mediatoren 4 von Zelladhäsion und -wanderung und 4 beeinflussen Zellfunktion, -differenzierung und -proliferation Fibronectin kommt in zahlreichen Spleiß-Varianten vor. Es bindet 4 sowohl an andere ECM-Moleküle wie Kollagen und Heparin als auch 4 über Integrine an Zellen Im adulten Organismus ist Fibronectin von Bedeutung 4 bei der Wundheilung und 4 der Regulation der Aktivität von (Bindegewebs-)Zellen Während der Embryonalentwicklung ist Fibronectin u.a. essentiell für die Bildung mesodermaler Strukturen. Laminine stellen eine große Molekülfamilie aus drei Polypeptidketten dar, die meisten Moleküle besitzen eine typische kreuzförmige Struktur.

24.6

Abbau der extrazellulären Matrix

Die extrazelluläre Matrix des Erwachsenen besitzt in der Regel einen recht geringen Stoffumsatz. So werden ca. 2–3% des Hautkollagens täglich erneuert, im gesunden Gelenkknorpel beträgt die Halbwertszeit viele Jahre. In bestimmten Situationen sind jedoch ein schneller Abbau bzw. Umbau erforderlich. Großflächige Umstrukturierungen finden z.B. bei der Rückbildung des Uterus nach der Geburt und bei der Wundheilung statt, während lokal eng begrenzte Abbauprozesse beim Durchtritt von weißen Blutkörperchen aus der Blutbahn ins Interstitium erfolgen. Der Abbau von ECM-Molekülen wird durch spezifische Proteasen vermittelt. Einige davon sind Serinproteasen, die meisten gehören jedoch zur Familie der Metalloproteinasen: 4 Zwei für den Abbau der ECM wichtige Serinproteasen sind tPA (tissue-type-plasminogen activator) und uPA (urokinase-type-plasminogen-activator). Beide wandeln durch Spaltung einer einzigen Peptidbindung Plasminogen in Plasmin um. Plasminogen/Plasmin sind wegen ihrer Rolle bei der Auflösung von Blutgerinnseln

Laminine sind 4 obligatorische Bestandteile der Basalmembran und 4 werden gewebs- und entwicklungsspezifisch exprimiert Der Ausfall der verschiedenen Iso-Formen hat einen charakteristischen, oft letalen Phänotyp. Integrine 4 sind die wichtigsten Zelloberflächen-Rezeptoren für ECM-Moleküle 4 bilden eine große Familie von heterodimeren Molekülen aus je einer D- und einer E-Kette 4 können in verschiedenen Kombinationen unterschiedliche Liganden binden 4 binden an die ECM, was für die Ausbildung der FokalKontakte wichtig ist. Dabei organisieren Integrine das Aktin-Cytoskelett, führen zur Aktivierung von Proteinkinasen und beeinflussen dadurch Signaltransduktionswege und den Funktionszustand der Zellen Inaktivierung von Integrin-Genen verursacht schwerste Schäden.

durch Spaltung von Fibrin bekannt (7 Kap. 29.5.3), sind aber auch an Umbauprozessen der ECM beteiligt. Plasmin ist in der Lage, verschiedene ECM-Proteine wie Fibronectin und Laminin zu verdauen. Eine Besonderheit von uPA besteht darin, dass durch Bindung an den Zelloberflächen-Rezeptor uPAR gezielt die ECM in der direkten Umgebung dieser Zelle verdaut werden kann, z.B. bei der Extravasation von Leukozyten. 4 Die Matrix-Metallo-Proteinasen (MMPs) stellen eine Familie von inzwischen über 20 Zink-abhängigen Proteasen dar (. Tabelle 24.5), die entweder sezerniert werden oder in der Membran verankert sind. Alle Enzyme besitzen eine konservierte Protease-Domäne, in der drei Histidin-Reste das Zinkatom im katalytischen Zentrum komplexieren. Zusätzlich finden sich bei den meisten Mitgliedern noch eine oder mehrere C-terminale Domänen, die für Substraterkennung und -bindung wichtig sind. ! Die Matrix-Metallo-Proteinasen werden als inaktive ProFormen (Zymogene) gebildet.

737 24.7 · Biochemie und Pathobiochemie des Skelettsystems

. Tabelle 24.5. Matrix-Metalloproteinasen und ihre Substrate (Auswahl) Col = Kollagen Enzym

Alternative Namen

Typische Substrate

Kollagenasen MMP-1

Kollagenase-1, Fibroblasten-Kollagenase

Col I, II, III, VII, X, Pro-MMP-2 u.-9

MMP-8

Kollagenase-2, Neutrophilen-Kollagenase

Col I, II, III, Aggrecan

MMP-13

Kollagenase-3

Col I, II, III, Aggrecan

MMP-2

Gelatinase A

Gelatine, Col IV, Col I, V, X, Elastin, Aggrecan, Link-Protein

MMP-9

Gelatinase B

Gelatine, Col IV, Col V, XI, Elastin, Aggrecan, Link-Protein

MMP-3

Sromelysin-1, Proteo-glykanase

Kollagene u. nichtkollagene ECM-Proteine, Pro-MMP-1,-8,-9,-13, E-Cadherin, L-Selektin, Inaktivierung v. Protease-Inhibitoren

MMP-10

Stromelysin-2

ähnlich wie MMP-3, schwächer aktiv als MMP-3

MMP-14

MT1-MMP

Col I, II, III, Fibronectin, Laminin, Proteoglykane

MMP-16

MT3-MMP

Pro-MMP-2

MMP-7

Matrilysin, PUMP-1

ECM-Proteine, Pro-MMP-1,-2 u.-9

MMP-12

Metalloelastase

Elastin und weitere ECM-Moleküle

MMP-20

Enamelysin

Amelogenin

Gelatinasen

Stromelysine

Membran-MMPs

Sonstige

Die Pro-Form enthält eine N-terminale Domäne, die ProDomäne, die das katalytische Zentrum blockiert. Die Aktivierung der Protease erfolgt durch proteolytische Abspaltung des Propeptids im Extrazellulärraum. Lediglich Stromelysin-3 und die membrangebundenen MMPs (MT-MMPs) werden bereits im Golgi-Apparat aktiviert. ! Die Matrix-Metallo-Proteinasen besitzen zum Teil eine sehr hohe Substratspezifität.

Die Kollagenasen MMP-1, -8 und -13 spalten die fibrillären Kollagene I–III, nicht aber Kollagen-Typ-IV. Die Spaltung erfolgt an einer einzigen Gly-Ile/Leu-Bindung. Die Tripelhelix der Fragmente ist thermisch nicht mehr so stabil und kann von anderen Proteasen, darunter die ebenfalls zu den MMPs gehörenden Gelatinasen (MMP-2 und MMP-9), weiter verdaut werden. Letztere vermögen auch das Typ-IV-Kollagen in zwei Fragmente zu zerlegen. Die Bedeutung der MMPs wurde in jüngerer Zeit auch durch Ausschalten der entsprechenden Gene in Mäusen offenbar. So können Makrophagen von Mäusen, denen MMP-12 fehlt, weder in vitro noch in vivo durch die Basalmembran penetrieren. MMP-9 defiziente Mäuse zeigen verzögertes Wachstum der langen Knochen mit abnorm verdickter Wachstumszone, was auf eine Verzögerung des Abbaus der knorpeligen ECM bei der indirekten Ossifikation zurückzuführen ist (s.u.). ! Die Aktivität von MMPs und Serinproteasen wird strikt reguliert.

Eine überschießende Reaktion würde leicht zu einer Gewebszerstörung führen. Daher erfolgt die Aktivierung lokal begrenzt an der Zelloberfläche von Fibroblasten. Gelatinase wird bei Bedarf durch die membranständige MT1-MMP aktiviert, die gleichzeitig einen Rezeptor für das aktive Enzym darstellt. Darüber hinaus gibt es eine Reihe von Inhibitoren der MMPs, die TIMP (tissue inhibitors of metalloproteinases) genannt werden. Normalerweise herrscht ein fein reguliertes Gleichgewicht zwischen den MMPs und TIMPs. Störungen des Gleichgewichts führen zu einem erhöhten Kollagenabbau (z.B. bei Metastasierungen) oder zu erniedrigtem Kollagenabbau (Fibrose).

24.7

Biochemie und Pathobiochemie des Skelettsystems

24.7.1

Die extrazelluläre Matrix von Knorpel und Knochen

Knorpel. Knorpel findet sich an den Stellen, wo flexible, druckresistente Strukturen benötigt werden. Er hat als Gelenkknorpel und Zwischenwirbelscheibe mechanische Aufgaben. Darüber hinaus ist Knorpel die Vorstufe für die durch indirekte Ossifikation entstehenden Knochen. Die extrazelluläre Matrix des Knorpels wird von Chondrozyten gebildet, die von ihren eigenen Syntheseprodukten eingeschlossen werden, sodass sie nur noch durch Diffusion von außen ernährt werden können, denn Knorpel ist nicht

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738

24

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

vaskularisiert. Die Knorpelmatrix stellt im Wesentlichen ein faserverstärktes Gel dar. Der Gelcharakter ist durch polyanionische Aggregate aus Hyaluronsäure mit Proteoglykanen (Aggrecan) bedingt (7 Kap. 2.1.4, 24.4.1), die zu hohen osmotischen Drücken führen. Daher besitzt Knorpel die Fähigkeit anzuschwellen, der Wasseranteil beträgt etwa 70–80%. Dieses Gel wird durch quervernetzte Fibrillen aus Kollagen-Typ-II in Form gehalten. Dieses Kollagen ist das mengenmäßig dominierende Knorpelkollagen. Daneben findet man noch geringere Mengen der physiologisch ebenfalls wichtigen Kollagene Typ-XI und Typ-IX (7 Kap. 24.2.1). Knorpel ist meist von einem Perichondrium umgeben, dies trifft jedoch nicht zu für die Gelenkflächen, die KnorpelKnochen-Grenze der Gelenke und die Wachstumszone. Im Perichondrium finden sich Kollagene Typ-I, -II und -V. Zusätzlich zu den Kollagenen und Proteoglykanen enthält die Korpel-Matrix noch weitere Proteine, darunter Proteaseinhibitoren und die in drei Isoformen bekannten Matriline (auch cartilage matrix protein genannt). Die mit den Thrombospondinen (. Tabelle 24.3) verwandten Matriline besitzen möglicherweise eine Bedeutung in der Assemblierung der Knorpelmatrix oder vermitteln die Adhäsion der Chondrozyten an Knorpel-Matrix-Proteine.

klasten. Fehlen dieser Proteine äußert sich u.a. in einer erhöhten Knochenbrüchigkeit und einer verlangsamten Heilung von Knochenbrüchen. Osteopontin und bonesialoprotein sind integrinbindende, phosphorylierte und sulfatierte Glycoproteine, denen aufgrund ihrer Fähigkeit Hydroxylapatit zu binden eine Funktion in der Mineralisierung zugeschrieben wird. Wichtig für die Ossifikation sind auch Proteine mit Vitamin-K abhängig gebildeten J-Carboxy-Glutamat-Resten (= Gla), z.B. Matrix-GLA-Protein und Osteocalcin (7 Kap. 23.2.4). Mäuse mit inaktivierten Genen für Matrix-GLA-Protein und Osteocalcin zeigen überraschenderweise eine verstärkte (!) Knochenbildung. Mäuse ohne GLA-Protein sterben in den ersten beiden Monaten nach der Geburt aufgrund einer exzessiven, abnormalen Calzifizierung der Arterien. Trotz ihrer Fähigkeit an Apatit zu binden, scheint also die Funktion dieser Proteine eher in der kontrollierten Abscheidung von Hydroxylapatit und der Verhinderung einer überschießenden Ossifikation zu liegen. Ein wichtiges Markerenzym für die Osteoblastenaktivität ist eine knochenspezifische alkalische Phosphatase, deren physiologische Funktion allerdings noch nicht genau bekannt ist.

Knochen. Im Gegensatz zum Knorpel ist der Knochen gut

durchblutet und innerviert. Die eigentlichen Knochenzellen sind die Knochenmatrix synthetisierenden Osteoblasten/Osteozyten und die Knochenmatrix ab-/umbauenden Osteoklasten. Der Knochen erfüllt mehrere Funktionen. Zum einen ist er ein hochdifferenziertes Stützgewebe, das für die Bewegungen des Körpers und zum Schutz von Organen wie dem Gehirn essentiell ist, zum anderen dient er als Speicher für Calcium- und Phosphationen. Darüber hinaus beherbergt der Knochen das Knochenmark als Stätte der Blutbildung. Das anorganische Knochenmaterial setzt sich vorwiegend aus Calciumphosphaten zusammen, die sehr dem Hydroxylapatit [3Ca3(PO4)2 ˜Ca(OH)2] ähneln. Zusammen mit 10% Wasser machen die anorganischen Bestandteile des Knochens etwa 80% aus. Die restlichen 20% entfallen auf organisches Material. Die Hauptkomponente stellt das Kollagen-Typ-I dar, das dem Knochen die mechanische Festigkeit verleiht. Die anorganische Matrix alleine ist zu brüchig, um Belastungen Stand zu halten, sie bildet mit dem Kollagen zusammen eine Art »Verbundwerkstoff«. Nichtkollagene Proteine machen nur etwa 10% der organischen Matrix aus, sind aber dennoch für die Knochenentwicklung und Homöostase wichtig. Zu den nichtkollagenen Proteinen gehören Proteoglykane wie Decorin und Biglykan und Zelladhäsionsproteine wie Fibronectin. Weiterhin enthält Knochen eine Reihe von matrizellulären Proteinen (. Tab. 24.3) wie Tenascin, Thrombospondin, Osteopontin und bone sialoprotein. Diese auch in der extrazellulären Matrix von Nicht-Knochen-Gewebe weit verbreiteten Proteine unterstützen u.a. die Differenzierung/Funktion von Osteoblasten und Osteo-

24.7.2

Synthese von Knochen und Knorpel durch Chondrozyten und Osteoblasten

Chondroblasten und Osteoblasten leiten sich von mesenchymalen Stammzellen ab, aus denen in anderen Differenzierungsprogrammen auch Fibroblasten, Myoblasten und Adipozyten entstehen. Sie sind die beiden zentralen Zelltypen, die die Knochen- und Knorpelsubstanz aufbauen. Knorpelbildung. An der Bildung der Knorpelsubstanz sind lediglich die Chondroblasten und Chondrozyten (in Knorpelmatrix eingebettete Chondroblasten) beteiligt. Sie synthetisieren die charakteristischen Knorpelbestandteile wie das Typ-II-Kollagen und Aggrecan. Knochenbildung. Die Bildung des Knochens verläuft we-

sentlich komplexer. Bei der direkten oder desmalen Ossifikation differenzieren mesenchymale Zellen direkt zu Osteoblasten. Zunächst wird eine Osteoid genannte organische Matrix aus Kollagen Typ I, Proteoglykanen, Mucinen und weiteren nichtkollagenen Proteinen wie Osteocalcin und Osteopontin abgelagert, die anschließend verkalkt. Die Osteoblasten werden in diese verkalkte Substanz eingemauert, bleiben aber über Zellfortsätze miteinander in Kontakt. Diese Art der Knochenbildung ist auf relativ wenige Bereiche wie z.B. die Bildung des knöchernen Schädeldachs beschränkt. Die häufigste Art der Knochenbildung ist die indirekte oder enchondrale Ossifikation. Einen

739 24.7 · Biochemie und Pathobiochemie des Skelettsystems

. Abb. 24.16. Schematische Darstellung der enchondralen Ossifikation von Röhrenknochen. Mesenchymale Zellen (1) kondensieren zu einer Knorpelanlage (Knorpelblastem) (2), das Knorpelmodell erhält eine perichondrale Knochenmanschette (3), die umschlossenen Chondrozyten hypertrophieren, verkalken und gehen durch Apoptose zugrunde (4), Blutgefäße wandern ein (5) und mit ihnen Chondroklasten, die die Reste der Knorpelzellen abbauen. In die ent-

standene Markhöhle wandern Osteoblasten-Vorläuferzellen ein und leiten die primäre Ossifikation ein (5). Das Längenwachstum erfolgt an der Wachstumszone zu beiden Seiten der Markhöhle (7 auch . Abb. 26.17a). In späteren Entwicklungsstadien, vor allem nach der Geburt entsteht in den Epiphysen das sekundäre Ossifikationszentrum (6, dargestellt sind zwei sekundäre Ossifikationszentren in unterschiedlichen Entwicklungsstadien)

Überblick gibt . Abb. 24.16. Eingeleitet wird sie durch Kondensation von Mesenchymzellen. Während die Zellen an der Peripherie das Perichondrium bilden und sich direkt zu Osteoblasten entwickeln, differenzieren die Zellen im Zentrum zu Knorpelzellen. Im Gegensatz zur Chondrogenese bleibt die Differenzierung aber nicht auf der Stufe der Chondrozyten stehen, sondern sie differenzieren über verschiedene Zwischenstadien zu hypertrophen Zellen, die durch Apoptose zugrunde gehen. Die Hypertrophierung ist durch Umschalten der Synthese von Kollagen-Typ-II auf Typ-X und schließlich die Mineralisierung der Knorpelmatrix gekennzeichnet. Von den hypertrophen Knorpelzellen sezerniertes VEGF (= vascular endothelial growth factor) führt zur Vaskularisierung der mineralisierten Knorpelmatrix. Mit den Blutgefäßen dringen Zellen ein, die zu Chondroklasten werden und die Knorpelreste abbauen, und schließlich Osteoblasten-Progenitorzellen, die die endgültige Ossifikation einleiten. Die Knochenmatrix-synthetisierenden Osteoblasten sind spezialisierte, aber noch nicht terminal differenzierte Zellen. Einige werden schließlich in die Knochen-

matrix eingebettet und differenzieren zu den nicht mehr teilungsfähigen Osteozyten, die über ein Netzwerk von Zellfortsätzen miteinander verbunden bleiben, aber kaum noch Osteoid synthetisieren. Andere sterben durch Apoptose ab. Auf molekularer Ebene werden Chondrogenese und Osteogenese durch eine Reihe von Faktoren reguliert, die man in zwei Gruppen unterteilen kann: 4 Schlüsseltranskriptionsfaktoren. Sie bewirken die Differenzierung von mesenchymalen Vorläuferzellen zu Chondrozyten bzw. Osteoblasten. Diese Faktoren werden im Laufe der Embryonalentwicklung an entscheidenden Weichenstellungen exprimiert. Sind sie nicht vorhanden, wird die ganze Zell-Linie (z.B. Chondroblasten) nicht gebildet. Welche Faktoren die Induktion dieser Transkriptionsfaktoren zum richtigen Zeitpunkt an der richtigen Position bewirken, ist meist erst unvollständig aufgeklärt 4 Parakrine Wachstumsfaktoren und Hormone. Eine Übersicht ist in . Tab. 24.6 dargestellt. Im Folgenden sind nur die wichtigsten Faktoren dargestellt

24

740

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

! Die wichtigsten Transkriptionsfaktoren für die Bildung von Chondrozyten und Osteoblasten sind SOX9 und CBFA-1 (Runx2).

24

SOX-9 reguliert die frühe Differenzierung der kondensierenden Mesenchymzellen zu Knorpelzellen und die folgenden Differenzierungsstadien. SOX-9 stimuliert zusammen mit weiteren Mitgliedern der SOX-Familie die Transkription einer Reihe von Matrix-Genen, darunter Typ-II-Kollagen und Aggrecan. Für die späte Differenzierung von Chondrozyten zu hypertrophen Chondrozyten übernimmt ein zweiter Transkriptionsfaktor, CBFA-1 (= core binding factor-1), Synonym: Runx-2 (= runt related transcription factor-2), eine zentrale Rolle. CBFA-1 ist gleichzeitig der Schlüsseltranskriptionsfaktor für die Differenzierung von Mesenchymzellen zu Osteoblasten. Ohne CBFA-1 bilden sich zwar noch die knorpeligen Vorläufer der Knochen, aber die OsteoblastenDifferenzierung und somit die Ossifikation unterbleiben. CBFA-1 ist auch für die Expression von Osteoblasten-spezifischen Genen erforderlich und wurde in der Tat erstmals als ein die Transkription von Osteocalcin stimulierender Faktor isoliert. ! Parakrin sezernierte Faktoren aus den Familien der BMPs und FGFs besitzen eine Schlüsselfunktion bei allen Stadien der Chondrozyten-Differenzierung.

Die bone morphogenetic proteins (BMPs) aus der TGFESuperfamilie wurden aufgrund ihrer Fähigkeit entdeckt, enchondrale Knochenbildung zu induzieren, wenn sie subkutan in Mäuse injiziert wurden. Die BMP-Proteine kommen in zahlreichen entwicklungsspezifisch exprimierten Isoformen vor und binden an mehrere unterschiedliche Rezeptoren. Einige Vertreter (BMP-4) sind für die Kondensation der Mesenchymzellen wichtig, für jeden Knochen muss eine Anlage von aggregierten Mesenchymzellen gebildet werden. Die Aggregation der Mesenchymzellen wird u.a. durch Expression von Zelladhäsionsmolekülen aus der Cadherin-Familie bewirkt. Außerdem halten BMPs die SOX-Expression aufrecht. BMPs sind auch an den weiteren Schritten der Chondrogenese beteiligt, wobei in jedem Stadium ein charakteristisches Muster an BMPs exprimiert wird. Darüber hinaus sind BMP-Proteine auch für die Osteoblastenentwicklung essenziell, von der Differenzierung der Mesenchymzellen über die Reifung der Osteoblasten bis hin zur Apoptose von Osteozyten. Die Fibroblastenwachstumsfaktoren (FGFs) stellen eine Gruppe von Cytokinen dar, die mit Tyrosinkinaserezeptoren (FGFRs) der Targetzelle interagieren. Viele der insgesamt 22 FGF-Gene und der vier FGF-Rezeptorgene werden in allen Stadien der Knorpel- und Knochenentwicklung exprimiert. Eine der bekanntesten Wirkungen ist die Induktion der Extremitätenknospen und die Regula-

tion des proximal-distalen Wachstums durch FGF8, und legt so die Grundlagen für die Arm- und Beinentwicklung. In der Wachstumsfuge wirken sie antagonistisch zu den BMPs (7 u.). Störungen der FGF-Signaltransduktion sind verantwortlich für häufige erblich bedingte Fehlregulationen der Knochenbildung: Die Achondrodysplasie, die häufigste Form von Zwergwuchs, wird durch aktivierende Mutationen des FGFR-3-Rezeptors verursacht, was zu einer verfrühten terminalen Differenzierung der Chondroblasten führt. Die Kraniosynostose ist die vorzeitige Verknöcherung der Schädelnähte. Sie wird meist durch aktivierende Mutationen des FGFR-2-Rezeptors verursacht, übermäßig starkes signaling durch FGF stimuliert die Differenzierung von Osteoblasten. ! Ein Regelkreis aus Ihh und PTHrP kontrolliert die Länge der Zone der proliferierenden Chondrozyten in der Wachstumsfuge.

Das Längenwachstum der Röhrenknochen erfolgt an den Wachstumsfugen und ist durch eine charakteristische Abfolge ruhender, proliferierender und hypertrophierender Chondrozyten gekennzeichnet (. Abb. 24.17a). Die verschiedenen Differenzierungsschritte müssen strikt reguliert und koordiniert werden. Werden z.B. unter pathologischen Bedingungen Chondrozyten zu einem vorzeitigen Übergang von der proliferativen Phase zum hypertrophierten Zustand stimuliert, wird das Längenwachstum des Knochens verlangsamt, mit Zwergwuchs als Folge. Die kontrollierte Abfolge von Reifungsprozessen wird durch komplexe Regelkreise gesteuert, an denen Hormone (Wachstumshormon, IGFs, Schilddrüsenhormone, 7 u.) und Wachstumsfaktoren (BMPs, FGFs, . Abb. 24.17b) beteiligt sind. Ein wichtiger Regelkreis zur Kontrolle der Chondrozyten-Proliferation und -Reifung wird durch indian hedgehog (Ihh) und parathormon-related-peptide (PTHrP) gebildet. (. Abb. 24.17a,b). Indian hedgehog (Ihh) ist ein Mitglied der Hedgehog Familie von lokal wirkenden, sezernierten Proteinen, die nach Bindung an den Rezeptor patched den Transkriptionsfaktor Gli (so benannt nach Mutationen die zu Glioblastomen führen) aktivieren. Ihh wird in prähypertrophen und frühen hypertrophen Chondrozyten exprimiert. Es stimuliert zum Einen die Proliferation der zum Gelenkende hin gelegenen Chondrozyten (die zur späteren Markhöhle gelegenen Chondrozyten sind nicht mehr teilungsfähig). Zum Anderen verhindert Ihh die vorzeitige Hypertrophierung der Chondrozyten. Dieser Effekt wird indirekt über Stimulierung der PTHrP-Expression vermittelt (7 u.). Eine weitere wichtige Funktion von Ihh ist die Förderung der Bildung von Osteoblasten in der primären Spongiosa und der Knochenmanschette. Parathormon-related-peptide (PTHrP) bindet an den gleichen Rezeptor wie PTH und wurde in der Tat auch als

741 24.7 · Biochemie und Pathobiochemie des Skelettsystems

. Abb. 24.17a,b. Interaktion von PTHrP, Ihh, BMPs und FGFs bei der Regulation der Chondrozytenproliferation und Reifung in der Wachstumszone (spätere Epiphysenfuge, vgl. Abb. 26.16, 5 u. 6).

a biologische Wirkungen von Ihh und negative Rückkopplung zwischen Ihh und PTHrP, b Darstellung des Antagonismus zwischen FGFs und BPMs und Beziehung zu Ihh und PTHrP. (Einzelheiten 7 Text)

Faktor entdeckt, der die Hypercalcämie bei bestimmten Tumoren bewirkt. Erst später wurde seine Bedeutung bei der Knochenentwicklung erkannt. PTHrP wird unter der Wirkung von Ihh von Perichondrium-Zellen und den frühen proliferativen Chondrozyten an den periartikulären Enden der langen Knochen exprimiert, der Mechanismus ist noch nicht bekannt. PTHrP wirkt primär, indem es die Chondrozyten im proliferierenden Zustand hält. Wenn Chondrozyten nicht mehr genügend durch durch PTHrP stimuliert werden, können sie nicht mehr zur Proliferation angeregt werden und beginnen, Ihh zu synthetisieren. Durch diesen Regelkreis wird die Länge der proliferativen Zone vorgeben (. Abb. 24.17a). Die Bedeutung des Ihh/ PTHrP-Systems erkennt man am besten aus der Tatsache, dass Fehlen von Ihh zu schwersten Wachstumsstörungen führt: Das Wachstum der Röhrenknochen ist praktisch komplett inhibiert, und es werden keine Osteoblasten gebildet. An der Wachstumsfuge müssen noch weitere Faktoren aktiv werden, damit eine normale Knochenentwicklung erfolgt:

trophen Chondrozyten zu terminal differenzierten Chondrozyten. Daher ist das Knochenwachstum vom richtigen Verhältnis der beiden Cytokine abhängig (. Abb. 24.17b).

! BMPs und FGFs sind Antagonisten bei der Regulation der Chondrozyten-Differenzierung in der Epiphysenfuge.

BMPs werden in proliferierenden und hypertrophierenden Chondrozyten sowie im Perichondrium exprimiert. Sie fördern die Proliferation von Chondrozyten und verzögern/inhibieren ihre terminale Differenzierung. Sie stimulieren die Expression von Ihh (und umgekehrt). FGFs hingegen vermindern die Proliferation von Chondrozyten und beschleunigen die Differenzierung von hyper-

! Parakrine Faktoren regulieren Chondro- und Osteogenese zusammen mit Hormonen.

An der Entwicklung und Homöostase von Knorpel/Knochengewebe sind eine Reihe von Hormonen beteiligt (. Tab. 24.6). PTH, Calcitonin und Dihydroxycalciferol regulieren den Calcium-Haushalt. Die wichtigsten Hormone, die das Längenwachstum während der Embryonalentwicklung und der Kindheit regulieren, sind das Wachstumshormon (GH) und die insulin-like growth factors-1, -2 (7 u.), die Schilddrüsenhormone und die Glucocorticoide, während des Heranwachsens gewinnen die Androgene und Östrogene an Bedeutung. Sowohl Chondrozyten als auch Osteoblasten besitzen Rezeptoren für diese Hormone. Die Biochemie dieser Hormone wird im Kap. 27 besprochen. Hier soll nur kurz die Beziehung zu den parakrinen Faktoren abgegrenzt werden. Auf den ersten Blick scheinen Hormone und parakrine Faktoren redundante Funktionen in der Embryonalentwicklung und der Wachstumsphase zu besitzen, da beide Proliferation und Differenzierung unterstützen. Aber da sowohl Störungen des Hormon-Haushalts als auch Defekte in der Signaltransduktion durch parakrine Wachstumsfaktoren zu definierten Defekten im Skelettsystem führen, können sie sich offensichtlich nicht gegenseitig ersetzen. Beide Komponenten sind essenziell. Einige Funktionen lassen sich klar voneinander abgrenzen. In der Embryonalentwicklung sind morphogenetische Prozesse wie Kondensation der Mesenchymzellen zu Knor-

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742

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

. Tabelle 24.6. Faktoren, die das Knochenwachstum beeinflussen (Auswahl) Faktor

Effekte

Hormone

24

T3

erforderlich für die normale Knochenentwicklung, bei Mangel Wachstumsverlangsamung, bei Überschuss beschleunigtes Knochenwachstum, fördern hypertrophe Differenzierung von Chondrozyten, Stimulierung der Transkription von IGF und GH

Glucocorticoide

Rezeptoren in proliferierenden und hypertrophierenden Chondrozyten und Osteoblasten, Osteoblastenproliferationp, Osteoblastendifferenzierungn, Knochenmatrixproduktionp, Knochenresorptionn

GH

IGF-Produktion (Leber)n, Wirkung an der Wachstumsfuge (Epiphysenwachstum): IGF-abhängige und unabhängige Mechanismen, GH postnatal erforderlich, pränatal nicht essentiell

IGF’s

Epiphysenwachstumn

Vitamin D

Stimulierung der Knochenbildung (vor allem durch Erhöhung des Ca2+ -Spiegels), Stimulierung der Osteoblasten (weniger wichtig), Stimulierung von Osteoklasten

PTH

Ca2+ -Mobilisierung aus dem Knochen, kurze Pulse von PTH wirken Osteoporose entgegen

Prostaglandin E2

Osteoklastengenese

Wachstumsfaktoren Ihh

produziert von postmitotischen Chondrozyten, Chondrozyten-Proliferation und -Differenzierungn, OsteoblastenDifferenzierungn, PTHrP-Bildungn, Osteoblasten-Differenzierung im Perichondriumn, Ihh-/- Mäuse: kleine KnorpelElemente, vermehrt hypertrophierender Knorpel

PTHrP

Bindet an PTH-Rezeptor, Proliferation von Chondrozyten, verzögerte Hypertrophierung,

FGFs

Chondrozyten: Proliferationp, terminale Differenzierungn, Osteoblasten: Regulation von Proliferation und Differenzierung; Effekte hängen vom Entwicklungsstadium ab

BMPs

Mesenchym-Kondensationenn, Chondrozyten-Proliferationn, terminale Differenzierungp, Antagonismus zu FGF

Interleukine

Osteoklastogenese

Transkriptionsfaktoren SOX9

Differenzierung von Vorläuferzellen zu Chondrozytenn, alle Stadien der Chondrozytendifferenzierungn, Transkription von ECM-Proteinenn

Cbfa1 (Runx2)

Differenzierung von Vorläuferzellen zu Osteoblastenn, bei Mangel abnorme Chondrozytenreifung

pelanlagen, Induktion der Extremitätenknospe primär die Domäne der parakrinen Faktoren (BMPs und FGFs). Auf der anderen Seite sind Koordination von Wachstumsprozessen primär die Aufgabe von Hormonen, z.B. kontrolliert das GH/IGF-System das proportionales Wachstum aller Knochen und die Koordination mit dem Muskelwachstum. Hormone koppeln auch das Wachstum an die Stoffwechsellage und Energieversorgung, hierbei sind die Schilddrüsenhormone und Glucocorticoide involviert. An vielen Prozessen sind aber Hormone und parakrine Faktoren gleichermaßen involviert (. Tab. 24.6). So regulieren T3/4, GH/IGF-1,2 auf der einen Seite und PTHrP/Ihh, BMP und FGF auf der anderen Seite zusammen die Proliferation und Differenzierung von Chondroblasten und Osteoblasten. Man weiß inzwischen, dass die Biosynthese von PTHrP und dessen Rezeptor zumindest teilweise unter Kontrolle der Schilddrüsenhormone steht, sodass sie den Regelkreis zwischen Ihh und PTHrP und somit auch die Länge des Zone zwischen Ruheknorpel und hypertrophierendem Knorpel (. Abb. 24.17a) beeinflussen. Auch stimulieren Schilddrüsenhormone die Biosynthese von Heparan-

sulfatproteoglykan, einem essenziellen Cofaktor der FGFRezeptors (7 o.). In den meisten Fällen sind die molekularen Mechanismen aber noch unbekannt. Die Wirkung der parakrinen Faktoren ist nicht auf die Wachstumsphase begrenzt. Einige Wachstumsfaktoren wie TGFβ, BMPs und FGFs werden auch im reifen Knochen gebildet und in der Knochenmatrix gespeichert. Sie spielen eine wichtige Rolle bei Umbau- und Regenerationsprozessen.

24.7.3

Differenzierung von Osteoklasten und Abbau und Umbau von Knochen und Knorpel

Osteoklasten sind die Zellen, die die Knochensubstanz auflösen und so für den Umbau des Skelettsystems unentbehrlich sind (7 u.). ! Im Gegensatz zu den Chondroblasten und Osteoblasten leiten sich die Osteoklasten von Vorläuferzellen der Makrophagen ab.

743 24.7 · Biochemie und Pathobiochemie des Skelettsystems

. Abb. 24.18. Mechanismus der Differenzierung von Osteoklasten aus Makrophagen-ähnlichen Vorläufern. Es werden zwei Signale benötigt: 1 direkte Interaktion von RANKL auf der Oberfläche von Osteoblasten/Stroma-Zellen mit dem Rezeptor RANK auf dem Makrophagen; 2 Bindung M-CSF an seinen Rezeptor auf der Vorläuferzelle; OPG = Osteoprotegrin; Vit D = Vitamin D; PTH = Parathormon. (Einzelheiten 7 Text)

Die Osteoklasten besitzen bis auf die terminale Differenzierung den gleichen Differenzierungsweg wie die Makrophagen. Progenitorzellen werden über die Blutzirkulation rekrutiert, durch Fusion von einkernigen Vorläufern entstehen schließlich die reifen, vielkernigen Osteoklasten (. Abb. 24.18). ! Zwei Osteoblasten-Proteine, M-CSF und RANKL, sind notwendig und hinreichend, um die Osteoklastogenese zu stimulieren.

Aufgrund der gleichen Abstammung ist nicht verwunderlich, dass der Wachstumsfaktor M-CSF (macrophage colonystimulating factor), der die Proliferation und Differenzierung der Makrophagen-Vorläuferzellen stimuliert, auch die Osteoklastenbildung reguliert. M-CSF kann von Osteoblasten gebildet werden oder auf dem Blutweg den Knochen erreichen. Zusätzlich ist ein direkter Kontakt zwischen Osteoblasten und Osteoklasten-Progenitorzellen zwingend erforderlich. Ohne die Anwesenheit von Osteoblasten werden keine Osteoklasten gebildet. Auf diese Weise werden Knochenabbau und -Aufbau miteinander gekoppelt, und einem überschießenden Knochenabbau kann weitgehend vorgebeugt werden. Osteoblasten stimulieren die Osteoklastenbildung über das in der Cytoplasmamembran verankerte Protein RANKL

(Ligand für RANK, alternativ auch TRANCE genannt). RANKL bindet an den Rezeptor RANK (receptor for activation of nuclear factor kappa B, auch OPGL, OsteoprotegrinLigand, genannt), der auf den Osteoklasten/MakrophagenVorläuferzellen exprimiert wird (. Abb. 24.18). Aktivierung von RANK durch RANKL führt zur terminalen Differenzierung und Aktivierung der Makrophagen. RANKL und RANK sind Mitglieder der Tumor-Necrosis-Factor-(TNF)und Tumor-Necrosis-Factor-Receptor-(TNFR)-Familie. Wie bei diesen assoziiert RANK mit TNF-Rezeptor-assoziierten Proteinen (TRAFs), die letztlich zu einer Aktivierung von NFNB und MAP-Kinasen führen (7 Kap. 25.4.3). Das Ausschalten der Gene für RANK oder RANKL führt neben schwerwiegenden Störungen im Immunsystem zur vollständigen Unterdrückung der Osteoklastogenese. Kürzlich wurde ein Antagonist zu RANKL gefunden, OPG (Osteoprotegrin) genannt. OPG konkurriert mit dem eigentlichen Rezeptor RANK um die Bindung von RANKL, vermag aber als frei lösliches Protein keine Signaltransduktion auszulösen und inhibiert so die Wirkung von RANKL. In Mäusen kann man durch Variation der Expression des Rezeptors RANK, des Liganden RANKL und des kompetitiven Inhibitors OPG die Osteoklasten-Bildung regulieren und alle Zustände von schwerer Osteopetrose bis zur massiven Osteoporose (7 Kap. 24.7.6) erzeugen. Viele Mediatoren wie PTH, Vitamin-D und Prostaglandine führen zu einer Erhöhung der Expression von RANKL. Daher nimmt man an, dass dieser Weg den gemeinsamen Endpunkt für viele Osteoklasten-aktivierende Prozesse darstellt. ! Osteoklasten erzeugen ein abgeschlossenes extrazelluläres Kompartiment, in dem die Knochenmatrix resorbiert wird.

Der erste Schritt im Knochenabbau besteht in der Anheftung der Osteoklasten an die Knochenoberfläche. Dies ist mit einer Polarisierung der Zelle verbunden. Die Plasmamembran gegenüber der Knochenmatrix faltet sich mehrfach ein, wodurch die resorbierende Oberfläche vergrößert wird, während der äußere Rand eine umlaufende dichte Verbindung zwischen Knochen und Zelle aufbaut, sodass ein isoliertes extrazelluläres Kompartiment entsteht, in dem der Knochenabbau vonstatten geht (. Abb. 24.19). Diese Abdichtung wird durch Bindung des Integrins DvE3 an ECM-Moleküle vermittelt. DvE3-defiziente Osteoklasten können Knochen nur unvollständig auflösen, was mit einer Erhöhung der Skelettmasse und einem niedrigen Blut-Calcium-Spiegel verbunden ist. Die Bedeutung der Erzeugung eines abgeschlossenen extrazellulären Kompartimentes wird klar, wenn man den Mechanismus der Resorption betrachtet (. Abb. 24.19). Zunächst muss die anorganische Knochenmatrix abgebaut werden. Dies geschieht durch pH-Erniedrigung in dem abgeschlossenen Raum, wodurch der Hydroxylapatit in Lösung geht. Die Ansäuerung erfolgt ähnlich wie bei der Sezernierung von HCl im Magen durch Sezernierung von H+-Ionen durch eine Protonen-

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744

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

während der Pubertät, ebenfalls unter dem Einfluss von Sexualhormonen. ! Die Schließung der Epiphysenfuge wird beim Mann und der Frau durch Östrogen vermittelt.

Indiz dafür ist z.B., dass bei einem 28-jährigen Mann mit defektem Östrogenrezeptor (ER) aber normalem Testosteronspiegel die Epiphysenfugen noch nicht vollständig geschlossen waren. Ähnliche Effekte waren bei Mäusen mit inaktiviertem ER-D-Östrogenrezeptor-Gen sowie bei männlichen Ratten, bei denen durch Gabe von AromataseInhibitoren die Bildung von Östrogenen inhibiert worden war, zu beobachten.

24

. Abb. 24.19. Mechanismus der Knochenresorption durch Osteoklasten. (Einzelheiten 7 Text)

ATPase, wobei die Elektroneutralität durch einen ladungsgekoppelten Chlorid-Kanal gewahrt bleibt. Der intrazelluläre pH wird durch HCO3–/Cl– Austausch auf der dem Knochen abgewandten Seite des Osteoklasten aufrechterhalten. Daraufhin wird die entmineralisierte Knochenmatrix durch lysosomale Proteasen abgebaut, eine Schlüsselstellung nimmt dabei Kathepsin K ein.

24.7.4

Regulation des Knochenwachstums bis zur Pubertät

! Die Geschwindigkeit des postnatalen Skelettwachstums wird durch das Wachstumshormon aus der Hypophyse (GH) reguliert.

Aktivierung von GH-Rezeptoren auf Chondrozyten der Wachstumsfuge führt zur lokalen Produktion von IGF-1 (7 Kap. 27.7.2), das an den IGF-Rezeptor, eine Rezeptortyrosinkinase, der Chondrozten bindet. In wie weit systemisch in der Leber unter Einfluss von GH gebildetes IGF-1 am Knochen eine Rolle spielt, ist noch umstritten. IGF-1 stimuliert die Proliferation von Chondrozyten und deren Größenwachstum (= Zunahme des Zellvolumens). Zusätzlich scheint GH auch direkte Effekte zu besitzen, indem es Chondrozyten der Ruhezone zur Proliferation anregt. Ein Fehlen von IGF-1 führt zu Zwergwuchs, die Proportionen des Skeletts bleiben dabei jedoch erhalten. Im Gegensatz zum postnatalen Wachstum wird in der Embryonalentwicklung die Chondrozytenproliferation vor allem durch unabhängig von GH gebildetes IGF-1 und IGF-2 vermittelt. Für den Wachstumsschub während der Pubertät und die geschlechtsspezifische Ausprägung des Körperbaus sind die Sexualhormone (Testosteron und Östrogen, 7 Kap. 27.5.5, 27.6.5) verantwortlich. Das Längenwachstum der Knochen endet mit Schließung der Epiphysenfuge

24.7.5

Homöostase des Skelettsystems

In der Wachstumsphase steht durch die Aktivität der Hormone und der verschiedenen Wachstums-/Differenzierungsfaktoren die Bildung neuer Knochensubstanz im Vordergrund. Nach Beendigung des Wachstums geht das Skelettsystem nicht in einen ruhenden Zustand über, sondern bleibt nach wie vor sehr aktiv, denn es erfolgt ein steter Umbau des Knochens. Dies ist erforderlich, da die Knochen einerseits als Calcium-Speicher fungieren und bei Bedarf Calcium freigesetzt werden muss. Zum anderen wird das Skelettsystem den mechanischen Erfordernissen angepasst, die Knochenbälkchen werden in Richtung der maximalen Belastung angeordnet, ein Prozess der noch weitestgehend unverstanden ist, aber immense physiologische Bedeutung besitzt, da sonst der Knochen bei mechanischer Belastung leicht brechen würde. Ständig wird Knochensubstanz durch die Osteoklasten abgebaut und gleichzeitig neue Knochensubstanz durch die Osteoblasten hergestellt. Man schätzt, dass dies im menschlichen Skelett an etwa 1 bis 2 Millionen Stellen gleichzeitig geschieht. Etwa alle zehn Jahre ist das Skelettsystem einmal erneuert. Beim jungen Erwachsenen sind Aufbau und Abbau exakt ausbalanciert, mit zunehmendem Alter verschiebt sich das Gleichgewicht jedoch zugunsten der Osteoklasten, es kommt zur Osteoporose, die ein großes gesundheitliches Problem darstellt, insbesondere bei Frauen nach der Menopause. Die Osteoblasten- und Osteoklastenaktivität kann auf zwei Wegen reguliert werden. Zum einen können reife Zellen zu Knochenaufbau bzw. Knochenabbau aktiviert werden. Zum anderen können Vorläuferzellen zur Proliferation und Differenzierung stimuliert werden, umso mehr Zellen zur Verfügung zu stellen. Beide Wege werden durch die verschiedenen lokalen und systemischen Faktoren unterstützt. Es ist in vielen Fällen jedoch noch unklar, auf welchen Mechanismen die Wirkungen beruhen.

745 24.7 · Biochemie und Pathobiochemie des Skelettsystems

24.7.6

Osteoporose und Regulation des Knochenumbaus durch Cytokine und Steroidhormone

Regulation durch Cytokine. Der Einfluss von Cytokinen auf die Knochenbildung wurde aufgrund der Beobachtung entdeckt, dass stimulierte Monozyten Faktoren ins Blut ausschütten, die die Knochenresorption fördern. ! Cytokine stimulieren die Knochenresorption und fördern so die Osteoporose.

Diese Aktivität wurde Osteoklasten-aktivierender Faktor (OAF) genannt und später als Interleukin 1 (IL-1) identifiziert. In der Folgezeit wurde eine Vielzahl von weiteren Cytokinen entdeckt, die die Knochenresorption stimulieren (darunter TNF-D, IL-6, IL-11, IL-15 und IL-17). Es wurden aber auch andere Interleukine gefunden, die die Knochenresorption inhibieren (IL-4, IL-10, IL-13, IL-18, IFN-J). TGF-E und Prostaglandine können sowohl inhibieren als auch stimulieren, je nach Funktionszustand der Zellen. Die Wirkung am Knochen von Interleukinen und anderen Cytokinen, die eigentlich aufgrund ihrer Funktion bei der Immunabwehr bekannt sind, wird leichter verständlich, seit man weiß, dass die Osteoklasten sich von den Makrophagen ableiten. Die Cytokine werden teils in den Stromazellen/Osteoblasten, teils in den hämatopoetischen Zellen/Osteoklasten exprimiert und bilden im Knochen ein komplexes Netzwerk. IL-1 kann zum Beispiel durch autokrine und parakrine Mechanismen seine eigene Biosynthese und die von weiteren Interleukinen wie IL-6 stimulieren. Als Resultat der Cytokin-Wirkungen kommt es zu einer Stimulierung der Proliferation, Differenzierung und Aktivierung von Osteoklasten. Die Aktivierung der Osteoklasten kann auf zwei verschiedenen Wegen erfolgen: 4 Cytokine können direkt an Rezeptoren auf Osteoklasten binden und intrazelluläre Signale auslösen 4 Sie können auf indirektem Wege wirken, indem die verschiedenen Interleukin-vermittelten Reaktionen in der Bildung von M-CSF und RANKL einmünden, die dann wie bereits diskutiert die Osteoklasten aktivieren Regulation durch Steroidhormone. Steroidhormone besitzen einen großen Einfluss auf die Homöostase des Skelettsystems. Von großer Bedeutung sind vor allem zwei Gruppen von Hormonen, die Sexualhormone und die Glucocorticoide. ! Östrogene und Androgene bewirken bei Mann und Frau eine positive Bilanz der Knochendichte mit verbesserten biomechanischen Eigenschaften.

Die Sexualhormone wirken wahrscheinlich primär an den Osteoblasten, obwohl auch Osteoklasten Rezeptoren für Östrogene bzw. Androgene besitzen. Die Wirkungen auf Proliferation und Differenzierung der Osteoblasten sind

komplex und molekular noch nicht gut verstanden, da Osteoblasten bzw. deren Vorläuferzellen je nach Differenzierungszustand und Umgebung unterschiedlich auf Sexualhormone ansprechen. Neben der positiven Wirkung auf die Knochendichte sind die Sexualhormone, wie in Kap. 24.7.4 dargelegt, auch für die geschlechtsspezifische Ausprägung des Knochenbaus und für die Schließung der Epiphysenfugen verantwortlich. ! Östrogene und Androgene verhindern ein Überschießen der Osteoklastentätigkeit und wirken so antiosteoporotisch.

Östrogene und Androgene inhibieren die Transkription einer Reihe von den Knochenabbau stimulierenden Cytokinen (7 o.) wie IL-1, IL-6, TNF-D, CSF und Prostaglandin E2. Die Effekte werden durch die gleichzeitige Inhibition der Expression von Cytokin-Rezeptoren noch verstärkt, wie im Falle des IL-6 Rezeptors gezeigt worden ist. Zusätzlich können Östrogene die durch RANKL vermittelte Aktivierung von Osteoklasten blockieren. Darüber hinaus kann Östrogen die Apoptose von Osteoklasten fördern. Es wird angenommen, dass an diesem Prozess TGFE beteiligt ist, dessen Transkription im Gegensatz zu den meisten Cytokinen durch Sexualhormone erhöht wird. In der Summe führen die Effekte der Sexualhormone daher zu einer Verminderung der Osteoklastentätigkeit und wirken so einer Osteoporose entgegen. ! Hohe Spiegel an Glucocorticoiden führen zur Entmineralisierung des Knochens.

Über die physiologische Rolle der Glucocorticoide im Knochenstoffwechsel weiß man noch wenig, dagegen sind die durch Hormonüberschuss verursachten Effekte gut untersucht, wie im Falle des Cushing-Syndroms oder heute häufiger bei Einsatz von Cortisolderivaten als Immunsuppressiva. Zielzelle der Hormonwirkung ist der Osteoblast. Dieser besitzt Rezeptoren für Glucocorticoide, in Osteoklasten hingegen sind bisher noch keine Glucocorticoid-Rezeptoren nachgewiesen worden. Glucocorticoide hemmen die Bildung und Aktivierung von Osteoblasten und damit auch die Neubildung von Osteoklasten (7 Kap. 24.7.3). Zusätzlich ist die Apoptoserate der Osteoblasten und Osteozyten erhöht. Als Teil der entzündungshemmenden Wirkung der Glucocorticoide wird die Expression von Kollagenase und Interleukin 6 inhibiert. Diese Effekte sollte zu einer Verminderung des Knochenabbaus führen. Dennoch kommt es wegen einer verstärkten Aktivierung der vorhandenen Osteoklasten letztlich zur Osteoporose. Ein Effekt, der dabei eine Rolle spielt, ist eine verminderte Transkription der RNA für Osteoprotegrin bei gleichzeitiger Erhöhung der Transkription seines Liganden (7 Kap. 24.7.3).

24

746

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

24.7.7

24

Knochenerkrankungen

Das Skelettsystem ist einer Reihe von pathophysiologischen Veränderungen unterworfen, beginnend von angeborenen Fehlbildungen bis hin zu erworbenen Schädigungen durch Fehlhaltung und falsche Belastung und Störungen der Knochenhomöostase. Aufgrund der damit verbundenen langfristigen gesundheitlichen Beeinträchtigung sind Knochenerkrankungen daher von großer volkswirtschaftlicher Bedeutung. Im Folgenden sollen einige Krankheiten im Zusammenhang mit Störungen der Knochenhomöostase dargestellt werden.

Entzündliche Knochenerkrankungen. Rheumatische Erkrankungen sind durch Zerstörung des Gelenkknorpels und eine exzessive subchondrale Knochenresorption gekennzeichnet. In den entzündeten Regionen erhöht sich die Konzentration verschiedener Cytokine, darunter IL-1, Oncostatin M, IL-6, IL-13, IL-17 und PTHrP. In der rheumatischen Synovialmembran finden sich vermehrt Makrophagen sowie aktivierte Fibroblasten und T-Zellen. Die beiden letzteren Zelltypen exprimieren RANKL, das die Osteoklastenbildung ohne Beteiligung von weiteren Zelltypen stimulieren kann. Infobox

Osteoporose. Die Verringerung der Knochenmasse ver-

bunden mit einer Verschlechterung der Knochenarchitektur nach dem 40sten Lebensjahr stellt ein großes gesundheitliches Problem dar, da bereits ein 10%iger Verlust an Knochenmasse das Risiko eines Knochenbruchs verdoppelt. Man hat abgeschätzt, dass allein in den Vereinigten Staaten mehr als 25% der Frauen in der Postmenopause eine um 10 bis 25% reduzierte Knochendichte besitzen und etwa 5 Millionen Frauen bereits einen Knochenbruch erlitten haben. Die häufigste Ursache der Osteoporose bei Frauen ist der Abfall an Östrogen in der Menopause. Da Östrogene den Spiegel an Cytokinen wie IL-1, IL-6 und TNF-D senken, führt ein Abfall des Östrogenspiegels natürlich zu einer Erhöhung der Cytokinspiegel und damit zu verstärktem Knochenabbau. Nicht nur Frauen, sondern auch Männer im fortgeschrittenen Alter leiden unter fortschreitender Osteoporose, vermutlich bedingt durch einen Abfall an Sexualhormonen. Aber auch die Tatsache, dass mit fortschreitendem Alter immer weniger teilungsfähige fibroblastenartige Zellen vorhanden sind, dürfte eine wesentliche Rolle spielen. Die dritthäufigste Ursache ist inzwischen die Behandlung mit Cortison-Präparaten. Weitere Ursachen sind Multiple Myelomatose, Hyperparathyreoidismus und Hyperthyreoidismus.

Knochenstoffwechsel Seit seinem 14. Lebensjahr war der großartige Maler Henri Toulouse-Lautrec (1864–1901) nicht mehr gewachsen. Er blieb 1,52 m groß und wurde zu einem deformierten Zwerg. Seine Beine waren die eines Kindes, beim Gehen war er behindert und musste einen Stock benutzen. Er sagte: »Ich gehe schlecht wie ein Enterich.« Im Zoo stellte er vor den Pinguinen fest: »Die watscheln ja genau wie ich!« Sein Leiden war eine seltene Erbkrankheit der Skelettentwicklung mit der Bezeichnung Pyknodysostose. Man weiß inzwischen, dass diese Erkrankung auf Mutationen im Gen für Kathepsin K beruhen. Dies führt zu einem gestörten Abbau der organischen Knochenmatrix. Die Resorptionslakunen der Osteoblasten enthalten große Mengen unverdauter Kollagenfibrillen. Es resultiert zwar eine röntgenologisch vermehrte Knochendichte, jedoch kommt es zur abnorm gesteigerten Brüchigkeit. Die Ursache von Lautrecs zwergenhafter Gestalt war also nicht, wie oft behauptet, schlecht verheilte Knochenbrüche, sondern eine rezessiv-autosomal erbliche Skelettdysplasie. Der später weltberühmte Maler ist im 37. Lebensjahr gestorben.

Paget-Krankheit. Diese Erkrankung betrifft etwa 3% der

über 40-jährigen Nordeuropäer und der weißen Bevölkerung Nordamerikas. Die Erkrankung ist durch Verkrümmung und Verdickung einzelner Röhrenknochen mit Neigung zu Spontanfrakturen gekennzeichnet. Die Ursache ist noch nicht vollends geklärt, beruht aber vermutlich auf einer Infektion mit Paramyxoviren, zu denen auch das Masernvirus gehört. In vitro konnte durch Transfektion von Osteoklasten-Vorläuferzellen mit retroviralen Vektoren, die das Gen für Masern-Nukleocapsidprotein trugen, eine Aktivierung der Expression von RANK, Aktivierung von NFNB und erhöhte Empfindlichkeit gegenüber Vitamin D beobachtet werden. Dafür spricht auch, dass bei einer autosomal dominanten juvenilen Variante der Paget-Krankheit aktivierende Mutationen des RANK-Gens nachgewiesen wurden.

Therapiemöglichkeiten. Zur Behandlung der nach der Menopause auftretenden Osteoporose werden in erster Linie Östrogene gegeben, um den Abfall des Hormonspiegels zu kompensieren. Da eine Östrogenbehandlung mit einem erhöhten Risiko für Unterleibskrebs verbunden ist, wird es in Verbindung mit einem Gestagen verabreicht. In den letzten Jahren wurden Agenzien entwickelt, die die Wirkung von Östrogen ganz oder teilweise nachahmen können, so genannte selektive Östrogen Rezeptor Modulatoren (SERMs). Der erste Vertreter dieser Substanzklasse war das Triphenylethylen-Derivat Tamoxifen. Mit derartigen Wirkstoffen wird es in der Zukunft wahrscheinlich gelingen, die positive Wirkung von Östrogen am Knochen zu substituieren, ohne die negativen Effekte in Kauf nehmen zu müssen. Eine andere Klasse von antiosteoporotisch

747 24.8 · Biochemie der Haut

wirkenden Substanzen sind die Bisphosphonate, in denen der Sauerstoff von Pyrophosphat (-O3P-O-PO3-) durch eine Methylengruppe (-O3P-CH2-PO3-) mit verschiedenen Seitenketten ersetzt ist. Diese Substanzen werden von Osteoklasten aufgenommen und wirken wahrscheinlich durch Inhibition der Farnesylpyrophosphatsynthase (7 Kap. 18.3.1)

und hemmen so die Prenylierung und damit die Membranverankerung von kleinen G-Proteinen wie Rho, Rab und Cdc42, die für die Aktivierung und das Überleben der Osteoklasten wichtig sind. Aufgrund ihres Wirkungsmechanismus können die Bisphosphonate Knochenresorption unabhängig von der Ursache verhindern.

In Kürze Knorpel und Knochen besitzen eine sehr spezialisierte ECM: 4 Knorpel stellt im Wesentlichen ein elastisches hydratisiertes Gel dar, das aus riesigen Komplexen zwischen Hyaluronsäure und dem Proteoglykan Aggrecan besteht und durch Typ II Kollagen-Fasern in Form gehalten wird 4 Knochen besitzt eine aus Hydroxyapatit aufgebaute ECM, die durch Kollagen Typ I-Fasern ihre Stabilität erlangt 4 Darüber hinaus enthalten Knochen und Knorpel noch eine Reihe von anderen, nichtkollagenen Proteinen, die z.T. für die Interaktion der Zellen mit der ECM von Bedeutung sind Knochen- und Knorpel-spezifische Zellen sind die Chondrozyten, Osteoblasten/Osteozyten und die Osteoklasten. 4 Chondrozyten und Osteoblasten leiten sich von Fibroblasten ab. Die Differenzierung ist von Transkriptionsfaktoren wie SOX-9 und CBFA-1 und Wachstums-/Differenzierungsfaktoren wie Ihh und PTHrP und verschiedenen Isoformen aus den TGFE/BMPund FGF-Familien abhängig. Zusätzlich ist eine Reihe von Hormonen (GH, IGF, T3, Glucocorticoide) involviert 4 Osteoklasten leiten sich von der Monozyten/Makrophagen-Linie ab. Die Differenzierung erfordert das Zusammenwirken zweier unterschiedlicher Signale:

24.8

Biochemie der Haut

24.8.1

Aufbau und Funktionen der Haut

Die Haut ist das Grenzorgan zur Umwelt. Sie besteht von außen nach innen aus drei Schichten: 4 Die Epidermis ist ein vielschichtiges Plattenepithel und ist Träger der Hornschicht, der äußersten, nicht mehr vitalen Hautschicht. Sie enthält drei Hauptzelltypen, die Keratinozyten, die Melanozyten und die immunkompetenten Langerhans-Zellen 4 Durch eine Basalmembran von der Epidermis getrennt, ist die Dermis das bindegewebige Gerüst der Haut und gleichzeitig der vaskularisierte Versorgungsteil 4 Die Subkutis ist ein Fettgewebspolster, das auf den Faszien der darunter liegenden Muskulatur aufliegt

– sezernierte Faktoren: Bindung von M-CSF an Rezeptoren auf den Vorläuferzellen – direkte Zell-Zell-Kontakte mit Osteoblasten: Interaktion des Zellmembranproteins RANKL auf Osteoblasten mit RANK auf den Präkursorzellen Osteoklasten bauen Knochen durch Erzeugung eines abgeschlossenen extrazellulären Kompartiments ab, in das HCl und lysosomale Enzyme sezerniert werden. Die Homöostase des Skelettsystems erfordert eine komplexe hormonelle Regulation: 4 Knochenwachstum unter Einfluss von Wachstumshormonen (GH und IGF), Schließung der Epiphysenfuge in der Pubertät unter Einfluss von Östrogen 4 Hormone des Calcium-Stoffwechsels (PTH, Vitamin D, Calcitonin): Mineralisation und Demineralisation 4 Androgene und Östrogene: positive Bilanz, geschlechtsspezifische Ausprägung 4 Glucocorticoide: hohe Spiegel bewirken Entmineralisierung 4 Cytokine (Interleukine): stimulieren Knochenabbau Das Skelettsystem ist einer Reihe von pathophysiologischen Veränderungen unterworfen. Am bedeutendsten sind: 4 Osteoporose, besonders in der Postmenopause bei Frauen 4 entzündliche Knochenerkrankungen wie Rheuma mit erhöhten Cytokin-Spiegeln

Die Haut erfüllt folgende Funktionen: 4 Barrierefunktion gegen die Umwelt, einschließlich Mikroorganismen 4 Schutz vor Wasserverlust 4 mechanischer Schutz gegen Traumen 4 Schutz vor physikalischen Einwirkungen, wie UV-Licht, Hitze oder Kälte 4 Regulation der Körpertemperatur 4 immunologische Abwehr 4 Sinnesfunktionen wie Tast- und Schmerzreize Zur Erfüllung spezifischer Aufgaben weist die Haut regionale Unterschiede auf, die sich in der Beschaffenheit und Dimensionierung der einzelnen Schichten und der makromolekularen Zusammensetzung manifestieren.

24

748

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

24.8.2

24

Die Epidermis

Die Epidermis besteht aus Schichten von Keratinozyten unterschiedlichen Reifungszustands (. Abb. 24.20). Diese entstehen aus Stammzellen und machen eine Reihe von Differenzierungsschritten durch bis sie abgeschilfert werden (Desquamation). In der normalen Haut besteht ein Gleichgewicht zwischen Proliferation und Desquamation, was zu einer vollständigen Erneuerung in etwa 28Tagen führt. In der Epidermis stellen Keratine die Hauptbestandteile terminal differenzierter Strukturen dar, die schützende Funktion aufweisen (Stratum corneum, Haare, Nägel). Sie gehören zu einer Großfamilie mit über 50 Proteinen (K1, K2, K3 etc.), die sich zu Cytoskelett-Filamenten mit einem Durchmesser von 10 nm zusammenlagern, die als Intermediärfilamente (IF) (7 Kap. 6.3.3) bezeichnet werden (. Abb. 24.21). Alle Keratine besitzen eine zentrale D-helicale Domäne mit 310 bis 350 Aminosäuren, die von einer nichthelicalen Kopf- und Schwanzregion flankiert wird. Letztere unterscheidet sich erheblich durch Länge und Zusammensetzung. Die D-helicale Domäne zeichnet sich durch eine Heptapeptid-Wiederholung aus, in der jede erste und vierte Aminosäure hydrophob ist, und durch eine periodische Verteilung sich abwechselnder positiver und negativer Ladungen. Die Heptapeptid-Wiederholung wird durch kurze Verbindungssequenzen unterbrochen. Aufgrund der Anordnung der hydrophoben Reste bilden Keratine spontan Dimere, indem sich zwei D-Helices zu einer coiled-coil-D-Helix in Parallelanordnung umeinander winden. Diese assoziieren ihrerseits zu einem Tetramer in antiparalleler Anordnung (Protofilament). Je zwei Protofilamente bilden eine Protofibrille, die Grundstruktur der 10 nm Fibrille (. Abb. 24.21). Die beiden Keratinsubtypen (I und II) unterscheiden sich durch Größe (40–57,5 kDa bzw. 53–67 kDa) und Ladung (sauer bzw. basisch-neutral). Dies ist insofern von Bedeutung, als Keratine immer Heterodimere aus Typ I- und II-Ketten darstellen. Die Zusammensetzung der keratinhaltigen Intermediärfilamente ist Gewebsepithel-spezifisch und vom Differenzierungszustand der Zelle abhängig. So erfolgt bei Keratinozyten im Rahmen der Differenzierung eine Umschaltung von Keratin 14 (Typ I)/Keratin 5 (Typ II) auf Keratin 10 (Typ I)/Keratin 1 (Typ II). Die Intermediärfilamente lagern sich in Keratinozyten zu einem Netzwerk zusammen. Normalerweise nimmt diese architektonische Struktur ihren Ausgang an einem den Zellkern umschließenden Ring, zieht durch das Cytoplasma und endet an Verbindungskomplexen an der Membran, den Desmosomen und Hemidesmosomen (7 Kap. 6.2.6). Diese Komplexe sind für die Aufrechterhaltung der Integrität der Epidermis entscheidend. Bei der normalen Differenzierung werden die Keratin-Intermediärfilamente durch Wechselwirkung mit Filaggrin, einem Matrixprotein, in eine hochorganisierte Struktur überführt. Bei der

. Abb. 24.20. Verteilung der Keratine in der Haut. K5 und K14 im Stratum basale, K1 und K10 im Stratum spinosum, K2 e und K9 im Stratum granulare. Diese Keratine bilden die Intermediärfilamente, die den Zellkern umschließen und mit den Desmosomen der Zellmembran verbinden. Im Zuge der Differenzierung treten die Keratin-Intermediärfilamente mit Filaggrin, einem Matrixprotein, zu einer hochorganisierten Struktur zusammen. Die Zellhülle ersetzt die Plasmamembran terminal differenzierter Keratinozyten. Sie besteht aus covalent verknüpften Proteinen, an die Lipide gebunden sind und dem Intermediärfilament-Matrix Komplex. Die Lipide stammen aus den lamellären Granula, aus denen sie beim Übergang zum Stratum corneum abgegeben werden. KPP = kleines prolinreiches Protein

749 24.8 · Biochemie der Haut

. Abb. 24.21. Aufbau der Typ Iund II-Keratine. (1A, 1B, 1B,2B helicale Abschnitte; L1, L1–2, L2 nicht helicale Abschnitte) parallele Anordnung zum Heterodimer, antiparallele Anordnung zum Protofilament. Supramolekulare Assoziation zur Protofibrille und zum Intermediärfilament (ZF)

Differenzierung werden außerdem unter dem Einfluss der Transglutaminase 1 und -3 (TG1, TG3) Glutaminyl- und Lysylreste von Proteinen covalent verknüpft, wodurch die Plasmamembran zunehmend durch eine Zellhülle ersetzt wird. Diese Zellhülle enthält außerdem Lipide auf ihrer Außenfläche und den sog. Filament-Matrix-Komplex an ihrer Innenfläche. Die Transglutaminase K (TGK) verknüpft ein membrangebundenes Protein mit Involukrin, einem Cytoplasmaprotein. Dieses Gerüst wird durch Verknüpfung anderer Proteine wie Cornifinen, den kleinen prolinreichen Proteinen (KPP) oder Lorikrin weiter verstärkt, bis die gesamte innere Oberfläche der Zellmembran bedeckt ist. Die durch Filaggrin aggregierten Keratinfilamente treten dann mit der verstärkten Proteinhülle in Verbindung.

24.8.3

Die dermo-epidermale Junktionszone

Die dermo-epidermale Junktionszone ist eine spezialisierte Basalmembranzone, die für den Zusammenhalt der Epidermis mit der Dermis und dadurch für die Unversehrtheit der Haut sorgt. Sie filtriert Moleküle anhand ihrer Größe und Ladung, ermöglicht jedoch unter gewissen Umständen die Passage bestimmter Zellen, z.B. der Langerhans-Zellen oder Lymphozyten. Ferner beeinflusst sie die Proliferation,

Differenzierung und Migration der basalen Keratinozyten in der Epidermis und spielt damit eine wichtige Rolle z.B. in der Wundheilung. Die supramolekularen Teilstrukturen der dermo-epidermalen Junktionszone sind im Elektronenmikroskop darstellbar (. Abb. 24.22a). Diese enthalten die in . Abb. 24.22b schematisch dargestellten Makromoleküle des dermo-epidermalen Verankerungskomplexes, der für den festen Zusammenhalt der Hautschichten essentiell ist.

24.8.4

Die Dermis

Die Dermis ist ein fibroelastisches Gewebe von hoher Reißfestigkeit und Elastizität und gleichzeitig Träger der versorgenden Gefäße und Nerven. Sie enthält mehrere Typen von diskreten fibrösen Netzwerken. Zwischen den Maschen dieser Fasernetze liegen die Zellen der Dermis, darunter die Fibroblasten, Mastzellen, Makrophagen, und gelegentlich Lymphozyten. Zu den molekularen Komponenten der extrazellulären Matrix in der Dermis zählen viele Kollagene, Proteoglykane und Glycoproteine, die alle zu unlöslichen, supramolekularen Aggregat-Netzwerken polymerisieren. Das prominenteste Fibrillennetzwerk besteht aus losen, vernetzten Faserbündeln aus Kollagen- und Proteoglykan-haltigen Fibrillen

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Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

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. Abb. 24.22a,b. Elektronenmikroskopische Aufnahme der dermo-epidermalen Junktion. a Der basale Keratinozyt (K) sitzt auf einer zweischichtigen Basalmembran bestehend aus einer elektronenoptisch hellen Zone, Lamina lucida (LL), und aus einer elektronenoptisch dunklen Zone, Lamina densa (LD). Die intrazellulären, dunkel gefärbten feinen Intermediärfilamente docken an den knopfförmigen Hemidesmosomen (HD) ein. Die feinen Verankerungsfilamente zwischen den Hemidesmosomen und der Lamina densa sind kaum sichtbar. Dagegen sind die quer gestreiften Verankerungsfibrillen (AF = anchoring fibrils) unterhalb der Lamina densa prominent. b Schematische Darstellung der molekularen Komponenten der dermo-epidermalen Junktion. Die Hemidesmosomen an der Plasmamembran der basalen Zelle sind Proteinaggregate, die eine Verbindung zwischen den Keratinfilamenten und der Basalmembran sichern. Auf der intrazellulären Seite vermitteln BP230 und Plectin als Linker-Proteine die Bindung zwischen den Keratinfilamenten und dem Hemidesmosom, während auf der extrazellulären Seite die Laminin 5- und Kollagen

Typ XVII-haltigen Verankerungsfilamente die Lamina lucida durchspannen. Dabei funktionieren die Transmembranproteine Integrin D6E4 und Kollagen Typ XVII auch als Zelladhäsionsrezeptoren. Die Lamina densa, eine ultrastrukturell amorphe Schicht, ist durch Kollagen Typ VII-haltige Verankerungsfibrillen mit dem unterliegenden Bindegewebe verankert. Ein Verankerungskomplex mit Hemidesmosomen, Verankerungsfilamenten und Verankerungsfibrillen ist charakteristisch für die Haut und kommt in anderen Basalmembranen nicht vor. Mutationen in den erwähnten Proteinen führen zum verminderten Zusammenhalt der Hautschichten und zur Blasenbildung als Symptom (Epidermolysis-bullosa-Gruppe). Rechts ist die Blasenbildungsebene bei den verschiedenen Epidermolysis-bullosa-Formen markiert (Pfeile). Die Blasenbildungsebene ist von der Lokalisation des betroffenen Proteins abhängig. Die entsprechenden Gendefekte sind in Tabelle 26.8 aufgelistet. EBS = Epidermolysis bullosa simplex; EBJ = Epidermolysis bullosa junctionalis; EBD = Epidermolysis bullosa dystrophica

751 24.8 · Biochemie der Haut

(D-Periodizität: 64 nm). Außerdem finden sich elastische Fasern, die mit perlenkettenartigen Mikrofibrillen vergesellschaftet sind (7 Kap. 24.2.1, 24.3). Andere Netzwerke werden z.B. durch Fibronectin gebildet. Schließlich kommen auch Filamente mit einer Periodizität von 100 nm vor, deren Hauptkomponente das Kollagen Typ VI ist. Die Information für den Aufbau einer gegebenen Aggregatstruktur ist in der Zusammensetzung der makromolekularen Bestandteile, sowie in deren Primärstruktur enthalten und die Polymerisierung der Fibrillen-Netzwerke ist auf molekularer Ebene hierarchisch und streng reguliert. Die Dermis enthält mindestens 12 verschiedene Kollagentypen (. Tabelle 24.1). Typische dermale Fibrillen sind immer Mischfibrillen, die mehrere Kollagentypen sowie nichtkollagene Komponenten enthalten. Die charakteristischen, im Elektronenmikroskop sichtbaren quer gestreiften Fibrillen in der Dermis enthalten als Hauptkomponente das ubiquitäre Kollagen Typ I, gemischt mit etwa 10–15% Typ III. Ferner finden sich geringe Mengen der Kollagene Typ V, Typ XII und Typ XIV, die jedoch für die Fibrillenorganisation essentiell sind. Der Kollagen Typ IIIGehalt nimmt mit dem Alter ab. Die Kollagen Typen IV, VII, VIII, XVII und XVIII kommen in den verschiedenen epithelialen und vaskulären Basalmembranzonen in der Haut vor und sind dort Bestandteile von diskreten Suprastrukturen. Die Elastizität der Haut beruht auf der Struktur der elastischen Fasern, die in verschiedenen Dermis-Schichten in unterschiedlicher Zusammensetzung vorkommen. Die Fasern sind unterschiedlich dick und zum Teil verzweigt. Ultrastrukturell sind zwei Komponenten erkennbar, eine amorphe Masse, die die dehnbare Komponente darstellt, und 10–12 nm dicke Mikrofibrillen, die die elastischen Fasern mit dem angrenzenden Gewebe verbinden. Das amorphe Material besteht vorwiegend aus Elastin, einem stark quervernetzten Protein, das E-Faltblatt-Elemente enthält. Die mikrofibrilläre Komponente der Fasern sorgt für deren Festigkeit und Begrenzung der Dehnbarkeit, ihr Hauptbestandteil ist Fibrillin-1, ein Makromolekül, das mit anderen Proteinen wie Fibrillin-2 zu Mikrofibrillen polymerisiert. Zwischen den Fibrillennetzwerken ist eine amorphe extrafibrilläre Matrix eingelagert. Deren Hauptkomponenten sind neben Wasser Proteoglykane (z.B. Versican, Decorin), Hyaluronan und Glycoproteine. Die extrafibrilläre Matrix hat in der Haut nicht nur eine wichtige Füll- und Stützfunktion, sondern ist auch biologisch aktiv. Viele Glycoproteine und Proteoglykane sind wesentlich für den korrekten Aufbau der Gewebearchitektur und liefern spezifische Informationen an die Zellen. Heparansulfatseitenketten der Proteoglykane und kleine Proteoglykane, z.B. Decorin und Biglykan, funktionieren auch als Speicher oder Modulatoren von Wachstumsfaktoren der FGF- und TGFE-Familien. Die dermalen Glycoproteine besitzen adhäsive Eigenschaften und sind an der Regulation der Fibrillenbildung

und bestimmter zellulärer Funktionen beteiligt. Ein wichtiges multifunktionelles Glycoprotein ist Fibronectin (7 Kap. 24.5.1). Das im Plasma in einer löslichen, globulären Form vorkommende Protein polymerisiert in der extrazellulären Matrix vieler Gewebe, u.a. in der Dermis, zu Fibrillen, welche die Adhäsion, die Migration und die Differenzierung von vielen verschiedenen Zellen regulieren.

24.8.5

Pathobiochemie der Haut

Verhornungsstörungen. Vielfältige genetische Defekte mit Hautmanifestationen sind bekannt, betroffen können alle Hautschichten sein. Verhornungsstörungen sind die Konsequenz von Mutationen in den Genen für epidermale Strukturproteine. Zum Beispiel führen Mutationen in den Genen für Keratin 1, Keratin 10 oder Transglutaminase-1 (. Tabelle 24.7) zu erblichen Ichthyosen (Fischschuppenkrankheit). Die durch die Transglutaminase vernetzten Keratinfilament-Aggregate des Stratum Corneum werden unter diesen Umständen nicht mehr normal gebildet und mit der Zellhülle verknüpft, was zu einer charakteristischen, grob lamellären Schuppenbildung führt. Bindegewebskrankheiten. Mutationen in den Genen für

die Hautkollagene, für das Elastin sowie für die Fibrilline führen zu einem breiten Spektrum von erblichen Hautkrankheiten oder Syndromen mit Hautbeteiligung . Tabelle 24.7). Die durch Kollagenmutationen herbeigeführten molekularen Defekte zeichnen sich durch eine abnormale Struktur oder Stabilität der kollagenhaltigen Fasern und damit eine stark erhöhte Dehnbarkeit oder verminderte Reißfestigkeit der Dermis aus. Diese Situation findet sich z.B. bei verschiedenen Formen des Ehlers-Danlos-Syndroms (. Abb. 24.23a). In ähnlicher Weise sind Mutationen im Fibrillin-1-Gen die Ursache für das Marfan-Syndrom und im Fibrillin-2-Gen für die kongenitale kontrakturale Arachnodaktylie. Elastin-Mutationen können autosomal dominante Formen von Cutis laxa verursachen (. Abb. 24.23b). Blasen bildende Hautkrankheiten. Ein illustratives Beispiel

für die unterschiedlichen Ursachen von Hautkrankheiten stellen die Defekte der dermo-epidermalen Junktionszone dar (. Abb. 24.23c). Daran lassen sich die genetischen und erworbenen molekularen Abnormitäten einander gegenüberstellen, bzw. miteinander korrelieren. Die Epidermolysis bullosa (EB) gehört zu einer Gruppe von erblichen Krankheiten, bei denen durch minimale Verletzungen Blasenbildung hervorrufen wird. Ursachen sind Mutationen in den Genen für Proteine des Verankerungskomplexes und dadurch Verminderung des dermoepidermalen Zusammenhalts. Es werden drei EB-Hauptgruppen unterschieden: EB simplex, EB junctionalis und EB dystrophica.

24

752

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

24

. Abb. 24.23a–c. Klinische Symptome von genetischen Hautkrankheiten. Mutationen in den Genen für Strukturproteine der Haut können vielfältige Symptome verursachen. Typische Beispiele sind in a–c dargestellt. a Dünne und stark dehnbare Haut beim Ehlers-Danlos-

Syndrom (Kollagen-Typ-I-Mutation). b Schlaffe, »zu große« Haut bei Cutis laxa (Elastin Mutation). c Blasenbildung an der Hand nach minimaler mechanischer Belastung (Kollagen Typ XVII Mutation)

Im Fall der EB simplex (EBS) erfolgt die Blasenbildung innerhalb des Stratum basale. Abnormale Intermediärfilamente sind die Folge von Mutationen in den Genen für die Keratine 5 und 14 oder Plectin. Diese Makromoleküle sind für den Aufbau und die Verankerung des Intermediärfilament-Netzwerks der Zelle essentiell. Bei der EB junctionalis (EBJ) tritt die Spaltbildung entlang der Lamina lucida aufgrund von abnormalen Verankerungsfilamenten auf. Hier sind Mutationen in den Genen für Laminin 5, D6E4Integrin und Kollagen Typ XVII ursächlich beteiligt (. Abb. 24.23c). Die Mutationen führen zu abnormalen

Proteinstrukturen und zu ultrastrukturell rudimentären Hemidesmosomen, die nicht funktionell sind. Bei der Epidermolysis bullosa dystrophica (EBD) findet die Spaltung unterhalb der Lamina densa auf der Ebene der Verankerungsfibrillen statt. Bei der EBD sind die Verankerungsfibrillen entweder abnormal oder in ihrer Anzahl vermindert. Für alle molekular identifizierten EBD-Varianten sind Mutationen im Gen für Kollagen Typ VII verantwortlich. Bis heute sind zahlreiche Mutationen in den Genen für die erwähnten Proteine bekannt (. Tabelle 24.8). Null-Mutationen, die zum vollständigen Fehlen eines

. Tabelle 24.7. Erbliche Hautkrankheiten oder -symptome durch mutierte Strukturproteine. EB Epidermolysis bullosa Protein

Gen

Krankheit

Hautsymptome

Keratin 1

KRT1

Ichthyose (epidermolytische Hyperkeratose)

Starke Schuppung und Rötung der Haut

Keratin 10

KRT10

Ichthyose (epidermolytische Hyperkeratose)

Starke Schuppung und Rötung der Haut

Kollagen Typ I

COL1A1

Ehlers-Danlos-Syndrom Typ I

Schwere Form; dünne, dehnbare Haut

Ehlers-Danlos-Syndrom Typ VII A & VII B

dünne, dehnbare Haut

Kollagen Typ III

COL3A1

Ehlers-Danlos-Syndrom Typ IV

Fragilität, Hämatombildung

Kollagen Typ V

COL5A1

Ehlers-Danlos-Syndrom Typ I

Schwere Form; dünne, dehnbare Haut

COL5A2

Ehlers-Danlos-Syndrom Typ I

Schwere Form; dünne, dehnbare Haut

Kollagen Typ VI

COL6A1

Ullrich-Syndrom

Muskeldystrophie und teigige Haut

Kollagen Typ VII

COL7A1

EB dystrophica

Blasenbildung

Kollagen Typ XVII

COL17A1

EB junctionalis

Blasenbildung

Laminin 5

LAMA3 LAMB3 LAMC2

EB junctionalis

Blasenbildung

Fibrillin 1

FBN1

Marfan-Syndrom

Dünne, leicht dehnbare Haut

Elastin

ELN

Cutis laxa

Schlaffe »zu große« Haut

753 24.8 · Biochemie der Haut

. Tabelle 24.8. Molekulare Grundlagen der Epidermolysis bullosa (EB) EB-Subtyp

Gen

Protein

Abnormale Struktur

EB simplex

KRT5

Keratrin 5

Keratinfilamente

EB simplex

KRT14

Keratin 14

Keratinfilamente

EB simplex-MDa

PLEC1

Plectin

Hemidesmosom

EB junctionalis

LAMA3

Laminin 5 (α3-Kette)

Verankerungsfilamente

EB junctionalis

LAMB3

Laminin 5 (β3-Kette)

Verankerungsfilamente

EB junctionalis

LAMC2

Laminin 5 (γ2-Kette)

Verankerungsfilamente

EB junctionalis

COL17A1

Kollagen Typ XVII

Verankerungsfilamente

EB junctionalis

ITGA6

α6β4-Integrin

Hemidesmosom

EB junctionalis

ITGB4

α6β4-Integrin

Hemidesmosom

EB dystrophica

COL7A1

Kollagen Typ VII

Verankerungsfibrillen

a

MD mit Muskeldystrophie. Plectin kommt in der Haut und im Muskel vor.

dieser Proteine führen, sind in der Regel mit schweren Krankheitsbildern assoziiert. Andere Mutationen, z.B. Aminosäuresubstitutionen oder kleine Deletionen oder Insertionen, verursachen meistens mildere Symptome (. Abb. 24.23c).

. Abb. 24.24. Immunfluoreszenz-Färbung der Haut beim bullösen Pemphigoid. Die Epidermis ist durch eine Blase von der Dermis getrennt (Stern). Autoantikörper gegen Kollagen Typ XVII (grüne Fluoreszenzfärbung, Pfeile) sind am Blasendach sichtbar. E = Epidermis; D = Dermis

Autoimmunkrankheiten. Erworbene Blasen bildende Hautkrankheiten können durch Autoantikörper verursacht werden, die gegen Strukturproteine der dermo-epidermalen Junktionszone gerichtet sind. Man vermutet, dass die Bindung der Autoantikörper zu einer Funktionsverminderung der Proteine und damit zum geschwächten dermoepidermalen Zusammenhalt führen. Zum Beispiel kommen beim bullösen Pemphigoid sowohl zirkulierende als auch gewebeständige Autoantikörper gegen Kollagen Typ XVII oder Laminin 5 vor, oder bei der Epidermolysis bullosa acquisita Autoantikörper gegen Kollagen Typ VII. Die Autoantikörper können durch Immunfluoreszenzfärbung in der Haut nachgewiesen werden (. Abb. 24.24).

In Kürze Die Haut ist das Grenzorgan zur Umwelt. Sie besteht aus drei Schichten: 4 Epidermis 4 Dermis und 4 Subkutis Dermis und Epidermis sind durch die dermo-epidermale Junktionszone verbunden. Hauptbestandteil der terminal differenzierten Strukturen (Corneum, Haare, Nägel) sind die Keratine, eine Großfamilie von etwa 40 verschiedenen Proteinen. Die

Keratine bilden 10 nm-dicke Keratin-Intermediärfilamente: Die Assemblierung erfolgt über Dimere mit einer coiled-coil D-helicalen Struktur, die über Proteofilamente und Proteofibrillen zu den reifen 10 nm-Fibrillen polymerisieren. Das Stratum corneum bildet eine hochorganisierte Struktur aus Keratin-Fibrillen, zusammen mit Filaggrin und weiteren Proteinen und Lipiden. Durch Transglutaminase 1 und 3 wird das Netzwerk zur Stabilisierung extensiv quervernetzt. Der Zusammenhalt zwischen Dermis und Epidermis wird durch eine spezialisierte Basalmembran-Region, die 6

24

754

24

Kapitel 24 · Binde- und Stützgewebe

dermo-epidermale Junktionszone, vermittelt: Hemidesmosomen an der basalen Seite der Keratinozyten stehen über das Integrin D6E4, Laminin-5 und das Transmembran-Kollagen XVII mit Ankerfibrillen aus Kollagen VII und dem interstitiellen Bindegewebe in Verbindung. Die Dermis ist ein fibroelastisches Gewebe mit mehreren Typen von fibrösen Netzwerken aus mindestens 12 verschiedenen Kollagentypen, Proteoglykanen und Fibronectin. Die Elastizität der Haut wird durch elastische Fasern aus Elastin und Fibrillin gewährleistet. Die fibrillären Strukturen sind in eine amorphe Matrix aus Hyaluronäure und Proteoglykanen wie Versican eingebettet.

Literatur Monographien und Lehrbücher Kreis T, Vale R (1999) Guidebook to the Extracellular Matrix, Anchor, and Adhesion Proteins, 2nd edn. A Sambrook and Tooze publication at Oxford University Press, New York Iozzo R (2000) Proteoglycans: Structure, Biology and Molecular Interactions. Marcel Dekker Press Bilezikian JP, Raisz LG, Rodan GA (2002) Principles of Bone Biology. Academic Press, San Diego, USA Original- und Übersichtsarbeiten Myllyharju J, Kivirikko KI (2001) Collagens and Collagen-related diseases. Ann Med 33:7–21 Prockop DJ,Kivirikko KI (1995) Collagens: Molecular Biology, Diseases, and Potentials for Therapy. Annu Rev Biochem 64:403–434 Kielty CM, Sheratt MJ, Shuttleworth A (2002) Elastic fibres. J Cell Sci 115:2817–2828 Kornblihtt AR, Pesce CG, Alonso CR, Cramer P, Srebrow A, Werbajh S, Muro AF (1996) The fibronectin gene as a model for splicing and transcription FASEB J 10:248–257 Nature Insight Reviews: Bone and Cartilage (2003) Nature 423:315– 361 a) Kronenberg HM. Developmental regulation of the growth plate, pp 423:332–336 b) Boyle WJ, Simonet WS, Lacey DL. Osteoclast differentiation and activation. pp 337–342 c) Harada S, Rodan GA. Control of osteoblast function and regulation of bone mass. pp 349–355

Alle Hautschichten können von vielfältigen genetischen Defekten betroffen sein. Die bekanntesten sind: 4 Verhornungsstörungen (Ichthyosen) 4 Mutationen in Bindegewebsproteinen, die zu einer erhöhten Dehnbarkeit/verminderten Reißfestigkeit führen (z.B. beim Marfan-Syndrom) 4 Blasen-bildende Krankheiten aufgrund von Defekten in der dermo-epidermalen Junktionszone (verschiedene Formen der Epidermolysis bullosa) Eine der bekanntesten Autoimmunerkrankung ist das bullöse Pemphigoid, bei der Autoantikörper gegen das Kollagen Typ XVII gebildet werden.

Rodan GA, Martin TJ (2000) Therapeutic Approaches to Bone Diseases. Science 289:1508–1514 Jilka RL (1998) Cytokines, bone remodelling, and estrogen deficiency: a 1998 update. Bone 23:75–81 Yurchenco PD, Amenta PS (2004) Basement membrane assembly, stability and activities observed through a developmental lens. Matrix Biol 22:521–538 Hynes RO (2002) Integrins: Bidirectional, Allosteric Signaling Machines. Cell 110:673–687 Miner JH, Yurchenco PD (2004) Laminin Functions in Tissue Morphogenesis. Annu Rev Cell Dev Biol 20:255–284 Bruckner-Tuderman L, Bruckner P (1998) Genetic diseases of the extracellular matrix: more than just connective tissue disorders. J Mol Med 76:226–237 Nievers MG, Schaapveld RQ, Sonnenberg A (1999) Biology and function of hemidesmosomes. Matrix Biol 18:5–17 Schumann H, Beljan G, Bruckner-Tuderman L (2001) Epidermolysis bullosa: eine interdisziplinäre Herausforderung. Neues über Genetik, Pathophysiologie und Management. Deutsches Ärzteblatt 98: A1559–1563 Jainta S, Schmidt E, Bröcker, E-B, Zillikens D (2001) Diagnostik und Therapie bullöser Autoimmunerkrankungen der Haut. Deutsches Ärzteblatt 98:A1320–1325 Alford AI, Hankenson KD (2006) Matricellular proteins: Extracellular modulators of bone development, remodeling, and regeneration. Bone, 38:749–757 Links im Netz 7 www.lehrbuch-medizin.de/biochemie

25 25

Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion Peter C. Heinrich, Serge Haan, Heike M. Hermanns, Georg Löffler, Gerhard Müller-Newen, Fred Schaper

25.1

Extrazelluläre Signalmoleküle und die Kommunikation zwischen Zellen – 757

25.1.1 25.1.2 25.1.3

Kommunikation zwischen Zellen – 757 Kommunikation und ihre Entsprechung in biologischen Systemen Glanduläre Hormone und Gewebshormone – 758

25.2

Stoffwechsel und Analyse von Hormonen und Cytokinen – 760

25.2.1 25.2.2 25.2.3 25.2.4

Biosynthese und Sekretion – 760 Transport im Blut – 760 Abbau und Ausscheidung – 761 Methoden zur Konzentrationsbestimmung

25.3

Rezeptoren für Hormone und Cytokine – 763

25.3.1 25.3.2 25.3.3

Nucleäre Rezeptoren – 763 Liganden-regulierte Ionenkanäle als Rezeptoren – 765 Membranrezeptoren – 767

25.4

Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren – 769

25.4.1 25.4.2 25.4.3 25.4.4 25.4.5

Rezeptoraktivierung – 770 Rekrutierung cytoplasmatischer Effektorproteine an die Plasmamembran – 770 Organisierte Kinasekaskaden – 772 G-Proteine – 773 Second messenger – 773

25.5

Einteilung der Cytokine – 777

25.5.1 25.5.2 25.5.3 25.5.4

Wachstumsfaktoren Interleukine – 778 Interferone – 778 Chemokine – 779

25.6

Signaltransduktion G-Protein-gekoppelter Rezeptoren – 779

25.6.1

G-Protein-gekoppelte Rezeptoren signalisieren über heterotrimere G-Proteine – 779 Rezeptoren, die an das Adenylatcyclase-System gekoppelt sind – 780

25.6.2

– 758

– 761

– 778

25.6.3 25.6.4

Rezeptoren, die an die Phospholipase Cβ gekoppelt sind und zur Ca2+-Freisetzung führen – 783 Die GPCR-vermittelte Signaltransduktion am Beispiel von Interleukin-8 – 783

25.7

Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen – 785

25.7.1 25.7.2

Rezeptor-Tyrosinkinasen – 785 Rezeptor-Serin/Threoninkinasen

25.8

Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen – 791

25.8.1 25.8.2 25.8.3 25.8.4 25.8.5

Interleukin-1-Signaltransduktion – 791 TNF-Signaltransduktion – 792 Interleukin-6-Signaltransduktion – 794 Interferon-Signaltransduktion – 796 Pathobiochemie: Septischer Schock und multiples Organversagen

25.9

Besondere Aktivierungsmechanismen – 801

25.9.1 25.9.2 25.9.3

Stickstoffmonoxid (NO) und lösliche Guanylatcyclasen Membrangebundene Guanylatcyclasen – 802 cGMP-Effektormoleküle – 803

25.10

Regulation der Signaltransduktion – 804

25.10.1 25.10.2

Rezeptorexpression – 804 Rückkopplungsmechanismen

Literatur

– 807

– 790

– 805

– 801

– 798

757 25.1 · Extrazelluläre Signalmoleküle und die Kommunikation zwischen Zellen

> > Einleitung Extrazelluläre Signalmoleküle spielen eine entscheidende Rolle für die Kommunikation zwischen Organen und Zellen. Die innerhalb des Organismus synthetisierten und sezernierten Botenstoffe lassen sich in die Gruppen der Hormone und Cytokine einteilen. Sie werden von bestimmten Zellen auf definierte Reize hin freigesetzt und wirken auf Zellen, die den passenden Rezeptor tragen. Die Zielzellen antworten nach Initiation einer Signalkaskade mit Änderungen einer Vielzahl von biochemischen und biologischen Prozessen. Störungen der Kommunikation zwischen Zellen und Organen führen, soweit es Hormone betrifft, zu klinisch gut definierten Krankheitsbildern. In verstärktem Maße werden vor allem akut und chronisch entzündliche Erkrankungen auch als Konsequenzen einer gestörten Regulation durch Cytokine verstanden, sodass speziell dieser Gruppe von Signalmolekülen eine zunehmende klinische Bedeutung zukommt. Daher werden im folgenden Kapitel die verschiedenen Unterfamilien der Cytokine (Interleukine, Interferone, Wachstumsfaktoren und Chemokine), deren Rezeptoren und die intrazelluläre Signaltransduktion besprochen.

25.1

25.1.1

Extrazelluläre Signalmoleküle und die Kommunikation zwischen Zellen Kommunikation zwischen Zellen

! Extrazelluläre Signalmoleküle erreichen ihre Zielzellen auf unterschiedlichen Wegen.

Die Entwicklung vielzelliger, arbeitsteilig organisierter Lebewesen aus dem Zusammenschluss von Einzelzellen stellt einen gewaltigen Fortschritt in der Evolution dar. Eine seiner wesentlichen Voraussetzungen ist die Signalüber-

mittlung von Zelle zu Zelle bzw. von Organ zu Organ. In . Abb. 25.1 sind die verschiedenen realisierten Mechanis-

men der interzellulären Kommunikation zusammengestellt. Die Signale werden auf humoralem Weg (lat. humor, Flüssigkeit) in Form chemischer Verbindungen als Signalvermittler übertragen. Die Signalmoleküle wirken nur auf solche Zellen, die einen passenden Rezeptor tragen. Die spezifische Bindung des Signalmoleküls (Ligand) an den Rezeptor löst eine zelluläre Reaktion aus. Erfolgt die Signalübermittlung durch Diffusion von der sezernierenden direkt auf eine benachbarte Zelle, so spricht man von parakriner Signaltransduktion (. Abb. 25.1a).

. Abb. 25.1. Mechanismen der interzellulären Signalübermittlung. (a) parakrine, (b) juxtakrine, (c) endokrine, (d) autokrine, (e) neuronale Signalübertragung. (Einzelheiten 7 Text)

25

758

25

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

Einen Sonderfall stellt die juxtakrine Signalübermittlung (. Abb. 25.1b) dar, bei der das Signalmolekül in der Plasmamembran der produzierenden Zelle verankert ist und für die Wechselwirkung mit dem entsprechenden Rezeptor auf der Zielzelle ein direkter Zell-Zell-Kontakt notwendig ist. Wird dagegen das Signalmolekül von einer spezifischen, sezernierenden Zelle in die Blutbahn abgegeben, um seine Wirkung an einer oft weit entfernten Zielzelle auszuüben, so handelt es sich um eine endokrine Signalübertragung (. Abb. 25.1c). Von parakriner und endokriner Signaltransduktion abzugrenzen ist schließlich die autokrine Signalweiterleitung (. Abb. 25.1d). Sie beruht darauf, dass von einer sezernierenden Zelle gebildete Signalmoleküle auf diese Zelle selbst bzw. auf Nachbarzellen vom gleichen Zelltyp einwirken. So wirkt beispielsweise das von einer stimulierten T-Zelle sezernierte Interleukin-2 autokrin und führt zur Proliferation der T-Zelle. Die autokrine Sekretion von Wachstumsfaktoren spielt auch bei manchen Tumoren eine wichtige Rolle. So konnte gezeigt werden, dass bestimmte Mammakarzinomzellen in großer Menge den insulinähnlichen Wachstumsfaktor-1 (IGF-1, 7 Kap. 27.7.2) abgeben, der auf die Tumorzellen als Proliferationsfaktor wirkt. Einen weiteren Sonderfall der interzellulären Kommunikation stellt die neuronale Signalübertragung dar (. Abb. 25.1e und 7 Kap. 31.3.1).

25.1.2

Kommunikation und ihre Entsprechung in biologischen Systemen

Kommunikation ist durch eine Abfolge von Ereignissen charakterisiert, die auch in biologischen Systemen zu finden ist. Hier beginnt die Signalweiterleitung mit der Stimulation einer Zelle gefolgt von Signalrezeption, Signaltransduktion, biologischer Antwort, z.B. Expression von Zielgenen, Proliferation, Apoptose, Migration und schließlich Signalabschaltung. Dementsprechend können die einzelnen Kommunikationsschritte wie folgt gegliedert werden: Kommunikation Allgemein Signalentstehung ’ Signalaufnahme ’

in biologischen Systemen Freisetzung eines Botenstoffs ’ Bindung des Botenstoffs an seinen Rezeptor ’ Signalweiterleitung Umwandlung des extrazellulären ’ Signals in ein intrazelluläres Signal ’ SignalentAktivierung von intrazellulären schlüsselung Signalkaskaden ’ ’

Signalverarbeitung biologische Antworten ’ ’ Signalabschaltung Hemmung durch Rückkopplung (feedback inhibition) Es gibt eine sehr große Zahl exogener und endogener Signale auf die Zellen ansprechen. Hierzu zählen z.B. 4 Licht 4 Wärme 4 akustische Reize 4 mechanische Reize 4 Geruchsstoffe 4 Geschmacksstoffe 4 Pheromone (Sexuallockstoffe) 4 Komponenten der extrazellulären Matrix 4 Zelloberflächen-Glycoproteine und -Glycolipide 4 Antigene 4 Hormone 4 Cytokine Von den genannten Signalmolekülen spielen für die Kommunikation zwischen Zellen Hormone und Cytokine eine sehr wichtige Rolle.

25.1.3

Glanduläre Hormone und Gewebshormone

Endogen synthetisierte extrazelluläre Signalmoleküle können in 4 glanduläre Hormone und 4 aglanduläre Hormone = Gewebshormone eingeteilt werden. Glanduläre Hormone werden in endokrinen Drüsen ge-

bildet, von diesen sezerniert und auf dem Blutweg zu den jeweiligen Zielzellen transportiert, an denen sie spezifische Wirkungen entfalten. Endokrine Drüsen sind: 4 der Hypothalamus und die Hypophyse (Vorder- und Hinterlappen) 4 die Langerhans’schen Inseln des Pankreas 4 die Schilddrüse 4 die Nebenschilddrüsen (Epithelkörperchen) 4 die Nebennieren (Nebennierenmark und -rinde) 4 die männlichen und weiblichen Keimdrüsen 4 die Placenta Bis auf wenige Ausnahmen sind glanduläre Hormone 4 Polypeptide (z.B. Insulin, Glucagon, adrenocorticotropes Hormon) 4 Aminosäure-Derivate (z.B. Schilddrüsenhormone: Thyroxin, T4 und Trijodthyronin, T3; Katecholamine: Adrenalin, Noradrenalin oder Neurotransmitter: Serotonin)

759 25.1 · Extrazelluläre Signalmoleküle und die Kommunikation zwischen Zellen

. Tabelle 25.1. Einteilung der Cytokine (Auswahl) und ihre biologischen Funktionen Wachstumsfaktoren

Interleukine

Interferone

Chemokine

Signaltransduktion über Rezeptor-Tyrosinkinasen 5 brain-derived nerve growth factor (BDNF) 5 colony stimulating factor (CSF) 5 epidermal growth factor (EGF) 5 fibroblast growth factor (FGF) 5 insulin-like growth factor (IGF) 5 keratinocyte growth factor (KGF) 5 macrophage colony stimulating factor (MCSF) 5 nerve growth factor (NGF) 5 platelet derived growth factor (PDGF) 5 stem cell factor (SCF) 5 vascular endothelial growth factor (VEGF)

pro-inflammatorische Cytokine 5 Interleukin-1 (IL-1) 5 Tumor-Nekrose-Faktor (TNF)

Typ-1-Interferone 5 Interferon-α (IFNα1,-2,-4,-5,-6,7,-8,-10,-13,-14,-16,-17,-21) 5 Interferon-β (IFNβ) 5 Interferon-ε (IFNε) 5 Interferon-κ (IFNκ) 5 Interferon-ω (IFNω1, IFNω2)

CC-Chemokine (CCL1 bis CCL28) 5 Eotaxine – Eotaxin 1 (CCL11) – Eotaxin 2 (CCL24) – Eotaxin 3 (CCL26) 5 macrophage inflammatory proteins – MIP1α (CCL3) – MIP1β (CCL4) – MIP1δ (CCL15) – MIP3α (CCL20) – MIP3β (CCL19) 5 regulated on activation, normal T-cell expressed and secreted (RANTES) (CCL5) 5 monocyte chemoattractant proteins – MCP1 (CLC2) – MCP2 (CLC8) – MCP3 (CLC7) – MCP4 (CLC13)

Signaltransduktion über Rezeptor-Serin/Threoninkinasen 5 transforming growth factor β (TGFE) 5 bone morphogenetic protein (BMP) 5 Aktivine

Signaltransduktion über die common β Kette 5 Interleukin-3 (IL-3) 5 Interleukin-5 (IL-5) 5 granulocyte macrophage colony Typ-2-Interferon stimulating factor (GM-CSF) 5 Interferon-γ (IFNγ) Signaltransduktion über die common γ Kette 5 Interleukin-2 (IL-2) 5 Interleukin-4 (IL-4) 5 Interleukin-7 (IL-7) 5 Interleukin-9 (IL-9) 5 Interleukin-15 (IL-15) 5 Interleukin-21 (IL-21)

Interferon-ähnliche Cytokine 5 Interleukin-10 (IL-10) 5 Interleukin-19 (IL-19) 5 Interleukin-20 (IL-20) 5 Interleukin-22 (IL-22) 5 Interleukin-24 (IL-24) 5 Interleukin-28 (IL-28) 5 Interleukin-29 (IL-29)

IL-6-Typ-Cytokine (pro- und anti-inflammatorisch) 5 Interleukin-6 (IL-6) 5 Interleukin-11 (IL-11) 5 Interleukin-27 (IL-27) 5 Oncostatin M (OSM) 5 leukemia inhibitory factor (LIF) 5 ciliary neurotrophic factor (CNTF) 5 cardiotrophin-1 (CT-1) 5 cardiotrophin-like cytokine (CLC) 5 Neuropoetin (NP)

CXC-Chemokine (CXCL1 bis CXCL15) 5 Interleukin-8 (IL-8, CXCL8) 5 stromal derived factor 1 (SDF1, CXCL12) 5 growth related oncogenes – GROα (CXCL1) – GROβ (CXCL2) – GROγ (CXCL3) XC-Chemokine 5 Lymphotactin (XCL1) 5 SCM-1β (XCL2)

Signaltransduktion über homodimere Rezeptoren 5 Erythropoetin (EPO) 5 growth hormone (GH) 5 granulocyte colony stimulating factor (GCSF) 5 Leptin 5 Thrombopoetin (TPO)

CX3C-Chemokine 5 Fractalkin (CX3CL1)

Biologische Funktion: Proliferation, Differenzierung

Immunabwehr, Entzündung, Hämatopoese, Apoptose

4 Steroide (z.B. Glucocorticoide: Cortisol; Mineralocorticoide: Aldosteron; männliche Sexualhormone: Testosteron; weibliche Sexualhormone: Östradiol) Die Funktionen der glandulären Hormone sind im Einzelnen in den Kapiteln 26 und 27 besprochen. Aglanduläre Hormone = Gewebshormone. Im Gegensatz zu den glandulären Hormonen werden die Gewebshormone oder aglandulären Hormone von in den verschiedensten Geweben verstreuten Zellen synthetisiert.

Virusabwehr, Proliferationshemmung, Apoptose

Migration, Chemotaxis

Gewebshormone, die keine Polypeptide sind, werden von der großen Gruppe der Cytokine, die alle zu den Polypeptiden zählen, abgegrenzt. Zur Gruppe der Gewebshormone, die keine Polypeptide sind, zählen 4 biogene Amine (Histamin, Serotonin) 4 Eikosanoide (Prostaglandine, Leukotriene) 4 Gase (Stickstoffmonoxid (NO)) 4 Neurotransmitter (Acetylcholin, J-Aminobuttersäure (GABA), Glutamat, Glycin)

25

760

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

Zu den Cytokinen gehören (. Tab. 25.1) 4 Wachstumsfaktoren 4 Interleukine 4 Interferone 4 Chemokine

Im Einzelfall kann die Zuordnung eines extrazellulären Signalmoleküls zu einer der oben genannten Gruppen schwierig sein. Die aglandulären nicht-peptidischen Hormone werden weiter unten und in den Kapiteln 13, 26, 27, 31, 34 behandelt.

In Kürze

25

Die Kommunikation zwischen verschiedenen Geweben und Organen im vielzelligen Organismus erfolgt mit Hilfe endogener Signalmoleküle. Diese können dabei als endokrine Faktoren von den Drüsen, in denen sie produziert werden, über den Blutweg an ihre Zielzellen gelangen, als parakrine Faktoren auf benachbarte Zellen einwirken

25.2

Stoffwechsel und Analyse von Hormonen und Cytokinen

25.2.1

Biosynthese und Sekretion

Cytokine sind immer Polypeptide und werden meist de novo synthetisiert. Glanduläre Hormone gehören dagegen chemisch zu den unterschiedlichsten Verbindungen. Sie können Derivate von Aminosäuren, Abkömmlinge des Cholesterins aber auch Peptide und Proteine sein. Dementsprechend unterschiedlich sind natürlich auch die Mechanismen ihrer Biosynthese. Besonders die Peptid- und Proteohormone (z.B. Insulin, Glucagon, Parathormon) werden wie andere sekretorische Proteine in Form höhermolekularer Vorstufen synthetisiert. Gelegentlich tragen derartige Vorläufer (precursors) sogar mehrere unterschiedliche Hormone, die durch entsprechende proteolytische Spaltung freigesetzt werden (z.B. Proopiomelanocortin, 7 Kap. 32.3.8, Glicentin, 7 Kap. 26.2.2). Bei vielen Peptid- und Proteohormonen, aber auch bei Aminosäurederivaten wie den Katecholaminen erfolgt eine Speicherung in Form intrazellulärer Sekretvesikel. Einen besonderen Fall stellen die Schilddrüsenhormone dar, die als Teil des Thyreoglobulin extrazellulär in großen Mengen in der Schilddrüse gespeichert werden (Kolloid). Andere Hormone, z.B. Steroidhormone oder das Parathormon (PTH) werden nur in geringem Umfang gespeichert. Daher muss in diesen Fällen die Biosynthese sehr genau reguliert werden. Die Sekretion der in Vesikeln gespeicherten Signalmoleküle erfolgt entsprechend den zellbiologischen Vorgängen beim regulierten vesikulären Transport (7 Kap. 6.2.4). Ein wichtiger Auslöser ist meist die Erhöhung der cytosolischen Calciumkonzentration. Bei einer Reihe von endokrinen Zellen ist experimentell nachgewiesen worden, dass ein intaktes mikrotubuläres System für den Transport der sekretorischen Vesikel vom Golgi-Apparat zur Plasmamembran notwendig ist. Dieser Transport ist ATP-abhängig

oder aber als autokrine Faktoren auf die Zellen zurückwirken, von denen sie produziert werden. Neben den in den endokrinen Drüsen gebildeten Hormonen kommt im Organismus eine große Zahl von Gewebshormonen vor, welche durch endokrin aktive, in den Geweben verstreute, einzelne Zellen gebildet werden.

und man nimmt an, dass Kinesin (7 Kap. 6.3.1) den für den Transport notwendigen Motor darstellt. Während die meisten Cytokine für ihre Sekretion mit einem N-terminalen Signalpeptid synthetisiert werden, gibt es Ausnahmen. Ohne dass eine klassische Signalsequenz vorliegt, werden die Cytokine Interleukin-1 (IL-1), tumor necrosis factor (TNF), ciliary neurotrophic factor (CNTF) und macrophage migration inhibitory factor (MIF) über einen im Detail noch unbekannten Mechanismus sezerniert.

25.2.2

Transport im Blut

Die glandulären Hormone gelangen über den Blutkreislauf an ihren Wirkungsort. Im Allgemeinen sind die Serumkonzentrationen von Hormonen äußerst gering. Für Peptidund Proteohormone liegen sie bei etwa 10–12–10–10 mol/l, für Schilddrüsen- und Steroidhormone zwischen 10–9 und 10–6 mol/l. Die vom Cholesterin abgeleiteten Steroidhormone sowie die Hormone der Schilddrüse sind besonders hydrophob. Aus diesem Grund können sie nur durch Bindung an spezifische Transportproteine im Serum transportiert werden. Aufgrund der hohen Affinität dieser Hormone zu ihren Transportproteinen liegen immer nur sehr geringe Mengen der betreffenden Hormone in freier und damit biologisch aktiver Form vor. Daher ist nicht nur die Konzentration des Hormons, sondern auch die seines Bindeproteins für die biologische Aktivität von Bedeutung. Im Unterschied zu den Hormonen, die in der Regel im Blut transportiert werden, wirken die meisten Cytokine eher lokal. Bei akuten und chronischen Entzündungen lassen sich jedoch Cytokine wie IL-1, TNF, IL-6 und IL-8 im Blut nachweisen. Die Bioaktivität dieser Cytokine im Blut wird häufig durch lösliche Rezeptoren moduliert.

761 25.2 · Stoffwechsel und Analyse von Hormonen und Cytokinen

25.2.3

Abbau und Ausscheidung

Besonders unter pathologischen Bedingungen kann die Geschwindigkeit des Abbaus und der Ausscheidung von Hormonen für ihre Serumkonzentration und damit für ihre biologische Aktivität wichtig werden. Cytokine, Peptidund Proteohormone werden durch Endozytose von den Zielzellen aufgenommen und durch anschließende Proteolyse abgebaut. Die hierfür wichtigen Organe sind v.a. die Leber, daneben aber auch die Nieren. Für den Abbau und die Ausscheidung von Steroid- bzw. Schilddrüsenhormonen oder Katecholaminen sind wesentlich spezifischere Mechanismen notwendig. Auch hierfür ist das wichtigste Organ die Leber. Die Metabolisierungsreaktionen für die genannten Hormone finden nach den Mechanismen der Phase I und II des Biotransformationssystems (7 Kap. 33.3.1) statt. Bei Funktionsstörungen des Leberzellparenchyms sind naturgemäß auch diese Reaktionen betroffen, sodass es dann zu entsprechenden Störungen im Stoffwechsel dieser Hormone kommt.

25.2.4

Methoden zur Konzentrationsbestimmung

! Biologische Nachweisverfahren beruhen auf der Quantifizierung zellulärer Effekte von Signalmolekülen.

Grundlage der biologischen Nachweisverfahren für Hormone und Cytokine ist deren biologische Aktivität am intakten Tier, in Gewebspräparaten oder an isolierten Zellen. . Abb. 25.2. Prinzip des Radioimmunoassays (RIA). (Einzelheiten 7 Text)

Dieser Nachweis ist der für die biologische Funktion wichtigste Test, da in ihm inaktive Vorstufen oder Abbauprodukte des Hormons oder Cytokins nicht wirksam sind. V.a. zur Aufdeckung neuer hormonell aktiver Verbindungen sind biologische Nachweisverfahren unerlässlich, da bis zur endgültigen Strukturaufklärung des Signalmoleküls andere Methoden (7 u.) nicht anwendbar sind. Ein Nachteil biologischer Testverfahren liegt in der Komplexität und Störanfälligkeit der Bestimmungsmethode. Es ist außerordentlich schwierig, die für derartige Tests benötigten Gewebe oder Zellpräparationen in gut reproduzierbarer Form herzustellen. Darüber hinaus werden gelegentlich auch von anderen Signalmolekülen ähnliche zelluläre Antworten ausgelöst, sodass häufig auch die Spezifität solcher Analysen nicht sehr groß ist. ! Für alle Hormone und Cytokine stehen spezifische und sensitive immunologische Nachweisverfahren zur Verfügung.

Die Entdeckung des Prinzips der immunologischen Konzentrationsbestimmungen durch Solomon Berson und Rosalyn Yalow Anfang der 60er Jahre hat die Endokrinologie in ihrer heutigen Form erst möglich gemacht, da nur diese Verfahren die notwendige Spezifität und Empfindlichkeit für die Konzentrationsbestimmung von Hormonen und Cytokinen in Körperflüssigkeiten liefern. Die Methode beruht auf der Reaktion mit spezifischen Antikörpern, die inzwischen gegen jedes bekannte Hormon oder Cytokin in ausreichender Spezifität und Menge gewonnen werden können. Der Vorteil der immunologischen Konzentrationsbestimmungen liegt in der Einfachheit ihrer Durchführung

25

762

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

und in der hohen Empfindlichkeit des Nachweises. Ihr Nachteil ist, dass auch Vorstufen oder Abbauprodukte vom Antikörper gebunden werden, wenn sie nur das für die Antikörperbindung notwendige Epitop enthalten. Daher ist es manchmal zur Lösung bestimmter Fragestellungen notwendig, neben der immunologischen Bestimmung auch die biologische Aktivität eines Hormons oder Cytokins zu messen.

Radioimmunoassay (RIA)

25

Es wird eine konstante Menge Hormon- bzw. Cytokinspezifischer Antikörper mit einer im Überschuss vorhandenen Menge radioaktiv markierten Hormons/Cytokins (in . Abb. 25.2 als Ligand (rot) bezeichnet) inkubiert. Alle Antikörper binden radioaktiv (meist 125J) markierten Liganden (maximal gebundene Radioaktivität = 100%). Überschüssige 125J-Liganden werden von Antikörper-gebundenen abgetrennt und die Antikörper-gebundene Radioaktivität wird gemessen (. Abb. 25.2a). Ist neben dem radioaktiv markierten Liganden auch noch nicht markierter Ligand (blau), dessen Konzentration bestimmt werden soll, vorhanden, tritt dieser mit dem radioaktiv markierten Liganden in Konkurrenz um die Bindung an den Antikörper (. Abb. 25.2b). Wenn die Zahl der nicht markierten Liganden gleich groß wie die 125J-Liganden ist, wird nach Bindung an die Antikörper und Trennung von freien und gebundenen Liganden nur die Hälfte der Radioaktivität für die Zahl der 125J-Ligand/Antikörper-Komplexe gemessen. Durch Zugabe verschiedener Mengen eines bekannten unmarkierten Standardpräparats, lässt sich eine Eichkurve erstellen. Die Messung der Ligandenkonzentration in unbekannten Proben erfolgt dann durch Vergleich mit dem Standard.

ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) Der ELISA vermeidet die Gefahren der Radioaktivität und wird deshalb heute bevorzugt. Wie in . Abb. 25.3 gezeigt wird ein erster Antikörper (blau) an eine Festphase (Mikrotiterplatte) gebunden. Der im Überschuss vorliegende Festphasen-gebundene Antikörper bindet das in der zu messenden Probe vorliegende Hormon/Cytokin (rot). Durch einen mit einem Enzym gekoppelten zweiten Antikörper (gelb) gegen weitere Epitope auf dem zu messenden Hormon/Cytokin erfolgt nun das eigentliche Nachweisverfahren. Das an den Zweitantikörper gekoppelte Enzym setzt ein zugegebenes Substrat zu einem farbigen oder fluoreszierenden Produkt um, dessen Konzentration hoch empfindlich gemessen werden kann. Eine Variante des in . Abb. 25.3 dargestellten immunometrischen Testverfahrens ist die Bestimmung von Antikörperkonzentrationen in Gewebeproben oder Körperflüssigkeiten mit Hilfe von an Mikrotiterplatten immobilisiertem Hormon/Cytokin.

. Abb. 25.3. Enzym-gekoppelter Immunoadsorptionstest (ELISA, enzyme-linked immunosorbent assay). (Einzelheiten 7 Text)

In Kürze Die Konzentrationen von Hormonen und Cytokinen in der extrazellulären Flüssigkeit liegen in einem Bereich zwischen 10–6 und 10–10 mol/l. Die Entwicklung immunologischer Bestimmungsverfahren für diese Verbindungen stellt einen Meilenstein in der Endokrinologie dar, da nur durch sie derartig geringe Konzentrationen in spezifischer und gut reproduzierbarer Weise ermittelt werden können.

763 25.3 · Rezeptoren für Hormone und Cytokine

25.3

Rezeptoren für Hormone und Cytokine

Unabhängig von Wirkort und Wirkungsspektrum muss man für alle extrazellulären Signalmoleküle (Liganden) annehmen, dass sie primär mit einem Rezeptor interagieren und dass der dabei entstehende Ligand-Rezeptor-Komplex für die Ausbildung der intrazellulären Signale verantwortlich ist: Extrazelluläres Signalmolekül + Rezeptor o Ligand-Rezeptor-Komplex o intrazelluläre Signale Rezeptoren sind immer Proteine und die Kinetik der Bindung des Signalmoleküls an seinen Rezeptor verläuft analog zur Bindung eines Substrats an das aktive Zentrum eines Enzyms (7 Kap. 4.2.1). Da die Anzahl der Rezeptoren einer Zelle begrenzt ist, erreicht die Ligandenbindung mit steigender Ligandenkonzentration eine Sättigung. Man kann eine Bindungskonstante bestimmen, die Informationen über die Affinität des Liganden zum Rezeptor liefert. Die meisten Rezeptoren durchspannen die Plasmamembran. Einige liegen jedoch im Zellinnern vor und binden ihre lipophilen Liganden nach deren Transport durch die Plasmamembran. Man unterscheidet die drei Klassen der 4 Nucleären Rezeptoren 4 Liganden-regulierte Ionenkanäle 4 Membranrezeptoren Die intrazellulär vorliegenden nucleären Rezeptoren können selbst als mobile Signalweiterleiter angesehen werden, die nach Ligandenbindung die Information bis in den Zellkern und an die DNA tragen können. Dies ist verständlicherweise für die Ionenkanäle und die membranverankerten Rezeptormoleküle nicht möglich. Im Fall der Ionenkanäle führt die Ligandenbindung zur Änderung der Durchlässigkeit für bestimmte Ionen, meist Na+, K+, Ca2+ oder Cl– Ionen. An die Aktivierung membranverankerter Rezeptoren schließen sich auf deren cytoplasmatischer Seite Signaltransduktionskaskaden an, bei denen aufeinander folgend verschiedene Proteine aktiviert werden. Diese Aktivierungen sind häufig mit Phosphorylierungen (dem Anhängen eines Phosphatrests an die Seitenketten von Aminosäuren wie Serin, Threonin oder Tyrosin) verbunden oder durch den Austausch von an G-Proteinen gebundenem GDP durch GTP gekennzeichnet. In selteneren Fällen kann die Aktivierung auch über eine Dephosphorylierung der Proteine erfolgen. Sowohl für nucleäre als auch für membranverankerte Rezeptoren führt die Signaltransduktion zu gesteigerter oder verminderter Transkription von Zielgenen und der entsprechenden Proteinexpression, zu Stoffwechseländerungen, Differenzierung, Proliferation, Apoptose oder Migration.

25.3.1

Nucleäre Rezeptoren

Einige extrazelluläre Signalmoleküle wie die Steroid- oder Schilddrüsenhormone (7 Kap. 8.5.2, 27.2), aber auch Retinsäure (7 Kap. 23.2.1) oder die D-Vitamine (7 Kap. 23.2.2) können aufgrund ihrer lipophilen Eigenschaften durch die Plasmamembran gelangen. Nach ihrer Aufnahme in die Zelle binden sie an intrazellulär vorliegende spezifische Rezeptorproteine. Durch die Interaktion des Hormons/ Vitamins mit seinem Rezeptor entsteht ein Komplex, der durch Bindung an spezifische Promotorregionen responsiver Gene (enhancer/silencer) deren Transkription positiv (. Abb. 25.4a) oder negativ beeinflussen kann. ! Durch die Bindung des Signalmoleküls an intrazelluläre Rezeptoren entsteht ein Komplex, der als Transkriptionsfaktor wirkt.

Die Mitglieder der Superfamilie der nucleären Rezeptoren weisen untereinander eine große Ähnlichkeit auf. Ihre Struktur ist modular, d.h. aus verschiedenen Domänen aufgebaut. Beginnend vom N-Terminus besitzen nucleäre Rezeptoren eine variable Region, die essentielle Bereiche zur Regulation der Genexpression enthält, eine DNA-Bindungsdomäne, eine Kern-Lokalisationssequenz und die Ligandenbindungsdomäne, die immer C-terminal zu finden ist (. Abb. 25.4b). Die Homologie der Rezeptoren ist besonders im Bereich der DNA-Bindungsdomäne sehr hoch. Soweit bisher bekannt binden alle nucleären Rezeptoren die DNA als Dimere. Sie erkennen zwei konservierte DNASequenzen aus je sechs Basen, die entweder auf dem gleichen DNA-Strang als sogenannte direct repeats oder auf entgegengesetzten Strängen, d.h. als inverted repeats vorliegen (. Abb. 25.5). Während die in homodimerer Form bindenden Steroidhormonrezeptoren, z.B. Glucocorticoidrezeptor und Östrogenrezeptor, an inverted repeats binden, erkennen die in heterodimerer Form bindenden Rezeptoren für Vitamin D3, Retinsäure und Schilddrüsenhormone direct repeats. Inzwischen gibt es gute Vorstellungen über die Raumstruktur der DNA-Bindungsdomäne der Hormonrezeptoren. Sie enthalten häufig Cystein-reiche Sequenzen, die Zink-Ionen koordinativ binden und werden daher »Zinkfingermotive« genannt (7 Kap. 8.5.2). Die Spezifität der Bindung wird im Fall der Steroidhormonrezeptoren über feine Unterschiede in der DNAErkennungssequenz (z.B. AGAACA (Glucocorticoid) im Vergleich zu AGGTCA (Östrogen)) oder im Fall der heterodimeren nucleären Rezeptoren durch den Abstand der beiden Sequenzen zueinander, der zwischen einem und fünf Basenpaaren variieren kann, bestimmt (. Abb. 25.5). Der Aktivierungsmechanismus der nucleären Rezeptoren unterscheidet die in homodimerer Form an die DNA bindenden Steroidhormonrezeptoren von den in heterodimerer Form bindenden Rezeptoren für Vitamin D3,

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764

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25

. Abb. 25.4. Signaltransduktion nucleärer Rezeptoren. (a) Aktivierung intrazellulärer Rezeptoren durch Liganden. Die Abbildung zeigt den bei Glucocorticoiden aufgeklärten Mechanismus. Glucocorticoide diffundieren durch die Zellmembran und binden an den intrazellulären Glucocorticoidrezeptor. Das zuvor an diesen gebundene

Hitzeschockprotein Hsp90 löst sich ab und gibt die Kernlokalisationssequenz des Rezeptors frei. Dieser wird in dimerer Form in den Zellkern transportiert, bindet dort an enhancer-Sequenzen responsiver Gene und führt zur Aktivierung des basalen Transkriptionsapparats. (b) Domänenstruktur einiger nucleärer Rezeptoren. AS = Aminosäuren

Retinsäure (7 Kap. 23.2.2) und Schilddrüsenhormone (7 Kap. 27.2). Die Rezeptoren für die D-Vitamine, Retinsäure und Schilddrüsenhormone sind ausschließlich nucleär lokalisiert. In Abwesenheit der Hormone (= Liganden) reprimieren sie als Monomere die Transkription bestimmter Gene. Nach Ligandenbindung erfolgt eine drastische Konformationsänderung und nach Rekrutierung des zweiten Rezeptors die Aktivierung der Gentranskription. Im Gegensatz dazu sind die Rezeptoren für Steroidhormone in Abwesenheit ihrer Liganden cytoplasmatisch lokalisiert, meist gebunden an Proteine, die ihre DNA-

Bindungsdomäne blockieren. Als solches ist u.a. das Hitzeschockprotein (7 Kap. 9.2.1) Hsp90 identifiziert worden. Die Bindung des Hormons an den Rezeptor führt zur Dissoziation der Hitzeschockproteine und anschließend zur Bildung von homodimeren Formen der jeweiligen Hormonrezeptoren. . Abb. 25.4a gibt die heutigen Vorstellungen über die Aktivierung derartiger intrazellulärer Hormonrezeptoren durch ihre jeweiligen Liganden wieder.

765 25.3 · Rezeptoren für Hormone und Cytokine

gulationsmechanismus hier darauf, dass die Bindung spezifischer Liganden den Öffnungszustand des Kanals beeinflusst. Liganden-aktivierte Ionenkanäle kommen in der Plasmamembran sowie in intrazellulären Membranen vor (. Tabelle 25.2). Extrazelluläre Liganden sind beispielsweise die Neurotransmitter 4 J-Aminobutyrat (GABA) 4 Acetylcholin 4 Glutamat 4 Serotonin

. Abb. 25.5. Enhancer-Sequenzen, die durch aktivierte, dimere Hormonrezeptor-Komplexe erkannt werden. GRE = glucocorticoid response element; ERE = estrogen response element; VDRE = vitamine D response element; TRE = thyroid hormone response element; RARE = retinoic acid response element; N: beliebige Base (A, G, C oder T) (die Sequenzen können in einzelnen Genen leicht von den oben dargestellten enhancer-Sequenzen abweichen)

25.3.2

Liganden-regulierte Ionenkanäle als Rezeptoren

Im Gegensatz zu den intrazellulären Rezeptoren für Signalmoleküle sind die Liganden-regulierten Ionenkanäle ihrer Natur nach immer Membranproteine. Wie für Ionenkanäle üblich (7 Kap. 6.1.3, 6.1.4, 32.2.2), sind sie für den nichtATP-abhängigen Transport verschiedener Ionen durch die Membran verantwortlich. Viele Ionenkanäle zeichnen sich dadurch aus, dass ihr Öffnungszustand und damit ihr Substratfluss regulierbar ist. Anders als bei den spannungsgesteuerten Ionenkanälen, die sich in Abhängigkeit vom Membranpotential öffnen oder schließen, beruht der Re-

Intrazellulär aktivierte Ionenkanäle spielen u.a. bei der Regulation der intrazellulären Calciumkonzentration z.B. durch Inositolphosphate eine wichtige Rolle (7 Kap. 25.6.3). Liganden-regulierte Ionenkanäle vermitteln die schnellsten bekannten zellulären Reaktionen auf Signalstoffe, da die Bindung des Liganden unmittelbar mit der spezifischen Antwort, nämlich dem Öffnen oder Schließen eines Ionenkanals verknüpft ist. Im Unterschied zu den anderen Rezeptortypen (7 u.) ist die Erzeugung eines intrazellulären Boten- oder zweiten Signalstoffs (second messenger) für die Signaltransduktion nicht notwendig. Die durch extrazelluläre Liganden aktivierten Ionenkanäle haben eine gemeinsame Grundstruktur. Sie sind jeweils aus fünf Proteinuntereinheiten zusammengesetzt. So hat z.B. der nikotinische Acetylcholinrezeptor die Struktur DEJG (. Abb. 25.6) Jede der Untereinheiten besteht aus einem integralen Membranprotein mit vier Transmembrandomänen. Der N- sowie der C-Terminus liegen extrazellulär, außerdem findet sich eine relativ große cytoplasmatische Schleife. Die durch intrazelluläre Liganden regulierten Ionenkanäle zeigen einen etwas anderen Aufbau und sind im Einzelnen im 7 Kap. 25.3.2 besprochen.

. Tabelle 25.2. Liganden-regulierte Ionenkanäle (Beispiele) Rezeptor (Kanal)

Ligand

Ionenselektivität

Besprochen in Kapitel

Nikotinischer Acetylcholinrezeptor

Acetylcholin

Na+, K+, Ca+

31.3.2, 31.3.3

GABAA-Rezeptor

GABA

Cl–, HCO3–

31.3.4

, HCO3–

31.3.4

Extrazellulär aktivierte Ionenkanäle

Glycinrezeptor

–

Glycin

Cl

Inositol-(1,4,5)-trisphosphat

Ca2+

Intrazellulär aktivierte Ionenkanäle IP3-abhängiger Calciumkanal

2+

Ryanodinrezeptor

cyclo-ADP-Ribose

Ca

Na+-Kanal der Stäbchen in der Retina

cyclo-GMP

Na+

31.3, 25.4.5 30.3.2

25

766

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25

. Abb. 25.6. Nikotinischer Acetylcholinrezeptor. Der nikotinische Acetylcholinrezeptor besteht aus fünf Untereinheiten (D, D, E, J, G), die jeweils vier Transmembranhelices besitzen (M1–M4). Die M2-Transmembranhelices (rot) der fünf Untereinheiten bilden eine Pore. Zwei Acetylcholin-Moleküle (blau) binden zwischen den D und J bzw. den D und G Untereinheiten des Rezeptors

Infobox Myasthenia gravis (myo: Muskel; asthenia: Schwäche; gravis: schwer) ist eine relativ seltene neurologische Erkrankung, die mit einem Verlust der nikotinischen Acetylcholin-Rezeptoren auf der postsynaptischen Membran einhergeht. Dies resultiert in einer Schwäche und Erschöpfung der quer gestreiften Muskulatur, die lebensbedrohlich enden kann. Es handelt sich um eine Antikörpervermittelte Autoimmunerkrankung, deren Entstehung bis heute nicht vollständig geklärt ist. Der erste Patient wurde vermutlich schon 1672 von Thomas Willis in De Anima Brutorum (wörtlich: Von der Seele der Tiere) beschrieben, wo er von einer Frau berichtet, die lang-anhaltende Paralysen der Extremitäten und der Zunge aufwies. Zwei Jahrhunderte später beschrieben Erb und Goldflam die genauen klinischen Symptome von Myasthenia gravis. Der Name selbst wurde aber erst von Jolly 1895 geprägt.

Im Serum von etwa 85% der Myasthenia gravis-Patienten konnten erhöhte Spiegel von Acetylcholin-Rezeptorspezifischen Antikörpern (hauptsächlich IgG1 und IgG3) nachgewiesen werden. Die Wirkungsweise der Autoantikörper ist vielfältig. So aktivieren einige das KomplementSystem und führen damit zur Lyse der Muskelmembran, andere verbrücken zwei Acetylcholin-Rezeptoren in der Membran und beschleunigen so deren Degradation. Etwa 75% der Myasthenia gravis-Patienten weisen Thymus-Abnormalitäten auf (z.B. Hyperplasie der Keimzentren oder Thyome) und eine Thymektomie führte bei einigen Patienten zur Linderung der Symptome. Nachdem erkannt wurde, dass es sich um eine Autoimmunerkrankung handelt, hat sich der Langzeiteinsatz von Steroiden oder Azathioprinen (Imuran£) zur Immunsuppression als erfolgreich herausgestellt.

Infobox Curare und Neurotoxine Das Pflanzengift Curare (»ourari« aus der Sprache der Tupi-Indianer bedeutet so viel wie »Flüssigkeit, die einen Vogel töten kann«) wird aus Curarea bzw. Strychnos toxifera oder Chondrodendron tomentosum gewonnen und

wurde von den südamerikanischen Indianern als Pfeilgift genutzt. Seine todbringende Wirkung entfaltet es hauptsächlich über die Lähmung der Atemmuskulatur. Es verhindert das Öffnen der Kanäle im nikotinischen Acetylcholin-Rezeptor der motorischen Endplatte, indem es die 6

767 25.3 · Rezeptoren für Hormone und Cytokine

Bindungsorte für Acetylcholin kompetitiv blockiert. Somit wirken bei Curare-Vergiftungen alle Stoffe, die die Acetylcholin-Menge im synaptischen Spalt erhöhen können (z.B. die Acetylcholinesterase-Hemmer Neostigmin oder Physostigmin), als Gegenmittel. Mitte des 20. Jahrhunderts wurde Curare als Relaxans bei chirurgischen Eingriffen verwendet. Dies war nicht ohne Risiko, da die lähmende Wirkung erst im Laufe der Zeit gut kontrolliert werden konnte. Zu Beginn des 20. Jahrhunderts wurde das Gift auch therapeutisch ge-

25.3.3

Membranrezeptoren

! Die Stimulierbarkeit eines Zelltyps durch hydrophile Signalmoleküle ist davon abhängig, ob auf der Zelloberfläche Rezeptoren für diese Moleküle vorhanden sind.

Die extrazelluläre Bindung eines Liganden an seinen Rezeptor löst intrazelluläre Reaktionskaskaden aus. Häufig werden hierbei intrazelluläre Botenstoffe gebildet, die auch als second messenger und dementsprechend die primären Signalstoffe als first messenger bezeichnet werden. In Abhängigkeit von ihrer Struktur und den Mechanismen der Signalweiterleitung im Cytoplasma unterscheidet man drei Arten von Membranrezeptoren (. Abb. 25.7a,b,c) 4 G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 4 Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen 4 Rezeptoren mit assoziierten Kinasen Bei den Membranrezeptoren kann es sich um ein einzelnes Protein, um Multimere eines Proteins (homooligomere Rezeptoren) oder Multimere aus mehreren unterschiedlichen Proteinen (heterooligomere Rezeptoren) handeln.

G-Protein-gekoppelte Rezeptoren G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (G-protein-coupled receptors, GPCR) durchspannen die Plasmamembran siebenmal und werden daher auch als heptahelicale, 7-Transmembrandomänen- oder Serpentin-Rezeptoren bezeichnet. Sie bilden die größte Familie der Membranrezeptoren. Ihr Aufbau ist in . Abb. 25.7a dargestellt. Es handelt sich um Proteine aus 350–800 Aminosäuren und Molekularmassen zwischen 40 und 90 kDa. Der N-Terminus liegt extrazellulär, der C-Terminus intrazellulär. Auffallend ist bei vielen GPCR eine große intrazelluläre Schleife zwischen der 5. und 6. Transmembrandomäne. Teile von ihr sind für den Signaltransduktionsmechanismus verantwortlich, bei dem immer heterotrimere (D,E,J) G-Proteine beteiligt sind (7 Kap. 25.4.4 und 25.6) (. Abb. 25.7a). Diese sind mittels

gen Tollwut, Epilepsie, Tetanus und Morbus Parkinson eingesetzt. Neurotoxine sind Substanzen, die eine normale Neurotransmission stören. Hierbei handelt es sich interessanterweise oft um Schlangen- oder Spinnengifte, wie z.B. das D-Bungarotoxin der Bungarus-Schlangen, das D-Dendrotoxin der schwarzen Mamba, das D-Latrotoxin der schwarzen Witwe oder die Agatoxine der Trichterspinnen. Diese Substanzen hemmen entweder den nikotinischen Acetylcholin-Rezeptor oder andere Ionenkanäle.

covalenter Verknüpfung mit einem hydrophoben Molekül (Myristoylierung, Palmitoylierung, Prenylierung) in der Zellmembran verankert (7 Kap. 9.2.4). G-Protein-gekoppelte Rezeptoren werden von den unterschiedlichsten Signalmolekülen als Signalvermittler genutzt. Zu ihnen gehören glanduläre Hormone, Cytokine (v.a. die Gruppe der Chemokine), Neurotransmitter, aber auch Geschmacks- und Geruchsstoffe sowie divalente Kationen und sogar Lichtquanten.

Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/ Threoninkinasen Die Rezeptoren für eine Vielzahl von Wachstumsfaktoren gehören zur Familie der Rezeptor-Tyrosinkinasen. Hierbei handelt es sich um integrale Membranproteine mit einer Transmembranhelix (. Abb. 25.7b). Der N-Terminus des Proteins befindet sich auf der Außenseite der Zelle, während der C-Terminus im Zellinnern lokalisiert ist (Typ-ITransmembranproteine). Rezeptor-Tyrosinkinasen sind Glycoproteine, die aus meist Immunglobulin-ähnlichen Domänen modular aufgebaut sind. Die Bindung des Liganden erfolgt auf der extrazellulären Seite des Rezeptors und wird über spezifische, nichtcovalente Wechselwirkungen zwischen definierten Regionen des Liganden und entsprechenden Bereichen des Rezeptors vermittelt (7 Kap. 25.7). Der Name Rezeptor-Tyrosinkinase leitet sich von einer Domäne mit Enzymaktivität in der cytoplasmatischen Region des Proteins ab, die nach Stimulation unter ATP-Verbrauch Proteine an Tyrosinseitenketten phosphorylieren kann. Insulin (7 Kap. 26.1.7) und eine Reihe von Wachstumsfaktoren sind Liganden von Rezeptor-Tyrosinkinasen. Einzelheiten zum Aufbau dieser Membranrezeptoren finden sich in 7 Kap. 25.7.1. Eine Besonderheit stellt der Rezeptor für TGF-E dar. Hier werden nicht Tyrosin-, sondern Serin-Seitenketten phosphoryliert. Solche Rezeptoren werden als RezeptorSerin/Threoninkinasen bezeichnet.

25

768

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25

. Abb. 25.7. Membranständige Rezeptoren. Aktivierungsmechanismen von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (a), Rezeptoren mit intrinsischer Kinaseaktivität (b) und assoziierter Kinaseaktivität (c). KD = Kinase-Domäne; P = Phosphat

Rezeptoren mit assoziierten Kinasen Die meisten Kinase-assoziierten Rezeptoren haben prinzipielle Ähnlichkeit mit den Rezeptor-Tyrosinkinasen mit dem Unterschied, dass die enzymatische Aktivität nicht auf dem selben Polypeptid vorliegt, sondern als separates Protein konstitutiv an den Membranrezeptor gebunden ist (. Abb. 25.7c). Auch die Kinase-assoziierten Rezeptoren gehören zur Familie der Typ-I-Transmembranproteine. Der Großteil der Interleukine und die Interferone, aber auch einige Wachstumsfaktoren (z.B. Wachstumshormon, Erythropoetin und Prolactin) signalisieren über Rezeptoren dieser Familie.

Die Bindung des Liganden erfolgt extrazellulär an spezifische Bereiche (7 Kap. 25.4.1). Viele Rezeptoren dieser Gruppe weisen in diesem Bereich mindestens ein Cytokinrezeptor-Homologiemodul auf. Die Interferonrezeptoren enthalten dieses Modul nicht. Die intrazellulären Regionen dieser Rezeptoren sind in weiten Teilen wenig homolog und strukturell noch nicht näher charakterisiert. Im Unterschied zu den Rezeptor-Tyrosinkinasen besitzen sie keine Enzymaktivität. Sie enthalten aber zwei membrannah liegende konservierte Regionen, die der dauerhaften Assoziation mit cytoplasmatischen Tyrosinkinasen dienen. Nach Ausbildung eines signaltransduzierenden Rezeptorkomplexes

769 25.4 · Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren

kommt es zur Aktivierung dieser assoziierten Tyrosinkinasen. Wichtige Ausnahmen bilden z.B. die Rezeptoren der Cytokine Interleukin-1 und Tumor-Nekrose-Faktor, die in 7 Kap. 25.8.1 und 25.8.2 ausführlich besprochen sind, sowie die Toll-like Rezeptoren, die eine zentrale Rolle bei der angeborenen Immunität spielen (7 Kap. 25.8.5 und 7 Kap. 34.1). In Kürze Die Interaktion mit einem spezifischen Rezeptor ist der erste Schritt in der Wirkung von Hormonen und Cytokinen. Intrazellulär lokalisierte Hormonrezeptoren gehören i. Allg. zur Gruppe der ligandenaktivierten Transkriptionsfaktoren. Diese treten mit enhancerSequenzen der entsprechenden Gene in Wechselwirkung und kontrollieren so die Genexpression. Ein großer Teil von Rezeptoren ist in zellulären Membranen, i. Allg. in die Plasmamembran, integriert. Nach ihrem Aufbau können Rezeptoren in ligandenaktivierte Ionenkanäle, G-Protein-gekoppelte Rezeptoren oder Rezeptoren mit intrinsischer oder assoziierter Kinaseaktivität unterteilt werden.

25.4

Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren

Die Plasmamembran einer Zelle stellt in vielerlei Hinsicht eine Barriere dar, nicht zuletzt auch für die meisten Hormone und alle Cytokine. Nur die lipophilen Hormone können die Membran passieren und an Rezeptoren im Zellinneren binden (7 Kap. 25.3.1). Für die übrigen hydrophilen Mediatoren erfolgt die Signaltransduktion an integralen Membranproteinen der Plasmamembran. Im Falle der Liganden-gesteuerten Ionenkanäle ist diese Umwandlung sehr direkt. Nach Ligandenbindung wird die Membran augenblicklich für bestimmte Ionen passierbar. Im Vergleich dazu erfolgt die Signaltransduktion anderer Membranrezeptoren eher indirekt. Die Ligandenbindung an der extrazellulären Region der Rezeptoren muss über die Transmembranhelices in ein cytoplasmatisches Signal übersetzt werden. Auf der cytoplasmatischen Seite sind unterschiedliche Signalproteine in die Signalweiterleitung eingebunden. Dieser komplexe Mechanismus bietet aber auch eine Reihe von Möglichkeiten. So kann ein einzelner aktivierter Membranrezeptor eine Vielzahl von nachgeschalteten Signalproteinen aktivieren und damit zu einer Signalamplifikation (. Abb. 25.8) beitragen. Durch die Rekrutierung verschiedener Signalproteine an einen Rezeptor entsteht eine regelrechte Signalplattform auf der cytoplasmatischen Seite der Plasmamembran, die durch Adapterproteine und scaffold (Gerüst)-Proteine weiter ausgebaut

. Abb. 25.8. Signalamplifikation bei der Signalweiterleitung

werden kann (. Abb. 25.11b). Es gibt Hinweise, dass bestimmte Bereiche der Plasmamembran mit veränderter Lipidkomposition (lipid rafts, 7 Kap. 2.2.6) für die Ausbildung solcher Plattformen prädestiniert sind. Verschiedene Signalwege können sich wechselseitig beeinflussen (crosstalk), wodurch die Komplexität der Signaltransduktion weiter gesteigert wird. Letztlich ist die Zelle gefordert, aus der Vielzahl der auf sie einwirkenden Mediatoren mit Hilfe der Signalintegration die vom Gesamtorganismus gewünschte biologische Antwort hervorzurufen. Die Untersuchung dieser komplexen Signaltransduktionsvorgänge ist ein hochaktuelles Forschungsgebiet. ! Bei allen Membranrezeptoren muss das extrazelluläre Signal in eine intrazelluläre Reaktion umgewandelt werden.

Der allgemeine Mechanismus der Umwandlung des extrazellulären Signals beruht auf folgenden Schritten: 4 Zuerst erfolgt die spezifische Bindung des Liganden (first messenger) an den Membranrezeptor 4 Die Ligandenbindung führt zu einer Konformationsänderung des Rezeptors, die mit einer Oligomerisierung einhergehen kann 4 Die Konformationsänderung initiiert eine intrazelluläre Signalkaskade Aktivierte Membranrezeptoren lösen verschiedene intrazelluläre Reaktionen aus, wie z.B.: 4 die Rekrutierung von Signalproteinen an den Rezeptor 4 die Aktivierung oder Inaktivierung von Enzymen durch covalente Modifikation (häufig Phosphorylierung) und 4 die Bildung von second messengern (z.B. cAMP oder Ca2+) Die daraus resultierenden zellulären Antworten äußern sich in Veränderungen 4 der Genexpression 4 des Stoffwechsels

25

770

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

4 des Cytoskeletts und der Migration 4 der Proliferation und der Apoptose 4 der Differenzierung der Zelle

25.4.1

Rezeptoraktivierung

Die Bindung des Liganden an den Membranrezeptor ist der erste Schritt einer jeden Signaltransduktionskaskade. Die Ligand-Rezeptor-Wechselwirkung ist durch Spezifität und hohe Affinität charakterisiert.

25

! Die Bindung eines Liganden an den Extrazellulärteil eines Rezeptormoleküls wird über mehrere nichtcovalente Wechselwirkungen vermittelt.

Die Rezeptorkinasen (7 Kap. 25.7) und die Rezeptoren mit assoziierten Tyrosinkinasen (7 Kap. 25.8) werden erst nach ihrer Dimerisierung oder Oligomerisierung aktiviert. Eine einzelne, starre Transmembranhelix könnte extrazelluläre Konformationsänderungen nur schlecht ins Zellinnere weitergeben. Die Oligomerisierung wird durch multivalente Liganden erreicht, die mit mehreren Rezeptorproteinen gleichzeitig interagieren. Bei der Bindung von Cytokinen an Rezeptorkomplexe, die aus mehr als einer Proteinspezies aufgebaut sind (Heterooligomere), kann häufig eine definierte Reihenfolge der Bindungsereignisse festgestellt werden. Das Cytokin bindet zunächst an eine der beteiligten Rezeptoruntereinheiten. Erst nach Bindung einer weiteren Rezeptoruntereinheit entsteht ein signalisierender Komplex auf der Zellmembran. In diesem Zusammenhang werden auch vorgeformte Komplexe aus Rezeptoruntereinheiten auf der Zellmembran diskutiert, die durch Ligandenbindung nur noch in eine aktivierte, signaltransduzierende Konformation gebracht werden müssen. Es ist jedoch nicht genau verstanden, wie die Bindung des Liganden zur Aktivierung der Kinasen führt. Im Fall von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (7 Kap. 25.6) scheint die Liganden-induzierte Rezeptor-Oligomerisierung eher von untergeordneter Bedeutung. Hier kann die Bindung des Liganden auf der extrazellulären Seite die Orientierung der an sich starren Transmembranhelices zueinander verändern. Diese Konformationsänderung des Rezeptors wird auf der cytoplasmatischen Seite von den assoziierten trimeren G-Proteinen erkannt und führt zur Auslösung der Signalkaskaden.

25.4.2

Rekrutierung cytoplasmatischer Effektorproteine an die Plasmamembran

Nach Aktivierung von Membranrezeptoren gehen alle weiteren Signaltransduktionsvorgänge von der zellinneren Seite der Plasmamembran aus. Hierzu werden cytoplasma-

Infobox Bindung von Cytokinen an Rezeptoren Für eine Reihe von Cytokinen konnten die Bereiche, mit denen sie in Kontakt zu ihren Rezeptoren treten, definiert werden. Ebenso ließen sich die an der Bindung beteiligten Bereiche auf den entsprechenden Rezeptoren identifizieren. Beispielhaft lässt sich diese Wechselwirkung am Komplex aus Wachstumshormon (growth hormone, GH, welches auf Grund struktureller Merkmale der Familie der helicalen Cytokine zugeordnet wird) und seinem Rezeptor in . Abb. 25.9 veranschaulichen. Dargestellt ist ein Komplex aus zwei Wachstumshormon-Rezeptoruntereinheiten (rot und grün) und dem gebundenen Wachstumshormon (blau). Von den beiden Rezeptoren sind nur die Extrazellulärdomänen gezeigt. Hierbei handelt es sich um zwei je etwa 100 Aminosäuren lange Fibronektin-Typ-III-Domänen. Jede Fibronektin-Typ-III-Domäne ist aus sieben E-Strängen aufgebaut. Die Interaktionsflächen zwischen Ligand und Rezeptoren bestehen aus einem hydrophoben Zentrum (gelb), das von einem Rand aus polaren Aminosäuren umgeben ist. Die Spezifität der Wechselwirkung wird dabei durch die polaren Interaktionen vermittelt, während die van-der-Waals-Wechselwirkungen im Zentrum der Interaktionsflächen den entscheidenden Beitrag zur Bindungsenergie liefern.

. Abb. 25.9. Erkennung eines Liganden durch seinen Rezeptor. Kristallstruktur des Komplexes aus Wachstumshormon (blau) und den extrazellulären Regionen zweier Wachstumshormon-Rezeptoren (grün und rot) (DeVos, Ultsch, Kossiakoff 1992). Das Prinzip der Erkennung des Liganden durch den Rezeptor ist vergrößert dargestellt. (Einzelheiten 7 Infobox)

771 25.4 · Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren

tische Signalproteine an die Plasmamembran rekrutiert. Die Lokalisierung an die Membran wird erreicht durch 4 Protein-Protein-Wechselwirkungen 4 Protein-Membranlipid-Wechselwirkungen 4 Lipidanker

Protein-Protein-Wechselwirkungen Diese spielen in der Signaltransduktion eine wichtige Rolle. An den aktivierten Rezeptor werden weitere Signalmoleküle rekrutiert, die wiederum in Wechselwirkung miteinander treten. Die Ausbildung dieser Komplexe wird über spezifische Interaktionsdomänen ermöglicht, welche zum Beispiel an phosphorylierte Aminosäureseitenketten oder an Proteinabschnitte mit definierten Aminosäuresequenzen binden. Es handelt sich hierbei um eine 1:1 Signalübertragung, im Unterschied zur häufig beobachteten Signalverstärkung über second messenger (. Abb. 25.8). ! SH2-Domänen und PTB-Domänen binden spezifisch an Phosphotyrosin-Motive (. Abb. 25.10).

Die Phosphotyrosin-Seitenketten im cytoplasmatischen Teil eines aktivierten Cytokinrezeptors oder einer aktivierten Rezeptortyrosinkinase dienen als Rekrutierungsstellen für weitere Signalmoleküle. Proteine mit SH2-Domänen- (src-homology 2 domains) oder PTB-Domänen (phosphotyrosine binding domains) binden spezifisch an Phosphotyrosin-Motive. Die spezifische Interaktion zwischen Proteinen ist ein grundlegendes Prinzip der Signaltransduktion. Die Erkennung von Phosphotyrosin-Motiven durch SH2-Domänen ist in . Abb. 25.10 verdeutlicht. Obwohl Proteine mit SH2-Domänen prinzipiell Phosphotyrosin-Motive erkennen, ist es von grundlegender Bedeutung für eine gerichtete, spezifische Signaltransduktion, dass nur bestimmte SH2-Domänen enthaltende Proteine (z.B. Protein 1 in . Abb. 25.10) mit bestimmten phosphorylierten Proteinen (Protein 3) interagieren. Aus diesem Grund enthalten SH2-Domänen eine konservierte Region, die die Erkennung von Phosphotyrosinen gewährleistet (rot) sowie eine variable Region (blau), die für die spezifische Erkennung der C-terminal zum Phosphotyrosin liegenden Aminosäuren (orange bzw. grün) zuständig ist. Diese duale Erkennung gewährleistet, dass nur bestimmte Proteine mit einer festgelegten Aminosäure-Sequenz in phosphorylierter Form gebunden werden. Auf diese Weise können z.B. Transkriptionsfaktoren wie die STAT-Faktoren (7 Kap. 25.8.3) an den Rezeptor gebunden und dort aktiviert werden. Die STAT-Proteine werden am Rezeptor phosphoryliert, dimerisieren und wandern daraufhin in den Zellkern um Zielgene zu induzieren. Ähnlich funktioniert die Aktivierung der Smad-Proteine im Rahmen der TGF-E Signaltransduktion (7 Kap. 25.7.2). Nur ist hier eine Serin-Phosphorylierung des Rezeptors der Auslöser. Entsprechend verfügen Smad-Proteine über MH–Domänen (MAD homology domains), die spezifisch mit Phosphoserin-Motiven interagieren.

. Abb. 25.10. Prinzip der spezifischen Erkennung von Phosphotyrosin-Motiven durch SH2-Domänen enthaltende Proteine. Dargestellt sind zwei Proteine mit SH2-Domänen, die jeweils nur spezifische Tyrosin-Motive in der phosphorylierten Form erkennen. Diese spezifische Erkennung ist die Grundlage für die Spezifität der Signalweiterleitung

Nicht alle Interaktionsdomänen binden an aktivierte Strukturen. Häufig existieren auch konstitutive ProteinProtein-Interaktionen. So ermöglichen SH3-Domänen (src homology 3 domains) die Interaktion mit Prolin-reichen Peptidabschnitten anderer Signalmoleküle. Interaktionen zwischen den Todes-Domänen (DD, death domains) der Signalmoleküle aus den TNF- und Fas-Signalkaskaden ermöglichen die Zusammensetzung großer Signalmolekülkomplexe, die Apoptose induzieren (7 Kap. 7.1.5). Um eine permanente Interaktion von deathDomänen enthaltenden Proteinen zu verhindern, werden sie durch die Bindung an SODD (silencer of death domains)Proteine blockiert. Proteine, die in der Signaltransduktion als Adapter fungieren, besitzen mehrere Interaktionsdomänen und können so unterschiedliche Signalproteine zusammenführen.

Protein-Membranlipid-Wechselwirkungen Eine Rekrutierung von Signalmolekülen an die Zellmembran kann auch durch die Modifizierung von Membranlipiden erreicht werden. Bestimmte Lipidkinasen wie die

25

772

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25.4.3

Organisierte Kinasekaskaden

Ein weit verbreiteter Signalweg, der sowohl von G-Proteingekoppelten Rezeptoren als auch von Rezeptorkinasen und Rezeptoren mit assoziierten Kinasen genutzt wird, ist die so genannte Mitogen-aktivierte Proteinkinase (MAPK)-Kaskade. Seit der Entdeckung der ersten Kinase dieser Familie im Jahre 1987 wurden große Fortschritte in der Entschlüsselung ihrer Aktivierungs- und Wirkungsweise gemacht. Heute weiß man, dass es drei Familien von MAP-Kinasen gibt (. Abb. 25.11a), die aufgrund ihrer aktivierenden Faktoren in zwei Gruppen eingeteilt werden können: 4 die hauptsächlich bei wachstumsfördernden Prozessen aktivierten Kinasen ERK1 und ERK2 (extracellular signal regulated kinases) 4 die durch extrazellulären Stress (wie z.B. UV-Licht, oxidativen Stress, Hungersignale, osmotische Veränderungen) und pro-inflammatorische Cytokine aktivierte Familie der p38-Kinasen (p38D, β, γ, G; benannt nach ihrer Molekülmasse von 38 kDa) und die JNK-Familie (c-Jun N-terminale Kinase) (JNK1, -2 und -3).

25

. Abb. 25.11. MAP-Kinase-Kaskaden. (a) Die drei Familien der MAP-Kinasen. MEK = mitogen-activated/extracellular signal-activated kinase kinase; MKK = mitogen-activated protein kinase kinase; ERK = extracellular signal-regulated kinase; MEKK = mitogen-activated/extracellular signal-activated kinase kinase kinase; MLK = mixed-lineage kinase; ASK = apoptosis signalling kinase; TAK = TGFE-activated kinase; JNK = c-Jun N-terminal kinase (b) Aktivierung der MAP-Kinasen am scaffold-Protein

Phosphatidylinositid-3-Kinase (PI3K) phosphorylieren Phosphatidylinositolphosphate. Proteine mit PH-Domänen (pleckstrin-homology domains) binden spezifisch an die so erzeugten Phosphatidylinositolphosphate. Dieser Mechanismus spielt eine wichtige Rolle bei dem anti-apoptotischen PI3K/PKB-Signalweg (7 Kap. 25.7.1).

Lipidanker Proteine können auch über einen Lipidanker an die Innenseite der Plasmamembran gebunden sein. Wird die Myristinsäure (eine gesättigte Fettsäure aus 14 C-Atomen) an den N-Terminus eines Proteins gebunden, so spricht man von Myristoylierung. Bei der Palmitoylierung wird die Palmitinsäure über eine Thioesterbindung an eine Cysteinseitenkette des Proteins gebunden. Auch Isopren-Derivate können an Cysteine gebunden werden wie z.B. bei der Farnesylierung von Proteinen (7 Kap. 9.2.4).

Die erwähnten Kinasen können nicht direkt von den Membranrezeptoren aktiviert werden, sondern stehen als ausführende (executive) Kinasen am Ende einer wohl organisierten Kinasen-Kaskade aus drei einzelnen Kinasen mit unterschiedlichen Kinaseaktivitäten: 4 MAP-Kinase Kinase Kinase (MAP3K) 4 MAP-Kinase Kinase (MAP2K) 4 MAP-Kinase (MAPK) Dieses Modul ist für alle drei MAPK-Familien ähnlich organisiert (. Abb. 25.11a). Die MAP3K ist immer eine Serin/ Threoninkinase, d.h. sie aktiviert die unter ihr stehende MAP2K über eine Phosphorylierung spezifischer Serylund/oder Threonylreste. Die MAP2K hingegen ist eine dual-spezifische Kinase, d.h. sie besitzt sowohl eine Serin/ Threoninkinase- als auch eine Tyrosinkinase-Aktivität, eine Fähigkeit, die sehr wenige Kinasen aufweisen. Diese duale Kinaseaktivität ist erforderlich, da die unter ihr stehende MAPK durch die Phosphorylierung eines, in allen MAPK konservierten, Tyrosin-X-Threonin Motivs aktiviert wird (wobei »X« im Fall der ERKs Glutamat, im Fall der JNKs Prolin und im Fall der p38 Glycin ist). Die MAPK selbst sind wieder reine Serin-/Threoninkinasen, d.h. sie aktivieren ihre Substrate über eine Phosphorylierung von Seryl- und/oder Threonylresten (. Abb. 25.11b). Es ist leicht einzusehen, dass eine solche Abfolge von Phosphorylierungsreaktionen eine räumliche Nähe der drei MAPK zueinander erfordert. In der Tat ist in den letzten Jahren klar geworden, dass es so genannte Gerüst- (scaffold) Proteine gibt, die alle drei Kinasen gleichzeitig binden können und somit in unmittelbare räumliche Nähe zueinander bringen (. Abb. 25.11b).

773 25.4 · Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren

Während die Anzahl der MAPK und der MAP2K relativ gering zu sein scheint, werden immer wieder neue Kinasen beschrieben, die den MAP3K zuzuordnen sind. Sie stellen mit Sicherheit die sowohl strukturell als auch funktionell variabelste Gruppe dar. Zusätzlich erlaubt ein solcher kaskadenartiger Ablauf einer Aktivierung eine enorme Signalamplifikation. So besitzt eine normale Säugerzelle ca. 10.000 Moleküle der MAP3K Raf-1, aber schon 36–80.000 Moleküle der MAP2K MEK1 und ca. 1.000.000 Moleküle der MAPK ERK1 und ERK2. Bevor die MAP3K die Kaskade auslösen kann, muss sie ihrerseits aktiviert werden. Hierzu sind die kleinen G-Proteine der Ras- und der Rho-Familie notwendig (7 Kap. 25.4.4). Infobox Ras – ein Protoonkogen Das kleine G-Protein Ras liegt in 30% aller menschlichen Krebsformen in einer mutierten, konstitutiv aktiven Form vor. Im Fall des Prostatakarzinoms liegt die Mutationsrate sogar bei nahezu 100%, bei Colonkarzinomen bei 50%. Es ist hauptsächlich involviert in Zellwachstum und verhindert die Einleitung apoptotischer Prozesse. Hauptaktivatoren von Ras sind Wachstumsfaktoren. Ras kommt in drei Isoformen vor (H-Ras, N-Ras, K-Ras), die alle C-terminal über einen Lipidanker membranlokalisiert vorliegen (7 Kap. 9.2.4).

25.4.4

G-Proteine

Häufig sind an der Signaltransduktion Guaninnucleotidbindende Proteine (G-Proteine) beteiligt. ! G-Proteine dienen als molekulare Schalter bei der Signaltransduktion.

G-Proteine sind nicht nur für hormonelle, sondern auch für nichthormonelle Signaltransduktions-Mechanismen . Abb. 25.12. Der Aktivierungszyklus der GProteine. G-Proteine werden durch den Austausch von GDP durch GTP aktiviert und wirken als »molekulare Schalter«. (Einzelheiten 7 Text) GEF = guanine nucleotide-exchange factor; GAP = GTPase aktivierendes Protein

als molekulare Schalter von großer Bedeutung. Wie aus . Abb. 25.12 hervorgeht, kommen G-Proteine in zwei unterschiedlichen Zuständen vor, die sich nur durch das jeweils gebundene Guaninnucleotid unterscheiden. In aktiver Form sind sie mit GTP beladen und imstande, eine Reihe unterschiedlicher Proteine zu aktivieren (7 u.). Für die Überführung der aktiven in die inaktive Form des G-Proteins wird die intrinsische GTPase-Aktivität des G-Proteins genutzt. Diese wird oft durch einen Hilfsfaktor, ein sog. GTPase-aktivierendes Protein (GAP) induziert. Soll das inaktive, GDP-beladene G-Protein wieder in die aktive Form überführt werden, so ist zunächst die Dissoziation des GDP notwendig. Hierfür werden Proteine unterschiedlichster Art benötigt, die allgemein als guanine nucleotide-exchange factors (GEF) bezeichnet werden. Das Guaninnucleotid-freie G-Protein hat eine hohe Affinität für GTP und nimmt dieses rasch auf, womit es wieder in den aktiven Zustand überführt wird. Bis heute sind mehr als 50 unterschiedliche Isoformen von G-Proteinen isoliert und charakterisiert worden. Sie lassen sich in drei Untergruppen einteilen (. Tabelle 25.3): 4 heterotrimere G-Proteine, die durch G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (7 Kap. 25.6) aktiviert werden 4 kleine G-Proteine, die als Schalter bei der Regulation von Wachstum und Differenzierung, beim Vesikeltransport und bei vielen anderen Vorgängen benötigt werden sowie 4 Translationsfaktoren mit ubiquitärem Vorkommen

25.4.5

Second messenger

Einige Signalwege führen zur Synthese oder Freisetzung eines niedermolekularen zweiten Botenstoffs (second messenger), der sich im Cytoplasma verteilt. So aktivieren bestimmte G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR) über trimere G-Proteine die membranständige Adenylatcyclase (. Abb. 25.13a). Diese synthetisiert zyklisches AMP (cAMP) aus ATP. Ein aktiviertes Adenylatcyclase-Enzym

25

774

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

. Tabelle 25.3. Die Großfamilie der G-Proteine

25

Familie

Bezeichnung

Funktion

heterotrimere G-Proteine

Gs

Aktivierung der Adenylatcyclase

Golf

Aktivierung der Adenylatcyclase

Gi

Hemmung der Adenylatcyclase

Go

Aktivierung der PLC-E

Gt

Aktivierung der cGMP-Phosphodiesterase

Gg

unbekannt

Gq

Aktivierung der PLC-E

G13

Aktivierung der Rho-Kinase

Ras-Proteine

Wachstum, Differenzierung, Genexpression

Rho/Rac/Cdc42-Proteine

Organisation des Zytoskeletts, Genexpression

kleine G-Proteine

Translationsfaktoren

Rab-Proteine

Vesikulärer Transport (vesicle trafficking)

Sar1/Arf-Proteine

Vesikel-Knospung (vesicle budding)

Ran-Proteine

nukleozytoplasmatischer Transport, Organisation von Mikrotubuli

eIF-2

Initiation der Translation

eEF-Tu; eEF-1; eEF-2

Elongation

kann viele tausend cAMP-Moleküle synthetisieren. Auf diese Weise trägt der second messenger zur effizienten Amplifikation des Signals bei und verteilt die Information von der Plasmamembran ausgehend über die gesamte Zelle (. Abb. 25.8). cAMP aktiviert die Proteinkinase-A (PKA) und nimmt damit unter anderem Einfluss auf den Glycogenmetabolismus (7 Kap. 11.2). Über diese amplifizierende Signalkaskade führt die Aktivierung von wenigen Membranrezeptoren zur Freisetzung von Glucose-Molekülen wie sie z.B. für die Aufrechterhaltung des Blutzuckerspiegels durch die Leber notwendig ist. Durch das Enzym Phosphodiesterase wird 3c,5c-cAMP in 5c-AMP umgewandelt und damit das Signal abgeschaltet. Der second messenger zyklisches GMP (cGMP) entsteht analog zu cAMP durch die Umsetzung von GTP durch Guanylatcyclasen. Die Stimulation der löslichen Guanylatcyclasen erfolgt über Stickstoffmonoxid (NO) (7 Kap. 25.9.1). Weitere second messenger sind Inositoltrisphosphat (IP3), Diacylglycerin (DAG) und Calcium (Ca2+). Das Enzym Phospholipase C (PLC), von dem mehrere Isoformen existieren, spaltet Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2) in IP3 und DAG. . Abb. 25.13b zeigt die Aktivierung verschiedener PLC-Isoformen durch Rezeptor-Tyrosinkinasen (PLCγ) oder G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (PLCβ). Über IP3 wird anschließend Ca2+ aus dem endoplasmatischen Retikulum freigesetzt. DAG und Ca2+ aktivieren unter anderem die Proteinkinase C (PKC) (. Abb. 25.23c und . Abb. 25.24) und induzieren so die zelluläre Antwort. ! Eine Vielzahl zellulärer Prozesse wird über die cytosolische Calciumionen-Konzentration gesteuert.

Jede Erhöhung der cytosolischen Calciumkonzentration führt zu markanten Änderungen des Zellstoffwechsels. So kommt es u.a. zu einer Stimulierung des Glycogenabbaus in Leber und Muskulatur, zu einer Stimulierung sekretorischer Prozesse (7 Kap. 6.2), sowie zur Verstärkung einer Reihe von cAMP-vermittelten Effekten. Die cytosolische Calciumkonzentration wird durch verschiedene Transportsysteme sehr genau reguliert (. Abb. 25.14). 4 Mechanismen für die schnelle Bereitstellung von Ca2+ im Cytoplasma: 5 Calciumeinstrom aus intrazellulären Calciumspeichern durch die IP3-aktivierten Calciumkanäle (①) des endoplasmatischen Retikulums. In vielen Geweben, besonders in der Skelettmuskulatur, finden sich zusätzlich als Liganden-aktivierte Calciumkanäle des sarkoplasmatischen Retikulums sog. Ryanodinrezeptoren. Sie werden durch Spannungs- oder Liganden-regulierte Calciumkanäle in der Plasmamembran aktiviert. Möglicherweise ist das aus NAD+ gebildete cyclo-ADP-Ribosemolekül der natürliche Ligand dieses Rezeptors 5 Calciumeinstrom aus dem extrazellulären Raum durch spannungsregulierte Calciumkanäle (②). Die Öffnung derartiger Kanäle, die in einer Reihe unterschiedlicher Isoformen vorkommen, erfolgt nach Depolarisierung von Zellen. Interessanterweise kann die Öffnungswahrscheinlichkeit des spannungsregulierten Calciumkanals, z.B. im Herzmuskel dadurch vergrößert werden, dass das Kanalprotein durch die cAMP-abhängige Proteinkinase A phosphoryliert wird. Dies ist eine der Möglichkeiten, die intrazelluläre Calciumkonzentration durch Hormone zu regulieren

775 25.4 · Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren

. Abb. 25.13. Synthese der second messenger Moleküle cAMP und IP3. (a) Generierung von cAMP aus ATP nach Stimulation der Adenylatcyclase durch trimere G-Proteine. (b) Entstehung der second messenger Inositol-1,4,5-trisphosphat (IP3) und Diacylglycerin (DAG) durch Phospholipase C-vermittelte Spaltung von Phosphatidylinosi-

tol-4,5-bisphosphat (PIP2). Während G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR) über trimere G-Proteine die Phospholipase CE (PLCE) aktivieren, können Rezeptor-Tyrosinkinasen (RTK) Phospholipase CJ (PLCJ) rekrutieren und aktivieren. Die Bildung von DAG und IP3 führt zur Aktivierung der Proteinkinase C bzw. zur Ca2+-Freisetzung

25

776

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25

. Abb. 25.14. Regulation des zellulären Calciumstoffwechsels. AC = Adenylatcyclase; CaM = Calmodulin; ER = endoplasmatisches

Retikulum; G = trimeres G-Protein; L = Ligand; MLCK = myosin light chain kinase; PKA = Proteinkinase A; PLC = Phospholipase C

5 Calciumeinstrom aus dem extrazellulären Raum durch Liganden-regulierte Calciumkanäle (③). Derartige Kanäle öffnen sich dann, wenn entsprechende Liganden, meist Hormone, gebunden werden. Hierzu gehören Vasopressin, Leukotriene oder extrazelluläres ATP (Purinrezeptoren) 4 Mechanismen für den Export von Ca2+ aus dem Cytoplasma: 5 eine in der Plasmamembran aller Zellen nachweisbare Ca2+-ATPase (④) 5 ein Ca2+/Na+-Antiport (⑤), ein System welches den mit Hilfe der Na+/K+-ATPase erzeugten NatriumGradienten über der Zellmembran sekundär zum aktiven Calciumexport benutzt 5 eine im endoplasmatischen Retikulum lokalisierte Ca2+-ATPase (⑥), die die Sequestrierung von Calcium in diesen Organellen ermöglicht sowie 5 ein nur bei Calciumüberladung von Zellen benutztes System, das die Akkumulierung von Calcium als Calciumphosphat in den Mitochondrien ermöglicht (in . Abb. 25.14 nicht dargestellt)

Die cytosolische Ca2+-Konzentration tierischer Zellen liegt im Ruhezustand bei etwa 10–7 mol/l und kann nach voller hormoneller Aktivierung auf etwa 10–5 mol/l ansteigen. Jede Wechselwirkung enzymatischer Systeme mit intrazellulärem Ca2+ kann aufgrund dieser Tatsache nur dann erfolgen, wenn sie über hochaffine Bindungsstellen für Calcium verfügen. Darüber hinaus müssen solche Bindungsstellen sehr spezifisch für Calcium sein, da intrazellulär andere zweiwertige Kationen, v.a. Magnesium, in einer Konzentration von etwa 10–3 mol/l vorkommen. Calcium wirkt meist nicht direkt, sondern über Calcium-bindende Proteine auf die enzymatischen Systeme ein. Das Vorkommen calciumbindender Proteine war schon aus Untersuchungen über die Skelettmuskel-Kontraktion bekannt. Hier ist Troponin das Calcium-bindende Protein (7 Kap. 30.2.2). Weiterhin wurde als Calcium-bindendes Protein das Calmodulin nachgewiesen, ein aus einer einzelnen Peptidkette aus 148 Aminosäuren bestehendes Protein, das große Ähnlichkeit mit Troponin C hat (7 Kap. 30.3.2). Nach Bindung von Calcium ändert Calmodulin seine Konformation und kann dann an weitere Effektorproteine wie z.B. Calmodulin-abhängige Kinasen oder Phosphatasen binden. So spielt beispielsweise die Calcium-regulierte Phosphatase Calcineurin bei der T-Zell-Rezeptor Signaltransduktion eine wichtige Rolle.

Die genannten Exportsysteme sind dafür verantwortlich, dass im Ruhezustand im Cytoplasma eine niedrige Calcium-Konzentration aufrechterhalten wird. ! Calcium-bindende Proteine vermitteln die Calciumwirkung auf zelluläre Systeme.

777 25.5 · Einteilung der Cytokine

. Tabelle 25.4. Beispiele Calmodulin-bindende Proteine Calmodulin bindendes Protein

Effekt der Calmodulin-Bindung

Funktion des Proteins

Vgl. Kapitel

CaM-Kinase III

?

Rolle bei der Proteinbiosynthese

9.1.4

CaM-Kinase II

Freigabe der autoinhibierenden Domäne (AID)

pleiotrope Funktionen; wichtig für die synaptische Plastizität

31.2

Myosin light-chain kinase (MLCK)

Freigabe der AID

beeinflusst den Kontraktionszyklus der glatten Muskulatur

30.3.2

Phosphorylasekinase

?

Bedeutung für die Glycogenolyse

11.5

Anthrax Adenylatcyclase

Konformationsänderung im aktiven Zentrum

Ödemischer Faktor beim Milzbrand

25.4.5

Ca2+-aktivierter K+-Kanal

Dimerisierung von Kanal-Untereinheiten

Regulation der neuronalen Erregung

31.2.2

Infobox Calmodulin Viele der zellulären Funktionen von Calcium werden durch mit Ca2+ beladenem Calmodulin vermittelt. Etwa 1% des gesamten zellulären Proteins tierischer Zellen besteht aus Calmodulin, welches nicht nur im Cytosol vorkommt, sondern auch an verschiedene zelluläre Strukturen wie Mitosespindeln, Aktinfilamente und Intermediärfilamente assoziiert ist. Calmodulin verfügt über vier hochaffine Bindungsstellen für Calcium. Diese zeichnen sich dadurch aus, dass das Calcium über eine Reihe von Carboxylaten sowie Carbonyl-Gruppen der Peptidbindung fixiert wird (7 Kap. 3.1.2). Das mit Ca2+ beladene Calmodulin kann unterschiedliche Konformationen annehmen und auf diese Weise mit vielen Proteinen interagieren. In 7 Tabelle 25.4 sind einige durch Calmodulin regulierte Proteine aufgeführt.

Pathobiochemie: Aktivierung der Anthrax Adenylatcyclase durch Calmodulin: Das Milzbrand (Anthrax) auslösende Bakterium Bacillus anthracis, das selbst kein Calmodulin exprimiert, nutzt Calmodulin, um auf die Zellen eines infizierten Organismus zu wirken. Hierbei wird die Aktivität eines der bakteriellen Toxine, einer löslichen Adenylatcyclase, durch die Bindung von Calmodulin bis zu 1000-fach verstärkt. Als Konsequenz werden 20% bis 50% des zellulären ATPs zu cAMP umgesetzt, die Membranpermeabilität verändert sich und es kommt zu einem Flüssigkeitsverlust im infizierten Gewebe. Die Adenylatcyclase ist somit die Ödem-auslösende Komponente von Anthrax. Die Nutzung des Calmodulins ist für das Bakterium sinnvoll, da es ubiquitär exprimiert wird und die Aminosäuresequenz des Calmodulins in allen Vertebraten hoch konserviert ist.

In Kürze Aktivierung von Membranrezeptoren durch ihre Liganden können folgende Mechanismen der Signaltransduktion auslösen: 4 Konformationsänderung der Rezeptoren 4 Aktivierung von Kinasen

25.5

Einteilung der Cytokine

Cytokine entfalten im Unterschied zu den Hormonen, die endokrin über den Blutstrom weit entfernte Zielgewebe/ -zellen erreichen, ihre Wirkung über sehr viel kürzere Distanzen (wenige Micrometer) entweder parakrin oder autokrin. Merkmale, die auf Cytokine zutreffen, sind im Folgenden zusammengestellt.

4 Rekrutierung von Effektorproteinen an die Plasmamembran und deren Aktivierung 4 Überführung von G-Proteinen in die aktive, mit GTP beladene Form 4 Bildung von second messengern

Cytokine 4 sind Polypeptide mit Molekulargewichten von ca. 15– 25 kDa 4 werden nach auslösenden Reizen/Noxen, schnell synthetisiert und sezerniert 4 werden selten als präformierte Moleküle gespeichert 4 werden von verschiedenen Zelltypen produziert 4 wirken im pico- bis nanomolaren Bereich 4 wirken auf unterschiedliche Zelltypen (Pleiotropismus), aber auch autokrin

25

778

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

4 wirken über spezifische Rezeptoren auf der Oberfläche von Zielzellen 4 unterschiedlicher Art können auf ihren Zielzellen Gleiches bewirken (Redundanz) 4 beeinflussen die Synthese anderer Cytokine 4 beeinflussen die Wirkung anderer Cytokine additiv, synergistisch oder antagonistisch 4 spielen eine wichtige Rolle für die Regulation der Genexpression in den Zielzellen 4 können Differenzierung, Proliferation, Migration oder Apoptose der Zielzellen induzieren

Weiterhin sind Einteilungen nach strukturellen Gesichtspunkten möglich, z.B. nach der dreidimensionalen Struktur der Cytokine oder nach gemeinsam genutzten Rezeptorkomponenten. In . Tabelle 25.1 findet sich ein Überblick über die verschiedenen Cytokine, die sich nach ihren biologischen Funktionen und der Natur ihrer Rezeptoren in Wachstumsfaktoren, Interleukine, Interferone und Chemokine einteilen lassen.

25.5.1

25

Eine Dysregulation der Cytokin-Signaltransduktion kann zu schwerwiegenden akuten und chronischen Entzündungen, Autoimmunerkrankungen und Neoplasien führen. Daher ist das Verständnis der molekularen Mechanismen der Cytokin-Signaltransduktionskaskaden für therapeutische Ansätze von großer Bedeutung. Infobox Lösliche Rezeptoren als Cytokin-Inhibitoren Im Blutplasma, häufig auch im Urin, kann man lösliche Formen von Cytokinrezeptoren nachweisen. Die löslichen Rezeptoren bestehen aus der Extrazellulärregion des Rezeptors, die Transmembrandomäne und der cytoplasmatische Teil fehlen. Lösliche Rezeptoren entstehen durch Translation einer alternativ gespleißten mRNA oder durch limitierte proteolytische Spaltung membranständiger Rezeptoren (shedding). Sie binden ihren Liganden mit vergleichbarer Affinität und Spezifität wie der membranständige Rezeptor. Cytokine, die an den löslichen Rezeptor gebunden sind, können nicht mehr an den membranständigen Rezeptor binden und sind daher unwirksam. Lösliche Rezeptoren wirken deswegen mit wenigen Ausnahmen als Cytokin-Inhibitoren. Man nimmt an, dass sie bei der Modulation von Cytokinsignalen eine wichtige Rolle spielen (7 Kap. 25.10.1). Chronische Entzündungen werden durch eine Überproduktion von pro-inflammatorischen Cytokinen wie Interleukin-1 (IL-1), Tumor-Nekrose-Faktor (TNF) und Interleukin-6 (IL-6) aufrechterhalten. Daher ist die gezielte Hemmun pro-inflammatorischer Cytokine ein vielversprechender Therapieansatz. Der lösliche TNFRezeptor wird in dimerer Form in großen Mengen biotechnologisch produziert und als TNF-Inhibitor mit Erfolg zur Behandlung von Morbus Crohn sowie rheumatischer Erkrankungen eingesetzt (Etanercept/Enbrel®). Weitere Cytokin-Inhibitoren auf der Basis löslicher Rezeptoren befinden sich im Entwicklungsstadium.

Cytokine lassen sich nach verschiedenen Gesichtspunkten klassifizieren: Im Hinblick auf ihre Funktionen kann eine Einteilung nach den biologischen Antworten erfolgen.

Wachstumsfaktoren

! Wachstumsfaktoren regulieren die Entwicklung von Vorläuferzellen zu differenzierten Zelltypen und stimulieren die Zellproliferation.

Innerhalb der Wachstumsfaktoren ist eine Einteilung nach funktionellen Eigenschaften schwierig. Die meisten Wachstumsfaktoren signalisieren über Rezeptoren mit intrinsischer Kinaseaktivität (Rezeptor-Tyrosinkinasen oder Rezeptor-Serin/Threoninkinasen). Ein gemeinsamer, zentraler Mechanismus in den Signalwegen aller Wachstumsfaktoren besteht in der Aktivierung der Ras/Raf/MAPKKaskade (7 Kap. 25.4.3).

25.5.2

Interleukine

! Interleukine besitzen vielfältige Aufgaben in der Regulation der Immunabwehr, der Entzündungsreaktion, der Hämatopoese und der Apoptose.

Bisher sind 33 Interleukine bekannt. Andere Cytokine wie z.B. Tumor-Nekrose-Faktor (TNF), Leptin, Erythropoetin (EPO), Thrombopoetin (TPO) werden auch zur Gruppe der Interleukine gerechnet. Die meisten Interleukine signalisieren über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen und nutzen als gemeinsamen zentralen Signalweg die Janus Kinase/ signal transducer and activator of transcription (JAK/STAT)Kaskade (7 Kap. 25.8.3). TNF und IL-1 nehmen innerhalb der Interleukin-Familie im Hinblick auf ihre Rezeptoren und Effektorproteine (NF-NB) eine Sonderstellung ein (7 Kap. 25.8.1, 25.8.2).

25.5.3

Interferone

! Die mit den Interleukinen nahe verwandten Interferone spielen eine wesentliche Rolle bei Immunabwehr (besonders nach Virusinfektionen) und Apoptose, sie wirken stark wachstumshemmend.

Von den Interleukinen werden die sehr nahe verwandten Interferone abgegrenzt. Auch die Interferone signalisieren

779 25.6 · Signaltransduktion G-Protein-gekoppelter Rezeptoren

über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen und nutzen die JAK/STAT-Signalkaskade (7 Kap. 25.8.4). Die Interferone selbst werden in zwei Klassen eingeteilt. Alpha-Interferone (IFN-D), E-Interferon (IFN-E), H-Interferon (IFN-H), N-Interferon (IFN-N) und Z-Interferone (IFN-Z) gehören zu den Typ-1-Interferonen. Sie signalisieren über die gleichen Rezeptorheterodimere. Von den D-Interferonen sind derzeit 13, von den ω-Interferonen zwei Subtypen und von den E-, H-, N-Interferonen nur jeweils eine Form bekannt. IFN-J ist das einzige derzeit bekannte Typ-2-Interferon. Es bindet als Dimer an IFN-J-spezifische Rezeptor-Heterodimere. Die Cytokine der Interleukin-10Familie gehören trotz ihrer anders lautenden Bezeichnung strukturell gesehen zu den Typ-2-Interferonen.

25.5.4

Chemokine

25.6

Signaltransduktion G-Proteingekoppelter Rezeptoren

Mit etwa 950 identifizierten Genen stellen die G-Proteingekoppelten Rezeptoren (G-protein-coupled receptors; GPCR) die größte Rezeptorklasse dar. Die Rezeptoren dieser Familie weisen typischerweise sieben Transmembrandomänen auf. Sie vermitteln die Effekte vieler unterschiedlicher Liganden (von Aminosäurederivaten wie Adrenalin bis zu den Chemokinen wie Interleukin-8). Die Struktur von GPCRs ist in . Abb. 25.15 am Beispiel des α1B-adrenergen Rezeptors verdeutlicht. Während die extrazellulären Schleifen des Rezeptors für die Ligandenbindung verantwortlich sind, vermitteln die intrazellulären Schleifen die Rekrutierung der trimeren G-Proteine. . Tabelle 25.5 zeigt die Einteilung der trimeren G-Proteine. Infobox

! Chemokinrezeptoren gehören zur Klasse der G-Proteingekoppelten Rezeptoren und vermitteln Chemotaxis.

Der Name Chemokine (chemotactic cytokine) stellt die Funktion dieser Cytokine als Migration-auslösende Faktoren heraus. Chemokine sind für die Immunantwort von Bedeutung. Im Unterschied zu den Wachstumsfaktoren, Interleukinen und Interferonen signalisieren die Chemokine über G-Protein-gekoppelte Rezeptoren. Die Ligandenbindung an den Rezeptor führt zur Aktivierung trimerer G-Proteine, die mit den cytoplasmatischen Schleifen der Rezeptoren assoziiert sind. Chemokine werden in zwei Haupt-Klassen unterteilt: CC- und CXC-Chemokine. CXC-Chemokine enthalten zwischen zwei konservierten, N-terminal lokalisierten Cysteinen (C) eine weitere Aminosäure, während bei CCChemokinen diese Cysteine direkt benachbart sind. Entsprechend ihrer Liganden werden auch die Chemokinrezeptoren in CXC- und CC-Rezeptoren unterteilt. Einzelne Chemokine sind in der Lage, verschiedene Rezeptoren der gleichen Klasse zu binden. Interleukin-8 ist trotz seines Namens bei den CXC-Chemokinen einzuordnen. In Kürze Cytokine werden nach ihrer biologischen Funktion eingeteilt in: 4 Wachstumsfaktoren 4 Interleukine 4 Interferone 4 Chemokine Die meisten Wachstumsfaktoren signalisieren über Rezeptor-Tyrosinkinasen. Interleukine und Interferone signalisieren über Rezeptoren mit assoziierten Tyrosinkinasen. Chemokine benutzen G-Protein gekoppelte Rezeptoren.

Medizin-Nobelpreis 2004 Für ihre Arbeiten zur Funktionsweise des Geruchssinns erhielten Linda Buck und Richard Axel im Jahr 2004 den Medizin-Nobelpreis. Die Forscher zeigten, dass etwa zwei Prozent der menschlichen Gene für Geruchsrezeptoren codieren. Bei diesen Rezeptoren handelt es sich um GPCRs, die durch Aktivierung der Adenylatcyclase zur Bildung von zyklischem AMP führen und über dieses Ionenkanäle aktivieren (7 Kap. 25.6.2). Beim Menschen scheinen viele der etwa 600 Geruchsrezeptoren degeneriert zu sein. Über die etwa 350 funktionellen Rezeptoren können jedoch rund 10.000 verschiedene Gerüche wahrgenommen werden.

25.6.1

G-Protein-gekoppelte Rezeptoren signalisieren über heterotrimere G-Proteine

In . Abb. 25.16 ist das Prinzip der Signaltransduktion von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren dargestellt. Ihnen allen ist gemeinsam, dass sie über heterotrimere G-Proteine signalisieren, deren Aktivierungs-/Inaktivierungszyklus sich in folgende Schritte einteilen lässt: 4 Das inaktive, an den Rezeptor gebundene heterotrimere G-Protein besteht aus den drei Untereinheiten D, E und J, wobei die D-Untereinheit mit GDP beladen ist 4 Der durch den entsprechenden Liganden aktivierte Rezeptor dient als GEF (guanine nucleotide exchange factor) und bewirkt den Austausch des an die D-Untereinheit gebundenen GDP durch GTP 4 Das aktivierte G-Protein zerfällt in seine D- und EJUntereinheiten und löst sich vom Rezeptor 4 Die mit GTP beladene D-Untereinheit oder die EJUntereinheiten des G-Proteins assoziieren mit den für

25

780

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25

. Abb. 25.15. Aufbau von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren. Der für heptahelicale Membranrezeptoren typische Aufbau mit sieben Transmembrandomänen ist am Beispiel des D1B-adrenergen Rezeptors dargestellt. G-Protein-gekoppelte Rezeptoren bestehen i. Allg.

aus 350–800 Aminosäuren. Der N-Terminus ist extrazellulär, der Cterminale Bereich intrazellulär lokalisiert. Der extrazelluläre Bereich des Rezeptors enthält Kohlenhydrat-Ketten (durch Rauten dargestellt)

. Tabelle 25.5. Einteilung der trimeren G-Proteine G-Protein Familie

Untergruppen (Auswahl)

Liganden, die zur Aktivierung des G-Proteins führen (Beispiele)

Effekt auf Schlüsselenzyme (Auswahl)

weitere Effekte (Auswahl)

Gs-Familie

Gs

Katecholamine, Histamin, Glucagon, LSH, FSH, TSH, Vasopressin, Prostaglandin E2

Aktivierung der Adenylatcyclase

cAMP n

Golf

Geruchsstoffe

Aktivierung der Adenylatcyclase

cAMP n

Gi

Angiotensin, Somatostatin, Glutamat, Opiate, Chemokine, Histamin, Katecholamine

Hemmung der Adenylatcyclase

cAMPp

Gt

Photonen, Opsin, Rhodopsin

Aktivierung der cGMP-Phosphodiesterase

cGMP p

Ggust

Geschmacksstoffe

Aktivierung der cGMP-Phosphodiesterase

cGMP p

Gq-Familie

Gq

Bradykinin, Bombesin, Angiotensin, Katecholamine

Aktivierung der PLCβ

IP3n, DAG n Ca2+-Influx

G12/13-Familie

G13

Bradykinin, Bombesin, TSH

Aktivierung der Rho-Kinase

Wirkung auf das Cytoskelett

Gi-Familie

die biologische Antwort verantwortlichen Effektorproteinen. Diese werden dadurch aktiviert oder inaktiviert 4 Eine intrinsische GTPase-Aktivität der D-Untereinheit sorgt für die Spaltung des gebundenen GTP zu GDP und anorganischem Phosphat (Pi). Diese Hydrolyse wird durch GTPase-aktivierende Proteine (GAP) beschleunigt. Damit ist die D-Untereinheit inaktiviert und das Signal abgeschaltet 4 Die GDP-beladene D-Untereinheit assoziiert mit den EJ-Untereinheiten und dem Rezeptor, womit der Ausgangszustand wieder hergestellt ist

25.6.2

Rezeptoren, die an das Adenylatcyclase-System gekoppelt sind

! Das Adenylatcyclase-System besteht aus Rezeptoren, heterotrimeren G-Proteinen und Adenylatcyclasen.

Eine große Zahl von Signalstoffen bedient sich des Adenylatcyclase-Systems zur Signaltransduktion. Wichtige Beispiele sind neben Geruchsstoffen die Botenstoffe Glucagon, Adrenalin und Serotonin. Der extrazelluläre Ligand wird auch als erster Botenstoff oder first messenger bezeichnet. Er

781 25.6 · Signaltransduktion G-Protein-gekoppelter Rezeptoren

. Abb. 25.16. Prinzip der Signaltransduktion von trimeren G-Proteinen. Nach der Aktivierung des trimeren G-Proteins zerfällt

dieses in eine D- und eine EJ-Untereinheit, die dann auf verschiedene Effektorproteine wirken. GPCR = G-Protein-gekoppelter Rezeptor

. Abb. 25.17. Das Adenylatcyclase-System. Die katalytische Domäne der Adenylatcyclase kann durch stimulierende GsD-Untereinheiten oder inhibierende GiD-Untereinheiten reguliert werden. Auf die Darstellung der Regulation der Adenylatcyclasen durch die

EJ-Untereinheiten wurde verzichtet. Rs = stimulierender Rezeptor; Ri = inhibierender Rezeptor; Gs = stimulierendes G-Protein; Gi = inhibierendes G-Protein; PPi = Pyrophosphat

bindet an seinen spezifischen GPCR und aktiviert über ein heterotrimeres G-Protein die auf der Innenseite der Zellmembran lokalisierte katalytische Domäne der Adenylatcyclase (7 Infobox). Diese katalysiert die Reaktion:

bzw. hemmende Hormone oder Substanzen (Rs bzw. Ri), über die die zelluläre cAMP Konzentration gesteigert oder gesenkt werden kann. Durch die Bindung des Liganden an den Rezeptor wird das entsprechende heterotrimere G-Protein aktiviert. Während die stimulatorischen G-Proteine (Gs-Proteine) über ihre α-Untereinheit Gsα die Adenylatcyclase aktivieren können, führen die inhibitorischen GProteine (Gi-Proteine) zu einer Hemmung der Adenylatcyclase durch die Giα-Untereinheit. Die Rolle der βγ-Untereinheiten trimerer G-Proteine: In den vergangenen Jahren wurde gezeigt, dass die EJ-Untereinheiten der trimeren G-Proteine ebenfalls eine Rolle bei der Regulation der GPCR-vermittelten Signale spielen (z.B. Chemotaxis/Migration). Folgende Funktionen können durch die EJ-Untereinheiten ausgeübt werden:

ATP o 3c,5c-cyclo-AMP + Pyrophosphat Der amerikanische Biochemiker Earl Sutherland entdeckte als Erster, dass das Nucleotid 3c,5c-cyclo-AMP (cAMP, . Abb. 25.13a, 7 Kap. 5.1.2) als intrazellulärer Vermittler der Wirkung vieler Hormone eine einzigartige Rolle spielt. Aus diesem Grund wird für diese Verbindung auch die Bezeichnung zweiter Botenstoff (second messenger) verwendet. In . Abb. 25.17 ist das in die Plasmamembran integrierte Adenylatcyclase-System dargestellt. Zu diesem System gehören die Rezeptoren für Adenylatcyclase stimulierende

25

782

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

4 Die EJ-Untereinheiten sind von Bedeutung für die Interaktion des trimeren G-Proteins mit dem GPCR 4 Sie inhibieren die spontane Dissoziation des an die D-Untereinheit gebundenen GDPs und erfüllen so die Funktion eines guanine nucleotide dissociation inhibitors (GDI) 4 Sie aktivieren bzw. hemmen verschiedene Isoformen der Adenylatcyclase

4 Sie aktivieren weitere Effektorenzyme wie z.B. die Phospholipase CE(PLCE; 7 Kap. 25.6.3) oder die Phosphatidylinositid-3 Kinase-J (PI3K-J) 4 Sie steuern die Aktivität von Ionenkanälen 4 Sie regulieren die an der Signalabschaltung beteiligten G-Protein-gekoppelten Rezeptorkinasen (GRK)

Infobox

25

Adenylatcyclasen Alle Mitglieder der Adenylatcyclase-Familie zeichnen sich durch einen ähnlichen Aufbau aus insgesamt 12 Transmembrandomänen aus. Zwischen der 6. und 7. Transmembran-Helix sowie am C-terminalen Ende existiert jeweils ein großer cytoplasmatischer Bereich (. Abb. 25.18). Beide Regionen besitzen eine Tertiärstruktur und bilden zusammen die katalytische Domäne der Adenylatcyclase, die in ihrer Struktur der DNA-Polymerase ähnelt. Dies ist verständlich, da beide Enzyme eine ähnliche Reaktion katalysieren: Während die Adenylatcyclase die Bildung einer intramolekularen 3c,5c-Diester-Bindung vermittelt, katalysiert die DNA-Polymerase die Bildung einer intermolekularen 3c,5c-Diester-Bindung. Bis heute sind neun Isoformen der membrangebundenen Adenylatcyclase nachgewiesen worden, die eine unterschiedliche Gewebsverteilung aufweisen. So werden Adenylatcyclasen des Typs IV und IX in vielen Geweben exprimiert und solche des Typs I, II und VIII kommen vorwiegend in neuronalem Gewebe vor. Adenylatcyclasen des Typs III finden sich in olfaktorischem Gewebe und die des Typs V und VI werden verstärkt in Leber, Lunge, Nieren und Herzmuskel exprimiert. Unterschiede zwischen den einzelnen Subtypen liegen in ihrer Aktivierung und Inaktivierung durch die verschiedenen D- und EJ-Untereinhei-

! cAMP aktiviert die Proteinkinase A und löst damit spezifische Phosphorylierungskaskaden aus.

cAMP übt mehrere intrazelluläre Funktionen aus; es aktiviert: 4 die Proteinkinase A (PKA) 4 einige cyclic nucleotide gated (CNG) Kationenkanäle 4 bestimmte guanine nucleotide exchange factors (GEF), die kleine G-Proteine aktivieren Eine Hauptfunktion von cAMP ist die Aktivierung der Proteinkinase A. . Abb. 25.19 stellt den Aufbau der PKA dar. Es handelt sich um ein tetrameres Enzym, welches aus zwei regulatorischen (regulatory) R-Untereinheiten sowie zwei katalytischen (catalytic) C-Untereinheiten besteht. In Abwesenheit von cAMP werden durch die R-Untereinheiten die Substratbindungsstellen der C-Untereinheiten blockiert. Die Bindung von jeweils zwei cAMP-Molekülen

ten der trimeren G-Proteine, aber auch z.B. in der unterschiedlichen Regulation durch second messenger-aktivierte Kinasen wie PKC und PKA. Pathobiochemie: Wegen der Vielzahl an G-Protein-gekoppelten Rezeptoren und ihrer großen Bedeutung bei nahezu allen physiologischen Prozessen wurde diese Rezeptorklasse zum wichtigsten Ziel für therapeutische Interventionen. Über die Hälfte der verschreibungspflichtigen Medikamente beeinflussen GPCR-vermittelte Signale. Es ist von besonderem medizinischen Interesse, dass die Effekte einiger Bakterientoxine offensichtlich über Wechselwirkungen mit den G-Proteinen vermittelt werden. So führt beispielsweise das Choleratoxin des Cholera-Erregers Vibrio cholerae zu einer ADP-Ribosylierung (7 Kap. 23.3.4) der GsD Untereinheit, wodurch diese irreversibel aktiviert wird und das Adenylatcyclase-System in einen permanent aktiven Zustand überführt (über die Bedeutung dieses Effekts für die intestinale Symptomatik bei der Cholera 7 Kap. 32.2.4). Das Toxin des Keuchhusten-Erregers Bordetella pertussis ADP-ribosyliert dagegen die GiD-Untereinheit und hält diese in einer inaktiven Form. Wie beim Choleratoxin wird also die Adenylatcyclase in einen permanent aktiven Zustand überführt, allerdings über einen anderen Mechanismus.

an jede R-Untereinheit führt zu einer Konformationsänderung, die eine Dissoziation der beiden katalytischen C-Untereinheiten auslöst. Dadurch werden die Substratbindungsstellen der PKA freigelegt und diese somit in die Lage versetzt, ihre Substrate an Serylresten zu phosphorylieren. Erhöhte zelluläre cAMP-Spiegel aktivieren bzw. inaktivieren nicht nur Stoffwechselenzyme, sondern lösen auch die Transkription spezifischer Gene aus. Derartige cAMPabhängige Gene enthalten in ihrer Promotorregion eine spezifische Sequenz, 5c-TGACGTCA-3c die als cAMP-response-element oder CRE bezeichnet wird. Die Aktivierung von Genen, die CRE als enhancer-Element enthalten, erfolgt nach Bindung eines spezifischen Transkriptionsfaktors, des CREB (cAMP response-element bind-

783 25.6 · Signaltransduktion G-Protein-gekoppelter Rezeptoren

. Abb. 25.18. Schematische Darstellung der Adenylatcylase. Die meisten Adenylatcyclasen sind integrale Membranproteine mit 12 Transmembrandomänen. Sie enthalten eine große cytoplasmatische Schleife zwischen den 6. und 7. Membran-durchspannenden Helices sowie einen längeren cytoplasmatischen C-terminalen Bereich. Diese beiden Bereiche bilden zusammen die katalytische Domäne der Adenylatcyclase. In ihrem katalytischen Zentrum binden Mg2+-Ionen und das Substrat ATP

. Abb. 25.19. Mechanismus der PKA-Aktivierung. Die Bindung von cAMP an die regulatorischen Untereinheiten der PKA führt zur Freisetzung der enzymatisch aktiven C-Untereinheiten

reotropin releasing hormone (TRH) sowie für Chemokine und Geruchsstoffe führen nach Bindung des jeweiligen Liganden über ein heterotrimeres G-Protein nach Austausch von GDP mit GTP zur Aktivierung der Phospholipase Cβ, welche in mehreren Isoformen vorkommt. Interessanterweise binden Rezeptor-Tyrosinkinasen (7 Kap. 25.7.1) nach Aktivierung die Phospholipase Cγ, was ebenfalls zur Hydrolyse von PIP2 führt (. Abb. 25.13b). Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2) wird durch zweimalige, ATP-abhängige Phosphorylierung von Phosphatidylinositol (7 Kap. 2.2.3) gebildet (. Abb. 25.20). Die genannten Phospholipasen spalten PIP2 in Inositol(1,4,5)-trisphosphat (IP3) und Diacylglycerin (DAG). IP3 löst einen Anstieg der intrazellulären Ca2+-Konzentration aus, was zu Änderungen des Stoffwechsels der Zielzellen führt. Das in der Membran zurück bleibende Diacylglycerin erfüllt ebenfalls eine wichtige Funktion bei der Signalweiterleitung. Es aktiviert zusammen mit Ca2+ spezifische Kinasen, die Proteinkinasen C (PKC) (7 Kap. 25.7.1, Infobox Proteinkinase C) ! IP3 vermittelt die calciumabhängige Zellaktivierung.

IP3 ist imstande, die cytoplasmatische Calciumkonzentration zu erhöhen. Die Calciummobilisierung erfolgt hierbei im Wesentlichen aus intrazellulären Calciumspeichern, welche im endoplasmatischen Retikulum lokalisiert sind. Dort finden sich die IP3-Rezeptoren, von denen 3 Subtypen bekannt sind. Es handelt sich um ligandenaktivierte Ionenkanäle mit zwei Membrandomänen und einer großen cytoplasmatischen N-terminalen Schleife. Man nimmt an, dass hier die Bindungsstelle für IP3 liegt. Insgesamt bilden vier derartige Rezeptormoleküle ein Homotetramer, das einen durch den Liganden IP3 aktivierten Calciumkanal darstellt.

25.6.4 ing protein). CREB ist ein dimeres Protein, mit einer LeucinZipper-Struktur, die für die Dimerisierung verantwortlich ist. Das dimere CREB wird durch die in den Zellkern translozierte PKA phosphoryliert und kann danach mit dem Transkriptionsfaktor TF II D sowie der RNA-Polymerase II assoziieren und die Transkription von Zielgenen induzieren. Beispiele für CRE-Elemente enthaltende Gene sind diejenigen für Somatostatin, Parathormon, für die Schlüsselenzyme der Gluconeogenese (7 Kap. 11.3) und das vasoaktive intestinale Peptid (VIP).

25.6.3

Rezeptoren, die an die Phospholipase Cβ gekoppelt sind und zur Ca2+-Freisetzung führen

G-Protein-gekoppelte Rezeptoren wie die Rezeptoren für Katecholamine (7 Kap. 26.3.4), Acetylcholin, Histamin, Angiotensin, Vasopressin, Pankreozymin, Serotonin, thy-

25

Die GPCR-vermittelte Signaltransduktion am Beispiel von Interleukin-8

Interleukin-8 (auch CXCL-8 genannt) ist ein pro-inflammatorisches, chemotaktisch wirkendes Cytokin, das zur Gruppe der CXC-Chemokine gehört. Es wird im Zuge einer Cytokinkaskade produziert: So stimuliert z.B. TumorNekrose-Faktor (TNF) die Freisetzung von Interleukin-1E (IL-1E), das seinerseits die Bildung von Interleukin-8 induziert. IL-8 ist einer der potentesten chemotaktischen Faktoren für neutrophile Granulozyten, spielt aber auch eine Rolle bei Angiogenese und Zellteilung. ! Die Produktion von Interleukin-8 im Entzündungsherd ist von zentraler Bedeutung für die Rekrutierung von neutrophilen Granulozyten.

Das sezernierte IL-8 bildet im Gewebe einen Konzentrationsgradienten aus und wird an der Innenseite der Blutgefäßwand präsentiert. Zusätzlich bewirken die ebenfalls

784

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25

. Abb. 25.20. Biosynthese und Spaltung von Phosphatidyl-4,5-bisphosphat (PIP2). ER = endoplasmatisches Retikulum; PKC = Proteinkinase C; PLC = Phospholipase C

ausgeschütteten Cytokine TNF und IL-1 die Bildung von Adhäsionsmolekülen durch Endothelzellen. Die im Blut zirkulierenden Neutrophilen heften sich an die Endothelzellen an und rollen durch wiederholtes Binden und Lösen an diesen entlang. Das präsentierte IL-8 aktiviert die heranrollenden Leukozyten, bewirkt eine vermehrte IntegrinExpression an deren Oberfläche und führt somit zu einer stabilen Anheftung an die Endothelzellen und zur Passage durch die Gefäßwand in das Gewebe (Diapedese). Im Gewebe bewegen sich die Neutrophilen entlang des IL-8-Konzentrationsgradienten zum Entzündungsherd. Die Bekämpfung der Pathogene erfolgt durch reaktive Sauerstoffspezies und freigesetzte Proteasen (u.a. Kathepsin G). Auf molekularer Ebene werden die beschriebenen Prozesse folgendermaßen vermittelt: Die Interleukin-8-Rezeptoren – CXCR1 und CXCR2 – sind G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (. Abb. 25.21).

Während CXCR1 vorwiegend durch IL-8 aktiviert wird, bindet CXCR2 in erster Linie GroD, einen Mitose-aktivierenden Faktor, und MIP2, das Monozyten aktiviert. Nach IL-8-Stimulus werden G-Protein-vermittelt PI3Kinase, Phospholipase CE2 und Rho A aktiviert. Rho A gehört zur Gruppe der kleinen G-Proteine (. Abb. 25.11a). Es beeinflusst die Aktin-Polymerisation und damit die Organisation des Cytoskeletts und die Zellmigration. Die PI3-Kinase katalysiert einerseits die Phosphorylierung verschiedener Phosphatidylinositole an Position 3 des Inositolringes. Wie unter 25.6.3 besprochen, führt die Phospholipase CE2 zur Freisetzung der second messenger IP3, DAG und Ca2+.

785 25.7 · Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen

. Abb. 25.21. Interleukin-8 Signaltransduktion. IL-8 bindet an die G-Protein-gekoppelten Rezeptoren CXCR1 oder CXCR2. Diese aktivieren ein heterotrimeres G-Protein, welches neben dem MAPK-Weg und der Erhöhung des cytoplasmatischen Ca2+-Spiegels die Aktivierung

des membrangebundenen kleinen G-Proteins RhoA induziert. ER = endoplasmatisches Retikulum; PI3 K = Phosphatidylinositid-3-Kinase; TF = Transkriptionsfaktor

In Kürze G-Protein-gekoppelte Rezeptoren sind mit sieben Transmembrandomänen in der Plasmamembran verankert. Sie können durch eine Vielzahl von extrazellulären Signalen aktiviert werden und signalisieren über heterotrimere G-Proteine. Die Adenylatcyclase ist ein Membranenzym, das durch verschiedene G-Proteine aktiviert (Gs-Proteine) bzw. inhibiert (Gi-Proteine) wird. Sie ist für die Synthese des intrazellulären second messengers cAMP verant-

25.7

Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen

Alle Rezeptorkinasen bestehen aus einer Liganden-bindenden Extrazellulärregion, einer einzelnen Transmembrandomäne und einem cytoplasmatischen Teil, der die Kinasedomäne enthält. Die Rezeptorkinasen lassen sich in die großen Familien der Rezeptor-Tyrosinkinasen und der Rezeptor-Serin/Threoninkinasen unterteilen. In beiden Fällen führt die Ligandenbindung am extrazellulären Teil des Rezeptors zur Aktivierung der cytoplasmatischen Kinasedomäne.

25.7.1

Rezeptor-Tyrosinkinasen

Seit der vollständigen Sequenzierung des menschlichen Genoms weiß man, dass der Mensch Gene für 58 verschie-

wortlich, das unter anderem die Proteinkinase A aktiviert und dadurch in den Stoffwechsel vieler Gewebe eingreift. Ein weiteres durch G-Proteine reguliertes Enzym ist die Phospholipase CE. Sie spaltet das Membranphospholipid PIP2, wobei Diacylglycerin und IP3 gebildet werden. IP3 löst eine Calciumfreisetzung aus dem endoplasmatischen Retikulum aus, die zur Zellaktivierung und zusammen mit Diacylglycerin zur Aktivierung der Proteinkinase C führt.

dene Rezeptor-Tyrosinkinasen besitzt. Rezeptor-Tyrosinkinasen sind modulartig aufgebaut. Sie enthalten alle eine cytoplasmatische Tyrosinkinase-Domäne, während sich die extrazellulären Bereiche von Rezeptor zu Rezeptor beträchtlich unterscheiden können (. Abb. 25.22). Die Familie der Rezeptor-Tyrosinkinasen umfasst eine Reihe medizinisch relevanter Proteine (siehe Info-Box: ErbB2 und Brustkrebs), die fundamentale biologische Prozesse steuern. So ist der Rezeptor für den vascular endothelial growth factor (VEGFR) für die Bildung neuer Blutgefäße von Bedeutung (Angiogenese). Durch Inhibition der VEGFRSignaltransduktion versucht man die Vaskularisierung von Tumoren zu verhindern und dadurch ihr Wachstum zu bremsen. Auch der Insulinrezeptor ist eine Rezeptortyrosinkinase. Wegen der herausragenden Bedeutung der Insulinrezeptor Signaltransduktion für die Glucose-Homöostase und den Diabetes mellitus ist ihm ein gesondertes Kapitel gewidmet (7 Kap. 26.1.7).

25

786

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

Infobox ErbB2 und Brustkrebs Rezeptor-Tyrosinkinasen aktivieren häufig mitogene und anti-apoptotische Signalwege, die gemeinsam zur Zellproliferation führen. Eine Dysregulation solcher Signalwege trägt zur Krebsentstehung bei. In der Tat ist in einer Vielzahl von Brustkrebstumoren die RezeptorTyrosinkinase ErbB2 (auch Her2 genannt), die zur Familie der epidermal growth factor Rezeptoren (EGFR) gehört, vermehrt auf der Zelloberfläche zu finden. Zudem ist der Rezeptor in diesen Krebszellen dauerhaft aktiviert und trägt damit zum unkontrollierten Zellwachstum bei. Die Blockierung von ErbB2 ist eine vielversprechende Strategie bei der Brustkrebstherapie. Man hat daher gegen die extrazelluläre Domäne des humanen Rezeptors eine Reihe von monoklonalen Antikörpern in Mäusen produziert und in Zellkulturexperimenten ihr inhibitorisches Potential analysiert. Dabei wurde ein besonders wirksamer neutralisierender Antikörper identifiziert. In humanisierter Form wird dieser Antikörper (Herceptin ) nun mit Erfolg in der Brustkrebstherapie eingesetzt, wobei etwa 30% der Patientinnen auf diese Behandlung ansprechen.

25

®

. Abb. 25.22. Aufbau von Rezeptor-Tyrosinkinasen. Während sich die extrazellulären Bereiche der verschiedenen Rezeptor-Tyrosinkinase-Familien unterscheiden, sind alle Rezeptoren durch eine konservierte intrazelluläre Tyrosinkinase-Domäne charakterisiert. EGFR = epidermal growth factor Rezeptor; PDGFR = platelet-derived growth factor Rezeptor; INSR = Insulinrezeptor; FGFR = fibroblast growth factor receptorr

Die Bindung des Liganden an eine Rezeptortyrosinkinase führt zur Aktivierung der cytoplasmatischen Tyrosinkinasedomäne mit der Konsequenz der Phosphorylierung cytoplasmatischer Tyrosylreste des Rezeptors. Die resultierenden Phosphotyrosinmotive sind spezifische Bindungsstellen für Proteine mit SH2-Domänen (. Abb. 25.10) oder PTB-Domänen (7 Kap. 25.4.2). Die auf diese Weise an den Rezeptor rekrutierten Proteine lösen die weiteren Signalkaskaden aus. Interessanterweise treten Vernetzungen der Signaltransduktion dieser Rezeptoren mit anderen, insbesondere den G-Protein-gekoppelten Rezeptoren auf, die auch als »receptor crosstalk« bezeichnet werden. Die Grundzüge der Rezeptortyrosinkinase-Signaltransduktion sollen im Folgenden am Beispiel der PDGF-Rezeptoren erläutert werden. ! Die wichtigsten durch Rezeptor-Tyrosinkinasen aktivierten Signalwege sind der Ras/Raf/MAPK-Weg, der Phosphatidylinositid-3-Kinase (PI3K)-Weg und der Phospholipase CJ (PLCJ)-Weg.

Platelet-derived growth factor (PDGF) (. Abb. 25.23) ist ein Wachstumsfaktor, der auch chemotaktische Aktivitäten besitzt. PDGF liegt in seiner biologisch aktiven Form als Homo- oder Heterodimer vor. Die beiden PDGF-A- und PDGF-B-Polypeptide sind im Dimer über DisulfidBrücken verknüpft. Die Zusammensetzung des Dimers aus zwei A-Polypeptiden, zwei B-Polypeptiden oder jeweils eines A- und eines B-Polypeptids ist für die Rezeptorbindung von Bedeutung. PDGF-C entsteht im Unterschied zu PDGF-A und PDGF-B nach proteolytischer Spaltung aus einer Prä-PDGF-C-Form. PDGF-C enthaltende Heterodimere sind noch nicht beschrieben. Ebenfalls durch limitierte Proteolyse entsteht aus dem vor kurzem identifizierten Prä-PDGF-D das aktive PDGF-D. Bisher ist nur das PDGF-D-Homodimer bekannt. PDGF/PDGF-Rezeptor-Interaktion. Die Bindung von PDGF

an seinen Rezeptor führt zur Dimerisierung zweier PDGFRezeptor-Tyrosinkinasen. Der entstehende PDGF-Rezeptor-Komplex kann dabei aus zwei D-Rezeptoren, zwei E-Rezeptoren oder aus je einem D- und E-Rezeptor zusammengesetzt sein. Die PDGF-Typen AA, AB, BB und CC binden D-Rezeptor-Dimere (. Abb. 25.23a). PDGF-Dimere, die PDGF-B enthalten, sowie das PDGF-C-Homodimer binden D/E-Rezeptor-Heterodimere. PDGF-B- und PDGF-DHomodimere binden E/E-Rezeptor-Homodimere. PDGF-A und -B haben eine unterschiedliche Bedeutung in der Embryonalentwicklung. In Knockout-Mäusen wurde gezeigt, dass PDGF-B bzw. der PDGF-E-Rezeptor

787 25.7 · Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen

. Abb. 25.23. PDGF-Signaltransduktion. (a) Aktivierung der PDGFRezeptoren durch die verschiedenen PDGF-Isoformen A, B, C und D. PDGF-Isoformen binden als Dimere an den PDGF-Rezeptor. Der gestrichelte Pfeil verdeutlicht eine niedrig-affine Bindung. (b) Vom aktivierten Rezeptor können verschiedene Signaltransduktionswege ausgehen: Grb2/SOS-Assoziation löst die Aktivierung der MAPK-

Kaskade aus (rechts); Bindung der PI3-Kinase resultiert in der PKBAktivierung (links). (c) Assoziation der PLCJ führt zur Erhöhung der cytoplasmatischen Ca2+-Konzentration und zur Aktivierung der Proteinkinase C (PKC). ER = endoplasmatisches Retikulum; KD = KinaseDomäne; PDK = phospholipid-dependent kinase; PI3 K = Phosphatidylinositid-3-Kinase; PKB = Proteinkinase B; PLC = Phospholipase C

25

788

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

. Tabelle 25.6. Signaltransduktionsmoleküle, die an den PDGF-Rezeptor binden

25

Signaltransduktionsmolekül

Funktion

Interaktionsdomänen*

Phosphatidylinositid-3-Kinase (PI3K)

Lipidkinase

SH2, SH3

Phospholipase CJ (PLCJ)

Lipase

SH2, SH3, PH

Src

Tyrosinkinase

SH2, SH3

SH2-containing tyrosine phosphatase (SHP2)

Tyrosinphosphatase, Adapterprotein

SH2

Signal transducer and activator of transcription (STAT1, 3 und 5)

Transkriptionsfaktor

SH2

Shc

Adapterprotein

SH2, PTB

Grb2

Adapterprotein

SH2, SH3,

Grb7

Adapterprotein

SH2, SH3

Nck

Adapterprotein

SH2, SH3

Crk

Adapterprotein

SH2, SH3

* SH2- und PTB-Domänen binden Phosphotyrosin-Motive; SH3-Domänen binden Prolin-reiche Sequenzen; PH-Domänen binden Phosphatidylinositolphosphate

essentiell für die Nierenentwicklung, PDGF-A jedoch wichtig für die Lungenentwicklung ist. Der Verlust des D-Rezeptors führt zu weiterreichenden Fehlentwicklungen als der Verlust des PDGF-A-Gens; dies lässt sich dadurch erklären, dass über den PDGF-D-Rezeptor sowohl PDGF-A als auch PDGF-B und PDGF-C signalisieren. Die hier für das PDGF-System exemplarisch beschriebenen Kombinationsmöglichkeiten bei der Zusammensetzung der Liganden und der Rezeptorkomplexe ermöglichen verschiedenen Zellen – bedingt durch eine Zelltyp-spezifische Expression der Liganden- und Rezeptoruntereinheiten – jeweils individuell zu reagieren. Dieses Prinzip ist von genereller Bedeutung innerhalb der Familie der Rezeptor-Tyrosinkinasen, aber auch für die Wirkung anderer Cytokine und wird in 7 Kap. 25.8.3 im Zusammenhang mit der Signaltransduktion von Interleukin-6 skizziert. PDGF-induzierte Rezeptoraktivierung. Die Ligandeninduzierte Rezeptordimerisierung führt zur Autophosphorylierung und damit zur Aktivierung der RezeptorTyrosinkinasen. Die aktivierten Kinasen phosphorylieren daraufhin Tyrosylreste im cytoplasmatischen Teil der Rezeptorkette. Diese Phosphotyrosinreste dienen weiteren Signalmolekülen als Rekrutierungsstellen. Für die spezifische Bindung dieser Moleküle ist die Aminosäuresequenz in unmittelbarer Nähe zum Phosphotyrosin entscheidend. Die rekrutierten Proteine besitzen SH2- oder PTB-Domänen, um mit den Phosphotyrosin-Motiven des Rezeptors interagieren zu können. Für die in . Tabelle 25.6 beschriebenen Proteine sind die Interaktionsstellen am PDGF-Rezeptor bekannt. Häufig besitzen die an den Rezeptor rekrutierten Proteine mehrere Interaktionsdomänen und können darüber mit weiteren Proteinen assoziieren. Viele dieser Proteine

dienen ausschließlich als Adaptermoleküle, andere stellen Enzyme oder Transkriptionsfaktoren dar. PDGF-induzierte Signalkaskaden. Im Wesentlichen werden nach PDGF-Stimulation drei Signalkaskaden aktiviert (. Abb. 25.23b,c): 4 die Mitogen-aktivierte-Proteinkinase-(MAPK)-Kaskade 4 die Phosphatidylinositid-3-Kinase-(PI3K)-Kaskade 4 die Phospholipase CJ (PLCJ)-Kaskade

Die Mitogen-aktivierte-Proteinkinase (MAPK)-Kaskade (7 Kap. 25.4.3) beginnt mit der Rekrutierung eines Grb2/ SOS-Proteinkomplexes an den Rezeptor (. Abb. 25.23b). Hierbei kann Grb2/SOS entweder direkt oder über die Adapter Shc oder SHP2 an den PDGF-Rezeptor gebunden werden. SOS gelangt hierdurch in die Nähe des in der Membran verankerten G-Proteins Ras und bewirkt dessen Übergang in die aktivierte, GTP-bindende Form. Die nun mögliche Interaktion von Ras-GTP mit der Serin/Threoninkinase Raf-1 führt zur Raf-1-Aktivierung. Raf-1 ist wiederum der Aktivator der MAP-Kinase-Kinase (MEK). Diese dualspezifische Threonin/Tyrosin-Kinase phosphoryliert schließlich die Mitogen-aktivierten-Proteinkinasen ERK1 und ERK2, deren Substrate unter anderem Transkriptionsfaktoren sind. Die Phosphatidylinositid-3-Kinase (PI3K), die aus einer regulatorischen und einer katalytischen Untereinheit besteht, bindet über die regulatorische Untereinheit ebenfalls an den aktivierten PDGF-Rezeptor (. Abb. 25.23b). Dies führt zur Aktivierung der katalytischen Untereinheit der PI3K und somit zur Phosphorylierung von Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2). Das entstehende Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphat (PIP3) wird von der Pleckstrin-Homologie-Domäne (PH-Domäne) der Pro-

789 25.7 · Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen

teinkinase B (PKB, auch Akt-Kinase genannt) gebunden. Die Rekrutierung der PKB an die Zellmembran ist ein essentieller Schritt für die Phosphorylierung und Aktivierung der PKB durch die Threonin-Kinase-PDK1 (phospholipiddependent kinase), die ebenfalls über ihre PH-Domäne an PIP3 gebunden wird. Über weitere Phosphorylierungen spezifischer Serin- und Threoninseitenketten von bestimmten Apoptose-regulierenden Proteinen wirkt die aktivierte PKB anti-apoptotisch. Aktivierte PKB kann auch in den Zellkern translozieren und reguliert dort Transkriptionsfaktoren, die für die Zellproliferation wichtig sind und trägt somit zur proliferationsfördernden Wirkung des Wachstumsfaktors bei. Im Rahmen der Insulin-Signaltransduktion sorgt der PI3K/PKB-Signalweg für eine verstärkte Glycogensynthese (7 Kap. 11.2.1). Phospholipase CJ (PLCJ) wird ebenfalls am PDGFRezeptor durch Tyrosinphosphorylierung aktiviert (. Abb. 25.23c). PIP2 ist sowohl Substrat der PI3K als auch der PLCJ. Nach Aktivierung am PDGF-Rezeptor bindet PLCJ

mit ihrer PH-Domäne an das durch die PI3K-generierte PIP3. Sie hydrolysiert PIP2 zu Inositol-(1,4,5)-trisphosphat (IP3) und Diacylglycerin (DAG). Cytoplasmatisches IP3 führt zur Freisetzung des second messengers Ca2+ aus dem endoplasmatischen Retikulum. Der zweite second messenger Diacylglycerin aktiviert zusammen mit dem freigesetzten Ca2+ die Serin/Threonin-Proteinkinase-C (PKC) (7 u.). Diese ist wiederum ein Regulator für Transkriptionsfaktoren und beeinflusst somit auch die Genexpression. Auch der JAK/STAT-Signalweg kann durch RezeptorTyrosinkinasen aktiviert werden. Mitglieder der Familie der signal transducers and activators of transcription (STAT1, STAT3 und STAT5) werden an den PDGF-Rezeptor rekrutiert und durch Tyrosin-Phosphorylierung aktiviert (in . Abb. 25.23 nicht dargestellt). Der JAK/STAT-Signalweg spielt bei der Signaltransduktion der meisten Interleukine und der Interferone eine zentrale Rolle und wird in den 7 Kapiteln 25.8.3 und 25.8.4 genauer beschrieben.

Infobox Proteinkinase-C Die Proteinkinasen-C (PKC) wurden ursprünglich als eine Familie von durch Calcium-Ionen aktivierbaren Kinasen beschrieben (daher PKC). Heute versteht man darunter eine aus mindestens 12 Mitgliedern bestehende Familie von Proteinkinasen, die in konventionelle PKC (cPKC), neue PKC (nPKC) und atypische PKC (aPKC) unterteilt wird. Nur die cPKC zeigen die charakteristische Aktivierbarkeit durch Diacylglycerin (DAG) und Calcium-Ionen. Die PKC spielen eine wichtige Rolle bei der Signaltransduktion, der Regulation von Wachstum und Differenzierung sowie der Krebsentstehung. . Abb. 25.24 stellt den Aufbau von Enzymen der PKC-Familie dar. Die PKC-Proteine lassen sich in eine durch eine Art Scharnierregion verbundene N-terminale regulatorische und C-terminale katalytische Region unterteilen. In der N-terminalen Region finden sich zwei Domänen, die die Regulierbarkeit des Enzyms durch Diacylglycerin bzw. Calcium vermitteln. Am weitesten N-terminal liegt eine Pseudosubstrat-Region (PSR), die für die Regulation des Enzyms von großer Bedeutung ist. Die katalytische Domäne enthält eine gut konservierte ATP-Bindungsregion sowie eine Substratbindungsstelle mit relativ breiter Substratspezifität. Die Aktivierung der verschiedenen PKC-Isoformen erfordert ein komplexes Zusammenspiel von Membranlipiden und Proteinkinasen. So genannte pflanzliche Phorbolester können die aktivierende Rolle von DAG nachahmen. Da sie nur langsam abgebaut werden, können sie die PKC über längere Zeit aktivieren und wirken daher als Tumorpromotoren.

. Abb. 25.24. Schematische Darstellung des Aufbaus der Proteinkinase C. (a) Aktivierung der Proteinkinase C durch Diacylglycerin (DAG), Phosphatidylserin (PS) und Calcium-Ionen. PSR = Pseudosubstrat-Region (b) Aufbau verschiedener Isoformen der Proteinkinase C. (Einzelheiten 7 Infobox)

25

790

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25.7.2

25

Rezeptor-Serin/Threoninkinasen

Im Unterschied zu Rezeptor-Tyrosinkinasen folgt nach Ligandenbindung an eine Rezeptor-Serin/Threoninkinase die Phosphorylierung von Serin- und Threonin-Seitenketten von Signalproteinen. Alle Cytokine, die über Rezeptor-Serin/Threoninkinasen signalisieren, gehören zur transforming growth factor β-Familie (TGFE), die sich in drei Gruppen einteilen lässt: 4 TGFE-Isoformen TGFE1 bis TGFE3 4 die Gruppe der bone morphogenetic proteins (BMP) 4 Aktivine ! Die Moleküle der TGFE-Familie spielen eine wichtige Rolle in der Regulation der Gewebehomöostase und bei der Entwicklung vielzelliger Organismen.

Entsprechend ihrer Heterogenität vermitteln die Mitglieder der TGFE-Familie vielfältige biologische Antworten: Die TGFE-Isoformen kontrollieren die Proliferation epithelialer und mesenchymaler Zellen (wachstumsinhibierende Wirkung), stimulieren die Bildung der extrazellulären Matrix (profibrotische Wirkung) und können Immunantworten unterdrücken (anti-inflammatorische Wirkung). Diese Eigenschaften sind mit Hilfe von knockout-Mäusen belegt worden, bei denen das Fehlen der jeweiligen TGFEIsoformen gravierende Fehlentwicklungen in verschiedenen Organen und Geweben zur Folge hat. Darüber hinaus weisen TGFE1-knockout-Mäuse multifokale Entzündungsherde auf und sterben infolge unkontrollierter Lymphozyten-Infiltration. TGFE1 spielt daher zusätzlich eine bedeutende Rolle in der Modulation von Immunantworten. ! Die BMP induzieren die Bildung von Knochen- und Knorpelgewebe. Aktivine beeinflussen die Erythropoese und die Neuralentwicklung im Stadium der Gastrulation.

Die Signaltransduktion dieser Cytokine wird im Folgenden am Beispiel von TGFE-Rezeptoren dargestellt. TGFE-Moleküle binden als Dimere an ihre Rezeptoren (. Abb. 25.25). Die Bindung des Ligandendimers an den dimeren TGFβ-Typ-II-Rezeptor ist Voraussetzung dafür, dass ein Dimer aus TGFβ-Typ-I-Rezeptoren rekrutiert wird. Bei beiden Rezeptortypen handelt es sich um Serin/ Threonin-Kinasen. Der Typ-II-Rezeptor ist konstitutiv aktiv und phosphoryliert nach Assoziation den Typ-I-Rezeptor. Das Typ-I-Rezeptordimer leitet das Signal des Liganden an cytoplasmatische Effektorproteine weiter, die als SmadProteine bezeichnet werden. Die R-Smad-Proteine (receptor activated Smads) Smad 2 und Smad 3 werden über das membranverankerte Hilfsprotein SARA (Smad anchor for receptor activation) an den Typ-I-Rezeptor rekrutiert. SARA interagiert dabei sowohl mit dem Rezeptor als auch mit dem R-Smad-Protein. Die Kinase-Domäne des Typ-I-Rezeptors phosphoryliert das R-Smad-Protein an bestimmten

. Abb. 25.25. TGFβ Signaltransduktion. TGFE-Isoformen binden als Dimere an TGFE-Rezeptoren vom Typ II. Nachfolgend werden Typ-ITGFE-Rezeptoren rekrutiert, welche das Signal an R-Smad-Proteine weitergeben. Aktivierte R-Smad-Proteine müssen ein Co-Smad-Protein binden, um in den Zellkern zu gelangen. Die Aktivierung von R-Smads wird durch I-Smad-Proteine inhibiert. SARA = (Smad anchor for receptor activation); Smad = Kunstwort aus Sma (ein Protein des Fadenwurms Caenorhabditis elegans) und dem verwandten Protein Mad (mothers against decapentaplegic) aus der Fruchtfliege Drosophila melanogaster

Serinresten. Dies führt zur Dimerisierung und zur nachfolgenden Assoziation mit einem Co-Smad (common partner Smad), dem Smad 4. Die Anlagerung des Co-SmadProteins ist für die Translokation des entstehenden Heterotrimers in den Zellkern notwendig. Dort assoziieren weitere Transkriptionsfaktoren oder Cofaktoren und die Transkription von TGFE-Zielgenen wird induziert. Eine feedback-Inhibition der TGFE-Signaltransduktion erfolgt unter anderem über das TGFE-induzierte I-SmadProtein (Inhibitory Smad) Smad 7, das die Phosphorylierung und Dimerisierung der R-Smad-Moleküle blockiert. An der BMP-Signaltransduktion sind die R-SmadProteine Smad 1, Smad 5 und Smad 8 und die I-Smad-Proteine Smad 6 und Smad 7 beteiligt. In Kürze Rezeptor-Tyrosinkinasen aktivieren nach ligandeninduzierter Phosphorylierung von Tyrosylresten eine Reihe von Signalproteinen. Zu diesen gehören die MAP-Kinasen, die Phospholipase CJ und die PI3-Kinase. Rezeptor-Serin/Threoninkinasen signalisieren über den Smad-Signalweg.

791 25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen

25.8

Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen

Neben Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/ Threoninkinasen existieren Rezeptoren ohne intrinsische Kinasedomänen. Diese Rezeptoren binden Tyrosin- oder Serin/Threoninkinasen entweder direkt oder über Adapterproteine. Hierzu gehören die Rezeptoren für die pro-inflammatorischen Cytokine IL-1 und TNF, die Rezeptoren für IL-6-Typ-Cytokine sowie die Interferon-Rezeptoren; letztere vermitteln anti-virale Wirkungen.

25.8.1

Interleukin-1-Signaltransduktion

Interleukin-1 wird als 31 kDa Präkursor ohne Signalpeptid synthetisiert und zunächst im Cytoplasma zurückgehalten. Erst durch Aktivierung der Cysteinprotease ICE (interleukin-1 converting enzyme = Caspase 1) entsteht durch limitierte Proteolyse das reife 17,5 kDa IL-1, welches über einen nicht-klassischen Sekretionsweg die Zelle verlässt. Der Mechanismus dieser Sekretion ist noch nicht aufgeklärt. Das pro-inflammatorische Cytokin Interleukin-1 kommt in zwei Isoformen (IL-1D und IL-1E) vor, die sich in ihren biologischen Wirkungen kaum unterscheiden. Sie signalisieren über einen Rezeptorkomplex, der aus zwei Polypeptid-Ketten besteht: dem Interleukin-1-Rezeptor-I (IL-1RI) und dem Interleukin-1-receptor accessory protein (IL-1RAcP) (. Abb. 25.26). Nach Ligandenbindung und Oligomerisierung des Rezeptors werden verschiedene Signalmoleküle rekrutiert. Zunächst bindet MyD88 (myeloid-differentiation) über seine TIR (Toll/IL-1 receptor)-Domäne an die TIR-Domäne des IL-1-Rezeptors I. MyD88 verfügt neben seiner TIRDomäne noch über eine death-domain (DD), die zur Rekrutierung der IL-1 Rezeptor-assoziierten Kinasen (IRAK) 1 und 4 dient. Death domains wurden ursprünglich im Rahmen apoptotischer Signalwege beschrieben (7 Kap. 7.1.5, 25.8.2), finden aber auch als Proteininteraktionsdomänen in anderen Signalwegen Verwendung. Nach Phosphorylierung von IRAK1 wird der TNF-receptor-associating factor TRAF6 an den Rezeptorkomplex rekrutiert und aktiviert. Nach Ubiquitinylierung dissoziiert TRAF6 vom Rezeptorkomplex und bindet an einen Komplex aus der Serin/Threoninkinase TAK1 (TGF-E activated kinase) und den TAB (TAK-binding protein)-Proteinen TAB1 und TAB2. In diesem Komplex wird TAK1 durch Phosphorylierung aktiviert. In der Folge wird der INB (inhibitor of NF-NB)Kinase(IKK)-Komplex, der aus den drei Untereinheiten IKKD, IKKE und IKKJ aufgebaut ist, durch Phosphorylierung aktiviert. Nach Phosphorylierung von INB, welches im Komplex mit NF-NB vorliegt, wird dieses an Lysin-Resten ubiquitinyliert und über das Proteasom abgebaut. Das freigesetzte NF-NB – bestehend aus den beiden Untereinheiten

. Abb. 25.26. Interleukin1-Signaltransduktion. Nach Bindung des IL-1 an den IL-1-Rezeptorkomplex wird der NF-NB-Signaltransduktionsweg aktiviert. Dies resultiert in der Induktion pro-inflammatorischer Zielgene. (Abkürzungen 7 Text)

p50 und p65 – transloziert in den Zellkern und bindet hier an enhancer-Elemente von Zielgenen. Wichtige Zielgene, die in der pro-inflammatorischen Phase von Entzündungsreaktionen durch NF-NB induziert werden, sind die für die Chemokine Interleukin-8 und RANTES. Diese Cytokine wirken chemotaktisch auf Granulozyten. Auch Interferon-J und IL-6 werden nach IL-1-Stimulation verstärkt exprimiert. Über die ebenfalls beobachtete Induktion der Cyclooxygenase 2 (COX2) werden andere Entzündungsmediatoren, wie die fieberauslösenden Prostaglandine generiert (7 Kap. 12.4.2).

25

792

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

Neben dem Interleukin-1-Rezeptor IL-1RI existiert auch eine cytoplasmatisch verkürzte Form des Rezeptors, der IL-1-Rezeptor-II. Dieser Rezeptor bindet die Liganden IL-1D/E, transduziert aber kein Signal und wirkt deshalb antagonistisch. In Kürze Interleukin-1 führt über verschiedene, an den Rezeptor assoziierte Proteine zur Translokation von NF-NB in den Zellkern. Nach Bindung an die enhancer-Elemente verschiedener Zielgene wird unter anderem die Expression von Chemokinen, Interferon-J und IL-6 induziert.

25 25.8.2

TNF-Signaltransduktion

Der Name Tumor-Nekrose-Faktor (TNF) geht auf Experimente zurück, in denen Tumore in Mäusen nach Behandlung mit TNF absterben. In der Tat kann über den TNF-Rezeptor eine Apoptose ausgelöst werden. Für die Behandlung humaner Tumore spielt TNF bisher noch keine Rolle. TNF ist ein sehr wirksames pro-inflammatorisches Cytokin, welches wie Interleukin-1 und Interleukin-6 Fieber hervorruft (Pyrogene). Es wird nach Endotoxinwirkung von Monozyten/Makrophagen in beträchtlichen Mengen freigesetzt und kann so zum septischen Schock führen. TNF ist darüber hinaus ein bedeutender Mediator chronisch entzündlicher Erkrankungen (7 Kap. 25.8.5). Der Tumor-Nekrose-Faktor existiert in einer Membran-gebundenen sowie in einer löslichen Form (. Abb. 25.27a). Das Enzym TNF-alpha converting enzyme (TACE) überführt den Membran-gebundenen Tumor-NekroseFaktor in die lösliche Form. Beide liegen in oligomerisierter Form – bevorzugt als Trimere – vor. Es existieren zwei TNF-Rezeptoren, die ebenfalls als trimere Komplexe signalisieren: TNF-Rezeptor-1 und TNF-Rezeptor-2. Während löslicher TNF ausschließlich über den TNF-Rezeptor-1 wirkt, kann Membran-gebundener TNF über beide Rezeptorkomplexe signalisieren.

Rezeptoren und untereinander zu interagieren. Der für die Apoptose wichtige Signaltransduktionsprozess ist die Rekrutierung der Pro-Caspasen 8 und 2, die am Anfang einer Caspase-Kaskade stehen (initiator-caspases). Caspasen gehören zur Familie der Cystein-Proteasen, die ihre Substrate C-terminal von Aspartat spalten. Die Pro-Caspase 8 wird durch Abspaltung eines Pro-Peptids autokatalytisch aktiviert und vermag ihrerseits verschiedene cytoplasmatisch lokalisierte Pro-Caspasen (3, 6 und 7) durch limitierte Proteolyse zu aktivieren. Die aktivierten Caspasen (executive-caspases) leiten den Zelltod auf verschiedenen Ebenen ein: Sie zerstören wichtige Strukturproteine der Zelle wie z.B. Proteine der Kernmembran und das Aktincytoskelett oder sie aktivieren eine DNAase und lösen damit die Zerstörung der nucleären DNA aus. Auch DNA-Reparatur und Zellzyklus werden außer Kraft gesetzt. Zur TNF-Rezeptor Superfamilie wird auch der Rezeptor Fas (CD95) gezählt. Nach Bindung des Fas-Liganden (FasL) wird FADD an den Rezeptor rekrutiert und über die Aktivierung der Caspasen 8 und 3 Apoptose ausgelöst.

! Eine Besonderheit des TNFR1 ist die death-domain (DD) im intrazellulären Teil des Rezeptors.

Der TNFR1 ist in der Lage, sowohl NF-NB zu aktivieren (. Abb. 25.27b) – ähnlich der IL-1-Signaltransduktion – und damit pro-inflammatorische Prozesse zu induzieren als auch den programmierten Zelltod (Apoptose) hervorzurufen. Die Auslösung der Apoptose erfolgt nach Ligandenbindung und Aktivierung des TNFR1-Rezeptorkomplexes durch Rekrutierung verschiedener cytoplasmatischer Effektorproteine (TRADD, FADD, RIP und RAIDD) (. Abb. 25.27c). Diese Effektormoleküle enthalten ebenfalls death-domains, die sie in die Lage versetzen, mit den

. Abb. 25.27. TNFα-Signaltransduktion. (a) Lösliches TNF entsteht aus membrangebundenem TNF durch Einwirkung des Enzyms TACE. Sowohl lösliches als auch membrangebundenes TNF kann den TNFR1 aktivieren. Der TNFR2 kann nur durch membrangebundenes TNF aktiviert werden. (b) Die Aktivierung des NF-NB-Signaltransduktionsweges durch TNF erfolgt über ähnliche Mechanismen wie beim IL-1-Rezeptor (c) Der TNFR1 ist im Gegensatz zum TNFR2 in der Lage, Caspasen zu aktivieren. Diese leiten den programmierten Zelltod (Apoptose) ein. FADD = Fas associated protein with a death domain; RIP = receptor interacting protein; RAIDD = RIP-associated ICH-1/CED-3 homologous protein with a death domain; TAK1 = TGF-E activated kinase 1; TRADD = TNF-receptor associated protein with a death domain; Ub = Ubiquitin

793 25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen

c . Abb. 25.27b,c.

25

794

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

In Kürze TNF führt sowohl zur NF-NB-Aktivierung als auch zur Apoptose. Hierfür sind Effektormoleküle mit so genannten death-domains verantwortlich. Die Apoptose wird durch Caspasen ausgelöst.

25.8.3

25

Interleukin-6-Signaltransduktion

Eine Besonderheit der Cytokinwirkung ist ihre Redundanz, d.h. verschiedene Cytokine können gleiche zelluläre Antworten hervorrufen. Dieses Phänomen beruht auf der Tatsache, dass verschiedene Cytokine über gemeinsame Rezeptoruntereinheiten signalisieren (. Abb. 25.28). Die wichtigsten gemeinsam genutzten Rezeptoruntereinheiten sind 4 die common E (Ec)-Kette für die Cytokine IL-3, IL-5 und den granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF) 4 die common J (Jc)-Kette für die Cytokine IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 und IL-21 4 das Glycoprotein 130 (gp130) für die Mitglieder der Interleukin-6-Typ Cytokinfamilie (. Abb. 25.28, . Tab. 25.1) Die Mechanismen der Signaltransduktion über gemeinsam genutzte Rezeptoruntereinheiten sind ähnlich und sollen hier am Beispiel der IL-6-Typ-Cytokine erläutert werden. Die Mitglieder dieser Familie, der neben IL-6 auch IL11, IL-27, leukemia inhibitory factor (LIF), oncostatin M . Abb. 25.28. Cytokin-Familien nutzen gemeinsame Rezeptorketten. Die Cytokinrezeptoren common E-Kette (Ec), common J-Kette (Jc) und gp130 dienen unterschiedlichen CytokinFamilien als gemeinsame signaltransduzierende Rezeptor-Untereinheit. Die Cytokine können nur dann ihre Wirkung entfalten, wenn neben der gemeinsamen Rezeptorkette auch eine Cytokin-spezifische Rezeptorkette exprimiert wird. (Abkürzungen 7 Text)

(OSM), ciliary neurotrophic factor (CNTF), cardiotrophin-1 (CT-1), cardiotrophin-like cytokine (CLC) und Neuropoetin (NP) angehören, weisen eine gemeinsame dreidimensionale Struktur auf: sie gehören zu den so genannten langkettigen 4-D-Helix-Bündel-Cytokinen und üben vielfältige physiologische Funktionen aus. Die IL-6-TypCytokine sind an der Akutphase-Reaktion des Körpers, an der Hämatopoese, der Differenzierung und dem Wachstum von B- und T-Zellen sowie an der neuronalen Differenzierung beteiligt. Die Familie ist durch die Nutzung einer gemeinsamen Rezeptoruntereinheit, dem Glycoprotein 130 (gp130), charakterisiert (. Abb. 25.28, 25.29a). Als zweite Signal-weiterleitende Untereinheit kann je nach Cytokin ein LIF-Rezeptor, ein OSM-Rezeptor oder ein zweites gp130 beteiligt sein. IL-6 und IL-11 führen zu einer Homodimerisierung von gp130. CNTF, LIF und CT-1 signalisieren über ein gp130/LIFR-Heterodimer. OSM ist das einzige Cytokin, das über zwei Rezeptorkomplexe, nämlich gp130/LIFR und gp130/OSMR, signalisieren kann. Während LIF und OSM direkt an die signaltransduzierenden Rezeptor-Untereinheiten binden können – LIF an den LIFR und OSM an gp130 – benötigen IL-6, IL-11 und CNTF spezifische, nicht signalisierende D-Rezeptoren. Die D-Rezeptoren für IL-6, IL-11 und CNTF kommen außer in Membran-ständiger auch in löslicher Form vor. Im Gegensatz zu vielen anderen löslichen Rezeptoren, die eine antagonistische Wirkung zeigen, können die löslichen α-Rezeptoren für IL-6, IL-11 und CNTF nach Bindung ihrer Liganden die signaltransduzierenden Ketten dimerisieren und somit agonistisch wirken.

795 25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen

. Abb. 25.29. Interleukin-6 Signaltransduktion. (a) Schematische Darstellung (links) und Kristallstruktur (rechts) des signalkompetenten IL-6-Rezeptorkomplexes bestehend aus zwei IL-6-Molekülen (grün), zwei IL-6RD (orange) und zwei gp130 Signaltransduktor-Untereinheiten (blau). Die extrazellulären Domänen D1, D2 und D3 von gp130 und IL-6RD sind gekennzeichnet. (b) Ablauf der IL-6-induzierten

Jak/STAT-Signaltransduktion. (Einzelheiten 7 Text) (c) Neben dem Jak/STAT-Weg kann ausgehend von aktiviertem gp130 auch die MAPK-Kaskade initiiert werden. Die Protein-Tyrosin-Phosphatase SHP2 fungiert hierbei als Adapterprotein. APRE = Akutphase responsives Element; Jak = Janus-Kinase; STAT = signal transducer and activator of transcription

25

796

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25

. Abb. 25.29c

! Ligandenbindung führt zur Dimerisierung/Multimerisierung der Rezeptorketten und zur Aktivierung von konstitutiv assoziierten Tyrosin-Kinasen der JanusFamilie.

In Kürze Mitglieder der Familie der IL-6-Typ-Cytokine führen zur Aktivierung assoziierter Tyrosinkinasen der JanusFamilie. Diese aktivieren Transkriptionsfaktoren der STAT-Familie, sowie die MAP-Kinasen.

Bei der IL-6-Typ-Cytokin-Signaltransduktion (. Abb. 25.29b) spielen die konstitutiv assoziierten Janus-Kinasen Jak1, Jak2 und Tyk2 eine Rolle. Nach Ligandenbindung aktivieren sich die Janus-Kinasen durch Tyrosin-Phosphorylierung ① und phosphorylieren anschließend Tyrosin-Reste im cytoplasmatischen Bereich der Cytokin-Rezeptoren ②. Diese Phosphotyrosin-Reste fungieren dann als Rekrutierungsstellen für Proteine mit SH2 (src homology 2)-Domänen wie STAT (signal transducer and activator of transcription) Transkriptionsfaktoren, die Tyrosinphosphatase SHP2, oder feed-back-inhibitor-Proteine der SOCSFamilie (suppressors of cytokine signaling) (7 Kap. 25.10). Im Fall der IL-6-Signaltransduktion assoziieren STAT3 und STAT1 an Rezeptoruntereinheiten ③ und werden ihrerseits Tyrosin-phosphoryliert ④, verlassen den Rezeptorkomplex, homo- bzw. heterodimerisieren ⑤, werden Serinphosphoryliert ⑥ und translozieren in den Zellkern. Hier binden die STAT-Dimere an enhancer-Elemente verschiedener Zielgene ⑦ und beeinflussen deren Transkription (. Abb. 25.29b). Der aktivierte Signaltransduktor gp130 bindet die Phosphatase SHP2, (. Abb. 25.29c) und aktiviert wie für PDGF (7 Kap. 25.7.1) beschrieben die Ras/Raf/ MAP-Kinase-Kaskade. Infobox Janus-Kinasen Janus – Römischer Gott mit einem Kopf und zwei Gesichtern. Janus-Tyrosinkinasen besitzen zwei KinaseDomänen, von denen nur eine enzymatische Aktivität besitzt.

25.8.4

Interferon-Signaltransduktion

! Interferone sind Cytokine, die die Virusvermehrung hemmen.

Die Biosynthese von Interferonen wird durch Viren, Bakterien, Antigene und Cytokine wie Interleukin-1, Interleukin-2 und Tumor-Nekrose-Faktor stimuliert. Zu den Typ-1Interferonen werden die Interferon-α-Mitglieder (IFND) und das Interferon-β (IFNE) gezählt. IFND wird hauptsächlich von Lymphozyten, Monozyten und Makrophagen, IFNE von nahezu allen differenzierten Zellen produziert. Das Typ-2-Interferon IFNJ wird von T-Zellen und natürlichen Killerzellen sezerniert. Die antivirale Wirkung der Interferone greift auf allen Ebenen der Virusreplikation: Virus-Aufnahme, Transkription, Translation, Reifung und Freisetzung. ZellzyklusKomponenten wie c-myc, Retinoblastom-Protein (Rb), oder Cyclin D3 (7 Kap. 7.1.3) sind Ziele der antiproliferativen und apoptotischen Wirkung der Interferone. Die immunoregulatorische Wirkung insbesondere von Interferon-J besteht in der Induktion der Expression von Antigen-präsentierenden MHC-Proteinen der Klasse I und II sowie der Modulation der Antigen-Prozessierung durch das Proteasom. Typ-1- und Typ-2-Interferone signalisieren über unterschiedliche Oberflächen-Rezeptoren. Der Rezeptor für Interferon-D/E besteht aus zwei Untereinheiten: InterferonD/E-Rezeptor-1 (IFNAR1) und Interferon-D/E-Rezeptor-2

797 25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen

. Abb. 25.31. Antivirale Wirkung von IFNα/β durch Blockade der Proteinsynthese. Die Signaltransduktion von IFND/E führt zur Expression von inaktiver Protein-Kinase R (PKR). Nach Bindung doppelsträngiger RNA (dsRNA) während der Virusreplikation wird das Enzym aktiviert. Dies führt zur Hemmung der Initiation der Proteinsynthese

. Abb. 25.30. Interferon-α/β Signaltransduktion. IFND/E bindet an einen Rezeptorkomplex aus IFNAR1 und IFNAR2. Nach TyrosinPhosphorylierung des IFNAR1 durch assoziierte Janus-Kinasen werden STAT1/STAT2-Komplexe phosphoryliert. Diese induzieren nach Bindung eines weiteren Proteins (IRF9 = interferon regulatory factor 9) die Transkription spezifischer Gene. Die STAT-Faktoren liegen möglicherweise in prä-assoziierter Form an den IFNAR2 gebunden vor (gestrichelter Doppelpfeil). IFNAR = Interferon-D/E-Rezeptor; ISGF = interferon-D-stimulated gene factor; ISRE = interferon-stimulated response element

(IFNAR2) (. Abb. 25.30). IFNAR1 bindet die Janus-Kinase Tyk2, IFNAR2 die Janus-Kinase Jak1. Nach Ligandenbindung dimerisieren die Rezeptoren, die Janus-Kinasen werden durch Tyrosin-Phosphorylierung aktiviert und phosphorylieren Tyrosin-Reste im cytoplasmatischen Teil des IFNAR1. Die am IFNAR2 präassoziierten dimerisierten STAT-Faktoren STAT1 und STAT2 werden anschließend über einen noch unverstandenen Mechanismus am IFNAR1 rekrutiert und Tyrosin-phosphoryliert. Die aktivierten STAT1/STAT2-Heterodimere binden nach Ablösung vom Rezeptor den Transkriptionsfaktor IRF9, der zur interferon regulatory factor (IRF)-Familie gehört. Der Komplex aus STAT1, STAT2 und IRF9 wird auch als interferon-stimulated gene factor-3 (ISGF3) bezeichnet. Dieser

Komplex transloziert in den Zellkern und bindet hier an interferon stimulated regulatory elements (ISRE) von Interferon-D/E-Zielgenen. IFN-D/E-induziert die Expression von Protein-Kinase R (PKR). Dieses Enzym liegt zunächst in inaktiver Form vor, wird aber durch Bindung an doppelsträngige RNA, die nach Virusreplikation gebildet wird, durch Autophosphorylierung an Serin-Threonin-Resten aktiviert (. Abb. 25.31). Die aktivierte PKR phosphoryliert den eukaryotischen Protein-Synthese-Initiationsfaktor 2D (eIF2D, 7 Kap. 9.1.5). Der modifizierte eIF2D kann nicht mehr die Proteinsynthese initiieren und hemmt somit auch die Bildung viraler Proteine. Neben der Hemmung der Proteinbiosynthese induziert Interferon D/E auch die 2c-5c-Oligo-A-Synthetase-Expression (2c-5c-OASE) (. Abb. 25.32). Die 2c-5c-OASE wird über doppelsträngige RNA aktiviert. Die aktive 2c-5c-OASE homopolymerisiert ATP zu 2c-5c-Oligoadenylat. Im Unterschied zu den üblichen 3c-5c-Phosphodiesterbindungen handelt es sich hier um eine 2c-5c-Phosphodiesterbindung. 2c-5c-Oligo-A bindet inaktive RNAseL und aktiviert dieses Enzym, welches virale mRNA zu Nucleotiden abbaut. Im Unterschied zu Interferon-D/E wirkt Interferon-J (IFNJ) als Dimer (. Abb. 25.33). Es bindet an einen Rezeptorkomplex, der aus zwei D- und zwei E-Ketten besteht. An die D-Ketten bindet konstitutiv Jak1, an die E-Ketten die Janus-Kinase Jak2. Nach Ligandenbindung und Rezeptoraktivierung werden die Janus-Kinasen durch Trans-

25

798

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

phosphorylierung aktiviert und können Tyrosin-Reste im cytoplasmatischen Teil der D-Rezeptor-Untereinheit phosphorylieren. Nach Rekrutierung von STAT1 an die Phosphotyrosin-Reste der D-Rezeptorketten sowie dessen folgender Tyrosin-Phosphorylierung löst sich der Transkriptionsfaktor STAT1 vom Rezeptor, homodimerisiert und transloziert in den Zellkern. Das Dimer bindet hier an so genannte interferon-J activated sequences (GAS Elemente) von IFN-J-Zielgenen, wie die für die Antigen-Präsentation wichtigen MHC-I und MHC-II Gene, deren Expression hierdurch stimuliert wird.

25

In Kürze

. Abb. 25.32. Antivirale Wirkung von IFNα/β durch mRNA-Abbau nach Aktivierung von RNaseL. Die Signaltransduktion von IFND/E führt zur Expression inaktiver 2c-5c-Oligo-A-Synthetase (OASE). Nach Bindung doppelsträngiger RNA während der Virusreplikation wird das Enzym aktiviert. Es synthetisiert daraufhin 2c-5c-Oligo A, welches nach Bindung die RNaseL aktiviert. Diese hydrolysiert mRNA, weshalb keine Proteinsynthese in der Zelle mehr stattfinden kann. PDE = Phosphodiesterase

Interferone hemmen die Virusvermehrung in nahezu allen Zellen. Über Änderung der Bildung von Zellzykluskomponenten, Induktion der Antigenpräsentation sowie durch Hemmung der Translation und Abbau der mRNA wird die Virusreplikation inhibiert. Interferone signalisieren über den Jak/STAT-Weg.

25.8.5

Pathobiochemie: Septischer Schock und multiples Organversagen

Für die Abwehr lokaler bakterieller Infekte ist die unspezifische Immunantwort von großer Bedeutung (7 Kap. 34.1). Ihre frühen Ereignisse sind die Freisetzung pro-inflammatorischer Cytokine (TNFD, IL-1, IL-6, IL-12 und IL-18) sowie die Bildung von chemotaktischen Faktoren (Chemokine, Komplementfaktoren C3a, C5a), Prostaglandinen, Thromboxanen und Prostazyklinen, die auf die Gefäße im Sinne einer Vasodilatation und Permeabilitätszunahme wirken. Diese Vorgänge sind lokal und leiten die spezifische Immunantwort u.a. durch Bildung von IL-12 und IL-18 sowie IL-4 und IL-10 ein. ! Der Übertritt bakterieller Infektionen in die Zirkulation führt zu einer systemischen generalisierten Entzündungsreaktion.

. Abb. 25.33. Interferon-γ-Signaltransduktion. IFNJ bindet als Dimer an einen Komplex aus zwei D- und zwei E-Rezeptorketten. Der aktivierte Rezeptor löst die Jak/STAT-Signaltransduktionskaskade aus. Dies führt zur Bildung von STAT1-Homodimeren (GAF = J interferon activated factor), die nach Translokation in den Zellkern an GASElemente binden (GAS = J interferon activated site)

Die Reaktionen der unspezifischen Immunantwort sind normalerweise streng lokalisiert und haben den Sinn, die bakterielle Infektion auf den Ort ihrer Entstehung zu beschränken und zu beenden (7 Kap. 34.5). Kommt es jedoch zu einem Übertritt von Bakterien, z.B. Gram-negative Pathogene und bakteriellen Endotoxinen in die Blutbahn, so entwickelt sich eine Sepsis. Diese verläuft unter einer Symptomatik, die auch nach schweren Traumen oder Verbrennungen vorkommt und als systemische Entzündungsreaktion oder SIRS (systemic inflammatory response syndrome) bezeichnet wird. Unter dem Begriff Sepsis versteht man heute ein durch bakterielle Infektion ausgelöstes SIRS. Es handelt sich hierbei um eine akut

799 25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen

. Abb. 25.34. Aktivierung von Zellen durch das bakterielle Lipopolysaccharid. LPS = bakterielles Lipopolysaccharid; LBP = LPSBindeprotein; TLR-4 = toll like receptor-4; IL = Interleukin; IFN = Interferon; TRAF = TNF-receptor associated factor; MyD88 = myeloid differen-

tiation (88 kDa), Mal = MYD88 adapter-like; IRAK = IL-1 receptor associated kinase; TAK = TGFE-activated kinase; TAB = TAK binding protein; NF-NB = nuclear factor NB; INB = inhibitor of NF-NB; IKK = INB Kinase, PLA2 = Phospholipase A2, ACT = Acetyltransferase

lebensbedrohliche Situation. Man schätzt, dass z.B. in den USA jährlich 300.000–500.000 Sepsisfälle vorkommen, wobei die Mortalität zwischen 20 und 40% liegt. In den frühen Stadien der Sepsis ist ein nicht beherrschbares Absinken des Blutdrucks, ein septischer Schock, die häufigste Todesursache. In späteren Stadien der Sepsis kommt es zum Multiorganversagen oder MOF (multi organ failure). Dieser Zustand ist mit einer Mortalität von 60–70% verknüpft. Die bakteriellen Toxine haben eine direkte toxische Wirkung. Daneben ist die generalisierte Aktivierung von Mediatorzellen wie Makrophagen und Granulozyten durch die bakteriellen Toxine eine Hauptursache für den lebensbedrohlichen Verlauf des SIRS. Besonders gut ist dies für das so genannte Lipopolysaccharid (LPS) gezeigt, einem wichtigen Bestandteil der Zellwand Gram-negativer Bakterien. In . Abb. 25.34 sind wichtige Schritte beim Zustandekommen des SIRS zusammengestellt. Die einzelnen Stufen sind:

4 Von Gram-negativen Bakterien erzeugtes LPS wird im Blut gebunden an das LPS-Bindeprotein transportiert. Dieser Komplex ist ein Ligand für einen als CD14 bezeichneten Rezeptor auf Makrophagen/ Monozyten und neutrophilen Granulozyten. Darüber hinaus bestehen Anhaltspunkte dafür, dass LPS auch direkt Endothelzellen der Blutgefäße aktivieren kann 4 CD14 ist ein GPI-verankertes Protein (7 Kap. 9.2.4) ohne cytoplasmatische Domäne, kann also keine Signalweiterleitung ins Cytosol auslösen 4 Der LPS/CD14-Komplex bindet an den TLR-4 (toll like receptor 4). Dieser gehört zu einer aus 10 Mitgliedern bestehenden Familie von Rezeptoren, die wegen ihrer Ähnlichkeit mit dem bei Drosophila vorkommenden Membranrezeptor Toll als toll like bezeichnet werden und für die Erkennung von bakteriellen Strukturen verantwortlich sind

25

800

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

. Tabelle 25.7. Symptomatik der generalisierten Freisetzung proinflammatorischer Zytokine (die Angaben basieren auf Versuchen, bei denen Versuchspersonen die angegebenen Zytokine intravenös in relativ hohen Konzentrationen erhalten haben; vgl. auch Abb. 25.35). (Nach Slifka, Whitton (2000) J Mol Med 78(2): 74–80)

25

Symptome

Ausgelöst durch

Akute respiratorische Insuffizienz (respiratory distress syndrom)

TNFα, IL-2, IL-12

Hypotension

TNFα, IL-2, IL-12

Schädigung des Gastrointestinaltraktes (Nekrose, Durchfälle, Hämorrhagie)

TNFα, IL-2, IL-12

Arrhythmie

TNFα, IL-2, IL-12

Mikrothrombosen

TNFα, IL-2, IL-12

Thrombocytopenie

TNFα, IL-2, IL-12

Gesteigerte Kapillarpermeabilität

TNFα, IL-2,

Fieber

TNFα, IL-1, IL-6, IL-12, IL-18, IFNJ

Renale Tubulusnekrose

TNFα

Veränderte Serum-Akutphase-Protein Spiegel (z. B. CRP)

IL-6, IL-1

4 Die durch LPS induzierte Aktivierung von TLR-4 führt über sehr komplexe, im Einzelnen noch nicht aufgeklärte Signalwege zur Freisetzung pro-inflammatorischer Cytokine. Zu diesen gehören TNFD, IL-1E, IL-6, IL-8 sowie Interferon-J 4 Diese lösen über verschiedene Mechanismen die massive und generalisierte Freisetzung von reaktiven Sauerstoffspezies (ROS, reactive oxigen species) aus, z.B. Superoxidanion (O2–), Stickstoffmonoxid (NO), sowie von Prostaglandinen, Hypochlorit und dem Plättchenaktivierungsfaktor (PAF, 7 Kap. 18.1.1) ! Die überschießende Produktion von pro-inflammatorischen Cytokinen und niedermolekularen Mediatoren löst Hypotension und multiples Organversagen aus. . Abb. 25.36. Multiorganversagen als Folge einer bakteriell verursachten Sepsis. (Einzelheiten 7 Text)

. Abb. 25.35. Serumspiegel von TNFα, IL-6, IL-8 und IL-10 nach intravenöser Gabe von LPS-Endotoxin. Gesunde Versuchspersonen erhielten LPS-Endotoxin in einer Menge von 2 ng/kg Körpergewicht. Die Serumkonzentrationen der Cytokine wurden zu den angegebenen Zeitpunkten bestimmt (nach Lin et al. (2000) Surgery 127: 117–126)

Beim SIRS kommt es zu einer generalisierten Freisetzung von inflammatorischen Cytokinen (. Abb. 25.35) sowie der oben genannten Mediatoren, die in den verschiedensten Zellen Cytokin-vermittelt gebildet werden. Die . Tab. 25.7 zeigt eine Auswahl klinischer Symptome, die nach intravenöser Gabe hoher Konzentrationen pro-inflammatorischer Cytokine beobachtet wurden. Wird eine Freisetzung dieser Cytokine durch LPS ausgelöst, ergibt sich ein kompliziertes Netzwerk von Reaktionen, die für den Abfall des Blutdrucks, die Verminderung der Herzleistung, das Auftreten von Mikrothrombosen, die Hypoperfusion von Geweben, die Gewebszerstörung und schließlich das Multiorganversagen verantwortlich sind. Einen Überblick über die dabei auftretenden Zusammenhänge gibt . Abbildung 25.36.

801 25.9 · Besondere Aktivierungsmechanismen

Obwohl man also einigermaßen klare Vorstellungen über das Zustandekommen des SIRS hat, ist die Umsetzung dieser Erkenntnisse in therapeutische Maßnahmen bisher enttäuschend verlaufen. Antikörper gegen TNFα, Gabe von IL-1-Rezeptorantagonisten sowie Hemmstoffe der Prostaglandin- oder NO-Biosynthese vermögen die Mortalitätsrate bestenfalls um 10% zu verringern. ! Beim SIRS ist das Gleichgewicht zwischen pro-inflammatorischen und anti-inflammatorischen Cytokinen gestört.

Bei der Immunantwort besteht in der Regel ein Gleichgewicht zwischen pro- und anti-inflammatorischen Cytokinen. SIRS ist dadurch gekennzeichnet, dass dieses Gleichgewicht zugunsten der pro-inflammatorischen Cytokine gestört ist. Überwiegen dagegen die anti-inflammatorischen Cytokine, kommt es zu einer Hemmung der Immunantwort. Nur wenn das Gleichgewicht erhalten bleibt, haben die Patienten eine einigermaßen gute Prognose.

In Kürze Die dramatische Symptomatik der Sepsis – des septischen Schocks und des multiplen Organversagens – wird dadurch verursacht, dass die Vorgänge, die bei der lokalisierten, unspezifischen Immunantwort auftreten, durch den Übertritt von bakteriellen Pathogenen ins Blut in generalisierter Form ablaufen und dabei die verschiedensten Organsysteme und Gewebe schwer schädigen. Im Einzelnen beruht dies darauf, dass die Sepsis eine systemische Entzündungsreaktion oder SIRS (systemic inflammatory response syndrome) auslöst. Diese führt zunächst zu: 4 einer gesteigerten und generalisierten Freisetzung pro-inflammatorischer Cytokine durch Makrophagen/ Monozyten und Granulozyten sowie Endothelzellen und

25.9

Besondere Aktivierungsmechanismen

25.9.1

Stickstoffmonoxid (NO) und lösliche Guanylatcyclasen

4 einer dadurch ausgelösten Freisetzung von Mediatoren wie reaktiven Sauerstoffspezies (ROS), NO, Prostaglandinen sowie dem Plättchenaggregationsfaktor (PAF) Die gesteigerte NO-Bildung löst eine allgemeine Gefäßrelaxation mit Blutdruckabfall, am Myokard darüber hinaus eine Verminderung der Kontraktilität und der Herzleistung aus. Am Zustandekommen des sich anschließenden Organversagens sind außer den genannten Mediatoren u.a. eine Verminderung der Organperfusion sowie Mikrothromben verantwortlich, weil die Fibrinbildung die Fibrinolyse überwiegt.

Drei Isoformen dieser Enzyme sind gut charakterisiert: die endotheliale (eNOS), die neuronale (nNOS) und die induzierbare (iNOS) NO-Synthase. Die konstitutiv exprimierten eNOS und nNOS werden durch eine Erhöhung der Ca2+/Calmodulin-Konzentration aktiviert. Im Gegensatz dazu wird die iNOS, die hauptsächlich in Makrophagen

Stickstoffmonoxid (NO) kann als Gas frei durch die Zellmembran diffundieren und ist daher ein wichtiges intraund interzelluläres Signalmolekül (. Abb. 25.37). Aufgrund seiner extrem kurzen Halblebenszeit (2–30 Sekunden) kann es vom Ort seiner Synthese nur in die umliegenden Gewebe und Zellen einwandern. Zu seinen wichtigsten physiologischen Funktionen gehören die Relaxation der glatten Gefäßmuskulatur (. Abb. 25.37) und die Hemmung der Thrombozytenaggregation. Die NO-Synthasen (NOS) katalysieren die Bildung von NO aus Arginin (. Abb. 25.37). Infobox Nobelpreis für biologische Funktion von NO Die Amerikaner Robert Furchgott, Ferid Murad und Louis Ignarro wurden 1998 für die Entdeckung der großen Bedeutung von NO für die Blutversorgung von Organen sowie der biologischen Funktion als Botenstoff im Organismus mit dem Nobelpreis für Physiologie und Medizin ausgezeichnet.

. Abb. 25.37. Wirkungsweise des Stickstoffmonoxids (NO). Das in Endothelzellen aus Arginin unter Sauerstoffeinwirkung erzeugte Stickstoffmonoxid (NO-Synthase-Reaktion 7 Kap. 13.6.3) diffundiert in die umliegenden glatten Muskelzellen. Dort aktiviert es die lösliche Guanylatcyclase und führt somit zur Vasodilatation

25

802

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

meinsame Expression beider Untereinheiten führt zu einer katalytisch aktiven GC. In den C-Termini beider Untereinheiten befinden sich die Cyclase-Homologiedomänen, die die katalytische Aktivität besitzen und stark den entsprechenden Domänen der Adenylatcyclasen ähneln. Die Aktivität dieser Enzyme verhält sich proportional zur vorhandenen NOKonzentration. Im N-terminalen Bereich ist an konservierte Histidinreste eine prosthetische Hämgruppe gebunden, die essentiell für die Bindung von NO an die GC ist. Die Guanylatcyclase katalysiert die folgende Reaktion: GTP o 3c,5c-cyclo-GMP + Pyrophosphat

25 cGMP ist eine dem cAMP analoge Verbindung. Außer seiner Funktion als Stimulator der löslichen Guanylatcyclase dient NO im Nervensystem als Neurotransmitter (nitrinerge Neuronen) bzw. im Immunsystem als Bestandteil des Verteidigungssystems gegen Bakterien.

25.9.2

Membrangebundene Guanylatcyclasen

! Membrangebundene Guanylatcyclasen sind Rezeptoren für natriuretische Peptide und Guanyline.

b . Abb. 25.38. Guanylatcyclasen. (a) Lösliche Guanylatcyclasen. Diese bestehen aus zwei verschiedenen Untereinheiten (D und E), die im N-terminalen Bereich ein als prosthetische Gruppe gebundenes Häm enthalten, welches die Bindung mit NO eingeht. Im C-terminalen Bereich befinden sich die Guanylatcyclase-Domänen. (b) Membrangebundene Guanylatcyclasen. Diese bilden Homodimere und binden über die extrazelluläre Region ihre Liganden. Intrazellulär findet sich die Kinase-Homologiedomäne, die Gelenkregion und im C-Terminus die Guanylatcyclase-Domäne

und anderen Zellen des Immunsystems vorkommt, nicht Ca2+-abhängig reguliert, sondern durch eine Reihe von Cytokinen induziert. Seine physiologische Wirkung entfaltet NO hauptsächlich über die Aktivierung der NO-sensitiven, löslichen Guanylatcyclasen (GC) (. Abb. 25.38a). Diese werden in nahezu allen Säugetierzellen exprimiert und bestehen aus zwei verschiedenen Untereinheiten (D und E). Nur die ge-

Membranständige Guanylatcyclasen unterscheiden sich von den Adenylatcyclasen dadurch, dass sie nur eine einzige Transmembran-Domäne enthalten und durch extrazelluläre Liganden-Bindung aktiviert werden (. Abb. 25.38b). Im Gegensatz zu den heterodimer vorliegenden löslichen Guanylatcyclasen bilden die membrangebundenen Guanylatcyclasen Homodimere. Membranständige Guanylatcyclasen kommen in sieben Isoformen vor: GC-A bis GC-G. Bislang sind nur die physiologischen Liganden für GC-A, GC-B und GC-C bekannt: 4 GC-A und GC-B binden das atriale natriuretische Peptid (ANP), sowie die natriuretischen Peptide B und C (7 Kap. 28.4.2) 4 GC-C bindet die Guanyline, eine aus drei Typen bestehende Klasse von Peptiden, die im Intestinaltrakt, den Nieren sowie im lymphatischen Gewebe gebildet werden Infobox Reise-Diarrhöe Das hitzestabile Enterotoxin von Enterobakterien bindet ebenfalls an die membranständige GC-C Isoform und kann diese aktivieren. Der Anstieg der intrazellulären cGMP-Spiegel führt in der Folge zu einer Verschiebung des Elektrolyt-Gleichgewichts. Pathophysiologische Folge dieser Veränderung der Elektrolyt-Homöostase ist die bekannte Durchfallerkrankung.

25

803 25.9 · Besondere Aktivierungsmechanismen

Die membranständige Guanylatcyclase besteht aus einer extrazellulären Ligandenbindungsregion, einer Transmembran-Domäne und einer Intrazellulärregion. Der cytoplasmatische Bereich enthält eine Kinase-Homologiedomäne, eine amphipathische Gelenkregion und die Cyclase-Homologiedomäne (. Abb. 25.38b). Es wird angenommen, dass die Kinase-Homologiedomäne ihre katalytische Aktivität verloren hat, da katalytisch wichtige Aminosäuren mutiert sind. Sie scheint jedoch einen negativ-regulatorischen Einfluss auf die Cyclaseaktivität zu haben. Die Gelenkregion vermittelt bei der Dimerisierung den Kontakt der beiden Untereinheiten.

Nach Bindung des Liganden kommt es zur Phosphorylierung des intrazellulären Teils des Rezeptors, zur Aktivierung des Enzyms und somit zur Bildung des second messengers cGMP. cGMP-abbauende Phosphodiesterasen hydrolysieren cGMP zu GMP und sind in Säugergeweben weit verbreitet. Sowohl die Dauer als auch die Intensität eines cGMP-vermittelten Signals werden durch Phosphodiesterasen (PDE) reguliert. Bislang sind elf PDE-Isoformen bekannt, wobei PDE5, PDE6 und PDE9 eine hohe Spezifität für cGMP aufweisen.

Infobox

®

Sildenafil (Viagra ) Sowohl die Dauer als auch das Ausmaß einer Erektion hängt vom Blutfluss in das Corpus cavernosum penis ab. Dieses ist ein arterieller Schwellkörper, der im nicht erigierten Zustand aufgrund der angespannten ringförmigen Muskulatur in der Arterienwand blutleer gehalten wird. Im Verlauf der Erektion wird Stickstoffmonoxid (NO) produziert, welches in den betreffenden Muskelzellen die Bildung von cGMP induziert. Die Muskeln entspannen sich und arterielles Blut kann in den Schwellkörper fließen und damit die Erektion auslösen. Viagra wird zur Behandlung erektiler Dysfunktionen eingesetzt und stellt einen potenten selektiven Inhibitor der cGMP-spezifischen PDE5 dar, die das im Corpus cavernosum gebildete cGMP wieder zu GMP ab-

®

25.9.3

cGMP-Effektormoleküle

! cGMP aktiviert cGMP-abhängige Kinasen und cGMPregulierte Ionenkanäle.

Wie für cAMP sind eine Reihe von intrazellulären cGMPbindenden Proteinen beschrieben worden (. Tabelle 25.8). cGMP-abhängige Proteinkinasen. Diese zur Familie der

Serin-/Threoninkinasen gehörenden Enzyme finden sich in besonders hoher Konzentration in glatten Muskelzellen, Thrombozyten und im Kleinhirn. Die wichtigste Funktion

®

baut. Somit kommt es beim Einsatz von Viagra im Verlaufe einer normalen sexuellen Stimulation durch Verhinderung des Abbaus von cGMP zu einem erhöhten intrazellulären Spiegel und damit zu einer verstärkten Erektion. Ohne die sexuelle Erregung löst Viagra keine Erektion aus. Fatale Folgen können eintreten, wenn Viagra gleichzeitig mit Nitrat-/Nitrithaltigen Medikamenten oder NODonatoren eingenommen wird. Zu diesen gehören auch die als Rauschmittel verwendeten und unter dem slangNamen Poppers bekannten Drogen. Sie bestehen aus den leicht flüchtigen Substanzen Amylnitrit, Butylnitrit oder Isobutylnitrit und werden direkt aus Glasampullen inhaliert. Durch die kombinierte Wirkung von NO-Donatoren und Viagra , welches die Wirkung von NO verlängert, droht ein akuter lebensbedrohlicher Blutdruckabfall.

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®

der cGMP-abhängigen Proteinkinase der glatten Muskulatur beruht auf ihrer relaxierenden Wirkung. Dies ist übrigens auch das therapeutische Prinzip aller NO-freisetzenden Vasodilatatoren wie Nitroprussit oder dem zur Behandlung der akuten koronaren Herzkrankheit eingesetzten Nitroglycerin. Ähnlich der Proteinkinase C (. Abb. 25.24) enthält der N-terminale Bereich der cGMP-abhängigen Proteinkinasen eine autoinhibitorisch wirksame Pseudosubstrat-Region. Durch die Bindung von cGMP an die Kinase wird die negativ-regulatorische Wirkung der Pseudosubstrat-Region aufgehoben.

. Tabelle 25.8. Intrazelluläre cGMP-Bindungsproteine Bindungsprotein

Vorkommen

Effekt

cGMP-abhängige Proteinkinasen

glatte Muskulatur Thrombocyten

Relaxation Hemmung der Aggregation

cGMP-abhängige Na+-Kanäle

Retina (Zapfen und Stäbchen)

Photorezeption

cGMP-abhängige Phosphodiesterasen

®

olfaktorisches Epithel

olfaktorische Rezeption

renales Sammelrohr

Natriurese

viele Zellen

cGMP-Abbau

804

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

Substrate der cGMP-abhängigen Proteinkinasen sind z.B. Proteine, die an der Regulation der intrazellulären Calcium-Konzentration beteiligt sind wie die IP3-Rezeptoren (7 Kap. 25.4.3). cGMP-abhängige Ionenkanäle. Sie finden sich in den Photorezeptorzellen, einzelnen olfaktorischen sensorischen Neuronen sowie dem Epithel der renalen Sammelrohre (. Tabelle 25.8). In den ersten beiden Systemen spielt der cGMP-abhängige Natriumkanal eine wichtige Rolle bei der Aufrechterhaltung des im unstimulierten

25

Zustands niedrigen Membranpotentials dieser Zelle. Erst durch Aktivierung einer cGMP-spezifischen Phosphodiesterase kommt es zur Hyperpolarisierung dieser Sinneszellen und damit zur Reizweiterleitung (7 Kap. 23.2.1). In den Sammelrohrepithelien ist der cGMP-abhängige Natriumkanal möglicherweise verantwortlich für die Stimulierung der Natriurese durch das atriale natriuretische Peptid (7 Kap. 28.4.2). cGMP-abhängige Proteinkinasen und Ionenkanäle enthalten ein so genanntes cNMP (cyclic nucleotide monophosphate)-Motiv als cGMP-bindende Sequenz.

In Kürze Stickstoffmonoxid (NO) ist ein wichtiger intra- bzw. interzellulär wirkender Signalmetabolit. Es aktiviert lösliche Guanylatcyclasen. Das dabei entstehende cGMP wirkt relaxierend auf glatte Muskelzellen und ist ein Ligand für Ionenkanäle und aktiviert Phosphodiesterasen. Außer

25.10

Regulation der Signaltransduktion

Die Termination einer Signalkaskade muss ebenso genau kontrolliert werden wie ihre Initiation. Rückkopplungsmechanismen sind daher von großer pathophysiologischer Bedeutung. Ein Ausfall dieser Mechanismen innerhalb einer Signaltransduktionskaskade führt zu ähnlichen Erscheinungen wie eine Hyperstimulation. So verursacht z.B. die Dysregulation der Signaltransduktion eines pro-inflammatorischen Cytokins den Übergang von akuter zu chronischer Entzündung, die im Falle der Leber zur Cirrhose führen und schließlich in der Manifestation eines hepatozellulären Karzinoms enden kann.

durch lösliche Guanylatcyclasen kann cGMP auch durch membrangebundene Guanylatcyclasen gebildet werden. Diese stellen Rezeptoren für die natriuretischen Peptide und Guanyline dar.

25.10.1 Rezeptorexpression Die primäre Voraussetzung, damit eine Zelle auf Cytokine reagieren kann, ist das Vorhandensein von spezifischen Rezeptoren auf der Zelloberfläche. Zusätzlich ist die Zugänglichkeit des Rezeptors für das Hormon/Cytokin von Bedeutung: Eine polarisierte Epithelzelle, die auf endokrine Botenstoffe reagieren soll, muss die notwendigen Rezeptoren auf ihrer basolateralen, dem Blut zugewandten Seite exprimieren. In den cytoplasmatischen Bereichen einer Reihe von Transmembranrezeptoren sind Signalsequenzen für die polare Expression identifiziert worden, die den Transport des Rezeptors an die basolaterale oder apikale Seite einer polaren Zelle vermitteln. Somit ist nicht nur die Anzahl der Rezeptoren, sondern auch ihre Lokalisation von zentraler Bedeutung für die Stimulierbarkeit einer Zelle.

Infobox Messung der Rezeptorexpression Neben den bereits erwähnten Methoden der Ligandenbestimmung (RIA, ELISA, 7 Kap. 25.2.4) existieren verschiedene Verfahren, um die Anzahl der Rezeptoren für extrazelluläre Signalmoleküle auf Zellmembranen zu bestimmen. Die Anzahl der Cytokinrezeptoren auf Zelloberflächen ist im Unterschied zu nutritiven Rezeptoren (z.B. dem LDLRezeptor) sehr gering. Man findet zwischen 100 und 5.000 Cytokinrezeptoren im Vergleich zu 500.000 LDL-Rezeptoren pro Zelle. Dennoch lassen sich diese relativ niedrigen Rezeptorzahlen mit Hilfe der so genannten FACS-(fluorescence activated cell sorting)-Analyse im Durchflusszyto-

meter bestimmen. Die Rezeptoren werden auf der Zelloberfläche über die spezifische Bindung eines Fluoreszenzmarkierten Antikörpers nachgewiesen. Diese Methode ermöglicht auch die Sortierung lebender Zellen nach der Ober flächenexpression bestimmter Proteine. Alternativ lässt sich die Zahl der Oberflächenrezeptoren auch mit Hilfe von Bindungsstudien mit radioaktiv markierten Liganden ermitteln. Hierbei wird die spezifische radioaktive Bindung als Differenz der gesamten Bindung und der unspezifischen Bindung errechnet. Durch die Wahl geeigneter Auswertungsverfahren (Scatchard-plots) kann die Anzahl der Bindungsstellen (Rezeptoren) und deren Bindungsaffinitäten zum Liganden (Cytokin) ermittelt werden.

805 25.10 · Regulation der Signaltransduktion

. Abb. 25.39. Biosynthese löslicher Rezeptoren. Differentielles Spleißen (links) einer Rezeptor-prä-mRNA resultiert in der Expression unterschiedlicher Proteine. Während der Membran-gebundene Rezeptor transmembranäre und cytoplasmatische Bereiche enthält (D, E), besteht der lösliche Rezeptor nur aus den extrazellulären

Domänen und einem alternativen Carboxy-Terminus (C). Bei der limitierten proteolytischen Spaltung (rechts) im Extrazellulärteil eines membranständigen Rezeptors durch eine spezifische Protease (shedding) entsteht ein löslicher Rezeptor, der keinen alternativen Carboxy-Terminus enthält

Einige Cytokine signalisieren über Rezeptorkomplexe, in denen Liganden-bindende Untereinheiten mit Signaltransduzierenden Untereinheiten assoziiert sind. Häufig ist die Stimulierbarkeit einzelner Zellen über die Expression der Liganden-bindenden Rezeptoruntereinheit reguliert. Das Fehlen dieser Untereinheit kann in einigen wenigen Fällen durch das Vorhandensein ihrer löslichen Form kompensiert werden. Dabei assoziieren Ligand und lösliche Rezeptoruntereinheit, binden an die Signal-transduzierenden Rezeptorketten und lösen dort die Signalkaskade aus. In der Regel hemmen aber lösliche Rezeptoren die Signaltransduktion, indem sie den Liganden binden und so seine Assoziation mit Membran-ständigen Rezeptoren verhindern.

Lösliche Rezeptoren entstehen entweder durch alternatives Spleißen der Prä-mRNA des Transmembranrezeptors oder werden durch eine Protease-vermittelte Abspaltung des extrazellulären Teils des Membran-ständigen Rezeptors (receptor-shedding) generiert (. Abb. 25.39).

25.10.2 Rückkopplungsmechanismen Zellen reagieren häufig nur transient auf eine CytokinStimulation. Es existieren mehrere Rückkopplungsmechanismen, um die Signaltransduktion bei andauernder Cytokin-Präsenz zu dämpfen oder sogar ganz zu hemmen. Eine Überstimulation – besonders an Orten der Cytokinfreisetzung – wird somit verhindert.

25

806

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

. Abb. 25.40. Negative Regulation der Signaltransduktion. Die Modulation und Termination eines Cytokininduzierten Signals kann auf verschiedenen Ebenen der Signaltransduktion erfolgen: neben der Verfügbarkeit von Rezeptorkomponenten entscheidet das Vorhandensein von cytoplasmatischen Inhibitoren über die Signalintensität. (Einzelheiten 7 Text)

25

Rezeptoren können Liganden-abhängig durch Endozytose internalisiert werden (. Abb. 25.40) ①. Sie stehen dann für eine weitere Stimulation nicht mehr zur Verfügung. Die Zelle ist desensitisiert. Internalisierte Rezeptorkomplexe können nach Ablösung des Liganden zurück zur Zellmembran transportiert (recycling) oder abgebaut werden. Degradierte Rezeptoren werden durch Neusynthese ersetzt. Die Desensitisierung durch Phosphorylierung und Internalisierung von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren ist in weiten Teilen verstanden. Die Phosphorylierung der Rezeptoren erfolgt an Serin- oder Threonin-Seitenketten und kann durch second messenger-aktivierte Kinasen (z.B. PKA oder PKC) oder über die so genannten G-Proteingekoppelten Rezeptorkinasen (GRK) erfolgen. Ein Beispiel hierfür ist die Kinase für den E-adrenergen Rezeptor (E-ARK bzw. GRK2). Die Phosphorylierung des Rezeptors erlaubt die Rekrutierung von Proteinen der ArrestinFamilie. Eine Funktion der Arrestine besteht in der Verhinderung der erneuten Bindung von trimeren G-Proteinen und führt somit zu einer Desensitisierung des Rezeptors. Sie bewirken zudem die Internalisierung des Rezeptors. Beide Mechanismen resultieren in einer länger anhaltenden Desensitisierung. Die Internalisierung der phosphorylierten Rezeptoren ist oft Voraussetzung für deren Dephosphorylierung und die erneute Präsentation an der Plasmamembran. Prinzipiell können alle Signalmoleküle durch Abbau eliminiert werden: So werden nach Cytokin-Stimulation Proteasen sezerniert, die das stimulierende Cytokin abbauen. Häufig werden Transkriptionsfaktoren durch das

Proteasom abgebaut ② (. Abb. 25.40). Im Unterschied dazu dient die Degradation von Inhibitoren der Signalweiterleitung (INB-Degradation, . Abb. 25.26). Die Bindung inhibitorischer Proteine an aktivierte Signalmoleküle ist auf allen Ebenen der Signaltransduktion zu finden: Liganden können durch lösliche Rezeptoren abgefangen ③, Kinasen durch spezifische Inhibitoren gehemmt ④, Transkriptionsfaktoren durch Bindung an Inhibitor-Proteine an der Kerntranslokation und/oder DNA-Bindung gehindert werden ⑤. ! Die reversible Phosphorylierung von Signalmolekülen ist bei der Modulation der Cytokin-Signaltransduktionswege von zentraler Bedeutung.

Stimulation mit Wachstumsfaktoren, Interleukinen oder Interferonen löst Phosphorylierungskaskaden aus. Aktivierte Kinasen können durch Kinase-Inhibitoren in ihrer enzymatischen Aktivität gehemmt und so an der Signalweiterleitung gehindert werden. Der Phosphorylierungsstatus der Signalmoleküle wird durch Serin/Threoninkinasen oder Tyrosinkinasen und deren Gegenspielern, den Phosphatasen bestimmt ⑥ ⑦ (. Abb. 25.40). Für viele Wachstumsfaktor-, Interleukin- und Interferon-Rezeptoren ist bekannt, dass sich neben Kinasen auch Phosphatasen im aktivierten Rezeptorkomplex befinden ⑥. Andere Phosphatasen wirken im Zellkern ⑦. Für einige Cytokine ist beschrieben, dass die Inaktivierung basal aktiver Phosphatasen einen initialen und essentiellen Schritt für die Signalweiterleitung darstellt. Erst nach Inhibierung der Phosphatasen kommt es zu einer effizienten Phosphorylierung weiterer Signalproteine durch die Kinasen.

807 Literatur

Die bei der Signaltransduktion über G-Protein-gekoppelte Rezeptoren aktivierten trimeren G-Proteine werden durch eine intrinsische GTPase Aktivität nach Interaktion mit GTPase aktivierenden Proteinen (GAP) inaktiviert. Beispiele für GAP sind die regulators of G-protein signalling (RGS) und die Gα-interacting proteins (GAIP). Auch die second messenger können abgebaut werden. So werden z.B. cAMP und cGMP durch Phosphodiesterasen hydrolysiert, IP3 zu Inositol dephosphoryliert, DAG nach Phosphorylierung wieder zu Phospholipiden umgebaut oder die Ca2+-Konzenteration in der Zelle durch aktiven Export aus dem Cytosol reduziert. Interleukine induzieren so genannte suppressors of cytokine signalling (SOCS)-Proteine. Diese sehr früh nach Cytokin-Stimulation nachweisbaren Proteine binden und hemmen aktivierte Janus-Kinasen oder kompetieren mit STAT-Faktoren um die Bindung am Rezeptor. SOCS-Proteine selbst werden sehr schnell durch das Proteasom abgebaut und können daher nur kurzfristig in die Signalweiterleitung eingreifen. Ähnlich wie die SOCS-Proteine werden auch an Rezeptor-Tyrosinkinasen inhibitorische Proteine rekrutiert: APS (adapter-containing PH and SH2 domains) bindet an den aktivierten PDGF-Rezeptor und inhibiert die Expression PDGF-induzierbarer Gene. Slap (src-like adaptor protein) kompetiert mit der Src-Kinase um die Assoziation am aktivierten PDGF-Rezeptor. Schließlich wird die

Ubiquitinylierung und anschließende Degradation des PDGF-R durch die Bindung des Cbl-Proteins an den aktivierten PDGF-R initiiert. ! Die Kerntranslokation von Transkriptionsfaktoren ist ein entscheidender Schritt der Signaltransduktion.

Häufig werden Transkriptionsfaktoren im Cytoplasma zurückgehalten und translozieren erst nach Stimulation der Zelle in den Zellkern (. Abb. 25.40). Zum Beispiel bindet INB an NF-NB und deckt dabei dessen Kernlokalisierungssequenz ab. Erst der Abbau von INB ermöglicht die Kerntranslokation von NF-NB (7 Kap. 28.4.3). Eine Hormon-induzierte erhöhte Expression von INB kann einer NF-NB-Aktivierung somit entgegenwirken. STAT-Faktoren translozieren als phosphorylierte Dimere in den Zellkern und binden dort an enhancer-Sequenzen Cytokin-induzierter Gene. Protein inhibitors of activated STATs (PIAS)Proteine assoziieren spezifisch mit STAT-Dimeren und verhindern so die Promotoraktivierung. Ähnlich wirken Smad 6 und Smad 7 in der TGF-E-Signalkaskade (7 Kap. 25.6.2). Schließlich findet man in den enhancer-Sequenzen von Promotoren meist Bindungsstellen für verschiedene Transkriptionsfaktoren. Diese Transkriptionsfaktoren kompetieren um DNA-Bindungsstellen, wenn diese überlappen (cross-talk).

In Kürze Die Cytokin-Signaltransduktion wird reguliert durch: 4 die Anzahl und Lokalisation von Rezeptoren auf der Plasmamembran 4 lösliche Rezeptoren 4 Phosphorylierung/Dephosphorylierung von Signalmolekülen 4 Bindung inhibitorischer Proteine an aktivierte Signalmoleküle

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4 Blockierung der Kerntranslokation von Transkriptionsfaktoren sowie eine Reihe von Inhibitionsmechanismen wie Internalisierung von Rezeptoren durch Endozytose, proteolytischer Abbau von Cytokinen, Rezeptoren und Transkriptionsfaktoren.

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25

808

25

Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

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26 26

Die schnelle Stoffwechselregulation Harald Staiger, Norbert Stefan, Monika Kellerer, Hans-Ulrich Häring

26.1

Insulin – 810

26.1.1 26.1.2 26.1.3 26.1.4 26.1.5 26.1.6 26.1.7

Struktur – 810 Biosynthese – 811 Sekretion – 812 Plasmakonzentration und Abbau – 816 Insulinanaloga – 816 Biologische Wirkungen – 817 Molekularer Wirkungsmechanismus – 820

26.2

Glucagon – 823

26.2.1 26.2.2 26.2.3 26.2.4

Struktur – 823 Biosynthese und Sekretion – 823 Biologische Wirkungen – 825 Molekularer Wirkungsmechanismus

26.3

Katecholamine – 826

26.3.1 26.3.2 26.3.3 26.3.4 26.3.5

Struktur – 826 Biosynthese und Sekretion – 827 Biologische Wirkungen – 829 Molekularer Wirkungsmechanismus Plasmaspiegel und Abbau – 831

26.4

Pathobiochemie: Diabetes mellitus – 832

26.4.1 26.4.2 26.4.3

Typ 1-Diabetes mellitus – 832 Typ 2-Diabetes mellitus – 834 Diabetes-assoziierte Erkrankungen

Literatur

– 838

– 825

– 829

– 836

810

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

> > Einleitung Die Funktion einer Reihe von Hormonen besteht darin, die Energie-liefernden und -verbrauchenden Stoffwechselprozesse rasch an akute Änderungen des Aktivitäts- und Ernährungszustandes des Organismus anzupassen. Insulin als das wichtigste anabole Hormon ist für die Substrataufnahme und -speicherung in einer Reihe von Geweben notwendig. Sein Mangel löst Diabetes mellitus aus, eine Erkrankung, deren klinischer Verlauf und Symptomatik schon sehr genau in den medizinischen Papyri der alten Ägypter beschrieben wurden. Glucagon ist einer seiner direkten Gegenspieler. Es ist verantwortlich für die Anpassung des Stoffwechsels an fehlende Nahrungszufuhr und wirkt überwiegend auf die Leber, wo es die Bereitstellung des Brennstoffs Glucose durch Glycogenabbau und Gluconeogenese stimuliert. Die Katecholamine sind schließlich die wichtigsten Hormone für die rasche Mobilisierung von gespeicherten Substraten. Sie spielen eine wesentliche Rolle bei der Reaktion des Organismus auf Stresssituationen und haben ein außerordentlich breites Wirkungsspektrum, das von der Regulation der Durchblutung verschiedener Gewebsgebiete bis zur Steuerung des Stoffwechsels reicht.

26

26.1

Insulin

26.1.1

Struktur

Entdeckung des Insulins. Insulin wurde 1921 erstmalig von Frederick Banting und Charles Best aus Rinderpankreas isoliert. Seither steht es für die Therapie der Zuckerkrankheit zur Verfügung. Erst nach dem 2. Weltkrieg gelang Frederick Sanger die Strukturaufklärung des Insulins. ! Insulin ist ein 5,8 kDa großes Proteohormon aus zwei Peptidketten, der A-Kette (21 Aminosäuren) und der B-Kette (30 Aminosäuren).

A- und B-Kette sind durch zwei Disulfidbrücken miteinander verknüpft, eine dritte Disulfidbrücke innerhalb der A-Kette trägt zur Stabilisierung der Raumstruktur des Insulins bei (. Abb. 26.1). Tierische Insuline. Bis heute ist die Primärstruktur der Insuline von weit mehr als 20 Arten aufgeklärt worden. Soweit

. Abb. 26.1. Primärstruktur des Humaninsulins

bis jetzt bekannt, ist der Bauplan aller Insuline identisch, wenn auch eine Reihe von Aminosäuren variiert. Die größte Ähnlichkeit mit dem Humaninsulin hat das SchweineInsulin, bei dem nur das carboxyterminale Threonin der B-Kette gegen ein Alanin ausgetauscht ist. Die Insuline des Schafes, des Pferdes und des Rindes unterscheiden sich vom Schweine-Insulin durch Veränderungen der drei Aminosäuren unter der Disulfidbrücke der A-Kette. Bei anderen Arten sind bis zu 29 der insgesamt 51 Aminosäuren ausgetauscht. Dennoch unterscheiden sich diese Insuline in verschiedenen experimentellen Testsystemen kaum in ihrer biologischen Aktivität. Oligomerisierung. In den Insulin-Speichergranula der EZellen der Langerhans’schen Inseln (7 u.) liegt das Insulin in stark kondensierter Form als Zinkkomplex vor. Im Blut zirkuliert Insulin sehr wahrscheinlich nur in monomerer Form. Bei stärkerer Konzentration und v.a. in Anwesenheit von Zinkionen bilden sich in vitro hexamere und dimere Insuline, die leicht kristallisieren. Insulinkristalle haben die

811 26.1 · Insulin

Infobox Die bedeutendste Entdeckung im Rahmen der Erforschung der Zuckerkrankheit endete mit einem Eklat 1921 war es Dr. Frederick Banting (1891–1941) und dem damals 22-jährigen Studenten Charles Best gelungen, im Labor von Professor John J.R. McLeod in Toronto das Hormon Insulin aus Pankreasextrakten von Versuchstieren zu gewinnen (Banting, F. G., Best C. H. and MacLeod, J. J. R. The internal secretion of the pancreas. Am. J. Physiol. 59:479, 1922). Damit stand das entscheidende Heilmittel zur Verfügung, die bislang unheilbare Krankheit Diabetes mellitus zu behandeln. Bereits 2 Jahre später, also 1923, erhielten Banting und McLeod, letzterer war während der entscheidenden Experimente gar nicht im Labor, den Nobelpreis für Medizin. Charles Best aber wurde als zu jung befunden und ging leer aus – zu Unrecht.

Röntgenstrukturanalyse des Insulinmoleküls ermöglicht (7 Kap. 3.5.1). Dabei hat sich gezeigt, dass große Teile der A-Kette des Moleküls nach außen exponiert sind, während die B-Kette mehr im Inneren des Moleküls liegt. Diese Tatsache hat zur Annahme geführt, dass die A-Kette den größeren Anteil an der biologischen Aktivität des Insulinmoleküls hat, während die B-Kette beispielsweise für die Ausbildung von Insulinoligomeren verantwortlich ist.

26.1.2

Biosynthese

Das endokrine Pankreas. Für die Insulinbiosynthese,

-speicherung und -sekretion ist der endokrine Teil des Pankreas verantwortlich. Er besteht aus den Langerhans’schen Inseln, kleinen homogen über das Pankreas verteilten und in das exokrine Drüsengewebe eingebetteten Zellaggregaten, in denen verschiedene Zelltypen nachzuweisen sind (. Abb. 26.2): 4 Die α-Zellen (ca. 20% der Inselzellen), die für die Glucagonbiosynthese (7 Kap. 26.2) verantwortlich sind 4 die Insulin-produzierenden β-Zellen (70–80% der Inselzellen) 4 die δ-Zellen (max. 5% der Inselzellen), die Somatostatin (7 Kap. 28.6) produzieren, sowie 4 die PP-Zellen (max. 2% der Inselzellen), die das Pankreatische Polypeptid bilden und sezernieren (in . Abb. 26.2 nicht dargestellt) ! Biosynthese und Sekretion von Insulin finden in den E-Zellen der Langerhans’schen Inseln des Pankreas statt.

Aufbau der Langerhans’schen Insel. Die vier Zellarten sind

in der Langerhans’schen Insel in typischer Weise verteilt. Die E-Zellen befinden sich im Zentrum der Insel, umgeben von den D-, G- und PP-Zellen. Die arterielle Blutversorgung

Die Ausgezeichneten bewiesen jedoch Fairness. Banting teilte seine Preishälfte demonstrativ mit Best, McLeod die seine mit James B. Collip, der bei der erstmaligen Insulinreinigung aus Bauchspeicheldrüsen einen wichtigen Beitrag geleistet hatte. Übrigens: Banting und Best verzichteten auf die Reichtümer, die sie mit der Insulinentdeckung hätten verdienen können. Für einen symbolischen Betrag von einem Dollar vergaben sie die Lizenz zur Insulinherstellung an alle Firmen, die sich der Einhaltung von Qualitätsstandards bei der Herstellung verpflichteten. Aus diesem Grund konnten sehr schnell nach der Entdeckung viele sonst dem Tod geweihte Zuckerkranke zu einem vertretbaren Preis behandelt werden.

der Langerhans’schen Insel gestaltet sich derart, dass die E-Zellen im Zentrum zuerst erreicht werden und dann erst die anderen Zelltypen. Hierdurch wird eine rasche Antwort auf Änderungen der Blutglucose-Konzentration ermöglicht. Im elektronenmikroskopischen Bild lassen sich die Zellarten aufgrund ihrer unterschiedlichen Sekretgranula differenzieren. ! Der einkettige Insulinpräkursor wird als Proinsulin bezeichnet.

Synthese des Proinsulins. An einem menschlichen Insel-

zelltumor konnte der Mechanismus der Insulinbiosynthese von Donald Steiner aufgeklärt werden. Er zeigte, dass die beiden Ketten des Insulins Teile eines einkettigen Vorläufermoleküls sind. Inzwischen ist auch die Struktur des auf dem kurzen Arm von Chromosom 11 gelegenen Insulingens bekannt, sodass der in . Abb. 26.3 dargestellte Syntheseweg gesichert ist. Das Insulingen enthält zwei Introns. Die nach Transkription und Spleißen entstehende mRNA des Insulins codiert für ein Protein, das vom N- zum C-Terminus zunächst eine Signalsequenz (7 Kap. 9.2.2) aus 24 Aminosäuren enthält, an die sich die vollständige Sequenz der B-Kette anschließt. Nach einem 35 Aminosäuren langen C-Peptid folgt dann die Sequenz der A-Kette. Dieses 11,5 kDa große Translationsprodukt ist das Prä-Proinsulin. Wie andere Exportproteine wird auch Prä-Proinsulin an den Ribosomen des rauen endoplasmatischen Retikulums synthetisiert, wobei das Signalpeptid für die Einfädelung der synthetisierten Peptidkette in das Lumen des ER verantwortlich ist. Dort erfolgt die Abtrennung des Signalpeptids, sodass das etwa 9 kDa große Proinsulin entsteht. Strukturell gehört Proinsulin zu einer Familie stoffwechselaktiver Wachstumsfaktoren, zu denen auch die insulin-like growth factors (IGF, 7 Kap. 27.7.2) und die Relaxine (7 Kap. 27.6.8) gehören.

26

812

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

26

. Abb. 26.2. Aufbau einer Langerhans’schen Insel. Schematische Darstellung einer elektronenmikroskopischen Aufnahme. Vergrößerung 10 000u

Reifung des Insulins. Insulin wird unter Einschaltung

spezifischer Proteasen aus der Familie der ProhormonKonvertasen durch Entfernung des C-Peptids gebildet (. Abb. 26.3). Dabei wird der entstandene C-Terminus der B-Kette durch Carboxypeptidase E noch um zwei Argininreste verkürzt. Dieser Vorgang findet im Golgi-Apparat sowie innerhalb der E-Granula statt. Ein kleiner Teil des Proinsulins entgeht diesem Reifungsprozess und gelangt mit dem reifen Insulin in den Blutstrom. Plasma-Proinsulin weist nur etwa 8% der biologischen Aktivität des reifen Insulins auf. Das C-Peptid (3 kDa) wird wie die B-Kette durch Carboxypeptidase E am C-Terminus um zwei basische Aminosäuren (RR bzw. RK) verkürzt, danach aber nicht weiter proteolytisch abgebaut, sodass sich in den im GolgiApparat entstehenden Sekretgranula Insulin und C-Peptid in äquimolarem Verhältnis befinden. Bei der Sekretion von Insulin (7 u.) wird auch C-Peptid in gleichen Mengen freigesetzt. Diese Tatsache ist insofern von klinischer Bedeutung, als bei Insulin-pflichtigen Diabetikern durch spezifische immunologische Bestimmung der C-Peptid-Konzentration im Plasma ein Rückschluss auf die noch vorhandene körpereigene Restsekretion von Insulin möglich ist. Eine biologische Aktivität des C-Peptids ist bislang nicht zweifelsfrei belegt.

! Das Insulingen zählt zu den sehr schnell regulierten Genen, den sog. immediate early genes.

Regulation der Insulinexpression. Der wichtigste Faktor für die Expression des Insulingens ist Glucose. Viele Beobachtungen haben gezeigt, dass jede Erhöhung der extrazellulären Glucosekonzentration eine Zunahme der Prä-Proinsulinsynthese auslöst. Die Transkription des Insulingens wird rasch initiiert und erreicht ihr Maximum bereits 30 min nach dem Glucose-Reiz. Dies dient dem zügigen Wiederauffüllen der intrazellulären Insulinvorräte, die sich infolge der Glucose-stimulierten Insulinsekretion teilweise erschöpfen. Außerdem konnte gezeigt werden, dass extrazelluläres Insulin selbst die Transkription seines eigenen Gens induzieren kann. Längerfristig erhöhte Insulinkonzentrationen führen dagegen zu einer Hemmung der Expression des Insulingens.

26.1.3

Sekretion

Insulinsekretion der β-Zelle. Nach seiner Biosynthese und

posttranslationalen Modifikation wird Insulin zusammen mit dem C-Peptid in den vom Golgi-Komplex abgeschnür-

813 26.1 · Insulin

. Abb. 26.3. Biosynthese des Insulins. Das Insulingen enthält zwei große Introns (I). Diese werden posttranskriptionell entfernt. Nach Translation der dabei entstehenden mRNA entsteht Prä-Proinsulin,

welches posttranslational prozessiert werden muss, damit natives Insulin entsteht. S = Signalsequenz; PC1/2 = Prohormon-Konvertase-1/-2; CPE = Carboxypeptidase E. (Einzelheiten 7 Text)

26

814

26

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

ten Sekretgranula in konzentrierter Form gespeichert. Jeder zur Sekretion führende Reiz bewirkt unter Beteiligung des mikrotubulären Systems eine Wanderung der β-Granula an die innere Zellmembranoberfläche. Hier verschmilzt die Granulamembran mit der Plasmamembran, an der Nahtstelle reißt die Membran auf, sodass der Granulainhalt jetzt in den perikapillären Raum entleert werden kann. Der Sekretionsvorgang, der also dem klassischen Ablauf der regulierten Exozytose (7 Kap. 6.2.3 und 6.2.4) entspricht, ist abhängig von der Aufrechterhaltung einer physiologischen Calciumkonzentration im extrazellulären Raum. Colchicin und Vinca-Alkaloide (7 Kap. 6.3) sind wirkungsvolle Hemmstoffe der Insulinsekretion, was der Beteiligung des mikrotubulären Systems an der Insulinsekretion entspricht. ! Die Insulinsekretion hängt von der extrazellulären Glucosekonzentration ab.

Glucose-stimulierte Insulinsekretion. Der physiologische Reiz zur Auslösung der Insulinsekretion der E-Zelle besteht in einer Erhöhung der Glucosekonzentration in der extrazellulären Flüssigkeit, wie man sie beispielsweise nach einer Mahlzeit beobachten kann. Die Insulinsekretion beginnt bei einer Glucosekonzentration von 2–3 mmol/l und nimmt danach bis zu einer Glucosekonzentration von 15 mmol/l zu. Diese Tatsache gewährleistet, dass im gesunden Zustand jede Erhöhung der Blutglucosekonzentration über einen Grenzwert von etwa 3 mmol/l dosisabhängig von einer Insulinfreisetzung und einem Anstieg der Insulinkonzentration im peripheren Blut begleitet wird (. Abb. 26.4). Dieses

Phänomen ist die Grundlage der Glucosetoleranz-Tests zur Diagnose von Vorstadien des Diabetes mellitus (7 Kap. 16.1.2). Nur bei normaler Insulinsekretion ist der etwa 30 min nach der Glucosebelastung erfolgende Abfall der Blutglucose möglich. Mechanismus der Glucose-stimulierten Insulinsekretion.

Durch kombinierte biochemische und elektrophysiologische Untersuchungen hat man heute eine einigermaßen sichere Vorstellung vom biochemischen Mechanismus, mit Hilfe dessen das Signal einer erhöhten extrazellulären Glucosekonzentration in die Exozytose der Insulin-enthaltenden E-Granula umgesetzt wird (. Abb. 26.5). Glucose wird von den E-Zellen in Abhängigkeit von ihrer Konzentration (s.u.) aufgenommen und verstoffwechselt. Jede Steigerung des Glucoseumsatzes in der E-Zelle resultiert in einem Anstieg des zellulären ATP/ADP-Verhältnisses. Dies führt zur Hemmung eines in der Plasmamembran der E-Zellen vorhandenen ATP-empfindlichen K+-Kanals, was eine Depolarisierung der E-Zelle auslöst. Ein spannungsregulierter Ca2+-Kanal öffnet sich infolgedessen und führt zu einem Anstieg der cytosolischen Calciumkonzentration, die wiederum der Auslöser für die gesteigerte Exozytose von E-Granula ist. ! Nicht das Glucosemolekül selbst, sondern das bei seinem Abbau gebildete ATP stellt das Signal für die Depolarisierung der E-Zelle und die Insulinsekretion dar.

Molekulare Natur des Glucosesensors. Die molekulare Ursache für die Abhängigkeit der Insulinsekretion der E-Zellen von der extrazellulären Glucosekonzentration und vom Glucoseumsatz liegt offensichtlich in einem gewebstypischen Zusammenspiel von Glucoseaufnahme und GlucosePhosphorylierung. In den E-Zellen der Langerhans’schen Inseln kommt das Glucosetransportprotein GLUT-2 mit einer besonders hohen KM für Glucose (etwa 40 mmol/l) vor, sodass die Glucoseaufnahme dieser Zellen stets proportional zur Blutglucosekonzentration ist. Ähnlich wie die Leber verfügen E-Zellen auch über eine hohe Glucokinase-Aktivität. Die Glucokinase der E-Zellen hat ebenfalls eine hohe KM (etwa 8 mmol/l), sodass die GlucosePhosphorylierung und damit die Glycolyserate direkt von der intrazellulären Glucosekonzentration abhängen. Die Ausstattung der E-Zelle mit GLUT-2 und Glucokinase sorgt also dafür, dass die Glycolyserate direkt proportional der Blutglucosekonzentration ist. Modulation der Insulinsekretion. Verschiedene Verbin-

. Abb. 26.4. Zusammenhang zwischen Blutglucose- und Plasmainsulin-Konzentration. 24-Stunden-Profil einer normalgewichtigen Versuchsperson. F = Frühstück; M = Mittagessen; Z = Zwischenmahlzeit; A = Abendessen; S = Spätmahlzeit; G = 1 Stunde gehen. (Nach Molnar 1972)

dungen modulieren die Antwort der E-Zelle auf den Glucose-Reiz. Außer einigen Monosacchariden können Aminosäuren (v.a. Arginin), Fettsäuren und Ketonkörper zur Insulinfreisetzung führen. Allerdings ist in jedem Fall die Anwesenheit von Glucose notwendig, sodass eigentlich die Glucose-stimulierte Insulinsekretion durch die genannten Verbindungen lediglich verstärkt wird.

815 26.1 · Insulin

. Abb. 26.6a,b. Struktur der Sulfonylharnstoffe. a Allgemeine Struktur. b Glibenclamid als Beispiel für einen häufig verwendeten Sulfonylharnstoff

Katecholamine D2-Adrenozeptor-vermittelt ist. Ob Insulin seine eigene Sekretion zu hemmen vermag, ist nach wie vor Gegenstand der Diskussion. Dagegen ist es sicher, dass Somatostatin, welches u.a. in den G-Zellen der Langerhans’schen Inseln gebildet wird, die Insulinsekretion unterdrückt. Die physiologische Bedeutung dieses Befundes ist jedoch noch weitgehend unklar. Insulinotrope Hormone. Seit langem ist bekannt, dass die

gleiche Menge Glucose oral verabreicht zu höheren Plasmainsulin-Konzentrationen führt als bei intravenöser Gabe. Dies ist die Folge einer durch bestimmte gastrointestinale Hormone (Enterohormone, 7 Kap. 32.1.6) gesteigerten Insulinsekretion. ! Enterohormone, die Glucose-abhängig sezerniert werden und die Insulinsekretion steigern, werden als Inkretine bezeichnet.

. Abb. 26.5. Mechanismus der Glucose-induzierten Insulinsekretion. Der Glucosestoffwechsel der E-Zellen der Langerhans'schen Inseln führt in Abhängigkeit von der extrazellulären Glucosekonzentration zu einer Steigerung des ATP/ADP-Quotienten, der das metabolische Signal für das Schließen eines ATP-abhängigen K+-Kanals darstellt. Die sich dadurch ergebende Depolarisierung bewirkt die Öffnung eines spannungsabhängigen Ca2+-Kanals und eine Zunahme der cytosolischen Calciumkonzentration. Diese ist der Auslöser für die gesteigerte Exozytose der E-Granula

! Hormone üben eine regulierende Wirkung auf die Insulinfreisetzung durch die E-Zelle aus.

Hemmung der Insulinsekretion. Noradrenalin und beson-

ders Adrenalin hemmen die Insulinsekretion. Dieser Effekt wird allerdings durch D2-Antagonisten wieder aufgehoben. Dies weist darauf hin, dass die inhibitorische Wirkung der

Von besonderer Bedeutung ist hier das gastroinhibitorische Peptid (GIP) (7 Kap. 32.1.6), dessen Plasmakonzentration besonders nach kohlenhydratreichen Mahlzeiten auf Werte ansteigt, die die Insulinsekretion deutlich stimulieren. Ähnlich verhält sich das aus dem Prä-Proglucagon der intestinalen Mukosazellen entstehende Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) (7 Kap. 26.2.2). Beide Inkretine binden an spezifische heptahelicale Transmembranrezeptoren der E-Zelle und stimulieren die Insulinfreisetzung über eine Aktivierung des Adenylatcyclasesystems (7 Kap. 25.6.2). Insulinsekretion-stimulierende Pharmaka. Von besonde-

rer Bedeutung sind hierbei die von den Sulfonamiden abgeleiteten Sulfonylharnstoffe (. Abb. 26.6), welche neben den Insulinresistenz-vermindernden Pharmaka als sog. orale Antidiabetica zur Therapie des Typ 2-Diabetes (7 Kap. 26.4.2) eingesetzt werden. Sulfonylharnstoffe führen direkt zu einer Depolarisierung der E-Zelle. Inzwischen ist es gelungen, den Sulfonylharnstoff-Rezeptor der E-Zelle zu klonieren und zu charakterisieren. Dieses auch als Sulfonylurea receptor (SUR) bekannte Transmembranprotein ist

26

816

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

ein Mitglied der ABC-Transporter-Familie (7 Kap. 6.1.5). Interessanterweise hat sich gezeigt, dass das SUR-Protein identisch mit einer Untereinheit des ATP-abhängigen K+Kanals ist. Während die ATP-Bindungsstelle des K+-Kanals intrazellulär liegt, befindet sich die Bindungsstelle für Sulfonylharnstoffe an der extrazellulären Seite des K+-Kanals. Sowohl ATP als auch Sulfonylharnstoffe können unabhängig voneinander an das Kanalprotein binden, den K+-Kanal schließen und damit Zelldepolarisierung und Insulinsekretion auslösen.

26.1.4

26

Plasmakonzentration und Abbau

Plasmakonzentration des Insulins. Im zirkulierenden Blut kommt Insulin im Wesentlichen als Monomer vor. Ein Bindungsprotein für Insulin ist nicht nachgewiesen worden. Die Insulinkonzentration im Blut beträgt – in Abhängigkeit von der Glucosekonzentration – beim Stoffwechselgesunden 0,4–4 ng/ml (69–690 pmol/l). Meist werden Insulinmengen aber in internationalen Einheiten angegeben: 1 mg Insulin entspricht etwa 25 internationalen Einheiten (IE). Dieser Wert ist mit Hilfe eines immunologischen Testverfahrens (7 Kap. 25.2.4) ermittelt worden. Die früher häufiger benutzten biologischen Bestimmungsverfahren führen zu höheren Werten, die durch die Anwesenheit von Insulinähnlich wirkenden Verbindungen im Plasma verursacht werden (Somatomedine/IGF, 7 Kap. 29.6.3). ! Die Halbwertszeit des Insulins im Serum beträgt nur etwa 7 bis 15 Minuten.

Abbau des Insulins. Eine Reihe von sehr aktiven enzymatischen Systemen in Leber und Niere sorgt für den raschen Abbau von zirkulierendem Insulin, sodass dessen Halbwertszeit im Serum nur etwa 7–15 Minuten beträgt. Eine spezifische Glutathion-Insulin-Transhydrogenase katalysiert die reduktive Spaltung der die A- und B-Kette verbindenden Disulfidbrücken. Die nun isolierten Ketten werden rasch proteolytisch abgebaut. Speziell in der Muskulatur scheint es zudem Proteasen mit hoher Spezifität für Insulin zu geben. Darüber hinaus wird in den Zellen Insulin-empfindlicher Gewebe der Insulin-InsulinrezeptorKomplex (7 u.) internalisiert und durch lysosomale Enzyme abgebaut.

26.1.5

Insulinanaloga

Entwicklung kommerzieller Insuline. In der Therapie des Insulin-pflichtigen Diabetes mellitus (Typ 1 und fortgeschrittener Typ 2) ist die subkutane Injektion von Insulin immer noch obligat. Lange Zeit wurden Insulin-Präparationen aus Rinder- und Schweinepankreas eingesetzt, bis in den 1980er Jahren moderne gentechnische Methoden (7 Kap. 7.4) es ermöglichten, hochreines rekombinantes

Humaninsulin herzustellen, welches deutlich weniger immunogen war und das Auftreten allergischer Reaktionen drastisch reduzierte. Dennoch bilden etwa 40% der Patienten nach Injektion Antikörper gegen rekombinantes Humaninsulin. Diese sind jedoch klinisch weitgehend bedeutungslos. In sehr seltenen Fällen werden neutralisierende Antikörper gebildet, die eine Dosiserhöhung erforderlich machen. Gentechnische und chemische Methoden erlaubten es schließlich, Insulinmoleküle zu erzeugen, die sich in ihrer Primärstruktur geringfügig vom normalen Humaninsulin unterscheiden, aber verbesserte pharmakokinetische Eigenschaften aufweisen. Diese Insulinvarianten, die in den letzten Jahren vermehrt zum klinischen Einsatz kommen, werden als Insulinanaloga bezeichnet. Ähnlich wie die tierischen Insuline weisen die Insulinanaloga vom Humaninsulin abweichende Aminosäuren auf (. Abb. 26.7). Die Immunogenität der Insulinanaloga, gemessen an der Antikörperbildung, entspricht allerdings der des Humaninsulins und ist im Vergleich zu den tierischen Insulinen vernachlässigbar. Schnell wirkende Insuline. Durch einzelne Aminosäureaustausche in der B-Kette des Humaninsulins wurden die Insuline Lispro, Aspart und Glulisin (. Abb. 26.7) entwickelt, welche im Vergleich zum Normalinsulin doppelt so schnell in die Zirkulation eintreten, einen doppelt so hohen Anstieg der Plasma-Insulinkonzentration bewirken und damit die physiologische Glucose-stimulierte Insulinsekretion besser imitieren. Der Grund hierfür liegt darin, dass die Insulin-Moleküle in der konzentrierten Injektionslösung als Hexamere vorliegen, welche im subkutanen Gewebe im Falle des Normalinsulins relativ langsam in Dimere und Monomere zerfallen und ins Blut übertreten, während die Aminosäureaustausche in den Insulinen Lispro, Aspart und Glulisin die Stabilität der Hexamere deutlich herabsetzen. Dementsprechend hält die Wirkung dieser Insulinanaloga nur 2–5 Stunden an (Normalinsulin: 5–8 Stunden). ! Subkutan injizierte Insuline treten nur in Form von Dimeren und Monomeren in die Zirkulation ein.

Lang wirkende Insuline. Diabetiker benötigen zur Deckung

des basalen Insulinbedarfs der Gewebe zudem lang wirksame Insuline. Hierbei kommt mit Protamin oder Zink versetztes Insulin (NPH- bzw. Zink-Insulin) zum Einsatz, dessen Hexamere durch die Zusätze deutlich stabilisiert sind (Wirkungsdauer: 12-24 Stunden je nach Präparat). Zunehmend werden aber auch die Insulinanaloga Glargin und Detemir (. Abb. 26.7) appliziert. Insulin Glargin weist nicht nur eine um zwei Argininreste carboxyterminal verlängerte B-Kette sondern auch einen Austausch des C-terminalen Asparagins der A-Kette durch Glycin auf. Diese Modifikationen bewirken eine Änderung des isoelektrischen Punktes des Moleküls (7 Kap. 3.2.2) und damit die Bildung relativ unlöslicher Präzipitate am Injektionsort. Von diesem

817 26.1 · Insulin

. Abb. 26.7. Primärstruktur gängiger Insulinanaloga

Depot wird Insulin Glargin langsam aber kontinuierlich über 20–24 Stunden hinweg freigesetzt. Ein anderes Prinzip zur Verzögerung der Insulinabgabe liegt beim Insulin Detemir vor. Hier wurde die B-Kette um das carboxyterminale Threonin verkürzt und an das nun endständige Lysin die Fettsäure Myristinsäure kondensiert. Über den Myristinsäurerest bindet Insulin Detemir reversibel an das Plasma-Fettsäurebindungsprotein Serumalbumin. Nur etwa 1% dieses Insulinanalogs zirkuliert dann in freier Form im Blut.

. Tabelle 26.1. Die Insulinempfindlichkeit verschiedener Organe und Zellen Insulinempfindliche Organe

Insulinunempfindliche Organe

Muskel (Skelett- und Herzmuskel)

Erythrozyten

Fettgewebe

Nieren

Leber Leukozyten Laktierende Brustdrüse Samenblasen

26.1.6

Biologische Wirkungen

Knorpel und Knochen Haut

Insulin-empfindliche Gewebe. Das aus den E-Zellen der

Linse des Auges

Langerhans’schen Inseln freigesetzte Insulin wirkt nicht auf alle Zellen des Organismus. Von den in . Tab. 26.1 aufgeführten Insulin-empfindlichen Geweben fallen aufgrund ihrer Masse und Stoffwechselbedeutung die Muskulatur, das Fettgewebe und die Leber besonders ins Gewicht, weswegen an ihnen die biochemischen Funktionen des Insulins dargestellt werden sollen (. Tab. 26.2).

Hypophyse Peripherer Nerv Aorta Hypothalamus Pankreas Hypophyse

Intestinale Mukosa

26

818

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

. Tabelle 26.2. Stoffwechselwirkungen von Insulin Wirkungstyp

Effekte

Stoffwechselwirkung

Schnell

Steigerung des Glucosetransports in Skelettmuskel und Adipocyt

Senkung der Blutglucosekonzentration; Steigerung der Glycogensynthese und Glycolyse der Skelettmuskulatur; Steigerung der Triacylglycerinsynthese im Fettgewebe

Langsam

26

Aktivierung der Glycogensynthase

Steigerung der Glycogensynthese in Leber und Skelettmuskulatur

Aktivierung der cAMP-spezifischen Phosphodiesterase

Senkung des cAMP-Spiegels; im Fettgewebe Hemmung der Lipolyse; in Leber und Skelettmuskel Hemmung der Glycogenolyse und Stimulierung der Glycogensynthese; in Leber Hemmung der Gluconeogenese

Steigerung des Aminosäuretransports im Skelettmuskel

Steigerung der zellulären Aminosäurekonzentration; Stimulierung der Proteinbiosynthese

Induktion der Lipoproteinlipase

Steigerung der Spaltung von VLDL-Triacylglycerinen; Stimulierung der Triacylglycerinbiosynthese

Induktion von Glucokinase, Phosphofructokinase, Pyruvatkinase

Stimulierung der Glycolyse

Repression von Pyruvat-Carboxylase, PEP-Carboxykinase, Fructose 1,6-Bisphosphatase und Glucose-6-Phosphatase

Hemmung der Gluconeogenese

! Insulin stimuliert den Glucosestoffwechsel in Fettgewebe und Skelettmuskel.

Steigerung des Glucosetransports. Die am längsten be-

kannte und wichtigste Wirkung des Insulins wurde in den 1940er Jahren von Rachmiel Levine entdeckt, als er zeigen konnte, dass Insulin die Glucoseaufnahme der Skelettmuskulatur stimuliert. Später konnte eine gleichartige Insulinwirkung auch im Fettgewebe nachgewiesen werden. Die hierdurch gesteigerte Glucoseverwertung führt im Gesamtorganismus zu einem raschen Blutglucoseabfall. Für die Glucoseaufnahme sowohl der Muskel- als auch der Fettzelle ist der Glucosetransporter GLUT-4 (7 Kap. 11.4.1) verantwortlich, welcher die Glucoseaufnahme durch erleichterte Diffusion katalysiert. GLUT-4 -Transporter sind nicht nur in der Plasmamembran verankert, sondern befinden sich auch in intrazellulären Membranvesikeln, wo sie zur schnellen Mobilisierung bereitstehen. Die Wirkung des Insulins beruht darauf, dass es solche Vesikel in die Plasmamembran verlagert (7 Kap. 11.4.1). Ein derartiger Mechanismus passt gut zu den Ergebnissen kinetischer Untersuchungen, wonach Insulin die Maximalgeschwindigkeit und nicht etwa die KM des Glucosetransportsystems verändert. Im Gegensatz zur Fett- und Muskelzelle verfügt die Leberzelle nicht über ein Insulin-abhängiges Glucosetransportsystem. Sie besitzt wie die E-Zelle den Glucosetransporter GLUT-2, welcher aufgrund seiner KM eine Glucoseaufnahme in Abhängigkeit von der extrazellulären Glucosekonzentration gewährleistet. Eine Insulin-abhängige Translokation zwischen Plasmamembran und intrazellulären Vesikeln findet beim GLUT-2 nicht statt. Da Hepatozyten eine sehr aktive Glucokinase besitzen, wird von ihnen Glucose proportional dem Glucoseangebot der extrazellulären Flüssigkeit metabolisiert (7 Kap. 11.4.2).

Wirkungen auf den Glucosemetabolismus. Die gesteigerte Glucoseaufnahme in Muskel- und Fettzelle führt zu einer Reihe von charakteristischen Stoffwechseleffekten. In der Muskelzelle kommt es v.a. zu einer Zunahme der Glycogenbiosynthese, daneben zu gesteigerter Glycolyse. In der Fettzelle wird ein beträchtlicher Teil der vermehrt aufgenommenen Glucose im Hexosemonophosphatweg unter Bildung von NADPH/H+ abgebaut. Außerdem steigt auch in der Fettzelle die Geschwindigkeit der Glycolyse, wobei das gebildete Pyruvat zu Acetyl-CoA decarboxyliert und danach gegebenenfalls für die Fettsäurebiosynthese verwendet wird (7 Kap. 16.1.1). Vermehrt synthetisierte Fettsäuren werden in Triacylglycerine eingebaut, womit Insulin auch in der Fettzelle den Aufbau von Speichermolekülen begünstigt. Von besonderer Bedeutung hierfür ist die durch das Insulin ausgelöste Aktivierung des in den Mitochondrien lokalisierten Pyruvatdehydrogenase-Komplexes. Dies führt zu einer vermehrten Bereitstellung von AcetylCoA für die Fettsäurebiosynthese. ! Insulin senkt den cAMP-Spiegel in Leber und Fettgewebe.

Senkung der cAMP-Konzentration in Hepatozyten. In der Leber treten Stoffwechseleffekte des Insulins mehr als bei anderen Organen im Gegenspiel zu Insulin-Antagonisten, also Glucagon oder Katecholaminen auf. Da die Glucoseaufnahme der Leberzelle Insulin-unabhängig verläuft, müssen etwaige Angriffspunkte des Insulins an der Leber über andere Wege als über das Glucosetransportsystem vermittelt werden. So vermag Insulin wirkungsvoll die durch Glucagon (7 u.) stimulierte Gluconeogenese zu hemmen, daneben stimuliert es die Glycolyse sowie die Glycogensynthese. Die genannten Effekte gehen mit einer durch Insulin verursachten Senkung des cAMP-Spiegels einher. Ursäch-

819 26.1 · Insulin

lich hierfür ist eine durch Insulin hervorgerufene Aktivierung der für den cAMP-Abbau verantwortlichen Phosphodiesterase. Jeder Abfall der cAMP-Konzentration muss zwangsläufig zu einer Hemmung des Glycogenabbaus und zu einer Stimulierung der Glycogensynthese führen. Darüber hinaus verursacht eine niedrige cAMP-Konzentration eine verminderte Phosphorylierung der Fructose-6phosphat-2-Kinase, was nach dem in 7 Kap. 11.6.2 dargestellten Mechanismus zur gesteigerten Bildung von Fructose-2,6-bisphosphat und damit zur gesteigerten Glycolyse führen muss. Wahrscheinlich beruht die unter Insulin beobachtete Hemmung der Ketonkörperproduktion auch auf dem beschriebenen Abfall des cAMP. Senkung der cAMP-Konzentration in Fettzellen. In der

Fettzelle, nicht aber in der Muskelzelle erzielt Insulin eine ähnliche inhibitorische Wirkung auf die durch Insulinantagonistische Hormone stimulierte cAMP-Bildung. Dieses Phänomen bildet die Basis des schon lange bekannten antilipolytischen Effektes von Insulin am Fettgewebe. Dieser äußert sich besonders eindrucksvoll in dem in . Abb. 26.8 dargestellten Verhalten von Blutglucose- und Fettsäurekonzentration bei der Therapie eines Patienten mit diabetischem Koma. Neben der Senkung der Blutglucosespiegel zeigt sich auch ein deutlicher Abfall der Fettsäurespiegel als Hinweis dafür, dass Insulin die Lipolyse der Fettzelle hemmt. Stimulierung der K+-Aufnahme. Besonders in Fettgewebe

und Muskulatur, aber auch in anderen Geweben, kommt es nach Insulingabe sehr schnell zu einer Steigerung der K+-Aufnahme. Dieser Effekt kommt dadurch zustande, dass das Hormon – ähnlich wie bei der Steigerung der Glucoseaufnahme (7 o.) – eine schnelle Translokation von intrazellulär vesikulär gebundenen Na+/K+-ATPase-Molekülen in die Plasmamembran stimuliert (7 Kap. 28.5.1). ! Insulineffekte auf Wachstum und Proteinbiosynthese sind erst nach Stunden bis Tagen nachweisbar.

Langfristige Insulinwirkungen. Die Latenzzeit bis zum

Wirkungseintritt der oben genannten Insulineffekte beträgt einige Sekunden bis höchstens wenige Minuten. Anders ist es dagegen mit Insulinwirkungen auf Wachstum und Proteinbiosynthese. Diese spielen sich auf der Ebene der Induktion bzw. Repression einzelner Enzyme ab oder bestehen in einer allgemeinen Stimulierung des Wachstums. Auf jeden Fall benötigen sie erhebliche Latenzzeiten. Insulin-abhängige Genregulation. Von immer mehr Genen wird bekannt, dass ihre Transkription durch Insulin reguliert wird. Meist handelt es sich um Enzyme, die an Schlüsselstellen des Kohlenhydrat- oder Fettstoffwechsels stehen. . Tab. 26.3 enthält eine Auswahl derartiger Enzyme. Im Fettgewebe wird die Expression der für die Umwandlung von Glucose in Fettsäuren benötigten Transportpro-

. Abb. 26.8. Antilipolytischer Effekt des Insulins. Konzentrationsabfall von Glucose und nicht-veresterten Fettsäuren im Blutplasma während der Therapie eines Coma diabeticum

teine und Enzyme durch Insulin induziert. Ein weiteres wichtiges, unter Insulinregulation stehendes Enzym ist die Lipoproteinlipase. Dieses für die Aufnahme von Triacylglycerinen aus den VLDL des Plasmas verantwortliche Enzym fehlt bei Insulinmangel im Fettgewebe fast vollständig, seine Aktivität lässt sich jedoch durch Zugabe von Insulin normalisieren (7 Kap. 12.1.3). Auch in der Leber . Tabelle 26.3. Enzyme, deren Biosynthese durch Insulin reguliert wird (Auswahl) Gewebe

Insulin Induziert

Fettgewebe

GLUT-4 Phosphofructokinase Pyruvatkinase Acetyl-CoACarboxylase Fettsäuresynthase Lipoproteinlipase

Leber

Glucokinase Phosphofructokinase Pyruvatkinase Acetyl-CoACarboxylase Fettsäuresynthase

Muskulatur

GLUT-4 Aminosäuretransport-Systeme

Reprimiert

Pyruvatcarboxylase PEP-Carboxykinase Fructose-2,6Bisphosphatase Glucose-6Phosphatase

26

820

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

beeinflusst Insulin in spezifischer Weise den Enzymbestand. So dient es als Induktor für die Glycolyse-spezifischen Enzyme 4 Glucokinase 4 Phosphofructokinase und 4 Pyruvatkinase Gleichzeitig reprimiert es die Biosynthese von Schlüsselenzymen der Gluconeogenese wie 4 Pyruvatcarboxylase 4 Phosphoenolpyruvat-Carboxykinase 4 Fructose-1,6-Bisphosphatase und 4 Glucose-6-Phosphatase

26

Im Skelettmuskel ist Insulin ein Induktor des Glucosetransporters GLUT-4, womit die Glucoseaufnahme und der Glucoseumsatz dieses Gewebes unter Insulinkontrolle stehen. Außerdem stimuliert Insulin die Aufnahme der Aminosäuren Alanin, Glycin, Serin, Threonin, Prolin, Histidin und Methionin; in wieweit sich dies auch auf andere Aminosäuren erstreckt, ist noch nicht sicher bekannt. Dieser Insulineffekt lässt sich durch Hemmstoffe der Proteinbiosynthese blockieren und beruht möglicherweise auf einer Insulinabhängigen Induktion der für die einzelnen Aminosäuren benötigten Transportsysteme. Wachstumswirkung des Insulins. Aus Untersuchungen

an isolierten Geweben und Zellen weiß man, dass Insulin die Proteinbiosynthese stimuliert. Diese Wirkung beruht dabei nicht nur auf einem gesteigerten Aminosäuretransport (7 o.), sondern auch auf einer Insulin-abhängigen Phosphorylierung ribosomaler Proteine und einer damit verbundenen Beschleunigung der Translationsmaschinerie. ! Insulin ist das wichtigste anabole Hormon des Organismus.

Fasst man die geschilderten Insulinwirkungen auf den Stoffwechsel von Leber, Muskulatur und Fettgewebe zusammen, so stellt sich Insulin als ein anabol wirksames Hormon dar. Seine Sekretion wird durch ein erhöhtes Substratangebot im Blut, vornehmlich durch Glucose ausgelöst. Es sorgt durch seine Wirkung auf die Glucosetransportsysteme von Muskulatur und Fettzelle mit nachgeschalteten Effekten auf verschiedene Enzymsysteme für die effiziente Speicherung dieses Substratangebotes in Form von Glycogen und Triacylglycerinen. Unterstützt wird diese Insulinwirkung durch die gleichzeitig erfolgende Blockade der Stoffwechseleffekte kataboler Hormone (Glucagon, Katecholamine). Insulin fördert die Aufnahme verschiedener Aminosäuren in die Gewebe und damit die Proteinbiosynthese.

26.1.7

Molekularer Wirkungsmechanismus

Während das physiologische Wirkungsspektrum des Insulins ein klares Bild seiner biologischen Funktionen ergibt, kann die Frage nach seinem molekularen Wirkungsmechanismus auch heute noch nicht in allen Teilen befriedigend beantwortet werden. Fest steht, dass die primäre Insulinwirkung auf molekularer Ebene auf der Bindung des Insulins an einen spezifischen Transmembranrezeptor, den Insulinrezeptor, beruht. ! Der Insulinrezeptor ist ein tetrameres integrales Membranprotein.

Die Struktur des Insulinrezeptors. In . Abb. 26.9 sind der Aufbau und die Membranintegrierung des Insulinrezeptors dargestellt. Er ist ein tetrameres integrales Membranprotein aus je zwei identischen Untereinheiten der Struktur D2E2 und einer Molekülmasse von ca. 460 kDa. Die einzelnen Untereinheiten sind durch Disulfidbrücken miteinander verknüpft. Ein tetrameres Rezeptormolekül bindet jeweils ein Insulinmolekül. Für die Insulinbindung sind die beiden nicht in die Plasmamembran integrierten D-Untereinheiten verantwortlich. Jede E-Untereinheit stellt eine typische Rezeptor-Tyrosinkinase (7 Kap. 25.7.1) dar. Biosynthese des Insulinrezeptors. Das InsulinrezeptorGen liegt auf Chromosom 19. Es umfasst 22 Exons; je 11 dieser Exons codieren für eine D- und eine E-Untereinheit. Das primäre Translationsprodukt des Insulinrezeptor-Gens ist zunächst ein einkettiger Prorezeptor. Die im endoplasmatischen Retikulum erfolgende Dimerisierung von zwei Prorezeptoren wird durch die Ausbildung von zwei Disulfidbrücken stabilisiert. Im Golgi-Apparat erfolgt dann die proteolytische Spaltung der dimerisierten Prorezeptoren durch eine Prohormon-Konvertase und die N-Glycosylierung an den D-Untereinheiten, sodass der fertige Rezeptor in die Plasmamembran eingebaut werden kann. ! Die Phosphorylierung definierter Tyrosinreste in der EUntereinheit des Insulinrezeptors ist eine unabdingbare Voraussetzung für die Weiterleitung des Insulinsignals in die Zelle.

Aktivierung des Insulinrezeptors. Die Bindung des In-

sulinmoleküls an die extrazellulär gelegenen D-Untereinheiten des Insulinrezeptors löst eine Konformationsänderung im Rezeptormolekül aus, welche die Tyrosinkinase im cytosolischen Abschnitt der E-Untereinheit aktiviert. So kann die ATP-abhängige Autophosphorylierung der E-Untereinheiten an mehreren Tyrosinresten in Gang gesetzt werden. Durch Phosphorylierung des Tyrosin 960 nahe der Plasmamembran wird eine Bindungsstelle für Insulinrezeptorsubstrat-1 (IRS-1, 7 u.) geschaffen. Die zusätzliche Phosphorylierung dreier Tyrosinreste innerhalb der Tyrosinkinase-Domäne bewirkt eine maximale Aktivierung der Tyrosinkinase.

821 26.1 · Insulin

den bevorzugten Substraten des Insulinrezeptors gehören IRS-1 und IRS-2. Sie werden von der InsulinrezeptorTyrosinkinase an zahlreichen Tyrosinresten phosphoryliert, die sich durch die Erkennungssequenz Tyr-MetX-Met (YMXM) auszeichnen. Diese Phosphotyrosinreste bilden wiederum Bindungsstellen für weitere Proteine, v.a. die Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K) sowie das Protein GRB2. Phosphatidylinositol-3-Kinase. Die PI3K bindet mit ihrer

. Abb. 26.9. Struktur des Insulinrezeptors. Die beiden etwa 135 kDa großen D-Untereinheiten des Insulinrezeptors bestehen aus je 731 Aminosäuren und sind über eine Disulfidbrücke miteinander verknüpft. Sie bilden die Insulin-bindende Domäne des Rezeptors. Die beiden 95 kDa großen E-Untereinheiten bestehen aus je 620 Aminosäuren mit einer extrazellulären, einer transmembranären und einer cytosolischen Domäne. Letztere enthält die Tyrosinkinase-Aktivität, die Bindungsstelle für IRS-Proteine (Juxtamembrandomäne) sowie eine C-terminale regulatorische Sequenz

Modulation der Rezeptor-Tyrosinkinase-Aktivität. Der

Insulinrezeptor kann neben der Phosphorylierung an Tyrosinresten auch an Serin- und Threoninresten phosphoryliert werden. Es gibt Hinweise dafür, dass der Insulinrezeptor selbst eine intrinsische Serinkinaseaktivität besitzt und hierdurch eine Serinphosphorylierung im Bereich der E-Untereinheit auslösen kann. Daneben kann der Insulinrezeptor auch als Substrat verschiedener Serinkinasen wie beispielsweise der Proteinkinase C (7 Kap. 25.7.1) und der Proteinkinase A (7 Kap. 25.6.2) dienen. Obwohl man die Serinphosphorylierung des Insulinrezeptors insgesamt noch nicht vollständig versteht, scheint nach bisherigen Erfahrungen hierdurch in den meisten Fällen eine negative Rückkoppelung auf das Insulinsignal, also eine Hemmung des Signalkomplexes ausgelöst zu werden. ! Die Insulinrezeptorsubstrate werden in den Geweben des Körpers unterschiedlich stark exprimiert, wodurch eine Gewebe-spezifische Weiterleitung des Insulinsignals möglich ist.

Weiterleitung des Insulinsignals. Nach Aktivierung der Tyrosinkinase sowie Autophosphorylierung der E-Untereinheit kommt es zur Bindung sog. docking-Proteine (Adapter-Proteine) an definierte Phosphotyrosine des Insulinrezeptors. Die wichtigsten docking-Proteine sind die Insulinrezeptorsubstrate (IRS). Von diesen sind inzwischen drei hoch homologe Formen (IRS-1, -2 und -4) mit Molekülmassen von 130–190 kDa beim Menschen beschrieben worden (IRS-3 kommt nur im Genom von Nagern vor). Zu

regulatorischen Untereinheit p85 an IRS-1, wodurch die katalytische Untereinheit des Enzyms (p110) aktiviert wird (. Abb. 26.10). Hierdurch wird Phosphatidylinositol-4,5bisphosphat (PIP-4,5-P2) zu Phosphatidylinositol-3,4,5trisphosphat (PIP-3,4,5-P3) phosphoryliert. An das so modifizierte Membranphospholipid binden v.a. zwei Enzyme: 4 Die phosphoinositide-dependent kinase (PDK) wird hierdurch aktiviert und phosphoryliert die 4 Proteinkinase B (PKB) an Seryl- und ThreonylResten, wodurch das Enzym aktiviert wird. Allerdings muss es hierfür vorher an PIP-3,4,5-P3 gebunden haben ! Durch Einsatz von Inhibitoren und gezielte Mutagenese konnte gezeigt werden, dass PI3K und PKB wichtig für die metabolischen Effekte des Insulins sind.

Die gezielte gentechnische Ausschaltung einzelner Proteine des oben dargestellten Signaltransduktionsmechanismus hat gezeigt, dass die PI3K-abhängige Aktivierung der PKB eine notwendige Voraussetzung für die Insulin-stimulierte Translokation von GLUT-4 in die Plasmamembran ist. Es ist allerdings auch klar, dass sie alleine nicht ausreicht, um den Insulineffekt auf die Glucoseaufnahme zu erklären. Die Natur dieses PI3K-unabhängigen Schrittes ist noch unklar. Auf jeden Fall sind zusätzliche Signalprozesse nötig, die, wie zumindest in Fettzellen gezeigt werden konnte, in den Caveolae (7 Kap. 2.2.6) ablaufen. Auslöser ist eine direkte Interaktion des Insulinrezeptors mit den Hauptstrukturproteinen der Caveolae, den Caveolinen. Dies induziert durch Protein-Protein-Wechselwirkungen eine Kaskade von Vorgängen, welche zur Aktivierung des kleinen G-Proteins TC10 und zur GLUT-4-Translokation führt. Auch der TC10-Weg, der im Detail noch nicht ausreichend charakterisiert ist, ist alleine nicht in der Lage, eine maximale Glucoseaufnahme zuzulassen, sondern bewirkt dies synergistisch mit dem PI3K-Signalweg. Neben der Rolle der PKB für die Aktivierung des Glucosetransportsystems wurde inzwischen auch gezeigt, dass PKB ein zentrales Signalelement für die Insulin-stimulierte Glycogensynthese darstellt (. Abb. 26.10). Sie phosphoryliert und inaktiviert die Glycogensynthasekinase-3 (GSK3), wodurch die Glycogensynthase in der aktiven, dephosphorylierten Form bleibt (7 Kap. 11.5). In Leber und Skelettmuskel aktiviert Insulin über PI3K und PKB außerdem die cAMP-spezifische Phosphodiesterase-3B (PDE3B), welche cAMP zu AMP hydrolysiert und so die intrazellulären cAMP-Spiegel sinken lässt.

26

822

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

26 . Abb. 26.10. Intrazelluläre Signalübertragung des Insulins. Nach Phosphorylierung von IRS-Proteinen an YMXM-Motiven durch den Insulinrezeptor bestehen zwei Möglichkeiten: Bindung und Aktivierung der PI3-Kinase führt zu metabolischen Insulineffekten

(rechts), alternativ kommt es durch Bindung von GRB2 und die anschließende Aktivierung der MAP-Kinasekaskade zu Änderungen der Genexpression (links). (Einzelheiten 7 Text)

Dies hat unweigerlich im Muskel eine Abnahme der Glycogenolyse und im Fettgewebe eine Hemmung der Lipolyse zur Folge. Auch eine Reihe weiterer Insulineffekte auf die Glycolyse in Leber, Skelettmuskulatur und Herzmuskel sind offensichtlich von der Aktivierung von PI3K und PKB abhängig, wenngleich der molekulare Mechanismus nicht in jedem Fall vollständig aufgeklärt ist (7 Kap. 11.5). Die PKB-abhängige Aktivierung der Phosphofructokinase-2 (PFK2) stellt eine Möglichkeit der Insulin-abhängigen Stimulation der Glycolyse dar.

GRB2. Auf der Ebene der IRS-Proteine führt eine weitere Reaktionskaskade zur Regulation der Genexpression. Diese wird, wie in . Abb. 26.10 dargestellt, über die Signalproteine GRB2, SOS und Ras hin zur Mitogen-aktivierten Proteinkinase (MAPK)-Kaskade (7 Kap. 25.4.3) geleitet. Proteinkinasen der MAPK-Familie können zudem IRS-1 an bestimmten Serinen phosphorylieren. Hierdurch wird IRS-1 in seiner Aktivität inhibiert, sodass man heute davon ausgeht, dass MAPK das Insulinsignal in Form einer negativen Rückkoppelung wieder abschalten können.

In Kürze Insulin wird in den E-Zellen der Langerhans’schen Inseln des Pankreas gebildet. Es ist das wichtigste anabole Hormon des Organismus. Es hat folgende Wirkungen: 4 Insulin beeinflusst den Kohlenhydratstoffwechsel akut durch Stimulierung des Glucosetransportes in Fettgewebe und Muskulatur sowie längerfristig durch Induktion von Glycolyse-Enzymen und Repression von Gluconeogenese-Enzymen 4 Durch die Aktivierung einer cAMP-Phosphodiesterase führt es zu erniedrigten intrazellulären cAMPKonzentrationen. Hierdurch werden Glycogenabbau und Lipolyse gehemmt und die Glycogensynthese und Liponeogenese stimuliert

4 Darüber hinaus hat Insulin einen direkten stimulierenden Einfluss auf Glycogensynthese, Liponeogenese und Proteinbiosynthese Alle Wirkungen des Insulins beruhen auf seiner Bindung an einen membranständigen Insulinrezeptor, der zur Familie der Tyrosinkinase-Rezeptoren gehört. Die Insulinbindung an den Rezeptor löst eine Rekrutierung von Insulinrezeptorsubstrat an den Rezeptor aus, von dem aus die verschiedenen Insulineffekte ihren molekularen Ursprung nehmen.

823 26.2 · Glucagon

26.2

Glucagon

26.2.1

Struktur

Glucagon ist ein Peptidhormon aus 29 Aminosäuren mit einer Molekülmasse von 3,485 kDa. Es wird in den α-Zellen der Langerhans’schen Inseln des Pankreas, also in unmittelbarer Nachbarschaft zum Produktionsort des Insulins gebildet. Alle Aminosäuren des Glucagons sind für seine biologische Aktivität erforderlich.

26.2.2

Biosynthese und Sekretion

Glucagonbiosynthese und -reifung. Glucagon, dessen Gen

auf dem humanen Chromosom 2 zu finden ist, wird wie viele Peptidhormone in Form eines wesentlich größeren Präkursor-Moleküls synthetisiert. Es handelt sich um das etwa 18 kDa große Prä-Proglucagon, welches außer in den D-Zellen der Langerhans’schen Inseln auch in der intestinalen Mukosa (Enteroglucagon, 7 Kap. 32.1.6) und im Zentralnervensystem vorkommt. N-terminal trägt es eine Signalsequenz, die wie bei Prä-Proinsulin für die Einschleusung des entstehenden Peptids in das Lumen des endoplasmatischen Retikulums verantwortlich ist. Nach der Abtrennung der Signalsequenz im ER entsteht das etwa 12 kDa große Proglucagon (160 Aminosäuren). . Abb. 26.11 zeigt seinen Aufbau sowie seine proteolytische Prozessierung.

. Abb. 26.11. Aufbau und proteolytische Prozessierung des Proglucagons. Das Präkursorprotein enthält die Sequenzen von Glucagon sowie GLP-1 und GLP-2. In den D-Zellen der Langerhans’schen Inseln des Pankreas erfolgt eine schrittweise Spaltung dieses

! Neben dem Glucagon enthält das Proglucagon-Molekül die Aminosäuresequenz für zwei weitere Peptide, deren Strukturen der des Glucagons homolog sind und die infolgedessen als Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) (29 Aminosäuren) und GLP-2 (33 Aminosäuren) bezeichnet werden.

Die jeweiligen Peptide sind durch Sequenzen basischer Aminosäuren voneinander getrennt, welche Spaltstellen für Prohormon-Konvertasen darstellen. In den α-Zellen der Langerhans’schen Inseln entsteht durch Prohormon-Konvertase-2-katalysierte Proteolyse zunächst ein N-terminales, als Glicentin bezeichnetes Protein sowie ein C-terminales Fragment, das Major Proglucagonfragment. Das letztere wird jedoch in den D-Zellen vollständig abgebaut. Glicentin wird durch Prohormon-Konvertase-2 weiter proteolytisch gespalten, wobei je nach Spaltstelle das 9 kDa große 9KGlucagon bzw. das Oxyntomodulin als Zwischenprodukte entstehen, die jedoch rasch zu fertigem Glucagon prozessiert werden. GLPs. In der intestinalen Mukosa und im Gehirn wird Proglucagon durch ein Zusammenspiel der ProhormonKonvertasen-1 und -2 prozessiert. Hier sind die wichtigsten aus der proteolytischen Spaltung hervorgehenden Produkte GLP-1 und GLP-2. Von beiden weiß man, dass sie nach der Nahrungsaufnahme von den L-Zellen des Intestinaltrakts freigesetzt werden. GLP-1 ist ein Inkretin und stimuliert als solches die Insulinsekretion der E-Zellen

Präkursors an basischen Aminosäuren (K und R), sodass als wichtigstes Spaltprodukt Glucagon entsteht. Die verschiedenen Zwischenprodukte der Spaltungsreaktion konnten ebenfalls in den D-Zellen nachgewiesen werden

26

824

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

Glucagonsekretion. Auch die Glucagonsekretion erfolgt

in Abhängigkeit von der extrazellulären Glucosekonzentration. ! Glucose beeinflusst die Sekretion von Insulin und Glucagon in reziproker Weise.

26

der Langerhans’schen Inseln (7 Kap. 26.1.2). Daneben deuten neuere Daten darauf hin, dass GLP-1 auch auf das hypothalamische Appetitzentrum Einfluss nehmen und als Sättigungsfaktor wirken kann. GLP-2 reguliert die Motilität und Nährstoffresorption des Dünndarms sowie das Wachstum der gastrointestinalen Epithelzellen. Die Rezeptoren für GLP-1 und GLP-2 sind eng mit dem Glucagonrezeptor (7 u.) verwandt.

Anders als beim Insulin ist ein Abfall der Glucosekonzentration der auslösende Stimulus für die Glucagonabgabe. So lässt sich nach mehrtägiger Nahrungskarenz ein Abfall der Insulin- und ein Anstieg der Glucagonkonzentration im Blut beobachten, der zeitlich genau dem Abfall der Blutglucosekonzentration entspricht (. Abb. 26.12). Auch an isolierten Langerhans’schen Inseln führt jeder Anstieg der Glucosekonzentration im Medium zu einem Abfall der Glucagonsekretion. Dieser Befund trifft allerdings nicht für alle physiologischen Bedingungen zu. Außer durch Glucose kann nämlich die Glucagonsekretion auch durch die Nahrungszusammensetzung beeinflusst werden. Während nach einer kohlenhydratreichen Mahlzeit die Insulinkonzentration im Blut ansteigt und diejenige des Glucagons abfällt, findet sich nach einer proteinreichen Mahlzeit ein Anstieg sowohl der Insulin- als auch der Glucagonkonzentration (. Abb. 26.13). Der biologische Sinn dieses Effektes liegt wohl darin, dass die nach einer proteinreichen Mahlzeit vermehrt resorbierten Aminosäuren die Insulinsekretion übermäßig stimulieren und dadurch eine Hypoglykämie auslösen könnten. Diese wird durch die gesteigerte Glucagonsekretion verhindert. Verbindungen, die die vermehrte Glucagonsekretion auslösen, sind sowohl die

. Abb. 26.13. Insulin- und Glucagonsekretion nach verschiedenen Mahlzeiten. Links: Nach einer proteinreichen Mahlzeit (Mittel-

werte +/– Standardabweichung). Rechts: Nach einer kohlenhydratreichen Mahlzeit (Mittelwerte +/– Standardabweichung)

. Abb. 26.12. Zusammenhang zwischen Blutglucose-, Plasmainsulin- und Plasmaglucagon-Konzentrationen. Mittlere Glucagon-, Insulin- und Glucosekonzentrationen vor und während 3–4-tägigem totalen Fastens. Die Bestimmungen wurden jeweils um 9 Uhr morgens durchgeführt

825 26.2 · Glucagon

resorbierten Aminosäuren selbst wie auch das bei proteinreichen Mahlzeiten gesteigert produzierte Cholecystokinin-Pankreozymin (7 Kap. 32.1.6). Modulation der Glucagonsekretion. E-adrenerge Stimulation sowie die Inkretine GIP und GLP-1 (7 Kap. 26.1.3) stimulieren die Glucagonfreisetzung. Erhöhte Spiegel von Fettsäuren, Insulin und Somatostatin hemmen die Glucagonfreisetzung. Plasmakonzentration. Die Plasmakonzentration des Glu-

cagons variiert nach 12-16stündigem Fasten individuell zwischen 25 und 150 pg/ml.

26.2.3

Biologische Wirkungen

Wirkung auf die Glucosehomöostase. Die wohl wichtigste biologische Funktion von Glucagon ist die Sicherung und Aufrechterhaltung einer ausreichenden Glucosefreisetzung aus der Leber. ! Glucagon ist wesentlich an der Aufrechterhaltung normaler Blutglucosespiegel und der Korrektur von Hypoglykämien beteiligt, wozu es auch therapeutisch eingesetzt wird.

Der Hauptwirkort des Glucagons ist die Leber, an die das Hormon nach seiner Sekretion zunächst und in höchster Konzentration gelangt. Am Hepatozyten stimuliert Glucagon die Adenylatcyclase, sodass seine Effekte auf den Leberstoffwechsel sich auf die dadurch erhöhten cAMPKonzentrationen zurückführen lassen. So kommt es zu gesteigerter Glycogenolyse durch Aktivierung der Phosphorylase mit gleichzeitig gehemmter Glycogenbiosynthese. Darüber hinaus führt cAMP über die in 7 Kap. 11.6 geschilderten Mechanismen zu einer Hemmung der hepatischen Glycolyse und Stimulierung der Gluconeogenese. Damit ist Glucagon an der Leber ein Insulin-antagonistisch wirkendes Hormon, dessen Aktivität bei kataboler Stoffwechsellage notwendig ist. Es wird bei Substratmangel (Glucosemangel) im Blut aus den D-Zellen der Langerhans’schen Inseln freigesetzt und stimuliert die Mobilisierung von Glucosespeichern wie auch die Glucoseneusynthese.

nierenrindenzellen. Beim Menschen ruft eine kurzzeitige intravenöse Gabe von Glucagon eine deutliche Zunahme der Blutcortisolspiegel hervor, sodass man eine stimulatorische Wirkung von Glucagon auf die Glucocorticoidsynthese der Nebennierenrinde annehmen kann. Welche physiologische Bedeutung dieser nicht-klassischen Wirkung von Glucagon zukommt, ist bisher noch nicht ausreichend erforscht. Eine Antwort könnte jedoch in der Stressantwort bei Hypoglykämie liegen. So könnte die vermehrte Glucagonfreisetzung im Rahmen einer akuten Hypoglykämie auch die Freisetzung des Stresshormons Cortisol direkt beeinflussen und hierdurch zu einer adäquaten kompensatorischen Reaktion auf die Unterzuckerung beitragen, da auch Cortisol die hepatische Glucosefreisetzung stimuliert. Glucagon ist imstande, im Fettgewebe von Nagern und anderen Versuchstieren in physiologischen Konzentrationen die Adenylatcyclase zu aktivieren. Dadurch wirkt es lipolytisch und Insulin-antagonistisch. Auch am menschlichen Fettgewebe sind Glucagonrezeptoren nachweisbar.

26.2.4

Molekularer Wirkungsmechanismus

Der Glucagonrezeptor. Alle bekannten Glucagoneffekte

werden durch einen in der Plasmamembran lokalisierten Glucagonrezeptor vermittelt. Er wird in einer Reihe von Geweben exprimiert, wobei die Leber ohne Zweifel der wichtigste Ort für die Glucagonwirkung ist. ! Der 55 kDa große Glucagonrezeptor ist ein klassischer Vertreter der heptahelicalen Transmembranrezeptoren und ist über heterotrimere stimulatorische G-Proteine an das Adenylatcyclase-System gekoppelt.

Dies macht verständlich, warum viele Glucagonwirkungen durch cAMP imitiert werden können. Außerdem interagiert der Glucagonrezeptor mit dem G-Protein Gq, welches eine Erhöhung der cytosolischen Ca2+-Konzentration einleitet. Sowohl die intrazelluläre cAMP-Erhöhung als auch die Erhöhung der intrazellulären Calciumspiegel sind für das intrazelluläre Glucagonsignal verantwortlich (. Abb. 26.14). Weiterleitung des Glucagonsignals. Glucagon bindet an

Langfristige Glucagonwirkung. Unterstützt wird die ra-

sche Glucagonwirkung durch die langfristige cAMP-Wirkung auf die Genexpression. cAMP dient als Repressor von Schlüsselenzymen der Glycolyse und als Induktor von solchen der Gluconeogenese (7 Kap. 11.6). Extrahepatische Glucagonwirkungen. Inzwischen ist

klar, dass Glucagonrezeptoren auf unterschiedlichen Zellarten vorkommen. So werden in letzter Zeit auch immer mehr nicht-klassische Wirkungen von Glucagon bekannt. Glucagonrezeptoren finden sich im Bereich der Neben-

den extrazellulären Bereich des Rezeptors, wobei sowohl der N-terminale Bereich als auch die transmembranären Regionen eine wesentliche Rolle spielen. Infolge der Ligandenbindung kommt es zu einer Konformationsänderung im Rezeptorprotein, welche nun die intrazelluläre Bindung und Aktivierung des stimulatorischen G-Proteins (Gs) verursacht (7 Kap. 25.6.2). Für die Kopplung von Gs-Protein an die intrazelluläre Region des Glucagonrezeptors sind nach neueren Erkenntnissen Sequenzen aus der zweiten und dritten intrazellulären Schleife notwendig. Die Aktivierung des Gs-Proteins beruht auf einem Austausch von GDP

26

826

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

26

. Abb. 26.14. Signalweiterleitung über den Glucagonrezeptor. Glucagon bindet an die extrazelluläre Domäne des Rezeptors und löst eine Konformationsänderung aus. Hierdurch kann ein heterotrimeres stimulatorisches G-Protein (GS) vom Rezeptor gebunden und aktiviert werden. Die D-Untereinheit von GS löst dann eine Aktivierung der Adenylatcyclase mit Erhöhung der intrazellulären cAMP-Spiegel aus

(rechts). Auch das G-Protein Gq wird durch den Rezeptor aktiviert, welches die Phospholipase C und damit den Inositol-1,4,5-trisphosphat-Weg stimuliert. Dies führt zur Erhöhung der intrazellulären Calciumspiegel (links). Beide intrazellulären Signale sind für die metabolischen Wirkungen des Glucagons erforderlich

gegen GTP. Schließlich dissoziiert die D-Untereinheit des aktiven Gs-Proteins ab und stimuliert die Adenylatcyclase, welche eine Erhöhung der intrazellulären cAMP-Spiegel hervorruft. Hierdurch kann die Proteinkinase A aktiviert werden (. Abb. 26.14). Außerdem initiiert der aktivierte Rezeptor einen GDP-GTP-Austausch im heterotrimeren

G-Protein Gq, welches die Phospolipase CE aktiviert und so die IP3-Kaskade auslöst (7 Kap. 25.6.3). Dies wiederum löst die Erhöhung der cytosolischen Ca2+-Konzentration aus. Weitere intrazelluläre Signalschritte bis zur Auslösung der biologischen Effekte des Glucagons folgen. Diese sind jedoch bislang noch nicht im Detail aufgeklärt.

In Kürze Glucagon ist das zweite Hormon der Langerhans’schen Inseln des Pankreas und an der Leber ein bedeutender Insulinantagonist. Es wird beim Absinken der Blutglucosekonzentration, z.B. bei Nahrungskarenz freigesetzt und dient der Bereitstellung des Brennstoffs Glucose für alle obligat auf Glucose angewiesenen Gewebe. Dies wird durch eine cAMP-vermittelte Stimulation der hepatischen

26.3

Katecholamine

26.3.1

Struktur

Das Nebennierenmark ist entwicklungsgeschichtlich ein Abkömmling eines sympathischen Ganglions, in welchem die postganglionären Zellen ihre Axone verloren haben und die von ihnen synthetisierten Transmitter als Hormone direkt in die Blutbahn abgeben. Dementsprechend ist auch bei einigen Species Noradrenalin (früher: Norepinephrin) das im Ne-

Glycogenolyse und Gluconeogenese bewerkstelligt. Außer in den D-Zellen der Langerhans’schen Inseln wird der Glucagonpräkursor auch im Intestinaltrakt synthetisiert. Hier wird er jedoch proteolytisch im Wesentlichen zu GLP-1 und GLP-2 prozessiert. GLP-1 und GLP-2 werden bei Nahrungszufuhr freigesetzt. GLP-1 ist ein wichtiger Stimulator der Insulinsekretion.

bennierenmark synthetisierte Hormon. Bei anderen Arten, z.B. dem Menschen oder dem Hund, wird dagegen im Wesentlichen Adrenalin (früher: Epinephrin) synthetisiert, das durch Methylierung von Noradrenalin entsteht (. Abb. 26.15). Adrenalin und Noradrenalin werden auch als Katecholamine bezeichnet, da sie chemisch gesehen Derivate des Katechols (1,2-Dihydroxybenzol) sind (7 Kap. 31.3.5). Außer durch das Nebennierenmark wird Noradrenalin auch durch die synaptischen Endigungen der adrenergen Neuronen gebildet und gespeichert. Es wirkt hier als Neurotransmitter.

827 26.3 · Katecholamine

. Abb. 26.15. Biosynthese der Katecholamine

26.3.2

Biosynthese und Sekretion

Katecholaminbiosynthese. Die Enzyme der Katecholaminbiosynthese finden sich sowohl in den adrenergen, postganglionären Nervenendigungen als auch in den Zellen des Nebennierenmarks. ! Ausgangspunkt für die Katecholaminbiosynthese ist die Aminosäure Tyrosin, welche aus der Nahrung stammt oder in der Leber aus Phenylalanin synthetisiert worden ist.

Die Biosyntheseschritte sind in . Abb. 26.15 dargestellt. Bis zum Noradrenalin hin ist der Syntheseweg im Nebennierenmark und in postganglionären Nervenzellen identisch. Da sich die beteiligten Enzyme in verschiedenen Kompartimenten der Zelle befinden, müssen die Biosynthesezwischenprodukte zusätzlich Transportschritte durchlaufen. Das erste Enzym der Katecholaminbiosynthese ist die Tyrosinhydroxylase. Sie benötigt das Coenzym Tetrahydrobiopterin, zweiwertiges Eisen und molekularen Sauerstoff. Das bei der Reaktion entstehende Dihydrobiopterin muss mit NADPH/H+ wieder reduziert werden, um einem erneuten Reaktionszyklus zur Verfügung stehen zu können (. Abb. 26.16). Das aus Tyrosin gebildete Dihydroxyphenylalanin (Dopa) wird im nächsten Schritt zum biogenen Amin Dihydroxyphenylamin (Dopamin) decarboxyliert. Die aromatische L-Aminosäuredecarboxylase zeigt eine

breite Spezifität für aromatische L-Aminosäuren und ist auch an der Bildung der biogenen Amine Tyramin, Serotonin und Histamin beteiligt. Durch einen spezifischen Carrier wird Dopamin in die chromaffinen Granula des Nebennierenmarks bzw. der postganglionären Neuronen aufgenommen. Hier erfolgt als weiterer Schritt die Bildung von Noradrenalin aus Dopamin. Das hierfür benötigte Enzym, die Dopamin-β-Hydroxylase, ist eine Monooxygenase, welche zweiwertiges Kupfer und Ascorbinsäure benötigt (7 Kap. 15.2.2). Mit Hilfe der PhenylethanolaminN-Methyltransferase erfolgt als letzte Reaktion die N-Methylierung von Noradrenalin zu Adrenalin. Die hierfür benötigte Methylgruppe stammt vom S-Adenosylmethionin (7 Kap. 13.6.4). Da dieses Enzym im Cytosol vorliegt, wird hierzu Noradrenalin aus den Granula ins Cytosol transportiert und das Reaktionsprodukt Adrenalin wieder von den Granula aufgenommen. Regulation der Katecholaminbiosynthese. Angesichts der Bedeutung der Katecholamine für Stressreaktionen aller Art, einschließlich körperlicher Aktivität, Kälteadaptation u.a. ist klar, dass die Katecholaminsynthese sehr genau reguliert sein muss. Dabei spielen sowohl nervale als auch hormonelle Faktoren eine wichtige Rolle (. Abb. 26.17). ! Die Katecholaminbiosynthese wird nerval und durch Glucocorticoide reguliert.

26

828

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

26 . Abb. 26.16. Rolle des Tetrahydrobiopterins bei der TyrosinHydroxylierung. Tetrahydrobiopterin dient als Donor der Reduktions-

äquivalente für die Tyrosinhydroxylase-Reaktion. Seine oxidierte Form, das Dihydrobiopterin, muss mit NADPH/H+ wieder reduziert werden

Speicherung der Katecholamine. Sowohl in den sympathi-

schen Nervenendigungen als auch im Nebennierenmark werden Katecholamine in spezifischen, von einer Membran umhüllten (chromaffinen) Granula gespeichert und durch einen in seinen molekularen Einzelheiten noch unbekannten Mg2+- und ATP-abhängigen Vorgang konzentriert. Sie bilden einen Komplex mit ATP im Verhältnis von 4:1. Außer ATP und Katecholamine enthalten die Sekretgranula die Dopamin-E-Hydroxylase, sowie verschiedene weitere als Chromogranine bezeichnete Proteine. Bei den letzteren handelt es sich um eine Familie von Proteinen, welche an die Membran der Sekretgranula assoziiert sind und über deren Bedeutung noch nichts bekannt ist. . Abb. 26.17. Regulation der Catecholaminbiosynthese. (Einzelheiten 7 Text)

Nervale, über nicotinische Acetylcholinrezeptoren vermittelte Impulse, sind für die Aktivierung der Katecholaminbiosynthese auf der Stufe der Tyrosinhydroxylase sowie der Dopamin-E-Hydroxylase verantwortlich, wobei der Effekt auf einer Induktion beider Enzyme beruht. Glucocorticoide sind schwache Induktoren der Tyrosinhydroxylase und starke der Phenylethanolamin-N-Methyltransferase. Da Katecholamine die CRH- und ACTH-Sekretion im Hypothalamus bzw. in der Hypophyse stimulieren (7 Kap. 27.3), ergeben sich hiermit Verstärkersysteme, die die Produktion großer Mengen an Katecholaminen gewährleisten. Vermindert wird die Katecholaminbiosynthese in Form einer negativen Rückkoppelung durch Adrenalin und Noradrenalin, welche die Tyrosinhydroxylase und Phenylethanolamin-N-Methyltransferase allosterisch hemmen.

Katecholaminsekretion. Bei der Katecholaminsekretion

sowohl aus dem Nebennierenmark wie auch aus den sympathischen Nervenendigungen wandern die Sekretgranula auf ein Ca2+-Signal hin zur Zellmembran, mit der die Granulamembranen verschmelzen, wobei der Granula-Inhalt nach außen abgegeben wird. Durch diese Exozytose treten auch andere Inhaltsstoffe der Sekretgranula wie ATP, Dopamin-E-Hydroxylase sowie Chromogranine in die extrazelluläre Flüssigkeit aus. ! Die Catecholaminsekretion wird durch nervale Reize ausgelöst.

In den sympathischen Nervenendigungen ist dabei eine Erregung der präganglionären Neuronen beteiligt, die Acetylcholin freisetzen, das als chemischer Transmitter wirkt (7 Kap. 31.3.3). Aus entwicklungsgeschichtlichen Gründen bewirken ähnliche Mechanismen auch die Adrenalin- und Noradrenalinausschüttung aus dem Nebennierenmark. Auch hier wird Acetylcholin von den die se-

829 26.3 · Katecholamine

kretorischen Zellen innervierenden präganglionären Neuronen freigesetzt. Acetylcholin löst über eine Depolarisation der postsynaptischen Membran einen Ca2+-Einstrom in die sekretorischen Zellen aus, welcher schließlich das Signal für die Hormonsekretion darstellt.

26.3.3

Biologische Wirkungen

Katecholaminwirkung auf das Herz-Kreislaufsystem. Das

Nebennierenmark bildet zusammen mit den adrenergen Nervenendigungen das adrenerge System. Dieses wird bei körperlicher und psychischer Belastung aktiviert. Katecholamine erhöhen die Kontraktionskraft und Frequenz des Herzens und erweitern die koronaren Blutgefäße. Gleichzeitig verursachen Katecholamine in den peripheren Geweben außer der Skelettmuskulatur eine Vasokonstriktion, was den Blutdruck ansteigen lässt. Metabolische Katecholaminwirkungen. Katecholaminausschüttung führt zur Mobilisierung zellulärer Energiespeicher. Dabei wird die Glycogenolyse und Lipolyse stimuliert, ein gleichzeitiges Wiederauffüllen der Energiespeicher wird zu einem beträchtlichen Anteil durch eine Hemmung der Insulinsekretion (7 Kap. 26.1.3) verhindert. ! Katecholamine bewirken einen Anstieg der Glucose-, Lactat- und Fettsäurekonzentrationen im Blut. Dies gewährleistet die Substratversorgung der in Stresssituationen vermehrt in Anspruch genommenen Gewebe.

Die pleiotropen Effekte der Katecholamine sind nur möglich, weil ihre Wirkungen über mehrere unterschiedliche Rezeptortypen vermittelt werden, deren Expression in verschiedenen Geweben variiert, sodass sich eine große Zahl unterschiedlicher Reaktionsmöglichkeiten auf den Katecholaminstimulus ergibt. Pharmakologische Hemmung der Katecholaminwirkung.

Angesichts der Bedeutung der Katecholamine für die Ent-

stehung des Bluthochdrucks hat es nicht an Versuchen gefehlt, ihre Biosynthese durch geeignete Pharmaka zu hemmen. Obwohl eine Reihe von Hemmstoffen für die entsprechenden Reaktionen gefunden wurde (im Wesentlichen handelt es sich um halogenierte Zwischenprodukte), haben nur das α-Methyltyrosin sowie das α-Methyldopa als Mittel gegen erhöhten arteriellen Blutdruck weitere Verbreitung gefunden. Beide Verbindungen wirken als artifizielle Substrate, aus denen D-Methylnoradrenalin entsteht. Dieses verdrängt Noradrenalin von den D-Adrenozeptoren (7 u.) der Zielzelle, ist jedoch selber unwirksam. Weit verbreitet sind Strukturanaloga der Katecholamine, die die entsprechenden Rezeptoren hemmen. Als kompetitive Hemmstoffe der myokardialen E1-Adrenozeptoren (7 u.) werden v.a. β-Blocker häufig verwendet (7 Lehrbücher der Pharmakologie).

26.3.4

Molekularer Wirkungsmechanismus

Katecholaminrezeptoren (Adrenozeptoren). Aufgrund

von Bindungsstudien sowie des Wirkungsspektrums von synthetisch hergestellten Derivaten der Katecholamine wurde schon sehr früh die Hypothese formuliert, dass diese Hormone über spezifische Rezeptoren von Zellen erkannt werden und unter Vermittlung dieser sog. Adrenozeptoren ihre Wirkung ausüben. Die Fortschritte der Molekularbiologie der letzten Jahrzehnte haben diese Vorstellung in eindrucksvoller Weise bestätigt (. Tab. 26.4). Die schon aufgrund pharmakologischer Untersuchungen postulierte Unterscheidung zwischen D- und E-Adrenozeptoren konnte dahingehend erweitert werden, dass zwei Typen von D-Rezeptoren, α1- und α2-Adrenozeptoren, sowie drei Typen von E-Rezeptoren, β1-, β2- und β3-Adrenozeptoren, molekularbiologisch charakterisiert werden konnten. Auffallend dabei ist, dass sowohl für die D1- wie auch für die D2-Adrenozeptoren jeweils noch drei gewebsspezifisch exprimierte Isoformen nachweisbar sind. Sämtliche bis jetzt klonierte Adrenozeptoren werden durch eigene, auf verschiedenen Chromosomen lokalisierte Gene codiert.

. Tabelle 26.4. Funkton und Mechanismus von Katecholaminrezeptoren Rezeptor

Signaltransduktion

Intrazelluläres Signalmolekül

Effekt

D1

G-Protein vermittelte Aktivierung der Phospholipase Cβ

Inositoltrisphosphat; Ca2+-Freisetzung

Glycogenolyse; Vasokonstriktion u.a. im Splanchnicusgebiet

D2

Gi-Protein vermittelte Hemmung der Adenylatcyclase

Senkung des cAMP-Gehaltes

Hemmung der Lipolyse; Hemmung der Insulinsekretion

β1

Gs-Protein vermittelte Stimulierung der Adenylatcyclase

Steigerung des cAMP-Gehaltes

Steigerung von Glycogenolyse und Gluconeogenese der Leber; Stimulierung der Insulinsekretion; Steigerung der Kontraktionskraft des Herzens

β2

Gs-Protein vermittelte Stimulierung der Adenylatcyclase

Steigerung des cAMP-Gehaltes

Steigerung der Lipolyse des Fettgewebes; Vasodilatation in Skelettmuskulatur

β3

Gs-Protein vermittelte Stimulierung der Adenylatcyclase

Steigerung des cAMP-Gehaltes

Steigerung der Lipolyse und Thermogenese im braunen Fettgewebe

26

830

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

! Alle Adrenozeptoren gehören zur Familie der G-Protein-gekoppelten heptahelicalen Transmembranrezeptoren (7 Kap. 25.3.3).

Signalweiterleitung über α-Adrenozeptoren. Entsprechend

26

ihrem jeweiligen Wirkungsmechanismus erfolgt die GProtein-Kopplung über unterschiedliche heterotrimere G-Proteine. 4 α1-Adrenozeptoren aktivieren solche G-Proteine, die zu einer Stimulierung der Phospholipase CE und damit zu einer IP3-vermittelten intrazellulären Calciumfreisetzung führen (7 Kap. 25.4.5). Dieser Effekt spielt bei der Katecholamin-induzierten Vasokonstriktion eine besondere Rolle 4 α2-Adrenozeptoren sind an ein Adenylatcyclase-inhibierendes G-Protein (Gi) gekoppelt, sodass ihre Aktivierung durch Katecholamine zu einer Senkung des intrazellulären cAMP-Gehalts führt. Dies ist besonders für das Fettgewebe wichtig. Adipozyten der typischen weiblichen Prädilektionsstellen für die Fettansammlung, sog. gynoide Adipozyten, enthalten neben E2(7 u.) besonders viele D2-Adrenozeptoren. Dies bedeutet, dass sie relativ unempfindlich gegenüber der lipolytischen Wirkung von Katecholaminen sind. In der Tat vermindert sich die Zahl der D2-Adrenozeptoren in diesem Gewebe nur während Schwangerschaft und Lactation. Dies deutet darauf hin, dass eine wesentliche Funktion des gynoiden Fettgewebes in der während der Lactationsphase erforderlichen Bereitstellung von Lipiden für die Synthese der Milchfette besteht Signalweiterleitung über β-Adrenozeptoren. Alle bekann-

ten E-Adrenozeptoren sind über stimulatorische G-Proteine (Gs) mit dem Adenylatcyclase-System gekoppelt, steigern also den zellulären cAMP-Gehalt. 4 β1-Adrenozeptoren finden sich u.a. in der Leber, wo sie für die Glucoseproduktion aus verschiedenen Quellen verantwortlich sind. Am Myokard beruht ihre Hauptfunktion in einer Steigerung der Kontraktionskraft des Herzens 4 β2-Adrenozeptoren sind für die Catecholamin-induzierte Steigerung der Lipolyse des Fettgewebes verantwortlich. Außerdem führen sie zu einer Relaxation der glatten Muskulatur sowie der Bronchien und der Blutgefäße der Skelettmuskulatur (Vasodilatation). Die molekulare Basis dieses Effektes beruht zum einen auf cAMP-stimulierter Calciumaufnahme in die Speicher des endoplasmatischen Retikulums. Dies führt zu einem Absinken der cytoplasmatischen Calciumkonzentration in der glatten Muskelzelle und damit zu einer Verminderung der Aktivität der Myosinkinase (. Abb. 26.18). Über E2-Adrenozeptoren ändern Katecholamine den Kontraktionszustand der glatten Muskulatur noch über einen zweiten Mechanismus. Die cAMP-abhängige Proteinkinase (Proteinkinase A) phosphoryliert

. Abb. 26.18. Regulation der Kontraktion der glatten Muskulatur. Die Myosin-ATPase der glatten Muskelzellen ist nur in phosphorylierter Form aktiv. Für die Phosphorylierung wird eine Myosinkinase benötigt, die durch den Ca2+-Calmodulin-Komplex aktiviert wird. Catecholaminrezeptoren können in zweifacher Weise eingreifen. D1-Adrenozeptoren führen über den IP3-Zyklus zu einer Erhöhung der zellulären Calciumkonzentration. Über E2-Adrenozeptoren erhöhte cAMP-Konzentrationen fördern zum einen die Calcium-Sequestrierung im endoplasmatischen Retikulum, zum anderen aktivieren sie die cAMP-abhängige Proteinkinase, welche die Myosinkinase phosphoryliert. Die phosphorylierte Myosinkinase benötigt höhere Ca2+Calmodulin-Konzentrationen, um aktiv zu sein

die Myosinkinase, wodurch deren Affinität zum Calcium-Calmodulin-Komplex wesentlich verändert wird. Im Vergleich zum nicht-phosphorylierten Enzym werden wesentlich höhere Konzentrationen des CalciumCalmodulinkomplexes benötigt, um von der inaktiven in die aktive Form überzugehen. Unter E2-adrenerger Stimulierung reicht die bei Erregung einer glatten Muskelzelle auftretende Konzentrationszunahme an freien Calciumionen (7 Kap. 30.3.2) nicht mehr zur Auslösung eines Kontraktionsvorgangs aus. Dieser Mechanismus liegt u.a. der therapeutischen Wirkung von E2-sympathikomimetisch wirkenden Arzneimitteln zugrunde, die in großem Umfang zur Therapie des Bronchialasthmas eingesetzt werden, welches durch eine gesteigerte Kontraktion der glatten Muskulatur des Bronchialtrakts gekennzeichnet ist 4 β3-Adrenozeptoren finden sich fast ausschließlich im braunen Fettgewebe (7 Kap. 16.1.2), wo sie für eine Steigerung der Lipolyse sowie der Thermogenese verantwortlich sind

831 26.3 · Katecholamine

26.3.5

Plasmaspiegel und Abbau

Plasmaspiegel. Die Plasmaspiegel der Katecholamine sind

mit etwa 1 nmol/l (0,2 ng/ml) für Noradrenalin und 0,2 nmol/l (0,05 ng/ml) für Adrenalin außerordentlich niedrig. Nach beidseitiger Adrenalektomie im Tierexperiment fällt der Plasma-Adrenalinspiegel auf 0 ab, während sich der Noradrenalinspiegel nicht ändert, da der Ausfall der Noradrenalinbiosynthese im Nebennierenmark durch entsprechende Mehrsekretion der adrenergen Nervenendigungen ausgeglichen wird. Abbau der Katecholamine. Adrenalin und Noradrenalin

werden durch eine Kombination von Oxidation und Methylierung zu biologisch inaktiven Produkten abgebaut. Die am Abbau beteiligten Enzyme sind die Monoaminoxidase (MAO) und die Catechol-O-methyltransferase (COMT) (. Abb. 26.19). Die MAO desaminiert Amine, darunter auch Noradrenalin, Adrenalin und Dopamin, wonach die entstehenden Aldehyde entweder zur entsprechenden Säure oxidiert oder zum Alkohol reduziert werden. Die MAO ist in den verschiedensten Geweben nachweisbar und findet sich in der äußeren Mitochondrienmembran. Die COMT ist zur O-Methylierung verschiedener biologisch aktiver Verbindungen wie Noradrenalin, Adrenalin, Dopamin, 3-Hydroxyestradiol, Ascorbat u.a. fähig. Als Methyldonor dient S-Adenosylmethionin (7 Kap. 13.6.4). Der Abbau von zirkulierendem Noradrenalin und Adrenalin beginnt mit der O-Methylierung zu den entsprechenden 3-Methoxyverbindungen Normetanephrin und Metanephrin. Durch MAO werden beide Verbindungen zum 3-Methoxy-4-hydroxymandelsäurealdehyd desaminiert, wonach eine Oxidation zur 3-Methoxy-4-hydroxymandelsäure (Vanillinmandelsäure) erfolgt. Diese wird im Harn ausgeschieden. In den adrenergen Nervenendigungen wird Noradrenalin zunächst durch MAO zum 3,4-Dihydroxymandelsäurealdehyd desaminiert, der zum größten Teil durch COMT ebenfalls in Vanillinmandelsäure umgebaut wird. ! Vanillinmandelsäure stellt das Hauptabbauprodukt der Katecholamine dar.

Um Aufschluss über die Katecholaminsekretion zu erhalten, hat es sich daher bewährt, statt der sehr aufwendigen Bestimmung der Katecholamingehalte des Plasmas die Vanillinmandelsäureausscheidung im Urin über 24 Stunden zu messen, die außerdem Anhaltspunkte über den täglichen Umsatz gibt. . Abb. 26.19. Abbau von Noradrenalin und Adrenalin. Zirkulierendes Adrenalin und Noradrenalin werden in der Leber zuerst mit Hilfe der Catechol-O-methyltransferase O-methyliert und dann durch Monoaminoxidase desaminiert. Durch Oxidation des dabei entstandenen Aldehyds entsteht 3-Methoxy-4-Hydroxymandelsäure (Vanillinmandelsäure), welche das Hauptprodukt des Katecholaminabbaus im Harn darstellt

26

832

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

In Kürze Für die Bewältigung von Stresssituationen sind die Katecholamine Adrenalin und Noradrenalin von ganz besonderer Bedeutung. Sie werden in adrenergen Nervenendigungen sowie im Nebennierenmark aus der Aminosäure Tyrosin synthetisiert. Sie verfügen über ein breites Wirkungsspektrum am Kreislaufsystem sowie auf den Stoffwechsel, das im Wesentlichen die Mobilisierung gespeicherter Substrate zum Ziel hat. Diese Vielfalt von Effekten kommt dadurch zustande, dass der Organismus über mindestens fünf unterschiedliche Katecholamin-

26.4

26

Pathobiochemie: Diabetes mellitus

Wechselwirkung der Hormone. Das koordinierte Zusammenspiel von Insulin und seinen Antagonisten Glucagon sowie den Katecholaminen gewährleistet, dass der Intermediärstoffwechsel des Organismus rasch und flexibel auf Änderungen der Nahrungszufuhr reagieren kann. Ein wesentliches Ziel dieser hormonellen Regulation besteht darin, unabhängig vom jeweiligen Ernährungszustand und der Art eines eventuellen Nahrungsmittels eine weitgehende Konstanz der Zusammensetzung der Körperflüssigkeiten zu erhalten, besonders was das Substratangebot angeht. Im Überschuss aufgenommene Nahrungsstoffe werden im Wesentlichen unter dem Einfluss von Insulin in den Energiedepots des Organismus als Glycogen bzw. Triacylglycerine abgelagert. Im Hungerzustand kommt es zunächst zu einer Abnahme der Substratkonzentration im Blut und damit zu einer Hemmung der Insulinsekretion. Das hierdurch ausgelöste Überwiegen Insulin-antagonistischer Hormone sowie die Steigerung der Glucagonsekretion gewährleistet eine rasche Mobilisierung der gespeicherten Energievorräte. Dabei sorgen komplizierte Regulationsprozesse dafür, dass trotz fehlender Zufuhr die Glucosekonzentration im Blut so hoch bleibt, dass die Energieversorgung des von Glucose abhängigen Zentralnervensystems gedeckt bleibt. Aufgrund dieser Erwägungen nimmt es nicht wunder, dass endokrine Störungen, welche das Verhältnis der genannten Hormone betreffen, rasch zu schweren Erkrankungen führen können. Der Diabetes mellitus ist eine Stoffwechselerkrankung, welche auf einem relativen oder absoluten Insulinmangel beruht. Können infolge einer pathologischen Veränderung der E-Zellen der Langerhans’schen Inseln oder sehr viel seltener durch Bildung eines mutierten Insulins mit fehlerhafter Aminosäuresequenz physiologische Insulinkonzentrationen nicht aufrecht erhalten werden, spricht man von absolutem Insulinmangel. Das durch ihn ausgelöste Krankheitsbild wird als Typ 1-Diabetes bezeichnet. Ein relativer Insulinmangel liegt dann vor, wenn trotz normaler oder sogar leicht erhöhter Insulinkonzentrationen im Blut die metabolische Antwort des Organismus nicht

rezeptoren, die Adrenozeptoren, verfügt. Sie gehören alle in die Familie der heptahelicalen Rezeptoren und benötigen für ihre Wirkung heterotrimere G-Proteine. D1-Adrenozeptoren sind an den IP3-Zyklus gekoppelt, D2-Adrenozeptoren hemmen die Adenylatcyclase-Aktivität, während alle drei E-Adrenozeptoren-Subtypen die Adenylatcyclase stimulieren. Die Antwort einer Zelle auf einen Catecholaminstimulus hängt damit von ihrer Ausstattung mit den unterschiedlichen Rezeptoren ab.

ausreicht. Dies kann u.a. die Folge eines Rezeptor- oder Postrezeptordefekts sein, hierdurch ausgelöste DiabetesFormen werden als Typ 2-Diabetes bezeichnet.

26.4.1

Typ 1-Diabetes mellitus

! Das durch absoluten Insulinmangel ausgelöste Krankheitsbild wird als Typ 1-Diabetes bezeichnet.

Das klassische Krankheitsbild des Diabetes mellitus findet sich beim meist in juvenilem Alter auftretenden Insulinabhängigen Typ 1-Diabetes. Eine durch Autoimmunreaktionen ausgelöste Zerstörung der E-Zellen führt häufig sehr rasch zu einem akuten Insulinmangel. Die Auslösung dieser autoimmunen Destruktion der E-Zellen beim Typ 1-Diabetes ist noch nicht vollkommen verstanden. Es werden jedoch sowohl genetische als auch ernährungsabhängige Faktoren sowie Stress und Virusinfekte diskutiert. Ein Genlocus, der mit der E-Zell-zerstörenden Autoimmunreaktion beim Typ 1-Diabetes in Verbindung gebracht wird, befindet sich auf dem humanen Leukozytenantigen (HLA-Gen oder MHC-Gen 7 Kap. 34.2.2), das eine wichtige Rolle bei der Antigenpräsentation spielt. So hat man die HLA-Haplotypen DR3 und DR4 als sog. Suszeptibilitätsgene für die Entstehung des Typ 1-Diabetes identifiziert. In der Zwischenzeit sind weitere Genorte auf verschiedenen Chromosomen identifiziert worden, die an der Autoimmunreaktion, die zum Typ 1-Diabetes führt, offensichtlich auch mitbeteiligt sind. Durch eine zytotoxische T-Zellreaktion wird eine entzündliche Reaktion der E-Zellen ausgelöst. Diese Insulinitis führt im Folgenden zur Zerstörung der Inselzellen. Häufig sind hierbei auch Antikörper gegen Insulin sowie Bestandteile der Inselzelle nachweisbar. Die Messung dieser Antikörpertiter nutzt man heute auch zur diagnostischen Einordnung des Diabetes mellitus sowie zur Einschätzung des Diabetesrisikos bei Kindern von Eltern mit Typ 1-Diabetes. Für den Stoffwechsel des Organismus hat der absolute Insulinmangel eine Reihe von Konsequenzen (. Abb. 26.20):

833 26.4 · Pathobiochemie: Diabetes mellitus

. Abb. 26.20. Brennstoffmobilisierung und -verwertung beim schweren Diabetes mellitus

Fettgewebe. Es kommt es zu einer Verminderung der

Glucoseaufnahme und -oxidation, was zu einer Hemmung von Fettsäure- und Triacylglycerinbiosynthese führt. Durch das Überwiegen Insulin-antagonistischer Hormone wird eine gesteigerte Lipolyse mit Freisetzung von Glycerin und nicht-veresterten Fettsäuren in die Blutbahn ausgelöst. Dies führt zu einem Überangebot mit gesteigerter Fettsäureoxidation in der Leber und damit zu überschießende Produktion von Ketonkörpern. Die Konsequenz sind Ketonämie und Ketonurie. Muskulatur. Der Glucosetransport und die Glucoseoxi-

dation sind verlangsamt. Die Glycogenbiosynthese ist vermindert, die Proteolyse gesteigert. Leber. Hier führt die Proteolyse zu einer Zunahme der Glu-

coneogenese aus Aminosäuren sowie zu einer gesteigerten Harnstoffbiosynthese. Proteolysesteigerung und Stimulierung der Harnstoff-Biosynthese sind die Ursache der negativen Stickstoffbilanz. Elektrolytstoffwechsel. Gestörte Glucoseaufnahme in den

extrahepatischen Geweben und erhöhte Gluconeogenese in der Leber führen zu Hyperglykämie und Glucosurie, die einen erheblichen Energieverlust bedeutet. Mit dem Anstieg der Glucose im Extrazellulärraum wird Wasser aus dem Intrazellulärraum abgezogen, um die Osmolalität aufrecht zu erhalten. Es kommt zur intrazellulären Dehydratation. Infolge der Glucosurie und Ketonurie stellt sich, bedingt durch osmotische Diurese mit verminderter Wasserreab-

sorption im proximalen Tubulus, eine Zwangspolyurie ein. Die gesteigerte Ausscheidung der Ketonkörper Acetacetat und E-Hydroxybutyrat bringt die gleichzeitige Ausscheidung von Kationen und Ammoniumionen mit sich. Coma diabeticum. Unter akutem Insulinmangel erreichen

die beschriebenen Fehlregulationen in kürzester Zeit ein bedrohliches Ausmaß. Es kommt zum Coma diabeticum. Im schweren diabetischen Koma können täglich 4–8 l Flüssigkeit, etwa 400 mmol Natrium- und 300–400 mmol Kaliumionen durch Diurese verloren gehen. Trotz des ausgeprägten Kaliumverlustes kann im Blutplasma ein normaler Kaliumspiegel gefunden werden, da die Gewebe im Insulinmangel vermehrt Kalium in den Extrazellulärraum verlieren. Anhaltende Hyperglykämie und zunehmender Flüssigkeitsverlust setzen die Osmolalität des Blutes weiter hinauf. Das zirkulierende Blutvolumen nimmt ab, es kommt zur Kollapsneigung mit cerebraler und renaler Minderdurchblutung und entsprechenden erheblichen Funktionsstörungen. Die Anhäufung von Ketonkörpern im Blut führt zur Azidose (diabetische Ketoazidose). Für die Hirnfunktionsstörungen im diabetischen Koma sind im Wesentlichen die Elektrolytverschiebungen, intrazelluläre Dehydratation und ein Sauerstoffmangel durch Minderdurchblutung verantwortlich zu machen. Die hier im Einzelnen beschriebenen Fehlregulationen, die zum diabetischen Koma führen, sind schematisch in . Abb. 26.21 zusammengefasst. Für die Behandlung des Coma diabeticum ist neben der Insulinsubstitution v.a. eine ausreichende Flüssigkeitszufuhr und die Korrektur der Elektrolytstörungen erforderlich.

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834

Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

26

. Abb. 26.21. Mechanismen der Entstehung des Coma diabeticum. (Einzelheiten 7 Text)

26.4.2

Typ 2-Diabetes mellitus

! Der Typ 2-Diabetes beruht sowohl auf einer Verzögerung der Insulinsekretion der E-Zelle als auch auf einer Insulinresistenz verschiedener Gewebe.

Im Gegensatz zum Typ 1-Diabetes findet beim Typ 2Diabetes kein durch eine Autoimmunreaktion bedingter Untergang von E-Zellen statt. Die Erstmanifestation der Krankheit trat in den vergangenen Jahrzehnten beim Typ 2-Diabetes typischerweise im höheren Lebensalter (über 40. Lebensjahr) auf. In neuerer Zeit erkranken allerdings auch zunehmend junge Menschen. Die epidemieartige Ausbreitung dieser Erkrankung weltweit stellt somit ein gesundheitspolitisches Problem ersten Ranges dar. Der klinische Verlauf ist nicht abrupt wie beim Typ 1-Diabetes sondern eher schleichend. Die Hyperglykämie kann anfangs nur milde ausgeprägt sein bei gleichzeitig erhöhten Insulinspiegeln. Dies zeigt, dass die E-Zellen noch hohe Mengen an Insulin freisetzen können, obwohl in diesem Stadium durchaus Störungen in der Kinetik der Insulinsekretion beobachtet werden. Ungeachtet der hohen Insulinspiegel kommt es zur Hyperglykämie, da eine Insulinresistenz in den Zielgeweben Skelettmuskel, Fettgewebe und auch Leber besteht, deren Ursachen noch nicht vollständig geklärt sind. Es hat sich jedoch gezeigt, dass in fast allen Fällen kein defektes Insulin- oder Insulinrezeptormolekül

vorliegt, und dass die Störung vor allem auf Postrezeptorebene liegt. Für die Entstehung der gestörten Insulinsekretion und der Insulinresistenz sind sowohl eine genetische Prädisposition als auch Umweltfaktoren, wie insbesondere fettreiche Ernährung, Übergewicht und Bewegungsmangel verantwortlich. Ca. 70% der Typ 2-Diabetiker sind zumindest in der Anfangsphase der Erkrankung übergewichtig. Daneben weist eine ebenso hohe Zahl auch eine Dyslipidämie und arterielle Hypertonie auf. Diese Kombination wird auch als Metabolisches Syndrom bezeichnet und bessert sich meist nach Gewichtsreduktion, sodass gelegentlich sogar die Behandlungsbedürftigkeit des Diabetes verschwindet. Der Adipositas kommt eine Schlüsselrolle bei der Entwicklung der Insulinresistenz und damit auch des Typ 2-Diabetes zu. ! Erhöhte Plasmakonzentrationen von freien Fettsäuren tragen zur Insulinresistenz bei.

Wodurch genau Übergewicht zur Insulinresistenz führen kann, ist noch nicht vollständig geklärt; ein wichtiger Faktor scheint jedoch auch die Fettverteilung zu sein. So hat man Hinweise dafür, dass in erster Linie eine Vergrößerung der viszeralen Fettdepots eine Insulinresistenz auslöst. Diese sind besonders empfindlich für lipolytische Hormone, weswegen bei viszeraler Adipositas die Plasmakonzentration an freien Fettsäuren erhöht ist. Dies vermindert die Glucoseaufnahme in die Skelettmuskulatur, erhöht die hepatische Glucosefreisetzung (7 Kap. 16.1.4) und führt da-

835 26.4 · Pathobiochemie: Diabetes mellitus

lichen Blut in der höchsten Konzentration vorkommende Hormon und wird fast ausschließlich im Fettgewebe produziert. Es hat Insulin-sensitivierende Eigenschaften im Muskel, in der Leber und scheint auch, zumindest bei Mäusen, im Hypothalamus eine Rolle in der Hemmung des Appetits zu spielen. Seine Wirkung beruht auf einer Aktivierung der AMP-aktivierten Proteinkinase (AMPK, 7 Kap. 16.1.4). Auf den ersten Blick scheint es paradox, dass die Adiponectinspiegel mit steigender Fettgewebsmasse im Blut abfallen. Es wird allerdings vermutet, dass vor allem der Anstieg seiner direkten Antagonisten wie TNF-D und Interleukin-6, deren Produktion mit zunehmender Fettgewebsmasse ansteigt, hierfür verantwortlich ist

. Abb. 26.22a,b. Rolle des Fettgewebes in der Pathogenese des Typ 2-Diabetes. a Rolle des Fettgewebes bei der Glucosehomöostase des Normalgewichtigen. b Fettgewebshypertrophie-induzierte Störungen der Glucosehomöostase bei Adipositas. Grüne Pfeile = Stimulierung; rote Pfeile = Hemmung. (Einzelheiten 7 Text)

neben auch zu einer gestörten Insulinsekretion der E-Zelle, eine Wirkung die als Lipotoxizität an der E-Zelle beschrieben wurde (. Abb. 26.22b). ! Auch Adipocytokine spielen eine wichtige Rolle bei der Entstehung der Insulinresistenz.

Seitdem die Rolle des Fettgewebes als endokrines Organ und die Produktion sog. Adipocytokine entdeckt wurde (7 Kap. 16.1.3), hat man Proteine identifiziert, die sowohl Insulinresistenz als auch Insulinempfindlichkeit induzieren: 4 Tumor-Nekrose-Faktor-α (TNF-α): Dieses Cytokin hemmt die Weiterleitung des Insulinsignals bereits am Insulinrezeptor. Sein Hauptproduktionsort ist neben dem Fettgewebe auch das Immunsystem (7 Kap. 25.8.2). Aktivierte Makrophagen, welche vor allem in das viszerale Fettgewebe einwandern, produzieren sogar den größten Anteil des im Gewebe und im Blut vorkommenden TNF-D 4 Adiponectin: Einer der wichtigsten TNF-D-Antagonisten ist das Hormon Adiponectin. Es ist das im mensch-

Nach diesen neuesten Erkenntnissen hat sich folgende Hypothese für die Adipositas-induzierte Insulinresistenz und Insulinsekretionsstörung entwickelt (. Abb. 26.22a und b): Mit der Zunahme von Fettgewebsmasse und Fettzellgröße kommt es zu einem Anstieg der Freisetzung von freien Fettsäuren sowie der Expression und Sekretion von Adipocytokinen wie TNF-D oder Interleukin-6. Gleichzeitig vermindert sich die Expression und Sekretion von Adiponectin. Dies hat zur Folge, dass die Insulin-induzierte Glucoseverwertung des Muskels abnimmt und die Insulininduzierte Hemmung der hepatischen Glucoseproduktion ebenfalls vermindert ist. Folglich kommt es zu einem Anstieg der Blutglucose. Die im Frühstadium der Insulinresistenz bestehende Hyperinsulinämie mit ihren anabolen Effekten sowie eine vermehrte Nahrungsaufnahme führen zunächst zu einer weiteren Zunahme des Fettgewebes, was diesen Prozess weiter verstärkt. Im weiteren Verlauf kommt es durch Gluco- und Lipotoxizität zu einem Abfall der Insulinsekretion. Durch diesen relativen Insulinmangel fällt der hemmende Effekt von Insulin auf die Glucoseproduktion der Leber weg und es tritt ein Ungleichgewicht zwischen Insulin- und Glucagonproduktion auf. Bestehen gleichzeitig endogene Defekte in der Insulinsignalkaskade im Muskel und/oder in der Leber, so wird dieser Prozess weiter beschleunigt. Genetische Prädisposition. Eine große Zahl von Untersuchungen hat deutliche Hinweise dafür gebracht, dass bei der Entstehung des Typ 2-Diabetes eine genetische Komponente eine große Rolle spielt. Amerikanische Indianer oder Bewohner von Pazifik-Inseln zeigen bei westlicher Ernährungsweise eine Inzidenz an Typ 2-Diabetes von 30–40%, was weit über der Häufigkeit dieser Erkrankung in der europäischen Bevölkerung (4%) liegt. Interessanterweise war zu Beginn des Jahrhunderts der Diabetes innerhalb dieser Bevölkerungsgruppen eine ausgesprochen seltene Erkrankung. Erst mit dem Übergang zu der in der westlichen Zivilisation üblichen Diät mit unbeschränktem Zugang zu einer großen Auswahl an Nahrungsmitteln kam es zu diesem gehäuften Auftreten des Metabolischen Syn-

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Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

Infobox Typ 2-Diabetes 68-jähriger ehemaliger Busfahrer, bei dem seit Jahrzehnten ein Übergewicht (110 kg bei einer Körpergröße von 176 cm) vorliegt (. Abb. 26.23). Seine Mutter fiel im Alter von 70 Jahren ins Coma diabeticum und musste anschließend mit Insulin behandelt werden.

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Am 4.6.2001 wurde der Patient, der bisher weitgehend gesund war, im Coma diabeticum mit einem Blutzucker von 1405 mg/dl und einem HbA1C-Wert von 17,1% vom Notarzt in die Klinik gebracht. Es wurde ein Diabetes mellitus Typ 2 diagnostiziert. Unter Insulintherapie besserte sich der Allgemeinzustand des Patienten rasch wieder. Am 15.6.2001 erhielt der Patient, der inzwischen erlernt hatte, sich selbst Insulin zu spritzen, eine Ernährungsberatung. In den folgenden 7 Wochen konnte er durch die Umsetzung der Ernährungsempfehlungen Gewicht abnehmen. Die Insulindosis konnte durch Verbesserung der Blutzuckerwerte schrittweise reduziert werden. Am 6.8.2001 Gewichtsabnahme von 7 kg (103 kg). Der Patient hatte jetzt ohne Insulin bereits wieder normale Blutzuckerwerte. . Abb. 26.23. Adipöser Typ 2-Diabetiker

Dieses Beispiel zeigt eindrücklich die starke Abhängigkeit des Glucosestoffwechsels vom Körpergewicht (insbesondere zentrale Adipositas) bei einem neu manifestierten Typ 2-Diabetiker. Bereits eine Abnahme von 7 kg hat hier wieder zu einer Stoffwechselnormalisierung geführt.

droms und Diabetes mellitus. Diese und andere Beobachtungen haben zu dem Konzept geführt, dass die für die Entwicklung des Metabolischen Syndroms und Typ 2-Diabetes verantwortlichen Gene – diese Krankheitsbilder werden als polygenetisch determiniert angesehen – für das Überleben unter Mangelbedingungen einen erheblichen Selektionsvorteil bieten, nicht aber unter den in europäischen und nordamerikanischen Industriestaaten vorherrschenden Wohlstandsbedingungen (thrifty-gene-Hypothese). Leider gibt es noch keine Anhaltspunkte, um welche Gene es sich im Einzelnen handelt.

26.4.3

Diabetes-assoziierte Erkrankungen

Obgleich die akute diabetische Stoffwechselentgleisung heute in der Regel gut zu beherrschen ist, hängt das Schicksal diabetischer Patienten zu einem beträchtlichen Ausmaß von Spätkomplikationen an

Somit sind Gewichtsabnahme und vermehrte körperliche Bewegung ein primäres therapeutisches Ziel zur Verbesserung der Insulinsensitivität beim übergewichtigen Typ 2-Diabetiker.

4 4 4 4

Augen (Katarakt, Retinopathie) Nieren (Nephropathie) Nerven (Neuropathie) und dem Gefäßsystem (Angiopathie) ab

! Der Entstehungsmechanismus der Spätkomplikationen hängt im Wesentlichen von der Hyperglykämie selbst und den durch das Metabolische Syndrom definierten Störungen wie Hyperlipidämie und arterielle Hypertonie ab.

So konnte durch groß angelegte Studien inzwischen belegt werden, dass eine normoglykämische Einstellung von Diabetikern sowie eine Korrektur der Hyperlipidämie und der arteriellen Hypertonie zu einer fast vollständigen Unterdrückung der Diabetes-spezifischen Folgeerkrankungen wie auch der kardiovaskulären Erkrankungen im Vergleich zu einem Kontrollkollektiv führt. Damit kommt der Stoffwechseleinstellung eine enorm große Bedeutung für die

837 26.4 · Pathobiochemie: Diabetes mellitus

Vermeidung von Diabetes-spezifischen Spätschäden zu. Schnell wirkende Insuline und Insulinanaloga (7 Kap. 26.1.5), die vor den Mahlzeiten appliziert werden, verhindern einen übermäßigen Anstieg des Blutzuckers. Da die Insulinwirkung auch relativ schnell nachlässt, besteht eine verminderte Gefahr der postprandialen Unterzuckerung. Lang wirkende Insulinanaloga zeigen ein gleichmäßigeres Wirkprofil und ermöglichen damit eine bessere Substitution des basalen Insulinbedarfs zwischen den Mahlzeiten und nachts mit weniger Unterzuckerungen. Die meisten der diabetischen Spätkomplikationen sind auf Schäden im Bereich der kleinen Gefäße (Mikroangiopathie) zurückzuführen. Retinopathie. Mit Mängeln der diabetischen Stoffwechsel-

einstellung kann es somit zu einer diabetischen Retinopathie kommen. Die intrazelluläre Hyperglykämie führt zu einem gestörten Blutfluss in den Gefäßen und zu einer vermehrten vaskulären Permeabilität. Ursächlich dafür sind eine verminderte Aktivität von Vasodilatatoren (z.B. NO), eine vermehrte Aktivität von Vasokonstriktoren (z.B. Angiotensin II und Endothelin-1) und eine vermehrte Bildung von Faktoren, welche die Permeabilität erhöhen (z.B. vascular endothelial growth factor (VEGF). Eine quantitative und qualitative Änderung der extrazellulären Matrix führt schließlich zu einer irreversiblen Veränderung der Gefäßpermeabilität. Zusammen mit einer durch die Hyperglykämie verursachten verminderten Produktion von trophischen Faktoren, welche für das Überleben von Endothelund Nervenzellen bedeutsam sind, kommt es schließlich zu Veränderungen der Netzhautgefäße mit Neovaskularisation, Aneurysmabildung und Retinablutungen. Unbehandelt würde dies in vielen Fällen zur Erblindung führen. Nephropathie. Eine weitere häufig auftretende Komplikation stellt die diabetische Nephropathie dar. Sie ist ebenfalls mit einer Mikroangiopathie vergesellschaftet. Weiterhin ist sie durch Veränderungen der glomerulären Basalmembran mit ihrem speziellen Typ IV-Kollagen (7 Kap. 24.2.2) gekennzeichnet. Basalmembranen von Diabetikern weisen einen höheren Gehalt an Hydroxylysin und an Hydroxylysin-gebundenen Disacchariden auf. Dies spricht dafür, dass die Lysylreste der Basalmembran-Kollagene vermehrt hydroxyliert werden, sodass mehr Akzeptorgruppen zur Ankopplung von Kohlenhydratseitenketten entstehen. Durch Verminderung der Heparansulfatproteoglykane im Bereich der Basalmembran des Glomerulus kommt es zu einer Reduktion der negativen Ladung, die wahrscheinlich zusammen mit Hyperfiltration, Kollagenveränderungen und anderen Faktoren zu einem veränderten Aufbau der Basalmembran und der glomerulären Porengröße führt. Weiterhin führt eine vermehrte Entzündungsreaktion zu einer Glomerulosclerose. Durch diese und tubuläre Veränderungen kommt es zu einem anfangs selektiv auf Albumin begrenzten Eiweißverlust der Niere. Die Albuminurie, die im Bereich zwischen 30 und 300 mg/Tag als Mikroalbumin-

urie definiert wird, benutzt man als frühen Marker der Nierenschädigung bei Diabetes mellitus. Dieses Stadium der diabetischen Nephropathie ist vielfach durch eine normoglykämische Einstellung sowie durch eine Blutdrucksenkung in den normotonen Bereich reversibel. Neuropathie. Die Mikroangiopathie spielt neben der Niere

und der Leber auch eine Rolle in der Entwicklung der diabetischen Neuropathie, die typischerweise distal symmetrisch vorkommt. Pathomechanismen. Die derzeitige Auffassung von der Entstehung der Spätkomplikationen geht davon aus, dass neben einer genetischen Disposition die zeitweise erhöhte Glucosekonzentration im Blut die entscheidende Störgröße ist. Folgende vier Mechanismen spielen dabei eine Rolle: 1. Gesteigerter Polyolstoffwechsel. Die Grundlage dieses

Mechanismus ist die in manchen Geweben realisierte Möglichkeit, durch die Aldosereduktase und Sorbitoldehydrogenase aus Glucose Sorbitol und Fructose zu bilden. Ein hohes Glucoseangebot verursacht dann osmotische Zellschädigungen, da die Aldosereduktase-Reaktion praktisch irreversibel ist und die beiden Zucker Sorbitol und Fructose nicht weiter verstoffwechselt werden, aber auch nicht in den Extrazellulärraum zurück diffundieren können. Eines der betroffenen Organe ist die Augenlinse, in deren Epithelzellen die Akkumulation der osmotisch aktiven Fructose und Sorbitol den Nachstrom von Wasser und damit eine Zellschwellung bewirkt. Mit dem Wasser dringt Natrium in die Epithelzelle, was von einem gleichzeitigen Efflux von Kalium zur Erhaltung der Elektroneutralität begleitet ist. Diese Elektrolytverschiebung stört die Membranfunktionen, sodass das Zellinnere an Aminosäuren und Proteinen, an Glutathion und ATP verarmt. Die Konsequenz dieser pathobiochemischen Veränderung ist der Zusammenbruch der Osmoregulation der Zelle, der sich klinisch als Trübung und Quellung der Linsenfasern, also als Katarakt, äußert. Die Verteilung des Polyolstoffwechselwegs im Nervengewebe zeigt interessante Aspekte für die Entwicklung der diabetischen Neuropathie. Die Aldosereduktase ist vorwiegend in den Schwann-Zellen lokalisiert, in denen auch die ersten diabetischen Schäden auftreten. Auch an der Pathogenese der Angiopathie soll eine Fehlregulation des Polyolstoffwechsels beteiligt sein. In engem Zusammenhang mit Mängeln der diabetischen Stoffwechseleinstellung kann es auch zu einer diabetischen Retinopathie kommen. 2. Vermehrte Bildung von advanced glycation end products (AGEs). In den letzten Jahren sind viele Hinweise dafür

gefunden worden, dass eine Reihe von Proteinen nichtenzymatisch glykiert wird (7 Kap. 11.7.1). Als Konsequenz ergeben sich sehr komplexe Umlagerungsreaktionen der im Zug der Glykierung angehängten Gruppen, die den aus der Lebensmittelchemie bekannten Bräunungsreaktionen ent-

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Kapitel 26 · Die schnelle Stoffwechselregulation

sprechen und als AGEs bezeichnet werden. Diese rufen sowohl Struktur- als auch Funktionsänderungen von Proteinen hervor. Sie treten beim Diabetiker weitaus häufiger auf als beim Nichtdiabetiker, betreffen u.a. Endothelien und könnten so für das verfrühte Auftreten von Gefäßveränderungen bei Diabetes verantwortlich sein. Pathologische Mechanismen, welche durch Bildung von AGEs hervorgerufen werden, beinhalten u.a. eine vermehrte Permeabilität der Kapillarwand der Blutgefäße, Induktion von Entzündungsprozessen vermittelt durch Makrophagen und Mesangialzellen und die Expression von prokoagulatorischen und proinflammatorischen Molekülen durch die Endothelzellen. Große Studien in Patienten mit Typ-1 Diabetes haben gezeigt, dass der AGE-Inhibitor Aminoguanidin sowohl das Fortschreiten der Nephropathie als auch der Retinopathie verlangsamt. Als wichtiger Parameter zur Beurteilung der Stoffwechselqualität eines Diabetikers hat sich die Bestimmung der Glycohämoglobine (7 Kap. 11.7.1, 29.2.4) erwiesen. Normalerweise machen diese nur bis zu 6% des gesamten Erwachsenenhämoglobins aus. Dabei korreliert ihr Anteil nicht mit der aktuellen Blutglucosekonzentration, sondern – was entscheidend für die Frage ist, ob ein Diabetiker nicht nur zum Zeitpunkt der Untersuchung sondern langfristig gut eingestellt ist – mit der über einen längeren Zeitraum erhöhten Blutglucosekonzentration. Nicht die Dauer des Diabetes oder Art der Therapie sind für die Höhe dieser glykierten Hämoglobine entscheidend, sondern allein die Häufigkeit und Stärke der Konzentrationsveränderungen von Glucose im Blut und damit in den Erythrozyten.

3. Aktivierung der Proteinkinase C (PKC). Die Familie der PKC-Proteine beinhaltet mindestens elf Isoformen. Aktivierung der PKC-E Isoform durch vermehrte Glucoseinduzierte Diacylglycerinsynthese führt zu einer Störung des Blutflusses in der Retina und in der Niere. Dies ist wahrscheinlich durch eine Hemmung der NO-Produktion und/oder eine Erhöhung der Aktivität der Endothelin-1Aktivität vermittelt. Weiterhin hat man gefunden, dass die durch Glucose induzierte erhöhte Permeabilität der Endothelzellen durch Aktivierung der PKC-D Isoform vermittelt wird. Außerdem führt eine Aktivierung der PKC über eine Induktion von TGF-E1 zu einer vermehrten Bildung von mikrovaskulären Matrixproteinen. Dieser Mechanismus wurde bislang vor allem hinsichtlich der Pathogenese der Nephropathie untersucht. Im Tierversuch hat man durch spezifische Hemmung der PKC-E Isoform eine Normalisierung der durch den Diabetes induzierten erhöhten glomerulären Filtrationsrate und einen Rückgang der Urin-Albuminausscheidung erreicht. Weiterhin wurde die glomeruläre mesangiale Proliferation verhindert. 4. Vermehrter Glucose-Durchsatz durch den HexosaminWeg. Ein vermehrter Durchsatz der Glucose durch diesen

Stoffwechselweg führt zu einer vermehrten Bildung von Glucosamin und somit zu einer erhöhten Produktion von TGF-D TGF-E und PAI-1. Das resul-tiert u. a. in einer Hemmung der endothelialen NO-Synthase und in einer Aktivierung verschiedener PKC-Isoformen.

In Kürze Der Diabetes mellitus ist die häufigste Störung im Bereich der rasch wirksamen Stoffwechselhormone. 4 Als Typ 1-Diabetes beruht er auf einem absoluten Insulinmangel durch weitgehende Zerstörung der Insulin-produzierenden E-Zellen

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4 Als Typ 2-Diabetes spiegelt er eher eine gestörte Regulationskette wider, die durch eine Insulinresistenz v.a. der Leber und der Skelettmuskulatur gekennzeichnet ist und häufig mit Übergewicht, Hypertonie, Hyperlipidämie, einhergeht. Sie wird dann als Metabolisches Syndrom bezeichnet

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26

27 27

Hypothalamisch-hypophysäres System und Zielgewebe Josef Köhrle, Petro E. Petrides

27.1

Hypothalamisch-hypophysäre Beziehungen – 843

27.1.1 27.1.2 27.1.3 27.1.4

Hypothalamus – 843 Hypophyse – 845 Regulation von Hypothalamus und Hypophyse durch die Zielgewebe Hormone des Hypophysenmittel- und -hinterlappens – 846

27.2

Hypothalamus-Hypophysen-Schilddrüsenhormonachse – 847

27.2.1 27.2.2 27.2.3 27.2.4 27.2.5 27.2.6

TRH Biosynthese, Freisetzung und Abbau – 847 Wirkung von TRH auf die TSH-Bildung in der Adenohypophyse – 848 TSH-regulierte Synthese und Freisetzung von Schilddrüsenhormonen – 850 Schritte des Iodstoffwechsels und der Schilddrüsenhormonsynthese – 850 Verteilung und Transport der Schilddrüsenhormone im Blut – 854 Regulierte Aufnahme, Aktivierung und Inaktivierung von Schilddrüsenhormonen in Zielzellen der Hormonwirkung – 855 Zelluläre Wirkungen der Schilddrüsenhormone – 857 Molekularer rezeptorvermittelter Wirkungsmechanismus von Schilddrüsenhormonen – 858 Pathobiochemie – 859

27.2.7 27.2.8 27.2.9

– 845

27.3

Hypothalamus-Hypophysen-Nebennierenrinden(Zona fasciculata-)Achse – 862

27.3.1 27.3.2 27.3.3 27.3.4 27.3.5 27.3.6 27.3.7 27.3.8

Regulatorische Polypeptide des Hypothalamus und der Hypophyse – 862 Regulation von Hypothalamus und Hypophyse – 863 Hormone der Zona fasciculata der Nebennierenrinde – 863 Transport des Cortisols im Blut – 865 Abbau des Cortisols – 865 Molekularer Wirkungsmechanismus des Cortisols – 866 Zelluläre Wirkungen des Cortisols – 866 Zusammenhänge zwischen hypothalamisch-hypophysärer NNR-Achse und Immunsystem – 868 Synthetische Glucocorticoidhormone – 868 Pathobiochemie – 869

27.3.9 27.3.10

27.4

Hypothalamus-Hypophysen-Gonadenachse – 870

27.4.1 27.4.2

Der hypothalamische GnRH-Pulsgenerator – 870 Hormonelle Regulation des hypothalamischen GnRH-Pulsgenerators und der hypophysären Gonadotropinsekretion – 871 Entwicklung steroidproduzierender Gewebe: Nebenniere und Gonaden – 873

27.4.3

27.5

Zielgewebe der Gonadotropine beim Mann – 874

27.5.1 27.5.2 27.5.3 27.5.4 27.5.5 27.5.6 27.5.7 27.5.8

Funktionen von Leydig- und Sertolizellen des Hodens – 874 Transport der Androgene im Blut – 876 Periphere Aktivierung oder Umwandlung von Testosteron – 876 Abbau der Androgene – 877 Zelluläre Wirkungen des Testosterons – 877 Molekularer Wirkungsmechanismus des Testosterons – 877 Synthetische Androgene und Antiandrogene – 877 Pathobiochemie – 877

27.6

Zielgewebe der Gonadotropine bei der Frau – 878

27.6.1 27.6.2 27.6.3 27.6.4 27.6.5 27.6.6 27.6.7 27.6.8 27.6.9

Regulatorische Polypeptide des Hypothalamus und der Hypophyse – 878 Hormone des Ovars (Östrogene und Progesterone) – 880 Transport der Hormone im Blut – 882 Abbau der Hormone – 882 Zelluläre Wirkungen der Hormone – 882 Molekularer Wirkungsmechanismus der Hormone – 883 Synthetische Progesterone, Östrogene und Phytoöstrogene – 884 Weitere Hormone des Ovars – 884 Hormone der Placenta – 884

27.7

Die Wachstumshormon-IGF-Achse – 885

27.7.1

27.7.3 27.7.4

Regulation der GH-Sekretion durch hypothalamisches GHRH, Somatostatin und durch Ghrelin aus der Magenmukosa – 885 Direkte GH Wirkungen und Effekte über das GH-regulierte Mediatorsystem IGF1-IGF1-Bindeproteine – 887 Prolactin – 888 Pathobiochemie – 889

27.8

Antidiuretisches Hormon (Vasopressin) und Oxytocin – 890

27.7.2

Literatur

– 891

843 27.1 · Hypothalamisch-hypophysäre Beziehungen

> > Einleitung Das hypothalamisch-hypophysäre System stellt zusammen mit seinen Zielgeweben ein komplexes neuroendokrines System dar, das die Funktionsfähigkeit elementarer Lebensvorgänge wie Wachstum, Fortpflanzung oder adäquate Reaktionen auf Stress garantiert. Dieses System besteht aus Hypothalamus, Hypophysenvorderlappen und verschiedenen Hormone produzierenden peripheren Geweben wie Schilddrüse, Zona fasciculata der Nebennierenrinde, Keimdrüsen (Hoden bzw. Ovarien) und Leber. Die Kommunikation zwischen den einzelnen Bestandteilen dieses Systems erfolgt über Hormone, Wachstumsfaktoren und Cytokine. Der Hypothalamus integriert biochemische Informationen aus verschiedenen Hirnarealen und gibt diese an die Hypophyse weiter, in der sie in endokrine, d.h. die Regulation entfernter Zielorgane bestimmende Informationen umgesetzt werden. Von den Zielorganen erfolgt eine hormonelle Rückkoppelung über den Blutweg. Angeborene und erworbene Störungen dieser verschiedenen Achsen führen zu Krankheiten, die an Störungen des Wachstums und der Entwicklung, der Fertilität oder der Reaktion auf Stresssituationen erkennbar sind. Da praktisch alle an diesen Systemen beteiligten Hormone oder ihre Analoga chemisch synthetisiert oder gentechnologisch hergestellt werden können, sind die Achsen durch synthetische Hormone gezielt beeinflussbar geworden.

27.1

Hypothalamisch-hypophysäre Beziehungen

27.1.1

Hypothalamus

! Der Hypothalamus kommuniziert mit der Hypophyse über Peptidhormone.

Der Hypothalamus (. Abb. 27.1) erhält Informationen von der Hirnrinde (Cortex), dem limbischen System (Hippocampus, Nucleus amygdalae, Septumregion), dem Thalamus, dem retikulären ascendierenden System und von Nervenfasern des Rückenmarks. Diese Einflüsse werden integriert und über neuroendokrine Zellen, d.h. spezialisierte Neurone mit endokriner Funktion, an die Hypophyse weitergegeben. Diese neuroendokrinen Zellen werden durch Neurotransmitter aktiviert, die an den synaptischen Verbindungen der verschiedenen Neuronen, die sich an diesen Zellen treffen, freigesetzt werden. Die Aktivierung der neuroendokrinen Zellen führt zur Freisetzung von Polypeptiden mit regulatorischer Funktion, den sog. releasing-Hor-

. Abb. 27.1. Die einzelnen Anteile des Hypothalamus

monen (RH) über welche die Freisetzung (= engl. release) von Hormonen aus dem Hypophysenvorderlappen (Adenohypophyse) gesteuert wird (. Tabelle 27.1). Die regulatorischen Polypeptide des Hypothalamus stellen eine Gruppe von Molekülen mit Längen von 3 bis etwa 60 Aminosäuren dar, die sich u.a. dadurch auszeichnen, dass ihr C-terminaler Rest amidiert und damit vor Proteolyse geschützt ist. Alle hypothalamischen Hormone entstehen durch limitierte Proteolyse aus hochmolekularen Vorstufen. Die Klonierung der Vorstufen für die einzelnen Polypeptide hat gezeigt, dass jeweils ein in der Vorstufe dem C-Terminus anliegender Glycylrest als Amiddonor für die enzymatische Amidierung dient. Fast alle hypothalamischen Regulatorhormone finden sich auch in extrahypothalamischen Arealen und anderen Geweben des Organismus, ohne dass jedoch ihre dortige Funktion in jedem Fall bekannt ist. ! releasing -Hormone werden pulsatil aus dem Hypothalamus freigesetzt.

Einen weiteren essentiellen Bestandteil des neuroendokrinen Systems stellt eine biologische Uhr dar, die verschiedene hormonelle Zyklen steuert, die auch mit dem SchlafWach-Rhythmus verbunden ist. Wie diese Uhr circadiane Rhythmen wie den der Cortisolsekretion (7 Kap. 27.3.7) hervorbringt, ist noch unbekannt. Andere reproduzierbare Veränderungen werden nicht von einer tageszeitlichen Rhythmik bestimmt, sondern z.B. davon, wann man einschläft: So kommt es etwa 60–90 min. nach dem Einschlafen zu einem starken Anstieg der Wachstumshormonsekretion. Eine weitere bedeutende Form der Periodizität findet sich z.B. bei der Sekretion des releasing-Hormons GnRH (aber auch bei den anderen releasing-Hormonen): die pulsatile Freisetzung, d.h. das Hormon wird nicht kontinuierlich, sondern stoßweise in Abständen von 90–120 min. aus dem Hypothalamus sezerniert. Dieses Sekretionsmuster, das eine wesentliche Voraussetzung für die biologische Wirkung der releasing-Hormone darstellt, bleibt auch dann

27

844

Kapitel 27 · Hypothalamisch-hypophysäres System und Zielgewebe

. Tabelle 27.1. Hypothalamische releasing-hormone (RH, Liberine) und adenohypophysäre glandotrope Hormone (Tropine)

27

Hypothalamisches releasing oder release inhibiting hormone

Abkürzung

Anzahl Aminosäuren

reguliertes hypophysäres Hormon

Abkürzung

Anzahl Aminosäuren

Cortictropin releasing hormone (Corticoliberin)

CRH

41

Adrenocorticotropes Hormon (Corticotropin)

ACTH

29

Thyrotropin releasing hormone (Thyroliberin)

TRH

3

Thyroidea stimulierendes Hormon (Thyrotropin)

TSH

112 + 89*

Gonadotropin releasing hormone (Gonadoliberin)

GnRH

10

Luteinisierendes Hormon (Luteotropin)

LH

118 + 89*

Follikel stimulierendes Hormon (Follitropin)

FSH

115 + 89*

growth hormone (Somatotropin) releasing hormone (Somatoliberin)

GHRH

44

growth hormone Somatotropin Wachstumshormon

GH

191

Somatostatin

SSt

14/28

growth hormone Somatrotropin Wachstumshormon

GH

191

Dopamin

–

–

Prolaktin

PRL

198

* TSH, LH und FSH haben eine gemeinsame D-Untereinheit aus 89 Aminosäuren.

bestehen, wenn z.B. in pathologischen Situationen die Rückkoppelung von der Peripherie gestört ist. ! Die hypothalamischen Neuropeptidhormone Neuromedin U, Galanin, und Calcitonin-Gen-verwandtes Peptid modulieren hypothalamische Funktionen, Verhalten, Schmerzempfindung, physiologische Regulationsvorgänge.

Im Hypothalamus werden noch weitere neurohypophysäre Hormone gebildet: Neuromedin U, ein aus 23-Aminosäuren bestehendes Neuropeptid, welches über zwei verschiedene G-Protein gekoppelte Rezeptoren wirkt. Der Neuromedin U-Rezeptor 2 ist vorwiegend im paraventrikulären Nucleus, entlang des 3. Ventrikels und im Hippocampus exprimiert. Im Tiermodell erhöht Neuromedin U die Freisetzung von ACTH. Intracerebrale Injektion von Neuromedin U stimuliert über noradrenerge Neurone in magnozellulären Neuronen den Neuromedin U-2-Rezeptor, welcher auf die Freisetzung von Vasopressin und Oxytocin (7 Kap. 27.8) in der Neurohypophyse positive Effekte ausübt. Galanin, ein Peptid aus 29 Aminosäuren, wird ebenfalls im Hypothalamus in hohen Konzentrationen gefunden. Über drei verschiedene gewebespezifisch exprimierte heptahelicale G-Protein gekoppelte Rezeptoren beeinflusst es Nahrungsaufnahme, Reproduktionsverhalten, Schmerzempfindung und Immunmodulation. Osmotische Stimuli erhöhen die Galaninexpression in magnozellulären Nuclei und wirken damit wiederum aktivierend auf die Neurophypophyse durch Steigerung der Vasopressin- und Oxytocinsekretion.

Ein aus 60 Aminosäuren bestehendes Galanin ähnliches Peptid (galanin like peptide, GALP), dessen Aminosäuren 9-21 identisch mit dem N-Terminus von Galanin sind, wird vorwiegend im anteroventralen periventrikulären Nucleus (AVP) und der Neurohypophyse exprimiert. GALP stimuliert die Nahrungsaufnahme, den Stoffwechsel und die GnRH-Freisetzung. Chronischer Stress oder chronische Entzündung erhöhen die GALP Expression und steigern die Sekretion von Vasopressin, Oxytocin und ACTH. Damit kann GALP die adrenale Corticoidausschüttung erhöhen unter Bedingungen wo CRH erniedrigt ist z.B. bei chronischem Stress. Durch alternatives Spleißen entsteht im Hypothalamus aus der Calcitonin-Prä-mRNA das Calcitonin-Gen-verwandte Peptid CGRP (calcitonin gene related peptide) (7 Kap. 8.5.3, 28.6.3). CGRP wirkt über G-Protein gekoppelte Rezeptoren auf das kardiovaskuläre System durch Erhöhung der Herzfrequenz, des Blutdrucks und auch der Noradrenalinsekretion, wenn die Substanz dem Versuchstier intracerebral gegeben wird. Die periphere Anwendung führt zur Vasodilatation mit Tachykardie und erhöhter Katecholaminsekretion. Die biologische Funktion des CGRP ist vermutlich der Grund, warum dieses Gen in der Evolution beibehalten wurde, da Calcitonin, welches in den neuroendokrin aktiven Calcitonin produzierenden C-Zellen der Schilddrüse gebildet wird, beim Menschen nicht lebenswichtig ist.

845 27.1 · Hypothalamisch-hypophysäre Beziehungen

27.1.2

Hypophyse

Zwischen den hypothalamischen Kernen und der Hypophyse bestehen enge anatomische und funktionelle Beziehungen (. Abb. 27.2). Entwicklungsgeschichtlich setzt sich die Hypophyse aus zwei verschiedenen Zelltypen zusammen: 4 der Neurohypophyse (Hinterlappen), die über das Infundibulum (Hypophysenstiel) mit dem Hypothalamus verbunden ist, und 4 der Adenohypophyse (Vorderlappen), in der die Hormone gebildet werden, deren Sekretion durch die regulatorischen Polypeptide des Hypothalamus gesteuert wird. Die verschiedenen in der Adenohypophyse vorkommenden Zelltypen sind in . Tabelle 27.2 zusammengestellt. ! Die hypophysären Hormone sind untereinander strukturverwandt.

Bisher sind sechs Hormone der Adenohypophyse charakterisiert worden (. Tabelle 27.1): TSH, LH und FSH sind Dimere, die eine identische D-Untereinheit besitzen und sich nur durch die E-Untereinheit voneinander unterscheiden. Prolactin und Somatotropin (Wachstumshormon) leiten sich von einem gemeinsamen Vorläufergen ab, da sie etwa 50% Homologie besitzen. Die Vorstufe von ACTH, das Präpro-Opiomelanocortin, besitzt strukturelle Ähnlichkeit mit dem Arginin-Vasopressin-Neurophysin, der Vorstufe des Vasopressins in der Neurohypophyse (7 Kap. 28.3.2).

27.1.3

Regulation von Hypothalamus und Hypophyse durch die Zielgewebe

Die aus der Hypophyse freigesetzten Hormone wirken auf bestimmte periphere Gewebe, in denen sie die Biosynthese und Sekretion gewebespezifischer Hormone hervorrufen. Über diese Hormonprodukte, aber auch Substrate, wie z.B. Glucose, erfolgt eine Rückkoppelungshemmung

. Abb. 27.2. Vasculäre und neurale Verbindungen zwischen Hypothalamus und Hypophyse. Fast das gesamte Blut, das den Hypophysenvorderlappen erreicht, muss zuerst das Gebiet der Eminentia mediana des Hypothalamus passieren. Dieses Netzwerk ermöglicht den Transport hypothalamischer regulatorischer Polypeptide in die Hypophyse. Blut aus der Eminentia mediana fließt durch einen primären Kapillarplexus in die hypophysären Portalvenen

(. Abb. 27.3) auf der Ebene des Hypothalamus und/oder der Hypophyse (long loop feedback). So verursacht z.B. ein Abfall der Plasmakonzentration von Cortisol eine vermehrte ACTH-Produktion und -Sekretion durch die Hypophyse, während auf der anderen Seite hohe Plasmacortisol-

. Tabelle 27.2. Zellen und Hormone der Adenohypophyse Zelltyp

Anteil

Produkt

Zielorgan

Corticotrop

15–20%

ACTH E-Lipotropin

Nebenniere Adipozyten Melanozyten

Thyrotrop

3–5%

TSH

Schilddrüse

Gonadotrop

10–15%

LH, FSH

Gonaden

Somatotrop

40–50%

GH

alle Gewebe, Leber, Knochen

Lactotrop

10–15%

PRL

Brustdrüse, Gonaden

Folliculo-Stellarzellen

10–20%

Cytokine, Wachstumsfaktoren

Hormon sezernierende Zellen der Adenohypophyse

27

846

Kapitel 27 · Hypothalamisch-hypophysäres System und Zielgewebe

konzentrationen die ACTH-Sekretion hemmen. Neben der Hemmung durch von den peripheren Zielgeweben gebildete Hormone bilden einzelne Gewebe, wie z.B. die Gonaden, Proteohormone, die spezifisch auf hypophysärer Ebene hemmend (Inhibin) oder aktivierend (Aktivin) wirken. Darüber hinaus besteht offenbar auch zwischen Hypophyse und Hypothalamus eine Rückkoppelungshemmung (short loop feedback).

27.1.4

Hormone des Hypophysenmittelund -hinterlappens

Im Hypophysenmittellappen finden sich bei vielen Vertebraten, aber nicht beim Menschen, Hormone, die die Melaninablagerungen in den Melanozyten und damit die Pigmentierung der Haut stimulieren. Die beiden bisher charakterisierten Melanozyten stimulierenden Hormone (MSH) D- und E-MSH (7 Kap. 31.3.8) besitzen strukturelle Ähnlichkeit mit ACTH, einem Hormon des Hypophysenvorderlappens (7 Kap. 27.3.1). Im Hypophysenhinterlappen finden sich die beiden Polypeptidhormone Ocytocin und Vasopressin, über deren Bedeutung bei der Regulation des Wasser- und Elektrolythaushalts in 7 Kapitel 28.3.2 berichtet wird.

27

In Kürze

. Abb. 27.3. Prinzip der Regulation des hypothalamisch-hypophysären Systems und seiner peripheren Zielgewebe. (Einzelheiten 7 Text)

5 Das hypothalamisch-hypophysäre System ist ein komplexes neuroendokrines Regelwerk. Seine Kommunikation erfolgt über releasing-Peptidhormone, die nicht kontinuierlich, sondern pulsatil in bestimmten zeitlichen Abständen aus dem Hypothalamus sezerniert werden 5 Unter dem spezifischen Einfluss hypothalamischer Faktoren werden aus der Hypophyse Hormone freigesetzt, die die Schilddrüse, die Nebennierenrinden, die männlichen oder weiblichen Geschlechtsgewebe sowie die Leber und sekundär den Knochen beeinflussen 5 Die in diesen Erfolgsorganen gebildeten Hormone binden an oder in ihren Zielzellen Rezeptoren, deren Aufbau ein gemeinsames Strukturprinzip zugrunde liegt 5 Über Rückkoppelungsmechanismen werden die Systeme auf Hypophysen- bzw. Hypothalamusebene reguliert

847 27.2 · Hypothalamus-Hypophysen-Schilddrüsenhormonachse

27.2

Hypothalamus-HypophysenSchilddrüsenhormonachse

27.2.1

TRH Biosynthese, Freisetzung und Abbau

! Thyrotropin-releasing-Hormon (Thyroliberin, TRH) wird im paraventrikulären Nucleus des Hypothalamus aus einem großen Vorläuferprotein durch spezifische proteolytische Prozessierung und nach posttranslationaler Modifikation freigesetzt.

Hypothalamische TRH-Biosynthese und -Freisetzung. Das

menschliche TRH-Gen codiert für das TRH-Prohormon (Prä-Pro-TRH), welches 6 Kopien des TRHs enthält (. Abb. 27.4). Im Lumen des endoplasmatischen Retikulums werden aus dem Pro-TRH-Protein mit Hilfe der Prohormonkonvertasen PC1 und PC2, die an monobasischen oder dibasischen Peptidsequenzen schneiden, 6 TRH-Vorläuferpeptide der Sequenz Arg-Gln-His-Pro-Gly-Arg freigesetzt. Für die Bildung des Tripeptids TRH aus dieser Sequenz sind folgende Schritte notwendig: 4 Entfernung des Argininrests am N-Terminus durch die Aminopeptidase B 4 Entfernung des Argininrests am C-Terminus durch die Carboxypeptidase E 4 Bildung von Pyroglutamin aus dem N-terminalen Glutamin mit Hilfe des Enzyms Glutaminylcyclase. Diese Modifikation schützt TRH vor zu schnellem Abbau durch Exopeptidasen. Ein analoger Schutzmechanismus findet sich auch bei anderen hypothalamischen Neuropeptiden, z.B. beim GnRH oder Vasopressin 4 Durch das Enzym Peptidylglycin-α-Monooxygenase (PAM) erfolgt eine Modifikation am C-Terminus. Die beiden enzymatischen Aktivitäten der PAM katalysieren durch eine α-Monooxygenase-Aktivität unter Sauerstoffverbrauch und Reduktion die Hydroxylierung des N-terminalen Glycins zum α-Hydroxyglycin. Mit der zweiten enzymatischen Aktivität, einer PeptidylAminoglycolat-Lyase, wird unter Freisetzung von Glycolat das C-terminale Prolinamid im TRH gebildet . Abb. 27.5. Regulation der TRH- bzw. TSH-Sekretion durch die Schilddrüsenhormone und andere Faktoren. (Einzelheiten 7 Text)

. Abb. 27.4. Das hypothalamische TSH-releasing hormon. a Struktur der mRNA des Prä-Pro-TRH. An eine am 5’-Ende gelegene, nicht translatierte Region (5’-UTR) schließt sich das Signalpeptid an. Darauf folgt die Sequenz des Pro-TRH, die insgesamt sechsmal die TRH-Vorläuferpeptide (dunkelrot) enthält. Am 3’-Ende befindet sich eine große nicht translatierte Region sowie das Poly-A-Ende. b Struktur des TRH. Die Spaltstelle der Thyroliberinase ist angegeben. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

Das jetzt biologisch aktive TRH-Neuropeptid PyroGluHis-Pro-amid wird durch Stimulation der TRH produzierenden, neuroendokrinen Zellen in Pulsen freigesetzt. Anschließend erfolgt der Transport über den Portalkreislauf des Hypophysenstiels zu den thyreotropen Zellen der Hypophyse. Die Biosynthese und Freisetzung von TRH wird als Teil des negativen Feedbacks durch das biologisch aktive Schilddrüsenhormon T3 unterdrückt (. Abb. 27.5). Die TRHFreisetzung weist einen Tagesrhythmus mit einem Maximum in den Abendstunden und zu Beginn der Nacht auf. Die Freisetzung von TRH wird positiv durch das von Adipozyten gebildete Hormon Leptin (7 Kap. 16.1.3) beeinflusst, während die Neurotransmitter GABA und Noradrenalin, sowie Somatostatin und Dopamin die Biosynthese und Freisetzung hemmen. Auch Glucocorticoide inhibieren die TRH-Produktion und Freisetzung. Auch die Prozessierung des TRH-Vorläuferpeptids wird durch Leptin beeinflusst. Leptin stimuliert die Ex-

27

848

27

Kapitel 27 · Hypothalamisch-hypophysäres System und Zielgewebe

pression der Prohormonkonvertasen PC1 und PC2 der Furinfamilie und führt damit zu einer verstärkten TRHProduktion. Im Gegensatz dazu löst Nahrungsentzug eine Verringerung der PC1- und PC2-Genexpression im paraventrikulären Nucleus des Hypothalamus aus. Seltene Störungen der endgültigen Prozessierung der TRH-Tripeptide durch Defekte der Carboxypeptidase E führen zu einer Beeinträchtigung der TRH abhängigen Regulation der Körpertemperatur und der Gewichtsregulation. Hypothalamischer TRH-Abbau: TRH hat eine sehr kurze Halbwertszeit von ca. 2 Minuten. Der Abbau erfolgt durch ein hochspezifisches Enzym, welches hormonell reguliert wird und vorwiegend auf den lactotropen Zellen der Adenophypophyse exprimiert ist. Das TRH-degradierende Ektoenzym Pyroglutamylaminopeptidase II oder Thyroliberinase spaltet TRH unter Freisetzung des Pyroglutamylrests und Bildung des Histidinprolinamids und beendet somit die TRH-Wirkung (. Abb. 27.4). Auch die Regulation des TRH degradierenden Ektoenzyms unterliegt dem Rückkopplungsmechanismus der Schilddrüsenhormonachse. Durch das aktive Schilddrüsenhormon Triiodthyronin T3 wird nämlich dessen Expression stimuliert, durch Estradiol dagegen gehemmt. Extrahypothalamisches TRH. Außer im Hypothalamus

wird TRH auch noch im Zentralnervensystem und in peripheren Geweben, z.B. im Pankreas, Gastrointestinaltrakt und Hoden exprimiert, wo es als neurotransmitterartige Substanz wirkt und von einem konstitutiv exprimierten zweiten TRH degradierenden Ektoenzym abgebaut werden kann, welches nicht unter der für die Hypophyse beschriebenen hormonellen Kontrolle steht. Im ZNS wirkt TRH über den TRH-Rezeptor II als Neurotransmitter und ist mit verschiedenen anderen neuroaktiven Substanzen in Interneuronen colokalisiert. TRH beeinflusst verschiedene hypothalamische Funktionen, Anorexie, Körpertemperaturerhöhung und Unterdrückung der Flüssigkeitsaufnahme und aktiviert extrahypothalamische Funktionen, wie Schmerzempfindung, Verhaltensmuster im Sinne einer Aktivierung und antidepressiven Wirkung. Im Rückenmark wirkt es excitatorisch und aktiviert sympathische Nervenbahnen, wobei die exakte physiologische und pathophysiologische Rolle dieser Wirkung noch erforscht wird. Infobox Entdeckung des TRH TRH wurde aus den Hypothalami von ca. 1 Million Schweinen bzw. 2 Millionen (!) Schafen als erstes hypothalamisches neuroendokrines Peptid von Roger Guillemins und Andrew V. Schallys Arbeitsgruppen isoliert, die dafür 1972 mit dem Nobelpreis ausgezeichnet wurden. Als dritte erhielt in diesem Jahr Rosalyn S. Yalow, die Pionierarbeiten durch die Entwicklung von Radioimmunoassays für Hormone geleistet hatte, den Nobelpreis.

27.2.2

Wirkung von TRH auf die TSH-Bildung in der Adenohypophyse

! TRH stimuliert im Hypophysenvorderlappen die Biosynthese und Sekretion des Glycoproteinhormons Thyrotropin.

Das pulsatil freigesetzte TRH erreicht in hohen Konzentrationen über den Portalkreislauf des Hypophysenstiels die thyreotropen und lactotropen Zellen des Hypophysenvorderlappens. Über die Aktivierung des TRH-Rezeptors I in thyreotropen Zellen werden Biosynthese, Glycosylierung und Sekretion des Thyrotropins oder Thyreoidea-stimulierenden Hormons (TSH) stimuliert (. Abb. 27.5). Der TRH-Rezeptor I gehört in die Gruppe der G-Protein-gekoppelten heptahelicalen Rezeptoren. Er wirkt über das G-Protein Gq11, wodurch die Bildung von Inositol-3Phosphat als second messenger gesteigert wird. Dies löst eine Steigerung der intrazellulären cytosolischen Calciumkonzentration und eine Aktivierung der Proteinkinase C aus. Außer in der Adenohypophyse wird der TRH-Rezeptor in neuroendokrinen Gehirnregionen und im autonomen Nervensystem exprimiert. Außer dem TRH-Rezeptor I kommt ein TRH-Rezeptor II vor, der sich, was seine Bindungsaffinität oder Spezifität aufweist, nicht vom TRH-Rezeptor I unterscheidet. Er wird v.a. in neuronalen Geweben exprimiert. Ein Fehlen von TRH bei Mensch und Tier reduziert die TSH-Biosynthese auf basale Werte und verringert seine biologische Aktivität wegen des dann veränderten Glycosylierungsmusters Die Stimulation der hypophysären TSH-Produktion und -sekretion in thyrotropen Hypophysenzellen wird durch T3 reduziert, das hierfür den Schilddrüsenhormonrezeptor TRE2 benutzt. Auch in lactotropen Zellen wird die Prolactinfreisetzung und Synthese durch TRH stimuliert. Der TRH-Rezeptor I der thyreotropen Zellen wird invers zum TRH degradierenden Ektoenzym Thyroliberinase reguliert. T3 supprimiert die Expression und hypothyreote Stoffwechselbedingungen stimulieren die Expression des thyrotropen TRH-Rezeptors I, was wiederum eine Komponente des negativen Feedback-Systems der HypothalamusHypophysen-Schilddrüsenachse darstellt. Das unter der Einwirkung von TRH in den thyrotrophen Zellen der Adenohypophyse produzierte und sezernierte Glycoproteohormon TSH besteht aus zwei Untereinheiten (. Abb. 27.6). Diesen Aufbau zeigen auch andere hypophysäre Glycoproteohormone wie das luteinisierende Hormon, das Follikel-stimulierende Hormon oder das menschliche Chorion Gonadotropin. Die genannten Hormone unterscheiden sich lediglich durch ihre ß-Untereinheit, während die α-Untereinheit für alle identisch ist. Die D-Untereinheit der hypophysären Glycoproteohormone wird auf Chromosom 6 in 4 Exons codiert, die TSH E-Untereinheit auf Chromosom 1 in drei Exons. Die D-Un-

849 27.2 · Hypothalamus-Hypophysen-Schilddrüsenhormonachse

. Abb. 27.6. Ähnlicher Aufbau der hypophysären Glycoproteohormone und des plazentaren hCG aus einer identischen α-Untereinheit und einer verwandten aber unterschiedlichen β-Untereinheit. (Einzelheiten 7 Text)

tereinheit enthält 92 Aminosäuren, die TSH-E-Untereinheit 110 Aminosäuren, was eine Molekularmasse von 26 kDa für das dimere TSH Protein nach Glycosylierung verschiedener Reste ergibt. Für die biologische Wirkung an den Zielorganen müssen die hypophysären Glycoproteohormone als glycosylierte Dimere vorliegen, da die Rezeptorinteraktion sowohl die D- als auch die E-Untereinheit zur Signaltransduktion erfordert (. Abb. 27.7). Verglichen mit der sehr kurzen Halbwertszeit von TRH im Minutenbereich weist TSH eine biologische Halbwertszeit von ca. 50–70 Minuten auf (. Tab. 27.3). Die tägliche Sekretion von TSH liegt im Bereich von 50–200 μg und zeigt ein ausgesprochenes circadianes Profil, unterbrochen und überlagert von einzelnen pulsatilen episodischen TSHPeaks. Die höchsten TSH-Spiegel werden am späten Abend und in der ersten Nachthälfte erreicht (. Abb. 27.8). Schlafentzug, Hunger sowie verschiedene pathophysiologische Konstellationen hemmen den nächtlichen TSH-Anstieg und unterbrechen auch die pulsatile Freisetzung des TSH. Die TSH-Bestimmung im Serum ist der erste wichtige Nachweisparameter des Funktionszustands der Schilddrüsenhormonachse und erlaubt in der größten Zahl der Fälle bereits erste diagnostische Rückschlüsse. Berücksichtigt a

b

c

. Abb. 27.7. Thyrotropin Rezeptor-Thyrotropin Interaktion. Die Abbildung stellt die Bindung von TSH an den TSH-Rezeptor dar. Die Darstellung b ist im Vergleich zu der in a um 90° gedreht. Die α- und βKette des TSH sind blau und grün dargestellt, der TSH-Rezeptor violett und grau. Man kann deutlich erkennen, dass beide Untereinheiten des TSH an den Rezeptor binden müssen. (Mit freundlicher Genehmigung von Thyroid u. R.N. Miguel. Nach Miguel RN et al. Thyroid 2004;14:991– 1011)

werden muss jedoch, dass es Unterschiede zwischen immunologisch nachgewiesenem TSH und dem am Schilddrüsen-TSH-Rezeptor wirksamen biologisch aktiven TSH geben kann, welche u.a. vom Glycosylierungsstatus dieses Hormons abhängig sind. Außerhalb der thyrotropen Zellen der Hypophyse wurde keine TSH-Produktion und Sekretion gefunden. TSH

. Tabelle 27.3. Biologische Halbwertszeiten einiger menschlicher Hormone Hormon

Anzahl Aminosäuren bzw. Molekularmasse*

Plasmahalbwertszeit (min)

TRH

3

5

Oxytocin

9

3

Antidiuretisches Hormon

9

15

D MSH

13

> Einleitung Die Nieren scheiden endogen gebildete organische wasserlösliche Stoffwechsel-Endprodukte, anorganische Stoffe sowie exogen zugeführte, nicht abbaubare Substanzen wie Medikamente oder Vitamine aus. Sie dienen darüber hinaus der Erhaltung der Konstanz der Extrazellulärflüssigkeit, regulieren Volumen und Osmolarität der Körperflüssigkeiten durch selektive Reabsorption oder Ausscheidung von Ionen und Wasser. Sie greifen durch Ausscheidung überschüssiger Säuren und Basen im Zusammenwirken mit den Lungen in das Säure-Basen-Gleichgewicht ein. Darüber hinaus sind die Nieren an der Regulation des Blutdrucks, der Erythropoiese und des extrazellulären Calciumspiegels beteiligt und synthetisieren wichtige Verbindungen wie Glucose und γ-Aminobutyrat. Die Funktion der Nieren steht in engem Zusammenhang mit den Regelsystemen, die für den Wasser- und Elektrolythaushalt verantwortlich sind. Für die Regulation des Wasserhaushalts und des Natrium- und Kaliumstoffwechsels sind die Hormone Vasopressin, Aldosteron und das atriale natriuretische Peptid von besonderer Bedeutung. Ihr Ziel ist es, Natrium- und Kaliumverluste gering zu halten und eine ausgeglichene Wasserbilanz zu erreichen. Für die Regulation des wichtigen Calciumstoffwechsels stehen drei Hormone zur Verfügung, das Parathormon, das D-Hormon sowie das Thyreocalcitonin.

28.1

Die Niere

28.1.1

Durchblutung der Niere

Die Durchblutung der Niere bewirkt eine ausreichende Versorgung mit Nährstoffen, gleichzeitig bestimmt sie aber auch das zur Filtration gelangende Blutvolumen. Zudem beeinflusst die Nierenmarkdurchblutung noch die Salz- und Wasserreabsorption. Beim Erwachsenen erhalten im Normalfall beide Nieren zusammen ca. 20–25% des Herzminutenvolumens in Ruhe, d.h. ca. 1,0–1,2 l Blut pro Minute, was einer sehr hohen spezifischen Gewebedurchblutung von 4 ml u min–1 u g–1 entspricht.

Regulationsorte der Nierendurchblutung sind. Die physiologischen Regulationen von afferentem und efferentem Widerstand sind dahingehend ausgerichtet, den Blutdruck innerhalb der Glomeruluskapillaren und den Blutflussdurch die Glomeruluskapillaren konstant zu halten. Folgende Faktoren sind dabei von Bedeutung: 4 Die Autoregulation der Nierendurchblutung bewirkt, dass sich der renale Perfusionwiderstand in einem Druckbereich von ca. 70–180 mmHg parallel mit dem Perfusionsdruck ändert und somit der renale Blutfluss (RBF = 'P/R) in diesem Bereich konstant bleibt (. Abb. 28.1, Einzelheiten 7 Lehrbücher der Physiologie)

! Die Nierenrinde ist wesentlich besser durchblutet als das Nierenmark.

Die Blutversorgung des Nierenmarks erfolgt nur über die efferenten Arteriolen derjenigen Glomeruli, die tief in der Rinde, nahe an der Rinden-Mark-Grenze (juxtamedullär) liegen. Diese Arteriolen gabeln sich, ziehen geradlinig und unverzweigt als vasa recta in Richtung Pyramidenspitze und übernehmen so die Versorgung des Parenchyms der Außen- und Innenzone des Marks. Wegen dieses speziellen Verteilungssystems fließen mehr als 90% des renalen Blutstroms nur durch die Nierenrinde, womit das Mark, welches immerhin mehr als 60% der Nierenmasse ausmacht, entsprechend wenig Blut erhält. ! Die Nierendurchblutung wird über die Widerstände der afferenten und efferenten Arteriolen reguliert.

Der renale Blutfluss (RBF) wird von der treibenden Blutdruckdifferenz ('P) zwischen A. und V. renalis und dem gesamten intrarenalen Gefäßwiderstand R bestimmt:

Die für die Nierendurchblutung bestimmenden Gefäßwiderstände werden hauptsächlich von den afferenten und efferenten Arteriolen gebildet, welche daher die wichtigsten,

. Abb. 28.1. Abhängigkeit des renalen Blutflusses (RBF) und der glomerulären Filtrationsrate (GFR) vom Druck in der Nierenarterie. Im oberen Bildteil ist schematisch die Druckabhängigkeit des inneren Durchmessers von afferenten Arteriolen sowie die Bedeutung des transmembranären Calciumeinstroms durch L-Typ-Calciumkanäle dargestellt. Eine druckabhängige Reduktion des Innendurchmessers um 25% führt dabei zu einem 3-fachen Anstieg des präglomerulären Strömungswiderstands (Hagen-Poiseuille-Gesetz) und bewirkt damit eine Konstanz von RBF und GFR

28

896

28

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

4 Regulation durch Neurotransmitter, die aus den sympathischen Nierennerven freigesetzt werden. Noradrenalin führt über α1-Rezeptoren und Aktivierung des Phospholipase-C-(PLC)-Signalwegs zur Gefäßkontraktion und damit zur Widerstandserhöhung, während Dopamin über D-1-Rezeptoren und Aktivierung des cAMP-Signalwegs die Arteriolen relaxiert und damit den Widerstand senkt. Bei stärkerer Aktivierung der Nierennerven überwiegt die konstriktorische Wirkung des Noradrenalins, was dazu führt, dass im Kreislaufschock die Niere durch den Blutdruckabfall bei gleichzeitigem Anstieg des Nierenperfusionswiderstands sehr schlecht durchblutet wird, was ein akutes Nierenversagen nach sich ziehen kann 4 Die afferenten und efferenten Widerstände werden auch von einer Reihe von parakrinen Faktoren und von Hormonen beeinflusst. So erhöhen Angiotensin II, Serotonin, Endotheline und Thromboxan über den PLC-Signalweg den Widerstand, während PGE2, PGI2 über den cAMP-Signalweg und atriales natriuretisches Peptid (ANP) sowie das aus dem Endothel freigesetzte Stickoxid (NO) über den cGMP-Signalweg den Gefäßwiderstand erniedrigen

28.1.2

Aufbau und Funktion der Glomeruli

! In den Glomeruli werden wasserlösliche Plasmabestandteile nach ihrer Größe und Ladung als Primärharn abfiltriert.

Aufbau eines Glomerulus. Die 1–1,5 Millionen Glomeruli (. Abb. 28.2) in jeder Nierenrinde verbinden das Blutgefäßmit dem Harnkanalsystem. Sie haben einen Durchmesser von 150–300 μm und bestehen aus ca. 30 miteinander verbundenen Kapillarschlingen, die sich aus einer afferenten Arteriole aufteilen. Ein Glomerulus enthält 3 Zelltypen: 4 gefensterte Endothelzellen, welche die Kapillarschlingen innen auskleiden 4 Podozyten, welche mit langen fußförmigen Fortsätzen außen auf den Kapillarschlingen aufsitzen und 4 Mesangiumszellen im Inneren des Glomerulus, welche der mechanischen Halterung und Stützung der Kapillarschlingen dienen

Im Rahmen von immunologischen Abwehrprozessen können die Mesangiumszellen stimuliert werden, worauf sie über Expression von MHCII-Komplexen (7 Kap. 34.2.2) zur Antigenpräsentation fähig werden und große Mengen an Cytokinen (z.B. IL-1E, TNF-D) bilden. Diese Vorgänge spielen eine Rolle bei intraglomerulären Entzündungsvorgänge (z.B. Glomerulonephritis). Filtration nach Molekülgröße. Durch einen dreilagigen Fil-

ter, der aus dem fenestrierten Endothel im Kapillarinneren,

der Basalmembran an der Außenseite der Kapillaren und den Schlitzen zwischen den Fußfortsätzen der Podozyten besteht (. Abb. 28.2), wird in den Glomeruli aus dem Blutplasma der Primärharn abgefiltert und über die als Trichter wirkende Bowman-Kapsel dem Harnkanalsystem zugeleitet. Die Poren der Endothelzellen (Durchmesser 50– 100 nm) verhindern den Durchtritt von Blutzellen. Die dreischichtige 300 nm dicke Basalmembran enthält Laminin, Fibronectin und Kollagen-Typ IV und stellt einen mechanischen Filter für Stoffe dar, deren relative Molekülmasse größer als 400 kDa ist. Je 2 Kollagen IV-Monomere assoziieren am C-Terminus und jeweils 4 Monomere am N-Terminus. Durch diese Assoziation bildet sich ein supramolekulares Maschenwerk aus (7 Kap. 26.2.2). Die Tripelhelix des Kollagens IV wird aus unterschiedlichen D-(IV)Ketten aufgebaut. Insgesamt sind bisher 6 Varianten der D-(IV)-Ketten bekannt. Eine dieser Ketten, die D-III(IV), findet sich nur in der Basalmembran der Nierenglomeruli, der Lungenalveolen und einigen anderen Basalmembranen. Das erklärt warum bei einzelnen Erkrankungen, die mit Schädigungen der Basalmembran einhergehen, bevorzugt Lungen und Nieren betroffen sind. Die Fortsätze der Podozyten stehen mit verbreiterten Füßchen direkt auf der Basalmembran und lassen zwischen sich Schlitze frei, welche in vivo schmäler als 5 nm sind. Der effektive Porenradius des Glomerulusfilters beträgt etwa 1,5–4,5 nm. Damit können im Prinzip Moleküle mit einer Masse bis zu 5 kDa ungehindert filtriert werden (. Tabelle 28.1). Darunter fallen Stoffwechselendprodukte wie Harnstoff, Kreatinin, Harnsäure etc., aber auch für den Körper wertvolle Substanzen wie Wasser, Monosaccharide, Aminosäuren, Peptide, Elektrolyte etc. Filtration nach Ladung. Die Fußfortsätze der Podozyten

sind von einer dicken negativ geladenen neuraminsäurereichen Glycocalix (Hauptprotein Podocalixin, Mw 144 kDa) überzogen, welche die Moleküldurchlässigkeit durch die Filtrationsschlitze noch zusätzlich hinsichtlich der Ladung der Stoffe beeinflusst. Damit spielt für die Filtrierbarkeit neben der mechanischen Einschränkung durch die Molekülgröße auch die Nettoladung der Moleküle eine . Tabelle 28.1. Glomeruläre Filtrierbarkeit biologischer Moleküle Molekül

Molekülmasse (Da)

Glomeruläre Filtrierbarkeit

Wasser

18

100%

Harnstoff

60

100%

Glucose

180

100%

Insulin

5500

99%

16000

75%

Ovalbumin

43500

22%

Hämoglobin

64000

3%

Albumin

66248

1%

Myoglobin

897 28.1 · Die Niere

. Abb. 28.2. a Schematische Darstellung eines Nierenglomerulus mit juxtaglomerulärem Apparat. Der juxtaglomeruläre Apparat besteht aus 3 Zelltypen, die alle miteinander in Kontakt stehen. Dies sind die extraglomerulären Mesangiumzellen, die sich zwischen der afferenten und efferenten Arteriole nach außerhalb erstrecken, die renin-

produzierenden Epitheloidzellen in der Wand der afferenten Arteriolen im Einmündungsbereich in das Glomerulus und die tubulären Macula densa-Zellen, welche den Endabschnitt der dicken aufsteigenden Henle-Schleife (. Abb. 28.3 in Kap. 28.1.3) bilden. (Aus Schmidt et al. 2000) b Schematische Darstellung der glomerulären Filtermembran

wichtige Rolle. Moleküle mit negativer Ladung treten schwerer als solche mit positiver Ladung in die Schlitze zwischen den negativ geladenen Podozytenfortsätzen ein. Das ist funktionell besonders bedeutsam für die Proteinfiltration, da die Plasma-Eiweißmoleküle in der Regel eine negative Überschussladung tragen, was neben ihrer Größe die Filtrierbarkeit zusätzlich reduziert.

Aufgrund einer Druckdifferenz zwischen dem Kapillarinneren und der Bowman-Kapsel werden ca. 20% des durchfließenden Plasmavolumens als wässriger, zellfreier und eiweißarmer Primärharn abfiltriert. In beiden Nieren eines Erwachsenen werden zusammen pro Minute im Normalfall ca. 125 ml Plasma-Ultrafiltrat als Primärharn erzeugt. Dieser Wert wird als glomeruläre Filtrationsrate (GFR) bezeichnet. Da die Nierenfunktion des Menschen auf eine gleich bleibende Filtrationsleistung (GFR) ausgelegt ist, haben

! Mehrere Sicherungsmechanismen sorgen für eine Konstanz der glomerulären Filtration.

28

898

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

28

. Abb. 28.3. Anordnung der Nephronsegmente und des Sammelrohrsystems in den verschiedenen Nierenzonen. Zu beachten ist die charakteristische Ultrastruktur der jeweiligen Tubulusabschnitte, insbesondere die Ausbildung des Bürstensaums zur Oberflächenvergrößerung und die Größe und Dichte von Mitochondrien als Ausdruck aerober Energiegewinnung. 1 proximaler Tubulus, gewundener

Teil; 2 proximaler Tubulus, gerader Teil; 3 dünne absteigende HenleSchleife; 4 dünne aufsteigende Henle-Schleife; 5 dicke aufsteigende Henle-Schleife; 6 Macula densa; 7 distaler Tubulus, gewundener Teil; 8 Verbindungstubulus; 9 corticales Sammelrohr (Hauptzelle); 10 innermedulläres Sammelrohr (Hauptzelle). (Modifiziert nach Kaissling u. Kriz aus Seldin u. Giebisch 2000)

899 28.1 · Die Niere

sich verschiedene Mechanismen entwickelt, die möglichen Schwankungen der GFR entgegensteuern: 4 Die Autoregulation der Nierendurchblutung (7 o.), welche auf einer myogenen Reaktion der afferenten Arteriolen (. Abb. 28.1) und dem tubulo-glomerulären Feedback (TGF) beruht. Dabei setzen die Macula densa Zellen des juxtaglomerulären Apparates (. Abb. 28.2) bei erhöhtem Salztransport (infolge erhöhter GFR) ATP frei. Dieses wird durch die 5c-Ektonucleotidase in Adenosin gespalten, welches wiederum die afferenten Arteriolen konstringiert (A1-Rezeptoren) 4 Bei Abfall des Nierenarteriendrucks sezernieren Epitheloidzellen des juxtaglomerulären Apparats am glomerulären Ende der afferenten Arteriolen das gespeicherte Renin, welches über eine Reaktionskaskade (Renin-Angiotensin-System, 7 u.) zur Bildung von Angiotensin II führt. Angiotensin II erhöht den arteriellen Blutdruck und konstringiert in der Niere präferentiell die efferenten Arteriolen. Beide Ereignisse zusammen führen zu einem Wiederanstieg des hydrostatischen Drucks in den Glomeruluskapillaren und damit zur Aufrechterhaltung der GFR

28.1.3

Aufbau des Harnkanalsystems

! Die spezielle Struktur des Tubulussystems bestimmt die Ausscheidungsfunktion der Niere.

Im Primärharn befinden sich nicht nur ausscheidungspflichtige Verbindungen sondern auch Moleküle, welche für den Körper noch sehr wertvoll sind. Dazu gehören Monosaccharide, Aminosäuren, Oligopeptide, Salze und natürlich auch Wasser. Entsprechend findet sich im Anschluss an jeden Glomerulus ein Kanalsystem (Tubulussystem), dessen Aufgabe die Rückresorption der wertvollen Stoffe und die möglichst effiziente Eliminierung der giftigen Stoffwechselendprodukte ist. Das System der Harnkanälchen besteht aus den Nephronen und aus dem Sammelrohrsystem, die sich ontogenetisch separat entwickeln (. Abb. 28.3). Ein Nephron besteht aus: 4 dem Glomerulus 4 der Bowman-Kapsel 4 dem proximalen Tubulus 4 der Henle-Schleife 4 der Macula densa 4 dem Konvolut des distalen Tubulus sowie dem 4 geraden Verbindungstubulus Zwischen 8–10 Nephrone münden in die einzelnen Sammelrohre, die aus der Rinde in Richtung Papillenspitze ziehen. In der Innenzone des Marks konvergieren alle Sammelrohre zu immer größeren Röhren bis hin zu den 10– 20 Ductus papillares einer Pyramide, welche schließlich in

das Nierenbecken einmünden. Die Nephrone eines Menschen haben je nach Länge der Henle-Schleife eine Gesamtlänge von 3–4 cm, die Sammelrohre sind im Mittel noch 2 cm lang. ! Der Extrazellulärraum der Niere ist kompartimentiert.

Das Harnkanalsystem durchzieht zweimal die Nierenrinde und zweimal das Nierenmark und wechselt dabei jeweils die Umgebungsbedingungen im Extrazellulärraum: Zwischen Rinde und Mark bestehen wesentliche Unterschiede in den O2-Partialdrucken (. Abb. 28.4). Wegen der relativ geringen Durchblutung des Nierenmarks nimmt die O2Versorgung von der Nierenrinde bis zur Papille hin ab. Dementsprechend findet man die höchsten mittleren O2Drucke in der Rinde (ca. 80 mmHg), die dann zur Papillenspitze bis auf 10 mmHg abfallen. Zwischen Rinde und Mark bestehen auch wesentliche Unterschiede in der Osmolarität des Interstitiums, welche in der Rinde 290 mosmol beträgt und bis zur Papillenspitze auf 1300 mosmol/l ansteigt (. Abb. 28.4). Die Erhöhung der Osmolarität beruht je zur Hälfte auf einem Anstieg der interstitiellen NaCl und Harnstoffkonzentration. Dieser Osmolaritätsgradient ist für die Wasserresorption in der Niere essentiell (zu seiner Entstehung 7 Lehrbücher der Physiologie). ! Die verschiedenen Funktionen der Niere sind jeweils verschiedenen Tubulussegmenten zugeordnet.

Die verschiedenen Tubulusabschnitte haben jeweils spezifische Funktionen zu erfüllen. Entsprechend werden die dafür notwendigen Funktionsproteine auch streng lokal exprimiert. Das gilt nicht nur für die zelluläre Expression als solche (. Abb. 28.5), sondern auch für die subzelluläre Lokalisation der Funktionsproteine, wobei deren selektiver Einbau entweder in die luminale oder basolaterale Zellmembran das Funktionsverhalten der verschiedenen Tubuluszellen bestimmt. Das wird beispielsweise bei der tubulären Natriumresorption deutlich, für die die verschiedenen Tubuluszellen unterschiedliche luminale Transportsysteme entwickelt haben, während sie als Gemeinsamkeit alle in der basolateralen Membran die Na+/K+-ATPase enthalten, mit welcher sie aus der Tubulusflüssigkeit eintretendes Natrium wieder in die Blutbahn zurückpumpen.

28.1.4

Reabsorption von Elektrolyten und Wasser

Wegen der Größe der glomerulären Filtrationsrate erbringen die Nieren eine gewaltige Leistung bei der notwendigen Reabsorption von Elektrolyten und Wasser. Hieran sind die verschiedenen Abschnitte des Nephron in unterschiedlichem Ausmaß beteiligt (. Tabelle 28.2). Die Reabsorption von Wasser und Natrium-Ionen macht mengenmäßig den größten Anteil aus.

28

900

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

28

. Abb. 28.4. Profil des Sauerstoffdrucks (oben) und der Osmolarität (unten) im Interstitium der verschiedenen Nierenzonen

. Tabelle 28.2. Reabsorptionsleistung der verschiedenen Abschnitte des Nephrons Gesamt (mol/24 h)

Na+

Proximalem Tubulus

Henle-Schleife Dünnem Teil

Distalem Tubulus Dickem, aufsteigendem Ast

Sammelrohr

65%

25%

0.7

80%

10%

Ca

0.2

65%

25%

9%

Mg2+

0.1

15%

70%

10%

+

K

2+

Cl– HCO3– H2O

23

Reabsorbiert in

19

9%

65%

25%

10%

4.3

80%

10%

10%

4

65%

10

18%

10%

901 28.1 · Die Niere

. Abb. 28.5a–o. Zonal spezifische Expression von Membrantransport-Proteinen in der Rattenniere. Der Nachweis der Expression der jeweiligen Proteine erfolgte durch in situ Hybridisierung. a Natrium-Glucose-Cotransporter (SGLT2); b Natrium-Hydrogencarbonat Cotransporter; c Natrium-Vitamin-C-Cotransporter (SVCT1); d Peptid-Transporter (PEPT2); e Natrium-Dicarboxylat-Cotransporter (SDCT1); f Natrium-Glucose-Cotransporter (SLGT1); g Natrium-Dicar-

boxylat-Cotransporter (SDCT2); h Glutamat-Transporter; i KationenTransporter (DCT1); j Harnstofftransporter (UT3); k Natrium-CalciumAustauscher; l Harnstofftransporter (UT2); m Harnstofftransporter (UT1); n Glutamat-Transporter (GLAST); o Kontrolle. Der Balken in (o) bezeichnet eine Länge von 2 mm. (Nach Berger et al. aus Seldin u. Giebisch 2000)

28

902

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

28

. Abb. 28.6. Die Mechanismen der Natriumresorption in den verschiedenen Tubulusabschnitten. Geschlossene Symbole geben

ATP-abhängige, offene Symbole sekundär aktive oder passive Transportvorgänge wieder. AS = Aminosäuren (Einzelheiten 7 Text)

! Über 99% des filtrierten Natriums werden im Tubulussystem reabsorbiert.

ren oder Säureanionen (7 u.) oder durch Antiport mit Protonen. Der Na+/H+-Austauscher befördert pro eintretendem Na+-Ion ein Proton aus der Tubuluszelle in die Tubulusflüssigkeit (. Abb. 28.7). Der Mechanismus der Regenerierung der für den Na+-Transport benötigten Protonen ist in . Abb. 28.8 dargestellt und entspricht einem gleichartigen Transportsystem im Ileum (7 Kap. 32.2.4). Eine nicht selektive passive Na+-Resorption im proximalen Tubulus erfolgt zusätzlich durch den starken parazellulären Wasserfluss (solvent drag,7 u.). Die Na+-Resorption im proximalen Tubulus wird durch Angiotensin II stimuliert (7 Kap. 28.1.10).

Das glomerulär filtrierte Na+ (23 mol/Tag) wird zu etwa 65% im proximalen Tubulus, zu 25% in der aufsteigenden Henle-Schleife, zu 7% im distalen Tubulus und zu 3% im Verbindungstubulus/Sammelrohr rückresorbiert. Im Normalfall werden weniger als 1% des filtrierten Natriums mit dem Urin ausgeschieden (. Abb. 28.6). Allgemeine Triebkraft für die Na+-Resorption ist das zelleinwärts gerichtete Konzentrationsgefälle für Natrium zwischen der Tubulusflüssigkeit und der Tubuluszelle. Dieses Konzentrationsgefälle wird durch die Aktivität der Na+/K+-ATPase (7 Kap. 6.1.5) erzeugt, welche in der basolateralen Membran der Tubuluszellen lokalisiert ist. Der Mechanismus der Na+-Aufnahme in die Tubuluszellen hängt von deren Lokalisation ab: Proximaler Tubulus. Hier erfolgt die apikale Na+-Aufnah-

me hauptsächlich durch Symport mit Glucose, Aminosäu-

Dünner aufsteigender Teil der Henle-Schleife. Hier wird Natrium passiv reabsorbiert. Diese Tubuluszellen besitzen eine hohe Chloridpermeabilität wegen zahlreicher Chloridkanäle (ClC-Ka, chloride channel-kidney a) in der luminalen und basolateralen Membran. Da die Interzellularkontakte in diesem Tubulusabschnitt für Kationen permeabel sind, diffundiert aufgrund eines starken Konzentrations-

903 28.1 · Die Niere

. Abb. 28.7. Modell der Membranintegration des Na/H-Austauschers-1 (NHE-1). Die Zylinder stellen die transmembranären Domänen dar. Die für den Ionentransport verantwortlichen Domänen sind rot hervorgehoben. Die Regulation der Aktivität erfolgt über

das C-terminale cytosolische Ende. In der Zellmembran bilden wahrscheinlich zwei Antiportmoleküle ein Dimer. (Verändert nach Ritter M et al. Cell Physiol Biochem 2001)

gradienten zwischen der aufkonzentrierten Tubulusflüssigkeit und dem Interstitium NaCl passiv aus der Tubulusflüssigkeit in das Interstitium.

Seite. Dabei entsteht bei diesem Transport eine negative Überschussladung im Interstitium. Diese Potentialdifferenz treibt Kationen (Na+, Mg2+, Ca2+, NH4+) parazellulär in das Interstitium.

Dicker aufsteigender Teil der Henle-Schleife. Na+ wird

hier über einen Na+/K+-2Cl–-Symport in der luminalen Membran resorbiert. Über zahlreiche Kaliumkanäle in der luminalen Membran diffundieren die über den Cotransport in die Zelle eintretenden K+-Ionen zum größten Teil in die Tubulusflüssigkeit zurück und stehen somit wieder für den Cotransport zur Verfügung. Die Cl–-Ionen verlassen mittels Diffusion die Zelle über spezifische Chloridkanäle (ClC-Kb, chloride channel-kidney b) und zu einem geringeren Teil über einen KCl-Symport an der basolateralen

Konvolut des distalen Tubulus. Natrium wird über einen luminalen NaCl-Symport reabsorbiert, wobei auch hier das Konzentrationsgefälle für Natrium zwischen der Tubulusflüssigkeit und der Tubuluszelle die Triebkraft für den Cotransport liefert. Na+ wird basolateral hinausgepumpt und Chlorid verlässt die Zelle über einen KCl-Symport. Das hierfür benötigte K+ rezirkuliert über die Aktivität der Na+/K+-ATPase. Überleitungsstück und Sammelrohr. Die Na+-Reabsorp-

tion erfolgt über spezifische Na+-Kanäle in der apikalen Membran der Hauptzellen, während K+ im Gegenzug durch apikale K+-Kanäle aus der Hauptzelle in die Tubulusflüssigkeit diffundiert. Da basolateral über die Na+/K+-ATPase Na+ aus der Zelle und K+ in die Zelle gepumpt werden, findet in den Hauptzellen somit netto eine Natriumresorption und eine Kaliumsekretion statt. Die Zahl und Aktivität der Na+-Kanäle und der Na+/K+-ATPase in den Hauptzellen wird durch das Nebennierenrindenhormon Aldosteron (7 u.) gesteigert. ! Filtriertes Wasser wird zu 99% wieder reabsorbiert. . Abb. 28.8. Regenerierung von Protonen für den Na+/H+-Austausch im proximalen Tubulus bei gleichzeitiger Hydrogencarbonat-Resorption. CAII = Carboanhydrase II, im Cytosol lokalisiert; CAIV = Carboanhydrase IV, mit einem GPI-Anker in der Membran des Bürstensaums verankert

Das glomerulär filtrierte Wasser (180 l/Tag) wird zu etwa 65% im proximalen Tubulus, zu 18% in der dünnen absteigenden Henle-Schleife und im Konvolut des distalen Tubulus und zu 10% im Verbindungstubulus/Sammelrohr rückresorbiert (. Abb. 28.9). Im Normalfall wird daher nur

28

904

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

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. Abb. 28.9. Die Mechanismen der Wasserresorption in den verschiedenen Tubulusabschnitten. AP = Aquaporin (Einzelheiten 7 Text)

weniger als 1% des filtrierten Wassers mit dem Urin ausgeschieden. Durch die transzelluläre Resorption von Natrium und anderen osmotisch wirksamen Molekülen (z.B. Monosaccharide, 7 u.) im proximalen Tubulus sinkt die Osmolarität der Tubulusflüssigkeit gegenüber dem Niereninterstitium ab. Zum Osmolaritätsausgleich strömt nun Wasser aus dem Tubuluslumen in das Interstitium. Dies geschieht zum einen transzellulär durch spezifische Wasserkanäle (Aquaporin 1) in der Membran der proximalen Tubuluszellen und zum anderen parazellulär durch die Interzellularverbindungen zwischen den Zellen Bei diesem starken parazellulären Wasserfluss werden gleichzeitig Ionen (z.B. Na+, K+, Ca2+, Mg2+ und Cl–) entsprechend ihrer Konzentration mitgerissen (solvent drag) und so resorbiert. Das Tubulusepithel des dünnen absteigenden Teils der Henle-Schleife enthält spezifische Wasserkanäle (Aquaporin 1) und ist daher gut wasserdurchlässig. Da das Interstitium des Nierenmarks und der Papille hyperton gegenüber dem Plasma ist (. Abb. 28.4), wird im Bereich der dünnen absteigenden Henle-Schleife Wasser aus der Tubulusflüssigkeit entzogen, wodurch der Harn konzentriert wird. Wie stark, hängt von der Länge der Schleife ab. Das Epithel des Konvoluts des distalen Tubulus in der Nierenrinde ist

ebenfalls gut wasserdurchlässig. Da durch die ElektrolytResorptionsaktivität der vorgeschalteten wasserimpermeablen dicken aufsteigenden Henle-Schleife die Tubulusflüssigkeit hypoton (100 mosmol/l) wurde, strömt im distalen Tubulus zum Osmolaritätsausgleich Wasser aus dem Tubulus in das Interstitium und wird so resorbiert. Die Einstellung der endgültigen Urinosmolarität erfolgt über die Hauptzellen des Verbindungstubulus und des Sammelrohrs. Die Sammelrohre tauchen auf ihrem Wege von der Rinde (in den Markstrahlen) an die Papillenspitze in Regionen zunehmender Osmolarität ein (. Abb. 28.4). Da der aus dem distalen Tubulus in das Sammelrohrsystem geleitete Harn plasma-isoton ist, entsteht mit zunehmender Passage durch das Sammelrohrsystem ein immer größerer osmotischer Gradient zwischen dem Niereninterstitium und der Tubulusflüssigkeit und damit ein zunehmender Sog auf das Wasser im Tubuluslumen. Die Interzellularkontakte im Sammelrohr sind wasserimpermeabel. Deshalb kann das Wasser nur transzellulär durch die Zellen aus dem Tubulus in das Interstitium diffundieren. Die Diffusion durch die luminale und basolaterale Membran erfolgt durch Aquaporine (7 Kap. 6.1). In der luminalen Membran der Hauptzellen findet man Aqua-

905 28.1 · Die Niere

porin 2, in der basolateralen Membran die Aquaporine 3 und 4 (. Abb. 28.10). Die Anzahl der luminalen Aquaporin-2-Kanäle limitiert die transzelluläre Wasserdiffusion. Der Einbau der Aquaporinkanäle in die luminale Membran wird vor allem durch das Antidiuretische Hormon (ADH oder Synonym: Vasopressin) reguliert (. Abb. 28.11). Dabei erhöht es in der apikalen Membran der Sammelrohrepithelien die Zahl der Wasserkanal (Aquaporin 2)-Moleküle, indem es eine Translokation von präformierten aber funktionslosen Wasserkanälen, die sich in intrazellulären Vesikeln befinden, in die apikale Plasmamembran induziert. Diese Wirkung wird durch den V2-Rezeptor vermittelt. Ähnlich wie der V1-Rezeptor gehört er zu den G-Protein gekoppelten Rezeptoren. Im Gegensatz zu diesem ist er jedoch an die Adenylatcyclase gekoppelt. Bei optimalem Wasserdurchfluss durch die Sammelrohrzellen kann der Harn fast die Osmolarität des Niereninterstitiums annehmen, welche an der Papillenspitze bis zu 1300 mosmol/l beträgt. Je geringer die Wasserdurchlässigkeit der Sammelrohrzellen ist, umso weniger Wasser wird reabsorbiert, umso weniger konzentriert ist der Endurin und umso größer ist das produzierte Urinvolumen (Diurese). Die osmotische Konzentration des Urins kann dabei auf 50 mosmol/l absinken. ADH kontrolliert so mit seiner Aktivität ca. 10% der glomerulär filtrierten Wassermenge. Bei maximaler ADH-Sekretion kann das Urinvolumen auf etwa 0,7 Liter pro Tag reduziert werden (maximale Antidiurese), während bei starker ADH-Suppression das Urinvolumen auf 20 Liter pro Tag ansteigen kann (maximale Diurese).

28.1.5

. Abb. 28.10. Modellvorstellung zur Struktur eines Aquaporins (AP-1). Die Aquaporine bestehen aus 6 Transmembrandomänen (1–6). Die Verbindungsschleifen zwischen den Domänen 2 und 3 sowie 5 und 6 tauchen teilweise in die Lipiddoppelschicht ein und bilden darin jeweils eine halbe Pore. Durch Zusammenlagerung der beiden Halbporen entsteht dann ein Wasserkanal aus hydrophilen Aminosäuren. (Modifiziert nach Agre et al. aus Seldin u. Giebisch 2000)

Reabsorption von Monosacchariden, Peptiden und Aminosäuren

! Filtrierte Monosaccharide werden in der Regel im proximalen Tubulus vollständig reabsorbiert.

Die für die Reabsorption von Monosacchariden benötigten Transportsysteme sind in der luminalen und basolateralen Membran lokalisiert. Glucose wird aus dem Primärharn über luminale Na+-gekoppelte Cotransporter SGLT1 und SGLT2 (sodium dependent glucose transporter) in die proximale Tubuluszelle transportiert (. Abb. 6.8). SGLT1 und SGLT2 unterscheiden sich nicht nur in ihrer Struktur, sondern auch hinsichtlich ihrer Lokalisation, ihrer Transportaffinität und Transportkapazität. Im Anfangsbereich des proximalen Tubulus dominiert dabei der SGLT2, der ein Glucosemolekül zusammen mit einem Na+-Ion transportiert. Mit diesem Transportsystem, welches eine hohe Kapazität aufweist, kann mit vergleichsweise niedrigem Energieaufwand (1 Na+) bereits der Großteil der Glucose resorbiert werden. Da die Glucosekonzentration in der Tubulusflüssigkeit durch die Resorption immer weiter absinkt, müssen die Cotransport-Triebkräfte stärker werden, um

. Abb. 28.11. Wirkungsmechanismus von Vasopressin (V) an den Sammelrohrepithelien der Nieren. Über V2-Rezeptoren (V2-R) kommt es zu einem Anstieg der zellulären cAMP-Konzentration. Diese löst über unbekannte Mechanismen eine Translokation von Wasserkanälen aus intrazellulären Vesikeln in die Plasmamembran aus. PKA = Proteinkinase A

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906

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

Glucose weiter zu resorbieren. Dies wird dann durch den SGLT1 bewerkstelligt, der ein Glucosemolekül zusammen mit zwei Na+-Ionen transportiert. Dieses Monosaccharidtransportsystem hat zwar eine hohe Affinität für Glucose, kommt jedoch in geringerer Menge vor und hat deswegen eine niedrigere Transportkapazität. SGLT1, der auch die Glucoseresorption im Darm vermittelt, wird vor allem im Endabschnitt des proximalen Tubulus exprimiert und sorgt dafür, dass im Normalfall die gesamte filtrierte Glucose aus dem Primärharn rückresorbiert wird. Die luminal aufgenommene Glucose verlässt die proximale Tubuluszelle basolateral wieder mittels des spezifischen (Natrium-unabhängigen) Uniporters GLUT2 (7 Kap. 11.4.1). Die tubuläre Resorption von Galactose erfolgt ebenfalls über den SGLT1. Fructose hingegen wird luminal über einen Na-unabhängigen Uniporter (GLUT5) in die proximale Tubuluszelle transportiert. ! Filtrierte Proteine, Peptide und Aminosäuren werden fast vollständig resorbiert.

28

Trotz der weitgehenden Impermeabilität des glomerulären Filters gelangen täglich einige Gramm Albumin und eine Reihe anderer Proteine in das Primärfiltrat. Albumin wird wie auch andere Proteine mittels des Megalinrezeptors (7 Kap. 23.2.2) über clathrinabhängige Endozytose in die proximale Tubuluszelle aufgenommen und darin lysosomal abgebaut. Größere Peptide werden über Endozytose (Pinozytose) in die proximale Tubuluszelle aufgenommen und darin in Lysosomen in einzelne Aminosäuren zerlegt. Oligo- und Polypeptide werden durch Peptidasen des Bürstensaums in Bruchstücke zerlegt und dabei entstehende Di- und TriPeptide über einen protonengekoppelten Transport direkt in die proximale Tubuluszelle aufgenommen. Freie Aminosäuren, welche entweder durch glomeruläre Filtration oder durch luminalen Proteinabbau in den proximalen Tubulus gelangen, werden dort vollständig reabsorbiert. Anionische (Glutamat, Aspartat) und neutrale Aminosäuren (Alanin, Glycin etc.) werden durch verschiedene luminale Natrium-gekoppelte Cotransportportsysteme aufgenommen, kationische (Arginin, Glutamin, Lysin, Ornithin) Aminosäuren und Zystin werden über Natrium-unabhängige Transportsysteme resorbiert. Durch diese sehr effektiven Rückresorptionsmechanismen wird die Proteinurie im Endurin unter 30 mg pro Tag gehalten.

28.1.6

Säure-Basen-Transport der Tubulusepithelien

! Organische Basen und Säuren können im proximalen Tubulus sowohl resorbiert wie auch sezerniert werden.

Organische Kationen. Für die Ausscheidung zahlreicher kationischer Medikamente, die wegen ihres hydrophoben

Charakters häufig an Plasmaproteine gebunden sind und deshalb glomerulär nicht filtriert werden können, stellt die tubuläre Sekretion den Haupteliminationsmechanismus dar. Ebenso werden endogene Kationen, wie z.B. Cholin, biogene Amine etc. im proximalen Tubulus in der Regel sezerniert. Dazu werden die organischen Kationen mittels des polyspezifischen Uniporters OCT2 (organic cation transporter) basolateral in die Zelle aufgenommen und luminal über einen polyspezifischen Kationen/ProtonenAntiporter abgegeben. Säureanionen. Anorganische (z.B. Phosphat etc.) aber auch kleine organische (z.B. Acetat etc.) Anionen werden normalerweise mittels Na+-gekoppelten CotransportSysteme (Na+-Mono(Di)carboxylat-Cotransporter, Na+Phosphat-Cotransporter etc.) über die luminale Membran aufgenommen und in den Zellen des proximalen Tubulus angereichert. Durch die basolaterale Membran werden diese Anionen mit Hilfe passiver Transportsysteme wieder ausgeschleust. Zahlreiche größere Anionen, dazu zählen oft auch Medikamente, werden über den proximalen Tubulus in den Harn sezerniert. In diesem Fall werden die Anionen basolateral mittels des polyspezifischen Anionenaustauscher OAT1 (organic anion transporter) in den proximalen Tubulus hineintransportiert und luminal über einen anderen Anionentransporter ausgeschleust. Spezifität der Transportsysteme. Die Transportsysteme,

welche die renale Sekretion von organischen Säuren und Basen vermitteln, sind polyspezifisch, das heißt, sie akzeptieren Substanzen unterschiedlicher Struktur als Substrat und unterscheiden nicht zwischen körpereigenen Substanzen oder Fremdstoffen. Da alle Transportsysteme ein begrenztes Transportmaximum haben, kann durch Fremdstoffe wie z.B. Medikamente die Sekretion von körpereigenen Abfallstoffen vermindert werden, was zur Akkumulation dieser Stoffe im Körper führen und entsprechende Krankheitserscheinungen auslösen kann. Eine besondere Rolle spielen diese Zusammenhänge bei der Entstehung und der Therapie der Gicht (7 Kap. 19.4.1).

28.1.7

Transport von Protonen und Hydrogencarbonat

! Protonensekretion und Hydrogencarbonatresorption sind miteinander gekoppelt und erfolgen im proximalen Tubulus und im Sammelrohr.

Im Stoffwechsel des Menschen entstehen täglich je nach Nahrungszusammensetzung 50–100 mmol nichtflüchtige Säuren, deren Protonen über die Niere ausgeschieden werden müssen. Dafür stehen drei Mechanismen zur Verfügung:

907 28.1 · Die Niere

a

b . Abb. 28.12. Schaltzellen Typ A und B. a Protonen-sezernierende/ Hydrogencarbonat-reabsorbierende Schaltzelle Typ A. b Hydrogencarbonat-sezernierende/Protonen-reabsorbierende Schaltzelle Typ B. Links: Funktionsschema. Rechts: Ultrastruktur. Es sei auf die Umord-

nung der Mitochondrien und der oberflächenvergrößernden Mikrovilli hingewiesen. (Modifiziert nach Kaissling und Kriz aus Seldin u. Giebisch 2000)

4 Na+/H+-Austausch im proximalen Tubulus. Bei der Sekretion der Protonen in den Urin wird in der proximalen Tubuluszelle CO2, das entweder aus dem Stoffwechsel der Zelle selbst stammt bzw. aus der Tubulusflüssigkeit oder dem Blut entnommen wird, unter Katalyse des Enzyms Carboanhydrase II in Hydrogencarbonat und Protonen umgewandelt. Während letztere im Austausch gegen Natrium in die Tubulusflüssigkeit diffundieren, tritt Hydrogencarbonat im Cotransport mit Natrium (Stöchiometrie 3:1) in den Extrazellulärraum (. Abb. 28.8). Die intrazelluläre Kohlensäureproduktion ist dabei direkt abhängig vom pCO2. Je höher der pCO2 in der Zelle, umso mehr Protonen werden sezerniert und Hydrogencarbonat-Ionen reabsorbiert. Sinkt der pCO2, dann sinken ebenfalls die Protonenausscheidung und die Hydrogencarbonatresorption 4 Protonen- und Hydrogencarbonatsekretion im Sammelrohr. Schaltzellen des Typs A im Sammelrohr sezernieren Protonen in den Urin (H+-ATPasen) und führen Hydrogencarbonat dem Extrazellulärraum zu (. Abb. 28.12a). Schaltzellen des Typs B sezernieren Hydrogencarbonat in den Urin und führen Protonen

dem Extrazellulärraum zu (. Abb. 28.12b). Zugrunde liegt wiederum eine intrazelluläre Bildung von Hydrogencarbonat und Protonen. Das Verhältnis von Typ-Azu Typ-B-Schaltzellen ist dabei variabel, da sie ineinander übergehen können. Je höher die Protonenkonzentration im Blut ist, umso höher ist die Zahl der protonensezernierenden Typ-A-Zellen und umgekehrt 4 Desaminierung von Glutamin im proximalen Tubulus. Glutamin wird in den perivenösen Zellen der Leber unter Energieaufwand durch die Glutaminsynthetase aus Glutamat unter Verbrauch von NH3 und H+ synthetisiert (7 Kap. 13.1.2). Glutamin wird von der Leber in die Zirkulation abgegeben, wo es mit 600–800 mmol/l die weitaus höchste Plasmakonzentration aller Aminosäuren erreicht. Es wird glomerulär filtriert und im proximalen Tubulus mit anderen Aminosäuren resorbiert. Zusammen mit der zusätzlichen Aufnahme aus dem Blut steht dem proximalen Tubulus damit Glutamin in beträchtlichem Umfang zur Desaminierung zu Glutamat zur Verfügung (. Abb. 28.13). Das entstehende NH4+ enthält damit ein Proton, welches dem Leberstoffwechsel entnommen wurde. Durch eine weitere

28

908

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

Urin-pH von 5,5 werden etwa nur 5 mmol H+ pro Tag in freier Form ausgeschieden. Dass die täglich produzierte Menge Protonen dennoch ausgeschieden werden kann, ist auf die Anwesenheit von Puffern im Urin zurückzuführen, die die sezernierten Protonen wegfangen und damit die weitere Protonensekretion in Gang halten. Dihydrogenphosphat-Hydrogenphosphat-System. Dieses

. Abb. 28.13. Verknüpfung von Glutaminabbau und Protonenausscheidung. (Einzelheiten 7 Text)

28

Desaminierung von Glutamat zu D-Ketoglutarat entsteht dann ein weiteres NH4+. Sein Proton entstammt der Protonierung der D-Aminogruppe des Glutamats und ist damit auch dem Stoffwechsel entzogen worden. Die Bereitstellung von Glutamin seitens der Leber und die Desaminierung von Glutamin in der Niere sind pH-abhängig: Beide Prozesse werden bei einem Anstieg der Protonenkonzentration aktiviert und bei einem Abfall entsprechend blockiert. Bei schwerer Azidose kann die Niere pro Tag 300–400 mmol NH4+ produzieren; allerdings benötigt sie für die erforderliche Anpassung mehrere Tage. NH4+-Ionen werden von der dicken aufsteigenden Henle-Schleife auch anstelle von K+ mit dem Na+/K+/2Cl–-Cotransporter resorbiert und so im Nierenmark akkumuliert, von wo sie direkt in das Sammelrohr diffundieren und so zum Teil zumindest den Weg durch die Rinde abkürzen ! Die Ausscheidung von Protonen über den Urin erfordert effektive Puffer.

Die Nieren des Menschen können so täglich bis zu 1000 mmol (1 mol) Protonen ausscheiden bzw. 300– 400 mmol einsparen. Die Nierentubuli sind imstande, die Wasserstoffionenkonzentration im Urin bis auf das 1000– fache zu erhöhen, von 40 nmol/l (der Konzentration im Blut und Glomerulumfiltrat) auf 40000 nmol/l (der Konzentration im Urin bei einem pH von 4,4). Diese 0,04 mmol/ l sind jedoch nur ein sehr geringer Teil der täglichen Produktion. Sollte die tägliche Bildung von durchschnittlich 60 mmol Protonen in der Tagesmenge von 1,5 l Urin ausgeschieden werden (entsprechend 40 mmol/l Urin), dann müsste ein Urin mit einem pH-Wert von 1,4 gebildet werden. Tatsächlich wird aber ein Urin-pH-Wert von 4,5 (Regelbereich 4,5–8,2) nicht unterschritten, weil die Protonenpumpen im Sammelrohr nur maximal gegen eine H+-Konzentration von 30 mmol/l (pH 4.5) arbeiten können. Folglich können die anfallenden Protonen nur zum geringen Teil in freier Form, sondern hauptsächlich nur in gebundener (gepufferter) Form im Endharn ausgeschieden werden (7 Kap. 28.2.1). Bei einem durchschnittlichen

Puffersystem weist im Glomerulumfiltrat eine annähernd gleiche Konzentration wie im Plasma auf (1 mmol/l) und liegt beim pH-Wert des Glomerulumfiltrats (7,40) zu 80% als Hydrogen- und zu 20% als Dihydrogenphosphat (Verhältnis 4:1) vor. Aufgrund der günstigen Lage seines pKcWerts mit 6,80 (pH = pKc ± 1 bei nichtflüchtigen Puffersystemen!) eignet es sich vorzüglich zur Urinpufferung. Erst bei einem pH-Wert von 4,5 ist nahezu das gesamte Hydrogenphosphat durch Aufnahme von Protonen nach der Gleichung

in Dihydrogenphosphat umgewandelt. Auf diese Weise werden bis zu 50% der Protonen im Urin von diesem Puffersystem aufgenommen. Durch Titration des Urins mit Base (NaOH 0,1 mol/l) wird diese Pufferung – in vitro – rückgängig gemacht und damit die abgepufferten Protonen quantitativ erfasst. Dieser als titrierbare Acidität des Urins bezeichnete Anteil beträgt beim Gesunden zwischen 10 und 40 mmol/24 h. Die titrierbare Acidität des Urins steigt bei Säurebelastung spontan an. Ammonium-/Ammoniak-System. Eine weitere Pufferungs-

möglichkeit ist die Bildung von Ammoniak, die im Gegensatz zu der des Phosphatpuffersystems in den Tubuluszellen erfolgt. Da die Konzentration von Ammoniak im Extrazellulärraum und damit auch im Glomerulumfiltrat aufgrund der entgiftenden Aktivität der Hepatozyten sehr niedrig ist, muss das von den Tubuluszellen in den Urin freigesetzte Ammoniak aus anderen Quellen stammen. Wesentlicher Ammoniakdonator ist die Aminosäure Glutamin, die in verschiedenen Geweben (Muskulatur, Gehirn, Leber) aus Glutamat und freiem Ammoniak gebildet wird, in den Extrazellulärraum übertritt und von den Tubuluszellen aus dem arteriellen Blut entnommen wird. Das in den Zellen des distalen und proximalen Tubulus sowie der Sammelrohre durch enzymatische Hydrolyse aus Glutamin freigesetzte Ammoniak diffundiert in das Lumen und wirkt dort als Protonenakzeptor nach der Gleichung

Das entstandene Ammoniumion kann aufgrund seiner Ladung die Tubulusmembran nicht permeieren und verbleibt daher im Urin.

909 28.1 · Die Niere

Die NH4+-Ausscheidung beträgt beim Gesunden etwa 30–50 mmol/24 h. Während das Phosphatpuffersystem auf eine Säurebelastung sofort anspricht, steigt die Ammoniumausscheidung erst innerhalb mehrerer Tage allmählich an. Sie kann dafür jedoch erheblich stärker gesteigert werden als die titrierbare Acidität und Werte bis zu 500 mmol/24 h erreichen. Ammoniak eignet sich besonders als Puffer, da es als Endprodukt des Stickstoffstoffwechsels in nahezu unbegrenzter Menge zur Verfügung steht. Es wird zwar in Aminierungsreaktionen (Glutamatdehydrogenase- und Glutaminsynthetasereaktion) teilweise wieder fixiert (wie Kohlendioxid in Carboxylierungsreaktionen), in der tierischen Zelle gibt es jedoch keine Nettofixierung dieser Endprodukte. Bei Säurebelastungen – wie z.B. bei länger dauerndem Hunger, der mit einer Ketoazidose einhergeht – wird deshalb mehr Stickstoff in Form von Ammoniak als in Form von Harnstoff ausgeschieden. Der pK-Wert des Ammonium-/Ammoniak-Puffersystems liegt mit 9,40 relativ ungünstig zum pH-Wert des Glomerulumfiltrats. Somit müsste dieser Puffer in einem geschlossenen System schlecht wirken. Da jedoch durch die Tubuluszellen ständig Ammoniak nachgeliefert wird, liegt der Puffer praktisch in einem offenen System vor. Dem Urin können hohe Säuremengen zugeführt werden, ohne dass sich der pH-Wert wesentlich ändert, weil in wässriger Lösung das Verhältnis von Ammonium-Ionen (NH4+) zu Ammoniak-Gas (NH3) sehr hoch ist (100:1 bei pH 7,40).

28.1.8

Ausscheidung harnpflichtiger Substanzen

Die Eliminierung im Stoffwechsel entstehender toxischer Substanzen ist eine wichtige Funktion der Niere. Die dabei beteiligten Mechanismen sind in . Tabelle 28.3 zusammengestellt. ! Bei Niereninsuffizienz steht eine verminderte Ausscheidungsfunktion im Vordergrund.

Ist die Ausscheidungsfunktion beider Nieren aufgrund einer Erkrankung oder Schädigung chronisch eingeschränkt, so kommt es zunächst zu einem Anstieg der harnpflichtigen Substanzen ohne allgemeine Vergiftungs-

erscheinungen und später zur vollen Ausbildung des klinischen Bilds, zur Urämie. Neben der Erhöhung der harnpflichtigen Substanzen lassen sich regelmäßig Fehlregulationen des Wasser- (Wasserretention, Anstieg der Plasmaosmolarität durch Harnstoff), Elektrolyt- (ungenügende Kaliumausscheidung) und des Säure-Basen-Haushalts (verminderte Protonenausscheidung) beobachten. Diese Veränderungen, sowie das Auftreten von Urämietoxinen wie Guanidinen, Phenolen und Aminen, führen zu gravierenden Störungen des Zellstoffwechsels (z.B. Hemmung der mitochondrialen ATPBildung). Die Behandlung der chronischen Niereninsuffizienz besteht in der Entfernung der Urämietoxine und harnpflichtigen Stoffe sowie der Korrektur der Elektrolytentgleisungen durch Dialyseverfahren wie Hämo- oder Peritonealdialyse. Durch die Entwicklung immer spezifischerer und nebenwirkungsärmerer Immunsuppresiva ist die Nierentransplantation zur Erfolg versprechendsten Therapieform der Niereninsuffizienz geworden.

28.1.9

Energiegewinnung in der Niere

! Die Natriumresorption determiniert wesentlich den Energieverbrauch der Niere.

Die Zellen des proximalen Tubulus, der dicken aufsteigenden Henle-Schleife und des Konvoluts des distalen Tubulus besitzen eine hohe Dichte an Mitochondrien, welche palisadenartig an der basalen Zellmembran angeordnet sind. Dieser Mitochondrienreichtum ist ein Hinweis auf den hohen Bedarf an oxidativ erzeugter Energie in Form von ATP. 80% des Energieumsatzes wird zum Betrieb der Na+/K+-ATPase verwendet, welche in der basalen Membran sitzt und den für den Natriumtransport wichtigen transzellulären Natriumgradienten erzeugt und aufrecht erhält. Entsprechend korreliert der Energieverbrauch der Niere mit der tubulären Na+-Resorption (. Abb. 28.14), da alle luminalen Na+-Aufnahmesysteme von diesem Gradienten abhängig sind. Weil die tubuläre Na+-Resorption von der filtrierten Na+-Menge abhängt, wird der Energieverbrauch der Niere von der glomerulären Filtrationsrate (GFR) bestimmt.

. Tabelle 28.3. Die Mechanismen der Eliminierung der im Stoffwechsel entstehenden toxischen Substanzen Verbindung

Entstehung

Mechanismus der Ausscheidung

Ausscheidung/24 h

Ammoniak

Aminosäurestoffwechsel

Tubuläre Desaminierung von Glutamin; Ausscheidung als Ammoniumionen

20–50 mmol

Harnstoff

Harnstoffzyklus

Glomeruläre Filtration, tubuläre Reabsorption

300–600 mmol

Harnsäure

Purinabbau

Glomeruläre Filtration, tubuläre Sekretion u. Reabsorption

2–12 mmol

Oxalat

Abbau von Glycin

Glomeruläre Filtration, tubuläre Sekretion u. Reabsorption

0,11–0,61 mmol

Kreatinin

aus Kreatinin

Glomeruläre Filtration

8–17 mmol

28

910

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

im proximalen Tubulus hat allerdings nachteilig zur Folge, dass diese Zellen unbedingt auf Sauerstoff zur Energiegewinnung angewiesen sind. Sie reagieren deshalb sehr empfindlich auf eine unzureichende Sauerstoffversorgung. In den nachgeschalteten Tubulusabschnitten wird dann Glucose verstoffwechselt und dabei nimmt die Aktivität des Glycolysestoffwechselwegs zum distalen Nephron hin zu. Der proximale Tubulus ist hingegen zur Gluconeogenese fähig. Hierfür nutzt er die Aminosäure Glutamin, aus welcher 2-mal NH3 abgespalten (Glutaminase und Glutamatdehydrogenase) wird und D-Ketoglutarat entsteht, welches als Ausgangssubstrat für die Gluconeogenese dient.

28.1.10 Die Niere als endokrines Organ

28

. Abb. 28.14. Sauerstoffverbrauch der Niere in Abhängigkeit von der Natriumresorption

! Die Sauerstoffversorgung der Niere ist inhomogen.

Die Niere erzeugt ATP hauptsächlich durch oxidative Phosphorylierung. Bei normaler GFR liegt der O2-Verbrauch bei 0,06 ml u min–1 u g–1. Da die Durchblutung mit 4 ml u min–1 u g–1 recht hoch ist, braucht die Niere damit nur ca 7% (0,015 ml O2/ml Blut) des antransportierten Sauerstoffes zu extrahieren, wodurch der Sauerstoffdruck im Nierenvenenblut mit etwa 60 mmHg noch sehr hoch bleibt. Diese Luxusdurchblutung darf aber nicht darüber hinwegtäuschen, dass die Sauerstoffversorgung innerhalb der Niere recht inhomogen ist und die O2-Drucke im schlecht durchbluteten inneren Nierenmark bis auf 10 mmHg absinken (. Abb. 28.5). Entsprechend ist der spezifische O2Verbrauch in der Papille (0,004 ml u min–1 u g–1) um den Faktor 20 niedriger als in der Rinde (0,09 mlumin–1 u g–1). ! Fettsäuren und Ketonkörper sind die Hauptsubstrate für die renale Energiegewinnung.

Die quantitativ bedeutsamsten Substrate für die oxidative Phosphorylierung in der Niere sind Acetoacetat, β-Hydroxybutyrat und Fettsäuren. Glucose spielt hierbei eine geringere Rolle, da der für die Glucosenutzung notwendige Glycolysestoffwechselweg im proximalen Tubulus fehlt, der hinsichtlich seiner Zellmasse und seines Energieumsatzes in der Niere dominiert. Dadurch fehlt dem proximalen Tubulus allerdings auch das Pyruvat, welches normalerweise nach Decarboxylierung als Acetyl-CoA in den Citratzyklus zur oxidativen Energiegewinnung eingespeist wird, weshalb Acetyl-CoA aus der E-Oxidation der Fettsäuren oder dem Abbau von Ketonkörpern gebildet wird. Das Fehlen des glycolytischen Stoffwechselwegs, und damit der Möglichkeit der anaeroben Energiegewinnung

Renin-Angiotensin-System (RAS). Renin ist eine Aspartylprotease mit einer Molekülmasse von ca 40 kDa. Es wird als enzymatisch inaktive Vorstufe (Prorenin) von den Epitheloidzellen des juxtaglomerulären Apparats synthetisiert und darin in Speichergranula verpackt. In diesen Vesikeln wird es durch Proteolyse zu Renin aktiviert, welches durch regulierte Exozytose aus den Zellen ausgeschleust wird. Das Prorenin umgeht die teilweise Einschleusung in die sekretorischen Vesikel und wird konstitutiv sezerniert, weshalb im Plasma des Menschen im Gegensatz zu anderen Säugern sogar mehr Prorenin als Renin vorkommt. Für Renin kennt man nur ein Substrat, nämlich das Glycoprotein Angiotensinogen (Molekülmasse ca. 60 kDa), das hauptsächlich in der Leber, daneben aber auch vom Fettgewebe gebildet wird. Renin spaltet im Plasma vom Angiotensinogenmolekül ein N-terminales Dekapeptid ab, das Angiotensin I, welches durch das angiotensin-I-converting-enzyme (ACE) um zwei Aminosäuren zum Oktapeptid Angiotensin II (AngII) verkürzt wird. Wegen ihrer hohen Aktivität an converting enzyme spielen die Lunge und die Niere eine besonders wichtige Rolle (. Abb. 28.15). Das menschliche ACE ist über eine C-terminale, hydrophobe, D-helicale Region in der Plasmamembran vieler Zellen, vor allen Dingen von Endothelzellen und glatten Muskelzellen verankert. In geringer Aktivität lässt sich ACE auch im Plasma nachweisen. Es wird von einem Gen von 21 kb Größe codiert, welches aus der Duplikation eines Vorläufergens entstanden sein muss, da es 2 alternative Promotoren enthält: 4 Die unter Benutzung des 5c-gelegenen Promotors abgelesene mRNA codiert für das somatische ACE, welches ein Molekulargewicht von 170 kDa hat und zwei funktionelle Domänen mit je einem aktiven Zentrum enthält. Die Aminosäuresequenz am aktiven Zentrum entspricht derjenigen einer Zinkprotease 4 Außer diesem somatischen ACE gibt es noch ein Keimzell-ACE, welches in reifen Spermatiden exprimiert wird, und welches für die männliche Fertilität wichtig ist. Es entsteht dadurch, dass der zweite Promotor des

911 28.1 · Die Niere

dafür, dass AT2-Rezeptor-vermittelte Wirkungen die Blutdruckwirkungen des AT1-Rezeptors abschwächen. ! Die Aktivität des Renin-Angiotensin-Systems (RAS) wird durch Rückkopplung reguliert.

. Abb. 28.15. Biosynthese und Abbau von Angiotensin II. Die Umwandlung von Angiotensin I in Angiotensin II erfolgt vor allen an den Gefäßendothelien durch das angiotensin converting enzyme (ACE)

ACE-Gens benutzt wird und führt zu einer ACE-Form, die nur über ein aktives Zentrum verfügt AngII als das eigentliche Hormon des Systems, entfaltet verschiedene biologische Wirkungen, die in der Kontrolle des Extrazellulärvolumens und des Blutdrucks zusammenmünden. AngII löst in glatten Gefäßmuskelzellen eine Kontraktion aus, was in verschiedenen Gefäßgebieten zu einer Vasokonstriktion und damit zu einer Erhöhung des Kreislaufwiderstands führt. Diese rasch einsetzende Erhöhung des Kreislaufwiderstands führt so zu einem unmittelbaren Anstieg des Blutdrucks. Durch verschiedene Mechanismen bewirkt AngII weiterhin eine Zunahme des Natriumbestands und damit auch des Extrazellulärvolumens (7 Kap. 28.2.3). ! An der Signaltransduktion von Angiotensin II sind AT1und AT2-Rezeptoren beteiligt.

Alle Angiotensin II-Wirkungen werden über Angiotensin II-AT1-Oberflächenrezeptoren vermittelt. Sie gehören zur Familie der G-Protein gekoppelten Rezeptoren (7 Kap. 25.6). Ihre Effekte beruhen auf einer Aktivierung des Phosphatidylinositolkaskade und damit auf einer Erhöhung der intrazellulären Calciumkonzentration und Stimulation der Proteinkinase C (7 Kap. 25.4.5). AT1-Rezeptoren können außerdem die Adenylatcylase sowie bestimmte K+-Kanäle hemmen und damit Zellen depolarisieren. In zahlreichen (vor allem fetalen) Geweben finden sich als weitere Isoform der Angiotensin-Rezeptoren die AT2-Rezeptoren. AT1- und AT2-Rezeptoren sind in der Aminosäuresequenz zu 34% identisch. Die physiologische Bedeutung und der Signaltransduktionsmechanismus des AT2-Rezeptors sind noch nicht eindeutig geklärt. Beim Erwachsenen wird der AT2-Rezeptor im Areal von Hautverletzungen besonders stark exprimiert. Man nimmt daher an, dass er eine Rolle bei der Wundheilung spielt. Beobachtungen an AT2-Knockout-Mäusen sprechen weiterhin

Die wesentliche physiologische Funktion des RAS von Erwachsenen besteht in der Erhöhung oder Normalisierung eines erniedrigten Extrazellulärvolumens oder Blutdrucks. Dabei kommt dem Renin eine Schlüsselfunktion zu: 4 Seine Freisetzung wird durch einen Blutdruckabfall in den afferenten Arteriolen der Niere und durch eine Reduktion des Extrazellulärvolumens (z.B. bei Natriummangel) stimuliert (. Abb. 28.16a) 4 Weiterhin stimulieren Adrenalin und Noradrenalin (E1-Rezeptoren) und Dopamin (D1-Rezeptoren) die Reninfreisetzung über die Aktivierung des cAMPSignalwegs (. Abb. 28.16b). Entsprechend führt auch eine Aktivitätssteigerung der sympathischen Nierennervenfasern zu einer Stimulation der Reninsekretion, was erklärt, warum Stresssituationen mit einer verstärkten Reninsekretion einhergehen 4 Die blutdruck- und volumensteigernde Wirkung des RAS wird dadurch begrenzt, dass ein erhöhter Blutdruck bzw. Salzüberschuss die Reninfreisetzung wieder hemmt 4 Auch AngII selbst hemmt im Sinne einer direkten negativen Rückkopplung über AT1-Rezeptoren die Reninfreisetzung (. Abb. 28.16a), was sich auch daran erkennen lässt, dass die Behandlung mit AT1-Rezeptorblockern oder ACE-Inhibitoren zu einer deutlichen Steigerung der Reninsekretion führt Auf zellulärer Ebene wird die Reningenexpression durch cAMP und durch Calcium (Phosphatidylinositolweg) gegenläufig reguliert (. Abb. 28.16b). ! Pathobiochemisch ist nur die Hypersekretion von Renin relevant.

Ein durch eine primäre Renin-Überproduktion und -Übersekretion hervorgerufenes Krankheitsbild entwickelt sich bei einseitiger Stenose der Nierenarterien. Die dabei herabgesetzte renale Durchblutung löst in der befallenen Niere eine massiv gesteigerte Reninproduktion und -freisetzung aus, die zu einer Steigerung der Angiotensin-II-Konzentration im Blut und aufgrund der vasopressorischen Wirkung dieses Hormons zur massiven Hypertonie führt. Bei Patienten mit essentieller Hypertonie (ca. 95% aller Hypertonie-Formen!) sind zwar erhöhte Reninkonzentrationen im Plasma eher selten, trotzdem führt eine Behandlung mit ACE-Hemmstoffen meist zu einer sehr deutlichen Absenkung des Blutdrucks, woraus man auf die Existenz lokaler Renin-Angiotensin-Systeme (z.B. in der Gefäßwand, Herz etc.) schließt. Erythropoietin. Das Cytokinhormon Erythropoietin (EPO) ist der zentrale hormonelle Regulator der Erythropoiese. Daneben mehren sich die Befunde, dass EPO zusätzlich in

28

912

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

28 . Abb. 28.17. Abhängigkeit der Plasmakonzentration von Erythropoietin von der Hämoglobinkonzentration des Bluts bei Nierengesunden und Patienten mit chronischer Niereninsuffizienz

. Abb. 28.16. Regulation von Reninsynthese und Reninsekretion in renalen juxtaglomerulären Epitheloidzellen. a Regulation der Reninsekretion durch negative Rückkopplung. b Antagonistische Regulation der Reningenexpression und Reninsekretion durch Adrenalin (über -Adrenorezeptoren) und Angiotensin II (über AngII-AT-1Rezeptoren). Aktivierung der Adenylatcyclase (AC) und der damit verbundene Anstieg von cAMP stimuliert die Reningentranskription und die Reninsekretion, während eine Aktivierung der Phospholipase C (PLC) und die damit verbundene Stimulierung der Proteinkinase C (PKC) und den Anstieg der cytosolischen Calciumkonzentration Reningentranskription und Reninsekretion hemmt

ischämischen Geweben (Gehirn, Herz) protektiv wirkt. Im Rahmen der Erythropoiese wirkt es als Mitogen, als Differenzierungsfaktor und als Überlebensfaktor für erythroid determinierte Vorläuferzellen im Knochenmark (7 Kap. 29.1). EPO ist ein Glycoprotein mit einer Molekülmasse von 30 kDa, wovon 16 kDa auf den Proteinanteil und 14 kDa auf den Kohlenhydratanteil entfallen. Der Kohlenhydratanteil (v.a. die terminalen Sialinsäuren) wird für die Interaktion von EPO mit seinem zur Familie der Cytokinrezeptoren zählenden Rezeptor auf der Zelloberfläche der erythroiden

Zielzellen nicht benötigt. Er ist aber sehr wichtig für die biologische Halbwertszeit und damit für die Verfügbarkeit von EPO. EPO wird in der Niere, Leber und im Gehirn gebildet. Während es vom Föten hauptsächlich noch in der Leber produziert wird, bilden ab dem Kindesalter die Nieren ca. 90% des gesamten EPO im Körper. In der Niere wird EPO von speziellen Fibroblasten zwischen den proximalen Tubuli in der Nierenrinde gebildet. Für die EPO-Bildung ist der O2- Gehalt des Bluts entscheidend. Eine verminderte O2-Zufuhr zur Nierenrinde stimuliert die EPO-Bildung, eine erhöhte O2-Zufuhr unterdrückt sie. Entsprechend führen arterielle Hypoxie und Anämie abhängig vom Schweregrad zu Steigerungen der EPO-Produktion und EPO-Plasmaspiegeln, wobei bis zu 10000-fache Erhöhungen gegenüber dem Normwert gemessen werden können. Ein O2-Überangebot an die Niere, z.B. bei Polyzythämie, führt zu einer Hemmung der EPO-Produktion. Zwischen der Hämoglobinkonzentration und der Plasma-EPO-Konzentration ergibt sich so ein inverser Zusammenhang (. Abb. 28.17). Die EPO-Bildung in den peritubulären Fibroblasten wird direkt vom Gewebesauerstoffdruck reguliert, welcher vom Verhältnis des O2Antransportes zu O2-Verbrauch bestimmt wird. Die EPO-Bildung ist dabei die Folge einer verstärkten Transkription des EPO-Genes. Diese wird durch den Transkriptionsfaktor HIF (hypoxia-inducible factor) ausgelöst, der als Heterodimer aus einer D- und einer E-Untereinheit besteht. Beide Untereinheiten werden ständig mit konstanter Rate synthetisiert, die Stabilität des HIF-D-Proteins

913 28.1 · Die Niere

ist jedoch abhängig vom O2-Druck. Bei höheren O2Drucken wird HIF-D durch eine O2-abhängige Prolinhydroxylase hydroxyliert. Dies ist ein Signal zur verstärkten Ubiquitinylierung mit anschließendem Abbau im Proteasom (7 Kap. 9.3). Mit verminderter Verfügbarkeit von O2 (sinkender pO2) nimmt daher die Ubiquitinylierung von HIF-D ab, weshalb es weniger rasch abgebaut wird. Damit steigt seine Konzentration in der Zelle, es wird mehr aktiver HIF gebildet und die Transkriptionsrate des EPO-Genes wird gesteigert (. Abb. 28.18). Zusätzlich hemmt eine O2-abhängige Asparaginhydroxylierung noch das Transaktivierungspotential von HIF-D. Dieser Mechanismus der O2-abhängigen Modulierung von HIF ist in vielen Körperzellen zu finden und dient den Zellen zum Schutz vor Sauerstoffmangelzuständen. HIF aktiviert nämlich nicht nur die Bildung von EPO, sondern auch die Bildung von z.B. Glucosetransportern, glycolytischen Enzymen und Gefäßwachstumsfaktoren (VEGF). Bei degenerativen Nierenerkrankungen ist die Regulation der EPO-Bildung deutlich gestört. Augenfällig wird dieser Defekt bei Betrachtung der Beziehung zwischen der Hämoglobinkonzentration und der Plasma-EPO-Konzentrationen. Die für den Nierengesunden charakteristische inverse Beziehung zwischen der Hämoglobinkonzentration und der EPO-Konzentration ist beim chronisch Nierenkranken dahingehend verändert, dass die kranken Nieren bei Anämie nicht vermehrt EPO bilden (. Abb. 28.17), weshalb eine kompensatorische Stimulation der Erythopoiese aus-

. Abb. 28.18. Transkriptionsregulation des Erythropoietingens durch den Hypoxie-induzierbaren Faktor (HIF). (Einzelheiten 7 Text)

bleibt. In der Folge bildet sich eine immer ausgeprägtere Anämie aus, welche charakteristisch für chronische Nierenerkrankungen ist, und als renale Anämie bezeichnet wird. Menschliches EPO wird mittlerweile gentechnisch hergestellt und steht so zur effektiven Therapie der renalen Anämie zur Verfügung.

In Kürze Die Niere besitzt ein streng organisiertes Blutgefäßsystem, das die Glomeruli speist. An diesen entspringt ein speziell aufgebautes Tubulussystem, das den filtrierten Primärharn zum Endharn aufbereitet und über das Sammelrohrsystem dem Nierenbecken zuleitet. In den Glomeruli wird der Primärharn als Ultrafiltrat des Blutplasmas gewonnen. Die Filtrationsrate des Primärharns hängt vom effektiven Filtrationsdruck und der filtrierenden Kapillaroberfläche ab. Die Zusammensetzung des Primärharns wird von der Filtereigenschaft des Glomerulus nach Molekülradius und Molekülladung bestimmt. Im proximalen Tubulus werden: 4 über 60% des filtrierten Wassers, Kochsalzes und Kaliums resorbiert, 4 filtrierte Glucose und Aminosäuren vollständig und Hydrogencarbonat zu über 90% resorbiert sowie 4 Ammoniak und Protonen in Form von Ammoniumionen ausgeschieden. Der proximale Tubulus hat die Fähigkeit: 4 zur Gluconeogenese, nutzt selbst aber keine Glucose sondern Fettsäuren zur oxidativen Energiegewinnung und

4 zur Resorption oder Sekretion anorganischer und organischer Säuren und Basen. Der interstitielle Osmolaritätsgradient zwischen Mark und Rinde ist die Voraussetzung für die Harnkonzentrierung im dünnen absteigenden Teil der Henle-Schleife und im Sammelrohr. Der distale Tubulus resorbiert aktiv über 30% des filtrierten NaCl, sowie Ammonium, Calcium, Magnesium und Wasser. Im konvergierenden Sammelrohrsystem wird die Endzusammensetzung des Harns festgelegt. Die tubuläre Natriumresorption bestimmt hauptsächlich den Energieverbrauch der Niere. Die Energiegewinnung erfolgt in der Rinde primär aerob, im Mark zunehmend auch anaerob, weil die Sauerstoffversorgung des Nierenmarks wesentlich schlechter als die der Rinde ist. Die Niere ist ein endokrines Organ: 4 Mit der Bildung und Freisetzung von Renin, kontrolliert die Niere die Aktivität des Renin-Angiotensin-Aldosteron-Systems, das wesentlich zur Regulation des Blutdrucks und des Extrazellulärvolumens beiträgt. 4 Mit der Bildung von Erythropoietin steuert die Niere essentiell die Neubildungsrate von Erythrozyten.

28

914

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

28.2

Der Endharn (Urin)

28.2.1

Eigenschaften des Urins

! Der gesunde Mensch bildet in Abhängigkeit vom Alter und Geschlecht täglich zwischen 500 und 2000 ml Urin.

Das Urinvolumen wird durch die Flüssigkeits- und Nahrungsaufnahme sowie durch extrarenale Flüssigkeitsabgabe mit Schweiß (Klima!), Atmung und Stuhl (Durchfälle) beeinflusst. Man spricht von einer: 4 Oligurie bei einem Harnvolumen von weniger als 400 ml/24 h (16 ml/h) 4 Anurie bei einem Harnvolumen von weniger als 100 ml/24 h (4 ml/h) und 4 Polyurie bei einem Harnvolumen von mehr als 2,5 l/24 h

28

Stickstoffreiche Kost erhöht die Urinausscheidung, da beim Abbau der Aminosäuren Harnstoff gebildet wird, dessen Ausscheidung über die Nieren Lösungsvolumen erfordert, wohingegen das beim Fettsäuren- und Kohlenhydratabbau freigesetzte Kohlendioxid mit der Atemluft abgeatmet werden kann. Das spezifische Gewicht in g/l hängt von Konzentration und Art aller gelösten Stoffe ab. Es liegt bei ausgeglichener Flüssigkeitsbilanz zwischen 1015 und 1022 (H2O = 1000), sinkt bei extremer Harnverdünnung auf 1001 (50 mosm/l H2O) und steigt bei extremer Konzentrierung bis auf etwa 1040 (1300 mosm/l H2O). ! Normaler Urin ist stroh- bis bernsteingelb.

Die wichtigsten Urinfarbstoffe sind die beiden Urochrome A und B, die sich spektralphotometrisch trennen lassen und 25 bzw. 70% des Harnfarbwerts ausmachen. Von untergeordneter Bedeutung ist der Gehalt an Uroerythrin (etwa 4%). Urochrom und Uroerythrin entstammen dem Hämabbau. Die Farbe wird durch die Konzentration an gelösten Stoffen, durch pathologische Bestandteile, Arznei- und Nahrungsmittel beeinflusst. Die 3 klinisch wichtigsten Ursachen eines roten Urins sind Hämaturie, Hämoglobinurie und Porphyrinurie. Bilirubin färbt den Urin dunkelbraun. Medikamentös und alimentär bedingte Urinverfärbungen sind ziemlich häufig. Zahlreiche Pharmaka und einige Nahrungsmittel bzw. deren Metaboliten können einen roten Urin verursachen. Grün gelbliche Fluoreszenz des Urins wird sehr häufig nach Einnahme von Multivitaminpräparaten, die Riboflavin enthalten, beobachtet. ! Frisch gelassener Urin riecht aromatisch.

Der Harngeruch kann nach dem Genuss mancher Speisen, Gewürze und Arzneimittel verändert werden (z.B. durch Knoblauch und Spargel). Der normale Harngeruch wird

durch bakterielle Zersetzung von Harnstoff in Ammoniak (Ureasereaktion) stechend. Ein Obstgeruch weist auf die Ausscheidung von Aceton hin (Diabetes mellitus). Urin schmeckt bitter und salzig. ! Der Urin ist bei normaler Kost sauer.

Mit der pH-Messung (Normalbereich pH 5,6–7,0) werden nur die freien Protonen bestimmt, die weniger als 1% der von den Nieren täglich zu eliminierenden Wasserstoffionen ausmachen und somit keinen quantitativen Aufschluss über die Nierenleistung vermitteln. Daher müssen die »titrierbare Säure« sowie die Ammoniumionenkonzentration bestimmt werden. Bei der titrierbaren Säure handelt es sich um diejenige Menge von Basenäquivalenten, die benötigt werden, um den Urin auf einen pH-Wert von 7,4 zu bringen. Diese Menge entspricht damit praktisch den phosphatgebundenen Protonen im Urin (ca 30 mmol/l). Die im NH4+ gebundenen Protonen werden – wegen des hohen pK-Werts dieser Verbindung von 9 – damit nicht erfasst (sog. nicht titrierbare Säure). Nach längerem Stehen wird Urin durch die Aktivität harnstoffspaltender Bakterien (7 o.) alkalischer.

28.2.2

Chemische Zusammensetzung des Urins

Die chemische Zusammensetzung des Urins wird durch Menge und Zusammensetzung der Nahrung (pflanzliche und/oder tierische Kost) sowie Alter und Geschlecht bestimmt (. Tabelle 28.4). Da die Konzentration der gelösten Stoffe im Laufe eines Tages erhebliche Schwankungen zeigen kann (z.B. die Phosphatausscheidung), sind für quantitative chemische Analysen Durchschnittsproben des 24-hUrins erforderlich. Der täglich von den Nieren ausgeschiedene Urin enthält durchschnittlich etwa 60 g (50–72 g) Trockensubstanz. Die im Urin vorkommenden Substanzen werden eingeteilt in solche, die physiologischerweise ausgeschieden werden (normale Harnbestandteile), und solche, die nur infolge von Krankheiten nachgewiesen werden können (pathologische Harnbestandteile). ! Die meisten ausgeschiedenen organischen Stoffe enthalten Stickstoff.

Außer den in . Tabelle 28.4 genannten harnpflichtigen Substanzen enthält Urin: 4 Nitrat: Diese Substanz ist im Urin stets in geringen Mengen vorhanden und stammt aus dem Abbau von NO. Da bestimmte Bakterien Nitrat in Nitrit umwandeln, dient der Nitritnachweis im Urin (mit Teststreifen) als Hinweis für eine bakterielle Besiedelung der Harnwege 4 Freie Aminosäuren: Der normale Urin kann 1–3 g Aminosäuren/Tag enthalten. Bei Lebererkrankungen steigt die Ausscheidung sehr stark an (Entfall der Puf-

915 28.2 · Der Endharn (Urin)

. Tabelle 28.4. Organische Bestandteile des Urins Tägliche Ausscheidung Harnstoff (abhängig von der Aminosäurezufuhr)

0,33–0,58 mol

Harnsäure (abhängig von der Nahrungszufuhr)

2–11 mmol

Kreatinin Frauen: 88–222 μmol/kg Körpergewicht Männer: 160-280 μmol/kg Körpergewicht

8–17 mmol

Kreatin

54–135 μmol

Aminosäuren

1–3 g

Glucose

bis 1,1 mmol

Ketonkörper

30–150 mmol

δ-Aminolävulinat

unter 45 μmol

Porphobilinogen

unter 10 μmol

Koproporphyrine

unter 280 μg

Uroporphyrine

unter 20 μg

Proteine

3–40 mg

D-Amylase

100–2000 U/l

ferfunktion der Leber!) und kann zum Auskristallisieren von Leucin und Tyrosin führen 4 Aminosäurederivate (Hydroxyprolin, Methylhistidin und Pyridinolin-Derivate): Hydroxyprolin ist fast ausschließlich im Kollagen vorhanden. Da das beim Kollagenabbau freigesetzte Hydroxyprolin nicht für die Biosynthese dieses Bindegewebeproteins reutilisiert werden kann, sondern entweder zu Kohlendioxid und Wasser oxidiert (85–90%) oder in den Urin ausgeschieden wird (10–15%), dient es als Indikator für einen veränderten Bindegewebestoffwechsel. Die Hydroxyprolinbestimmung wird zunehmend durch die Bestimmung der Pyridinolin-Abbauprodukte ersetzt (7 Kap. 24.2). 3-Methylhistidin, ein Bestandteil von Aktin und Myosin, gibt Informationen über den Muskelproteinumsatz (7 Kap. 30.2.2). Weitere stickstoffhaltige Substanzen sind Hippursäure (0,1–1,0g/24 h), N-haltige Phenole und Indican (4–20 mg/24 h). 4 Proteine: Je nach angewandter Untersuchungsmethode können 3–40 mg Protein im 24-h-Urin nachgewiesen werden. Sie bestehen zu 2/3 aus Plasmaproteinen (Albumin 60%, Immunglobuline und andere Globuline jeweils 20%) und zu 1/3 aus Gewebsproteinen. Glycoproteine (Mucine) stammen aus der Schleimhaut der Blase und kommen ebenfalls im normalen Urin vor 4 Schwefelhaltige Substanzen: Der mit dem Urin ausgeschiedene Schwefel besteht im Wesentlichen aus anorganischem Sulfat. Da dieses beim Abbau der Aminosäuren Methionin und Cystein entsteht, wird seine täglich ausgeschiedene Menge (von 3–60 mmol/d durch die zugeführte Proteinmenge bestimmt. Etwa 10% des

ausgeschiedenen Sulfats liegen als konjugiertes Sulfat (z.B. Phenole und Steroide) vor und werden deshalb als Ätherschwefelfraktion bezeichnet. Die übrigen schwefelhaltigen Verbindungen wie Cystein, Taurin und Thiocyanat werden unter dem Begriff Neutralschwefel zusammengefasst 4 Hormone und Vitamine: Im Urin vorkommende diagnostisch wichtige Hormone sind Adrenalin, Noradrenalin, Steroide, Gonadotropine, Serotonin bzw. deren Abbauprodukte (Vanillinmandelsäure, 17-Hydroxyund 17-Ketosteroide, 5-Hydroxyindolessigsäure). Von den Vitaminen sind – in Abhängigkeit von der zugeführten Menge – hauptsächlich die wasserlöslichen B-Vitamine und Vitamin C vertreten 4 Phosphat: Die Ausscheidung von Phosphat ist nahrungsabhängig und tageszeitlichen Schwankungen unterworfen. Im Glomerulumfiltrat liegt Phosphat – wie im Blutplasma – bei einem pH-Wert von 7,4 zu 80% als Hydrogenphosphat und zu 20% als Dihydrogenphosphat vor. Verschiedene Krankheitszustände gehen mit einer Erhöhung (Hyperparathyreoidismus, 7 Kap. 28.6.4) bzw. Erniedrigung (Hypoparathyreoidismus, 7 Kap. 28.6.4) der Phosphatausscheidung einher

28.2.3

Pathobiochemie des Urins

Pathologische Urinbestandteile sind nach Schädigungen der Nieren (Permeabilitätsänderung der glomerulären Kapillarmembran bzw. Einschränkung der Tubulusfunktion) oder bei pathologischer Erhöhung der Plasmakonzentration eines Stoffes (Überlaufmechanismus) nachweisbar. ! Eine pathologische Proteinausscheidung tritt bei entzündlichen und degenerativen Nierenerkrankungen auf.

Bei Nierenerkrankungen, welche auch die glomeruläre Filterfunktion miterfassen, wird mehr Protein filtriert als in der proximalen Tubuluszelle maximal reabsorbiert werden kann. Entsprechend wird vermehrt Eiweiß im Endurin ausgeschieden. Unter Proteinurie versteht man entweder eine Gesamtausscheidung von mehr als 150 mg Protein in 24 Stunden oder eine Abweichung vom Verteilungsmuster der physiologisch im Harn vorkommenden Proteine. Eine Sonderstellung nimmt die Mikroalbuminurie ein. Eine erhöhte Albuminausscheidung in den Urin von 20–300 mg/24 h weist auf glomeruläre Schäden bei Diabetikern hin. Als nephrotisches Syndrom wird eine große Proteinurie mit mehr als 3,5 g pro Ausscheidung in 24 Stunden bezeichnet. Beim Plasmocytom ist das Bence-JonesProtein nachweisbar. Einschränkungen der Reabsorptionsleistung können ebenfalls zur Proteinurie führen. Am bekanntesten hierfür sind genetisch bedingte Funktionsveränderungen von Aminosäuretransportern, welche zur Aminoazidurie führen.

28

916

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

! Die renale Glucoseresorption hat ein Transportmaximum; Glucosurie weist fast immer auf einen Diabetes mellitus hin.

Das Auftreten von Monosacchariden im Urin wird als Melliturie bezeichnet. Die wichtigste und häufigste Melliturie ist die Glucosurie (7 Kap. 26.4.1). Ausscheidungen anderer Monosaccharide (Fructose, Lactose, Galactose, Pentosen) haben wegen ihres seltenen Auftretens nur geringe Bedeutung. Die tubuläre Rückresorption von Glucose erfolgt über eine begrenzte Zahl von Transportmolekülen. Wenn die filtrierte Glucosemenge die maximale Transportkapazität der Na+-gekoppelten Symportsysteme überschreitet, erscheint Glucose im Endharn (Glucosurie) und geht damit dem Körper verloren. Das geschieht, wenn die Glucosekonzentration im Plasma (Normalwert 5 mmol/l) und damit auch im Primärharn 10 mmol/l überschreitet (sog. Nierenschwelle). ! Nahrungskarenz führt zur Ketonurie.

28

Muskelverletzungen (»Crush-Syndrom«; quetschen, engl. to crush) in den Urin übertreten. Bei intravasaler Hämolyse tritt Hämoglobin in den Urin über sobald die Haptoglobinbindungskapazität des Plasmas 7 Kap. 29.6.3) und die Reabsorptionskapazität der Tubuli für Hämoglobin überschritten werden. Das ist in der Regel bei Hämoglobinkonzentrationen über 1,2 g/l der Fall. Porphyrinurie. Das Vorkommen von Uroporphyrinen sowie vermehrter Mengen von Koproporphyrinen im Urin wird als Porphyrinurie bezeichnet (7 Kap. 20.2). Die normale Koproporphyrinausscheidung im Urin beträgt 90– 430 nmol (60–280 mg)/24 h. Über die Anwesenheit von Bilirubin, Urobilin und Urobilinogen und ihre Beziehung zur Gelbsucht informiert 7 Kapitel 20.

28.2.4

Harn- und Nierensteine

! Zwei Drittel aller Harnsteine sind Oxalatsteine.

Die normalerweise geringe Ausscheidung (3–15 mg/24 h bzw. 30–150 mmol/24 h) der Ketonkörper (Aceton, Acetacetat, E-Hydroxybutyrat) ist erhöht im Hungerzustand, bei Diabetes mellitus, während der Schwangerschaft und bei einigen Alkaloseformen. Bei kohlenhydratarmer und fettreicher Kost sind aufgrund der erhöhten Lipolyserate ebenfalls Ketonkörper im Urin nachweisbar. Die frühzeitige Diagnose der diabetischen Ketonurie ist wichtig, da sie eine Stoffwechselentgleisung anzeigt. Die Bestimmung muss mit frisch gelassenem Urin sofort durchgeführt werden, da Acetacetat spontan zu Aceton decarboxyliert, das flüchtig ist. ! Rotverfärbung des Urins tritt bei Hämoglobinurie, Hämaturie und Porphyrien auf.

Hämaturie. Treten Erythrozyten in den Urin über, so liegt

eine Hämaturie vor. Hämoglobinurie. Freies Hämoglobin kann nach schwerer Hämolyse oder schweren Verbrennungen, Myoglobin nach

Die Konzentrationsleistung der Nieren bei der Bildung des Urins ermöglicht die Ausscheidung mancher Stoffe in relativ hoher Konzentration. Dabei hängt die Löslichkeit derartiger Verbindungen weitgehend von der Protonenkonzentration des Urins ab, da die Wasserstoffionen des Lösungsmittels die Dissoziation gelöster Stoffe und damit deren Löslichkeit bestimmen (je polarer, desto wasserlöslicher). Unter bestimmten Umständen stellt der Urin für eine Reihe von Verbindungen, v.a. Calciumoxalat und Calciumphosphat, eine übersättigte Lösung dar. Citrat und einige Urinproteine (7 u.) verhindern normalerweise das Ausfallen dieser Verbindungen und die Bildung von Steinen. Bei einem verminderten Gehalt des Urins an diesen Regulationsfaktoren und entzündlichen Veränderungen von Nieren und Harnwegen kommt es jedoch in Nieren (Nephrolithiasis), der Harnblase oder Harnröhre (Urolithiasis) zu Ablagerungen und zur Bildung kleinerer oder größerer Steine oder Konkremente. Da die Zusammensetzung des Urins weitgehend durch die aufgenommene Nahrung bestimmt wird, ist es wichtig, die chemische Zusammenset-

. Tabelle 28.5. Zusammenstellung häufiger Nierensteine Bezeichnung

Konkremente aus

Ursache

Häufigkeit (%)

Calciumoxalat-Steine

Calciumoxalat und Calciumphosphat

Hypercalciurie, Hyperoxalurie (selten)

70

Struvit-Steine

Magnesium-Ammoniumphosphat

Harnwegsinfekte mit harnstoffspaltenden Mikroorganismen. Dadurch gesteigerte Ammoniakbildung mit alkalischem Urin

15

Harnsäuresteine

Harnsäure

Hyperuricosurie wegen gesteigertem Purinabbau (Gicht) oder erhöhtem Zellumsatz bei Hyperacidität des Urins

10

Cystinsteine

Cystin

Cystinurie

selten

917 28.3 · Der Wasserhaushalt

zung der Harn-(Nieren-)Steine zu kennen, um durch eine entsprechende Diät ihrer weiteren Bildung entgegenwirken zu können. Die häufigsten Steinformen sind in . Tabelle 28.5 zusammengestellt. Die Steine kommen selten in reiner Form vor, 90% enthalten einen oder mehrere zusätzliche kristalline Bestandteile. Außerdem sind immer Proteine und Glycoproteine, die etwa 3% des Gesamtgewichts des Steins ausmachen, vorhanden. Nierensteine gelangen oft in den Harnleiter und können dort eine Kolik auslösen. Kleinere Blasensteine verfan-

gen sich manchmal im inneren Harnröhrenostium und lösen so eine Kolik aus. Verschiedene Nierenproteine hemmen die Steinbildung. Nephrocalcin, ein saures Glycoprotein, das die Aminosäure J-Carboxyglutamat enthält, hemmt die Bildung von Calciumoxalatsteinen. Ähnlich wirkt das TammHorsfall-Glycoprotein. Uropontin, ebenfalls von den Nieren gebildet, hemmt das Wachstum von Calciumoxalatkristallen. Möglicherweise begünstigen Konzentrationsveränderungen derartiger Proteine die Entwicklung von Steinen.

In Kürze Der gesunde Mensch bildet in Abhängigkeit von Alter und Geschlecht täglich 500–2000 ml sauren Urin, der normal stroh- bis bernsteingelb ist und aromatisch riecht. Der Urin enthält in höherer Konzentration die wasserlöslichen Endprodukte des Eiweißstoffwechsels, die damit stickstoffhaltig sind. Die Proteinausscheidung über den Urin ist normalerweise sehr gering, nur bei entzündlichen und degenerativen Nierenerkrankungen tritt eine pathologische Proteinausscheidung (Proteinurie) auf.

28.3

Der Wasserhaushalt

28.3.1

Wasserbilanz

! Das Körperwasser verteilt sich auf verschiedene Kompartimente.

Da das Fettgewebe im Vergleich zu anderen Körpergeweben einen sehr viel geringeren Wassergehalt besitzt, sollte das Körperwasser eigentlich auf die fettfreie Körpermasse (lean body mass) bezogen werden. Bei einer großen Zahl von Säugetieren einschließlich des Menschen beträgt der Wassergehalt der fettfreien Körpermasse konstant 72–74% (. Abb. 28.19). Da das Körperwasser mit der Isotopendilutionsmethode gut bestimmt werden kann, lässt sich diese Beziehung zur Berechnung des Körperfettgehalts verwenden:

Bezieht man den Wassergehalt auf die Gesamtmasse, so ist dieser im Wesentlichen vom Körperfett abhängig, das je nach Geschlecht und Lebensalter schwankt. Bei Säuglingen macht das Körperwasser noch etwa 75% der Körpermasse aus, beim erwachsenen Mann etwa 60%, und bei der erwachsenen Frau etwa 50% (wegen eines höheren Fettgewebsanteils).

Der Urin enthält normalerweise keine Glucose. Eine Glucosurie weist deshalb fast immer auf einen Diabetes mellitus hin. Bei Hungerzuständen steigt die Konzentration von Ketonkörpern im Urin (Ketonurie) an. Rotverfärbung des Urins tritt bei Hämoglobinurie, Hämaturie und Porphyrien auf. Durch Auskristallisieren von Salzen im Urin entstehen Harnsteine, wovon die häufigsten Oxalatsteine sind.

Innerhalb des Körpers lassen sich 2 Wasserräume unterscheiden, nämlich der größere Intrazellulärraum (60–65% des Körperwassers) und der kleinere Extrazellulärraum (35–40% des Körperwassers). Der Extrazellulärraum lässt sich weiter unterteilen in den interstitiellen Raum (75% des Extrazellulärvolumens), das Blutplasma (25% des Extrazellulärvolumens) und die transzelluläre Flüssigkeit (z.B. Liquor cerbrospinalis etc.), die aber nur etwa 1 Liter beim Erwachsenen ausmacht. ! Die Wasserzufuhr dient der Kompensation obligater und nichtobligater Wasserverluste.

Der Mensch kann wochenlang auf die Zufuhr von Nahrungsstoffen verzichten, jedoch nur wenige Tage auf die von Wasser und Elektrolyten. Die Wasserbilanz eines 70 kg schweren Erwachsenen ist in . Tabelle 28.6 zusammengestellt. Damit sie ausgeglichen ist, muss die Zufuhr die Wasserverluste kompensieren. Dabei ist zu beachten, dass fast 40% der Wasserverluste als Wasserdampf über die Lungen und die Haut erfolgen. Hierdurch gehen etwa 25% der Wärmeproduktion des Körpers verloren. Dieser obligate Wasserverlust spielt eine Rolle bei der Regulation der Körperwärme und nimmt auch bei hochgradigen Flüssigkeitsverlusten nur wenig ab. Im Organismus entsteht Wasser bei der mitochondrialen Oxidation der Nahrungsstoffe (Biooxidation). Die Oxidation von 100 g Fett liefert 107 ml, die von 100 g

28

918

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

. Tabelle 28.6. Tägliche Zufuhr und Verlust von Wasser beim Erwachsenen

28

Wasserzufuhr

ml

Wasserverlust

ml

Trinken (Wasser und Getränke)

1200 (500–1600)

Urin

1400 (600–1600)

Wasser der Nahrungsstoffe (Gehalt: 60–97% Wasser)

900 (800–1000)

Lungen und Haut (Perspiration)

900 (850–1200)

Oxidationswasser

300 (200–400)

Faeces

100 (50–200)

Insgesamt

2400 (1500– 3000)

2400 (1500–3000)

Kohlenhydraten 55 ml und die von 100 g Protein 41 ml Wasser. Die vom Menschen täglich gebildete Menge Oxidationswasser beträgt etwa 300 ml. Der darüber hinausgehende Teil der Wasserbilanz muss durch Getränke und den Wassergehalt der Nahrungsmittel ausgeglichen werden. In die Bilanz gehen die 5–10 l Verdauungssekrete, die in den Magen-Darm-Trakt abgegeben werden, nicht mit ein, da sie schließlich wieder reabsorbiert werden. Sie sind aber beim Erbrechen oder bei Durchfällen von Bedeutung. ! Die Regulation des Wasserhaushalts erfolgt hauptsächlich durch Osmoregulation.

Der Wasserhaushalt des Körpers wird über die Osmolarität der Extrazellularflüssigkeit geregelt, die normalerweise bei ca. 290–295 mosmol/l liegt und deren Konstanz vom Körper angestrebt wird. Entscheidend für die effektive Osmolarität im Extrazellulärraum sind vorwiegend Natriumionen, welche in einer Konzentration von 140 mmol/l vorliegen, zusammen mit Chlorid- und Hydrogencarbonat-Anionen. Die Osmolarität im Intrazellulärraum entspricht der des Extrazellulärraums. Im Intrazellulärraum sind die Träger der effektiven Osmolarität im Wesentlichen Kaliumionen und die organischen Phosphate bzw. die Proteine. Die Osmolarität wird ständig durch die Osmorezeptoren des Hypothalamus kontrolliert, die Änderungen der Osmolarität des Extrazellulärraums mit hoher Sensitivität erfassen. Diese regeln die Wasseraufnahme und -ausscheidung derart, dass die Osmolarität im Extrazellulärraum konstant bleibt, sodass sich im Normalfall Wasseraufnahme und -ausscheidung die Waage halten.

. Abb. 28.19. Beziehung zwischen Körperwasser und fettfreier Körpermasse bei verschiedenen Säugern. (Daten nach Wang Z et al. 1999)

28.3.2

Hormonelle Regulation des Wasserhaushalts

! Das antidiuretische Hormon (ADH) ist das zentrale Hormon in der Regulation des Wasserhaushalts.

Als blutdrucksteigerndes, antidiuretisches Peptid kommt im Hypophysenhinterlappen das aus 9 Aminosäuren bestehende antidiuretische Hormon, ADH (Synonym: Vasopressin oder Pitressin) vor (. Abb. 28.20). Die Cysteine in den Positionen 1 und 6 bilden eine Disulfidbrücke. Ein sehr ähnliches, ebenfalls im Hypophysenhinterlappen vorkommendes Peptidhormon ist das Ocytocin. Es unterscheidet sich vom Vasopressin lediglich in 2 Aminosäuren. Das Phenylalanin des Vasopressins ist im Ocytocin durch Isoleucin ersetzt, das Arginin durch Leucin. Ocytocin ist die wichtigste zur Uteruskontraktion führende Substanz und wird infolgedessen im Rahmen der Geburtshilfe verwendet. Außerdem führt es zu einer Kontraktion der glatten Muskulatur der Brustdrüse, wodurch es zur Milchexkretion kommt. ! ADH (Vasopressin) wird als Prohormon im Hypothalamus gebildet.

Vasopressin wird – wie Ocytocin – in den neurosekretorischen Neuronen der paraventrikulären Kerne des Hypothalamus gebildet. Das Vasopressin-Gen (. Abb. 28.21) ist ein Polyprotein-Gen, welches aus 3 Exons und 2 Introns besteht. Die nach Transkription und Entfernung der Introns entstehende mRNA codiert für Prä-Provasopressin. Nach Abtrennung der N-terminalen Signalsequenz entstehen Provasopressin und aus diesem durch weitere limitierte Proteolyse das N-terminal gelegene Nonapeptid Vasopressin, ein als Neurophysin II bezeichnetes Protein sowie ein Glycoprotein. Das Ocytocin-Gen ist sehr ähnlich aufgebaut und codiert für ein über weite Bereiche homologes Präproocytocin. Aus ihm entstehen Ocytocin sowie Neurophysin I. Eine zum Glycoprotein des Vasopressinpräkur-

919 28.3 · Der Wasserhaushalt

. Abb. 28.20. Chemische Struktur des Nonapeptids Vasopressin. Die Cysteinreste in Position 1 und 6 sind durch eine Disulfidbrücke

verknüpft, sodass eine zyklische Struktur entsteht. Im Ocytocin sind Phenylanalin durch Isoleucin und Arginin durch Leucin ersetzt

sors analoge Verbindung kommt beim Ocytocin nicht vor. Man nimmt an, dass das Vasopressin- und Ocytocin-Gen von einem gemeinsamen Vorläufer-Gen abstammen. Die Neurophysine dienen als Trägerproteine für Vasopressin bzw. Ocytocin während ihres Transports vom Ort der Biosynthese entlang entsprechender Axone in den Hypophysenhinterlappen, dem Ort ihrer Sekretion. Über die Funktion des C-terminalen Glycoproteins ist nichts bekannt.

Renale Wirkungen. Über V2-Rezeptoren wirkt ADH durch

! ADH (Vasopressin) wirkt vasokonstriktorisch über V1-Rezeptoren und fördert die renale Wasserrückresorption über V2-Rezeptoren.

Gefäßwirkungen. ADH (Vasopressin) löst über V1-Rezeptoren eine Kontraktion der glatten Muskelzellen der Blutgefäße aus. Das bewirkt einen Blutdruckanstieg durch die Erhöhung des Kreislaufwiderstands. Die V1-Rezeptoren gehören zur Familie der G-Protein gekoppelten Rezeptoren und sind an die Phosphatidylinositol-Kaskade gekoppelt, ihre Aktivierung führt also zu einer Erhöhung der cytosolischen Calciumkonzentration.

eine Stimulierung der Wasserrückresorption im Sammelrohrsystem der Niere (7 Kap. 28.1.4).antidiuretisch. Da die Halbwertszeit des zirkulierenden ADH als Peptidhormon ca. 5 Minuten beträgt, wirken sich Änderungen der ADHFreisetzung schnell auf die ADH-Konzentration im Plasma aus. So kann der Organismus sehr rasch auf Änderungen des Wasserbestands bzw. der Osmolarität reagieren und verhindern, dass es zu unerwünschten Volumenänderungen des Intrazellulärraums kommt. ! Die ADH-Freisetzung wird durch eine Erhöhung der Plasmaosmolarität, eine Verringerung des Extrazellulärvolumens und durch Hormone stimuliert.

Die Freisetzung von ADH aus dem Hypophysenhinterlappen wird durch osmotische und nichtosmotische Signale gesteuert: 4 Die Plasmaosmolarität ist für die ADH-Sekretion von besonderer Wichtigkeit. Die Schwelle für die ADHFreisetzung liegt bei ca. 275–280 mosmol/l, weshalb

28

920

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

Auslösung des Durstgefühls liegt nur 5–10 mosmol über der für die ADH-Freisetzung. Dadurch wird vermieden, dass es zu einer Erhöhung des osmotischen Drucks über den physiologischen Bereich (290–295 mosmol/l) kommt.

28.3.3

28

. Abb. 28.21. Genstruktur und Biosynthese von Vasopressin. Das Vasopressin-Gen enthält 2 Introns und 3 Exons. Nach Transkription und posttranskriptionaler Prozessierung codiert die mRNA für das Präpro-Vasopressin, das posttranslational durch Entfernung der Signalsequenz sowie Spaltung zu Vasopressin, Neurophysin II und einem C-terminal gelegenen Glycoprotein prozessiert wird. ArgininVasopressin (AVP) ist ein Nonapeptid (rot)

auch bereits im Normalzustand ADH sezerniert wird. Ein Anstieg der Osmolarität um nur 1% führt bereits zu einer messbaren Zunahme der ADH-Sekretion. Der osmotische Druck wird kontinuierlich in verschiedenen Bereichen des Hypothalamus durch spezifische Osmorezeptoren erfasst, deren Signale auf die ADH produzierenden Zellen des N. suprapopticus und N. paraventricularis weitergegeben werden. Auch diese selbst sind an der Osmorezeption beteiligt 4 Der Füllungszustand des Extrazellulärraums bzw. der Blutdruck beeinflusst die ADH-Freisetzung über Barosensoren. Dadurch kann unabhängig von der Osmolarität eine Steigerung der ADH-Produktion bei signifikantem Volumenmangel und/oder Blutdruckabfall ausgelöst werden. Eine Überfüllung des Extrazellulärraums bzw. ein Blutdruckanstieg wirkt sich dagegen dämpfend auf die ADH-Freisetzung aus. Hierfür genügen bereits Wasserdefizite oder Wasserzufuhr von 0,3–0,5 l 4 Angiotensin II aktiviert die ADH-Sekretion durch einen direkten Effekt auf die Zellen des N. supraopticus und N. paraventricularis 4 Am Hypophysenhinterlappen stimulieren Acetylcholin, Nikotin und Morphin die ADH-Freisetzung, Adrenalin und Ethanol sind dagegen Hemmstoffe ! Das Durstgefühl wird von Osmorezeptoren vermittelt.

Auch das Durstgefühl wird wesentlich über hypothalamische Osmorezeptoren ausgelöst, die jedoch nicht genau lokalisiert sind. Angiotensin II wirkt ebenfalls fördernd auf die Entwicklung des Durstgefühls. Die Schwelle für die

Pathobiochemie des Wasserhaushalts

Abweichungen des Wassergehalts vom Normalwert bezeichnet man als Dehydratation bzw. Hyperhydration. Dabei ist zu unterscheiden, ob es sich um isotone Veränderungen (Osmolarität bleibt normal) oder um hypo- bzw. hypertone Abweichungen handelt. Da hauptsächlich die Natriumkonzentration die Osmolarität des Extrazellulärraums bestimmt, definiert sie auch die Zuordnung der De- bzw. Hyperhydratation. Isotone Veränderungen des Wassergehalts treten in der Regel sekundär zur Veränderung des Natriumhaushalts auf. Sie werden deshalb in 7 Kapitel 28.4 beschrieben. Nichtisotone Veränderungen gehen bei Wasserverlust (ohne Natriumverlust) in der Regel mit einer Hypertonizität (Hypernatriämie, Na+ >150 mmol/l), bei Überwässerung (ohne zusätzliche Natriumzufuhr) mit einer Hypotonizität (Hyponatriämie, Na+ 3 l/Tag muss zusätzlich Natrium angeboten werden, da die in der Nahrung enthaltene Menge an Kochsalz (ca. 10 g/Tag) den Verlust nicht mehr kompensiert 4 Hypoaldosteronismus: Eine verminderte Biosynthese und Sekretion von Mineralocorticoiden, speziell von Aldosteron, ist ein relativ seltenes Krankheitsbild. Es entwickelt sich im Verlauf einer allgemeinen Nebenniereninsuffizienz (Morbus Addison) sowie gelegentlich beim adrenogenitalen Syndrom (7 Kap. 27.3.10). Die Folge derartiger Krankheitsbilder besteht in einem Salzverlustsyndrom mit Hyponatriämie und Hyperkaliämie 4 Unkontrollierter Einsatz von harnfördernden Mitteln

28

928

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

In Kürze Der Natriumbestand des Körpers wird vor allem über die Kontrolle des Extrazellulärvolumens reguliert. Eine Abnahme des Volumens aktiviert über arterielle Pressorezeptoren den Sympathikus, was in der Niere direkt die Na+-Reabsorption fördert und über eine Stimulation der Reninsekretion das Renin-Angiotensin-AldosteronSystem aktiviert. Auch die Aktivierung der Niederdruckrezeptoren (in Hohlvenen und Herzvorhöfen) stimuliert das ReninAngiotensin-Aldosteron-System über eine verstärkte Reninsekretion. Parallel dazu wird ADH freigesetzt und das Durstgefühl ausgelöst. Die durch Angiotensin II induzierte Bildung von Aldosteron fördert die renale Natriumresorption im

28

28.5

Der Kaliumhaushalt

28.5.1

Regulation des Kaliumhaushalts

! Das Körperkalium befindet sich zu 98% im Intrazellulärraum.

Kalium ist in mehrfacher Hinsicht ein biochemisch-physiologisch sehr bedeutsames Ion. Es bestimmt wesentlich das Membranpotential und damit das elektrische Verhalten von Zellen. Weiterhin aktiviert es eine Reihe von Enzymen. Es ist außerdem wichtig für die Regulation des Zellvolumens wie auch für die zelluläre pH-Regulation. Den obligaten Kaliumverlusten in Höhe von 25 mmol/ 24 h steht eine durchschnittliche Nahrungszufuhr von 50–150 mmol/24 h gegenüber. Dieser nahrungsbedingte Kaliumüberschuss muss eliminiert werden, wobei sich

Sammelrohr, begleitet von einer ADH-bedingten Wasserretention. Ein Anstieg des Natriumbestands des Körpers und damit verbunden eine Vergrößerung des Extrazellulärvolumens hemmt die: 4 Reninsekretion und damit die Angiotensin II-Bildung 4 Aldosteronproduktion und 4 ADH-Sekretion Ein Anstieg des Drucks im Niederdrucksystem aktiviert in den Herzvorhöfen die Freisetzung von ANP, welches die Ausscheidung von Natrium und Wasser in der Niere stimuliert.

die Kaliumausscheidung durch die Nieren problemlos auf 500 mmol/24 h steigern lässt. Etwa 10% der täglichen Kaliumausscheidung erfolgt im Intestinaltrakt. Die Gesamtkaliummenge des Körpers liegt bei 40– 50 mmol/kg Körpergewicht (d.h. 3,5 mol bei einer Person mit 70 kg), wovon sich 98% im Intrazellulärraum befinden. Die intrazelluläre Kaliumkonzentration liegt bei durchschnittlich 140 mmol/l. Die Kaliumkonzentration des Blutplasmas beträgt demgegenüber im Mittel nur 4 mmol/l (Normbereich 3,5–5,5 mmol/l), sodass der Gesamtbestand an extrazellulärem Kalium nur 60–80 mmol beträgt (. Tabelle 28.8). ! Enterale Kaliumaufnahme, Verschiebungen von Kalium zwischen dem Intra- und Extrazellulärraum sowie die renale Kaliumausscheidung sind die wesentlichen Determinanten der Plasmakaliumkonzentration.

. Tabelle 28.8. Daten zum Kaliumstoffwechsel Verteilung des Kaliums im Organismus

mmol/kg Körpergewicht

Plasma

0,2

Interstitielle Flüssigkeit, Lymphe

0,5

Sehnen und Knorpel

0,2

Knochen (gesamte Menge)

4,1

Transzelluläre Flüssigkeit

0,5

Gesamtmenge

冎

Prozentualer Anteil an der Gesamtmenge 0,4 1,0 0,4 7,6 1,0

im Extrazellulärraum

5,5

10,4

im Intrazellulärraum

48,3

89,6

58,0

100,0

im Organismus Kaliumkonzentration des Blutplasmas Normalbereich Tägliche Ausscheidung mit dem Urin Tägliche Zufuhr mit der Nahrung

4,0 mmol/l 3,5–5,5 mmol/l 60–80 mmol 50–150 mmol (Durchschnitt 65 mmol)

冎

929 28.5 · Der Kaliumhaushalt

Kaliumaufnahme. Das Membranpotential der meisten

Körperzellen hängt wesentlich vom elektrochemischen Gleichgewichtspotential (Nernst-Potential) für Kalium und damit vom Verhältnis der intra- und extrazellulären Kaliumkonzentrationen ab (7 Lehrbücher der Physiologie). Wegen der stark unterschiedlichen Konzentrationen von Kalium im Intrazellulärraum (ca. 140 mmol/l) und Extrazellulärraum (ca. 4 mmol/l) können bereits quantitativ geringe Relativverschiebungen von Kaliumionen zwischen den beiden Kompartimenten das Verhältnis der Konzentrationen und damit das Membranpotential stark beeinflussen. Besonders empfindlich auf solche Veränderungen reagieren dabei elektrisch erregbare Gewebe wie Nerven- oder Muskelzellen. Am Herzmuskel resultieren daraus Störungen der Erregungsbildung und -fortleitung im Herzen, die lebensbedrohlich (Kardioplegie!) sein können. Entsprechend müssen die intrazellulären und extrazellulären Kaliumkonzentrationen sehr genau reguliert werden. Nach der Resorption wird mit der Nahrung aufgenommenes Kalium zum größten Teil in den Intrazellulärraum überführt, wobei das während der Nahrungsaufnahme aus der Bauchspeicheldrüse freigesetzte Insulin eine wichtige Rolle spielt (7 Kap. 26.1). Es stimuliert die Na+/K+ATPase-Aktivität in Leber und Muskel, die dadurch zusätzlich Kalium aufnehmen. Der im Extrazellulärraum verbleibende Rest des Nahrungskaliums wird unmittelbar über die Nieren ausgeschieden. So wird eine Überflutung des Extrazellulärraums mit Kalium und damit eine Hyperkaliämie und in der Folge eine Depolarisation von Zellmembranen vermieden. Wenn die Insulinwirkung abklingt, verlässt das Kalium langsam die Zellen und wird über die Nieren ausgeschieden. Angesichts dieser Wirkung von Insulin wird die Hyperkaliämie bei entgleistem Diabetes Typ1 verständlich (7 Kap. 26.4.1). Renale Kaliumausscheidung. Die renale Kaliumausscheidung wird durch folgende Faktoren reguliert: 4 Aldosteron reguliert die renale Kaliumausscheidung indirekt, da es über die Steigerung der Natriumreabsorption die Kaliumausscheidung erhöht. Erhöhte Plasmakonzentrationen von Kalium stimulieren dabei die Sekretion von Aldosteron aus der Nebennierenrinde (. Abb. 28.28). Die aldosterongesteuerte Kaliumausscheidung in den Verbindungstubuli und Sammelrohren der Niere kann in einem weiten Bereich unterschiedlichen enteralen Kaliumaufnahmen angepasst werden, ohne dass es zu pathologischen Änderungen der Plasmakaliumkonzentration kommt, weil sich die renale Kaliumausscheidung bis auf 500 mmol/Tag steigern lässt (vgl. eine mittlere tägliche Aufnahme von 65 mmol). Bei erhöhter Kaliumzufuhr steigt unter der Wirkung von Aldosteron die Na+/K+-ATPase-Aktivität und die Kaliumsekretionsrate in den Sammelrohren

. Abb. 28.28. Abhängigkeit der Plasma-Aldosteronkonzentration von der Plasma-Kaliumkonzentration. (Modifiziert nach Guyton, Textbook of Medical Physiology. Saunders 1986)

4 Da die Aktivität der Kaliumkanäle im Sammelrohr auch durch die Protonenkonzentration reguliert wird, führt eine Alkalose zu verstärkten Kaliumverlusten und eine Azidose zu einer Verminderung der Kaliumsekretion und damit zur Kaliumretention 4 Der Harnfluss im Sammelrohr beeinflusst ebenfalls die Kaliumausscheidung. Je höher der Harnfluss, umso mehr Kalium kann ausgeschieden werden. Bei niedrigen Harnflussraten akkumuliert Kalium in der Tubulusflüssigkeit, wodurch der Ausstrom aus den Sammelrohrzellen gebremst wird

28.5.2

Pathobiochemie des Kaliumhaushalts

Da Kalium ganz vorwiegend intrazellulär lokalisiert ist, lassen Bestimmungen der Plasmakaliumkonzentration keine verlässlichen Abschätzungen des Gesamtkörperkaliums zu. Indirekten Aufschluss hierüber gibt die Messung von Kalium im Erythrozyten. Störungen des Kaliumhaushalts beruhen meist auf Störungen der renalen Kaliumausscheidung. Hyperkaliämie. Hyperkaliämien, die durch einen Anstieg

der Plasmakaliumkonzentration über 5,5 mmol/l gekennzeichnet sind, sind meist ein Zeichen einer unzureichenden Nierenfunktion (Niereninsuffizienz). Weiterhin kann auch eine ungenügende Produktion von Aldosteron (Hypoaldosteronismus), eine vermehrte Freisetzung aus dem Gewebe bei Verletzungen oder Hämolyse zu einer Hyperkaliämie führen. Auch ausgeprägte Azidosen gehen mit einer Hyperkaliämie einher (. Abb. 28.29). Eine Hyperkaliämie macht sich zuerst im EKG durch eine Veränderung des Kammerkomplexes (»hohe T-Welle«)

28

930

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

Ionenaustauscherharzen kann die intestinale Resorption von Kalium gehemmt werden.

. Abb. 28.29. Verschiebung von Kaliumionen zwischen Intra(IZR) und Extrazellulärraum (EZR) bei Änderungen der Protonenkonzentration des Extrazellulärraums

28

bemerkbar; am Herzen treten Arrhythmien, bis hin zum Herzstillstand auf. Bei bedrohlicher Hyperkaliämie kann durch die gleichzeitige Verabreichung von Insulin und Glucose Kalium aus dem Extrazellulärraum in den Intrazellulärraum verschoben werden. Mit der oralen Gabe von

Kaliummangel und Hypokaliämie. Bei kaliumarmer Ernährung kann die tägliche renale Kaliumausscheidung bis auf ca. 8–10 mmol/Tag herabgesetzt werden. Voraussetzung für die Entwicklung eines Kaliummangels sind daher in der Regel neben einer reduzierten Zufuhr auch starke Verluste über die Niere oder den Magen-Darm-Trakt (Diarrhoe). Im Plasma liegt eine Hypokaliämie bei einen KaliumWert 44 mmHg) bedeutet eine Vergrößerung des Nenners der Henderson-HasselbalchGleichung

(s = molarer Löslichkeitskoeffizient für CO2). Als Folge des erniedrigten Quotienten HCO3–/CO2 nimmt der pH-Wert ab (. Abb. 28.42).

28

948

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

28

. Abb. 28.42. Respiratorische und nichtrespiratorische Störungen des Säure-Basen-Haushalts. (Einzelheiten 7 Text)

Nach ca. 24 Stunden setzen dann renale Kompensationsmechanismen ein. Im proximalen Tubulus wird die HCO3–-Resorption verstärkt, da eine intrazelluläre Azidose die luminale H+-Sekretion steigert (7 o.). Gleichzeitig werden verstärkt Protonen im Sammelrohr sezerniert, was mit einer Abgabe von Hydrogencarbonat an den Extrazellulärraum verbunden ist. Somit kann die HydrogencarbonatKonzentration im Plasma stark erhöht und dadurch der HCO3–/ CO2-Quotient dem Normalwert von 20:1 wieder angenähert werden. Damit wird der pH-Abnahme entgegengewirkt (. Abb. 28.42). Die respiratorische Alkalose ist durch die vermehrte Abatmung von Kohlendioxid (Hyperventilation) gekennzeichnet. Der Basenüberschuss ist unverändert (7 o.). Die Hyperventilation kann physiologische Gründe haben (Höhenaufenthalt), sie kann aber auch andere Ursachen haben

(häufig: Angst als Hyperventilationssyndrom; Schmerz). Die dadurch verursachte Verringerung des CO2-Partialdrucks (Hypokapnie) ( 44

>2

Respiratorische Alkalose

>> 7,44

< 36

r2

Nach Kompensation

t 7,44

< 36

44

>2

! Nichtrespiratorische Störungen entstehen meist aus Säureüberproduktion oder Säurenverlust.

Metabolische Azidosen entstehen bei einer Erhöhung der endogenen Säureproduktion (Lactatazidose im Schock, diabetische Ketoazidose) oder bei gesteigerten Verlusten von Hydrogencarbonat (Diarrhoe). Entsprechend wird der Basenüberschuss negativ. Nach der Henderson-Hasselbalch-Gleichung führt die Abnahme der Hydrogencarbonat-Konzentration zu einem Abfall des pH-Wertes des Extrazellulärraums (. Abb. 28.42). Durch Pufferung und kompensatorische Senkung des CO2-Partialdrucks (Hyperventilation, weil Azidose das Atemzentrum stimuliert) wird versucht, den normalen HCO3–/CO2-Quotienten von 20:1 wieder herzustellen und damit dem pH-Abfall entgegenzuwirken (. Abb. 28.42). Die metabolische Alkalose ist durch den Verlust von nichtflüchtigen Säuren (z.B. durch Erbrechen von Mageninhaltausgelöster Verlust von HCl) oder durch einen Hydrogencarbonat-Überschuss charakterisiert. Entsprechend wird der Basenüberschuss positiv. Die Hydrogencarbonat-Zunahme bedeutet nach der Henderson-Hasselbalch-Gleichung eine pH-Erhöhung (. Abb. 28.42). Durch Pufferung und kompensatorische Erhöhung des CO2-Partialdrucks (Hypoventilation, weil Alkalose das Atemzentrum hemmt) wird der pH-Verschiebung entgegengewirkt ! Der Säure-Basen-Status kann durch Bestimmung der arteriellen Werte für pH, pCO2 und den Basenüberschuss beurteilt werden.

Die im klinischen Einsatz befindlichen Geräte zur Erfassung des Säure-Basen-Status messen bzw. berechnen alle

relevanten Parameter: pH, pCO2 und pO2 werden direkt mit Elektroden im arteriellen Blut gemessen. Ergänzend werden Messungen der Hämoglobinkonzentration (wird benötigt für die Gesamtpufferbasenkonzentration) und der arteriellen Sauerstoffsättigung durchgeführt. Die abhängigen Parameter wie Gesamtpufferbasenkonzentration, Basenüberschuss und Standard-Hydrogencarbonat werden aus den Messdaten berechnet. Der pH-Wert ist bei der Beurteilung Leitparameter, da er angibt, ob überhaupt eine Azidose oder Alkalose vorliegt: Geht eine Azidose mit einem erhöhten pCO2, bzw. eine Alkalose mit einem erniedrigten pCO2 einher, so ist von einer primär respiratorischen Störung auszugehen. Solange noch keine metabolischen Kompensationen eingesetzt haben, bleibt der Basenüberschuss normal. Erst bei metabolischen Kompensationen primär respiratorischer Störungen ändert er sich mit einem Anstieg bei einer Azidose bzw. einer Abnahme bei einer Alkalose. Geht eine Azidose mit einem normalen oder gar erniedrigten pCO2 bzw. eine Alkalose mit einem normalen oder gar erhöhten pCO2 einher, so ist von einer primär metabolischen Störung auszugehen. Der Basenüberschuss ist verändert, und zwar erniedrigt bei einer Azidose und erhöht bei einer Alkalose. Auffällige Abweichungen des pCO2 vom Normalwert zeigen hier bereits respiratorische Kompensationen an. Typische Konstellationen von kennzeichnenden Blutparametern für die verschiedenen Störungen des Säure-Basen-Haushalts sind in der . Tabelle 28.12 dargestellt.

28

950

Kapitel 28 · Funktion der Nieren und Regulation des Wasser- und Elektrolyt-Haushalts

In Kürze Im Stoffwechsel entstehen Kohlendioxid (Kohlensäure) und andere nichtflüchtige Säuren als Endprodukte. Da Änderungen der Protonenkonzentration eine Vielzahl von zellulären Reaktionen beinträchtigen, müssen die anfallenden Protonen zunächst gepuffert und anschließend ausgeschieden werden. Proteine und Phosphat sind die wichtigsten intrazellulären Puffer, das Kohlendioxid-HydrogencarbonatSystem und Proteine (Hämoglobin) die wichtigsten extrazellulären Puffer. Alle Puffersysteme stehen dabei miteinander im Gleichgewicht. Die Pufferfähigkeit des Körpers wird durch die Pufferkapazität und den Basenüberschuss des Bluts reflektiert. An der Ausscheidung von Protonen und Pufferbasen bzw. deren Rückgewinnung sind die Lunge, Nieren und

28

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Leber zentral beteiligt. Da die Ausscheidung von Protonen in den Nieren – im Gegensatz zur Lunge und Leber – nicht in chemisch gebundener Form erfolgt, sind im Urin effektive Puffersysteme wie Phosphat und Ammoniak erforderlich. Störungen des Säure-Basen-Haushalts werden als Azidosen oder Alkalosen bezeichnet und können primär respiratorisch oder metabolisch bedingt sein. Respiratorische Störungen resultieren aus einer Veränderung der CO2-Abatmung, nichtrespiratorische Störungen meist aus Säureüberproduktion oder -verlusten. Respiratorische und metabolische Störungen des Blut-pH-Werts können sich wechselseitig kompensieren. Der Säure-Basen-Status kann durch Bestimmung der arteriellen Werte für pH, pCO2 und den Basenexzess beurteilt werden.

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29 29

Blut Petro E. Petrides

29.1

Korpuskuläre Elemente des Bluts – 952

29.2

Erythrozyten – 953

29.2.1 29.2.2 29.2.3 29.2.4

Eigenschaften und Stoffwechsel der Erythrozyten Hämoglobin – 957 Erythrozyten-Antigene – 965 Pathobiochemie – 967

29.3

Leukozyten – 972

29.3.1 29.3.2

Funktion und Stoffwechsel der Leukozyten – 972 Pathobiochemie – 976

29.4

Thrombozyten – 976

29.5

Blutstillung – 979

29.5.1 29.5.2 29.5.3 29.5.4 29.5.5

Vaskuläre Blutstillung – 979 Zelluläre Blutstillung (Thrombozytenadhäsion) – 980 Plasmatische Vorgänge (Blutgerinnung) – 981 Fibrinolyse – 987 Pathobiochemie – 988

29.6

Plasmaproteine – 991

29.6.1 29.6.2 29.6.3 29.6.4 29.6.5

Konzentration, Biosynthese und Abbau von Plasmaproteinen Trennung von Plasmaproteinen in Einzelfraktionen – 991 Die einzelnen Proteinfraktionen des Serums – 994 Funktionen der Plasmaproteine – 996 Pathobiochemie – 996

Literatur

– 999

– 953

– 991

952

Kapitel 29 · Blut

> > Einleitung Blut ist das Trägermedium für die humorale Kommunikation zwischen den einzelnen Geweben, die durch das Gefäßsystem ermöglicht wird. Aufgrund seiner ständigen Bewegung eignet sich Blut mit seinen korpuskulären Elementen, Transportproteinen und seiner wässrigen Phase zum Transport der verschiedensten Stoffe. Mit Hilfe der Erythrozyten werden Sauerstoff von den Lungen zu den Geweben und Kohlendioxid in umgekehrter Richtung transportiert. Blut befördert weiterhin im MagenDarm-Trakt resorbierte Nahrungsstoffe in gelöster Form oder in Bindung an Transportproteine über die Pfortader in die Leber und von dort aus in die peripheren Organe. Von den Organen gelangen Endprodukte des Stoffwechsels zu den Ausscheidungsorganen (Nieren, Lungen, Haut und Darm). Hormone werden von den endokrinen Drüsen zu den Erfolgsorganen und Metaboliten zwischen den verschiedenen Organen (z.B. Lactat und Alanin von der Muskulatur in die Leber, Ketonkörper von der Leber in die peripheren Organe) befördert. Im intrazellulären Stoffwechsel entstehende und an den Extrazellulärraum abgegebene Protonen und Kohlendioxid werden vom Blut wirksam abgepuffert und den Ausscheidungsorganen (Lungen und Nieren) zugeleitet. Aufgrund dieser Eigenschaften eignet sich das Blut in hervorragender Weise zur Analyse des Funktionszustands verschiedener Organe: die Untersuchung von durch Venenpunktion gewonnenem Blut erlaubt schnelle Rückschlüsse auf die Funktion von Nieren, Herz, Leber, Knochenmark und anderen Geweben. Gegen Viren und Bakterien kann Blut den Organismus durch den Besitz unspezifischer (Serumproteine wie C-reaktives Protein, Properdin, Faktoren des Komplements, Lysozym) und spezifischer (Antikörperproteine) Abwehrmechanismen schützen. Neutrophile Granulozyten sind durch ihre Fähigkeit, hochaktive Sauerstoffverbindungen zu erzeugen und Bakterien zu phagozytieren, entscheidender Bestandteil des zellulären Immunsystems. Aufgrund der hohen spezifischen Wärme von Wasser verteilt Blut die in einzelnen Organen gebildete Wärme (z.B. in der stoffwechselaktiven Leber) auf den Gesamtorganismus. Durch die Wasser anziehende Wirkung seiner Proteine nimmt Blut Einfluss auf den Austausch von Wasser und Stoffen zwischen der zirkulierenden und der Gewebeflüssigkeit. Zum Schutz vor dem Verlust dieses wichtigen Gewebes existiert ein komplexes Gerinnungssystem, das bei Gefäßverletzungen sofort aktiv wird. Eine Aktivierung dieses Systems ohne Verletzungen des Gefäßes kann zu Thrombosen führen.

29 29.1

Korpuskuläre Elemente des Bluts

Blut enthält eine Reihe korpuskulärer Elemente, die vorwiegend im Knochenmark gebildet werden und an der Erfüllung mehrerer Aufgaben des Bluts (Sauerstofftransport, Blutstillung, Abwehr) beteiligt sind. Dies sind die Erythrozyten, Thrombozyten und Leukozyten. Zu Letzteren gehören neutrophile, eosinophile und basophile Granulozyten sowie Monozyten. ! Die Hämatopoese wird durch Cytokine reguliert.

Ausgangspunkt der Bildung der korpuskulären Elemente im Knochenmark sind die Stammzellen (wegen des Besitzes des Oberflächenmarkers CD34 als CD34-positive Zellen bezeichnet), die die Fähigkeit zur Selbstreplikation mit Bildung von Tochterstammzellen besitzen. CD34+ Zellen sind in sehr geringen Mengen auch im Blut nachweisbar; dasselbe gilt für die sog. CD34+/-R2-Stammzellen, aus denen sich Endothelzellen entwickeln. Stammzellen sind pluripotent, d.h. sie können zu funktionell verschiedenen Zelltypen differenzieren. Dieser Vorgang läuft über mehrere Stufen ab, die mit einem schrittweisen Verlust der Pluripotenz einhergehen (. Abb. 29.1). Die frühesten differenzierten Zellen werden als determinierte Vorläuferzellen bezeichnet, die in ihrer weiteren Entwicklung bereits auf ein oder zwei Zelltypen festgelegt sind. Die Vorläuferzellen besitzen jedoch ein ausgeprägtes proliferatives Potential und produzieren so Tochterzellen des entsprechenden reifen Zelltyps. In vitro überleben oder proliferieren Knochenmarkzellen nur in Gegenwart regulatorischer Polypeptide. Da diese Experimente

in Agarkultursystemen durchgeführt werden, in denen die Zellen unter Bildung von Kolonien wachsen, werden die entstehenden Kolonien als CFU (colony forming units) und die Polypeptide mit Hormoncharakter als CSF (colony stimulating factors) bezeichnet (. Abb. 29.1). Den CSF wird ein Präfix vorangestellt (z.B. GM), das die Zellpopulation angibt (Granulozyten und Makrophagen), die unter dem stimulierenden Einfluss des betreffenden Proteins gebildet wird. T-Lymphozyten, Monozyten (und Makrophagen) und Stromazellen sind die Hauptquellen von Wachstumsfaktoren. Ausnahmen sind nur Erythropoietin (Nieren) und Thrombopoietin (Leber). Viele dieser auch als Cytokine bezeichneten Polypeptide stehen heute in rekombinanter Form für die Therapie beim Menschen zur Verfügung (. Tabelle 29.1). Sie finden vor allem bei der Stimulierung der hämatopoetischen Regeneration (nach Bestrahlung oder zytotoxischen Medikamenten), der Rekrutierung von CD34-Zellen in das Blut für die Stammzelltransplantation oder zur Verstärkung der Abwehr bei akuten Infektionen klinische Anwendung. Nach Differenzierung im Knochenmark müssen die reifen Blutzellen auf einen adäquaten Reiz hin die Knochenmark-Blut-Schranke überwinden, um Anschluss an die Blutbahn zu gewinnen. Diese Schranke stellt eine dreischichtige Struktur dar, die aus Adventitiazellen (einer spezialisierten Fibroblastenart), einer Basalmembran und der Endothelschicht besteht (. Abb. 29.2). Die Überwindung der Schranke wird den reifen Blutzellen wahrscheinlich durch die Freisetzung von Proteasen wie Elastase oder MMPs (7 Kap. 9.3.3) ermöglicht, die dieses Gitter reversibel öffnen können.

953 29.2 · Erythrozyten

. Abb. 29.1. Entwicklung der einzelnen Blutzellen aus einer pluripotenten Stammzelle im Knochenmark unter dem Einfluss hämatopoetischer Wachstumsfaktoren

. Tabelle 29.1. Rekombinante hämatopoietische Wachstumsfaktoren (Cytokine) beim Menschen (Beispiele) Bezeichnung

Synonym

Molekulargewicht

Produziert von

Genetische Information des Glykoproteins

Interleukin-3

Multi-CSF 1I-3

20–26 kDa

T-Lymphozyten

cDNA: 133 Aminosäuren enthaltendes Protein Chromosom 5

GM-CSF

CSF-D

14–35 kDa

T-Lymphozyten Endothelzellen Fibroblasten

cDNA: 127 Aminosäuren enthaltendes Protein Genstruktur: 4 Exons Chromosom 5

M-CSF

CSF-1

70 kDa (Dimer)

Monozyten Fibroblasten Endothelzellen

cDNA: 189 Aminosäuren enthaltendes Protein Chromosom 5

G-CSF

CSF-E

20 kDa

Monozyten Fibroblasten

cDNA: 177 Aminosäuren enthaltendes Protein Genstruktur: 5 Exons Chromosom 17

Erythropoietin

Epo

34–39 kDa

peritubuläre Nierenzellen

cDNA: 166 Aminosäuren enthaltendes Protein Genstruktur: 5 Exons Chromosom 7

Thrombopoietin

Tpo

35 kDa

Leber-, Nierenzellen

cDNA: 335 Aminosäuren enthaltendes Protein Genstruktur: 5 Exons Chromosom 3q26–27

29.2

Erythrozyten

29.2.1

Eigenschaften und Stoffwechsel der Erythrozyten

! Erythrozyten entstehen aus Erythroblasten durch den Verlust des Zellkerns.

Bei der Erythrozytenbildung (Erythropoiese) im Knochenmark differenzieren sich Proerythroblasten unter dem Ein-

fluss des renalen Hormons Erythropoietin (molekularer Mechanismus, 7 Kap. 28.1.10) aus pluripotenten Stammzellen und durchlaufen mehrere Zellteilungen. Die dabei entstehenden Erythroblasten sind in kleinen Inseln um eine zentrale Retikulumzelle angeordnet, die die Erythroblasten während des Reifungsprozesses mit notwendigen Stoffen versorgt. Während der Teilung der Proerythroblasten setzt die Biosynthese von Hämoglobin, des mengenmäßig bedeutendsten Proteins des Erythrozyten, ein. Gleichzeitig beginnt sich der Zellkern zusammenzuziehen, wird schließ-

29

954

29

Kapitel 29 · Blut

. Abb. 29.2. Aufbau der Knochenmark-Blut-Schranke aus Endothelzellschicht, Basalmembran und den Adventitiazellen (grün), einer spezialisierten Fibroblastenart. Nach Stimulierung durch ein Signal S (wie z.B. Interleukin-8, grünes Dreieck), das entweder direkt auf

den Granulozyten oder indirekt über ein zweites Signal (rotes Viereck) wirkt, wandern reife Granulozyten über die Schranke in den Knochenmarksinus

lich aus der Zelle ausgestoßen und von der zentralen Retikulumzelle aufgenommen. Nach dem Verlust des Zellkerns tritt der Erythrozyt, der deshalb nicht mehr als Zelle, sondern als korpuskuläres Element bezeichnet wird, in die Zirkulation über, in der er als Scheibe mit einer zentralen Delle erscheint (. Abb. 29.3). Von den älteren Erythrozyten, die schon längere Zeit im Kreislauf zirkulieren, unterscheidet sich der junge Erythrozyt durch den Besitz eines mit bestimmten Farbstoffen (z.B. Brilliantkresylblau) anfärbbaren Retikulums, das aus ribosomaler RNA und anderen Zellorganellen besteht und innerhalb der ersten 48 Stunden verloren geht. In diesem

Stadium werden Erythrozyten als Reticulozyten (nicht zu verwechseln mit den Retikulumzellen) bezeichnet und dienen als Indikator der Erythrozytenproduktion. Während der Reifung verlieren die Erythrozyten auch ihre Mitochondrien und damit die mit diesem Zellorganell verbundenen Stoffwechselleistungen (z.B. Pyruvatdehydrierung und oxidative Phosphorylierung). Übrig bleiben ihnen cytosolische Stoffwechselwege wie die Glycolyse und der Pentosephosphatweg. ! Zwischen Erythrozytenauf und -abbau besteht ein dynamisches Gleichgewicht.

Die Lebenszeit des Erythrozyten, von denen jeder Mikroliter Blut 4–6 Millionen enthält, beträgt 110–130 Tage (. Tabelle 29.2). Warum Erythrozyten nicht länger überleben, ist unbekannt, könnte aber auf die Aktivitätsminderung erythrozytärer Enzyme zurückzuführen sein, da eine Enzymneusynthese nicht mehr möglich ist. Nach Ablauf . Tabelle 29.2. Einige Lebensdaten des Erythrozyten

. Abb. 29.3. Rasterelektronenoptische Aufnahme eines in einem Fibrinnetz liegenden Erythrozyten

Lebensdauer

120 Tage (110–130 Tage)

Oberfläche aller Erythrozyten

3800 m2

Gesamtmenge

25 000 Milliarden

Täglicher Bedarf

208 Milliarden

Erythrozytenproduktion/s

2,4 Millionen

Zurückgelegter Weg während 120 Tagen

400 km

Gewicht eines Erythrozyten

3 × 10–11 g (= 30 pg)

955 29.2 · Erythrozyten

ihrer Lebenszeit werden die Erythrozyten von Zellen des retikuloendothelialen Systems (in Milz, Knochenmark und Leber) durch Phagozytose aufgenommen und abgebaut. Die beim Abbau des Porphyringerüsts entstehenden Gallenfarbstoffe werden ausgeschieden (7 Kap. 20.3), das frei werdende Eisen und die beim Globinabbau entstehenden Aminosäuren werden erneut für die Biosynthese verwertet. Die Erythrozytenzahl und damit die Hämoglobinkonzentration im Blut werden in engen Grenzen konstant gehalten. Beim erwachsenen Mann beträgt die Erythrozytenzahl zwischen 4,5 und 6,0 Million/μl und die Hämoglobinkonzentration zwischen 14 und 18 g/100 ml (140 und 180 g/l entsprechend 8,7 und 11,2 mmol/l, wobei das Molekulargewicht des Monomers zugrunde liegt), bei der erwachsenen Frau zwischen 4,0 und 5,0 Millionen/μl bzw. 12 und 16 g/100 ml Blut. Störungen dieses Gleichgewichts können durch Änderungen von Abbau und/oder Biosynthese verursacht werden. Der prozentuale Anteil der Erythrozyten am Gesamtblut wird als Hämatokrit bezeichnet. Die Anzahl der Erythrozyten im strömenden Blut wird durch das renale Hormon Erythropoietin (7 u.) reguliert. Eine vermehrte Erythrozytenmenge im Blut wird als Polyzythämie, die Abnahme der Erythrozytenmenge als Anämie bezeichnet. Der Verringerung der Konzentration kann eine Hämolyse, d.h. ein vermehrter Abbau von Erythrozyten vor Erreichen des normalen Lebensalters (hämolytische Anämie) oder eine verringerte Biosynthese aufgrund eines Eisen- (7 Kap. 22.2.1) oder Vitamin-B12-Mangels (7 Kap. 23.3.9) zugrunde liegen. Beim Eisenmangel sind die Erythrozyten zudem kleiner (mikrozytäre Anämie), beim Vitamin B12-Mangel vergrößert (makrozytäre Anämie). Ist eine Schädigung der Stammzellen im Knochenmark die Ursache, so liegt eine aplastische Anämie vor. ! Die Regulation der Erythropoiese erfolgt über das Cytokin Erythropoietin.

Erythropoietin ist ein 34 kDa-Glycoprotein, das beim Fetus in der Leber und beim Erwachsenen in den peritubulären Fibroblasten der Nieren synthetisiert wird. Es expandiert die Menge unreifer roter Vorläuferzellen im Knochenmark. Rezeptoren für Erythropoietin finden sich nicht nur im Knochenmark, sondern auch in nicht-hämatopoietischen Zellen (ZNS, Endothelzellen, Leber, Uterus). Der Erythropoietinrezeptor gehört in die Gruppe der Cytokinrezeptoren (7 Kap. 25.5.2, . Tab. 25.1). Jeder Verlust von Erythrozyten (z.B. durch Blutverlust oder Hämolyse) reduziert die Versorgung peripherer Gewebe mit Sauerstoff, wodurch es zu einer Stimulierung der Expression des durch Hypoxie induzierbaren Faktors (hypoxia induced factor, HIF-1) (7 Kap. 28.1.10) kommt, der die Erythropoietinproduktion reguliert. Rekombinantes Erythropoietin wird zur Behandlung der Tumoranämie eingesetzt und von Sportlern als Dopingmittel verwendet.

. Abb. 29.4. Entstehung des Signalmetaboliten 2,3-Bisphosphoglycerat in einem Nebenschritt der Glycolyse des Erythrozyten

! Für den Stoffwechsel des Erythrozyten stellt Glucose die wesentliche Energiequelle dar.

Nach Phosphorylierung zu Glucose-6-phosphat durch die Hexokinase beschreitet der weitere Abbau die beiden bekannten Wege: Etwa 5–10% werden zur Bildung von NADPH/H+ dem Pentosephosphatweg zugeführt, die Hauptmenge (90–95%) wird zur Bildung von ATP in der Glycolyse herangezogen. Eine Besonderheit des Erythrozytenstoffwechsels ist ein Nebenweg der Glycolyse, der bei 1,3-Bisphosphoglycerat abzweigt. Statt in der Phosphoglyceratkinasereaktion (. Abb. 29.4) ATP zu bilden, werden etwa 20% des 1,3-Bisphosphoglycerats durch eine Mutase in 2,3-Bisphosphoglycerat umgewandelt, das durch Abspaltung des Phosphatrests am C-Atom 2 (jedoch ohne ATP-Gewinn!) wieder in die Glycolyse einmünden kann. Sinn dieses – als 2,3-Bisphosphoglycerat-Nebenweg bezeichneten – Stoffwechselwegs ist die Bereitstellung von 2,3-Bisphosphoglycerat. Dieses kann an die E-Ketten des Hämoglobins binden und damit – als Signalmetabolit – Einfluss auf die Sauerstoffaufnahme und -abgabe nehmen (7 Kap. 3.3.5, 29.2.2). ! ATP wird zum Ionentransport und zur Glutathionsynthese benötigt.

Das in der Glycolyse gebildete ATP wird für den aktiven Ionentransport benötigt, durch den der Erythrozyt Natrium und Calcium eliminiert (die Natriumkonzentration beträgt in Erythrozyten etwa 10% des Plasmagehalts) und Kalium akkumuliert (die Konzentration beträgt etwa das Dreißigfache des Plasmagehalts). Außerdem wird ATP für die Aufrechterhaltung der Form des Erythrozyten und für die Biosynthese von Glutathion benötigt. Dieses Tripeptid wird im Erythrozyten durch zwei jeweils ATP-abhängige Reaktionen aus Glutamat, Glycin und Cystein synthetisiert. Glutathion, das im Erythrozyten in hoher Konzentration vorliegt (etwa 2,5 μmol/ml) und dessen Halbwertszeit 3–4 Tage beträgt,

29

956

29

Kapitel 29 · Blut

wird nicht im Erythrozyten abgebaut, sondern ins Plasma abgegeben. Die Funktion wird durch die Sulfhydrylgruppe von Cystein bestimmt, die SH-Gruppen von Enzymen (z.B. Hexokinase, Glycerinaldehydphosphat-Dehydrogenase und Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase), von Proteinen der Erythrozytenmembran und von Hämoglobin, das 6 Sulfhydrylgruppen enthält, vor einer Oxidation schützt. Oxidiertes und reduziertes Glutathion bilden ein Redoxsystem, bei dem die reduzierte Form zu 98% vorliegt. Wegen des kontinuierlichen Verbrauchs von Glutathion muss das reduzierte Glutathion ständig durch eine Glutathionreduktase, die mit NADPH/H+ aus dem Pentosephosphatweg arbeitet, regeneriert werden. Wasserstoffperoxid, das im Erythrozyten unter dem Einfluss bestimmter Medikamente (7 unten) entstehen kann, oder unter Sauerstoffeinfluss entstehende Lipidperoxide in Membranlipiden von Erythrozyten werden durch eine Selen-haltige Peroxidase, die mit Glutathion als Cosubstrat arbeitet, entgiftet. Oxidiertes Glutathion wird auch aus dem Erythrozyten heraustransportiert. Da Erythrozyten dem Blut ständig Glucose für ihren Stoffwechsel entnehmen, muss Blut zur Glucosebestimmung in Röhrchen mit Fluoridzusatz entnommen werden, da ansonsten der Wert bis zum Eintreffen der Blutprobe im Labor erniedrigt ist. Von praktischer Bedeutung ist, dass schon eine geringgradige Hämolyse, wie sie z.B. bei der langsamen Blutabnahme aus einer Vene auftreten kann oder beim Stehen einer Blutprobe über Nacht, zum Austritt der in den Erythrozyten enthaltenen Enzyme und Elektrolyte führt. Diese kann eine hohe LDH-Aktivität oder Kaliumkonzentration im Serum verursachen. ! Erythrozyten müssen sich gut verformen können.

Da Erythrozyten einen Durchmesser von etwa 7,5 μm (ihre Dicke liegt bei etwa 1,5 μm), Kapillaren aber nur eine lichte Weite von 3 bis 5 μm aufweisen, ist eine Deformierbarkeit des Erythrozyten Voraussetzung für die ungehinderte Passage der Kapillaren. Durch den Verlust des Zellkerns und die Flexibilität der Membran, die durch das veränderte Verhältnis Oberfläche zu Volumen des Erythrozyten erreicht wird, verformen sich rote Blutkörperchen mit Leichtigkeit und zwängen sich durch engste Kapillaren (. Abb. 29.5). Normalerweise müsste die Oberfläche eines Erythrozyten bei seinem Volumen von 90 μm3 (mittleres korpuskuläres Volumen, MCV) bei einer Kugelform 95 μm2 betragen; tatsächlich ist die Oberfläche durch die bikonkave Scheibenform auf 140 μm2 erhöht, was offenbar eine leichtere Deformierbarkeit zur Folge hat. Die in . Abb. 29.3 gezeigte Form gilt jedoch – das sei ausdrücklich betont – aufgrund der mechanischen Einflüsse, denen der Erythrozyt ständig ausgesetzt ist, nur als Idealform, die intravital selten auftritt. Die spezielle Erythrozytenform hat außerdem den Vorteil, dass durch die Eindellungen die Diffusionsstrecken für den Sauerstoffaustausch reduziert sind.

. Abb. 29.5. Verformung der Erythrozyten im Kapillarbereich. 1 Erythrozytenstrom; 2 Plasmasaum; 3 Kapillarlumen (etwa 5 μm Ø); 4 Endothelzelle; 5 Basalmembran; 6 kollagene Gitterfasern

! Die Architektur der Erythrozytenmembran wird durch den mechanischen Stress bestimmt.

Die Membran des Erythrozyten besteht wie die anderer Zellen aus der typischen Lipiddoppelschicht, in die Proteine eingebaut sind (7 Kap. 2.2.6), weist aber durch den zusätzlichen Besitz eines Membranskeletts eine Strukturbesonderheit auf, die auf die speziellen Funktionen des Erythrozyten zugeschnitten ist. Sie enthält etwa zehn Hauptproteine, die durch SDS-Gelelektrophorese getrennt werden können (. Abb. 3.9, 7 Kap. 3.2.2). Die Bezeichnung der einzelnen Proteine beruht auf ihrer elektrophoretischen Mobilität in SDS-Gelen. Quantitativ bedeutsam sind Proteine, die Erythrozytenantigene tragen (7 Kap. 29.2.3), Rezeptoren (z.B. Glycophorine A und B) oder Transportproteine (z.B. Protein 3, der Anionenkanal oder Aquaporin, der Wasserkanal). Diese Glycoproteine liegen an der äußeren Membranoberfläche. Membranproteine ohne Kohlenhydratanteil befinden sich dagegen an der inneren Oberfläche. Dieser inneren Oberfläche liegen die sog. peripheren Membranproteine in Form eines zweidimensionalen Netzwerks an (. Abb. 29.6): dazu gehören Enzyme wie Glycerinaldehydphosphat-Dehydrogenase (Bande 6), Strukturproteine wie Spectrin (Banden 1 und 2) oder Aktin (Bande 5). Die peripheren Proteine sind mit der Membran assoziiert, untereinander verbunden oder mit den eigentlichen Membranproteinen verankert. Die entscheidenden Komponenten dieses Membranskeletts sind Spectrin, Aktin, Protein 4.1, Ankyrin (das aus den Proteinen 2.1, 2.2, 2.3 und 2.6 besteht) und die Bande 4.9. Spectrin ist ein Dimer aus zwei langen flexiblen Ketten (Protein 1 und 2), die parallel angeordnet und umeinander gewunden sind. An ihrem Kopfende bilden Spectrindimere durch Selbstassoziation Tetra- oder Oligomere, an ihrem Schwanzende binden die Spectrinmoleküle an kurze Aktinfilamente. Diese Bindung wird durch Protein 4.1 verstärkt. Da ein Aktinfilament mit mehreren Spectrinmolekülen in

957 29.2 · Erythrozyten

. Abb. 29.6. Schematische Darstellung der Verteilung und molekularen Wechselwirkungen der wesentlichen Proteine der Erythrozytenmembran. Bande 3 ist ein Tetramer und Bestandteil eines Chlorid-Hydrogencarbonat-Anionenaustauschers, der die Proteine 4,1 4,2 und 4,9 enthält und als Anker für andere Proteine dient. Hierzu

gehören Ankyrin (Bande 2,1), das an die β-Kette von Spectrin (Bande 2) bindet, Protein 4.2 und zahlreiche cytosolische Proteine wie Desoxy-Hämoglobin, Glycerinaldehyddehydrogenase (Bande 6) und Aldolase. Protein 4.1 bindet ebenfalls an Spectrin und an Aktinmoleküle

Wechselwirkung tritt, entstehen Spectrinverzweigungen und damit ein molekulares Netzwerk. Das Membranskelett ist mit der Lipiddoppelschicht über Ankyrin verbunden, das im Bereich der Kopfregion des Spectrins bindet und selbst mit dem cytosolischen Ende von Protein 3 verbunden ist.

globin bei einem 70 kg schweren »Normalerwachsenen« mit einem Blutvolumen von 5 Litern zu 800 g. Davon werden pro Tag etwa 6,25 g, das ist rund 1%, synthetisiert und abgebaut. Eine Verminderung der Hämoglobinkonzentration im Blut (beim Mann unter 14 g/100 ml, bei der Frau unter 12 g/100 ml) wird als Anämie bezeichnet. Hinweise auf mögliche Ursachen gibt der MCH-Wert: 4 bei einem Abfall des MCH-Werts liegt eine hypochrome Anämie vor: der ursächliche Eisen- (oder auch Kupfer- oder Vitamin B6-) mangel reduziert die Hämoglobinsynthese bei gleich bleibender Erythrozytenbildung 4 bei einem Anstieg des MCH-Werts eine hyperchrome Anämien: der ursächliche Vitamin B12- (oder Folsäure)Mangel reduziert die Erythrozytenbildung bei gleich bleibender Hämoglobinsynthese 4 Bei gleichzeitiger Verminderung von Hämoglobinkonzentration und Erythrozytenzahl und damit normalem MCH-Wert liegt eine normochrome Anämie, die z.B. durch eine Hämolyse (siehe oben) verursacht sein kann.

29.2.2

Hämoglobin

! Hämoglobin macht etwa ein Drittel der Zellmasse des Erythrozyten aus.

Der rote Farbstoff der Wirbeltiererythrozyten ist das Hämoglobin, ein zusammengesetztes Protein, das folgende Funktionen besitzt: 4 Transport des Sauerstoffs im Blut 4 Beteiligung am Transport des Kohlendioxids und Stickoxids im Blut 4 Beteiligung an der Pufferung zur Aufrechterhaltung der normalen Wasserstoffionenkonzentration im Extrazellulärraum Der Hämoglobingehalt des einzelnen Erythrozyten kann aus Hb-Gehalt und Erythrozytenzahl errechnet werden: Bei einer Hämoglobinkonzentration von 160 g/l Blut, das 5000 Milliarden Erythrozyten enthält, beträgt der Hämoglobingehalt eines einzelnen Erythrozyten (mittleres korpuskuläres Hämoglobin = MCH) 32 pg. Ausgehend von dem Durchschnittswert von 160 g/l Blut (16 g/100 ml oder 9,9 mmol/l) errechnet sich der Gesamtbestand an Hämo-

! Hämoglobin ist ein Tetramer aus jeweils zwei D- und EKetten.

Hämoglobin ist ein kugelförmiges Molekül, das aus 4 Untereinheiten besteht, von denen jede etwa ein Molekulargewicht von etwa 17 kD besitzt (7 Kap. 3.3.5). Jede Untereinheit trägt in ihrem Inneren eine Hämgruppe, mit der sie über eine koordinative Bindung (Histidin) und hydrophobe Wechselwirkungen verbunden ist. Beim Sauerstofftrans-

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Kapitel 29 · Blut

port wird der Sauerstoff reversibel an das Hämeisen angelagert (Oxygenierung), ohne dass Eisen im Schutz der koordinativen Bindung Fe-N (Histidin) oxidiert wird (7 Kap. 3.3.5). Von den vier Polypeptidketten des Hämoglobins, die insgesamt als sein Globinanteil bezeichnet werden, sind je zwei identisch. Man unterscheidet zwischen jenen der Dund der E-Familie: So wird z.B. das normale Erwachsenenhämoglobin aus 2D- und 2E-Ketten gebildet und als HbA (Adult) oder HbD2ß2 bezeichnet. Die Gene für die Globinketten liegen auf verschiedenen Chromosomen in der Reihenfolge, in der sie während der Ontogenie aktiviert werden (. Abb. 29.7). Die D-ähnlichen Gene auf Chromosom 16 enthalten ein funktionelles embryonales ]-Gen, das die Information für die embryonalen D-Gene trägt, gefolgt von einem Pseudo-]-Gen, dann \-DGenen – die jeweils nicht exprimiert werden – und den eigentlichen D-Genen, die für die D-Kette des fetalen (HbF) und Erwachsenenhämoglobins (HbA) codieren. Die EGlobingenfamilie auf Chromosom 11 enthält das embryonale H-Globingen, zwei fetale Globingene (GJ und AJ), ein \-E-Gen und zwei Erwachsenenglobingene (G und E). Der prinzipielle Aufbau der einzelnen Gene der beiden Familien ist praktisch identisch: Jedes Gen besteht aus drei Exons, die von zwei Introns unterbrochen werden. Die Sequenz am 5’-Ende enthält die Promotorregion, mit hoch-

. Abb. 29.7. Embryonales, fetales und ErwachsenenStadium der Hämoglobinbiosynthese beim Menschen. Die embryonalen Globinketten (H und ]) werden in der frühen Embryonalentwicklung gebildet; zu diesem Zeitpunkt werden auch geringe Mengen der J-Globinketten des Erwachsenen synthetisiert. Mit der Anschaltung der J-Globingene wird fetales Hämoglobin gebildet. Am Ende der Fetalperiode erfolgt die Umschaltung auf die Produktion des Erwachsenenhämoglobins

konservierten Regionen für die Biosynthese der mRNA, am 3’-Ende dienen andere Sequenzen als Signale für die Beendigung der Transkription und Polyadenylierung der mRNA. ! Während der Embryofetalentwicklung sind andere Hämoglobine aktiv als in der Postnatalperiode.

Beim Embryo werden die Hämoglobine Gower 1 und 2 gebildet, die Tetramere aus jeweils zwei H- und ]- bzw. D-Ketten darstellen (. Abb. 29.7). Im 3. Schwangerschaftsmonat werden die embryonalen durch die fetalen Hämoglobine ersetzt. Das fetale Hämoglobin weist besondere Charakteristika der Sauerstoffanlagerung auf, was für die Koppelung des fetalen an den mütterlichen Kreislauf erforderlich ist. Der Austausch von fetalem Hämoglobin HbF (F = fetal) gegen HbA (A = adult) beginnt durch Umschaltung der Kettenbiosynthese schon vor der Geburt, sodass bei der Geburt nur noch 60–80% fetales Hämoglobin im Erythrozyten vorliegen. Der Kind- und Erwachsenenerythrozyt enthält HbA (auch als HbA1 bezeichnet) und daneben noch etwa 2,5% HbA2, ein Hämoglobin, bei dem die E-Ketten durch G-Ketten ersetzt sind (D2G2). Diese Ketten bestehen ebenfalls aus 146 Aminosäuren, unterscheiden sich aber in 10 Positionen von der E-Kette, die für seine höhere Sauerstoffaffinität verantwortlich sind.

959 29.2 · Erythrozyten

! Unterschiedlich beladene Hämoglobine werden anhand ihres Absorptionsspektrums unterschieden.

Alle Hämoglobine zeigen bei der Spektralanalyse eine charakteristische Absorptionsbande, die sog. Soret-Bande bei 400 nm, die durch den Porphyrinanteil hervorgerufen wird. Durch die übrigen Banden können unterschiedliche Hämoglobinderivate voneinander unterschieden werden (. Abb. 29.8). Da die Spektralkurven von CO-Hämoglobin und mit Sauerstoff beladenem Hämoglobin (Oxyhämoglobin) sehr ähnlich sind, behandelt man eine Blutprobe bei Verdacht auf eine Kohlenmonoxidvergiftung mit einem leichten Reduktionsmittel (z.B. Natriumdithionit): dadurch gibt Oxyhämoglobin seinen Sauerstoff ab und zeigt die charakteristische Absorptionsbande des desoxygenierten Hämoglobins, während in Gegenwart von CO-Hb keine Änderung der Absorptionsbande eintritt. ! Hämoglobin transportiert den im Blut schlecht löslichen Sauerstoff.

Da Sauerstoff in polaren Lösungsmitteln wie dem Plasmawasser viel schlechter löslich ist als in unpolaren (1 l Blut löst und transportiert bei einem O2-Partialdruck von 100 mmHg gerade 3 ml Sauerstoff) und die Transportstrecke von den Lungenalveolen, über die das Sauerstoffgas in den Organismus eintritt, zu den Gewebezellen sehr lang ist, könnten die Zellen durch einfache molekulare Diffusion des Sauerstoffs nicht ausreichend mit diesem lebensnotwendigen Gas versorgt werden. Deshalb ist die Anlagerung an ein spezifisches Transportprotein – das Hämoglobin – erforderlich, das mit seinem hydrophoben Porphyringerüst und seiner hydrophilen Oberfläche als Lösungsvermittler zwischen dem unpolaren Sauerstoff und dem polaren Plasmawasser wirkt. Den Vorgang der Anlagerung eines Sauerstoffmoleküls an das Porphyrineisen der Hämoglobinun-

. Abb. 29.8. Spektralkurven menschlichen Hämoglobins. Links: Oxygeniertes Hämoglobin (rot), desoxygeniertes Hämoglobin (grün), Kohlenmonoxidhämoglobin (blau). Rechts: Oxygeniertes Hämoglobin (rot), Cyanmethämoglobin (grün) und Methämoglobin (blau)

tereinheit bezeichnet man als Oxygenierung, die Abgabe des Sauerstoffs als Desoxygenierung. Da die Konzentration des Hämoglobins im Vergleich zu anderen Blutproteinen mit etwa 160 g/l sehr hoch ist (im Vergleich dazu die Albumine mit 70 g/l), bietet die Verpackung im Erythrozyten insofern einen Vorteil, als das Protein dadurch kolloidosmotisch unwirksam wird und damit nicht den Wasseraustausch im Kapillarbereich beeinträchtigen kann. Durch die Vermittlung des Transportproteins Hämoglobin kann pro Liter Blut die 70-fache Menge Sauerstoff, also etwa 200–210 ml (bei einem Hämoglobingehalt von 160 g/l), befördert werden. ! Sauerstoffkapazität und -affinität des Bluts bestimmen den Sauerstoffaustausch.

Die Sauerstoffmenge, die vom Blut in den Lungen aufgenommen und in den Geweben an die Zellen abgegeben werden kann, wird von der Sauerstoffkapazität und der Sauerstoffaffinität bestimmt. Unter der Sauerstoffkapazität des Bluts versteht man seine maximale Aufnahmefähigkeit pro definierter Volumeneinheit (z.B. Liter). Sie hängt unter physiologischen O2-Druckbedingungen (also etwa 100 mmHg in den Lungenalveolen) und bei normalen Temperaturen (also etwa 37°C) nahezu ausschließlich von der Konzentration des Hämoglobins ab. Dabei ist jedoch allein das sauerstoffanlagerungsfähige Hämoglobin entscheidend, da z.B. CO-Hämoglobin (Raucher!) und Methämoglobin keinen Sauerstoff transportieren können. Als Sauerstoffaffinität des Bluts wird das Verhältnis zwischen O2-Druck (sei es im Bereich der Lungen oder der Gewebe) und der Beladung des Hämoglobinmoleküls (O2Sättigung) mit Sauerstoff bezeichnet, d.h. sie gibt an, wie viel Prozent des Hämoglobins bei einem bestimmten Sauerstoffangebot beladen sind. Ein Maß für die Affinität ist der O2-Druck, der eine Sättigung des Hämoglobins von 50% herbeiführt (Halbsättigungsdruck, P50). Er beträgt bei pH 7,4 und 37°C bei gesunden Erwachsenen 26,6 mmHg. Da bei der Sauerstoffanlagerung und -abgabe eine Farbänderung des Hämoglobins auftritt (. Abb. 29.8), die für die unterschiedliche Färbung des Bluts in den Venen (dunkelrot) und Arterien (hellrot) verantwortlich ist, lässt sich das Ausmaß der O2-Anlagerung mit Hilfe eines Spektralphotometers bequem quantitativ verfolgen. Man erhält dabei eine S-förmige Kurve (7 u.), die typisch für einen kooperativen Anlagerungsprozess ist. Das bedeutet, dass bei der Anlagerung von vier Sauerstoffmolekülen an das Hämoglobintetramer das erste nur sehr langsam, das zweite und dritte schon wesentlich leichter und das vierte mehrere hundert Male schneller aufgenommen wird (»Der Appetit kommt beim Essen«.). Der biologische Vorteil des sigmoid(al)en Verlaufs der Sauerstoffanlagerungskurve liegt v.a. darin, dass Hämoglobin den Sauerstoff leicht bei dem im Bereich der Gewebezellen herrschenden niedrigen O2-Druck (15– 30 mmHg im Kapillarbereich) abgeben kann. Im Fall einer

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Kapitel 29 · Blut

hyperbolischen Anlagerungskurve (wie z.B. bei der isolierten E-Kette) würde ein erheblicher Teil des transportierten Sauerstoffs nicht an die Zellen abgegeben werden können. ! Temperatur, pH-Wert und CO2-Partial-Druck beeinflussen die Sauerstoffanlagerungskurve.

Die Sauerstoffanlagerungskurve wird durch die Temperatur, den pH-Wert, den CO2-Druck und andere Faktoren beeinflusst. Unter der Standard-O2-Kurve versteht man den Kurvenverlauf bei 37 bzw. 38°C (je nach Übereinkunft) und pH 7,4. 4 Die Linksverlagerung dieser Kurve bedeutet eine Zunahme der Sauerstoffaffinität, d.h. die O2-Aufnahme in den Lungen wird erleichtert, die O2-Abgabe in den Geweben erschwert 4 Die Rechtsverlagerung bedeutet Abnahme der Sauerstoffaffinität, d.h. der Sauerstoff wird schwerer in den Lungen aufgenommen, aber besser in den Geweben abgegeben

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Unter physiologischen Bedingungen stehen die Wirkungen von Änderungen des pH-Werts bzw. des CO2-Drucks im Blut auf die Sauerstoffaffinität des Hämoglobins im Vordergrund. Beide Einflüsse werden nach ihrem Entdecker Christian Bohr (dem Vater von Niels Bohr) als Bohr-Effekt zusammengefasst. Ob die nach CO2-Druckabnahme im Blut zu beobachtende Rechtsverlagerung der Sauerstoffanlagerungskurve ausschließlich auf den gleichzeitig damit einhergehenden Abfall des pH-Werts (Henderson-Hasselbalch-Gleichung!, 7 Kap. 1.2.6) zurückzuführen ist oder ob außerdem eine spezifische Wirkung auf die O2-Affinität des Hämoglobins existiert, ist noch unklar. Die Erleichterung der O2-Abgabe im sauren und CO2-reichen Gewebebereich ist biologisch ebenso sinnvoll wie die verbesserte O2-Abgabe bei erhöhter Temperatur (z.B. beim arbeitenden Muskel). Typische Verlagerungen der O2-Anlagerungskurve des menschlichen Bluts können auch hervorgerufen werden durch 4 infolge von Genmutationen veränderte Hämoglobine 4 die Art des Hämoglobins (HbF oder HbA) 4 die Hämoglobin- und Kationenkonzentrationen im einzelnen Erythrozyten 4 intraerythrozytäre Enzymdefekte (7 Kap. 29.2.4) sowie 4 den Gehalt der Erythrozyten an 2,3-Bisphosphogylcerat, auf dessen Einfluss genauer eingegangen werden soll ! 2,3-Bisphosphoglycerat verlagert die Sauerstoffanlagerungskurve nach rechts.

Die Sauerstoffaffinität des Hämoglobins nimmt nach Zusatz von 2,3-Bisphosphoglycerat zu Hämoglobinlösungen zu; ebenso verlagert der Konzentrationsanstieg dieser Phosphate im Erythrozyten die Sauerstoffanlagerungskurve nach rechts (. Abb. 29.9). Erythrozyten enthalten

. Abb. 29.9. Sauerstoffanlagerungskurven. Von links nach rechts: Hämoglobin in Abwesenheit von 2,3-Bisphosphoglycerat (BPG); Hämoglobin in Gegenwart von 40 mmHg CO2; Hämoglobin in Gegenwart von 2,3-Bisphosphoglycerat; Hämoglobin in Anwesenheit von 2,3-Bisphosphoglycerat und CO2; Vollblut bei 40 mmHg CO2. Der pHWert der Hb-Lösung betrug 7,22 bei 50% O2-Sättigung. Der pH-Wert des Blutplasmas betrug 7,40 bei 50% O2-Sättigung, was einem pH-Wert von 7,22 innerhalb der Erythrozyten entspricht. (1 mmHg = 133,3 Pa)

wesentlich mehr 2,3-Bisphosphoglycerat als andere Körperzellen. 2,3-Bisphosphoglycerat, das auf einem Nebenweg der Glycolyse gebildet und abgebaut wird (7 o.), ist im menschlichen Erythrozyten etwa in der gleichen molaren Konzentration wie Hämoglobin und etwa in der vierfachen molaren Konzentration von ATP vorhanden. Durch Anlagerung des 2,3-Bisphosphoglyceratmoleküls an das desoxygenierte Hämoglobinmolekül wird die Sauerstoffaffinität von Hämoglobin herabgesetzt. Dies erleichtert die Sauerstoffabgabe in der peripheren Zirkulation und gewährleistet eine bessere Sauerstoffversorgung der Gewebe. 2,3-Bisphoglycerat besitzt die Funktion eines Signals und wird deshalb als Signalmetabolit bezeichnet. Der Erythrozyt besitzt mit diesem System einen Mechanismus zur Aufrechterhaltung der Sauerstoffversorgung der Gewebe unter veränderten äußeren Bedingungen: so kommt es beim Aufenthalt in Gebirgshöhen ab 4500 m zu einer erheblichen Steigerung der 2,3-Bisphosphoglyceratkonzentration, die sich etwa 50 Stunden nach Rückkehr ins Flachland wieder normalisiert. Gleichzeitig mit dieser 2,3-Bisphosphoglyceraterhöhung ist der Halbsättigungs-

961 29.2 · Erythrozyten

druck erhöht, d.h. derjenige Sauerstoffpartialdruck im Blut, der Hämoglobin bei einem pH von 7,40 und einer Temperatur von 37 bzw. 38°C zu 50% mit Sauerstoff sättigt (P50). Dies entspricht einer Rechtsverlagerung der Sauerstoffanlagerungskurve. Der Organismus reagiert mit diesem Kompensationsmechanismus auch auf eine Änderung der zirkulierenden Erythrozytenmenge. Im Tierexperiment zeigen Affenerythrozyten bereits 24 Stunden nach Entnahme von etwa 40% des Erythrozytenvolumens einen signifikanten 2,3-Bisphosphoglyceratanstieg mit entsprechender P50-Erhöhung. Die 2,3-Bisphosphoglyceraterhöhung bei Anämien soll – durch die dadurch bedingte Rechtsverlagerung – zu einer Entlastung des Herzens führen, das sein Minutenvolumen (Lehrbücher der Physiologie) entsprechend dem Hämoglobinverlust erhöhen müsste, um die Sauerstoffversorgung der Gewebe sicherzustellen. Möglicherweise führt aber weniger die Anämie als vielmehr eine intraerythrozytäre pH-Erhöhung zur 2,3-Bisphosphoglyceratvermehrung. ! Der intraerythrozytäre pH-Wert ist der wichtigste Regulator der 2,3-Bisphosphoglyceratkonzentration.

Bei den Änderungen des 2,3-Bisphosphoglyceratspiegels, die z.B. während einer Hypoxie (Sauerstoffmangel der Gewebe), einer Alkalose (Zunahme des pH-Werts im Extrazellulärraum) oder Azidose (Abfall des pH-Werts im Extrazellulärraum) auftreten, spielt der pH-Wert im Erythrozyten die Schlüsselrolle (. Abb. 29.10). Bei der Hypoxie führt der Sauerstoffmangel zu einer Hyperventilation mit vermehrtem Kohlendioxidverlust, sodass der pH-Wert des Bluts und der Erythrozyten ansteigt (Alkalose). Gleichzeitig bedingt die vermehrte Bildung von Desoxyhämoglobin mit der damit verbundenen Aufnahme von Protonen (7 Kap. 3.3.5) einen Anstieg des intraerythrozytären pH-Werts. Dies bewirkt die Abnahme der Konzentration von freiem 2,3-Bisphosphoglycerat, das bevorzugt an Desoxyhämoglobin bindet. Die Alkalisierung innerhalb des Erythrozyten führt über eine Aktivierung der Phosphofructokinase zu einer Erhöhung der Glycolyserate, wodurch vermehrt 1,3-Bisphosphoglycerat entsteht. Demzufolge nimmt auch die Produktion von 2,3-Bisphosphoglycerat zu. Da die 2,3-Bisphosphoglycerat. Abb. 29.10. Mechanismus des Hypoxie-induzierten Anstiegs des Erythrozyten-2,3-Bisphosphoglyceratspiegels. BPG = Bisphosphoglycerat; PFK = Phosphofructokinase. (Einzelheiten im Text)

phosphatase durch einen pH-Anstieg gehemmt wird, tragen Hypoxie und Alkalose auch über eine Hemmung dieses Enzyms zu einem Konzentrationsanstieg bei. Auf der anderen Seite führt eine Azidose zu einer Erniedrigung der 2,3-Bisphosphoglyceratkonzentration. Der durch diese Vorgänge vermittelte Anstieg der 2,3Bisphosphoglyceratkonzentration während einer Hypoxie oder Alkalose wird offenbar durch einen Rückkoppelungsprozess reguliert. Mit steigender Konzentration des nichtpermeablen 2,3-Bisphosphoglyceratanions sinkt der intraerythrozytäre pH-Wert wieder ab. Der Abfall des pH-Werts wirkt also dem durch die Hypoxie hervorgerufenen pHAnstieg entgegen, d.h. die erhöhte 2,3-Bisphosphoglyceratbiosyntheserate wird bei hohen 2,3-Bisphosphoglyceratspiegeln wieder auf Normalwerte reduziert. Wie oben dargelegt beeinflusst der Erythrozyten-pHWert nicht nur den 2,3-Bisphosphoglyceratstoffwechsel, sondern auch die Sauerstoffaffinität von Hämoglobin (Bohr-Effekt, 7 o., 7 Kap. 3.3.5). Ein Anstieg des pH-Werts verlagert die Sauerstoff-Anlagerungskurve nach links. Der gleiche Anstieg des pH-Werts verursacht jedoch einen Anstieg der 2,3-Bisphosphoglyceratkonzentration, der seinerseits eine Verlagerung der Kurve in die Gegenrichtung, nämlich nach rechts, hervorruft. Es erscheint somit wahrscheinlich, dass der 2,3-Bisphosphoglyceratmechanismus die pH-induzierte Änderung der Sauerstoffaffinität des Bluts bei chronischen Störungen des Säure-Basen-Haushalts (7 Kap. 28.8.6) kompensiert. ! Im Bereich der Gewebekapillaren wird Kohlendioxid im Erythrozyten in Hydrogencarbonat überführt.

Das im Zellstoffwechsel produzierte Kohlendioxid gelangt in physikalischer Lösung in den interstitiellen Raum und diffundiert von dort in das Plasma der Gewebekapillaren. Unter Verwendung des molaren Löslichkeitskoeffizienten, der angibt, wie viel Millimol eines Gases sich in 1 Liter Flüssigkeit bei Einwirkung des Partialdrucks von 1 mmHg lösen, errechnet sich die physikalisch gelöste Konzentration bei einem CO2-Partialdruck im venösen (arteriellen) Bereich von etwa 45 (39) mmHg mit 1,4 (1,2) mmol/l. Diese physikalisch gelöste Menge nimmt mit etwa 10% am Transport teil. Ein geringer Teil (etwa 0,1%) des Kohlendioxids wird zu Kohlensäure hydratisiert, die in Hydrogencarbonat

29

962

Kapitel 29 · Blut

und Protonen dissoziiert, wobei letztere von Plasmapuffern abgefangen werden. Die übrigen 90% werden in chemischer Bindung und als Hydrogencarbonat befördert. Aus dem Plasma diffundiert Kohlendioxid in den Erythrozyten und wird dort an Aminogruppen des Hämoglobins (wahrscheinlich N-terminale Valylreste) in Form der Carbaminobindung (10–15% des transportierten Kohlendioxids) gebunden. Die Reaktion verläuft nichtenzymatisch nach der Gleichung

29

Mit protonierten Aminogruppen (NH3+) bildet CO2 keine Carbaminoverbindungen. Derartige Bindungen können auch mit Plasmaproteinen zustande kommen. Der größere Teil des Kohlendioxids, der in die Erythrozyten diffundiert ist, wird unter Katalyse der in den Erythrozyten vorkommenden Enzyme Carboanhydrase I und II reversibel hydratisiert. Carboanhydrase II ist eines der schnellsten Enzyme: Pro Sekunde kann jedes Enzymmolekül 106 CO2-Moleküle in Protonen und Hydrogencarbonat umwandeln. Da dadurch für Hydrogencarbonat ein Konzentrationsgefälle ins Plasma entsteht, diffundiert es aus dem Erythrozyten ins Plasma. Die frei werdenden Protonen werden vom Hämoglobin aufgenommen, das bei der Sauerstoffabgabe in den Gewebekapillaren zu einer schwächeren Säure wird (Änderung des pK-Werts der Aminogruppe von Valylresten und der Imidazolgruppe von Histidylresten, 7 Kap. 3.3.5). Diese Abwanderung der Hydrogencarbonatanionen als negative Ladungsträger würde die elektrische Neutralität zwischen Plasma und Erythrozyten stören, wenn nicht entweder die gleiche Menge Kationen ebenfalls aus dem Erythrozyten ins Plasma oder die gleiche Menge von Anionen aus dem Plasma in den Erythrozyten diffundieren würde. Da die Erythrozytenmembran für Kationen im Gegensatz zu Anionen schlecht permeabel ist, muss ein Anion in den Erythrozyten diffundieren. Dazu bietet sich das im Plasma in hoher Konzentration vorliegende Chloridanion an. Dieser als Chloridverschiebung bezeichnete Austausch von Hydrogencarbonat- gegen Chloridionen erfolgt über den Anionenkanal, ein transmembranäres Tetramer des Protein 3 (auch als Chlorid/ Hydrogencarbonat-Anionen-Exchanger AE1 bezeichnet, . Abb. 29.6), und läuft bis zum Erreichen eines Gleichgewichtes ab. Dadurch steigt im Plasma die Konzentration von Hydrogencarbonat an, das die wesentliche Transportform (75–80%) von Kohlendioxid von den Geweben zu den Lungen darstellt. Die Carboanhydrasen bilden mit AE1 einen Komplex, sodass ein sog. Metabolon entsteht. ! Im Bereich der Lungenkapillaren wird Hydrogencarbonat über Kohlensäure zu Kohlendioxid überführt.

Im venösen Schenkel der Lungenkapillaren gerät das Blut mit dem CO2-Partialdruck der Alveolarluft in Kontakt, der durch das Atemzentrum (Lehrbücher der Physiologie) auf

40 mmHg eingestellt wird. Aus dem Blut diffundiert jetzt so viel CO2 in die Gasphase, bis die CO2-Konzentration wieder 1,2 mmol/l beträgt. Das diffundierende Kohlendioxid stammt aus zwei Quellen: Zum einen werden aus den covalenten Carbaminobindungen der Plasmaproteine und des Hämoglobins wieder CO2-Moleküle freigesetzt, zum anderen laufen in den Erythrozyten die umgekehrten Vorgänge wie im Bereich der Gewebekapillaren ab: Die durch die Sauerstoffaufnahme stärkere Säure Oxyhämoglobin gibt Protonen ab, die mit Hydrogencarbonat zu Kohlensäure zusammentreten. Die Carboanhydrase beschleunigt die Dehydratisierung von Kohlensäure zu Kohlendioxid, das den Erythrozyten verlässt und durch das Plasma in den Alveolarraum diffundiert. Da dadurch der Hydrogencarbonatspiegel im Erythrozyten abfällt, diffundiert Hydrogencarbonat aus dem Plasma nach, wobei die Erhaltung der Elektroneutralität wieder durch Chlorid, diesmal durch Abströmen durch den Anionenkanal ins Plasma, erfolgt. Der größte Teil des CO2-Transports verläuft also unter Vermittlung des Erythrozyten, der durch den Besitz der Carboanhydrase im Bereich der Gewebekapillaren aus dem CO2 gut lösliches HCO3– für das Plasma bereitstellt und im Bereich der Lungenkapillaren das Hydrogencarbonat wieder in das auszuscheidende, gut diffusible Kohlendioxid zurückverwandelt. Da die Erythrozyten weniger als 1s in den Lungenkapillaren verweilen, würde diese Zeit für die nichtenzymatische Bereitstellung von CO2 nicht ausreichen. ! Täglich werden etwa 12 mol Kohlendioxid über die Lungen abgeatmet.

Unter Ruhebedingungen beträgt die Gesamtmenge Kohlensäure in 1 Liter venösen Bluts 23,21 mmol, in derselben Menge arteriellen Bluts 21,53 mmol. Die Differenz von 1,68 mmol/l ist die Menge CO2, die in 1 Liter Blut von den Geweben zu den Lungen transportiert wird und dort aus dem Blut in die Lungenalveolen diffundiert. Da die Lungen von 5 Liter Blut/min durchströmt werden, werden in dieser Zeit 8,4 mmol CO2 abgegeben. Das bedeutet eine tägliche CO2-Abgabe von 12100 mmol unter Ruhebedingungen. Wie die Gesamt-CO2-Menge im Blut auf Plasma und Erythrozyten verteilt ist, zeigt . Tabelle 29.3. Bei einem Hämatokrit von 40% (Plasma 60%, Erythrozyten 40%) beträgt die CO2-Konzentration in 600 ml venösen Plasmas 16,99 mmol, in derselben Menge arteriellen Plasmas 15,94 mmol. Die Differenz in Höhe von 1,05 mmol stellt die im Plasma von den Geweben zu den Lungen transportierte CO2-Menge dar. Sie beträgt 62% der transportierten Gesamt-CO2-Menge (1,68 mmol). Von diesem Betrag werden nur 0,09 mmol in physikalischer Lösung und 0,96 mmol in Form von Hydrogencarbonationen transportiert. Die Erythrozyten (400 ml) transportieren 0,63 mmol CO2 oder 38% der Gesamtmenge, d.h. der Großteil des CO2-Transports erfolgt im Plasma. Da aber die Hydrogencarbonationen durch die intraerythrozytäre Carboanhy-

963 29.2 · Erythrozyten

. Tabelle 29.3. Blutwerte des Probanden A.V.B. Konzentration des Hämoglobins = 8,93 mmol/l Blut (dieser Angabe liegt das Molekulargewicht des Monomers mit 16,7 kD zugrunde), Hämatokrit = 40 % Venös

Artriell

Differenz

Gesamt-CO2 [mmol/Blut]

23,21

21,53

+ 1,68

Gesamt-CO2 im Plasma von 1 l Blut (= 600 ml)

16,99

15,94

+ 1,05

davon: als gelöstes CO2

0,80

0,71

+ 0,09

als HCO3–-Ionen

16,19

15,23

+ 0,96

pH

7,429

Netto-negative Ladungen an Plasmaproteinen Chloridionen

7,455

– 0,026

7,80

7,89

– 0,09

58,72

59,59

– 0,87

Gesamt-CO2 in der Erythrozyten von 1 l Blut (= 400 ml)

6,22

5,59

+ 0,63

davon: als gelöstes CO2

0,39

0,34

+ 0,05

als Carbamino- CO2

1,42

0,97

+ 0,45

als HCO3–-Ionen

4,41

4,28

+ 0,13

Netto-negative Ladungen am Hämoglobin

21,15

22,60

– 1,45

Chloridionen

18,98

18,11

+ 0,87

Alle Angaben – mit Ausnahme des pH-Wertes (ohne Dimension) – in mmol/l.

drase gebildet und die entstehenden Protonen durch Hämoglobin abgepuffert werden, ist der Erythrozyt Voraussetzung für den CO2-Transport. Wie aus . Tabelle 29.3 weiterhin hervorgeht, ändert sich die negative Ladung der Plasmaproteine, da sie 0,09 mmol Protonen aufnehmen, die aus der im Plasma gebildeten Kohlensäure stammen. Die dabei gebildeten 0,09 mmol Hydrogencarbonationen verbleiben im Plasma. Weil die gesamte transportierte Hydrogencarbonationenmenge 0,96 mmol beträgt, müssen 0,87 mmol (0,96–0,09) aus den Erythrozyten ins Plasma übergetreten sein. Die Bedeutung des Hämoglobins für den CO2-Transport ist aus dem unteren Teil von . Tabelle 29.3 zu ersehen: Da Hämoglobin 1,45 Einheiten negative Ladungen verliert, müssen in Erythrozyten 1,45 mmol Protonen gebildet und von Hämoglobinmolekülen aufgenommen worden sein. Davon entstehen 0,45 mmol bei der Bildung von Carbaminoverbindungen (R–NHCOO–+H+), der Rest bei der Hydratisierung von 1 mmol CO2 zu HCO3– und Protonen. Die Protonen beider Gruppen werden von Hämoglobinmolekülen abgepuffert. Da sich die Chloridkonzentration um 0,87 mmol ändert, müssen von den 1 mmol entstandenen Hydrogencarbonationen (7 oben) 87% ins Plasma übergetreten sein. Das Entscheidende beim CO2-Transport ist, dass jedes CO2-Molekül, das zum Transport nicht physikalisch gelöst wird, nur unter Freisetzung von Protonen (durch Bildung von Hydrogencarbonationen und Carbaminoverbindungen) befördert werden kann. Die Funktion des Hämoglobins beim CO2-Transport liegt darin, dass es den wesentlichen Teil der freigesetzten Protonen (1,45 mmol von 1,54 mmol; die restlichen 0,09 mmol werden von den Plasmaproteinen abgepuffert) aufnimmt.

Von den in . Tabelle 29.3 angegebenen Messgrößen sind nur der pH-Wert, die Gesamtmenge CO2 und der pCO2 messbar, während für die Bestimmung von Hydrogencarbonationen und gelöstem CO2 keine direkten Messmethoden existieren. Sind die Gesamtmenge CO2 und der pH-Wert bekannt, so können nach der Gleichung von Henderson und Hasselbalch (7 Kap. 1.2.6) die Hydrogencarbonatkonzentration und der CO2-Partialdruck berechnet werden:

Da die Konzentration des gelösten CO2, die in der Gleichung für die Summe aus CO2 und H2CO3 steht, dem CO2Partialdruck direkt proportional ist, kann unter Verwendung des molaren Löslichkeitskoeffizienten für CO2 in der Gleichung statt [CO2]=[S·pCO2] gesetzt werden:

Da die Gesamtmenge CO2 im Plasma die Summe aus gelöstem CO2 und Hydrogencarbonationen darstellt, kann bei bekannter Gesamt-CO2-Konzentration die Hydrogencarbonatkonzentration folgendermaßen errechnet werden:

29

964

Kapitel 29 · Blut

Setzt man diesen Ausdruck für HCO3– in die obige Henderson-Hasselbalch-Gleichung ein, so entsteht:

Der pK-Wert, der von Bestimmungsmethode, Temperatur und pH-Wert abhängt, beträgt i. Allg. 6,10, der molare Löslichkeitskoeffizient für Plasma bei 37°C 0,0304.

29

Diese Gleichung enthält drei Unbekannte: den pH-Wert, die Gesamt-CO2-Konzentration im Plasma und den CO2Partialdruck. Sind zwei dieser Größen bekannt, so kann die dritte berechnet werden. Da die Gesamtmenge CO2 im Plasma oft in Volumenprozent angegeben wird, muss sie unter Verwendung eines Umrechnungsfaktors vor Einsetzen in die Gleichung noch in mmol/l umgerechnet werden. Zur Berechnung der CO2-Verteilung im Plasma werden also in Plasmaproben arteriellen und venösen Bluts der pH-Wert und die Gesamtmenge CO2 bestimmt (. Tabelle 29.4). Nach der Umrechnung der Volumenprozente in mmol/l Gesamtmenge CO2 lassen sich aus der Henderson-Hasselbalch-Gleichung der CO2-Partialdruck und damit auch die Konzentration des gelösten Kohlendioxids sowie die Hydrogencarbonatkonzentration errechnen oder aus speziellen Nomogrammen (. Abb. 29.11) ablesen. Da die Erythrozyten einen wesentlichen Anteil am CO2-Transport haben, kann auch die Verteilung des Kohlendioxids im Gesamtblut, d.h. Plasma und Erythrozyten, durch einfache – an dieser Stelle nicht erwähnte – Berechnungen ermittelt werden. ! Hämoglobin ist aufgrund seiner hohen Konzentration ein wichtiges Puffersystem im Blutplasma.

Nach dem Hydrogencarbonatpuffersystem (7 Kap. 1.2.6) ist das Hämoglobinprotein das wichtigste Puffersystem im . Tabelle 29.4. Berechnung von pCO2, [CO2]P und [HCO3–]P nach Bestimmung des pH-Wertes und der Gesamtmenge CO2 in Plasmaproben arteriellen und venösen Blutes Werte

Venös

Arteriell

Gemessen pH-Wert Gesamt-CO2 [Vol%]

7,39

7,44

62,0

59,4

Gesamt-COs [mmol/l]

27,8

26,7

pCO2 [mm Hg]

45

39

Errechnet

[CO2]P [mmol/l] –

[HCO3 ] [mmol/l]

1,4

1,2

26,4

25,5

. Abb. 29.11. Nomogramm zur Ermittlung des CO2-Partialdrucks, des pH-Werts und der Plasmahydrogencarbonatkonzentration. Sind zwei dieser drei Größen bekannt, so kann die dritte abgelesen werden

Blut, was auf die hohe Konzentration und die Histidylreste mit den günstigen pK-Werten (. Abb. 3.2, 7 Kap. 3.1.3) zurückzuführen ist. Wie bereits erwähnt (7 Kap. 3.3.5), führt die Oxygenierung des Hämoglobins zur Abgabe von Protonen, die Desoxygenierung zu deren Aufnahme. Normalerweise kann das Hämoglobinprotein pro Mol abgegebenen Sauerstoff 0,7 mol Protonen aufnehmen. Das bedeutet, dass bei einem respiratorischen Quotienten (RQ, 7 Kap. 21.1.4) von 0,7 (Fettoxidation) alle durch den CO2Abtransport anfallenden Protonen von Hämoglobinmolekülen aufgenommen werden können. Bei einem RQ von 1,0 (Kohlenhydratoxidation) können nur 70% gepuffert werden. Deshalb weist das venöse Blut bei normalem Stoffwechsel (RQ>0,7) einen geringeren pH-Wert (= höhere Protonenkonzentration) als das arterielle auf. ! Hämoglobin kann auch mit Stickoxid reagieren.

Hämoglobin kann Stickoxid (NO) sowohl durch Bindung an das Hämeisen inaktivieren (unter Bildung von Methämoglobin, siehe unten und Nitrat) oder reversibel an das Cystein in Position 93 der ß-Kette binden. Es wurde die Hypothese aufgestellt, dass NO bei fallender Sauerstoffspannung in der Mikrozirkulation aus der Hämoglobinbindung freigesetzt wird und die dadurch hervorgerufene

965 29.2 · Erythrozyten

Vasodilatation den Blutfluss in die Region des örtlichen Sauerstoffbedarfs dirigiert.

29.2.3

Erythrozyten-Antigene

! Die AB0- und Rhesussysteme sind die für Transfusionen wichtigsten Blutgruppenantigene.

Die Blutgruppenunterteilungen innerhalb einer Species kommen dadurch zustande, dass bestimmte Mitglieder der Species auf ihrer Erythrozytenoberfläche Antigene (7 Kap. 34.2.1) besitzen, die auf den Erythrozyten anderer Mitglieder derselben Species fehlen. Diese Antigene werden durch Serumantikörper entdeckt, die die Erythrozyten zur Agglutination (Zusammenballung) bringen. Die Blutgruppenantigene kommen nicht nur auf Erythrozyten, sondern auch auf sehr vielen anderen Zelloberflächen und in Körperflüssigkeiten vor. Aber sie beschränken sich nicht nur auf den Menschen: Blutgruppen und blutgruppenähnliche Verbindungen kommen bei allen Tieren und vielen Mikroorganismen vor. Deshalb werden diese Antigene als heterophile Antigene bezeichnet, d.h. es handelt sich um Antigene, die Affinität zu Antikörpern besitzen, die aufgrund ihrer Herkunft eigentlich nichts mehr mit dem betreffenden Antigen zu tun haben dürften. So entwickeln z.B. Kaninchen, die mit Meerschweinchenniere immunisiert wurden, hämolysierende Antikörper gegen Schafserythrozyten. Die Blutgruppenantigene heißen also nur deshalb so, weil sie zuerst an Erythrozyten entdeckt worden sind. Beim Menschen sind vierzehn Blutgruppensysteme bekannt, die aus mehr als hundert verschiedenen Blutgruppenantigenen bestehen. Die am längsten bekannten sind das AB0-System (vor hundert Jahren entdeckt) und das Rhesussystem (vor fünfzig Jahren entdeckt). Beim AB0-System werden Träger der Blutgruppe A, B oder AB unterschieden, in deren Serum die Antikörper Anti-B (E), Anti-A (D) bzw. keine Antikörper vorkommen. Bei Menschen mit der Blutgruppe 0 finden sich im Serum die Antikörper Anti-A und Anti-B (. Tabelle 29.5). Es gibt kein 0-Antigen: Gruppe-0-Erythrozyten besitzen das H-Antigen, die Bezeichnung Blutgruppe 0 wurde nur aus historischen Gründen beibehalten.

. Tabelle 29.5. Das ABO-System (die prozentuale Verteilung in Mitteleuropa) Blutgruppe

Antigen auf Erythrozyten

Antikörper im Serum

A (40 %)

A

Anti-B (β)

B (16 %)

B

Anti-A (α)

AB (4 %)

A und B

–

0 (40 %)

H

Anti-A und Anti-B

Die Produktion dieser Antikörper (Isoagglutinine) wird durch blutgruppensubstanzhaltige Bakterien der Darmflora stimuliert. Genetisch bedingt ist nur die Fähigkeit, Antikörper mit einer derartigen Spezifität zu bilden. Die menschlichen Isoagglutinine sind also heterophile Antikörper. Das eigentliche antigene Stimulans, das bakterielle »Blutgruppenantigen«, hat mit Erythrozyten der menschlichen Population nur zufällig die determinante Gruppe gemeinsam. Isoagglutinine kommen außer im Blut auch in der Tränenflüssigkeit, im Vaginalsekret und im Speichel vor. Klinische Bedeutung kommt den Blutgruppeneigenschaften bei Erythrozytentransfusionen (Gefahr der hämolytischen Reaktion infolge Transfusionen gruppenungleichen Bluts) und bei Unverträglichkeitserscheinungen (Inkompatibilität) der Blutgruppen von Mutter und Kind (fetale Erythroblastose) zu. A- und/oder B-Antigene bzw. das H-Antigen kommen auf der Oberfläche wahrscheinlich aller Endothel- und vieler Epithelzellen sowie auf Erythrozyten, Thrombozyten, Leukozyten und Spermatozoen vor. Bei diesen zellgebundenen Antigenen handelt es sich um Kohlenhydrate. Zusätzlich scheiden als Sekretoren bezeichnete Individuen (etwa 80% der Population) wasserlösliche Blutgruppensubstanzen aus, die in Urin, Speichel, Magensaft, Amnionflüssigkeit, Samenflüssigkeit, Cervicalschleim, in Ovarialzysten und im Meconium, dem ersten Stuhl des Neugeborenen, nachweisbar sind. ! Für die Biosynthese der ABH- Antigene sind Glycosyltransferasen erforderlich.

Beim chemischen Aufbau der Blutgruppenantigene unterscheidet man das Trägermolekül und die antigene Determinante (7 Kap. 34.2.1). Letztere wird entweder durch ein Oligosaccharid – an dessen Aufbau vier verschiedene Saccharide teilnehmen können (Fucose, Galactose, N-Acetyl-DGalactosamin, N-Acetyl-D-Glucosamin) – oder ein Protein gebildet. Die Kohlenhydrat-Antigene (ABH) sind covalent an Proteine und/oder Sphingolipide gebunden. Protein-Antigene (z.B. das Rhesussystem) werden von Proteinen, Glycoproteinen oder Proteinen mit GPI-Anker gebildet. Bei den Sphingolipiden besteht das Trägermolekül aus Ceramid (7 Kap. 2.2.4). Die primäre Alkoholgruppe stellt die Bindungsstelle für den Oligosaccharidanteil dar. Glycoproteine weisen einen Kohlenhydratanteil von bis zu 85% auf. Die Biosynthese der oligosaccharidhaltigen Antigene erfolgt durch Glycosyltransferasen, durch die schrittweise Monosaccharide (. Abb. 29.12) an eine aus D-Galactose und N-Acetyl-D-Glucosamin bestehende Disaccharidgrundstruktur gehängt werden. Je nachdem, ob die beiden Zucker (1.3)-E-glycosidisch oder (1.4)-E-glycosidisch miteinander verbunden sind, wird zwischen Typ-1- und Typ2-Ketten unterschieden. Wird an das Galactosemolekül der Grundstruktur ein Fucosylrest (1.2)-D-glycosidisch durch eine D-L-Fucosyltransferase gebunden, so entsteht eine Struktur mit H-Spe-

29

966

Kapitel 29 · Blut

29

. Abb. 29.12. Biosynthese der antigenen Determinanten der Blutgruppensubstanzen durch Glycosyltransferasen. Endständige Zuckersequenzen der Polysaccharidketten der Glycoproteine, die die

Spezifitäten »H«, »A« und »B« bestimmen (7 Text). GP = Glycoprotein; Gal = D-Galactose; GNAc = N-Acetyl-D-glucosamin; GalNAc = N-Acetyl-D-galactosamin; Fuc = L-Fucose

zifität (. Abb. 29.12). Wird an diese H-Struktur N-Acetylgalactosamin bzw. Galactose gekoppelt, so entstehen die A- und B-determinanten Gruppen.

Die Gene der A- und B-Antigene unterscheiden sich nur um einige Basensubstitutionen unterscheiden, die zur Änderung von vier Aminosäureresten führen. Dies ruft die Unterschiede in der Spezifität dieser beiden Transferasen hervor (. Abb. 29.13). Im H-Gen findet sich die Deletion einer Base, die zu einem vollständig unterschiedlichen,

! Wenige Basensubstitutionen ändern die Spezifität der A- und B-Glycosyltransferasen.

967 29.2 · Erythrozyten

wo die Pestzüge nur selten hinkamen (Alpen- und Pyrenäentäler, britische Inseln), überwiegt bei weitem die Blutgruppe 0. ! Die Rhesusantigene werden von zwei Genen auf Chromosom 1 codiert.

. Abb. 29.13. Struktureller Aufbau der Membran verankerten Aund B-Glycosyltransferasen. Die Gene beider Enzyme unterscheiden sich durch Codons für vier Aminosäuren, von denen zwei (266 und 268) die Substratspezifität bestimmen. Eine Deletion im Codon für die Aminosäure 87 führt zu einem Rasterschub und damit Verlust der Enzymaktivität, was die 0-Spezifität bedingt

inaktiven Enzym führt, die das H-Antigen nicht mehr modifizieren kann. Dass diese Mutation Verbreitung fand, ist darauf zurückzuführen, dass sie für die betreffende Bevölkerung einen Selektionsvorteil brachte. Wahrscheinlich haben die seuchenhaften Infektionserkrankungen, wie z.B. die Pest, eine besondere Rolle dabei gespielt. Bei Populationen, die mehrfach von Pestepidemien heimgesucht wurden, ist die Blutgruppe 0 zurückgegangen, während die Blutgruppe A offenbar einen Selektionsvorteil darstellte. Dies beruht wahrscheinlich darauf, dass die Pestbazillen über H-Antigene verfügen, die einen Nachteil für Blutträger der Blutgruppe 0 darstellen, da bei der Bildung von Antikörpern gegen die Pestbazillen diese auch gegen die eigenen Blutgruppenantigene gerichtet sind. Überall dort,

. Abb. 29.14. Codierung der Antigene des Rhesussystems durch das Rh D-Gen und das Rh CcEe-Gen. Beide Gene codieren für strukturell verwandte Membranproteine mit jeweils 417 Aminosäuren, wobei beim Rh CcEe-Gen durch alternierendes Spleißen ein zweites verkürztes Protein mit 267 Aminosäuren entsteht. Vier Aminosäure-

Die Rhesusantigene werden nicht durch Kohlenhydrate, sondern durch Proteine codiert. Für die drei Antigene (CDE bzw. cde) werden nur zwei Gene benötigt. Das Rhesus D-Gen codiert für das D-Antigen mit 417 Aminosäuren, das für die rhesuspositive Blutgruppe verantwortlich ist. Rhesusnegative Individuen (dd) sind für eine Deletion der Rhesus D-Gensequenz homozygot. Das Rhesus CcEeGen ist mit dem Rhesus D-Gen homolog und unterscheidet sich in etwa 30 Aminosäurepositionen. Aus dem primären präRNA-Transkript entsteht durch alternierendes Spleißen entweder das normale Transkript mit 417 Aminosäuren, das für das Rhesus E/e-Antigen codiert, oder ein Protein mit 267 Aminosäuren, welches für das C/c-Antigen codiert. Rhesus E und Rhesus e unterscheiden sich durch eine Aminosäuresubstitution in Position 226 voneinander, Rhesus C und Rhesus c durch vier Aminosäuren (. Abb. 29.14). Rhesusantigen-ähnliche Proteine sind in der Niere, Leber, Gehirn und Haut nachweisbar.

29.2.4

Pathobiochemie

Ein erhöhter Umsatz der Erythrozyten, der zu einer verkürzten Erythrozytenlebenszeit führt, wird als Hämolyse

substitutionen (16, 60, 68 und 103) sind für die Unterschiede zwischen C und c verantwortlich, eine (226) für den Unterschied zwischen E und e. Bei rhesusnegativen Personen wird das Rh D-Gen durch eine Mutation nicht exprimiert

29

968

Kapitel 29 · Blut

. Abb. 29.15. Rasterelektronenmikroskopische Aufnahmen von Erythrozyten. Hereditäre Elliptozytose (oben), Sphärozytose (unten)

29

bezeichnet. Der Hämolyse können Störungen des Enzymstoffwechsels, der Membran oder des Hämoglobins zugrunde liegen. ! Glucose-6-phosphat-Dehydrogenasemangel schützt vor Malaria.

Von allen Enzymen des Erythrozytenstoffwechsels sind kongenitale Anomalien bekannt, von denen die wichtigste der Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase(G6PD)-Defekt ist. Als Folge dieser Störung des Pentosephosphatwegs, von der weltweit ca. 400 Millionen Menschen betroffen sind, kann es zu einer Beeinträchtigung der Produktion von Glutathion kommen, das zum Schutz des Hämoglobins vor einer Oxidation benötigt wird. Heute sind über 400 G6PDVarianten bekannt, von denen aber nur wenige eine Hämolyse verursachen. Die meisten Betroffenen haben deshalb keine klinischen oder biochemischen Zeichen einer Hämolyse; erst wenn auslösende Mechanismen wie eine Infektion, bestimmte Medikamente (wie z.B. das Sulfonamid Cotrimoxazol oder das Antiandrogen Flutamid) oder der Genuss von Acker- oder Saubohnen einen oxidativen Stress verursachen, werden die Genträger symptomatisch. Bohnen enthalten Glycoside, deren Abbauprodukte freie Sauerstoffradikale generieren. Diese führen zur Oxidation von SH-Gruppen im Hämoglobin, das in Monomere dissoziiert und in den Erythrozyten präzipitiert. Entstehende Einschlüsse in den Erythrozyten sind im Blutausstrich erkennbar. Genträger der G6PD-Mutationen haben einen Schutz vor Malaria, was die weite Verbreitung der Mutationen in Malariagebieten erklärt. ! Auch angeborene Membrandefekte können eine Hämolyse verursachen.

Die hereditäre Elliptozytose ist eine heterogene Gruppe von Erkrankungen, die morphologisch durch ovalgeformte Erythrozyten gekennzeichnet ist (. Abb. 29.15). Ursache ist das Fehlen des Proteins 4.1, das zu einer Störung der Membranintegrität des Erythrozyten und damit zur Hämolyse führt. Bei der häufigen hereditären Sphärozytose (1 auf 2500 Menschen in Nordeuropa) liegt ebenfalls eine Störung der Architektur des Erythrozytenmembranskeletts vor [Defekt im Spectrinmolekül, Ankyrin, Bande 3 oder Protein 4.2]. Dadurch ist die Assoziation mit den anderen Membranskelettproteinen gestört, sodass der Erythrozyt Kugelform annimmt und deshalb Sphärozyt heißt (. Abb. 29.15). Diese veränderten Erythrozyten werden bereits nach zehntägiger (!) Lebensdauer durch Phagozytose in der Milz aus dem Blut entfernt. Kann das Knochenmark den schnellen Abbau durch eine vermehrte Erythrozytenbildung ausgleichen, so liegt eine kompensierte Hämolyse vor. Erleidet dagegen ein Betroffener zusätzlich einen Infekt, so kann das Knochenmark diese Kompensation nicht mehr bewerkstelligen, sodass der Erythozytenwert abfällt (dekompensierte hämolytische Anämie). Bei dauerhafter Dekompensation besteht die Therapie in einer Entfernung der Milz, wodurch die Lebensdauer der Sphärozyten bis auf 80 Tage erhöht werden kann. ! Bei der erworbenen paroxysmalen nächtlichen Hämoglobinurie liegt eine somatische Mutation in dem Gen für die Synthese eines GPI-Ankerproteins vor.

Patienten mit dieser erworbenen Stammzellerkrankung leiden an häufig nachts auftretenden hämolytischen Attacken, die immer wieder ein Ausmaß annehmen, dass sich der Urin dunkel verfärbt. Die Verfärbung ist auf freies Hämoglobin zurückzuführen, das in so großen Mengen anfällt,

969 29.2 · Erythrozyten

dass es durch Haptoglobin nicht mehr gebunden werden kann und deshalb in den Urin übertritt. Ursache der Hämolyse der von der Mutation (siehe unten) betroffenen Erythrozyten ist eine besondere Empfindlichkeit gegenüber dem Angriff durch das Komplementsystem (7 Kap. 34.4). Bereits normale Erythrozyten sind ständig durch die zellzerstörenden Komplementfaktoren bedroht, die sich auf der Erythrozytenoberfläche ansammeln, wenn sie durch Antikörper und Bakterienprodukte aktiviert worden sind. Zur Abwehr dieses lytischen Angriffs besitzen Erythrozyten drei membranverankerte Proteine: 4 den zerfallbeschleunigenden Faktor (Decay-accelerating-factor, DAF), 4 den Membraninhibitor der reaktiven Lyse (CD59) und 4 ein C8-bindendes Protein. Die von der Erkrankung betroffenen Erythrozyten sind extrem empfindlich gegenüber dem Komplementsystem, da ihnen diese drei schützenden Proteine fehlen. Allen drei Proteinen ist gemeinsam, dass sie nicht mit Hilfe einer transmembranären Proteindomäne, sondern über einen Glycosyl-Phosphatidyl-Inositol-Anker in der Membran verankert sind. Bei der PNH erwirbt eine Stammzelle im Knochenmark eine Mutation im Gen für die Synthese eines Glycosyl-Phosphatidyl-Inositolankers. Bei der PNH liegen verschiedene Mutationen im GPI-A-Gen vor, welches für das erste Enzym der GPI-Synthese codiert. Damit fehlt den drei oben genannten Proteinen ihr Membrananker. Im Gegensatz zu Keimbahnmutationen, die für die angeborenen Enzym- und Membrandefekte des Erythrozyten verantwortlich sind, liegt bei der PNH eine erworbene, genetische Störung vor. Sie kommt durch eine somatische Mutation in einer Knochenmarksstammzelle zustande. Der betroffene Zellklon übergibt diese Mutation an all seine Abkömmlinge, d.h. Erythrozyten, Leukozyten und Thrombozyten. Diese mutierten Zellen existieren gleichzeitig mit den normalen Blutelementen, wodurch ein hämatologisches Mosaik entsteht, bei dem das Verhältnis von gestörten zu normalen Erythrozyten im Blut den Schweregrad der Krankheit bestimmt. ! Durch die ständige Gegenwart von Glucose entsteht Glycohämoglobin auf nichtenzymatischem Weg.

Ein Glucose enthaltendes Hämoglobin (HbA1c) ist in einer Konzentration von 4–6% im Erythrozyten nachweisbar. Dieses Glycohämoglobin ist bei Diabetikern häufig erhöht und dient zur Bewertung der Einstellung des Diabetes mellitus (7 Kap. 26.4). ! Verschiedene Medikamente begünstigen die Bildung von Methämoglobin.

Wird das zweiwertige Eisen im Hämoglobin zu dreiwertigem oxidiert, so kann das entstandene Methämoglobin

(Hämiglobin) keinen Sauerstoff mehr transportieren. In vivo wie in vitro kann Methämoglobin durch Einwirkung von Oxidationsmitteln wie Kaliumferricyanid, Wasserstoffperoxid oder aromatische Nitro- und Aminverbindungen (Nitroglycerin, Anilin) entstehen. Im Erythrozyten entsteht Methämoglobin ständig durch die Anlagerung des Sauerstoffs an Hämoglobin. Bei diesem als Autoxidation bezeichneten Vorgang führt die Übernahme eines Elektrons von Eisen zur Bildung von Methämoglobin und dem Superoxidanion (O2–). Dass die Methämoglobinkonzentration i. Allg. 1–2% nicht überschreitet, ist auf eine intraerythrozytäre NADH-abhängige Methämoglobinreduktase zurückzuführen. Das Superoxidanion wird durch eine Superoxiddismutase zu H2O2 reduziert und anschließend durch die in Kapitel 15.3 erwähnte Peroxidase zu H2O und O2 entgiftet. Ist die Aktivität der Methämoglobinreduktase – wie bei der familiären Methämoglobinämie – stark vermindert, so kann das ständig gebildete Methämoglobin nicht mehr ausreichend reduziert werden, sodass die Konzentration bis auf 30% ansteigt. Folge der dadurch verursachten mangelnden Sauerstoffversorgung der Gewebe ist eine Vermehrung der Erythrozyten im Blut (reaktive Polyzythämie). Bestimmte Medikamente mit Anilinderivatcharakter (siehe oben) wie Dapson, ein Lepramittel, sind Methämoglobinbildner. Bei Vergiftungen (Met-Hb>40%) wird ein Reduktionsmittel (Toloniumchlorid) als Antidot intravenös verabreicht, in schweren Fällen sind Austauschtransfusionen erforderlich. ! Hämoglobin besitzt eine 300-fach höhere Affinität zu Kohlenmonoxid als zu Sauerstoff.

Kohlenmonoxid (CO) ist ein giftiges Gas, das durch unvollständige Verbrennung organischer Verbindungen entsteht. Die Toxizität dieses farb- und geruchlosen Gases kommt dadurch zustande, dass es sich an Stelle des Sauerstoffs an das Hämoglobinmolekül anlagert und so den Sauerstofftransport blockiert. Da die Affinität des Hämoglobinmoleküls zu Kohlenmonoxid rund 300mal so hoch ist wie zu Sauerstoff (. Abb. 29.16), führen schon geringe Mengen dieses Gases zu einer starken Reduktion der Sauerstofftransportfähigkeit des Bluts. Die daraus resultierende Hypoxie (Sauerstoffmangel der Gewebe) wird noch dadurch verstärkt, dass Kohlenmonoxid eine Linksverlagerung der Sauerstoffanlagerungskurve (7 o.) bewirkt, sodass die Abgabe des noch transportierten Sauerstoffs im Bereich der Gewebe erschwert ist. Erst durch diesen Umstand wird es verständlich, dass eine CO-Vergiftung, die mit 60% COHämoglobin einhergeht, eine tödliche Bedrohung darstellt, während eine Anämie mit 40% des normalen Hämoglobingehalts durchaus mit dem Leben vereinbar ist. Daneben blockiert Kohlenmonoxid auch Myoglobin und andere eisenhaltige Proteine. Wegen der reversiblen Anlagerung des Kohlenmonoxids an den Porphyrinanteil des Hämoglobins kann das CO-Hämoglobin durch hohe Sauerstoffdrucke in O2-Hb überführt werden. Vergiftete sind deshalb schnell aus dem Kohlenmonoxid-haltigen Milieu (z.B. Abgasen in

29

970

Kapitel 29 · Blut

. Abb. 29.16. Bindung von Kohlenmonoxyd bzw. Sauerstoff an Hämoglobin. Die Kurven zeigen, zu welchem Prozentsatz das Hämoglobin bei einem bestimmten Gasangebot (Sauerstoff bzw. Kohlenmonoxid) mit dem betreffenden Gas beladen ist. Aufgrund der hohen Affinität des Hämoglobins zu Kohlenmonoxid führen schon sehr geringe CO-Drucke zu einer 100%igen Sättigung des Hämoglobins, die beim Sauerstoff erst bei Drucken von etwa 120 mmHg erreicht wird. (1 mmHg = 133,3 Pa)

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Garagen) zu bringen und mit Sauerstoff zu beatmen. Bei Zigarettenrauchern findet man im Durchschnitt 4–9%, bei stärkeren Rauchern auch Werte bis zu 15% CO-Hämoglobin (!). ! Die Thalassämien kommen durch quantitative Störungen der Globinkettenproduktion zustande.

Bei den Thalassämien ist die Biosynthese eines der beiden Kettentypen des Hämoglobins in den Erythroblasten des Knochenmarks gestört. Die homozygote Form (Thalassämia major) hat früher bereits im Kindesalter zum Tode geführt, heute hat die Lebenserwartung der Patienten aufgrund verbesserter Kenntnisse über die Erkrankung deutlich zugenommen. Genträger, also Individuen, die die heterozygote Form (Thalassämia minor) aufweisen, haben eine mikrozytäre Anämie, die keine Symptome verursacht. Aus diesem Grunde besitzen die Identifizierung von Genträgern und genetische Beratung für die Familienplanung von Betroffenen eine große Bedeutung. α-Thalassämien. Deletionen treten häufiger in der DGlobinfamilie auf, da der gesamte Komplex Sequenzhomologien aufweist und die Verdoppelung der E- und D-Gene (. Abb. 29.17) die Wahrscheinlichkeit der Fehlanlagerung während der Meiose erhöhen kann. Eine ungleiche Überkreuzung kann zu Chromosomen mit einer Überzahl oder verringerten Anzahl von D-Genen führen. Die Tatsache, dass vier D-Gene (jeweils zwei auf jedem Chromosom 16) existieren, erklärt, warum D-Thalassämien i. Allg. weniger dramatisch verlaufen als E-Thalassämien (. Abb. 29.17). Die homozygote D-Thalassämie, die zum Hydrops fetalis (Morbus haemolyticus neonatorum) und zum Tod in utero führt, beruht auf einer Deletion aller vier Globingene. Die Hämoglobin-H-Erkrankung, eine milde, hypochrome, hä-

. Abb. 29.17. Erscheinungsformen der α-Thalassämien. Alle vier Genloci werden gleich stark exprimiert. Die Existenz von vier a-Genen erklärt, warum die a-Thalassämien i. Allg. – mit Ausnahme der homozygoten Form – klinisch weniger dramatisch verlaufen als die E-Thalassämien. Der Verlust von 1, 2 oder 3 Genen wird zumindest teilweise durch die übrigen kompensiert

molytische Anämie, ist in vielen Fällen auf die Deletion von drei D-Genen zurückzuführen. Die beiden heterozygoten Zustände werden durch die Deletion von einem oder zwei D-Genen verursacht. Durch die Störung der Biosynthese der D-Ketten ist nicht nur die Produktion von HbA1, sondern auch von HbA2 und HbF verringert. Beim Embryo treten die überschüssigen J-Ketten wegen der eingeschränkten DKettenbiosynthese zu γ4-Tetrameren (Hb J4 oder HbBart) zusammen. Da nach der Geburt die J-Ketten durch E-Ketten ersetzt werden, bilden E-Ketten, die keine D-Ketten zur Bildung des normalen D2E2-Hämoglobins finden, β4-Tetramere (HbH). HbBart und HbH zeigen keinen Bohr-Effekt mehr, sind unstabil und neigen zu Verklumpungen, wodurch die normale Lebensdauer der Erythrozyten, die bizarre Formen aufweisen können, herabgesetzt wird. β-Thalassämien. Im Gegensatz zur D-Thalassämie wird die E-Thalassämie erst einige Wochen oder Monate nach der Geburt manifest, wenn die J-Ketten durch E-Ketten ersetzt werden. Da die Biosynthese dieser Ketten jedoch reduziert ist (E+) oder überhaupt nicht stattfindet (E°), treten überschüssige D-Ketten mit – auch im Erwachsenenalter bei der E-Thalassämie weiter synthetisierten – J- oder

971 29.2 · Erythrozyten

G-Ketten zusammen, wodurch bei der heterozygoten Form der Prozentsatz von HbA2 (D2G2) auf 4–6% (normal 2–3%) und von HbF (D2J2) auf 0,5–6% (normal nicht vorhanden) erhöht ist. Es werden keine D4-Tetramere gebildet. Die Instabilität der Erythrozyten von Patienten mit Thalassämien ist zumindest teilweise dadurch bedingt, dass freie D- und E-Ketten wesentlich rascher als im Tetramerverband des normalen Hämoglobins autoxidieren. Dadurch wird entsprechend mehr Superoxidanion gebildet und die Kapazität des Dismutasesystems überschritten, sodass Schäden an der Erythrozytenmembran durch die Peroxidation von Membranlipiden und SH-Gruppen von Proteinen resultieren. Die vermehrte Produktion von HbA2 und HbF reicht jedoch nicht zur Kompensation der verringerten EGlobinsynthese aus. Gleichzeitig wird die Erythropoiese erheblich gesteigert (bis zum Faktor 10), aufgrund des Überschusses an D-Ketten ist sie jedoch ineffektiv, d.h. die erythrozytären Vorläufer gehen im Knochenmark durch Apoptose (7 Kap. 7.1.5) zugrunde. Als wesentliche Komplikation der homozygoten bzw. gemischt-heterozygoten schweren Form der Thalassämie tritt aufgrund der ineffektiven Erythropoiese eine Überladung des Organismus mit Eisen (sekundäre Eisenüberladung) auf: der bei den Patienten zu beobachtende Abfall des Hepcidinspiegels führt dazu, dass im Gastrointestinaltrakt vermehrt Eisen resorbiert wird. Dadurch kommt es zu einer Eisenakkumulation mit konsekutiver Funktionsstörung von Herz, Leber und endokrinen Organen. ! Punktmutationen in Exonbereichen der Globingene führen zu qualitativ veränderten Hämoglobinen.

Abweichungen der normalen Sequenz der Globinketten werden bei etwa jedem 600sten Menschen beobachtet. Inwieweit der Austausch einer Aminosäure Einfluss auf die Struktur und Funktion des Hämoglobins besitzt, hängt davon ab, welcher Art die Substitution ist (z.B. Austausch einer hydrophoben durch eine hydrophile Aminosäure), und ob die ausgetauschte Aminosäure an der Oberfläche oder im Inneren des Moleküls liegt. Hämoglobinanomalien werden autosomal-rezessiv vererbt. Bei heterozygoten Trägern, die zur Hälfte ein normales und ein pathologisches Hämoglobin besitzen, reicht die Menge des normalen Hämoglobins zur Sauerstoffversorgung der Gewebe aus, während bei homozygoten Trägern schwere Anämien und in vielen Fällen der Tod eintreten. Die anomalen Hämoglobine werden

. Tabelle 29.6. Genetische Störung der Aminosäuresequenz von Hämoglobinen (Auswahl aus über 250 bekannten Varianten) Hämoglobin

Substitution

Resultierende Störung

HbS

E6

Glu o Val

Sichelzellbildung

Chesapeake

D92

Arg o Leu

O2-Affinität erhöht

Seattle

E70

Ala o Asp

O2-Affinität reduziert

Nagoya

E97

His o Pro

instabil mit Hämolyse

Barcelona

E94

Asp o His

Erythrozytose (Polyzythämie)

Iwate

D87

His o Tyr

Methämoglobinbildung mit Zyanose

mit den großen Buchstaben des Alphabets oder mit dem Klinik-, Ortschafts- oder Patientennamen bezeichnet, der mit ihrer erstmaligen Beschreibung in Zusammenhang steht (. Tabelle 29.6). Die Mutation wird entweder auf DNA-Ebene (z.B. GAG o GTG) oder Proteinebene (E6Glu o Val oder Glu6Val) beschrieben, d.h. in diesem Fall ist der Glutamylrest in Stellung 6 der E-Ketten durch einen Valylrest ersetzt. ! Das Sichelzellgen schützt heterozygote Träger vor einer Malariainfektion.

Bei der homozygoten Form der Sichelzellkrankheit (HbS/ HbS) kommt es im peripheren, d.h. sauerstoffarmen Blut zum Auftreten sichelförmiger Erythrozyten. Ursache ist eine Polymerbildung des desoxygenierten HbS, die durch die Substitution des hydrophilen Glutamats durch das hydrophobe Valin in Position 6 an der Oberfläche der ß-Kette zustande kommt (HbS = D2E26Glu o Val). Die Sichel-Erythrozyten adhärieren in der postkapillären Venule der Mikrozirkulation und führen dort zu einem (schmerzhaften) Gefäßverschluss. Weiterhin werden die irreversibel geschädigten Erythrozyten rasch abgebaut, sodass eine Anämie entsteht. Der Selektionsvorteil heterozygoter Träger der HbS-Anlage beruht darauf, dass Erythrozyten, die den Malariaparasiten enthalten, sehr viel leichter als nicht infizierte Zellen sicheln, da sie einen niedrigeren pH-Wert aufweisen. Mit dem Sicheln im sauerstoffarmen Blut ist die Aktivierung des Kalium-Efflux-Kanals verbunden, der zum Verlust von Kaliumionen und dadurch zum Tod des Parasiten führt.

In Kürze Erythrozyten sind für den Transport von Sauerstoff und Kohlendioxid im Blut verantwortlich. Die Nieren messen den peripheren Sauerstoffgehalt über den Hypoxie induzierbaren Faktor (HIF) und regulieren die Erythrozytenproduktion im Knochenmark über Erythropoietin. Der Ery-

throzyt bezieht seine Energie aus der ausschließlichen Verstoffwechselung von Glucose. Diese Energie wird zur Aufrechterhaltung von Ionengradienten und zum Schutz vor oxidativem Stress benötigt. Erythrozyten sind formflexibel und besitzen eine komplex aufgebaute Membran. Ver6

29

972

Kapitel 29 · Blut

schiedene angeborene Enzym- oder Membrandefekte führen zum frühzeitigen Abbau (Hämolyse), der bei unzureichender Kompensation durch eine Steigerung der Erythopoiese eine Anämie hervorrufen kann. Bei der erworbenen paroxysmalen nächtlichen Hämoglobinurie wird ein GPI-Ankerprotein nicht mehr gebildet, sodass die Erythrozyten besonders empfindlich gegenüber Komplementfaktoren werden. Hämoglobin transportiert Sauerstoff, Kohlendioxid, Protonen und möglicherweise auch Stickoxid. Bei der Geburt erfolgt eine Umschaltung vom fetalen auf das Erwachsenen-Hämoglobin mit veränderten funktionellen Eigenschaften. Die Sauerstoffanlagerungskurve wird durch Temperatur, pH-Wert, CO2-Druck und 2,3-Bisphosphoglycerat beeinflusst. Hämoglobin stellt aufgrund seiner hohen Konzentration ein wichtiges Puffersystem dar. Längerfristige Erhö-

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hungen des Plasma-Glucosespiegels erhöhen die Glycohämoglobinkonzentration im Erythrozyten. Letale CO-Vergiftungen beruhen auf der extrem hohen Affinität von Kohlenmonoxid zu Hämoglobin. Die Thalassämien kommen durch quantitative Störungen der Globinkettenproduktion zustande. Punktmutationen in Exonbereichen der Hämoglobinketten führen zu Hämoglobinopathien: die häufigste ist die Sichelzellanämie, die im heterozygoten Zustand vor Malaria schützt und im homozygoten Zustand zu Gefäßverschlüssen und Anämie führt. Die unterschiedlichen Blutgruppenantigene A, B und 0 (auch als H bezeichnet) werden durch die individuell unterschiedliche Ausstattung mit Glycosyltransferasen verursacht. Die Rhesusantigene werden nicht durch Kohlenhydrate, sondern durch Proteine codiert.

29.3

Leukozyten

! Neutrophile Granulozyten müssen an das Endothel adhärieren, bevor sie die Zirkulation verlassen.

29.3.1

Funktion und Stoffwechsel der Leukozyten

Die Adhäsion und die sich daran anschließende Wanderung durch das Endothel finden vor allem in den postkapillären Venolen statt. Dieser Prozess ist mit charakteristischen Änderungen der Granulozytenmorphologie verbunden. Der schwimmende Granulozyt gerät zuerst in kurzen Kontakt mit der Gefäßwand, verlangsamt daraufhin seine Bewegung und rollt sich am Endothel entlang. Einige Zellen lösen sich wieder von der Gefäßwandoberfläche, wohingegen andere zu einem Stillstand kommen und ihre Gestalt innerhalb von Sekunden ändern, indem sie eine abgeflachte, adhärente Struktur annehmen. Innerhalb der nächsten Minuten wandern die Zellen zwischen den Endothelzellen hindurch in das Gewebe (. Abb. 29.18). Der entscheidende Faktor für die Rekrutierung dieser Granulozyten sind Wechselwirkungen zwischen den Zellen und dem Endothelium. Für das Andocken an die Endotheloberfläche sind lektinähnliche, Kohlenhydrat-bindende Proteine, die sog. Selectine (7 Kap. 6.2.6) verantwortlich. 4 L-Selectin findet sich auf den meisten Leukozyten 4 wohingegen E-Selectin von Endothelzellen nach Aktivierung durch Cytokine synthetisiert und exprimiert wird 4 P-Selectin wird vom aktivierten Endothel und von Thrombozyten (Plättchen) exprimiert

Je nach Gestalt, Funktion und Biosyntheseort unterscheidet man Granulozyten, Lymphozyten und Monozyten. Da nur 1% der Lymphozyten in der Blutbahn kreist, ist der Lymphozyt streng genommen eine Gewebezelle und wird deshalb im Kap. Immungewebe (7 Kap. 34) besprochen. ! Die Granula neutrophiler Granulozyten enthalten eine Vielzahl verschiedener Enzyme.

Unter den Granulozyten (neutrophile, eosinophile und basophile) kommt den Neutrophilen eine Schlüsselstellung bei der Infektabwehr zu. Die neutrophilen Granulozyten – auch als polymorphkernige Leukozyten bezeichnet – phagozytieren stark, sind reich an in Granula (Name!) verpackten Hydrolasen [Proteasen wie Elastase (7 Kap. 6.2.7), Kollagenase oder Kathepsin G; Lysozym (Muraminidase, 7 Kap. 4.3)] und können mit diesen und anderen Enzymen Bakterien auflösen. Bei der Reifung im Knochenmark macht der Granulozyt mehrere Phasen durch, wobei ab der zweiten Phase (also mit Ausnahme der Myeloblasten, die noch keine Granula besitzen) das Enzym Myeloperoxidase (7 u.) nachgewiesen werden kann. Während des Reifungsprozesses nimmt die Anzahl der Mitochondrien ab, während Glycogenspeicherung und Glycolyserate zunehmen. Der Energiegewinn durch Glycolyse bietet dem Granulozyten insofern einen Vorteil, als mit Hilfe dieses Stoffwechselwegs Energie auch unter anaeroben Bedingungen wie im hypoxischen, entzündeten Gewebe gewonnen werden kann.

Jedes dieser Selectine erkennt spezifische Kohlenhydratsequenzen auf Leukozyten (so z.B. E-Selectin das sLex-Molekül) oder dem Endothel. Selectine sind für diese Andockungsfunktion gut geeignet, da sie lang ausgestreckt sind, sodass Leukozyten, die den entsprechenden Rezeptor auf-

973 29.3 · Leukozyten

. Abb. 29.18. Prozesse, die zur Auswanderung von neutrophilen Granulozyten aus dem Blutgefäßsystem bei Entzündungen führen. Im ersten Schritt kommt es zu einer lockeren Anhaftung, die über ICAM-1 und E-Selectin auf Endothelzellen vermittelt wird. Im zweiten Schritt wird diese Adhäsion durch zusätzliche Adhäsionsmoleküle, wie sLe auf Endothelzellen oder die L-Selectine auf Granulozyten, intensi-

viert. Dies ist die Voraussetzung für die Wanderung der Granulozyten zwischen zwei Endothelzellen hindurch durch die Gefäßwand. Von Makrophagen freigesetzte Mediatoren wie Interleukine, chemotaktische Substanzen des Komplementsystems oder Leukotriene fördern die gerichtete Wanderung der durchgetretenen Granulozyten in den Entzündungsbereich

weisen, eingefangen werden können. Die vorübergehende Natur dieser Wechselwirkung ist wichtig, da Leukozyten das Endothel auf spezifische Auslösefaktoren absuchen können, welche zu einer Aktivierung der Leukozyten und damit zu einer Auswanderung in entzündete Gewebe führen. Fehlen solche Faktoren, so führt die nur leichte Bindung an Selectine zu einer schnellen Lösung, sodass die Leukozyten im Blut weiterschwimmen können. Die feste Anhaftung an das Endothel wird durch Adhäsionsmoleküle vermittelt, die als Integrine bezeichnet werden (7 Kap. 6.2.6, 24.5.3). Dazu gehören die E2-Integrine LFA-1 (Lymphozytenfunktion assoziiertes Antigen, CDLFA/CD 18), MAC-1 (Leukozyten-Adhäsionsrezeptor, CD 11 B/CD 18) und das E1-Integrin VLA-4, die am CAM-Molekül (7 Kap. 6.2.6) wie ICAM-1 oder 2 an Endothelzellen binden (. Abb. 29.18). Diese Integrine auf zirkulierenden Leukozyten binden nur dann gut an Endothelien, wenn ihre Bindungsaktivität durch Aktivierung erhöht wird. Diese Aktivierung erfolgt durch Signale, die vorwiegend von Endothelzellen freigesetzt werden und als chemotaktisch aktive Cytokine (Chemokine wie z.B. Interleukin-8) bezeichnet werden. Nach Adhäsion an das Endothel wandern Leukozyten unter dem Einfluss von Chemokinen in das Gewebe. Dazu gehören auch Fragmente des Komplementsystems wie C5a (7 Kap. 34.4) oder das Leukotrien B4. Unter dem Einfluss lokal gebildeter Entzündungsfaktoren, wie z.B. Tumor-

nekrosefaktor D (7 Kap. 25.8.2) oder Interleukin-1 werden interzelluläre Adhäsionsmoleküle (wie z.B. ICAM-1) auf Endothelzellen verstärkt exprimiert, sodass noch mehr Leukozyten aus dem Blutstrom rekrutiert werden können. Auf chemotaktische Reize ändern die Neutrophilen nach Einwanderung in das Gewebe ihre Gestalt, richten sich nach dem Gradienten aus und bewegen sich kontinuierlich auf den Ausgangspunkt der chemoattraktiven Substanz zu. Nach Kontakt mit dem Fremdkörper wird dieser von Cytosolausläufern (Pseudopodien) des Granulozyten umgeben und in den Zell-Leib aufgenommen. Dadurch, dass die Pseudopodien an der distalen Seite des Mikroorganismus fusionieren, entsteht eine von der Zellmembran umschlossene Phagozytosevakuole (als Phagosom bezeichnet), in die das Bakterium eingekapselt ist. Dieses Phagosom löst sich von der Zellperipherie und wandert zelleinwärts. Die Aufnahme eines Fremdkörpers stellt einen energieabhängigen Vorgang dar, der mit einer Aktivitätserhöhung ATP-produzierender Prozesse einhergeht. ! Degranulierung und Erzeugung hochaktiver Sauerstoffverbindungen ermöglichen die Vernichtung von Bakterien.

Die Aktivierung des Granulozyten bewirkt die Bildung von zwei intrazellulären Botenstoffen, des Inositol-1,4,5-tris-

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974

Kapitel 29 · Blut

phosphats und des Diacylglycerins. Während Inositoltrisphosphat Calcium aus intrazellulären Speichern mobilisiert, aktiviert Diacylglycerin Protein C-Kinasen, die ihrerseits Cytoskelett-Proteine wie Aktin, Aktin bindende Proteine, Profilin, Acumentin oder Gelsolin phosphorylieren. Das von Filamenten dieser Proteine gebildete Netzwerk bestimmt den physikalischen Zustand des Cytosols und damit die Bewegung der Pseudopodien und die Phagozytose. Anschließend verschmelzen die Granula des Granulozyten mit dem Phagosom und verschwinden aus dem Cytosol (Degranulierung). Dabei ergießen sich die Enzyme der primären und sekundären Granula wie 4 Lysozym zur Zerstörung der Bakterienwand (osmotischer Schock!) 4 neutrale und saure Hydrolasen sowie 4 Lactoferrin, das Eisen cheliert und damit den Mikroorganismen dieses für ihr Wachstum wichtige Metall entzieht

29

in die Vakuole, ohne jedoch in das Cytosol der Zelle zu gelangen. Gleichzeitig nimmt der nicht-mitochondriale Sauerstoffverbrauch des Granulozyten innerhalb von Sekunden auf das hundertfache (sog. respiratory burst) zu, da durch eine in der Plasmamembran lokalisierte NADPH- Oxidase Sauerstoff nach Reaktion

Aktivierung aus dem Cytosol rekrutiert werden. Im Einzelnen handelt es sich um 4 Einen trimeren Proteinkomplex aus den Proteinen p47, p40 und p67. Diese werden nach Phosphorylierung durch die Proteinkinase C an p22 gebunden und sind eine Voraussetzung für die Aktivität der NADPH-Oxidase 4 Das kleine G-Protein Rac-2. Aktivierende Signale lösen den Austausch von GDP gegen GTP aus, was ebenfalls von der Bindung an p22 gefolgt ist und die Aktivierung der Oxidase auslöst Das Superoxidanion wird durch die Superoxiddismutase (7 Kap. 15.3) zu Wasserstoffperoxid reduziert oder kann mit bereits gebildetem Wasserstoffperoxid unter Bildung hochaktiver Hydroxylradikale (OH) reagieren:

Unter dem Einfluss des bereits erwähnten Enzyms Myeloperoxidase werden Chloridionen (oder auch Jodid) durch Wasserstoffperoxid unter Bildung von Hypochloritionen oxidiert:

zum Superoxidanion (O2–) reduziert wird. Die NADPH-Oxidase ist ein Proteinkomplex aus katalytisch aktiven und regulatorischen Komponenten (. Abb. 29.19). In der Membran trägt die Untereinheit p91 die katalytische Aktivität. Sie ist ein Flavoprotein und verfügt außerdem über zwei Cytochrom b558 -Gruppen, die für den Elektronentransport zum Sauerstoff verantwortlich sind. Die regulatorische Untereinheit p22 ist ebenfalls membrangebunden. Sie bindet eine Reihe von Faktoren, die bei der

Diese Sauerstoffverbindungen verursachen die Peroxidation von Membranlipiden (Radikalreaktionen, 7 Kap. 15.3) des Bakteriums. Wasserstoffperoxid wird auch durch eine D-Aminosäureoxidase (7 Kap. 13.3.4) erzeugt, die bei der Vereinigung eines bakterienhaltigen Phagosoms mit einem Peroxisom die Oxidation von D-Aminosäuren der Bakterienwand katalysiert. Da H2O2 biologische Membranen relativ gut permeieren kann und dadurch aus dem Phagosom ins Cytosol gelangt, muss der Granulozyt sich durch Katalase (in Peroxisomen, 7 Kap. 6.2.10) und Glutathionabhängige Enzymsysteme (7 Kap. 15.3) vor H2O2 schützen.

. Abb. 29.19. Aufbau des NADPH/H+-Oxidase-Systems in der Plasmamembran des Granulozyten. Der membrangebundene Komplex aus den Proteinen p91 und p22 wird durch Rekrutierung cytoplasmatischer Proteine aktiviert. Die aktivierenden Signale lösen

die Phosphorylierung der p67 Untereinheit des p47/p40/p67-Komplexes und dessen Bindung an p22 aus. Außerdem führen sie zur Aktivierung von Rac-2 und dessen Bindung an p22. Erst dann ist die Oxidase aktiv. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

975 29.3 · Leukozyten

Das durch H2O2 oder Lipidperoxide oxidierte Glutathion wird durch mit dem Pentosephosphatweg gekoppelte Enzyme regeneriert. Sauerstoffradikale können auch mit D1-Antitrypsin reagieren und diesen Proteaseinhibitor durch Oxidation eines entscheidenden Methionylrests inaktivieren. Während diese Reaktion für die Bakterienabtötung keine Rolle spielt, kann sie bei Gewebeschädigungen durch Entzündungen mit Granulozytenaktivierung von Bedeutung sein. Das Schicksal des neutrophilen Granulozyten ist mit dem der abgetöteten Bakterien unlösbar verbunden: Die mit den Enzymen angefüllte Phagozytenvakuole kann nicht mehr aus der Zelle entfernt werden; nach einigen Stunden wird ihre Wand durchlässig, der Inhalt ergießt sich in die Zelle und zerstört sie. Man bezeichnet das Phagosom deshalb auch als »suicide bag«. In neutrophilen Granulozyten übt das Cytoskelett-assoziierte Protein Pyrin (auch als Marenostrin bezeichnet) eine hemmende Wirkung auf die Stimulationskaskade der Granulozyten aus, sodass nur starke proinflammatorische Stimuli eine Aktivierung bewirken können. Gleichzeitig fördert Pyrin die Bildung antiinflammatorischer Inhibitoren, z.B. des C5a-Inhibitors, wodurch die Entzündungsreaktion reguliert wird. Mutationen im Pyringen beim familiären Mittelmeerfieber verursachen eine überschießende Aktivierung und Migration von Neutrophilen, die sich klinisch durch Fieber, Bauch- und Rippenfell- sowie Gelenkentzündungen manifestiert. Auch eosinophile und basophile Granulozyten besitzen die Fähigkeit zur Phagozytose. Dadurch sind diese Zellen ebenfalls an Abwehrreaktionen (z.B. Wurminfektionen) beteiligt. ! Makrophagen besitzen eine Funktion als Antigen präsentierende Zellen.

Aus den Monozyten, die ebenfalls im Knochenmark gebildet werden, differenzieren sich die Gewebemakrophagen. Dabei nehmen sie unter Änderung ihrer Morphologie und ihres Stoffwechsels Eigenschaften an, die für das betreffende Gewebe charakteristisch sind. So gewinnen die Makrophagen in den Lungenalveolen ihre Energie vorwiegend durch oxidative Phosphorylierung, während Makrophagen im Peritoneum sie aus der Glycolyse beziehen. Der Ersatz von Gewebemakrophagen wird hauptsächlich durch den Zustrom von Blutmonozyten bestimmt, von einigen Ausnahmen – wie z.B. den Kupffer-Zellen – abgesehen, die sich in situ reduplizieren können. Monozyten enthalten wie die neutrophilen Granulozyten cytosolische Granula, in denen sich Peroxidase und lysosomale Enzyme befinden. Nach Aufnahme in die Gewebe und Differenzierung zum Makrophagen verschwinden die Peroxidase-haltigen Granula, wohingegen die lysosomalen Enzyme weiterhin synthetisiert werden, dann aber in kleineren Vesikeln verpackt sind. Makrophagen nehmen durch ihre Fähigkeit zur Erkennung, Phagozytose, Prozessierung und Präsentation von Antigenen eine Schlüsselfunktion im Immunsystem ein

(7 Kap. 34). Sie interagieren dabei v.a. mit T-Lymphozyten. Durch die Existenz von membranständigen Fc-Rezeptoren (die den Fc-Anteil von IgG-Antikörpern binden, 7 Kap. 34.3.4) und Rezeptoren für Komplementfaktoren werden v.a. die Antigene von Makrophagen leicht aufgenommen, die opsoniert worden sind, d.h. mit Antikörper und Komplement beladen sind. Im Rahmen der Phagozytose wird das Antigen internalisiert und durch proteolytische Enzyme zu Aminosäuren abgebaut. Ein kleiner Anteil des aufgenommenen Antigens entgeht jedoch dem vollständigen Abbau durch Proteasen, sodass Antigenfragmente zusammen mit MHC-II (HLH-)-Proteinen (7 Kap. 34.2.2) in die Plasmamembran verlagert werden (Antigenpräsentation). Dieser bimolekulare Komplex wird jetzt von T-Lymphozyten erkannt, die natives, frei zirkulierendes Antigen nicht erkennen können. Die Erkennung führt zu einem direkten Zell-Zell-Kontakt zwischen T-Lymphozyten und Makrophagen, infolge dessen Interleukin-1, ein Polypeptid mit einem Molekulargewicht von etwa 17 kD, vom Makrophagen sezerniert wird. Dieses Lymphokin bindet an Interleukin 1-Rezeptoren des T-Lymphozyten und stimuliert diesen zur Sekretion von Interleukin-2 (7 Kap. 25.5.2) und Immun- oder J-Interferon (7 Kap. 25.8.4), das weitere Makrophagen aktiviert. T-Lymphozyten erkennen somit – im Gegensatz zu B-Lymphozyten – antigene Determinanten (Epitope, 7 Kap. 34.2.1) nicht an nativen Polypeptiden, sondern nur in denaturierten Proteinfragmenten. ! Cytokine aktivieren die Akutphase-Antwort.

Verschiedene Cytokine wie Interleukin-6, Interleukin-1, Tumornekrose-Faktor-D, Interferon-J, TGF-ß oder Interleukin-8 werden während entzündlicher Vorgänge gebildet und stellen die Haupt-Stimulatoren der sog. AkutphaseAntwort dar. Diese Cytokine werden von einer Vielzahl verschiedener Zellen gebildet (Hepatozyten, Endothelzellen, Keratinozyten etc.), die wichtigsten sind aber die Makrophagen und Monozyten in Entzündungsregionen. Die Akutphase-Antwort stellt eine koordinierte Reaktion des Organismus auf Infektionen oder Gewebeverletzungen dar. Zu dieser Reaktion (. Abb. 29.20) gehören: 4 Ein Anstieg der Biosynthese von etwa 30 Plasmaproteinen, den sog. Akutphase-Proteinen. Unter diesen stellt das C-reaktive Protein (CRP) das klinisch wichtigste dar (7 Kap. 29.6.4) 4 ein Anstieg der neutrophilen Granulozyten 4 ein Abfall der Eisen- und Zinkkonzentration im Plasma, der eine vermehrte Freisetzung von Lactoferrin (7 Kap. 29.3.1) aus neutrophilen Granulozyten mit anschließender Sequestrierung als Eisen-LactoferrinKomplex zugrunde liegt 4 eine Steigerung der Proteolyse im Muskel mit Freisetzung von Aminosäuren sowie 4 eine Temperaturverstellung im Wärmeregulationszentrum des Hypothalamus (Fieber als physiologische Antwort auf Infektionen)

29

976

Kapitel 29 · Blut

. Abb. 29.20. Die Akutphase-Antwort. (Einzelheiten 7 Text)

29

Darüber hinaus stimuliert Interleukin-1 die ACTH- und Cortisolsekretion (7 Kap. 27.3). Die Aktivierung durch J-Interferon führt u.a. zur Freisetzung eines für Tumorzellen zytotoxischen Polypeptids (Molekularmasse 17,3 kD) aus dem Makrophagen, das als Tumornekrosefaktor-D (TNF-D, 7 Kap. 25.8.2) oder auch Kachektin bezeichnet wird. Das Polypeptid tötet in vitro Tumorzellen ab und verursacht bei Versuchstieren Nekrosen in transplantierten Tumoren. Es unterdrückt auch die Expression der Lipoproteinlipase (7 Kap. 12.1.3) und verhindert dadurch die Aufnahme und Speicherung von Triacylglycerinen durch das Fettgewebe. Bei Versuchstieren führt rekombinanter TNF-D zu Appetit- und Gewichtsverlust, daher auch das Synonym Kachektin für dieses Molekül.

der Fälle wird die chronische Granulomatose X-chromosomal, in den übrigen 40% autosomal-rezessiv vererbt. Die Diagnose wird durch einen funktionellen Test gestellt, der die respiratorische Aktivität misst: Normalerweise wird der NBT-Test verwendet, dem die Reduktion des Farbstoffs Nitroblautetrazolium (NBT) zu einem violetten, unlöslichen Präzipitat durch das unter der Einwirkung der aktivierten NADPH/H+-Oxidase gebildeten Wasserstoffperoxids zugrunde liegt. Da bei der chronischen Granulomatose keine NBT-Reduktion nachweisbar ist, muss die NADPH/H+-Oxidaseaktivität gestört sein. Biochemisch kann diese fehlende Aktivität durch ein defektes Enzymprotein oder auch durch einen gestörten Aktivierungsmechanismus verursacht werden. Dies wird durch den oben erwähnten unterschiedlichen Vererbungsmechanismus unterstrichen. So sind Mutationen als Ursache der septischen Granulomatose bei Patienten nicht nur im Gen für die 91 kD- und 22 kD-Untereinheiten des Enzyms beschrieben worden, sondern auch in den Genen für die 47 und 67 kD-Untereinheiten des Aktivatorproteins (. Abb. 29.19). In Kürze Neutrophile Granulozyten müssen unter Vermittlung von Selectinen an das Gefäßendothel adhärieren, bevor sie das Gefäßsystem verlassen können. Die Granula der Granulozyten enthalten Enzyme, mit denen sie Bakterien vernichten können. Dazu ist auch die Erzeugung reaktiver Sauerstoffverbindungen erforderlich, die unter dem Einfluss der Enzymsysteme NADPH/H+-Oxidase und Myeloperoxidase erfolgt. Makrophagen besitzen eine Schlüsselfunktion im Immunsystem als Antigen präsentierende Zellen.

29.4 29.3.2

Thrombozyten

Pathobiochemie ! Thrombozyten sind für die Blutstillung zuständig.

! Bei der septischen Granulomatose können die NADPH/ H+-Oxidase oder deren Aktivierung gestört sein.

Von den zahlreichen bekannten Störungen der Funktion polymorphkerniger Leukozyten ist die chronische granulomatose Erkrankung (septische Granulomatose) am besten untersucht. Klinisch stellt sie die wichtigste der verschiedenen Defekte des oxidativen Stoffwechsels des Granulozyten dar. Die Krankheit ist durch das Fehlen eines vermehrten Sauerstoffverbrauchs bei der oben diskutierten Reaktion auf Phagozytosestimuli gekennzeichnet. Die Leukozyten phagozytieren zwar die Mikroorganismen, können sie aber nicht abtöten. Die Patienten leiden deshalb an immer wieder auftretenden Infektionen mit Pilzen und Bakterien. Als Folge der chronischen Entzündung treten die für die Krankheit charakteristischen Granulome auf. In 60%

Thrombozyten (Plättchen) entstehen durch Abschnürung aus dem Cytosol von Megakaryozyten des Knochenmarks. Dabei verformen sich diese Zellen und bilden Ausläufer, die sich zunehmend verlängern und den Megakaryozyten ein tintenfischartiges Aussehen verleihen. Aus diesen Ausläufern werden die Blutplättchen abgeschnürt. Das periphere Blut enthält 150.000–450.000 Thrombozyten pro Mikroliter. Die Regulation der Thrombozytenbildung unterliegt vor allem dem in Leber und Nieren gebildeten Thrombopoietin, das an den c-MPL-Rezeptor der Megakaryozyten bindet. Thrombozyten besitzen die im Cytosol lokalisierten Enzyme der Glycolyse und des Pentosephosphatwegs sowie Mitochondrien, die sie zur Ausführung der enzymatischen Schritte des Citratzyklus und der Elektronentransportphosphorylierung befähigen. Da sie noch

977 29.4 · Thrombozyten

. Tabelle 29.7. In Thrombocytengranula gespeicherte Moleküle Dichte Granula (proaggregierende Faktoren)

α-Granula (adhäsive u. heilende Faktoren)

Lysosomen (abbauende Faktoren)

Nucleotide

Adenin: ATP, ADP Guanin, GTP, GDP

Amine divalente Kationen

Serotonin, Histamin Calcium, Magnesium

Proteoglykane

E-Thromboglobulin, Plättchenfaktor 4, histidinreiches Glycoprotein

adhäsive Glycoproteine

Fibronektin, Vitronektin, von-Willebrand-Faktor, Thrombospondin

Gerinnungsfaktoren

Fibrinogen, Faktor V, VII, XI, XII, Protein S, Plasminogen

Wachstumsfaktoren

PDGF, TGF-E, EGF, VEGF

Protease-Inhibitoren

D2-Antitrypsin, D2-Makroglobulin

saure Proteasen

Cathepsine, Carboxypeptidasen, Collagenase

Glycohydrolasen

Heparinase, E-Glucoronidase etc.

(mitochondriale) DNA und stabile RNA besitzen, können Blutplättchen in geringem Maß Proteine, wie z.B. den Fibrin-stabilisierenden Faktor (Faktor XIII, 7 Kap. 29.6.4), synthetisieren. Die Glycolyse wird teilweise durch Glucoseaufnahme aus der Umgebung, zum überwiegenden Teil aber durch eigene Glycogenvorräte gespeist. Die aus dem Glucose- und auch Fettsäureabbau gewonnene Energie dient 4 der Erhaltung der Thrombozytenstruktur (Lebensdauer 8–11 Tage) 4 den plasmatischen Vorgängen der Blutstillung, der Hauptfunktion der Blutplättchen (Aktivierung des Plättchens) und 4 der Speicherung verschiedener Substanzen, zu denen biogene Amine (Serotonin), Prostaglandine, Plasmaproteine, Polypeptid-Wachstumsfaktoren und lysosomale Enzyme gehören In den Thrombozyten werden diese Substanzen in den dichten Granula, D-Granula oder Lysosomen gespeichert (. Abb. 29.21). Jede der Granulapopulationen speichert bestimmte Moleküle (. Tabelle 29.7): Die dichten Granula enthalten kleine Nichtprotein-Moleküle, die bei der Plättchenaggregation der Rekrutierung weiterer Plättchen dienen, die D-Granula enthalten große Proteine mit adhäsiver oder mitogener Aktivität. Lysosomen besitzen wie in anderen Zellen Hydrolasen. Neben den Granula enthalten Thrombozyten ein Cytoskelett (Aktinfilamente und Mikrotubuli) sowie komplexe Membransysteme: das sog. offene kanikuläre System schafft die Verbindung zwischen Cytosol und dem umgebenden Medium und das dichte Tubulussystem (DTS) enthält eine Reihe wichtiger Enzyme. So wird hier unter dem Einfluss der Enzyme Cyclooxygenase

und Thromboxan-Synthetase Thromboxan gebildet. Bei der Thrombozytenaggregation wird Thromboxan freigesetzt und bindet an den Thromboxan-Rezeptor der Plättchenmembran, was über eine autokrine Stimulation zu einer Verstärkung der Plättchenaktivierung führt. Das DTS speichert auch Calcium und cycloAMP, die für die Plättchenaktivierung ebenfalls von entscheidender Bedeutung sind (7 Kap. 29.5.2). Ruhende Thrombozyten transportieren diese Substanzen ständig durch das Gefäßsystem (. Abb. 29.21). Als Reaktion auf verschiedene Stimuli (siehe unten) werden sie aktiviert, ändern durch Rearrangement des Cytoskeletts ihre Morphologie (. Abb. 29.21), setzen die Materialien aus den Granula frei und aggregieren untereinander (»Synapsenbildung«). Diese Freisetzungsreaktion, die große Ähnlichkeit mit der Exozytose in Neuronen aufweist (7 Kap. 31.2.2), stellt einen wichtigen Schritt bei der im Folgenden beschriebenen Blutstillung dar (7 Kap. 29.5). Die Membran des Thrombozyten enthält eine Reihe von Glycoproteinen (GPI bis IX in absteigendem Molekulargewicht), die Rezeptoren bilden: Glycoprotein Ib-V-IX ist ein konstitutiv aktiver Rezeptor für den von WillebrandFaktor, Glycoprotein Ia-IIa ein konstitutiv aktiver Kollagen-Rezeptor und Glycoprotein IIb-IIIa ist ein Rezeptor, der erst nach Aktivierung des Thrombozyten durch Konformationsänderung Fibrinogen erkennt. Aus Thrombozyten können Mikropartikel (auch als »Plättchenstaub« bezeichnet) abgeschnürt werden, die Wechselwirkungen von Leukozyten untereinander und von Leukozyten und Gefäßendothelien vermitteln können. ! Die partielle Hemmung der Thrombozytenfunktion stellt ein wichtiges therapeutisches Prinzip dar.

29

978

Kapitel 29 · Blut

. Abb. 29.21. Elektronenmikroskopische Aufnahmen ruhender und aktivierender Thrombozyten. Oben: Rasterelektronenoptische Aufnahmen normaler zirkulierender Plättchen in Scheibenform (links × 20000) und aktivierter Thrombozyten, die viele lange Pseudopodien ausgebildet haben (rechts × 20000). Unten links: Schematische Darstellung der subzellulären Strukturen; Mitte dazugehörige elektro-

nenoptische Aufnahme (× 21000). Rechts: Darstellung eines aktivierten Plättchens mit einem Mikrotubulusring um die zentral angeordneten Granula und Ausbildung von Pseudopodien (× 30000). 1 kanikuläres System; 2 Mikrotubuli; 3 a-Granulum; 4 dichtes Granulum; 5 Glycogen; 6 Mitochondrium. (Aufnahmen von JG White, University of Minnesota)

29 Zur Prophylaxe von Thrombosen (z.B. Herz- oder Hirninfarkt), d.h. Thrombozytenaggregaten innerhalb der nicht eröffneten Strombahn, finden Acetylsalicylsäure (das die Thromboxansynthese durch irreversible Hemmung der Cyclooxygenase blockiert) sowie Hemmstoffe der thrombozytären ADP-Rezeptoren und Glycoprotein IIb-IIIABlocker Anwendung (7 Kap.29.5.2). In Kürze Thrombozyten, die durch cytosolische Abspaltung aus Megakaryozyten entstehen, besitzen eine überragende Bedeutung für die normale Hämostase und für die Entstehung von Thrombosen. Die Bildung von Thrombozyten wird durch Thrombopoietin reguliert, das an den c-MPL-Rezeptor von Megakaryozyten bindet. Bei Gefäßverletzungen vermitteln thrombozytäre Glycoprotein-Rezeptoren die Bindung an das subendotheliale Gewebe, was zu einer Aktivierung mit nachfolgender Aggregation der Thrombozyten führt. Medikamente, die die Thrombozytenfunktion hemmen, sind deshalb wichtig für die Therapie cardio- und cerebrovaskulärer Erkrankungen.

Infobox Automatisierte Bestimmung korpuskulärer Elemente des Blutes. Mit modernen Hämatologie-Analyzern können heute innerhalb von 5 Minuten komplette Blutzellzählungen durchgeführt werden: diese umfassen die Erythrozytenzahl (red blood cell count: RBC), die Leukozytenzahl (white blood cell count: WBC), die Thrombozytenzahl (PlateLeT count: PLT), den Hämatokrit (HCT), das mittlere Zellvolumen des Erythrozyten (MCV), den mittleren zellulären Hämoglobingehalt (MCHC) und die differenzierte Leukozytenzählung (Lymphozyten, Monozyten und Granulozyten). Daneben werden auch das mittlere Plättchenvolumen (MPV), die Größenverteilung der Erythrozyten (red cell distribution width: RDW) und die mittlere zelluläre Hämoglobinkonzentration (MCHC) ermittelt. Bei einzelnen Geräten ist auch die Bestimmung des C-reaktiven Proteins (CRP) integriert. Damit ist in der Praxis eine einfache und rasche Diagnose von Blutbildveränderungen und deren möglichen Ursachen sowie von akuten Entzündungen und deren Verlauf unter Therapie möglich.

979 29.5 · Blutstillung

29.5

Blutstillung

Mit dem Mechanismus der Blutstillung (Hämostase) besitzt der Organismus ein Werkzeug, mit dem er sich bei Gewebeverletzungen, bei denen auch kleine oberflächliche Gefäße eröffnet werden, wirksam gegen den Verlust des lebenswichtigen Organs Blut schützen kann. Der komplexe Vorgang der Blutstillung ist ein Zusammenspiel von 4 vaskulären (dem verletzten Blutgefäß) 4 zellulären (insbesondere den Thrombozyten) und 4 plasmatischen (auf die Blutstillung spezialisierten Plasmaproteinen) Vorgängen

Blutgerinnung und Fibrinolyse sind enzymatisch regulierte Vorgänge, die ständig nebeneinander im strömenden Blut ablaufen (latente Gerinnung und Fibrinolyse). Normalerweise stehen beide Vorgänge miteinander im Gleichgewicht. Bei einer Störung dieses Gleichgewichts kann es einerseits zur Blutungsneigung, die durch mangelnde Gerinnung oder/und gesteigerte Fibrinolyse gekennzeichnet ist, und andererseits zur Thromboseneigung, die durch eine gesteigerte Gerinnung oder/und verminderte Fibrinolyse hervorgerufen wird, kommen.

29.5.1

Vaskuläre Blutstillung

Die plasmatischen Vorgänge werden auch als endgültige Blutstillung oder Blutgerinnung (Prokoagulation) bezeichnet. An die Blutstillung schließt sich die langsame Auflösung des Gerinnsels durch das fibrinolytische System (Antikoagulation) an, die Voraussetzung für die Rekanalisierung von Gefäßen und Heilung des geschädigten Gewebes ist. Daneben besitzt die Fibrinolyse die Aufgabe, das Blut in flüssigem Zustand zu erhalten, um Störungen der Hämodynamik zu verhindern.

Als Folge einer Verletzung kommt es zu einer reflektorischen Gefäßkontraktion. Die Gefäßkontraktion durch die Reizung glatter Muskulaturen dauert etwa 60 Sekunden. Sie wird durch die Freisetzung vasokonstriktorischer Substanzen (Serotonin, Katecholamine) aus Thrombozyten und der verletzten Gefäßwand unterstützt. Die Folge davon ist eine Verlangsamung des Blutstroms, die die zelluläre und plasmatische Blutstillung begünstigt.

. Abb. 29.22. Adhäsion von Thrombozyten an die subendotheliale Matrix unter Vermittlung des von-Willebrand-Faktor-

Rezeptors und des Fibrinogenrezeptors auf der Thrombozytenmembran

29

980

Kapitel 29 · Blut

29.5.2

29

Zelluläre Blutstillung (Thrombozytenadhäsion)

Normalerweise bleiben Thrombozyten weder am Gefäßendothel hängen noch verkleben sie untereinander. Gerät der Thrombozyt jedoch mit geschädigten venösen Gefäßen in Kontakt, deren Endothel zerrissen ist, so kann eine Wechselwirkung mit den darunter liegenden Matrixproteinen wie Kollagen, Fibronektin oder Laminin eintreten. Für jedes dieser Matrixproteine besitzt der Thrombozyt spezifische Membranrezeptoren, die den Integrinen (7 Kap. 24.5.3) ähnlich sind. So besteht der Lamininrezeptor aus einer D6-Untereinheit, die mit dem Glycoprotein IIa (GPIIa) assoziiert ist. Der Fibronektinrezeptor besteht aus einem Dimer aus den Thrombozytenglycoproteinen GPIc und GPIIa. Für die Wechselwirkung mit Kollagen Typ III sind verschiedene Membranproteinrezeptoren verantwortlich (GPIa/IIa, GPVI und möglicherweise GPIV und GPIIb). Unter den Bedingungen hoher Scherkräfte, wie sie in Arteriolen und in der Mikrozirkulation vorherrschen, reichen die genannten Wechselwirkungen für diesen als Plättchenadhäsion bezeichneten Vorgang nicht aus. In diesem Bereich sind Wechselwirkungen zwischen dem von-Willebrand-Faktor (vWF) und seinem Thrombozytenrezeptor, dem Glycoprotein Ib/V/IX, erforderlich. Der von-Willebrand-Faktor ist ein multimeres Glycoprotein, das im Plasma im Komplex mit Faktor VIII (7 Kap. 29.5.5) zirkuliert. Der vWF wird von Endothelzellen synthetisiert, die ihn in der subendothelialen Matrix deponieren und in das Plasma sezernieren, wie auch von Megakaryozyten (den Vorläufern der Thrombozyten), die es in D-Granula speichern. Für die optimale Plättchenadhäsion sind sowohl der subendotheliale als auch der lösliche vWF erforderlich. Der von-Willebrand-Faktor interagiert mit Kollagen und mit heparinähnlichen Glycosaminoglykanen im Subendothelium und schafft über den Glycoprotein Ib/V/IX-Komplex (. Abb. 29.22) die Brücke zwischen Thrombozyt und Gefäßsubendothel. Im Zuge der Anheftung an die Proteine der subendothelialen Matrix werden die genannten Membranrezeptoren aktiviert, was über intrazelluläre Botenstoffe zu einer Reihe von Folgereaktionen der Plättchen führt, die nach einer beträchtlichen Formveränderung unter Ausbildung von Pseudopodien ihren Abschluss in einer über mehrere Stufen verlaufenden Aggregation findet (. Abb. 29.21). Zunächst kommt es zur Ausschüttung von ADP aus den dichten Granula, das nach Bindung an den thrombozytären ADP-P2Y1-Rezeptor eine vorerst noch reversible Aggregation der Thrombozyten bewirkt. Sie geht dann in einen irreversiblen Zustand über, wenn weiteres ADP an den zweiten ADP-Rezeptor-Typ (P2Y12) bindet, wobei das vasokonstriktorische Thromboxan A2 (TXA2, 7 Kap. 12.4.2) und Serotonin sowie Adrenalin freigesetzt werden, die weitere Plättchen zur Aggregation veranlassen. Die Aggregation wird durch das Gerinnungsprotein Fibrinogen gefördert, welches an den Fibrinogen (GP IIb/GPIIIa)-Rezeptor

. Abb. 29.23. Aktivierung des Thrombozyten durch Bindung des von-Willebrand-Faktor-VIII-Komplexes. Nach Aktivierung bildet der Thrombozyt Pseudopodien aus und verändert die Struktur des GP-IIb/IIIa-Rezeptors, sodass unter Vermittlung von Fibrinogen Brücken zwischen den einzelnen Thrombozyten gebildet werden können

(. Abb. 29.23) bindet und damit benachbarte Thrombozyten miteinander verknüpft. Dieser Rezeptor kann Fibrinogen erst nach Aktivierung durch die erwähnten intrazellulären Botenstoffe erkennen; die Erkennung erfolgt über eine Region in der J-Kette und über die sog. RGD-Domäne, d.h. eine Sequenz von Arginin, Glycin und Glutamat, die in der D-Kette des Fibrinogens (und in vielen anderen Proteinen der extrazellulären Matrix) vorkommen. Im Rahmen der Thrombozytenaggregation kann auch die plasmatische Gerinnung beschleunigt werden. Diese Beschleunigung kommt dadurch zustande, dass der Blutgerinnungsfaktor V an die Thrombozytenmembran bindet und dadurch aktiviert wird. Der aus Thrombozyten gebildete Pfropf oder Thrombus kann das Gefäß jedoch nur dann dauerhaft verschließen, wenn ihm durch die anschließenden plasmatischen Vorgänge (Einbau von Fibrin in den Thrombus) eine ausreichende Festigkeit verliehen wird. Das Endothel besitzt eine Reihe von Abwehrmechanismen, die der Prävention und der Rückbildung unerwünsch-

981 29.5 · Blutstillung

ter Aggregationen dienen. So setzen die Endothelzellen Prostacyclin (PGI2) und den endothelzellproduzierten, relaxierenden Faktor (EDRF oder Stickstoffmonoxid) frei, die die Thrombozytenadhäsion, -aktivierung und -aggregation hemmen.

29.5.3

Plasmatische Vorgänge (Blutgerinnung)

! Die klassische Theorie zum Ablauf der Blutgerinnung wurde von Paul Morawitz entwickelt.

An diesem Konzept sind vier Gerinnungsfaktoren beteiligt, von denen drei, nämlich Calciumionen (Faktor IV) und die beiden in Leberparenchymzellen gebildeten Plasmaproteine Fibrinogen (Faktor I) und Prothrombin (Faktor II), ständig im Blut zirkulieren. Diese Faktoren können eine Gerinnung jedoch nur dann in Gang setzen, wenn bei Gewebeverletzung der als Gewebethromboplastin (tissue factor, TF) bezeichnete Faktor III ins Blut übertritt. Dieser Faktor führt in Gegenwart von Calciumionen das Proenzym Prothrombin in Thrombin über, eine hochaktive Protease, die in kurzer Zeit große Mengen Fibrinogen in Fibrin umwandelt (. Abb. 29.24). Die Bindung von Calciumionen an Prothrombin erfolgt dabei an N-terminal gelegene JCarboxyglutamylseitenketten (7 Kap. 23.2.4). Der von Paul Morawitz beschriebene Weg der Thrombinaktivierung wird heute als extravaskuläres (exogenes) System der Blutgerinnung bezeichnet, weil ein extravaskulärer, d.h. nicht im Blut vorhandener Faktor die Gerinnung in Gang setzt. Zusätzlich besteht noch eine weitere Möglichkeit der Aktivierung über das intravaskuläre (endogene) System, auf dessen Existenz die Beobachtung hinweist, dass Blut auch beim Kontakt mit Glasoberflächen gerinnt. Es müssen also auch im Blut vorhandene Faktoren die Thrombinbildung in Gang setzen können. Obwohl das klassische Konzept nach wie vor seine Gültigkeit besitzt, ist das gegenwärtige Bild vom Gerinnungsvorgang wesentlich differenzierter geworden, da erkannt worden ist, dass eine Reihe weiterer, meist mit römischen Ziffern benannter Faktoren beteiligt ist. Dabei handelt es sich vorwiegend um Proteinasen, die ihre Substrate durch limitierte Proteolyse aktivieren. ! Die Faktor X und V stellen die gemeinsame Endstrecke des intra- und extravaskulären Systems dar.

Entscheidend für die Thrombinbildung ist die Überführung des Faktors X in eine aktive Form (Xa), die mit dem Faktor V, Calcium und Phospholipiden einen Komplex mit enzymatischer Aktivität bildet, der – als Prothrombinase bezeichnet – die Umwandlung von Prothrombin in Thrombin katalysiert. Da der Faktor X durch das intra- und extravaskuläre System aktiviert wird, bilden die Faktoren X und V die gemeinsame Endstrecke

. Abb. 29.24. Klassisches Schema der Blutgerinnung

beider Systeme (. Abb. 29.25). Gewebsverletzungen bilden die Grundlage der Aktivierung des Faktor X durch das extravaskuläre System. Die Verletzung des Gewebes verursacht dabei die Freisetzung von Gewebethromboplastin (tissue factor, TF). Dieses stellt ein Membranprotein dar, das konstitutiv auf nichtvaskulären Zellen exprimiert wird. Der extrazelluläre Anteil des Moleküls ist der Faktor VII-Rezeptor, der mit dem Faktor VII, Phospholipiden und Calcium einen Komplex bildet, der den Faktor X zu Xa aktiviert (. Abb. 29.25). Daneben wird auch der Faktor IX zu IXa aktiviert. Im Gegensatz zum extravaskulären System, das in Sekundenschnelle zur Aktivierung von Thrombin führt, läuft das endogene (= intravaskuläre) System erst nach einigen Minuten an. Die Aktivierung geschieht nach Art eines Wasserfalls (Kaskadensystem): zur Einleitung der Reaktion ist die Aktivierung von Faktor XII (des Hageman-Faktors) zu XIIa notwendig, die an Proteinen der extrazellulären (subendothelialen) Matrix oder auch Phospholipiden, die während der Plättchenaktivierung von der Innenschicht der Plasmamembran in die Außenschicht transloziert werden, erfolgt, der seinerseits den Faktor XI in die aktive Form XIa überführt. Faktor XIa wiederum aktiviert den Faktor IX, der an eine Zellmembranoberfläche bindet, bis er den dort ebenfalls gebundenen, bereits durch Thrombin aktivierten Faktor VIIIa (. Abb. 29.25) trifft und mit diesem einen, als Tenase bezeichneten Komplex bildet (. Abb. 29.25). Dieser Komplex verbleibt an der Membran, bis er auf den Faktor X trifft, den er zum Faktor Xa (wie beim extravaskulären System) aktiviert. ! Durch Aktivierung von Prothrombin entsteht Thrombin, dessen Substrat Fibrinogen ist.

Fibrinogen ist ein längliches Protein (Molekulargewicht 340 kD), das sich aus zwei identischen Untereinheiten mit je drei Polypeptidketten (D, E und J) aus je 400–700 Aminosäuren (. Abb. 29.26) zusammensetzt. Die Gene für die D, E- und J-Ketten des Fibrinogens liegen in einem 50 kbSegment auf dem langen Arm von Chromosom 4. Die DNA-Sequenz weist erhebliche Homologien auf, sodass man davon ausgehen kann, dass die Gene durch Duplikation und anschließende Diversifikation eines gemeinsamen Vorläufergens entstanden sind. Von je zwei der Peptidketten (D, E) werden durch Thrombin kleine Bruchstücke (Fi-

29

982

Kapitel 29 · Blut

29

. Abb. 29.25. Aktivierung der plasmatischen Gerinnung über das extravaskuläre und intravaskuläre System. Für beide Systeme ist die Aktivierung einzelner Faktoren an der Oberfläche von Zellmem-

branen von entscheidender Bedeutung, da nur so eine Beschränkung der Gerinnung auf den Ort der Gewebeverletzung möglich ist. GT = Gewebethromboplastin oder tissue faktor

. Abb. 29.26. Modell des Fibrinogendimers, das aus zwei Sätzen von drei (α, β und γ) Ketten besteht. Die Ketten sind untereinander über 29 Disulfidbrücken (-S-S-) verbunden, davon 13 in jeder Dimerhälfte und 3, die die beiden Hälften miteinander verbinden. Jeder Disulfidring enthält drei Disulfidbrücken (D>E, E>J, a>J). Zwischen den Disulfidringen liegen Tripel-a-Helices. An den Enden sind die

E- und J-Ketten hydrophob und relativ kompakt aufgebaut, wohingegen die a-Kette hydrophil ist und frei in der wassrigen Umgebung flottiert. An jedem Monomer befinden sich zwei Kohlenhydratseitenketten (Sechsecke). An den Bereichen, an denen die Freisetzung der Fibrinopeptide zu a- bzw. b-»Knöpfen« führt, sind die Aminosäuren angegeben

983 29.5 · Blutstillung

. Abb. 29.27a–e. Schematische Darstellung der Polymerisation von Fibrinogen zu Fibrin. a Fibrinogen wird durch Abspaltung der Fibrinopeptide A und B (an den N-Termini) in ein Fibrinmonomer überführt. b Die jetzt exponierten Enden dienen als »Knöpfe«, die mit

Löchern in den terminalen Domänen in Wechselwirkung treten. c Dadurch kommt es zu einer Seit-zu-Seit-Anlagerung der Monomere. d,e Diese Anordnung wird zu einem langen Polymer verlängert, das durch die Ausbildung covalenter Quervernetzung stabilisiert wird

brinopeptide A und B) abgespalten, deren Molekulargewicht insgesamt rund 2% des Fibrinogens beträgt. Dadurch werden im Fibrinogenmolekül Bezirke freigelegt, die eine Zusammenlagerung der entstandenen Fibrinmonomeren zu Polymeren erlauben (. Abb. 29.27). Da die einzelnen Bestandteile des frisch gebildeten Fibringerinnsels nur über nichtcovalente Bindungen (hydrophobe Wechselwirkungen und Wasserstoffbrücken) verbunden sind, ist es mechanisch noch recht unstabil und kann durch Verbindungen, die diese Bindungen schwächen (in vitro durch

Harnstoff), wieder aufgelöst werden [lösliches (solubles) Fibrin]. Erst durch die Wirkung des Faktors XIII, der durch Thrombin zu XIIIa aktiviert wird und Fibrinmonomere durch Ausbildung von Peptidbindungen zwischen den HAminogruppen von Lysylresten und Carboxylgruppen von Glutaminylresten (im Bereich antiparallel zueinander angeordneter J-Ketten) covalent verknüpft, wird dem Fibrinpolymer die notwendige Festigkeit [jetzt unlöslich (insoluble)] verliehen (. Abb. 29.28). Das Gerinnsel zieht sich zusam-

29

984

Kapitel 29 · Blut

. Abb. 29.28. Knüpfung einer covalenten Bindung zwischen Lysyl- und Glutaminylresten verschiedener Fibrinmonomere durch den aktiven Faktor VIIIa

men und presst dabei eine Flüssigkeit ab, die im Gegensatz zum Plasma kein Fibrinogen mehr besitzt (da dies ja verbraucht worden ist) und als Serum bezeichnet wird. Durch die Retraktion, bei der das Thrombosthenin noch intakter Thrombozyten eine wesentliche Rolle spielt, nähern sich die Wundränder stark an, was entscheidend zum Wundverschluss beiträgt. Mit Hilfe der Intravitalmikroskopie kann die Thrombusbildung heute am Tiermodel visualisiert werden (Videoclips siehe unter www.lehrbuch-medizin.de)

29

! Die Blutgerinnungsfaktoren haben sich offenbar aus einem gemeinsamen Vorläufergen entwickelt.

Die Enzyme, die an der Blutgerinnung beteiligt sind, sind enge Verwandte der Verdauungsproteasen Trypsin und Chymotrypsin (7 Kap. 4.5.3, 32.1.3). Da die Blutgerinnungs-

. Abb. 29.29. Struktureller Aufbau der Proenzyme und Profaktoren der plasmatischen Gerinnung und Proteinen, die das System durch eine Hemmung regulieren. Die große Ähnlichkeit zwischen den Proteinen legt einen gemeinsamen Ursprung nahe

enzyme ihre Funktion im Gefäßsystem ausüben, ist eine präzise Regulation erforderlich, um diese potenten, prokoagulatorischen Aktivitäten in der Region der Gewebeverletzung zu halten. Prothrombin und die Faktoren VII, IX und X weisen große Ähnlichkeiten auf (. Abb. 29.29). Sie enthalten J-Carboxyglutamat- oder Gla-Domänen, EGF-ähnliche Domänen und die drei Disulfidbrücken enthaltenden Kringle-Domänen, die für die Bildung von Proteinkomplexen von Bedeutung sind. Die Cofaktoren V und VIII sind mit den Proenzymen nicht strukturverwandt, zeigen aber untereinander eine erhebliche Homologie. Tissue factor unterscheidet sich von allen anderen Faktoren dadurch, dass es ein integrales Membranprotein mit einer cytosolischen, einer transmembranären und einer extrazellulären Domäne (Faktor VII-Rezeptor) darstellt. Die regulatorischen Proteine (7 u.), Protein C und Protein S, weisen ebenfalls strukturelle

985

29.5 · Blutstillung

. Tabelle 29.8. Blutgerinnungsfaktoren (die Existenz eines Faktors VI wird heute nicht mehr angenommen) Faktor

Bezeichnungen

Biologische Halbwertszeit (Stunden bzw. Tage)

Biosynthese Vitamin K-abhängig

Angeborene Koagulopathien (mit Angabe der Häufigkeit)

I

Fibrinogen

ca. 5 Tage

–

Afibrinogenämie, Hypofibrinogenämie, A-, Hypo- bzw. Dysfibrinogenämie (1:1 Mio)

II

Prothrombin

2–3 Tage

+

Hypoprothrombinämie (1:2 Mio)

III

Gewebethromboplastin

IV

Calcium

V

Accelerin, Acceleratorglobulin, labiler Faktor

ca. 1 Tag

–

Hypoaccelerinämie (Parahämophilie) (1:1 Mio)

VII

Proconvertin, stabiler Faktor

5h

+

Hypoproconvertinämie (1: 500 000)

VIII

Antihämophiler Faktor A

15 h

–

Hämophilie A (1: 10 000)

IX

Antihämophiler Faktor B, Christmas-Faktor

20 h

+

Hämophilie B (1: 60 000)

X

Stuart-Power-Faktor

2 Tage

+

Stuart-Power-Faktor-Mangel (1:1 Mio)

XI

Plasma thromboplastin antecedent (PTA)

2 Tage

–

PTA-Mangel (1:1 Mio)

XII

Hageman-Faktor

2 Tage

–

Hageman-Faktor-Mangel

XIII

Fibrin-stabilisierender Faktor (FSF), Loki-Lorand-Faktor

ca. 5 Tage

–

FSF-Mangel (1:1 Mio)

Ähnlichkeiten mit den Proenzym-Gerinnungsfaktoren auf. Fast alle Gerinnungsfaktoren werden im Hepatozyten der Leber gebildet, ihre Halbwertszeit ist relativ kurz, sie liegt zwischen Stunden und wenigen Tagen (. Tabelle 29.8). ! Antithrombotische Mechanismen sorgen dafür, dass die lokale Gerinnung sich nicht generalisiert.

Neben den prokoagulatorischen Blutgerinnungsfaktoren enthält das Blut Inhibitoren, die die Fibrinbildung verzögern und damit eine Schutzfunktion zur Aufrechterhaltung der Zirkulation und zur Vermeidung der Generalisierung der Gerinnung ausüben (. Abb. 29.30). Zu diesen gehören 4 Antithrombin III, das die aktivierten Faktoren XIIa, XIa, IXa, Xa und Thrombin durch Bildung eines stabilen Enzym-Inhibitor-Komplexes hemmt 4 Protein C und S, die die Faktoren Va und IVa inaktivieren 4 Plasminogenaktivator, der die Fibrinolyse durch Aktivierung von Plasminogen zu Plasmin fördert, und 4 der Gewebethromboplastin-Inhibitor (tissue factor pathway inhibitor, TFPI) Auch Endothelzellen sind an der Antikoagulation beteiligt: zum einen durch gebundene, heparinähnliche Glycosaminoglykane (7 Kap. 2.1.4), die die Inaktivierung von Koagulationsproteasen durch Antithrombin III beschleunigen, zum anderen durch die Biosynthese von Prostaglandin I2 (7 Kap. 12.4.2) und durch die Sekretion von Plasminogenaktivator und Thrombomodulin, ein Thrombin bindendes Protein, das die Spezifität von Thrombin ändert, indem es

. Abb. 29.30. Hemmung der Blutgerinnung. Wichtige Faktoren sind der Gewebethromboplastininhibitor (GTI, auch als TFPI = tissue factor pathway inhibitor bezeichnet), das ProteinC/Protein S-System, Antithrombin III und der Plasminogenaktivator. PC = Protein C; PS = Protein S; PT = Prothrombin; Th = Thrombin; Pl = Plasmin

29

986

Kapitel 29 · Blut

. Abb. 29.31. Indirekte Hemmung von Thrombin durch Heparin. 1 schwache Bindung von Antithrombin an Thrombin; 2, 3 Bindung von Heparin an Lysylseitenketten von Antithrombin mit konsekutiver irreversibler Konformationsänderung von Antithrombin und damit hoher Affinität zu Thrombin

dieses in einen wirksamen Protein C-Aktivator umwandelt. Die medikamentöse Behandlung mit gerinnungshemmenden Mitteln (sog. Antikoagulantien) ist dann angezeigt, wenn der Bildung von Thromben, d.h. Blutgerinnseln innerhalb der nicht-eröffneten Gefäßbahn vorgebeugt werden soll (z.B. nach Operationen oder Herzinfarkten). Dazu haben sich Heparine und Vitamin K-Antagonisten bewährt.

29

! Heparine hemmen Thrombin indirekt über eine Bindung an Antithrombin III.

Heparine werden in den basophilen Granula von Mastzellen im perikapillären Gewebe, in Lungen oder Leber (Name) und von Granulozyten des Bluts gebildet. Es handelt sich um ein Gemisch aus Molekülen mit unterschiedlicher Kettenlänge (Molekularmassen von 5–30 kDa, 7 Kap. 2.1.4). Heparine, die nur parenteral verabreicht werden können, wirken über eine Bindung an Antithrombin III, die zu dessen Aktivierung führt (. Abb. 29.31). Die Wirkung hängt vom Sulfatierungsgrad ab. Ein wesentlicher Vorteil des Heparins ist das schlagartige Einsetzen seiner Wirkung, die durch Verabreichung von organischen Proteinkationen (wie Protamin), die Heparin binden, ebenso schnell wieder aufgehoben werden kann. Der Abbau von Heparin erfolgt durch Heparinasen in der Leber. ! Protein C und Protein S inaktivieren die Faktoren Va und VIIIa.

Die Protease Protein C [so genannt, weil es bei den ersten Untersuchungen auf einer Ionenaustauschersäule (7 Kap. 2.3.4) als 3. Peak (nach A und B) eluierte] stellt ein Polypeptid aus zwei Ketten mit Molekularmassen von 41 kDa und 21 kDa dar. Sie wird als inaktives Proenzym in der Leber synthetisiert. Dabei werden – ähnlich wie bei den Blutgerinnungsfaktoren – 10 Glutamylreste Vitamin K-abhängig carboxyliert. Bei einer Behandlung mit Vitamin K-Antagonisten (7 u.) sinkt deshalb auch die Aktivität dieses Proenzyms ab. Für seine enzymatische Wirkung muss Protein C aktiviert werden (aktiviertes Protein C, APC). Das Proenzym wird zwar durch Thrombin aktiviert, der Vorgang läuft aber zu langsam ab, um physiologische Bedeu-

tung zu besitzen. Eine wesentlich schnellere Aktivierung erfolgt unter Vermittlung von Thrombomodulin, einem Rezeptorprotein an der Endothelzelloberfläche (. Abb. 29.32). Durch die Bindung von Thrombin (das ja eigentlich Teil der Prokoagulation ist) an Thrombomodulin wird Protein C in die aktive Form überführt. Das aktivierte Protein C kann mit Thrombozyten oder Endothelzelloberflächen in Wechselwirkung treten, optimal ist diese Interaktion jedoch nur in Gegenwart von Protein S (nach der Stadt Seattle, in der es entdeckt worden war). Protein S wird ebenfalls Vitamin K-abhängig in der Leber synthetisiert. Im Blut zirkuliert es entweder in freier Form (. Abb. 29.32), als Komplex mit dem C4b-Bindungsprotein (einem Inhibitor des Komplementsystems, 7 Kap. 34.4) oder als Komplex mit einem Protein S-Bindungsprotein. Der Komplex aus aktiviertem Protein C und Protein S inaktiviert die aktivierten Faktoren Va und VIIIa und wirkt dadurch antikoagulierend. Gleichzeitig inaktiviert das Enzym einen Inhibitor des Gewebe-Plasminogenaktivators, sodass es indirekt auch als Stimulator der Fibrinolyse (7 Kap. 34.4) wirkt. ! Vitamin K-Antagonisten wirken über eine Hemmung der J-Carboxylierung von Blutgerinnungsfaktoren.

Die in der Praxis häufig verwendeten Derivate von 4-Hydroxycumarin und Indan-1,3-dion (. Abb. 29.33) wirken indirekt über eine kompetitive Verdrängung von Vitamin K bei der posttranslationalen Modifikation der Faktoren II, VII, IX und X sowie von Protein C und Protein S in der Leber. Vitamin K ist Cofaktor einer Carboxylase, die Glutamylreste in den genannten Proteinen posttranslational in J-Stellung carboxyliert (7 Kap. 23.2.4); dabei entstehen JCarboxylglutamylreste, deren benachbarte Carboxylgruppen leicht Calcium binden können. Man nimmt an, dass alle Glutamylseitenketten in den Vitamin K-abhängig synthetisierten Faktoren carboxyliert werden. Vitamin K-Antagonisten verhindern die Carboxylierung durch Verdrängung des Vitamins K an der Carboxylase, sodass Faktoren entstehen, deren Glutamylreste nicht mehr verändert sind und die demnach nicht mehr Calcium und Phospholipide binden können. Sie verlieren dadurch ihre Aktivierbarkeit. Daraus wird verständlich, dass Vitamin K-Antagonisten nicht in vitro wirken und dass eine Wirkung erst nach einer

987 29.5 · Blutstillung

. Abb. 29.32. Schematische Darstellung der Proteine und Zelloberflächen, die am Protein-C-Stoffwechsel beteiligt sind. TM = Thrombomodulin; Th = Thrombin; PC = Protein C; PS = Protein S;

C4BP = C4-Bindungsprotein; PSBP Protein = PS-Bindungsprotein; SR = endothelialer Protein S-Rezeptor, APC = aktiviertes Protein C

ausreichenden Senkung (in der Regel nach 2–3 Tagen) des Blutspiegels der Faktoren II, VII, IX und X eintritt. Eine Überdosierung mit diesen Medikamenten wird durch Gabe von Vitamin K behandelt.

den Thromben lysiert, die sich im intakten Gefäßsystem gebildet haben. Auch in diesem System wird eine Endopeptidase, das Plasmin, aus der inaktiven Vorstufe Plasminogen durch limitierte Proteolyse gebildet. Die Aktivierung erfolgt über sog. Plasminogenaktivatoren. Es wird zwischen körpereigenen wie Urokinase und Gewebeplasminogenaktivator [auch t-(für tissue)PA] und externen wie Streptokinase (aus Streptokokken) unterschieden. t-PA ist ein Glykoprotein mit einem Molekulargewicht von 70 kD (527 Aminosäuren) und einem Kohlenhydratanteil von rund 10%. Es kommt in den meisten Geweben vor, wenn auch in unterschiedlichen Konzentrationen. In Blutgefäßen ist es an Endothelzellen gebunden und kann durch Thrombin freigesetzt werden. In der Blutbahn komplexiert t-PA als (Serin-)Protease schnell mit Proteaseinhibitoren und wird dadurch inaktiviert. t-PA wird schnell in der Leber abgebaut, sodass die Halbwertszeit nur 3 min beträgt. Aufgrund seiner hohen Affinität zu Fibrin wird t-PA selektiv dort, wo Fibrin abgelagert ist oder wo sich Thromben gebildet haben, aus dem Endothelspeicher freigesetzt. Im Gegensatz zu allen anderen bekannten Serinproteasen (7 Kap. 9.3) entfaltet t-PA bereits in der Proform proteolytische Aktivität. Unter dem Einfluss von Plasmin wird das einkettige Polypeptid an der Peptidbindung Arg275-Ile276 gespalten, sodass ein Molekül mit einer schweren und einer leichteren Kette entsteht, die über Disulfidbrücken verbunden sind. Damit geht eine deutliche Erhöhung der Enzymaktivität einher. In Anwesenheit von Fibrin binden t-PA und Plasminogen an den Thrombus, sodass ein Komplex entsteht, der die Plasminogenaktivierung und damit die Fibrinauflösung bewirkt (lokale Lyse). Beim Abbau von Fibrin entstehen Fibrinspaltprodukte, die auch als D-Dimere bezeichnet werden. Eine Erhöhung der D-Dimere zeigt eine reaktive Fibrinolyse bei vermehr-

! Heparin, EDTA oder Citrat hemmen die Blutgerinnung in vitro.

Soll bei Blutuntersuchungen die Gerinnung verhindert werden, so kann durch Punktion gewonnenes Blut in heparinisierten Röhrchen gesammelt werden. Andere Möglichkeiten sind entweder der Zusatz von EDTA, das mit dem für die Gerinnung notwendigen Calcium einen Komplex bildet oder von Citrat, das mit Calcium ebenfalls einen Komplex bildet. Citrat wird auch zur Bereitung von Transfusionsblut verwendet.

29.5.4

Fibrinolyse

! Die Fibrinolyse ist ein wichtiger Gegenspieler der Blutgerinnung.

Mit Hilfe des fibrinolytischen Systems, das eine auffallende Ähnlichkeit mit dem Blutgerinnungssystem aufweist, wer-

. Abb. 29.33. Struktur von 4-Hydroxycumarin (links) und Indan1,3-dion (rechts). Derivate dieser Verbindungen verdrängen Vitamin K kompetitiv bei der Biosynthese der Faktoren II, VII, IX sowie Protein C und Protein S in der Leber

29

988

29

Kapitel 29 · Blut

ter Fibrinbildung an und dient deshalb als empfindlicher Indikator einer Gerinnselbildung (Thrombose). Plasmin baut nicht nur Fibrin ab, sondern greift auch Fibrinogen und die Faktoren V und VIII an. Die beim Fibrinogenabbau entstehenden Produkte (Fibrinogenspaltprodukte) hemmen die Thrombinbildung und die Polymerisation von Fibrinmonomeren. Damit wird die gesteigerte Fibrinolyse durch die gleichzeitige Hemmung der Gerinnung unterstützt. Streptokinase, ein Protein ohne enzymatische Eigenschaften, wirkt nicht direkt auf Plasminogen, sondern bildet mit diesem erst einen durch hydrophobe Wechselwirkungen bedingten Komplex, der dann weitere Plasminogenmoleküle in Plasmin umwandelt. Ein Nachteil der Streptokinase, die bei der Auflösung intravasaler Gerinnsel Anwendung findet, ist, dass bei Patienten, die eine Streptokokkeninfektion durchgemacht haben, Antikörper gegen Streptokinase auftreten können, die die therapeutisch zugeführte Streptokinase inaktivieren. Während Streptokinase und Urokinase (ein aus menschlichem Urin gewonnener Aktivator, der Plasminogen ohne vorherigen Kontakt mit Fibrin aktiviert) schon seit Jahrzehnten zur Thrombolysetherapie eingesetzt werden, wird rekombinantes t-PA erst seit einigen Jahren bei arteriellen Verschlüssen (Herzinfarkt) und Lungenembolien angewendet. ! Die Fibrinolyse kann durch Medikamente gehemmt werden.

Die Bildung zu hoher Mengen freien Plasmins im Blut wird durch Protein mit Antiplasminaktivität wie D2-Makroglobulin, Antithrombin III und D1-Antitrypsin (. Tabelle 29.9) verhindert. Eine pathologisch gesteigerte Fibrinolyse (z.B. bei Leukämien, Operationen an Fibrinolyseaktivator-reichen Organen wie Uterus, Prostata oder Lungen sowie beim Einbruch von Fruchtwasser in die Blutbahn) kann medikamentös durch Antifibrinolytica wie die Aminosäure H-Aminocapronsäure, p-Aminomethylbenzoesäure oder Aprotinin unterbrochen werden, die außer Plasmin auch Trypsin, Chymotrypsin und die in erster Linie für die Kininfreisetzung verantwortlichen Kallikreine hemmen.

29.5.5

Pathobiochemie

Keimbahnmutationen in den Genen (auf Chromosom 17 q21 o 23) für den Komplex GP IIb/IIIa (den Fibrinogenrezeptor) führen zu einer seltenen, autosomal rezessiven Blutungserkrankung, die durch eine verlängerte Blutungszeit, normale Thrombozytenwerte und das vollständige Fehlen der Plättchenaggregation charakterisiert ist und als Thrombasthenie Glanzmann bezeichnet wird. Bei den Plättchen ist die Gerinnselretraktion herabgesetzt oder vollständig fehlend, da die Thrombozyten offenbar die Kraft der cytoskelettalen Kontraktion nicht auf das Fibrinnetzwerk übertragen können.

Synthese- oder Strukturänderungen des von-Willebrand-Faktors bedingen ebenfalls eine Thrombozytenfunktionsstörung. Da der von-Willebrand-Faktor für die Plättchenadhäsion von großer Bedeutung ist, fallen Patienten mit einem Mangel an diesem Faktor durch vermehrte Blutergüsse, Nasenbluten oder Monatsblutungen bzw. starke Blutungen nach Verletzungen oder operativen Eingriffen auf. ! Die Hämophilien (A und B) werden durch Fehlen der Faktoren VIII bzw. IX verursacht.

Angeborene Mangelzustände sind für alle Faktoren beschrieben worden (. Tabelle 29.8). Die bekannteste und häufigste Krankheit ist die Hämophilie A, die durch den Mangel des Faktors VIII zustande kommt. Dadurch ist die Aktivierung von Faktor X durch das intravaskuläre System gestört, sodass die Aktivierung von Prothrombin verlangsamt oder ganz verhindert wird. Die Krankheit ist durch eine erhöhte Blutungsneigung charakterisiert, wobei v.a. Blutungen nach geringfügigen Verletzungen unstillbar sind. Eine Therapie erfolgt mit aus Plasma isoliertem oder gentechnologisch hergestellten Faktor VIII-Konzentrationen, die wegen der kurzen Halbwertszeit (6–20 h) häufig verabreicht werden müssen. Das Gen für Faktor VIII macht etwa 0,1% des gesamten X-Chromosoms aus. Es enthält 186.000 Basenpaare mit 26 Exons, zwischen denen die Introns liegen, die etwa 95% des gesamten Gens ausmachen (. Abb. 29.34). Die Exons codieren in ihrer Gesamtheit für das Protein mit 2351 Aminosäuren und einer Molekularmasse von 400 kDa (ohne die Kohlenhydratseitenketten). Da die Krankheit klinisch sehr heterogen ist, ist zu erwarten, dass – auch bedingt durch die Größe des Gens – viele verschiedene Mutationen als Ursache in Frage kommen: tatsächlich sind bisher 943 (!) verschiedene Missense-Mutationen und Deletionen (des gesamten Gens oder auch einer einzigen Base) beschrieben worden. Auf der anderen Seite zeigt die Analyse großer Patientenkollektive, dass bestimmte Punktmutationen, so z.B. CG o TG-Transition mit Bildung eines Nonsensecodons in den Exons 18 und 22 gehäuft auftreten (mutational hotspots, 7 u.). Außerdem müssen bei dieser Erkrankung zur Aufrechterhaltung ihrer Häufigkeit in der Population de novo-Mutationen auftreten (7 Kap. 7.3). Die Hämophilie A tritt mit einer Häufigkeit von 1:10.000 beim männlichen Geschlecht auf und ist damit die häufigste, schwere Blutgerinnungsstörung des Menschen. Sie manifestiert sich klinisch nur bei Männern, heterozygote Frauen bleiben aufgrund ihres zweiten intakten X-Chromosoms ohne Symptome. Die Hämophilie A zeigt kein einheitliches Krankheitsbild. Dieses reicht von schwersten, sich bereits bei der Geburt oder im Säuglingsalter manifestierenden (Restaktivität Einleitung Der Mensch benötigt einige 100 willkürlich schnell kontrahierbare Muskeln, um koordinierte, zielgerichtete Bewegungen durchführen zu können. Diese Muskeln, deren Zellen eine auffällige Querstreifung aufweisen, kommen außer als Bewegungsapparat des Skeletts auch in Auge, Zunge, Gesicht sowie in einer spezialisierten Form als Muskulatur des Herzens vor. Es gibt zwei zelluläre Formen von quergestreifter Muskulatur. Der Herzmuskel besteht aus einzelnen, elektrisch gekoppelten Zellen, den Cardiomyozyten, die alle synchron kontrahieren. Skelettmuskeln bestehen dagegen aus vergleichsweise riesigen Zellen, die jeweils ein Syncytium darstellen: aus vielen ursprünglich vorhandenen Einzelzellen bildet sich durch Zellfusionen ein lang gestrecktes Gebilde mit außerordentlich vielen peripher liegenden Zellkernen. Die entstehenden Muskelfasern können durch individuelle Innervation aktiviert werden. Die glatte, vegetativ innervierte Muskulatur der Eingeweide (Gastrointestinal- und Urogenitaltrakt sowie Blutgefäße) weist dagegen keine Querstreifung auf, besteht aus einzelnen lang gestreckten Zellen, ist nicht willkürlich innerviert und kontrahiert wesentlich langsamer als quergestreifte Muskulatur. Die verschiedenen Muskeltypen zeichnen sich durch eine gewebespezifische Ausstattung mit unterschiedlichen Isoformen kontraktiler Proteine, Regulatorproteinen, Ionenkanalproteinen und Enzymen aus. Viele Proteine der verschiedenen Muskelgewebe können durch Genmutationen strukturell so verändert werden, dass Muskelerkrankungen entstehen. So führen z.B. Mutationen von Cytoskelettproteinen des Skelettmuskels zum Muskelschwund (Dystrophie), solche von kontraktilen Proteinen und Regulatorproteinen im Herzen zu Cardiomyopathien und jene in Ionenkanalproteinen zu Lähmungserscheinungen der Skelettmuskulatur oder Herzrhythmusstörungen.

30

30.1

Feinstruktur der Muskulatur

30.1.1

Die quergestreifte Muskulatur

! Der quergestreifte Muskel weist eine hierarchische Organisationsstruktur auf.

Voraussetzung für das Verständnis des Mechanismus der Muskelkontraktion ist die Kenntnis der Feinstruktur der Muskulatur (. Abb. 30.1). Quergestreifte Muskeln in der Skelettmuskulatur (1 in . Abb. 30.1) setzen sich aus Faserbündeln (2 in . Abb. 30.1) zusammen, die noch mit bloßem Auge gut erkennbar sind. Sie werden von verschiedenen Nervenfasern erregt. Die einzelnen Muskelfasern des Bündels (3 in . Abb. 30.1) sind lange Zellen mit einem Durchmesser von 10 bis 100 Pm und Längen von wenigen mm bis zu mehreren cm. In einigen Fällen können sie die Gesamtlänge des Muskels durchlaufen und an beiden Enden in die bindegewebigen Sehnen übergehen. Die Muskelfasern enthalten in hoher Konzentration die Proteine Aktin und Myosin. Diese bilden faserförmig in der Längsrichtung der Muskelzelle angeordnete Komplexe, die als Myofibrillen bezeichnet werden und die ca. 80% des Gesamtvolumens der Zellen einnehmen. Bereits bei lichtmikroskopischer Betrachtung zeigen Skelettmuskelfasern eine charakteristische Querstreifung, die durch eine hochregelmäßige Anordnung des kontraktilen Apparats entsteht (. Abb. 30.2). Im Polarisationsmikroskop lassen sich anisotrope, doppelbrechende, proteinreiche A-Banden und isotrope, also weniger dichte und nicht doppelbrechende I-Banden, unterscheiden. Im Zentrum der I-Bande ist noch eine schmale, stark lichtbrechende Struktur, die Z-Scheibe, zu erkennen (4 in . Abb. 30.1). Erst durch die höhere Auflösung elektronen mikrosko-

pischer Bilder war die Bedeutung dieser Bandenmuster erklärbar (7 u.). ! Das Sarkomer ist die funktionelle Einheit der Myofibrille.

Die grundlegende Baueinheit der Myofibrille ist das Sarkomer. Das Sarkomer ist ein Zylinder mit einem Durchmesser von etwa 1500 nm und einer Länge von etwa 2500 nm (2,5 Pm). Eine Längenänderung vieler oder aller Einzelsarkomere, von denen z.B. der Bizepsmuskel etwa 10 Mio. besitzt, verursacht die Verkürzung oder Verlängerung des gesamten Muskels. Das Sarkomer wird durch die oben erwähnten Z(wischen)-Scheiben begrenzt, die gleichsam die Grund- und Deckplatten des Zylinders bilden. Es handelt sich hierbei um Proteinkomplexe, in denen die Filamente Aktin und Titin sowie das D-Actinin die wichtigsten Rollen spielen. In beiden Z-Scheiben sind je ca. 2000 parallel zur Zylinderachse verlaufende dünne Myofilamente aus Aktin verankert. Entscheidend für den Kontraktionsmechanismus ist, dass die aus den benachbarten Sarkomeren in eine Z-Scheibe inserierenden dünnen Filamente entgegengesetzte Polarität besitzen. In der Mitte der im Ruhezustand ca. 2,5 Pm langen Sarkomere befinden sich weitere Gerüstproteine (z.B. Myomesin), die in der sog. M(ittel)-Bande die ebenfalls parallel zur Zylinderachse angeordneten dicken Myofilamente aus Myosin verankern (1600 nm lang, je 800 nm diesseits und jenseits der zentralen M-Bande und 15 nm dick). In den Überlappungszonen, die sowohl dünne als auch dicke Filamente enthalten, bietet sich im Querschnitt des Sarkomers folgendes Bild: Jedes dicke Filament liegt im Mittelpunkt eines gleichseitigen Sechsecks, dessen Ecken von dünnen Filamenten gebildet werden (. Abb. 30.3). Jedes dünne Filament besitzt 3 »dicke« Nachbarn (9 in . Abb. 30.1). Das Zahlenverhältnis dünner zu dicken Filamenten beträgt 2:1.

1003 30.1 · Feinstruktur der Muskulatur

. Abb. 30.2. Elektronenoptische Aufnahme (Längsschnitt) eines quergestreiften Muskels. (Aufnahme von H.E. Huxley, Cambridge). Vergrößerung 18 600:1

. Abb. 30.3. Elektronenoptische Aufnahme (Querschnitt) eines quergestreiften Muskels. Jedes dicke Myosinfilament ist von 6 dünnen Aktinfilamenten umgeben. (Aufnahme von H.E. Huxley, Cambridge). Vergrößerung 155 000:1

! Durch die unterschiedliche Verwendung von Muskelprotein-isoformen entstehen unterschiedliche Myofibrillentypen.

. Abb. 30.1. Die einzelnen Organisationsebenen des quergestreiften Muskels. 1 Muskel; 2 Faserbündel; 3 Muskelfaser; 4 Myofibrille; 5 Aufbau des Sarkomers; 6 Querschnitt durch dünne Myofilamente im Bereich der Z-Scheibe; 7 Querschnitt durch dicke Myofilamente; 8 Querschnitt durch dicke Myofilamente im Bereich der M-Bande; 9 sich überlappende dicke und dünne Myofilamente. (Verändert nach Bloom W, Fawcett DW 1994)

Die Proteine der Myofibrillen kommen in Isoformen vor, die sich durch ihre physikalisch-chemischen Eigenschaften unterscheiden. Protein-Isoformen können durch Multigenfamilien (mehrere Gene) oder durch alternierendes Spleißen (ein Gen) gebildet werden. Die Vielfalt dieser Protein-Isoformen (zu denen noch fetale und neonatale Varianten kommen) erlaubt dem menschlichen Organismus, nach dem Baukastenprinzip Muskelfasern verschiedener Myofibrillenstruktur für spezielle Funktionen zu bilden und diese Strukturen veränderten Umweltanforderungen (z.B. Training) durch Adaptation anzupassen. Eine Störung dieses Systems (Maladaptation) dürfte entscheidend an der Entstehung von Krankheiten der Muskulatur beteiligt sein.

30

1004

Kapitel 30 · Muskelgewebe

30.1.2

Die glatte Muskulatur

Im Gegensatz zur quergestreiften besteht die glatte Muskulatur aus spindelförmigen Zellen mit jeweils nur einem Kern. Glatte Muskelzellen enthalten zwar dicke und dünne Filamente, jedoch sind diese nicht zu Sarkomeren mit regel-

mäßigen Strukturmustern geordnet. Aus diesem Grund fehlt auch die Querstreifung. Die Enden der dünnen Filamente sind mit Hilfe sog. »dense bodies« am Cytoskelett der glatten Muskelzellen sowie an ihrer Plasmamembran befestigt.

In Kürze Mehrere hundert Skelettmuskeln garantieren die koordinierten Bewegungen des Knochengerüsts, die schnell oder langsam und von längerer oder kürzerer Dauer sein können. Daneben sorgt die dauerarbeitende Herzmuskulatur für den Bluttransport und die glatte Muskulatur in Eingeweiden und Blutgefäßen für kontraktile Prozesse von langsamer Dauer. Die Vielfalt dieser unterschiedlichen Muskelfaser-Phänotypen wird zum einen durch die Expression für den einzelnen Typ spezifischer Proteine und zum anderen durch die Expression von Protein-Iso-

30

30.2

Die Proteine des kontraktilen Apparats

30.2.1

Myosin

! Das Myosinhexamer ist das Hauptprotein der dicken Myofilamente.

Die dicken Filamente bestehen als Haupt-Strukturkomponente aus dem Myosin, einem Molekül, das einige besondere Eigenschaften aufweist: es ist extrem asymmetrisch gebaut und besitzt einen ca. 150 nm langen, stabförmig gestreckten Teil (»Schaft«) sowie an einem Ende zwei etwa 20 nm große »Köpfchen«. Die Fähigkeit des stabförmigen Teils zur Selbstassoziation ist die Grundlage für die Bildung der dicken Filamente, während die enzymatisch aktiven Köpfchen an Aktin binden können und die in ihnen ablaufende Hydrolyse von ATP eine Konformationsänderung bewirkt, welche die molekulare Grundlage der Muskelmechanik darstellt. Jedes Myosinmolekül mit einer Molekülmasse von ca. 520 kD ist aus 6 Untereinheiten aufgebaut: 4 Zwei schwere Ketten (myosin heavy chain, MHC) mit einer Masse von je 220 kD bestehen etwa zur Hälfte aus dem Schaft, während die aminoterminale Hälfte die Köpfchen aufbaut. Die stabförmigen Bereiche der schweren Ketten bilden eine prototypische D-helicale »coiled-coil«-Struktur aus, in der jede 3. und 4. Position von 7 (heptad-repeat) durch hydrophobe Aminosäuren besetzt sind 4 Mit den Köpfchen assoziiert sind jeweils eine essentielle und eine regulatorische leichte Kette (light chain, LC), die strukturelle Ähnlichkeit zum Calcium-bindenden Protein Calmodulin aufweisen. Die leichten Ket-

formen erreicht, deren Struktur an die jeweilige Funktion angepasst ist. Funktionelle Einheit der Myofibrille ist das Sarkomer, welches die dicken und dünnen Myofilamente sowie Cytoskelettproteine enthält. Die Proteine der Myofibrillen kommen in Isoformen vor, die durch Genfamilien oder alternierendes Spleißen gebildet werden. Durch die Vielfalt dieser Protein-Isoformen entstehen Muskelfasern unterschiedlicher Zusammensetzung, die sich veränderten Umweltanforderungen durch Adaptation anpassen können.

ten dienen je nach Myosintyp der Aktivierung (glatter Muskel) oder Feinregulation der Kontraktion (quergestreifter Muskel). Das Myosinmolekül weist demnach die Zusammensetzung (MHC)2(LC)2+2 auf Im Muskelgewebe werden mindestens 13 unterschiedliche Gene für schwere Myosinketten exprimiert (. Tabelle 30.1), die in zwei Clustern auf den Chromosomen 14 und 17 liegen. Es besteht eine fast unbegrenzte Möglichkeit, die unterschiedlichen schweren und leichten Ketten miteinander zu kombinieren, wodurch sich eine verwirrende Zahl möglicher Myosinmoleküle ergibt. So sind alleine mehr als 9 verschiedene »schnelle« Myosin-Isoformen möglich, die oft nebeneinander in einem Muskel vorkommen! Die einzelnen Isoformen unterscheiden sich erheblich voneinander hinsichtlich ihrer ATPase-Aktivität und der maximalen lastfreien Verkürzungsgeschwindigkeit. Dadurch bietet sich die Möglichkeit einer feinen Abstimmung der Eigenschaften des Myosins auf gewünschte physiologische Zustände. Um den strukturellen Bereichen der Myosinmoleküle spezifische biochemische Eigenschaften zuordnen zu können, war die gezielte Herstellung proteolytischer Fragmente von enormer Bedeutung. Die schwere Myosinkette ist an zwei Stellen besonders empfindlich gegenüber Proteolyse: 4 Am Übergang vom Köpfchen zum Schaft und 4 ca. 90 nm vom Ende des stabförmigen Teils entfernt Dadurch lassen sich die folgenden Fragmente erhalten (. Abb. 30.4 und . Tabelle 30.2): 4 LMM (light meromyosin), der 90 nm lange carboxyterminale Teil des Schafts, der alleine eine Art dicker Filamente aufbauen kann

1005 30.2 · Die Proteine des kontraktilen Apparats

. Tabelle 30.1. Nomenklatur der Myosin schweren Ketten und ihr Bezug zu bestimmten Fasertypen Fasertyp Embryonal

Nomenklatur der Myosin schweren Kette

Vorkommen in Fasertyp:

MHCemb

Primäre Myotuben,

(MYH3)

extraocular, infrafusale und regenerierende extrafusale Fasern (Muskelspindeln)

Fötal

MYH4

Fötale Fasern

Neonatal

MHCneo (MYH8)

Neonatal, extraocular, M. masseter, intrafusale und regenerierende extrafusale Fasern (Muskelspindeln)

Schnell phasisch (»Typ II«)

MHC II a MHC II b MHC II d/x MHCeom MHC IIm

II A, II AB, II DA, II C, I C II B, II BD, II AB II D, II BD, II DA Extraoculare und laryngeale Muskeln (auch „superschnell“ genannt) masticatorische Muskeln

Langsam phasisch (»Typ I«)

MYH7 (cardial E) MHC ID

I, I C, II C fötales Herz Extraocular Diaphragma, M. masseter, intrafusale Fasern (Muskelspindeln)

Langsam tonisch

MHC Iton

Extraocular, M. tensor tympani, intrafusale Fasern (Muskelspindeln)

Cardial

MYHCA

Kardial

Glatter Muskel

MYH 11

Glatte Muskulatur

. Abb. 30.4. Aufbau des Myosinhexamers aus 2 schweren und 2 Paaren von leichten Ketten

30

1006

Kapitel 30 · Muskelgewebe

. Tabelle 30.2. Größe und Eigenschaften proteolytischer Spaltprodukte von Myosin Native Molekülmasse

kDa in SDS-PAGE

Länge (nm)

ATPase-Aktivität

Actin-Bindung

Bildung von Filamenten

Schwere Kette

440

220

150 + 20

(+)

(+)

+

Stabförmiger Teil (Schaft)

150

120

150

–

–

+

LMM

(150)n

75

90

–

–

+

HMM

340

140, 22, 17

60 + 20

+

+

–

S1

130

90, 22, 17

20

+

+

–

S2

45

45

60

–

–

–

4 S2 (Subfragment 2), der 60 nm lange Rest des stabförmigen Teils, der alleine keine Filamente bilden kann 4 S1 (Subfragment 1), einzelne Myosinköpfchen von ca. 20 nm, die eine Aktin-Bindungsstelle sowie die Fähigkeit der ATP-Spaltung besitzen 4 HMM (heavy meromyosin), Paare von Myosinköpfchen, die über ihre S2-Anteile zusammenhängen

regionalen Verteilung der Expression dieser Isoproteine werden auch bei der pathologischen Herzhypertrophie gefunden.

30.2.2

Aktin

! Aktin ist das Hauptprotein der dünnen Filamente.

30

Die Myosinmoleküle assoziieren durch elektrostatische Wechselwirkungen ihrer stabförmigen (LMM) Anteile zu zylinderförmigen Filamenten (. Abb. 30.5). In quergestreiften Muskeln geschieht diese Assoziation mit erstaunlicher Präzision, sodass wahrscheinlich jeweils genau 294 Moleküle ein Filament von 1,6 Pm Länge aufbauen. Die Myosinköpfchen stehen von der Oberfläche des Zylinders radial nach außen ab und bilden die im elektronenmikroskopischen Bild sichtbaren Querbrücken, die dicke und dünne Filamente beim Kontraktionsvorgang verbinden. Die Moleküle sind in den dicken Filamenten mit den Köpfen nach beiden Seiten hin ausgerichtet, sodass in der Mitte eine köpfchenfreie Zone (»bare zone«) von 150 nm Breite entsteht. Dies bedeutet, dass die Myosinmoleküle in diesem Bereich über ihre gesamte Länge überlappen und man nur dort sowohl eine antiparallele als auch eine parallele Anordnung benachbarter Moleküle antrifft. Zu den Enden hin nimmt die Anzahl der Moleküle ab, und daher laufen die dicken Filamente spitz zu. Diese Art des Filamentaufbaus, in dem parallele, antiparallele und wieder parallele Bereiche einander abwechseln, stellt eine absolute Besonderheit in der Natur dar. In allen anderen bekannten makromolekularen Komplexen wiederholt sich eine bestimmte Anordnung der Moleküle von einem Ende zum anderen, und die Polarität ändert sich nicht (z.B. Aktinfilamente, Mikrotubuli, Intermediärfilamente, Kollagenfasern, bakterielle Flagellen etc.). Die Regulation der quantitativen Verteilung dieser und anderer Proteine im Muskelgewebe unterliegt dem Einfluss von Cytokinen (FGF, TGF-E, IGF-1, Myostatin) und Hormonen; so führt z.B. die vermehrte Ausschüttung von Schilddrüsenhormonen zu einer Umschaltung der Synthese von V3- zu V1-Myosin im Ventrikel und damit zu einem Myosin mit höherer ATPase-Aktivität. Veränderungen der

Die strukturgebende Komponente der dünnen Filamente ist das Aktin, dazu kommen als Regulatorproteine Tropomyosin und – nur im quergestreiften Muskel – der Troponinkomplex. Aktin ist ein annähernd globuläres Protein (G-Aktin, 42 kDa Molekülmasse), das unter physiologischen Bedingungen zu langen, fadenförmigen Ketten (FAktin) polymerisiert. Im Skelettmuskel lagern sich etwa 360 G-Aktinmoleküle zu 1 Pm langen Filamenten zusammen. Durch eine seitlich etwas verschobene Bindung der Aktine aneinander ergibt sich das Bild einer Doppelhelix aus zwei schraubig umwundenen Strängen (. Abb. 30.6). ! Tropomyosine und Troponine sind Aktin-assoziierte Proteine.

In den Rinnen zwischen den Aktinketten liegen die 40 nm langen, starren Tropomyosinmoleküle, von denen jedes aus 2 Polypeptidketten besteht. In einem dünnen Filament erstreckt sich ein Tropomyosinmolekül über 7 Aktinmoleküle, wobei auf jedem Tropomyosin zusätzlich noch der Troponinkomplex (I, C, T) sitzt. Aktin- und Myosinproteine verschiedener Muskelarten zeichnen sich durch das Vorkommen der Aminosäure 3-Methylhistidin aus. Die Tropomyosine stellen eine Familie nahe verwandter dimerer Proteine dar, die auf unterschiedlichen Spleißvarianten der Transkripte von vier Genen (TPM1 bis TPM4) beruhen. In allen adulten Muskeln kommen nur die von den langen Transkripten der TPM1- bis –3-Gene abgeleiteten Varianten einheitlicher Länge (284 Reste) vor, alle kürzeren Molekülvarianten findet man nur in Nichtmuskelzellen.

1007 30.2 · Die Proteine des kontraktilen Apparats

. Abb. 30.5. Assoziation von Myosinhexameren zum dicken Myofilament. Die Myosinköpfe sind in 2 Bereichen (Pfeile) flexibel

30.2.3

. Abb. 30.6. Assoziation von Aktin, Tropmyosin und dem Troponin-Komplex zum dünnen Myofilament

Das Cytoskelett der quergestreiften Muskelzellen

Zusätzlich zu den kontraktilen Myofibrillenproteinen existieren im Muskel mehrere spezialisierte Cytoskelett-Domänen: 4 Das sarkomere Cytoskelett, das die Z-Scheiben und M-Banden aufbaut, bestehend u. a. aus Titin, Myomesin, MyBP-C (C-Protein) und Nebulin 4 Außerhalb des Sarkomers ein Gerüst aus Intermediärfilamenten mit Proteinen wie Desmin, Plectin, Synemin und Paranemin, über die auch Mitochondrien, Zellkerne und sarkolemmale Teile organisiert werden 4 Ein Membrancytoskelett bestehend aus Dystrophin und damit assoziierten Glycoproteinen, die eine Ver-

30

1008

Kapitel 30 · Muskelgewebe

. Abb. 30.7. Aufbau des sarkomeren Cytoskeletts aus Titin und damit assoziierten Proteinen

bindung vom Aktin-Cytoskelett zur extrazellulären Matrix herstellen 4 Hauptsächlich transversal verlaufende Zell-Matrix Kontakte, genannt Costamere, die in ihrer Zusammensetzung den Fokalkontakten von Nichtmuskelzellen ähneln ! Titin und damit assoziierte Proteine bilden das Gerüst der Myofibrillen.

30

Für die Anordnung der kontraktilen und akzessorischen Proteine im Sarkomer ist das Titinmolekül von zentraler Bedeutung. Dieses über 1 Pm lange, mit ca. 3000 kDa

. Abb. 30.8. Schematische Darstellung der Proteinkomplexe, die das Cytoskelett der Muskelzelle mit der extrazellulären Matrix (ECM) verbinden. Der Komplex aus Dystroglykanen (DGCα und β) und Sarkoglykanen (SGCα, β, γ, δ und Sarkospan S) verknüpft die Laminine der ECM über Dystrophin (DYS) direkt mit Aktin-Filamenten (blau). Über die Interaktion des Dystrophins mit Dystrobrevin,

größte bekannte Polypeptid überbrückt die gesamte symmetrische Halbeinheit eines Sarkomers von der M-Bande zur Z-Scheibe. Das Titinmolekül ist aus repetitiven, ca. 100 Aminosäuren großen Modulen der sog. ImmunglobulinSuperfamilie aufgebaut. Zusammen mit nicht-repetitiven Sequenzen bilden diese hunderte spezifischer Bindungsstellen für Proteine wie D-Actinin, Aktin, Myosin, C-Protein und Myomesin. Dabei definieren sie automatisch die Abstände aller Bindungspartner zueinander. Titin kann also als molekularer Bauplan (»molecular ruler«) des Sarkomers verstanden werden. Der Verlust des Titinmoleküls führt zum völligen Verlust der Sarkomerbildung, selbst bei

Syntrophin und nNOS (DSN) wird eine direkte Anbindung an intrazelluläre Signaltransduktionswege ermöglicht. Die Integrine (INTα, β) stellen über mehrere Proteine der Adhäsionskontakte (FIL = Filamin, AAC = α-Actinin, VPT = Vinculin, Paxillin, Talin) eine zweite Brücke von der ECM zu den Aktin-Filamenten her

1009 30.3 · Molekularer Mechanismus der Muskelkontraktion und -relaxation

verbleibender Expression anderer sarkomerischer Proteine. Dies illustriert, dass so komplexe makromolekulare Systeme wie das Sarkomer nicht alleine durch selbst-assemblierende Proteinuntereinheiten gebildet werden können, sondern eine zusätzliche Organisationsebene erforderlich ist. Die mit Titin assoziierten Proteine MyBP-C (C-Protein), Myomesin und M-Protein sind ebenfalls von modularem Aufbau und erfüllen Funktionen in der Kontraktions-Feinregulation sowie dem Aufbau des dicken Filaments (C-Protein) und der M-Bande (Myomesin, M-Protein). Im Skelettmuskel dient das ca. 700 kDa große Protein Nebulin als Blaupause für die regelmäßige Länge der Aktinfilamente. Dieses Proteinnetzwerk wird auch als endosarkomeres Cytoskelett bezeichnet (. Abb. 30.7). ! Proteine wie Dystrophin bilden das Membran-Cytoskelett der Muskelfasern.

Die kontraktile Kraft der Myofibrillen muss über die Zellmembran auf die Muskelinsertionen übertragen werden, um durch Kontraktion der Muskelzelle schließlich zur Kontraktion eines ganzen Muskels zu gelangen. Für diese Kraftübertragung und für die Erhaltung der Integrität des

Sarkolemms selbst sind zwei Proteinkomplexe verantwortlich. Eine zentrale Rolle bei der Organisation des subsarkolemmalen Cytoskeletts spielt das Dystrophin, das strukturell mit Spectrin und D-Actinin verwandt ist und dessen Schädigung Auslöser der Duchenne-Muskeldystrophie (7 Kap. 30.5.1) ist. Das Dystrophin bindet mit seinem Aminoterminus direkt an Aktin-Filamente und weiter carboxyterminal an einen Komplex aus mehreren Transmembran-Glycoproteinen (Dystroglykane, Sarkoglykane; . Abb. 30.8). Über die Dystroglykane erfolgt direkt die Bindung an Proteine der Basallamina der Muskelzellen (Laminin-2, Agrin). Der zweite funktionell bedeutsame Membrankomplex sind die Costamere, Adhärenskontakte, die »rippenförmig« (lat. costa, Rippe) in Höhe der Z-Scheiben um die Muskelfasern verlaufen. Zentrale Proteine sind hier die Integrine, die als Rezeptoren des Laminins dienen. Im Zellinneren vermitteln mehrere Fokalkontakt-Proteine (u.a. Vinculin, Talin, Paxillin, Filamin) die Verknüpfung mit dem Aktin-Cytoskelett (. Abb. 30.8). Es ist noch nicht geklärt, wie weit gehend die Zusammenhänge zwischen diesen beiden Proteinkomplexen sind.

In Kürze Das Sarkomer besteht aus den dicken und den dünnen Filamenten sowie aus verschiedenen cytoskelettalen Proteinen: Die dicken Filamente werden primär von Myosin gebildet. Dieses hexamere Protein besteht aus zwei schweren und vier leichten Ketten und kommt in vielen Isoformen vor, die sich hinsichtlich der ATPase-Aktivität und der maximalen Verkürzungsgeschwindigkeit unterscheiden. In den Vorhöfen des Herzens herrscht die

30.3

Molekularer Mechanismus der Muskelkontraktion und -relaxation

30.3.1

Der Querbrückenzyklus

! Die Muskelkontraktion kommt durch eine verstärkte Überlappung der dünnen und dicken Filamente zustande.

Lange Zeit war angenommen worden, dass die Muskelkontraktion auf einem gummiartigen Zusammenziehen der Myosin-Filamente beruhe. Licht- und elektronenmikroskopische Untersuchungen in den Labors von A.F. Huxley und H.E. Huxley zeigten in den 50er Jahren, dass statt dessen die Länge der Myosin- und Aktinfilamente im Verlauf der Kontraktion konstant bleibt und sich nur deren Überlappungsgrad ändert. Diese Arbeiten führten zur Formulierung der Gleitfilament-Theorie der Muskelkontraktion

V1-Form, in den Kammern die V3-Form vor. Ihre quantitative Verteilung unterliegt der Regulation durch Cytokine und Hormone. Die dünnen Filamente bestehen aus Aktin, dem Troponinkomplex und Tropomyosin, wobei letztere als Regulatorproteine wirken. Die wichtigsten Cytoskelettproteine des Muskels sind Dystrophin, Desmin, Nebulin und Titin.

(»sliding filaments«), nach der die Kontraktion auf der Wechselwirkung der dicken und dünnen Filamente beruht, die aneinander vorbeigleiten (. Abb. 30.9). Um ein exzentrisches Ineinandergleiten der dicken und dünnen Filamente zu verhindern, werden die A-Banden durch ihre Verankerung über den elastischen Anteil des Titins mit der Z-Scheibe im Sarkomer zentriert. Das Titin ist also für die passive Elastizität des Muskels mitverantwortlich. Die treibende Kraft für die aktive Kontraktion kommt von den Myosin-Querbrücken (also den Köpfchen der Myosinmoleküle), in denen die Energie-produzierende ATPase-Aktivität und die eigentlichen sich bewegenden Teile lokalisiert sind. ! Die Querbrücken der dicken Filamente ändern zyklisch ihre räumlichen Beziehungen zu den dünnen Filamenten.

30

1010

Kapitel 30 · Muskelgewebe

chen dissoziieren die Köpfchen von Aktin und gehen in die ursprüngliche Konformation über. Diese auch als Querbrückenzyklus bezeichnete Abfolge von 4 Bindung des Köpfchens an Aktin 4 Konformationsänderung 4 Abkopplung 4 Konformationsänderung 4 erneute Bindung an einem anderen Punkt des dünnen Filaments

. Abb. 30.9. Gleitmodell der Muskelkontraktion. Durch Aneinandervorbeigleiten der dicken und dünnen Myofilamente kommt es zur Verkürzung des Sarkomers

30

Die Myosin-Querbrücken binden in einer 90°-Konformation an Aktin, gehen in eine 45°-Konformation über und verschieben dabei die dicken gegen die dünnen Filamente. Dieser Vorgang läuft unter Spaltung von ATP zu ADP und Phosphat ab. Durch erneute Bindung von ATP an das Köpf-

. Abb. 30.10. Molekulares Modell der Kraftentwicklung im Muskel. Zwei Spalten im Bereich des globulären Myosinkopfs, d.h. eine ATP-Bindungsstelle (aktives Zentrum des Enzyms) und eine, die in der Mitte der Aktinbindungsstelle liegt, sind in der offenen und geschlos-

wiederholt sich zyklisch, woraus in Summe eine Verkürzung des Sarkomers resultiert. Die Myosinköpfe laufen gleichsam auf den Aktinmolekülen, wobei sie selbst auf der Stelle treten. Die Energie für diesen Prozess stammt wie für alle wesentlichen energieverbrauchenden Prozesse in der Zelle aus der Hydrolyse von ATP. Den Schlüssel zum Verständnis der Koppelung von ATP-Hydrolyse und Konformationsänderung des Myosins bot die Entdeckung, dass die Kopfregionen der Myosinmoleküle ATPase-Aktivität aufweisen, die auch als Myosin-ATPase bezeichnet wird. ! Die Konformationsänderung des Myosinkopfs ist die molekulare Grundlage des Querbrückenzyklus.

Die gegenwärtige Vorstellung über den molekularen Mechanismus des Querbrückenzyklus (. Abb. 30.10) beruht auf der Beobachtung, dass die Bindung von ATP und die Freisetzung von ADP Lageveränderungen von Domänen

senen Form dargestellt. Der Arbeitstakt, in dem die Arbeit am Aktinfilament erfolgt, wird durch die Öffnung des ATP-bindenden Spalts (aktives Zentrum des Enzyms) nach Freisetzung der Produkte der ATPHydrolyse angetrieben. (Verändert nach Rayment I, Holden HM 1994)

1011 30.3 · Molekularer Mechanismus der Muskelkontraktion und -relaxation

des Myosinproteins und damit eine Konformationsänderung des Myosinkopfs hervorrufen, die die Grundlage der Bewegung darstellt. Man unterscheidet hierbei die eigentliche Motordomäne im S1-Bereich des Myosins und die ebenfalls in S1 lokalisierte Hebelarmdomäne (lever arm), die aus den Bindungsstellen der leichten Ketten und den beiden leichten Ketten selbst besteht. In der globulären Region des Myosinkopfs liegen zwei Spalten, von denen eine als Substratbindungsregion für ATP dient (violett und gelb markiert in . Abb. 30.10). Die zweite Spalte liegt im Bereich der Aktinbindungsstelle (grün markiert in . Abb. 30.10). Während der Kraftentwicklung öffnen und schließen sich diese beiden Spalten. Diese Konformationsänderungen werden von einer als Konverterdomäne bezeichneten Region in Winkelveränderungen des Hebelarms umgesetzt. Das Myosinmolekül schlägt damit gewissermaßen rhythmisch mit dem Schwanz (dem Hebelarm). Dieser Vorgang durchläuft folgende Stadien: 4 In Abwesenheit von ATP bildet Myosin eine starke Bindung mit Aktin aus (. Abb. 30.10, Zustand A) 4 Wenn ATP an das aktive Zentrum im Myosin bindet, kommt es über eine Kommunikation mit der AktinBindungsstelle zu einer Öffnung der Spalte und damit zu einer Schwächung der Bindung von Myosin an Aktin (Zustand B) 4 Nach Lösung der Bindung führt das ATP im aktiven Zentrum zu einem Verschluss der ATP-Bindungsstelle (Zustand C), gleichzeitig wird es zu ADP und Pi hydrolysiert 4 Daraufhin kann Myosin wieder eine schwache Bindung mit Aktin ausbilden (Zustand D) 4 Der Übergang in den kraftproduzierenden Zustand ist mit der Freisetzung von anorganischem Phosphat und der Öffnung der ATP-Bindungsstelle verbunden, welche eine Bewegung der Kopf-Schaft-Verbindung von etwa 5 nm verursacht (Zustand E). Da Myosin fest an Aktin gebunden ist, wird diese Bewegung auf das Aktinfilament übertragen und führt so zu einer Bewegung. Somit wirkt die Halsregion des Myosinkopfs als schlagendes Ruder 4 Am Ende des Arbeitstaktes (Zustand F) wird ADP freigesetzt und Myosin wieder fest an Aktin mit offener ATP-Bindungsstelle gebunden, welche zur erneuten ATP-Aufnahme bereit ist Für eine rasche Muskelkontraktion muss eine große Zahl derartiger Zyklen ablaufen: Jedes dicke Filament verfügt über 600 Myosinkopfgruppen, von denen jede etwa 5 Querbrückenzyklen pro Sekunde durchmacht. ! In vitro-Motilitäts-Assay und Einzelmolekül-Experimente.

Für die Entstehung von Kraft und Bewegung sind ausschließlich die Myosin-Köpfchen, Aktin und die Hydrolyse von ATP erforderlich. Dies konnte eindrücklich durch den

in vitro-Motilitäts-Assay (IMA) und in Experimenten mit einzelnen Myosinmolekülen demonstriert werden. Im IMA gleiten Aktinfilamente in Gegenwart von ATP über Myosin-beschichtete Oberflächen. In Einzelmolekülexperimenten kann die Funktion der molekularen Motoren weiter aufgelöst werden. So scheint es nun, dass ein einziger Myosinkopf durch Hydrolyse eines ATP-Moleküls eine Bewegung von ca. 5 nm bewirkt, wobei Kräfte im PiconewtonBereich wirken. Diese Experimente erlauben nun auch die molekulare Analyse mutierter Motorproteine, wie sie z.B. bei hereditären Herzerkrankungen (7 Kap. 30.5.1) vorkommen.

30.3.2

Kopplung zwischen Erregung und Kontraktion

! Calciumionen vermitteln die elektromechanische Koppelung.

Durch Übertragung der Erregung vom Nerv auf den Muskel an der motorischen Endplatte entsteht ein Aktionspotential. Dieser Erregungsprozess läuft an den äußeren Grenzmembranen (Sarkolemm) ab, die den extrazellulären Raum vom Faserinneren trennen. Die Kontraktion ist dagegen ein intrazellulärer Vorgang. Die zeitliche Koppelung der bioelektrischen und -mechanischen Phänomene setzt daher die Existenz eines Systems der Informationsvermittlung von der Zelloberfläche ins Innere der kontraktilen Fasern voraus. Calciumionen wirken dabei als Mittlersubstanzen zwischen Membranerregung und intrazellulärer Myofilamentverschiebung (elektromechanische Koppelung). Der erste Schritt liegt in der Steigerung der Calciumpermeabilität der Membranen im Augenblick der Depolarisation. Calciumionen dringen dementsprechend während der Dauer des Aktionspotentials (im einfachsten Fall aus dem Extrazellulärraum) über spannungsabhängige Calciumkanäle (L-Typ-Calciumkanal, Dihydropyridinrezeptor) ins Faserinnere ein. Dort setzen sie die zur Kontraktion führenden Mechanismen in Gang (s.u.). Diese Kanäle werden im Laufe der Depolarisierung innerhalb von Millisekunden maximal aktiviert und bleiben während der Plateauphase des Aktionspotentials geöffnet. Dünne kontraktile Gebilde sind durch die eindiffundierenden Calciumionen ohne Schwierigkeit von der äußeren Zelloberfläche her aktivierbar. Bei den dickeren Fasern des Myokards oder der Skelettmuskulatur ist dagegen auf diese einfache Art wegen der viel weiteren Diffusionsstrecken kein rascher Anstoß des kontraktilen Systems von der äußeren Grenzmembran her möglich. Bei dicken Muskelfasern erfolgt daher die elektromechanische Koppelung auf folgende Weise: 4 Die äußeren Zellmembranen im Bereich der Z-Scheiben sind in Form transversaler Tubuli weit ins Faser-

30

1012

Kapitel 30 · Muskelgewebe

. Tabelle 30.3. Eigenschaften des Ryanodinrezeptors von Skelett- bzw. Herzmuskel Eigenschaft

Skelettmuskel

Herzmuskel

Molekülmasse (kDa)

560

560

Aktivierung durch Ryanodin

++

++

Calcium

++ (μmol)

++ (μmol)

ATP

++

++

Acylcarnitin

++

–

cyclo-ADP-Ribose

–

++

Magnesium

++

++

Calmodulin

++

++

Hemmung durch

. Abb. 30.11. Die transversalen Tubuli und das endoplasmatische Retikulum (auch als sarkoplasmatisch bezeichnet) in einer Muskelfaser. Parallel zu den Myofibrillen liegen Mitochondrien und Glycogengranula

30

innere eingestülpt (. Abb. 30.11). Im Myokard verlaufen darüber hinaus auch Längsverbindungen zwischen den transversalen Tubuli eng parallel zu den Myofibrillen 4 Zwischen den transversalen Tubuli befinden sich die longitudinalen Strukturen des sarkoplasmatischen Retikulums. Seiner Funktion nach ist es als intrazellulärer Calciumspeicher anzusehen 4 Die transversalen Tubuli und das sarkoplasmatische Retikulum sind über synapsenartige Kontaktstellen, die sog. Triaden, verknüpft. Diese bestehen aus meist zwei sog. terminalen Cisternen des sarkoplasmatischen Retikulums, die sich an transversalen Tubuli anlagern Bei der elektromechanischen Koppelung finden an den oben geschilderten Triaden folgende Vorgänge statt (. Abb. 30.12, . Tabelle 30.3): 4 Die mit der Erregung einhergehende Öffnung der spannungsabhängigen Calciumkanäle führt zu einer lokalen Erhöhung der cytosolischen Calciumkonzentration im Bereich der Triade. Dies löst die Aktivierung eines auch als Ryanodinrezeptor bezeichneten ligandenaktivierten Calciumkanals des sarkoplasmatischen Retikulums aus, was mit einer Freisetzung großer Mengen von Calcium aus dem sarkoplasmatischen Retikulum in den cytosolischen Raum einhergeht. Dieser Vorgang wird auch als Calcium-induzierte Calciumfreisetzung bezeichnet (calcium-induced calcium release, CICR) 4 Außerdem gibt es Hinweise dafür, dass die mit der Depolarisierung einhergehende Konformationsänderung des spannungsabhängigen Calciumkanals (Dihydropyridin-Rezeptor) direkt auf den Ryanodinrezeptor übertragen wird und so die Calciumfreisetzung aus dem endoplasmatischen Retikulum auslöst. Dieser Vorgang wird auch als konformationsabhängige Cal-

ciumfreisetzung bezeichnet (conformationally coupled calcium release, CCCR) 4 Schließlich kann der Ryanodinrezeptor auch durch Liganden aktiviert werden. Zu diesen gehören cycloADP-Ribose (7 Kap. 23.3.4),Acylcarnitin (7 Kap. 12.2.1) oder reaktive Sauerstoffspezies (ROS, 7 Kap. 15.3) Störungen des Zusammenspiels zwischen dem spannungsabhängigen Calciumkanal der Plasmamembran und dem Ryanodinrezeptor können zu schwerwiegenden Pathologien führen (7 Kap. 30.5). Etwas anders ist dagegen die Situation bei Myokardfasern. Hier entspricht zwar das transversale System weitgehend dem der Skelettmuskulatur. Die longitudinalen endoplasmatischen Calciumspeicher sind jedoch nur relativ schwach ausgebildet. Die elektromechanischen Koppelungsprozesse in den Myokardfasern sind daher stark

. Abb. 30.12. Molekulare Mechanismen bei der Aktivierung der intrazellulären Calciumfreisetzung der Muskelzelle. CS = Calsequestrin; DHPR = Dihydropyridinrezeptor; RR = Ryanodinrezeptor. (Einzelheiten 7 Text)

1013 30.3 · Molekularer Mechanismus der Muskelkontraktion und -relaxation

vom extrazellulären Calciumangebot abhängig und infolgedessen auch sehr vom Extrazellulärraum her im positiven oder negativen Sinne beeinflussbar (z.B. durch Calciumantagonisten). ! Calcium aktiviert den Actomyosinkomplex nur indirekt.

Steigt die Konzentration an freien Calciumionen im Cytosol von 10–8 auf 10–5 mol/l an, so kommt es im Sarkomer zur Kontraktion. Allerdings erfolgt die aktivierende Wirkung der Calciumionen nicht direkt auf den Actomyosinkomplex, sondern läuft über das sog. Troponin-Tropomyosin-System ab (. Abb. 30.13). 4 Das lang gestreckte Tropomyosinmolekül, welches in der Furche des F-Aktins liegt und sich über 7 Aktinmonomere erstreckt, blockiert in Abwesenheit von Calcium die Wechselwirkung zwischen Aktin und Myosin. Wahrscheinlich verdeckt es die spezifischen Bindungsstellen für die Myosinköpfe 4 Durch den Troponinkomplex, der aus den 3 Untereinheiten Troponin C, I und T besteht, wird seine Lage auf dem F-Aktin stabilisiert. Troponin C, welches weitgehende Strukturhomologie zum Calmodulin zeigt, dient als Ligand für die während der Erregung freigesetzten Calciumionen und macht dabei eine Konformationsänderung durch. Diese wird über die Troponinuntereinheiten I und T auf das Tropomyosin weitergeleitet, welches dadurch die Myosinbindungsstellen freigibt, womit der Kontraktionsvorgang ausgelöst werden kann Auch in der glatten Muskelzelle von Blutgefäßen, Lungenepithelien, Gallenblase, Myometrium oder Harnblase ist die Wechselwirkung zwischen den Myosinkopfgruppen und dem F-Aktin Grundlage des Kontraktionsprozesses. Dieser kann durch Wechselwirkungen mit dem F-Aktin oder alternativ dem Myosin reguliert werden (. Abb. 30.14a,b): 4 Glatte Muskelzellen enthalten zwar Tropomyosin, jedoch fehlt ihnen Troponin. Im relaxierten Zustand bindet ein als Caldesmon bezeichnetes Protein an das Tropomyosin des Aktins der glatten Muskelzellen und verhindert so dessen Wechselwirkung mit dem Myosin. Steigt die Calciumkonzentration an, binden die dann entstehenden Ca2+-Calmodulinkomplexe an Caldesmon und entfernen es auf diese Weise aus seiner Bindung an Aktin. Die Aktin-Myosin-Wechselwirkung kann jetzt stattfinden 4 Eine der beiden leichten Ketten des Myosins der glatten Muskulatur, die sog. regulatorische leichte Kette, hemmt die für den Kontraktionsvorgang notwendige MyosinAktin-Wechselwirkung. Diese Hemmung wird durch Phosphorylierung der regulatorischen leichten Kette aufgehoben. Die hierfür verantwortliche Myosin-leichte Kette-Kinase (myosin light chain kinase, MLCK) wird durch Calcium-Calmodulin aktiviert. Die MLCK kann

. Abb. 30.13. Wechselwirkung von Aktin, Tropomyosin und Troponin C, I und T. In Abwesenheit von Calcium verdeckt Tropomyosin die Myosinbindungsstelle (markiert in lila) am Aktinmolekül. Anlagerung von Calcium an eine spezifische Bindungsregion des Troponin C führt über Konformationsänderungen der Troponine zur Freigabe der Myosinbindungsstelle. Durch Abfall des Calciumspiegels wird der ursprüngliche Zustand wieder hergestellt

. Abb. 30.14a,b. Regulation der Kontraktion der glatten Muskulatur. a Bedeutung von Caldesmon für die Wechselwirkung des Aktins mit Myosin. b Bedeutung der Myosin-leichte Kette-Kinase (MyosinLCK = light chain kinase) für die Kontraktion der glatten Muskelzelle. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

30

1014

Kapitel 30 · Muskelgewebe

u.a. durch die Proteinkinase A phosphoryliert werden und benötigt dann höhere Calcium-Calmodulin-Konzentrationen für ihre Aktivierung. Dies ist die Basis für die Relaxation der glatten Muskulatur durch Aktivatoren von E-Rezeptoren (7 Kap. 26.3.4), z.B. bei der Asthmatherapie.

30.3.3

Molekularer Mechanismus der Muskelrelaxation

! Die Muskelrelaxation ist ebenfalls ein ATP-abhängiger Vorgang.

4 In der Plasmamembran lässt sich neben einer Ca2+ATPase ein Na+/Ca2+-Gegentransportsystem nachweisen. Dieser Antiporter transportiert drei Na+-Ionen im Austausch gegen ein Ca2+-Ion in den cytosolischen Raum 4 Ein Teil des Calciums wird auch in Mitochondrien aufgenommen. Dies dient jedoch über Calcium-empfindliche Dehydrogenasen hauptsächlich der Adaptation des oxidativen Stoffwechsels an den Energiebedarf der Muskelzelle (7 Kap. 15.1.1)

Grundlage der Relaxation von Muskeln ist die Senkung der cytosolischen Calciumkonzentration auf Werte unter 10–6 mol/l. Hierfür sind v.a. drei Vorgänge wichtig: 4 Eine im sarkoplasmatischen Retikulum lokalisierte Ca2+-ATPase katalysiert den ATP-abhängigen Transport von cytosolischen Calciumionen gegen ein Konzentrationsgefälle in das sarkoplasmatische Retikulum. Calcium wird dort durch das Protein Calsequestrin gebunden. Pro mol ATP werden 2 mol Calciumionen aktiv transportiert. Diese Calcium-ATPase wird durch das Protein Phospholamban gehemmt (7 u.)

Insgesamt werden für diese Calciumbewegungen etwa 25% der Energie der Muskelzellen aufgewendet. Die mit der De- und Repolarisation der Plasmamembran verbundenen Änderungen der transmembranären Natrium- und Calciumgradienten werden durch die membranständige Na+/K+-ATPase rückgängig gemacht. Dieses Enzym kann myokardspezifisch durch Herzglykoside gehemmt werden, die häufig zur Stärkung der Herzkraft der Patienten eingesetzt werden. Die positiv inotrope Wirkung dieser Medikamente erklärt sich dadurch, dass die Hemmung der Na+/K+ -ATPase zu einer Erhöhung des intrazellulären Natriumspiegels führt. Dies hemmt den Na+/Ca2+Antiporter und löst damit einen Anstieg der intrazellulären Calciumkonzentration aus.

. Abb. 30.15a,b. Regulation der cytosolischen Calciumkonzentration im Myokard. a Mechanismen der Calciumfreisetzung in das und des Calciumexports aus dem Cytosol. b Effekte von E1-Agonisten wie Noradrenalin auf die elektromechanische Koppelung im Myokard.

AC = Adenylatcyclase; CS = Calsequestrin; DHPR = Dihydropyridinrezeptor (spannungsabhängiger Calciumkanal); Gs = stimulierendes G-Protein; PK A = Proteinkinase A; RR = Ryanodinrezeptor; SR = sarkoplasmatisches Retikulum. (Einzelheiten 7 Text)

30

1015 30.4 · Regeneration der Muskelzelle

! Neurotransmitter und Hormone regulieren den myokardialen Calciumstoffwechsel.

Die synchron ablaufenden und sich rhythmisch wiederholenden Kontraktionen des Myokards beruhen auf regelmäßigen Oszillationen der cytosolischen Calciumkonzentrationen. Diese spiegeln periodisch ablaufende Änderungen des Verhältnisses von Calciuminflux in das und Calciumefflux aus dem Cytosol wieder. Die wichtigsten Mechanismen sind hierbei (. Abb. 30.15a): 4 Die für die Kontraktion notwendige Erhöhung der cytosolischen Calciumkonzentration beruht zu etwa 30% auf einem Influx aus dem extrazellulären Raum und zu 70% aus dem sarkoplasmatischen Retikulum 4 Die Senkung der cytosolischen Calciumkonzentration während der Relaxation erfolgt durch die sarkoplasmatische Calcium-ATPase sowie über den Na+/Ca2+Antiporter. Die Calciumausschleusung durch die Ca2+-ATPase des Plasmalemms oder durch Aufnahme in die Mitochondrien spielt demgegenüber nur eine geringe Rolle Eine lastabhängige Anpassung der Herzleistung erfolgt im Gegensatz zum Skelettmuskel v.a. über Katecholamine,

wobei eine Signaltransduktion über β1-Rezeptoren von besonderer Bedeutung ist (. Abb. 30.15b). Durch Noradrenalin (Adrenalin) aktivierte E-Rezeptoren führen über stimulierende G-Proteine zur Aktivierung der Adenylatcyclase und gesteigerter cAMP-Bildung. Dieses aktiviert die Proteinkinase A, welche im Myokard folgende Phosphorylierungen auslöst, die am Zustandekommen des positiv inotropen Effekts von Katecholaminen beteiligt sind: 4 Die Phosphorylierung des spannungsabhängigen Calciumkanals führt zu einer Steigerung und Beschleunigung des Calciumeinstroms 4 Die Phosphorylierung des Myosin-Bindungsproteins C bewirkt eine Erhöhung der Kraftentwicklung 4 Die Phosphorylierung von Troponin I löst eine Abnahme der Calciumabhängigkeit der Kontraktion und eine schnellere Relaxation aus 4 Die Phosphorylierung von Phospholamban hebt dessen Hemmwirkung auf die sarkoplasmatische Ca2+ATPase auf. Infolgedessen wird Calcium vermehrt ins sarkoplasmatische Retikulum aufgenommen, was die Relaxationszeit verkürzt und die intrazellulären Calciumspeicher auffüllt

In Kürze Die Muskelkontraktion kommt durch ATP-abhängige Wechselwirkungen von Aktin und Myosin zustande. Dabei verursacht die Bindung von ATP an den Myosinkopf eine Konformationsänderung, die die Bindung an Aktin schwächt und damit eine Gegenbewegung von Aktin und Myosin erlaubt (Querbrückenzyklus). Die Erregungs-

30.4

Regeneration der Muskelzelle

Die Frage, ob und in welchem Umfang Regenerationsvorgänge in den verschiedenen Muskeltypen des Organismus ablaufen können, ist von erheblicher praktischer Bedeutung, da Muskelgewebe häufig Verletzungen unterliegt. Generell sind Cardiomyozyten und Skelettmuskelzellen nicht mehr teilungsfähig. Sie können sich also nur durch Hypertrophie, d.h. Zunahme des Zellvolumens ausdehnen. In allen Muskeltypen finden sich allerdings neben Myozyten auch stromale Zellen, sodass sich die Frage erhebt, inwieweit diese zur Muskelregenerierung beitragen können. Im Myokard machen die Myozyten zwar etwa 70% des Gewebevolumens, aber nur ein Drittel aller Zellen aus. Die Nichtmyozytenfraktion besteht hauptsächlich aus Fibroblasten, glatten Gefäßmuskelzellen, Endothelzellen und Makrophagen. Sie synthetisieren u.a. das kollagene Netzwerk, das die Anordnung der Myozyten im Rahmen der myokardialen Architektur bestimmt. Die Aktivität dieser

übertragung vom Nerven auf die Muskulatur erfolgt über Calcium-Ionen, die an Troponin C binden, wodurch Myosinbindungsstellen geöffnet werden, was den Kontraktionsvorgang auslöst. Bei der Muskelrelaxation wird ebenfalls ATP verbraucht, da die Calciumionen vom kontraktilen System entfernt werden müssen.

Zelltypen ist für pathobiochemische Prozesse von großer Bedeutung. Ein Beispiel ist die Akkumulation von Typ IKollagen bei der pathologischen Myokardhypertrophie. Eine Neubildung von Muskelzellen aus den verschiedenen zellulären Elementen des Herzens ist offensichtlich nicht möglich, weswegen Myokardinfarkte nur narbig ausheilen. In letzter Zeit ist jedoch beobachtet worden, dass eine gewisse Neubildung von Cardiomyozyten durch embryonale oder adulte Stammzellen erfolgen kann. Im Gegensatz zum Myokard kommen im Skelettmuskel einkernige Zellen ohne Myofibrillen vor, die als Satellitenzellen bezeichnet werden. Sie sind für die Neubildung von Muskelzellen nach Muskelverletzungen verantwortlich und liegen unter der Basalmembran der Skelettmuskelfasern, wo sie nur im elektronenoptischen Bild erkennbar sind. Glatte Muskelzellen besitzen nicht nur die Fähigkeit zur Biosynthese extrazellulärer Matrixproteine (Elastin, Kollagen, Glycosaminoglykane), sondern können sich auch teilen. Als Bestandteil von Gefäßendothelien, in denen sie proliferieren können, besitzen glatte Muskelzellen deshalb

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Kapitel 30 · Muskelgewebe

. Abb. 30.16. Signalwege, die den Muskelaufbau bzw. -abbau regulieren. a Die Bedeutung von Calcineurin für die Genexpression der Muskelzelle: Die Regulation der Genexpression im Muskel wird durch komplizierte und erst teilweise verstandene Regelnetzwerke kontrolliert. Mehrere normalerweise mitogene Signalwege über Rezeptortyrosinkinasen oder α1-adrenerge Rezeptoren führen zur Aktivierung kleiner G-Proteine (Ras und Rho-Familie) und schließlich zur Aktivierung von Proteinkinasen wie dem Ras-aktivierten MAP/ERKWeg, oder zur Aktivierung von Protein Kinase C. Durch Phosphorylierung von Transkriptionsfaktoren (NF-ATn, beispielsweise GATA-2 im Skelettmuskel oder GATA-4 im Herzmuskel) wird deren Transport in den Zellkern und ihre Transkriptionsaktivität kontrolliert. Durch Muskelaktivität oder Rezeptoraktivierung wird aus zellulären Speichern Calcium freigesetzt, wobei der Inositoltrisphosphat-Rezeptor wesentlich beteiligt ist. Durch die erhöhte intrazelluläre Calciumkonzentration wird die Ca2+-abhängige Proteinphosphatase Calcineurin aktiviert. Sie dephosphoryliert im Cytosol den Transkriptionsfaktor NF-ATc, der daraufhin in den Zellkern transportiert wird und zusammen mit den NF-ATn transkriptionell aktiv wird. αAR = α-adrenerge Rezeptoren; RTK = Rezeptortyrosinkinasen; Raf = Ras-aktivierte RafKinase; MEK = mitogen-activated protein kinase kinase; ERK = extracellular signal regulated kinase/mitogen activated protein kinase; IP3R = Inositol-tris-phosphat-Rezeptor; DAG = Diacylglycerin; PKC = Protein

große Bedeutung bei der Entstehung der Arteriosklerose und der erneuten Verengung (Restenose) der Herzkranzgefäße nach Traumen wie z.B. der Ballondilatation. ! Cytokine und Hormone regulieren Muskelwachstum und Hypertrophie sowie den Muskelabbau und Atrophie.

Wachstum und Hypertrophie von Muskelzellen werden durch muskelspezifische wie auch pleiotrope Transkriptionsfaktoren kontrolliert. Ihre Aktivität wird durch eine Vielzahl teilweise konvergierender Signalwege kontrolliert, die wiederum durch eine Reihe von Cytokin- oder hormon-

Kinase C b Regulation des Wechselspiels aus Muskelaufbau und Muskelabbau durch FOXO-1. Bei fehlender mechanischer Aktivität, bei Sepsis, Diabetes oder Kachexie kommt es über Abschaltung des Inositol-3-phosphat-Kinasenweg (PI3K) zu verringerter Aktivierung der Proteinkinase PKB. Damit wird die Phosphorylierung des Transkriptionsfaktors FOXO-1 (im Herzmuskel auch FOXO-3) reduziert. Der dephosphorylierte Transkriptionsfaktor wird in den Zellkern transportiert und aktiviert dort die Transkription von Atrophie-fördernden Genen (Atrogenen) wie MuRF oder Atrogin-1 (MAFbx1). Die erhöhte Expression dieser Proteine steigert den Proteinabbau über das Ubiquitin-Proteasom-System. Bei Aktivierung anaboler Signalwege, zum Beispiel über die Insulinrezeptorkinase (Insulin RK) oder den Rezeptor des insulinartigen Wachstumsfaktors-1 (IGF-1 RK) wird PKB vermehrt durch Phosphorylierung aktiviert, und über die Aktivität nachgeschalteter Proteinkinasen wie die Glycogen-Synthase-Kinase (GSK), mTOR und S6 Kinase (S6K) kommt es zu gesteigerter Proteinsynthese. Über diesen Signalweg stehen anabole und katabole Signale im dynamischen Gleichgewicht

stimulierten Rezeptoren aktiviert werden. Auch die mechanische Aktivität des Muskels selbst wirkt als wachstumsstimulierender Reiz. Als zentrales signalverarbeitendes Molekül bei vielen dieser Prozesse dient die Calcium-abhängige Proteinphosphatase Calcineurin (7 Kap. 9.2.1). Sie wird u.a. durch erhöhte intrazelluläre Calciumkonzentrationen (wie sie durch andauernde Muskelaktivierung entstehen) sowie über hormonelle Stimulierung durch Wachstumsfaktoren wie IGF-1 7 Kap. 27.7.2) aktiviert. Durch ihre Phosphatase-Aktivität wird u.a. der Transkriptionsfaktor NF-ATc1 aktiviert und in den Zellkern transloziert, wo er zusammen mit anderen

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myogenen Faktoren wie NF-Atc, GATA-2 und -4, MyoD und MYF2 positiv auf die Transkription muskelspezifischer Gene wirkt (7 Kap. 16.2.3). Über die parallele Aktivierung pleiotroper Genexpression, v.a. über den Transkriptionsfaktor NF-NB, kommt es zur Anpassung allgemeiner zellulärer Funktionen wie z.B. des Energiestoffwechsels (. Abb. 30.16). Als Besonderheit sowohl des Herz- wie des Skelettmuskels gilt, dass in diesen postmitotischen Zellen die Aktivierung ansonsten mitogener Signalwege, wie z.B. der kleinen GTPasen Ras und Rho, oder der Tyrosinkinase Src, zur Zelldifferenzierung und Hypertrophie anstatt zur Dedifferenzierung und Proliferation führen. Auch die Aktivierung von Cytokinrezeptoren der IL-6-Familie mündet in muskulärer Hypertrophie. Sowohl im Herz- wie auch im Skelettmuskel ist mechanische Aktivität einer der stärksten Regulatoren des Muskelwachstums über konvergierende Signalwege. Im Gegensatz dazu führt mechanische Inaktivität, wie beispielsweise bei Bettlägerigkeit oder bei Intensivpatienten, zum raschen Abbau von Muskelproteinen und zur transkriptionellen Repression ihrer Synthese (Inaktivitätsatrophie)

(. Abb. 30.16.b). Aber auch humorale Faktoren steigern den Abbau von Muskelproteinen, wie z.B. Cytokine der Tumornekrosefaktor-Familie, die bei Sepsis und Kachexie erhöht sind, sowie verringerte Insulinspiegel wie bei Diabetes. Die enge Beziehung zwischen Aktivität und Proteinumsatz wird wesentlich über das Ubiquitin-Proteasom-System reguliert, wobei muskelspezifische Ubiquitin-konjugierende Proteine (»Atrogene«) wie MuRF-1 und Atrogin-1 die zu degradierenden Muskelproteine mit Ubiquitin markieren und so dem Proteasom zuführen. Der Transkriptionsfaktor FOXO-1 reguliert hierbei die erhöhte Expression von Atrogin-1 und MuRF, sowie die Abschaltung speziell von Sarkomerproteinen. Durch anabole Signale, z.B. über den Insulinrezeptor und den Insulin-ähnlichen Wachstumsfaktor IGF-1, kommt es zur Phosphorylierung von FOXO-1 durch die Kinase PKB, wodurch FOXO-1 vom Zellkern ausgeschlossen und seine Funktion bei der Expression kataboler Gene gehemmt wird. In katabolen Situationen wird durch die verminderte Phosphorylierung von FOXO-1 dessen Translokation in den Zellkern ermöglicht, und damit die Expression von Atrogin-1 und MuRF erhöht.

In Kürze Während der Herzmuskel ein postmitotisches Organ darstellt, das auf Schädigungen nur mit einer Fibrosierung reagieren kann, können Skelett- und glatte Muskelzellen durch Aktivierung von Stammzellen (Satellitenzellen) regenerieren. Für das hypertrophische Wachstum von Herz- und Skelettmuskel ist die Cal-

30.5

Pathobiochemie: Angeborene und erworbene Muskelerkrankungen

Die normale Funktion der Muskeln beruht auf einem komplexen Zusammenspiel des kontraktilen Apparats und des Cytoskeletts mit den Membrankompartimenten, welche die ionale Zusammensetzung des Cytoplasmas steuern. Eine übergeordnete Kontrolle üben hierbei neuronale, hormonelle oder metabolische Signale aus. Demgemäß können sich Störungen in auch nur einer der vielen beteiligten Komponenten schnell in einer Muskelerkrankung manifestieren. Es gibt bisher noch keine umfassende, akzeptierte Klassifizierung aller dieser Krankheitsbilder; . Tabelle 30.4 versucht eine Gruppierung der wichtigsten Muskelerkrankungen vorwiegend nach funktionellen Gesichtspunkten. Bei vielen der genannten Muskelerkrankungen erlaubten die raschen Fortschritte der Molekularbiologie durch die Methode der positionellen Klonierung die Identifizierung der verantwortlichen Gene. Eine molekulare Analyse der Zusammenhänge zwischen Genmutationen und den dadurch bedingten klinischen Manifestationen sowie

cium-abhängige Proteinphosphatase Calcineurin von zentraler Bedeutung, welche die Aktivität muskelspezifischer Genexpression reguliert. Muskelabbau (Atrophie) wird durch die vermehrte Expression von Ubiquitinligasen (Atrogene) durch den Transkriptionsfaktor FOXO-1 vermittelt.

die Entwicklung neuer molekular orientierter Behandlungsansätze stehen deshalb im Zentrum der Erforschung dieser Muskelerkrankungen.

30.5.1

Angeborene Muskelerkrankungen

! Muskeldystrophien sind durch den fortschreitenden Schwund der Muskulatur gekennzeichnet.

Bei Patienten mit der schweren Dystrophie vom DuchenneTyp [beschrieben von G. Duchenne (Paris)] treten Symptome bereits im Alter von 2 bis 3 Jahren auf. Die Schwäche und Muskeldystrophie, v.a. der proximalen Muskulatur der unteren Extremität (. Abb. 30.17), schreitet unaufhaltsam fort, sodass die Patienten im Alter von 12 Jahren an den Rollstuhl gefesselt sind. Die meisten Patienten sterben im Alter von etwa 20 Jahren an Lungenkomplikationen. Bei der von Becker (Kiel) beschriebenen Dystrophie bleiben die Patienten bis etwa zum 15. Lebensjahr gehfähig. Beiden Dystrophien liegen Mutationen im Dystrophin-Gen zugrunde, einem mit 2,5 Mb und fast 80 Exons

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Kapitel 30 · Muskelgewebe

. Tabelle 30.4. Krankheiten der Muskulatur Muskuläre Dystrophien Duchenne’sche Muskeldystrophie Becker’sche Muskeldystrophie Emery-Dreyfuss-Muskeldystrophie Facioscapulohumerale Dystrophie Oculopharyngeale Muskeldystrophie Scapulohumerale Muskeldystrophie Pelvifemurale Muskeldystrophie Distale Myopathien Gliedergürtel-Muskeldystrophien dominant rezessiv X-chromosomal Congenitale Muskeldystrophien (central core, Centronucleäre, Congenitale Muskeldystropie, Nemaline Rod Myopathie) Muskelerkrankungen aufgrund veränderter Erregbarkeit des Sarcolemms Maligne Hyperthermie Paramyotonia Congenita Hypokalämische periodische Paralyse Dystrophe Myotonie QT-Syndrom (Ionenkanäle) Stoffwechselerkrankungen Saure Maltase-Defizienz Phosphorylase-Defizienz Carnitin-Palmitoyltransferase-Defizienz Erkrankungen des Fettstoffwechsels Mitochondriale Krankheiten (z.B. MELAS-Syndrom) McArdle-Syndrom Endokrine Myopathien Myopathien durch Drogen, Toxine und Nahrungsdefizienzen Muskelerkrankungen aufgrund neuronaler Krankheiten und neuromuskulärer Transmissionsstörungen Denervation Spinale und Bulbospinale Muskelatrophie Perineuritis motor neuron disease Myasthenia Gravis Entzündliche Myopathien: Polymyositis Dermatomyositis Acute virale Myositis Parasitische Myositis Calcinosis Focale Myositis Herzmuskel-Erkrankungen Familiäre hypertrophe Kardiomyopathie Dilatative Kardiomyopathie X-chromosomale Kardiomyopathie Barth-Syndrom Kardiomyopathien durch hämodynamische Belastung Weitere Muskelkrankheiten: Multibrey-Syndrom (Muscle-Liver-Brain-Eye Nanism) desmin-storage disease Calciphylaxis FSH-Dystrophie Barnes-Myopathie

. Abb. 30.17. Progressive Muskeldystrophie vom Typ Duchenne. Die Patienten zeigen Hyperlordose, Scapulae alatae, vorgestreckten Bauch, breitbeinigen Stand, atrophische Oberschenkelmuskulatur und Pseudohypertrophie der Waden (»Gnomenwaden«). (Aus Zöllner 1991)

sehr großen Gen auf dem X-Chromosom. Ein Drittel der Mutationen sind de-Novo-Mutationen. Das codierte Protein ist als Cytoskelettprotein in Assoziation mit den Plasmamembranen aller Muskel- (Herz, Gefäß, Skelett) und Fasertypen nachweisbar, weiterhin auch im zentralen und peripheren Nervensystem. In den einzelnen Geweben finden sich mindestens 5 verschiedene Dystrophinvarianten, je nachdem, wie das primäre Transkript gespleißt wird. Bei Duchenne-Patienten ist kein oder nur wenig Dystrophin mit der Western-Blot Technik nachweisbar, bei BeckerPatienten sind die Dystrophinmengen leicht reduziert oder die Größe des Proteins ist vermindert. Das Fehlen von Dystrophin führt zu einer Störung der Verbindung des subsarkolemmalen Cytoskeletts und dem GlycoproteinKomplex im Muskel. Dadurch wird das Sarkolemm während der Muskelkontraktion geschädigt, sodass es zum Zelluntergang (Nekrose) kommt. Molekulare Ursache sind partielle Gendeletionen, Punktmutationen oder Duplikationen. ! Myotone Muskelerkrankungen zeichnen sich durch eine verlangsamte Muskelrelaxation aus.

Die myotonen Muskelerkrankungen stellen eine heterogene Gruppe klinisch verwandter Krankheiten dar, die das gemeinsame Charakteristikum der Myotonie aufweisen, d.h. einer verlangsamten Relaxation des Muskels nach willkürlicher Kontraktion (Aktionsmyotonie) oder mechanischer Stimulation mit einem Reflexhammer (Perkussionsmyotonie). Bei der klassischen Myotonie bessert sich die Myotonie mit der Erwärmung der Muskulatur, während

1019 30.5 · Pathobiochemie: Angeborene und erworbene Muskelerkrankungen

. Abb. 30.18. Mutationen in den Domänen (D1-D4) des Natriumkanalproteins (lineare Darstellung) bei hyperkaliämischer Para-

lyse (hypP) und Paramyotonia congenita (PC). In rot der Spannungssensor. (Nach Ptacek et al. 1993)

sie sich bei der paradoxen Myotonie (Paramyotonie) mit wiederholter Muskelkontraktion verschlechtert. Elektrophysiologisch ist die Myotonie durch repetitive elektrische Aktivität von Muskelfasern charakterisiert. Die myotonen Muskelerkrankungen können auch mit Dystrophiezeichen vergesellschaftet sein.

treten in einem Arginylrest im S4-Segment der Domäne 4 (. Abb. 30.18) auf, d.h. dem Proteinanteil, der als Spannungssensor wirken soll. Die anderen beiden Mutationen liegen zwischen den Domänen 3 und 4, d.h. der Region, die als Inaktivierungstor dient. Bei der kongenitalen Myotonie, deren Symptome sich nach Muskelarbeit bessern, liegen Mutationen im Chloridkanalgen vor (Insertionsmutanten mit nachfolgender Störung der Transkription).

! Nicht-dystrophe Myotonien werden durch Mutationen in Ionenkanalproteingenen verursacht.

Zu den nicht-dystrophen Myotonien gehören die hyperkaliämische periodische Paralyse (hypP), die kongenitale Paramyotonie und die kongenitale Myotonie. Patienten mit hypP erfahren plötzlich eine schmerzlose Schwäche der Extremitäten, sodass sie oft nicht mehr gehen oder sich aus einem Stuhl erheben können. Die Anfallsdauer unterscheidet sich bei den einzelnen Formen der hypP, meist kehrt die normale Muskelkraft nach einigen Stunden zurück. Die hypP und die kongenitale Paramyotonie sind durch Mutationen in der D-Untereinheit des Natriumkanalgens bedingt (. Abb. 30.18). Bei beiden Krankheiten ist die NaKanalinaktivierung gestört, wenn erhöhte extrazelluläre Kaliumkonzentrationen vorliegen. Die Mutationen treten im S5-Segment (. Abb. 30.18) der Domäne 2 und dem S6-Segment der Domäne 4 auf. Obwohl sie damit nicht in der Verbindung zwischen den Domänen 3 und 4 liegen, die das Inaktivierungstor des Natriumkanals bilden, sind diese Mutationen wie das Tor im Bereich der cytosolischen Oberfläche des Kanals lokalisiert. Wie beide Mutationen dieselbe hypP verursachen können, ist noch unklar. Eine gestörte Inaktivierung des Natrium-Kanals liegt auch bei der kongenitalen Paramyotonie (Paramyotonia congenita, PC) vor. Klinische Symptome werden bei Abkühlung des Muskels hervorgerufen. Zwei der Mutationen

! Maligne Hyperthermie, eine lebensbedrohliche Störung des Calciumhaushalts des Muskels.

Die maligne Hyperthermie (MH) bezeichnet eine Gruppe autosomal-dominant vererbter Funktionsvarianten des Ryanodinrezeptors, die normalerweise asymptomatisch sind. Es handelt sich also nicht im eigentlichen Sinne um eine genetische Erkrankung. Bestimmte sog. Triggersubstanzen, zu denen v.a. die volatilen Anästhetika wie Halothan sowie bestimmte Muskelrelaxantien wie Succinylcholin gehören, lösen bei den Trägern der MH-Mutationen einen erhöhten Ca2+-Ausstrom aus dem SR des Skelettmuskels aus. Die stark erhöhten intrazellulären Ca2+-Konzentrationen lösen an den sarkomerischen Proteinen, v.a. dem Ca-regulierenden System des dünnen Filaments, eine supramaximale Aktivierung und daraus resultierend einen stark erhöhten ATP-Umsatz des Myosins aus. Als Folge entstehen ein Hypermetabolismus im Muskel und ein schneller, dramatischer Temperaturanstieg auf weit über 40°C. Ohne raschen Entzug des Triggers und Blockade des Ryanodinrezeptors kann die MH tödlich enden. ! Dystrophe Myotonien entstehen durch die Vermehrung von Triplett-Repeats in einem Proteinkinase-Gen.

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Kapitel 30 · Muskelgewebe

Diese Dystrophien sind die häufigsten im Erwachsenenalter und sind durch Muskelschwund und Myotonie sowie Erregungsleitungsstörungen im Herzen charakterisiert. Bei den Patienten ist ein Gen auf Chromosom 19 (q13.3) betroffen, das für eine Serin-Threonin-spezifische cycloAMP-abhängige Proteinkinase codiert, die Ionenkanalproteine phosphoryliert und so ihre Funktion moduliert. Von Mutationen ist jedoch nicht der codierende Teil betroffen, sondern das Triplett CTG, das normalerweise in 5 bis 35 Kopien am 3c-Ende des Proteinkinasegens vorliegt (triplett-repeats). Bei Patienten mit milden Formen der Erkrankung ist die Zahl dieses Tripletts auf mehr als 50, bei denen mit schwerer Manifestation auf über 2000 erhöht. Die Schwere der Erkrankung nimmt normalerweise mit der Übertragung auf die nächste Generation zu (Antizipation). Das bedeutet gleichzeitig eine Zunahme der Repeats. Auf der anderen Seite sind einzelne Familien beschrieben worden, bei denen mit der Übertragung auf die nächste Generation eine Abnahme der Repeats und damit der Manifestationen der Erkrankung einhergeht.

a

! Die familiäre hypertrophe Cardiomyopathie wird durch Mutationen in verschiedenen Sarkomerproteinen hervorgerufen.

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Diese Cardiomyopathie ist pathologisch-anatomisch durch eine Massenzunahme im Bereich des interventrikulären Septums (. Abb. 30.19), durch das Auftreten einer ungeordneten Myofibrillenstruktur und sekundär vermehrter interstitieller Fibrose gekennzeichnet. Die Krankheit kann milde verlaufen, ist aber auch die häufigste Ursache des plötzlichen Herztodes bei Kindern und jungen Er wachsenen. Alle bisher bekannten Gendefekte betreffen sarkomerische Proteine. Auch diese Erkrankung weist eine molekulare Heterogenität auf, da z.B. Mutationen 4 im Myosin-E-Schwerketten-Gen 4 aber auch im Troponin-T-Gen oder 4 im Tropomyosingen (die für Proteine der dünnen Myofilamente codieren) oder auch 4 im MyBP-C Gen (das für ein Protein der dicken Myofilamente codiert) oder auch die Cardiomyopathie hervorrufen können. Bisher wurden bei Familienuntersuchungen mehr als 20 verschiedene Punktmutationen im Myosin-E-Schwerketten-Gen nachgewiesen, die meist zu einer Änderung der Polarität der betroffenen Aminosäure führen. Auffälligerweise sind die meisten Mutationen auf den Kopfbereich des Myosins beschränkt. Wie diese Punktmutationen im E-Myosingen zur Cardiomyopathie führen, ist noch unklar, da nicht alle im Bereich der ATPase-Domäne oder in den Aktin- und leichte Myosinketten-bindenden Domänen liegen. Möglicherweise bedingen die Myosinmutanten eine Störung entweder der strukturellen Integrität der Sarkomere, der Wechselwirkung mit regulatorischen Proteinen

b

c . Abb. 30.19a–c. Hypertrophe Kardiomyopathie. a Hypertrophie des linken Ventrikels und des Kammerseptums als Kardinalzeichen. b Histologisches Korrelat: Bündel hypertrophierter Zellen in unregelmäßiger Anordnung. c Radiologisches Korrelat: links-ventrikuläre Betonung des Herzschattens

1021 30.5 · Pathobiochemie: Angeborene und erworbene Muskelerkrankungen

oder der funktionellen Wechselwirkungen zwischen den Myofilamenten (ähnlich wie bei Ehlers-Danlos-Syndrom). Die Art der Mutationen ist mit der Schwere der Erkrankung korreliert, d.h. isopolare Mutationen sind mit einer höheren Lebenserwartung verbunden. ! Patienten mit Glycogenspeicherkrankheiten klagen über vorzeitig auftretende körperliche Ermüdbarkeit.

Dem McArdle-Syndrom liegt ein vollständiger Defekt der Glycogenphosphorylase des Muskels zugrunde, wodurch sich der Glycogengehalt des Muskels auf mehr als das zehnfache der Norm erhöht. Da das Muskelglycogen bei körperlicher Belastung nicht abgebaut werden kann, resultieren eine vorzeitig auftretende körperliche Ermüdbarkeit und Muskelschwäche, die bei schwerer Belastung zu Lähmungserscheinungen führen kann. Durch eine Beeinträchtigung der Permeabilität der Muskelmembran treten die Kreatinkinase und Myoglobin in das Blutplasma über. Die Unfähigkeit Glycogen zu mobilisieren verursacht einen sekundären Pyruvatmangel, demzufolge die Patienten von der Verfügbarkeit alternativer Substrate wie freier Fettsäuren für ihren oxidativen Stoffwechsel während der Muskeltätigkeit abhängig sind. Die Krankheit ist auf molekularer Ebene heterogen, d.h. 90% der Patienten weisen eine AUG-Stopcodon-Mutation (Codon 49 im Exon 1), die übrigen verschiedene Aminosäuresubstitutionen auf. ! Mutationen in Genen der mitochondrialen DNA können Muskelerkrankungen verursachen.

Mitochondrien enthalten ihre eigene zirkuläre DNA (in 5 Kopien) mit einer Länge von etwa 16 kb für insgesamt 37 Gene. Diese Gene tragen die Information für 12 tRNAs, zwei rRNAs und 13 Polypeptide, die Bestandteile der Atmungskette und der oxidativen Phosphorylierung sind (verschiedene Untereinheiten der Komplexe I, II, IV und V). Eine der mitochondrialen Myopathien ist das MELASSyndrom (Mitochondriale Enzephalomyopathie mit Lactat-Azidose und Schlaganfällen), das durch Krampfanfälle, migräneartige Kopfschmerzen, Lactat-Azidose, gelegentliches Erbrechen und rezidivierende Schlaganfällen (die zu Muskellähmungen führen) gekennzeichnet ist. Bei Patienten mit MELAS-Syndrom sind Punktmutationen im Gen für die Leucin-tRNA beschrieben worden, die zu einer Mitochondrienschwellung führen, ohne dass im Einzelnen

bisher bekannt ist, wie Gendefekt, Mitochondrienveränderung und Zellschädigung zusammenhängen. ! Repolarisationsstörungen durch mutierte Ionenkanäle begünstigen Herzrhythmusstörungen.

Herzrhythmusstörungen machen etwa 10% aller natürlichen Todesfälle aus. Zu den angeborenen Ursachen gehört das QT-Syndrom (Verlängerung der QT-Zeit im EKG), das bei jungen, ansonst gesunden Menschen einen abrupt einsetzenden Bewusstseinsverlust (Synkope), Krämpfe und plötzlichen Tod aufgrund von ventrikulären Herzrhythmusstörungen hervorrufen kann. Viele Menschen mit QT-Syndrom haben ein verlängertes QT-Intervall im EKG, was für eine gestörte Repolarisation spricht. Ähnlich wie bei der familiären hypertrophen Cardiomyopathie sind auch beim QT-Syndrom die molekularen Ursachen heterogen: Mutationen in Genen für Kalium- (KVLQT1 bzw. HERG) oder Natriumkanalproteine (SCN5A) können das QT-Syndrom verursachen.

30.5.2

Erworbene Muskelerkrankungen

Änderungen des Stoffwechsels und der Expression verschiedener Gene in der Muskulatur treten als Folge von Änderungen der Schilddrüsen- und Nebennierenrindenfunktion auf. Trijodthyronin reguliert z.B. die Expression von Myosin-Isoformen, der Na+/K+-ATPase und der sarkoplasmatischen Ca2+-ATPase. Die durch hämodynamische Belastung entstehende Cardiomyopathie stellt ein wichtiges klinisches Problem dar. Gegenstand der molekular orientierten Herzforschung ist die Aufdeckung der Mechanismen, die für die Änderungen der Genexpression verantwortlich sind, die als Reaktion des Myokards auf Volumenbelastung, Ischämie oder Infarkt auftreten. Im Myokard sind die Polypeptidwachstumsfaktoren TGF-E und verschiedene FGFs nachweisbar. Diese dürften an der Änderung der Expression von Struktur- und Enzymproteinen (Myosin, Aktin) und von Ionenkanalproteinen, an der Aktivierung von Fibroblasten mit konsekutiver Typ-I-Kollagenakkumulation und von Fibrose entscheidend beteiligt sein. Daneben hemmt Bradykinin die Proliferation von Fibroblasten, wohingegen Angiotensin-II diese stimuliert.

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Kapitel 30 · Muskelgewebe

In Kürze Molekularbiologische Methoden haben es ermöglicht, erstmalig die molekularen Ursachen einzelner Muskelerkrankungen zu erkennen. Muskeldystrophien sind durch den fortschreitenden Schwund der Muskulatur gekennzeichnet. Mit Hilfe der positionellen Klonierung ist es gelungen, Mutationen im Gen für das Cytoskelettprotein Dystrophin bei der Duchenne-Muskeldystrophie als verantwortliches Gen zu identifizieren. Bei den myotonen Muskelerkrankungen führen Mutationen in Kanalproteinen für Natrium- bzw. Chloridionen zu den klinischen Symptomen der verlangsamten Relaxation des Muskels nach willkürlicher Kontraktion. Bei den dystrophen Myotonien treten Muskelschwund und Myotonien gleichzeitig auf. Bei diesen Patienten ist ein Gen für eine Proteinkinase mutiert, die Ionenkanalproteine phosphoryliert (Myotonien). Von der Mutation sind Triplett- (CTG-) Wiederholungen betroffen,

Literatur

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die bei Gesunden normalerweise in etwa 5–35 Kopien am nichttranslatierten 3c-Ende des Gens vorliegen. Bei Patienten ist in Korrelation zum klinischen Schweregrad die Zahl der Tripletts auf 50 bis zu 2000 erhöht. Hypertrophe Cardiomyopathien werden durch Mutationen in verschiedenen Sarkomerproteinen (Myosin-βSchwereketten, Myosin-Leichtketten, Troponin-T, Tropomyosin, MyBP-C) verursacht. Die molekulare Heterogenität reflektiert die unterschiedliche klinische Ausprägung der Erkrankung, d.h. insbesondere auch das Risiko eines plötzlichen Herztods. Die durch hämodynamische Belastungen entstehenden Cardiomyopathien sind die häufigsten und sehr schwerwiegenden erworbenen Muskelerkrankungen. Pathobiochemisch steht die Erforschung der Ursachen der für die veränderten strukturellen und funktionellen Eigenschaften des Myokards verantwortliche Genexpression im Vordergrund.

Holmes KC, Geeves MA (2000) The structural basis of muscle contraction. Phil Trans Roy Soc Lond B 355:419–431 Huxley HE (1969) The Mechanism of Muscular Contraction. Science 164:1356–1366 Mackrill JJ (1999) Protein-protein interactions in intracellular Ca2+release channel function. Biochem J 337:345–361 Meissner G (1994) Ryanodine Receptor/Ca2+ release channels and their regulation by endogenous effectors. Annu Rev Physiol 56:485–508 Pette D, Staron RS (1997) Mammalian skeletal muscle fiber type transitions. Int Rev Cytol 170:143–223 Ptacek LJ et al. (1993) Genetics and physiology of the myotonic muscle disorders. New Engl J Med 328:482–489 Rayment I, Holden HM (1994) The three-dimensional structure of a molecular motor. TIBS 19:129–134 Schiaffino, S. and Serrano, A. (2002) Calcineurin signaling and neural control of skeletal muscle fiber type and size. Trends Pharmacol Sci 23:569–575 Steinberg SF (1999) The Molecular Basis for Distinct E-Adrenergic Receptor Subtype Actions in Cardiomyocytes. Circ Res 85:1101– 1111 Towbin JA (1998) The role of cytoskeletal proteins in cardiomyopathies. Curr Opin Cell Biol 10:131–139 Winegrad S (1999) Cardiac Myosin Binding Protein C. Circ Res 84:1117– 1126 Links im Netz 7 www.lehrbuch-medizin.de/biochemie

31 31

Nervensystem Astrid Scheschonka, Heinrich Betz, Cord-Michael Becker

31.1

Stoffwechsel des Gehirns

31.1.1 31.1.2

Energiestoffwechsel des Gehirns – 1024 Blut-Hirn-Schranke und Liquor cerebrospinalis – 1025

– 1024

31.2

Neuronale Zellen – 1029

31.2.1 31.2.2 32.2.3

Struktur von Nervenzellen – 1029 Membranpotential und Erregungsleitung Synapsen: Aufbau und Funktion – 1034

31.3

Chemische Signalübertragung zwischen Neuronen – 1036

31.3.1 31.3.2 31.3.3 31.3.4 31.3.5 31.3.6 31.3.7 31.3.8

Allgemeine Prinzipien – 1036 Glutamat – 1038 Acetylcholin – 1039 Glycin und γ-Aminobutyrat (GABA) – 1040 Dopamin, Noradrenalin und Adrenalin – 1041 Serotonin – 1042 ATP/Adenosin – 1044 Peptiderge Neurotransmitter – 1044

31.4

Nicht-neuronale Zellen – 1045

31.4.1 31.4.2 31.4.3

Gliazellen und Myelin – 1045 Demyelinisierungen und erbliche periphere Neuropathien Besonderheiten des peripheren Nervensystems – 1047

– 1030

– 1047

31.5

Neurodegenerative Krankheiten – 1048

31.5.1 31.5.2 31.5.3 31.5.4

Morbus Alzheimer – 1048 Polyglutamin-Krankheiten – 1049 Morbus Parkinson – 1049 Prionkrankheiten – 1050

31.6

Neuronale Stammzellen und neurotrophe Faktoren – 1051 Literatur

– 1051

1024

Kapitel 31 · Nervensystem

> > Einleitung Das Nervensystem verarbeitet die von den Sinnesorganen aufgenommenen äußeren Reize, steuert die Motorik und koordiniert viele Vitalfunktionen des Organismus. Die komplexen Leistungen des Gehirns führen zu einem hohen Energiebedarf, der hauptsächlich durch Glucose gedeckt wird. Das zentrale Nervensystem (ZNS) ist vom Liquor cerebrospinalis umgeben, der durch Abfiltration von Blutplasma gebildet wird. Vor Schwankungen des Stoffwechsels und Schadstoffen wird das Gehirn durch die Blut-Hirn-Schranke geschützt. Vom Gehirn benötigte Substrate passieren die Endothelzellen des Schrankensystems durch Transzytose. Die Erregungsleitung im Nervensystem beruht auf den Funktionen der membranständigen Na+/K+-ATPase und spannungsregulierter Kanäle für Natrium-, Kalium-, Calcium- und Chloridionen. Die neuronale Erregungsleitung wird durch lipidhaltige Myelinscheiden beschleunigt. Neurone kommunizieren vorwiegend über chemische Synapsen, an denen ein Neurotransmitter aus der präsynaptischen Nervenendigung freigesetzt wird. Die Bindung des Transmitters an postsynaptische Rezeptoren führt zur Erregung oder Hemmung der nachgeschalteten Nervenzelle oder Muskelfaser. Nach seiner Freisetzung wird der Transmitter wieder in die präsynaptische Nervenendigung und umliegende Gliazellen aufgenommen oder durch enzymatischen Abbau inaktiviert. Die große molekulare Vielfalt der Ionenkanäle und Rezeptoren des Nervensystems trägt zur hohen Spezifität der neuronalen Informationsverarbeitung bei. Störungen von Reizleitung und synaptischer Erregungsübertragung können zu Lähmungen, Epilepsie, Depression und Demenz führen. Von besonderer Bedeutung für die Ontogenese des Nervensystems sind Wachstumsfaktoren und Adhäsionsmoleküle auf der Oberfläche von Neuronen und Gliazellen, welche die Verschaltung und das Wachstum von Nervenzellen regulieren.

31.1

Stoffwechsel des Gehirns

31.1.1

Energiestoffwechsel des Gehirns

! Das Gehirn benötigt eine ständige Glucosezufuhr, verwertet aber nach längerem Fasten und bei Säuglingen auch Ketonkörper.

31

Das Gehirn beansprucht einen hohen Anteil am Energiestoffwechsel des Körpers. Obwohl das Gehirn beim Erwachsenen mit 1,4 kg nur einen Anteil von 2% am Körpergewicht besitzt, entspricht seine Durchblutung von 750 ml/ min mit 15% einem wesentlich größeren Anteil am 5 l umfassenden Minutenvolumens des Herzens. Rückschlüsse auf den Stoffwechsel des Gehirns gewinnt man durch Bestimmung des arteriovenösen Konzentrationsunterschieds der Metaboliten im Blut der Hirngefäße. Um die Substratextraktion bei einer Hirnpassage zu ermitteln, wird arterielles Blut aus einer Arterie des Arms und venöses Blut der V. jugularis interna entnommen. Wie aus . Tabelle 31.1 . Tabelle 31.1. Arteriovenöse Differenzen verschiedener Substrate nach Hirnpassage (Durchschnittswerte bei 50 ruhenden Probranden im Alter von 18–29 Jahren) Substrat

Sauerstoff Kohlendioxyd

Blutkonzentration [mmol/l]

Arterivenöse Differenz

Arteriell

[mmol/l]

8,75

Venös 5,75

–3

21,5

24,4

+2,9

Glucose

5,1

4,6

–0,5

Lactat

1,1

1,27

+0,17

Pyruvat

0,1

0,12

+0,02

hervorgeht, liegt der respiratorische Quotient, das Verhältnis von abgegebenem Kohlendioxid zu aufgenommenem Sauerstoff, unter Normalbedingungen bei 1.0. Dieser Wert besagt, dass das Gehirn hauptsächlich Kohlenhydrate verstoffwechselt (7 Kap. 21.1.4). Weil das zentrale Nervensystem (ZNS) jedoch kaum Glycogen speichert, hängt es von einer kontinuierlichen Glucosezufuhr ab. Infolge der Abhängigkeit des Gehirns von ständiger Glucosezufuhr führt ein Abfall des Blutglucosespiegels (Hypoglykämie) rasch zu Bewusstlosigkeit, irreversiblen Funktionsausfällen und schließlich zum Tod. Etwa 20% der ATP-Bildung werden für den Erhalt der Ionengradienten an den Membranen benötigt. Daher beeinflussen Änderungen der neuronalen Aktivität wiederum den ATP-Gehalt und somit Glucose- und Sauerstoffverbrauch des Gehirns. Die Stoffwechselaktivität des gesamten Gehirns schwankt bei gesunden Menschen trotz regionaler Unterschiede nur wenig und bleibt auch im Schlaf hoch. Im Koma nimmt der Stoffwechsel demgegenüber deutlich ab, während die Glucoseaufnahme bei einem epileptischen Anfall infolge der erhöhten neuronalen Aktivität massiv gesteigert ist. Die Glucoseaufnahme einzelner Hirnregionen lässt sich in der Positronen-Emissions-Tomographie (PET) mit dem nuklearmedizinischen Marker 18F-Desoxyglucose (FDG) in Schnittbildern (Tomographien) erfassen. Bei längerem Fasten stellt sich der Energiestoffwechsel des Gehirns um: Im Hungerzustand können die Ketonkörper Acetacetat und β-Hydroxybutyrat vom ZNS oxidiert werden und Glucose als Energielieferant weitgehend, aber nicht vollständig ersetzen. Nach 120-stündigem Fasten steigt die Ketonkörperverwertung auf das 20-fache (. Abb. 31.1). Gleichzeitig sinkt die Glucoseaufnahme um die Hälfte, wobei die aufgenommene Glucose überwiegend als Lactat abgegeben und wieder für die Gluconeogenese ver-

1025 31.1 · Stoffwechsel des Gehirns

D-Aminosäuren des ZNS aus. Im Glutamat-GlutaminZyklus wird von Gliazellen freigesetztes Glutamin erneut von Neuronen aufgenommen und durch mitochondriale Glutaminase (7 Kap. 13.5.2) der aktive Neurotransmitter Glutamat regeneriert. Alternativ kann das Kohlenstoffskelett von Glutamat aus Glucose synthetisiert werden: Pyruvat liefert durch Carboxylierung zu Oxalacetat oder dehydrierende Decarboxylierung zu Acetyl-CoA die Produkte, aus denen im Citratzyklus D-Ketoglutarat gebildet wird. Transaminierung von D-Ketoglutarat führt schließlich zu Glutamat. Auch das an der Synapse freigesetzte GABA unterliegt einem Stoffwechselzyklus, indem es in den GABAShunt (engl. GABA-Nebenweg) eingeht (7 Kap. 31.3.4). Tyrosin ist der Vorläufer für die Biosynthese der Neurotransmitter Dopamin und Noradrenalin sowie des Hormons Adrenalin (7 Kap. 26.3.2, 31.3.5), während die Biosynthese von Serotonin und Melatonin von Tryptophan (7 Kap. 13.6.6, 31.2.6) ausgeht. . Abb. 31.1. Substratverwertung des menschlichen Gehirns bei längerem Hungern. Aus arteriovenösen Differenzen sowie der Durchblutung wurden Glucose- und Ketonkörperaufnahme sowie Lactatabgabe ermittelt

fügbar wird. Damit verhält sich das Gehirn im Hungerzustand ähnlich wie die Muskulatur (7 Kap. 16.2.3). Während der Stillzeit verwendet das Säuglingsgehirn Ketonkörper viel effizienter als das Hirn eines Erwachsenen. Nach der Geburt steigen die Aktivitäten der Ketonkörper verwertenden Enzyme β-Hydroxybutyrat-Dehydrogenase und Succinyl-CoA-Acetacetyl-CoA-Transferase deutlich an und ermöglichen damit eine optimale Ausnutzung des hohen Fettanteils der Muttermilch. Infolgedessen tolerieren Säuglinge wesentlich geringere Blutglucosekonzentrationen (20–30 mg/dl, entspricht 1,2–1,8 mmol/l) ohne neurologische Ausfälle als Erwachsene. Glucose kann jedoch auch beim Säugling nicht vollständig durch Ketonkörper ersetzt werden. Nach dem Abstillen und der Umstellung des Kleinkindes auf kohlenhydratreiche Nahrung fallen die Ketonkörper metabolisierenden Enzymaktivitäten ab. Danach ist das Gehirn wieder überwiegend von Glucose abhängig. ! Aminosäuren sind wichtige Substrate des Gehirnstoffwechsels. Sie spielen im Nervensystem eine bedeutende Rolle als Neurotransmitter oder deren Vorläufer.

Glutamat ist nicht nur der wichtigste erregende Neurotransmitter im ZNS, sondern dient auch als Vorläufer des hemmenden Neurotransmitters γ-Aminobutyrat (GABA). Beide Transmitter werden in den präsynaptischen Vesikeln der Neurone in hohen Konzentrationen (bis zu 100 mmol/l) gespeichert. An Synapsen freigesetztes Glutamat wird großenteils von Gliazellen aufgenommen und durch Übertragung von Ammoniak in Glutamin überführt. Glutamat und Glutamin machen zusammen bis zu 60% der freien

31.1.2

Blut-Hirn-Schranke und Liquor cerebrospinalis

! Die Blut-Hirn-Schranke beruht auf der besonderen Architektur der Kapillaren des Gehirns und des Plexus choroideus, in dem der Liquor cerebrospinalis als proteinarmes Filtrat des Blutplasmas gebildet wird.

Die Blut-Hirn-Schranke isoliert das ZNS und den umgebenden Liquor cerebrospinalis (engl.: cerebrospinal fluid, CSF) von den übrigen Organen des Körpers. Dadurch trägt sie dazu bei, dass das extrazelluläre Milieu des Gehirns konstant gehalten wird. Der proteinarme Liquor füllt Gehirnventrikel und Subarachnoidalraum aus. Seine Zusammensetzung ähnelt derjenigen der interstitiellen Flüssigkeit es Gehirns (. Abb. 31.2). Das Liquorvolumen entspricht mit ca. 150 ml etwa einem Zehntel des Hirnvolumens. Die Blut-Hirn-Schranke stellt keine einheitliche Grenzfläche zwischen Blutplasma und ZNS dar, sondern umfasst zwei unterschiedliche Schrankenfunktionen, die den Stoffaustausch zwischen Körper, Gehirn und Liquor regulieren (. Abb. 31.2): 4 Der Liquor wird im Plexus choroideus der Hirnventrikel aus Blutplasma abfiltriert. Diese Grenzfläche beruht auf der besonderen Architektur des Plexus choroideus und wird als Blut-Liquor-Schranke bezeichnet. Die Liquorsekretion erreicht mit ca. 0,4 ml/min ein Drittel der Urinbildung und erlaubt einen dreifachen Umsatz des Liquorvolumens pro Tag. Mit der interstitiellen Flüssigkeit des Gehirns tauscht sich der Liquor durch Diffusion aus 4 Der direkte Stoffaustausch zwischen Blutplasma und Hirnparenchym erfolgt über die Hirnkapillaren, die ebenfalls eine charakteristische Architektur aufweisen und die Blut-Hirn-Schranke im engeren Sinne bilden

31

1026

Kapitel 31 · Nervensystem

31 . Abb. 31.2. Kompartimente der Blut-Hirn-Schranke. Schematische Darstellung der Flüssigkeitskompartimente im Gehirn und ihrer wechselseitigen Beziehungen. Die Neubildung von Liquor erfolgt durch Filtration am Plexus choroideus, ein weiterer Stoffaustausch erfolgt an den Hirnkapillaren. Über die Pacchioni-Granulationen wird der Liquor in die Sinus und damit ins venöse Blut drainiert. Unten: An der Bildung der Blut-Hirn- und der Blut-Liquor-Schranke beteiligte Strukturen. Innerhalb der Ventrikel wird der Extrazellulärraum durch das Ependym vom Liquorraum getrennt, an der Oberfläche von

Gehirn und Rückenmark dagegen durch die Pia mater. Oben links: Blut-Hirn-Schranke mit Querschnitt durch eine Hirnkapillare. Die Endothelzellen bilden eine geschlossene Begrenzung der Kapillare; zwischen Endothelzellen und Perizyten bzw. Astrozyten liegt eine kontinuierliche Basalmembran. Oben rechts: Querschnitt durch die mehrschichtige Blut-Liquor-Schranke mit Endothel der Plexuskapillaren, Basalmembran und über Zonulae occludentes verbundenen Plexusepithelien. Das Endothel vermittelt einen regen Stofftransport durch Transzytose

Bei der Neubildung im Plexus choroideus wird Liquor als proteinarmes Filtrat durch eine mehrschichtige Barriere (. Abb. 31.2) aus Blutplasma abgepresst. Der Übertritt von Plasmabestandteilen in den Liquor wird durch ihren hydrodynamischen Molekülradius und ihre Fettlöslichkeit bestimmt. Die erste Schicht des Filters wird durch Plexuskapillaren gebildet, die ein stark fenestriertes Endothel besitzen. Während hier korpuskuläre Blutbestandteile zurückgehalten werden, können große Proteine und sogar kleine Viren diese erste Barriere noch passieren. Zusätzlich vermitteln die Endothelzellen durch Transzytose in Vesikeln einen regen Stofftransport aus dem Blut in das Liquorfiltrat. Eine dichte Basalmembran aus Proteoglykanen und Kollagenfasern, die das Endothel umgibt, wirkt als Proteinfilter. Eine erheblich dichtere Barriere stellen jedoch die über Zonulae occludentes miteinander verbundenen

Plexusepithelien dar. Diese Zonulae occludentes bilden an den Kontaktstellen der Zellen gelegene Poren aus und wirken als Mikrofilter, die größere Serumproteine wie Immunglobuline (z.B. IgG, IgM) zurückhalten, kleinere Moleküle aber eher passieren lassen. An der Blut-Liquor-Schranke korreliert die Permeabilität von wasserlöslichen Molekülen daher mit dem hydrodynamischen Radius. Lipophile Substanzen diffundieren dagegen durch die Zellmembranen des Endothels. Außerhalb des Plexus choroideus wird die Ventrikeloberfläche durch Ependymzellen ausgekleidet. Über das Ependym hinweg besteht zwischen Liquorraum und Interstitialflüssigkeit des Hirnparenchyms keine definierte Permeabilitätsbarriere, sondern ein Diffusionsgradient. Der direkte Stoffaustausch zwischen Plasmaraum und Hirnparenchym erfolgt an der Blut-Hirn-Schranke (im engeren Sinne) über die Hirnkapillaren. Deren Aufbau

1027 31.1 · Stoffwechsel des Gehirns

unterscheidet sich vom Plexusendothel am Ort der Liquorfiltration. Die über Schlussleisten (tight junctions) fest miteinander verbundenen Endothelzellen der Hirnkapillaren werden von einer kontinuierlichen Basalmembran umgeben, auf der in dichter Anordnung Perizyten und Ausläufer von Astrozyten sitzen (. Abb. 31.2). Durch diesen Aufbau ist die Permeabilität der Kapillaren des Gehirns im Vergleich zu anderen Geweben relativ gering. Im Gegensatz zur Liquorfiltration am Plexus choroideus wird der Stoffaustausch an den Hirnkapillaren durch membranständige Transporter bestimmt. Aminosäuren und Glucose, die entscheidenden Energiequellen des Gehirns, passieren die Blut-Hirn-Schranke durch erleichterten Transport über Aminosäuretransporter bzw. den Glucosetransporter GLUT-1. Ionen und andere Stoffe werden durch Diffusion oder aktiven Transport aufgenommen, während die Transzytose hier keine Rolle spielt. Zahlreiche lipophile Substanzen, darunter das am GABAA-Rezeptor angreifende Beruhigungsmittel Diazepam (Valium ), können die Blut-Hirn-Schranke leicht überwinden. Andere lipophile Verbindungen werden jedoch durch Transportsysteme wie das P-Glycoprotein (7 Kap. 6.1.5) wieder in das Kapillarlumen zurücktransportiert und dadurch an der Passage gehindert. Beim Erwachsenen verhindert die Blut-Hirn-Schranke bei Erhöhung des Plasmaspiegels einen Bilirubindurchtritt. Da die Blut-Hirn-Schranke nach der Geburt noch nicht voll ausgebildet ist, kann bei der persistierenden Hyperbilirubinämie der Säuglinge Bilirubin in den Kerngebieten des Stammhirns abgelagert werden und zu Hirnschäden führen (Kernikterus, 7 Kap. 20.4.1). Von seinem Bildungsort in den Hirnventrikeln strömt der im Plexus choroideus abfiltrierte Liquor über den Aquaeduct in den Subarachnoidalraum, der den äußeren Liquorraum darstellt. Durch die über dem Großhirn gelegenen Pacchioni-Granulationen wird der Liquor in die venösen Sinus, entlang des Rückenmarks an den Abgängen der Spinalnerven in venöse Plexus oder Lymphgefäße drainiert. Entlang seiner ventrikulolumbalen Strömungsrichtung ändert sich die Zusammensetzung des Liquors, wobei insbesondere der Proteingehalt zunimmt.

®

! Blut-Hirn-Schranke und Liquor dienen der Konstanthaltung des extrazellulären Milieus im Zentralnervensystem.

In ihrer Gesamtheit ist die Blut-Hirn-Schranke: 4 für Gase wie CO2, O2 und NH3 permeabel 4 für hydrophile, niedermolekulare Substanzen sowie 4 für Elektrolyte wie HCO3– oder NH4+ und Aminosäuren jedoch kaum durchlässig

lium, Chlorid, 7 Kap. 28.4.3, 28.5.2), geschützt. So kann die Kaliumkonzentration von Liquor cerebrospinalis und interstitieller Flüssigkeit des Gehirns auch bei Veränderungen des Plasmakaliums weitgehend konstant gehalten werden. Nur bei niedrigen extrazellulären Kaliumkonzentrationen ist die Funktion von Neuronen und Gliazellen gewährleistet, da der Kaliumgradient an der Plasmamembran das neuronale Transmembranpotential bestimmt. Dennoch kann sich die geringe Durchlässigkeit der Blut-Hirn-Schranke für Elektrolyte auch nachteilig auswirken, wenn die Plasmaosmolarität (7 Kap. 1.2.3) z.B. infolge einer Hyperhydratation (7 Kap. 28.3.3) abfällt. Bei Hyperhydratation bildet sich ein osmotischer Gradient zwischen Blut und Gehirn aus. Da die osmotisch aktiven Substanzen durch die BlutHirn-Schranke nur langsam ins Blut übertreten, strömt zum osmotischen Ausgleich Wasser aus dem Extrazellulärraum in Liquorraum und Gehirn ein. Dadurch entwickelt sich ein Hirnödem mit ansteigendem intrakraniellen Druck, der zum Absinken der Hirndurchblutung und zur Einklemmung lebenswichtiger Strukturen des Stammhirns führen kann. ! Der Hydrogencarbonatpuffer bestimmt den pH-Wert des Liquors.

Die Säure-Basen-Pufferung des Liquor cerebrospinalis erfolgt vorwiegend durch das Kohlendioxid-Hydrogencarbonat-System (7 Kap. 1.2.6), da Liquor nur wenig Protein und kein Hämoglobin enthält. Aufgrund einer anderen Elektrolytzusammensetzung (. Tabelle 31.2) ist der pKcWert des Kohlendioxid-Hydrogencarbonat-Systems gegenüber Blut leicht erhöht. Als apolares Gas passiert CO2 die Blut-Hirn-Schranke leichter als Hydrogencarbonationen. Daher teilen sich Änderungen der extrazellulären CO2Konzentration dem Liquorraum rasch mit, während die Hydrogencarbonatkonzentration im Liquor der Blutkonzentration nur verzögert und unvollständig folgt. So findet man bei chronischen nichtrespiratorischen Azidosen und Alkalosen, bei denen zunächst der Hydrogencarbonatspiegel betroffen ist, einen nahezu unveränderten pH-Wert des Liquor. Bei respiratorischen Azidosen und Alkalosen verschiebt sich dagegen das Liquor-pH gleichsinnig zum arteriellen Wert. ! Die Konzentrationen von Aminosäuren sind bis auf Glutamin im Liquor cerebrospinalis gering. . Tabelle 31.2. Konzentrationsvergleich (mmol/l) der Ionenkonzentrationen in Liquor cerebrospinalis und Blutplasma Substanz Na

+

K+

Das Gehirn wird durch die Blut-Hirn-Schranke vor Belastungen des Organismus, wie z.B. nichtrespiratorischen Störungen des Säure-Basen-Gleichgewichts (7 Kap. 28.8.6) oder Störungen des Elektrolytstoffwechsels (Natrium, Ka-

Ca

2+

Cl– HCO3

–

Liquor

Plasma

150

145

21,5

24,4

5,1

4,6

1,1

1,27

0,1

0,12

31

1028

Kapitel 31 · Nervensystem

Mit Ausnahme von Glutamin, das den gleichen Gehalt wie im Plasma aufweist, erreichen die meisten Aminosäuren im Liquor nur geringe Konzentrationen. So betragen die Liquorkonzentrationen der als Neurotransmitter wirkenden Aminosäuren Glutamat und Glycin nur 3–10% ihrer Plasmakonzentration. Ein Schlaganfall oder ein Schädel-Hirn-Trauma können zu einer freien Permeabilität von Aminosäuren in die interstitielle Flüssigkeit des Gehirns führen und die synaptische Signalübertragung durch Überaktivierung der Neurotransmitter-Rezeptoren erheblich beeinträchtigen (Exzitotoxizität; 7 Kap. 31.3.2). ! Änderungen der Liquorzusammensetzung haben diagnostische Bedeutung.

31

Erkrankungen des Nervensystems gehen häufig mit Liquor veränderungen einher. So kommen Schrankenstörungen, d.h. Veränderungen der Permeabilität der Blut-Hirn-Schranke, häufig bei Entzündungen des ZNS vor. Zur Labordiagnostik wird Liquor durch Lumbalpunktion gewonnen und auf folgende Parameter untersucht: 4 Zellzahl: Während normaler Liquor fast zellfrei ist (1–4 Zellen/ml), führt z.B. eine bakterielle Meningitis zu Zellvermehrungen auf >1000 Zellen/ml. In der akuten Phase handelt es sich überwiegend um Granulozyten 4 Glucose: Der Glucosegehalt von Liquor cerebrospinalis liegt bei 60% des Blutglucosespiegels und ist daher nur im Vergleich mit dem Blutwert aussagekräftig. Abnahmen der Liquorglucose sind für bakterielle oder durch Tumoraussaat bedingte Entzündungen der Meningen charakteristisch 4 Lactat: Zusammen mit einem Abfall des Liquorglucosespiegels weist ein erhöhter Lactatgehalt (>2,1 mmol/l) auf eine bakterielle oder neoplastische Erkrankung hin, z.B. eine tuberkulöse Meningitis 4 Gesamtprotein: Liquor cerebrospinalis ist ein proteinarmes Plasmafiltrat, dessen Gesamtproteingehalt (8 × 103)

. Abb. 31.3. Oligoklonale Immunglobulin-Banden in Liquor cerebrospinalis. Bei der Liquoruntersuchung durch isoelektrische Fokussierung werden zusätzlich oligoklonale Banden sichtbar, während im Serum nur polyklonale Banden gefunden werden. Dieser Befund weist auf eine lokale Synthese von Immunglobulinen im Liquorraum hin und ist für Entzündungen des ZNS typisch. (Aus: Poeck/Hacke, Neurologie)

4 Immunglobulin G: Einerseits gelangen Immunglobuline mit dem Plasmafiltrat in den Liquor, andererseits werden sie bei chronischen Entzündungen des Nervensystems intrathekal, d.h. im Liquorraum, gebildet. Das Ausmaß der intrathekalen Immunglobulin G-Synthese wird erfasst, indem deren Liquor/Serum-Quotient (QIgG) mit dem Quotienten für Albumin (Qalb) in Beziehung gesetzt wird. Aus dem Verhältnis von QIgG und Qalb wird die Größe der lokal synthetisierten Immunglobulin-G-Fraktion ersichtlich, die z.B. bei Neuroborreliose (Lyme Disease) ein Drittel des ImmunglobulinG-Gehalts von Liquor erreichen kann. Da bei Entzündungen eine begrenzte Zahl von Plasmazellklonen gegen spezifische Antigene selektioniert werden, stellen sich in der elektrophoretischen Analyse (isoelektrische Fokussierung) von Immunglobulinen G oligoklonale Banden dar, die jeweils einem spezifischen Antikörper entsprechen. Der Nachweis eines vom Serum abweichenden oligoklonalen Bandenmusters im Liquor (. Abb. 31.3) bestätigt eine intrathekale Immunreaktion, wie sie bei z.B. Multipler Sklerose fast regelmäßig nachgewiesen wird Pathobiochemie: Das Auftreten von Proteinen, die normalerweise in Liquor cerebrospinalis nur in geringer Konzentration vorkommen, weist auf eine Schädigung des Gehirns oder seiner Hüllen durch Entzündungen, Tumoren oder degenerative Erkrankungen hin. Zu den differentialdiagnostisch verwertbaren Markern gehören das karzinoembryonale Antigen (CEA) bei Karzinomen und E2-Mikroglobulin bei Lymphomen.

1029 31.2 · Neuronale Zellen

In Kürze Das Gehirn deckt seinen Energiebedarf überwiegend mit Glucose. Ein plötzlicher Abfall des Blutglucosespiegels (Hypoglykämie) kann zu schweren Störungen der Gehirnfunktion führen. Im Säuglingsalter und nach langsamer Adaptation bei Nahrungskarenz kann das Gehirn Ketonkörper verwerten. Die Blut-Hirn-Schranke trennt durch ihren besonderen Aufbau Gehirn und Blutkreislauf. Deshalb müssen sowohl vom Gehirn benötigte Substanzen als auch Stoffe,

31.2

Neuronale Zellen

31.2.1

Struktur von Nervenzellen

Das menschliche Gehirn besitzt etwa 1011 Neurone, deren Verbund die zelluläre Basis für alle Gehirnleistungen schafft. Ein Neuron besteht aus (. Abb. 31.4): 4 einem Zellkörper (Soma) mit einer Vielzahl weit verästelter Fortsätze (Neuriten) 4 Dendriten, die dem Erregungsempfang dienen. Sie leiten ihre Impulse als Potentialschwankungen überwiegend elektrotonisch, ohne Aktionspotentiale auszulösen, zum Soma weiter 4 myelinisierten und nichtmyelinisierten Axonen. Diese leiten Erregungssignale in Form von Aktionspotentialen weiter bis zu den Nervenendigungen, wo sie die Freisetzung von Neurotransmittern auslösen Neurone sind terminal differenzierte, nicht mehr zur Zellteilung fähige Zellen. Inzwischen steht aber fest, dass auch im erwachsenen Gehirn Vorläuferzellen existieren, aus denen neue Neurone gebildet werden können. Deren Re-

. Abb. 31.4. Erregungsfortleitung im Neuron. Das Axon leitet Aktionspotentiale (Pfeile) vom Zellkörper zu den präsynaptischen Nervenendigungen (efferent), während Dendriten erregende und

die ausgeschieden werden sollen, durch Transportsysteme der Endothelzellen bewegt werden. Der einer ständigen Neubildung unterliegende Liquor cerebrospinalis wird in den Kapillaren des Plexus choroideus als proteinarmes Filtrat des Blutplasmas abgepresst. Er ähnelt in seiner Zusammensetzung der interstitiellen Flüssigkeit des Gehirns. Änderungen der Liquorzusammensetzung sind von erheblicher Bedeutung für die Diagnostik von Entzündungen und von Tumoren des Zentralnervensystems.

generationsvermögen reicht jedoch nicht aus, um durch Schlaganfall oder Trauma zerstörte Hirnareale zu ersetzen. Aufgrund ihrer besonderen Morphologie besitzen Neurone ein hochspezialisiertes Cytoskelett. Neben neuronenspezifischen Intermediärfilamenten, den Neurofilamenten (. Tab. 6.6 in Kap. 6.3), finden sich zahlreiche Aktinfilamente, welche für das Neuritenwachstum essentiell sind. Axone sind besonders reich an Mikrotubuli (7 Kap. 6.3.1), an denen der anterograde Transport von vesikulär verpackten Proteinen aus dem Zellkörper zur Nervenendigung und der retrograde Transport von dort durch Endozytose aufgenommenen Molekülen (z.B. Wachstumsfaktoren, Viren) zum Zellkörper erfolgt. In Kürze Neurone besitzen spezialisierte Zellfortsätze: Dendriten leiten eingehende Impulse in Form von elektrotonischen Potentialschwankungen zum Soma, von wo aus das Axon die Erregungen als Aktionspotentiale weiterleitet.

hemmende Signale von anderen Neuronen empfangen (afferent), welche im Zellkörper aufsummiert werden

31

1030

Kapitel 31 · Nervensystem

31.2.2

Membranpotential und Erregungsleitung

! Ionengradienten werden durch energieabhängige Transport-ATPasen und Ionenkanäle aufrechterhalten.

31

Wie alle Körperzellen besitzen auch Nervenzellen ein negatives Membranpotential, das im Ruhezustand bei etwa – 70 mV liegt. Dieses kommt durch das Zusammenwirken der Aktivität der Na+/K+-ATPase (7 Kap. 6.1.5) mit in der Plasmamembran der Nervenzellen lokalisierten sog. »passiven« Ionenkanälen zustande. Letztere bilden eine die Membran durchspannende Kanalpore, durch die Ionen ihrem Konzentrationsgefälle entsprechend fließen. Zunächst entsteht durch die Aktivität der Na+/K+ATPase ein Konzentrationsgradient von Natrium- und Kaliumionen, der dazu führt, dass die Kaliumkonzentration in der Zelle wesentlich höher als außerhalb ist. Umgekehrt sind Natriumionen extrazellulär höher konzentriert. Die Aufrechterhaltung dieser Ionengradienten verbraucht bis zu zwei Drittel der gesamten metabolischen Energie eines Neurons. Die neuronale Plasmamembran enthält Kaliumkanäle, die im Ruhezustand für Kaliumionen durchlässig sind und einen Leckstrom vermitteln (leak channels). Daher diffundieren Kaliumionen von innen nach außen. Dagegen werden die nicht diffusiblen negativ geladenen Ionen (Proteine, Phosphatester) im Zellinneren zurückgehalten, wodurch es zu einer negativen Aufladung des Zellinneren gegenüber der Außenseite kommt. Diese Ladungsdifferenz neutralisiert den Kaliumausstrom, sodass sich ein Gleichgewichtspotential einstellt, das dem Ruhepotential entspricht. Am Ruhepotential gleichen sich also der Kaliumausstrom, die Pumpaktivität der Na+/K+-ATPase und die Ladungsenergie der intrazellulären Anionen aus. In Kürze Das Ruhemembranpotential wird durch die Na+/K+ATPase und Ionenkanäle aufrechterhalten. Die Kaliumkonzentration ist intrazellulär hoch, extrazellulär niedrig. Die Natriumkonzentration ist intrazellulär niedrig, extrazellulär hoch. ! Die Öffnung von Natrium-Kanälen führt zur Depolarisation und Weiterleitung von Aktionspotentialen.

Jedes Aktionspotential von Nervenzellen beginnt mit einer Abnahme des Membranpotentials (Depolarisation). Sobald das Schwellenpotential für die Aktivierung von spannungsregulierten Natriumkanälen in der Plasmamembran erreicht wird, kommt es zu einer schnellen Öffnung dieser Kanäle. Der resultierende Natriumeinstrom in die Zelle führt zur weiteren Positivierung des Membranpotentials. Infolge dieser Depolarisation werden mit leichter Verzögerung spannungsregulierte Kaliumkanäle geöffnet, welche die Zellmembran durch gesteigerten K+-Ausstrom repola-

risieren und damit das Ruhepotential wieder herstellen. Der Zusammenbruch des Ionengradienten wird durch die Na+/K+-ATPase verhindert. Eine Besonderheit der Nervenzellmembran ist ihre Fähigkeit, Aktionspotentiale rasch (1–120 m/s) und unidirektional über Axone fortzuleiten. Diese gerichtete Fortleitung basiert auf der Inaktivierung der spannungsregulierten Ionenkanäle, welche nach der Öffnung kurzfristig refraktär gegenüber einer erneuten Membrandepolarisation sind. Die hohe Leitgeschwindigkeit myelinisierter Nervenfasern beruht auf einem saltatorischen Fortleitungsmechanismus, bei dem das Aktionspotential von einem Ranvier’schen Schnürring zum nächsten springt. Ionenkanäle sind Transmembranproteine, welche einen selektiven Ionenfluss durch Lipidmembranen vermitteln und in Neuronen das Ruhemembranpotential sowie die Entstehung und Form von Aktionspotentialen kontrollieren. Ionenkanäle besitzen eine zentrale Kanalpore, durch die Ionen definierter Größe und Ladung mit ihrer Hydrathülle sehr rasch hindurchfließen können. Die ionenselektiven Kanäle werden nach dem hindurchfließenden Ion benannt: 4 Natrium4 Kalium4 Calcium- und 4 Chloridkanäle Kanalproteine von weniger ausgeprägter Ionenselektivität unterteilt man in: 4 Kationen- und 4 Anionenkanäle Viele Ionenkanäle sind in der Lage, die Kanalpore für Ionen reguliert zu öffnen und zu schließen; diesen Vorgang bezeichnet man als »gating« (. Abb. 31.5). Bei spannungsregulierten Ionenkanälen wird die Öffnung (oder Schließung) von Änderungen des Membranpotentials gesteuert. Ligandengesteuerte Ionenkanäle werden dagegen durch Neurotransmitter oder andere extra- oder intrazelluläre Moleküle geöffnet (7 Kapitel 31.3.1). ! Die verschiedenen Ionenkanäle weisen gemeinsame Architekturmerkmale auf.

Die spannungsregulierten Ionenkanäle, welche die Fortleitung von Aktionspotentialen in Neuronen und anderen erregbaren Zellen vermitteln, sind Glycoproteine mit Molekülmassen von 250–300 kD. Sie sind aus vier Untereinheiten bzw. Proteindomänen aufgebaut, die je sechs Transmembransegmente (S1–S6) besitzen (. Abb. 31.6). Zusätzlich können akzessorische Untereinheiten, die nicht an der Ausbildung der Kanalpore beteiligt sind, vorkommen. Charakteristisch für diese Kanalproteine ist ein viermal wiederholtes Motiv mit 6 Transmembransegmenten (6-TM). In jedem dieser Motive liegt zwischen den Segmenten S5 und S6 eine P-Schleife, welche die Ionenselektivität der Kanalpore bestimmt (. Abb. 31.6). Die wichtigsten Mitglieder dieser Familie sind:

1031 31.2 · Neuronale Zellen

. Abb. 31.5. Schematisches Modell eines spannungsregulierten Ionenkanals. Der in der Lipidmembran liegende Spannungssensor aus positiv geladenen Aminosäuren induziert das Öffnen und Schließen eines den Ionenfluss regulierenden »Tores« (gate). Ein in der Porenregion liegender Selektivitätsfilter ist für die Unterscheidung einzelner Ionen verantwortlich

Spannungsregulierte Kaliumkanäle bestehen aus vier Untereinheiten mit jeweils einem 6-TM-Motiv, die durch nicht-covalente Wechselwirkungen zusammengehalten werden (. Abb. 31.6). Kaliumkanäle kommen als Homotetramere mit gleichen oder als Heterotetramere mit unterschiedlichen Untereinheiten vor. Die einzelnen Untereinheiten werden von mehr als 10 Genen codiert, die wiederum durch alternatives Spleißen in verschiedenen Varianten auftreten können. Durch vielfältige Kombinationen dieser Genprodukte entsteht eine Vielzahl von Kaliumkanal-Isoformen. Im Gegensatz zu den tetrameren Kaliumkanälen bestehen spannungsregulierte Natrium- und Calciumkanäle aus einer Polypeptidkette mit etwa 2000 Aminosäuren, die sich auf 4 homologe Domänen (D1, D2, D3, D4) mit je einem 6-TM-Motiv verteilen (. Abb. 31.6). Zu dieser Gruppe gehört auch der Spannungssensor des Skelettmuskels, der ein Calciumkanal vom L-Typ ist (7 Kap. 25.4.5). ! Unterschiedliche Segmente der Kanalproteindomänen bilden die Pore und den Spannungssensor.

Verschiedenen strukturellen Elementen der o.g. Motive können besondere Funktionen zugeordnet werden: 4 Die Helices S5 und S6 der vier 6-TM-Motive bilden mit den sie verbindenden Peptidschleifen die Pore des Ionenkanals. Die Peptidschleifen bestehen aus etwa 21 Aminosäuren, die eine beta-Haarnadelstruktur bilden (7 Kap. 3.3.3). Zusammen bilden die vier Haarnadelstrukturen ein beta-Fass (die Pore umgebenden TIMBarrel, benannt nach dem Enzym Triosephosphat-Isomerase), durch das nach Aktivierung des Kanals Ionen permeieren können (. Abb. 31.7) 4 Das Segment S4 enthält eine hohe Anzahl positiv geladener Aminosäureseitenketten (Lys, Arg) und dient

. Abb. 31.6. Schematische Darstellung der Membrantopologie von spannungsregulierten Ionenkanälen. Oben: Spannungsregulierte Kaliumkanäle sind aus vier gleichen oder auch unterschiedlichen Untereinheiten D1–D4 aufgebaut, die sechs Transmembransegmente (S1–S6) besitzen. Zwischen den Transmembranhelices S5 und S6 befindet sich eine in die Membran schleifenförmig eingelagerte Porensequenz (P-Schleife, rot), die den Ionenkanal auskleidet. Natriumund Calciumkanalproteine bestehen jeweils aus einer sehr langen Polypeptidkette, die vier zu Kaliumkanaluntereinheiten homologe Domänen (D1–D4) umfasst. Unten: Durch Assoziation der vier P-Schleifenregionen wird die zentrale Pore des Ionenkanals gebildet. Aus Gründen der Übersichtlichkeit ist nur eine Schleife gezeigt

31

1032

Kapitel 31 · Nervensystem

31 . Abb. 31.7. Der Selektivitätsfilter des K+ Kanals. Die Abbildung zeigt die zentrale Kristallstruktur eines bakteriellen Kaliumkanalproteins, das seine Organisation mit neuronalen Kaliumkanälen teilt. Unten: Die P-Schleifen bilden die Engstelle in der Kanalpore zwischen den S5 und S6 entsprechenden Transmembranhelices. Oben: Vergrößerung der P-Schleifenregion mit gebundenen K+ Ionen. Interaktionen mit Carbonylgruppen des Polypeptidgerüsts vermitteln die Ionenselektivität und Entfernung der Hydrathülle für durchtretende K+ Ionen

zusammen mit den Helices S1–S3 als Spannungssensor, der seine Lage bei Änderungen des Membranpotentials wie ein Magnet in einem elektrischen Feld wechselt (. Abb. 31.8). Diese Konformationsänderung führt zur Öffnung des Kanals, wenn die Membran depolarisiert wird 4 Bei Natrium- und Calciumkanälen dient die cytosolische Schleife, die das Segment S6 der Domäne 3 mit dem Segment S1 der Domäne 4 verbindet, der Kanalinaktivierung. Durch Lagewechsel bei Membrandepolarisation wirken die geladenen Aminosäuren dieser Schleife als Tor und schließen den Kanal durch Blockade der inneren Öffnung der Pore (. Abb. 31.8). Beim Kaliumkanal unterscheidet sich der Mechanismus des

. Abb. 31.8. Modell der Öffnung und Schließung des Natriumkanals. Oben: Die Transmembranhelix S4 wirkt als Spannungssensor, da sie in jeder dritten Position positiv geladene Aminosäuren enthält (Arginin R und Lysin K), zwischen denen hydrophobe Aminosäuren liegen. Unter dem Einfluss elektrostatischer Kräfte, d.h. bei Membrandepolarisation, ändert Helix S4 deshalb zusammen mit den Helices S1–S3 ihre Position in der Membran. Unten: Die gleichzeitige Positionsänderung aller vier Spannungsfühler öffnet den Kanal. Diese Konformationsänderung leitet die nachfolgende Schließung ein, bei der die intrazelluläre Peptidschleife zwischen den Domänen D3 und D4 mit einem kritischen Phenylalaninrest (F) die Pore okkludiert

Torschlusses geringfügig, da diese Kanäle aufgrund ihrer Tetramerstruktur eine andere Architektur besitzen. Hier wirken die cytoplasmatischen N-Termini als Kanalverschluss (sog. ball-and-chain Mechanismus) ! Das S4-Segment von spannungsregulierten Ionenkanälen ist ein Spannungsmessfühler, dessen Positionsänderung die von der S5–S6-Schleife gebildete Kanalpore öffnet. Bewegliche intrazelluläre Domänen können den Ionenkanal inaktivieren.

Die Inaktivierung eines Ionenkanals ist kein direktes Rückversetzen der S4-Domänen in den Ruhezustand, sondern erfolgt über einen inaktivierten, geschlossenen Zustand des Kanalproteins. Dies verhindert seine sofortige Reaktivie-

1033 31.2 · Neuronale Zellen

. Tabelle 31.3. Ionenkanalerkrankungen Ionenkanal

Mutiertes Gen

Betroffene Untereinheit

Krankheit

Na+

SCN1A

D1

Epilepsie mit Fieberkrämpfen, Myoklonusepilepsie

Na+

SCN1B

E1

Epilepsie mit Fieberkrämpfen

K+

KCNA1

D (Kv1.1)

Episodische Ataxie

+

KCNQ1

D (Kv7.1)

Herzrhythmusstörungen (long QT-Syndrom)

2+

Ca

CACNA1A

D1A

familiäre hemiplegische Migräne, Ataxie (SCA6)

Ca2+

CACNA1S

D1S

hypokaliämische periodische Paralyse, maligne Hyperthermie

CLCN1

α

Myotonia congenita

K

–

Cl

Mutationen in den die Untereinheiten von Ionenkanälen kodierenden Genen führen abhängig von deren hauptsächlichen Expressionsorten zu Krankheiten mit unterschiedlichen Symptomen. So können Mutationen der im ZNS exprimierten D1A-Untereinheit des spannungsregulierten Calciumkanals eine mit Lähmungen einhergehenden Form der Migräne oder Ataxie auslösen, während Mutationen der im Skelettmuskel vorkommenden Calciumkanaluntereinheit D1S Muskellähmungen hervorrufen. Vergleichbares gilt für Kaliumkanäle: Ist das im ZNS exprimierte Gen KCNA1 mutiert, resultiert eine Ataxie, während Mutationen des im Herzen exprimierte Gens KCNQ1 zu tödlichen Herzrhythmusstörungen führen können.

rung, was für die gerichtete Ausbreitung von Aktionspotentialen von entscheidender Bedeutung ist. Eine wichtige Eigenschaft von Ionenkanälen ist ihre Ionenselektivität. Diese wird durch von geladenen Aminosäureseitenketten gebildeten Ionenbindungsstellen in der Kanalpore erzeugt, welche spezifische Ionen von Bindungsstelle zu Bindungsstelle weitergeben und so einen elektrostatisch unterstützten Ionenfluss erlauben. Geringfügige Unterschiede in der Position, Größe und Ladung der diese Bindungsstellen bildenden Aminosäuren sind für die Selektivität und Richtung des Ionenflusses verantwortlich. So sind bei spannungsregulierten Calcium- und Natriumkanälen geladene Aminosäurereste in der P-Schleife am Eingangsbereich der Kanalpore für die Unterscheidung der fast gleich großen Ca2+ und Na+ Ionen entscheidend. In Kaliumkanälen sind Wechselwirkungen mit den Carbonylgruppen des Peptidgerüstes für das Abstreifen der Hydrathülle vom K+ Ion und damit die Selektivität der Pore verantwortlich (. Abb. 31.7). Spannungsregulierte Chloridkanäle besitzen 12 Transmembrandomänen (S1–S12) und weichen damit von diesem Architekturprinzip ab. Der epitheliale Chloridkanal (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) ist bei cystischer Fibrose mutiert (7 Kap. 9.2.5). Die Aktivität von Kanalproteinen wird von Proteinkinasen und -phosphatasen moduliert. Fast alle Ionenkanalproteine enthalten intrazelluläre Serin-, Threonin- und Tyrosinreste, die phosphoryliert und dephosphoryliert werden können. Dadurch wird die Aktivität von Ionenkanälen durch Hormone (z.B. über den Insulinrezeptor), Adenylatcyclasen oder Rezeptoren, die ihre Wirkung über G-Proteine entfalten, regulierbar (. Abb. 31.9). Pathobiochemie: Als Ionenkanalkrankheiten (channelopathies) werden angeborene neurologische Störungen und Krankheiten des Herzens, der endokrinen Drüsen und der Niere bezeichnet, die durch Mutationen von Ionenkanalgenen verursacht werden (. Tabelle 31.3). Zu den neuro-

. Abb. 31.9. Regulation von Ionenkanälen durch Phosphorylierung. Die Proteinkinasen A und C (ss. Kap. 25) regulieren den Ionenfluss durch die covalente Modifikation von Serin- und Threoninresten, während Phosphoproteinphosphatasen kovalent gebundenes Phosphat entfernen. H = Hormon; R = Rezeptor; G = G-Protein; PKA = Proteinkinase A; PKC = Proteinkinase C; PLC-J = Phospholipase C J

logischen Ionenkanalkrankheiten gehören erbliche Formen der Epilepsie, Ataxien oder die mit Halbseitenlähmung einhergehende familiäre hemiplegische Migräne. In Kürze Die Entstehung des Aktionspotentials wird durch die Aktivierung spannungsregulierter Ionenkanäle gesteuert, die ein gemeinsames Bauprinzip teilen. Spannungsregulierte Natriumkanäle leiten die Membrandepolarisation ein, während Kaliumkanäle die Repolarisation vermitteln. Ionenkanäle können sich in drei verschiedenen Zuständen befinden: geschlossen, geöffnet und inaktiviert. Die schnelle Inaktivierung ist für die gerichtete Weiterleitung des Aktionspotentials von Bedeutung. Mutationen von Ionenkanälen führen zu Ionenkanalkrankheiten.

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1034

Kapitel 31 · Nervensystem

31.2.3

Synapsen: Aufbau und Funktion

Synapsen sind für die schnelle Erregungsübertragung spezialisierte Kontaktstellen zwischen Nervenzellen. Änderungen in der Effizienz der synaptischen Erregungsübertragung werden als ursächlich für höhere Hirnfunktionen wie z.B. die Gedächtnisbildung angesehen. Nervenzellen kommunizieren über elektrische Synapsen, bei denen die Zellen direkt elektrisch gekoppelt sind, oder über chemische Synapsen miteinander. Bei letzteren vermittelt ein chemischer Überträgerstoff (Neurotransmitter) die Signalübertragung. ! Elektrische Synapsen sind bidirektional und meistens exzitatorisch.

31

Elektrische Synapsen werden von gap junctions gebildet, die aus sechs Untereinheiten, den sog. Connexinen bestehen (7 Kap. 6.1.4). Wichtig sind sie für die rasche Synchronisierung von Gruppen von Nervenzellen in Hirnarealen wie den Oliven- und Kleinhirnkernen. Durch die Poren der gap junctions können nicht nur Ionenströme, sondern auch second messenger wie Calcium, cAMP oder Inositolphosphate sowie Metabolite fließen. Im Gegensatz zu chemischen Synapsen wirken elektrische Synapsen meist exzitatorisch und ohne Richtungsselektivität – sie können Signale in beiden Richtungen von einer Zelle auf die andere übertragen. Die Öffnung von gap junctions wird u.a. vom Spannungsunterschied zwischen zwei Neuronen reguliert. Ist der Spannungsunterschied hoch, sinkt die Durchlässigkeit des Kanals. ! Chemische Synapsen benötigen Neurotransmitter zur Erregungsübertragung.

Chemische Synapsen vermitteln die Erregungsübertragung durch spezielle Botenstoffe, die Neurotransmitter. Diese werden aus der Nervenendigung durch ankommende Aktionspotentiale freigesetzt. Dort sind sie in speziellen Speicherorganellen, den synaptischen Vesikeln, angereichert (. Abb. 31.10). Die in den synaptischen Spalt freigesetzten Neurotransmitter diffundieren rasch zur postsynaptischen Membran der nachgeschalteten Nervenzelle und binden dort an spezifische Rezeptoren. Dies führt zu einer Änderung des Membranpotentials und kann so einen neuen elektrischen Nervenimpuls auslösen. Anatomisch sind chemische Synapsen durch das präsynaptische Axonende und die darunter liegende spezialisierte postsynaptische Membran (. Abb. 31.10) der Zielzelle (ein zweites Neuron oder auch eine Muskel- oder Drüsenzelle) charakterisiert. Zwischen beiden liegt der schmale, etwa 20 nm breite synaptische Spalt. Jedes Neuron im ZNS ist mit durchschnittlich ca. 104 anderen Neuronen über chemische Synapsen verbunden, sodass im erwachsenen Gehirn ein Netzwerk mit über hunderttausend Milliarden (1014) Synapsen vorliegt.

. Abb. 31.10. Schematischer Schnitt durch eine chemische Synapse. In der präsynaptischen Nervenendigung finden sich neben Mitochondrien in großer Zahl synaptische Vesikel, die mit einem oder verschiedenen Transmittern gefüllt sind. Einige dieser Vesikel sind an der präsynaptischen Plasmamembran angedockt. Die Depolarisierung der präsynaptischen Nervenendigung führt zur Öffnung spannungsregulierter Calciumkanäle und löst so die Exozytose der Transmitter aus synaptischen Vesikeln aus. Im synaptischen Spalt werden dadurch schnell hohe Konzentrationen des Transmitters erreicht, der Transmitter wird von entsprechenden Rezeptoren in der postsynaptischen Membran gebunden, wodurch die Erregung fortgeleitet wird. Anschließend wird die Vesikelmembran durch Clathrin-vermittelte Endozytose (7 Kap. 6.2.4) der Wiederverwendung zugeführt

! Neurotransmitter werden von Neuronen synthetisiert, gespeichert und sezerniert.

Neben Acetylcholin wirken als Neurotransmitter: 4 Aminosäuren (Glutamat, Glycin), 4 Derivate von Aminosäuren (biogene Amine) oder 4 Peptide bzw. Polypeptide Nach ihrer Biosynthese im Cytosol werden Neurotransmitter mittels spezifischer Transportsysteme in die synaptischen Vesikel aufgenommen. Die . Abbildung 31.11 zeigt den Aufbau eines derartigen Vesikels und die Topologie wichtiger in diesen Vesikeln identifizierter Membranproteine. Die vesikulären Neurotransmittertransporter katalysieren einen sekundär aktiven Transmitter-ProtonenAntiport. Für die Herstellung des benötigten Protonengradienten wird eine V-Typ-ATPase (7 Kap. 6.1.5) benötigt. Meist sind in den synaptischen Vesikeln mehrere Transmitter lokalisiert, wie z.B. Acetylcholin oder Noradrenalin zusammen mit Peptidtransmittern (7 Kap. 31.3.8). Auch

1035 31.2 · Neuronale Zellen

. Abb. 31.11. Aufbau synaptischer Vesikel. Die Membran synaptischer Vesikel enthält Proteine für die Aufnahme von Transmittern, eine Protonen-ATPase sowie Calcium- und ATP-Transporter. Synapsin fixiert die Vesikel am Cytoskelett. Synaptobrevin und die GTPase Rab 3 sind für das Andocken an der Plasmamembran notwendig. Synaptotagmin dient als Calciumsensor. Synaptophysin ist ein sehr häufiges Vesikelmembranprotein ungeklärter Funktion

ATP wird, häufig in stöchiometrischem Verhältnis zu den Transmittern, durch ein spezifisches Transportsystem in die synaptischen Vesikel aufgenommen. Es moduliert die Transmitterwirkung über spezifische Purinrezeptoren. Pharmakologisch wichtig ist, dass die für die Transmitteraufnahme benötigten Antiporter durch Medikamente beeinflusst werden können. So sind Phesamicol bzw. Reserpin Hemmstoffe der Acetylcholin- bzw. katecholaminAufnahme in synaptische Vesikel. Neben diesen Transportsystemen enthält die Membran synaptischer Vesikel weitere Proteine, die für Wechselwirkungen mit dem Cytoskelett und für die Neurotransmitterfreisetzung wichtig sind. Synapsin immobilisiert Vesikel am Cytoskelett, vor allem durch Bindung an Aktinfilamente. Diese Bindung wird durch Calcium-aktivierte Phosphorylierung von Synapsin aufgehoben und so die Vesikel zur Fusion und Exozytose freigegeben. Mehrere andere Proteine sind für den eigentlichen Sekretionsvorgang verantwortlich. ! Die Neurotransmitterfreisetzung aus synaptischen Vesikeln erfolgt an spezialisierten Bereichen der Plasmamembran, den sog. aktiven Zonen, und erfordert eine Vielzahl interagierender Proteine.

Das Andocken von synaptischen Vesikeln an der präsynaptischen Plasmamembran wird von SNARE (soluble N-ethyl-

. Abb. 31.12. Der synaptische Vesikel-Andockungskomplex. Oben: Das v-SNARE Synaptobrevin (blau) und die t-SNARE-Proteine Syntaxin (rot) und SNAP-25 (grün) bilden einen sehr stabilen Komplex aus vier α-Helices (sog. tetrahelicales Bündel), der die Vesikelmembran dicht an die Plasmamembran anlagert. Tetanustoxin (TeTX) und verschiedene Botulinumtoxine (BoTX-B) hemmen die Neurotransmitterfreisetzung, indem sie die SNARE-Proteine an den angezeigten Positionen spalten. Unten: Der »gedockte« SNARE-Komplex wird durch Synaptotagmin stabilisiert. Bei Erregung der Nervenendigung einströmendes Calcium bindet an Synaptotagmin und löst dadurch eine Konformationsänderung aus, welche die exozytotische Membranfusion einleitet

maleimide sensitive fusion protein attachment protein receptors)-Proteinen vermittelt. SNARE-Proteine sind in allen eukaryotischen Zellen an Membranfusionen beteiligt (7 Kap. 6.2.4). Die synaptischen SNARE-Proteine bilden einen sehr stabilen Andockungskomplex (. Abb. 31.12). Auf der Vesikelseite ist das Protein Synaptobrevin (syn. VAMP) beteiligt, welches die Funktion eines v (vesicular)SNARE-Proteins (7 Kap. 6.2.4) übernimmt, indem es mit den t (target)-SNARE-Proteinen Syntaxin und SNAP-25 in der präsynaptischen Plasmamembran einen aus vier D-Helices bestehenden Komplex bildet (. Abb. 31.12). Dieser ternäre SNARE-Komplex ist mit regulatorischen Proteinen wie dem kleinen G-Protein Rab3 (ras-related in brain) und dem Calcium-bindenden Vesikelprotein

31

1036

Kapitel 31 · Nervensystem

Synaptotagmin assoziiert, welches bei der Vesikelfusion mit der präsynaptischen Membran als Calciumschalter wirkt. Bei Erregung der Nervenendigung durch ankommende Aktionspotentiale werden spannungsregulierte Calciumkanäle geöffnet, sodass es zum Einstrom von extrazellulärem Calcium in die Nervenendigung kommt. Der resultierende Anstieg des intrazellulären Calciums führt zu einer Konformationsänderung des mit dem SNAREKomplex assoziierten Synaptotagmin, die wiederum die Fusion der gedockten Vesikel mit der Plasmamembran einleitet (. Abb. 31.12). Zusammenfassend handelt es sich also bei der Neurotransmitterfreisetzung um einen Spezialfall der SNARE-vermittelten Membranfusion, welcher sich durch eine strikte örtliche und zeitliche Kontrolle des Fusionsereignisses durch Proteine der aktiven Zone und Calcium auszeichnet. Nach der Fusion der synaptischen Vesikel mit der Plasmamembran und der dadurch bewirkten Transmitterfreisetzung wird die synaptische Vesikelmembran mit ihren Membranproteinen durch Clathrin-vermittelte Endozytose (7 Kap. 6.2.4) rasch wieder ins Cytoplasma aufgenom-

men und die so entstehenden Vesikel erneut der Wiederbeladung mit Neurotransmittern und der Exozytose unterworfen. Die synaptischen Vesikel durchlaufen also an der Synapse einen Lebenszyklus (Dauer ca. 30–45 sec; . Abb. 31.10), welcher durch lokale Regulationsmechanismen ihr kontinuierliches recycling erlaubt. Pathobiochemie: Die Toxine der Sporen bildenden Bakterien Clostridium tetani und Clostridium botulinum lösen schwere, häufig tödlich verlaufende Erkrankungen (Wundstarrkrampf bzw. Botulismus nach Fleischvergiftungen) aus, die auf einer irreversiblen Blockade der Neurotransmitterfreisetzung aus hemmenden bzw. erregenden Synapsen beruhen. Dementsprechend kommt es zu einer spastischen bzw. schlaffen Lähmung der Muskulatur. Die Toxine dieser Bakterien sind Zinkproteasen, die synaptische SNARE-Proteine hochspezifisch spalten (. Abb. 31.12) und so die Funktion des SNARE-Komplexes blockieren. Heute wird Botulinustoxin rekombinant hergestellt und zur lokalen Behandlung fokaler Dystonien (Blepharospasmus, Torticollis spasmodicus) und zur kosmetischen Glättung von Hautfalten eingesetzt.

In Kürze

31

Nervenzellen kommunizieren miteinander über elektrische Synapsen, die von gap junctions gebildet werden, oder über chemische Synapsen. Unter dem Einfluss eines Aktionspotentials setzen letztere aus präsynaptischen Vesikeln einen Neurotransmitter frei. Als Neurotransmitter wirken Acetylcholin, biogene Amine (z.B. Serotonin, Histamin, Tryptamin), Aminosäuren und Peptide, die zunächst über einen Transmitter-Protonen-

31.3

Chemische Signalübertragung zwischen Neuronen

31.3.1

Allgemeine Prinzipien

! Neurotransmitter lösen sehr schnelle Effekte an Ionenkanalrezeptoren und langsamere Effekte an metabotropen Rezeptoren aus.

Die postsynaptische Membran ist mit Rezeptoren für den sezernierten Transmitter dicht bestückt. Diese Rezeptoren besitzen entweder Ionenkanalfunktion, welche durch die Bindung des Transmitters reguliert wird (»ionotrope« Rezeptoren), oder sie aktivieren intrazelluläre Signalkaskaden oder Ionenkanäle über G-Proteine (»metabotrope« Rezeptoren). ! Ionotrope Rezeptoren sind aus homologen Untereinheiten aufgebaute oligomere Membranproteine.

Ionotrope Rezeptoren (syn. liganden-gesteuerte Ionenkanäle) sind aus 3–5 Untereinheiten aufgebaut. Sie werden in drei große Familien eingeteilt:

Antiport in die Vesikel aufgenommen werden. Das Andocken von Vesikeln an die präsynaptische Membran und die Fusion werden durch SNARE-Proteine vermittelt, wobei das Vesikelprotein Synaptotagmin als Calciumschalter wirkt. Die Neurotransmitterfreisetzung wird durch Bakterientoxine gehemmt, welche als Zinkproteasen wirken und die synaptischen SNARE-Proteine spalten.

4 Pentamere Rezeptoren der sog. nikotinischen Acetylcholin-Rezeptor Superfamilie 4 Tetramere ionotrope Glutamat-Rezeptoren 4 Trimere ATP-Rezeptoren der P2X-Familie Die verschiedenen Rezeptorfamilien unterscheiden sich nicht nur in der Zahl ihrer Untereinheiten, sondern auch in deren Membrantopologie und der Anordnung funktioneller Domänen wie der Ligandenbindungstaschen und der Kanalporen (. Abb. 31.13). So wird z.B. der Ionenkanal der pentameren Rezeptoren von den D-Helices bildenden zweiten Transmembransegmenten der fünf Untereinheiten gebildet (7 Kap. 25.3.2). In den Glutamatrezeptoren dagegen stellt das zweite Transmembransegment ähnlich wie in spannungsregulierten Kanälen eine intramembranäre Schleife dar, welche im Tetramer das Kanalinnere auskleidet und den Selektivitätsfilter bildet. Bei den einfacher aufgebauten P2X-Rezeptoren wird der Ionenkanal möglicherweise von allen sechs Transmembransegmenten des drei Untereinheiten enthaltenden Rezeptorkomplexes aufgebaut.

1037 31.3 · Chemische Signalübertragung zwischen Neuronen

. Abb. 31.13. Schematische Darstellung der Quaternärstruktur Neurotransmitter-gesteuerter Ionenkanäle und der Membrantopologien der zugehörigen Rezeptoruntereinheiten. Oben: Ionenkanalrezeptoren vom Typ des nikotinischen Acetylcholinrezeptors sind pentamere Membranproteine, die bis zu vier verschiedene Untereinheiten enthalten können. Glutamatrezeptoren vom AMPA-, Kainatund NMDA-Subtyp bestehen aus vier identischen oder unterschiedlichen Untereinheiten. ATP-gesteuerte Ionenkanäle des P2X-Typs sind trimere Transmembranproteine. Unten: Die Untereinheiten von Rezeptoren der nikotinischen Acetylcholinrezeptorfamilie besitzen vier Transmembransegmente; das zweite Transmembransegment (orange) kleidet den Ionenkanal aus. Glutamatrezeptoruntereinheiten besitzen ebenfalls vier Membrandomänen; hier wird der Kationenkanal ähnlich

wie bei den spannungsregulierten Ionenkanälen von der schleifenförmig in die postsynaptische Membran eintretenden Domäne M2 (orange) gebildet. Bei den P2X-Rezeptoren ist die Kanalregion noch nicht genau bekannt; wahrscheinlich tragen beide Transmembranregionen der Untereinheiten (teilweise orange) zur Pore bei. Die Neurotransmitter-Bindungsstellen (L) werden bei Rezeptoren der Acetylcholinrezeptorfamilie (und wahrscheinlich auch P2X-Rezeptoren) von den extrazellulären Domänen zweier benachbarter Untereinheiten gebildet, während bei Glutamatrezeptoren die extrazellulären Domänen S1 und S2 einer einzelnen Untereinheit das Glutamatmolekül wie Muschelschalen umschließen. Die cytoplasmatischen Domänen der Rezeptoruntereinheiten sind u.a. für den intrazellulären Transport und die synaptische Verankerung der Rezeptoren wichtig

Die »metabotropen« Neurotransmitter-Rezeptoren sind über heterotrimere G-Proteine an intrazelluläre Signaltransduktionskaskaden wie den cAMP-Weg oder das InsP3/DAG-System gekoppelt. Diese stimulieren z.B. die Proteinkinase A (7 Kap. 25.6.2) bzw. CaM-Kinasen (7 Kap. 25.4.5) und modulieren auf diese Weise die Aktivität von Ionenkanälen der postsynaptischen Membran. Häufig regulieren metabotrope Rezeptoren nachgeschaltete Ionenkanäle auch direkt, meist über G-Protein EJ-Untereinheiten. Wichtig ist, dass die Neurotransmitter Glutamat, GABA, Acetylcholin, Serotonin und der Cotransmitter ATP sowohl Ionenkanalrezeptoren als auch metabotrope Rezeptoren aktivieren. Dagegen wirken Katecholamine, Endorphine (7 Kap. 31.3.8) und andere Neuropeptide ausschließlich über G-Protein gekoppelte Rezeptoren. Die meisten Neurotransmitter-Rezeptoren kommen in Isoformen vor, die sich vielfach in Expressionsmuster und funktionellen Eigenschaften unterscheiden. Diese Isoformen werden von unterschiedlichen Genen codiert, was

häufig zu hoher Rezeptorheterogenität führt. So sind für den ionotropen GABAA-Rezeptor 17 Untereinheitengene bekannt, welche in unterschiedlichen Kombinationen zu funktionellen Kanälen zusammengesetzt werden können. ! Neurotransmitter werden nach Bindung an den Rezeptor inaktiviert.

Nach der Freisetzung und Aktivierung postsynaptischer Rezeptoren wird die Neurotransmitterwirkung entweder durch enzymatischen Abbau wie im Falle des Acetylcholins oder, häufiger, durch Wiederaufnahme in die präsynaptische Nervenendigung oder umliegende Gliazellen beendet. Diese Wiederaufnahme wird von Neurotransmitter-Transportern vermittelt, welche als Symporter (7 Kap. 6.1.3) die Transmitter Natrium-abhängig durch die präsynaptische Membran ins Cytosol transportieren. Auch die Neurotransmitter-Transporter bilden Großfamilien, die gemeinsame Strukturprinzipien aufweisen. So teilen die Katecholamin-, Serotonin-, GABA- und Glycintransporter

31

1038

Kapitel 31 · Nervensystem

. Tabelle 31.4. Neurotransmitter

31

Transmitter Bezeichnung der entsprechenden Neuronen

Vorstufen

Vorkommen

Inaktivierung

Hemmstoffe

Acetylcholin cholinerge Neuronen

Acetyl-CoA (aus Citratzyklus) und Cholin

Motorische Endplatte, autonome Ganglien, Nucleus caudatus

Enzymatische Hydrolyse

Curare (kompetitiv am nikotischen Rezeptor) Atropin (kompetitiv am muskarinischen Rezeptor)

Dopamin (D), Noradrenalin (N) und Adrenalin (A) dopaminerge bzw. adrenerge Neuronen

Tyrosin

D: Corpus striatum, Putamen, Nucleus caudatus N: Hypothalamus, Substantia nigra A: Nebennierenmark

Vorwiegend durch Wiederaufnahme (Desaminierung, O-Methylierung)

Reserpin (hemmt Noradrenalinaufnahme in die Vesikel)

γ-Aminobutyrat gabaerge Neuronen

Glutamat (aus D-Ketoglutarat)

Purkinje-Zellen des Rückenmarks, Cortex

Wiederaufnahme

Pikrotoxin

Glycin glycinerge Neuronen

Serin (aus Glucose)

Rückenmark, Stammhirn

Wiederaufnahme

Strychnin

Serotonin serotoninerge Neuronen

Tryptophan

Hypothalamus, Nucleus caudatus, Epiphyse

Wiederaufnahme und enzymatische Methylierung oder Desaminierung

Ondansetron

Glutamat

D-Ketoglutarat (aus Citratzyklus)

Ubiquitär

Wiederaufnahme

Endorphine und Enkephaline peptiderge Neuronen

1. Proopiomelanocortin 2. Enkephalinvorläufer 3. Dynorphinvorläufer

Pars intermedia der Hypophyse Nebennieren

Enzymatische Hydrolyse

eine gemeinsame Transmembrantopologie mit 12 Transmembrandomänen, welche sich auch bei anderen Metabolitentransportern findet. ! Die Wirkung von Transmittern kann durch Hemmstoffe selektiv blockiert werden.

Eine Reihe von Hemmstoffen kann über verschiedene Mechanismen die Wirkung von Neurotransmittern inhibieren (. Tabelle 31.4). So blockiert z.B. Reserpin die Aufnahme von Noradrenalin in synaptische Vesikel und wird klinisch zur Behandlung des Bluthochdrucks eingesetzt. Synthetische Antagonisten von Neurotransmitterrezeptoren besitzen zunehmend klinische Bedeutung. So wird z.B. ein Antagonist des Subtyps 3 des Serotoninrezeptors (5-HT3) gegen das Cytostatika-induzierte Erbrechen angewendet. Die Hemmung des Plasmamembran-ständigen Serotonintransporters durch spezifische Wiederaufnahmehemmer (Imipramin, Fluoxetin) stellt eine klinisch wichtigste Therapie zur Behandlung von depressiven Erkrankungen dar. Im Folgenden sind die einzelnen Transmitter, ihre Synthese, Rezeptoren und deren Effekte dargestellt.

31.3.2

Naloxon

Glutamat

! Glutamat ist der wichtigste exzitatorische Neurotransmitter im ZNS. Er wirkt über verschiedene Glutamatrezeptoren, welche in ionotrope (Ionenkanalproteine) und metabotrope (G-Protein-gekoppelte) Rezeptoren eingeteilt werden.

Ionotrope Glutamatrezeptoren werden aufgrund ihrer Aktivierbarkeit durch synthetische Agonisten, die Glutamat oder Aspartat ähneln, in drei Gruppen eingeteilt: 4 AMPA-(D-Amino-3-Hydroxy-5-Methyl-4-Isoxazolpropionat) 4 Kainat-, und 4 NMDA- (für N-Methyl-D-Aspartat) Rezeptoren Die Bindung von Glutamat an diese Rezeptoren erhöht die Membranpermeabilität für Natrium- und Calciumionen und führt damit zur Erregung der Nervenzellmembran. Ionotrope Glutamatrezeptoren sind tetramere Proteine, die aus vier gleichen oder unterschiedlichen Untereinheiten aufgebaut sind. Agonisten und Antagonisten werden zwischen den extrazellulären Domänen einer Untereinheit gebunden (. Abb. 31.13). Agonistenbindung bewirkt eine konforma-

1039 31.3 · Chemische Signalübertragung zwischen Neuronen

tionelle Umlagerung, welche den von der Schleifenregion des zweiten Membransegments gebildeten Ionenkanal öffnet. Ionotrope Glutamatrezeptoren, insbesondere vom NMDA-Subtyp, sind an der Gehirnentwicklung, synaptischen Plastizität und Gedächtnisbildung entscheidend beteiligt. Während AMPA- (und Kainat-) Rezeptoren allein durch Bindung von Glutamat aktiviert werden, erfordert die Öffnung von NMDA-Rezeptoren zusätzlich eine Depolarisation der postsynaptischen Plasmamembran sowie die gleichzeitige Bindung von Glycin. NMDA-Rezeptoren wirken dadurch als Koinzidenz-Detektoren für Glutamatausschüttung und Nervenzellaktivität, was zusammen mit dem von ihnen vermittelten Einstrom von Calciumionen die Langzeitpotenzierung exzitatorischer Synapsen ermöglicht. Metabotrope Glutamatrezeptoren stimulieren über G-Proteine die Phospholipase C oder inhibieren die Adenylatcyclase. Da sie prä- und/oder postsynaptisch lokalisiert sind, können sie unterschiedliche Effekte auf die synaptische Erregungsübertragung ausüben. So bewirken z.B. hohe Glutamatkonzentrationen im synaptischen Spalt eine Aktivierung von präsynaptischen Glutamatrezeptoren, die über einen G-Protein-vermittelten Mechanismus den Einstrom von Calcium durch Calciumkanäle vermindert und so die Ausschüttung von Glutamat unterdrückt. Dagegen verstärkt die Aktivierung postsynaptischer metabotroper Glutamatrezeptoren die ionotrope Glutamatrezeptorantwort über eine erhöhte InsP3-Synthese, welche zur Freisetzung von Calcium aus intrazellulären Speichern führt. Pathobiochemie: Normalerweise ist die Glutamatkonzentration in Liquor cerebrospinalis und im Extrazellulärraum des Gehirns niedrig. Bei Schlaganfall oder SchädelHirn-Trauma kann es jedoch zu einer ungeregelten Glutamatfreisetzung und einem Einstrom von Glutamat aus dem Blutplasma kommen, der durch die Transportsysteme nicht mehr kompensiert werden kann. Die exzessive Stimulation von ionotropen Glutamatrezeptoren führt in den betroffenen Neuronen zu einem massiven Calciumeinstrom und schließlich zum apoptotischen Zelluntergang. Dieser als Exzitotoxizität bezeichnete Pathomechanismus soll auch zum Nervenzelluntergang bei Epilepsien und neurodegenerativen Krankheiten beitragen.

31.3.3

Acetylcholin

! Acetylcholin ist der einzige Neurotransmitter, der nicht aus Aminosäuren oder deren Derivaten besteht.

Acetylcholin, der Essigsäureester des Aminoalkohols Cholin, wirkt als Neurotransmitter 4 an der motorischen Endplatte 4 in Ganglien des autonomen Nervensystems und 4 an cholinergen Synapsen in Gehirn und Rückenmark Acetylcholin wird aus Cholin und Acetyl-CoA durch das Enzym Cholinacetyltransferase im Cytosol der Nervenendi-

. Abb. 31.14. Molekülstruktur des nikotinischen Acetylcholinrezeptors an der neuromuskulären Endplatte. a Die fünf Untereinheiten (2α,β,γ,δ) sind pseudosymmetrisch um den zentralen Kationenkanal angeordnet. Jede Untereinheit besitzt eine lange extrazelluläre Domäne und vier Transmembransegmente M1–M4. Der Ionenkanal entsteht durch Assoziation der fünf M2-Helices (rot). Die α-Untereinheiten sind für die Bindung von Acetylcholin besonders wichtig. b Abfolge der molekularen Vorgänge zwischen der Depolarisation der präsynaptischen Membran und der postsynaptischen Erregung

gungen gebildet und anschließend in synaptische Vesikel aufgenommen (. Abb. 31.14). An der neuromuskulären Synapse führt die Freisetzung von Acetylcholin in den synaptischen Spalt (ca. 107 Moleküle pro Impuls) zur Aktivierung des nikotinischen Acetylcholin-Rezeptors, des am besten erforschten Mitglieds der Familie der pentameren Neurotransmitterrezeptoren. Die im Muskel exprimierte Variante dieses Glycoproteins besteht aus 4 homologen Untereinheiten mit der Stöchiometrie D2EJG (. Abb. 31.14). Neuronale nikotinische Acetylcholin-Rezeptoren sind dagegen entweder nur aus D-Untereinheiten aufgebaut oder Heteropentamere aus D- und E-Untereinheiten. Jede Untereinheit umfasst eine große N-terminale Region sowie vier Transmembrandomänen (M1–M4). Die Bindungsstelle für Acetylcholin liegt an der Kontaktfläche zwischen den D-Untereinheiten und ihren jeweiligen Nachbarn.

31

1040

Kapitel 31 · Nervensystem

! Nikotinische Acetylcholinrezeptoren sind unselektive Kationenkanäle.

31

Ebenso wie bei den ionotropen Glutamatrezeptoren befindet sich der Ionenkanal im Zentrum des Rezeptorproteins (. Abb. 31.14). Die Bindung von Acetylcholin verursacht über einen allosterischen Effekt eine Konformationsänderung und damit die Öffnung des Kationenkanals. Dieser wird durch Assoziation der fünf M2-Segmente gebildet und erlaubt im geöffneten Zustand den Einstrom einwertiger Kationen ins Cytosol. Aufgrund der Potentialverhältnisse an der postsynaptischen Membran fließen Natriumströme ins Zellinnere, die zu einer Depolarisation, dem exzitatorischen postsynaptischen Potential, führen. Im Gehirn und anderen Geweben kommen auch GProtein-gekoppelte Acetylcholinrezeptoren vor. Da sich diese metabotropen Rezeptoren im Gegensatz zu den ligandenregulierten Ionenkanälen durch das Fliegenpilzgift Muskarin aktivieren lassen, bezeichnet man sie als muskarinische Acetylcholinrezeptoren. Sie vermitteln auch die Wirkungen des parasympathischen Nervensystems auf Drüsen und glatte Muskulatur. Nach der Rezeptorbindung wird Acetylcholin von Acetylcholinesterase rasch zu Cholin und Acetat hydrolysiert, sodass der Übertragungsvorgang in Millisekunden beendet ist (. Abb. 31.15). Cholin wird erneut in die Nervenendigungen aufgenommen und steht damit wieder für die Acetylcholinbiosynthese zur Verfügung. Acetylcholinesterase ist ein oligomeres Enzym, dessen Isoformen hochkonzentriert im synaptischen Spalt vorliegen. An der motorischen Endplatte ist das Enzym über eine Kollagentripelhelix an die Basalmembran gebunden, während es an zentralnervösen Synapsen über einen lipophilen Glycosylphosphatidylinositol(GPI)-Anker in die postsynaptische Membran insertiert ist. Ein katalytischer Serinrest im aktiven Zentrum der Acetylcholinesterase stellt den Angriffspunkt von reversiblen Acetylcholinesterasehemmern wie Physostigmin dar. Diese Medikamente werden bei Myasthenia gravis und Demenzen eingesetzt, um die Acetylcholinkonzentration im synaptischen Spalt zu erhöhen und die Übertragungseffizienz zu verbessern. Den katalytischen Serinrest covalent modifizierende Organophosphate haben als hochtoxische Insektizide und Kampfgase Verwendung gefunden. Pathobiochemie: Myasthenia gravis ist eine Autoimmunkrankheit, bei der sich Antikörper gegen den nikotinischen Acetylcholinrezeptor der neuromuskulären Synapse bilden. Die motorische Endplatte wird durch diese Immunreaktion geschädigt und die neuromuskuläre Signalübertragung gestört. Dadurch kommt es zu einer belastungsabhängigen Schwäche der Skelettmuskulatur. Häufig sind die Lidheber des Auges so stark betroffen, dass sich die Lider über das Auge senken und den Blick des Patienten stören. Acetylcholin wird durch Esterasen in der postsynaptischen Membran abgebaut.

. Abb. 31.15. Abbau und Wiederaufnahme von Acetylcholin. Die für den Acetylcholinabbau benötigten Acetylcholinesterasen sind membrangebundene, meist oligomere Enzyme. Sie sind je nach Typ der Synapse über eine Kollagentripelhelix oder einen GPI-Anker in der Membran verankert. Cholin wird durch entsprechende Transporter in die präsynaptische Nervenendigung transportiert, durch das Enzym Cholinacetyltransferase mit Acetyl-CoA verestert und dann in synaptische Vesikel aufgenommen aus denen Acetylcholin wieder freigesetzt werden kann. Der katalytische Serinrest im Zentrum der Acetylcholinesterase ist eingezeichnet

31.3.4

Glycin und γ-Aminobutyrat (GABA)

Glycin ist der wesentliche inhibitorische Transmitter im Rückenmark und Stammhirn, während GABA auf fast alle Neurone des Gehirns hemmend wirkt. GABA (J-Aminobutyrat) wird in einer Pyridoxalphosphat-abhängigen Reaktion durch Decarboxylierung von Glutamat gebildet. In Nerven- und Gliazellen wird diese Reaktion durch Glutamatdecarboxylase I, in anderen Geweben durch Glutamatdecarboxylase II katalysiert (. Abb. 31.16). ! Glycin- und GABAA/C-Rezeptoren sind Neurotransmittergesteuerte Chloridkanäle.

GABAA-, GABAC- und Glycinrezeptoren sind Ligandengesteuerte Anionenkanäle, die zur pentameren Actylcholinrezeptorfamilie gehören, während der metabotrope GABAB-Rezeptor mit Adenylatcyclase und dem Phosphoinositolstoffwechsel verbunden ist. In adulten Nervenzellen bewirkt die Aktivierung von Glycin- und GABAA/CRezeptoren den Einstrom von Chloridionen ins Cytosol

1041 31.3 · Chemische Signalübertragung zwischen Neuronen

. Abb. 31.16. GABA-Shunt. Links: Bildung von J-Aminobutyrat aus L-Glutamat durch Decarboxylierung und Abbau zu Succinat. Rechts:

Umwandlung von Glutamat über D-Ketoglutarat zu Succinat über die Reaktionen des Citratzyklus

und damit eine Hyperpolarisation der Zellmembran, welche die Auslösung eines Aktionspotentials erschwert und die neuronale Aktivität hemmt. Auch diese Rezeptoren existieren in mehreren Isoformen, die in verschiedenen Gehirnregionen exprimiert werden und sich pharmakologisch unterscheiden. So kommt die sedierende und angstlösende Wirkung von Benzodiazepinen durch eine selektive Bindung an solche GABAA-Rezeptoren zustande, deren J-Untereinheit eine passende Bindungsstelle aufweist. Auch Alkohol, Anästhetika und Barbiturate greifen an GABAARezeptoren an und verstärken deren hemmende Wirkung. Nach der Rezeptorbindung werden Glycin und GABA durch Transporter wieder in die Nervenendigungen aufgenommen und erneut in synaptischen Vesikeln gespeichert. Ein Teil des aufgenommenen GABA wird durch Transaminierung zu Succinatsemialdehyd, welcher zur Dicarbonsäure dehydriert wird, enzymatisch inaktiviert (. Abb. 31.16). Dadurch wird die intramitochondriale D-Ketoglutaratdehydrogenase-Reaktion (dehydrierende Decarboxylierung von D-Keto-glutarat zu Succinyl-CoA) umgangen. Dieser sog. GABA-Shunt (Nebenweg) findet sich auch in der Nierenrinde. Pathobiochemie: Mutationen in Untereinheiten des inhibitorischen Glycin-Rezeptors können zu einer ausge-

prägten Schreckreaktion auf sensorische Reize (StartleSyndrom; Hyperekplexie), einem erhöhtem Muskeltonus und in schweren Fällen zu Atemstörungen führen. Dagegen sind Mutationen in GABAA-Rezeptoren für unterschiedliche Formen von Epilepsie verantwortlich. Autoantikörper gegen Glutamatdecarboxylase I haben das stiff-person-Syndrom zur Folge, eine neurologische Krankheit mit stark erhöhtem Muskeltonus infolge einer verminderten GABAergen Hemmung.

31.3.5

Dopamin, Noradrenalin und Adrenalin

! Dopamin, Noradrenalin und Adrenalin werden aus Tyrosin synthetisiert.

Diese Transmitter sind Zwischenprodukte eines gemeinsamen Biosynthesewegs, der von der aromatischen Aminosäure Tyrosin ausgeht. Je nach Enzymausstattung der Nervenendigung findet sich entweder Dopamin als Endprodukt oder, bei zusätzlicher Gegenwart der Dopamin-EHydroxylase, Noradrenalin. Bilden die Neurone außerdem das Enzym Phenylethanolamin-N-methyltransferase, so

31

1042

Kapitel 31 · Nervensystem

entsteht Adrenalin (7 Kap. 26.3.2). Diese Neurotransmitter wirken auf metabotrope G-Protein-gekoppelte Rezeptoren, welche ebenso wie andere Neurotransmitterrezeptoren eine ausgeprägte Heterogenität aufweisen und sowohl auf Neuronen als auch auf Effektorzellen vorkommen. Für Dopaminrezeptoren sind mindestens 5 verschiedene Subtypen (D1–D5) bekannt; adrenerge Rezeptoren werden in 7 Kap. 26.3.4 diskutiert. In den Nervenendigungen werden die Katecholamintransmitter in speziellen elektronendichten Vesikeln (dense core vesicles) gespeichert. Diese Vesikel enthalten auch die Neuropeptide (7 Kap. 31.3.8), während die Aminosäuretransmitter Glutamat, Glycin und GABA oder Acetylcholin in kleinen klaren synaptischen Vesikeln vorliegen. Nach ihrer Freisetzung werden Dopamin, Adrenalin und Noradrenalin durch Transporter wieder in die Nervenendigung aufgenommen. Diese Transporter stellen nicht nur Pharmakawirkorte, sondern auch Zielstrukturen von Suchtgiften wie Cocain dar. Ein Teil der wieder aufgenommenen Katecholamine wird in den Mitochondrien durch Monoaminoxidasen (MAO Typ A und B) und Catechol-Omethyltransferase (COMT) abgebaut (7 Kap. 26.3.5). Obwohl diese enzymatische Inaktivierung nur einen Bruchteil ausmacht, reicht die Menge der freigesetzten Metaboliten aus, um Störungen im Stoffwechsel dieser Transmitter zu erkennen (7 Kap. 26.3.4).

31

! Pathobiochemie: Dopaminmangel infolge eines Verlusts von melaninhaltigen Neuronen der Substantia nigra führt zu Morbus Parkinson.

Bei Schüttellähmung, dem Morbus Parkinson, kommt es zu einem Untergang von dopaminergen Neuronen der Substantia nigra. Dadurch ist der Dopamingehalt in den Zielgebieten dieser Neurone, dem Putamen und dem Nucleus caudatus, deutlich verringert. Dadurch wird ein für die extrapyramidale Motorik wichtiges Gleichgewicht zwischen cholinergen und dopaminergen Neuronen gestört, was als Bewegungsstörung mit Steifigkeit (Rigor) und Zittern (Tremor) der Extremitäten und Bewegungsarmut (Akinese) sichtbar wird. Diese Symptomatik lässt sich durch Gabe von Acetylcholinantagonisten oder durch Substitution des fehlenden Transmitters Dopamin mildern. Da aber Dopamin die Blut-Hirn-Schranke nicht passieren kann, verabreicht man die Vorstufe 3,4-Dihydroxy-L-Phenylalanin (L-Dopa), welche aktiv ins ZNS aufgenommen wird.

31.3.6

Serotonin

! Serotonin entsteht durch Decarboxylierung von Tryptophan.

Serotonin ist das hydroxylierte biogene Amin der essentiellen Aminosäure Tryptophan (5-Hydroxytryptamin). Es wird im Zentralnervensystem (Bulbus olfactorius, Dience-

. Abb. 31.17. Biosynthese und Abbau von Serotonin

phalon, insbesondere Hypophyse und Mesencephalon) und in den enterochromaffinen Zellen des Magen-DarmTrakts (zu 90%) synthetisiert. Im Blut wird es in Thrombozyten gespeichert und aus diesen freigesetzt (7 Kap. 29.4). Serotoninbiosynthese: Tryptophan wird über Transporter ins Gehirn aufgenommen, die es mit den verzweigtkettigen Aminosäuren (Valin, Leucin und Isoleucin), Phenylalanin und Tyrosin teilt. Anschließend erfolgt wie bei der Dopaminsynthese aus Tyrosin (7 Kap. 26.3.2) zunächst eine Hydroxylierung am Indolring, wodurch 5-Hydroxytryptophan entsteht (. Abb. 31.17). Das beteiligte Enzym, die Tryptophanhydroxylase, besitzt eine ungewöhnlich hohe Michaelis-Konstante (7 Kap. 4.4.1), sodass das Tryptophanangebot die Geschwindigkeit der Serotoninbiosyn-

1043 31.3 · Chemische Signalübertragung zwischen Neuronen

these bestimmt. Anschließend erfolgt eine Pyridoxalphosphat-abhängige Decarboxylierung zu 5-Hydroxytryptamin. Serotonin wird wie andere Neurotransmitter auch in Vesikeln in der Nervenendigung gespeichert und nach Stimulation in den synaptischen Spalt freigesetzt. ! Serotonin wirkt über metabotrope und ionotrope Rezeptoren.

Serotoninrezeptoren finden sich auf Neuronen, Gliazellen, glatter Muskulatur, Endothel- und Epithelzellen und Thrombozyten. Überwiegend werden G-Protein-gekoppelte Antworten ausgelöst, die zur Hemmung oder Stimulierung der Adenylatcyclase oder zur Stimulierung der Phospholipase C führen (7 Kap. 25.6.3). Pharmakologisch lassen sich diese Rezeptoren in verschiedene SubtypKlassen (5HT1, 5HT2, 5HT4) einteilen. Der 5HT3-Rezeptor ist dagegen ein pentamerer Liganden-regulierter Ionenkanal, welcher eine Depolarisation der Nervenzellmembran verursacht und aus homologen Untereinheiten mit 4 Transmembransegmenten besteht. Durch die verschiedenen Rezeptoren werden unterschiedliche biologische Effekte vermittelt: 4 5HT1-Rezeptoren verursachen eine Relaxation der glatten Muskulatur in Gefäßen und im Gastrointestinaltrakt und eine Kontraktion kranialer Blutgefäße 4 5HT2-Rezeptoren bedingen eine Kontraktion der glatten Muskulatur und Plättchenaggregation 4 5HT3-Rezeptoren sind an der Entstehung von Übelkeit, Erbrechen, Schmerzen und Angst beteiligt. 5HT3Rezeptorantagonisten besitzen deshalb eine wichtige Bedeutung bei der Behandlung von Übelkeit und Erbrechen Der Abbau von 5-Hydroxytryptamin erfolgt durch die mitochondriale Monoaminoxidase-Typ A. Dabei entsteht 5-Hydroxyindolacetaldehyd, dessen Dehydrierung zu 5-Hydroxyindolacetat führt (. Abb. 31.17), das in den Urin ausgeschieden wird (täglich 10–40 mmol). ! Pathobiochemie: Tumoren enterochromaffiner Zellen bilden vermehrt Serotonin.

Carcinoide sind Tumoren der enterochromaffinen Zellen, die meist im Dünndarm auftreten und Serotonin bilden. Die Serotoninkonzentration im Blut ist erhöht und 5-Hydroxyindolacetat, das Abbauprodukt von 5-Hydroxytryptamin, wird vermehrt im Urin ausgeschieden. Die Lebermetastasen dieser Tumoren bilden im Gegensatz zur gesunden Leber große Mengen an Kallikrein. Dieses Enzym setzt aus dem Kininogen des Blutplasmas Kinine (Kallidin und Bradykinin) frei. Die erhöhten Serotonin- und Bradykininkonzentrationen im Blut lösen die Symptomatik des Carcinoids (Anfälle mit purpurroter Verfärbung der Haut, Koliken, Diarrhö und Asthma) aus. Bei Diagnosestellung durch quantitative Bestimmung der 5-Hydroxyindolacetat-Konzentration im 24-Stunden-Urin ist darauf zu achten, dass während der

. Abb. 31.18. Biosynthese und Abbau von Melatonin

Urinsammlung stark Serotonin-haltige Früchte (Bananen, Walnüsse und Ananas) gemieden werden. ! Melatonin wird aus Serotonin gebildet und ist ein Hormon des Gehirns.

Melatonin wird in der Epiphyse (Glandula pinealis), einem endokrinen Organ des Zentralnervensystems, sowie in der Retina synthetisiert. Ausgangspunkt der Biosynthese ist

31

1044

Kapitel 31 · Nervensystem

Serotonin, das N-acetyliert und anschließend an der 5-Hydroxygruppe O-methyliert wird (. Abb. 31.18). Die Melatoninsynthese und -sekretion unterliegt einem ausgeprägten 24-Stunden-Rhythmus. Dieser wird über die Lichtwahrnehmung der Retina gesteuert und über suprachiasmatische Kerne im Hypothalamus und die Formatio reticularis auf die Epiphyse weitergeleitet. Daraus ergibt sich, dass die Plasma-Melatonin-Konzentration tagsüber niedrig ist, am frühen Abend vor dem Einschlafen ansteigt und ein Maximum gegen Mitternacht erreicht. Bei Reisen durch Zeitzonen wird dieser Rhythmus gestört, sodass die vorübergehende Desynchronisierung der Melatoninsekretion am Jetlag beteiligt sein könnte. Aus diesem Grund wird Melatonin häufig zur Vorbeugung des Jetlags verwendet. Außer dieser Funktion im Rahmen der Aufrechterhaltung einer circadianen Rhythmik beeinflusst Melatonin neuroendokrine Funktionen.

31.3.7

ATP/Adenosin

! ATP ist nicht nur das wichtigste Energiespeichermolekül in der Zelle, sondern dient zusammen mit seinen Metaboliten auch als extrazellulärer Botenstoff insbesondere zwischen Neuronen und Gliazellen.

31

Das energiereiche Nucleotid ATP wird im ZNS zusammen mit den klassischen Neurotransmittern in synaptischen Vesikeln gespeichert und durch Aktionspotentiale als Cotransmitter an der Nervenendigung freigesetzt. Auch Gliazellen können ATP nach Stimulation sezernieren. An Nervenzellen aktiviert ATP entweder ligandengesteuerte Ionenkanäle der sog. P2X-Rezeptorfamilie (. Abb. 31.13), die eine rasche synaptische Erregungsübertragung z. B. bei der Schmerzwahrnehmung vermitteln, oder metabotrope P2Y-Rezeptoren. Letztere gehören ebenso wie die weit verbreiteten P1-Adenosinrezeptoren zu der Großfamilie der G-Protein gekoppelten Rezeptoren. Adenosin entsteht extrazellulär durch den von Ektonucleotidasen katalysierten Abbau von ATP über ADP und AMP, welche teilweise auch als P2Y-Agonisten wirken. Je nach P2Y-Rezeptorsubtyp können unterschiedliche G-Proteine und damit verschiedene intrazelluläre Signalkaskaden aktiviert werden. P2X- und P2Y-Rezeptoren sind außer für synaptische Übertragungsvorgänge vor allem für die Aktivierung und Kommunikation zwischen Gliazellen wichtig. So regulieren sie Apoptose und Proliferation der Glia sowie Regenerationsvorgänge.

31.3.8

Peptiderge Neurotransmitter

! Endorphine sind Peptide und körpereigene Liganden für Opiatrezeptoren.

Das Schmerzmittel Morphin und andere Opiate wirken auf hochaffine Rezeptoren im Nervensystem. Ausgehend von der Überlegung, dass für diese Opiatrezeptoren auch körpereigene Liganden existieren müssen, konnten endogene Morphine, die sog. Endorphine, identifiziert werden. Sie besitzen ebenfalls eine analgetische Wirkung und können die Körpertemperatur erhöhen oder senken. Sie finden sich neben anderen Hirnarealen insbesondere in der Pars intermedia der Hypophyse. Endorphine entstehen durch proteolytische Spaltung aus dem aus 91 Aminosäuren bestehenden lipotropen Hormon (E-LPH oder E-Lipotropin), das seinerseits Teil eines Vorläuferproteins für diverse Hormone, des Proopiomelanocortins (POMC), ist (. Abb. 31.19). Alle Endorphine (DEJG beginnen mit Position 104 des E-LPH/ ACTH Proproteins, unterscheiden sich aber in ihrer Länge (10–30 Aminosäuren). Durch weitere Spaltung entstehen Pentapeptide mit opioider Wirkung, die sog. Enkephaline (griech. im Kopf); ähnlich wirken die Dynorphine und Neoendorphine. Alle Peptide mit Opiatwirkung entstehen aus drei verschiedenen, grundsätzlich ähnlich aufgebauten Vorstufenproteinen von jeweils etwa 28 kDa (Proopiomelanocortin, Proenkephalin, Prodynorphin). Die proteolytische Prozessierung erfolgt meist an zwei aufeinander folgenden basischen Aminosäureresten (Lysin/Arginin), wobei die Art der gebildeten Peptide durch den spezifischen Proteasenbesatz der Zelle bestimmt wird, in der das Vorstufen-Gen exprimiert wird. Die verschiedenen opioiden Peptide aktivieren spezifische Opiatrezeptor-Isoformen, welche die Adenylatcyclase hemmen: 4 Dynorphin und die am C-Terminus verlängerten LeuEnkephaline den sog. N-Rezeptor 4 E-Endorphin und die Enkephaline den P-Rezeptor und 4 die Enkephaline den G-Rezeptor Nach der Freisetzung in den synaptischen Spalt und Bindung an Rezeptoren werden die opioiden Peptide ebenso wie andere Neuropeptide durch extrazelluläre membranständige Peptidasen inaktiviert. ! Neurotransmitter und Neuropeptide können im gleichen Neuron coexistieren.

In sehr vielen Neuronen kommen klassische Neurotransmitter zusammen mit Neuropeptiden (in unterschiedlichen Vesikeln) vor und werden zusammen mit diesen freigesetzt. Dies erlaubt die gleichzeitige Auslösung sehr schneller (im Millisekundenbereich, klassische Neurotransmitter) und langsamerer (im Sekundenbereich, Neuropeptide) Übertragungsvorgänge.

1045 31.4 · Nicht-neuronale Zellen

. Abb. 31.19. Entstehung von Endorphinen. Endorphine entstehen durch limitierte Proteolyse von Proopiomelanocortin, welche ausser ACTH und β-LPH kleine Peptidhormone inklusive β-Endorphin

und MET-Enkephalin erzeugt. ACTH = adrenocorticotropes Hormon; MSH = Melanozyten-stimulierendes Hormon; CLIP = corticotropin-like peptide; LP = Lipotropin

Neben den opioiden Peptiden wurden eine Reihe anderer Peptide, v.a. des Gastrointestinaltrakts, wie Substanz P, Neuropeptid Y, Neurotensin oder Cholecystokinin, im Nervensystem nachgewiesen. Die genauen physiologischen Funktionen dieser Peptidneurotransmitter sind erst ansatzweise bekannt.

31.4

Nicht-neuronale Zellen

31.4.1

Gliazellen und Myelin

In Kürze Die Signalübertragung von Neuron zu Neuron kann über elektrische oder chemische Synapsen erfolgen. Die chemische Kommunikation wird über Neurotransmitter vermittelt, deren Rezeptoren Ionenkanäle oder G-Protein gekoppelte Rezeptoren sind. Neurotransmitter, die zu den verschiedensten Stoffgruppen gehören können, werden nach Bindung an diese Rezeptoren über unterschiedliche Mechanismen inaktiviert. Für Dopamin, Noradrenalin und Adrenalin wurden bisher noch keine ionotropen Rezeptoren identifiziert und für Glycin kein metabotroper Rezeptor. Alle anderen Neurotransmitter können sowohl ionotrope als auch metabotrope Wirkungen haben. Neuropeptide wirken stets über G-Protein gekoppelte Rezeptoren.

! Gliazellen dienen der elektrischen Isolierung und trophischen Unterstützung von Neuronen, wobei myelinbildende von nicht-myelinisierenden Gliazellen unterschieden werden.

Neben Neuronen kommen im Nervensystem Zellen mit Stütz- und Ernährungsfunktion vor, die als Gliazellen oder Neuroglia bezeichnet werden. Diese Zellen sind etwa zehnmal häufiger als Neurone und lassen sich in mehrere Subgruppen klassifizieren: Oligodendroglia-Zellen bilden im ZNS und Schwann-Zellen im peripheren Nervensystem die Myelinscheide der Axone. Schwann-Zellen synthetisieren außerdem neurotrophe Faktoren, die das Überleben von Neuronen sichern. Astrogliazellen bilden Fortsätze zu den Blutgefäßen aus und tragen zur Versorgung der Neurone bei. Als Makrophagen des ZNS dienen die Zellen der Mikroglia der immunologischen Abwehr und wirken an der Beseitigung von Zelltrümmern mit. ! Myelinscheiden sind spezialisierte Membranstrukturen von Gliazellen.

Die Axone von markhaltigen Nerven sind von Myelinscheiden umgeben, die von den Plasmamembranen der

31

1046

Kapitel 31 · Nervensystem

9 . Abb. 31.20. Bildung und Aufbau von Myelinscheiden. Oben: Bildung der Myelinscheiden um das Axon durch Oligodendrozyten im Zentralnervensystem oder Schwann-Zellen im peripheren Nervensystem. Mitte: Längsschnitt durch ein Axon mit Ranvier’schen Schnürringen. Unten: Organisation des Myelins durch Aneinanderlagerung der extra- und intrazellulären Schichten der Gliaausläufer. Diese werden durch Wechselwirkungen zwischen den intra- und extrazellulären Domänen der verschiedenen Myelinproteine dicht gepackt

31

Oligodendrozyten oder Schwann-Zellen gebildet werden (. Abb. 31.20). Im ZNS wickeln sich die Ausläufer eines Oligodendrozyten spiralförmig um bis zu 50 verschiedene Axone. Dabei sind die einzelnen Lagen der Plasmamembran so eng gepackt, dass kaum Cytosol in den Fortsätzen verbleibt. Die intrazellulären Oberflächen der Membranfortsätze verschmelzen deshalb in der Elektronenmikroskopie zu einer dichten Linie. Auch die extrazellulären Oberflächen der Plasmamembranen treten in engen Kontakt und bilden die Zwischenraumlinien aus. Die Plasmamembranen der Myelinscheiden unterscheiden sich von denen anderer Zellen durch ein besonderes Proteinmuster. Die für die Markscheiden des ZNS charakteristischen Proteine werden von Oligodendrozyten synthetisiert: 4 Proteolipidprotein (PLP) und seine Spleißvariante DM20 bestehen überwiegend aus hydrophoben Aminosäuren und weisen 4 Transmembranregionen auf. PLP trägt zur kompakten Axonumwicklung durch Markscheiden bei 4 Myelin-assoziiertes und Myelin-Oligodendrozytenassoziiertes Glycoprotein (MAG und MOG) vermitteln den Kontakt zwischen Axon und den Blättern der Myelinscheide Die von Schwann-Zellen produzierte Myelinscheide peripherer Nerven unterscheidet sich von der des ZNS durch: 4 Protein Null (P0) trägt eine Immunglobulin-ähnliche extrazelluläre Domäne und macht > 50% des peripheren Myelinproteins aus. P0 wirkt als Adhäsionsmolekül, das die Blätter der Myelinscheide zusammen hält 4 Das periphere Myelinprotein (PMP-22) besitzt 4 Transmembranregionen und eine Molekülmasse von 22 kD Mehrere Proteine kommen – wenn auch in unterschiedlichem Ausmaß – sowohl in zentralem als auch in peripherem Myelin vor: 4 Das basische Myelin-Protein (MBP) macht 30–40% der Myelinproteine aus und ist auf der cytoplasmatischen Seite innerhalb der dichten Linie lokalisiert. Immunisierung von Versuchstieren mit MBP führt zur experimentellen allergischen Enzephalomyelitis, einem Tiermodell der multiplen Sklerose 4 Obwohl die 2c,3c-Cyclonucleotidphosphodiesterase (CNP) der Markscheiden des ZNS und der peripheren Schwann-Zellen eine hohe enzymatische Aktivität be-

1047 31.4 · Nicht-neuronale Zellen

. Tabelle 31.5. Gendefekte bei erblichen Neuropathien des peripheren Nervensystems Neuropathie

Gen

Protein

Mutation

CMT1A

PMP22

Peripheres Myelinprotein (22 kD)

Genduplikation

CMT1B

P0

Protein Null (30 kD)

Punktmutationen

CMTX

Cx32

Connexin 32

Punktmutationen

HNPP

PMP22

Peripheres Myelinprotein (22 kD)

Deletion des Gens

sitzt, ist ihre Funktion nicht genau bekannt. CNP ist für den Erhalt der Struktur der Ranvierschen Schnürringe erforderlich Mit Ausnahme des basischen Myelin-Proteins und der 2c,3c-Cyclonucleotidphosphodiesterase besitzen diese Myelinproteine eine oder mehrere Transmembrandomänen.

31.4.2

Demyelinisierungen und erbliche periphere Neuropathien

! Störungen der Myelinbildung führen zu schweren neurologischen Krankheiten.

Immunologische und genetische Störungen der Myelinisierung führen zu neurologischen Erkrankungen. Bei Multipler Sklerose tritt im ZNS eine progrediente Demyelinisierung auf, die schwere Funktionsstörungen der betroffenen Hirnregionen verursacht. Es wird vermutet, dass es sich dabei um eine Autoimmunreaktion gegen Proteine der Myelinscheide handelt. Diese richtet sich wahrscheinlich gegen ein immundominantes Epitop des basischen MyelinProteins MBP (Aminosäuren 85–99). Die innerhalb des ZNS ablaufende Antikörperbildung wird durch oligoklonale Banden im Liquor ersichtlich (vgl. . Abb. 31.3). ! Mutationen in Genen für Myelinproteine verursachen periphere Neuropathien.

Im Jahr 1886 beschrieben die Ärzte Jean-Martin Charcot und Pierre Marie in Frankreich und Howard Tooth in England eine Erbkrankheit, die im 1.–3. Lebensjahrzehnt manifest wird und durch zunehmende Muskelschwäche bei abnehmender Nervenleitgeschwindigkeit charakterisiert ist. Die Muskelschwäche ist in den Beinen stärker ausgebildet als in den Armen. Heute wissen wir, dass die CharcotMarie-Tooth-Krankheit zu den hereditären motorischen und sensiblen Neuropathien (HMSN) gehört, die auf Mutationen unterschiedlicher Gene (. Tabelle 31.5) zurückzuführen sind. Der Schweregrad der angeborenen peripheren Neuropathien ist recht unterschiedlich. Im elektronenoptischen Bild weisen die Axone von Patienten mit Charcot-Marie-Tooth-Krankheit sehr dünne Myelinscheiden und duplizierte Schwann-Zellfortsätze auf, die wie Zwiebelschalen aussehen. Dieses Bild spricht für eine Stö-

rung der Myelinisierung durch Mutationen von Myelinproteinen. Den HMSN, zu denen die Charcot-Marie-ToothKrankheit gehört, liegen verschiedene Mutationen zugrunde. Für die Krankheitsvariante CMT-1A ist das periphere Myelinprotein PMP-22 verantwortlich, für das sowohl chromosomale Genduplikationen als auch Punktmutationen beschrieben worden sind. Unklar bleibt, wie eine vermehrte Bildung von PMP-22 ebenso wie die Reduktion seiner Biosynthese zu ein und demselben Krankheitsbild führen können. Der Variante CMT-1B liegen Mutationen des P0-Gens zugrunde. Bei der selteneren Form CMT-X der Krankheit handelt es sich um eine zum Funktionsverlust führende Mutation von Connexin 32 (7 Kap. 6.1.6), dem einzigen in Schwann-Zellen exprimierten Connexin. Es kommt zum Verlust der für die Ernährung der lamellären Myelinscheiden wichtigen gap-junctions. In Kürze Gliazellen nehmen im Nervensystem Stütz- und Ernährungsfunktionen wahr, bilden das Myelin der Axone und sind ein wichtiger Bestandteil der Blut-HirnSchranke. Oligodendroglia- und Schwann-Zellen sind für die Biosynthese und den Strukturerhalt der Myelinscheiden verantwortlich. Störungen der Myelinisierung führen zu schweren neurologischen Krankheiten.

31.4.3

Besonderheiten des peripheren Nervensystems

! Bei der Regeneration eines peripheren Nerven, z.B. nach Durchschneidung, wirken Neuronen, SchwannZellen und Makrophagen zusammen.

Periphere Nerven können im Gegensatz zu den zentralen Nervenbahnen nach einer Verletzung wieder regenerieren. Nach Durchtrennung eines peripheren Nerven (Axotomie) wird ein Genexpressionsprogramm aktiviert, das zu einer vollständigen Regeneration führen kann. Die Regeneration kommt durch die konzertierte Aktion des verletzten Neurons, aus dem neue Axone aussprossen, und benachbarter Schwann-Zellen, die dieses Wachstum unterstützen, zu-

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1048

Kapitel 31 · Nervensystem

stande. Nach einer Axotomie proliferieren Schwann-Zellen und stellen ihr Syntheseprogramm von Myelinproteinen auf Proteine der extrazellulären Matrix (Laminin, Fibronektin) und auf Adhäsionsmoleküle (Integrine) um. Einwandernde Monozyten räumen Myelinreste und Zelltrümmer durch Phagozytose ab. Zugleich werden neurotrophe Faktoren wie Nervenwachstumsfaktor (NGF, nerve growth factor) und die Neurotrophine (7 Kap. 31.6) exprimiert. In Kürze Im Gegensatz zu zentralen Neuronen gelingt peripheren Nervenzellen nach Verletzung des Axons eine funktionelle Regeneration. Die Regeneration hängt von einer Aktivierung von Schwann-Zellen und Makrophagen sowie der lokalen Produktion neurotropher Faktoren ab.

31.5

Neurodegenerative Krankheiten

! Neurodegenerative Krankheiten werden nach den ursächlichen pathobiochemischen Mechanismen und ihrem neuropathologischen Erscheinungsbild klassifiziert.

31.5.1

31

Morbus Alzheimer

Amyloid und Neurofibrillen: Im Jahr 1906 beschrieb der Neuropathologe Alois Alzheimer erstmals die nach ihm benannte, in der Regel nach dem 60. Lebensjahr auftretende Alzheimersche Krankheit. Diese beginnt schleichend mit kleinen Vergesslichkeiten und schreitet über Jahre hinweg zu einer ausgeprägten räumlichen und zeitlichen Desorientierung bis zum Tode fort. In Deutschland sollen etwa 25% der über 85-Jährigen von dieser Krankheit betroffen sein. . Abb. 31.21. Lichtmikroskopische Aufnahme von Alzheimer-Plaques. Die Immundarstellung zeigt Plaques, die aus kompakten kugelförmigen Amyloidablagerungen bestehen (Aufnahme von I. Blümcke, Institut für Neuropathologie, Universität ErlangenNürnberg)

Im Gehirn der Patienten treten zwischen den Neuronen Plaques (. Abb. 31.21) auf, die weitgehend aus einem Peptid mit 39–43 Aminosäuren bestehen, das als E-Amyloid bezeichnet wird. Dabei handelt es sich um ein proteolytisches Fragment eines integralen Membranproteins unbekannter Funktion, das als E-Amyloidproteinvorläufer (E-amyloid protein precursor, E-APP) bezeichnet wird. Das mit einer Transmembrandomäne in der Plasmamembran verankerte Membranprotein E-APP gehört zu einer Proteinfamilie, die im Nervensystem in verschiedenen Isoformen vorkommt. E-APP wird durch überwiegend membrangebundene Proteasen, den in mehreren Varianten existierenden Sekretasen, proteolytisch prozessiert (. Abb. 31.22). Dabei wird APP entweder von D- und J- oder E- und J-Sekretasen gespalten. Eine Spaltung durch D- und J-Sekretasen führt zu Bruchstücken, die keine Amyloidplaques bilden, während die E- und J-Sekretase-spaltung pathologische AE-Peptide produziert. Diese aggregieren zu den neuropathologisch typischen Plaques, die sich zwischen Synapsen schieben und entzündliche Gewebereaktionen induzieren. Durch Mutationen im Bereich der proteolytischen Schnittstellen des E-APP-Gens kann es zu einer besonders früh einsetzenden erblichen Form des Morbus Alzheimer kommen. Auch Patienten mit Trisomie 21 (Down-Syndrom) entwickeln meist um das 40. Lebensjahr eine Alzheimersche Krankheit. Da das Gen für E-APP auf Chromosom 21 liegt, wird vermutet, dass eine Überproduktion des E-APP zum Untergang von Neuronen führt. Mutationen von Presenilin, das Teil der J-Sekretase ist, führen zu einer autosomal dominanten Form der Alzheimerschen Krankheit. Innovative Therapieansätze zielen auf die Stimulation des DJ-Sekretase- oder die Inhibition des E-/J-Sekretase-Wegs ab. Die zweite Auffälligkeit, die sich neuropathologisch bei der Demenz vom Alzheimer-Typ nachweisen lässt, ist die Bildung von pathologischen Neurofibrillen-Bündeln, (neurofibrillary tangles), die hauptsächlich aus dem Protein Tau bestehen.

1049 31.5 · Neurodegenerative Krankheiten

. Abb. 31.22. Proteolytische Prozessierung des β-Amyloidvorläufer-Proteins (APP). APP ist ein integrales Membranprotein, dessen Funktion nicht bekannt ist. Durch eine als D-Sekretase bezeichnete Protease wird APP in eine lösliche Form überführt, die im Plasma nachgewiesen werden kann. APP kann durch zwei weitere Enzyme, die E- und J-Sekretasen, gespalten werden. Während die D- und

E-Sekretasen extrazellulär schneiden, liegt die J-Sekretase-Schnittstelle im Transmembransegment von APP. Nur die kombinierte Spaltung durch E- und J-Sekretase führt zur Entstehung der krankheitserzeugenden AE-Peptide, die sich zu extrazellulären Amyloid-Plaques zusammenlagern. (Mit freundlicher Erlaubnis nach O. Haass, LMU München)

Tauopathien: Als Bestandteil des Cytoskeletts (7 Kap. 6.3) ist das intrazelluläre Strukturprotein Tau für die Sta-

hören Chorea Huntington, spinobulbäre Muskelatrophie, dentato-rubro-pallido-luysianische Atrophie (DRPLA) und spinocerebelläre Ataxien (Typ 1-3, 6, 7, 17). Charakteristisch sind intraneuronale Einschlüsse, die durch eine Ubiquitin-Färbung darstellbar sind. Das Auftreten von Ubiquitin in diesen Ablagerungen wird als Versuch des Neurons gedeutet, die pathologischen Proteine über den Ubiquitin-Proteasom-Weg (7 Kap. 9.3.5) abzubauen. Das bei der Huntington-Krankheit veränderte Protein wurde Huntingtin genannt; seine physiologische Funktion ist bisher unbekannt.

bilisierung von Mikrotubuli in Neuronen verantwortlich. Hyperphosphoryliertes Tau lagert sich in Fibrillenform zu intraneuronalen Aggregaten (sog. tangles oder neurofibrillären Bündeln) zusammen, die intrazelluläre Transportprozesse behindern. Unter dem Begriff ›Tauopathien‹ versteht man Erkrankungen des Gehirns, bei denen Mutationen des Tau-Proteins nachweisbar sind (z.B. frontotemporale Demenz mit Parkinsonismus). Umgekehrt wird auch vermutet, dass weitere neurologische Krankheiten, bei denen ebenfalls Tau-Ablagerungen auftreten, auf einen ähnlichen Mechanismus zurückzuführen sind. Zu diesen gehören die Demenz vom Alzheimer Typ, Morbus Pick, corticobasale Degeneration und die progressive supranukleäre Blickparese. Die Einteilung nach pathobiochemischen Mechanismen bringt mit sich, dass die Alzheimersche Krankheit sowohl als Amyloid/Neurofibrillen- als auch als Tau-Störung eingeordnet werden kann.

31.5.2

Polyglutamin-Krankheiten

Das Trinucleotid CAG codiert für die Aminosäure Glutamin; Wiederholungen dieses Motivs aus den für Glutamin codierenden Basen CAG werden als Trinucleotid-repeats bezeichnet. Erbliche Verlängerungen von Trinucleotid-repeats führen zu Polyglutamin-Krankheiten, wobei das mutierte Protein intrazelluläre Ablagerungen bildet. Diese stören die Funktion von Nervenzellpopulationen, in denen das betroffene Gen stark exprimiert wird. Dabei korreliert die Länge der Trinucleotid-Repeats mit dem Schweregrad der Erkrankung. Zu den Polyglutamin-Krankheiten ge-

31.5.3

Morbus Parkinson

Die Ursache des Untergangs der dopaminergen Neurone der Substantia nigra bei Morbus Parkinson, der in den Zielgebieten des Putamens und des Nucleus caudatus zu einer Dopaminverarmung führt, ist bisher nicht geklärt. Charakteristisch für die degenerierenden Neurone sind die durch Ubiquitin-Färbung darstellbaren Lewy-Körperchen. Diese intrazellulären Einschlüsse, die sich nicht nur bei der Parkinsonschen Krankheit, sondern auch bei der Lewy-Körperchen-Krankheit finden, deuten auf einen gemeinsamen pathobiochemischen Mechanismus hin. Beim Morbus Parkinson konnte das ubiquitinierte Protein als α-Synuclein identifiziert werden. Familiäre Formen des M. Parkinson sind durch Mutationen in Parkin, einer Ubiquitin-Ligase, und weiteren Genloci verursacht. Seltenere neurologische Krankheiten wie die Myoklonus-Epilepsie zeichnen sich durch intraneuronale Einschlüsse aus Polyglucosanen aus, die als Lafora-Körperchen bezeichnet werden. Intra- und extrazelluläre Ablage-

31

1050

Kapitel 31 · Nervensystem

rungen bei Speicherkrankheiten oder Enzymdefekten werden in den einzelnen Kapiteln besprochen.

31.5.4

31

Prionkrankheiten

Prion-Proteine können sich in eine krankheitserzeugende Konformation umformen, die extrazelluläre Aggregate bildet und wichtige Zellfunktionen stört (7 Kap. 3.4.2). Dieser Vorgang führt schließlich zum apoptotischen Zelltod. In gesunden Geweben kommen Prion-Proteine in monomerer, nicht pathogener Form (PrPc, Prion Protein cellular = zelluläres Prion-Protein) in überwiegend D-helicaler Konformation vor. Die Konversion in die krankheitserzeugende Konformation PrPSc (Prion Protein Scrapie; pathogene Form, die zuerst bei an Scrapie erkrankten Tieren gefunden wurde) ist mit einer Änderung der Sekundärstruktur verbunden: PrPSc ist ein oligomeres Protein mit einem hohen Anteil an E-Faltblatt-Strukturen, das eine sehr hohe Resistenz gegenüber Proteasen aufweist. PrPSc-Partikel sind infektiös. Diese Infektiösität wird von der protein onlyHypothese dadurch erklärt, dass PrPSc die Fehlfaltung von bisher normalem PrPc in die pathologische Konformation PrPSc induziert (. Abb. 31.23). Prionkrankheiten treten als sporadische, erbliche oder infektiöse Formen auf. Die Kuru-Krankheit in Neuguinea wurde auf rituelle Handlungen zurückgeführt, bei denen menschliches Gehirn verzehrt wurde. Zu den in der westlichen Welt auftretenden sporadischen oder als autosomal-dominante Mutationen des Priongens auftretenden Prion-Erkrankungen gehören die Creutzfeldt-Jakob-Krankheit, das Gerstmann-Sträussler-Scheinker-Syndrom und die tödliche familiäre Insomnie. Diese Krankheiten führen unweigerlich zum Tode. Die Creutzfeldt-Jakob-Krankheit beginnt meist mit Schreckhaftigkeit, Muskelzuckungen und Verwirrtheit und mündet in einen dementiellen Abbau. Neuropathologisch findet sich eine schwammartige Veränderung des Hirngewebes, die zu dem Namen »spongiöse Enzephalopathie« geführt hat. Da das fehlgefaltete Prionprotein sehr stabil ist, besteht nach Kontakt mit ZNS-Gewebe von erkrankten Personen die Gefahr der Übertragung durch chirurgische Instrumente, EEG-Tiefenelektroden und Gewebespenden

. Abb. 31.23. Entstehungsmechanismus von Prion-Aggregaten bei spongiformen Enzephalopathien. a Normales Prion-Protein PrPc wird durch Konformationsänderung zu PrPSc umgewandelt, das unlösliche Proteinaggregate bildet. Das fehlgefaltete PrPSc stößt wiederum die Fehlfaltung des normalen PrPc zu PrPSc an und induziert damit neurodegenerative Veränderungen (protein-only-Hypothese). Diese Kaskade kann durch spontane Konformationsänderung, eine Konformationsänderungen begünstigende Mutation oder externe Zufuhr von PrPSc ausgelöst werden. b Monomeres PrPc besitzt eine überwiegend D-helicale Struktur, die sich durch Konformationsänderung in das E-Faltblatt-reiche Protein PrPSc wandelt. Wahrscheinlich bildet PrPSc Trimere, die sich zu sehr stabilen Aggregaten aufschichten (Modellierung von Heike Meisenbach und Heinrich Sticht, Institut für Biochemie, Universität Erlangen-Nürnberg nach Daten von Govaerts C et al. (2004) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101, 8342-8347)

(Dura mater, Hormonextrakte aus der Hirnanhangsdrüse). Bei Tieren treten spongiöse Enzephalopathien als Scrapie bei Schafen und als bovine spongiforme Enzephalopathie (BSE, Rinderwahnsinn) bei Rindern auf. Durch eine große Zahl von erkrankten Rindern wurde die öffentliche Aufmerksamkeit in den 90er Jahren auf BSE gelenkt, dessen Übertragbarkeit auf den menschlichen Organismus befürchtet wurde.

In Kürze Viele neurodegenerative Krankheiten weisen extraoder intrazelluläre Ablagerungen dysfunktioneller Proteine auf. Diese bilden Aggregate und formen 5 Amyloid-Plaques 5 neurofibrilläre Bündel aus hyperphosphoryliertem Tau-Protein 5 Polyglutamin-Protein-Aggregate 5 Lewy-Körperchen aus ubiquitinierten Proteinen 5 Lafora-Körperchen aus Polyglucosanen

Bei der Alzheimerschen Krankheit finden sich 5 extrazellulär Plaques und 5 intrazellulär Neurofibrillen-Bündel Prion-Krankheiten sind auf unterschiedliche Entstehungsmechanismen zurückzuführen. Gelangen fehlgefaltete Prionproteine durch Infektion in einen Fremdorganismus, können sie dort die Fehlfaltung der endogenen Proteine induzieren. Außerdem werden humane Prionen-Krankheiten durch Mutationen des Gens für das Prionproteins verursacht.

1051 Literatur

31.6

Neuronale Stammzellen und neurotrophe Faktoren

Während der Ontogenese entwickeln sich Nervenzellen und nicht-neuronale Zellen des Nervensystems aus gemeinsamen Stammzellen. Die Ausdifferenzierung dieser pluripotenten Vorläuferzellen in Neurone und Gliazellen wird durch Differenzierungsfaktoren und ortsständige Oberflächenmoleküle gesteuert. Vorläuferzellen persistieren auch im adulten ZNS. Therapieversuche bei Schlaganfall, neurodegenerativen Krankheiten oder multipler Sklerose zielen auf eine verbesserte Regenerationsfähigkeit des ZNS durch Aktivierung dieser Vorläuferzellen oder durch Transplantation von Stammzellen ab. Entwicklung, Erhaltung und Regeneration von Nervenzellen und Nervenzellfortsätzen werden von Neurotrophinen gefördert. Der Nervenwachstumsfaktor NGF (nerve growth factor) ist ein Protein aus der Familie der Cytokine, das von Viktor Hamburger, Rita Levi-Montalcini und Stanley Cohen aufgrund seiner Bedeutung für das Überleben von sympathischen Neuronen entdeckt wurde. Anschließend wurden weitere Neurotrophine mit unterschiedlicher Zellspezifität identifiziert: BDNF (brain-derived neurotrophic factor), NT-3 (Neurotrophin-3) und NT-4 (Neurotrophin-4). Neurotrophine aktivieren RezeptorTyrosinkinasen. Weitere das Überleben von Neuronen fördernde Faktoren mit unterschiedlichen Wirkmechanismen sind der mit TGFE verwandte gliale Faktor GDNF (glial-cell line-derived neurotrophic factor), das Cytokin CNTF (ciliary neurotrophic factor) und möglicherweise VEGF (vascular endothelial growth factor). NGF induziert das Auswachsen eines Wachstumkegels an der Spitze eines Axons. Dieser wird durch lösliche (Netrine) und ortsständige (Cadherine) Signale in sein Zielgebiet geleitet (Chemoattraktion). Umgekehrt stoßen außerhalb der Zielregionen sezernierte lösliche Proteine (Semaphorine) und Oberflächenmoleküle (Ephrine) den Wachstumskegel ab (Chemorepulsion). Ähnliche chemotrope Prozesse steuern die Wanderung von Vorläuferzellen während der Gehirnentwicklung. Zusätzlich sind Plasmamembranproteine wie das neurale Zelladhäsionsmolekül N-CAM (neural cell adhesion molecule) oder die auch in anderen Geweben vorkommenden Integrine (7 Kap. 24.5.3) entscheidend an der Bildung von Nervenbündeln bzw. dem Auswachsen von Neuronen beteiligt. Die mangelnde Regenerationsfähigkeit zentralnervöser Neurone ist auf die Existenz repulsiver Zelloberflächen-

moleküle (z. B. des Myelin-assoziierten Glycoproteins MAG) auf zentralnervösen Gliazellen, insbesondere Oligodendrozyten, zurückzuführen. Derzeit wird deshalb versucht, die neuronale Regeneration bei Querschnittslähmung durch Hemmung dieser »Regenerationsinhibitoren« zu verbessern. In Kürze Wachstum und Erhalt von Nervenzellen werden durch lösliche neurotrophe Faktoren gesteuert. Die Ausbildung und Regeneration von Nervenzellfortsätzen wird durch lösliche und membrangebundene Proteine reguliert, die entweder anziehende (Chemoattraktion) oder abstoßende (Chemorepulsion) Wirkungen haben. Die adulten Gliazellen des ZNS besitzen repulsive Zelloberflächenmoleküle, welche die Regeneration von Nervenzellfortsätzen im ZNS verhindern

Literatur Monographien und Lehrbücher Bear MF, Connors BW, Paradiso MA (2006) Neuroscience. Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore Felgenhauer K, Beuche W (1999) Labordiagnostik neurologischer Erkrankungen. Thieme, Stuttgart Kandel ER, Schwartz JH, Jessell TM (Hrsg) (2000) Priciples of Neural Science. McGraw-Hill/Appleton & Lange Kettenmann H, Ransom BR (eds) (2004) Neuroglia. University Press, Oxford Nicholls JG, Martin AR, Wallace BG (Hrsg) (2002) Vom Neuron zum Gehirn. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg Poeck K, Hacke W (2006) Neurologie. Für Studium, Klinik und Praxis. Springer, Berlin Siegel GJ, Albers RW, Brady ST, Price DL (eds) (2006) Basic Neurochemistry. Elsevier, Amsterdam Original- und Übersichtsarbeiten Aguzzi A, Polymenidou M. (2004) Mammalian Prion Biology: One Century of Evolving Concepts. Cell 116:313–327 Frisen J (1997) Determinants of axonal regeneration. Histol Histopathol 12:857–868 Rautenstrauss B, Liehr T, Fuchs C et al. (1997) Molekulargenetische Diagnostik der Charcot-Marie-Tooth’schen Erkrankung (CMT) sowie der tomakulösen Neuropathie (HNPP). Med Genetik 9:501–504 Wolf S et al. (1996) Die Blut-Hirn-Schranke: Eine Besonderheit des cerebralen Mikrozirkulationssystems. Naturwissenschaften 83:302– 311 Links im Netz 7 www.lehrbuch-medizin.de/biochemie

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32 32

Gastrointestinaltrakt Georg Löffler, Joachim Mössner

32.1

Gastrointestinale Sekrete – 1054

32.1.1 32.1.2 32.1.3 32.1.4 32.1.5 32.1.6 32.1.7

Speichel – 1054 Magensaft – 1054 Pankreassekrete – 1057 Galle – 1060 Duodenalsekret – 1062 Regulation der gastrointestinalen Sekretion Pathobiochemie – 1067

32.2

Verdauung und Resorption einzelner Nahrungsbestandteile – 1068

32.2.1 32.2.2 32.2.3 32.2.4 32.2.5 32.2.6

Kohlenhydrate – 1069 Lipide – 1070 Proteine, Peptide und Aminosäuren – 1073 Resorption von Wasser und Elektrolyten – 1074 Schicksal der Nahrungsstoffe im Colon – 1076 Pathobiochemie – 1076

32.3

Das Immunsystem des Intestinaltrakts – 1079 Literatur

– 1080

– 1062

1054

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

> > Einleitung Der Gastrointestinaltrakt ist eines der komplexesten Organsysteme des menschlichen Organismus. Er ist von vitaler Bedeutung für sämtliche Lebensvorgänge, da er für die Aufnahme der Nahrungsstoffe und damit für die Aufrechterhaltung der Energiezufuhr des Organismus verantwortlich ist. Die Nährstoffe können i. Allg. in der angebotenen Form vom Organismus nicht aufgenommen werden, da es sich um hochmolekulare bzw. nicht oder nur schwer wasserlösliche Verbindungen handelt. Die Aufgabe der Verdauungsvorgänge im Magen-Darm-Trakt besteht darin, die Nahrungsstoffe zu einer für die anschließende Resorption im Duodenum, Jejunum und Ileum geeigneten Form abzubauen. Dies geschieht durch hydrolytische Spaltung der hochmolekularen Verbindungen in ihre monomeren Bausteine. Sie erfolgt durch die in den verschiedenen Verdauungssäften des Magen-Darm-Traktes und in der Dünndarmmukosa enthaltenen Enzyme, deren Wirkung durch Milieubedingungen wie die Salzsäurekonzentration des Magens oder die Gallensäuren des Dünndarms beeinflusst wird. Die bei der Hydrolyse der Nahrungsstoffe entstehenden monomeren Einheiten werden von den Zellen der Dünndarmmukosa resorbiert und gelangen dadurch in die Blutbahn bzw. in das Lymphsystem, von wo aus sie über den gesamten Organismus verteilt werden.

32

32.1

Gastrointestinale Sekrete

32.1.2

32.1.1

Speichel

Die in der Magenschleimhaut gelegenen Magendrüsen produzieren täglich etwa 3000 ml Magensaft, dessen Bestandteile von den verschiedenen sekretorischen Zellen der Magenschleimhaut gebildet werden. Für die Produktion der einzelnen Bestandteile des Magensaftes sind jeweils unterschiedliche Epithelzellen verantwortlich: 4 Während die Nebenzellen des Antrums im Wesentlichen das für den Schutz der Magenschleimhaut vor Selbstverdauung notwendige Mucin produzieren 4 wird in den Parietalzellen (Belegzellen) des Magenfundus und Corpus die für den Magensaft charakteristische Salzsäure sezerniert 4 Die Protease Pepsin, sowie bei einigen Arten Renin, werden in den Hauptzellen der Magenschleimhaut gebildet

In den Parotiden sowie den submaxillaren und sublingualen Speicheldrüsen werden je nach Menge und Art der aufgenommenen Nahrung pro Tag etwa 1000–1500 ml Speichel produziert. Die Speichelflüssigkeit besteht zu 99,5% aus Wasser und hat einen pH-Wert von etwa 7. Sie enthält mehrere unterschiedliche Mucine (7 Kap. 32.1.2), die die Nahrung gleitfähig machen. Verschiedene körperfremde Substanzen wie Alkohol oder Morphin, außerdem anorganische Ionen wie Kalium, Calcium, Hydrogencarbonat und Jodid werden teilweise in die Speichelflüssigkeit sezerniert. Die Speichelflüssigkeit enthält eine Reihe von Proteinen: 4 Als antimikrobiell wirkende Komponenten wurden Lysozym, Immunglobulin A, eine Gruppe histidinreicher Proteine, die Histatine sowie die als Proteinase-Inhibitoren wirkenden Cystatine identifiziert 4 Von Bedeutung für die Zahnmineralisierung (7 Kap. 22.2.7) sind die sog. Prolinreichen Proteine (PRP’s) sowie die Statherine 4 Mucine machen die Nahrungsbissen gleitfähig und üben eine cytoprotektive Wirkung aus 4 Im Speichel kommt schließlich ein Stärke verdauendes Enzym, das Ptyalin, vor. Es handelt sich um eine DAmylase, die Stärke bis zur Maltose hydrolysiert. Infolge ihrer geringen Aktivität und der kurzen Verweilzeit der Speise in der Mundhöhle spielt sie allerdings nur eine geringe Rolle bei der Verdauung. Das pH-Optimum des Ptyalins liegt bei 6,7, bei pH-Werten unter 4 wird das Enzym rasch inaktiviert, sodass es im sauren Milieu des Magens nicht mehr wirksam ist

Magensaft

! Die Parietalzellen produzieren HCl und den intrinsic factor.

. Abb. 32.1. Mechanismus der Salzsäurebildung in den Belegzellen der Magenschleimhaut. Die rot dargestellte H+/K+-ATPase ist imstande, die luminale H+-Konzentration auf etwa 0.1 mol/l (pH 1) zu erhöhen

1055 32.1 · Gastrointestinale Sekrete

. Abb. 32.2. Mechanismus der H+/K+-ATPase der Belegzellen der Magenschleimhaut. a Membrantopologie der humanen H+/K+ATPase. Die D-Untereinheit besitzt zehn Transmembrandomänen. Die ATP-Bindungsstelle sowie das für den Katalysezyklus wichtige Aspartat387 befinden sich auf der cytosolischen, die K+-Bindungsstelle sowie die für die Hemmung durch Omeprazol verantwortlichen Cysteinylreste Cys815 und Cys892 auf der luminalen Seite. Die E-Untereinheit ist für die zelluläre Lokalisation und die Aktivität der Pumpe verantwortlich b Katalysezyklus der H+/K+-ATPase. Dargestellt ist die für den H+/K+Antiport verantwortliche Phosphorylierung und Dephosphorylierung des Asp387. (Einzelheiten 7 Text)

. Abbildung 32.1 zeigt die Vorgänge bei der Salzsäuresekretion durch die Parietalzellen. Morphologisch zeichnen sich diese durch ein spezifisches vesikuläres System aus, dessen Membranen nach Stimulierung der Belegzellen mit den Membranen eines intrazellulären Kanalsystems fusionieren. Dieses stellt die Verbindung mit der luminalen Seite der Belegzellen her. In die Vesikelmembranen ist eine Protonenpumpe integriert, welche unter ATP-Verbrauch Protonen im Austausch mit Kaliumionen gegen einen erheblichen Konzentrationsgradienten ins Lumen transportiert. Die Protonenkonzentration im Magensaft kann bis etwa 0,1 mol/l entsprechend einem pH-Wert von 1 betragen. Da die Protonenkonzentration intrazellulär bei etwa 10–7 mol/l (pH 7,0) liegt, entspricht dies einem Konzentrationsgradienten von etwa 106. Die für den Austausch benötigte Energie entstammt der Hydrolyse von ATP mit einer Stöchiometrie von je 2H+ bzw. K+ pro ATP.

Die für die Salzsäureproduktion benötigten Protonen werden mit Hilfe der Carboanhydrase aus CO2 und H2O gebildet. Das dabei entstehende Hydrogencarbonat wird durch einen auf der basolateralen Seite der Belegzellen lokalisierten Antiporter gegen Chloridionen ausgetauscht, die über einen speziellen Chloridkanal in das Lumen abgegeben werden. Auch die für das Funktionieren der Protonenpumpe notwendigen K+-Ionen gelangen durch einen entsprechenden Kanal auf die luminale Seite der Belegzellen. Die Salzsäure spielt eine wichtige Rolle in der Pathogenese von Magen- und Zwölffingerdarmgeschwüren und der Reflux-Ösophagitis. Daher war die Aufklärung der Struktur der Protonenpumpe des Magens sowie der Regulation ihrer Expression von großer Bedeutung. . Abbildung 32.2a zeigt die aus der Aminosäuresequenz abgeleitete Membrantopologie der Protonenpumpe. Es handelt sich

32

1056

32

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

um ein dimeres Protein aus je einer D- und β-Untereinheit. Die D-Untereinheit ist für die ATP-Bindung, die ATPasesowie die H+/K+-Austauschaktivität verantwortlich, die stark glycosylierte E-Untereinheit ist für die intrazelluläre Lokalisation und die Aktivität der Pumpe notwendig. Strukturell zeigt die H+/K+-ATPase große Ähnlichkeit mit anderen ATPasen des P-Typs wie der Na+/K+-ATPase der Plasmamembran oder der Ca2+-ATPase des endoplasmatischen Retikulums (7 Kap. 6.1.5). Dieser strukturellen Ähnlichkeit entspricht auch eine Ähnlichkeit im Transportmechanismus (. Abb. 32.2b). Nach der Bindung von H+ auf der cytosolischen Seite erfolgt der Transfer des γ-Phosphats des ATP auf einen Aspartylrest der ATPase, sodass ein energiereiches gemischtes Säureanhydrid (Acylphosphatbindung) entsteht (1). Dies löst den Transport von H+ auf die luminale Seite aus (2). Die Bindung von K+ (3) verursacht die Hydrolyse der Acylphosphatbindung und den Transport von K+ auf die cytosolische Seite (4). Die Entwicklung von spezifischen Hemmstoffen der Protonenpumpe der Belegzelle war ein wichtiger Fortschritt in der Therapie aller Erkrankungen, bei denen die Magensäure eine pathogenetische Rolle spielt. Diese H+/K+-ATPase-Inhibitoren, die sog. Protonenpumpenblocker, hemmen die Säuresekretion wesentlich effektiver als Blocker der Histaminrezeptoren (H2-Blocker) oder Acetylcholinantagonisten. Omeprazol war der erste Vertreter dieser Substanzklasse, der therapeutisch zum Einsatz kam, später folgten Esomeprazol, Lansoprazol, Pantoprazol, Rabeprazol. Protonenpumpenblocker werden als ungeladene Moleküle von den Belegzellen des Magens aufgenommen und erfahren im sauren Milieu der Vesikel der Belegzellen eine Umlagerung zu einem reaktiven Sulfenamid (. Abb. 32.3). Dieses reagiert mit Cysteinylresten der H+/K+-ATPase und inaktiviert auf diese Weise das Enzym in der Regel irreversibel. Eine erneute HCl-Produktion ist erst nach der Synthese neuer Protonenpumpen möglich. Derzeit sind reversible Protonenpumpenblocker in Erprobung. Diese Substanzen konkurrieren kompetitiv mit Kalium um die Aufnahme in die Parietalzellen (PCABs: potassium competitive acid inhibing blockers). Der Vorteil dieser Substanzgruppe könnte ein schnellerer Wirkungseintritt der Säurehemmung sein. Die HCl-Produktion ist nicht die einzige Funktion der Parietalzellen. Sie sind für die Biosynthese und Sekretion des intrinsic factors verantwortlich, der bei der Resorption von Cobalamin (Vitamin B12) im terminalen Ileum eine entscheidende Rolle spielt (7 Kap. 23.3.9). ! Die Hauptzellen synthetisieren Pepsinogen und einige andere Hydrolasen.

Das wichtigste im Magensaft enthaltene Verdauungsenzym ist das Pepsin. Diese Protease wird in Form des inaktiven Proenzyms, des Pepsinogens, von den Hauptzellen der Magenmukosa synthetisiert und intrazellulär in Form der Zymogengranula gespeichert. Die Molekülmasse des Pep-

. Abb. 32.3. Struktur und Wirkungsweise von Omeprazol. Nach Umlagerung zum Sulfenamid reagiert der rot hervorgehobene Schwefel mit SH-Gruppen der H+/K+-ATPase. (Einzelheiten 7 Text)

sinogens beträgt 42,6 kDa. Im sauren Milieu des Mageninhalts und unter Katalyse von bereits vorhandenem Pepsin werden in Form verschiedener Peptide insgesamt 44 Aminosäuren des Pepsinogens abgespalten, wobei das aktive Enzym Pepsin mit einer Molekülmasse von 34,5 kDa entsteht. Eines der abgespaltenen Peptide wirkt bei neutralem pH als Pepsininhibitor, wird aber bei der sauren Reaktion des Magensaftes rasch vom Pepsin verdaut. Das pH-Optimum des aktiven Pepsins liegt bei 1,8. Das Enzym spaltet als Endopeptidase Peptidbindungen im Inneren von Peptidketten, besonders leicht diejenigen, an denen aromatische Aminosäuren (Phenylalanin, Tyrosin) beteiligt sind. Bei der Pepsinverdauung entstehen Polypeptide mit Molekulargewichten zwischen 600 und 3000 Da, die früher als Peptone bezeichnet wurden. Pepsinogen kommt in einer seiner Sekretionsrate entsprechenden Konzentration im Serum vor und wird auch im Urin ausgeschieden (Uropepsinogen). Neben dem Pepsin findet sich als weiteres proteolytisches Enzym im menschlichen Magensaft das Gastricin. Es unterscheidet sich vom Pepsin durch sein weniger saures

1057 32.1 · Gastrointestinale Sekrete

. Abb. 32.4. Domänenstruktur des Mucin 1. Das MUC1-Gen besteht aus 7 Exons und hat eine Größe von ungefähr 6 kb. Die zugehörige mRNA umfasst eine Signalsequenz (SIG) sowie eine für den Einbau in die Plasmamembran notwendige Transmembrandomäne (TM). Die glycosylierte Region enthält eine core region aus 41 repetitiven Sequenzen (dunkelblau) aus je 60 Basenpaaren. Die Codons für die

Aminosäuren Threonin und Serin kommen besonders häufig vor und werden nach der Translation zum großen Teil glycosyliert. An die cytosolische Domäne (CYT) schließt sich eine nicht translatierte Sequenz UT an. T = Threonin; S = Serin; P = Prolin; Y = Tyrosin (modifiziert nach Patton S, Gendler SJ, und Spicer AP 1995)

pH-Optimum von 3,0. Seine Funktion dürfte dem im Magen von jungen Wiederkäuern vorkommenden Renin (Labferment, Chymosin) entsprechen. Das wichtigste Substrat dieser Protease ist das lösliche Casein (Caseinogen) der Milch, das durch leichte Proteolyse in das unlösliche Casein (Paracasein) umgewandelt wird. Außer diesen Proteasen produzieren die Hauptzellen noch die Magenlipase. Das pH-Optimum dieses Enzyms liegt bei 4–7, aber es ist relativ säurestabil, da auch bei einem pH von 2 noch kein Aktivitätsverlust eintritt. Für die Fettverdauung beim Erwachsenen spielt es wahrscheinlich keine sehr große Rolle. Man nimmt dagegen an, dass die Magenlipase bei Säuglingen zur Hydrolyse der Milchlipide herangezogen wird, da dieses Enzym eine besondere Affinität zu Triacylglycerinen mit kurzkettigen Fettsäuren (Kettenlänge 4–8 C-Atome) hat, wie sie in der Milch vorkommen.

zellen produzierten Mucin 1 dar, welches durch eine Transmembranhelix in der Membran verankert ist. Auffallend an dem Mucinmolekül sind repetitive Aminosäuresequenzen, in denen Seryl- und Threonylreste etwa 25–30% der Aminosäuren ausmachen und als Träger von Kohlenhydratseitenketten dienen. Im Magen kommen darüber hinaus weitere Mucine vor, die nicht membranverankert sind, sondern sezerniert werden. Ein Beispiel hierfür ist das Mucin 6 (. Abb. 32.5). Es zeigt in der glycosylierten Domäne repetitive Aminosäuresequenzen, die 30% Threonin und 18% Serin enthalten. Diese sind in O-glycosidischer Bindung mit Kohlenhydratketten von durchschnittlich 12 Zuckerresten Länge verknüpft, was einem sehr hohen Glycosylierungsgrad entspricht. Über die Cysteinylreste kommen Quervernetzungen zwischen Mucinmonomeren zustande, die ein Grund für die besonders hohe Viskosität der Mucinschicht sind. Eine Reihe von Untersuchungen hat gezeigt, dass die Mucinschicht des Magens tatsächlich dafür verantwortlich ist, dass ein pH-Gradient von einem pH-Wert von 1–2 im Magenlumen bis zu 6–7 an der Zelloberfläche aufrecht erhalten werden kann. Man nimmt an, dass die von den Belegzellen synthetisierte Salzsäure als wässrige Lösung durch kanalähnliche Strukturen der Mucinschicht an die luminale Oberfläche des Magens gelangt und sich dort ausbreitet. Eine Diffusion von Salzsäure erfolgt dann nicht oder nur sehr langsam.

! Die Produktion von Mucinen ist eine Funktion der Nebenzellen.

Seitdem Ferchault de Reaumur im 18. Jahrhundert zeigte, dass Magensaft Fleisch verdauen kann, hat es Physiologen und Kliniker beschäftigt, warum der Magen sich nicht selbst verdaut. Eine Erklärung für dieses Phänomen liefert die Tatsache, dass viele Epithelien von Säugern eine etwa 200–500 μm dicke Schleimschicht synthetisieren können, die zwischen dem Epithel und der Umgebung lokalisiert ist. Den wichtigsten Bestandteil dieser Schleimschicht bilden die sog. Mucine. Mucine sind Glycoproteine mit Molekülmassen von vielen hunderttausend, die sich durch einen besonders hohen Gehalt an O-glycosidisch verknüpften Saccharidseitenketten auszeichnen (mehr als 50% der Masse). Bis heute sind die Gene von 12 unterschiedlichen Mucin-Proteinen kloniert und analysiert worden. . Abbildung 32.4 stellt die Domänenstruktur des von den Neben-

32.1.3

Pankreassekrete

Feste Nahrungsbestandteile werden durch die Motilität des Magenantrums (»Antrummühle«) auf eine Partikelgröße kleiner als 2 mm zermahlen und dann über den Pylorus in das Duodenum abgegeben. So wird der Mageninhalt oder

32

1058

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

. Abb. 32.5. Schematischer Aufbau des gastrischen Mucins 6. Der glycosylierte Anteil ist hervorgehoben und besteht überwiegend aus O-glycosidisch verknüpften Oligosacchariden (wellenförmige Linien) sowie aus wenigen N-glycosidisch verknüpften Oligosacchari-

den (verzweigte Strukturen). Die dargestellten Disulfidbrücken sind inter- und intramolekular lokalisiert (modifiziert nach Bansil R, Stanley E, LaMont JT 1995)

Chymus, der von cremiger Konsistenz ist, schubweise in das Duodenum befördert und mischt sich dort mit dem duodenalen Verdauungssaft, einer Mischung aus den Sekreten der Mukosa sowie der Brunner-Drüsen des Duodenums, der Gallenflüssigkeit und des Pankreassekrets.

aktiviert Trypsinogen zu Trypsin. Die Umwandlung von Chymotrypsinogen zu Chymotrypsin sowie der Procarboxypeptidasen zu Carboxypeptidasen erfolgt unter Katalyse von Trypsin. Wie Pepsin sind Trypsin und Chymotrypsin Endopeptidasen, allerdings mit einem pH-Optimum zwischen 7,5 und 8,5. Denaturierte Proteine werden besonders leicht gespalten. Unter der Einwirkung von Trypsin und Chymotrypsin werden die durch die peptische Aktivität des Magensaftes entstandenen Proteinbruchstücke in kleinere Polypeptide zerlegt. Über die Substratspezifität von Trypsin und Chymotrypsin 7 Kap. 3.2.3. Die Exopeptidase Carboxypeptidase ist ein Zinkprotein mit einer Molekülmasse von 34 kDa, das vom Pankreas ebenfalls als inaktive Vorstufe (Procarboxypeptidase, Molekülmasse 90 kDa) sezerniert und erst durch die Einwirkung von Trypsin aktiviert wird. Das Enzym spaltet die am Carboxylende stehenden Aminosäuren von Polypeptiden ab. Man unterscheidet zwei pankreatische Carboxypeptidasen: 4 die Carboxypeptidase A hat eine besondere Affinität zu aromatischen Endgruppen (Phenylalanin, Tyrosin, Tryptophan) 4 die Carboxypeptidase B zu basischen Endgruppen (Lysin, Arginin, Histidin)

! Alle wichtigen Verdauungsenzyme werden im Pankreas gebildet.

32

Beim Menschen werden in Abhängigkeit von der Nahrungszufuhr pro Tag etwa 3000 ml Pankreassaft sezerniert, dessen Enzymgehalt in . Tabelle 32.1 dargestellt ist. Unter seinen anorganischen Bestandteilen ist von besonderer Bedeutung der hohe Hydrogencarbonatgehalt, der dem Pankreassaft sein typisches alkalisches Milieu von etwa pH 8,0 verleiht und zur Neutralisierung des sauren Mageninhalts beiträgt. ! Die Proteasen des Pankreas werden als inaktive Proenzyme sezerniert.

Von besonderer Bedeutung für die Verdauung sind die im Pankreassaft reichlich vorhandenen proteolytischen Enzyme. Es handelt sich um die 4 Endopeptidasen Trypsin und Chymotrypsin 4 Exopeptidasen Carboxypeptidase A und B sowie 4 Elastase Diese werden in den exokrinen Zellen (Acinuszellen) des Pankreas in Form inaktiver Proenzyme synthetisiert und intrazellulär in den Zymogengranula gespeichert. Ähnlich wie Pepsinogen zeichnen sich die inaktiven Vorstufen Trypsinogen, Chymotrypsinogen und die Procarboxypeptidasen gegenüber den aktiven Enzymproteinen dadurch aus, dass sie aus einer längeren Peptidkette bestehen und durch Abspaltung von Teilsequenzen aktiviert werden (7 Kap. 4.5.3). Normalerweise findet dieser Vorgang erst im Duodenum statt. Die in der intestinalen Mukosa produzierte Enteropeptidase (früher Enterokinase), ein Glycoprotein mit einem Kohlenhydratanteil von 45%,

! Andere hydrolytische Enzyme des Pankreassekrets spalten Glycogen, Lipide oder Nucleinsäuren.

Außer den proteolytischen Enzymen enthält das Pankreassekret Hydrolasen zur Aufspaltung von Kohlenhydraten, Lipiden und Nucleinsäuren. Die Pankreasamylase entspricht in ihren Eigenschaften dem Ptyalin. Es handelt sich um eine Endoamylase oder D-Amylase, die die 1,4-D-glycosidischen Bindungen in Polysacchariden wie Stärke oder Glycogen aufspaltet. Da das Enzym die 1,6-glycosidischen Bindungen nicht zu spalten vermag und seine Affinität zum Substrat mit Abnahme der Kettenlänge des Polysaccharidmoleküls geringer wird, sind ihre Reaktionspro-

1059 32.1 · Gastrointestinale Sekrete

. Tabelle 32.1. Wichtige gastrointestinale Verdauungsenzyme Bildungsort

Enzym

Inaktive Vorstufe

Cofaktoren

Speicheldrüsen Magenschleimhaut

Ptyalin

–

Cl–

Pepsin

Pepsinogen

Pankreas, exokrin

Intestinale Mukosa

2+

ph-Optimum

Substrat

Reaktionsprodukt

6,7

Stärke

Maltose

1–2

Proteine

Peptide

3–4

Lösliches Casein

Unlösliches Casein

Renin

–

Ca

Trypsin

Trypsinogen

–

7–8

Proteine, Polypeptide

Oligopeptide

Chymotrypsin

Chymotrypsinogen

–

7–8

Proteine, Polypeptide

Oligopeptide

Carboxypeptidasen A u. B

Procarboxypeptidasen A und B

–

7–8

C-terminale Aminosäuren von Proteinen

Aminosäuren Peptide

Elastase

Proelastase

Lipase

–

Gallensäuren Colipase

8

Triacylglycerine

Fettsäuren, D- u. β-Monoacylglycerine

Cholesterinesterase

–

Gallensäuren

8

Cholesterinester

Cholesterin, Fettsäuren

Elastin

α-Amylase

–

–

8

Stärke

Maltose

Ribonuclease

–

–

7–8

Ribonucleinsäuren

Ribonucleotide

Desoxyribonuclease

–

–

7–8

Desoxyribonucleinsäuren

Desoxyribonucleotide

Aminopeptidase

–

–

–

N-terminale Aminosäuren von Proteinen

Aminosäuren, Peptide

Dipeptidasen

–

–

–

Dipeptide

Aminosäuren

Enteropeptidase

–

–

–

Trypsinogen

Trypsin

Saccharase

–

–

5–7

Saccharose

Fructose, Glucose

Maltase

–

–

5–7

Maltose

Glucose

Lactase

–

–

5–7

Lactose

Galactose, Glucose

Isomaltase

–

–

5–7

Isomaltose

Glucose

Polynucleotidase

–

–

–

Nucleinsäuren

Nucleotide

Nucleosidasen

–

–

–

Nucleoside

Purin- bzw. Pyrimidinbase, Pentose

Phosphatase

–

–

8

Organische Phosphorsäureester

Phosphat

dukte unterschiedlich große Bruchstücke der Polysaccharidmoleküle. Die D-Amylase wird in geringen Mengen an das Blut abgegeben und wegen ihres niedrigen Molekulargewichts mit dem Urin ausgeschieden. Die Pankreaslipase ist zur Hydrolyse von Triacylglycerinen imstande, wobei als Reaktionsprodukte v.a. Monoacylglycerine, daneben Fettsäuren, Glycerin und in geringem Umfang Diacylglycerine entstehen. Ihre Anwesenheit

ist zur Fettverdauung unbedingt erforderlich. Das Enzym katalysiert bevorzugt die hydrolytische Abspaltung der in 1- bzw. 3-Positionen (D bzw. Dc-Position) stehenden Fettsäuren aus den Triacylglycerinen, die dabei entstehenden E-Monoacylglycerine spielen bei der Fettverdauung als Emulgatoren eine wichtige Rolle. Weitere an der Lipidverdauung beteiligte Pankreasenzyme sind die Carboxylesterase, die u.a. die Hydrolyse der Cholesterinester katalysiert, sowie Phospholipasen.

32

1060

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

Der Nachweis der Lipaseaktivität im Serum hat sich als wertvolles diagnostisches Hilfsmittel bei entzündlichen Pankreaserkrankungen bewährt. Für die Verdauung von Nucleinsäuren sind schließlich im Pankreassaft Ribonuclease und Desoxyribonuclease enthalten, deren Spezifität und Wirkungsweise in 7 Kapitel 5 besprochen wurde.

32.1.4

Galle

! Galle ist für Verdauung und Resorption unerlässlich.

Für die im Darmlumen ablaufenden Verdauungsprozesse spielt auch die Leber eine wichtige Rolle, da sie die Bildungsstätte der Galle ist. Beim Menschen und vielen anderen Warmblütern wird die von der Leber sezernierte Galle (Lebergalle) in der Gallenblase gespeichert und konzentriert. . Tabelle 32.2 zeigt die Zusammensetzung menschlicher Leber- und Blasengalle.

. Tabelle 32.2. Zusammensetzung menschlicher Leber- und Blasengalle

Wasser

Lebergalle [% des Gesamtgewichts]

Blasengalle [% des Gesamtgewichts]

96,64

86,7

Gallensäuren

1,9

9,1

Mucin und Gallenfarbstoffe

0,5

3,0

Cholesterin

0,06

0,3

Fettsäuren

0,1

0,3

Anorganische Salze

0,8

0,6

pH

7,1

6,9–7,7

Die Bedeutung der Gallenflüssigkeit bei den Verdauungsvorgängen lässt sich v.a. auf ihren hohen Gehalt an Gallensäuren zurückführen, deren Anwesenheit im Duodenalsaft eine Voraussetzung der für die Lipidresorption notwendigen Mizellenbildung (7 Kap. 2.2.6) ist.

32

. Abb. 32.6. Bildung von Gallensäuren und Gallensäurenkonjugaten. (Einzelheiten 7 Text)

1061 32.1 · Gastrointestinale Sekrete

Die wichtigsten Gallensäuren der menschlichen Galle sind 4 Cholsäure und 4 Chenodesoxycholsäure deren Strukturen in . Abb. 32.6 dargestellt sind. Sie werden in der Leberzelle aus Cholesterin synthetisiert. Der erste Schritt besteht in einer Hydroxylierung des Cholesterins in Position 7α, die wahrscheinlich der geschwindigkeitsbestimmende Schritt der Gallensäurenbiosynthese ist. Die Hydroxylierung wird durch ein im endoplasmatischen Retikulum lokalisiertes Enzym katalysiert, das Sauerstoff und NADPH/H+ benötigt und teilweise durch Kohlenmonoxid gehemmt wird. Trotz der offensichtlichen Ähnlichkeiten mit den Monooxygenasen (7 Kap. 15.2.2) ist eine Beteiligung des Cytochroms P450 bei der Synthese von Gallensäuren noch nicht bewiesen. Der größte Teil der Gallensäuren wird nach Aktivierung zum Coenzym-A-Ester mit Glycin oder Taurin konjugiert und in die Gallengänge ausgeschieden. ! Gallensäuren durchlaufen einen enterohepatischen Kreislauf.

Unter der Annahme einer täglichen Gallensekretion der menschlichen Leber von etwa 500 ml lässt sich anhand der in . Tabelle 32.2 angegebenen Daten errechnen, dass der tägliche Umsatz an Gallensäuren 10 g beträgt. Wie experimentell mit Hilfe von radioaktiv markierten Vorstufen von Gallensäuren gemessen werden konnte, synthetisiert die Leber jedoch täglich nur 200–500 mg Gallensäuren. Dieser Wert entspricht genau der täglichen Ausscheidung mit den Faeces. Offensichtlich ersetzt also die Leber nur den täglichen Verlust von Gallensäuren im Stuhl, während eine weitaus größere Menge von Gallensäuren sich in der Gallenflüssigkeit bzw. dem Duodenalinhalt befindet. Tatsächlich konnte gezeigt werden, dass die mit der Galle in das Duodenum eingebrachten Gallensäuren zu über 90% im Ileum mit Hilfe eines aktiven Transportsystems resorbiert und über das Pfortadersystem zur Leber zurückgebracht werden, wo sie für die erneute Sekretion in die Gallenflüssigkeit zur Verfügung stehen. Dieser enterohepatische Kreislauf der Gallensäuren erfolgt mit beträchtlicher Geschwindigkeit, sodass die relativ geringe Gesamtmenge an Gallensäuren des menschlichen Organismus (3–5 g) etwa sechs- bis zehnmal pro Tag den Kreislauf durchläuft. Die Ausscheidung von Gallensäuren mit den Faeces ist für den Organismus die einzige Möglichkeit zur Eliminierung von Cholesterin und seinen Derivaten, da Säugetiere nicht über die zur Aufspaltung des Cholesterin-Ringsystems notwendigen Enzyme verfügen. Die Bestimmung der täglichen Ausscheidung von Gallensäuren ist infolgedessen ein gutes Maß zur Bestimmung der Cholesterinausscheidung. ! Gallensäuren sind für die Lipidresorption unerlässlich und beeinflussen die Cholesterinbiosynthese.

Die Gallensäuren besitzen eine Reihe wichtiger Stoffwechselfunktionen. Für die Fettverdauung stellen sie eine unerlässliche Komponente dar, da sie im Duodenum mit den unter der Einwirkung der Pankreaslipase entstehenden Fettsäuren und Monoacylglycerinen Mizellen bilden. Die Lipase selbst wird durch Gallensäuren gehemmt. In mizellärer Form ist die Resorption lipophiler Substanzen beträchtlich erleichtert (7 Kap. 32.2.2). Gallensäuren sind nicht nur die Ausscheidungsform des Sterangerüstes, sondern regulieren auch die Cholesterinbiosynthese. Diese wird primär durch die Cholesterinzufuhr mit der Nahrung gesteuert. An Versuchstieren mit Gallengangsfisteln konnte jedoch gezeigt werden, dass bei Ableitung der Gallenflüssigkeit nach außen die Geschwindigkeit der Cholesterinbiosynthese in der Leber und im Darm deutlich zunimmt. Bei Verfütterung eines nicht resorbierbaren Ionenaustauscherharzes (7 Kap. 2.3.4, 3.2.1) mit hoher Affinität zu Gallensäuren (Cholestyramin) werden die Gallensäuren gebunden und ihre Rückresorption verhindert. Die Cholesterinbiosynthese der Leber nimmt entsprechend zu. Trotzdem sinkt der Cholesterinspiegel im Blut ab, da durch die Verhinderung der Gallensäurenrückresorption und die Verminderung der Gallensäurekonzentration in der Leber die Umwandlung von Cholesterin in Gallensäuren stark beschleunigt wird. Der gegenteilige Effekt, nämlich eine Hemmung der Cholesterinbiosynthese, wird durch orale Zufuhr von freien und konjugierten Gallensäuren in hohen Konzentrationen erreicht. Diese Wechselbeziehungen zwischen Cholesterinbiosynthese und Gallensäurenresorption werden auch klinisch ausgenutzt. So können Hypercholesterinämien durch Cholestyramin oder drastischer durch Entfernung des Ileums als Ort der Gallensäurenrückresorption behandelt werden. In der Gallenflüssigkeit selbst wirken Gallensäuren als Lösungsvermittler für das dort, wenn auch nur in geringen Mengen (0,26% der Gesamtgalle) vorkommende Cholesterin. In dieser Konzentration ist es praktisch unlöslich in wässrigen Medien. Ein Ausfallen kann nur dadurch verhindert werden, dass mit Gallensäuren und dem ebenfalls in der Galle vorkommenden Phosphatidylcholin mizelläre Cholesterin-Lösungen gebildet werden. Das in . Abb. 32.7 dargestellte Diagramm ermöglicht die Bestimmung der maximalen Löslichkeit von Cholesterin in menschlicher Blasengalle. Es wurde aus Untersuchungen des Verhaltens von Mischungen aus Gallensäuren, Phosphatidylcholin und Cholesterin in Wasser konstruiert. Bei allen Zusammensetzungen der Gallenflüssigkeit, die außerhalb des Bereiches micellärer Lösungen liegen, kommt es zur Bildung von Cholesterinkristallen, die die Keime von Cholesterinsteinen sein können. Da 80% der Gallensteine cholesterinreich und 50% reine Cholesterinsteine sind, nimmt man an, dass Änderungen des Mischungsverhältnisses der drei genannten Verbindungen für das Entstehen von Gallensteinen verantwortlich sind. Bei der sog. lithogenen Galle findet sich dementspre-

32

1062

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

. Abb. 32.7. Löslichkeit von Cholesterin in Lipid-Wasser-Mischungen. Löst man Cholesterin, Phosphatidylcholin und Gallensäuren in einer Gesamtkonzentration von 10% in Wasser, so bestimmt das Verhältnis von Phosphatidylcholin, Gallensäuren und Cholesterin die Löslichkeit des letzteren. Bei Mischungsverhältnissen innerhalb des rot markierten Bereiches liegt Cholesterin in mizellärer Lösung vor, bei allen anderen Verhältnissen befindet es sich in übersättigter Lösung und fällt aus

32

chend auch häufig eine Abnahme des PhosphatidylcholinGehaltes. Diese Beobachtungen waren der Anlass dafür, Gallensteinleiden mit Gallensäuren zu behandeln. Diese greifen nicht nur ändernd in das Verhältnis von Cholesterin, Phosphoglyceriden und Gallensalzen ein, sondern hemmen in der Leber die Cholesterinbiosynthese und damit die Cholesterinausscheidung. In einigen Fällen konnte das Weiterwachsen von Cholesterin-(Gallen-)Steinen nicht nur verhindert, sondern sogar eine Auflösung bereits vorhandener Steine erreicht werden. Die Gallenflüssigkeit ist ein wichtiges Vehikel für eine Vielzahl körpereigener und körperfremder Substanzen. So werden z.B. 4 die Gallenfarbstoffe Biliverdin und Bilirubin als Glucuronide sowie 4 von den Hormonen v.a. die Steroide der Nebennierenrinde und der Gonaden mit der Gallenflüssigkeit ausgeschieden Mit der Galle werden auch viele Medikamente aus dem Organismus entfernt. Störungen des Gallenflusses behindern deswegen häufig die Eliminierung von Arzneimitteln.

32.1.5

Duodenalsekret

Die Dünndarmschleimhaut bildet täglich 1000–2000 ml eines eigenen Verdauungssekrets. Ein wesentlicher Be-

standteil dieses Darmsaftes sind Mucine, welche die Schleimhaut vor der Einwirkung der Magensäure oder anderer schädigender Nahrungsbestandteile schützen. Daneben kommt Albumin vor, das im Darm durch Proteolyse abgebaut wird. Etwa 1/5 des gesamten Albuminabbaus erfolgt durch Abgabe an das Duodenum. Die bei der Albuminhydrolyse entstehenden Aminosäuren werden resorbiert und der Leber für eine erneute Proteinbiosynthese zur Verfügung gestellt (enterohepatischer Kreislauf von Aminosäuren). Noch ungeklärt ist die Frage, ob auch Verdauungsenzyme aus der Dünndarmmukosa sezerniert werden. Im Darmsaft wurden zwar eine Reihe von Enzymen wie Aminopeptidasen, Dipeptidasen, Saccharase, Maltase, Isomaltase, alkalische Phosphatase, Polynucleotidase und Phospholipase nachgewiesen, es ist jedoch noch nicht sicher, ob es sich hierbei um tatsächliche Sekretionsprodukte handelt oder ob die betreffenden Enzyme aus abgeschilferten und zugrunde gegangenen Zellen stammen. Gesichert ist lediglich, dass durch die duodenale Mukosa die für die Trypsinogenaktivierung notwendige Enteropeptidase abgegeben wird.

32.1.6

Regulation der gastrointestinalen Sekretion

! Der Intestinaltrakt enthält ein umfangreiches endokrines System.

Im Intestinaltrakt erfolgt die Aufarbeitung und Resorption eines ständig wechselnden Angebots an Nahrungsmitteln. Es ist daher verständlich, dass die funktionellen Zustände einzelner Darmabschnitte sowie der anderen an der Verdauung beteiligten Organe sehr genau aufeinander abgestimmt werden müssen, damit eine optimale Verdauung und Resorption der Nahrungsstoffe gewährleistet ist. Im Intestinaltrakt werden darüber hinaus große Mengen an Flüssigkeit umgesetzt, außerdem muss der größte Teil der mit den Verdauungssäften in den Intestinaltrakt gelangenden Elektrolyte hier wieder rückresorbiert werden. Die koordinierte Regulation dieser Prozesse erfolgt bei höheren tierischen Organismen sowie beim Menschen durch eine große Zahl gastrointestinaler Hormone sowie parakrin wirksamer hormonartiger Faktoren. Diese werden nicht von einzelnen endokrinen Drüsen sezerniert, sondern von endokrinen Zellen, die über den Intestinaltrakt verstreut sind. Die Bedeutung dieses endokrinen Systems wird allein aus der Tatsache verständlich, dass die Gesamtmasse der hormonell aktiven Zellen im Intestinaltrakt größer ist als die Masse aller anderen endokrinen Drüsen des Organismus. . Tabelle 32.3 stellt eine Auswahl gastrointestinaler Peptidhormone und Neurotransmitter zusammen. Es handelt sich ausschließlich um Peptide mit Molekülmassen unter 10 kDa. Interessanterweise kommt ein beträchtlicher

1063 32.1 · Gastrointestinale Sekrete

. Tabelle 32.3. Gastrointestinale Peptidhormone und Neurotransmitter Bezeichnung

Aminosäurereste

Vorkommen

Wichtigste Funktion

Gastrin

17 bzw. 34

Antrum des Magens, oberes Duodenum

Stimulierung der HCl-Sekretion

Sekretin

27

Duodenum, Jejunum

Stimulierung der pankreatischen HCO3–-Sekretion

Cholecystokinin/ Pankreozymina

33

Duodenum Jejunum

Stimulierung der pankreatischen Enzymsekretion, Kontraktion der Gallenblase

Gastroinhibitorisches Peptid (GIP)

43

Duodenum bis oberes Jejunum

Stimulierung der Insulinsekretion

Motilin

22

Oberes Jejunum, Duodenum

Stimulierung der Motilität von Magen und Dünndarm

Neurotensin

13

Unterer Dünndarm, Colon

Stimulierung der Sekretion von Insulin, Glucagon, Gastrin?

Enteroglucagon

~70

Ileum und Colon

Trophischer Faktor für Epithelzellen des Intestinaltraktes

Somatostatina

14

Gesamter Intestinaltrakt, Pankreas

Hemmung sekretorischer Vorgänge

Vasoaktives intestinales Peptida

14/28

Neurone und Nervenfasern des Intestinaltrakts

Vasodilatation, Relaxation der glatten Muskulatur

Substanz Pa Bombesina

11 14

Gesamter Intestinaltrakt Magen, Duodenum, Jejunum

Kontraktion der glatten Muskulatur Pankreassekretion?

Enkephalina

5

Gesamter Intestinaltrakt

?

Hormone

Neurotransmitter

a

Vorkommen im Zentralnervensystem gesichert.

Teil von ihnen auch im Zentralnervensystem vor und wirkt dort als Neurotransmitter. Über die physiologische Bedeutung der Enterohormone Gastrin, Sekretin, Cholecystokinin sowie gastroinhibitorisches Peptid liegen einigermaßen gesicherte Erkenntnisse vor (7 u.). Über andere in der . Tabelle 32.3 genannte Peptide weiß man jedoch wesentlich weniger; ihre Wirkung lässt sich häufig nur anhand experimenteller Modellsysteme nachweisen. Es ist offenbar so, dass die einzelnen funktionellen Zustände des Gastrointestinaltrakts jeweils durch eine Vielzahl von Regulationsfaktoren stabilisiert werden, deren Zusammenspiel die geordnete Funktion des Intestinaltrakts garantiert. Wie kompliziert die Verhältnisse sind, geht aus der Tatsache hervor, dass allein für die Regulation der HCl-Produktion im Magenfundus und -corpus 16 hemmende bzw. aktivierende Faktoren beschrieben worden sind. ! Die Magensaftsekretion wird hormonell und nerval reguliert.

Salzsäuresekretion. Die Salzsäureproduktion der Parietal-

zellen hängt von der gleichzeitigen Erhöhung der intrazellulären Calcium- und cAMP-Konzentration ab. Die Wirkung beider intrazellulärer Botenstoffe beruht auf einer

Verlagerung der für die Salzsäuresekretion verantwortlichen H+/K+-ATPase aus intrazellulären Vesikeln in die apikale Plasmamembran. Die Einzelheiten der dabei ablaufenden Vorgänge sind nicht genau bekannt. Folgende extrazelluläre Signale sind für Stimulierung bzw. Hemmung der Salzsäuresekretion verantwortlich (. Abb. 32.8): 4 Der wichtigste, die Salzsäuresekretion stimulierende Faktor ist Histamin, das biogene Amin der Aminosäure Histidin. Es wird in den Enterochromaffin-ähnlichen Zellen (enterochromaffin-like cells, ECL-Zellen) der Magenmukosa produziert. Diese Zellen befinden sich in enger Nachbarschaft zu den Belegzellen (Parietalzellen), das von ihnen abgegebene Histamin wirkt als parakriner Faktor. Es reagiert mit H2-Histaminrezeptoren der Parietalzellen. Diese stimulieren die Adenylatcyclase, was über erhöhte intrazelluläre cAMP-Konzentrationen zu einer Aktivierung der Proteinkinase A führt 4 Enteroendokrine Zellen im Antrum des Magens, sog. Gastrinzellen (G-Zellen), setzen als Antwort auf Dehnungsreize, Anstieg des pH-Wertes, Alkohol, Coffein sowie vor allen Dingen auf bei der Proteinverdauung entstehende Peptide das Peptidhormon Gastrin frei. Von diesem kommen durch Proteolyse entstehende Formen mit 34, 17 oder 13 Aminosäuren vor. Für die

32

1064

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

. Abb. 32.8. Regulation der Salzsäureproduktion durch die Belegzellen. Für die Regulation der Salzsäureproduktion ist das Zusammenspiel des aus ECL-Zellen stammenden Histamins mit dem aus den Gastrinzellen (G-Zellen) stammenden Gastrin, zentralnervö-

32

biologische Aktivität sind vor allem die 4 C-terminalen Aminosäuren der Gastrine verantwortlich. Über den Blutweg gelangen sie zu den Parietalzellen des Magenfundus und reagieren dort mit Gastrinrezeptoren. Diese gehören zur Familie der CCK-Gastrinrezeptoren und sind heptahelicale Membranproteine. G-Proteinvermittelt führen sie zur Aktivierung der Phospholipase CE und damit zu einer Erhöhung der Calcium- und Diacylglycerin-Konzentration (7 Kap. 25.6.3) 4 Vom Zentralnervensystem über den Nervus Vagus ausgehende Impulse stimulieren über muscarinische Acetylcholinrezeptoren der Klasse 3 die Salzsäureproduktion der Parietalzellen. Auch diese Rezeptoren lösen eine Aktivierung der Phospholipase Cβ und damit eine Erhöhung der intrazellulären Calciumkonzentration aus 4 Diese Regelkreise können weiter moduliert werden: Über muscarinische Acetylcholinrezeptoren stimuliert der Nervus Vagus sowohl die Histaminproduktion der ECL-Zellen als auch die Gastrinsekretion der G-Zellen 4 Von peptidergen postganglionären parasympathischen Nervenfasern und Neuronen des enteralen Nervensystems wird ein Peptid aus 27 Aminosäuren freigesetzt, das Strukturhomologie zu einem Peptid in der Froschhaut, dem Bombesin, zeigt und als gastrin releasing peptide (GRP) bezeichnet wird. GRP stimuliert die Gastrinsekretion von Gastrinzellen 4 Somatostatin ist ein sehr wirkungsvoller Hemmstoff der Salzsäureproduktion. Es wird in enteroendokrinen Zellen des Intestinaltrakts, den sog. D-Zellen, gebildet.

sen cholinergen (Acetylcholin) Impulsen (N. vagus) und dem durch die D-Zellen gebildeten Somatostatin notwendig. GRP = gastrin releasing peptide. (Einzelheiten 7 Text)

In der Magenschleimhaut wird die Somatostatinfreisetzung dieser Zellen auf der basolateralen Seite durch cholinerge Neuronen, Gastrin und GRP gehemmt und von der luminalen Seite durch hohe Protonenkonzentrationen stimuliert. Somatostatin hemmt die Histaminfreisetzung der ECL-Zellen sowie direkt die Salzsäureproduktion der Parietalzellen. Der SomatostatinRezeptor gehört zu der Gruppe der inhibitorischen Rezeptoren des Adenylatcyclasesystems, d.h. seine Stimulierung führt zu einer Senkung des cAMP-Spiegels der betroffenen Zellen (7 Kap. 25.6.2) Mucinsekretion. Von großer Bedeutung für den Schutz des

Magenepithels vor Selbstverdauung ist die Mucinsekretion durch die Mucinzellen der Magenmukosa (. Abb. 32.9). Auch sie wird durch eine hohe Protonenkonzentration in der Magenflüssigkeit stimuliert, steht daneben aber ebenfalls unter neurokriner, endokriner und parakriner Kontrolle. 4 Acetylcholin sowie Sekretin stimulieren die Mucinsekretion. Der Sekretinrezeptor gehört zu den stimulierenden Rezeptoren des Adenylatcyclasesystems 4 Prostaglandine des E-Typs sind wichtige Stimulatoren der Mucinsekretion. Diese fördern außerdem die Zellregeneration und die Durchblutung. Sie wirken damit cytoprotektiv gegen Schädigungen z.B. durch die Salzsäure. Prostaglandin E hemmt ferner über den Rezeptor-Subtyp EP3 die Adenylatcyclase der Parietalzellen und damit die HCl-Sekretion 4 Glucocorticoide sind sehr wirksame Hemmstoffe der Mucinsekretion (über die pathobiochemische Bedeu-

1065 32.1 · Gastrointestinale Sekrete

. Abb. 32.9. Regulation der Mucin- und Pepsinogensekretion der Magenmukosa. (Einzelheiten 7 Text)

tung der genannten Faktoren bei der Entstehung des Magen- und Duodenalgeschwürs 7 Kap. 32.1.7) Pepsinogen-Sekretion. Die Sekretion von Pepsinogen

durch die Hauptzellen des Magenfundus wird durch cholinerge nervale Reize sowie durch Gastrin stimuliert. Ein wesentlicher weiterer Reiz für die Pepsinogen-Sekretion ist eine hohe Protonenkonzentration des Magensaftes (. Abb. 32.9). ! Sekretin und Cholecystokinin/Pankreozymin regulieren die Pankreassekretion.

Die Bildung des Pankreassekrets wird durch eine Reihe neurokriner und endokriner Faktoren gesteuert (. Abb. . Abb. 32.10. Enzym-, Wasser- und Hydrogencarbonat-Sekretion in Acinus- bzw. Gangzellen des Pankreas. VIP vasoaktives intestinales Peptid. (Einzelheiten 7 Text)

32.10). Sie wird im Wesentlichen von zwei Zelltypen ge-

tragen, 4 den für die Sekretion der Verdauungsenzyme verantwortlichen Acinuszellen sowie 4 den Pankreasgangzellen, die Wasser und Hydrogencarbonat sezernieren Pankreatische Enzymsekretion. Der wichtigste physiologi-

sche Stimulus für die pankreatische Enzymsekretion ist die durch das parasympathische Nervensystem hervorgerufene Freisetzung von Acetylcholin, das über muscarinische Acetylcholinrezeptoren des Typs M1 auf den Acinuszellen zu einer Aktivierung der Phospholipase CE führt (. Abb. 32.10). Dies löst eine Erhöhung der intrazellulären Calcium-

32

1066

32

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

konzentration und damit einhergehend eine Stimulierung der Enzymsekretion aus. Ein weiterer wichtiger Mechanismus zur Stimulierung der pankreatischen Enzymsekretion beruht auf dem durch die im Duodenum und Jejunum lokalisierten I-Zellen produzierten Peptid Cholecystokinin. Dieses ist mit dem 1943 entdeckten Pankreozymin identisch, weswegen das Hormon gelegentlich auch als Cholecystokinin-Pankreozymin (CCK-PZ) bezeichnet wird. Ähnlich wie beim Gastrin kommen auch beim Cholecystokinin Peptide unterschiedlicher Größe vor, die posttranslational durch Proteolyse entstehen. Die vorherrschende Form ist das CCK 33. Die biologisch aktive Region des CCK ist in den C-terminalen sieben Aminosäuren lokalisiert. Die 5 C-terminalen Aminosäuren des CCK entsprechen denen des Gastrins, was bei der Bestimmung der biologisch aktiven Formen beider Hormone Schwierigkeiten verursachen kann. Für die Freisetzung von CCK verantwortliche Stimuli sind Fettsäuren, Aminosäuren und Peptide im duodenalen Lumen. Außer einer gesteigerten pankreatischen Enzymsekretion löst CCK eine Kontraktion der Gallenblase mit Entleerung der Gallenflüssigkeit in das Duodenum sowie eine Aktivierung des Sättigungsgefühls aus (7 u.). CCK-Rezeptoren gehören zur Familie der heptahelicalen Rezeptoren, die die Phospholipase Cβ stimulieren und so zu einer Erhöhung der intrazellulären Calciumkonzentration führen. Der CCK-Rezeptor A ist spezifisch für CCK, der CCK-Rezeptor B ist identisch mit dem Sekretin-Rezeptor und wird sowohl durch CCK als auch durch Sekretin aktiviert. Bei Nagern wie der Ratte und der Maus finden sich CCK-Rezeptoren des Typs A direkt auf den Acinuszellen, weswegen CCK einen direkten stimulierenden Einfluss auf die Enzymsekretion hat. Beim Menschen sind die Verhältnisse grundsätzlich anders, da keine CCK-Rezeptoren Typ A auf den Acinuszellen nachweisbar sind. Derartige Rezeptoren finden sich jedoch auf vagalen afferenten Nerven, sodass man annimmt, dass CCK hier indirekt, d.h. über eine Stimulierung der Acetylcholin-Freisetzung, wirkt Pankreatische Wasser- und Hydrogencarbonat-Sekretion.

Für die ebenfalls im Pankreas erfolgende Sekretion von Wasser und dem für die Neutralisation der Salzsäure notwendigen Hydrogencarbonat sind die Pankreasgangzellen verantwortlich. Ausgelöst wird die Wasser- und Hydrogencarbonat-Sekretion dabei durch Sekretin, ein Peptid aus 27 Aminosäuren (. Abb. 32.10). Es wird im Duodenum und Jejunum gebildet und zeigt enge Verwandtschaft mit dem vasoaktiven intestinalen Peptid (. Tabelle 32.3). Der Sekretinrezeptor gehört zur Familie der Glucagonrezeptoren, die Bindung seines Liganden löst eine Aktivierung des Adenylatcyclasesystems aus. ! Gallensäuren stimulieren die Gallenbildung.

Substanzen, die die Gallensekretion durch Hepatozyten stimulieren, werden als Choleretica bezeichnet. Unter phy-

siologischen Bedingungen sind die wichtigsten Choleretica die Gallensäuren. Damit hängt die Gallensekretion sehr eng mit dem enterohepatischen Kreislauf der Gallensäuren zusammen (7 Kap. 32.1.4). Eine leicht choleretische Wirkung hat auch Sekretin. Es führt ähnlich wie am Pankreas zu einer Wasser- und Hydrogencarbonat-Sekretion in die Gallenflüssigkeit. Ein ganz anderes Wirkungsspektrum für die Gallenbildung hat CCK. Es löst eine Kontraktion der Gallenblase mit Entleerung von Gallenflüssigkeit in das Duodenum aus. ! Im Intestinaltrakt werden Signale erzeugt, die Nahrungsaufnahme und Nahrungsverwertung regulieren.

Die Regulation der Nahrungsaufnahme durch Hungerbzw. Sättigungsgefühl erfolgt in den hypothalamischen Kerngebieten und hängt von einer großen Zahl verschiedener endokrin und parakrin wirkender Faktoren ab (7 Kap. 21.4). Auch die im Folgenden aufgeführten, im Intestinaltrakt gebildeten Faktoren spielen dabei eine große Rolle. Cholecystokinin. Cholecystokinin reguliert nicht nur die

Funktion des Pankreas und der Gallenblase (7 o.), sondern hemmt auch das Hungergefühl. Über CCK-A-Rezeptoren im Intestinaltrakt bewirkt Cholecystokinin eine Unterdrückung der Nahrungsaufnahme, was wahrscheinlich durch den N. vagus und die hypothalamischen Zentren des Hunger- bzw. Sättigungsgefühls weitergeleitet wird. Auch andere intestinale Peptide wie Enterostatin oder GLP-1 (7 Kap. 26.2.2) vermindern das Hungergefühl. Ghrelin. Ghrelin ist ein aus 28 Aminosäuren bestehendes

Peptid, das von Epithelzellen der Magenschleimhaut gebildet wird. Für seine Wirkung ist die Acylierung des Serins 3 mit Octanoat erforderlich. Ghrelin wird bei Nahrungskarenz verstärkt sezerniert. Spezifische Ghrelin-Rezeptoren finden sich in der Hypophyse und im Hypothalamus. In der Hypophyse stimuliert Ghrelin die Sekretion von Wachstumshormon, im Hypothalamus steigert es das Hungergefühl und wirkt als Antagonist des Leptins (7 Kap. 16.1.3, 21.4). Gastroinhibitorisches Peptid (GIP). Durch Glucose, aber auch durch Aminosäuren und Fettsäuren, wird die Sekretion des gastroinhibitorischen Peptids im Duodenum und oberen Jejunum ausgelöst. Die durch GIP bewirkte Hemmung der Magenmotorik tritt allerdings nur in unphysiologisch hohen Konzentrationen auf. Sein physiologischer Effekt ist eine durch Erhöhung der cAMP-Konzentration hervorgerufene Stimulierung der Insulinsekretion durch die E-Zellen der Langerhans’schen Inseln des Pankreas. Es ist damit dafür verantwortlich, dass resorbierte Nahrungsstoffe auch rasch verwertet werden können (7 Kap. 26.1.3). Ein physiologischer Hemmstoff der Magenmotorik scheint das Cholecystokinin/Pankreozymin (CCK/PZ) zu sein.

1067 32.1 · Gastrointestinale Sekrete

32.1.7

Pathobiochemie

Magen- und Duodenalulcus. Bei Störungen des Gleichgewichts zwischen Salzsäure- bzw. Pepsinsekretion und Produktion der für das Epithel des oberen Intestinaltrakts essentiellen Schutzschicht aus Mucinen entstehen Geschwüre, die unbehandelt zu schweren Blutungen und im Extremfall zu Perforationen führen können. Auslöser hierfür sind i. Allg. zwei unterschiedliche Pathomechanismen: 4 Eine verminderte Produktion oder Funktion der Mucine oder 4 eine gesteigerte Produktion von Salzsäure Hemmung der Mucinproduktion. Eine Hemmung der Mu-

cinproduktion kann u.a. verursacht werden: 4 Durch Glucocorticoide. Diese können endogen durch die Nebennierenrinde produziert werden (z.B. bei Stress) oder als Medikamente zugeführt werden 4 Durch Hemmung der Synthese von Prostaglandin E. Diese wird häufig durch Aspirin (7 Kap. 12.4.2) oder nichtsteroidale Antirheumatika (NSAR) ausgelöst 4 Durch die verschiedensten Noxen (Hitze, Kälte, Röntgenbestrahlung, Kochsalz, Nitrate usw.) kann es zu einer Verminderung der Bindungsstellen für Mucine an den Mukosazellen und damit zu einer Störung der Mukosabarriere kommen Steigerung der Salzsäuresekretion. Eine Überproduktion von Salzsäure ist die Folge einer gesteigerten Stimulierung der Belegzellen durch Vagusreize, Histamin oder Gastrin. Das Ausmaß der hierdurch ausgelösten Hypersekretion hängt allerdings von der angeborenen Parietalzellmasse ab. Gastrin bildende Tumoren (z.B. Zollinger-Ellison-Syndrom) führen allein durch die von ihnen ausgelöste exzessive Säurestimulation zu schweren Geschwüren. In der Regel führt eine nur leicht erhöhte oder mäßige Säureproduktion alleine nicht zu einem Ulcus. Eine wesent-

liche Voraussetzung ist die Besiedlung der Magenschleimhaut mit dem Bakterium Helicobacter pylori. Dieser an das saure Milieu der Magenschleimhaut angepasste Erreger löst eine – häufig asymptomatisch verlaufende – Gastritis aus. Diese ist offenbar an der Ulcus-Entstehung beteiligt, sodass der Leitsatz gilt »ohne Säure kein Ulcus, ohne Helicobacter pylori kein Ulcus«. Man weiß noch nicht genau, wie die bakteriell ausgelöste Gastritis zur Entstehung von Ulcera führt. Eine Erklärung wäre, dass Helicobacter große Mengen an Ammoniumionen produziert, möglicherweise um dem stark sauren Magenmilieu zu entgehen. Dies führt jedoch zu einer gesteigerten Gastrinsekretion mit reaktiver Steigerung der Salzsäureproduktion. Bei rezidivierendem Ulcusleiden führt meist eine erfolgreiche Therapie der Infektion mit Helicobacter pylori bereits zu einer Heilung. Zusätzlich ist eine Hemmung der Salzsäuresekretion durch Protonenpumpenblocker wie Omeprazol (7 Kap. 32.1.2) notwendig. Pankreasinsuffizienz. Die wichtigsten Störungen der exo-

krinen Pankreasfunktion sind: Akute Pankreatitis. Die häufigsten Ursachen der akuten Pankreatitis sind Erkrankungen der Gallenwege und Alkoholabusus (je 40% der Fälle). Die Pathogenese der Erkrankung ist noch nicht vollständig geklärt. Auslösende Faktoren sind u.a. Steine im Pankreas-Gangsystem mit dadurch ausgelöster Druckerhöhung, die zu einer veränderten Permeabilität der Acinuszellen führt. Chronischer Alkoholabusus führt zu Stoffwechselstörungen der Acinuszellen. Der akuten Pankreatitis liegt immer eine vorzeitige Aktivierung der als Zymogene vorliegenden Proteasen, insbesondere des Trypsinogens, zugrunde. Dabei spielt eine Störung des Transportes der Zymogengranula in den Acinuszellen eine wichtige Rolle. Dies löst eine Fusionierung der Zymogengranula mit Lyosomen, eine sog. Crinophagie, aus. Durch die in den Lysosomen vorhandene Protease Kathep-

Infobox Nobelpreis für Medizin 2005 an Robin Warren und Barry Marshall In der Vorstellung, dass diese Bakterien etwas mit Anfang der 80 Jahre entdeckte der australische PatholoGastritis und Magengeschwüren zu tun haben müssten, ge Robin Warren in der Magenschleimhaut von Patienten wurden Warren und Marshall u.a. durch einen durchaus mit Magen- oder Duodenalgeschwüren spiralförmige schmerzhaften Selbstversuch bekräftigt. Warren trank den Bakterien. Dieser Befund wurde zunächst von der FachInhalt einer größeren Kulturflasche mit Helicobacter und welt angezweifelt, da die gängige Lehrmeinung besagte, erkrankte prompt an einer schweren Gastritis, die mit dass der Mageninhalt wegen des stark sauren Milieus Antibiotika geheilt werden konnte. steril sei. Erst recht stieß seine Vermutung auf UnglauHeute weiß man, dass etwa die Hälfte der Weltbevölkeben, dass die Entstehung von Magengeschwüren etwas rung mit Helicobacter infiziert ist und dass etwa 10% der mit diesen Bakterien zu tun haben sollte. Robin Warren Infizierten im Laufe ihres Lebens ein Magen- oder Zwölffinließ jedoch nicht locker. Zusammen mit dem Mikrobiologerdarm-Geschwür entwickeln. Zur Standardtherapie der gen und Internisten Barry Marshall gelang es, diese BakErkrankung gehört eine Behandlung mit Protonenpumterien zu kultivieren. Sie wurden der Ordnung Campylopen-Inhibitoren und Antibiotika. bacteriales zugeordnet und als Helicobacter pylori beWeitere Informationen: http://nobelprize.org zeichnet.

32

1068

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

sin B wird Trypsinogen zu Trypsin aktiviert, was zur Selbstverdauung des Pankreas (Pankreasnekrose) führt. Diese geht mit einem schweren Krankheitsverlauf einher, wobei besonders die Infektion der Pankreasnekrosen durch Dickdarmbakterien von Bedeutung ist. Chronische Pankreatitis. Die chronische Pankreatitis ist in 60–80% der Fälle die Folge eines chronischen Alkoholabusus. Sie entwickelt sich wahrscheinlich aus der Folge meh-

rerer Schübe einer akuten Pankreatitis und führt zur chronischen Pankreasinsuffizienz. Andere Ursachen der chronischen Pankreasinsuffizienz können eine verminderte Sekretion von Sekretin bzw. CCK sein. Durch die nicht ausreichende Freisetzung dieser Hormone kommt es zur sog. pankreatico-cibalen Dyssynchronie. Weitere Ursachen der chronischen Pankreasinsuffizienz können Pankreaskarzinome oder Abfluss-Störungen des Pankreassekrets sein.

In Kürze Im Intestinaltrakt finden zwei unterschiedliche Vorgänge statt, nämlich 5 der als Verdauung bezeichnete Abbau von Nahrungsstoffen zu monomeren Bausteinen sowie 5 die Resorption dieser Bausteine und damit ihre Aufnahme in den Organismus Die Verdauung der Nahrungsstoffe beginnt bereits in der Mundhöhle, wird im Magen fortgesetzt und im Dünndarm abgeschlossen. Sie wird katalysiert durch die Aktivität der von den verschiedenen Verdauungsdrüsen freigesetzten Hydrolasen. Diese spalten Polysaccharide zu Oligo- und Monosacchariden, Proteine zu Oligopeptiden und Aminosäuren, Lipide zu Monoacylglycerinen und Fettsäuren sowie Nucleinsäuren zu Nucleosiden.

32.2

32

Die zeitgerechte Freisetzung der Verdauungsenzyme muss sehr genau reguliert werden, damit in der zur Verfügung stehenden Passagezeit durch das Duodenum und Jejunum auch ein vollständiger Abbau als Voraussetzung für die Resorption erzielt werden kann. Diese Regulation erfolgt über eine große Zahl von Hormonen und Transmittern, die durch zentralnervöse Reize, durch parakrine Signale sowie durch nervale Impulse freigesetzt werden. Für die Sekretion des Magensaftes ist das wichtigste Hormon das Gastrin, die Pankreassekretion wird durch Sekretin und Cholecystokinin reguliert. Das letztere sorgt darüber hinaus durch die Entleerung der Gallenblase für die Bereitstellung der für die Lipidresorption benötigten Gallensäuren.

Verdauung und Resorption einzelner Nahrungsbestandteile

Durch die enzymatischen Aktivitäten sowie die Oberflächeneigenschaften der verschiedenen Verdauungssäfte werden die Nahrungsbestandteile so aufbereitet, dass sie im Dünndarm resorbiert werden können. Für diesen Vorgang steht prinzipiell die gesamte Dünndarmlänge zur Verfügung, jedoch wird der größte Teil der Nahrungsstoffe im Duodenum und Jejunum resorbiert (. Abb. 32.11). Durch Dünndarmzotten und Mikrovilli der Mukosazellen wird die Resorptionsfläche auf etwa 200 m2 vergrößert. Für die Aufnahme von Substanzen aus dem Dünndarmlumen in die Mukosazellen bestehen verschiedene Möglichkeiten. Bei der einfachen passiven Diffusion erfolgt die Aufnahme entlang eines Konzentrationsgefälles. Sie kann also nur dann erfolgen, wenn die Konzentration der betreffenden Substanz im Dünndarmlumen höher als in der Mukosazelle ist und außerdem die Möglichkeit einer unbehinderten Passage durch die luminale Membran der Mukosazelle besteht. Die wichtigste, durch passive Diffusion transportierte Substanz ist das Wasser. Wegen ihrer guten Membrangängigkeit können lipophile Substanzen wie Fettsäuren, Glyceride, fettlösliche Vitamine, aber auch lipophile Arzneimittel ebenfalls durch passive Diffusion aufgenommen werden. Die Aufnahmegeschwindigkeit ist von

. Abb. 32.11. Schematische Darstellung der Resorptionsorte der wichtigsten Nahrungsstoffe im Duodenum, Jejunum und Ileum. (Einzelheiten 7 Text)

1069 32.2 · Verdauung und Resorption einzelner Nahrungsbestandteile

der Molekülgröße abhängig. Substanzen mit einem Molekulargewicht über 400 Da werden i. Allg. nicht mehr mit messbarer Geschwindigkeit passiv aufgenommen. Häufiger als durch passive Diffusion erfolgt die Resorption gegen ein Konzentrationsgefälle als aktiver Transport. Gelegentlich muss nicht nur ein chemischer Gradient, sondern auch eine Ladungsdifferenz zwischen innen und außen (elektrochemischer Gradient) überwunden werden. Die für den aktiven Transport benötigte Energie wird aus der Spaltung von ATP bezogen.

32.2.1

Kohlenhydrate

! Nahrungskohlenhydrate werden durch α-Amylase sowie verschiedene Disaccharidasen gespalten.

Vor ihrer Resorption müssen Kohlenhydrate in die zugrunde liegenden Monosaccharideinheiten zerlegt werden. Der Abbau der mengenmäßig bedeutsamsten Polysaccharide Glycogen und v.a. Stärke beginnt durch die Einwirkung der in der Speichel- und Pankreasflüssigkeit enthaltenen DAmylase. Dabei entsteht ein Gemisch aus Dextrinen (Oligosaccharide aus 4–10 Glucosylresten), Maltotriose und Maltose. Neben diesen Bruchstücken müssen außerdem noch die in manchen Nahrungsmitteln enthaltenen Disaccharide Saccharose und Lactose gespalten werden. Die hierfür verantwortlichen Enzyme Amylo-1,6-α-Glucosidase, Isomaltase, verschiedene Maltasen, Lactase sowie Saccharase sind im Bürstensaum der Mukosazellen lokalisiert, hier findet wahrscheinlich auch die Spaltung statt. Man nimmt an, dass die Disaccharidasen der Mukosazellen in enger Nachbarschaft zu den für die Monosaccharidresorption (7 u.) benötigten Transportsystemen angeordnet sind. ! Für die Resorption von Monosacchariden werden spezifische Transportsysteme benötigt.

In unmittelbarer Nachbarschaft zum Ort der Disaccharidspaltung im Bürstensaum der Mukosazellen befinden sich die für die Monosaccharidresorption zuständigen Transportsysteme. Sie zeigen folgende Eigenschaften: 4 Verschiedene Hexosen wie Glucose oder Fructose werden mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten resorbiert 4 Der Transportvorgang erfolgt stereospezifisch. So wird beispielsweise die natürlich vorkommende D-Glucose, nicht aber die L-Glucose resorbiert 4 die Konzentration resorbierter Monosaccharide, insbesondere der von Glucose ist in der Mukosazelle wesentlich größer als im intestinalen Lumen 4 der Monosaccharidtransport in die Mukosazelle erfolgt nur in Anwesenheit von Natriumionen Diese Beobachtungen haben zur Entdeckung des in . Abbildung 32.12 dargestellten Natrium-abhängigen Glucose-

. Abb. 32.12. Natriumabhängiger Transportmechanismus für Glucose. (Einzelheiten 7 Text)

transporters SGLT (sodium dependent glucose transporter 7 Kap. 6.1.5) geführt. An der luminalen Seite der Mukosazelle binden Glucose und Natriumionen an den SGLT. Da infolge der Aktivität der an der basolateralen Seite gelegenen Na+/K+-ATPase die Natriumkonzentration in der Mukosazelle niedrig ist und zusätzlich ein negatives Potential von etwa 40 mV gegenüber dem intestinalen Lumen besteht, kann Na+ entlang eines elektrischen Gradienten durch die Membran des Bürstensaums in die Mukosazelle gelangen und nimmt dabei das am gleichen Carrier angelagerte Monosaccharid mit, auch wenn damit ein Transport gegen einen Konzentrationsgradienten verbunden ist. Von den bis heute beschriebenen Isoformen des SGLT kommt im Intestinaltrakt nur SGLT-1 vor. In den Epithelien der renalen Tubulussysteme finden sich außer dem SGLT-1 noch die Isoformen 2 und 3 (7 Kap. 28.1.5). Der SGLT-1 arbeitet solange die intrazelluläre Natriumkonzentration durch die ATP-abhängige Natrium-KaliumPumpe niedrig bleibt. Er kommt infolgedessen zum Erliegen, wenn deren Aktivität abnimmt, sei es durch Hemmstoffe wie Ouabain oder durch Störungen des Energiestoffwechsels. Auf der basalen Seite der Enterozyten befindet sich ein weiteres Transportsystem für Glucose, das die erleichterte Diffusion intrazellulärer Glucose in die extrazelluläre Flüssigkeit und damit in das Blut ermöglicht. Es handelt sich um einen Glucosetransporter aus der GLUT-Familie, nämlich den GLUT1 (7 Kap. 11.4.1). SGLT-1 zeigt eine besonders hohe Affinität zu Hexosen, die am C-Atom2 die D-Konfiguration haben und dementsprechend an dieser Stelle nicht substituiert sein dürfen (. Abb. 32.13. Hierzu passt, dass SGLT-1 Galactose mit etwa der gleichen Geschwindigkeit wie Glucose transportiert.

32

1070

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

. Abb. 32.13. Strukturelemente, die für den Natrium-abhängigen Hexosetransport wichtig sind. Die hervorgehobenen Gruppen und die Pyranosekonfiguration sind für den Transport durch SGLT-1 notwendig

Für die Resorption von Fructose wird dagegen das zur Familie der GLUT-Transporter gehörige GLUT5-Transportsystem benötigt.

32.2.2

Lipide

Infolge ihrer geringen Wasserlöslichkeit müssen Nahrungslipide (Triacylglycerine, Cholesterin sowie die fettlöslichen Vitamine A, D, E und K) im intestinalen Lumen in eine resorptionsfähige Form überführt werden. Dies geschieht durch teilweisen Abbau sowie feinste Emulgierung. Nach Aufnahme in die Mukosazellen erfolgt sodann ein Umbau der aufgenommenen Lipide in eine für den Transport im Serum geeignete Form.

32

! Triacylglycerine der Nahrung werden durch die Pankreaslipase abgebaut.

Abbau und feine Dispersion der Triacylglycerine im intestinalen Lumen werden durch deren partielle Spaltung durch Lipasen katalysiert. Etwa 15% der Esterbindungen in Triacylglycerinen werden bereits durch die Magenlipase (7 Kap. 32.1.2) gespalten, der Hauptteil jedoch im Duodenum durch die Pankreaslipase. In Anbetracht der Bedeutung der Nahrungslipide für die Aufrechterhaltung der Versorgung mit Energie, essentiellen Fettsäuren und fettlöslichen Vitaminen ist dieses Enzym von ganz besonderem Interesse. Seine aus einer Röntgenstukturanalyse gewonnene Raumstruktur ist in . Abb. 32.14 dargestellt. Das Enzym besteht aus zwei Domänen, wobei die N-terminale Domäne das aktive Zentrum enthält, welches das für die Esterspaltung essentielle Serin trägt. Durch eine Art Deckel ist das aktive Zentrum verschlossen. Die C-terminale Domäne enthält die Bindungsstelle für ein Hilfsprotein, ohne das die Lipase nicht in die aktive Form überführt werden kann. Dieses Hilfsprotein wird als Colipase bezeichnet und vermittelt die Assoziation der Lipase an Lipidgrenzflächen mit Phospholipiden und Gallensäuren. Diese Assoziation führt dazu, dass sich der Deckel über dem aktiven Zent-

. Abb. 32.14. Schematische Darstellung der Raumstruktur des Lipase-Colipase-Komplexes und Aktivierung der Lipase durch Kontakt mit Grenzflächen. In Abwesenheit von Grenzflächen ist der Deckel über dem aktiven Zentrum der Lipase geschlossen. Der durch die Colipase vermittelte Kontakt mit Grenzflächen aus Phospholipiden oder Gallensäuren führt zu einer Konformationsänderung, die den Deckel vom aktiven Zentrum abzieht. (Nach Lowe 1997)

rum öffnet und damit die Lipase katalytisch aktiv werden kann. Neben der Triacylglycerin-spezifischen Pankreaslipase kommt im intestinalen Lumen eine weitere Lipase vor, die im Gegensatz zur Pankreaslipase auch E-Monoacylglycerine zu spalten imstande ist. Dieses Enzym wird durch Gallensäuren aktiviert und zeigt eine sehr weite Substratspezifität. Außer Acylglycerinen werden von dieser Carboxylesterase auch Cholesterinester und Phospholipide gespalten. Interessanterweise ist die Carboxylesterase auch mit großer Aktivität in der Muttermilch enthalten. Diese liefert also nicht nur die für den Säugling notwendigen Triacylglycerine, sondern auch das für deren Spaltung notwendige Enzym, das im Intestinaltrakt des Säuglings durch die dort vorhandenen Gallensäuren aktiviert wird. Vervollständigt wird das Repertoire an Lipid-spaltenden Enzymen des Pankreassekretes durch eine Phospholipase A. Die durch die Pankreaslipase katalysierte Triacylglycerinverdauung führt im Wesentlichen zu β-Monoacylglyce-

1071 32.2 · Verdauung und Resorption einzelner Nahrungsbestandteile

rin und Fettsäuren. Die vollständige Aufspaltung in Glycerin und Fettsäuren findet nur in geringem Umfang statt, ebenso treten nur kleine Mengen von Diacylglycerinen als Reaktionsprodukte auf. ! Die Bildung von Mizellen ist eine Voraussetzung für die Lipidaufnahme in die Mukosazellen.

Durch die Aktion der verschiedenen Lipid-spaltenden Enzyme im intestinalen Lumen entsteht ein Gemisch aus Fettsäuren, Monoacylglycerinen und Cholesterin. Unter der Einwirkung der aus der Gallenflüssigkeit stammenden Gallensäuren lagern sich diese Verbindungen zu Mizellen zusammen, die auch weitere Lipide, vor allem die fettlöslichen Vitamine (7 Kap. 23.2) einschließen. Die Bildung dieser Mizellen ist eine Voraussetzung für die Lipidresorption. Bei allen Störungen des Gallenflusses wird also die Lipidaufnahme in den Organismus blockiert sein und es zu sog. Fettstühlen kommen. Eine Ausnahme von dieser Regel machen Triacylglycerine, die – wenn auch mit deutlich verringerter Geschwindigkeit – in Abwesenheit von Gallensäuren resorbiert werden, wenn sie nur in Monoacylglycerine und Fettsäuren aufgespalten und anschließend möglichst fein verteilt werden. ! Bei Kontakt mit dem Bürstensaum der Mukosa zerfallen die Mizellen und ihre verschiedenen Bestandteile werden einzeln resorbiert.

Resorption von Acylglycerinen und Fettsäuren. Es sind

zwar unterschiedliche Fettsäuretransportproteine, vor allem das CD 36 sowie FATP-Proteine (7 Kap. 12.1.3) in der Mukosazelle beschrieben worden, allerdings verläuft die Resorption von Acylglycerinen und Fettsäuren auch bei solchen Versuchstieren mit normaler Geschwindigkeit, bei denen diese Proteine gentechnisch ausgeschaltet wurden. Fettsäuren und Monoacylglycerine scheinen daher überwiegend passiv durch die Lipidphase der apikalen Plasmamembran der Mukosazellen zu diffundieren. Resorption von Sterolen. Wesentlich komplexer sind dagegen die Verhältnisse beim Cholesterin und verwandten Verbindungen. Bei ausgewogener Diät werden pro Tag etwa 250–500 mg Cholesterin, aber auch 200–400 mg andere Sterole aufgenommen. Diese sind wie das Sitosterol (7 Kap. 2.2.5) überwiegend pflanzlicher Herkunft. . Abbildung 32.15 zeigt die Grundzüge der Resorption dieser Verbindungen. Für die Aufnahme der aus den zerfallenden Mizellen freigesetzten Sterole in die Mukosazelle ist ein spezifisches Transportprotein verantwortlich, das als NiemannPick C 1-like 1 (NPC 1 like 1) bezeichnet wird. Das Protein gehört in die Familie der Niemann-Pick-C1-Proteine, die am intrazellulären Cholesterintransport beteiligt sind und deren Mutationen den Typ C der Niemann-Pick’schen Lipidspeicherkrankheit auslösen. NPC 1 like 1 ist ein integrales Membranprotein der apikalen Plasmamembran der intestinalen Mukosazellen, das dort mit 13 Transmem-

. Abb. 32.15. Resorption von Sterolen. NPC 1 like 1 = NiemannPick C like 1 Steroltransporter; ABCG5 und ABCG8 = ABC-Transporter, die den Export von Sitosterol und ähnlichen Verbindungen übernehmen, Chol = Cholesterin, Sito = Sitosterol. (Einzelheiten 7 Text)

brandomänen verankert ist. Es ist für die Cholesterinaufnahme in die Mukosazellen verantwortlich, kann aber nicht zwischen Cholesterin und den anderen meist pflanzlichen Sterolen unterscheiden. Erst ein in dem vesikulären Kompartiment der Mukosazellen lokalisierter Sortierungsvorgang trennt Cholesterin und die anderen Sterole. Diese werden mit Hilfe der ABC-Transporter ABCG5 und ABCG8 wieder in das duodenale Lumen zurücktransportiert. Hemmstoffe des NPC 1 like 1-Transporters werden auch zur Behandlung der Hypercholesterinämie (7 Kap. 18.6.2) eingesetzt. ! In der Mukosazelle erfolgt die Resynthese von Triacylglycerinen sowie die Assemblierung von Chylomikronen.

Resynthese von Triacylglycerinen. Nach der Aufnahme der durch die intestinale Lipidverdauung entstandenen Fettsäuren und β-Monoacylglycerine finden die in . Abb. 32.16 dargestellten Reaktionen am endoplasmatischen Retikulum der Mukosazelle statt. Ihr Zweck ist die Umwandlung der aus dem Darm aufgenommenen Lipide in eine in Lymphe und Blut transportable Form. Dabei kommt es zunächst durch Reveresterung von Fettsäuren zur Triacylglycerinbildung. Der Mukosazelle stehen hierfür verschiedene Möglichkeiten zur Verfügung. Einmal können die aus dem intestinalen Lumen aufgenommenen E-Monoacylglycerine direkt mit aktivierten Fettsäuren, also mit Acyl-CoA, verestert werden. Acyl-CoA entsteht unter Einwirkung der in der intestinalen Mukosa in hoher Aktivität vorkommenden Acyl-CoA-Synthetase (7 Kap. 12.2.1). Neben diesem für die Mukosazelle typischen Reveresterungsmechanismus kommt als weitere Möglichkeit die Triacylglycerinbiosynthese aus D-Glycerophosphat und AcylCoA in Frage, wie sie in vielen Zellen des Organismus

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1072

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

. Abb. 32.16. Intestinale Spaltung und Resynthese von Triacylglycerinen. R = Acylrest. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

32 abläuft. Das für diesen Vorgang notwendige Acyl-CoA entsteht aus resorbierten Fettsäuren oder durch hydrolytische Abspaltung aus den aufgenommenen Monoacylglycerinen mit Hilfe einer in der Mukosazelle vorkommenden Monoacylglycerinlipase. Das D-Glycerophosphat entstammt im Wesentlichen der Glycolyse, kann aber auch durch direkte Phosphorylierung von Glycerin mit Hilfe einer ATP-abhängigen Glycerokinase entstehen. Diese verschiedenen Wege zur Triacylglycerinbildung bieten für die Mukosazelle Vorteile. Unter normalen Bedingungen werden aufgenommene Monoacylglycerine direkt zu Triacylglycerinen acyliert. Bei einem Überschuss von nicht veresterten Fettsäuren kann zusätzlich die Möglichkeit der Triacylglycerinbiosynthese aus D-Glycerophosphat und Fettsäuren in Anspruch genommen werden. Durch die mukosaspezifische Monoacylglycerinlipase kann schließlich ein Monoacylglycerin-Überschuss abgebaut und die dabei entstehenden Fettsäuren der Triacylglycerinbiosynthese zugeführt werden. Außer der Triacylglycerinbildung erfolgt in der Mukosazelle auch die Veresterung von Cholesterin, das nur in freier Form resorbiert werden kann.

Assemblierung von Chylomikronen. Im Anschluss an die

Biosynthese von Triacylglycerinen und Cholesterinestern erfolgt ihre Assoziation an das Apolipoprotein B48, wobei Chylomikronen entstehen (7 Kap. 18.5.2). Hierzu müssen die im glatten endoplasmatischen Retikulum synthetisierten Triacylglycerine, Cholesterinester und Phospholipide durch das Triglycerid-Transfer-Protein zum Golgi-Apparat transportiert werden. Das TriglyceridTransfer-Protein ist ein heterodimeres Protein, dessen eine Untereinheit aus der Protein-Disulfidisomerase (7 Kap. 9.2.2) besteht und die andere wesentlich größere Untereinheit in relativ hoher Konzentration in Intestinaltrakt und Leber vorkommt. Dies sind die beiden einzigen Organe, die zur Biosynthese von Apolipoprotein B-haltigen Lipoproteinen imstande sind (7 Kap. 8.5.4). Im Golgi-Apparat erfolgt dann die Assemblierung der Triacylglycerine, Cholesterinester und Phospholipide mit dem Apolipoprotein B48 zu Chylomikronen. Diese werden durch Exozytose von den Enterozyten freigesetzt (7 Kap. 18.5.2). Es ist zurzeit nicht klar, wie die Chylomikronen vom Interzellulärraum durch die Basalmembran in die Lymphgefäße gelangen.

1073 32.2 · Verdauung und Resorption einzelner Nahrungsbestandteile

32.2.3

Proteine, Peptide und Aminosäuren

Beim Erwachsenen werden Proteine und Peptide der Nahrung nicht als intakte Moleküle resorbiert und in das Blut abgegeben, sondern durch die proteolytischen Enzyme der gastrointestinalen Säfte sowie der Mukosazellen zerlegt. Dementsprechend kommt es nach einer proteinreichen Mahlzeit im Pfortaderblut zu einer der Proteinzusammensetzung entsprechenden Zunahme der Konzentrationen einzelner Aminosäuren; Di-, Tri- oder gar Oligopeptide sind dagegen nicht vermehrt nachweisbar. Da besonders nach proteinreichen Mahlzeiten die Verweildauer im Duodenum zu kurz für eine vollständige Aufspaltung von Protein in Aminosäuren ist, ist schon vor Jahren die Resorption kleinerer Peptide als wesentlicher Mechanismus der Proteinresorption postuliert worden (7 u.). Im Gegensatz zum Erwachsenen findet beim Neugeborenen eine – wenn auch nur geringe – Aufnahme von intakten Proteinen durch die Mukosazellen statt, wahrscheinlich durch Pinozytose. Auf diese Weise können besonders in der Muttermilch enthaltene Immunglobuline von der Mutter auf den Säugling übertragen werden. Nach neueren Untersuchungen spielt dieser Vorgang jedoch im Vergleich zum placentaren Übertritt von mütterlichen Immunglobulinen beim Menschen eine geringe Rolle. ! Oligopeptide werden mit einem H+-abhängigen Transportsystem resorbiert.

Aus Beobachtungen, dass die Verweildauer im Duodenum für vollständige Proteolyse zu Aminosäuren zu kurz, die Konzentrationen von Di- und Tripeptiden im Duodenallumen fünf- bis zehnmal größer als die Konzentration von freien Aminosäuren und die Resorptionsgeschwindigkeiten von Di- und Tripeptiden größer als diejenige freier Aminosäuren sind, muss geschlossen werden, dass ein erheblicher Teil der Nahrungsproteine nicht in Form freier Aminosäuren, sondern als Di- und Tripeptide von den Mukosazellen aufgenommen wird. Diese enthalten außerordentlich aktive cytoplasmatische Peptidasen, sodass man davon ausgehen kann, dass die aufgenommenen Peptide intrazellulär auf die Stufe freier Aminosäuren gespalten und von dort in das Pfortaderblut abgegeben werden. Die Aufnahme von Peptiden in die Mukosazelle erfolgt nach dem Prinzip des sekundär aktiven Transportes. Im Gegensatz zu der Aufnahme von Aminosäuren oder Glucose ist sie allerdings nicht natrium- sondern protonenabhängig (. Abb. 32.17). Der in den intestinalen Mukosazellen nachgewiesene Peptidtransporter PepT1 (grün) gehört in eine größere Familie von Peptidtransportern, die u.a. auch in den Bürstensaumepithelien der renalen Tubuli nachgewiesen wurden. PepT1 zeigt eine außerordentlich breite Substratspezifität und transportiert außer Di- und Tripeptiden auch eine Reihe von Arzneimitteln, z.B. E-Lactam-Antibiotika wie Penicillin. Der für den Transport notwendige Protonengradient wird durch einen Natrium-

. Abb. 32.17. Mechanismus der Aufnahme von Peptiden oder Peptidantibiotika durch den Peptidtransporter PepT1. Der Transport durch den Peptidtransporter PepT1 (grün) in die Mukosazellen erfolgt gegen ein Konzentrationsgefälle in Form eines Protonencotransports. Blau: Na+/H+-Antiporter, rot: Na/K-ATPase, lila: Aminosäuretransporter serosaseitig (Einzelheiten 7 Text)

Protonen-Austauscher (blau) aufrecht erhalten, der an die basolateral gelegene Na +/K+ -ATPase (rot) gekoppelt ist. ! Aminosäuren werden durch spezifische Transportproteine aufgenommen.

Für die Aufnahme von Aminosäuren in die Mukosazellen des Intestinaltrakts stehen, wie aufgrund der unterschiedlichen Struktur und Ladung der Aminosäureseitenketten nicht anders zu erwarten, unterschiedliche Transportsysteme zur Verfügung. So sind apikal lokalisierte Transportsysteme für saure, neutrale und basische Aminosäuren beschrieben worden, wobei die letzteren neben basischen Aminosäuren auch Cystin transportieren. Vom Transportmechanismus her unterscheidet man 4 Na+-abhängige Transportsysteme. Diese gleichen in ihrer Transportkinetik den Na+-abhängigen Zuckertransportsystemen wie dem SGLT1 (7 Kap. 6.1.5) 4 Na+-unabhängige Transportsysteme. Hier handelt es sich um eine Reihe heterodimerer Transportproteine, die speziell für die Aufnahme basischer Aminosäuren und des Cystins verantwortlich sind Auf der basolateralen Seite erfolgt die Aminosäureabgabe aus den Mukosazellen in das Blut durch entsprechende Uniporter. Es besteht grundsätzlich eine große Ähnlichkeit der Aminosäureaufnahmesysteme der intestinalen Mukosazellen mit entsprechenden Transportern in den renalen Tubulusepithelien.

32

1074

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

32.2.4

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Resorption von Wasser und Elektrolyten

Mit dem Übergang der Meeresbewohner zum Leben auf dem Land ergab sich die Notwendigkeit, spezielle Mechanismen zur möglichst effektiven Konservierung von Wasser und Elektrolyten zu entwickeln. Neben den Nieren und den Schweißdrüsen fällt dabei dem Magen-Darm-Trakt eine Hauptaufgabe zu. Hierfür sind v.a. zwei Gründe verantwortlich. Einmal ist der Magen-Darm-Trakt unter physiologischen Bedingungen die einzige Aufnahmestelle für Wasser und Elektrolyte. Beim Menschen müssen täglich etwa 2–3 Liter Wasser sowie 300 mmol (ca. 7 g) Natrium und 100 mmol (ca. 4 g) Kalium, die mit dem Harn und Schweiß verloren gehen, ersetzt werden. Zum anderen müssen im Magen-Darm-Trakt erhebliche Mengen der Plasma-isotonen Flüssigkeit resorbiert werden, die aus den Sekreten der Verdauungsdrüsen und der Leber stammt. Wie vorne diskutiert, beträgt die Gesamtmenge dieser Sekrete beim Menschen pro Tag etwa 6–9 l. Da sie eine dem Plasma entsprechende Elektrolytzusammensetzung haben, müssen also nicht nur Wasser, sondern auch entsprechende Mengen an Elektrolyten resorbiert werden, um schwere, mit dem Leben nicht zu vereinbarende Elektrolytverluste zu vermeiden. Im Gegensatz zu Aminosäuren, Zuckern oder Elektrolyten ist die Resorption von Wasser ein passiver Vorgang und erfolgt entlang eines osmotischen Gradienten. Da die Elektrolyte Natrium, Chlorid und Hydrogencarbonat den überwiegenden Teil der osmotisch aktiven Substanzen im Bereich des Magen-Darm-Traktes ausmachen, sind die Vorgänge der Wasserresorption untrennbar mit denjenigen des Elektrolyttransports verbunden und werden deshalb im Folgenden auch zusammen behandelt.

. Abb. 32.18. Abhängigkeit der Wasserresorption vom Hexosetransport. 30 cm normalen menschlichen Jejunums wurden mit einer Geschwindigkeit von 20 ml/min mit den angegebenen Lösungen perfundiert und die Wasserresorption gemessen. Die Perfusionslösungen enthielten in isotonischer Kochsalzlösung (0,9%) jeweils 2,5% der angegebenen Zucker. (Einzelheiten 7 Text)

! Wasser- oder NaCl-Sekretion in Magen und Duodenum macht den Speisebrei isoton.

Im Magen und Duodenum findet keine Wasserresorption statt. Im Gegenteil, es kommt hier bei Vorliegen eines hypertonen Speisebreis zur Wassersekretion, bis ein annähernd Plasma-isotoner Wert erreicht wird. Werden dagegen hypotone Lösungen (Wassertrinken) zugeführt, so wird Natriumchlorid bis zur Isotonie in das duodenale Lumen sezerniert. ! Im Jejunum erfolgt der größte Teil der Wasserrückresorption.

Der wichtigste Ort der gastrointestinalen Wasserrückresorption ist das Jejunum. Ist der Darminhalt an dieser Stelle noch hypoton, verlässt Wasser infolge der osmotischen Druckdifferenz zwischen Plasma und Lumen den Darm. Unter normalen Bedingungen ist jedoch die Speiseflüssigkeit im Bereich des Jejunums eine isotone Lösung, die sich in etwa in ionischem Gleichgewicht mit dem Plasma befindet. Unter diesen Bedingungen können nur geringe Men-

. Abb. 32.19. Kopplung von Na+- und Flüssigkeitstransport im Jejunum. Rot: aktiver Transport von Na+-Ionen (Na/K-ATPase, grün: an Hexose- bzw. Aminosäure-Transport gekoppelter Na+-Transport. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

gen von Na+, Cl– oder Wasser resorbiert werden (. Abb. 32.18). Der Resorptionsvorgang kommt jedoch sofort in Gang, wenn zusätzlich Zucker oder Aminosäuren im Darmlumen vorhanden sind. Eine Erklärung findet dieses Phänomen darin, dass die treibende Kraft für den passiv erfolgenden Wassertransport der aktive Natriumtransport aus dem Darmlumen in das Plasma ist, der wiederum in diesem Teil des Magen-Darm-Trakts mit dem Transport von Monosacchariden bzw. Aminosäuren gekoppelt ist. Die im Jejunum vorliegenden Verhältnisse werden in schematischer Form in . Abb. 32.19 dargestellt. Natriumionen werden mit Monosacchariden oder Aminosäuren aus dem intestinalen Lumen in die Mukosazelle transpor-

1075 32.2 · Verdauung und Resorption einzelner Nahrungsbestandteile

tiert. Durch die vor allen Dingen an der basolateralen Seite der Mukosazellmembran gelegene energieabhängige Natriumpumpe wird der Natriumgehalt der Mukosazelle niedrig gehalten, im Interzellulärspalt jedoch ein osmotischer Gradient aufgebaut, sodass passiv Wasser aus dem Lumen in den Interzellulärspalt nachfließt. Ein Wasserausgleich in Richtung des intestinalen Lumens ist unmöglich, da der Interzellulärspalt der luminalen Seite durch die sog. Zonula occludens verschlossen ist. Eine weitere wichtige Rolle bei der Wasserresorption spielt das Hydrogencarbonat. Infolge seiner hohen Konzentrationen in der Gallenflüssigkeit sowie im Pankreassekret gelangen relativ große Mengen des Anions in das Jejunum, aus dem sie rasch resorbiert werden. An die Hydrogencarbonatresorption ist der Transport von Natrium und Wasser geknüpft. Ein gleichartiger Vorgang findet in den proximalen Tubulusepithelien der Niere statt (. Abb. 28.8). ! Ileum und Colon enthalten spezifische Transportsysteme für die Wasser- und Elektrolytresorption.

Im Gegensatz zum Jejunum erfolgt im Ileum und Colon die Resorption von Natrium und Wasser unabhängig von der Anwesenheit von Monosacchariden, Aminosäuren oder Hydrogencarbonationen. Prinzipiell können zwei unterschiedliche Transportmechanismen unterschieden werden. 4 Die elektroneutrale NaCl-Resorption. Für diesen Vorgang, der in . Abbildung 32.20, oberer Teil, schematisch dargestellt ist, werden ein Na+/H+- sowie ein Cl–/ HCO3–- Austauscher benötigt. Für die Regenerierung der im Austausch gegen NaCl aufgenommenen Protonen und des Hydrogencarbonats sind zwei Carboanhydrasen erforderlich, von denen eine im Bürstensaum, die andere in der Mukosazelle lokalisiert ist. Auf der basolateralen Seite findet der Na+- (und Cl–-) Export durch die Na+/K+-ATPase oder entsprechende Kanäle statt 4 Elektrogene Na+-Aufnahme durch den epithelialen Natriumkanal (epithelial natrium channel, ENaC). Dieser in vielen epithelialen Geweben vorkommende regulierbare Natriumkanal ist für die luminale Na+-Aufnahme verantwortlich (. Abb. 32.20, unterer Teil). Sie wird durch eine entsprechende Cl–-Aufnahme komplettiert. Diese kann über Chloridkanäle oder durch parazellulären Transport erfolgen. Auf der basolateralen Seite findet der Na+- (und Cl–-)Export durch die Na+/K+-ATPase oder entsprechende Kanäle statt Von entscheidender Bedeutung für die Rückresorption von Wasser ist, dass durch die genannten Natrium-Rückresorptionsvorgänge ein osmotischer Gradient aufgebaut wird, der für den Wassertransport aus dem luminalen in den basolateralen Raum verantwortlich ist. Es ist noch nicht geklärt, inwieweit Aquaporine an ihm beteiligt sind.

. Abb. 32.20. Elektroneutrale und elektrogene Reabsorption von Na+, Cl– und Wasser im Ileum und Colon. (Einzelheiten 7 Text)

! Aldosteron und Angiotensin regulieren Natrium- und Wasserrückresorption.

Die in den unteren Abschnitten des Dünndarms und im Dickdarm vorhandenen Natrium- und damit auch Wasserkonservierenden Enzymsysteme gehören zu den für Landlebewesen essentiellen Schutzmechanismen, die mit der Nahrung nicht wieder einbringbare Verluste von Wasser und Natrium verhindern sollen. Sie entsprechen damit funktionell gleichartigen Systemen, die in den Nieren Wasser- und Elektrolytverluste sowie in den Schweißdrüsen Elektrolytverluste zu verhindern haben. Es ist deshalb sinnvoll, dass auch im Magen-DarmTrakt die Mineralocorticoidhormone im Sinne einer Natriumkonservierung wirken. Dies trifft v.a. für das Aldosteron (7 Kap. 28.4.2) zu, das neben seiner renalen Wirkung auch an Ileum und Colon die Rückresorption von Natrium stimuliert. So steigt beim normalen Menschen 24 h nach Aldosterongabe die Geschwindigkeit der Natriumresorption im Colon um etwa das Dreifache an. Der Wirkungsmechanismus des Aldosterons beruht auf der vermehrten Induktion der an der Na+-Rückresorption beteiligten Kanäle und Transporter, v. a. des ENac und der Na+/K+-ATPase. Eine weitere wichtige Rolle bei der Natrium- und Wasserkonservierung im Magen-Darm-Trakt spielt das Angiotensin II (7 Kap. 28.1.10). Ähnlich wie in den Nieren stimuliert es auch im Ileum und Colon die Natriumrückresorption und begünstigt so die Wasseraufnahme durch den Darm. ! Im Intestinaltrakt können Wasser und Elektrolyte sezerniert werden.

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Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

Neben der Aufnahme von Wasser und Elektrolyten durch die Darmwand finden ständige Flüssigkeits- und Elektrolytbewegungen in der umgekehrten Richtung, d.h. in Richtung auf das Darmlumen statt. Die absolute, als Absorptionsrate bezeichnete Größe des Stofftransports durch die Darmwand ergibt sich aus der Geschwindigkeitsdifferenz des Transports vom Lumen durch die basolaterale Membran und damit ins Blut (Insorption) und der als Exsorption bezeichneten Bewegung von Wasser bzw. Elektrolyten durch die apikale Membran in das Darmlumen hinein. Dass die Exsorption nicht ausschließlich durch passive Rückdiffusion hervorgerufen wird, geht aus der Beobachtung hervor, dass bei der Cholera eine massiv gesteigerte Flüssigkeits- und Elektrolytsekretion durch das Jejunum in das Lumen erfolgt, obwohl die Mukosa histologisch normal ist und die insorptiven Vorgänge wie aktiver Transport von Monosacchariden und Aminosäuren sowie Natriumtransport ungestört ablaufen. Eine entscheidende Rolle bei der intestinalen Sekretion von Elektrolyten und Wasser spielt der Chloridtransport durch ein als CFTR (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) bezeichnetes Protein. CFTR, dessen Mutationen die cystische Fibrose (7 Kap. 9.2.5) auslösen, ist ein in vielen Epithelzellen in der apikalen Membran lokalisierter Chloridkanal. Zusammen mit entsprechenden Transportsystemen für Na+ und K+-Ionen ist er für die Sekretion von NaCl in das intestinale Lumen verantwortlich, dem ein entsprechender Wassertransport folgt. Das CFTR-Protein unterliegt einer sehr fein gesteuerten hormonellen Regulation. Es kann durch eine Reihe von Proteinkinasen (Proteinkinase A, cGMP-abhängige Proteinkinase, Proteinkinase C, CaM-Kinase) phosphoryliert werden, was jeweils zu einer Aktivierung der Chloridsekretion und damit auch des Wassertransports führt. ! Resorption anderer Nahrungsbestandteile.

Für eine Reihe wichtiger Nahrungsbestandteile wie Vitamine, Calcium, Magnesium, Phosphat und Eisen bestehen spezielle Resorptionsmechanismen, die bei der Besprechung des Stoffwechsels der einzelnen Substanzen abgehandelt werden (7 Kap. 22, 23).

Kohlenhydrate und Lipide werden zu niedermolekularen organischen Säuren wie Lactat, Acetat und Butyrat vergoren, wobei verschiedene Gase wie CO2, Methan und Wasserstoff entstehen können. Proteine und Aminosäuren unterliegen dagegen im Dickdarm einem bakteriell induzierten Fäulnisvorgang. Viele Aminosäuren werden durch die intestinale Bakterienflora zu toxischen Aminen decarboxyliert. Auf diese Weise entsteht 4 aus Lysin Cadaverin 4 aus Arginin Agmatin 4 aus Tyrosin Tyramin 4 aus Ornithin Putrescin und 4 aus Histidin Histamin Tryptophan wird in einer mehrstufigen Reaktion durch die Darmbakterien in Indol und Scatol (Methylindol) umgewandelt. Diese mehr oder weniger toxischen Abbauprodukte werden z.T. resorbiert und gelangen über die Pfortader zur Leber, wo sie durch Kopplung an Sulfat oder Glucuronat für die Nieren ausscheidungsfähig gemacht werden. Die aus Indol durch Kopplung an Schwefelsäure entstehende Indoxylschwefelsäure wird auch als Indican bezeichnet und kann relativ leicht in Serum bzw. Urin nachgewiesen werden, da sie zu Indigo oxidiert werden kann. Nimmt infolge chronischer Lebererkrankungen die Fähigkeit des Leberparenchyms zum Abbau bzw. zur Entgiftung toxischer Amine ab, so steigt deren Serumkonzentration an. Dies führt zu einer Funktionsstörung des Zentralnervensystems, die auch als hepatische Enzephalopathie bezeichnet wird. Ein ähnliches Krankheitsbild kann sich auch dann entwickeln, wenn zur Senkung des Drucks im Bereich der Pfortader ein Kurzschluss zwischen Pfortader und V. cava operativ oder radiologisch interventionell (TIPS: transjugulärer intrahepatischer portosystemischer stentshunt) angelegt wird und auf diese Weise ein Teil des Pfortaderbluts ohne Leberpassage direkt in den großen Kreislauf gelangt.

32.2.6

Pathobiochemie

! Störungen der Kohlenhydratverdauung und Resorption beruhen auf Defekten von Enzymen oder Transportern.

32.2.5

Schicksal der Nahrungsstoffe im Colon

Duodenum, Jejunum und in geringerem Umfang Ileum sind die Hauptorte der resorptiven Vorgänge. Hat der Speisebrei diese Darmabschnitte passiert, so hört die Resorption mit Ausnahme der oben besprochenen Wasser- und Elektrolytaufnahme auf. Die im Darminhalt noch vorhandenen Reste der Nahrungsstoffe werden durch die im Colon vorkommenden Bakterien zersetzt.

Eine Reihe von Störungen der Kohlenhydratverdauung und -resorption sind auf verminderte Aktivitäten bzw. vollständigen Mangel an Disaccharidasen zurückzuführen. Können Nahrungsdisaccharide nicht verdaut und damit auch nicht resorbiert werden, gelangen sie in tiefere Darmabschnitte. Dort lösen sie eine osmotische Diarrhoe und wegen der Fermentierung durch Darmbakterien Meteorismus aus. Man unterscheidet im Einzelnen zwischen primärem, sekundärem und relativem Disaccharidasenmangel.

1077 32.2 · Verdauung und Resorption einzelner Nahrungsbestandteile

Primärer Disaccharidasenmangel. Die häufigste Form des primären Disaccharidasenmangels ist der primäre Lactasemangel, der auch als Lactose-Intoleranz bezeichnet wird. Bei diesem Leiden kommt es zu einer genetisch fixierten Abnahme der zum Zeitpunkt der Geburt noch normalen Lactaseaktivität mit zunehmendem Lebensalter. Das Leiden, das gelegentlich familiär gehäuft vorkommt, bevorzugt bestimmte Rassen. Bei amerikanischen Schwarzen, Bewohnern des Vorderen Orients und der australischen Urbevölkerung tritt es wesentlich häufiger auf als bei Europäern. Das Krankheitsbild ist abzugrenzen von dem sehr seltenen kongenitalen Fehlen der enteralen Lactase des Säuglings. Die Behandlung des primären Lactasemangels besteht in der Vermeidung von Milch und Milchprodukten. Neben dem primären Lactasemangel kommt, wenn auch wesentlich seltener, ein primärer Saccharase-IsomaltaseMangel vor. Sekundärer Disaccharidasenmangel. Auch beim sekundä-

ren Disaccharidasenmangel überwiegt der Lactasemangel. Der sekundäre Lactasemangel ist eine Begleiterscheinung bei vielen gastrointestinalen Erkrankungen, beispielsweise bei der Gliadin-induzierten Sprue (7 u.), dem Kwashiorkor (7 Kap. 21.5.1) und dem M. Crohn (eine chronisch entzündliche Darmerkrankung) bei Dünndarmbefall. Er kann auch durch chemische Substanzen wie Colchicin und Neomycin, Chemotherapie bei malignen Erkrankungen oder durch Röntgenbestrahlung hervorgerufen werden. Relativer Disaccharidasenmangel. Der relative Disacchari-

dasenmangel ist durch ein Missverhältnis der in der Mukosa vorhandenen Disaccharidasen zu den mit der Nahrung zugeführten Disacchariden gekennzeichnet. Funktionell kann der relative Disaccharidasenmangel nach Magenresektion entstehen, wenn es zu einer zu raschen Entleerung des Chymus aus dem Restmagen kommt. Außerdem kann jede besonders disaccharidreiche Diät einen relativen Disaccharidasenmangel erzeugen. Grundsätzlich kommt es beim Erwachsenen mit der normalerweise auftretenden Verminderung der Zufuhr milchhaltiger Nahrungsmittel zu einem relativen Disaccharidasenmangel. Dieser ist i. Allg. reversibel, da die Disaccharidasen der Dünndarmmukosa durch Zufuhr ihres Substrats induziert werden. Glucose-Galactose-Malabsorption. Die Glucose-Galacto-

se-Malabsorption ist eine sehr seltene Erbkrankheit, die auf einem Defekt des luminalen Glucosetransporters SGLT1 beruht. Die Patienten können deswegen weder Glucose noch Galactose resorbieren. Da diese Zucker in die tieferen Darmabschnitte gelangen, lösen sie dort osmotische Diarrhoen aus und werden bakteriell abgebaut. Für die betroffenen Kinder ist dies eine lebensgefährliche Erkrankung, die lediglich dadurch behandelt werden kann, dass ihre Diät frei von Saccharose, Lactose, Glucose oder Galactose gehal-

ten wird. I. Allg. wird Fructose als Kohlenhydrat verwendet, da diese über den GLUT 5-Transporter resorbiert wird. ! Mangel an Gallensäuren geht mit Störungen der Fettresorption einher.

Eine Reihe von Pathomechanismen führen zu Störungen der Fettresorption, die sich i. Allg. am Auftreten von Fettstühlen (Steatorrhoe) erkennen lassen und deswegen besonders bedeutsam sind, weil sie mit Resorptionsstörungen essentieller lipophiler Verbindungen wie fettlöslicher Vitamine und essentieller Fettsäuren einhergehen. Häufig werden Fettresorptionsstörungen durch eine verminderte intestinale Gallensäurekonzentration ausgelöst, die durch Verlegung der ableitenden Gallenwege oder durch eine hepatische Störung der Gallensäuresynthese verursacht werden kann. Viel seltenere Ursachen sind Lipase- bzw. Colipasemangel bei Pankreasinsuffizienz oder als hereditäre Erkrankung. Ein durch massive Lipid-Einlagerungen in den Mukosazellen gekennzeichnetes Krankheitsbild findet sich schließlich bei der sehr seltenen hereditären A-β-Lipoproteinämie. Die betroffenen Patienten zeichnen sich dadurch aus, dass in ihrem Plasma keinerlei Lipoproteine mit Apolipoproteinen des Typs B nachweisbar sind. Eine genauere Untersuchung hat ergeben, dass sie zwar durchaus imstande sind, das ApolipoproteinB100 bzw. B48 zu synthetisieren, jedoch keinerlei TriacylglycerinTransfer-Proteine besitzen, da diese durch Mutationen ausgeschaltet sind. Triacylglycerin-Transfer-Proteine werden für die Verpackung von Triacylglycerinen in Chylomikronen-Vesikel benötigt. Dieser Befund weist auf die enorme Bedeutung des Lipidtransfers zwischen Membranen für die Biosynthese von Lipoproteinen hin. ! Die Sitosterolämie zeigt die Symptomatik einer familiären Hypercholesterinämie.

Wie in 7 Kap. 32.2.2 beschrieben, erfolgt die Aufnahme von Sterolen durch das NPC 1-like 1-Transportprotein, das allerdings nicht zwischen Cholesterin und pflanzlichen Sterolen unterscheiden kann. Unter normalen Umständen werden diese im vesikulären Kompartiment der Mukosazellen sortiert und durch die Lipidtransporter ABCG5 und ABCG8 wieder in das intestinale Lumen exportiert. Defekte dieser beiden Lipidtransporter lösen das Krankheitsbild der Sitosterolämie aus. Bei den Patienten findet man eine erhöhte Konzentration von pflanzlichen Sterolen in den Mukosazellen und im Blut. Die Betroffenen zeigen Xanthome und leiden unter verfrühter schwerer Arteriosklerose mit häufiger koronarer Herzerkrankung. ! Defekte von Proteinverdauung und Resorption haben verschiedenste Ursachen.

Die häufigsten Defekte der Proteinverdauung und Resorption finden sich bei der exkretorischen Pankreasinsuffizienz, bei einer Atrophie bzw. Funktionseinschränkung der

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1078

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

Dünndarmzotten (Sprue) sowie auch nach Dünndarmresektion. Nicht verdaute bzw. resorbierte Proteine gelangen dann in tiefere Darmabschnitte, wo sie bakteriell abgebaut werden, was häufig zur Bildung toxischer Produkte führt (7 Kap. 32.2.5). Seltenere Erkrankungen sind hereditäre Defekte proteolytischer Enzyme, z.B. des Trypsinogens oder der Enteropeptidase. Gendefekte von Aminosäuretransportsystemen sind 4 die Hartnup-Krankheit, die durch eine Aufnahmestörung neutraler Aminosäuren verursacht wird 4 die Cystinurie (7 Kap. 13.6.4) 4 die Methionin-Malabsorption und 4 die Prolin-Malabsorption

32

Die Bedeutung der Peptidspaltung innerhalb der Mukosazellen für Verdauung und Resorption lässt sich gut am Beispiel der Gliadin-induzierten Sprue zeigen (unter dem Begriff Sprue werden eine Reihe von Durchfallerkrankungen unterschiedlicher Genese zusammengefasst). Bei diesem Krankheitsbild findet sich eine allgemeine Störung der Verdauung und Resorption von Nahrungsstoffen infolge einer weitgehenden Atrophie der Dünndarmzotten mit entsprechenden Veränderungen des Dünndarmepithels. Diese im Kindesalter auch als Zöliakie bezeichnete Erkrankung ist eine Autoimmunerkrankung mit genetischen, immunologischen und Umweltkomponenten. Gliadine sind Peptide aus 6–7 Aminosäuren, die bei der Verdauung des Weizenproteins Gluten entstehen. Besonders nach Desamidierung von Glutaminresten durch eine enterale Transglutaminase 2 lösen Gliadine bei den Betroffenen eine komplexe zur oben beschriebenen Symptomatik führende Reaktion aus. Es ist bis jetzt noch nicht sicher bekannt, ob die Gliadine selbst auf das Dünndarmepithel toxisch wirken oder ob es sich um eine Autoimmunreaktion aufgrund von Kreuzreaktivität handelt. Gliadine werden auch in die Blutbahn aufgenommen und führen dort zur Bildung spezifischer Antikörper, die sich bei allen Patienten mit Sprue nachweisen lassen und die ihrerseits für die Schädigung des Dünndarmepithels verantwortlich sein könnten. Ferner finden sich im Serum Antikörper gegen Transglutaminase. Die Erkrankung ist assoziiert mit Genen die für die HLA Antigene DQ2 und DQ8 kodieren. ! Man unterscheidet osmotische und sekretorische Diarrhoen.

Weltweit sterben jährlich an akuten Diarrhoen mehrere Millionen Patienten, vor allem Kinder. Die meisten Fälle ereignen sich in Entwicklungsländern mit schlechten hygienischen Verhältnissen und einer unzureichenden ärztlichen Versorgung. Aber auch in industrialisierten Ländern mit entsprechender Infrastruktur sind akute oder chronische Durchfälle keinesfalls eine Seltenheit. Für die große Gruppe der akuten Durchfallerkrankungen ist folgende Einteilung üblich:

4 Osmotische Durchfälle und 4 Sekretorische Durchfälle Osmotische Durchfälle. Zu osmotischen Durchfällen kommt es immer dann, wenn nicht oder nur schlecht resorbierbare niedermolekulare wasserlösliche Verbindungen in die tieferen Darmabschnitte gelangen. Sie lösen dort aufgrund ihrer hohen osmotisch wirksamen Konzentration einen Transport von Wasser in das intestinale Lumen aus, dem Na+ und Cl–-Ionen nachfolgen. Eine Ursache für osmotische Durchfälle kann der Verzehr nicht oder schlecht resorbierbarer Zucker sein. Beispiel hierfür ist die Verwendung von Sorbitol oder Xylitol als Nahrungszusätze. Eine weitere Ursache osmotischer Durchfälle sind die oben geschilderten Defekte der enzymatischen Systeme, die für die Aufspaltung von Disacchariden oder die Resorption von Monosacchariden verantwortlich sind. Sekretorische Durchfälle. Sekretorische Durchfälle werden

durch eine gesteigerte Sekretion von Na+ und Cl- Ionen in das intestinale Lumen ausgelöst, denen passiv Wasser nachfolgt. Besonders gut untersucht ist dabei die durch den Choleraerreger Vibrio Cholerae ausgelöste Diarrhoe. Dieser produziert ein Enterotoxin, welches aus einer dimeren AUntereinheit und fünf identischen B-Untereinheiten besteht (7 Kap. 25.6.2). Die B-Untereinheiten sind für die Bindung des Choleratoxins an das Gangliosid GM 1 verantwortlich, das einen wesentlichen Bestandteil der intestinalen Bürstensaummembranen darstellt. Anschließend kann die A-Untereinheit aufgenommen werden, die nun die ADPRibosylierung (7 Kap. 23.3.4) des stimulierenden G-Proteins (Gs) der Adenylatcyclase auslöst. Hierdurch wird dieses konstitutiv aktiv und führt zu einer Dauerstimulierung der Adenylatcyclase. In den Mukosazellen des Intestinaltrakts löst dies über die Proteinkinase A eine Aktivierung des CFTR-Chloridkanals aus. Die Folge ist eine gesteigerte Sekretion von Chlorid und ihm folgend von Natriumionen und Wasser. Dieses pathogenetische Prinzip findet sich nicht nur beim Choleratoxin, sondern auch bei den Toxinen einer Reihe anderer Mikroorganismen sowie im Rahmen der IgE-vermittelten mukosalen Immunantwort (7 Kap. 32.3). Außerdem kommt es bei einem sehr seltenen endokrinen Tumor, dem Werner-Morrison-Syndrom vor. Dieser zeichnet sich durch eine vermehrte Sekretion von VIP (vasoaktives intestinales Peptid) aus.

1079 32.3 · Das Immunsystem des Intestinaltrakts

In Kürze Für die Resorption von Monosacchariden, Aminosäuren und Oligopeptiden stehen spezifische Transportmoleküle zur Verfügung, die den Na+- bzw. H+-abhängigen, sekundär aktiven Transport in die Mukosazelle ermöglichen. Auf der basolateralen Seite der Mukosazellen erfolgt anschließend die Abgabe der aufgenommenen Verbindungen in die extrazelluläre Flüssigkeit durch erleichterte Diffusion, ebenfalls mit Hilfe spezifischer Transportproteine. Acylglycerine werden durch Diffusion in die Mukosazellen aufgenommen, Sterole durch den Niemann Pick C 1 like 1-Transporter. Intrazellulär erfolgt eine Resynthese zu Triacylglycerinen und Cholesterinestern und dann die Verpackung mit dem Apolipoprotein B48 zu Chylomikronen. Anschließend werden diese von den Mukosazellen sezerniert und gelangen über die Lymphbahnen in den Blutkreislauf.

32.3

Das Immunsystem des Intestinaltrakts

Schon vor vielen Jahren ist das Konzept entwickelt worden, dass eine besonders wichtige Barriere gegen das Eindringen von Bakterien, Viren, Toxinen oder anderen Fremdstoffen im Intestinaltrakt lokalisiert sein muss. Diese wird durch das intestinale Immunsystem repräsentiert ! IgA- bzw. IgE-vermittelte Immunantworten haben eine besondere Bedeutung für das mukosale Immunsystem.

Die IgA-vermittelte intestinale Immunantwort. Immun-

globuline des Typs A (IgA, 7 Kap. 34.3.4) sind ein besonders wichtiger Bestandteil des intestinalen Immunsystems (. Abb. 32.21). Aktivierte B-Lymphozyten des Intestinaltrakts sammeln sich nach Differenzierung zu IgA-produzierenden Plasmazellen in der Lamina propria des Darms. Die von ihnen gebildeten IgA-Antikörper diffundieren durch die Basalmembran und assoziieren mit einem auf der basolateralen Seite der Epithelzellen gelegenen PolyImmunglobulinrezeptor (PIGR) (1). Dies löst die Internalisierung des Poly-Immunglobulin-Rezeptor-IgA-Komplexes aus, der dann in einem Transportvesikel an die apikale Oberfläche der Epithelzelle befördert wird (2). Während dieser Transzytose wird der Immunglobulinrezeptor enzymatisch gespalten (3), sein extrazellulärer Anteil bleibt jedoch mit dem IgA-Dimer verknüpft (4). Man nimmt an, dass diese sog. sekretorische Komponente das IgA-Molekül im Intestinaltrakt vor proteolytischer Spaltung schützt. IgA-Antikörper binden die unterschiedlichsten Antigene im Intestinaltrakt. Sie verhindern damit 4 die Aufnahme bakterieller Toxine 4 die Aufnahme von Viren sowie

Der Intestinaltrakt ist Ort großer Flüssigkeits- und Ionenbewegungen. Diese setzen sich aus Wasser und Elektrolyten der Nahrung sowie den meist Plasma-isotonen Sekreten der einzelnen Abschnitte des Intestinaltraktes zusammen und machen pro 24 Stunden etwa 8 l Flüssigkeit aus. Sowohl das Wasser als auch die Elektrolyte müssen im Intestinaltrakt zum größten Teil wieder reabsorbiert werden, um gravierende Flüssigkeits- und Elektrolytverluste zu verhindern. Durchfallerkrankungen sind häufig und nehmen oft, besonders bei Kindern einen schweren Verlauf. Man unterscheidet 5 osmotische Durchfälle, denen häufig Störungen der Verdauung oder Resorption von Nahrungsstoffen zugrunde liegen, und 5 sekretorische Durchfälle, die durch bakterielle Infekte oder chronisch entzündliche Darmerkrankungen ausgelöst werden

4 die Anheftung von Bakterien an Zelloberflächen, die für die Infektiosität gerade intestinaler Bakterien von großer Bedeutung ist IgE-vermittelte intestinale Immunantwort. Ein wichtiger Mechanismus des intestinalen Immunabwehrsystems beruht auf Immunglobulin E (IgE)-vermittelten Reaktionen. Hier spielen Mastzellen, die unterhalb der Epithelschicht lokalisiert sind, eine entscheidende Rolle (. Abb. 32.22). Durch die Freisetzung einer großen Zahl von Mediatorstoffen nach der Bindung entsprechender Antigene lösen sie eine heftige Entzündungsreaktion aus, deren Ziel die Eliminierung und gegebenenfalls Ausschwemmung des Antigens aus dem Intestinaltrakt ist. Ganz besonders effektiv ist die IgE-vermittelte mukosale Immunantwort bei der Bekämpfung von Parasiten.

. Abb. 32.21. Mechanismus der Transzytose von IgA durch intestinale Mukosazellen. IgA = Immunglobulin A; PIGR = Poly-IgG-Rezeptor; SC = sekretorische Komponente. (Einzelheiten 7 Text)

32

1080

Kapitel 32 · Gastrointestinaltrakt

Die von den aktivierten Mastzellen freigesetzten Mediatorstoffe sind im Wesentlichen 4 Prostaglandine 4 Leukotriene und 4 biogene Amine wie Serotonin und Histamin

. Abb. 32.22. Mechanismus der IgE-vermittelten Immunantwort im Intestinaltrakt. (Einzelheiten 7 Text)

An den Epithelzellen des Intestinaltrakts lösen diese Verbindungen eine Chlorid-, Na+- und Wassersekretion aus, gleichzeitig führen sie zur Kontraktion der glatten Muskulatur, was Durchfall oder Erbrechen und damit die Eliminierung des infektiösen Agens auslöst. Wie bei anderen IgE-vermittelten Immunreaktionen besteht auch bei der IgE-vermittelten mukosalen Immunantwort die Gefahr allergischer Reaktionen. Diese äußert sich z.B. in der bekannten Symptomatik der Nahrungsmittelallergien. Ein Sonderfall der Nahrungsmittelallergien ist die Gliadin-induzierte Enteropathie, die auf einer T-Zell-vermittelten Überempfindlichkeitsreaktion vom verzögerten Typ beruht (7 Kap. 32.2.7). Zum intestinalen Immunsystem gehört auch das zelluläre Immunsystem, d.h. die intraepithelialen T-Lymphozyten, die darmspezifisch sind (»homing«) und natürlich die T-Zell-vermittelte Immunität in den Lymphfollikeln der Darmwand.

In Kürze

32

Der Intestinaltrakt enthält zum Schutz des Organismus vor der großen Zahl dort vorhandener Antigene eine hoch effektive immunologische Barriere. Diese besteht aus: 5  Intraepithelialen Lymphozyten 5 Plasmazellen in der Lamina propria, die zur Produktion von IgA-Molekülen imstande sind sowie 5 unterhalb der Epithelschicht lokalisierten Mastzellen, die nach Stimulierung mit IgE Mediatorstoffe freisetzen

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IgA-Moleküle gelangen durch Transzytose in das Lumen des Intestinaltraktes. Sie binden und inaktivieren viele Antigene, z.B. Toxine, Viren, Bakterien. Die durch IgE vermittelte Freisetzung von Mediatorstoffen löst eine Wasser- und Elektrolytsekretion aus. Die damit verbundene Durchfallreaktion dient der Ausschwemmung vieler Antigene, Bakterien aber auch von Parasiten.

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32

33 33

Leber Dieter Häussinger, Georg Löffler

33.1

Die zellulären Bestandteile der Leber und ihre anatomischen Beziehungen – 1084

33.1.1 33.1.2

Zusammensetzung der Leber – 1084 Funktion und Aufbau der Leber – 1084

33.2

Funktionen der Leberparenchymzellen – 1086

33.2.1 33.2.2 33.2.3 33.2.4

Funktionen im Kohlenhydrat- und Lipidstoffwechsel – 1086 Funktionen im Protein- und Aminosäurestoffwechsel – 1087 Synthese spezifischer Proteine in der Leber – 1088 Die Leber als Speicherorgan – 1089

33.3

Biotransformation – 1090

33.3.1 33.3.2

Die Phasen der Biotransformation – 1090 Die metabolische Aktivierung durch das Biotransformationssystem – 1093

33.4

Die Leber als Ausscheidungsorgan – 1096

33.4.1 33.4.2

Die Bedeutung der Hepatozyten bei der Gallebildung – 1096 Die Funktion der Cholangiozyten bei der Gallebildung – 1098

33.5

Funktionen der Nichtparenchymzellen der Leber – 1098

33.6

Pathobiochemie – 1099

33.6.1 33.6.2

Leberzellschädigung – 1099 Gallensteine – 1101

Literatur

– 1102

1084

Kapitel 33 · Leber

> > Einleitung Die Leber ist eines der größten Organe des Organismus. Etwa 70% ihrer Zellmasse besteht aus Parenchymzellen, den verbleibenden Anteil bilden Gallengangsepithelien, Zellen des reticuloendothelialen Systems (Kupfferzellen), Sternzellen und Endothelzellen. In der Leber laufen die meisten der heute bekannten Reaktionen des Intermediärstoffwechsels ab. Die Kapazität der Leber zur Erfüllung ihrer vielfältigen Funktionen im Stoffwechsel ist außerordentlich groß. Dies geht allein aus der Tatsache hervor, dass erst ein Zustand, in dem mehr als 80% der Parenchymzellen zerstört sind, mit dem Leben nicht mehr vereinbar ist. Da die Leber über eine besondere Regenerationsfähigkeit verfügt, können akute und chronische Schädigungen von ihr relativ gut bewältigt werden.

33

33.1

Die zellulären Bestandteile der Leber und ihre anatomischen Beziehungen

33.1.1

Zusammensetzung der Leber

Nur etwa 60–70% der Zellmasse der Leber bestehen aus den eigentlichen Leberparenchymzellen oder Hepatozyten. Eine weitere Gruppe epithelialer Zellen sind die als Cholangiozyten bezeichneten Zellen der Gallengangsepithelien. Neben diesen enthält die Leber eine Reihe von nichtepithelialen Zelltypen. Diese befinden sich bevorzugt entlang der Sinusoide und stehen sowohl anatomisch als auch funktionell in enger Beziehung zu den Parenchymzellen (. Abb. 33.1). Im Einzelnen handelt es sich um: 4 Sinusoidale Endothelzellen. Sie sind ein erheblicher Teil der nichtepithelialen Zellen und bilden ein gefenstertes Endothel, wobei der Durchmesser der Fenster durch endogene oder exogene Substanzen, wahrscheinlich über die Beteiligung von Elementen des Cytoskeletts, beeinflusst werden kann 4 Kupfferzellen. Diese gehören zum reticuloendothelialen System, adhärieren an die Wand der Sinusoide, sind aber sehr wahrscheinlich beweglich 4 Sternzellen (Synonym Fettspeicherzellen, Ito-Zellen). Sie finden sich in engerer Assoziation an die Hepatozyten und entwickeln cytoplasmatische Extensionen, die ähnlich wie Perizyten um das Endothel der Sinusoide gewickelt sind 4 Pit-Zellen. So werden in der Leber große granuläre Lymphozyten bezeichnet, die zur Gruppe der KillerZellen gehören 4 Progenitor- oder Ovalzellen. Es handelt sich um Leberstammzellen, die im Bereich der Heringschen Kanäle lokalisiert sind und sich sowohl zu Hepatozyten als auch Cholangiozyten differenzieren können. Schwere Leberschädigungen stimulieren die Proliferation von Progenitorzellen, die dann zur Leberregeneration beitragen Ferner ist die Leber sympathisch und parasympathisch innerviert, wobei die meisten Nervenendigungen an Lebersternzellen zu finden sind. Efferente Lebernerven sind nicht nur an der Regulation des Leberstoffwechsels und des Blut-

flusses durch die Leber beteiligt, sondern auch an der Leberregeneration nach Schädigungen. Darüber hinaus existieren in der Leber afferente Nerven, welche Signale von Volumen- und Osmosensoren an das Zentralnervensystem weitergeben.

33.1.2

Funktion und Aufbau der Leber

Die Funktionen der Leber sind vielfältig: 4 Verwertung aufgenommener Nährstoffe 4 Aufrechterhaltung der Glucose-, Aminosäuren-, Ammoniak- und Hydrogencarbonathomöostase 4 Synthese der meisten Plasmaproteine 4 Gallensäurensynthese und Gallebildung 4 Bildung, Speicherung und Prozessierung von Signalmolekülen 4 Mitwirkung bei der Immunabwehr 4 Metabolisierung von Endobiotica und Xenobiotica 4 Blutspeicherung ! Durch ihre Stoffwechselleistungen ist die Leber für die Aufrechterhaltung des konstanten inneren Milieus der extrahepatischen Organe und Gewebe verantwortlich.

Die besondere Funktion der Leber im Intermediärstoffwechsel erklärt sich aus ihrer anatomischen Lage: 4 Sie nimmt während der Resorptionsphase die über den Intestinaltrakt resorbierten Nahrungsstoffe, Vitamine und Elektrolyte auf. Eine Ausnahme hiervon machen die Nahrungslipide, die über die Lymphbahnen des Intestinaltrakts gesammelt und über den Ductus thoracicus in den großen Kreislauf verteilt werden. Dementsprechend ist die Leber als einziges Organ daran angepasst, ein sowohl von der Quantität als auch von der Qualität her sehr variables Stoffangebot zu bewältigen. Die während der Resorptionsphase angefluteten Substrate werden von ihr zu einem beträchtlichen Teil gespeichert 4 In der postresorptiven oder Hungerphase ist sie dann imstande, die gespeicherten Substrate in den Blutkreislauf abzugeben und den anderen Organen und Geweben des Körpers zur Deckung des Energiebedarfes zur Verfügung zu stellen. In diesem Sinne trägt die Leber entscheidend zur Aufrechterhaltung eines konstanten

1085 33.1 · Die zellulären Bestandteile der Leber und ihre anatomischen Beziehungen

. Abb. 33.1. Hepatozyten und ihre anatomischen Beziehungen zu Nichtparenchymzellen und dem Dissé-Raum. A = Aktinfilamente; C = Gallecanaliculus; D = Dissé‘scher Raum; De = Desmosom; E = Endothelzelle, G = Golgi-Apparat; GER = glattes endoplasmatisches Retikulum; H = Hepatozyt; K = Kupffer-Zelle; Ly = Lysosomen; M = Mitochon-

drien; Mt = Mikrotubuli; Mv = Mikrovilli; N = Zellkern; Ne = Nexus; Nu = Nucleolus; P = Peroxisomen; R = Ribosomen; RER = raues endoplasmatisches Retikulum; S = Sternzellen; T = Tonofilamente; V = pericanaliculäre Vesikel; Za = Zona adhärens; Zo = Zonula occludens (tight junction)

inneren Milieus und damit zur Funktionsfähigkeit aller extrahepatischen Organe und Gewebe bei

tät des Glycogenabbaus, der Gluconeogenese, der Fettsäureoxidation, der Harnstoffbildung aus Aminosäurestickstoff sowie der Gallensäuren- und Bilirubinausscheidung aus. Dagegen stellen perivenöse (an der acinären Ausflussbahn gelegene) Hepatozyten den bevorzugten Ort der Glycogensynthese, der Glycolyse, Lipogenese, der Harnstoffbildung aus Ammoniak und der Biotransformation körpereigener und körperfremder Stoffe dar. Unmittelbar am perivenösen Ende des Leberacinus findet sich eine besonders spezialisierte, kleine Hepatozytenpopulation (Scavenger- oder Fängerzellen), welche als einzige Leberparenchymzellen das Enzym Glutaminsynthetase enthält. Ihre Aufgabe ist es u.a. mit hoher Affinität Ammoniak, aber auch viele innerhalb des Acinus freigesetzte und der interzellulären Kommunikation dienende Signalstoffe zu entfernen, bevor das sinusoidale Blut in die Lebervene und damit in die systemische Zirkulation gelangt.

! Die Leberparenchymzellen sind funktionell heterogen.

Der Leberacinus ist die funktionelle Grundeinheit der Leber. Er erstreckt sich vom terminalen Pfortaderast entlang des Sinusoids bis zum terminalen Lebervenenast; zu ihm gehören die das Sinusoid begrenzenden Parenchymund Nichtparenchymzellen der Leber. Während einer acinären Passage strömt das Blut an etwa 20–30 Parenchymzellen vorbei, die funktionell heterogen sind, d.h. unterschiedliche Genexpressionsmuster aufweisen. Eine Ursache für diese funktionelle Leberzellheterogenität sind Metabolit-, Sauerstoff- und Hormongradienten entlang des Leberacinus. Periportale (an der acinären Einflussbahn gelegene) Hepatozyten zeichnen sich durch höhere Aktivi-

33

1086

Kapitel 33 · Leber

In Kürze Die Leber enthält als unterschiedliche Zelltypen: 4 Leberparenchymzellen oder Hepatozyten (60–70% der Leberzellen), daneben 4 Cholangiozyten 4 Endothelzellen 4 Kupfferzellen 4 Sternzellen 4 Pit-Zellen 4 Leberstammzellen (Progenitor- oder Ovalzellen)

33.2

Funktionen der Leberparenchymzellen

33.2.1

Funktionen im Kohlenhydratund Lipidstoffwechsel

! Die Leber ist das zentrale Organ der Glucosehomöostase des Organismus.

Resorptionsphase. Das Pfortaderblut enthält in Abhängig-

keit vom Kohlenhydratgehalt der jeweiligen Nahrungsstoffe erhebliche Mengen an Glucose, aber auch Fructose und Galactose. Ein großer Teil dieser Monosaccharide wird entsprechend der bereits geschilderten Reaktionen (7 Kap. 11.2.1) nach Umwandlung zu Glycogen gespeichert.

33

Postresorptions-/Hungerphase. Die Leber ist für die Aufrechterhaltung der Blutglucosekonzentration verantwortlich: 4 Durch Glycogenolyse wird Glycogen mobilisiert und wegen der für die Leber typischen hohen Glucose-6Phosphatase-Aktivität (7 Kap. 11.4.2) zu Glucose abgebaut, die in die Lebervene abgegeben wird 4 Bei länger dauerndem Hunger genügen die in der Leber gespeicherten Glycogenvorräte nicht zur Deckung des Energiebedarfs der obligaten Glucoseverwerter, nämlich des zentralen Nervensystems, des Nierenmarks und der Erythrozyten. Unter diesen Bedingungen wird die Gluconeogenese aus Nichtkohlenhydraten aktiviert, auf welche die Leber dank ihrer enzymatischen Ausstattung besonders spezialisiert ist (7 Kap. 11.3). So müssen nach 24-stündigem Hunger etwa 180 g Glucose/Tag, nach mehrwöchigem Hungern immerhin noch 60 bis 90 g Glucose/Tag synthetisiert werden. Substrate für die Gluconeogenese, deren Reaktionssequenz in 7 Kap. 11.3 geschildert ist, sind durch Proteolyse in den extrahepatischen Geweben freigesetzte glucogene Aminosäuren (7 Kap. 13.4.3), im Fettgewebe durch Lipolyse freigesetztes Glycerin (7 Kap. 16.1.2, 21.3.3) sowie durch

Die funktionelle Grundeinheit der Leber ist der Acinus. Die ihm zugehörigen Hepatozyten sind funktionell heterogen, was durch die Gradienten von Metabolit-, Sauerstoffund Hormonkonzentrationen entlang des Acinus verursacht wird. Die wichtigsten Aufgaben der Leber sind: 4 Aufnahme und Speicherung von Nahrungsstoffen sowie deren Verarbeitung und Freisetzung 4 Synthese von Gallensäuren und Sekretion von Galle 4 Metabolisierung von Endo- und Xenobiotica 4 Synthese von Plasmaproteinen 4 Synthese von Signalmolekülen

Glycolyse entstandenes Lactat (7 Kap. 16.1.1, 21.3.3). Jede länger dauernde Hungerphase geht mit einer spezifischen Änderung der enzymatischen Ausstattung der Leberparenchymzellen einher. Diese ist dadurch gekennzeichnet, dass die für die Glycolyse benötigten Enzymaktivitäten reprimiert und diejenigen der Gluconeogenese und des Aminosäurestoffwechsels induziert werden. Für diese Umstellung sind neben den Katecholaminen v.a. die Glucocorticoide, beim Menschen also hauptsächlich das Cortisol, verantwortlich (7 Kap. 27.3.7). Zur Gluconeogenese befähigt sind außer der Leber auch die Nieren, die jedoch allein schon wegen ihrer geringeren Größe einen wesentlich kleineren Anteil übernehmen ! Die Leber ist das wichtigste Organ für den Ab-, Umund Aufbau der verschiedensten Lipide.

Resorptionsphase: Die wesentlichste Funktion der Leber

im Lipidstoffwechsel besteht in der Biosynthese von Triacylglycerinen, Phosphoglyceriden und Sphingolipiden aus den aufgenommenen Kohlenhydraten und Lipiden (7 Kap. 12.1.4, 18.1.1, 18.2.1) sowie der Biosynthese und Sekretion von VLDL-Lipoproteinen (7 Kap. 18.5.2). Die Leber ist schließlich für die Bereitstellung eines großen Teils des vom Organismus benötigten Cholesterins (7 Kap. 18.3.1) verantwortlich, wobei ihre Cholesterinbiosynthese u.a. vom Nahrungsangebot an Cholesterin abhängt. Postresorptions-/Hungerphase: Die Leber deckt ihren

Energiebedarf nahezu vollständig durch die Fettsäureoxidation. Sie nimmt in diesem Zustand jedoch mehr Fettsäuren auf als hierzu notwendig sind und wandelt diese in Acetacetat und β-Hydroxybutyrat, die sog. Ketonkörper, (7 Kap. 12.2.2) um. Diese werden von der Leber nicht verwertet, sondern vollständig zur Deckung des Substratbedarfs extrahepatischer Gewebe abgegeben. Außer Fettsäuren werden von der Leber LDL- und v.a. HDL-Lipoproteine und die in ihnen enthaltenen Lipide abgebaut (7 Kap. 18.5.2).

1087 33.2 · Funktionen der Leberparenchymzellen

. Abb. 33.2. Hepatische Glutaminsynthetase und Ammoniakeliminierung. CPS I = Carbamylphosphat-Synthetase I. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

33.2.2

Funktionen im Protein- und Aminosäurestoffwechsel

Leber über die Pfortader Aminosäuren in Abhängigkeit von dem Proteingehalt der Nahrung angeboten und durch ein breites Spektrum an Transportern aufgenommen. Sie dienen v.a. als Substrate der Proteinbiosynthese.

dann reduziert wird, wenn der pH und/oder die HCO3–Konzentration im extrazellulären Raum abfallen. Das dabei nicht fixierte Hydrogencarbonat dient dazu, die bestehende Azidose zu korrigieren. Natürlich führt jede Reduktion der Geschwindigkeit der Harnstoffbiosynthese relativ zur Geschwindigkeit des Proteinabbaus zu einem Anstieg der Ammoniakkonzentration. Dieser wird dadurch aufgefangen, dass in einer ATP-abhängigen Reaktion Ammoniak als Glutamin fixiert werden kann (. Abb. 33.2). Die hierfür notwendige Glutaminsynthetase ist ausschließlich in einer kleinen perive-

Postresorptions/Hungerphase: Die postresorptive und v.a. die Hungerphase ist durch eine gesteigerte Proteolyse in extrahepatischen Geweben gekennzeichnet. Die Leber nimmt die vermehrt freigesetzten Aminosäuren auf. Nach Transaminierung wird der Kohlenstoffanteil der ketogenen Aminosäuren in den Energiestoffwechsel eingeschleust, derjenige der glucogenen Aminosäuren jedoch für die in dieser Situation notwendige Gluconeogenese verwendet. Dabei frei werdende Aminogruppen werden ebenso wie der durch die verschiedenen Stoffwechselprozesse entstehende Ammoniak (7 Kap. 13.5.2) durch Umwandlung in Harnstoff entgiftet und danach über die Nieren ausgeschieden. Der ausschließlich in den Leberparenchymzellen lokalisierte Harnstoffzyklus dient nicht nur der Eliminierung von Ammoniak, sondern fixiert auch HCO3–. Damit spielt er eine wichtige Rolle für den Säurebasenhaushalt. Dass die Leber durch Regulation der Geschwindigkeit der Harnstoffbiosynthese in diesen eingreifen kann, geht aus der Beobachtung hervor, dass die Harnstoffbildung immer

. Abb. 33.3. Lokalisation der Glutaminsynthetase der Leber. Wie aus der immunhistochemischen Anfärbung hervorgeht, ist das schwarz angefärbte Enzym ausschließlich in einer kleinen Hepatozytenpopulation (sog. Scavenger-Zellen) um die Zentralvene lokalisiert

! Die Leber nimmt Aminosäuren sowohl in der Resorptions- als auch in der Hungerphase auf.

Resorptionsphase: In der Resorptionsphase werden der

33

1088

Kapitel 33 · Leber

nösen Zellpopulation des Leberacinus lokalisiert, die kaum mehr als zwei Zelllagen dick ist und auch als »ScavengerZellen« bezeichnet werden (. Abb. 33.3). Diese Zonierung des Glutaminstoffwechsels ermöglicht es, nur diejenige Menge von Ammoniak als Glutamin zu fixieren, die nicht in den weiter oberhalb gelegenen Teilen des Leberacinus durch Harnstoffbiosynthese gebunden worden ist. ! Die Leber besitzt eine sehr hohe Kapazität für den Proteinabbau.

Neben dem Proteinabbau im Proteasom spielt die autophagische Proteolyse in der Leber eine besondere Rolle, da durch diese ein vollständiger Proteinabbau auf die Stufe von Aminosäuren gewährleistet ist. Ihre Regulation ist komplex und hängt u.a. vom Hydratationszustand, d.h. dem Wassergehalt der Leberzelle ab. Dieser ist eine dynamische Größe, die von der Aktivität von Metabolit- und Ionentransportsystemen in der Plasmamembran mit entsprechendem Auf- oder Abbau osmotisch wirksamer Gradienten abhängt. Zur Zunahme der Leberzellhydratation kommt es z.B. durch die kumulative Aufnahme von Aminosäuren mittels sekundär aktiver, Na+-abhängiger Transportsysteme. Hierdurch werden sog. Osmosignalketten aktiviert, an denen die mitogenaktivierten Proteinkinasen (7 Kap. 25.4.3) beteiligt sind. Sie lösen eine Hemmung des Proteinabbaus auf der Ebene der Autophagosomenbildung, der Glycogenolyse und eine Aktivierung der Glycogensynthese aus (. Abb. 33.4). Einen ähnlichen Effekt hat Insulin durch

33

. Abb. 33.4. Regulation von autophagischer Proteolyse und Proteinbiosynthese. Die Na+-abhängige Aufnahme von Aminosäuren geht mit einer zellulären Hydratationsteigerung einher, die zusammen mit den Aminosäuren die autophagische Proteolyse hemmt und die Proteinbiosynthese stimuliert

zelluläre Akkumulation von K+, Na+ und Cl–, während Glucagon durch Export dieser Ionen entgegengesetzt wirkt.

33.2.3

Synthese spezifischer Proteine in der Leber

! Die Leber synthetisiert den größten Teil der Plasmaproteine.

Die Leber hat eine besonders hohe Kapazität zur Biosynthese der verschiedensten Proteine. So werden eine große Zahl von im Blutplasma vorkommenden Proteinen mit unterschiedlichsten Funktionen, unter ihnen auch Hormone, Prohormone und Lipoproteine, in den Parenchymzellen der Leber synthetisiert (. Tabelle 33.1). Hierzu gehören der größte Teil der Blutgerinnungsfaktoren, die Proteine der Fibrinolyse sowie Proteinaseinhibitoren wie das α1-Antitrypsin und das α2-Makroglobulin. Die Leber synthetisiert außerdem Transportproteine wie Transferrin, Transcortin oder Caeruloplasmin. Von besonderer Bedeutung ist die Biosynthese von Prohormonen wie des Angiotensinogens (7 Kap. 28.1.10) oder des Kininogens.

. Tabelle 33.1. Produktion für den Organismus wichtiger Verbindungen durch die Leber (Auswahl) Proteine

siehe

Albumin

Kap. 29.6.3

Angiotensinogen

Kap. 28.1.10

D-Fetoprotein

Kap. 35.10

Orosomucoid

Kap. 29.6.3

D1-Antitrypsin

Kap. 29.6.3

D1-Antichymotrypsin

Kap. 29.6.3

D2-Makroglobulin

Kap. 29.6.3

Antithrombin III

Kap. 29.5.3

Caeruloplasmin

Kap. 22.2.1

Gerinnungsfaktoren I, II, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII

Kap. 29.5.2

IGF-1; IGF-2

Kap. 27.7.2

Kininogen

Kap. 33.2.3

Komplementsystem

Kap. 34.4

C-reaktives Protein

Kap. 29.3.1, 29.6.4

Fibrinogen

Kap. 29.5.3

Plasminogen

Kap. 29.5.3

Transcortin

Kap. 27.3.4

Transferrin

Kap. 22.2.1

VLDL

Kap. 18.5.1

Nascierende HDL

Kap. 18.5.1

1089 33.2 · Funktionen der Leberparenchymzellen

. Tabelle 33.2. Akutphase-Proteine (Auswahl) Gruppe

Protein

Funktion

Gerinnungsfaktoren

Prothrombin Fibrinogen

Blutgerinnung, Hemmung der Ausbreitung der Entzündung, Reparatur

Komplementsystem

Komponenten C1–C9

Opsonierung

Kallikrein-Kinin-System

Präkallikrein

Vasodilatation, Gefäßpermeabilität

Proteinaseinhibitoren

D1-Antitrypsin D1-Antichymotrypsin

Antiproteolyse

Opsonine

C-reaktives Protein

Opsonierung

Transportproteine

Caeruloplasmin

Kupfertransport

Eine weitere wichtige Funktion der Hepatozyten beruht darauf, dass sie die sog. Akutphase-Proteine (. Tabelle 33.2) synthetisieren und ans Blut abgeben können (7 Kap. 29.6.4). Den genannten Proteinen ist gemeinsam, dass ihre Konzentration innerhalb von 6–48 Stunden nach dem Auftreten einer lokalen Entzündungsreaktion im Organismus um das zwei- bis 1000-fache zunimmt. Sinn dieser Reaktion ist, die Entzündung zu lokalisieren, ihre Ausbreitung zu verhindern. So erleichtert natürlich ein Anstieg der Fibrinogenkonzentration die Thrombusbildung und erschwert so die Ausbreitung eines Infektes. Die Proteinaseinhibitoren der akuten Phase, z.B. α1-Antitrypsin und α1-Antichymotrypsin, vermindern die durch freigesetzte Proteasen ausgelösten Gewebsschädigungen. Für andere Proteine des Akutphase-Systems ist die Funktion noch nicht so gut charakterisiert. Man nimmt beispielsweise an, dass das C-reaktive Protein an die Oberfläche von Fremdkörpern bindet und auf diese Weise ihre Aufnahme durch Phagozyten ermöglicht. Alle bekannten Akutphase-Proteine werden von den Parenchymzellen der Leber synthetisiert (. Abb. 33.5). Der adäquate Reiz hierfür sind die Interleukine IL-6 und IL-1, die von Makrophagen, Endothelzellen und Fibroblasten in

den durch die Entzündung geschädigten Gewebsteilen freigesetzt werden. Sie gelangen auf dem Blutweg zur Leber, werden dort durch entsprechende Rezeptoren (7 Kap. 25) gebunden und lösen danach die Biosynthese und Sekretion der Akutphase-Proteine aus. Im Allgemeinen ist dazu jedoch zusätzlich die Anwesenheit von Glucocorticoiden erforderlich. Die Leber nimmt aber auch Proteine aus dem Blutplasma auf und führt sie dem lysosomalen Abbau zu. Dies trifft besonders auf Glycoproteine zu, die über den Asialoglycoprotein-Rezeptor (7 Kap. 17.3.4) gebunden und internalisiert werden.

33.2.4

Die Leber als Speicherorgan

! Leberparenchymzellen speichern Substrate, Vitamine und Metalle und sind an der Prozessierung von Hormonen beteiligt.

In der Leber werden nicht nur Kohlenhydrate in Form von Glycogen und in beschränktem Umfang Lipide als Triacylglycerine gespeichert, sondern auch einige Vitamine und Spurenelemente. Neben Retinoiden, die ausschließlich in den Sternzellen gespeichert werden (7 u.), enthält die Leber beträchtliche Mengen wasserlöslicher Vitamine (. Tabelle 33.3), beson-

. Tabelle 33.3. Speicherung von wasserlöslichen Vitaminen in der Leber Vitamin

Gehalt der Leber (mg/Leber

Thiamin

1,5

4,4

Riboflavin

1,5

32,0

Nicotinsäure

. Abb. 33.5. Auslösung der Sekretion von Akutphase-Proteinen

Empfohlene Zufuhr (mg/Tag)

17,0

120,0

Pyridoxin

1,8

5,5

B12

0,002

Folsäure

0,2

1,0 20,0

Biotin

0,1

1,4

Pantothensäure

7,0

90,0

60,0

250,0

Ascorbat

33

1090

Kapitel 33 · Leber

ders Folsäure und Vitamin B12. Diese Tatsache ist für die Pathophysiologie von Vitaminmangelzuständen von großer Bedeutung. So deckt beispielsweise das in der menschlichen Leber gespeicherte Vitamin B12 den Bedarf für mehrere hundert Tage. Vitamin D wird in der Leber in Position 25, in der Niere dagegen in Position 1 hydroxyliert. Damit ist die Leber an der Umwandlung von Vitamin D in das biologisch aktive

1,25-Dihydroxycholecalciferol (Calcitriol) beteiligt. Auch die Umwandlung von Thyroxin (T4) in das biologisch weit aktivere Trijodthyronin (T3) erfolgt hauptsächlich in der Leber. Etwa 30% des Körperbestands an T3 und T4 sind in der Leber gespeichert. Die Leber speichert darüber hinaus das etwa 10–15fache der täglichen Kupferzufuhr und 10% des im Organismus vorhandenen Eisens (7 Kap. 22.2.1).

In Kürze Die metabolischen Aktivitäten der Leber sind überwiegend in den Hepatozyten lokalisiert: 4 Kohlenhydratstoffwechsel: Die Leber ist das wichtigste Glycogenspeicherorgan des Organismus. Da sie darüber hinaus über die Fähigkeit zur Gluconeogenese verfügt, spielt sie eine zentrale Rolle im Rahmen der Glucosehomöostase 4 Lipidstoffwechsel: Die Leber synthetisiert aus Lipiden und Kohlenhydraten Triacylglycerin-reiche Lipoproteine, die VLDL. Diese werden von ihr sezerniert und in den extrahepatischen Geweben metabolisiert. In der postresorptiven und erst recht der Hungerphase nimmt die Leber aus dem Blut große Mengen an Fettsäuren auf, die jedoch nur z.T. zur Deckung des

33.3

Biotransformation

! Die Biotransformation dient der Ausscheidung lipophiler Verbindungen.

33

Die Funktion der Biotransformationsreaktionen besteht darin, apolare, lipophile und damit nicht oder nur außerordentlich langsam ausscheidungsfähige Verbindungen in polare, wasserlösliche Substanzen umzuwandeln, die dann leicht über den Harn oder die Gallenflüssigkeit ausgeschieden werden können. Derartige Verbindungen können körpereigene, endogen entstandene Stoffe, sog. Endobiotica oder auch körperfremde Substanzen, die sog. Xenobiotica sein. Zu den ersteren gehören beispielsweise die schlecht wasserlöslichen Steroidhormone oder Stoffwechselendprodukte wie das Bilirubin. Die Zahl der Xenobiotica nimmt mit der ständigen Entwicklung chemisch-technischer Verfahren rasant zu. Zu ihnen gehören beispielsweise Pharmaka, aber auch Konservierungsmittel, Geschmacksmittel und eine Vielzahl synthetischer organischer Verbindungen, die z.T. als Abfallprodukte in die Umwelt gelangen und diese erheblich belasten. Biotransformationsreaktionen finden in beschränktem Umfang in nahezu allen Geweben statt. Die Leber ist jedoch nicht nur wegen ihrer Masse von ca. 1.5 kg beim Menschen, sondern auch wegen ihrer besonders reichen Ausstattung mit den Enzymen der Biotransformationsreaktionen das wichtigste Organ für diese Funktion. Der

Energiebedarfes herangezogen werden, z.T. dagegen in Acetacetat und β-Hydroxybutyrat umgewandelt und wieder von der Leber abgegeben werden 4 Proteinbiosynthese und Aminosäurestoffwechsel: Eine große Zahl von Proteinen des Blutplasmas werden in der Leber synthetisiert und von ihr sezerniert. Für die Eliminierung von Ammoniak und Aminogruppen spielt die Leber infolge ihrer Fähigkeit zur Harnstoff- und Glutaminbiosynthese eine besondere Rolle 4 Neben diesen metabolischen Funktionen ist die Leber ein wichtiges Speicherorgan für Vitamine und Spurenelemente

größte Teil der für die Biotransformation benötigten Enzymaktivitäten ist im glatten endoplasmatischen Retikulum lokalisiert.

33.3.1

Die Phasen der Biotransformation

Üblicherweise wird die Biotransformation in zwei oder drei Phasen eingeteilt (. Abb. 33.6): 4 Phase 1: Modifikation der infrage kommenden Verbindungen durch oxidative, seltener durch reduktive Reaktionen sodass reaktive Gruppen entstehen 4 Phase 2: Bildung von Konjugaten durch Reaktion dieser reaktiven Gruppen mit polaren oder stark geladenen Verbindungen, sodass die dabei entstehenden gut wasserlöslichen Produkte ausgeschieden werden können. Hierfür steht hauptsächlich die Gallenflüssigkeit zur Verfügung, in der tatsächlich ein großer Teil der durch die Biotransformation entstandenen Verbindungen erscheint. Eine Alternative ist die Abgabe ans Blut und die daran anschließende Ausscheidung über die Nieren 4 Phase 3: Transport der auszuscheidenden Verbindungen durch die Plasmamembran der Hepatozyten. Die hierfür benötigten Transportproteine bilden eine eigene Familie, die durch sie katalysierten Transportvorgänge werden gelegentlich auch als Phase3 der Biotransformation bezeichnet

1091 33.3 · Biotransformation

. Abb. 33.6. Mehrstufige Metabolisierung hydrophober, apolarer Verbindungen in der Leber. (Einzelheiten 7 Text)

. Abb. 33.7. Durch Cytochrom P450-Monooxigenasen katalysierte Reaktionen. a Hydroxylierung, b Dealkylierung, c N-Dealkylierung hydrophober Verbindungen

! In der Phase 1 der Biotransformation erfolgen oxidative bzw. reduktive Umwandlungen.

Den größten Beitrag zur Phase 1 der Biotransformation leisten Enzyme aus der Familie der Monooxygenasen, die molekularen Sauerstoff und NADPH als Cosubstrate benutzen. Die Aktivierung des Sauerstoffs erfolgt durch Anlagerung an das Cytochrom P450. Ein Sauerstoffatom wird dabei in das Substratmolekül eingebaut, das andere zu Wasser reduziert (7 Kap. 15.2.2). Auf diese Weise wird hydroxyliert oder O- bzw. N-dealkyliert (. Abb. 33.7). Weitere wichtige oxidative Reaktionen stellen die oxidative Desaminierung (7 Kap. 13.3.3) unter Bildung einer Ketogruppe und Freisetzung von Ammoniak sowie die oxidative Abspaltung der Seitenkette des Cholesterins unter Bildung der Carboxylgruppe der Gallensäuren dar (7 Kap. 32.1.4). Seltener sind reduktive Modifikationen wie z.B. die Umwandlung einer NO2-Gruppe in eine NH2-Gruppe. Unspezifische Hydrolasen spalten Ester- bzw. SäureamidBindungen und setzen die entsprechenden Alkohole, Amino- und Carbonsäuren frei. Durch die geschilderten chemischen Modifikationen der betreffenden Verbindungen werden also reaktive Gruppen wie OH-, NH2-, SH- bzw. COOH-Gruppen gebildet.

4 Durch Kopplung mit Glucuronsäure entstehen so die Glucuronide (7 Kap. 17.1.2). Die Konjugation mit UDPGlucuronat kann dabei mit OH-Gruppen, primären und sekundären Aminen sowie mit Carboxylgruppen erfolgen. Ein wichtiges Beispiel für diesen Reaktionstyp ist die Glucuronidierung von Bilirubin zu Bilirubindiglucuronid (7 Kap. 20.3.1) 4 Sulfatiert werden i. Allg. OH-Gruppen sowie Aminogruppen. Substrat hierfür ist das aktivierte Sulfat oder 3c-Phosphoadenosin-5c-Phosphosulfat (PAPS, 7 Kap. 4.2.1). Östrogene werden beispielsweise meist erst nach Sulfatierung als Sulfate ausgeschieden 4 Neben der Sulfatierung kommt auch die Acetylierung mit Acetyl-CoA vor. Eine weitere Möglichkeit ist die Kopplung von Carboxylgruppen an die Aminosäuren Glycin, Taurin bzw. Glutamin, wobei eine Säureamidgruppierung entsteht. Die die Kopplung eingehende Carboxylgruppe muss dafür allerdings zunächst in das entsprechende Coenzym-A-Derivat umgewandelt werden. Beispiele hierfür sind die verschiedenen Derivate von Gallensäuren (7 Kap. 32.1.4) 4 Weitere Konjugationsreaktionen sind Methylierung, die Deacetylierung sowie die Ausbildung von Thioethern, wobei meist Glutathion-S-Derivate entstehen

! Die Produkte der Phase1 der Biotransformation werden in Phase 2 mit polaren Substanzen konjugiert.

! Viele Verbindungen induzieren das Biotransformationssystem.

Die Phase 2 der Biotransformation wird auch als Konjugationsphase bezeichnet. In ihr werden die in der Phase1 der Biotransformation entstandenen Verbindungen über ihre reaktiven Gruppen an polare Substanzen gekoppelt, wodurch sie sich in ausreichend hydrophile Verbindungen umwandeln (. Abb. 33.8).

Es ist schon lange bekannt, dass Verbindungen, die im Biotransformationssystem modifiziert werden, die einzelnen Enzymaktivitäten der Phasen 1 und 2 induzieren können. Die zugrunde liegenden Mechanismen sind allerdings erst in den letzten Jahren aufgeklärt worden (. Abb. 33.9). Endobiotica und v.a. Xenobiotica sind nämlich Liganden einer

33

1092

Kapitel 33 · Leber

COO–

COO– O

R

OH

+

O

OH

UDP

HO

O

OH

R

NH

+ UDP

OH

UDP

HO

HO

OH

OH

COO–

COO– O

COO– +

UDP

COO– O

R

+ OH

COO– NH2 +

R

HO

OH

R

O

OH

O O

OH

O C

R + UDP

OH

UDP

HO

HO

OH

OH

a

R

OH + PAPS

R

O SO–3 + PAMP

R

NH2 + PAPS

R

NH

R

COO– + ATP + CoA

SO–3 + PAMP

b O

R

SH

C S

O

c

R

C SCoA + H3N

CoA + AMP + PPi O

+

CH2 COO

–

R

C NH CH2 COO– + CoA

SH

. Abb. 33.8. Die wichtigsten Konjugationsreaktionen. a Glucuronidierung von Hydroxylgruppen, primären Aminen und Carboxylgruppen. b Sulfatierung von Hydroxylgruppen oder primären Aminen mit PAPS (3`-Phospho-adenosin-5`-phosphosulfat); Kopplung von

Carboxylgruppen an Aminosäuren. Für die Knüpfung der Amidbindung muss die Carboxylgruppe ATP-abhängig in den CoA-Thioester umgewandelt werden. c Konjugation mit Glycin

Familie von Transkriptionsfaktoren, die strukturell große Ähnlichkeit mit den Steroidhormonrezeptoren haben: 4 Der konstitutive Androstanrezeptor CAR sowie der Pregnan-X-Rezeptor PXR binden eine Vielzahl verschiedenster Xenobiotica und wirken dann als ligandenaktivierte Transkriptionsfaktoren der entsprechenden Gene. Eine Voraussetzung für ihre Wirksamkeit ist allerdings die Heterodimerisierung mit dem RetinoatX-Rezeptor 4 Für die karzinogene Wirkung von polyzyklischen Kohlenwasserstoffen ist der Arylhydrocarbonrezeptor AHR verantwortlich, ebenfalls ein ligandenaktivierter Transkriptionsfaktor. Dieser ist nur als Heterodimer aktiv, allerdings benötigt er den Transkriptionsfaktor ARNT (ARH nuclear translocator), der auch für den Hypoxie-induzierten Faktor HIF (7 Kap. 28.1.10) eine wichtige Rolle spielt

Zur Konkurrenz um die Enzyme des Biotransformationssystems kann es kommen, wenn mehrere Arzneimittel gleichzeitig gegeben werden. Als Folge zeigen sich dann gegebenenfalls Überdosierungen. Bei Neugeborenen sind die betreffenden Enzymaktivitäten i. Allg. außerordentlich niedrig. Dies betrifft v.a. die Konjugationsreaktionen und hier die Glucuronyltransferasen. So beruht der bei ihnen gelegentlich zu beobachtende schwere Icterus Neonatorum auf einer noch ungenügenden Glucuronidierung des durch den physiologischerweise gesteigerten Erythrozytenabbau entstehenden Bilirubins (7 Kap. 20.4.2). Außerdem reagieren Neugeborene gegen eine Reihe von Arzneimitteln ganz besonders empfindlich.

33

1093 33.3 · Biotransformation

. Abb. 33.9. Induktion der Metabolisierungsenzyme durch Xenobiotica. Hydrophobe Xenobiotica oder andere Aktivatoren binden entweder direkt im Zellkern an den PXR oder im Cytosol an den CAR, der anschließend mit Hilfe von weiteren Proteinfaktoren in den Zellkern verlagert wird. Dort erfolgt in beiden Fällen die Heterodimerisierung mit RXR und die Transkriptionsaktivierung.

33.3.2

Die metabolische Aktivierung durch das Biotransformationssystem

! Durch metabolische Aktivierung können toxische Produkte entstehen.

Gelegentlich entstehen erst durch die Biotransformationsreaktionen Verbindungen mit biologischer Wirkung. Dies kann bei Arzneimitteln ein gewünschter Effekt sein, häufiger treten jedoch toxische, oft karzinogene Verbindungen auf. Derartige reaktive Metabolite können auf jeder Stufe der Biotransformation entstehen. Dieser auch als Giftung bezeichnete Prozess benötigt gelegentlich auch mehrere Umwandlungsschritte. Tierexperimentelle Untersuchungen über den Stoffwechsel eines Arzneimittels lassen häufig nur eine beschränkte Aussage über die entsprechende Umwandlung beim Menschen zu, da große Speziesunterschiede im Metabolisierungsmuster bestehen. Darüber hinaus können bei wiederholter Applikation durch Induktion weiterer biotransformierender Enzyme innerhalb derselben Spezies andere Metabolite entstehen und zahlreiche genetisch determinierte Polymorphismen von arzneimittelmetabolisierenden Enzymen sind bekannt. Dies begründet interindividuelle Unterschiede hinsichtlich Arzneimittel-

Für polyzyklische Kohlenwasserstoffe wird der Transkriptionsfaktor AHR verwendet, der allerdings mit ARNT heterodimerisieren muss. PXR = Pregnan-X-Rezeptor; CAR = konstitutiver Androstanrezeptor; RXR = Retinoat-X-Rezeptor; AHR = Aryl-Hydrocarbon Rezeptor; ARNT = AHR nuclear translocator

verträglichkeit und -wirksamkeit und bildet die Grundlage für das Forschungsgebiet Pharmakogenetik. Es ist auch wahrscheinlich, dass Polymorphismen in fremdstoffabbauenden Enzymen an der genetischen Veranlagung zur Tumorentstehung beteiligt sind. Von besonderem Interesse sind metabolische Aktivierungen bei Arzneimitteln, was im Folgenden an zwei Beispielen dargestellt werden soll. Paracetamol ist ein Acetanilid, das als mildes Analgetikum wirkt. Der größte Teil dieser Verbindung wird nach Glucuronidierung bzw. Sulfatierung wasserlöslich und damit ausscheidungsfähig. Ein Teil des Paracetamols wird jedoch oxidiert, sodass das in . Abb. 33.10 dargestellte Zwischenprodukt entsteht. Dieses wird als Glutathion-S-Konjugat ausgeschieden. Es kommt jedoch gelegentlich zu Zuständen, bei denen durch konkurrierende Reaktionen die für diese Reaktion benötigte Glutathionmenge nicht zur Verfügung steht. In diesem Fall reagiert das Produkt mit SH-Gruppen auf Hepatozytenproteinen, die damit inaktiviert werden. Bei Überdosierung von Paracetamol lässt sich auf diese Weise eine lebensbedrohliche Lebernekrose auslösen. Häufig werden im Verlauf von Biotransformationsreaktionen Arzneimittel acetyliert. Bei Menschen können als genetische Varianten ein langsamer und ein schneller

33

1094

Kapitel 33 · Leber

. Abb. 33.10. Der Paracetamolstoffwechsel. Der zu toxischen Nebenprodukten führende Abbauweg des Paracetamol ist (rot) hervorgehoben. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

33

Acetylierungstyp unterschieden werden. Diese Tatsache ist für den Stoffwechsel einer Reihe von Medikamenten von großer Bedeutung. Schnelle Acetylierer zeigen häufig gegenüber langsamen Acetylierern unterschiedliche Metabolisierungsmuster. Bei einer Reihe von Arzneimitteln hat dies wesentliche Konsequenzen. Procainamid (. Abb. 33.11) ist ein zur Therapie von Herzrhythmusstörungen benutztes Arzneimittel. Der normale Abbau der Verbindung beginnt durch eine N-Acetylierung, wobei das entstehende Produkt die gleichen pharmakologischen Wirkungen wie die Ausgangsverbindung zeigt. Bei Personen mit langsamem Acetylierungstyp findet dagegen bevorzugt eine N-Hydroxylierung statt. N-Hydroxyprocainamid bildet jedoch eine Reihe weiterer reaktionsfähiger Zwischenprodukte, die mit zellulären Makromolekülen, z.B. mit Nukleinsäuren, covalente Verbindungen eingehen können. Diese wirken offensichtlich als Antigene. Jedenfalls erkranken Personen vom langsamen Acetylierungstyp nach Behandlung mit Procainamid in statistisch signifikant höherem Maß an systemischem Lupus erythematodes, einem mit Autoantikörpern gegen DNA einhergehenden Krankheitsbild. Das in . Abb. 33.12 dargestellte Aflatoxin ist ein Sekundärmetabolit verschiedener Schimmelpilze. Es wird nach

. Abb. 33.11. Metabolisierungsprodukte von Procainamid. (Einzelheiten 7 Text)

Aufnahme in die Hepatozyten oxidativ in ein sehr reaktionsfähiges Epoxid umgewandelt, anschließend als Gluthation-S-Konjugat löslich gemacht und durch entsprechende Transportsysteme ausgeschieden. Wegen seiner hohen Reaktionsfähigkeit ist das Epoxid imstande, mit DNA Addukte zu bilden, die mutagen und damit karzinogen sind.

1095 33.3 · Biotransformation

. Abb. 33.12. Eliminierungsreaktionen von Aflatoxin. Die reaktive Gruppe des Zwischenprodukts ist rot hervorgehoben. (Einzel-

heiten 7 Text) MRP2 = multidrug resistance related protein (organischer Anionentransporter, grün)

In Kürze Die Leber ist das Hauptorgan des in drei Phasen ablaufenden Biotransformationssystems: 4 In Phase 1 werden meist hydrophobe Endo- bzw. Xenobiotica hydroxyliert, alternativ oxidativ oder seltener reduktiv modifiziert 4 In Phase 2 unterliegen die durch die Reaktionen der Phase 1 entstandenen funktionellen Gruppen der Kopplung an hydrophile Verbindungen, häufig Glucuronat

4 In Phase 3 werden die so entstandenen Verbindungen durch spezifische Transportsysteme in die Galle oder die Blutbahn exportiert Gelegentlich entstehen durch die Reaktionen des Biotransformationssystems biologisch aktive Verbindungen, was für den Stoffwechsel von Arzneimitteln oder Umweltgiften von Bedeutung ist.

33

1096

Kapitel 33 · Leber

33.4

Die Leber als Ausscheidungsorgan

Durch Gallebildung ist die Leber ein wichtiges Ausscheidungsorgan. Diese erfolgt durch gerichtete Sekretion gallenpflichtiger Substanzen in die Gallencanaliculi, welche von benachbarten Hepatozyten gebildet werden und durch tight junctions abgedichtet sind. Die Gallencanaliculi vereinigen sich zu immer größeren Gallengängen bis letztendlich die Galle über den Ductus choledochus in den Darm abfließt. Während der Gallenwegspassage wird die Zusammensetzung der von den Hepatozyten gebildeten Primär- oder Lebergalle durch Gallengangsepithelzellen (Cholangiozyten) weiter modifiziert. Beim Menschen werden täglich 600–700 ml Galle in den Darm sezerniert, deren Hauptbestandteile Gallensäuren, Phospholipide und Cholesterin sind (7 Kap. 32.1.4). Daneben enthält die Galle Proteine, Elektrolyte, und Konjugate von Xenobiotica sowie von endogen gebildeten Abfallstoffen (z.B. Bilirubinglucuronide). Die mit der Galle in den Darm ausgeschiedenen und für Fettverdauung und -resorption wichtigen Gallensäuren werden im unteren Dünndarm großteils rückresorbiert und gelangen über das Pfortaderblut wieder zur Leber, um erneut in die Galle ausgeschieden zu werden (sog. enterohepatischer Kreislauf).

33.4.1

Die Bedeutung der Hepatozyten bei der Gallebildung

! Die Gallebildung ist ein osmotischer, durch transzellulären Transport getriebener Prozess.

33

Gallebildung. Der Hepatozyt ist eine polarisierte epithelia-

le Zelle, bei der die basolaterale (sinusoidale, der Blutseite zugewandte) Zellmembran von der apicalen (canaliculären) Membran, die den Gallecanaliculus begrenzt, zu unterscheiden ist. Beide Membranabschnitte sind an der Gallebildung beteiligt, indem Fremdstoffe, aber auch endogene Metabolite über die sinusoidale Membran des Hepatozyten aufgenommen und nach Prozessierung im Zellinnern (z.B. durch Konjugationsreaktionen) über die canaliculäre Membran in den Gallecanaliculus ausgeschieden werden. Auf diese Weise entsteht ein transzellulärer, vom Sinusoidallumen in den Gallecanaliculus gerichteter Transport (. Abb. 33.13). Da viele der beteiligten Carrier einen primär oder sekundär aktiven Transport katalysieren, kommt es zu einer Substratkonzentrierung in der Gallenkapillare mit Aufbau eines osmotisch wirksamen Gradienten. Dieser ist für das passive Nachströmen von Wasser und Elektrolyten aus dem Parazellulärraum verantwortlich. Gallensäuren haben einen großen Anteil an diesem Substratgradienten, weswegen man auch von einer gallen-

säureabhängigen Gallesekretion spricht. Sie macht 30– 60% der basalen Sekretion aus, kann aber bei Nahrungsresorption aufgrund des damit verbundenen enterohepatischen Kreislaufs von Gallensäuren erheblich zunehmen. Die gallensäureunabhängige Gallesekretion wird teils durch den Transport von Glucuronsäure- und Glutathionkonjugaten, teils auch durch eine Sekretion von HCO3– angetrieben, das durch die Carboanhydrase gebildet wird. Ladungs- und Ionenausgleich besorgen in der sinusoidalen Membran gelegene Na+/H+- und Na+/HCO3–-Antiporter sowie die Na+/K+-ATPase. Transportsysteme der Sinusoidalmembran. Folgende

Transportsysteme der sinusoidalen Membran (. Abb. 33.13) sind von besonderer Bedeutung bei der Gallebildung: 4 Na+/K+-ATPase, die durch Ausbildung eines elektrochemischen Na+-Gradienten die Triebkraft für Na+gekoppelten, sekundär aktiven Transport darstellt 4 Ntcp, ein Na+-abhängiges Gallensalztransportsystem, welches vorwiegend die Gallensäureaufnahme in die Leberzelle vermittelt 4 Transporter der Oatp-Familie, die Na+-unabhängig die Aufnahme von organischen Anionen (z.B. Bilirubin, Digitalis, unkonjugierte Gallensäuren) vermitteln. Bei Oatp1 erfolgt diese Aufnahme im Gegentausch mit intrazellulärem Glutathion (GSH), welches einen hohen intra-/extrazellulären Konzentrationsgradienten aufweist 4 Transport-ATPasen der multidrug-related Proteinfamilie (MRP3 und 4), welche konjugierte Gallensäuren und Bilirubin, aber auch Glutathionkonjugate aus der Leberzelle in das Blut transportieren können. Normalerweise ist die Expression dieser Transporter sehr gering; sie werden aber hochreguliert bei Cholestase und verhindern auf diese Weise eine Überladung der Leberzelle mit gallenpflichtigen Substanzen Transportsysteme der canaliculären Membran. Die Aus-

scheidung gallepflichtiger Substanzen über die canaliculäre Membran erfolgt vorwiegend durch ATP-abhängige Transportsysteme, wie: 4 BSEP (bile salt export protein) für die Ausscheidung von Gallensäuren 4 Multidrug-related protein 2 (MRP 2), welches unterschiedliche organische Anionen transportiert, wie Glucuronsäurekonjugate (z.B. Bilirubinglucuronide) oder Glutathionkonjugate. Letztere werden mit Hilfe von Glutathion-S-Transferasen aus Glutathion (GSH) und verschiedenen lipophilen Verbindungen, auch Arzneimitteln gebildet:

4 Multidrug Resistenz Transporter (MDR-Transporter), von denen MDR1 an der Ausscheidung von organischen

1097 33.4 · Die Leber als Ausscheidungsorgan

. Abb. 33.13. An der Gallenbildung beteiligte hepatozelluläre Transportsysteme. ABC G5/G8 = Cholesterintransporter; BDG = Bilirubindiglucuronid; BSEP = Gallensäuretransporter; CA = Carboanhydrase; GS = Gallensäuren; GSH = Glutathion; MDR = multidrug resistance transporter; MRP2 = multidrug resistance related protein;

NK = Na+/K+-ATPase; Ntcp = Na+-abhängiger Gallensäuretransporter; Oatp = Transporter für organische Anionen; T = tight junctions; geschlossene Symbole geben ATP-abhängige, offene sekundär aktive oder passive Transportsysteme wieder. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

Kationen und Xenobiotica beteiligt ist, während das humane MDR3 Phospholipide transportiert 4 FIC 1 (engl.: familiar intrahepatic cholestasis) für die Ausscheidung von Aminophospholipiden 4 ABCG5/G8, ein Heterodimer aus zwei Halbtransportern, welches den Cholesterintransport in die Galle ermöglicht

in die canaliculäre Membran. Es besteht ein Gleichgewicht zwischen aktuell in die canaliculäre Membran eingebauten Transportern und solchen die intrazellulär in subcanaliculären Vesikeln gespeichert sind. Letztere können bei Bedarf rasch zur canaliculären Membran rekrutiert werden, sodass innerhalb von Minuten eine Steigerung der Exkretionskapazität möglich wird. Die choleretische Wirkung der therapeutisch eingesetzten Ursodesoxycholsäure beruht u.a. auf einer Stimulation des Einbaus von intrazellulär gelagertem MRP2 und BSEP in die canaliculäre Membran. Der Farnesoid X Rezeptor (FXR) ist als Transkriptionsfaktor ein besonders wichtiger Regulator der Genexpression vieler Gallensäuretransportsysteme. FXR wird durch Gallensäuren aktiviert, mit der Folge, dass canaliculäre Transporter, wie BSEP und MRP2 vermehrt, der sinusoidale Ntcp dagegen vermindert exprimiert werden. Dadurch wird nicht nur das Gallebildungsvermögen an die intrazelluläre Gallensäurekonzentration angepasst, sondern auch eine Überladung der Leberzelle mit Gallensäuren bei Cholestase vermieden. Dies ist von Bedeutung, da hohe Konzentrationen von Gallensäuren die Leberzelle schädigen und zum Zelltod durch Apoptose führen können.

Außer den genannten Transport-ATPasen finden sich in der canaliculären Membran noch Transportsysteme für Pyrimidine, Purine und Aminosäuren. HCO3–/Cl–- und SO42–/OH–-Antiporter sind für die Aufrechterhaltung einer hohen Hydrogencarbonat- und Sulfatkonzentration der Gallenflüssigkeit verantwortlich. Typisch für die canaliculäre Membran ist schließlich die Ausstattung mit verschiedenen Enzymen. Zu ihnen gehören die γ-Glutamyltranspeptidase, die Leucinaminopeptidase, weitere Peptidasen sowie eine CalciumATPase. ! Die Aktivität der für die Gallebildung verantwortlichen Transportsysteme wird langfristig durch Änderung ihrer Genexpression, kurzfristig durch reversiblen Einbau in die canaliculäre Membran reguliert.

Die funktionelle Aktivität der genannten Transportsysteme unterliegt dabei nicht nur einer Langzeitregulation auf Genexpressionsebene, sondern auch einer Kurzzeitregulation durch raschen Ein- und Ausbau von Transportermolekülen

33

1098

Kapitel 33 · Leber

33.4.2

Die Funktion der Cholangiozyten bei der Gallebildung

Gallengangsepithelzellen (Cholangiozyten) können die Zusammensetzung der Galleflüssigkeit modifizieren. Unter dem Einfluss von Sekretin kommt es rezeptorvermittelt zur Erhöhung der intrazellulären cAMP-Konzentration

mit nachfolgend gesteigerter Wasser- und HCO3–-Sekretion. An den beteiligten Wasserverschiebungen sind Aquaporine beteiligt. Außerdem sind Cholangiozyten imstande, mit Hilfe Na+-abhängiger Transportsysteme Glucose, aber auch Gallensäuren rückzuresorbieren. Letzteres tritt insbesondere bei Abflussbehinderungen der Gallenwege auf (obstruktive Cholestase).

In Kürze Die sekretorische Funktion der Leber beruht auf ihrer Fähigkeit zur Bildung und Ausscheidung von Galle. Diese enthält als Hauptbestandteile 4 Gallensäuren 4 Phospholipide 4 Cholesterin 4 andere Konjugate sowie 4 anorganische Salze

33.5

Funktionen der Nichtparenchymzellen der Leber

! Die hepatischen Endothelzellen sind für die Eliminierung von Makromolekülen aus dem Blut verantwortlich.

33

Die Aufnahme und Eliminierung von Makromolekülen aus dem Blut ist eine der Hauptfunktionen der hepatischen Endothelzellen. Sie verfügen jedenfalls im Vergleich zu den anderen zellulären Elementen der Leber über die beste Ausstattung mit Rezeptoren für 4 Asialoglycoproteine (7 Kap. 17.3.4) 4 Fc-Teile von Immunkomplexen (7 Kap. 34.3.4) sowie 4 LDL-Apolipoproteine (7 Kap. 18.5.2) Darüber hinaus können sie in beträchtlichem Umfang Kollagen sowie Proteoglykane durch Endozytose aufnehmen und auf diese Weise zum Abbau von Bindegewebskomponenten beitragen. Sinusendothelzellen besitzen Fenestrationen (Siebplatten) über welche der Sinusoidalraum mit dem Disséschen Raum in Verbindung steht (. Abb. 33.1) ! Kupfferzellen werden für Phagozytose und Abwehr benötigt.

Die Kupfferzellen leiten sich von den Knochenmarksstammzellen ab und gehören in die Reihe der mononucleären Phagozyten (7 Kap. 34). Sie sind zur Phagozytose von Viren, Bakterien, Zelltrümmern, Immunkomplexen und Endotoxinen imstande. Gleichzeitig mit diesem Prozess kommt es zu einer gesteigerten H2O2-Produktion, zur Prostaglandinsynthese sowie zur Sekretion von Kollagenase. Diese für die Abtötung fremder Zellen benötigten Mechanismen dienen auch der Eliminierung von Tumor-

Die Gallebildung beruht mechanistisch auf der Kooperation einer Reihe von z.T. ATP-abhängigen Transportern, die sowohl in der basolateralen als auch der canaliculären Membran der Hepatozyten lokalisiert sind. In den Cholangiozyten erfolgt außerdem die Sekretion von Hydrogencarbonat und Wasser in die Gallenflüssigkeit

zellen. Daneben geben Kupfferzellen bei Endotoxinkontakt Cytokine wie TNFα (7 Kap. 25.8.2) und Interleukin-6 (7 Kap. 25.8.3) ab. Letzteres bewirkt an der Leberparenchymzelle eine Akutphase-Antwort. Kupfferzellen sind aber auch an der Beendigung von Immunantworten beteiligt, indem sie die Apoptose von Lymphozyten einleiten. Dies liegt auch der hepatischen Immuntoleranz zugrunde. ! Sternzellen sind auf die Speicherung von Retinol und auf die Produktion von extrazellulärer Matrix spezialisiert.

Lebersternzellen (Synonyme: Ito-Zellen, perisinudoidale Zellen, Lipidspeicherzellen) können sich in »ruhendem« und »aktiviertem« Zustand befinden: 4 Im Ruhezustand speichern sie Vitamin A (Retinol und Retinolester), können dies aber auch wieder freisetzen und sind zur Bildung extrazellulärer Matrix (Kollagen I, III, IV und VI, Proteoglykane) befähigt. Vergleicht man die Kapazität der verschiedenen Leberzelltypen zur Biosynthese von Kollagen und Proteoglykanen, so zeigt sich, dass etwa 80% dieser wichtigen Bestandteile der extrazellulären Matrix in den Sternzellen synthetisiert werden 4 Die Aktivierung der Sternzellen erfolgt im Rahmen von Leberschäden durch Cytokine, wie TGFβ, TNFα und PDGF. Sie führt zur Transformation der ruhenden Sternzelle in rasch proliferierende, myofibroblastenähnliche Zellen, die keine Vitamin A-haltigen Tröpfchen mehr aufweisen, jedoch α-Aktin, wie es in der glatten Muskulatur vorliegt, exprimieren. Diese aktivierten Sternzellen sind zur Kontraktion und zur Kollagenbildung befähigt und spielen eine herausragende Rolle bei der Entstehung von Leberfibrose und -cirrhose (7 Kap. 33.6.1)

1099 33.6 · Pathobiochemie

In Kürze Die Nichtparenchymzellen der Leber sind für jeweils spezifische Funktionen zuständig: 4 Die hepatischen Endothelzellen für die Aufnahme von Makromolekülen, z.B. Glycoproteinen, Immunkomplexen oder Lipoproteinen,

33.6

Pathobiochemie

33.6.1

Leberzellschädigung

Aufgrund ihrer besonderen anatomischen Positionierung und ihrer vielfältigen Funktionen kann die Leber von einer großen Zahl unterschiedlichster Noxen getroffen werden. Diese können zum mehr oder weniger umfänglichen Leberzelluntergang mit nachfolgender Wundheilungsantwort und Regeneration führen. Sistiert die zugrunde liegende Noxe, ist eine restitutio ad integrum möglich, da die Leber über eine sehr hohe Regenerationsfähigkeit verfügt. Bei Noxenpersistenz führt der kontinuierliche Leberzelluntergang zu Bindegewebsablagerungen, die sich zunächst ohne (Leberfibrose), später aber mit Störung der Leberarchitektur und Regeneratknotenbildung (Lebercirrhose) manifestiert. Grundsätzlich ist diese Bindegewebseinlagerung als Wundheilungsantwort zu verstehen, deren fehlende Beendigung aber zu Fibrose und Cirrhose führen kann. Dann kommt es zu Funktionseinschränkungen der Leber sowie zu Störungen der Leberhämodynamik, die auch auf die Funktion anderer Organe zurückwirken kann. Im Folgenden werden drei pathobiochemisch wichtige Störungen angesprochen: 4 Der akute Leberzelluntergang 4 Die chronische Leberschädigung 4 Die Cholestase ! Viele Gifte lösen einen akuten Leberzelluntergang aus.

Auslösende Ursache für eine akute Zellnekrose der Leber können Sauerstoffmangel, Vergiftung mit bakteriellen Endotoxinen, Leberzellgifte (z.B. Tetrachlorkohlenstoff, Knollenblätterpilzgift u.a.) oder akute, schwer verlaufende Infekte sein. Der direkte Auslöser für die Zellnekrose ist häufig eine schwere Beeinträchtigung des Energiestoffwechsels mit Aktivierung von Lysosomen, Schädigung des Cytoskeletts sowie der Zellmembranen. Dabei kommt es zum Austritt zellulärer Bestandteile in das Blut. Aufgrund der besonders günstigen Messtechnik dient die Bestimmung hepatozellulärer Enzymaktivitäten im Serum (z.B. die Alaninaminotransferase und/oder die Aspartataminotransferase) neben der Bestimmung der hepatischen Syntheseleistung als Maß für die Schwere der Leberschädigung. Wegen der kurzen Halbwertszeit von Blutgerinnungsfaktoren sind plasmatische Gerinnungstests (z.B. Prothrom-

4 die Kupfferzellen für Phagozytose und Abwehr, 4 die Sternzellen für die Speicherung von Retinol und besonders nach Aktivierung für die Produktion von extrazellulärer Matrix, v.a. die Kollagene I, III, IV und VI sowie verschiedene Proteoglykane, Laminin und Fibronectin.

binzeit nach Quick oder Faktor V Bestimmung) besonders gut geeignet um Schwere und Dynamik der Leberschädigung bei akutem Leberversagen zu erfassen. Während starke Gifteinwirkung den nekrotischen Zelltod auslöst, führen subkritische Schädigungen zum apoptotischen Zelluntergang. Die Übergänge zwischen Apoptose (7 Kap. 7.1.5) und Nekrose sind dabei fließend. Eine immunologisch vermittelte Apoptose ist von besonderer Bedeutung beim Leberzelluntergang im Rahmen einer Virushepatitis. Auch Alkohol, toxische Gallensäuren und manche Medikamente können zur Apoptose von Leberzellen über eine teilweise ligandenunabhängige Aktivierung von Todesrezeptoren (z.B. Fas/CD95) führen. Die Prognose eines akuten Leberzelluntergangs hängt von seinem Ausmaß ab; bisweilen ist er so stark, dass eine rasche Lebertransplantation erforderlich ist. ! Alkoholgenuss ist eine häufige Ursache der chronischen Leberschädigung.

Akuter Alkoholkonsum. Die Leber ist der Hauptort des

Alkoholabbaus, der hauptsächlich über die Alkoholdehydrogenase (ADH) erfolgt (. Abb. 33.14). Die dabei anfallenden Reduktionsäquivalente in Form von NADH und Acetat führen zur Hemmung der Gluconeogenese und der Fettsäureoxidation, und zu einer Steigerung der Ketonkörper-, α-Glycerophosphat- und Fettsäuresynthese. Daraus synthetisierte Triacylglycerine akkumulieren intrazellulär, da ihre Ausschleusung aus der Leberzelle u.a. durch eine Acetaldehyd-bedingte Beeinträchtigung mikrotubulärer Transportvorgänge (7 Kap. 6.3.1) gestört ist. Auch die autophagische Proteolyse wird durch Alkohol gehemmt (Hydratationszunahme der Leberzelle!) mit der Folge einer intrazellulären Proteinakkumulation. Die so entstehende Fettleber ist durch Fett- und Proteinanhäufung und Lebervergrößerung (Hepatomegalie) charakterisiert. Weitere Folgen des akuten Alkoholkonsums sind Neigung zu Hypoglykämie, Lactat- und Ketoazidose (Neigung zu Gichtanfällen!) und Interferenzen mit dem Arzneimittelabbau. Diese akuten alkoholbedingten Stoffwechselveränderungen sind bei Alkoholkarenz in der Regel reversibel. Chronischer Alkoholkonsum. Chronische Zufuhr von Alko-

hol kann zu dauerhaften Leberschäden bis hin zur Lebercirrhose führen. Folgende Mechanismen sind daran beteiligt (. Abb. 33.14):

33

1100

Kapitel 33 · Leber

. Abb. 33.14. Der Stoffwechsel des Ethanols in der Leber. Für die erste Oxidation zu Acetaldehyd stehen zwei Enzyme zur Verfügung. Die cytosolische Alkohol-Dehydrogenase, die den Hauptanteil an der Ethanoloxidation katalysiert, liefert NADH. Das im endoplasmatischen Retikulum lokalisierte mikrosomale Ethanol oxidierende System (MEOS) beruht auf der Aktivität einer Cytochrom P450-abhängigen Monooxigenase, die durch Ethanol induziert wird. In Nebenreaktionen

33

4 Durch chronische Alkoholzufuhr kommt es zur Induktion der im endoplasmatischen Retikulum lokalisierten Cytochrom P450-abhängige Monooxigenase CYP 2E1 (7 Kap. 15.2.1). Dieses Enzym hat ein breites Substratspektrum für die Metabolisierung von Endo- bzw. Xenobiotica, katalysiert aber auch die Ethanoloxidation zu Acetaldehyd. Aus diesem Grund wird es auch als ethanoloxidierendes System (MEOS engl. microsomal ethanol oxidizing system) bezeichnet 4 Die Induktion von MEOS führt zu einer Zunahme dieses normalerweise nur in geringem Umfang beschrittenen Wegs des Alkoholabbaus, allerdings unter Verbrauch von Sauerstoff und Reduktionsäquivalenten ohne ATP-Gewinnung. Dies ist u.a. für hypoxische Leberzellschäden im perivenösen Bereich des Leberacinus verantwortlich 4 Die gesteigerte Metabolisierung von Ethanol, aber auch der anderen Substrate von CYP 2E1 begünstigt die Bildung von Sauerstoffradikalen (oxidativer Stress), führen so zur Lipidperoxidation mit entsprechenden Membranschädigungen und begünstigen die Apoptose von Leberzellen 4 Der Alkoholabbau sowohl über ADH als auch über MEOS führt zur Bildung von Acetaldehyd. Dieses wird zum größten Teil über die mitochondriale Aldehydehydrogenase zu Acetat abgebaut. Acetaldehyd kann durch Proteinadduktbildung neue antigene Determinanten schaffen und so Immunreaktionen in Gang set-

dieses Enzyms entstehen reaktive Sauerstoffspezies, die für viele Folgeschäden des chronischen Alkoholabusus verantwortlich sind. Das Reaktionsprodukt Acetaldehyd bildet Proteinaddukte und löst Immunreaktionen und eine Fibrosierung aus. Durch die mitochondriale Aldehyddehydrogenase wird es in Acetat umgewandelt. (Weitere Einzelheiten 7 Text)

4

4

4

4

zen, insbesondere aber Kupfferzellen zur Bildung von Cytokinen, wie PDGF, TNFα und TGFβ veranlassen Diese Cytokine führen zur Aktivierung ruhender Sternzellen, deren Proliferation und Umwandlung in myofibroblastenartige Zellen. Diese transformierten Sternzellen sind kontraktil, synthetisieren große Mengen extrazellulärer Matrix und fördern so die Fibrosierung. Dies führt zur Erhöhung des sinusoidalen Durchströmungswiderstands Aktivierte Sternzellen produzieren ihrerseits weitere Signalstoffe, wie PDGF, welches autokrin proliferationssteigernd wirkt und so zur Propagierung der Fibrosierung führt Im Rahmen all dieser Prozesse kommt es zum progredienten Leberzelluntergang, aber auch zum Einsetzen von Regenerationsvorgängen. Diese werden aber durch die Fibrosierung der Leber behindert: es kommt zum Umbau der Läppchenarchitektur mit Regeneratknotenbildung und gestörter Leberdurchblutung. In diesem Zustand spricht man von Lebercirrhose Es sind eine Reihe von Genpolymorphismen für oxidative und antioxidative Enzymsysteme (z.B. manganabhängige Superoxiddismutase, Cytochrom P450-Subspezies) sowie Promotoren in Cytokingenen (z.B. TNFα, Interleukin 10) bekannt, welche die Suszeptibilität für alkoholische Leberschäden beeinflussen. Dies erklärt weshalb viele, jedoch nicht alle Alkoholiker einen schweren Leberschaden entwickeln

1101 33.6 · Pathobiochemie

Auch andere Formen der chronischen Leberzellschädigung (z.B. chronische Virushepatitis, nichtalkoholische Steatohepatitis, Eisenspeicherkrankheit) können durch Auslösung dieser Reaktionsmuster zur Lebercirrhose führen, deren klinische Symptomatik durch den Leberfunktionsverlust (z.B. Blutgerinnungsstörungen, verminderte Albuminsynthese), die Störung der Leberdurchblutung (portale Hypertension, Ösophagusvarizen und andere Umgehungskreisläufe, Aszites, Milzvergrößerung) und die Rückwirkung auf die Funktion anderer Organe (z.B. Gehirn: hepatische Enzephalopathie durch unzureichende Ammoniakentgiftung der erkrankten Leber) geprägt ist. Infobox Hepatische Enzephalopathie bei Lebercirrhose »I’m a great eater of beef, but believe it does harm to my wit« sagt Sir Andrew Aguecheek in Shakespeares »Was ihr wollt«. Aguecheek, der sehr dem Alkohol zusprach und daher wahrscheinlich an Lebercirrhose litt, berichtet hier die Auslösung einer Enzephalopathieepisode durch Fleischgenuss. Die hepatische Enzephalopathie ist eine in der Regel reversible Hirnfunktionsstörung mit Verlangsamung, Konzentrationsstörung bis hin zum Koma, die u.a. durch Hyperammoniämie ausgelöst wird. Fleischgenuss führt zu einer vermehrten Produktion von Ammoniak, welcher normalerweise von der Leber wirksam und rasch entgiftet wird. Bei Lebercirrhose dagegen gelangt Ammoniak aufgrund einer metabolischen Leberinsuffizienz und aufgrund von Umgehungskreisläufen vermehrt zum Gehirn und entfaltet dort seine toxische Wirkung.

! Cholestase ist Folge einer Störung hepatobiliärer Transportsysteme oder eines gestörten Galleabflusses.

Störungen der Gallebildung können auf mechanischer Verlegung abführender Gallenwege (z.B. Tumoren, Gallensteine) beruhen (»obstruktive Cholestase«), aber auch primär auf hepatozellulärer Ebene durch Störungen der hepatobiliären Sekretion (»hepatozelluläre Cholestase«) zustande kommen. Letztere tritt meist auch sekundär bei obstruktiver Cholestase hinzu. Ursache des hepatozellulären Sekretionsdefekts sind Infektionen, Toxine, aber auch angeborene Defekte der hepatobiliären Transportsysteme. So führen TNFα und andere inflammatorisch wirkende Cytokine zu verminderter Expression von Ntcp, MRP2 und BSEP, und damit zur gestörten Ausscheidung von Gallensäuren und organischen Anionen. Diese reichern sich im Blut an und führen zu Juckreiz (Gallensäuren) und Gelbsucht (Ikterus durch unzureichende Bilirubinausscheidung). Auch medikamentös und hormonell bedingte Cholestasen beruhen auf einer verminderten Expression solcher Transportsysteme. Im Falle der intrahepatischen Schwangerschaftscholestase lässt sich bei der Hälfte der Patientinnen eine

Mutation im MDR3 Gen nachweisen. Demgegenüber führen schwere Defekte im MDR3 Gen zur familiären progressiven intrahepatischen Cholestase Typ 3 (PFIC 3), welche ebenso wie PFIC Typ 1 (Defekt des FIC 1 Gens) und PFIC Typ 2 (Defekt des BSEP Gens) bereits im Kindesalter eine Lebertransplantation erfordern. Andere Mutationen von BSEP und FIC 1 können klinisch unter dem Bild der benignen rekurrenten intrahepatischen Cholestase (BRIC) in Erscheinung treten. Unterschiedliche Mutationen in ein und demselben Transporter haben offensichtlich unterschiedliche funktionelle Auswirkungen und können daher zu klinisch unterschiedlichen Krankheitsbildern führen. Dem Ikterus beim Dubin-Johnson-Syndrom liegt ein isolierter genetischer Defekt von MRP2 und damit eine Bilirubinausscheidungsstörung zugrunde, während die Sekretion von Gallensäuren über BSEP nicht beeinträchtigt ist. Über die Pathogenese der verschiedenen Formen des Ikterus 7 Kap. 20.4. Alle Formen der Cholestase können die Leber schädigen, da Gallensäuren in der Leberzelle akkumulieren und so Apoptose auslösen können.

33.6.2

Gallensteine

Eine der häufigsten Erkrankungen in Westeuropa ist das Gallensteinleiden. Allein in Deutschland wird die Zahl der Steinträger auf über 5 Mio. geschätzt, wobei Frauen mehr als doppelt so häufig betroffen sind wie Männer. Gallensteine enthalten in wechselndem Verhältnis als wichtigste Bestandteile Cholesterin, Gallenfarbstoffe sowie Calciumsalze. Je nachdem, welche dieser Verbindungen überwiegend vorkommt, spricht man von Cholesterinbzw. Pigmentsteinen: 4 Cholesterinsteine machen etwa 90% aller Gallensteine aus und haben einen Cholesteringehalt von etwa 70%. Sie entstehen durch Auskristallisation von Cholesterin in der Gallenblase und sind Folge einer übermäßigen Cholesterinausscheidung oder einer Störung des Verhältnisses von Cholesterin und seinen Lösungsvermittlern, den Gallensäuren und Phospholipiden. Solche Missverhältnisse an sezernierten Gallensäuren, Phospholipiden und Cholesterin können erworben (z.B. bei intestinalen Gallensäureverlustsyndromen oder verminderter Synthese bei Lebercirrhose), aber auch genetisch bedingt sein. So wurden sog. Lith-Gene identifiziert, deren Polymorphismen die Cholesterinsteinbildung begünstigen. Zu ihnen zählen BSEP, MDR3 sowie die Cholesterinhalbtransporter ABCG5/8 4 Pigmentsteine bestehen überwiegend aus den Calciumsalzen des Bilirubins sowie Calciumphosphat und -carbonat. Zu ihrer Entstehung tragen eine gesteigerte Ausscheidung von nicht an Glucuronsäure konjugiertem Bilirubin bei, wie sie bei hämolytischen Krankheitsbildern (Sichelzellanämie, Thalassämie, fetale

33

1102

Kapitel 33 · Leber

Erythroblastose, 7 Kap. 29.2.4, 29.2.3) oder Defekten der Glucuronidierung der Leber auftreten. Ein wichtiger Auslöser der Pigmentsteinbildung ist darüber hinaus die Dekonjugierung von Bilirubinglucuronid in der Gallenblase. Sie tritt bei bakterieller Besiedelung der

Gallenwege, besonders mit E. coli auf. Diese setzen große Mengen der β-Glucuronidase frei und sind so für die gesteigerte Dekonjugierung und die dramatische Verschlechterung der Löslichkeit von Gallenfarbstoffen verantwortlich

In Kürze Die Leber kann von einer großen Zahl unterschiedlichster Noxen getroffen werden. Diese können zum mehr oder weniger umfänglichen Leberzelluntergang mit nachfolgender Wundheilungsantwort und Regeneration führen. Man unterscheidet 4 toxische Leberschädigung, z.B. durch Gifte, Endotoxine oder schwere Infekte, die zum akuten Zelluntergang führen 4 chronische Leberschädigungen, die neben der Schädigung der Hepatozyten einen v.a. durch die akti-

Literatur Monographien und Lehrbücher Arias IM, Boyer JL, Chisari FV, Fausto N, Schachter D, Shafritz DA (eds) (2001) The Liver: Biology and Pathobiology. 4th ed., Raven Press, New York Gerok W, Blum H (eds) (1995) Hepatologie, 2. Aufl., Elsevier Gressner AM (1995) In: Greiling H, Gressner AM (Hrsg) Lehrbuch der klinischen Chemie und Pathobiochemie. Schattauer, Stuttgart

33

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vierten Sternzellen ausgelösten fibrotischen Umbau der Leber mit der Entwicklung einer Lebercirrhose nach sich ziehen, und 4 Schädigungen durch Cholestase, die durch Verlegung der abführenden Gallenwege oder durch Störungen der Gallebildung in den Hepatozyten einhergehen 4 Sehr häufig sind Konkremente in den ableitenden Gallenwegen. Nach ihrer Zusammensetzung unterscheidet man zwischen Cholesterin- und Pigmentsteinen

Häussinger D, Graf D, Weiergraber OH (2001) Glutamine and cell signaling in liver. J Nutr 131 (9 Suppl):2509S–14S Häussinger D, Kubitz R, Reinehr R, Bode JG, Schliess F (2004) Molecular aspects of medicine: from experimental to clinical hepatology. Molecular Aspects of Medicine 25:221–360 Hautekeete Ml, Geerts A (1997) The hepatic stellate (Ito) cell: its role in human liver disease. Virchows Arch 430:195–207 Jungermann K, Kietzmann T (1996) Zonation of parenchymal and nonparenchymal metabolism in liver. Annu Rev Nutr 16:179–203 Kadowaki M, Kanazawa T (2003) Amino Acids as Regulators of Proteolysis. J Nutr 133:2052S–2056S König J, Nies AT, Cui Y, Leier I, Keppler D (1999) Conjugate export pumps of the multidrug resistance protein (MRP) family: localization, substrate specificity, and MRP2-mediated drug resistance. Biochim Biophys Acta 1461:377–394 Kullak-Ublick GA (1999) Regulation of organic anion and drug transporters of the sinusoidal membrane. J Hepatol 31:563–573 Lang F et al. (1997) The functional significance of cell volume. Physiol Rev 78:247–306 Olaso E, Friedman L (1998) Molecular regulation of hepatic fibrogenesis. J Hepatol 29:836–847 McCarver MG, Hines RN (2002) The Ontogeny of Human Drug-Metabolizing Enzymes: Phase II Conjugation Enzymes and Regulatory Mechanisms. J Pharmacol Exp Ther 300:361–366 Links im Netz 7 www.lehrbuch-medizin.de/biochemie

34 34

Immunsystem Siegfried Ansorge

34.1

Angeborene Immunantwort – 1104

34.2

Molekulare Instrumente der adaptiven Immunantwort – 1105

34.2.1 34.2.2 34.2.3

Chemische Natur von Antigenen – 1106 Das MHC-/HLA-System als Instrument der Antigenpräsentation – 1106 Die Gene des HLA-Komplexes – 1107

34.3

Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems – 1109

34.3.1 34.3.2 34.3.3 34.3.4 34.3.5

CD-Nomenklatur – 1109 Antigen-Erkennung durch Lymphozyten T-Lymphozyten – 1110 B-Lymphozyten – 1118 Zirkulation von Lymphozyten – 1129

34.4

Komplementsystem – 1130

34.5

Wechselwirkungen zwischen unspezifischer und spezifischer Immunantwort – 1133

– 1110

34.6

Immunabwehr von Mikroorganismen – 1134

34.6.1 34.6.2

Bakterienabwehr – 1134 Virusabwehr – 1135

34.7

Pathobiochemie – 1136

34.7.1 34.7.2 34.7.3 34.7.4

Immundefekte – 1136 Allergien – 1137 Autoimmunkrankheiten – 1138 Transplantatabstoßungen – 1138

Literatur

– 1139

1104

Kapitel 34 · Immunsystem

> > Einleitung Das Immunsystem ist ein komplexes System von Zellen und Faktoren, das den Organismus in die Lage versetzt, mit Infektionserregern und anderen Fremdstrukturen, wie Allergenen, fertig zu werden. Die Instrumente dieses Systems sind über den gesamten Organismus verteilt mit einer Konzentrierung in den primären (Knochenmark, Thymusdrüse) und sekundären lymphatischen Organen (Lymphknoten, Schleimhaut, Milz, Haut u.a.). Die Zahl der immunologisch bedeutsamen Zellen wird auf 1012 geschätzt. Das Immunsystem bedient sich zweier unterschiedlich funktionierender Systeme: eines angeborenen, unspezifisch wirkenden Repertoires an Zellen und Stoffen, das die erste, frühe Phase der Abwehr von Krankheitserregern bestimmt und eines selektiv wirkenden Systems, das für die antigenspezifische oder erworbene/adaptive Immunantwort verantwortlich ist und erst einige Tage später zur Wirkung gelangt. Beide Ebenen der Immunantwort sind miteinander vernetzt. An einer Immunantwort sind wesentlich folgende Zelltypen beteiligt: Antigen-präsentierende Zellen (Makrophagen, dendritische Zellen), Thymus-geprägte Lymphozyten (T-Zellen) und im Knochenmark geprägte Lymphozyten (B-Zellen), die in Antikörper-produzierende Plasmazellen umgewandelt werden. Sie kommunizieren miteinander entweder direkt oder über Cytokine. Immunzellen zirkulieren über das Blut- oder Lymphgefäßsystem und wandern zum Ort des Geschehens, z.B. zu einer Verletzung oder lokalen Entzündung. Diese Vorgänge werden über gefäßaktive Prostaglandine und Prostacycline, Adhäsionsmoleküle und Chemokine reguliert. Das Immunsystem steht in enger Wechselwirkung mit den Systemen des Komplements, der Kinine, der Gerinnung und Fibrinolyse, die an Entzündungsprozessen mitwirken. Darüber hinaus bestehen enge Beziehungen zum neuronalen und endokrinen System sowie zum Stoffwechsel und der Ernährung.

34.1

Angeborene Immunantwort

! Makrophagen, polymorphkernige Granulozyten und NK-Zellen vermitteln die unspezifische Immunantwort.

Angeborene Immunantwort. Die unspezifische natürliche Immunantwort ist angeboren. Grenzflächen wie Haut und Schleimhaut bilden die erste Barriere gegen den Eintritt von

Mikroorganismen. Nach der Passage dieser Barriere kommen humorale wie zelluläre Elemente ins Spiel (. Tabelle 34.1). Hierzu gehören das in vielen Sekreten vorkommende Enzym Lysozym sowie über die alternative Komplementkaskade aktivierte Faktoren. Bei einer Infektion steigt regelmäßig auch die Konzentration von Akutphase-Proteinen wie C-reaktivem Protein (CRP) im Blut an. CRP, ein aus 206 Aminosäuren bestehendes Polypeptid, bindet an Phosphorylcholin-Reste auf Bakterienoberflächen, z.B. von

. Tabelle 34.1. Charakteristika der angeborenen und adaptiven Immunität

34

Angeborene Immunität

Adaptive Immunität

Mechanische Barrieren

Haut Schleimhaut

Keine

Zellen

Monozyten/Makrophagen Granulozyten

T-Lymphozyten B-Lymphozyten

NK-Zellen

Antigen-präsentierende Zellen

Faktoren

Toll-like Rezeptoren Eikosanoide

Inflammatorische Cytokine (z.B. IL-2, IFN-γ)

Chemokine

Anti-inflammatorische Cytokine (z. B. TGF-E, IL-4, IL-10, IL-13)

Sauerstoffspezies

Antikörper

NO Proteasen Komplement Pro-inflammatorische Cytokine Akutphase-Proteine (z.B. TNF-D, IL-1, IL-6) CRP Spezifität

nein

ja

Selbst-/Nicht-Selbst-Diskriminierung

nein

ja

Gedächtnis

nein

ja

1105 34.2 · Molekulare Instrumente der adaptiven Immunantwort

Pneumokokken, wirkt als Opsonin und induziert die Komplementaktivierung durch Bindung von C1q. Neben Granulozyten spielen Monozyten und Makrophagen eine wichtige Rolle in der ersten Phase der Immunantwort. Sie sind Produzenten proinflammatorischer Cytokine (7 Kap. 25.2). Die Phagozytose von Mikroorganismen wird von Mannose- und scavenger-Rezeptoren unterstützt, während die Freisetzung von proinflammatorischen Cytokinen hauptsächlich auf der Aktivierung von Toll-like-Rezeptoren (TLR, benannt nach dem Drosophila-Protein Toll) beruht. Beim Menschen kennt man 10 verschiedene TLR, die unterschiedliche Mikroorganismen-Strukturen erkennen wie z.B. Lipopolysaccharid von gram-negativen oder Lipoteichonsäure von gram-positiven Bakterien, bakterielles Flagellin, nicht methylierte CpG-Motive bakterieller DNA oder viraler doppelsträngiger RNA. Darüber hinaus vermitteln TLR die Signaltransduktion in die Zelle. Zu den wichtigsten freigesetzten proinflammatorischen Cytokinen gehören Interleukin-1 (IL-1), Tumornekrosefaktor-α, In-

terleukin-6 (IL-6), IL-12 und IL-18, die weitere Zellsysteme wie Endothelzellen und Lymphozyten aktivieren. IL-6, TNF-D und IL-1 sind Pyrogene, d.h. für das Fieber verantwortliche Cytokine. IL-6 bewirkt auch die Freisetzung von CRP in der Leber. Zum zytotoxisch gegen Mikroorganismen gerichteten Arsenal von Makrophagen und Granulozyten gehören Toll-like-Rezeptoren, reaktive Sauerstoffspezies (7 Kap. 15.3), Stickstoffmonoxid (NO, 7 Kap. 25.9.1) und proteolytische Enzyme wie Granulozyten-Elastase, Proteinase 3 und Kathepsine, die in der frühen Phase der Immunantwort zum Teil überschießend freigesetzt werden. Im Unterschied zur Bakterienabwehr sind an der Virusabwehr in der ersten Phase der Immunantwort vor allem natürliche Killerzellen (NK-Zellen, natural killer cells ) beteiligt. NK-Zellen sind große granuläre Lymphozyten, die weder den T- noch den B-Lymphozyten zugeordnet werden können. Sie sind in der Lage, virusinfizierte Zellen oder Tumorzellen zu zerstören und werden durch Interferone, IL-1, IL-12 und IL-18 aktiviert (7 Kap. 25.5.2, 25.5.3).

In Kürze Die angeborene Immunantwort ist unspezifisch. Die wichtigsten daran beteiligten Zellen sind neutrophile Granulozyten, Makrophagen und NK-Zellen. Die Kommunikation zwischen den Zellen erfolgt über: 4 Toll-like Rezeptoren 4 proinflammatorische Cytokine wie IL-1, IL-6, TNF-α, IL-12 und IL-18 4 Chemokine, z.B. IL-8

34.2

Molekulare Instrumente der adaptiven Immunantwort

Die adaptive Immunantwort erfolgt in mehreren Schritten. Es sind dies: die Antigenerkennung durch spezifische Tund B-Lymphozyten, die Aktivierung dieser Lymphozyten (Bildung von Effektorzellen), die Eliminierung der Antigene, die Bildung von memory- (Gedächtnis-) Zellen und die Terminierung der Immunantwort. ! Die adaptive Immunantwort ist hochspezifisch, unterscheidet zwischen Selbst und Nicht-Selbst und verfügt über ein Gedächtnis.

Adaptive Immunantwort. An die initiale Phase der Abwehr

schließt sich die adaptive Immunantwort an, die spezifisch gegen Krankheitserreger gerichtet ist und durch Anpassungsmechanismen eine individualisierte Antwort auf Erreger oder andere Fremdstrukturen vermittelt. Da Makrophagen auch in dieser Immunantwort beteiligt sind, stellen sie eine Brücke zwischen beiden Formen der Immunantwort dar.

4 Eikosanoide, wie Prostaglandine, Prostazykline, Thromboxane und Leukotriene Effektormoleküle der unspezifischen Immunantwort sind: 4 reaktive Sauerstoffspezies und NO 4 Komplementfaktoren 4 Myeloperoxidase 4 proteolytische Enzyme, wie Granulozyten-Elastase und toxische Granulabestandteile

Die Fähigkeit der adaptiven Immunantwort, zwischen unterschiedlichen Antigenen zu unterscheiden, wird für den T-Zellbereich auf 1015 und für den B-Zellbereich auf 1011 Antigene geschätzt. Praktisch kann damit das Immunsystem auf jedes denkbare Antigen reagieren. Dieses Potential ist im Genom begründet und wird durch das Prinzip der Genumlagerung (rearrangement) und im Fall der Immunglobuline zusätzlich durch somatische Mutationen erreicht (7 Kap. 34.3.4.5). Neben der Spezifität sind weitere Charakteristika der adaptiven Immunantwort die Fähigkeit zur Unterscheidung zwischen Selbst und Nicht-Selbst sowie das Vermögen einen immunologischen Erfahrungsschatz gegen im Kindesalter auftretende Erreger aufzubauen, der den Organismus in die Lage versetzt später auf die gleichen Erreger effizient und ohne Zeichen von Erkrankungen zu reagieren. Immunologische Toleranz. Die Fähigkeit zur Unterschei-

dung zwischen Selbst und Nicht-Selbst, d.h. körpereigenen und körperfremden Strukturen und die damit verbundene Toleranz des Immunsystems gegenüber körpereigenen Strukturen, wird nach der Geburt erworben. Sie impliziert,

34

1106

Kapitel 34 · Immunsystem

dass körpereigene Lymphozyten nicht durch körpereigene Strukturen aktiviert werden können. Ein Bruch dieser Toleranz führt zu Autoimmunerkrankungen (7 Kap. 34.7.3) wie rheumatoide Arthritis oder multiple Sklerose. Die molekularen Strukturen der Selbst-/Nicht-Selbst-Diskriminierung sind im MHC (major histocompatibility complex)- bzw. HLA (Humanes Leukozytenantigen)- System begründet. Das wichtigste Organ zur Vermittlung der Fähigkeit der Toleranz durch T-Zellen ist die Thymus-Drüse. Neben der HLA-vermittelten (zentralen) Toleranz spielen regulatorische T-Zellen (früher Suppressorzellen) als Instrumente der peripheren Toleranz eine wichtige Rolle. Die meisten Antigene induzieren eine Immunantwort, in die sowohl T- als auch B-Lymphozyten einbezogen sind.

34.2.1

Chemische Natur von Antigenen

! Antigene sind meist Proteine, gelegentlich auch Saccharide, Nucleinsäuren oder Lipide.

Antigene. Stoffe, die spezifisch mit Antikörpern oder T-

34

Zellen reagieren, werden Antigene genannt. Der Bereich an der Oberfläche des Antigenmoleküls, der für die Bindung und Bildung eines spezifischen Antikörpermoleküls oder Lymphozyten verantwortlich ist, wird als Epitop oder antigene Determinante bezeichnet. Die Aminosäuren derartiger Regionen auf Proteinoberflächen stammen meist aus verschiedenen Abschnitten der Proteinsequenz, die nach Ausbildung der Konformation benachbart liegen. Solche Epitope heißen Konformations- oder diskontinuierliche Epitope. Ein Epitop, das aus einem einzigen Segment einer Peptidkette besteht, wird als lineares oder kontinuierliches Epitop bezeichnet. Für die Immunantwort, d.h. die Bildung von Antikörpern und Antigen-spezifischen T-Zellen ist allerdings immer ein Vollantigen oder Immunogen nötig, das zusammen mit den spezifischen Rezeptoren der T- wie der B-Zellen in Wechselwirkung tritt. Ausnahmen sind T-Zellunabhängige Antigene wie Kohlenhydrate mit sich wiederholenden Epitopabschnitten. Antigene, die mit einem Antikörper reagieren, aber selbst keine Immunantwort auslösen, werden Haptene genannt. Haptenen fehlt ein Proteinepitop (carrier epitop), das T-Helferzellen aktivieren kann. Haptene sind meist niedermolekulare Stoffe. Zu ihnen gehören u.a. Medikamente, Metallionen (Zn2+) oder Aminosäurederivate, die erst nach Bindung an einen Carrier, zumeist Protein, immunogen werden und eine Immunantwort auslösen. Antigene können jede beliebige Struktur besitzen, besonders gute Immunogene sind Proteine, die wegen ihrer Größe und der Vielzahl von Epitopen T- und B-Zellen unterschiedlicher Spezifität stimulieren können. Antigenerkennung durch B- und T-Lymphozyten. Wäh-

rend Antikörper und B-Lymphozyten dazu befähigt sind,

die komplexe Struktur des Antigens (z.B. eines Proteins) in seiner nativen Form zu erkennen und zu binden, sind T-Zellen mit ihren Rezeptoren nur in der Lage, kurze Oligopeptide (9–30 Aminosäuren) aus einem Antigen zu erkennen, die an der Oberfläche von Antigen-präsentierenden Zellen (APZ) über membrangebundene MHC/HLA-Moleküle dargeboten werden. Zu den Antigen-präsentierenden Zellen gehören dendritische Zellen, Makrophagen und B-Lymphozyten. Auch intrazellulär lokalisierte Antigene, wie solche von Viren und sich intrazellulär vermehrenden Bakterien (Listerien), werden für die T-Zelle erst erkennbar, wenn entsprechende Peptidbruchstücke dieser Antigene über MHC-Moleküle an der Oberfläche der Zelle zugänglich sind.

34.2.2

Das MHC-/HLA-System als Instrument der Antigenpräsentation

Haupthistokompatibilitäts-Komplex (MHC, major histocompatibility complex), humanes LeukozytenantigenSystem (HLA). Die Frage, warum zumindest bei Protein-

antigenen immer eine größere Zahl von Oberflächenbereichen als Epitope dienen und jedes dieser Epitope die Ausbildung eines spezifischen Antikörpermoleküls im Organismus hervorruft, konnte durch die Entdeckung der Antigenpräsentation als einem Grundprinzip bei der Antigenerkennung befriedigend erklärt werden. Nach diesem Konzept wird beim erstmaligen Kontakt eines Antigens mit dem Organismus dieses Antigen von Antigen-präsentierenden Zellen intrazellulär durch Proteolyse fragmentiert und die dabei entstehenden Fragmente zusammen mit spezifischen Peptidrezeptoren auf der Zelloberfläche präsentiert. Diese Peptidrezeptoren wurden ursprünglich bei Transplantationsexperimenten identifiziert und werden infolgedessen auch als Haupthistokompatibilitäts-Komplex (MHC-Komplex, major histocompatibility complex) bezeichnet. Der Begriff MHC wird Species-unabhängig genutzt. Die MHC-Systeme der unterschiedlichen Species haben gesonderte Namen. Das menschliche MHC-System wurde zuerst auf Leukozyten nachgewiesen und als Humanes Leukozytenantigen-System (HLA) bezeichnet. MHC-Proteine werden besonders stark auf Leukozyten exprimiert.. Das MHC-System der Maus wird als H-2 (histocompatibility-2) bezeichnet. Peptidrezeptoren des MHC-Komplexes treten in 2 Klassen, I und II, auf. ! MHC-I- und -II-Peptidrezeptoren werden auf unterschiedlichen Zellen exprimiert.

MHC-I-Peptidrezeptoren finden sich auf allen kernhaltigen Zellen, wobei die Expression in hämatopoietischen Zellen am höchsten ist. MHC-II-Peptidrezeptoren werden im gesunden Organismus konstitutiv auf B-Lymphozyten,

1107 34.2 · Molekulare Instrumente der adaptiven Immunantwort

Makrophagen und dendritischen Zellen, also Zellen des Immunsystems exprimiert. Kernlose Erythrozyten enthalten keine MHC-Moleküle. ! MHC-I- und -II-Rezeptoren werden auf unterschiedlichen Wegen mit Antigen-Peptiden beladen.

Prozessierung und Präsentation frei im Cytosol vorkommender Antigene (. Abb. 34.1). Peptide, die von MHC-I-

Molekülen präsentiert werden, entstehen durch Proteolyse intrazellulär synthetisierter viraler Proteine oder TumorAntigene unter Mitwirkung des Proteasoms. Antigen-präsentierende Zellen benutzen dafür eine besondere Form des Proteasoms, das Immunproteasom, Tumorzellen die Tripeptidylpeptidase II. Unter Vermittlung des TAP1/ TAP2Komplexes werden die dabei entstehenden Fragmente in das endoplasmatische Retikulum transportiert und dort von MHC-I-Rezeptoren gebunden (. Abb. 34.1a). TAP (transporter associated with antigen processing)-Transporter sind Transmembranproteine mit einer hydrophoben, in das ER-Lumen ragenden Transmembrandomäne und einer hydrophilen ins Cytosol ragenden ATP-bindenden Domäne. TAP1 ist über einen Chaperonkomplex (Tapasin, Calretikulin) an das MHC-Molekül gebunden. Diese Bindung wird nach Beladung des MHC mit einem Antigenpeptid gelöst und der MHC-Peptidkomplex über das GolgiSystem an die Oberfläche transportiert. Dies führt dazu, dass jede Körperzelle ihrer Umgebung einen Satz von Peptiden präsentiert, durch den sie als »selbst« erkennbar ist. Werden Körperzellen z.B. von Viren befallen, die den zelleigenen Proteinbiosyntheseapparat in ihren Dienst stellen, werden körperfremde, virale Peptidfragmente präsentiert, die eine Identifikation und Eliminierung derartiger Zellen durch das Immunsystem möglich macht (7 Kap. 34.6.2). Auf ähnliche Weise werden transformierte Zellen entfernt. Prozessierung und Präsentation extrazellulärer Antigene.

Ein etwas anderer Mechanismus liegt der Präsentation extrazellulärer Antigene wie Bakterien- oder Allergen-Strukturen zugrunde (. Abb. 34.1b). Diese werden von Antigenpräsentierenden Zellen (dendritische Zellen, Makrophagen) durch Endozytose aufgenommen und in sauren Endosomen zu Peptiden durch lysosomale Proteasen (Kathepsin B, D, L) fragmentiert. Man nimmt an, dass endosomale saure Vesikel mit Vesikeln aus dem endoplasmatischen Retikulum fusionieren, die membrangebundene MHCMoleküle enthalten. Diese MHC-Moleküle treten als Trimere auf und sind an der Peptidbindungsstelle durch die invariante Kette (ebenfalls als Trimer) blockiert. Erst nach Teilabbau der invarianten Kette zum CLIP (class II-associated invariant chain peptide) mit Hilfe von Kathepsinen, lysosomalen Zystein-Proteinasen und dem Austausch von CLIP gegen Antigenpeptide wird ein Transport an die Oberfläche der Zelle möglich. Dabei spielen Genprodukte des HLA-DM eine Helferrolle.

. Abb. 34.1a,b. Antigenpräsentation durch MHC-Peptidrezeptoren. a Ein Teil der intrazellulär synthetisierten Proteine wird im Proteasom fragmentiert. Die dabei entstehenden Peptide werden durch einen Transporterkomplex (TAP1/TAP2) in das endoplasmatische Retikulum transportiert, wo sie von MHC-I-Rezeptoren gebunden und mit ihnen an die Zelloberfläche befördert werden. b Extrazelluläre Antigene werden vom Rezeptor Antigen-präsentierender Zellen durch Endozytose aufgenommen und lysosomal zu Peptiden fragmentiert. Die derartige Peptide enthaltenden Lysosomen fusionieren mit aus dem Golgi-Apparat stammenden Vesikeln, welche MHC-II-Moleküle gebunden haben. Die Bindungsstelle der MHC-IIMoleküle ist durch die invariante Kette (Li) blockiert. Diese wird durch Kathepsine gespalten. Das resultierende CLIP (class II-associated invariant-chain peptide) wird durch Antigenpeptide ausgetauscht und der MHC-II-Peptidkomplex an die Zelloberfläche transportiert

34.2.3

Die Gene des HLA-Komplexes

HLA-System. Das HLA-System als für den Menschen spe-

zifische MHC-System ist ein polymorpher Genkomplex, der Membranproteine codiert, die die Basis der Diskriminierung von Selbst und Nicht-Selbst durch T-Lymphozyten bilden. Die polymorphen Gene des HLA-Komplexes liegen auf Chromosom 6, die des β2-Mikroglobulins auf Chromosom 15. Es gibt 3 Hauptgene der Klasse I, die als HLA-A, -C und -B bezeichnet werden (. Abb. 34.2a) und 6 Paare von α- und β-Ketten-Genen für die Klasse II (2u HLA-DR,

34

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34

Kapitel 34 · Immunsystem

. Abb. 34.2a,b. Aufbau des humanen MHC-Komplexes (HLA) und der entsprechenden HLA-Proteine. a Der HLA-Komplex liegt mit 7 Genloci auf dem kurzen Arm von Chromosom 6. Der HLA-D-Locus unterteilt sich in 4 Loci, die jeweils eine α- und eine β-Kette codieren. Bei HLA-DR kommt ein weiterer β-Locus hinzu. Unter Berücksichtigung der gemeinsamen Nutzung der α- bzw. β-Ketten vom mütterlichen bzw. väterlichen Chromosom verfügt jedes Individuum über 18 verschiedene HLA-Allele. b Das HLA-I-Protein ist ein integrales

Typ-I-Membranprotein. Das präsentierte Antigenpeptid (rot) findet sich in einer Vertiefung zwischen den Domänen α1 und α2. Assoziiert ist β2-Mikroglobulin, das auf Chromosom 15 codiert wird. Das HLA-IIProtein ist ein symmetrisches Heterodimer aus je einer α- und einer β-Kette. Die Antigenpeptidbindungsstelle wird durch die beiden N-terminalen Domänen gebildet (in Klammern sind die Molekulargewichte der Ketten angegeben)

2u -DP, 1u -DQ und 1u -DM). Insgesamt sind danach bei einem Individuum 6 Allele der HLA-I-Klasse (2A, 2B, 2C) und 12 Allele der HLA-II-Klasse (4DR, 4DQ, 2DM, 2DP) exprimiert. Die Gene sind bis auf HLA-DRα und HLA-DPα polymorph. Für den HLA-B-Lokus sind z.B. bisher 75 Allele bekannt. Die Zahl der verschiedenen HLA-Allele ist in den unterschiedlichen ethnischen Gruppen bzw. Rassen verschieden. Die Wahrscheinlichkeit, dass eine volle Identität der Allele zwischen 2 Personen auftritt, ist mit Ausnahme eineiiger Zwillinge extrem gering.

Assoziation an das β2-Mikroglobulin notwendig. Anders als das MHC-I-Protein ist das MHC-II-Protein ein symmetrisches Heterodimer aus einer α- und einer β-Kette. Die Peptidbindungsstelle wird durch die N-terminalen Domänen α1 und β1 gebildet. Die Länge der Peptide, die von MHC-I-Molekülen präsentiert werden, variiert zwischen 9 und 11 Aminosäuren, die der MHC-II-Moleküle zwischen 10 und 30 Aminosäuren. Neben HLA-I- und HLA-II-Strukturen befinden sich auf dem Chromosom 6 die Gene für verschiedene Komplementfaktoren, TNF-α, Substrukturen des Proteasoms sowie TAP1 und TAP2. Dieser Bereich wird als HLA-III bezeichnet. Individuelle HLA-Haplotypen zeigen Assoziationen zu bestimmten Erkrankungen, insbesondere Autoimmunerkrankungen wie Typ-I-Diabetes, bzw. zur Fähigkeit, auf bestimmte Antigene zu reagieren.

HLA-Membranstrukturen. Die . Abbildung 34.2b zeigt

schematisch den Aufbau und den Membraneinbau der HLA-Peptidrezeptoren. Das MHC-I-Protein ist ein monomeres integrales Membranprotein, dessen 3 extrazelluläre Domänen als α1–α3 bezeichnet werden. Das präsentierte Peptid befindet sich in einer Spalte zwischen den Domänen α1 und α2. Für die Funktion des MHC-I-Proteins ist seine

1109 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

Präsentation von Kohlenhydrat- und Lipidantigenen.

Weder Klasse I- noch Klasse II-HLA-Moleküle haben die Fähigkeit, Kohlenhydrat- oder Lipidantigene, wie AB0Blutgruppen-Antigene, zu präsentieren. Dies erfolgt über eine Familie von nicht polymorphen CD1-Molekülen. Sie

sind aus β2-Mikroglobulin und Glycoproteinen zusammengesetzt und werden von Antigen-präsentierenden Zellen exprimiert. Die Zellen, die diese Antigene erkennen, sind T-Zellen mit γ/δ-Rezeptor (CD4-, CD8- negative Zellen, 7 Kap. 34.3.3).

In Kürze Antigene sind Stoffe, die Lymphozyten spezifisch aktivieren: 4 Eine Immunantwort lösen nur Vollantigene oder Immunogene aus. Haptene benötigen dazu zusätzlich Protein-Carrier, die mit T-Helferzellen in Wechselwirkung treten 4 Die molekularen Bereiche, die mit Antikörpern, B- und T-Zell-Rezeptoren spezifisch in Wechselwirkung treten, werden Epitope oder Determinanten genannt 4 B-Zellen erkennen Antigene in der nativen Form, T-Zellen nur nach Prozessierung und Präsentation der Peptide durch membrangebundene MHC- bzw. HLA-Moleküle Das MHC- bzw. humane HLA-System ist ein polymorpher Genkomplex auf dem Chromosom 6, der Membranproteine codiert, die die Antigenerkennung von T-Zellen ermöglicht. Es wird in 2 Hauptklassen eingeteilt. HLA-Klasse I: 4 besteht aus den Hauptgenen A, C und B, von denen ein heterozygotes Individuum jeweils 6 Allele besitzt 4 kommt als Genprodukt in der Plasmamembran aller kernhaltigen Zellen, kombiniert mit β2-Mikroglobulin, vor

34.3

Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

34.3.1

CD-Nomenklatur

! Die zellulären Komponenten des Immunsystems werden durch Zelloberflächenmarker klassifiziert, die auch als CD-Antigene bezeichnet werden.

CD-Nomenklatur. Die Charakterisierung und Unterschei-

dung von Leukozyten und ihren Subpopulationen erfolgt durch phenotypische Marker, die an der Oberfläche der Zelle exprimiert werden. Diese Antigene wurden durch ein internationales Standardisierungskomitee unter Nutzung von Antikörpern durch eine CD (cluster of differentiation)Nummer definiert. Bisher sind mehr als 300 CD-Antigene erfasst, die jeweils durch eine Gruppe monoklonaler Antikörper mit sehr ähnlicher Spezifität charakterisiert sind. Dabei benutzt man z.B. Fluorochrom-markierte Antikörper und das Verfahren der Durchflusszytometrie. Einige wichtige CD-Antigene sind in der . Tabelle 34.2 zusam-

4 präsentiert Antigenpeptide (9–11 Aminosäuren) den T-Zell-Rezeptoren auf CD8-T-Zellen 4 wird im ER mit Peptiden beladen, die aus intrazellulär synthetisierten Proteinen durch Proteasom-katalysierte Hydrolyse entstanden sind HLA-Klasse II: 4 besteht aus den Hauptgenen DR, DQ, DM und DP, von denen ein heterozygotes Individuum jeweils insgesamt 12 Allele besitzt 4 kommt als Genprodukt auf Antigen-präsentierenden Zellen, wie dendritischen Zellen, Makrophagen und B-Zellen, vor 4 codiert jeweils eine α- und eine β-Kette 4 präsentiert Antigenpeptide (10–30 Aminosäuren) den T-Zell-Rezeptoren auf CD4-T-Zellen 4 wird in endolysosomalen Vesikeln mit Peptiden beladen, die als Proteine aus dem extrazellulären Milieu aufgenommen und durch Kathepsin-katalysierte Hydrolyse entstanden sind 4 HLA-DM-Genprodukte helfen beim Austausch der invarianten Kette gegen Peptide

mengefasst. Mit Hilfe derartiger Antigene ist es heute möglich, objektiv zwischen unterschiedlichen Differenzierungsstufen und Aktivierungszuständen von Zellen des Immunsystems und anderer Organe zu unterscheiden. Dabei werden überwiegend monoklonale Antikörper eingesetzt. Eine besondere Rolle spielen diese Antigene bei der Differentialdiagnose von Neoplasien des Immunsystems, den Leukämien und Lymphomen. Jedes Differenzierungssta. Tabelle 34.2. Diagnostisch wichtige Oberflächenantigene von Leukozyten (CD-Antigene) CD-Antigen

Zelltyp

CD 3

T-Lymphozyt

CD 4

TH, T-Helfer-Zelle

CD 8

TC, Zytotoxische T-Zelle

CD 19

B-Lymphozyt

CD 56

NK-Zelle

CD 14

Monozyt

CD 34

Stammzelle

34

1110

Kapitel 34 · Immunsystem

dium von Immunzellen (Lymphozyten, myelomonozytäre Zellen) kann ein neoplastisches Äquivalent ausprägen, was unterschiedliche therapeutische Maßnahmen notwendig macht. Für die Funktion des adaptiven Immunsystems sind die B-Lymphozyten und die T-Lymphozyten von besonderer Bedeutung.

34.3.2

Antigen-Erkennung durch Lymphozyten

T- und B-Lymphozyten verfügen über Membranrezeptoren, welche die Erkennung von präsentierten Antigenen ermöglichen.

34

MHC-Restriktion der Antigenerkennung von T-Zellen. Die entscheidende Rolle bei der adaptiven Immunantwort spielen neben den Antigen-präsentierenden Zellen (Makrophagen, dendritische Zellen, B-Lymphozyten) die Lymphozyten. Diese wichtigsten zellulären Bestandteile des Immunsystems kommen in 2 Subtypen, den T- und B-Lymphozyten vor. Nach Konvention werden diese Zellen auch als B-Zellen bzw. T-Zellen bezeichnet. Beide Typen von Lymphozyten exprimieren auf ihrer Oberfläche Rezeptoren, die Antigene hochspezifisch erkennen: B-Lymphozyten erkennen Antigene in ihrer nativen Form über den B-Zell-Rezeptor-Komplex, der ein membrangebundenes Immunglobulin enthält. T-Lymphozyten sind nicht in der Lage, gelöste native Antigene zu erkennen. Sie erkennen über den T-Zell-Rezeptor-Komplex nur Peptidfragmente (prozessierte Antigene), die auf MHC-Molekülen Antigen-präsentierender Zellen präsentiert werden sowie fremde (allogene, xenogene) MHC-Moleküle auf fremden Zellen. Danach besteht die biologische Funktion des MHCSystems in erster Linie in der Restriktion (Einschränkung) der Antigenerkennung von T-Lymphozyten und der Unterscheidung von Selbst und Nicht-Selbst durch das Immunsystem. Helfer-T-Zellen (TH) sowie zytotoxische T-Zellen (TC) erkennen Antigene nur zusammen mit HLA-Molekülen. Helfer-T-Zellen benötigen dazu MHC-Klasse-IIMoleküle, zytotoxische T-Zellen benötigen MHC-Klasse-IMoleküle. Im Falle der Abstoßungsreaktionen nach Transplantation werden fremde MHC-Moleküle des Spenders durch das Immunsystem des Empfängers direkt ohne Antigenprozessierung oder indirekt nach Antigenprozessierung und Präsentation durch Empfänger-MHC-Moleküle erkannt. Da es sich hierbei um eine allogene Situation, d.h. eine Beziehung von Molekülen von genetisch unterschiedlichen Individuen einer Spezies handelt, spricht man von Allo-Erkennung und Allo-Reaktivität. Nach Erkennung des Antigens in T-Zellen wie in BZellen werden unterschiedliche Signalkaskaden ausgelöst, die zur Aktivierung, verstärkter DNA-Synthese und klona-

. Abb. 34.3. Die klonale Expansion in der adaptiven Immunantwort. Die klonale auf das spezielle Antigen ausgerichtete Zellvermehrung von antigenspezifischen T- und B-Zellen bildet die Grundlage für die Schaffung eines ausreichenden Potentials an zellulären Immunprodukten der adaptiven Immunantwort

ler Proliferation der Lymphozyten führen (. Abb. 34.3). Damit wird ein Potential antigenspezifischer Lymphozyten geschaffen, das notwendig ist, um eine effiziente Immunantwort zu erreichen. Gleichzeitig wird ein Potential antigenspezifischer Gedächtnis-Lymphozyten erzeugt, das bei nachfolgenden Antigenkontakten schneller und noch effizienter zu reagieren vermag. Man spricht von Primär- und Sekundär-Immunantwort.

34.3.3

T-Lymphozyten

! T-Lymphozyten stehen im Zentrum der Immunantwort und können zu T-Helferzellen bzw. zu zytotoxischen oder regulatorischen T-Zellen differenzieren.

T-Zell-Entwicklung im Thymus Thymus-Funktion. Das Schlüsselereignis im Aufbau eines individuellen kompetenten protektiven Repertoires an TZellen ist der Prozess der Positiv- und Negativ-Selektion von T-Zellen in der Thymusdrüse während der Ontogenese (. Abb. 34.4). Aus dem Knochenmark in die Thymusdrüse einwandernde Lymphozyten besitzen weder charakteristische T-Lymphozytenantigene noch Antigen-spezifische T-Zell-Rezeptoren (TZR). Nach Expression entsprechender Strukturen erfolgt in der corticalen Zone eine positive Selektion, d.h. eine Auswahl solcher T-Lymphozyten, die in der Lage sind, über ihre T-Zell-Rezeptoren Selbst-MHCStrukturen zu binden. T-Zellen, die dazu nicht in der Lage sind, unterliegen der Apoptose. In der Medulla erfolgt eine Negativ-Selektion solcher T-Lymphozyten, die mit hoher Affinität an Selbst-MHC-

1111 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

. Abb. 34.4. Reifung von T-Lymphozyten im Thymus. T-Lymphozyten erlernen im Thymus die Unterscheidung zwischen Selbst und Nicht-Selbst. Im Cortex werden solche T-Zellen selektioniert, deren T-Zell-Rezeptor (TZR) in der Lage ist, eigene MHC-Moleküle zu erkennen (positive Selektion). Allerdings erfolgt während der MedullaPassage auch eine Eliminierung solcher T-Zellen, die MHC-präsentierte Autoantigene mit hoher Affinität binden. Fehlende Wechselwirkung mit MHC-Molekülen, wie hohe Affinität zu Autoantigenen sind Signale

für den apoptotischen Zelluntergang. Etwa 95% der Lymphozyten werden während der Thymuspassage eliminiert. Der überwiegende Teil der in die sekundären lymphatischen Organe einwandernden T-Lymphozyten exprimiert αβ-T-Zell-Rezeptoren. Sie sind entweder CD4- oder CD8-positiv. Etwa 10% der Thymozyten differenzieren zu γ/δ-T-Zell-Rezeptor exprimierenden T-Zellen. Diese besitzen weder CD4- noch CD8-Antigene

Moleküle des Stromas (Epithelzellen, dendritische Zellen, Makrophagen) binden, die mit körpereigenen Antigenen (Autoantigenen) beladen sind. Sie werden ebenfalls der Apoptose zugeführt. Bei diesen Vorgängen überleben weniger als 5% der Thymozyten. Die damit erreichte immunologische Toleranz wird als zentrale Toleranz von T-Lymphozyten bezeichnet. Die überwiegende Zahl der im Thymus entstehenden T-Lymphozyten, die in sekundäre lymphatische Organe auswandern, sind CD4- oder CD8-positive TZR-α/β-exprimierende Zellen. 5–10% sind CD4- und CD8-negativ und exprimieren anstelle von α/β-Ketten, γ- und δ-Ketten. Diese T-Zellen werden γδ-T-Zellen (TZR γ/δ) genannt. Neben der spezifischen Erkennung von Antigenen sind diese Zellen auch befähigt als Antigen-präsentierende Zellen zu wirken. Die Liganden dieser T-Zellen sind bisher nicht genau bekannt. Neben so genannten nichtklassischen HLA-Genprodukten werden CD1-Moleküle zusammen mit β2-Mikroglobulin als Antigen-präsentierende Strukturen für γ/δ-TZR-exprimierende T-Zellen diskutiert. Diese T-Zellen treten besonders häufig in epidermalen Zellen der Schleimhaut und Haut auf. Funktionell werden CD4-T-

Zellen in T-Helferzellen und regulatorische T-Zellen unterteilt. CD8-T-Zellen werden als zytotoxische Zellen definiert.

Helfer-T-Zellen und regulatorische T-Zellen ! CD4+-T-Zellen differenzieren zu TH-Zellen und regulatorischen T-Zellen mit unterschiedlichen Cytokinmustern.

TH1- und TH2-Zellen. Naive CD4-T-Zellen bilden nach An-

tigenkontakt Interleukin-2 (IL-2), das zur Proliferation und Ausprägung des Zelltyps TH0 führt. Aus dieser Vorläuferzelle entstehen 2 Subpopulationen, die unterschiedliche Cytokine produzieren und an unterschiedlichen Formen der Immunantwort beteiligt sind (. Abb. 34.5). T-Zellen, die vorwiegend IL-2, Interferon-γ (IFN-γ) und Tumornekrosefaktor-β (TNF-β) bilden, werden TH1-Zellen genannt. T-Zellen, die vorwiegend IL-3, IL-4, IL-5, IL-9, IL-10 und IL-13 produzieren, bezeichnet man als TH2-Zellen. Neuerdings sind weitere Populationen, so genannte immunregulatorische T-Zellen, mit immunsupprimierender Wirkung beschrieben worden. Die bekannteste Form exprimiert

34

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Kapitel 34 · Immunsystem

9 . Abb. 34.5. Bildung von TH1- und TH2-Lymphozyten. TH1-Zellen bilden sich aus naiven Vorläuferzellen unter Mitwirkung von IL-12, IL-18 und IFN-γ. Letzteres supprimiert die Differenzierung zu TH2Zellen. Die wichtigsten von TH1-Zellen gebildeten inflammatorischen Cytokine sind IL-2, IFN-γ und TNF-β (Lymphotoxin). TH2-Zellen bilden sich in Gegenwart von IL-4 und IL-10. IL-4 hemmt auch die Differenzierung zu TH1-Zellen. Die wichtigsten von TH2-Zellen gebildeten Cytokine sind IL-3, IL-4, IL-5, IL-9, IL-10 und IL-13. Sie induzieren die humoral mediierte (IgE, IgG1) allergische Entzündung. Nicht dargestellt ist die Differenzierung zu regulatorischen T-Zellen vom CD4-Typ

CD4 und CD25 sowie den Transkriptionsfaktor Foxp3. Sie wirkt über direkten Zellkontakt und ist zur Produktion der immunsuppressiven Cytokine Transforming Growth Factor-β1 (TGF-β1) und IL-10 befähigt. Die Differenzierung von TH0-Zellen zu TH1-Zellen wird durch IL-12 und IL-18 (aus Makrophagen) sowie IFN-γ, zu TH2-Zellen dagegen durch IL-4 und IL-10 vermittelt. Gleichzeitig bewirken IFN-γ und IL-4 jeweils die Hemmung der Differenzierung von TH0-Zellen zu TH2bzw. TH1-Zellen. Ähnliche TH1- bzw. TH2-Cytokinmuster wurden auch an CD8-Zellen beobachtet. Funktionell induzieren TH1-Zellen und die dort gebildeten Cytokine überwiegend eine zelluläre Immunantwort, TH2-Zellen eher eine Antikörper-abhängige humorale sowie IgE-vermittelte allergische Immunantwort. So sind bei der Lepra im Falle der tuberkulösen Form primär TH1-Zellen und bei der lepromatösen Form vor allem TH2-Zellen für den Krankheitsverlauf verantwortlich. In Kürze

34

T-Lymphozyten stehen im Zentrum der Immunantwort: 4 Sie erkennen Antigene nur im Kontext mit HLA-Molekülen. CD4-Zellen benötigen MHC-II-Moleküle, CD8Zellen MHC-I-Moleküle 4 Sie reifen im Thymus, wo sie durch positive und negative Selektion die Fähigkeit zur Unterscheidung von Selbst und Nicht-Selbst erlernen (zentrale Toleranz) Den Thymus verlassende Zellen sind: 4 α/β-T-Zell-Rezeptoren tragende CD4-T-Zellen, die Helferzellen genannt werden (TH) 4 α/β-T-Zell-Rezeptoren tragende CD8-T-Zellen, die auch zytotoxische T-Zellen genannt werden 4 γ/δ-T-Zell-Rezeptoren tragende CD8/CD4-T-Zellen

Molekulare Mechanismen der T-Zell-Aktivierung ! Der T-Zell-Antigen-Rezeptor ist mit CD3 assoziiert.

T-Zell-Antigen-Rezeptor-Komplex. Die von MHC-Molekülen präsentierten Antigenpeptide werden von der T-Zelle durch den T-Zell-Rezeptor-Komplex spezifisch erkannt. Der Plasmamembran-ständige T-Zell-Rezeptor ist ein He-

4 CD4-T-Zellen differenzieren während der Immunantwort in TH1- und TH2-Zellen mit unterschiedlichen Cytokinmustern: 4 TH1-Zellen entstehen unter Mitwirkung von IL-12 und IL-18 und bilden die inflammatorischen, die zelluläre Immunantwort befördernden Cytokine IL-2, IFN-γ und TNF-β 4 TH2-Zellen entstehen unter Mitwirkung von IL-4 und IL-10 und bilden die Cytokine IL-4, IL-5, IL-9, IL-10 und IL-13, die wesentlich an der humoralen Immunantwort beteiligt sind 4 Immunregulatorische T-Zellen (Suppressorzellen) haben eine immunsupprimierende Wirkung und bilden TGF-β1 und IL-10

terodimer, das über eine Disulfidbrücke verbunden und mit verschiedenen signaltransduzierenden Membranmolekülen, die zusammen als CD3-Komplex bezeichnet werden, assoziiert ist (. Abb. 34.6). Von den T-Zellen benutzen 90–95% eine α- und eine β-Kette im TZR. Der Rest trägt eine γ- und eine δ-Kette. Beide TZR-Formen sind Produkte von Genumlagerungen

1113 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

morph. Der TZR α/β oder γ/δ bildet mit dem CD3-Komplex in der Plasmamembran einen signaltransduzierenden Komplex, dessen unterschiedlichen Bestandteilen verschiedene Funktionen zukommen. Die CD3-Komponenten sind für die Signalweiterleitung verantwortlich. ! Die Aktivierung von T-Lymphozyten benötigt mehrere Signale.

Das erste Signal der T-Zell-Aktivierung. Die Aktivierung

. Abb. 34.6. Schematische Darstellung des T-Zell-RezeptorKomplexes. Der Antigen-bindende T-Zell-Rezeptor (TZR) kann aus α- und β-Ketten oder aus γ- und δ-Ketten zusammengesetzt sein. Für die Signalweiterleitung nach Antigenbindung sind Strukturen des CD3-Komplexes, bestehend aus den Heterodimeren εγ und δε sowie das ξξ-Homodimer verantwortlich. Diese Strukturen weisen in ihrem cytoplasmatischen Teil ITAM (immunoreceptor tyrosine-based activation motif )-Peptidsequenzen auf

(gene rearrangement). Diese Genumlagerungen erfolgen in ähnlicher Weise wie die der Immunglobulingene (7 Kap. 34.3.4.5). Sie erklären die Vielzahl der möglichen antigenspezifischen T-Zell-Rezeptoren, die für α/β-T-Zell-Rezeptoren auf 1015 geschätzt wird. Dabei werden im Falle der β- und δ-Kette diskontinuierliche Gensegmente der variablen (V), diversifizierenden (D), verbindenden (J) und konstanten (C) Regionen rearrangiert. Bei der α- und γ-Kette fehlen die Diversitätsregionen. Die aminoterminale, variable Domäne (VDJ oder VJ) ist hochpolymorph und definiert die Antigenspezifität. Die konstante Domäne (C) ist mono-

. Abb. 34.7a–c. Schematische Darstellung der Schritte der T-ZellAktivierung und Terminierung der T-Zell-Immunantwort. a Der erste Schritt ist die Ausbildung eines dreidimensionalen Komplexes zwischen MHC, Antigenpeptid und T-Zell-Rezeptor (TZR) unter Mithilfe von CD4 (oder CD8) und Adhäsionsmolekülen (in der Abb. nicht dargestellt). Diese Wechselwirkung ist notwendig, aber nicht hinreichend. Ohne weitere Signale erfolgt keine Immunantwort (Anergie, periphere Toleranz). b Professionelle Antigen-präsentierende Zellen exprimieren B7-Moleküle (CD80/CD86), die als Liganden von CD28 auf T-Zellen das 2. Aktivierungssignal liefern. Durch inflammatorische

von T-Lymphozyten ist ein mehrstufiger Prozess. Dies gilt für die Aktivierung von naiven T-Zellen über Antigen-präsentierende Zellen (APZ) ebenso wie für die von T-Effektorzellen durch Zielzellen (Tumor-, Virus-infizierte Zellen). Im Falle der primären Aktivierung von T-Zellen, z.B. in der paracorticalen Zone des Lymphknotens, kommt es zunächst zu einer unspezifischen Wechselwirkung zwischen APZ und T-Zellen über Adhäsionsmoleküle. Professionelle APZ wie dendritische Zellen, Makrophagen oder B-Zellen exprimieren z.B. Adhäsionsmoleküle der Ig-Superfamilie wie LFA-3 (lymphocyte function-associated antigen), ICAM-1 und -2 (intracellular adhesion molecule) sowie Integrine wie LFA-1, die mit entsprechenden Strukturen auf der Oberfläche von T-Zellen, wie CD2, LFA-1 sowie ICAM-3 interagieren. Damit ist die Voraussetzung für die spezifische Aggregation von Antigen-beladenen MHC-Molekülen und T-Zell-Rezeptoren (TZR) auf den entsprechenden Zellen gegeben. Durch diesen Kontakt kommt es zur Stabilisierung der Wechselwirkung der Zellen. Essentiell für die Aktivierung sind die Oberflächenstrukturen CD4 und CD8

Cytokine wie IL-2 oder IFN-γ wird der Restriktionspunkt G1/S im Zellzyklus überwunden und die T-Zelle in die Mitosephase überführt. Ein weiteres Aktivierungssignal wird durch die Wechselwirkung von ICOS (inducible costimulator) auf T-Zellen und B7RP-1 auf Antigenpräsentierenden Zellen (APZ) bereitgestellt (nicht dargestellt). c Mit der Aktivierung wird auf T-Zellen CTLA-4 induziert, das mit CD80/86 um die Bindung zu CD28 konkurriert. CTLA-4-Wechselwirkung mit CD80/86 führt zur Suppression der Proliferation und damit zur Terminierung der T-Zell-Aktivierung

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Kapitel 34 · Immunsystem

. Abb. 34.8. Schematische Darstellungen der Strukturen der Corezeptoren CD4 und CD8. Die beiden N-terminalen Domänen von CD4 binden an MHC-II-Moleküle. CD8 besteht aus einem über eine Disulfidbrücke verbundenen Heterodimer. Die Ig-Domäne tritt in Wechselwirkung mit MHC-I-Strukturen auf Antigen-präsentierenden Zellen. Der cytoplasmatische Teil beider Corezeptoren ist konstitutiv mit der Tyrosinkinase Lck assoziiert. CD4 wie CD8 sind auch Rezeptoren für HI-Viren

Terminierung der T-Zellaktivierung. Mit der Aktivierung der T-Lymphozyten wird auf diesen eine weitere Oberflächenstruktur, CTLA-4 (cytotoxic T lymphocyte antigen), exprimiert. CTLA-4 hat eine ähnliche Struktur wie CD28, bindet allerdings Mitglieder der B7-Familie mit wesentlich höherer Affinität. Im Gegensatz zu CD28 liefert CTLA-4 ein negatives Signal an die T-Zellen. Damit werden weniger inflammatorische Cytokine und deren Rezeptoren gebildet und die Immunantwort supprimiert (. Abb. 34.7c). Die Bedeutung von CTLA-4 für die Terminierung der T-Zellaktivierung wird auch dadurch deutlich, dass Mäuse, in denen das CTLA-4-Gen ausgeschaltet ist, eine massive Lymphozytenproliferation aufweisen. Inzwischen wird CTLA-4 auch als Immunsuppressivum in der Behandlung von Autoimmunkrankheiten und Transplantatabstoßungen erprobt.

Signalübertragung in T-Lymphozyten

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der T-Zellen, die mit MHC-II- bzw. MHC-I-Molekülen direkt in Wechselwirkung treten (. Abb. 34.7a). CD4 ist ein einkettiges, aus 4 Ig-ähnlichen Domänen aufgebautes Membranmolekül, CD8 ist ein aus einer α- und einer β-Kette bestehendes und über eine Disulfidbrücke verbundenes Heterodimer mit jeweils einer Igähnlichen Domäne. Beide MHC-Liganden besitzen cytoplasmatische Domänen, an die sich die Tyrosinkinase Lck anlagern kann (. Abb. 34.8). Sie ist für einen der ersten Schritte der Signalweiterleitung bei der T-Zellaktivierung verantwortlich. Mit der Ausbildung des dreidimensionalen Komplexes zwischen MHC, Antigenpeptid, TZR und CD4 oder CD8 ist das 1. Signal für die Aktivierung von T-Zellen generiert. Allerdings genügt dieses Signal nicht, um eine Zellvermehrung auszulösen. Ohne weitere Signale verbleibt die T-Zelle trotz Antigenkontakt im Zustand der Anergie. Dieser Zustand wird als periphere Immuntoleranz bezeichnet und schützt neben der zentralen Immuntoleranz gesundes Gewebe vor einer autoimmunologischen Zerstörung. Das 2. und 3. Signal der T-Zell-Aktivierung. Das 2. Signal (costimulatorisches Signal) wird durch professionelle APZ über ein B7-Molekül vermittelt, das zu einer Gruppe verwandter Glycoproteine gehört. Die bekanntesten sind B7.1 (CD80) und B7.2 (CD86). Ihr Ligand auf der T-Zelle ist CD28, ein konstitutiv exprimiertes, zur Gruppe der Ig-Superfamilie gehörendes Membranprotein. Durch das 2. Signal werden T-Zellen in die G1-Phase des Zellzyklus überführt. Die Überwindung des Restriktionspunkts G1/S des Zellzyklus erfolgt unter Mithilfe inflammatorischer Cytokine wie IL-2, die über spezifische Rezeptoren auf die T-Zelle wirken (7 Kap. 25.8.5). Aktivierte T-Zellen sind in der Lage, sowohl IL-2 als auch dessen Rezeptorstruktur vermehrt zu bilden. Mit diesem 3. Signal wird die klonale Proliferation eingeleitet (. Abb. 34.7b). ! CTLA-4-Wechselwirkung mit CD80/86 liefert ein negatives Signal.

Molekulare Mechanismen der Signalübertragung in T-Zellen. Die ersten Schritte der T-Zellaktivierung (. Abb. 34.9)

nach Antigenbindung sind verbunden mit einer Aggregation von Substrukturen des TZR-CD3-Komplexes, CD4 (oder CD8) und CD45, einer Tyrosinphosphatase, in der Plasmamembran. Durch die räumliche Annäherung können die an der cytoplasmatischen Domäne der Corezeptoren CD4 und CD8 angelagerte Tyrosinkinase Lck und die am CD3ξ-Komplex angelagerte cytoplasmatische Tyrosinkinase Fyn durch CD45, eine Phosphatase, dephosphoryliert und dadurch aktiviert werden. Lck und Fyn katalysieren die Phosphorylierung der cytoplasmatischen Domänen von CD3ε und das ξ-Protein. Die so veränderten Strukturbereiche sind Bindungsstellen (Motive) für ZAP-70 (ξ-assoziiertes Protein 70). Derartige Tyrosin-phosphorylierte Sequenzen werden ITAMs genannt (ImmunorezeptorTyrosin-abhängige Aktivierungs-Motive). An ITAMs gebundenes ZAP-70 wird mit Hilfe von Fyn und Lck durch Phosphorylierung aktiviert. Die Aktivierung von ZAP-70 ist die Initialreaktion zur Auslösung folgender Signalkaskaden, dem Ras/Fos-Weg und der Aktivierung der Phospholipase Cγ die im Inositol-Trisphosphat-Weg und im Diacylglycerin/PKC-Weg münden (7 Kap. 25). Ras aktiviert über MAP-Kinasen Fos, eine Komponente des Transkriptionsfaktors AP-1. Inositol-Trisphosphat bewirkt eine Ca2+-Mobilisierung aus intra- und extrazellulären Ressourcen, was zu einer Aktivierung der Proteinphosphatase Calcineurin (7 Kap. 25.4.5, 9.2.1) führt. Die Dephosphorylierung von NFAT-1 (nuclear factor of activated T cells) durch Calcineurin führt zu einer Translokation von NFAT-1 in den Zellkern. Im Zellkern bindet NFAT-1 an AP-1 und bildet so einen aktiven Transkriptionsfaktor. Diacylglycerin aktiviert die Proteinkinase C, die eine zentrale Rolle in der Induktion des Transkriptionsfaktors NFN% spielt. Alle drei genannten Transkriptionsfaktoren sind für die Anschaltung der Produktion von Cytokinen und/oder

1115 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

. Abb. 34.10. Aktivierung von T-Zellen durch Superantigene. Superantigene werden nicht zur Antigenpräsentation durch Proteasen prozessiert. Sie binden als intaktes Antigen einerseits an die β-Kette des TZR-CD3-Komplexes und andererseits an die β-Kette der MHC-Klasse-II-Moleküle Antigen-präsentierender Zellen (APZ). Mit dieser Verbrückung leiten sie die T-Zell-Aktivierung ein

die Hemmung von Calcineurin im Sinne einer spezifischen Suppression der IL-2-Produktion.

Superantigene ! Superantigene werden ohne Prozessierung den T-Zellen präsentiert.

Superantigene. Normale Antigene werden nach Prozessie. Abb. 34.9. Molekulare Mechanismen der Signalübertragung im T-Lymphozyten. Die Bindung des MHC-Antigenpeptids an den TZR-CD3-Komplex bewirkt eine Aggregation von Adhäsionsstrukturen und Corezeptoren (CD4 bzw. CD8), einschließlich CD45. Dies führt zur Dephosphorylierung und Aktivierung der CD4-(CD28-)assoziierten Tyrosinkinase Lck und der ξ-assoziierten Tyrosinkinase Fyn. Lck und Fyn phosphorylieren Tyrosin-Reste im cytoplasmatischen Teil von CD3ε sowie ξ. Die so veränderten Strukturen (ITAMs) sind Bindungsmotive für ZAP70. ZAP70 wird durch Lck und Fyn mittels Phosphorylierung aktiviert. Diese Aktivierung ist die Initialreaktion zur Einleitung von 3 Signalkaskaden. Durch Aktivierung der PhospholipaseC-γ entstehen aus Phosphatidylinositol Diacylglycerin (DAG) und Inositoltriphosphat (InsP3), die Ausgangsstrukturen für 2 unterschiedliche Signalwege sind. Parallel dazu wird Ras, ein GTP-bindendes Protein aktiviert, das die Aktivierung von Fos bewirkt, welches mit Jun zusammen den Transkriptionsfaktor AP-1 bildet. Die drei Transkriptionsfaktoren Fos, NFAT und NFκB aktivieren die Expression von Genen, die die Voraussetzung für die Vermehrung und Differenzierung von T-Zellen sind. IL-2 als T-Zell-Wachstumsfaktor spielt hier eine Schlüsselrolle. Allerdings ist für die Produktion von IL-2 die Costimulation über CD28 essentiell. AP-1 = activator protein-1; MAPK = mitogen activated protein kinase; NFκB = nuclear factor κB; NFAT = nuclear factor of activated T cells

die Aktivierung von Effektorzellen (CD8-Zellen) wichtig. Über wachstumsstimulierende Cytokine, wie IL-2, werden T-Zellen in die S-Phase des Zellzyklus überführt und die klonale Proliferation eingeleitet. Manche Hemmstoffe der Immunantwort wie Cyclosporin A oder FK506 wirken über

rung als Peptide in der Grube des variablen Teils der HLAMoleküle präsentiert. Superantigene sind bakterielle, retrovirale, aber auch endogene Produkte, die in ihrer nativen Form ohne Prozessierung direkt an weniger variable Bereiche der β-Kette des TZR und des MHC-II-Moleküls, außerhalb der klassischen Antigen-Bindungsstelle, binden (. Abb. 34.10). Sie stimulieren sowohl naive wie Gedächtnis-T-Zellen. Im Gegensatz zur normalen Immunantwort, in die 0,01–0,0001% der T-Zellen einbezogen werden, sind es bei den Superantigenen 5–30%. Die bekanntesten Superantigene stammen aus Streptokokken und Staphylokokken. Die mit der polyklonalen Aktivierung des Immunsystems verbundene, extrem erhöhte Cytokinproduktion ist für die mit Superantigeninfektionen verbundenen Schockzustände verantwortlich.

Zytotoxische T-Zellen in der adaptiven Immunantwort ! Zytotoxische T-Zellen greifen Zellen mit extrazellulären und intrazellulären Fremdstrukturen an.

Zytotoxische T-Zellen in der adaptiven Immunantwort.

Während CD4-positive TH-Zellen (T-Helfer-Zellen) ihre Hauptfunktion in der Helferfunktion und der Produktion spezieller Cytokine haben, wirken CD8-positive T-Zellen in der adaptiven Immunantwort vorwiegend als zytotoxi-

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Kapitel 34 · Immunsystem

. Abb. 34.11a–e. Mechanismen der zellulären Zytotoxizität von TC-Zellen. Die Wirkung von TC-Zellen besteht in der direkten antigenspezifischen Zytolyse von virusinfizierten Zellen oder transformierten Zellen, z.B. Tumorzellen durch Perforin und Granzyme (a) oder über die Wechselwirkung zwischen Fas und Fas-Ligand (b). In beiden Fällen kommt es zur Aktivierung von Caspasen und damit zur Apoptose der

Zielzellen. Auch Zellen, die intrazelluläre Antigene aufweisen, werden von TC-Zellen angegriffen. Intrazelluläre Bakterien können durch IFN-γ induziertes NO abgetötet werden, ohne dass die Zelle zerstört wird (c). Daneben können Bakterien enthaltende Makrophagen in die Apoptose überführt und die frei werdenden Bakterien durch Granulysin (d) und/oder durch aktivierte Makrophagen (e) abgetötet werden

sche T-Zellen (TC-Zellen, cytotoxic T cells). Die Wirkung von zytotoxischen Effektor-T-Zellen besteht: 4 in der direkten Antigen-spezifischen Zytolyse von virusinfizierten Zellen, Tumorzellen oder anderen veränderten körpereigenen Zellen 4 in der antigenspezifischen Zytolyse von Makrophagen, in denen sich Bakterien vermehren sowie 4 in der direkten oder indirekten Abtötung von intrazellulären Bakterien, ohne dass die Wirtszelle zerstört wird

Im zweiten Fall wird die Induktion der Apoptose durch die nichtkonstitutive Expression von Fas (CD95, Apo-1) auf aktivierten Zellen des Organismus und dessen Wechselwirkung mit Fas-Ligand bewirkt (7 Kap. 7.1.5). Der Apoptose-Rezeptor Fas (CD95, Apo-1) ist ein 45-kDa-Protein, das konstitutiv auf Immunzellen, auf Zellen der Leber, Lunge und Nieren exprimiert wird. Auf anderen Zellen, z.B. den β-Zellen der Langerhans-Inseln des Pankreas erfolgt dies unter den Bedingungen einer Entzündung (Insulitis) oder einer Autoimmunerkrankung (Diabetes mellitus Typ I) und führt zum Absterben der β-Zellen durch Apoptose. Der Fas-Ligand (Fas-L) ist ein 40-kDa-Typ-II-Membran-Protein, das zur TNF-α-Familie gehört. Es wird auf aktivierten T-Lymphozyten exprimiert und spielt zusammen mit Fas eine zentrale Rolle bei der Homöostase des Immunsystems. Die nicht konstitutive Expression von Fas auf Zellen verschiedener Organe ist ein wichtiger pathogenetischer Mechanismus von organspezifischen Autoimmunerkrankungen, wie Diabetes mellitus Typ I oder multipler Sklerose.

Hinsichtlich der Zytolyse können 2 Mechanismen unterschieden werden. In beiden Fällen wird die Zielzelle durch TC-Zellen über den Vorgang der Apoptose zerstört. Im ersten Fall erfolgt dies durch die Freisetzung von Inhaltsstoffen zytolytischer Granula der TC-Zellen. Dabei wirkt zunächst Perforin als porenbildendes Protein in der Plasmamembran, gefolgt von Kathepsin C, das zur Aktivierung von Granzymen führt. Die Apoptose selbst wird durch die Aktivierung von Caspasen (7 Kap. 7.1.5) durch aktivierte Granzyme eingeleitet.

1117 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

Neben der zytolytischen Wirkung von zytotoxischen T-Zellen (TC-Zellen) auf Virus-, Tumor- oder Autoantigen- bzw. Fas-exprimierende Zellen sind TC-Zellen auch an der spezifischen antibakteriellen Abwehr beteiligt (. Abb. 34.11a–e). Bakterien können indirekt durch IFN-γinduzierte intrazelluläre Abwehrmechanismen (z.B. NO) abgetötet werden (. Abb. 34.11c), ohne dass die Wirtszelle zerstört wird. Alternativ besteht die Möglichkeit der Perforin-eingeleiteten Zytolyse, bei der das in den zytotoxischen Granula vorkommende antimikrobiell wirkende Granulysin die Abtötung der Bakterien übernimmt (. Abb. 34.11d). Granulysin gehört zur Gruppe der Saponin-ähnlichen Proteine. Es ähnelt den in NK-Zellen vorkommenden NKLysinen. Granulysin bindet an Lipidbestandteile von Bakterienmembranen und aktiviert die Glucosylceramidase sowie die Sphingomyelinase. Das dabei gebildete Ceramid wirkt apoptotisch.

Schließlich können intrazellulär vorkommende Bakterien durch Zytolyse freigesetzt und durch aktivierte Makrophagen aufgenommen und abgetötet werden (. Abb. 34.11e). Antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität (ADCC, antibody dependent cellular cytotoxicity). Auch Antikörper

wirken an adaptiven Zytolysemechanismen mit, ohne dass T-Zell-Rezeptoren benötigt werden. Über Fc-Rezeptoren werden Antikörper an T- oder B-Zellen sowie Makrophagen gebunden. Die Wechselwirkung von mit Antikörpern bewaffneten Immunzellen mit Zielzellen führt zu einem zytolytischen Signal in der Zielzelle. Man spricht von einer antikörperabhängigen zellulären Zytotoxizität (ADCC). Dabei erfolgt über Antikörper eine Kopplung der unspezifischen und spezifischen Immunreaktion.

In Kürze Der T-Zell-Antigen-Rezeptor-Komplex besteht aus: 4 einem Plasmamembran-ständigen α/β-KettenHeterodimer oder einem γ/δ-Ketten-Heterodimer, das spezifisch Antigene erkennt sowie 4 einem CD3-Komplex, bestehend aus ε/γ- und ε/δHeterodimeren und 4 einem ξξ-Homodimer, die die Signalweiterleitung in die Zelle nach Antigenbindung übernehmen Die antigenspezifische Aktivierung von T-Lymphozyten führt zur klonalen Proliferation. Wesentliche Teilschritte sind die: 4 unspezifische Wechselwirkung zwischen Antigenpräsentierenden Zellen und T-Zellen über Adhäsionsmoleküle, einschließlich CD4 und MHC-II sowie CD8 und MHC-I 4 spezifische Wechselwirkung von MHC-I- oder MHC-IIpräsentierten Antigenpeptiden mit dem T-Zell-Rezeptor 4 Wechselwirkung über die costimulatorischen Strukturen CD28 auf T-Zellen und B7 (CD80/86) auf Antigen-präsentierenden Zellen 4 Überwindung des Restriktionspunkts G1/S und Einleitung der Proliferation mit Hilfe von Cytokinen, z.B. IL-2 Die Signalübertragung in T-Zellen erfolgt über CD3ε und ξ. Wesentliche Schritte sind die: 4 Dephosphorylierung der Tyrosinkinasen Lck und Fyn 4 Phosphorylierung von CD3ε und ξ, Bildung von ITAMs und Anlagerung von ZAP-70 4 Phosphorylierung und Aktivierung von ZAP-70 durch Fyn und Lck Initiierung der Signalkaskaden Ras/Fos-Weg, InositolTrisphosphat-Weg und Diacylglycerol/PKC-Weg, 4 Anschaltung der Produktion von Cytokinen (IL-2)

Die Aktivierung wird terminiert durch die Wechselwirkung von CD28 und CTLA-4. Superantigene sind mikrobielle oder endogene Produkte, die ohne Prozessierung direkt mit weniger variablen Bereichen der β-Kette des TZR und HLA-II-Molekülen reagieren und zur massiven T-Zell-Proliferation und extrem erhöhter Cytokinproduktion führen. Zytotoxische Lymphozyten (TC) greifen Zellen mit extrazellulär und intrazellulär exprimierter Fremdstruktur an. TC-Zellen bewirken: 4 eine antigenabhängige, spezifische Lyse von z.B. virusinfizierten Zellen 4 eine antigenspezifische Lyse von Makrophagen, die intrazellulär Bakterien enthalten 4 eine direkte oder indirekte Abtötung von intrazellulären Bakterien und Viren Der Hauptmechanismus der Zytolyse ist die Apoptose. Sie wird erreicht durch: 4 Granula-Inhaltsstoffe von T-Zellen wie Granzymen und Kathepsin C 4 Fas-/Fas-Ligand-Wechselwirkung Die Abtötung der Mikroorganismen erfolgt durch: 4 NO 4 Granulysin 4 nach zytolytischer Freisetzung durch aktivierte Makrophagen Die antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität (ADCC, antibody dependent cellular cytotoxicity) ist unabhängig vom TZR und nutzt zur Antigenerkennung Fc-Rezeptorgebundene Antikörper. Die Zytolysemechanismen sind die gleichen wie oben beschrieben.

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Kapitel 34 · Immunsystem

34.3.4

B-Lymphozyten

Aufbau und Vorkommen von Antikörpern ! Antikörper sind die Moleküle, die die humorale Immunantwort durch Erkennung und Bindung von Antigenen einleiten.

Antikörper zirkulieren als Produkte von Plasmazellen im Blut. Auf der Oberfläche von allen B-Lymphozyten, an der sie über eine Transmembransequenz fixiert sind, fungieren sie als Membranrezeptoren für Antigene (7 Kap. 34.2.1). Lösliche Antikörper des Bluts sind bei der elektrophoretischen Auftrennung der Plasmaproteine in der γ-Globulinfraktion nachweisbar und werden deshalb auch als Immunglobuline bezeichnet. Die in der Elektrophorese einheitliche Fraktion der γ-Globuline lässt sich durch Immunelektrophorese (7 Kap. 29.6.2) in 5 Hauptfraktionen auftrennen, die zwar einen prinzipiell gleichen Aufbau zeigen, sich aber durch die Aminosäuresequenz einzelner Abschnitte (und damit in der Konformation), ihrem Kohlenhydratgehalt, ihren Molekularmassen, ihren Sedimentationskoeffizienten und ihren biochemischen Funktionen unterscheiden (7 Kap. 34.3.4.3). Sie werden als IgG, IgA, IgM, IgD und IgE bezeichnet (. Tabelle 34.3). ! Die Grundstruktur der Immunglobuline besteht aus 2 leichten und 2 schweren Ketten.

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Grundstruktur der Immunglobuline. Das Immunglobulin G, das als Prototyp der Antikörper gilt, ist ein symmetrisch gebautes, vierkettiges Protein, dessen Untereinheiten durch nicht-covalente Bindungen und Disulfidbrücken zusammengehalten werden. Nach Lösung dieser Bindungen (durch Mercaptoethanol und Harnstoff) entstehen 2 Kettenpaare, die aufgrund ihrer unterschiedlichen Molekularmassen als schwere (heavy oder H) und leichte (light oder L) Ketten bezeichnet werden (. Abb. 34.12). Wird das Immunglobulin einer proteolytischen Spaltung (z.B. mit Papain, einer pflanzlichen Protease) unterzogen, so entstehen 3 Bruchstücke, von denen sich 2 jeweils aus der L-Kette und dem N-terminalen Ende der H-Kette zusammensetzen: Sie heißen Fab-Fragmente, da an diesem Teil des Moleküls das Antigen gebunden wird (Fab = Fragment, das das Antigen bindet). Das 3. ist das Fc-Fragment (c deshalb, weil es leicht

. Abb. 34.12. Aufbau eines Antikörpers der IgG-Klasse. Die Ketten sind über nicht-covalente Bindungen sowie drei Disulfidbrücken miteinander verbunden. Auch innerhalb einer Kette werden jeweils in einer Homologieregion (VL, CL, VH, CH1, CH2, CH3) Disulfidbrücken ausgebildet. Aufspaltung mit Papain führt zu zwei Fab- und einem Fc-Fragment. Blau hervorgehoben ist der Kohlenhydratanteil. Die variablen Bereiche bestimmen die Spezifität der antigenbindenden Stelle. Da der Antikörper 2 Fab-Fragmente besitzt, ist er bivalent. IgM besitzt 4 CH-Domänen (CH1–CH4, nicht gezeigt)

kristallisierbar ist), ein Glycoprotein, das abhängig vom Isotyp mindestens 2 jeweils verzweigte Ketten aus etwa 9 Hexoseresten enthält. Es bestimmt die Klasse (IgG, IgA etc.), die Halbwertszeit, die Komplementfixierung sowie die Plazentapassage und dient wegen seiner Fähigkeit der Komplementfixierung vorwiegend der zweiten, wichtigen Funktion der Antikörper, nämlich der Aktivierung der Abwehrmechanismen. IgG hat an seiner H-Kette nur eine Ngebundene Kohlenhydratkette, alle anderen Isotypen mindestens 5, die sich über alle CH- Domänen verteilen. Das IgG-Molekül besitzt eine Y-förmige Gestalt, wobei die beiden Schenkel des Ypsilons (die Fab-Fragmente)

. Tabelle 34.3. Die Immunglobuline des Humanserums IgG

IgA

IgM

IgD

IgE

Molekularmasse

150 kDa

160 kDa (+ Aggregate)

900 kDa (+ Aggregate)

184 kDa

190 kDa

Schwere Ketten

γ

α

μ

δ

ε

Leichte Ketten

κ/λ

κ/λ

κ/λ

κ/λ

κ/λ

Gesamtkohlenhydrate [%]

2,9

7,5

10,9

Gehalt im Normalplasma [g/l]

8–18

0,9–4,5

0,6–2,8

10,7 0,003–0,4

1–14 u 10–4

1119 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

Die Domänen ordnen sich in 2 Ebenen antiparalleler Faltblattstrukturen an, die einen hydrophoben Kern abschirmen und über eine Disulfidbrücke verbunden sind. Die V-Regionen je einer L- und einer H-Kette bilden zusammen einen sich nach oben erweiternden Spalt in den das Antigenmolekül über spezifische Haftstellen eingelagert wird. Den Domänen können unterschiedliche Funktionen zugeordnet werden: der V-Region die Antikörperspezifität, der C-Region z.B. die Komplementaktivierung (7 Kap. 34.4) und die Plazentagängigkeit des Immunglobulin G. Die Übergangsregionen zwischen den Domänen, die sog. Switch- oder Umstellregionen zwischen V- und C-Teil sowie die sog. Hinge- oder Scharnierregionen, die Fab und Fc verbinden (bzw. CH1 und CH2), weisen eine große Flexibilität der Konformation auf, welche eine Vielzahl möglicher räumlicher Anordnungen des Gesamtmoleküls erlaubt. Wechselwirkungen von Antigenen mit den hypervariablen Regionen der Antikörper werden durch nichtcovalente Bindungen bestimmt. Domänenstruktur der Immunglobuline. Antikörper bin-

. Abb. 34.13. Flexibilität von Antikörpern durch freie Drehbarkeit ihrer Schenkel (Y-Modell). Fab Antigen bindendes Fragment; a Bindungsstelle für Antigen; Fc kristallisierbares Fragment; Disulfidbrücken sind in blau dargestellt

durch die L-Ketten und Teile der H-Ketten gebildet werden. Die Fab-Fragmente sind frei schwenkbar (!) und tragen an den beiden Enden Bindungsstellen für das Antigen (. Abb. 34.13). ! Die Ketten weisen jeweils einen variablen und einen konstanten Anteil auf.

H- und L-Ketten aller Immunglobuline besitzen einen invariablen (konstanten) carboxylterminalen und einen variablen Teil. Bei L-Ketten macht der variable Teil 108 von 211–221 Aminosäureresten aus, bei H-Ketten sind dies 110 von 440 Aminosäuren. Die Ketten zeigen untereinander und in einzelnen Abschnitten derselben Kette Homologien: So sind die konstanten Regionen der leichten und schweren Ketten einander homolog, die konstante Region der H-Kette besteht aus drei, bei IgM vier Abschnitten (CH1, CH2, CH3, CH4), die untereinander und zu den konstanten Regionen der leichten Ketten (CL) homolog sind. Jede Homologieregion besitzt eine intrapeptidische Disulfidbrücke und wird als Ig-Domäne bezeichnet.

Funktion von Immunglobulinen ! Die einzelnen Domänen in Immunglobulinen besitzen unterschiedliche Funktionen.

den Antigene, deren Oberflächen komplementär zu denen der Antikörper sind. Bei kleineren Antigenen, wie Haptenen, erfolgt die Bindung in der Vertiefung zwischen H- und L-Ketten. Bei großen Antigenen, wie Proteinen, die eine ähnliche Dimension wie die Antikörper selbst haben können, erfolgt die Bindung über ausgedehnte Kontaktstellen auch planar. Innerhalb der variablen Teile der Immunglobuline unterscheidet man so genannte hypervariable Regionen. Die hypervariablen Regionen der schweren und leichten Ketten bilden jeweils gemeinsame hypervariable Domänen, die die Antigenbindungsstellen repräsentieren. Da die Oberflächenstrukturen der antigenbindenden Regionen komplementär zu denen der Antigene sind, werden diese für die H- und L-Ketten als CDR1-, CDR2- und CDR3-Regionen (Komplementarität determinierende Region) bezeichnet. Da die Bindung des Antikörpers an das Antigen möglichst schnell ablaufen soll, darf die Energie der auszubildenden Bindung nicht allzu hoch sein. Erst die räumliche Anordnung von Wasserstoffbrückenbindungen und hydrophoben Wechselwirkungen bringt die erforderliche Spezifität der Bindungsstelle des Antikörpers hervor. Durch den Besitz mehrerer Bindungsstellen kann der Antikörper mit 2 Antigenmolekülen in Wechselwirkung treten. Das ist von großem Vorteil bei der Abwehr von Mikroorganismen, die auf ihrer Oberfläche eine Fülle identischer Antigene besitzen. So können in Gegenwart spezifischer Antikörper größere Aggregate (Präzipitate, Agglutinate) entstehen, die über Antikörperbrücken verbunden sind und von Granulozyten und Makrophagen besser phagozytiert werden. ! Antikörper neutralisieren Pathogene und sind ein Verbindungsglied zwischen unspezifischer und spezifischer Immunität.

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Kapitel 34 · Immunsystem

Biologische Funktionen der Immunglobuline. Die von Plasmazellen gebildeten Antikörper tragen auf unterschiedliche Weise zur Immunität bei: zum einen binden sie den Krankheitserreger und verhindern dadurch seinen Eintritt in Gewebe und Zellen (Neutralisierung), zum anderen verändern sie seine Oberfläche durch ihre Bindung an Oberflächenproteine. Dieser auch als Opsonierung bezeichnete Vorgang macht den Krankheitserreger für phagozytierende Zellen kenntlich, die ihn über Fc-Rezeptoren aufnehmen. Eine Alternative ist die durch Antikörperbindung ausgelöste Aktivierung des Komplementsystems oder der antikörperabhängigen zellulären Zytotoxizität (ADCC) von T-Lymphozyten und Makrophagen. Welcher Effektormechanismus zum Tragen kommt, wird durch die Immunglobulinklasse (oder Isotyp) bestimmt. ! Die einzelnen Immunglobulinklassen besitzen unterschiedliche Funktionen.

Immunglobulinklassen

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Immunglobulinisotypen. Antikörper werden aufgrund ihrer unterschiedlichen Genabschnitte für die konstanten Teile der schweren Kette in insgesamt 5 Isotypen IgM, IgG, IgA, IgD und IgE eingeteilt, die wiederum in verschiedene Subklassen eingeteilt werden (. Abb. 34.14). In jeder der 5 Klassen von Immunglobulinen kommen außerdem noch 2 strukturell unterschiedliche Formen von leichten Ketten (N- bzw. λ-Typ) vor. Die individuellen Strukturen in den variablen Regionen der Immunglobulinketten bedingen unterschiedliche Ideotypen der Immunglobuline. Insgesamt unterscheidet sich damit jedes Individuum vom anderen durch einen spezifischen Satz von Immunglobulinen. Einige Charakteristika der im Blut auftretenden Immunglobuline sind in . Tabelle 34.3 zusammengefasst. Immunglobuline vom G-Typ (IgG) neutralisieren vor allem von Bakterien gebildete Toxine und binden Mikroorganismen, sodass diese besser phagozytiert werden können. Vom IgG gibt es 4 Subklassen, IgG1–IgG4, die unterschiedliche Funktionen haben und die sich in der HingeRegion unterscheiden. Phagozyten enthalten spezifische Rezeptoren für den Fc-Teil der IgG. Blutmonozyten binden über den Fc-Rezeptor I IgG1 oder IgG3. Neutrophile Granulozyten exprimieren den Fc-Rezeptor II (CD33) und III (CD16) und binden besonders gut IgG-Komplexe. Die Halbwertszeit von IgG liegt bei etwa 20 Tagen. IgG besitzt von der 2. Hälfte der Schwangerschaft an die Fähigkeit zur Plazentapassage, wodurch das Neugeborene während der ersten Lebensmonate geschützt ist (Leihimmunität). Zunächst ist es auch in der Kolostralmilch nachweisbar, die während der Schwangerschaft und während der ersten Tage nach der Entbindung gebildet wird. IgG kann vom Neugeborenen als vollständiges Molekül im Intestinaltrakt resorbiert werden. Immunglobulin A (IgA) ist das mengenmäßig am häufigsten produzierte Immunglobulin. Allerdings gelangt nur

. Abb. 34.14. Die 5 Immunglobulin-Klassen. Die Abbildung stellt die löslichen, sezernierten Immunglobulinisotypen dar. Zu sehen sind die Domänenstrukturen der Immunglobulin-Klassen, ihre Assoziation zu oligomeren Komplexen sowie ihre Hauptfunktionen. Beim Menschen treten 4 IgG-Subklassen (IgG1–IgG4) und 2 IgA-Subklassen (IgA1, IgA2) auf. Die blauen Linien repräsentieren Disulfid-Brücken, die grüne Linie beim IgA das J-Protein (joining protein), die rosa Linie beim slgA die sekretorische Komponente (sIgA)

ein Teil, das nichtsekretorische IgA, in das Blut. Es kommt in Speichel, Tränen- und Nasalflüssigkeit, im Schweiß, der Kolostralmilch sowie in den Sekreten der Lunge und des Gastrointestinaltrakts vor. Es wird von Plasmazellen synthetisiert, die direkt unterhalb des Schleimhautepithels liegen. Die Plasmazellen geben IgA als dimeres Protein ab, wobei die IgA-Moleküle durch ein cysteinreiches Protein verbun-

1121 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

den werden, das als Joining-Protein (Verbindungsprotein, in . Abb. 34.14 grün) bezeichnet wird. In den Sekreten ist ein weiteres Protein an das IgA assoziiert, die sog. sekretorische Komponente (in . Abb. 34.14 rosa). Sie wird während der Rezeptor-vermittelten Transzytose von IgA durch die Schleimhautepithelien gebildet (7 Kap. 32.3). Im Darm vermischt sich dieses sekretorische IgA (sIgA) mit dem Mucin und bildet eine schützende Oberflächenschicht. Dies verhindert die Anlagerung von Bakterien oder deren Toxine an die Epitheloberfläche. Ein Teil des IgA-Dimers wird rückresorbiert und gelangt über den enterohepatischen Kreislauf in die Gallenflüssigkeit. Die Halbwertszeit des IgA beträgt 5–6 Tage. Es kommt in 2 Subklassen, IgA1 und IgA2 vor. Immunglobulin E (IgE) wirkt bei der Abwehr von Parasiten, insbesondere Würmern, mit. Es kommt nur in geringen Mengen im Blut vor, hat aber eine besondere pathobiochemische Bedeutung bei Allergien vom Typ I, wie Asthma bronchiale oder Heuschnupfen. Es wird gegen spezielle Allergene, wie Pollen oder Hausstaub vermehrt gebildet und kann von einem spezifischen IgE-Rezeptor auf Mastzellen gebunden werden. Nach Bindung der entsprechenden Antigene an Mastzell-gebundene IgE-Moleküle kommt es zur Degranulierung der Mastzelle und damit zur Freisetzung vasoaktiver Amine, Prostaglandine und Leukotriene (7 Kap. 34.7.2). Eine starke Mastzelldegranulierung kann zum anaphylaktischen Schock führen. Immunglobulin M (IgM) liegt im Plasma als Pentamer vor. Die Assoziation der 5 das Pentamer bildenden IgMMonomere hängt wie beim IgA von der Gegenwart des Joining-Proteins ab. IgM agglutiniert sehr stark und bindet bevorzugt polymere Antigene. Von allen Immunglobulinen ist IgM der stärkste Aktivator des Komplementsystems (7 Kap. 34.4). Die Halbwertszeit des IgM beträgt etwa 5–6 Tage. IgM ist das erste Immunglobulin, das nach Primärkontakt mit einem Antigen gebildet wird. Spezifisches IgM ist damit ein diagnostischer Indikator für Erstinfektionen (z.B. Toxoplasmose bei Schwangeren). Immunglobulin D (IgD) ist im Plasma in nur sehr geringer Konzentration nachweisbar. Über seine Funktion ist noch nichts bekannt.

B-Zell-Antigen-Rezeptor-Komplex Der B-Zell-Antigen-Rezeptor-Komplex (. Abb. 34.15) enthält antigenbindende und signaltransduzierende Strukturen. Er besteht aus einem membrangebundenen Immunglobulin (IgG, IgM, IgD, IgA, IgE) und 2 Ig-α/Ig-β-heterodimeren, Transmembran-Proteinen, die ähnliche funktionelle Eigenschaften haben wie die signaltransduzierenden Komponenten des TZR-CD3-Komplexes. Entsprechend besitzen ihre cytoplasmatischen Domänen Tyrosinkinase(Tyk)-bindende ITAM-Sequenzmotive, die wir beim CD3-Komplex bereits kennen gelernt haben (7 Kap. 34.3.3.4).

. Abb. 34.15. Schematische Darstellung des B-Zell-Rezeptorkomplexes. Der Antigen-bindende Teil des B-Zell-Rezeptors (BZR) besteht aus Plasmamembran-gebundenem Immunglobulin der jeweiligen Klasse (IgG, IgM, IgA, IgD, IgE). Für die Signalweiterleitung sind Igα/Igβ-heterodimere Proteine notwendig, die im cytoplasmatischen Teil ITAM-Sequenzmotive aufweisen, an die nach Phosphorylierung die Tyrosinkinase Syk binden kann. Als weitere Corezeptoren fungieren CD19, CD21 und CD81

Entstehung der Antikörpervielfalt ! Die Variabilität der Antikörper und des B-Zellrezeptors entsteht durch Genumlagerungen und somatische Mutationen.

Antikörpervielfalt. Das Immunsystem ist in der Lage, gegen praktisch jedes denkbare Antigen zu reagieren. Das gilt für T-Zellen ebenso wie für B-Zellen und ihre Produkte, die Antikörper. Die Zahl der möglichen Antikörper, die von einem Menschen produziert werden kann, wird auf 1011 geschätzt. Es ergibt sich die Frage, wie diese enorme Antikörper-Diversität zustande kommt. Wir wissen heute, dass es 2 unterschiedliche, sich ergänzende Vorgänge sind: 4 die somatische Genumlagerung (rearrangement) während der Reifung der Stammzellen im Knochenmark, die eine Vielzahl von unterschiedlichen Immunglobulinen generiert und 4 die somatische Mutation der Gene, besonders die der hypervariablen Region der L- und H-Ketten

Die somatische Genumlagerung der H-Ketten erfolgt im Chromosom 14, die der L-Ketten im Chromosom 22 (λKetten) und im Chromosom 2 (κ-Ketten). (. Abb. 34.16). Bei diesem Vorgang werden Genabschnitte, die die V- und C-Regionen codieren, zusammengebracht. Für die L-Ketten sind dies V-Gen-, Joining(J)-Gen- und C-Gen-Segmente, im Falle der H-Ketten V-Gen-, Diversitäts(D)-Gen-, J-Gen- und C-Gen-Segmente (. Abb. 34.17). Die Diversität entsteht vor allem durch die unterschiedlichen Möglichkeiten der Kombination von verschiedenen V- und J- (L-Ketten) bzw. V-, J- und D-Segmenten (H-Ketten) mit C-Segmenten und der Kombination unterschiedlicher variabler Regionen von H- und L-Ketten im Immunglobulin-Molekül.

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Kapitel 34 · Immunsystem

Die Bildung eines aktiven Gens für eine leichte Kette erfordert eine Rekombination, bei der sich eine der vielen variablen Regionsequenzen mit einer der 4 oder 5 J-Sequenzen (. Abb. 34.16) verbindet. Es gibt etwa 70 verschiedene V-Regionsequenzen, von denen jede eine sog. LeaderSequenz besitzt, die von dem Rest der V-Region durch eine nichtinformationstragende Sequenz getrennt ist. Die Leader-Sequenz enthält die Information für die hydrophoben Aminosäuren, die das Signalpeptid bilden, das später während der Kettenbiosynthese wieder abgespalten wird. Damit wird die variable Region einer leichten Immunglobulinkette von 3 Segmenten codiert: 4 der Leader-Sequenz 4 der V-Sequenz und 4 der J-Sequenz Die konstante Region der Kette wird vom C-Segment codiert, das in der Nähe auf demselben Chromosom lokalisiert ist. Die DNA, die zwischen den V- und C-Regionen liegt (Intron) wird zwar mit in die Prä-mRNA eingebaut, aber anschließend durch Spleißen aus ihr entfernt. Durch die Existenz von etwa 70 V-Regionen und 5 J-Regionen können 350 verschiedene Gene für leichte Ketten entstehen. Diese Zahl wird durch zusätzliche Mechanismen, insbesondere die somatische Hypermutation in den 3 CDR-Genabschnitten (CDR = complementarity determining region) der variablen Regionen, weiter erhöht.

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. Abb. 34.16. Rearrangement der leichten Ketten der Immunglobuline. Das aktive Gen für eine leichte Kette (z.B. vom N-Typ) entsteht durch eine Umlagerung, bei der eine der etwa 70 verschiedenen variablen (V) Regionen, die die Information für die Aminosäuren 1–95 enthalten, mit einer der 5 J-(joining-)Regionen (Aminosäuren 96–108) verbunden wird. Die V-Region besteht aus einer L- (leader-) Region, die von dem V-Gensegment durch eine Intronsequenz getrennt ist. Der konstante Anteil der κ-Kette wird von einem C-Gensegment codiert, das etwa 3000–4000 Basenpaare stromabwärts von der J-Region liegt. Ein Teil der DNA zwischen den V- und C-Gensegmenten wird durch Deletion entfernt. Durch Transkription des aktiven Gens entsteht ein primäres Transkript, das durch Spleißen in die reife mRNA überführt wird

Die somatische Hypermutation von Genabschnitten nach Genumlagerung der hypervariablen Regionen der L- und H-Ketten erfolgt durch Punktmutationen. Sie findet nach Antigenkontakt statt. Wenn mutierte B-Zell-Rezeptoren an der Oberfläche von B-Zellen Antigene besser binden als die Ausgangsimmunglobuline, führt dies zur Selektion dieser Zellen und damit zur Affinitätsreifung. Umlagerung der Gene für die leichten Ketten. Die Umlage-

rung kommt durch die Deletion von DNA und nicht durch das Spleißen von mRNA zustande. Die Umlagerungen sind erforderlich, da die Information für die variablen (V) und konstanten (C) Regionen sowie der J-(joining-)Regionen der leichten und schweren Ketten auf verschiedenen Genen liegt.

! Die Gensequenz für den variablen Anteil der schweren Ketten enthält zusätzlich das D-Segment.

Umlagerung der Gene für die schweren Ketten. Obwohl sich die Struktur und die Umlagerung auf Gen-Niveau von leichten (N, λ) und schweren (α, μ, δ, ε und γ) Ketten in vielerlei Hinsicht ähneln, existieren auch Unterschiede, die das Gensystem für die schweren Ketten noch komplexer machen. Die Gensequenz für den variablen Anteil der schweren Ketten besteht nämlich nicht nur aus 2, sondern aus 3 verschiedenen DNA-Segmenten: Neben den V- und J-Gensegmenten existieren zusätzlich noch D-Segmente (Diversity für Vielfalt). Geht man von der Existenz von 50 V-, 30 D- und 6 J-Gensegmenten aus, so könnten damit etwa 9000 verschiedene Kombinationen erzeugt werden. Hinzu kommt die somatische Hypermutation. Alle Gensequenzen für die konstanten Abschnitte der 8 verschiedenen Typen (μ, δ, die beiden Kopien von α [α1 und α2] sowie γ1–γ4) der schweren Ketten liegen auf Chromosom 14 in einem zusammenhängenden Bereich von etwa 100000 Basenpaaren (. Abb. 34.17). Die μ- und δ-Segmente der schweren Ketten, die während der initialen Phase der B-Lymphozytendifferenzierung gleichzeitig exprimiert werden, liegen etwa 2000 Basenpaare voneinander entfernt. Weitere 2000 Basenpaare stromaufwärts befindet sich ein Bereich von 6 aktiven J-Segmenten. Stromabwärts liegen aufeinander folgend die 4 γ-Segmente, die ε- und die α-Segmente. Im ersten Schritt der Expression des Gens für die

1123 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

. Abb. 34.17. Organisation der einzelnen Gene für die schweren Ketten auf dem Chromosom 14. Die sechs J-Sequenzbereiche liegen etwa 2000 Basenpaare stromaufwärts von der μ-Sequenz entfernt. Im ersten Schritt der Umlagerung wird eines der etwa 50 V-Gensegmente mit einem der etwa 30 D-Segmente und mit einem der 6 J-Segmente unter Bildung des aktiven Gens verknüpft. Die Synthese der μ-Kette erfolgt durch Transkription des Gens bis zum Beginn der δ-Sequenz.

Die Synthese der δ-Ketten wird durch Spleißen reguliert, bei dem der mRNA-Anteil der μ-Sequenz entfernt wird. Zur Bildung der γ-, ε- oder α-Ketten wird die V-D-J-Sequenz jeweils in die Nähe (an eine mit U markierte Region) des Gens für die betreffende Kette verlagert, wobei die dazwischenliegenden DNA-Regionen deletiert werden (ψε1-Pseudogen für ε)

schwere Kette erfolgt eine Umlagerung, bei der sich ein VGensegment mit einem J- und einem D-Segment verbindet. Zwischen diesen Segmenten liegende DNA wird deletiert. Bei der Umlagerung finden wahrscheinlich die gleichen Signale Verwendung, die auch bei der besprochenen V-J-Umlagerung der leichten Ketten von Bedeutung sind. Die Tatsache, dass μ- und δ-Ketten immer zusammen exprimiert werden, erfordert zusätzliche Mechanismen zur Herstellung entweder der μ- oder der δ-Kette. Im Falle der μ-Kette bricht die Transkription nach Erreichen des 3c-Endes des μ-Gens ab. Im Falle der δ-Kette wird ein μ- und δ-Ketten-PrämRNA-Transkript gebildet, aus dem das μ-Kettensegment durch Spleißen entfernt wird, wodurch das V-D-J-Segment direkt mit dem δ-Kettensegment verbunden wird.

Bei naiven Lymphozyten (7 u.) liegen beide als membranassoziierte Antigenrezeptoren vor. Nach der Aktivierung von B-Lymphozyten werden auch die anderen Isotypen von Antikörpern (IgA, IgG, IgE) exprimiert. Im Prinzip findet hier der gleiche Vorgang statt: Es kommt zur Anlagerung der VDJ-Segmente an die entsprechenden für die konstanten Regionen der schweren Ketten codierenden Genabschnitte γ1–4, α1–2 und ε1–2, von denen jedes wiederum in spezifische Abschnitte für die einzelnen Domänen unterteilt werden kann. Stromauf- und stromabwärts gelegene Teile des Immunglobulin-GenClusters werden deletiert. Die Regulation des Klassenwechsels erfolgt über TH-Zellen. Essentiell ist die Expression des CD40-Liganden CD40L auf TH2-Zellen sowie die Bereitstellung von Cytokinen. IL-4 fördert die Bildung von IgG1 und IgE, IL-5 die von IgA, IFN-γ die von IgG2 und IgG3 und TGF-β die von IgG2b und IgA.

! Mit der Anheftung des Genabschnitts für den konstanten Teil der schweren Kette wird das ImmunglobulinGen vervollständigt.

Isotypwechsel. Der durch die Assoziation der V-, D- und J-Segmente entstandene Genabschnitt wird anschließend mit den für die konstanten Teile der schweren Kette verantwortlichen Genen kombiniert. Diese liegen stromabwärts der VDJ-Segmente (. Abb. 34.17), wobei für IgG-Subtypen 4 verschiedene Isoformen bereitstehen. Bei der Reifung von naiven B-Lymphozyten werden immer die in Nachbarschaft liegenden Genabschnitte für die schweren Ketten von IgM und IgD (μ und δ) mit den VDJ-Segmenten verknüpft und die dazwischen gelegene DNA deletiert. Das primäre RNA-Transkript enthält zunächst noch μ und δ. Erst durch entsprechendes Spleißen der RNA wird dann die mRNA für eine der beiden Antikörperspezies hergestellt.

Lösliches versus membrangebundenes Immunglobulin.

Die Entscheidung darüber, ob das Immunglobulin als lösliches Produkt sezerniert oder in die Plasmamembran eingebaut wird, fällt ebenfalls auf der Transkriptionsebene. Beide Formen werden vom gleichen Gen unter Nutzung unterschiedlicher Stopp-Codons am 3c-Ende des C-Segments codiert. Das vom C-Segment entfernter liegende Stopp-Codon führt zur Transkription einer längeren mRNA, die für ein hydrophobes Membranprotein codiert. Die Translation dieses Produktes ergibt das Membran-Immunglobulin. Die Nutzung des dem C-Segment näher liegenden Stopp-Codons führt zu einer mRNA, die ein hydrophiles, lösliches Immunglobulin codiert, wie wir es im Plasma finden.

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Kapitel 34 · Immunsystem

In Kürze Antikörper: 4 Antikörper oder Immunglobuline treten gelöst und als Bestandteile der Plasmamembran (BZR) von reifen B-Zellen auf 4 Die Grundstruktur aller Immunglobuline besteht aus 2 schweren (H-) und 2 leichten (L-) Ketten (N, λ) die über Disulfidbrücken verbunden sind. Durch Papainspaltung entstehen N-terminale Fab-Fragmente und ein C-terminales Fc-Fragment. Intrapeptidische Disulfidbrücken bedingen Domänenstrukturen, 2 in den leichten und 3 bzw. 4 (IgM) in den schweren Ketten 4 Die Immunglobulin-Klassen bzw. Isotypen (IgM, IgD, IgG, IgA, IgE) unterscheiden sich in den schweren Ketten. IgM tritt als Pentamer, IgA als Monomer, Dimer und sekretorisches sIgA auf 4 Die Antigenbindung erfolgt am variablen (V-) N-terminalen Bereich der H- und L-Ketten. Innerhalb des V-Bereichs gibt es 3 hypervariable Regionen (CDR1– CDR3), die durch somatische Mutationen bedingt sind 4 Der Fc-Teil der Immunglobuline bedingt die Komplementbindung, die Plazentapassage und die Bindung an Fc-Rezeptor-tragende Zellen wie z.B. Makrophagen, Lymphozyten und Mastzellen 4 Die Immunglobulinklassen besitzen unterschiedliche Funktionen. IgM ist das zuerst gebildete Immunglobulin und aktiviert neben IgG das Komplementsystem. sIgA (sekretorisches IgA) ist wesentlich für die Schleimhautimmunität verantwortlich, IgG für die Leihimmunität. IgE wirkt mit bei der Abwehr von Parasiten und spielt bei Allergien vom Typ I eine entscheidende Rolle 4 Der B-Zell-Antigen-Rezeptor-Komplex besteht aus einem membrangebundenen Immunglobulin und

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Reifung und Aktivierung von B-Lymphozyten ! Die Reifung von B-Lymphozyten erfolgt im Knochenmark.

Differenzierung von Stammzellen zu reifen B-Lymphozyten. Die wichtigste Funktion von B-Lymphozyten ist die

Bereitstellung von Antikörpern. Die B-Zell-Reifung aus der hämatopoietischen Stammzelle erfolgt beim Menschen im Knochenmark. Sie ist in der frühen Phase abhängig von Stromazellen des Knochenmarks, die einen direkten Kontakt zur B-Zelle haben und Cytokine (z.B. IL-7) für diese bereitstellen (. Abb. 34.18). Der Kontakt wird durch zelluläre Adhäsionsmoleküle (CAMs, cellular adhesion molecules 7 Kap. 6.2.6), insbesondere durch VCAM-1 (vascular cellular adhesion molecule), vermittelt. Die Proliferation in den frühen Reifungsstufen wird durch die Wechselwirkung zwischen dem Stromagebundenen Stammzellfaktor (SCF, stem cell factor) und

2 Igα/Igβ-Heterodimeren, die an der Signalübertragung beteiligt sind Entstehung der Antikörpervielfalt: 4 Die Variabilität der Antikörper und des B-Zell-Rezeptors entsteht durch Genumlagerungen (Rearrangement) und somatische Mutation 4 Für L-Ketten werden die auf Chromosom 22 (δ-Kette) und Chromosom 2 (N-Kette) lokalisierten polymorphen Genabschnitte V, J und C rearrangiert 4 Für H-Ketten werden die auf Chromosom 14 lokalisierten polymorphen Genabschnitte V, D, J und C rearrangiert 4 Das Rearrangement von H-Ketten erfolgt über die Zusammenfügung von DJ- und VDJ- bzw. VDJC-Gensegmenten bei gleichzeitigem Verlust 5c-gelegener V- und der dazwischenliegenden V-, D- und J-Segmente. Nach Transkription und Herausschneiden der überschüssigen J- bzw. C-Segmente erfolgen die Translation und die posttranslationalen Veränderungen (Leader-Segment, Kohlenhydrate) Das Rearrangement von L-Ketten erfolgt über die Zusammenfügung von VJ- bzw. VJC- Gensegmenten, bei Verlust der 5c-gelegenen V- und der dazwischenliegenden V- und J- Segmente. Nach Transkription und Herausschneiden der überschüssigen J- und C- Segmente schließen sich die Translation und posttranslationalen Veränderungen an. Der Isotypwechsel (class switch ) wird durch Cytokine reguliert. Die Entscheidung, ob lösliches oder Membran-Immunglobulin gebildet wird, geschieht über verschiedene STOPPCodons. Die somatische Hypermutation erfolgt nach dem Rearrangement.

dem B-Zell-Liganden Kit (Tyrosin-Kinase) sowie durch aus dem Stroma stammendem IL-7 bewirkt. Die Reifung der Stammzelle bis zur unreifen B-Zelle ist unabhängig von Antigenen. Nach Expression von Membran-IgM und -IgD erfolgt die weitere Differenzierung nur in Gegenwart von Antigenen. Dies geschieht zum Teil im Knochenmark selbst, zum Teil erst nach Auswanderung in sekundären lymphatischen Organen, wie Lymphknoten, Milz, Schleimhäuten oder Haut. Charakteristisch für die verschiedenen Reifungsstadien sind die unterschiedlichen Stadien der Genumlagerungen, Transkriptionen und Translationen der Ig-Gene (7 Kap. 34.3.4.5). Daneben treten während der Reifung charakteristische Oberflächenstrukturen (CD) auf. Sie haben auch eine praktische Bedeutung bei der Differentialdiagnose von lymphozytären Neoplasien (Leukämien, Lymphome), die besonders im B-Zellbereich auftreten.

1125 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

. Abb. 34.18. B-Zell-Differenzierung im Knochenmark. Die Differenzierung der Stammzelle (CD34) zur Immunglobulin sezernierenden Plasmazelle erfolgt in Stufen, bis zur unreifen B-Zelle unabhängig von Antigenen, später bestimmt durch Antigene. Die Differenzierungsstadien sind durch unterschiedliche Stadien der Ig-Genumlagerung und Expression von Oberflächenstrukturen charakterisiert.

Prä-B-Zellen enthalten cytoplasmatische μ-Ketten, unreife B-Zellen membrangebundenes IgM. Die Aktivierung ist mit einem Isotypswitch verbunden, sodass B-Zellen entstehen, die nur noch einen Ig-Isotyp an der Oberfläche exprimieren und produzieren. Plasmazellen verlieren membrangebundene Immunglobuline bzw. den B-Zell-Rezeptor

Alle B-Zellen sind durch CD19 charakterisiert. Das Endprodukt der Differenzierung von B-Lymphozyten ist die Plasmazelle, die jeweils einen Ig-Isotyp (z.B. IgA1) für ein gegebenes Antigen produziert und sezerniert.

fische TH-Zellen ist eine Konzentrierung von entsprechenden MHC-Peptid-Komplexen an der Oberfläche der B-Zellen notwendig.

! Die Aktivierung von B-Lymphozyten ist ein mehrstufiger Vorgang.

B-Zell-Aktivierung. Die Bindung eines nativen Antigens an den B-Zell-Rezeptor(BZR)-Komplex führt zur Aktivierung von B-Lymphozyten, d.h. zur B-Zell-Proliferation und einer nachfolgenden Differenzierung in Antikörper-produzierende Plasmazellen. Für die Mehrzahl der Antigene sind dabei TH-Zellen, überwiegend TH2-Zellen, notwendig. Diese Antigene werden T-Zell-abhängige Antigene genannt. Bei Nicht-Peptid-Antigenen, wie z.B. bakteriellen Polysacchariden, erfolgt die Aktivierung der B-Zellen unabhängig von T-Zellen. Dabei kommt es zur Kreuzvernetzung von B-Zell-Rezeptoren durch wiederkehrende Kohlenhydratsequenzen. Antigenprozessierung in B-Zellen. Die auf ein spezifisches Antigen ausgerichtete gemeinsame Wirkung von TH-Zellen und B-Zellen wird durch die Fähigkeit der B-Zelle vermittelt, das vom BZR spezifisch fixierte Antigen zu endozytieren, proteolytisch zu prozessieren und als MHC-II-gebundenes Antigen-Peptid der TH-Zelle zu präsentieren. Für die Erkennung solcher B-Zellen durch antigenspezi-

Costimulatorische Signale. Wie im Falle der T-Zellaktivierung sind auch hier costimulatorische Signale notwendig. Durch die Wechselwirkung zwischen der B- und T-Zelle über das spezifische Antigen (. Abb. 34.19) kommt es zur Induktion der Expression von B7-Molekülen (CD80/86) auf der B-Zelle, die von CD28 auf der T-Zelle gebunden werden. Dies wiederum führt zur Induktion des CD40Liganden (CD40L, CD154) auf der TH-Zelle und zu einem zweiten costimulatorischen Signal. CD40 gehört zur TNF-Rezeptor-Familie, der auch Fas auf virusinfizierten Zellen zuzuordnen ist. Entsprechend gehört CD40L zur TNF-Familie. Die Bindung von CD40 durch CD40L ist essentiell für die B-Zell-Aktivierung. Sie ermöglicht den Eintritt ruhender B-Zellen in den Zellzyklus. Der Übergang in die Proliferation und Differenzierung zu Plasmazellen wird durch Cytokine der TH2-Zellen, wie IL-4, IL-6 und IL-5 vermittelt. Kürzlich wurde ein weiterer Corezeptor auf aktivierten T-Zellen gefunden: ICOS (inducible costimulator) der mit dem Liganden B7RP-1, insbesondere exprimiert auf B-Lymphozyten und Makrophagen, interagiert. Durch diese Wechselwirkung bilden TH2-Zellen IL-4 und IL-13, was zur vermehrten IgE-Bildung führt. Dies ist für allergische Reaktionen vom Typ I von zentraler Bedeutung.

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Kapitel 34 · Immunsystem

. Abb. 34.19. Mechanismen der B-Zell-Aktivierung. Das initiale Ereignis der B-Zell-Aktivierung ist die Bindung eines nativen Antigens an den B-Zell-Rezeptor. Das Antigen wird endozytiert, proteolytisch prozessiert und über MHC-II der T-Helferzelle präsentiert. Dabei kommt es zur Expression von B7-Molekülen (CD80/86) auf der B-Zelle und zur Wechselwirkung mit CD28. Dies führt zur Expression des CD40-Liganden auf der T-Zelle und seiner Wechselwirkung

mit dem konstitutiv exprimierten CD40 auf der B-Zelle. Ein weiteres Aktivierungssignal wird durch die Wechselwirkung von ICOS (inducible costimulator) auf T-Zellen und B7RP-1 gegeben (nicht dargestellt). Damit wird der Eintritt der ruhenden B-Zelle in den Zellzyklus ermöglicht. Der Übergang in die Proliferation und die Differenzierung zu Plasmazellen wird durch unterschiedliche Cytokine vermittelt

Cytokine, nicht nur die der TH2-Zelle, sind auch an der Klassenumschaltung und der Affinitätsreifung beteiligt (vgl. Rearrangement). Diese Vorgänge erfolgen in sekundären lymphatischen Organen, insbesondere Lymphknoten und werden durch follikuläre dendritische Zellen gefördert.

der B-Zellen erfolgt in der T-Zell-reichen Zone, z.B. dem Paracortex des Lymphknotens. Danach wandern sie in einen benachbarten primären Follikel. In den Lymphfollikeln von Milz oder Lymphknoten machen aktivierte B-Lymphozyten rasche Teilungen durch, bilden ein Keimzentrum und werden dann als Zentroblasten bezeichnet. Während dieser Teilungen treten Mutationen in den Genen für die variablen Ketten der Immunglobuline auf, sodass Nachkommen mit unterschiedlicher Affinität zum Antigen entstehen, die als Zentrozyten bezeichnet werden. Diese Zentrozyten sterben nur dann nicht innerhalb kurzer Zeit durch Apoptose wieder ab, wenn ihre Immunglobulinrezeptoren ein Antigen binden. Je höher die Affinität, desto höher wird auch die Wahrscheinlichkeit, das bcl-2-Gen zu exprimieren, dessen Produkt den apoptotischen Zelltod verhindert. Durch diesen Prozess werden also B-Zellen mit Immunglobulinrezeptoren mit hoher Affinität zum Antigen selektioniert. An dem Vorgang der Affinitätsreifung von Zentrozyten sind maßgeblich follikuläre dendritische Zellen (FDZ) beteiligt. Diese sind keine Antigen-präsentierenden Zellen im klassischen Sinne. Sie tragen an ihrer Oberfläche Komplement- und Fc-Rezeptoren, die Antigen-Antikörper- bzw. Antigen-Komplement-Komplexe binden können, über die die Affinitätsreifung der B-Zellen erfolgt. Zentrozyten differenzieren entweder zu B-Gedächtniszellen (Mantelzone) oder zu Plasmazellen, die das Keimzentrum verlassen und ins Knochenmark (oder auch in Schleimhautepithelien) wandern. Welche Moleküle bestimmen, ob aus einem Zentrozyten eine Gedächtnis- oder Plasmazelle wird, ist noch unklar. Gedächtniszellen sezernieren zwar bei der primären

! Die Signalvermittlung bei der B-Zell-Aktivierung ähnelt der der T-Zellaktivierung.

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Das initiale Ereignis der B-Zell-Aktivierung besteht in der Kreuzvernetzung des BZR durch Antigene. Die weiteren Signale ähneln sehr denen der T-Zell-Aktivierung (7 Kap. 34.3.3.4). Die membranständige Phosphatase CD45 aktiviert die Tyrosinkinasen Blk, Fyn und Lyn, die die cytoplasmatischen Domänen des Igα/Igβ-Komplexes des BZR phosphorylieren. Damit kann eine Bindung der Tyrosinkinase Syk an phosphorylierte Peptidsequenzen (ITAM) erfolgen und die Aktivierung der bekannten 3 Signalwege vermittelt werden. Es sind dies der Ras-Weg und die PLCγ-mediierten DAG- bzw. IP3-Wege. Die Modulation dieser Signalwege erfolgt über einen Corezeptorkomplex, der sich aus 3 Membrankomponenten zusammensetzt, nämlich CD19, dem Komplementrezeptor CR2 (CD21) und TAPA-1 (CD81). ! Aktivierte B-Lymphozyten wandern in Lymphfollikel, wo sie mit der Teilung beginnen.

Differenzierung von B-Lymphozyten zu Plasmazellen oder Gedächtniszellen. Die initiale Antigenerkennung von B-

Zellen erfolgt allgemein in lymphatischen Organen, wie Lymphknoten oder submukosalem lymphatischen Gewebe, wo sich die meisten B-Zellen aufhalten. Die Aktivierung

1127 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

Immunantwort keine Immunglobuline, können dies aber bei einer erneuten Exposition mit demselben Antigen tun.

Antiseren und monoklonale Antikörper Antiseren. Gelangt ein körperfremder Stoff mit mehreren

antigenen Determinanten durch Infektion oder Injektion in ein Wirbeltier, so kommt es zur Aktivierung einer Vielzahl von B-Lymphozyten, die insgesamt ein polyklonales Gemisch von Antikörpern gegen die einzelnen Epitope des Antigens mit unterschiedlicher Affinität sezernieren. Da die Immunantwort von Versuchstier zu Versuchstier unterschiedlich ist, können sich Antikörper enthaltende Seren, die Antiseren, ganz erheblich voneinander unterscheiden. Deshalb ist es schwierig, standardisierte Antiseren für die FACS (fluorescence-activated cell sorting)-Analyse von z.B. Membranantigenen normaler und maligner Zellen oder verschiedener Unterklassen von T-Lymphozyten (CD4, CD8 etc.) herzustellen. Monoklonale Antikörper. Das Verfahren zur Herstellung von B-Lymphozytenklonen, die Antikörper mit genau definierter Spezifität und Affinität produzieren, wurde von Georges Köhler und Cesar Milstein entwickelt. Die Methode beruht auf der Immortalisierung antikörpersezernierender Plasmazellen durch Hybridisierung mit Myelomzellen. Das Entscheidende dieser Technik liegt darin, dass man einen der Plasmazelle ähnlichen Zell-Klon in vitro erzeugen und vermehren kann, der einen Antikörper der Wahl produziert. Normale Plasmazellen, die aus der Milz gewonnen werden, sind nach einigen Zellteilungen terminal differenziert und sterben deshalb ab. Durch Fusionierung mit einer malignen Plasmazelle, der Myelomzelle, können sie jedoch immortalisiert werden. Die Mausmyelomzelle, die zur Fusionierung benutzt wird, hat 2 wichtige Eigenschaften: Sie sezerniert selbst keine Antikörper mehr und hat z.B. das Enzym Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyl-Transferase (HGPRT, 7 Kap. 19.2) verloren. Zur Herstellung eines monoklonalen Antikörpers in der Maus geht man folgendermaßen vor (. Abb. 34.20): Nach Injektion des Antigens, gegen den der Antikörper erzeugt werden soll, wird nach einigen Wochen die Milz der Maus entfernt, deren Serum den höchsten Antikörpergehalt (Antikörpertiter) aufweist. Nach Zerkleinerung der Milz werden die Plasmazellen unter Zugabe von Polyethylenglycol oder im elektrischen Feld mit Myelomzellen fusioniert. Da im Allgemeinen nur eine von etwa 200.000 Plasmazellen ein lebensfähiges Hybrid mit einer Myelomzelle bildet, müssen die nichtfusionierten Zellen und die Myelom-Myelom-Hybride entfernt werden. Dies erfolgt durch die Selektion in einem speziellen Medium, dem HAT-Medium, welches Hypoxanthin, Aminopterin und Thymidin enthält. Die Myelomzelle, die das HGPRT-Enzym nicht besitzt, kann exogenes Hypoxanthin nicht zur Purinbiosynthese verwen-

. Abb. 34.20. Produktion monoklonaler Antikörper mit der Hybridom-Technik. HGPRT-Zellen fehlt die Hypoxanthin-GuaninPhosphoribosyl-Transferase; Ig+-Milzzellen sind B-Lymphozyten, die keine Antikörper produzieren. (Einzelheiten 7 Text)

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Kapitel 34 · Immunsystem

den und stirbt ab, da das ebenfalls zugesetzte Aminopterin die endogene Purinbiosynthese blockiert. Nur Myelomzellen, die mit Mauszellen (die HGPRT enthalten) fusioniert sind, können Hypoxanthin und Thymidin utilisieren und überleben deshalb. Nichtfusionierte Plasmazellen müssen nicht entfernt werden, da sie in Kultur absterben. Zellhybride erscheinen etwa eine Woche nach der Fusion. Nach 2–6 Wochen im HAT-Medium sind mehrere Hundert Klone vorhanden, die nach entsprechender Verdünnung auf Mikrotiterplatten verteilt werden, sodass angenommen werden darf, dass statistisch nur eine Zelle pro Vertiefung vorliegt. Aus jeder Vertiefung der Gewebekulturplatten wird nach einigen Wochen eine geringe Menge Medium entnommen und auf die Gegenwart eines Antikörpers gegen das Antigen untersucht. Ist für die Immunisierung ein starkes Immunogen verwendet worden, so können bis zu 50 verschiedene Hybridome, die Antikörper produzieren, identifiziert werden. Sind die positiven Hybridome identifiziert, so werden sie propagiert. Gute Klone produzieren bis zu 100 μg Antikörper/ml Kulturflüssigkeit. Als entscheidender Vorteil der Technik gilt, dass man hochgereinigte, standardisierte Antikörper auch gegen

nicht gereinigte Antigene wie z.B. Antigene auf Immunoder Tumorzellen erhalten kann. Monoklonale Antikörper dienen zur Identifikation von Antigenen auf Zellen und Geweben sowie in komplexen Stoffgemischen im Rahmen der Diagnostik. Dabei verwendet man mit Fluorochromen, Enzymen oder radioaktiven Isotopen markierte Antikörper. Monoklonale Antikörper dienen auch zur spezifischen Isolierung von Stoffen aus komplexen Gemischen mit Hilfe der Affinitätsreinigung. Inzwischen gibt es eine Reihe monoklonaler Antikörper, die zur Therapie von Autoimmunkrankheiten (z.B. rheumatoide Arthritis) oder von Transplantatabstoßungen eingesetzt werden. Dabei handelt es sich überwiegend um Antikörper gegen Lymphozytenstrukturen (z.B. CD3, CD4) oder Cytokine bzw. Cytokinrezeptoren (z.B. TNF-α). Darüber hinaus werden monoklonale Antikörper gegen Tumorantigene zur Krebstherapie genutzt. Um die Bildung von Antikörpern gegen therapeutisch eingesetzte monoklonale Maus-Antikörper zu vermeiden, werden zunehmend gentechnisch modifizierte («humanisierte«) Maus-Antikörper entwickelt, die im Aufbau den humanen Antikörpern sehr nahe kommen.

In Kürze Reifung und Aktivierung von B-Lymphozyten Reifung: 4 Die Reifung von B-Zellen erfolgt beim Menschen im Knochenmark und ist gekennzeichnet durch unterschiedliche Stadien der Ig-Genumlagerungen 4 Wesentlich beteiligt sind der Stroma-gebundene Stammzellfaktor und sein Ligand Kit sowie IL-7 4 Reife B-Zellen exprimieren den membrangebundenen Immunglobulin-Rezeptor des entsprechenden Isotyps und CD19

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Aktivierung: 4 Die Aktivierung und Differenzierung von B-Zellen bis hin zu Plasmazellen oder Gedächtnis-B-Zellen ist ein mehrstufiger Prozess 4 B-Zellen binden das Antigen über den BZR, endozytieren und prozessieren dieses und präsentieren das Antigenpeptid auf MHC-II den T-Helferzellen 4 Costimulatorische Signale sind die Wechselwirkungen zwischen B7 (CD80/86) und CD28, nachfolgend zwischen CD40 und CD40L sowie zwischen B7RP-1 und ICOS

4 Die Proliferation, Klassenumschaltung und Ig-Produktion wird über IL-4, IL-6, IL-5 und IL-13 reguliert 4 In der Signalvermittlung bei der B-Zell-Aktivierung sind die Tyrosinkinasen Blk, Fyn, Lyn, Syk sowie die ITAMs beteiligt. Sie initiiert die Ras-, DAG- und IP3-Kaskaden. Die Aktivierung der B-Zellen erfolgt in den T-Zell-reichen Zonen der sekundären lymphatischen Organe. An der Affinitätsreifung sind maßgeblich follikuläre dendritische Zellen der Keimzentren beteiligt Antiseren und monoklonale Antikörper: 4 Bei normalen Immunisierungen gegen Antigene wird immer eine größere Zahl von B-Zellen aktiviert, sodass sich im Serum ein Gemisch einzelner monoklonaler Antikörper nachweisen lässt, die gegen unterschiedliche Epitope des Antigens gerichtet sind 4 Im Gegensatz dazu ist der in vitro hergestellte monoklonale Antikörper nur gegen ein Epitop gerichtet. Er wird von immortalisierten und experimentell vereinzelten Plasmazell-Hybridomen in Zellkultur produziert

1129 34.3 · Die zellulären Komponenten des adaptiven Immunsystems

34.3.5

Zirkulation von Lymphozyten

Die an der Immunantwort beteiligten Zellen sind über den gesamten Organismus verteilt. Voraussetzung für eine effektive Immunüberwachung und Immunantwort ist die Koordination dieser Zellen. Durch Zirkulation werden Antigenrezeptor-tragende Lymphozyten mit allen Spezifitäten ständig über das Immunsystem verteilt. Die adaptive Immunantwort gegen Mikroorganismen erfolgt überwiegend in peripheren lymphatischen Organen, wie Lymphknoten, Milz, dem Mukosa- und Bronchusassoziierten Immunsystem sowie der Haut. Diese lymphatischen Gewebe sind so organisiert, dass sie eine optimale Wechselwirkung von Antigenen, Antigen-präsentierenden Zellen und Antigen-spezifischen T- und B-Lymphozyten, einschließlich der T-Helferzellen und regulatorischen TZellen, erlauben. Rezirkulation. Voraussetzung für eine optimale Immunantwort ist darüber hinaus die besondere Fähigkeit von Lymphozyten, durch diese lymphatischen Organe über die Blutund Lymphbahnen zu zirkulieren. Dabei wandern die noch nicht aktivierten, nur einen kleinen Anteil ausmachenden, für ein Antigen spezifischen Lymphozyten (naive Lymphozyten), in Bereiche, wo das Antigen konzentriert ist. Dies gilt sowohl für T-Lymphozyten aus dem Thymus als auch für B-Lymphozyten aus dem Knochenmark, die über postkapilläre Venolen mit hohem Endothel (HEV, high endothelial venule) z.B. in die Lymphknoten gelangen. Hier erfolgt unter Mithilfe der T-Helferzellen die spezifische Aktivierung, die klonale Expansion und die Ausbildung spezifischer Effektor- und Gedächtnis-Zellen, die dann an den Ort der Infektion wandern oder weiter zirkulieren. Diese Zirkulation ist besonders relevant für T-Zellen, die unmittelbar in die Immunantwort und die Eliminierung des Antigens eingebunden sind. B-Lymphozyten müssen

nicht in diesem Umfang rezirkulieren, da sie nach Aktivierung und Ausdifferenzierung zu Plasmazellen Immunglobuline sezernieren, die als Effektormoleküle über den Blutweg an den Infektionsherd gelangen. Steuerung der Zirkulation. In die sekundären lymphatischen Organe gelangen Lymphozyten durch die Wechselwirkung von Zelladhäsionsmolekülen auf den Lymphozyten, den sog. Homing-Rezeptoren und solchen auf dem hohen Endothel. Naive T-Zellen exprimieren L-Selektine, aktivierte Effektor- und Memory-T-Zellen E- und P-Selektin-Liganden sowie die Integrine LFA-1 und VLA-4. Auf der anderen Seite sind Endothelzellen in der Lage, insbesondere nach Aktivierung durch die Cytokine IL-1 und TNF-α, für naive T-Zellen L-Selektin-Liganden und für aktivierte Effektor- oder Gedächtnis-T-Zellen E- oder PSelektine bzw. die Integrin-Liganden ICAM-1 oder VCAM1 zu exprimieren. Neben den Homing-Rezeptoren steuern Chemokine die Zirkulation der Immunzellen. Sie werden extravaskulär am Entzündungsherd von Leukozyten gebildet und wirken über spezifische Rezeptoren auf die Chemokinese von Lymphozyten, Monozyten und Granulozyten (7 Kap. 25 und 34.5). Lymphozyten im Blut. Die im peripheren Blut zirkulierenden kleinen T- und B-Lymphozyten sind überwiegend nichtaktivierte, naive Zellen und repräsentieren etwa 1–2% aller Lymphozyten des Organismus. T-Lymphozyten machen beim Erwachsenen etwa 73% (CD4-Zellen: 42%) und B-Lymphozyten etwa 13% der Lymphozyten des Bluts aus. Die übrigen 14% besitzen weder T-Zell- noch B-ZellRezeptoren und heißen natürliche Killerzellen (NK, CD16, CD56). Der Anteil regulatorischer T-Zellen (Suppressorzellen) liegt unter 5%. Bei Neugeborenen und Kindern liegt der T-Lymphozyten-Anteil im Blut etwa 10% niedriger, der B-Anteil ist höher.

In Kürze Die adaptive Immunantwort erfolgt überwiegend in sekundären lymphatischen Geweben und für B-Zellen auch im Knochenmark. In sekundäre lymphatische Gewebe gelangen T- und B-Lymphozyten über postkapilläre Venolen mit hohem Endothel (HEV) unter Mithilfe von Chemokinen und spezifischen Adhäsionmolekülen auf Lymphozyten und Endothelzellen, sog. Homing-Rezeptoren.

Naive T-Lymphozyten unterliegen im Sinne einer Überwachung einer kontinuierlichen Zirkulation. Bei B-Lymphozyten übernehmen diese Funktion die Antikörper. Die Lymphozyten des peripheren Bluts sind überwiegend naive, nicht aktivierte Zellen und repräsentieren nur 1–2% des gesamten Lymphozyten-Pools. T-Lymphozyten machen etwa 75% aller Lymphozyten des Bluts aus.

34

1130

Kapitel 34 · Immunsystem

34.4

Komplementsystem

! Komplement kann auf 2 Wegen aktiviert werden.

Komplementaktivierung. Durch Antikörper werden lösliche Antigene oder Bakterien, Viren oder eukaryonte Zellen, an deren Oberfläche sich die Antigene befinden, zwar neutralisiert, sie sind damit aber noch nicht abgebaut. An die Neutralisierung schließt sich der Abbau durch Phagozytose und anschließende Zellverdauung oder die direkte Zellzerstörung an. Dabei spielt das Komplementsystem eine wichtige Rolle. Das Komplementsystem besteht aus über 20 verschiedenen Proteinen, die in Form ihrer Vorstufen im Blutplasma zirkulieren. Wird es aktiviert, so kommt eine kaskadenartige proteolytische Kettenreaktion in Gang, in deren Verlauf alle Komponenten in ihre aktive Form überführt werden. Damit weist dieses System eine deutliche Parallelität zum Gerinnungs-, Fibrinolyse-, Renin-Angiotensin- und Kininsystem auf. Alle diese Systeme erfahren eine sequentielle Aktivierung und dienen als schnelle und verstärkende Reaktion auf einen spezifischen Stimulus. Das Komplementsystem kann auf 2 Wegen aktiviert werden:

4 auf einem als klassische Aktivierung bezeichneten Weg, der durch Bindung von Antigenen an Antikörper, d.h. durch die adaptive humorale Immunreaktion aktiviert wird, und 4 einem als alternative Aktivierung bezeichneten Weg. Er stellt einen Teil des angeborenen Systems dar Beide Wege münden in eine gemeinsame Endstrecke. Molekulare Grundlage der Komplementwirkung ist die Assoziation der einzelnen Komponenten, die durch Komplement-eigene Serinproteasen mittels limitierter Proteolyse generiert werden. Am klassischen Aktivierungsweg des Komplementsystems sind 9 Glycoproteine (C1–C9) beteiligt. Diese haben Molekülmassen von 24–410 kDa und werden nach Bildung in der Leber, in kleinem Umfang auch am Ort der Entzündung von mononukleären Phagozyten und Epithelzellen in die Blutbahn sezerniert, wo sie etwa 10% der Globulinfraktion ausmachen. Wichtigste Funktionen des Komplementsystems (. Abb. 34.21). Die wichtigsten Funktionen des Komplementsys-

tems sind folgende:

34

. Abb. 34.21. Klassischer und alternativer Weg der Aktivierung des Komplementsystems. Gemeinsame Schlüsselreaktionen der beiden Wege der Komplementaktivierung sind die proteolytische Spaltung von C3 und C5 durch die C3- bzw. C5-Konvertase und die Bildung des cytolytischen Komplexes C5-9. Die initiale Reaktion kann im Falle der klassischen Komplementaktivierung (oben) durch IgG- oder IgM-Antigen-Komplexe ausgelöst werden, womit eine Verbindung zwischen der spezifischen Immunantwort und den Antigen-unspezifischen Wirkungen der Komplementfaktoren hergestellt

wird. Dagegen ist die alternative Komplementaktivierung (unten) nicht Antigen-spezifisch und kann auf der Oberfläche von fremden Mikroorganismen, nicht aber autologen Zellen, oder in Lösung durch spontan, oder über den klassischen Weg gebildetes C3b ausgelöst werden. Alle proteolytisch wirksamen Faktoren sind durch einen Querbalken gekennzeichnet. Der cytolytische Komplex C5–9 bildet in der Zellmembran eine Pore, durch die insbesondere Wasser und Ionen in die Zelle eindringen und diese zerstören können

1131 34.4 · Komplementsystem

4 Bildung eines zytolytischen Komplexes (C5–9) zur Abtötung von fremden Mikroorganismen und allogenen Zellen 4 Markierung (Opsonierung) von fremden Mikroorganismen zur Aufnahme und Abtötung in phagozytierenden Zellen (C3b) 4 Aktivierung und Beeinflussung der Leukotaxis (zielgerichtete Bewegung) von Leukozyten (C5a, Ba) 4 Aktivierung von Mastzellen und Granulozyten zur Freisetzung von Mediatoren, die auf die Blutgefäße wirken (Anaphylatoxine, C3a, C4a, C5a) 4 Mitwirkung bei der Entsorgung von Antigen-Antikörper-Immunkomplexen Das C1q-Molekül löst den klassischen Weg der Komplementaktivierung durch Assoziation mit Antikörpermolekülen aus. Klassische Komplementaktivierung. Eingeleitet wird die Reaktion z.B. durch die Bindung von IgG oder IgM an Membranoberflächen (. Abb. 34.21). Der Kontakt des FabBereichs mit dem Antigen erwirkt über eine Konformationsänderung die Aktivierung eines Oberflächenbereichs im Fc-Anteil, an den die C1-Komponente gebunden wird. Dieser Proteinkomplex besteht aus jeweils einem Molekül C1q, zwei Molekülen C1r und zwei Molekülen C1s. Bei der Bindung von IgG-Antikörpern sind wenigstens zwei Moleküle erforderlich, beim pentameren IgM reicht ein Molekül; IgA-, IgE- oder IgD-Antikörper bewirken keine Komplementaktivierung. C1q besteht aus drei Polypeptidketten, die über die Bindung an ein IgM-Molekül beziehungsweise zwei oder mehr IgG-Moleküle so verändert werden, dass C1r aktiviert und autoproteolytisch in die aktivierte Serinprotease C1r (proteolytisch aktive Faktoren werden durch einen horizontalen Balken markiert, vergleiche . Abb. 34.21) umgewandelt wird. Durch sie wird die Serinprotease C1s aktiviert. ! Durch die Komplementaktivierung werden die C3- und die C5-Konvertasen erzeugt.

Die aktive C1s-Serinprotease spaltet das Plasmaprotein C4 in C4a und C4b. Das entstandene C4b bindet an die Oberfläche des Bakteriums. Dort reagiert es mit einem C2-Molekül, welches in C2a und C2b gespalten wird. C2b ist ebenfalls eine Serinprotease. Der Komplex aus C4b und C2b ist die sog. C3-Konvertase des klassischen Aktivierungswegs. Diese Protease konvertiert C3-Moleküle in C3a, das eine lokale Entzündungsantwort in Gang setzt, und C3b, das an die Bakterienoberfläche bindet. Damit die enzymatische Wirkung der C3-Konvertase auf das Bakterium beschränkt bleibt und nicht auf Zellen des Wirtsgewebes übergeht, muss dieser Komplex covalent an die Bakterienoberfläche gebunden sein. Dies wird hauptsächlich über eine Bindung von C4b an Oberflächenproteine erreicht. Da C3b einen ähnlichen strukturellen Aufbau wie C4b aufweist, wird es

ebenfalls covalent auf der Bakterienoberfläche gebunden oder bei Nichtbindung hydrolytisch inaktiviert. C3 und C4 enthalten eine Thioesterbindung zwischen einem Cysteinylrest und der Carboxylgruppe eines Glutaminsäurerests. Sie ist zunächst im Inneren des Proteins verborgen, wird jedoch nach Aktivierung zu C3a bzw. C4a nach außen exponiert. Die Thioestergruppierung kann nun entweder durch Wasser gespalten oder aber durch NH2bzw. OH-Gruppen auf dem Antigen angegriffen werden. Dies führt zu einer covalenten Amidverknüpfung von C3 bzw. C4 mit dem Antigen. C3 ist das quantitativ bedeutendste Komplementprotein im Plasma. Durch die Komplementaktivierung werden große Mengen von C3b auf der Oberfläche des Bakteriums abgelagert (Opsonierung). Dadurch bildet sich eine Hülle, die das Signal für die endgültige Zerstörung des Bakteriums durch phagozytierende Wirtszellen gibt. Dies erfolgt über eine Aktivierung von Komplementrezeptoren auf phagozytierenden Zellen. Nach Anlagerung eines C3b-Moleküls an den C4b2aKomplex (C3-Konvertase) entsteht der C4b2a3b-Komplex der als C5-Konvertase die Umwandlung von C5 in C5a und C5b katalysiert. Damit wird die Voraussetzung für die Ausbildung des zytolytischen Komplexes geschaffen. In der Bilanz der Komplementaktivierung des klassischen Wegs sind also C3b- und C5b-Moleküle gebildet worden, die an die Oberfläche des Bakteriums binden, und C3a und C5a, die in die Umgebung freigesetzt werden. C3b-Moleküle werden von Komplementrezeptoren auf phagozytierenden Zellen erkannt, C3a und C5a sind starke lokale Entzündungsmediatoren (Leukotaxine und Anaphylatoxine). Die alternative Komplementaktivierung erfolgt über den membrangebundenen C3bBb-Komplex. Alternative Komplementaktivierung. Beim alternativen

Weg der Komplementaktivierung bindet das an die Bakterienoberfläche gebundene C3b den Faktor B, der strukturell C2 entspricht. Durch diese Assoziation kann der Faktor B durch die Plasmaprotease Faktor D in Bb und Ba überführt werden. Dabei entsteht der Komplex C3bBb, der der C3Konvertase des klassischen Wegs entspricht. Durch weitere Anlagerung von C3b entsteht, wie beim klassischen Weg, die alternative C5-Konvertase, die durch Properdin, ein 220 kD Protein, stabilisiert wird. Durch diese enzymatischen Ereignisse wird der klassische Weg verstärkt. Ein Teil des alternativen Wegs kann auch in Lösung beschritten werden. ! C3b auf Bakterienoberflächen bindet an Komplementrezeptoren von Phagozyten.

Komplementrezeptoren. Verschiedene Zellen des Immun-

systems (Makrophagen, Monozyten, polymorphkernige Granulozyten, B-Lymphozyten) oder auch Erythrozyten weisen auf ihrer Oberfläche Rezeptoren für Komplementproteine auf. Für die Ingangsetzung der Phagozytose von

34

1132

Kapitel 34 · Immunsystem

Bakterien sind insbesondere die Komplementrezeptoren CR1 (CD35) und CR3 (CD11 b/CD18) von Bedeutung, die sich auf Makrophagen/Monozyten und polymorphkernigen Leukozyten finden. Der Komplementrezeptor CR2 (CD21) findet sich hauptsächlich auf B-Lymphozyten und dient dort auch als Rezeptor für das Epstein-Barr-Virus. Komplementrezeptoren auf Erythrozyten spielen eine Rolle bei der Entfernung löslicher Antigen-Antikörper-Komplexe aus dem Blutkreislauf. CR2 auf B-Lymphozyten hat als Teil des B-Zell-CD19-Corezeptorkomplexes Anteil an der B-Lymphozytenaktivierung durch Antigene. Viele lösliche Antigene bilden Antigen-Antikörper-Immunkomplexe. Diese können Komplement direkt aktivieren. Durch die Anlagerung der aktivierten Komponenten C3b und C4b an den Immunkomplex wird eine Bindung an den Komplementrezeptor 1 auf der Oberfläche von roten Blutkörperchen ermöglicht. Diese transportieren die Komplexe in Leber und Milz, wo sie durch Makrophagen von der Erythrozytenoberfläche entfernt werden. Immunkomplexe, die nicht entfernt werden können, lagern sich an den Basalmembranen von Kapillaren, wie z.B. dem Glomerulum der Niere ab, wodurch eine Schädigung der Nierenfunktion auftritt. Die löslichen Komplementfragmente C3a, C4a und C5a lösen eine lokale Entzündungsreaktion aus. Sie führen zu Kontraktionen der glatten Muskulatur und erhöhen die Gefäßpermeabilität. C5a rekrutiert wie Chemokine polymorphkernige Granulozyten und Monozyten (Leukotaxine) an Gefäßwände, was die Voraussetzung für die Einwanderung in das Entzündungsgebiet darstellt. C3a, C4a und C5a wirken darüber hinaus als Anaphylatoxine. ! Die terminalen Komplementkomponenten bilden den membranangreifenden Komplex.

Komplementabhängige Zytolyse. Neben der komplementabhängigen Phagozytose können Bakterien auch durch die Bildung des membranangreifenden, zytolytischen Kom-

plexes abgetötet werden. An das in der Bakterienmembran abgelagerte Fragment C5b wird zunächst C6 und nachfolgend C7 angelagert. Dieser aus 3 Molekülen bestehende Komplex macht eine Konformationsänderung durch, wodurch das Molekül hydrophober wird und so in die Lipiddoppelschicht des Bakteriums eindringen kann. Die Anlagerung der C8-Komponente ermöglicht die konsekutive Bindung und Polymerisierung von C9-Molekülen, welche eine Pore in der Membran bilden. Der Komplex C5–9 wird als zytolytischer Komplex bezeichnet, der den Perforinporen entspricht, die durch zytotoxische T-Lymphozyten und natürliche Killerzellen gebildet werden. Durch den Kanal können Ionen und Wasser in die Zelle eindringen, wodurch es zu einer Zerstörung des Bakteriums kommt. ! Durch Antagonisten wird der Wirtsorganismus vor schädlichen Auswirkungen der Komplementaktivierung geschützt.

Regulation der Komplementkaskade. Der Wirtsorganismus schützt sich durch ein vielfältiges Kontrollsystem vor potenziell schädigenden Wirkungen des Komplementsystems. So wird z.B. die Aktivierung von C1 durch ein Plasmaprotein, den C1-Inhibitor, kontrolliert, der an den aktiven Enzymteil von C1 (C1r/C1s) bindet und dadurch von C1q abtrennt. Sein Fehlen bewirkt eine Erkrankung, die als Angioödem bezeichnet wird. Ein weiteres Membranprotein, der decay-accelerating-factor CD59, verhindert eine Gewebeschädigung infolge einer zufälligen Bindung von aktivierten Komplementkomponenten an Wirtszellen und die spontane Aktivierung von Komplementfaktoren im Plasma. Es ist über den Glycolipid-PhosphoinositolAnker (GPI-Anker) mit der Zelloberfläche verbunden. Sein Mangel induziert eine komplementvermittelte intravaskuläre Auflösung von roten Blutkörperchen (paroxysmale nächtliche Hämoglobinurie). Das Fehlen von C4 oder C2 bewirkt eine dem Lupus erythematodes visceralis ähnliche Autoimmunkrankheit.

34 In Kürze Komplementsystem: 4 Das Komplementsystem besteht aus Plasmaproteinen, die durch eine proteolytische Kaskade in Komponenten umgewandelt werden, die an der Opsonierung von Mikroorganismen, osmotischen Lyse von Zellen, Chemokinese von Phagozyten und als Anaphylatoxine an der Freisetzung von Mediatoren aus Mastzellen und Granulozyten beteiligt sind 4 Komplement wird über den klassischen Weg durch Antikörper (IgG, IgM) oder den alternativen Weg (an Bakterien gebundenes C3b) aktiviert 4 Die wichtigsten Reaktionen sind die proteolytische Konvertierung von C3 in C3a und C3b und C5 in

4

4 4 4

C5a und C5b sowie die Bildung des zytolytischen Komplexes C3a, C4a und C5a wirken als Anaphylatoxine, C5a wirkt darüber hinaus aktivierend und chemotaktisch auf neutrophile Granulozyten, C3b und C5b sind Opsonine Die Zytolyse von Zellen erfolgt über den porenbildenden zytolytischen Komplex, C5–C9 CR1 (CD35) und CR3 (CD11b/CD18) binden C3b auf Phagozyten Überschießende Komplementaktivierungen werden durch Antagonisten wie den C1-Inhibitor kontrolliert

1133 34.5 · Wechselwirkungen zwischen unspezifischer und spezifischer Immunantwort

34.5

Wechselwirkungen zwischen unspezifischer und spezifischer Immunantwort

phagen, dendritischen Zellen, Granulozyten und NK-Zellen spielen NK-T-Zellen in der Basisabwehr eine Rolle. Sie exprimieren einen einzigen überwiegend invarianten TZell-Rezeptor (TZRα-Kette), gehören damit zu den T-Zellen, exprimieren aber auch NK-Zell-Antigene. NK-TZellen erkennen Glycolipide, die – anders als Eiweiße bzw. Peptide – über CD1 präsentiert werden. Sie werden durch IFN-α/β, TNF-α, IL-1, IL-12 und IL-18 aktiviert und bilden IFN-γ und IL-4.

Proinflammatorische Vorgänge. Die angeborene, unspezifische Immunantwort und die adaptive spezifische Immunantwort sind eng aufeinander abgestimmt. Die Wechselwirkung erfolgt maßgeblich unter Mithilfe humoraler Faktoren, zu denen neben dem Komplementsystem die Cytokine, Chemokine, Akutphase-Proteine, Eikosanoide und Glucocorticoide gehören (. Abb. 34.22). Der initiale Antigenkontakt mit Zellen der unspezifischen Immunantwort, besonders Makrophagen und neutrophilen Granulozyten, führt zu einer schnellen Freisetzung der proinflammatorischen Cytokine TNF-α, IL-1, IL-6, IL-12 und IL-18, von Chemokinen, wie IL-8, und Eikosanoiden. Daran sind Toll-like-Rezeptoren und ihre Liganden beteiligt. Im Falle der Virusabwehr werden früh, innerhalb von 2 Tagen, neben TNF-α und IL-12 auch IFN-α und IFN-β gebildet, gefolgt von einer Aktivierung von NK-Zellen. Neben Makro-

Gerichtete Wanderung von Leukozyten. Chemokine, von denen etwa 45 bekannt sind (7 Kap. 25.5.4), wirken auf Leukozyten chemotaktisch. Die verschiedenen Chemokine benutzen z.T. unterschiedliche Rezeptoren, deren Gemeinsamkeit eine heptahelicale Struktur ist (7 Kap. 25.3.3). Zusammen mit Adhäsionsmolekülen, die über proinflammatorische Cytokine auf Leukozyten und Endothelzellen induziert werden, bewirken sie eine gerichtete Wanderung von Leukozyten zum Ort der Entzündung. Der Vorgang wird in der Regel unterstützt durch Eikosanoide, die vaso-

. Abb. 34.22. Wechselwirkung zwischen unspezifischer und spezifischer Immunantwort. Frühe unspezifische Ereignisse der Immunantwort sind die Freisetzung proinflammatorischer Cytokine (TNF-α, IL-1, IL-6, IL-12 und IL-18) sowie die Bildung von chemotaktischen Faktoren (Chemokine, Komplementfaktoren C3a, C5a), Prostaglandinen, Thromboxanen und Prostacyclinen, die auf die Gefäße im Sinne einer Vasodilatation und Permeabilitätszunahme wirken. Diese Vorgänge erfahren am Ort des Geschehens eine Amplifikation und leiten die spezifische Immunantwort u.a. durch Bildung von IL-12

und IL-18 sowie IL-4 und IL-10 ein. Die systemische Regulation der unspezifischen Immunantwort erfolgt über IL-6, aber auch TNF-α und IL-1. Die Leber besitzt Rezeptoren für IL-6 und bildet AkutphaseProteine wie C-reaktives Protein (CRP). Die notwendige negative Rückkopplung der Immunantwort erfolgt über den Hypothalamus bzw. die Hypophyse u.a. durch Induktion der Glucocorticoid-Produktion in der Nebennierenrinde sowie durch die regulatorischen T-Zellen (Treg) und die immunsuppressiv wirkenden Cytokine, TGF-β1, IL-10 und IL-4

34

1134

Kapitel 34 · Immunsystem

dilatorisch oder -konstriktorisch und gefäßpermeabilitätssteigernd sowie auf Makrophagen und Granulozyten aktivierend wirken. Eikosanoide entstehen aus Membranlipiden. Unter Mitwirkung der Phospholipase A2 wird die proinflammatorische Arachidonsäure (ω-6-Fettsäure) oder die anti-inflammatorische Eikosapentaensäure (ω-3-Fettsäure) freigesetzt, die über die Cyclooxygenase bzw. die Lipoxygenase in die entsprechenden Prostaglandine und Thromboxane bzw. Leukotriene umgewandelt werden (7 Kap. 12.4.2). Eine besondere Rolle spielt das proinflammatorische Leukotrien B4, das von Granulozyten gebildet wird und das Prostaglandin E2 und Thromboxan A2 aus Makrophagen. Anti-inflammatorisch wirkt z.B. Leukotrien B5, das aus Eikosapentaensäure entsteht. Mit der Ansammlung von Leukozyten am Entzündungsherd sind die Voraussetzungen für eine Verstärkung der unspezifischen und die Einleitung einer spezifischen Immunantwort z.B. über IL-12 gegeben. Die systemische Regulation der Immunantwort erfolgt über IL-6 und aus der Leber freigesetzten Akutphase-Proteinen, wie C-reaktives Protein, Fibrinogen oder Haptoglobin.

Terminierung der Entzündung. Terminiert werden die

Vorgänge durch immunsuppressive Mechanismen. Dabei spielen regulatorische T-Zellen (Suppressorzellen), die über direkten Zellkontakt oder über die immunsuppressiv wirkenden Cytokine TGF-β1 und IL-10 wirken, eine wichtige Rolle. Im Rahmen der T-Zell-Aktivierung wirkt CTLA-4 (cytotoxic T lymphocyte antigen) direkt terminierend (7 Kap. 34.3.3.3). Darüber hinaus spielen die aus der Nebennierenrinde freigesetzten Glucocorticoide eine wichtige Rolle. Die über die hypothalamisch/hypophysär-adrenale Achse (HAA) regulierten Glucocorticoide greifen an verschiedenen Stellen in die Immunantwort ein. Sie hemmen z.B. die Expression des IL-2- und Cyclooxygenase-2-Gens und bewirken eine veränderte Organverteilung von Leukozyten. Hohe Glucocorticoidspiegel (am Tage) bewirken eine Erniedrigung der Lymphozytenanteile und eine Erhöhung der Granulozytenanteile im Blut. Damit erklären sich die deutlichen Tag-Nacht-Schwankungen der Leukozytenanteile im Blut.

In Kürze Wechselwirkung zwischen unspezifischer und adaptiver Immunantwort: 4 Vermittler zwischen der unspezifischen, frühen und der adaptiven, verzögerten Immunantwort sind humorale Faktoren, die von Makrophagen, dendritischen Zellen, Granulozyten und NK-Zellen gebildet werden 4 Wesentliche Faktoren sind Toll-like-Rezeptoren und die proinflammatorischen Cytokine IL-1, TNF-α, Interferone, IL-6, IL-12 und IL-18 sowie Chemokine und Eikosanoide

34

34.6

Immunabwehr von Mikroorganismen

34.6.1

Bakterienabwehr

Die antimikrobielle Abwehr benutzt unabhängig vom Erreger immer sowohl angeborene wie erworbene, spezifische Abwehrmechanismen (. Tabelle 34.4). Andererseits verfügen Mikroorganismen, Bakterien, Viren und Parasiten über Strategien, sich der Immunantwort zu entziehen. Die Abwehrmechanismen gegenüber extrazellulär sich vermehrenden Bakterien unterscheiden sich prinzipiell von denen gegen Erreger, die sich intrazellulär vermehren (Bakterien und Viren). ! Die Immunabwehr gegen extrazelluläre Bakterien erfolgt durch komplementabhängige Lyse und Abtötung nach Endozytose.

4 Chemokine und Eikosanoide koordinieren die Wanderung von Leukozyten zum Ort der Entzündung. IL-12 und IL-18 sowie IL-4 und IL-10 regulieren die TH-Polarisierung, d.h. die Ausrichtung der adaptiven Immunantwort 4 Die Terminierung der adaptiven und unspezifischen Immunantwort erfolgt über regulatorische T-Zellen, immunsuppressive Cytokine (IL-10, IL-4, TGF-β1) sowie durch die über die Cytokinstimulation des Hypothalamus freigesetzten Glucocorticoide der Nebennierenrinde

Unspezifische Abwehr extrazellulärer Bakterien. Eiter erregende Keime wie Staphylokokken und Streptokokken oder auch Gram-negative Kokken und Stäbchenbakterien (E. coli) vermehren sich extrazellulär. Sie lösen Entzün. Tabelle 34.4. Zellen und Faktoren der antimikrobiellen Immunabwehr Mikroorganismen

Immunantwort/Immunreaktion unspezifisch

spezifisch

Bakterien, extrazellulär

Komplement neutrophile Granulozyten Makrophagen

Antikörper

Bakterien, intrazellulär

NK-Zellen (IFN-γ) Makrophagen

TH1-Zellen Makrophagen TC-Zellen

Viren

Interferone NK-Zellen

TC-Zellen (IFN-γ) Antikörper

1135 34.6 · Immunabwehr von Mikroorganismen

dungsprozesse aus und bilden Endotoxine sowie Exotoxine. Das bekannteste Endotoxin Gram-negativer Bakterien ist Lipopolysaccharid (LPS). Die unspezifische Abwehr extrazellulärer Keime erfolgt zum einen durch die alternative Komplementaktivierung und die damit verbundene C3bOpsonierung und Zell-Lyse. Ein wichtiger Mechanismus ist die Phagozytose von Keimen durch neutrophile Granulozyten oder Makrophagen und deren intrazelluläre Abtötung. Neutrophile Granulozyten binden Bakterien über unterschiedliche Membranrezeptoren (z.B. MannoseRezeptor, CD14, Komplementrezeptoren CR1 und CR3 sowie spezielle Toll-like-Rezeptoren) und phagozytieren sie. Durch Fusion des Phagosoms mit lysosomenähnlichen granulahaltigen Strukturen entstehen Phagolysosomen, in denen die Bakterien zerstört werden. Die dabei wirksamen Effektormoleküle der primären, azurophilen Granula neutrophiler Granulozyten sind u.a. Myeloperoxidase, Lysozym, Kathepsin G, Proteinase 3, Elastase und Defensine. Die so genannten sekundären Granula enthalten z.B. Kollagenasen. Parallel zur Wirkung der Phagolysosom-Effektormechanismen wird mit der Phagozytose der sog. respiratory burst (7 Kap. 29.3.1) und damit die Bildung von zytotoxisch reaktiven Sauerstoffspezies ausgelöst, die extrazellulär und intrazellulär wirken. Daneben kommt es zur Bildung von toxischem Stickstoffmonoxid (NO). Makrophagen binden extrazelluläre Keime über Tolllike-Rezeptoren, den Mannose-Rezeptor oder die Komplementrezeptoren CR3 (CD11b/CD18) und CR4 (CD11c/ CD18). Auch hier wird mit der Endozytose die Bildung von reaktiven Sauerstoffspezies und NO in Gang gesetzt. Daneben bilden die so aktivierten Makrophagen proinflammatorische Cytokine wie IL-1, TNF-α und IL-6, die weitere Makrophagen und andere Zellen aktivieren.

die Wirtszelle aufweisen. Durch sie bedingte Erkrankungen verlaufen oft chronisch. Die Bakterien können auch über eine lange Zeit ohne Krankheitszeichen persistieren. Unspezifische Eliminierung von intrazellulären Bakterien.

Aktivierte NK-Zellen produzieren IFN-γ. Dieses Cytokin aktiviert Makrophagen, die die Abtötung der Keime (z.B. Listerien) vornehmen. Im Gegensatz zu extrazellulären Keimen spielen bei intrazellulären Bakterien Antikörper in der Abwehr keine entscheidende Rolle. Spezifische Abwehrmechanismen. Sie bauen auf der un-

spezifischen Immunantwort auf und sind T-Zell-vermittelt. Im Zentrum stehen hier TH1-Zellen, die über die IFN-γBildung das zytolytische Potential von Makrophagen aktivieren (NO, Sauerstoffmetabolite) sowie TC-Zellen, die über Granulysin, NO-Induktion oder indirekt durch Freisetzung der Bakterien die spezifische Eliminierung der Bakterien bewirken (. Abb. 34.11c–e). Bei unzureichender Abtötung der Bakterien kommt über die dauerhafte Antigenpräsenz eine fortlaufende T-Zell- und MakrophagenAktivierung zustande. Dabei bilden sich Granulome. Diese Zellgebilde bestehen aus bakterienhaltigen Makrophagen, fusionierten Makrophagen (Riesenzellen), differenzierten Monozyten (Epitheloidzellen) und Lymphozyten. Sie begrenzen die Bakterienausbreitung, haben aber eine Gewebeschädigung zur Folge. Ein Beispiel dafür ist die Granulombildung in der Lunge bei chronisch verlaufender Tuberkulose.

34.6.2

Virusabwehr

Spezifische Abwehr extrazellulärer Bakterien. Sie erfolgt

! Die Immunabwehr gegen Viren nutzt Interferone, NKZellen und TC-Zellen.

überwiegend unter Mithilfe von spezifischen Immunglobulinen. IgG-Moleküle wirken als Opsonine, IgG und IgM im Rahmen der Komplementaktivierung und Neutralisierung von Bakterientoxinen. Im Falle einer massiven Staphylokokken- und Streptokokkeninfektion können Bakterien als Superantigene wirken und einen toxischen Schock auslösen (7 Superantigene 7 Kap. 34.3.3.5).

Viren vermehren sich obligat in Zellen. Die meisten Virusinfektionen erfolgen über Schleimhäute oder über das Blut. Dabei werden normale Oberflächenstrukturen von Zellen als Rezeptoren benutzt (7 Kap. 10.2). Epstein-Barr-Viren nutzen den Komplementrezeptor 2 (CD21), HI-Viren das CD4- und CD8-Molekül sowie Chemokinrezeptoren, wie CCR5 als Corezeptoren.

! Die Immunabwehr gegen intrazelluläre Bakterien nutzt NK-Zellen und zytotoxische T-Zellen (TC-Zellen).

Intrazellulär auftretende Bakterien werden eingeteilt in solche, die nur fakultativ in infizierten Makrophagen auftreten, und solche, die obligat die Wirtszelle für ihre Vermehrung benutzen. Zur ersten Gruppe gehören die Mykobakterien, Salmonellen und Listerien. Zu den obligat intrazellulär auftretenden Bakterien gehören Rickettsien und Chlamydien, die neben Makrophagen auch Epithel- und Endothelzellen besiedeln können. Beiden Gruppen ist gemeinsam, dass sie keine oder nur eine geringe Toxizität für

Primäre unspezifische Antwort des Immunsystems gegen Viren. Im ersten Schritt bilden infizierte Zellen, wie Epithel-

zellen, virostatisch wirkendes Interferon-α (IFN-α) und Interferon-β (IFN-β). Damit erfolgt eine Begrenzung der Replikation und Ausbreitung der Viren innerhalb der ersten 2 Tage. Interferone bewirken eine verstärkte Expression von HLA-Molekülen, zusammen mit IL-12 aus Makrophagen auch eine Aktivierung von NK-Zellen. NK-Zellen erkennen virusinfizierte Zellen und zerstören diese bzw. tragen durch Sekretion von IFN-γ zur weiteren Einschränkung der Virusreplikation bei. Der molekulare Mechanis-

34

1136

Kapitel 34 · Immunsystem

mus der Erkennung durch NK-Zellen ist noch nicht vollständig bekannt. Eine Voraussetzung für die NK-mediierte Lyse von virusinfizierten Zellen ist eine geringe MHC-IExpression der Zielzellen. Das Maximum der NK-Wirkung liegt etwa am 3. Tag nach Infektion. Die spezifische Immunantwort gegen Viren. Sie erfolgt im

Lymphknoten. Viruspartikel oder virusbeladene Zellen, z.B. dendritische Zellen, gelangen in die drainierenden Lymphknoten, wo eine klonale Vermehrung von T- und B-Zellen stattfindet. Dies geht mit deutlichen Vergrößerungen der Lymphknoten einher. Die Auswanderung der spe-

zifischen Effektor-TC-Zellen in das Gewebe erfolgt zwischen dem 7. und 9. Tag nach Infektion. Parallel dazu werden virusspezifisches IgM, später IgG und IgA durch Plasmazellen synthetisiert und sezerniert. Die spezifischen Effektoren bei der Virusabwehr sind danach zyotoxisch wirkende CD8-positive TC-Zellen, IFN-γ, das durch TCoder TH-Zellen gebildet wird und spezifische Antikörper. Mit diesen Instrumentarien werden die Viren innerhalb der folgenden 3 Tage, also um den 10. bis 12. Tag nach Infektion, eliminiert. Den wesentlichen ersten Schutz vor einer erneuten Infektion bieten Antikörper zusammen mit spezifischen TH-Zellen sowie TC-Zellen.

In Kürze Die Immunabwehr von Mikroorganismen nutzt immer angeborene wie adaptive Abwehrmechanismen: 4 Extrazelluläre Bakterien werden durch komplementabhängige Lyse oder Opsonierung sowie durch Phagozytose über Makrophagen und Granulozyten eliminiert. Effektormoleküle sind Myeloperoxidase, Lysozym, Kathepsin G, Proteinase 3, Elastase, Defensine, Kollagenasen sowie reaktive Sauerstoffspezies und NO 4 Für die spezifische Abwehr von extrazellulären Bakterien werden Immunglobuline, besonders IgG und IgM genutzt 4 Intrazelluläre Bakterien werden unspezifisch durch IFN-γ aus NK-Zellen abgetötet. Die spezifische Abwehr erfolgt über TH1-Zellen durch Aktivierung von

34

34.7

Pathobiochemie

34.7.1

Immundefekte

Immundefekt ist ein Sammelbegriff für verschiedene angeborene oder erworbene Erkrankungen, die durch eine erhöhte Infektanfälligkeit charakterisiert sind. Rezidivierende pyogene (eitererzeugende) Infektionen treten bei Defekten der humoralen Immunität auf, bei Defekten der zellvermittelten Immunität kommt es häufig zu Virus- oder Pilzinfektionen. Oft treten kombinierte Defekte auf, verbunden mit opportunistischen Infektionen, d.h. durch Erreger, die von einem normal funktionierenden Immunsystem beherrscht werden. Dazu gehört z.B. die Infektion durch den Pilz Candida albicans oder Pneumonien bedingt durch den Parasiten Pneumocystis carinii. Primäre oder genetisch bedingte Immundefekte sind selten und treten meist wenige Monate nach der Geburt auf, wenn die Leihimmunität der Mutter zurückgeht. Mit der zunehmenden molekularen Charakterisierung der Defekte wächst deren Zahl. Man kennt heute mehr als 30. Der häufigste erworbene Immundefekt ist der selektive IgAMangel (Inzidenz 1:300–1:800), gekennzeichnet durch feh-

Makrophagen (IFN-γ) oder über TC-Zellen, die infizierte Makrophagen lysieren und toxische Granulysine freisetzen 4 Unzureichende Abtötung von intrazellulären Bakterien führt zur Bildung von Zellaggregaten, genannt Granulome. Diese, bestehen aus Bakterien enthaltenden Makrophagen, fusionierten Makrophagen, Epitheloidzellen und Lymphozyten 4 Viren vermehren sich obligat in Zellen. Der erste unspezifische Schritt der Virusabwehr erfolgt durch IFN-α und IFN-β sowie durch aktivierte NK-Zellen 4 Die spezifische Virusabwehr findet im Lymphknoten statt. Spezifische Effektoren sind TC-Zellen (CD8), IFN-γ aus T-Zellen und spezifische Antikörper (IgM, IgG, IgA)

lendes oder extrem niedriges IgA ( > Einleitung Biochemische Untersuchungsmethoden wurden von Otto Warburg in den 30er Jahren des vergangenen Jahrhunderts in die Krebsforschung eingeführt. Dieser machte vor allem Störungen der Atmungskette und des Glucosestoffwechsels für die Malignität verantwortlich. Im Gefolge dieser Pionierforschungen suchte man seit Ende der 40er Jahre nach allen möglichen biochemischen Unterschieden zwischen Krebs- und normalen Zellen. Diese Bemühungen haben erst seit Beginn der 80er Jahre des vergangenen Jahrhunderts durch die Entdeckung von Krebsgenen zu ersten sichtbaren Erfolgen geführt. Das Auffinden der molekularen Unterschiede zwischen Normal- und Krebszellen stellt nicht nur die Grundlage zum Verständnis der malignen Transformation dar, sondern eröffnet auch neue Wege zur Entwicklung von Krebstherapeutika. Denn das Problem der dem Onkologen zur Verfügung stehenden Krebsmittel war bisher ihre mangelnde Spezifität, d.h. die Tatsache, dass sie auch auf gesunde Gewebe wirken. Der Ansatz der zielgerichteten Tumortherapie (»targeted therapy«) auf der Basis tumorbiochemischer Erkenntnisse hat zur Entwicklung neuer Krebsmittel wie monoklonaler Antikörper oder TyrosinkinaseInhibitoren geführt, die bereits Eingang in die Tumorbehandlung gefunden haben. Die molekulare Dimension des Krebsproblems ist extrem vielschichtig, da es den Krebs par excellence nicht gibt: Tumoren der einzelnen Gewebe unterscheiden sich, wie auch die normalen Gewebe, voneinander; in einem Gewebe entstehen unterschiedliche Tumoren, und viele Tumoren weisen zudem Subpopulationen von Zellen auf (Tumorheterogenität). Darüber hinaus nehmen die Krankheiten bei einzelnen Patienten einen sehr unterschiedlichen, individuellen Verlauf.

35.1

Fehlregulation des Wachstums und der Differenzierung bei Tumoren

! Störungen des Fließgleichgewichts zwischen Zellaufund -abbau führen zu Tumoren.

35

Der menschliche Organismus besteht aus etwa 1013 Zellen, die in Organen und Geweben jeweils Funktionseinheiten bilden. Diese bestehen aus verschiedenen Zelltypen in genau festgesetzten Proportionen und mit definierter, räumlicher Anordnung. Die Entwicklung, die zu den einzelnen Arten spezialisierter Zellen führt, wird als Differenzierung bezeichnet. Darüber gibt es praktisch in allen Geweben weitere Spezialisierungen: So besteht die Population der Epidermiszellen der Haut zu einen aus Basalzellen zum anderen aus Zellen verschiedener Keratinisierungs-Stadien (7 Kap. 24.8.2). Die mitotische Aktivität ist auf die basalen Zellen beschränkt, bei deren Teilung jeweils wieder eine Basalzelle und eine Zelle entstehen, die sich weiter differenziert, d.h. die Fähigkeit zur Teilung verliert, dafür aber die Fähigkeit gewinnt, Keratin zu produzieren. Während Zellen der Epidermis ständig abgebaut und durch neue ersetzt werden, bleiben andere Zellen, wie z.B. der Großteil der Nervenzellen, als individuelle Einheit bis zum Tode des Menschen bestehen. Der Austausch der Epidermiszellen ist wohl organisiert: Die Stammzellen produzieren durch Replikation ständig Nachkommen, die nach mehreren Differenzierungsschritten den Platz der verlorenen Zellen einnehmen. Zwischen Wachstum und Differenzierung einerseits und dem programmierten Zelltod durch Apoptose (7 Kap. 7.1.5; 7 Kap. 25.8.2) andererseits besteht ein Fließgleichgewicht, d.h. die Anzahl der neu produzierten Zellen entspricht genau der der abgebauten Zellen. Eindrucksvolles Beispiel ist das Darmepithel, das beim Menschen wie die Epidermis innerhalb von einigen Tagen regeneriert wird.

! Störungen des Gleichgewichts von Zellneubildung und programmiertem Zelltod können zu Tumoren führen.

Neben den Basalzellen der Haut und den Mukosazellen haben auch die Zellen des Knochenmarks eine dauerhaft hohe Proliferationsrate. Daneben existieren Zellen mit nur zeitweilig erhöhter Mitoserate wie Fibroblasten oder Endothelzellen, die bei Verletzungen aktiv werden, und Zellen endokriner Gewebe wie das Endometrium, die in Zyklen proliferieren. Insgesamt sollen während eines Menschenlebens 1016 Zellen unbrauchbar und durch neue Zellen ersetzt werden. Wie der Ausgleich des Zellverlusts durch entsprechende Zellproliferation reguliert wird, ist noch unbekannt. Die molekularen Grundlagen sind jedoch von großem praktischem Interesse, wenn bei Störungen des Fließgleichgewichts die Zahl der neu gebildeten Zellen die der verloren gegangenen übersteigt. Die überzähligen Zellen können sich teilweise oder vollständig, zeitweilig oder auch immer der Regulation entziehen: die Folge sind harmlose Wucherungen (benigne Tumoren) oder bösartige Krebsgeschwulste (maligne Tumoren). Häufig ist mit der erhöhten Proliferation auch eine Unfähigkeit zur Differenzierung verbunden. Deshalb zielen Therapieansätze nicht nur auf eine Hemmung der Proliferation, sondern auch auf eine Induktion der Differenzierung. Je nachdem, ob die Tumoren von Mesenchym- oder Epithelzellen ausgehen, wird zwischen Sarkomen und Karzinomen unterschieden. Tumoren der Blut bildenden Zellen werden als Leukämien bezeichnet. Ein Tumor entsteht aus einer neoplastisch veränderten Zelle und stellt damit einen Klon dar.

1143 35.3 · Onkogene

35.2

Tumorentstehung (Cancerogenese)

! Onkogene und Antionkogene sind die verantwortlichen Krebsgene.

Krebs stellt eine genetische Erkrankung in dem Sinne dar, dass das Genom der Krebszelle durch eine Akkumulation von genetischen Veränderungen gekennzeichnet ist und dass diese Veränderungen von einer Krebszellgeneration auf die nächste übertragen werden. Wesentliches Ziel der Krebsforschung ist die Identifizierung der für die Entstehung und Progression der einzelnen Tumorerkrankungen beim Menschen verantwortlichen Gene (nach den Sequenzdaten des menschlichen Genoms etwa 900), der »Krebsgene«. Zu den »Krebsgenen« gehören die Onkogene und die Antionkogene, die die Tumorentstehung fördern bzw. supprimieren. Diese Gene sind im normalen, d.h. genetisch nicht veränderten Zustand häufig als Schlüsselgene für die Vorgänge der Signaltransduktion (7 Kap. 25) verantwortlich. Zwischen den Produkten beider Gengruppen, den Onkoproteinen und Antionkoproteinen, besteht ein fein reguliertes Gleichgewicht: Störungen dieses Gleichgewichts durch die konstitutive Aktivierung von Onkogenen und/oder die Inaktivierung von Antionkogenen begünstigen die Tumorentstehung. Wahrscheinlich sind verschiedene Mutationen in unterschiedlichen Genen für die Entstehung und Progression der einzelnen Tumorerkrankungen verantwortlich und unterschiedliche Gene mit unterschiedlichen Mutationen beim einzelnen Patienten verändert, was den individuellen Verlauf der Erkrankung und das individuelle Ansprechen auf eine Behandlung erklärt.

35.3

Onkogene

35.3.1

Mechanismus der Onkogenwirkung

. Tabelle 35.1. Protoonkogene und verwandte Onkogene (Auswahl) 1. Wachstumsfaktoren PDGF (platelet derived growth factor) FGF (fibroblast growth factor)

sis-Onkogen int 2-Onkogen

2. Transmembranäre Wachstumsfaktorrezeptoren EGF-Rezeptor M-CSF-Rezeptor

erbB-Onkogen fms-Onkogen

3. Membranassoziierte Tyrosinkinasen Abl-Tyrosinkinase

abl-Onkogen

4. Membranassoziierte Guaninnucleotid-bindende Proteine Ras-Protein

ras-Onkogen

5. Cytosolische Serin-Threoninkinasen 6. Cytosolische Hormonrezeptoren Schilddrüsenhormonrezeptor

raf-mil-Onkogen mos-Onkogen erbA-Onkogen

7. Transkriptionsfaktoren

fos-, jun-, myc-, myb-, rel-Onkogene

8. Apoptosefaktoren

bcl2-Onkogen

nimmt deswegen an, dass diese viralen Onkogene durch Übernahme aus dem Genom der jeweiligen Wirtszelle des Virus – eventuell in veränderter Form (z.B. ohne Introns) – entstanden sein müssen. ! Protoonkogene sind an der Transduktion von Wachstumssignalen beteiligt.

Das Zellwachstum wird durch eine große Zahl von Wachstumsfaktoren reguliert. Diese sind Polypeptide, die von verschiedenen Zellen gebildet werden und u.a. den Übergang von Zellen aus der G0- bzw. G1-Phase in den Zellzyklus bewirken. Dieser Übergang erfolgt in zwei Schritten (. Abb. 35.1): Zuerst muss die Zelle durch sog. Kompe-

! Viele Onkogene leiten sich von den an der Wachstumsregulation beteiligten Genen ab.

Viele Onkogen-Proteine weisen Strukturähnlichkeiten mit an der Wachstumsregulation beteiligten Proteinen auf. Onkogene sind durch Mutationen aus diesen normalen, für den Fortbestand einer Zelle notwendigen Genen entstanden. Die letzteren werden dementsprechend auch als Protoonkogene, d.h. Vorläufer von zellulären Onkogenen (c-Onkogene) bezeichnet. . Tabelle 35.1 gibt eine Zusammenstellung der wichtigsten Protoonkogene und der daraus abgeleiteten zellulären Onkogene. Die Analyse Tumor bildender Gene aus Retroviren zeigt darüber hinaus, dass auch diese als virale Onkogene (v-Onkogene) bezeichneten Gene in vielen Fällen Sequenzhomologie zu den an der Wachstumsregulation beteiligten Genen zeigen. Man

. Abb. 35.1. Beeinflussung des Zellzyklus durch Kompetenz- und Progressionsfaktoren. Kompetenzfaktoren wie EGF, PDGF oder FGF können durch bestimmte Onkogene substituiert werden; die Wirkung von Progressionsfaktoren ist z.B. durch TGF-β antagonisierbar

35

1144

Kapitel 35 · Tumorgewebe

. Abb. 35.2. Ras-Inaktivierung durch Bindung des GAP-Proteins. Das mutierte Ras-Protein kann das GAP-Protein nicht mehr binden, sodass das Ras-Protein daueraktiviert bleibt

35

tenzfaktoren von der G0- in die G1-Phase überführt werden und anschließend unter dem Einfluss von Progressionsfaktoren mit der DNA-Synthese beginnen. Zur Gruppe der Kompetenzfaktoren zählen der epidermale Wachstumsfaktor (EGF), der transformierende Wachstumsfaktor-D (TGF-D), der Fibroblastenwachstumsfaktor (FGF) und der Plättchenwachstumsfaktor (PDGF) (7 Kap. 7.1.4, 25.1.3). Der insulinähnliche Wachstumsfaktor-1 (IGF-1) oder Insulin in hohen Konzentrationen sind wichtige Vertreter der Progressionsfaktoren (. Abb. 35.1). Der Durchtritt durch die G1-Phase erfordert die kontinuierliche Wachstumsfaktor-Stimulation über mehrere Stunden, da die Zellen sonst wieder in den G0-Zustand zurückkehren. Während eines bestimmten Abschnitts der G1-Phase müssen sowohl Kompetenz- als auch Progressionsfaktoren anwesend sein, anschließend nur noch Progressionsfaktoren. Einige Cytokine wie der transformierende Wachstumsfaktor-E (TGF-E), Interferone oder Tumornekrosefaktor D (TNF-D) antagonisieren die Wirkung von Wachstumsfaktoren. Der erste Schritt in der Wechselwirkung von Wachstumsfaktoren mit der Zielzelle ist die Bindung an einen spezifischen Membranrezeptor, meist aus der Familie der Rezeptoren mit Tyrosinkinaseaktivität (7 Kap. 25.5.1). Eine wichtige Funktion bei dieser Signaltransduktion kommt dem G-Protein Ras zu, das, das nach Aktivierung durch Rezeptoren mit Tyrosinkinaseaktivität GTP bindet und damit die Signaltransduktionskaskade weiterleitet. Zur Signallöschung dient das GAP-Protein (GAP, GTPase activating protein). Dies fördert die GTPase-Aktivität von Ras und leitet damit dessen Inaktivierung ein (. Abb. 35.2). Es gibt Mutationen, die einen Aminosäureaustausch im Ras-Protein auslösen, der die Bindung des GAP-Protein und damit die Ras-Inaktivierung unmöglich macht. Dies führt zu einer Arretierung des durch den Wachstumsfaktor aktivierten Zustands der Zelle und wirkt damit mitogen.

35.3.2

Protoonkogenaktivierung durch Mutationen

! Onkogenmutationen wirken dominant.

Onkogene werden bei menschlichen Tumoren durch Mutationen aktiviert. Die Wirkung aktivierter Onkogene ist dominant, d.h. sie wird bereits manifest, wenn das zweite Allel noch nicht aktiviert ist. Onkogen-Mutationen können ständig in somatischen Zellen auftreten. Da sie nicht in Keimbahnzellen beobachtet worden sind, wirken Onkogenmutationen während der Embryonalentwicklung offenbar letal. Punktmutationen verursachen den Austausch einer Aminosäure, so z.B. in den Positionen 12, 13 oder 61 des Ras-Onkoproteins bei Patienten mit Colontumoren. Chromosomale Translokationen wie bei der chronischen Leukämie (9/22) führen zum Bruch von Onkogenen und zur anschließenden Fusion der Bruchstücke mit Ausbildung von Fusionsgenen, die in ihrer Funktion verändert sind. Durch andere Translokationen (t8/14) gerät ein Onkogen unter den Einfluss eines neuen regulatorischen Systems (wie z.B. das c-myc-Onkogen beim Burkitt-Lymphom unter den Einfluss des Immunglobulinlocus). Folge der Onkogenmutation ist die konstitutive Anschaltung eines Signaltransduktionswegs, auch wenn kein exogenes Wachstumssignal vorliegt. Sie macht die Zelle also vom Liganden unabhängig. Alternativ kann eine Daueraktivierung auch durch die konstitutive Produktion eines Wachstumsfaktors hervorgerufen werden, für den die Zelle einen Rezeptor besitzt. Diese autokrine Stimulation der Proliferation (7 Kap. 25.1.1) ist demnach ligandenabhängig. Darüber hinaus können auch Gene, die am programmierten Zelltod (Apoptose) beteiligt sind, durch eine veränderte Expression zu einer Verlängerung der Überlebenszeit der Zelle (ohne Proliferationssteigerung) führen. Dies kann z.B. durch eine Erhöhung der bcl 2-Konzentration oder den Verlust von

1145 35.4 · Antionkogene

Caspase-Inhibitoren hervorgerufen werden (7 Kap. 7.1.5, 7 Kap. 9.3.1, 9.3.5).

35.4

Antionkogene

35.4.1

Identifizierung von Antionkogenen

! Bei familiären Tumoren liegt bereits eine Keimbahnmutation vor.

Wesentliche Anstöße erhielt die Antionkogenforschung durch das Postulat von Alfred Knudson von der University of Texas in Houston zu Anfang der 70er Jahre des vergangenen Jahrhunderts, nach dem das Retinoblastom (RB), ein Augentumor bei Kindern, durch zwei konsekutive Mutationen im Genom entsteht. 4 Danach treten bei der sporadischen Form des Retinoblastoms beide Mutationen in der Retinazelle als somatische Mutationen nach der Konzeption auf 4 wohingegen bei der familiären Form eine Mutation als Keimbahnmutation von einem Elternteil ererbt und die zweite als somatische Mutation erworben wird (. Abb. 35.3) Diese Hypothese geriet in Zusammenhang mit den Antionkogenen, als die Natur dieser Keimbahn- und somatischen Mutationen erkannt wurde: Sie führen nämlich zur Inaktivierung eines Gens auf Chromosom 13, das als Rb-Gen (7 Kap. 7.1.3; 35.4.2) bezeichnet wird. Grundlage für diese Identifizierung waren cytogenetische Analysen, die ein gelegentliches Fehlen der Bande q14 des Chromosoms 13 bei Retinoblastomtumorzellen ergeben hatten. Anschließende genetische Analysen erbrachten den Beweis,

. Abb. 35.3. Vergleich der zeitlichen Mutationsabfolge bei familiären und sporadischen Tumoren. Gezeigt sind die beiden Allele, die nacheinander durch Mutationen geschädigt werden müssen

dass es sich bei den beiden postulierten Mutationen um die Inaktivierung der beiden Allele dieses Gens handelte. Es wurde auch klar, dass das Rb-Gen rezessiv wirkte, da Kinder mit nur einem defekten Allel eine normale Entwicklung erfahren. Nur die Zelle, die auch das normale Wildtyp-Allel zusätzlich verliert, ist wachstumsgestört. ! Eine somatische Mutation ist an dem Verlust der Heterozygotie erkennbar.

Zur Identifikation chromosomaler Regionen, die Antionkogene enthalten, dient die DNA-Sequenzverlust-Analyse, die am Beispiel des Retinoblastoms veranschaulicht werden soll (. Abb. 35.4), das – wie besprochen – als hereditäre und sporadische Form vorkommt. Geht man von der Annahme aus, dass der hereditären Form eine Keimbahnmutation des Retinoblastomlocus zugrunde liegt, dann wird das mutierte Allel bei einem Nachfahren des Patienten in allen seinen Keimzellen und somatischen Zellen vorkommen. Der Nachkomme ist also heterozygot für den Locus, da er auf einem Chromosom das normale und auf dem anderen das mutierte Allel aufweist. Tritt nun in einer Retinazelle eine somatische Mutation auf, die zum Verlust des normalen Allels führt, so verliert die entstehende Tumorzelle ihren heterozygoten Zustand (loss of heterozygosity, LOH). Die Mutation, die zum Verlust des zweiten Allels führt, kann mit einer Frequenz von 10–6 pro Zellgeneration auftreten, sodass zwei nicht-funktionierende Allele entstehen, die jedoch Mutationen in unterschiedlichen Regionen aufweisen können (gemischte Heterozygotie). Wesentlich häufiger (mit 10–3 bis 10–4 pro Zellgeneration) erfolgt der Verlust des Wildtyp-Allels jedoch durch andere Mechanismen wie chromosomale non-disjunction, meiotische Rekombination oder Genkonversion, sodass die meisten Tumoren, die beide Allele des Antionkogens verloren haben, identisch mutierte Allele aufweisen. Ist eine solche Mutation mit dem Verlust einer chromosomalen Bande (7 oben) oder gar des gesamten Chromosoms verbunden, so ist sie entsprechend einfach unter dem Mikroskop mit Hilfe der Cytogenetik zu erkennen (ohne dass dadurch der genaue Locus definiert wäre). Die meisten Mutationen liegen jedoch auf submikroskopischer Ebene. Da aufgrund des oben geschilderten Mechanismus der Entstehung der Heterozygotie die chromosomalen Regionen, die das mutierte Allel flankieren, oft ebenfalls betroffen sind, können polymorphe Marker, die in der Nähe der mutierten Region liegen und ebenfalls vor der Tumorentstehung heterozygot waren, einen parallelen Verlust der Heterozygotie aufweisen. Zur Identifizierung bisher noch nicht bekannter Antionkogene werden auch sog. anonyme Sonden (da zwar ihr Bindungsort an einen Chromosomenabschnitt, nicht aber ihre Struktur bekannt ist) als Marker für Polymorphismen verwendet: Mehrere Hundert solcher anonymen DNASonden für alle Chromosomen mit einem mittleren Abstand von etwa 10 Millionen Basen stehen für diese Untersuchungen zur Verfügung. Um den Verlust von Allelen zu

35

1146

Kapitel 35 · Tumorgewebe

. Abb. 35.4. Verlust der Heterozygotie (LOH) am Beispiel des Retinoblastoms. Oben links: Vererbung eines Chromosom 13 mit einem rezessiven Defekt am RB 1-Locus (als rb bezeichnet) führt dazu, dass das Kind in allen Zellen rb/+ ist. Das Retinoblastom kann durch Verlust des dominanten Wildtyp-Allels durch im unteren Abbildungsteil beschriebene Mechanismen entstehen. Oben rechts: Eine rezessive Mutation, die in einer einzelnen Zelle auftritt, könnte ebenfalls durch einen der angegebenen Mechanismen erkannt werden. Unten: Der an der Tumorentstehung beteiligte chromosomale Mechanismus kann durch den Vergleich der Genotypen der Loci A und B auf Chromosom 13 in Normal (N)– und Tumorgewebe (T) analysiert werden: (α) Verlust des Wildtypchromosoms, sodass ein Verlust dieser Allele im Tumorgewebe auftritt, (β) Verlust des Wildtypchromosoms und Duplikation des mutierten Chromosoms, sodass die Intensität der verbliebenen Allele doppelt so stark im Tumor- wie im Normalgewebe ist, (γ) Rekombination unter Beteiligung eines Bruchpunkts zwischen Locus A und rb1, sodass ein Locus im Tumor heterozygot bleibt, während der andere ein Allel verliert und das zweite verdoppelt, und (δ) ist die Mutation spezifisch für den rb1-Locus, dann zeigt die RFLP-Analyse keinen Allelverlust im Tumor. (Nach Hansen u. Cavanee 1988)

35

entdecken, muss DNA von normalen und Tumorzellen desselben Patienten verglichen werden. Die wiederholte Beobachtung des Verlusts der Heterozygotie eines spezifischen chromosomalen Markers in Zellen eines bestimmten Tumortyps spricht dann für die Existenz eines in der Nähe gelegenen Antionkogens, dessen Verlust an der Tumorentstehung beteiligt ist. So findet sich z.B. ein Marker für Chromosom 18q, der hochpolymorph (und deshalb in den meisten Genomen heterozygot) ist, in 70% fortgeschrittener Colonkarzinome in einem homozygoten Zustand. Dies spricht für die Gegenwart eines Antionkogens in der Nähe dieses Markers. Mit diesem Ansatz kann man das gesamte Tumorgenom systematisch auf die Gegenwart von LOHs untersuchen. Erschwert werden Interpretation und Analyse von LOHs gelegentlich durch die Gegenwart stromaler und inflammatorischer Zellen in Tumorgewebeproben, d.h. von Zellpopulationen, die den normalen Genotyp aufweisen.

! Unterschiede in den genetischen Fingerabdrücken von Tumor- und Normalgewebe weisen auf somatische Mutationen hin.

Ein ähnlicher Ansatz ist mit Hilfe der Sonden für Mikrosatelliten möglich. Dazu werden kurze Nucleotidabschnitte wie (CAC)5 oder (CTGT)4, die mehrfach an bekannten Stellen des Genoms vorkommen, als Sonden verwendet. Bei diesem Ansatz werden bei einem Patienten der transformierte und der noch verbliebene gesunde Anteil eines Organs parallel untersucht. Dies ist z.B. beim Nierenkrebs möglich, zu dessen Behandlung die erkrankte Niere durch Operation entfernt wird. Solche als genetischer Fingerabdruck bezeichneten Analysen zeigen, dass bei Verwendung der mit dem DNA-Abschnitt (CTGC)4 hybridisierenden Sonde (GACA)4 nach Restriktionsenzymverdau bei einem Großteil der Patienten Bandenabschwächungen erkennbar sind (. Abb. 35.5). Da die repetitiven Elemente,

1147 35.4 · Antionkogene

dung zusätzlicher Sonden kann die Zahl der Kandidatengene von mehreren auf eines eingeengt werden, welches dann sequenziert wird. Durch den Nachweis von Mutationen bei Patienten mit der untersuchten Tumorerkrankung wird das Kandidatengen in den Stand eines Tumorgens erhoben.

35.4.2

Funktionen von Antionkogenen

! Tumorsuppressor-Gene regulieren den Zellzyklus.

. Abb. 35.5. Nachweis des Verlusts chromosomaler Abschnitte bei 8 Patienten mit Nierenkrebs durch genetischen Fingerabdruck. Die Hybridisierung erfolgte mit der synthetischen Oligonucleotidsonde (GACA). N Normalgewebe; C Tumorgewebe; Hi Hinf I; H Hae III. Die Pfeile zeigen die im Tumoranteil fehlenden Banden. (Nach Bock et al. 1994)

mit denen diese Sonde hybridisiert, auf den kurzen Armen der Chromosomen 13, 14, 15, 21 und 22 liegen, befinden sich dort wahrscheinlich für die renale Tumorgenese kritische Gene. Durch diese Techniken wird i.A. eine chromosomale Region festgelegt, auf der sich eine Vielzahl von Kandidaten-Antionkogenen befindet. Durch Verwen-

Antionkogene bzw. Antionkoproteine wirken als Hemmstoffe des Zellwachstums (. Tab. 35.2): Die Antionkoproteine Rb105 und p53 (7 Kap. 7.1.3, 10.3.2, 35.4.2) werden als kernständige Proteine beim kritischen Übergang von der G1- in die S-Phase benötigt, also zu dem Zeitpunkt, zu dem auch TGF-E die Progression durch den Zellzyklus hemmen kann. Die Hemmung durch TGF-E korreliert mit einer Phosphorylierung des Rb-Genprodukts, welches dadurch inaktiviert wird (7 unten). Für andere Antionkoproteine werden eine Reihe von Funktionen (. Tabelle 35.3) diskutiert, zu denen auch DNA-Reparaturfunktionen zählen (Mutator-Gene, 7 Kap. 35.5.2). Für ein weiteres Antionkogen, das BCRA1-Gen, dessen Ausfall mit einem deutlichen Risiko verbunden ist, ein familiäres Mammakarzinom zu entwickeln, sind Funktionen bei der Regulation der Transkription, der DNA-Reparatur sowie der Ubiquitierung von Proteinen nachgewiesen worden. ! Das Rb-Genprodukt hemmt über die Inaktivierung der Transkriptionsfaktoren E2F und DP1 den Eintritt in die S-Phase.

Der zeitliche Ablauf des Zellzyklus wird durch Synthese und Abbau der Cycline bestimmt, deren Konzentration in einer Phase des Zellzyklus ansteigt und in einer anderen wieder abfällt (Einzelheiten 7 Kap. 7.1.2). Cycline regulieren

. Tabelle 35.2. Antionkogene (Auswahl) Gen

Protein

Krankheit

Lokalisation

Funktion

rb

Rb

Retinoblastom, Osteosarkom

13q14

Reguliert Transkriptionsfaktoren

wt-1

WT-1

Wilms-Tumor

11p13

Transkriptionsfaktor

apc

APC

Familiäre Polyposis

5q21

β-Cateninbindung

dcc

DCC

Colorektale Tumoren

18q21

Adhäsionsprotein

p53

p53

Osteosarkom, Mamma, Gehirn

17p12–13

Transkriptionsfaktor

nf1

Neurofibromin

Neurofibromatose

17q11.2

GTPase-aktivierendes Protein

nf2

Merlin

Akustikusneurinom

22q

Cytoskelett-Integration

mts1

p16

Melanom

9q21

Blockiert cdk4

mts2

p15

?

9q21

Blockiert cdk

msh2

MSH2

Colorektale Tumoren

2p

DNA-Reparatur

mlh1

MLH1

Colorektale Tumoren

3p

DNA-Reparatur

brca1

BRCA1

Mamma-, Ovarialcarcinom

17q21

Transkriptionsfaktor

35

1148

Kapitel 35 · Tumorgewebe

lich sind (sog. S-Phase-Proteine). Damit besteht die normale Funktion von Rb105 – nicht nur in Retinazellen – darin, den Eintritt in die S-Phase zu verhindern.

. Tabelle 35.3. Mögliche Funktionen von Antionkogenen Induktion terminaler Differenzierung Aufrechterhaltung genomischer Stabilität (Mutator-Gene)

! p53 hemmt den Übergang in die S-Phase bei DNASchädigungen.

Triggerung des Alterungsprozesses Regulation des Zellwachstums

Wenn die DNA einer Zelle durch Carcinogene, UV-Licht oder γ-Strahlung beschädigt ist (7 Kap. 7.7.3), bedeutet dies bei einer Zellteilung das Risiko einer erhöhten Mutationsfrequenz. Es existieren deshalb Mechanismen, mit denen der Übergang in die S-Phase bei Schädigung des Genoms verhindert wird. So steigt die p53-Konzentration als Antwort auf eine DNA-Schädigung an. Dadurch werden verschiedene Transkriptionsfaktoren wie z.B. das p21-Protein vermehrt synthetisiert. p21 bindet die CDK 2 und 4 und hemmt dadurch die Phosphorylierung ihrer Substrate, so z.B. des Rb105 (. Abb. 35.7). Dadurch bleibt der Rb105E2F-DP1-Komplex intakt und die Zelle kann nicht von der G1- in die S-Phase übertreten. Dies verschafft der Zelle eine Gelegenheit, den DNA-Schaden zu reparieren. Anschließend fällt der p53-Spiegel wieder ab, sodass p21 nicht länger synthetisiert wird. Ist p53 mutiert (bei fast der Hälfte aller menschlichen Tumoren! siehe unten), so kann der

Hemmung von Proteinasen Modulation von Histokompatibilitätsantigenen Regulation der Angiogenese Vermittlung der Zell-Zell-Kommunikation

Proteinkinasen, die deshalb als Cyclin-abhängige Proteinkinasen (cyclin dependent kinases, CDK 1, 2, 3 etc.) bezeichnet werden. Die Aktivierung von CDK 2 durch Cyclin E und von CDK 4 durch Cyclin D führt zur Phosphorylierung des Retinoblastom-Proteins (Rb105), wodurch die Zelle in die S-Phase eintreten kann. Rb105 bindet im dephosphorylierten Zustand zwei Transkriptionsfaktoren, E2F und DP1, die dadurch inaktiviert werden. Die Phosphorylierung von Rb105 führt zu Freisetzung von E2F und DP1, die dann die Transkription von Genen in Gang setzen (. Abb. 35.6). Dazu gehören Proteine, die für die die DNA-Synthese verantwort. Abb. 35.6. Wirkung von Cyclin E/CDK2 und Cyclin D/CDK4 auf den Rb-E2F-DP1-Komplex. Nach Phosphorylierung des Rb 105 dissoziiert der Komplex, sodass die Transkriptionsfaktoren freigesetzt werden und ihre Wirkung entfalten können

G0

E2F

Cyclin E CDK 2

p 53

DP 1

Rb M ATP

CDK 4

G2 G1

ADP P

P Cyclin D

Rb P

+

+

P

S Transkription von S -Phase-Genen

35

. Abb. 35.7. Über p21 vermittelte Effekte von p53 auf die Cyclin E/CDK2- und Cyclin D/CDK4Komplexe. (Einzelheiten 7 Text)

1149

35.4 · Antionkogene

Übergang in die S-Phase nicht verhindert werden. Darüber hinaus supprimiert das p53-Protein die Entstehung von Tumoren noch über die Initiation der Apoptose (7 Kap. 7.1.5). Somit überwacht p53 die Integrität des Genoms durch Verhinderung der Zellteilung durch G1-Arretierung oder Aktivierung eines Suizidprogramms, wenn die DNA eine Schädigung aufweist. ! Papillomvirus-Genprodukte können p53 und das Rb105 inaktivieren.

die S-Phase ermöglichen. Die Bindung von E7 an Rb105 entspricht der Phosphorylierung von Rb105 durch die CDKs (. Abb. 35.6), sodass die Notwendigkeit für das normale Signal umgangen wird. Unter diesen Umständen erkennt das p53-Kontrollsystem möglicherweise, dass etwas nicht stimmt, sodass die Zelle der Apoptose anheim fallen würde. Da jedoch das E6-Protein mit p53 assoziiert, wird sein Abbau gefördert und seine Wirkung entsprechend geschwächt.

Inaktivierung von Antionkogenen durch Mutationen

Papillomviren (7 Kap. 10.3.2) benötigen für ihre Replikation Nucleotidvorstufen. Aus diesem Grunde ist es für sie günstig, wenn die Wirtszelle in die S-Phase eintritt, in der die Bedingungen für die Virusreplikation optimal sind. Die Virusproteine E6 und E7 binden und inaktivieren p53 und Rb105. Wenn E7 an Rb105 bindet, setzt das Rb105-Protein die E2F-DP1-Transkriptionsfaktoren frei, die den Eintritt in

35.4.3

. Abb. 35.8. Verteilung somatischer Mutationen im p53-Gen. In der Mitte: Die Gesamtverteilung bei 1312 Patienten. Oben: Die unterschiedliche Verteilung bei Leberkrebspatienten in Hoch- und Niedrig-

risikoregionen. Unten Patienten mit Lungen- oder Darmkrebs. (Nach Harris u. Hollstein 1993)

! Antionkogenmutationen wirken rezessiv.

Antionkogene wirken – im Gegensatz zu den Onkogenen – rezessiv, d.h. sowohl die vom Vater als auch die von

35

1150

Kapitel 35 · Tumorgewebe

der Mutter ererbte Kopie des Gens muss inaktiviert sein, damit die wachstumssupprimierende Funktion des Gens aufgehoben wird. Prädispositionssyndrome resultieren aus der Keimbahninaktivierung einer Kopie eines Antionkogens, der eine somatische Mutation auf dem anderen Allel folgen muss, damit die Krankheit klinisch manifest wird. Auch Antionkogene können über die bekannten Mechanismen inaktiviert werden: Punktmutationen (mit Aminosäuresubstitutionen oder vorzeitigem Translationsabbruch), Deletionen, Insertionen oder Spleißmutationen. ! Somatische Mutationen des p53-Antionkogens sind häufig und bei den einzelnen Tumorerkrankungen unterschiedlich verteilt.

Etwa 80% der Mutationen im p53-Gen bedingen Aminosäuresubstitutionen (Missense-Mutationen), die die Wechselwirkung mit anderen Proteinen in der Zelle oder die Halbwertszeit verändern (. Abb. 35.8). Die Analyse von über 30 Tumorerkrankungen des Menschen hat gezeigt, dass die meisten p53-Mutationen aufweisen und dass sich die Verteilung verschiedener Mutationen im p53-Gen von Erkrankung zu Erkrankung unterscheidet. Abbildung 35.8 zeigt die Verteilung von Mutationen bei verschiedenen Gruppen von Patienten. Hochrisikogruppen chinesischer Patienten mit Leberkrebs, die aus Gegenden stammen, in denen chronische Hepatitis B-Infektionen oder Belastung mit Aflatoxin B1 häufig sind, haben ein deutlich anderes Mutationsspektrum als Patienten aus Gegenden mit geringem Erkrankungsrisiko. Deutliche Unterschiede finden sich auch beim Vergleich von Lungen- und Darmkrebs. Im Allgemeinen sind p53-Genmutationen mit einem schlechteren Ansprechen auf die Chemo- und Radiotherapie verbunden. Die Zellen weisen ein labileres Genom auf, sodass Mutationen akkumulieren können. Dagegen reagieren Tumoren mit normalen p53-Genen gut auf die therapeutisch induzierte DNA-Schädigung durch Cytostatika.

35

35.5

eine immer wieder beobachtete zeitliche Abfolge morphologischer Veränderungen vom Adenom bis zum Karzinom auf, die auf molekulare Veränderungen untersucht werden kann.

35.5.1

Familiäre adenomatöse Polyposis (FAP)

! Werden Patienten mit der FAP nicht operiert, so entwickelt sich ein Dickdarmtumor.

Die FAP manifestiert sich im 2.Lebensjahrzehnt und ist durch die Entstehung von Hunderten bis Tausenden von adenomatösen Polypen im Colon und Rektum gekennzeichnet (. Abb. 35.9). Wird der Patient nicht behandelt, so entsteht aus den Polypen im 4. und 5. Lebensjahrzehnt immer ein colorektales Karzinom (obligate Präcancerose). Die Therapie besteht in der vorbeugenden, fast vollständigen Entfernung des Dickdarms. Einzelne Patienten können auch andere Tumormanifestationen oder Veränderungen am Retinaepithel entwickeln. Das bei der FAP veränderte Gen wird als APC-Gen (. Tab. 35.3) bezeichnet. Es liegt auf Chromosom 5q21, hat eine Länge von 6,6 kb mit 15 Exons und codiert für ein TumorsuppressorProtein mit 2843 Aminosäuren. Eine Fülle unterschiedlicher Keimbahnmutationen ist bei FAP-Patienten beschrieben worden, von denen die meisten Rasterschubmutationen sind, die einen vorzeitigen Abbruch der

Kumulative Aktivierung von Onkogenen und Inaktivierung von Antionkogenen beim Mehrschrittprozess der Tumorigenese

Seit Ende der 80er Jahre des vergangenen Jahrhunderts sind die Kenntnisse über die genetischen Grundlagen von Krebserkrankungen, die den Dickdarm und das Rektum betreffen (colorektale Tumoren) wesentlich weiterentwickelt worden. Dazu haben angeborene Erkrankungen (Prädispositionssyndrome), die zu diesem Tumor führen, wie die familiäre adenomatöse Polyposis (FAP) oder die nichtpolypösen colorektalen Tumorerkrankungen, beigetragen. Außerdem tritt bei sporadischen colorektalen Tumoren

. Abb. 35.9. Zahlreiche gutartige Polypen, aus denen sich bei der familiären adenomatösen Polyposis obligat Karzinome entwickeln. (Aufnahme von S.R.Hamilton, John Hopkins University School of Medicine)

1151 35.5 · Kumulative Aktivierung von Onkogenen und Inaktivierung von Antionkogenen

. Abb. 35.10. Die APC-mRNA: Darstellung der 15 Exons. In der unteren Hälfte sind die Keimbahnmutationen mit ihren klinischen Manifestationen, in der oberen Hälfte die somatischen Mutationen

dargestellt, die sowohl bei der FAP als auch bei sporadischen colorektalen Tumoren vorkommen

Translation mit Bildung eines verkürzten Proteins zur Folge haben. Über den Nachweis solch unterschiedlich verkürzter Proteine können etwa 80% der Mutationen nachgewiesen werden. Dem APC-Protein wird eine Funktion als Zelladhäsionsmolekül durch Wechselwirkungen mit α- und ß-Catenin (7 Kap. 6.2.6) zugeschrieben. Zwischen Art der Mutationen (und damit der Länge des Proteinprodukts) und dem Auftreten klinischer Symptome besteht eine direkte Beziehung (. Abb. 35.10). Die Adenome bei FAP-Patienten erwerben mit zunehmender Zahl

und Größe eine weitere (in diesem Fall somatische) Mutation in dem noch normalen Allel (Knudson-Hypothese, 7 Kap. 35.4.1). Diese könnte durch Mutagene in der verdauten Nahrung verursacht werden oder dadurch, dass die Zellen eine Störung des DNA-Reparaturmechanismus aufweisen, sodass sie die Rasterschubmutationen nicht reparieren können. Die Folge ist ein Wachstumsvorteil durch die Mutation, sodass der betroffene Zellklon stark expandiert.

35

1152

Kapitel 35 · Tumorgewebe

35.5.2

Hereditäre nicht-polypöse colorektale Tumoren

! Mutationen in Genen für Reparaturenzyme können Tumorerkrankungen verursachen.

Diese vererbbaren Darmtumoren (Lynch-Syndrom) zeichnen sich durch eine Disposition, einen colorektalen Tumor zu entwickeln, aus. Sie machen etwa 5 bis 15% der Dickdarmkrebserkrankungen aus. Die Tumoren treten im mittleren Lebensalter (mit etwa 45 Jahren) auf und liegen bevorzugt proximal der linken Colonflexur. Durch die Analyse von Familien (. Abb. 35.11), in denen die Krankheit vermehrt auftritt, gelang mit verschiedenen Methoden die Identifizierung der zugrunde liegenden genetischen Defekte: Interessanterweise fand sich nicht der übliche Verlust von Genen, sondern es wurden Allele mit unterschiedlicher Länge beobachtet. Dies ist auf veränderte (CA-) Dinucleotidrepeats zurückzuführen. Veränderungen dieser Mikrosatelliten (7 Kap. 5.4.3) wurden im gesamten Genom gefunden, was dafür spricht, dass die an der angeborenen Disposition für colorektale Tumoren beteiligten Gene etwas mit der fehlerfreien DNA-Replikation zu tun hatten. So wurden mehrere Gene auf den Chromosomen 2, 3 und 7 (hmsh2, hmlh1, hpms1 und 2) identifiziert, die Homologe des bakteriellen muthls-Komplexes darstellen, der am genetischen Korrekturlesen, d.h. der Reparatur von Basenfehlpaarungen, beteiligt ist (7 Kap. 7.3.1). Keimbahnmutationen dieser Mutatorgene führen zu einem Funktionsverlust mit Akkumulation von Fehlpaarungen mit DNA-Replikationsfehlern, der bei einem hohen Prozentsatz von Patienten mit angeborenen, aber auch bei

etwa 15% der Patienten mit sporadischen colorektalen Tumoren gesehen wird. Diese Mikrosatelliten-Instabilität könnte für Mutationen anderer Gene verantwortlich sein, die an dem Mehrschrittprozess der Tumorentstehung beteiligt sind.

35.5.3

Sporadische colorektale Tumoren

Colorektale Tumoren stellen ein ausgezeichnetes Modell für die molekulare Analyse des Mehrschrittprozesses der Tumorentstehung dar, da die meisten bösartigen Tumoren (Karzinome) aus gutartigen (Adenomen) entstehen. Damit lassen sich die einzelnen Schritte der Tumorigenese, d.h. die Progression vom normalen Mukosaepithel über die Hyperplasie, die unterschiedlichen Adenomformen bis zum Karzinom (mit und ohne Metastasierung) auf molekularer Ebene verfolgen. Dazu werden Gewebeproben in den einzelnen Krankheitsstadien mit Hilfe cytogenetischer und molekularbiologischer Methoden mit gesundem Colongewebe verglichen und auf Änderungen (loss of heterozygosity (LOH) und Mutationsanalyse) untersucht. Nach den Ergebnissen dieser Analysen entstehen colorektale Tumoren als Folge der kumulativen Aktivierung von Onkogenen bzw. Inaktivierung von Antionkogenen durch Mutationen. ! Mutationen in den mcc- und ras-Onkogenen bestimmen die frühe Phase des Adenom-Karzinom-Übergangs.

Im Gegensatz zum normalen Epithelwachstum besteht in der frühen colorektalen Tumorigenese ein hyperproliferativer Regenerationszustand von Colonepithelien. An die-

35

. Abb. 35.11. Familienstammbaum mit hereditärem, nichtpolypösem, colorektalem Karzinom (CRC). Die Zahl gibt das Manifestationsalter an. Die meisten Betroffenen haben colorektale Karzino-

me (rote Symbole), einzelne aber auch andere Tumoren z.B. des Nierenbeckens oder Dünndarms (grüne Symbole). ○ Frau; □ Mann; ø □/ verstorben; CRC colorektales Karzinom

1153 35.5 · Kumulative Aktivierung von Onkogenen und Inaktivierung von Antionkogenen

. Abb. 35.12. Genetische Veränderungen bei der Progression vom Colonadenom zum Colonkarzinom. (Einzelheiten 7 Text)

sem Zustand ist das mcc-Gen (mutated in colon carcinoma) auf Chromosom 5q21 beteiligt. Das Auftreten des Adenomphänotyps wird von einer Hypomethylierung (verringerte DNA-Methylierung, 7 Kap. 8.5.1) mit genomischer Instabilität begleitet (. Abb. 35.12). Diese hemmt die Chromosomenkondensation. Bei einem Drittel der untersuchten DNA-Abschnitte konnten bereits bei Grad I/II-Adenomen Hypomethylierungen festgestellt werden. Im weiteren Verlauf der Tumorigenese treten ras-Mutationen auf. Bis zu 10% der Colonadenome (Polypen) mit einer Größe von weniger als 1 cm, aber bereits etwa die Hälfte der Adenome mit einer Größe von mehr als 1 cm und die Hälfte aller Karzinome weisen ras-Mutationen auf (. Abb. 35.13). Daneben können andere Onkogene wie z.B. das neu-, c-mycoder c-myb-Onkogen aktiviert sein.

dukt übrig bleibt, so erwirbt die Tumorzelle einen weiteren Wachstumsvorteil. Der zweite wichtige Allelverlust betrifft Chromosom 18q21–22, das bei etwa 70% der Tumoren und etwa 50% der späten Adenome verloren ist. Das dort gelegene dccGen (deleted in colorectal carcinomas) codiert für ein Protein, das eine signifikante Homologie zur Familie der Zelladhäsionsproteine aufweist. Das dcc-Gen wird in normaler Colonschleimhaut exprimiert, jedoch nicht oder nur in reduzierter Menge in der Mehrzahl (etwa 75%) der colorektalen Tumoren. Das Gen könnte durch Veränderungen von Zell-Zell-Wechselwirkungen oder Zell/extrazelluläre Matrix-Wechselwirkungen eine Rolle bei der Tumorigenese spielen. Im Gegensatz zu Allelverlusten auf Chromosom 17p bestehen 18q-Verluste bereits in etwa 15% sog. Grad

! Mutationen in den dcc- und p53-Antionkogenen bestimmen die späte Phase des Adenom-Karzinom-Übergangs.

Im weiteren Verlauf kommt es zum Verlust verschiedener Regionen (LOH, 7 Kap. 35.4.1) im Bereich des kurzen Arms von Chromosom 17: Sie sind zwar selten bei Patienten mit Adenomen und nehmen mit zunehmender Größe, villösen Anteilen bzw. Dysplasie (Grad I bis III, also zunehmend undifferenzierter) auf etwa 25% zu, treten aber bei etwa 75% aller Patienten mit Karzinomen auf (. Abb. 35.13). Allen Verlusten gemeinsam ist die Region p12–13, die das p53-Antionkogen enthält. Außerdem wurden Punktmutationen in dem zweiten p53-Allel in Zusammenhang mit dem Verlust des anderen Allels häufig bei colorektalen Tumoren gefunden. Bereits die Mutation eines Allels bewirkt einen selektiven Wachstumsvorteil der betroffenen Zelle, da offenbar das mutierte Genprodukt mit der Funktion des noch gesunden durch Komplexbildung interferiert (dominanter Effekt). Geht in einem weiteren Schritt das normale Allel verloren, sodass nur das mutierte Genpro-

. Abb. 35.13. Prozentsatz von ras-Mutationen und -Allelverlusten auf Chromosom 17p in Abhängigkeit vom Tumorstadium. (Einzelheiten 7 Text)

35

1154

Kapitel 35 · Tumorgewebe

. Abb. 35.14. Entstehung verschiedener Formen des BCR-ABL-Fusionsgens durch Chromosomen-Translokation bei der chronisch myeloischen Leukämie. (Einzelheiten 7 Text)

I–II-Adenome und nehmen mit weiterer Dysplasie (Grad III) auf 47% zu. Bei diesen molekularen Veränderungen handelt es sich um häufige, in der Adenom-Karzinom-Sequenz anzutreffende Veränderungen, deren dargelegter Zeitablauf bevorzugt auftritt, aber nicht auftreten muss. So sind 17p-Allelverluste in frühen Adenomen selten und vergleichende Untersuchungen zwischen Adenomen und Karzinomen zeigen, dass der Unterschied nicht durch die Qualität der Veränderungen, sondern ihre Quantität bedingt ist. Daraus kann man schließen, dass die Akkumulation genetischer Veränderungen und nicht ihr zeitlicher Ablauf für die Progression vom Adenom zum Karzinom verantwortlich ist. Mit Sicherheit sind noch Allelverluste in anderen chromosomalen Regionen (so z.B. auf 1q, 4p, 6p, 8p, 9q, 22q) für die colorektale Tumorigenese von Bedeutung, sodass man davon ausgehen kann, dass mindestens 6 bis 10 genetische Veränderungen die colorektale Tumorigenese bedingen.

35.6

35

Entstehung von Fusionsgenen durch Translokationen

Jede Änderung des Tumorzellgenoms kann (muss aber nicht) eine makroskopisch sichtbare Veränderung der Chromosomen bedingen und damit mit Hilfe der Cytogenetik erkennbar werden. Daraus folgt, dass die molekulare Charakterisierung der chromosomalen Veränderung zur Identifikation der an der Erkrankung ursächlich beteiligten Krebsgene führen kann. In der Tat zeigte die Identifizierung von Genen, die an Rearrangements beteiligt sind, dass es sich in einzelnen Fällen um Onkogene handelt. Dadurch, dass Onkogene an der Translokation beteiligt waren, war belegt, dass sowohl Translokationen als auch Onkogene entscheidend an der Tumorentstehung beteiligt sein müssen. Die chromosomale Analyse, d.h. z.B. der Nachweis der 9/22 Translokation bei der chronischen myeloischen Leu-

kämie (CML), war die Voraussetzung für die Klonierung der beteiligten Gene. ! Patienten mit chronisch myeloischer Leukämie weisen eine reziproke Translokation zwischen den Chromosomen 9 und 22 auf.

Die chronische myeloische Leukämie (CML) ist eine Leukämie, bei der Granulozyten und ihre unreifen Vorstufen unreguliert produziert und ins Blut freigesetzt werden. Bei Patienten mit CML waren im Jahre 1960 ein verkürzter langer Arm des Chromosoms 22 (22q- oder PhiladelphiaChromosom) und als dessen Ursache im Jahre 1973 eine Translokation beschrieben worden, die durch eine Austausch von Bruchstücken zwischen den Chromosomen 9 und 22 charakterisiert ist. Dabei ist jeweils eines der beiden Chromosomen der Zelle betroffen. An der reziproken Translokation sind das Abl-Onkogen auf Chromosom 9 und das Breakpoint Cluster Gen (BCR) auf Chromosom 22 beteiligt. Das Abl-Onkogen kodiert für eine NichtrezeptorTyrosinkinase mit einem Molekulargewicht von 145 kd (p145ABL) (. Abb. 35.14). Der Bruchpunkt im ABL-Gen tritt in Richtung 5c (zum Zentromer hin) des Exon 2 (von insgesamt 11 Exons) auf . Die Exons 2–11 des ABL-Onkogens werden in die sog. Major Breakpoint-Cluster Region (M-bcr) des BCR-Gens transponiert: die dabei entstehende Fusions-mRNA wird in ein chimäres Protein transkribiert, das als p210BCR-ABL bezeichnet wird. In seltenen Fällen liegt der Bruchpunkt auf Chromosom 22 an anderen Stellen, den Minor- bzw. Mikron-Breakpoint Cluster Regionen. Dabei entstehen das p190BCR-ABL(m-bcr) bzw. p230BCR-ABL-(μ-bcr) Fusionsprotein. Die mit der Bildung der Fusionsproteine verbundenen strukturellen Änderungen rufen die Charakteristika der CML (Transformation, vermehrte Proliferation, gestörte Adhäsion) hervor: vermittelt wird diese durch konstitutive Aktivierungen der RAS- , JAK-STAT-, FAK und Pl-3-Kinase-Signalwege (7 Kap. 25).

1155 35.7 · Mechanismen der Invasion und Metastasierung

Durch die auf diesen biochemischen Kenntnissen beruhende Entwicklung eines spezifischen BCR-ABL-Tyrosinkinase-Inhibitors (STI 571) können Patienten mit CML heute sehr gut behandelt werden (7 Kap. 35.11).

35.7

Mechanismen der Invasion und Metastasierung

Solange ein Tumor auf seinen Ausgangspunkt beschränkt ist (Primärtumor), kann die Erkrankung durch einen operativen Eingriff geheilt werden. Viele Tumoren weisen jedoch die Tendenz auf, lokal invasiv zu wachsen und nach Einbruch in die Gefäßbahn sekundäre Tumoren (Metastasen) zu bilden.

35.7.1

Invasion und Metastasierung

! Invasion und Metastasierung erfordern zusätzliche genetische Veränderungen in Tumorzellen.

Verschiedene koordiniert ablaufende Prozesse stellen die Voraussetzung für Invasion und Metastasierung dar. Dabei sind – wie im Falle der Onko- und Antionkoproteine – negative und positive regulatorische Elemente von Bedeutung. Die bisher beschriebenen genetischen Veränderungen führen zu einer Störung der Proliferation. Das fehlregulierte Wachstum ruft jedoch nicht per se Invasion und Metastasierung hervor, d.h. diese Prozesse bedürfen zusätzlicher genetischer Veränderungen. Mutationen können entweder nacheinander und völlig unabhängig voneinander auftreten oder – was wahrscheinlicher ist – durch zeitlich überlappende Prozesse. Invasion und Metastasierung kommen durch Proteine zustande, die die Anhaftung von Tumorzellen an zelluläre oder extrazelluläre Matrixbestandteile des umgebenden Gewebes fördern, die die Proteolyse von Wirtsbarrieren wie z.B. Basalmembranen durch Tumorzellen stimulieren, die die Tumorzellfortbewegung unterstüt-

zen und die die Proliferation im Zielorgan der Metastasierung ermöglichen. Diese Proteine werden auch von nichttransformierten Zellen gebildet, werden aber durch Proteine antagonisiert, die ihre Produktion, Regulation oder Wirkung blockieren können. Störungen dieses Gleichgewichts führen zur Aktivierung der Bewegung (Motilität) und Proteolyse als Voraussetzung für Invasion und Metastasierung. ! Die Neubildung von Gefäßen ist ein kritischer Schritt bei der Tumorbildung.

Invasives Verhalten und Metastasierung beruhen auf einer Kaskade von miteinander verbundenen und nacheinander ablaufenden Schritten, die viele Wirt-Tumor-Wechselwirkungen beinhalten. Für die erfolgreiche Metastasierung muss eine Zelle oder eine Gruppe von Zellen imstande sein, den Primärtumor durch Überwindung der Basalmembran zu verlassen, in das örtliche Stroma einzudringen, Anschluss an die Zirkulation zu gewinnen, im entfernten Gefäßbett stecken zu bleiben, in das Zielorgan zu auszuwandern (Interstitium und Parenchym) und als sekundäre Kolonie zu proliferieren (. Abb. 35.15). Dabei stellt die Neubildung von Gefäßen, die Angiogenese, die Voraussetzung für die Größenzunahme des Primärtumors über einen Durchmesser von 2 mm dar; diese Größenzunahme verursacht eine Hypoxie, die zur Bildung des Hypoxie-induzierbaren Transkriptionsfaktors I (HIF) führen (7 Kap. 28.1.10). Diese führt zur Expression des vaskulären endothelialen Wachstumsfaktors (VEGF). Auf parakrinem Weg stimuliert VEGF die Proliferation von Gefäßendothelzellen. Diese Wirkung wird über spezifische VEGF-Rezeptoren (VEGF-R1 und VEGF-2 oder KDR) vermittelt, die Tyrosinkinaseaktivität aufweisen. An der Gefäßneubildung sind auch andere Cytokine wie TGF-E, FGF und Angiogenin beteiligt. Über die neu gebildeten Blutgefäße, die den Tumor durchdringen, treten die Tumorzellen häufig in die Zirkulation ein. Eine Neubildung von Gefäßen ist ebenso für die Vergrößerung der metastatischen Kolonie erforderlich. Nur ein sehr kleiner Prozentsatz, d.h. weniger als 0,01%

. Abb. 35.15. Mehrschrittprozess der Metastasierung. (Einzelheiten 7 Text)

35

1156

Kapitel 35 · Tumorgewebe

der zirkulierenden Tumorzellen, ist schließlich imstande, metastatische Kolonien zu verursachen. Demzufolge wird die Metastasierung auch als ein hochselektiver Wettbewerb angesehen, der das Überleben einer Subpopulation von metastatischen Tumorzellen favorisiert, die im heterogenen Primärtumor präexistieren.

35.7.2

Wechselwirkungen von Tumorzellen mit der extrazellulären Matrix

! Tumorzellen haben die Tendenz, Kompartimentgrenzen zu überwinden.

35

Im Zuge der Entwicklung zu invasiven Tumoren missachten Tumorzellen die soziale Ordnung von Grenzen innerhalb von Geweben und dringen in fremde Organe ein. Der Säugetierorganismus ist durch die extrazelluläre Matrix, die aus der Basalmembran und dem darunter liegenden interstitiellen Stroma (7 Kap. 24.1) besteht, in eine Reihe von Gewebekompartimenten aufgeteilt. Die basale Epithelzellschicht liegt auf dieser Basalmembran, auf der anderen Seite befindet sich das interstitielle Stroma mit stromalen Zellen wie z.B. Fibroblasten oder Myofibroblasten. Normalerweise mischen sich die Zellpopulationen auf den beiden Seiten diesseits und jenseits der Basalmembran nicht. Beim invasiven Tumor überwinden Tumorzellen jedoch die Basalmembran, dringen in das darunter liegende interstitielle Stroma ein und treten mit den stromalen Zellen in Wechselwirkung. Demzufolge ist das metastatische Verhalten der Tumorzelle durch ihre Tendenz gekennzeichnet, Gewebekompartimentgrenzen zu überwinden und sich mit verschiedenen Zelltypen zu mischen. Die Basalmembran ist eine Matrix aus Kollagen, Glycoproteinen und Proteoglykanen, die normalerweise keine zum passiven Zelltransport ausreichend großen Poren enthält. Aus diesem Grunde muss die Invasion der Basalmembran durch Tumorzellen ein aktiver Vorgang sein. Sobald die Tumorzellen das Stroma erreichen, können sie Anschluss an Lymph- und Blutgefäße zur weiteren Disseminierung gewinnen. Die Wechselwirkungen der Tumorzelle mit der Basalmembran können in mehrere Schritte unterteilt werden: 4 die Herabsetzung der Wechselwirkungen zwischen den einzelnen Tumorzellen 4 ihr Kontakt mit der Basalmembran 4 die Auflösung der Matrix und 4 die Wanderung (Motilität) Die Bindung der Tumorzelle an die Basalmembranoberfläche wird durch Tumorzelloberflächenrezeptoren der Integrin- und Nichtintegrin-Familien vermittelt. Diese Rezeptoren erkennen Glycoproteine wie Laminin, Typ IV-Kollagen und Fibronektin in der Basalmembran (7 Kap. 24.5.3). Einige Stunden nach dem Kontakt der Tumorzelle mit der

Basalmembran findet sich an dieser Stelle eine umschriebene lokalisierte Zone der Auflösung. Dies kommt dadurch zustande, dass Tumorzellen proteolytische Enzyme sezernieren oder dass die Wirtszelle Proteinasen freisetzt, die die Matrix und ihre Adhäsionsmoleküle abbauen. Die Auflösung der Matrix findet in einer umschriebenen Region in der Nähe der Tumorzelloberfläche statt, in der die Mengen aktiven Enzyms die natürlich vorkommenden Proteinaseinhibitoren im Interstitium und in der Matrix, die von normalen Zellen in der Nachbarschaft sezerniert werden, überschreitet. ! Tumorzellen müssen beweglich sein.

Die Motilität ist ein weiterer wichtiger Schritt der Invasion, der dazu führt, dass die Tumorzelle gerichtet die Basalmembran überwindet und sich durch das Stroma nach regionaler Proteolyse der Matrix bewegt. Die Bewegung beginnt mit der Ausstreckung von Pseudopodien an der Front der wandernden Zelle. Die Tumorzellmotilität wird durch Tumorzellcytokine (autokrine Motilitätsfaktoren) reguliert. Die ebenfalls erhöhte ungerichtete Motilität von Tumorzellen führt zu einer Ausbreitung im Bereich des Primärtumors. Zusätzlich können Ort und Richtung der Tumorzellbewegung durch von anderen Zellen gebildete Stoffe mit chemotaktischer Wirkung beeinflusst werden.

35.7.3

Bedeutung von Proteinasen für Invasion und Metastasierung

! Matrix-Metalloproteinasen besitzen eine Schlüsselfunktion beim Abbau der extrazellulären Matrix.

Verschiedene Familien proteolytischer Enzyme (Metallo-, Cystein- und Serinproteinasen) sind am Abbau der Basalmembran bzw. der extrazellulären Matrix beteiligt. Serinproteinasen wie t-Plasminogenaktivator aktivieren das Proenzym Plasminogen zu Plasmin, welches Matrixkomponenten abbaut. Cysteinproteinasen wie Kathepsin B können bei transformierten Zellen in aktivierter Form mit der Plasmamembran assoziiert sein, von wo aus sie bei Kontakt mit einer Basalmembran darin enthaltenes Laminin degradieren. Die wichtigste Gruppe Matrix-abbauender Enzyme stellen die Matrix-Metalloproteinasen (MMP) dar (7 Kap. 9.3.3, 7 Kap. 24.6). Die Aktivität vieler Metalloproteinasen wird nach ihrer Sekretion in den Extrazellulärraum auf verschiedenen Ebenen reguliert (7 Kap. 9.3.3), entweder durch Aktivierung mittels limitierter Proteolyse, durch Bindung an Zellmembranen, durch Substratbindung und durch Wechselwirkungen mit von Wirt- und/oder auch Tumorzellen gebildeten Metalloproteinase-Inhibitoren (tissue inhibitors of metalloproteinases, TIMPs). TIMP1, ein Glycoprotein mit einer Molekülmasse von 28,5 kDa, wird von vielen vom Mesoderm abstammenden Zellen und von Fibroblasten

1157 35.8 · Tumorentstehung durch Cancerogene

produziert. Es hemmt interstitielle und Typ IV-Kollagenase und damit auch die Invasion von Tumorzellen durch Amnionmembranen (ein experimentelles System zum Studium der Invasion und Metastasierung), ohne dass dabei die Wachstumstendenz oder Adhäsion der Zellen beeinflusst wird. TIMP2 besitzt ein Molekulargewicht von 21 kD und ist nicht glycosyliert. Es wird ebenfalls von mesodermalen Zellen produziert und bildet inaktivierende Komplexe mit aktiven MMPs und ihren Proenzymen. Bei der Invasion muss das fein regulierte Gleichgewicht zwischen Proteinasen und ihren Inhibitoren als Voraussetzung für eine erhöhte Enzymaktivität gestört sein: Dies kann theoretisch durch vermehrte Expression des Proteinase-Gens, vermehrte Aktivierung des Proenzyms bzw. verringerte Expression des Antiproteinase-Gens oder erhöhte enzymatische Inaktivierung des Proteinaseinhibitors eintreten. Auch Cytokine beeinflussen die Aktivität von Proteinasen und Antiproteinasen (. Abb. 35.16).

2

35.8

Tumorentstehung durch Cancerogene

35.8.1

Chemische Cancerogenese

! Mutagene hinterlassen Fingerabdrücke im Genom.

Obwohl inzwischen nachgewiesen ist, dass Änderungen in bestimmten DNA-Sequenzen Krebs verursachen, sind die Rolle der primären Faktoren, die diese Veränderungen herbeiführen, und die Mechanismen, über die sie wirken, im Detail noch unklar. Sequenzänderungen in Genen können nach Exposition mit Stoffen auftreten, die die DNA schädigen, wie z.B. elektrophile Mutagene oder auch spontan. Auch die Zellproliferation als Reaktion auf einen Entzündungsstimulus oder aufgrund der toxischen Wirkung von Carcinogenen erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass genetisch veränderte Zellen entstehen. Die Mutationen entstehen dabei nicht statistisch verteilt in einem bestimmten Gen, sondern gehäuft in bestimmten Regionen. Jedes Mutagen oder jeder mutagene Prozess hinterlässt einen charakteristischen Fingerabdruck von DNA-Veränderungen, der sich hinsichtlich der Natur der Änderungen (d.h. welche Nucleotide ein bestimmtes Basenpaar ersetzen), den Ort der Änderungen und der Häufigkeit der Änderungen in dem Gen unterscheiden. Durch Analyse des Spektrums von Mutationen, wie z.B. beim p53-Gen (. Abb. 35.8), können Arbeitshypothesen über die umweltinduzierten und körpereigenen molekularen Vorgänge aufgestellt werden, die zur Entwicklung der Krebserkrankung beitragen. So wurde z.B. die Hypothese aufgestellt, dass die G o T-Mutationen in Codon 249 des p53-Gens bei Patienten mit Leberkrebs, die in Hochrisikoregionen in China leben, auf ein Aflatoxin in der Nahrung zurückzuführen sind, da dieses Toxin eine starke mutagene Aktivität besitzt und nach Mutagenesestudien vor allem diese Transversion hervorruft. ! Viele Cancerogene sind elektrophil.

. Abb. 35.16. Regulation der Aktivität von Matrix-Metalloproteinasen durch TIMPs und Cytokine. PA = Plasminogen-Aktivator; PAI = Plasminogen-Aktivator-Inhibitor. (Einzelheiten 7 Text). (Nach Ries u. Petrides 1995)

Bei der Mehrzahl der chemischen Cancerogene handelt es sich um organische Moleküle mit einem Molekulargewicht von weniger als 500 kDa: Neben polycyclischen aromatischen Kohlenwasserstoffen, die in Autoabgasen, Zigarettenrauch oder Kaffee (. Abb. 35.17) vorkommen, sind dies aromatische Amine und Amide, alicyclische Nitrosamine und Nitrosamide, halogenierte aliphatische und alicyclische Kohlenwasserstoffe sowie komplexe Pyrrolizidinalkaloide. Aber auch Metalle wie Cadmium, Beryllium, Kobalt, Blei oder Nickel können cancerogen sein. Auffallende Gemeinsamkeit vieler organischer Cancerogene ist ihre Elektrophilie, d.h. ihr Streben nach elektronenreichen Zentren anderer Moleküle, die meist erst nach enzymatischer Aktivierung der Cancerogene im Wirtsorganismus entsteht. Elektronenreiche Zentren finden sich vor allem an Stickstoff-, Sauerstoff- und Schwefelatomen wie dem N7, dem C8 und dem Sauerstoffatom am C8 von Guanin, den Stickstoff-

35

1158

Kapitel 35 · Tumorgewebe

. Abb. 35.17. Chemische Cancerogene

atomen1 und 3 von Adenin sowie dem Stickstoffatom 3 von Cytosin in Nucleinsäuren. ! Die meisten Cancerogene sind Procancerogene, die durch Zellenzyme aktiviert werden müssen.

35

In allen Fällen wird dann eine stark elektrophile Verbindung gebildet. Enzyme, die Cancerogene aktivieren, sind in vielen Zellen mit unterschiedlicher Spezifität und Aktivität vorhanden. Polycyclische aromatische Kohlenwasserstoffe werden zu Epoxiden (cyclische Äther) oder Radikalen umgewandelt: 3,4-Benzpyren wird unter Beteiligung von Cytochrom P450 (Genfamilie I, 7 Kap. 15.2.2) im endoplasmatischen Retikulum zum Arenoxid oxidiert, das durch eine Epoxidhydratase in ein Transdihydrodiol überführt wird. Durch erneute Epoxidierung dieses als vorläufig bezeichneten Cancerogens entsteht das endgültige Cancerogen, das covalent unter Öffnung des Epoxidrings mit nucleophilen Basen wie der Aminogruppe von Guanin reagiert (Bildung von Benzpyrendiolepoxid-DNA-DNA-Addukten). Entgiftungsreaktionen überführen vorläufiges und endgültiges Cancerogen in die entsprechenden Phenole und Glutathionverbindungen. Ist durch eine Mutation die

entsprechende Glutathion-S-Transferase reduziert, so ist dies mit einem erhöhten Krebsrisiko verbunden (7 Kap. 15.3). Der oxidative Stoffwechsel chemischer Fremdsubstanzen durch die Leber, der einen lebenswichtigen Entgiftungsmechanismus darstellt (7 Kap. 33.2.1), macht somit die chemisch inerten Cancerogene erst zu Krebs auslösenden Stoffen. Die Organspezifität bestimmter Cancerogene ist möglicherweise auf die unterschiedliche Ausstattung einzelner Gewebe mit diesen Enzymen zurückzuführen.

35.8.2

Physikalische Cancerogenese

Ultraviolettes Licht ist hoch mutagen, was zumindest teilweise auf die charakteristischen Pyrimidin-Dimerschäden in der DNA zurückzuführen ist. Nicht reparierte CytosinDimere rufen Tandemmutationen hervor, bei denen zwei benachbarte Cytosinreste (Cytosin-Cytosin) durch zwei Thyminbasen (Thymin-Thymin) ersetzt werden. Diese Änderung tritt praktisch nur nach Exposition mit UVStrahlung auf (7 Kap. 7.3).

1159 35.10 · Früherkennung von Tumoren

35.9

Stoffwechsel von Tumorgeweben

! Tumorzellen weisen oft einen erhöhten Glucosedurchsatz auf.

Etwa vor 60 Jahren bemerkte Otto Warburg (1883–1970), einer der Begründer der heutigen Biochemie, dass verschiedene Tumoren auch in Anwesenheit von Sauerstoff große Mengen von Lactat bilden. Er postulierte, dass die hohe Glucoseabbaurate zu Lactat auch in Gegenwart von Sauerstoff die Folge eines Defekts der Atmungskette sei, und dass Krebs entstehe, wenn die Zelle auf eine irreversible Schädigung ihrer Atmung mit der Adaptation an die Glycolyse zu Lactat antwortet. Nach Warburg können diese Zellen ihren differenzierten Zustand nicht aufrechterhalten und wachsen als entdifferenzierte Zellen unkontrolliert. Seine Beobachtungen führten ihn zu der apodiktischen Aussage (1956), dass »die Ära vorbei sei, in der die Glycolyse zu Lactat in Tumorzellen und ihre Bedeutung für die Tumorentstehung diskutiert werden, und niemand heutzutage bezweifelt, dass wir den Ursprung der Tumorzellen erkennen werden, wenn wir wissen, wie die hohe Glycolyserate zu Lactat zustande kommt, oder um es vollständiger zu fassen, wenn wir wissen, wie die gestörte Atmung und die exzessive Lactatbildung zustande kommen«. Durch Untersuchungen seit Mitte der fünfziger Jahre sind die Ergebnisse von Warburg relativiert worden, da auch Tumoren existieren, die Glucose in normalen Mengen oxidieren. Dennoch weisen viele Tumoren eine erhöhte Glucoseaufnahme auf, was auch die Grundlage der sog. Fluordesoxyglucose-(FDG)-Methode zur PET-Analyse von Tumoren darstellt. ! Mammakarzinome sind in ihrem Wachstum auf Östrogene angewiesen.

Bereits normales Brustdrüsengewebe ist von weiblichen Sexualhormonen abhängig, sodass die Hormonabhängig-

keit davon abgeleiteten Tumorgewebes nicht überrascht. Die Hormone wirken dabei über die Induktion der Bildung von Polypeptidwachstumsfaktoren wie IGF, EGF oder TGF-D. Die Antagonisierung von Östrogenen ist deshalb ein wesentlicher Bestandteil der Therapie des Mammakarzinoms: diese kann entweder durch Antiöstrogene wie Tamoxifen erfolgen, die Östrogen kompetitiv vom Östrogenrezeptor verdrängen, durch Hemmstoffe der endogenen Östrogensynthese, sog. Aromatasehemmstoffe oder durch Medikamente, die zu einem Abbau des Östradiolrezeptors führen (7 Kap. 27.6.2).

35.10

Früherkennung von Tumoren

Zu den dringlichsten Problemen in der klinischen Onkologie gehört die Früherkennung von Krebserkrankungen. Die ideale Substanz zur Früherkennung einer Tumorerkennung wäre ein stabiles Molekül, das ausschließlich von Tumorzellen (eines Gewebes) synthetisiert und sezerniert wird und im Plasma und/oder Urin nachweisbar ist. Alle bisher bekannten von Tumorzellen abgegebenen und als Tumormarker bezeichneten Moleküle werden jedoch auch von gesunden Geweben produziert. Da von Tumoren abgegebene Moleküle in den Körperflüssigkeiten verdünnt werden, muss eine bestimmte Anzahl von Tumorzellen vorhanden sein, um nachweisbare Quantitäten zu bilden: Die chemische Grenze liegt etwa bei 104 bis 105 Zellen, das sind vier bis fünf Zehnerpotenzen weniger als das Minimum von 109 Zellen, welches 1 cm3 Tumormasse entspricht, das zum radiologischen Nachweis (z.B. durch Computertomographie) erforderlich ist. Aus diesem Grunde sind die Erkrankungen bei dem erstmaligen Nachweis eines Tumormarkers i.a. bereits in einem fortgeschrittenen Stadium. Tumormarker eignen sich deshalb weniger zur Früherkennung als zur Verlaufsbeurteilung der Therapie einer Krebserkrankung: klinisch wichtige Tumormarker sind

. Tabelle 35.4. Tumormarker (Auswahl) Freigesetzte Substanz

Vorkommen bei Tumoren

Vorkommen bei nicht-malignen Erkrankungen

Carcinom (Colon, Rektum, Pankreas, Gallenblase u. a.)

Gewebenekrose, starkes Rauchen, Darmerkrankungen

α1-Fetoprotein CA 19-9 CA 12-5

Hepatom, malignes Teratom Pankreascarcinom Ovarialcarcinom

Lebercirrhose, Hepatitis

Enzyme Prostata-spezifisches Antigen (PSA) Alkalische Phosphatase (Knochenisoenzym)

Prostatacarcinom Osteosarkom, Knochenmetastasen (besonders Brust, Prostata, Schilddrüse)

Prostatitis Osteomalazie

Hormone Choriongonadotropin (HCG) Calcitonin (Pro-)ACTH

Choriocarcinom, Testiscarcinom Medulläres Schilddrüsencarcinom Lungentumoren

Onkofetale Antigene Carcinoembryonales Antigen (CEA)

35

1160

Kapitel 35 · Tumorgewebe

das D-Fetoprotein, das carcinoembryonale Antigen (CEA), das Prostata spezifische Antigen (PSA) und Hormone, die von bestimmten Tumoren ektopisch produziert werden (. Tabelle 35.4). Eine wichtige Früherkennungsmethode ist die Untersuchung des Stuhls auf okkultes Blut (das aus Darmtumoren stammen kann). Der auch als Haemokkult bezeichnete Test nutzt die Pseudo-Peroxidaseaktivität von Hämoglobin aus. Empfindlichere – in Entwicklung befindliche – Tests versuchen, Mutationen in Tumor-DNA, die aus Stuhl extrahiert wird, nachzuweisen. In der Diagnostik von Leukämien und Tumorerkrankungen finden zunehmend Mikroarray- und Proteomanalysen Anwendung (Beispiel, 7 Kap. 7.4.4), bei denen die Probe auf die unterschiedliche Expression von Tausenden von Genen bzw. Proteinen untersucht wird.

35.11

Krebstherapie

! Cytostatika hemmen die Zellteilung über eine Hemmung des DNA-Stoffwechsels.

35

4 Cytostatika greifen an definierten Stellen des Zellzyklus ein; sie können aber nur auf Zellen wirken, die sich in Teilung befinden (was bei Tumorgewebe nicht für alle Zellen zutrifft): 4 Alkylanzien (wie z.B. Cyclophosphamid) führen über eine covalente Brückenbildung zwischen den DNASträngen zu einer Hemmung der Replikation 4 Anthracycline interkalieren zwischen den DNA-Strängen und verwehren der DNA-Polymerase damit den Zugang 4 Verschiedene Cytostatika hemmen für die DNA-Synthese essentielle enzymatische Systeme wie die Topoisomerase (so z.B. Etoposid) 4 Vincaalkaloide wirken über eine Hemmung des Spindelapparats in der M-Phase 4 Antimetaboliten (wie Fluorouracil) hemmen spezifisch in der S-Phase die Thymidylat-Synthase und damit die DNA-Synthese (7 Kap. 19.1.5) 4 Im Gegensatz dazu aktivieren die ebenfalls in der Krebstherapie eingesetzten Cytokine Interferon-α oder Interleukin-2 Immunvorgänge (7 Kap. 25.5; 34.6.2) ! Neue Therapieansätze entwickeln sich aus dem zunehmend besseren Verständnis der Biochemie von Tumoren.

Das zunehmend bessere Verständnis der biochemischen Grundlagen von Tumorerkrankungen erlaubt die Entwicklung einer zielgerichteten Tumortherapie: Schwerpunkt der bisherigen Entwicklung sind monoklonale Antikörper und Tyrosinkinaseinhibitoren: beim Darmkrebs wird der EGFRezeptor von einem Teil der Patienten überexprimiert, beim Brustkrebs das HER2-Neu-Onkogen, ein Verwandter des EGF-Rezeptors. Monoklonale Antikörper gegen diese

Proteine (Cetuximab bzw. Trastuzumab) sind therapeutisch wirksam und werden für die Behandlung dieser Krebsarten eingesetzt. Ebenso ist ein Antikörper gegen vEGF (Bevazuzimab), der die Angiogenese hemmt, für die Therapie von Darmtumoren zugelassen. Tyrosinkinasen sind wichtige Vermittler der Signaltransduktion einer Vielzahl von Membranrezeptoren (7 Kap. 25.5.1). Bei der chronisch myeloischen Leukämie wird die BCR/ABL-Fusions-Tyrosinkinase (siehe oben) effektiv durch den Tyrosinkinase-Inhibitor STI 571 gehemmt. Deshalb hat auch dieses Molekül Eingang in die Leukämietherapie gefunden. Die Tyrosinkinaseinhibitoren Erlotinib und Gefitinib hemmen über eine selektive Hemmung der ATP-Bindungsstelle die EGF-Rezeptor-Tyrosinkinase und werden zur Behandlung des Bronchialkarzinoms angewandt. ! Tumorzellen entwickeln Resistenzmechanismen gegen Cytostatika.

Werden Tumorzellen in vitro mit pflanzlichen Cytostatika wie Vincaalkaloiden, Actinomycin D oder Anthracyclinen inkubiert, entstehen resistente Varianten. Im Allgemeinen sind diese Zellvarianten nicht nur gegen das Medikament resistent, das sich in dem Inkubationsmedium befindet, sondern auch gegenüber anderen aus natürlichen Produkten. Deshalb wird dieser Zustand als Multidrug-Resistenz (MDR) bezeichnet. Diese Resistenz erklärt, warum viele Tumorerkrankungen des Menschen nur schlecht auf die Behandlung mit Cytostatika ansprechen. Vermittelt wird sie u.a. durch eine Familie membranständiger Transportproteine, die die Cytostatika aus dem Cytosol wieder in den Extrazellulärraum zurücktransportieren. Zu dieser Familie gehört auch das bei der cystischen Fibrose gestörte Transportsystem. Beim Menschen gibt es zwei Mitglieder der MDR-Familie (MRD-1 und -2). Beide Proteine weisen einen hohen Homologiegrad auf. Beim Menschen wird das MDR-1-Protein (. Abb. 35.18) in Nieren, Colon, Placenta, Nebennieren und spezialisierten Strukturen wie Endothelzellen, die an der Bildung der Blut-Gehirn- und Blut-Hoden-Schranke beteiligt sind, gefunden. Es wird ihnen deshalb eine physiologische Funktion beim ATP-abhängigen Transport von Steroidhormonen und der Ausscheidung natürlicher Toxine zugeschrieben. Das MDR-1 codiert für ein Glycoprotein mit einem Molekulargewicht von 170 kD (P-Glycoprotein, P-170), das MDR-2 ist offenbar am stärksten in der Leber exprimiert. Interessanterweise sind Tumoren, die aus Geweben mit hoher MDR-1-Expression entstehen, chemotherapieresistent, wohingegen die initiale Therapieempfindlichkeit von Leukämien und Lymphomen mit einer niedrigen MDR-1-Expression normaler hämatopoietischer Zellen einhergeht. Tumorzellen können offenbar nicht nur dadurch, dass sie sich in der G0-Phase befinden, sondern auch durch eine vermehrte MDR-1-Expression gegenüber der Chemotherapie resistent sein. Die Isolierung des MDR-1-Gens hat somit einen molekularen

1161 35.12 · Gentherapeutische Ansätze bei Krebserkrankungen

. Abb. 35.18. Strukturmodell des MDR1-Proteins (P170-Glycoprotein), das als transmembranäres Protein in der Zellmembran verankert ist

Marker zur Verfügung gestellt, der zur Beurteilung der Chemotherapieresistenz dienen kann. Daneben spielen auch Änderungen der Expression anderer Enzyme wie der Topoisomerase II (7 Kap. 7.2.3) oder der Glutathion-STransferase (7 Kap. 15.3) eine Rolle für die Chemotherapeutikaresistenz.

35.12

Gentherapeutische Ansätze bei Krebserkrankungen

! Die Gentherapie von Krebserkrankungen steht am Beginn ihrer Entwicklung.

Die kausale Behandlung des durch Mutationen hervorgerufenen Gendefekts bei Tumorzellen ist die Einführung des normalen Gens in die Tumorzelle. Bei Genverlusten oder -störungen (wie z.B. solcher der Antionkogene) ist das Ziel, durch Transfektion ein neues Gen in das zelluläre Genom einzubringen (Additionstherapie) oder das defekte Gen durch homologe Rekombination (7 Kap. 7.4.4) durch ein neues zu ersetzen (Substitutionstherapie). Das ersetzte fremde Genmaterial tritt dabei an die Stelle des defekten endogenen Gens und wird wie dieses reguliert. Die homologe Rekombination gelang jedoch bisher nur an kultivierten Zellen der Maus (7 Kap. 7.4.5). Die Transfektion, d.h. die Einbringung eines zusätzlichen funktionellen Gens in eine Zelle, kann durch die in Kapitel 7 (7 Kap. 7.4.1, 7.4.2) besprochenen Methoden erreicht werden; dies funktioniert in vitro zwar leicht, ist aber in vivo bei einem soliden Tumor bisher sehr viel schwieriger zu erreichen. Die Effizienz der Transfektion ist immer noch sehr niedrig und auch von Zelle zu Zelle stark unterschiedlich. Die meisten menschlichen Zellen können zudem nur kleine Mengen fremder DNA integrieren (etwa 6 kb). Weiterhin wird das transfizierte Gen aus noch unbekannten Gründen nur für einige Monate exprimiert. Daher versucht man, durch selektive Promotoren die Transkription der transfizierten Gene zu beeinflussen.

! Mit der Anti-Gentherapie sollen Gene der Tumorzelle gehemmt werden.

Andere Ansätze bedienen sich der Antisense-Oligonucleotide, d.h. kurzen synthetischen Nucleotidsequenzen, die zu DNA- und RNA-Sequenzen komplementär sind und diese durch Hybridisierung inaktivieren (7 Kap. 7.4.4). Durch Bindung dieser Nucleotide an ihr jeweiliges Zielmolekül können Transkription oder Translation des dazugehörigen Gens selektiv gehemmt werden. Wenn dieses Gen ursächlich an der Entstehung der Tumorkrankheit beteiligt ist, könnte seine Inaktivierung zu einer Regression des malignen Phänotyps führen. Die mRNA im Cytosol stellt ein geeigneteres Ziel als die DNA im Zellkern für diesen Ansatz dar, da die Antisense-Oligonucleotide – neben der Zellmembran – nicht auch die Kernmembran permeieren müssen. ! Der Einbau von Cytokingenen soll natürliche Abwehrmechanismen stimulieren.

Cytokine können eine Wirkung auf das Tumorwachstum haben, besitzen jedoch bei systemischer Gabe Nebenwirkungen und eine sehr kurze Halbwertszeit. Deshalb versucht ein neuer Ansatz, Gene für Cytokine (Interleukin-2, Interleukin-4, Interferone, Tumornekrosefaktor) in Zellen einzubringen, die spezifisch mit Tumorzellen in Wechselwirkung treten, wie z.B. tumorinfiltrierende Lymphozyten (TIL). So wurden solche Zellen mit dem Gen für Tumornekrosefaktor transfiziert. Durch Markierung mit einem Markergen wie Neomycinphosphotransferase konnte nachgewiesen werden, dass sich diese Zellen im Tumor anreichern und dort bis zu 10 Monaten fremde Gene exprimieren. ! Gentherapeutische Manipulation erlaubt die lokale Produktion eines Cytostatikums.

Ein weiterer Therapieansatz ist die virusdirigierte EnzymMedikamentenvorstufen-Therapie, die darauf beruht, dass ein Vektor spezifisch in Tumorzellen, aber nicht in

35

1162

Kapitel 35 · Tumorgewebe

normalen Zellen exprimiert wird. So wird ein Virusgen in der normalen Leberzelle nur dann exprimiert, wenn es an den Albuminpromotor gekoppelt ist, aber nicht bei Kopplung an den D-Fetoprotein-Promotor. In der Lebertumorzelle ist dies genau umgekehrt: Koppelt man z.B.

das Gen für Cytosin-Desaminase an einen derartigen selektiven Promotor, so führt die Expression dieses Gens in der Zielzelle dazu, dass angebotenes 5-Fluorocytosin intrazellulär in das Cytostatikum 5-Fluorouracil umgewandelt wird.

In Kürze Der programmierte Zelltod, die Apoptose, ist ein Vorgang, der im Zuge der Tumorentstehung fehlreguliert sein kann. Onkogene und Antionkogene sind die Krebsgene, deren Mutationen die Tumorentstehung verursachen. Mehrere Hundert dieser Gene sind inzwischen bekannt. Onkogene und Antionkogene sind im nicht-mutierten Zustand an der Regulation des Zellwachstums beteiligt. Onkogene werden durch Mutationen aktiviert. Die mutierten Gene werden auf die nächste Tumorzellgeneration weitergegeben. Die Inaktivierung von Antionkogenen trägt ebenfalls zur Tumorentstehung bei. Mutationen in Genen für Reparaturenzyme verursachen Tumoren. Bei vielen Leukämien sind Translokationen bekannt, die zur Bildung

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35

von Fusionsgenen und damit -proteinen mit veränderter Funktion führen. Invasion und Metastasierung erfordern zusätzliche genetische Veränderungen. Expression von Proteinasen und Neubildung von Gefäßen (Angiogenese) sind Schlüsselvorgänge in dem Mehrschrittprozess der Tumorigenese. MMPs und vEGF sind dabei von entscheidender Bedeutung, sodass an der Entwicklung von Inhibitoren gearbeitet wird. Mutagene Stoffe sind in unserer Umwelt und Nahrung vorhanden. Die Krebstherapie entwickelt sich von einem empirischen zu einem auf den Erkenntnissen der Biochemie basierenden Ansatz. Beispiele dafür sind monoklonale Antikörper und Tyrosinkinase-Inhibitoren.

Gleave ME, Monia BP (2005) Antisense therapy of cancer. Nat rev Cancer 5:468–479 Krause DS, van Etten RA (2005) Tyrosin kinases as targets for cancer therapy. New Engl J Med 353:172–187 Mocellin S, Mandruzzato S, Bronte V, Lise M, Nitti D (2004) Vaccines for solid tumours. Lancet Oncology 5:681–689 Osborne C, Wislon P, Tripathy D (2004) Oncogenes and tumor suppressor genes in breast cancer: potential diagnostic and therapeutical applications. The Oncologist 9:361–377 Ries C, Petrides PE (1995) Cytokine regulation of matrix metalloproteinase activity and its regulatory dysfunction in disease. Biol Chem Hoppe-Seyler 376:345–355 Rosen LS (2005) VEGF-targeted therapy: therapeutic potential and recent advances. The Oncologist 10:382–391 Yee KS,Vousden KH (2005) Complicating the complexity of p53. Carcin 26:1317–1322

Anhang Häufige Abkürzungen – 1164 Sachverzeichnis

– 1167

1164

Anhang

Häufige Abkürzungen A ABC ACTH ADP Ala d-ALA ALAT AMP AMPK ANF Arg ASAT Asn Asp ATP ATPase AVP

Adenin ATP bindende Kassette adrenocorticotropes Hormon Adenosindiphosphat Alanin (A) d-Aminolävulinat Alanin-Aminotransferase Adenosinmonophosphat AMP-abhängige Proteinkinase atrialer natriuretischer Faktor Arginin (R) Aspartat-Aminotransferase Asparagin (N) Asparaginsäure (D) Adenosintriphosphat Adenosintriphosphatase Arginin-Vasopressin

BMP bp BSE BPG

bone morphogenic protein Basenpaare, base pairs bovine spongiforme Encephalopathie Bisphophoglycerat

C CaM CAM cAMP CCK/PZ CD

Cytosin Calmodulin cell adhesion molecule 3c,5c-cyclo-AMP Cholecystokinin/Pankreozymin Differenzierungscluster (cluster of differentiation) Cyclin abhängige Proteinkinase (cyclin dependent kinase) komplementäre DNA Cytidindiphosphat cystic fibrosis transmembrane conductance regulator Kreatinkinase Cytidinmonophosphat Coenzym A Katechol-O-methyltransferase Coenzym Q (Ubichinon) zelluläres Retinol-Bindungsprotein cAMP response-element binding protein corticotropin releasing hormone (Thyreo-) Calcitonin Cytidintriphosphat Cystein (C)

cdk cDNA CDP CFTR CK CMP CoA COMT CoQ CRBP CREB CRH CT CTP Cys

Da DHF DNA DNase Dopa Dopamin

Dalton Dihydrofolat Desoxyribonucleinsäure Desoxyribonuclease Dihydroxyphenylalanin Dihydroxyphenylamin

ECM EDRF EDTA eEF EGF ELISA EPO ER EST

extracellular matrix endothelium-derived releasing factor Ethylendiamin-Tetra-Acetat eukaryoter Elongationsfaktor epidermal growth factor; epidermaler Wachstumsfaktor enzyme linked immunosorbent assay Erythropoietin endoplasmatisches Retikulum expressed sequence tags

FAD FGF FMN Fru Fuc

Flavinadeninnucleotid fibroblast growth factor Flavinmononucleotid Fructose Fucose

G G-CSF GABA Gal GAP GDP GH GIP GK Glc GlcN GlcNAc GLDH GLP Gln Glu GLUT Gly GM-CSF

Guanin granulocyte colony-stimulating factor J-Aminobutyrat Galactose GTPase aktivierendes Protein Guanosindiphosphat Wachstumshormon (growth hormone) gastrisches inhibitorisches Peptid Glucokinase Glucose Glucosamin N-Acetyl-Glucosamin Glutamatdehydrogenase glucagon-like peptide Glutamin (Q) Glutaminsäure (E) Glucose-Transporter Glycin (G) granulocyte macrophage colony-stimulating factor Guanosinmonophosphat Glutamat-Oxalacetat-Transaminase Glycosyl-Phosphatidyl-Inositol Glutamat-Pyruvat-Transaminase

GMP GOT GPI GPT

1165 Häufige Abkürzungen

GRE GSH GSSG GTP

glucocorticoid responsive element Glutathion Glutathion-Disulfid Guanosintriphosphat

Hb HDL His HIV HK HLA HMG-CoA HPLC HPTE Hsp Hyp

Hämoglobin high density lipoprotein Histidin (H) humanes Immundefizienz-Virus Hexokinase humanes Lymphozytenantigen E-Hydroxy,E-Methyl-Glutaryl-CoA Hochleistungsflüssigkeits-Chromatographie (high performance liquid chromatography) 5-Hydroperoxyeikosatetraenoat heat shock protein Hydroxyprolin

INB IDL IEMA IFN Ig IGF IGF-BP IL Ile IP3 IRMA ITP

Inhibitor von NFNB intermediate density lipoprotein immunoenzymatischer Assay Interferon Immunglobulin insulin-like growth factor IGF-Bindungsprotein Interleukin Isoleucin (I) Inositol-(1,4,5)-Trisphosphat immunoradiometrischer Assay Inosintriphosphat

Jak

Januskinase

kb kJ KM

Kilobase Kilojoule Michaeliskonstante

LCAT LDH LDL Leu LH LH-RH Lys

Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase Lactat-Dehydrogenase low density lipoprotein Leucin (L) luteotropes Hormon LH-releasing hormone Lysin (K)

M-CSF MAG Man MAPK

macrophage colony-stimulating factor Myelin-assoziiertes Glykoprotein Mannose Mitogen aktivierte Proteinkinase

MAPKK MBP MDR Met MHC MMP MOG mRNA miRNA MSH

NAD+ NADP+

MAP Kinase Kinase Myelin-basisches Protein Multidrug-Resistenz Methionin (M) major histocompatibility complex Matrix-Metallproteinasen Myelin-Oligodendrozyten-assoziierte Glykoproteine messenger-RNA Mikro-RNA Melanozyten-stimulierendes Hormon

NO

Nicotinamid-Adenin-Dinucleotid Nicotinamid-Adenin-DinucleotidPhosphat N-Acetyl-Neuraminsäure nuclear factor NB nerve growth factor Magnetische Kernresonanz (nuclear magnetic resonance) Stickstoffmonoxid

OMP OPG OPGL

Orotidinmonophosphat Osteoprotegrin Osteoprotegrin Ligand

Pi PALP PAMP PAPS PCR

anorganisches Orthophosphat Pyridoxalphosphat Pyridoxaminphosphat 2c-Phosphoadenosin-5c-Phosphosulfat Polymerase-Kettenreaktion (polymerase chain reaction) Phosphodiesterase platelet-derived growth factor Pyruvat Dehydrogenase phospholipid-dependent kinase 1 Proteindisulfid-Isomerase Phosphoenolpyruvat Phosphoenolpyruvat Carboxykinase Positronen-Emissionstomographie Phosphofructokinase Prostaglandin Phenylalanin (F) Phosphatidyl-Inositol-3-Kinase prolactin-inhibiting hormone Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat Proteinkinase peripheres Myelinprotein Sauerstoff-Partialdruck Pro-Opiomelanocortin anorganisches Pyrophosphat Prolactin

NANA NF-NB NGF NMR

PDE PDGF PDH PDK1 PDI PEP PEP-CK PET PFK PG Phe PI3K PIH PIP2 PK PMP pO2 POMC PPi PRL

1166

Anhang

Pro PRPP PTH PTHrP

Prolin (P) Phosphoribosyl-Pyrophosphat Parathormon parathormone-related protein

RANK RANKL RAR RER RFLP

receptor for activation of nuclear factor NB Ligand für RANK Retinoat-Rezeptor rauhes endoplasmatisches Retikulum RestriktionsfragmentlängenPolymorphismus Ribonucleinsäure Ribonuclease ribosomale RNA Retinoat-X-Rezeptor

RNA RNase rRNA RXR

SCID scRNA SDS Ser SH2 siRNA snRNA STAT STH

severe combined immunodeficiency small cytoplasmic RNA Natriumdodeylsulfat (sodium dodelcyl sulfate) Serin (S) src-Homologie 2 small interfering RNA small nuclear RNA signal transducer and activator of transcription somatotropes Hormon

T T3 T4 TBP TF TGF TGN TH THF Thr TMP TNF TRH tRNA Trp TSH TTP TXA Tyr

Thymin Trijodthyronin Thyroxin TATA-Box Bindungsprotein Transkriptionsfaktor transforming growth factor Trans-Golgi-Netzwerk T-Helferzellen Tetrahydrofolat Threonin (T) Thymidinmonophosphat Tumornekrose Faktor thyreotropin-releasing hormone transfer-RNA Tryptophan (W) Thyreoidea-stimulierendes Hormon Thymidintriphosphat Thromboxan Tyrosin (Y)

U UDP UDPG UMP UTP

Uracil Uridindiphosphat Uridindiphosphat-Glucose Uridinmonophosphat Uridintriphosphat

Val VLDL vWF

Valin (V) very low density lipoprotein von-Willebrand-Faktor

YAC

yeast artificial chromosome

1167

Sachverzeichnis (F) verweist auf Formelbilder in einer Abbildung

A AAA-ATPasen 183 – Aktivität, Proteasomen 321 A-(Aminoacyl-)Stellen, Ribosomen 293, 294 (F) AAX-Proteinase, Hemmstoffe 311 AB0-System 965–966 – Bluttransfusion 965 A-Bande, Muskulatur, quergestreifte 1002–1003, 1008 ABCA1 183 – Mutation/Defekt 186 – – HDL-Mangel 186 ABC(ATP-binding cassette)-Familie 692 ABCB2/3 322 ABCG5/8 – canaliculäre Membran 1097 – Cholesterinsteine 1101 – Sterole, Resorption 1071 ABC-Transporter 184, 322 – Defekt 323 – – Adrenoleukodystrophie 323 – – Mukoviszidose 313 – – Tangier-Erkrankung 581 – MDR-Protein (multi drug resistance) 184 – P-Glycoprotein 184 – Sterole, Resorption 1071 – Sulfonylharnstoff-Rezeptor 816 ABH-Antigen, Biosynthese, Glycosyltransferasen 965 Abklatsch (blot), Proteine, separierte 63 Abl-Onkogen 1143 – Bruchpunkt 1154 – Leukämie, chronisch-myeloische (CML) 1154 Abl-Tyrosinkinase 1143 Abwehr – Bakterien 1134–1135 – Cytokingene, Einbau 1161 – Mikroorganismen 1134–1136 – (un)spezifische 1135 – Viren 342, 1135–1136 ACAT 7 Acyl-CoA-CholesterinAcyltransferase Acceleratorglobulin 985 Accelerin 985 ACE (Angiotensin-I-ConversionsEnzym) 315–316, 318, 910 – somatisches 910 ACE-Hemmer 315–316 – Captopril 134

– Renin-Überproduktion 911 Acetacetat 408, 441 – Abbau 484 – Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 467–468 – Ballaststoffe 651 – Dehydrierung 484 – Dissoziationskonstante K 15 – Energiestoffwechsel, Gehirn 1024 – Ketonkörper, Biosynthese 409 – Nahrungskarenz 521, 529, 641 – Niere, Energiegewinnung 910 – pKS-Wert 15 – Resorptions-/Hungerphase, Leber 1086 – Standardpotential 103 – Typ-1-Diabetes mellitus 833 – Tyrosinabbau 471 (F) Acetacetyl-CoA – Ketonkörper, Biosynthese 409 – Mevalonat, Biosynthese 565 (F) Acetaldehyd 650 – Alkoholabbau 1100 – Ethanolstoffwechsel, Leber 1100 – Hefezellen 363 Acetessigsäure 7 Acetacetat Aceton 408, 943 – Ketonkörper, Abbau/Biosynthese 409 Acetylcholin 759, 765, 1034, 1037–1040 – Abbau 1040 – ADH-Freisetzung 920 – Bindung 1039 – – Kationenkanal, Öffnung 1040 – Katecholaminsekretion 828 – Mucinsekretion 1064 – Pankreassekretion 1065 – synaptische Vesikel 1035 – Wiederaufnahme 1040 Acetylcholinantagonisten 1042 Acetylcholinesterase 1039–1040 – AcChEH, AcChER bzw. AcChET 313 – kinetische Konstante 123 – Phosphatidylinositol, Verankerung 312 – Spleißen, alternatives 313 Acetylcholinesterasehemmer 1040 Acetylcholinrezeptor(en) 1039 – Acetylcholin, Stoffwechsel 1040

– G-Protein-gekoppelter 783, 1040 – muscarinischer 1040, 1065 – – Histaminproduktion 1064 – – Salzsäureproduktion 1064 – nicotinischer 182, 765, 766 (F), 1039–1040 – – Katecholaminbiosynthese 828 – – Myasthenia gravis 1040 – Superfamilie 1036 Acetylcholin-Transporter, synaptische Vesikel 1035 Acetyl-CoA 391, 405, 440–443, 478–479, 480 (F), 485–486, 571, 704, 943, 1038–1039 – Acetylcholin, Stoffwechsel 1040 – – Synthese 1039 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – – verzweigtkettige, Abbau 467–468 – Carboxylierung, Biotin-abhängige 410 (F), 943 – Cholesterin, Biosynthese 564, 864 – Citratzyklus 704 – Decarboxylierung 1025 – energiereiche Verbindungen 479 – Fettsäuren, Biosynthese 413, 519, 704 – – (β-)Oxidation 405, 484–485, 522 – Gluconeogenese 391 – Glycolyse 364 – Insulin 818 – Ketonkörper, Biosynthese 409, 704 – Lipidstoffwechsel 704 – Lysinabbau 476 – Melatonin, Abbau/Biosynthese 1043 – Mevalonat, Biosynthese 565 (F) – Muskulatur 392 – Oxidation 485 – Pyruvatdehydrogenase (PDH) 522 – – Hemmung 484–485 – Reaktion mit Oxalacetat 482 – Thioesterkonfiguration 479 – Tryptophanabbau 472 Acetyl-CoA-Carboxylase 111, 570, 706 – Carboxylierung, Biotin-abhängige 410 – Dephosphorylierung 132

– Fettsäurebiosynthese 413, 416–417, 520 – Glucose 417 – Hemmung, de-novo-Fettsäurebildung 647 – Induktion 647 – Inhibitor, Acyl-CoA 417 – Insulin 417 – Insulinbiosynthese 819 – Lipogenese 517 – monomere 417 – Nahrungskarenz 527 – Phosphorylierung 132, 417 – – AMP-abhängige Proteinkinase, Aktivierung 527 – polymere 417 Acetyl-Coenzym A 7 Acetyl-CoA β-D-N-Acetyl-Galactosamin 23 (F) β-D-N-Acetyl-Glucosamin 23 (F) Acetylierung – Biotransformation 1091 – Histonproteine 273–274 – Lysinreste 273 – Pantothensäure 704 – reversible, Histone 273 Acetylierungstyp, langsamer 1094 β-D-N-Acetyl-Mannosamin 23 (F) Acetylneuraminsäurestoffwechsel, CTP 540 Acetylsalicylsäure – Cyclooxygenase-Hemmung 134 – Prostaglandinbiosynthese 424 – Thrombosen, Prophylaxe 978 Acetyltransferase (ACT) 799 – Defekt 200 – – Mukop0lysaccharidose 178 Achondrodysplasie, FRG-3Rezeptor, Mutationen 740 Aciclovir 350 Acidität, titrierbare, Urin 908 Acidose 7 Azidose Ackererde, Cancerogenese 1158 Aconitase – Citratzyklus 480, 482 – cytosolische 483 cis-Aconitat 480 (F) ACP (Acyl-Carrier-Domäne/ -Protein), Fettsäuresynthase 410 (F), 412 (F) acquired immunodeficiency syndrome 7 AIDS Acrodermatitis enteropathica 673 Acroleyl-β-Aminofumarat 473 – Tryptophanabbau 472 (F)

A

1168

Anhang

ACTH (adrenocorticotropes Hormon, Corticotropin) 758, 844–846, 863 – Cushing-Syndrom, ektopisches 869 – Halbwertszeit 849 – Hypercortisolismus 869 – Sekretion, Interleukin-1 976 – Tumormarker 1159 ACTH-ähnliche Polypeptide, Plazenta 884 Actinomycin D 269 (F) – DNA-Replikation, Hemmung 236 – Transkription, Hemmung 268–269 activator protein-1 (AP-1) 1115 Activine 7 Aktivine Acumentin 974 Acycloguanosin 350 – DNA-Polymerase 351 Acycloguanosin-Monophosphat 350 (F) Acycloguanosin-Triphosphat 350 (F) Acyladenylat, Fettsäureabbau 404 Acylcarnitin 406 (F), 517 – elektromechanische Koppelung 1012 – Fettsäureabbau 406 – Fettsäurebiosynthese 417 Acyl-Carrier-Domäne/-Protein 410 (F), 412 (F) Acyl-CoA 178, 405, 406 (F), 517 – Acetyl-CoA-Carboxylase, Inhibitor 417 – Fettsäureabbau 404 – Fettsäurebiosynthese 413, 417 – Glucose-Fettsäurezyklus 522 – Phosphatidylcholin, Acylierungszyklus 557 (F) – Thiokinase 519 – Triacylglycerine, Biosynthese 402 (F) – – Spaltung/Resynthese 1071–1072 Acyl-CoA-Cholesterin-Acyltransferase (ACAT) 578 Acyl-CoA-Dehydrogenase 506 – Fettsäuren, β-Oxidation 405, 498 – peroxisomale, Fettsäureoxidation 408 Acyl-CoA:Retinol-Acyltransferase (ARAT) 683–684 Acyl-CoA-Synthetase 519 – Fettsäureabbau 404 – Fettsäuren, langkettige, Biosynthese 411 – Triacylglycerine, Biosynthese 403 Acyl-CoA-Transferase, Ceramid, Biosynthese 560 Acylglycerine 32

– Resorption 1071 Acylierung(en) – Fettsäuren, gesättigte 310 – Membran-Anker 310 – Pantothensäure 704 – Phosphatidylcholin 557 – Proteine 310 Acyltransfer, Fettsäuren, langkettige, Biosynthese 411 Acyltransferase, Phosphatidylcholin, Acylierungszyklus 557 ADAM-(adistengrin-like and metalloproteinase) 317 ADAMTS (ADAM with thrombospondin motifs) 317 Adaptine 193 – AP-1-Adaptin 201 – AP-2-Adaptin 201 – – Plasmamembran 195 – AP-3-Adaptin 201 – Membranbeschichtung 193 – Plasmamembran 195 – Transport, vesikulärer 193 adaptive Immunantwort 1105–1106 Adaptorproteine (AP) 43, 193, 198, 788 – SH2-/SH3-Domänen 735 – Zonula adherens 198 ADCC (antibody dependent cellular cytotoxicity) 1117 Addison-Syndrom 869 – Hypoaldosteronismus 927 Addition, Protonen 19 Adenin 142–143 – DNA 149 – Reutilisierung 597 – tRNA, Aminoacylierung 291 (F)–292 (F) Adeninnucleotid-Carrier 492, 493 (F), 494 Adeninnucleotide – Biosynthese, Regulation 594 – Coenzyme 145 – Nomenklatur 144 Adenin-Phosphoribosyltransferase (APRT), Purinbasen, salvage pathway 597 Adenohypophyse 843, 845 – Hormone 845 – Zellen 845 Adenom-Karzinom-Übergang, colorektale Tumoren, sporadische 1152 Adenosin 143–144, 1044 – Glycogenolyse, Myokard 385 – Purinabbau 599 (F) Adenosin-5‘-monophosphat 7 AMP Adenosin-5‘-triphosphat 7 ATP Adenosindesaminase (ADA) – Geschwindigkeitskonstante 107 – Mangel, hereditärer 604 – Purinabbau 599 Adenosindiphosphat 7 ADP

Adenosin-3‘,5‘-monophosphat, cyclisches 7 cAMP Adenosinnukleotidtranslokase, Transport, sekundär aktiver 185 Adenosin-5‘-triphosphat 7 ATP 5‘-Adenosylcobalamin 111 Adenosylhomocystein 557 Adenosyl-5‘-phosphosulfat (APS) 941 Adenoviren 329 – Adsorption 335 – Aufbau 327 – Aufnahme 333 – Persistenz 343 – Rezeptoren 333 Adenylatcyclase 519, 781–782, 783 (F), 825 – Aktivierung 774, 780, 830 – – Nahrungskarenz 529 – Calcitoninrezeptoren 937 – elektromechanische Koppelung, Myokard 1014 – GABAB-Rezeptor 1040 – Glycogenstoffwechsel, Regulation 381 – Hemmung 774, 780 – – α2-Rezeptoren 528, 830 – – Hormone 781 – Isoformen 782 – Nahrungskarenz 526 – Parathormon 936 – Salzsäuresekretion 1063 – Serotoninrezeptoren 1043 – T3 857 Adenylatcyclase-System 780–781 – Inaktivierung, ATPase-Aktivität 383 – Rezeptoren 780–783 – Stimulierung 781 Adenylatkinase 491 – Reaktion 105 Adenylosuccinat, AMP-/GMP-Biosynthese 588 Adenylosuccinatlyase 588 – IMP-Biosynthese 589 – Nucleosiddi-/-triphosphate, Synthese 589 – Purinnucleotid-Synthese 597 Adenylosuccinat-Synthetase 588 – Hemmung, Mercaptopurin 134 – Nucleosiddi-/-triphosphate, Synthese 589 – Purinnucleotidzyklus 597 Aderlässe, Eisenablagerungen 666 ADF (Aktin-Depolymerisierungsfaktor) 212–213 ADH (antidiuretisches Hormon, Vasopressin bzw. Pitressin) 845, 890–891, 905, 918, 919 (F) – Angiotensin II 920 – Barosensoren 920 – Biosynthese 920 – Blutdruckabfall 920

– – – – – – –

Blutdruckanstieg 919 Durstgefühl 920 Freisetzung, Schwelle 919 Gefäßwirkungen 919 Genstruktur 920 G-Protein, Aktivierung 780 G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 783 – Halbwertszeit 849 – Hypophysenhinterlappen 919 – Natriumhaushalt 922 – Plasmaosmolarität 919 – Sekretion, gesteigerte 921 – Urinvolumen 905 – V1-Rezeptoren 919 – V2-Rezeptoren 919 – Volumenmangel 920 – Wasserhaushalt, Regulation 918 – Wasserrückresorption 919 – Wirkungsmechanismus, Sammelrohr 905 Adhäsion, Plasmamembran 195 Adhäsionsmoleküle/-proteine 197–200, 1113 – Axotomie 1047 – Fibronectin 732 Adipocytokine, Insulinresistenz 835 Adiponectin – AMP-abhängige Proteinkinase, Aktivierung 527 – Typ-2-Diabetes mellitus 835 adipose triglyceride lipase 7 ATGL Adipositas 425, 523 – Begleiterkrankungen 640 – BMI-Wert 638 – Energieausbeute 634 – Energiebilanz, positive 632 – Glucocorticoide 640 – Hypercholesterinämie 583 – Hyperlipoproteinämie 581 – Hypothyreose 640 – Leptin 524 – Leptingen 639 – Leptinrezeptor-Gen 639 – Melanocortin-4-Rezeptor-Gen 639 – metabolisches Syndrom 640 – Typ-2-Diabetes mellitus 834 – UCP2 634 Adipozyten – GLUT 4 375 – gynoide 830 Adjuvans, Totimpfstoffe 349 A-DNA 149, 150 (F) – Struktureigenschaften 149 ADP (Adenosindiphosphat) 104 – ATP-Bildung 106 – Isocitratdehydrogenase, Aktivierung 485 – Muskelarbeit 531 – Muskelkontraktion 1010 – Phosphofructokinase-1 (PFK-1) 388 – Phosphorylierung 106

1169 Sachverzeichnis

ADP-Rezeptoren – Blutstillung, zelluläre 980 – thrombozytäre, Hemmstoffe 978 ADP-Ribose, N-glycosidische Bindung 701 ADP-ribosyliertes Protein, PolyADP-Ribosylierung 702 ADP-Ribosylierung, Nicotinamid 701 ADP-Ribosylierungsfaktor 310 ADP-Ribosyltransferase 702 Adrenalin 463, 468, 758, 826, 1038, 1041–1042 – Abbau 831 – ADH-Freisetzung 920 – Biosynthese 111 – Fettgewebe, braunes 520 – Katecholaminabbau/-biosynthese 827 (F), 831 (F) – Lipolyse 520 – Nahrungsaufnahme, hemmende Wirkung 643 – Reninfreisetzung 911 – Rückkoppelung, negative 828 – Stress 636 – Urin 915 – Wirkungsverstärkung, Cortisol 867 adrenerges System, Katecholamine 829 adrenocorticotropes Hormon 7 ACTH Adrenodoxin 508 adrenogenitales Syndrom 869 – Hypoaldosteronismus 927 Adrenoleukodystrophie 323 Adrenozeptoren 829 – α1-Adrenozeptoren 829–830 – α2-Adrenozeptoren 829–830 – β1-Adrenozeptoren 829–830 – β2-Adrenozeptoren 829–830 – β3-Adrenozeptoren 829–830 – Adipozyten, gynoide 830 Adsorption, Viren 330–333 advanced glycation end products 7 AGEs Äthergruppe 5 (F) Ätherlipide – Biosynthese 558 – Peroxisomen 205 Ätherschwefelfraktion 915 AF-1/2 687 Afadin, Zonula adherens 198 AFB1-8,9-epoxid 1095 (F) AFB1-DNA-Addukt 1095 (F) Affenmensch, Porphyria cutanea tarda 618 Affinitätschromatographie, Proteine 60 Afibrinogenämie 985 Aflatoxin 1094, 1095 (F), 1158 (F) Aflatoxin B1 (AFB1) 1095 (F) AFP 7 α-Fetoprotein Agammaglobulinämie, Typ Bruton 1136

Agarose-Gelelektrophorese 165 – DNA 169 AGEs (advanced glycosylation end-products) 394 (F) – Arteriosklerose 394 – Diabetes mellitus 837–838 – Rezeptoren 319 Agglutinate, Antikörper 1119 Agglutination, Erythrozyten 965 Aggrecan 317, 728 – Hyaluronsäure, Aggregate 728–729 – Knorpel 738 aglanduläre Hormone 759 β1A-Globulin, Immunelektrophorese 995 A-Glycosyltransferase 966, 967 (F) Agmatin 438, 460, 1076 β1-Agonisten, elektromechanische Koppelung, Myokard 1014 Agrin 728, 730, 1009 Ahornsirupkrankheit 467–468 AHR, Biotransformation 1092, 1093 (F) AICAR (5-Aminoimidazol-4carboxamidribonucleotid) 587 (F) – Purinbiosynthese 587 (F), 588 AICAR-Transformylase, IMP-Biosynthese 589 AIDS (acquired immunodeficiency syndrome) 1136 – Aspartatproteinase, Hemmstoffe 315 AIR (5-Aminoimidazolribonucleotid) 587 (F) – Carboxylierung 943 – Purinbiosynthese 587 (F), 588 AIR-Carboxylase, IMP-Biosynthese 589 AIRC-Gen 589 AIR-Synthetase, IMP-Biosynthese 589 Akromegalie 850, 889–890 AKT-1, Muskelaufbau/-abbau 1017 Aktin 214, 302, 974, 1006–1008 – β-Aktin 213 – γ-Aktin 213 – Cytoskelett 207 – Erythrozytenmembran 956 – Filamente, dünne 1006–1007 – Funktionen 213–214 – Muskulatur, quergestreifte 1002 – Stressfasern 735 Aktin-assoziierte Proteine – Tropomyosine 1006 – Troponine 1006 Aktin-bindende Proteine 974 Aktinbindungsstelle, Myosinkopf 1011 Aktin-Depolymerisierungsfaktor (ADF) 212–213

Aktinfilamente 176 (F), 211–214 – Cytoskelett 211–214 – Erythrozytenmembran 956 – fokale Kontakte 212 – Integrine 734 – Listeria 214 – Neurone 1029 – Shigella 214 – Thrombozyten 977 Aktingifte 214 Aktinine, α-Aktinin 213, 1008 Aktionspotentiale – Calciumkanäle, spannungsregulierte 1036 – Neurone 1030, 1032 Aktivatoren, Enzyme 124 Aktivatorproteine, Lysosomen 200 aktives Zentrum – Chymotrypsin 108 – Enzyme 108 – Pyridoxalphosphat 434 Aktivierung – Gene 271–275 – metabolische, Biotransformation 1093–1095 – Proteolyse, limitierte 133 Aktivierungsenergie 107 – Biokatalysatoren 107 – Erniedrigung 20 Aktivierungsenthalpie, freie 107 Aktivine 759, 790, 846, 872 – Aktivin A/B 873 Aktivinfamilie – Aufbau 873 – TGF-β-Superfamilie 872 Akt-Kinase 7 Proteinkinase B Akustikusneurinom 1147 Akutphase-Antwort/-Reaktion 975–976, 992 Akutphase-Proteine 975, 995, 1089, 1104 – α1-Antitrypsin 997 – Bildung 997 – Ferritinspiegel 663 – Immunantwort 1133–1134 – Plasmaproteine 996 Akzeptorarm, tRNA 289 δ-ALA (δ-Aminolävulinat) 609 (F), 615 (F) – Hämbiosynthese 608, 609 (F) – Porphyrie, erworbene 619 δ-ALA-Dehydratase-Mangel 616 Alanin 45 (F), 47, 439, 441–444, 451, 486 – β-Alanin 49 (F), 410 (F), 438, 601 – – Pyrimidinabbau 601 (F) – Abbau 454 – Amino-/Carboxylgruppen, Dissoziationsverhalten 50 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Aminosäurestoffwechsel, Muskulatur 453

– – – – –

Aufnahme, Insulin 820 Bedarf des Menschen 439 Biosynthese 454 – Muskulatur 453 energetisches Äquivalent 637 – Gluconeogenese 444 – Harnstoffzyklus 448 – – Leber 447 – isoelektrischer Punkt 49 – pK-Wert 49 – Plasmakonzentration 445 – Resorption, tubuläre 906 – Stoffwechsel 454–457 – Stoffwechselbedeutung 454–455 – Titrationskurve 50–52 Alanin-Aminotransferase (ALAT, ALT, GPT) 116, 433, 454, 456 – Aktivitätsmessung 136 – Harnstoffzyklus, Leber 447 Alanin-Glyoxylat-Aminotransferase 307 – Defekte 313 Alaninzyklus 444–445 – Leber 454 – Muskelarbeit 534 δ-ALA-Synthase – δ-Aminolävulinat, Synthese 609 (F) – Gene 608 – Hämbiosynthese 608 – Porphyrie, angeborene 614 – Pyridoxalphosphat 704 δ-ALA-Synthase-1, Hämbiosynthese, Regulation 611–612 δ-ALA-Synthase-2 664 – Defekt 614 – – Anämie, sideroblastische 614 – Eisenhomöostase 664 – Hämbiosynthese, Regulation 612–613 δ-ALA-Synthase-2-mRNA 613, 665 ALA-Synthase-2-Gen 608 – Transkription, Erythropoetin 613 – Translation 613 ALAT 7 Alanin-Aminotransferase Albinismus 206 Albumin(e) 993–995 – Bilirubin, Transport 621 – Darmsaft 1062 – Funktion/Pathobiochemie 992 – glomeruläre Filtrierbarkeit 896 – Immunelektrophorese 995 – Kupfertransport 668 – Plasmakonzentration 992 – Proteine, glykierte 394 – Schilddrüsenhormone, Transport 854 – Synthese in der Leber 1088 – Zink, Bindung 672

A

1170

Anhang

Albuminurie, Diabetes mellitus 837 Aldehyddehydrogenase – Ethanolstoffwechsel, Leber 1100 – Histidinabbau 474 (F) – Serotonin, Abbau/Biosynthese 1042 (F) Aldehyde 22 Aldehydoxidase, Molybdän 671 Aldimin 433, 434 (F), 437 – Transaminierung 435 (F) Aldoladdition 19, 482 Aldolase, Glycolyse 360 Aldolase A – Fructoseintoleranz, hereditäre 395 – Glycolyse 360 Aldolase B – Fructosestoffwechsel 364–365 – Glycolyse 360 – Mangel, Fructoseintoleranz 395 Aldosereduktase 365, 543 Aldosteron 759, 922 – Biosynthese 922–923 – – Natriumretention 924 – – Plasma-Kaliumkonzentration 924 – Cholesterin 922 – Conn-Syndrom 927 – cytosolischer Rezeptor 923 – Freisetzung, ANP 926 – Halbacetalform 923 (F) – Halbwertszeit 849 – Hyperkaliämie 929 – Kaliumausscheidung, renale 929 – Mineralstoffwechsel 923 – Natrium, Rückresorption 923, 1075 – Natriumhaushalt 922, 924 – Sammelrohr 903 – Steroidhormonrezeptoren 923 – Überleitungsstück 903 – Wasserresorption 1075 – Wirkungen 923 Aldosteronrezeptoren – Colon 924 – Sammelrohre 924 – Schweißdrüsen 924 A-β-Lipoproteinämie 581 – hereditäre 1077 alkalische Phosphatase, Tumormarker 1159 Alkalisierung – des Blutes, Ammoniak 445 – Erythrozyten 961 Alkalose 18, 947 – 2,3-Bisphosphoglycerat 961 – Hypocalciämie 938 – Kaliumausscheidung, renale 929 – Ketonkörper im Urin 916 – metabolische 949

– – Blutparameter 949 – pH-Wert 949 – respiratorische 948 – – Blutparameter 949 – – Liquor-pH 1027 Alkohol – Abbau, Acetaldehyd 1100 – GABAA-Rezeptoren 1041 – Gehalt in Getränken 650–651 – mehrwertiger 23 – PBG-Desaminase-Mangel 617 – Resorption 650 – Stoffwechselbedeutung 649–652 Alkoholabusus/-konsum bzw. Alkoholismus – akuter 1099 – Alkoholdehydrogenase (ADH) 1099 – CD(Carbohydrate Deficient)Transferrin 661 – chronischer 1099–1101 – Folsäuremangel 709 – Hypercholesterinämie 583 – Leberzellschädigung 1099 – Magnesiumresorption 940 – Pankreatitis, akute 1067 – – chronische 1068 Alkoholdehydrogenase 1099 – Hefezellen 363 – Isoformen 650 – Zink 672 Alkoholdehydrogenase 1C, Retinoidfunktion 687 Alkoholgenuss 7 Alkoholabusus/-konsum bzw. Alkoholismus Alkoholintoxikation 393 Alkoholmenge 650 Alkoholresorption, Nahrungsaufnahme 650 Alkylanzien, Krebstherapie 1160 1-Alkyl-Phosphatidylcholin (Plasmalogen) 36, 37 (F), 557 (F) Alkylphosphoglyceride 558 Alkylradikal 510 Alkylreste, Umlagerung, Cobalamin 710 Allantoin, Harnsäureabbau 600 Allergene 1137 Allergien 1137–1138 – frühe/verzögerte Reaktionen 1137 – Gell-Coombs-Einteilung 1137 – Typ I 1137 – Typ II 1137–1138 – Typ III 1137–1138 – Typ IV 1137–1138 Alles-oder-Nichts-Übergänge, Enzymaktivität 131 Allo-Erkennung 1110 allogene Transplantation 1138 Allopurinol 604 (F) – Hyperuricämie 603 – Xanthinoxidase, Hemmung 127, 134

Alloreaktivität 1110, 1139 Allosterie 83 – Enzyme 130–131 allosterische Effektoren, Hämoglobin 83 all-trans-Retinal 683 (F), 684, 685 (F) – Sehvorgang 686 all-trans-Retinoat 683 (F), 684 all-trans-Retinol 683 (F), 684, 685 (F) Allysin 310, 725 Alphavirus 328 Alport-Syndrom 724 Alter(n) 513 – Ernährung 652 – Nährstoffdichte 652 alternativer Weg 7 Properdinweg alternatives Spleißen 278–280 Alterung(sprozess) – Kalorienrestriktion, Effekte 639 – Lysosomen 203 – Sirtuine 639 Aluminium, Gesamtbestand/ Plasmaspiegel 656 Alzheimer-Demenz 89, 214, 1048–1049 – Amyloidvorläuferprotein APP 1049 – (anti-)amyloidogener Weg 1049 – Homocystein 464 Alzheimer-Plaques 1048 Amadori-Umlagerung 393–394, 720 Amalgam, Quecksilber 677 Amanita phalloides 215 Amanitin – RNA-Polymerasen, Hemmung 260 – Transkription, Hemmung 269 Amantadin 352 Ameisensäure 4, 708 (F) Amelogenin 317 Amethopterin 595 (F), 596, 709 Amidbildung, C-terminale, Proteinolyse, limitierte 309 Amide – Bindung 312 – Cancerogenese 1157 – Stoffwechsel 454–457 Amine 436 – aromatische 1158 (F) – biogene, Mastzellen 1080 – – Neurotransmitter 1034 – Cancerogenese 1157 – Desaminierung, oxidative, O2-abhängige 434 – Thrombozytengranula 977 – toxische, Lebererkrankungen 1076 – Urämietoxine 909 Aminierung – Glutamatdehydrogenasereaktion 909

– Glutaminsynthetasereaktion 909 – α-Ketoglutarat 432 α-Amino-β-Ketoadipat, Hämbiosynthese 608 Aminoacrylat 436–437 – Desaminierung 436 (F) Aminoacyladenylat 145, 292 – tRNA, Aminoacylierung 291 (F)–292 (F) Aminoacylierung – Aminoacyl-tRNA-Synthetase 292 – tRNA 291 (F)–292 (F) Aminoacyl-tRNA 292–293, 296 – Proteinbiosynthese 288 Aminoacyl-tRNA-Synthetase 291, 292 (F) α-Aminoadipat 440, 442 – 7 Lysin Aminoazidurie 915 p-Aminobenzoesäure, Folsäure 707 γ-Aminobutyrat (7a. GABA) 49 (F), 759, 765, 1037, 1040–1042 – Nahrungsaufnahme, Wirkungen 643 – Stoffwechselbedeutung 454 – TRH-Freisetzung 847 – Vorkommen 615 (F) ε-Aminocapronsäure 988 α-Aminocarbonsäuren 45, 48 α-Aminoglutarat 7 Glutamat Aminoglycosid-Antibiotika, Proteinbiosynthese, Hemmung 299 α-Aminogruppe – Katalyse 315 – Stoffwechsel 432–433 Aminogruppen 5 (F) – Aminosäuren 48, 58 – Dissoziationsverhalten 50 α-Amino-β-(5-hydroxy-)indolylpropionat 7 5-Hydroxytryptophan α-Amino-β-(3,4-hydroxy-)phenylpropionat 7 3,4-Dihydroxyphenylalanin 5-Aminoimidazol-4-N-succinocarboxamidribonucleotid (SAICAR) 587 (F) – Purinbiosynthese 587 (F), 588 5-Aminoimidazol-4-carboxamidribonucleotid (AICAR) 587 (F) – Purinbiosynthese 587 (F) 5-Aminoimidazolribonucleotid (AIR) 587 (F) – Carboxylierung 943 – Purinbiosynthese 587 (F), 588 5-Aminoimidazol-ribosylcarboxy-5‘-Phosphat 943 β-Aminoisobutyrat 601, 604 – Pyrimidinabbau 601 (F) β-Aminoisobutyrat-Transaminase, Mangel 604 Amino-Isopropanol 710 (F)

1171 Sachverzeichnis

α-Aminoisovalerat 7 Valin α-Amino-β-ketoadipat – Decarboxylierung 943 – Hämbiosynthese 608 δ-Aminolävulinat (δ-ALA) 486–487, 609 (F), 615 (F), 943 – Bleiausscheidung 677 – Hämbiosynthese 608, 609 (F) – Porphyrie, erworbene 619 – Urin 915 δ-Aminolävulinatdehydratase, Hämbiosynthese 609 δ-Aminolävulinatsynthase 7 δ-ALA-Synthase α-Amino-γ-mercaptobutyrat 7 Homocystein p-Aminomethylbenzoesäure 988 α-Amino-β-methylvalerat 7 Isoleucin α-Aminomuconat-δ-Semialdehyd, Tryptophanabbau 472 (F) 2-Aminonaphthalin 1158 (F) Aminopeptidase B, TRH-Biosynthese/-Freisetzung 847 Aminopeptidase N, Virusrezeptor 331 Aminopeptidase(n) 316, 1059 – Cysteinumwandlung 466 – Darmsaft 1062 – Lysosomen 318 Aminophospholipid-Translocase 563 Aminopropeptidase 719 α-Aminopropionat 442 β-Aminopropionat 7 β-Alanin Aminopterin 595 (F), 596, 709 Aminosäurederivate 758 – Urin 915 Aminosäuren 4, 45–52, 56, 825 – α-Aminosäuren 45 (F) – Abbau 448 – – Cytosol/Mitochondrien 443 – – Decarboxylierung 441–442 – – Glucose, Bereitstellung 646 – – Harnstoffzyklus 442 – – Lokalisation, subzelluläre 442 – – Multienzymkomplex 441 – – Säuren, nichtflüchtige 942 – Aminogruppen 48 – – ε-Amino-Gruppe 45 – – Dissoziationsverhalten 50 – Ampholyte 48–50 – aromatische, Abbau 468–473 – – Stoffwechselbedeutung 468 – Aufnahme, Insulin 820 – Bedarf 438–439, 653 – bedingt essentielle 438–439 – Blutplasma 522 – Carbonsäurederivate, gesättigte 45 – Carboxylgruppen 45, 48 – – Dissoziationsverhalten 50 – chromatische Trennung 51

– Chromatographie 51 – Decarboxylierung 436 – – Pyridoxalphosphat-abhängige 438 – Derivate, Neurotransmitter 1034 – Derivatisierung mit Dansylchlorid bzw. Ninhydrin 51 – Desaminierung 434–436 – enterohepatischer Kreislauf 1062 – Erythrozytenabbau 955 – essentielle 438, 518, 644 – – Abbau 439–442 – – Bedarf 653 – – Biosynthese 442–444 – – – Enzyme 443 – – Kohlenstoff 442 – – Mangel 645 – Fäulnisvorgang, bakteriell induzierter 1076 – freie, Resorption, tubuläre 906 – – Urin 914 – Funktionen im Organismus 429 – Gehirnstoffwechsel 1025 – geladene, Seitenketten 58 – glucogene 441, 517–518, 521, 644, 1086 – – Energiebilanz, negative 640 – – Gluconeogenese 372–373, 518 – – Postresorptions-/Hungerphase 1087 – Guanidinogruppe 45 – Helixformation 72 – Imidazolgruppe 45 – Invarianz, Cytochrom c 95 – Ionenaustauschchromatographie 51 – isoelektrischer Punkt 49 – katalytische Triade 108 – ketogene 441 – – Postresorptions-/Hungerphase 1087 – Klassifizierung 45 – Kopplung, Peptidsynthese 93 – – Schutzgruppen 92 – Leber-/Nierenfunktionsstörungen 653 – Liquor cerebrospinalis 1027–1028 – Nachweisreaktionen 50 – Nahrungsaufnahme, afferente Signale 642 – Nahrungszufuhr 522 – Neurotransmitter 453, 1034 – nicht essentielle 439 – – Abbau 439, 440 (F) – – Biosynthese 439, 440 (F) – – – Citratzyklus 487 – – Stoffwechsel 439, 440 (F) – nichtproteinogene 48 – OH-Gruppe 45

– – – – – – – – – –

pH-Wert 50 pK-Wert 49 positionale 293 Proteinbiosynthese 57 – Regulation 300 – im Skelettmuskel 529 proteinogene 45–47, 289 – Derivate 48 – Seitenketten 45 – tRNA-Derivate, Synthese 298 – Proteolyse 1073 – Re(ab)sorption 1073 – – Niere 905 – Resorptionsphase 1087 – Säureamid-Gruppe 45 – Säure-Basen-Eigenschaften 48–52 – saure, Stoffwechsel 454–457 – schwefelhaltige 462–466 – Seitenketten 45 (F), 58, 944 – – basische 45 (F) – SH-/SeH-Gruppe 45 – Stoffwechsel 454 – Stoffwechselbedeutung 430, 644–646 – terminale, Entfernung bzw. Addition, Proteinolyse, limitierte 309 – Titrationskurve 50 – Transaminierung 433–434, 435 (F) – Transport, Jejunum 1074 – tRNA, Aminoacylierung 291 (F)–292 (F) – Umkehrflüssigkeitschromatographie 52 – Umsatz, täglicher 644 – Urin 915 – Verteilungschromatographie 52 – verzweigtkettige 438, 466–468 – – Abbau 467 (F), 494 – – Carrier 494 – – Muskulatur 453 – – Transportproteine 494 – – Verzweigtketten-Dehydrogenase-Komplex 466 – zellulärer Pool 645 – Zwitterion 49 Aminosäureoxidasen 437 Aminosäuresequenz – Edman-Abbau 65–66 – Erkennungsmotive, Transport, vesikulärer 193 – Proteine 65–69, 97 Aminosäure-spaltende Enzyme, Pyridoxalphosphat 704 Aminosäurestoffwechsel 438–444, 508 – Darm 451 – Enterozyten 451 – Enzyme 432–438 – Glutamat 432 – Glutamat-Dehydrogenase (GLDH) 452

– – – – – – – – – –

Glutaminase 452 Harnstoffzyklus 448 Leber 444–451, 1087–1088 Muskulatur 444, 453 Nieren 451–453 Organe 444–454 PEP-Carboxykinase 452 Pyridoxalphosphat 433, 703 Reaktionen 432–438 Zentralnervensystem 453–454 Aminosäuretransportsysteme – Gendefekte 1078 – Insulinbiosynthese 819 α-Aminosuccinat 7 Aspartat Aminotransferasen 433 – Methionin, Abbau 463 – Pyridoxalphosphat 704 α,δ-Aminovalerianat 7 Ornithin Aminoxidasen 506 Aminozucker 24, 518, 540 – Aminosäuren 429 – Biosynthese 541, 544–545 – Glycoproteine 545 – Glycosaminoglykane 545 Aminverbindungen, Methämoglobin 969 Ammoniak 428 – Alkalisierung des Blutes 445 – Carboxylierung 943 – Elimination, renale, Nahrungskarenz 641 – Eliminierung, Leber 1087 – Eliminierungsmechanismen 909 – Harnsäureabbau 600 Ammoniak-Lyasen 434 Ammoniakvergiftung 453–454 Ammonium-/Ammoniak-Puffersystem 944 – Dissoziationskonstante K 15 – pKS-Wert 15 – pK-Wert 909 – Tubuluszellen 908–909 – Urin 17 Ammonium-Assimilation 428–429 – Glutamat 429 Ammonium-Ionen 428 – Elimination, Urin 946 – Entgiftung, Harnstoffzyklus 447 – Harnstoff 445 – Herkunft 447 – Konzentration 445 – Leberinsuffizienz 17 – Neurotoxizität 445 – Produktion, Azidose 908 – stickstoffhaltige Substanzen, Biosynthese 445 – Stoffwechsel, Leberläppchen 448, 449 (F) – Toxizität 445 – Urin-pH-Wert 914 ammonotelische Form, Stickstoffausscheidung 429

A

1172

Anhang

AMP (Adenosin-5‘-monophosphat) 144, 292, 380, 588 (F) – Biosynthese 588–590 – Fettsäureabbau 404 – Gluconeogenese 391 – Nahrungskarenz 526 – Phosphofructokinase-1 (PFK-1) 388 – Purinbiosynthese 588 – tRNA, Aminoacylierung 291 (F)–292 (F) AMPA(α-Amino-3-Hydroxy-5Methyl-4-Isoxazolpropionat)Rezeptoren 1038–1039 AMP-abhängige/-aktivierte Proteinkinase (AMPK) 132, 525–526, 570, 645 – Aktivierung, Adiponectin 527 – – Nahrungskarenz 526 – – Typ-2-Diabetes mellitus 835 – Kohlenhydratstoffwechsel 647, 651 AMPA-Glutamatrezeptorvesikel, Axone/Dendriten 210 AMP-Desaminase,Purinnucleotidzyklus 597 Amphetamine, ATP-Synthese 634 amphibole Natur, Citratzyklus 486–487 amphiphile Helices – Apolipoproteine 574 – Membranproteine 178 amphiphile Verbindungen 554 – Phosphoglyceride 40 – Sphingolipide 40 Ampholyte 48 – Aminosäuren 48–50 AMPK 7 AMP-abhängige/ -aktivierte Proteinkinase α-Amylase 1059 – Kohlenhydrate, Resorption 1069 – Pankreas 1058–1059 – Speichel 1054 – Urin 915 Amylo-1,6-Glucosidase – Glycogenabbau 370 – Kohlenhydrate, Resorption 1069 Amylo-1,6-Glucosidase-Mangel, Glucogenose Typ III 395 (β-)Amyloid, Alzheimer-Demenz 1048 amyloidogener Weg, AlzheimerDemenz 1049 Amyloid-Plaques, AlzheimerDemenz 723, 1048 (β-)Amyloidproteinvorläufer – Alzheimer-Demenz 1048–1049 – Prozessierung, proteolytische 1049 Amylopectin 26 Amylose 26

Amylo-1,4o1,6-Transglucosylase, Glycogenbiosynthese 369, 370 (F) Amytal 497 Anämie 955 – aplastische 955 – Eisenmangel/-verlust 666 – Erythropoietin 912 – Hämoglobinkonzentration 957 – hämolytische 955, 992 – – angeborene 395 – – dekompensierte 968 – – Folsäuremangel 709 – – Pyruvatkinase-Mangel 395 – hyperchrome, MCH-Wert 957 – MCH-Wert 957 – megaloblastäre, Cobalaminmangel 710 – – Folsäuremangel 709 – mikrozytäre 955 – normochrome 957 – perniziöse 1138 – – Cobalaminmangel 710 – renale, Erythropoietin 913 – sideroblastische 614 Anästhetika, GABAA-Rezeptoren 1041 Analbuminämie 998–999 analgetische Wirkung, Endorphine 1044 Analyseverfahren, enzymimmunologische 134 Anaphase, Mitose 155 Anaphylatoxine – C3a, C4a bzw. C5a 1132 – Komplementaktivierung 1131 anaplerotische Reaktionen – Citratzyklus 487, 706 – Gluconeogenese 372 – Purinnucleotidzyklus 597 Anastrozol, Aromatase-Hemmung 134 anchoring plaque, dermodermale Junktion 750 Anderson-Krankheit 205 Androgene 872 – Abbau 877 – Biosynthese 864, 869 – – LH 874 – – Nebennierenrinde 874 – Erythropoietin, Produktion 877 – Gonaden 873 – Granulosa-Zellen 880 – Knorpel-/Knochenbildung 741 – Leydig-Zellen 874 – Östrogene, Prohormone 880 – Skelettsystem, Homöostase 745 – synthetische 877 – Transport im Blut 876 Androgenrezeptoren 877 Androgenrezeptorgen, Mutationen 877–878

Androstanrezeptor, konstitutiver, Biotransformation 1092, 1093 (F) 3α-Androstendiol, Androgene, Abbau 877 5-Androstendiol, Testosteron, Biosynthese 874, 875 (F) Androstendion 880, 882 – Androgene, Abbau 877 – Östrogene, Biosynthese 880–881 – Progesteron, Biosynthese 880–881 – Testosteron, Biosynthese 874, 875 (F) – Theca Interna 879 ANG II 7 Angiotensin II Angina pectoris, Adipositas 640 Angiokeratoma corporis diffusum, β-Galactosidase, Defekt 580 Angioödem 1132 Angiotensin – G-Protein, Aktivierung 780 – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 783 angiotensin-I-converting enzyme 7 ACE Angiotensin I 910 Angiotensin-I-ConversionsEnzym 7 ACE Angiotensin II 910 – Abbau 911 – ADH-Sekretion 920 – AT1-Rezeptoren, Rückkopplung, negative 911 – Biosynthese 911 – Blutdruck 911 – Extrazellulärvolumen 911 – Natriumhaushalt 922, 924 – Natriumresorption 1075 – Nierenarteriendruck 899 – Nierendurchblutung 896 – Retinopathie, diabetische 837 – Rezeptoren 911 – Signaltransduktion 911 – Tubulus, proximaler 902 – Wasserresorption 1075 Angiotensinogen 910 – Fettgewebe 524 – Hypertonie 524 – metabolisches Syndrom 524 – Synthese in der Leber 1088 Anionen – (an)organische, Transport, Tubulusepithelien 906 – mitochondriale Carrier 492 Anionenaustauscher, Tubulusepithelien 906 Anionenkanäle – ligandengesteuerte, GABAA-/ GABAC-Rezeptoren 1040 – – Glycinrezeptoren 1040 – Neurone 1030

Anionentransportproteine, Schilddrüsenhormontransporter 855–856 Ankyrin, Erythrozytenmembran 957 α-/β-Anomerie, Glycoside 24 Anorectin, Nahrungsaufnahme, hemmende Wirkung 643 Anoxie, Phosphorylase b 380 ANP (atriales natriuretisches Peptid) 924, 925 (F) – Biosynthese, Natriumhaushalt 924 – Elimination, Endopeptidase, neutrale (NEP) 926 – Myozyten, Dehnung 926 – Natriumhaushalt 922 – Nierendurchblutung 896 – Primärstruktur 925 – Rezeptoren 926 – Sekretion, Natriumhaushalt 924 – Typ A 925 – Typ B 925 – Typ C 925 – Vorhofdruck 926 – Wirkung 926 Anpassung, induzierte (induced fit), Enzyme 109 Ansäuerung, luminale, V-ATPasen 183 Anthracycline, Krebstherapie 1160 Anthrax-Adenylatcyclase 777 – Aktivierung, Calmodulin 777 Anti-A/B 965 antiamyloidogener Weg, Alzheimer-Demenz 1049 Antiandrogene 877 – Cyproteronacetat 877 – Flutamid 877 antiapoptotische (Apoptosehemmende) Faktoren 227 antibody dependent cellular cytotoxicity (ADCC) 1117 α1-Antichymotrypsin – Akutphase-Proteine 1089 – Funktion/Pathobiochemie 992 – Leber 1089 – Synthese in der Leber 1088 Anticodon 287 – Basenpaarung 290 Anticodon-Codon-Wechselwirkung, tRNA 289–290 Antidiurese 183 – ADH-Freisetzung 920 – maximale 905 antidiuretisches Hormon 7 ADH Antifibrinolytika 988 Antigen-Antikörper-Immunkomplexe, Komplementaktivierung 1131 Antigen-Antikörper-Reaktion, Immunelektrophorese 993

1173 Sachverzeichnis

Antigene – antigene Determinante 1106 – chemische Natur 1106 – Epitop 1106 – Erythrozyten 965–967 – extrazelluläre 1107 – heterophile 965 – oligosaccharidhaltige 965 – onkofetale, Tumormarker 1159 – Proteasom 1107 antigene Determinante – Antigene 1106 – Blutgruppenantigene 965 Antigen-Erkennung, Lymphozyten 1110 Antigenpräsentation 322, 1106–1107 – Makrophagen 975 – MHC-Peptidrezeptoren 1107 Antigen-präsentierende Zellen (APZ) 975, 1104, 1106–1107, 1113 – B7RP-1 1113 – Immunproteasom 1107 Antigenprozessierung 796, 1107 – B-Lymphozyten 1125 – Makrophagen 975 Anti-Gentherapie, Tumorzellen 1161 antihämophiler Faktor A/B 985 antiinflammatorische Wirkung, Cortisol 867 Antikoagulantien, Blutgerinnung, Hemmung 986 Antikörper 965, 1104 – 7 Immunglobuline – Aufbau 1118 – Bindung 1119 – Cardiolipin 580 – ELISA/Western-Blot 346 – Flexibilität 1119 – Genumlagerung (rearrangement), somatische 1121 – γ-Globuline 995 – Immunität 1119 – katalytische 109–110 – monoklonale 1127–1128 – – Fluorochrome 1128 – – Herstellung, HybridomTechnik 1127–1128 – – Krebstherapie 1160 – Mutationen, somatische 1121 – Nachweis 1119 – Vielfalt 1121–1123 – Virusabwehr 1136 – Vorkommen 1118 – Y-Modell 1119 antilipolytischer Effekt, Insulin 819 Antimetabolite, Krebstherapie 596, 1160 Antimycin, Ubichinon-Reduktionszentrum, Blockade 499 Antionkogene 1143, 1145–1150 – DNA-Sequenzverlust-Analyse 1145

– Funktionen 1147–1148 – Identifizierung 1145 – Inaktivierung 1143 – – Mutationen 1149–1150 – – Tumorigenese 1150 – Lokalisation 1147 – Sonden, anonyme 1145 – Viren, Tumor-erzeugende 344 Antioxidantien – Aminosäuren 429 – Glutathion (GSH) 465 – lipophile, Bilirubin 621 – Sauerstoffradikale 511 – Vitamin E (Tocopherol) 691, 693 Antiphospholipidsyndrom 580 Antiport 179 (F) – mitochondriale Carrier 492 – Tubulus, proximaler 902 Antiport, Symport bzw, Uniport 179 α1-Antiprotease 996 – Funktion/Pathobiochemie 992 – Mangel 996 Antisense-Oligonucleotide, Gentherapie bei Krebserkrankungen 1161 antisense strand 256 Antisense-Transkripte, natürliche (NAT‘s) 164 Antisense-Transkription, Proteincodierte Gene 163 Antiseren 1127 – FACS (fluorescence-activated cell sorting)-Analyse 1127 Antithrombin III – Blutgerinnung 985 – Funktion/Pathobiochemie 992 – Heparin, Bindung 986 – Mangel 990 – Plasmin 988 – Synthese in der Leber 1088 antithyroidale Substanzen, Thyreoperoxidase, Inhibitoren 854 α1-Antitrypsin 317, 510, 997, 998 (F) – Akutphase-Proteine 1089 – Funktion/Pathobiochemie 992 – Immunelektrophorese 995 – Leber 1089 – Methionylrest 998 – Mutationen 997 – Oxidation, Sauerstoffradikale 975 – Plasmin 988 – P1-(Proteaseinhibitor-)Typ 997 – Synthese in der Leber 1088 – Z-Variante 997 α1-Antitrypsinmangel 996 – Leberzirrhose 998 – Lungenemphysem 998 – Zigarettenrauch 998 α1-Antitrypsin-mRNA 998

Antivitamine 682 Antizym 322 Antrum, Magen, Mucin 1054 Antrummühle 1057 Anurie, Harnvolumen 914 Aorta, Insulinempfindlichkeit 817 AP-1 (activator protein-1) 1115 Apaf-1 (apoptotic proteaseactivating factor-1) 226 APC (aktiviertes Protein C) 986, 1147 – Zelladhäsionsmolekül 1151 APC-Gen, FAP 1150 APC-mRNA – colorektale Tumoren 1151 – FAP 1151 APC-Resistenz 990 AP3-Defekte, Immundefizienz 206 AP-Endonucleasen 239 Aphthovirus 328 apikaler Iodtransporter (AIT), Schilddrüse 852 Apo... 7 Apolipoproteine Apo-1 (CD95, Fas) 1116 Apo A 574 Apo AI 573–574 – Retinoidfunktion 688 Apo AII 573 Apo AIV 573 Apo B, Biosynthesestörung, A-β-Lipoproteinämie 581 Apo B48 – chemische Zusammensetzung 573 – Chylomikronen, Assemblierung 1072 – Entstehung, RNA-editing 280 – nicht austauschbare 574 – physikalische Eigenschaften 573 – RNA-editing 280 Apo B100 576 – chemische Zusammensetzung 573 – LDL-Rezeptor 577 – nicht austauschbare 574 – physikalische Eigenschaften 573 – RNA-editing 280 Apo C 574, 576 Apo CI 573–574, 576 Apo CII 573–574, 576 Apo CIII 573, 576 Apo D 573–574 Apo E 573–574, 576 Apocarboxylasen 312, 705 (F) Apoenzym 110 – prosthetische Gruppe 111 Apoferritin 663 – H-/L-Ketten 663 – Mikroheterogenität 663 Apolipoproteine 573–574 – 7 Apo... – cDNA-Sequenzen 574 – Chylomikronen 574

– HDL, LDL bzw. VLDL 574 – Triacylglycerine, Spaltung/ Resynthese 1072 Apoplex, Homozystinurie 465 Apoproteine – glykierte 394 – Häm 496 (F) Apoptose 177, 225–228, 315, 1142 – Auslösung 571 – Bcl-2-Familie 226 – Caspasen 226, 320, 792, 1116 – Cytochrom-c-Freisetzung 226 – death-domain (DD) 791 – Effektormoleküle 792 – extrazelluläre Matrix 730 – Faktoren 1143 – Fehler, Tumoren 227 – Glucocorticoide 867 – Hemmung 571 – Induktion/Initiation 1149 – – Fas (CD95, Apo-1) 1116 – Leberzellschädigung 1099 – mitochondrialer Weg 226 – – Rezeptor-abhängiger 227 (F) – Mitochondrien 203 – p53-vermittelte 227 – – SIRT1 639 – Pin1-Isomerase 303 – Polyamine 462 – Proteolyse, intrazelluläre 226 – Stickstoffmonoxid (NO), Überproduktion 323 – Stress, zellulärer 323 – TC-Zellen 1116 – Telomerase, Funktionsverlust 236 – Thalassämie 971 – TNFR1-Rezeptorkomplex, Aktivierung 792 – TNF-Rezeptor-Superfamilie 226 – Virusfreisetzung 340 – Virusinfektion 342 – Zellkern, Schrumpfung 225 – zelluläre Vorgänge 226 Apoptose-hemmende Gene, Vitamin E 694 Apoptose-Rezeptor, Fas (CD95, Apo-1) 1116 Apoptose-stimulierende Gene, Vitamin E 694 Apoptosomen 205 Appetit, Obestatin 886 Appetitzentrum, hypothalamisches, GLP-1 824 APRE (Akutphase-responsives Element), Interleukin-6-Signaltransduktion 795 APS-Kinase, Sulfat, Aktivierung 941 APZ 7 Antigen-präsentierende Zellen Aquaporin 1, Henle-Schleife, dünne, absteigende 904

A

1174

Anhang

Aquaporin 2 – Nephronabschnitte 182 – Signaltransduktion, Adiuretinabhängige 182 Aquaporin-2-Kanäle, Wasserdiffusion, transzelluläre 905 Aquaporin 3 905 Aquaporine 12, 182, 904–905, 1075 – Erythrozyten(membran) 12, 956 – Gallebildung, Cholangiozyten 1098 – Nierenepithelien 12 Arachidonsäure 34, 418, 420–421, 571 – Immunantwort 1134 Arachidonsäurederivate 423 Arachidonyl-CoA 419, 420 (F) – Biosynthese, Linoleyl-CoA 420 Arachnodaktylie, kongenitale kontrakturale 751 Arachnoidea 1026 ARAT (Acyl-CoA:Retinol Acyltransferase) 683–684 Arbeit, Nahrungsenergie, absorbierte, Umwandlung 633–634 Archäen 6–7 Archäen-Chaperonine 303 Architekturmotive, Proteinstrukturen 77 ARE-Bindeproteine 281 – mRNA-Moleküle, Stabilität 280 Arenaviren 328 – RNA-Genom 335 Arf (adenosyl ribosylation factor) 194–195 Arf-G-Proteine – Choleratoxinbindung 206 – Plasmamembran 195 Arf-Proteine 192, 310 – Arf-1-Protein 194 Arginase – Aminosäurestoffwechsel, Leber 447 – Defekt/Mangel 450 – Mangan 673 Arginase I, Harnstoffzyklus 446 Arginin 45, 47, 49, 438–439 – Abbau 459, 942 – Aminosäurestoffwechsel 432, 440, 451 – – Leber 447 – Bedarf 439 – Biosynthese 459–460 – – Darm/Enterozyten 451 – Bioynthese, Darm/Enterozyten 460 – Harnstoffzyklus 446 (F), 447–448, 459 – Harnstoffzyklusdefekte 450 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 – Plasmakonzentration 445 – Stoffwechsel 459–462 – Umwandlungsreaktionen 461

Argininosuccinat 443 – Aminosäurestoffwechsel, Leber 447 – Harnstoffzyklus 446 (F), 448 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 Argininosuccinatlyase – Aminosäurestoffwechsel, Leber 447 – Defekt 450 – – Citrullinäme Typ I 450 – Harnstoffzyklus 446 Argininosuccinat-Synthetase – Aminosäurestoffwechsel, Leber 447 – Defekt 450 – Harnstoffzyklus 446 Argininosuccinaturie 450 Argininreste – Methylierung 273 – N-terminale, Proteine 321 Arginin-Vasopressin (AVP) 890 – ACTH-Sekretion 863 – Nahrungsaufnahme, hemmende Wirkung 643 Arginin-Vasopressin-Neurophysin 845 Arginyl-tRNA 321 β-ARK 806 ARNT (ARH nuclear translocator), Biotransformation 1092, 1093 (F) Aromatase 873, 877 – Östrogene/Progesteron, Biosynthese 880–881 Aromatasehemmer – Anastrozol 134 – Östrogensynthese 881 Arp2/3-Komplex 212–213 Arrestine 686 – Funktion 806 – β2-Rezeptoren, adrenerge, G-Protein-gekoppelte 195 Arrhythmie, gap junction-Defekte 186 Arrhythmien 800 – Hyperkaliämie 930 ARS (autonomously replicating sequence) – DNA-Replikation 230 – Hefechromosomen, künstliche 243 ARS (utonomously replicating sequence), Hefechromosomen, künstliche 243, 243 (F) Arsen 656 arterielle Verschlüsse, t-PA, rekombinantes 988 Arteriolen – afferente/efferente 897 – Scherkräfte, hohe 980 Arteriosklerose – AGE 394 – Herzkranzgefäße 1016 – metabolisches Syndrom 640 – PPAR 649

– Sitosterolämie 1077 arteriovenöse Differenzen, Hirnpassage 1024 Arteriviridae 328 Arterivirus 328 Arthropathie, Eisenablagerungen 666 Arylhydrocarbonrezeptor (ARH), Biotransformation 1092, 1093 (F) Arylsulfatase A, Defekte 200 Arzneimittel – Lipidlöslichkeit 10 – Resorptionsgeschwindigkeit 10 Arzneimittelallergie 1137 ASAT 7 Aspartat-Aminotransferase Ascorbat 7 Ascorbinsäure (Vitamin C) Ascorbinsäure (7a. Vitamin C) 111, 511 (F), 681, 697–699 – biochemische Funktion 697–699 – chemische Struktur 697 – Coenzym 111 – GLUT1 697 – GLUT3 697 – enzymatische Reaktionen 698 – Hypovitaminose 699 – Kollagenbiosynthese 699 – Redoxpotential 697 – Sauerstoffradikale 511 – Speicherung in der Leber 1089 – Standardpotential 103 – Stoffwechsel 697 – Synthese 542 – – Glucuronat/-Glucuronsäure 541–542 – Transporter 697 – Tyrosinabbau 471 (F) – Vorkommen 697 – Zufuhr, tägliche 681 Ascorbyl-Radikal 697 Asialoglycoproteine, Zellen 1098 Asialoglycoprotein-Rezeptoren 319 – Glycoproteine 548 – Leber 1089 ASK (apoptosis signalling kinase) 772 Asn-X-Ser/Thr 546 Asparagin 28 (F), 45, 47, 439, 518 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Bedarf des Menschen 439 – Stoffwechsel 455–456 – Stoffwechselbedeutung 455 Asparaginase 456 – Leukämie, akute, lymphatische 456 Asparagin-Synthetase 456 Aspartat 45, 47, 49, 121, 432, 438–439, 442–443, 486 – Abbau 454

– Amino-/Carboxylgruppen, Dissoziationsverhalten 50 – Aminosäurestoffwechsel 432, 440 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 454 – Darmschleimhaut 451 – Harnstoffzyklus 446 (F), 448 – Herkunft 447 – isoelektrischer Punkt 49 – NH2-Donor 454 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 – pK-Wert 49 – Plasmakonzentration 445 – Purinnucleotidzyklus 597 – Pyrimidinbiosynthese 590 – Resorption, tubuläre 906 – Stoffwechselbedeutung 454–455 – Titrationskurve 50–51 Aspartat-Aminotransferase (ASAT, AST, GOT) 111, 433, 454, 456 – Cysteinabbau 465 (F) – Harnstoffzyklus, Leber 447 – kinetische Konstante 123 – Mechanismus 434 Aspartat-Glutamat-Austausch, Harnstoffzyklus 448 Aspartat-Glutamat-Carrier 494 Aspartatpeptidase 315 Aspartatproteinase, Hemmstoffe, AIDS 315 Aspartat-Seitenkette, P-ATPasen 184 Aspartattranscarbamylase 594 – Dihydroorotatbiosynthese 594 Aspartatzyklus 432 – Aminosäurestoffwechsel, Leber 447 – Fumarat 448 – Transportproteine 494 Aspartylreste, Spaltung, Caspasen 320 Aspergillus-flavus-Toxin 7 Aflatoxin Aspirin£ – Mucinproduktion, Hemmung 1067 – Prostaglandinbiosynthese 424 Assemblierung, Kollagene 719 Assemblierungsmaschinerie 308 AST 7 Aspartat-Aminotransferase Astacine 317 Asthma bronchiale 830, 1137 Astrozyten – Ammoniakvergiftung 454 – Plexusendothel 1027 AT1(AT2-)Rezeptor 911 Ataxia/Ataxie – Enzephalomyopathien, mitochondriale 512

1175 Sachverzeichnis

– – – – –

episodische 1032 Pyridoxinmangel 703 spinocerebelläre 1049 teleangiectatica (AT) 237 with Vitamin E Deficiency (AVED) 694 ATCase 594 ATGL (adipose triglyceride lipase) 398–399 – knock-out 399 – Nahrungskarenz 399 Atherocalcin 695 Atherosklerose 694 Atmung, herabgesetzte, CO2-Partialdruck 946 Atmungskette 203, 491 – Elektronentransport 494–500 – Enzymkomplex 497 – Fließgleichgewichtszustände 503 – Glycerophosphatzyklus 498 – Innenmembran, mitochondriale 204 – Komplex I 496–497 – Komplex II 497–498 – Komplex III 498–499 – Komplex IV 499–500 – Multiproteinkomplexe 494 – NADH 364 – Protonentransport 494–500 – Thermogenin, Entkopplungsprotein 503–504 Atmungskettenkomplexe 491 Atmungskettenphosphorylierung 106 Atmungskontrolle 503 – ATP-Bildung 503 – Entkoppler 503 – Mitochondrienmembran, innere 503 – Substratoxidation 503 Atovaquone 595 (F)–596 (F) Atox1, Kupfertransport 669 ATP7A (Menkes-Protein) 668 – Aufbau 670 – Defekte, genetische 670 ATP7B (Wilson-Protein) 668, 670 – Defekte, genetische 670 – Kupferüberschuss 669 – Wilson-Syndrom 670–671 ATP (Adenosintriphosphat) 105–106, 111, 144, 145 (F), 775 (F), 1037, 1044 – ADP-Phosphorylierung 106 – AMP-Biosynthese 589–590 – Bildung 380 – – Atmungskontrolle 503 – – F1/F0-ATP-Synthase 502 – – Glycolyse 362 – Citratsynthase, Hemmung 485 – Energiebilanz 632 – Erythrozyten, Form 955 – GMP-Biosynthese 589–590 – Hexokinase 112 – Hydrolyse 104

– Kontraktions-Relaxations-Vorgang (Muskelarbeit) 531–532 – Kreatinphosphorylierung 531 – Mangel, Ammoniakvergiftung 454 – Muskelkontraktion 531, 1010 – Myokard 385 – neuronale Aktivität 1024 – Phosphofructokinase-1 (PFK-1) 388 – Phosphorsäureanhydrid-Bindung 144 – Querbrückenzyklus 1011 – Synthese 500–502 – – Amphetamine 634 – – Dinitrophenol 634 – – F1-F0-ATP-Synthase 500–502 – – Koffein/Nikotin 634 – – zelluläre, Energieverbrauch 504 – tRNA, Aminoacylierung 291 (F)–292 (F) – Verbrauch 380 – – Salzsäureproduktion 1055 – ZNS 1044 ATP/ADP-Quotient – GLDH-Aktivität 457 – Insulinsekretion, Glucosestimulierte 814 – Verminderung 634 ATPasen 183 – Adenylatcyclase, Inaktivierung 383 – Magnesium 939 – Myosin 1004 – Querbrückenzyklus 1010 ATP-binding-cassette 184 ATP-Bindungsstelle, Öffnung, Querbrückenzyklus 1011 ATP-Citratlyase 486 ATP:Citrat-Lyase, Fettsäurebiosynthese 413 ATP-Citratlyase, Fettsäurebiosynthese 414, 519 ATP-Hydrolyse 179 – Querbrückenzyklus 1010 ATP-Rezeptoren, trimere, P2X-Familie 1036 ATP-Sulfurylase, Sulfat, Aktivierung 941 ATP-Synthasen 183, 203, 501 – Untereinheiten 501 ATP-Transporter, synaptische Vesikel 1035 Atractylis gummifera 493 Atraktylosid 493 AT-reiche Regionen – Prokaryote, Transkription 258 – Prokaryoten, Transkription 258 AT1-Rezeptoren, Angiotensin II-Wirkungen 911 AT2-Rezeptoren, Niere 911 atriales natriuretisches Peptid 7 ANP Atrogin-1 529

– Muskelaufbau/-abbau 1017 AUC (area under the curve), Blutglucoseverlauf 646 AUF1, mRNA-Stabilität 281 Auge, Störungen, Riboflavinmangel 700 AU-reiche Elemente 281 Aurora-Kinasen, Histonphosphorylierung/-dephosphorylierung 274 Außenmembran, Mitochondrien 203, 208 (F) Außenmembran-Vorläuferprotein 308 Austausch-Carrier, elektroneutrale 493–494 Austrittstelle, Proteinbiosynthese, eukaryote, Elongation 296 Autoabgase, Cancerogenese 1157–1158 Autoantikörper, Glutamatdecarboxylase I 1041 Autoimmunerkrankungen 1106, 1138 – Haut 753 – Schilddrüse 860 – β-Zell-zerstörende, Typ-1-Diabetes mellitus 832 Autoimmunität 1138 Autokatalyse 133 autokrine Signaltransduktion 758 autokrine Stimulation – Proliferation 1144 – Thrombozyten 977 Autophagocytose, Lysosomen 200 Autophagosomen 200, 319 – Bildung, Hydratation 1088 – Elektronenmikroskopie 319 – Transport, vesikulärer 191 Autophagozytose-Regulatorprotein (Apg) 319 Autophosphorylierung, Insulinrezeptor 820 Autoxidation 509 AVED (ataxia with vitamin E deficiency) 694 Avery, Oswald Theodore 147 Aviadenovirus 329 Avibirnavirus 329 Avidin, Biotinmangel 706 Avihepadnavirus 329 Avipoxviren 329 Avitaminose 680–682 AVPV (anteroventraler periventrikulärer Nucleus) 872 Axone 1029 – AMPA-Glutamatrezeptorvesikel 210 – Mikrotubuli 208 – Myelinscheide 1045 – Wachstum, Aktin 214 axoplasmatischer Transport 209 Axotomie 1047 (5-)Aza-Cytosin 272–273

A–B

– DNA, Methylierungsmuster 272 Azathioprin, Transplantatabstoßung 1139 3-Azido-3‘-deoxythymidin 7 Azidothymidin Azidose 18, 947 – Biotinmangel 707 – 2,3-Bisphosphoglycerat 961 – Coma diabeticum 833 – Cytochrom-c-Oxidase, Hemmung 500 – Diabetes mellitus 529 – Kaliumausscheidung, renale 929 – Lipolyse 529 – metabolische 949 – – Basenüberschuss 944 – – Blutparameter 949 – – Glutaminverbrauch, renaler 444 – NH4+, Produktion 908 – pH-Wert 949 – respiratorische 947–948 – – Blutparameter 949 – – Liquor-pH 1027 Azidothymidin (3-Azido-3‘-deoxythymidin, AZT) 351 Azidothymidintriphosphat 351 (F)

B 2B 1108 B7.1 (CD80) 1114 B7.2 (CD86) 1114 B7RP-1 – Antigen-präsentierende Zellen 1113 – B-Zell-Aktivierung 1125 BACE (beta-amyloid-precursorconverting-enzyme) 318 Bacillus anthracis 777 Bacteria 7 Bad 227 Bak 227 Bakterien 6 – Colon 1076 – extrazelluläre 1134–1135 – Fremdproteine, Produktion, inclusion bodies 243 – Glycopeptidbiosynthese 595 – gram-pos itive, Lipopolysaccharid 1105 – – Lipoteichonsäure 1105 – intrazelluläre 214, 1134 – – Eliminierung, unspezifische 1135 – Peptidoglykane 30 – Plasmide 241 – säurebildende, Karies 674 Bakterienabwehr 1134–1135 Bakteriophagen, Restriktionsenzyme 244

1176

Anhang

bakteriostatischer Effekt, Penicillin 550 Baktoprenol 32 ball-and-chain-Mechanismus, Kanalverschluss 1031 Ballaststoffe 651–652 – Acetat 651 – Chymus, Viskosität 651 – Faeces 651 – fermentierbare, Brennwert 651 – mikrobieller Stoffwechsel, Dickdarm 651 – Propionat 651 – wasserlösliche 651 – wasserunlösliche 651 Bandenbildung, Chromosomen 157 Barbiturate 497 – GABAA-Rezeptoren 1041 Barium – Gesamtbestand 656 – Plasmaspiegel 656 Barnes-Myopathie 1018 Barosensoren, ADH-Freisetzung 920 β-barrel-Architektur, Kanal, interzellulärer 181 β-barrel-Proteine 77, 178, 307 – Membranen 178 (F) β-barrel-Proteine, Porin-ähnliche 308 Barrieren, Heterochromatin 187 Barth-Syndrom 1018 Bartter-Syndrom, Hypokaliämie 930 Basalkörper, Cilien 211 Basalmembran 1155 – Glomerulus 896–897 – Glycosaminglykane 732 – Kollagenasen 317 – Kollagene 717 – Laminine 732 – Perlecan 732 – Plexus choroideus 1026 – Plexusendothel 1027 – Proteine, glykierte 394 – Proteinzusammensetzung 732 – Proteoglykane 728 – Tumoren, invasive 1156 Basalmembranoberfläche,Tumorzellen, Bindung 1156 base excess (BE) 944 – Blut 944 Basedow-Syndrom 860, 1138 Basen 14–15 – Elektronendonatoren 18 – Katalysatoren 19 – methylierte 463 – Protonen 14 – Stärke 14 Basenexcisionsreparatur – DNA-Glycosylasen 238 – DNA-Schäden 238 – Mechanismus 238–239

basengenaue Verknüpfung, Exon 264 Basenkatalyse 19 (F), 20 – elektrophiler Angriff 19 – nucleophiler Angriff 19 Basenpaarung – Anticodon 290 – Codon 290 – mRNA 290 – tRNA 290 Basensequenz – codierender Strang 257 – DNA 158 Basentriplett 158 – genetischer Code 287 Basenüberschuss 7 base excess (BE) Baustoffwechsel, Aminosäuren 430 Bax 227 bcl-2-Gen 227, 1143 – Zentrozyten 1126 Bcl-2-L1, Vitamin E 694 Bcl-2-Proteine – Apoptose 226–227 – proapoptotische 227 BCR-ABL-Fusionsgen, Leukäme, chronisch-myeloische (CML) 1154 BCR-ABL-Fusions-Tyrosinkinase, Leukämie, chronisch-myeloische (CML) 1160 BCR-ABL-Tyrosinkinase-Inhibitor (STI 571), Leukämie, chronisch-myeloische (CML) 1155 BCR-Gen – Leukämie, chronisch-myeloische (CML) 1154 – Major Breakpoint-Cluster Region 1154 – Minor Breakpoint-Cluster Region 1154 B-DNA 147, 148 (F), 149, 150 (F) – Struktureigenschaften 149 BDNF (brain-derived nerve growth/ neurotrophic factor) 759, 1051 Becker-Muskeldystrophie 1018 Befruchtung – Östrogene 883 – Progesterone 883 – Prostaglandine 883 Belastungstests, Vitaminmangel 681–682 Belegzellen (Magen) – Na+/K+-ATPase 1055 – Salzsäurebildung 1054, 1064 Bence-Jones-Protein, Plasmocytom 915 Benzodiazepine, Bindung an GABAA-Rezeptoren 1041 Benzoesäure 404 – Harnstoffzyklusdefekte 450 3,4-Benzpyren 1158 (F) – Cytochrom P450 1158 Beriberi-Krankheit 699 Bernsteinsäure 7 Succinat

Beryllium, Cancerogenese 1157 beta-amyloid-precursor-converting- enzyme (BACE) 318 Betaglykan 728–729 – TGFβ 729 Betain-Homocysteinmethylase, Homocystein, Remethylierung 464 Beute, Hefe-Zwei-Hybrid-System 249 Bewusstlosigkeit, Hypoglykämie 1024 B-Gedächtniszellen, Knochenmark 1126 β1B-Globulin, Funktion/Pathobiochemie 992 B-Glycosyltransferase 966–967 Bid 227 Bienengift/Bienenstichallergie 1137 – Phospholipase A 559 Bier, Cancerogenese 1158 bifunktionelle Proteine 483 Biglykan 728 – Haut 751 bilayers, Sphingolipide 40 bile salt export protein 7 BSEP Bilifuchsin 623 Bilirubin 620 (F), 621–622, 623 (F) – Abbau, Darm 622–623 – Aufnahme, OATP 622 – Ausscheidung, MRP2 622 – Diazoreaktion 622 – Durchtritt, Blut-Hirn-Schranke 1027 – Glucuronidierung, Störungen 543 – Hämabbau 620 (F), 621–622 – (in)direkt reagierendes 622 – konjugiertes 622 – lipophiles Antioxidans 621 – Nachweismethoden im Blutplasma 622 – Stoffwechselstörungen 624–626 – Transport 622, 664 – – Albumin 621 – Umsatz 623–624 – unkonjugiertes 622, 624 Bilirubindiglucuronid, Biotransformation 1091 Bilirubinstoffwechsel 508 – Hepatocyten, Schädigung 625 Bilirubin-UDP-Glucuronyltransferase 622 Biliverdin 620 (F), 621 Bim 227 Binde- und Stützgewebe 715–754 – Erkrankungen 751 binukleäres Zentrum, Cytochrom-c-Oxidase 500 (F) Biocytin (ε-N-Biotinyllysin) 312, 681, 706 (F) bioelektrische Impedanzanalyse (BIA), Ernährungszustand, Messung 638

Bioenergetik 100–106 biogene Amine 759 – Mastzellen 1080 – Neurotransmitter 1034 Bioinformatik, Protein-ProteinInteraktionen 95 Biokatalysatoren 107 – Aktivierungsenergie 107 – Ribozyme 114 – Übergangszustand 107 biologische Strukturen, Organisation, hierarchische 6 biologische Systeme – Katalyse 107–117 – Kommunikation 758 – Organisationsstufen 5–8 – pH-Wert 13 biologische Wertigkeit – Proteine 644 – Proteinsyntheserate, endogene 644 Biopterin, chinoides 469 Biotin (Vitamin H) 111, 681–682, 705–707 – Acetyl-CoA-Carboxylase 410 – Carboxylasen, Gluconeogenese 372 – Carboxylierung 705 (F)–706 (F) – Coenzym 111, 705–706 – Mangel 706 – Pyruvatcarboxylase 372, 487 – Speicherung in der Leber 1089 Biotinidase 312, 706 – Biotinzyklus 706 – genetische Defekte 706 Biotransformation 508, 761, 1090 – Acetylierung 1091 – Aktivierung, metabolische 1093–1095 – Bilirubindiglucuronid 1091 – Cytochrom P450 190, 1091 – Desaminierung, oxidative 1091 – Glucuronide 1091 – Hydroxylierung 1091 – Konjugationsphase 1090–1092 – Leber 1090–1095 – Monooxygenase 1091 – N-Dealkylierung 1091 – O-Dealkylierung 1091 – OH-Gruppen-Sulfatierung 1091 – oxidative Abspaltung/Umwandlungen 1091 – Phasen 1090 – reaktive Gruppen 1090 reduktive Umwandlungen 1091 1,3-Bisphosphoglycerat – Enthalpie, freie 105 – Erythrozytenstoffwechsel 955 – Glycolyse 360 (F), 361, 362 (F) 2,3-Bisphosphoglycerat 83–84, 960

1177 Sachverzeichnis

– Alkalose/Azidose 961 – Aufenthalt in Gebirgshöhen 961 – Bindung im Hämoglobin 85 – Erythrozyten-pH-Wert 961 – Glycolyse 363 – Hypoxie 961 – Sauerstoffanlagerungskurve 960 (2,3-)Bisphosphoglyceratphosphatase, Glycolyse 363 Bisphosphonate – Farnesylpyrophosphatsynthase, Inhibition 747 – Osteoporose 747 Blasenbildung – epitheliale 206 – Hautkrankheiten 751 Blasengalle 1060 Blasenkarzinom 7 Harnblasenkarzinom Blei 677 – Ausscheidung, δ-Aminolävulinat 677 – Bindung, Sulfhydrylgruppen 677 – Cancerogenese 1157 Bleivergiftung, akute 677 Blindheit, corticale, Enzephalomyopathien, mitochondriale 512 Blk, B-Zell-Aktivierung 1126 β-Blocker, Katecholamine, Hemmung 829 Bloom-Syndrom 237 Blotten – Nucleinsäuresequenzen 166 – Proteine, separierte 63 Blut 951–1000 – Androgene, Transport 876 – Basenüberschuss 944 – Calcium 931 – Cortisol, Transport 865 – Cortisolspiegel, Glucagon 825 – Enzymaktivität 135 – korpuskuläre Elemente 952–953 – Lipide, Transport 572–575 – Lymphozyten 1129 – Phosphat 932 – pH-Wert 18 – Pufferkapazität 944–945 – Sauerstoffaffinität 10, 959 – Sauerstoffkapazität 959 – venöses, Kohlensäure 962 Blutabnahme, langsame, Hämolyse 956 Blutarmut 7 Anämie Blutdruck – Abfall, ADH-Freisetzung 920 – Angiotensin II 911 – Katecholamine 829 Blutfluss, renaler (RBF) 895 Blutgerinnung 133, 979, 981–987 – Calcium 930 – Enzyme 984

– extravaskuläre (exogene) 981 – Hemmstoffe, Mangel, Thrombosen 990 – Hemmung, Antikoagulantien 986 – – Citrat 987 – – EDTA 987 – – gerinnungshemmende Mittel 986 – – Heparin 986–987 – Heparin 30 – intravaskuläre (endogene) 981 – latente 979 – Plasmaproteine 996 – plasmatische, extravaskuläres System 982 – – intravaskuläres System 982 – – Proenzyme 984 – – Profaktoren 984 – α-Tocopherol 693 – Vitamin K 695 Blutgerinnungsfaktoren 985 – Carboxylierung, Hemmung, Vitamin-K-Antagonisten 986 – α-Granula 977 – Hemmung 986 – prokoagulatorische 985 – Synthese in der Leber 1088 – Vitamin-K-abhängige 986 – Vorläufergen 984 Blutglucose 522–523, 836–837, 1024 – Abfall 984 – Insulin 818 – Konzentration 814 – – Säugling 1025 – Nahrungskohlenhydrate 646 – Verlauf, AUC (area under the curve) 646 Blutgruppe 0, Pestepidemien 966 Blutgruppe A, Pestepidemien 966 Blutgruppenantigen P, Virusrezeptor 331 Blutgruppenantigene – antigene Determinante 965 – Selektionsvorteil 966 – Trägermolekül 965 Blutgruppensubstanzen – antigene Determinanten, Biosynthese 966 (F) – als Glycoproteine 27 Blutgruppensystem, Menschen 965 Blut-Hirn-Schranke 1025–1028 – Bilirubindurchtritt 1027 – Cytokine 868 – Diazepam 1027 – Elektrolyte, Durchlässigkeit 1027 – GLUT1 1027 – Hirnkapillaren 1025 – Kompartimente 1026 – Kupfertransport 670 – osmotischer Gradient 1027

– P-Glycoprotein 1027 – Stoffaustausch 1026 – Transport, erleichterter 1027 Blut-Liquor-Schranke 1025 – Permeabilität 1026 Blutplättchen 7 Thrombocyten Blutplasma 917 – Bilirubinnachweis 622 – Eisentransport 659 – Eisentransportsystem, Export 660 – Gesamteisenmenge 661 – pH-Wert 13 – pKS-Wert 18 – Proteinasen 317 – Puffersystem, Hämoglobin 964 Blutserum – Gefrierpunktserniedrigung 12 – Osmolalität 12 Blutstillung 979–991 – plasmatische 981–987 – Thrombozyten 976 – Thrombozytenadhäsion 980–981 – vaskuläre 979 – zelluläre 980–981 Bluttransfusion – AB0-System 965 – Rhesussysteme 965 Blutungen, Eisenverluste 665 Blutzucker 7 Blutglucose Blutzuckerbestimmung, elektrochemische, Glucose-Biosensoren 136 B-Lymphozyten 1104, 1110, 1118–1128 – Aktivierung 1124–1127 – Antigenerkennung 1106 – Antigenprozessierung 1125 – CD19 1125 – Differenzierung 1126–1127 – – Knochenmark 1125 – Exosomen 203 – Reifung 1124–1127 – – costimulatorische Signale 1125 BMI (body mass index), Adipositas/ Übergewicht 638 BMPs (bone morphogenetic proteins) 759, 790 – Chondrozyten, Proliferation 741 – Knochen 742 – Knochenbildung 740 – Osteoblastenentwicklung 740 – Signaltransduktion, R-SmadProteine 790 – SOX-Expression 740 – Wachstumsfuge 741 BMP-1 (bone morphogenetic protein 1) 317–318 BMP-4 (bone morphogenetic protein 4), Knochenbildung 740 BNP (B-Typ) 925 body mass index 7 BMI

Bohr – Christian 960 – Neils 960 Bohr-Effekt 85, 960–961 Bombesin – G-Protein, Aktivierung 780 – Nahrungsaufnahme, afferente Signale 642 – – hemmende Wirkung 643 – Vorkommen/Funktion 1063 bone morphogenetic proteins 7 BMPs bone sialoprotein – Knochen 738 – Ossifikation 738 bone sideroprotein 730 Bor 4 Bordetella pertussis 782 Bornaviridae 328–329 bottle neck-Phänomen, OXPHOSSystem, Defekte 513 Botulinumtoxin 206 Botulismus 1036 Bowman-Kapsel 896, 899 BP230, dermo-dermale Junktion 750 Bradykinin – Carcinoide 1043 – G-Protein, Aktivierung 780 brain-derived nerve growth factor 7 BDNF branched-chain amino acids (BCAA) 444, 466–468 braunes Fettgewebe 7 Fettgewebe, braunes BRCA1 1147 BRCA2 237 κBRE (κB responsive element), Transkription 276 breakpoint cluster region 7 bcr breakpoint cluster region-Gen 7 BCR-Gen Brefeldin A 193 Brennwert – Ballaststoffe, fermentierbare 651 – physikalischer 633 – physiologischer 633 Brenztraubensäure 7 Pyruvat BRF1, mRNA-Stabilität 281 Broensted, Johann N. 14 Brom, Gesamtbestand/Plasmaspiegel 656 Bromcyan, Proteinspaltung 66 Bromodomäne, Histone, acetylierte 274 Bromoergocryptin 875 Bronchialasthma 7 Asthma bronchiale Bronchialkarzinom – ADH-Sekretion 921 – kleinzelliges, Thyreocalcitoninüberproduktion 939 Brückenfunktion, Fibronectin 732 Brustdrüse 7 Mamma

B

1178

Anhang

Bruton-Agammaglobulinämie 1136 BSE (bovine spongiforme Enzephalopathie) 89, 1050 BSEP (bile salt export protein) – canaliculäre Membran 1096– 1097 – Cholestase 1101 – Cholesterinsteine 1101 budding 7 Knospung Bürstensaum – Aktin 214 – Disaccharidspaltung 1069 α-Bungarotoxin 767 Bunyavirus/-viridae 328 – RNA-Genom 335 Burkitt-Lymphom – c-myc-Onkogen 1144 – Epstein-Barr-Virus 344 Butansäure 34 Butyrat, Dickdarmmukosa 651 B-Zell-Aktivierung, Signalvermittlung 1126 B-Zell-(Antigen-)Rezeptor-Komplex 1110, 1121 B-Zell-CD19-Corezeptorkomplex 1132 B-Zellen 7 B-Lymphozyten

C C1 – Akutphase-Proteine 1089 – Komplementaktivierung 1131 C1-Gruppen, Übertragung, Folsäure 707, 708 (F) C1-Inhibitor 317 – Mangel 1132 C1q 1131 C1r 1131 C1s-Serinprotease 1131 C2 1108 – Akutphase-Proteine 1089 – Mangel 1132 C2a/2b 1131 C2H2-Zinkfinger 672 C3 1131 – Akutphase-Proteine 1089 C3‘-Komponente, Funktion/ Pathobiochemie 992 C3a/b 1131 C3-Konvertase, Komplementaktivierung, klassische 1131 C4 1089, 1131 – Mangel 1132 C4a/C4b 1131–1132 C4BP (C4-Bindungsprotein) 986 C4-Zinkfinger 672 C5a 1131–1132 – Leukozyten, Adhäsion 973 C5b 1131 C5-Konvertase 1131 – membrangebundene 130 C6-Zinkfinger 672

C8-bindendes Protein, Erythrozyten, lytischer Angriff, Abwehr 969 C17-C20-Lyase 881 – Testosteron, Biosynthese 874–875 Ca2+-aktivierter K+-Kanal 777 Ca2+-ATPase 183, 690 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – canaliculäre Membran 1097 – Muskelrelaxation 1014 – sarkoplasmatisches Retikulum 1014 – T3 857 Ca2+/Na+-Antiport, Calciumstoffwechsel, Regulation 776 Ca2+-Uniport 183 CA 11-5 1159 CA 19-9 1159 CAAT-Box, Thymidinkinasepromotor 261 CACH (childhood ataxia with central hypomyelinisation) 301 Caciumkanal, spannungsabhängige/-regulierte, Calciumstoffwechsel, Regulation 776 Cadaverin 438, 1076 Cadherine 197–198, 1051 – Zonula adhaerens 198 Cadmium 676–677 – Cancerogenese 1157 CAD-Protein – cytosolisches 110 – Pyrimidinbiosynthese 590, 594 Caenorhabditis elegans 790 Caeruloplasmin 664 – α2-Caeruloplasmin 992 – Akutphase-Proteine 1089 – Kupfer 664, 667 – Synthese in der Leber 1088 CAIR (4-Carboxy-5-aminoimidazolribonucleotid), Purinbiosynthese 587 (F), 588 Cajal nodies 188 CAK (cdk-aktivierte Kinase) 222 Calbindin 690 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 Calciferol(e) 688–691 – Calciumkonzentration 689 – Calciumresorption, intestinale 690 – Knochenstoffwechsel 690 – Transport 689 – Vorkommen 688 – Wirkungen 690 Calcineurin 303, 776, 1114 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – Hemmung, Immunsuppression 303 – Muskelaufbau /-abbau 1016 Calcinosis 1018 Calciphylaxis 1018

calcitonin gene related peptide 7 CGRP Calcitonin (Thyreocalcitonin) 844, 851, 937 – Calciumstoffwechsel 933, 936–937 – cAMP 937 – C-Zellen 851 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 – Halbwertszeit 849 – Knochen 937 – Knorpel-/Knochenbildung 741 – Motilität, intestinale 937 – Nahrungsaufnahme, Wirkung 643 – Natriumcotransport (NaPi) 935 – Osteoklasten 937 – Osteolyse, Hemmung 937 – Parathormon 936–937 – Phosphatausscheidung, renale 933 – Phosphatstoffwechsel 933 – Plasma-Phosphatkonzentration, Erniedrigung 938 – Spleißen, alternatives 278–279 – Tumormarker 1159 – Überproduktion, Hypocalciämie 938 – – Schilddrüsenkarzinome 939 Calcitoninrezeptoren 937 Calcitriol 7 1,25-Dihydroxycholecalciferol Calcium 4, 985 – Ausscheidung 932 – Bedarf, täglicher 931 – Bindung, pH-Wert 932 – Blut 931 – Blutgerinnung 930 – Einstrom, Extrazellulärraum 931 – endoplasmatisches Retikulum 190 – Freisetzung, intrazelluläre 776 – – konformationsabhängige, elektromechanische Koppelung 1012 – – Muskelzelle 1012 – 1α-Hydroxylase, Hemmung 689 – Hypoparathyreoidismus 939 – ionisiertes 931 – Isocitratdehydrogenase, Aktivierung 485 – α-Ketoglutaratdehydrogenase, Aktivierung 485 – Knochen 738 – Knochenmineralisierung 930 – komplexiertes 931 – Konzentration 382 – – Calciferole 689 – – cytosolische 931 – – – elektromechanische Koppelung 1012 – – – Glycogenabbau 774

– – – Regulation, Myokard 1014 – – – Transportsysteme 774 – – extrazelluläre, Regulation 934 (F) – – Insulinsekretion 814 – – intrazelluläre 783, 931 – – – Angiotensin-II-Wirkungen 911 – – Thyreocalcitonin 937 – Mangel 690 – Membranpotential, Stabilisierung 930 – Mobilisierung 571 – – Vitamin D 690 – Muskelkontraktion 1011–1014 – Parathormon, Sekretion 934 – Permeabilitätssteigerung, Muskelkontraktion 1011 – proteingebundenes 931 – Proteinkinase C 789 – Pyruvatdehydrogenase-Phosphatase, Aktivierung 485 – Renin-Genexpression 911 – Resorption 690, 1076 – – Henle-Schleife, dicke 932 – – intestinale 931 – – – Calciferol 690 – – – 1,25-Dihydroxycholecalciferol 932–933, 937 – – Parathormon 932 – – Tubulus, proximaler 932 – – Vitamin D 690 – second messenger 774 – Thyreocalcitonin 936–937 – Transport, transzellulärer 690 – Überladung, Myokard-Nekrose 385 – Verteilung im Organismus 931 – Zellaktivierung 930–931 – Zufuhr, Phosphatausscheidung, renale 933 Calcium-bindende Proteine 776 Calciumhaushalt 930–932 – Knorpel-/Knochenbildung 741 – Pathobiochemie 938–939 calcium-induced calcium release (CICR), elektromechanische Koppelung 1012 Calciumkanäle 1031 (F) – Depolarisierung, Insulinsekretion 815 – elektrogene, Enterozyten 690 – Insulinsekretion, Glucosestimulierte 814 Calciumkanäle – IP3-abhängige 765, 774 – Kanalinaktivierung 1031 – ligandenregulierte 776 – – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – Neurone 1030 – spannungsabhängige/ -regulierte 774 – – Aktionspotentiale 1036

1179 Sachverzeichnis

– – elektromechanische Koppelung, Myokard 1014 – – Insulinsekretion 815 – – Muskelkontraktion 1011 – – Muskelrelaxation 1015 – – Polypeptidkette 1031 Calciumoxalatsteine 916 – Nephrocalcin 917 – Tamm-Horsfall-Glycoprotein 917 – Uropontin 917 calciumreiche Kost, Magnesiumresorption 940 Calciumrezeptor-Protein, Parathormon, Sekretion 934 Calciumsalze, Gallensteine 1101 Calcium-Sensorprotein, Tubulusepithelien 689 Calciumspeicher – intrazellulärer, Mobilisierung 931 – Knochen 744 Calciumstoffwechsel – 1,25-Dihydroxycholecalciferol 933 – hormonelle Regulation 933–938 – Parathormon (PTH) 933 – Thyreocalcitonin (TC) 933 – zellulärer, Regulation 776 Calcium-Transporter, synaptische Vesikel 1035 Caldesmon, Muskulatur, glatte 1013 Caliciviridae 328 Calmodulin 776–777 – Anthrax-Adenylatcyclase, Aktivierung 777 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – Phosphorylasekinase 382 Calmodulin-bindende Proteine 777 Calnexin (Clx), Proteine, Faltung 304 (F), 305 Calpaine 315, 320 – Muskelproteine, Umsatz 322 Calpastatine 320 – Inaktivierung 322 Calretikulin (Clr), Proteine, Faltung 304 (F), 305 Calsequestrin – elektromechanische Koppelung, Myokard 1014 – Muskelrelaxation 1014 CaM-Kinase 382, 1037 – CFTR-Protein 1076 CaM-Kinase II/III 777 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 cAMP (cyclisches Adenosin-3,5monophosphat) 145, 384, 773, 775 (F) – β3-Rezeptoren 504 – Abbau, Phosphodiesterase 819

– Gluconeogenese 391 – – Regulation 388 – Glycogenstoffwechsel, Regulation 381 – Glycolyse 388, 390 – Hämbiosynthese, Regulation 612 – 1α-Hydroxylase, Induktion 689 – Konzentration, Fettzellen/ Heptozyten, Senkung durch Insulin 819 – Parathormon, Freisetzung 934–936 – Proteinkinase A, Aktivierung 782 – Renin-Genexpression 911 – second messenger 781 – Signalweg, Nierendurchblutung 896 – Synthese 775 – Thyreocalcitonin 937 – Transkription 276 – im Urin 936 cAMP-response-element (CRE) 387, 782 – Transkription 276 cAMP-response-element(CREB)binding protein 782–783 CAMs (cellular adhesion molecules) 199, 973 – Stammzellen, Differenzierung 1124 – vaskuläre (VCAM) 199 canaliculäre Membran, Transportsysteme 1096 canaliculäres System, offenes, Thrombozyten 977 Cancerogene/Cancerogenese 1143 – chemische 1157–1158 – – p53-Gen, Mutationen 1157 – DNA-Schädigung 1148 – physikalische 1158 – Tumorentstehung 1157–1158 Capside – HIV 331 – Viren 326–327 Captopril, ACE-Hemmung 134 CAR, Biotransformation 1092, 1093 (F) Carbamylaspartat, Pyrimidinbiosynthese 590 Carbamylglutamat, N-Acetylglutamat-Synthetase, Defekt 451 Carbamylphosphat 932, 943, 947 – Enthalpie, freie 105 – Harnstoffzyklus 446 (F), 448 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 – Pyrimidinbiosynthese 590 Carbamylphosphat-Synthetase, Aminosäurestoffwechsel, Leber 445–446 Carbamylphosphat-Synthetase I (CPS-I)

– Aktivität 594 – Defekt 450 – Dihydroorotatbiosynthese 594 – Harnstoffzyklus 446 Carbamylphosphat-Synthetase II (CPS-II), Pyrimidinbiosynthese 591, 594 Carboanhydrase 111 – Geschwindigkeitskonstante 107 – intraerythrozytäre, Hydrogencarbonat 962 – Katalyse, Metallionen-vermittelte 119–120 – kinetische Konstante 123 – Salzsäureproduktion 1054–1055 – Zink 672 Carboanhydrase I, Kohlendioxid, Katalyse 962 Carboanhydrase II – Kohlendioxid, Katalyse 962 – Tubulus, proximaler 907 carbohydrate response element 7 ChRE carbohydrate response element binding protein 7 ChREBP Carbokation, Squalen, Bildung 566 Carbonsäure 23 – Reaktion mit einem Alkohol 18–19 Carbonsäurederivate, gesättigte, Aminosäuren 45 Carbonsäure-Phosphorsäureanhydride – Glycolyse 361 – Gruppenübertragungspotential 105 Carbonylgruppe 5 – Glycerinaldehyd-3-phosphat 361 Carboplatin 669 4-Carboxy-5-aminoimidazolribonucleotid (CAIR) 587 – Purinbiosynthese 587 (F)–588 (F) Carboxyethylhydroxychroman (CEHC) 691, 693 – Vitamin-E-Stoffwechsel 693 γ-Carboxyglutamat 48 γ-Carboxyglutamylreste, Proteine, modifizierte 312, 695 Carboxylase – Biotin 706 – biotinabhängige 707 – – Gluconeogenese 372 – Biotinzyklus 706 (F) – γ-Glutamyl-Carboxylierung, Vitamin-K-abhängige 696 – Kohlenhydratstoffwechsel 706 – Lipidstoffwechsel 706 – Mangel, juveniler 707 – Proteinstoffwechsel 706 – Vitamin K 986 Carboxylatgruppe 5

B–C

Carboxylester, Acylglycerine, Spaltung 1070 Carboxylesterase, Pankreas 1059 Carboxylgruppen 5 – γ-Carboxylgruppen 58 – Aminosäuren 48, 58 – Dissoziationsverhalten 50 – Fettsäuren 33 – Sauerstoff 490 Carboxylierung 909, 943 – γ-Carboxylierung, Proteine, modifizierte 312 – γ-Glutamylreste 696 – Kohlendioxid 943 Carboxymethyl (CM) 60 (F) Carboxymethylbutylhydroxychromane (CMBHC), Vitamin-EStoffwechsel 693 Carboxypeptidase 133, 316, 1058 – Lysosomen 318 – Pankreas 1058 – Zinkprotein 1058 Carboxypeptidase A 1058–1059 – Geschwindigkeitskonstante 107 Carboxypeptidase B 1058–1059 Carboxypeptidase E – Insulinreifung 812 – TRH-Biosynthese/-Freisetzung 847 Carboxypropeptidase 719 carcinoembryonales Antigen 7 CEA Carcinoide 1043 Cardiolipin 36, 37 (F), 204, 556 – Antikörper 580 – Biosynthese 556 – Innenmembran, mitochondriale 204 Cardiomyopathie 1020 – Eisenablagerungen 666 Cardiomyozyten, ATP-Konzentration 385 Cardiotrophin-1 (CT-1) 759, 794 cardiotrophin-like cytokine (CLC) 759, 794 cardiovaskuläre Erkrankungen, Homocystein 464 Cardiovirus 328 Carnitin 406 (F), 473, 517 – Biosynthese, Ascorbinsäure 698–699 – Fettsäuren, langkettige, Transport 406 – Muskelzellen 406 Carnitin-Acylcarnitin-Translokase 406 – Fettsäurebiosynthese 406, 417 Carnitin-Acyl-Carrier-System, Fettsäurebiosynthese 648 Carnitin-Acyltransferase – Acylcarnitin, Bildung 406 – Fibrate 416 – Schilddrüsenhormone 416

1180

Anhang

Carnitin-Acyltransferase 1 406 – Fettsäurebiosynthese 417 – Fettsäuren, langkettige 416 – Inhibitor, Malonyl-CoA 416 Carnitin-Acyltransferase 2 406 – Fettsäurebiosynthese 417 Carnitin-Carrier 493–494 Carnitin-Palmitoyltransferase 1 (CPT-1) 517 – Defizienz 1018 – Fettsäureabbau 406 β-Carotin 683 (F) Carotinoide 566, 647, 683 CAR-Rezeptor (coxsackie- and adenovirus-receptor) 333 Carrier 494 – Aminosäuren, verzweigtkettige 494 – elektrogene 492 – neutrale 493–494 – Nucleoside 144 – protonenkompensierte, elektroneutrale 493–494 Carrier-Proteine 183 – 7 Transportproteine Carrierproteine – Enzyme, vektorielle 178 – als Glycoproteine 27 – Hormone 760 – mitochondriale 494 – Schilddrüsenhormone 854 Carrier-Proteine, Transport, aktiver 179 Carrierproteine, Vitamine 682 Carrier-vermittelter Transport 179 cartilage matrix protein, Knorpel 738 Caryopherine, Transport, nucleocytoplasmatischer 189 Caseinkinase 1 382 Caspase 3 226, 792–793 Caspase 6 793 Caspase 7 792–793 Caspase 8 226, 792–793 Caspase 9 127 Caspase-aktivierte DNase (CAD) 226 Caspase-Inhibitoren, bcl2-Konzentration, Erhöhung 1144–1145 Caspasen 315, 320, 792 – aktivierte, Apoptose 792 – Apoptose 226, 320, 1116 – Aspartylreste, Spaltung 320 – DNA-Fragmentierung 793 – DNA-Reparatur, Verlust 793 – Strukturproteine, Zerstörung 793 – Zellzyklus, Stopp 793 Castleman-Erkrankung, Humanes Herpesvirus Typ 8 344 Catechol-O-Methyltransferase (COMT) 831, 882, 1042 – Katecholaminabbau 831 – niedrige, Brustkrebsrisiko 882

α-/β-Catenin 1151 – Zonula adherens 198 Cathepsine 7 Kathepsine C-Atome, Herkunft, Cholesterin 564 Caveolae 43, 176 (F), 197 (F) – Endozytose, Clathrin-unabhängige 197 – Fettzellen 821 – Organisation in Membranen 43 – Transport, vesikulärer 191 Caveoline 43 – Insulinsignal, Weiterleitung 821 CBFA-1 (core binding factor-1) – Chondrozyten, Differenzierung 740 – Knochenwachstum 742 – Osteoblasten, Differenzierung 740 CC-Chemokine 759, 779 CC-Chemokine RANTES 333 CCCR (conformationally coupled calcium release), elektromechanische Koppelung 1012 CCK 7 Cholecytokinin CCK-PZ 7 CholecystokininPankreozymin CCK-Rezeptoren 1066 CCL5 759 CCR5, HI-Viren 1135 CCs, Kupfertransport 669 CD1 1109 – Immunantwort 1133 CD3 1109, 1114, 1128 CD4 1109, 1112–1115, 1128 – HI-Viren 1135 CD4-negative Zellen 1109 CD4-positive TZR-α/β-exprimierende Zellen 1111 CD4-Rezeptor – HIV 332 – Ubiquitinylierung 342 – Viren 331 CD4-T-Zellen 1111 – α/β-T-Zell-Rezeptor (TZR) 1112 CD8 1109, 1113–1115 – HI-Viren 1135 CD8-negative Zellen 1109 CD8-positive TZR-α/β-exprimierende Zellen 1111 CD8-T-Zellen 1111 – α/β-T-Zell-Rezeptor (TZR) 1112 – zytotoxisch-wirkende, Virusabwehr 1136 CD10 – immunhistochemische Darstellung 138 – Niere 138 CD11 973 CD11b/CD18 (CR3) 1132 CD14 799, 1109 – Bakterienabwehr 1135

– GPI-verankertes Protein 799 CD16 1129 CD18 973 CD19 1109 – B-Lymphozyten 1125 CD21 (CR2) – B-Zell-Aktivierung 1126 – Epstein-Barr-Viren 1135 – Komplementrezeptoren 1132 – Virusrezeptor 331 CD25 1112 CD28 1113–1114 – B-Lymphozyten, Reifung 1125 CD34 1109 – Stammzellen 952 CD34-positive Zellen 952 CD35 (CR1) – Bakterienabwehr 1135 – Komplementrezeptoren 1132 CD36 694 – Fettsäuretransport 1071 CD36-Fettsäuretranslokase 401 CD40, B-Lymphozyten, Reifung 1125 CD40-Liganden (CD40L, CD154) 1123 – B-Lymphozyten, Reifung 1125 CD45 1114 CD55 (decay accelerating factor) – Mangel 314 – Virusrezeptor 331 CD56 1109, 1129 CD59 1132 – Erythrozyten, lytischer Angriff, Abwehr 969 CD80 (B7.1) 1113–1114 – B-Lymphozyten, Reifung 1125 – CTLA-4-Wechselwirkung 1114 CD86 (B7.2) 1113–1114 – B-Lymphozyten, Reifung 1125 – CTLA-4-Wechselwirkung 1125 CD95 (Fas, Apo-1) 226, 1116 CD95-Ligand – Proteine, Regulation 694 – Vitamin E 694 CD154 (CD40L, CD40-Ligand) 1123, 1125 CD155, Virusrezeptor 331 CD (cluster of differentation)Nummer 1109–1110 CD-Antigene 1109 cdc25C 222–223 – Bindung, 14-3-3-Protein 224 cdc42-Proteine, Aktin-Cytoskelett, Aufbau und Umbau 212 CDF (cation diffusion facilitator) 672 cdh23, Mechanotransduktor 198 CDK (Cyclin-abhängige Proteinkinasen) 1148 cdk-aktivierte Kinase (CAK) 222 CDLFA 973 cDNA (complementary DNA) 245 (F) cDNA-Banken, DNA-Sequenzen 245

cDNA-Bibliotheken, Proteinsynthese, gentechnische 93 CD-Nomenklatur 1109–1110 CDP (Cytidindiphosphat) 111 CDP-Cholin 145, 517 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 – Sphingomyeline, Biosynthese 559, 560 (F) CDP-Cholin-Diacylglycerin-Transferase, Phosphoglyceride, Biosynthese 555 CDP-Diacylglycerin, Phosphoglyceride, Biosynthese 555 (F), 556 CDP-Diacylglycerin-InositolTransferase, Phosphoglyceride, Biosynthese 555 CDP-Ethanolamin, Phosphoglyceride, Biosynthese 555 CDR (complementary determining region), Immunglobuline 1122 CEA (carcinoembryonales Antigen) – Biotransformation 1093 – Karzinome 1028 – Tumormarker 1159 CEHC 7 Carboxyethylhydroxychroman cell adhesion molecules 7 CAMs Cellulose 26, 651 Celluloseacetatfolie, Plasmaproteine, Trennung 994 Centriolen 176 (F), 208–209 Centromer, Chromosomen 155 Centrosomen 205, 208 – Mikrotubuli 208 – Proteinkinasen, Cyclin-abhängige 225 Ceramid 38, 559, 561–562, 571 – Biosynthese 560 (F), 571 – Sphingolipide, Biosynthese 559, 965 – Sphingomyelin, Abbau/Biosynthese 560 (F), 562 (F) Ceramidase 562, 571 – Sphingomyelin, Abbau 562 c-erbA-Rezeptorfamilie 858 cerebrale Anfälle, Enzephalomyopathien, mitochondriale 512 Cerebrosid(e) 38, 559, 564 – Biosynthese 561 (F) – Sulfatstoffwechsel 941 cerebrospinal fluid (CSF) 1025–1028 Ceroid-Lipofuszinose 200, 323 C-Extein, Proteine, selbstspleißende, autokatalytische Reifung 309 (F) CFTR (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator), cystische Fibrose 185, 1076 CFTR-Chloridkanal 185 – Aktivierung, Proteinkinase A 1078

1181 Sachverzeichnis

CGoTG-Transition, Hämophilie A 988 C-Gen-Segmente – H-Ketten, Antikörper 1121 – L-Ketten, Antikörper 1121 β1C-Globulin, Immunelektrophorese 995 cGMP (zyklisches GMP) 145, 765 – second messenger 774 cGMP-abbauende Phosphodiesterase 803 cGMP-abhängige Ionenkanäle 804 cGMP-abhängige Proteinkinasen 803 – Muskelrelaxation 803 cGMP-Bindungsproteine, intrazelluläre 803 cGMP-Effektormoleküle 803–804 cGMP-Signalweg, Nierendurchblutung 896 CG-Paare, Methylierung 273 CGRP (calcitonin gene related peptide) 844, 937 – Spleißen, alternatives 278–279 channelopathies 1032 Chaperone 88–89, 302 – Cytosol 303 – endoplasmatisches Retikulum 303 – intramolekulare 307 – Lectin-artige 305 – Mitochondrien 303 – Proteinfaltung 88–89, 302, 305 – Viren, Morphogenese 340 Chaperonine (TRiC) 205, 302–303 – Proteinfaltung 303 Chaperonopathien 313–314 Charcot-Marie-Tooth-Krankheit 1047 – Connexin-26-Gen, Mutation 186 Chediak-Higashi-Syndrom 206 Cheilosis, Riboflavinmangel 700 Chemikalien, DNA, Instabilitäten 237 chemiosmotische Hypothese 490 chemiosmotische Kopplung, Energie 104 chemiosmotisches Potential, Mitochondrienmembran 106 chemische Cancerogenese 1157–1158 chemische Elemente 4 chemische Kopplung, Energie 104 chemische Synapsen 1034 chemische Veränderungen, Ubiquitiniylierungssignale 321 Chemoattraktion 1051 Chemokine 759, 779, 1104 – Allergie Typ I 1137 – Cytokine 760 – G-Protein, Aktivierung 780

– G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 783 – Immunantwort 1133 – Leukozyten, zirkulierende 973 – Lymphozyten, Zirkulation 1129 Chemokinrezeptoren – gp120 333 – HI-Viren 1135 – Viren 331 Chemorepulsion 1051 chemotaktischer Reiz, Neutrophile 973 Chemotaxis, Aktin 213 Chemotherapeutika, Resistenz, MDR-Proteine (multi drug resistance) 184 Chemotherapie – 7 Cytostatika – Virusinfektion 350–352 Chemotherapieresistenz – Glutathion-S-Transferase 1161 – Topoisomerase II 1161 Chenodesoxycholsäure 1060 (F), 1061 chimäre Mäuse 252 chinoide Form 437 – Pyridoxalphosphat 433, 434 (F)–435 (F) chinoides Biopterin 469 Chinolinat – Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 468 – Tryptophanabbau 472 Chinon-Form, Ubichinon 495 Chinonreduktase 696 – γ-Glutamyl-Carboxylierung, Vitamin-K-abhängige 696 Chlor 4 Chloramphenicol, Proteinbiosynthese, Hemmung 299 Chlorid 918 – Ioneneinstrom 1040 – Myeloperoxidase, Oxidierung 974 – Reabsorption, elektroneutrale/ elektrogene 1075 – Sekretion 1076 Chlorid/HydrogencarbonatAnionen-exchanger (AE1) 962 Chloridkanal 182, 1055 – Defekte 200 – epithelialer 1032 – Henle-Schleife, dünne, aufsteigende 902 – Neurone 1030 – Schilddrüse 852 – spannungsregulierter 1032 Chlorid-Transportprotein, Defekt, Mukoviszidose 313 Chloridverschiebung, Erythrozyten 962 Chloroplasten 7 – Proteinbiosynthese 288 Cholangiozyten 1084 – Gallebildung 1098

Cholecalciferol 681, 688–691 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Synthese 688 (F) – Hydroxylierung 688–689 Cholecystokinin-Pankreozymin (CCK-PZ) 825, 1045, 1063, 1066 – ACTH-Sekretion 863 – Halbwertszeit 849 – Hemmung durch Somatostatin 887 – Magenmotorik, Hemmstoff 1066 – Nahrungsaufnahme 642–643 – Pankreas 1065 – Pankreassekretion 1065 – Sekretion, Fett-/Proteinverdauung 642 Cholera 1076 Choleratoxin 206, 702, 782 – Gangliosid GM 1 1078 Choleretica 1066 Cholestan 38, 39 (F) Cholestanol 39 (F) Cholestase 1099, 1101 – Vitamin-E-Mangel 694 Cholesterin 32, 38, 39 (F), 398, 567 (F), 571, 647 – Abbau 568 – Abkömmlinge 566 – Aldosteron(biosynthese) 922–923 – Ausscheidung, Transporter 177 – Biosynthese 564–567, 569 – – Gallensäuren 1061 – – Hemmung 569 – – Regulation 568–571 – – SREBP-2, Aktivierung 569 – C-Atome, Herkunft 564 – chemische Zusammensetzung 573 – Cortisol 863 – 11-Desoxycorticosteron 922–923 – freies, Bildung 864 – Gallensäuren, Bildung 568, 1060 (F) – Gallensteine 1101 – Golgi-Apparat 190 – HMG-CoA-Reduktase 568 – Isopren, aktives, Biosynthese 567 – LDL 575, 577 – Lipiddoppelschichten 41 – Löslichkeit, Blasengalle 1061–1062 – – Lipid-Wasser-Mischungen 1062 – Lysosomen 200 – Mangel 569 – – SREBP-2, Aktivierung 570 – Membranen, zelluläre 568 – Membranlipide 43, 177 – Normalwerte 692 – Östrogene, Biosynthese 880–881

– physikalische Eigenschaften 573 – Plasmamembran 312 – Progesteron, Biosynthese 865 (F), 880–881 – Proteine, Verankerung 310 – Resorptionsphase, Leber 1086 – Serumkonzentrationen 572 – Steroidhormone 568 – Stoffwechsel 564–571 – – LDL-Rezeptor 579 – – T3 857 – Synthese, Squalen 567 – Transport, LDL 577 – Umwandlung, Leydig-Zellen 874 – Veresterung 1072 – Vorkommen 39 – zellulärer Gehalt, HMG-CoAReduktase, Halbwertszeit 570 Cholesterin-Acyltransferase (ACAT-2) 178 Cholesterin-Desmolase 864, 873 Cholesterinester 32, 398, 865 – Acylglycerine, Spaltung 1070 – Assemblierung 1072 – chemische Zusammensetzung 573 – LDL 574–575, 577 – physikalische Eigenschaften 573 Cholesterinester-Hydrolase 1059 – Progesteron, Biosynthese 865 Cholesterinsteine 1061, 1101 Cholesterin-Translokator 864 Cholesterintransport, reverser, HDL 579 Cholestyramin, Hypercholesterinämie 1061 Cholin 32, 463, 554, 1038–1039 – Acetylcholin, Stoffwechsel/ Synthese 1039–1040 – Biosynthese 708 (F) – Phosphoglyceride, Abbau/ Biosynthese 555, 558 – Sphingomyelin, Biosynthese 560 (F) Cholinacetyltransferase, Acetylcholin, Synthese 1039 Cholin-Kinase, Phosphoglyceride, Biosynthese 555 Cholintransporter 1039 – Acetylcholin, Stoffwechsel 1040 Cholsäure 1060 (F), 1061 Cholyl-CoA, Gallensäuren, Bildung 1060 (F) Chondroblasten 716 – Knorpelbildung 738 Chondrodendron tomentosum 766 Chondrodysplasia/-dystrophie 552 – metaphysaria vom Typ Schmid 724

C

1182

Anhang

Chondrogenese – Hormone 739 – parakrine Faktoren 741 – Schlüsseltranskriptionsfaktoren 739 – Wachstumsfaktoren, parakrine 739 Chondroitinsulfat 29, 549, 727 – Chondroitin-4-sulfat 29, 30 (F) – Chondroitin-6-sulfat 29, 30 (F) – Typ A, B bzw. C 29 Chondrozyten 716 – Differenzierung, CBFA-1 (core binding factor-1) 740 – – Runx-2 (runt related transcription factor-2) 740 – GH-Rezeptoren 744 – Knorpelbildung 738 – Proliferation, BMPs/IGF-1 744 – – PTHrP 741 Chorea Huntington 1049 Choriongonadotropin (CG) 884 – humanes (hCG) 548, 849, 1159 – – Chorionkarzinom 885 – Tumormarker 885, 1159 Chorionkarzinom, hCG 885 Chorionsomatomammotropin (CS) 884–885 ChRE (carbohydrate response element) 647 ChREBP (carbohydrate response element binding protein) 387, 647 – AMP-abhängige Proteinkinase, Aktivierung 527 – Glycolyse 387 – Kohlenhydratstoffwechsel 651 – Nahrungskarenz 527 Christmas-Faktor 985 Chrom 4, 675–676 – Erythrozyten, Markierung 675 – Gesamtbestand 656 – Glucosetoleranz 675 – Hämoglobin 675 – Mangel, Wachstumsstörungen 675 – Plasmaspiegel 656 Chromatide 188 Chromatin 152, 176 (F), 187 – DNA-Histon-Komplex 154 (F) – eukaryotisches 230 – kondensiertes 187 – Nucleosomen 153 – Struktur 152–154 – Zellkern 187 Chromatographie, Aminosäuren 51 Chrommarkierung – Erythrozyten 675 – Plasmaproteine 675 Chromodomäne, Histonproteine, methylierte 275 Chromogranine 828 Chromophoren, Markierung 167

Chromoproteine 56 chromosomale Bande, Verlust, Cytogenetik 1145 chromosomale Translokation 1144 Chromosomen 153–154, 187 – Aufbau 154–157 – Bandenbildung 157 – Centromer 155 – Chromosom 11 958 – Chromosom 14, H-Ketten, Immunglobuline 1122–1123 – Chromosom 16 958 – Chromosom 18q21-22, Allelverlust, colorektale Tumoren, sporadische 1153 – Chromosom 21, Genkarte 160 – crossing over 157 – Darstellung, schematische 155 – Funktion 154–157 – homologe, Rekombination 157 – künstliche, Hefezellen 243 – Meiose 156 (F), 157 – Mitose 154–157, 188 – p-/q-Arme 155 – Rekombination, homologe 157 – Telomere 155, 234 Chromosomensatz – diploider 154 – haploider 154, 156 Chylomikronen 517, 572, 575–576, 648, 1072 – Abbau, Lipoproteinlipase 576 – Apolipoproteine 574 – Assemblierung 1072 – Blutplasma 522 – Eigenschaften 573 – Lipoproteine, Triacylglycerinreiche 401 – Nahrungslipide 518 – Nahrungszufuhr 522 – Retention 205 – Triacylglycerine 398, 519 – unreife 575 – Vitamin E 692 Chylomikronen-Remnants 517 Chymosin, Magen 1057 Chymotrypsin 108 (F), 133 (F), 315, 1058–1059 – aktives Zentrum 108 – Katalyse, gemischte 120–121 – katalytische Triade 121 – Pankreas 1058 – Proteinspaltung 66 Chymotrypsinogen 133 (F), 1058–1059 – Aktivierung 132 Chymus 1058 – Viskosität, Ballaststoffe 651 CIC5, Schilddrüse 852 CICR (calcium-induced calcium release), elektromechanische Koppelung 1012

CID (collision-induced dissociation) 67 ciliäre Dyskinesie, primäre 214 ciliary neurotrophic factor (CNTF) 759–760, 794, 1061 Cilien 211 – Basalkörper 211 – Defekte 214 – Dynein 211 circadiane Rhythmik – Cortisol 843 – Melatonin 1044 Circoviren/-viridae 329 – DNA-Polymerasen 339 cis-aktivierende Elemente, Transkriptionsgeschwindigkeit 275 Δ3-cis-cis-Δ2-trans-Enoyl-CoA-Isomerase, Fettsäureabbau 408 (F) Δ4-cis-Enoyl-CoA, Fettsäureabbau 407, 408 (F) Δ9-cis-Hexadecensäure 34, 418 cis-Isomere, Fettsäuren, ungesättigte 34 Δ3-cis-Octadecansäure 33 (F) Δ9-cis-Octadecensäure 34, 418 Cisplatin 669 cis-Position, Fettsäuren 649 11-cis-Retinal 683 (F), 684, 685 (F) – Sehvorgang 686 9-cis-Retinoat 683 (F) 11-cis-Retinol 685 (F) Cisterne, terminale, sarkoplasmatisches Retikulum 1012 Δ15-cis-Tetracosensäure 34 Δ19-cis-Tetracosensäure 418 Δ3-cis-Δ2-trans-Enoyl-CoA-Isomerase, Fettsäureabbau 407 Cis-trans-Isomerie, PeptidylProlyl-Peptidbindungen 303 Citrat 441, 443, 480 (F), 482, 485–486 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Aminosäurestoffwechsel, Muskulatur 453 – Blutgerinnung, Hemmung 987 – Fettsäurebiosynthese 413 – Fettsäureoxidation 522 – Gluconeogenese 391 – Phosphofructokinase-1 (PFK-1) 388 Citrat/Malat-Carrier 493–494 Citratsynthase 111, 482, 485 – Aktivierung/Hemmung 485 – Citratzyklus 480 – Fettsäurebiosynthese 413–414 – Hemmung, ATP/NADH 485 Citratzyklus 441, 443, 477–488, 490 – Abbaureaktionen, biosynthetische 527 – Acetyl-CoA 704 – Aktivatoren/Inhibitoren 485

– Aminosäuren, nichtessentielle, Biosynthese 487 – amphibole Natur 486–487 – anabole Reaktion 486 – anaplerotische Reaktionen 487, 706 – Energieausbeute 484 – Energiebedarf, zellulärer 485 – Enzyme 924 – Fettsäurebiosynthese 486 – – Substrate 412 – Fettstoffwechsel 478 – Gluconeogenese 487 – Glucosekohlenstoff 391 – Hämbiosynthese 487 – katabole Stoffwechselwege 486 – α-Ketoglutarat 1025 – Kohlenhydratstoffwechsel 478–479 – oxidative Endstrecke 478 – oxidative Phosphorylierung 505 – Phosphorylierung 482 – Proteinstoffwechsel 478 – Reaktionsfolge 479–484, 525 – Regulation 484–485 – Stoffwechselgifte 485 – Summengleichung 484 – Transportproteine 494 Citrin – Defekt 450 – Harnstoffzyklus 448 Citrullin 443 – Aminosäurestoffwechsel, Nieren 451 – Arginin, Umwandlungsreaktionen 461 – Darm 451 – Harnstoffzyklus 446 (F), 447–448 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 – Plasmakonzentration 445 Citrullinäme – Typ I 450 – – Argininosuccinatlyase, Defekt 450 – Typ II 450 CK-1 (CK-BB) 137 CK-2 (CK-MB) 137 CK-3 (CK-MM) 137 CK-MB 137, 531 – Immuninhibitionstest 137 class II-associated invariant chain peptide (CLIP) 1107 Clathrin 662 – Endozytose 195 – Viruspartikelaufnahme 333 Clathrin-beschichtete Grübchen (coated pits) – Plasmamembran 201 – Transport, vesikulärer 191 Clathrin-beschichtete Vesikel 194 – Endozytose 195

1183 Sachverzeichnis

– Plasmamembran 195 – TGN 195 Clathrin-vermittelte Endozytose 1036 Claudine, Zonula occludens 198 CLC2 (MCP1) 759 CLC7 (MCP3) 759 CLC8 (MCP2) 759 CLC13 (MCP4) 759 CLC (cardiotrophin-like cytokine) 759 ClC-Ka/-Kb (chloride channelkidney a/b) 903 CLCN1, Mutation 1032 clearance-receptor 926 CLIP (class II-associated invariant chain peptide) 1107 Clostridien/Clostridium – botulinum/tetani 1036 – Zinkproteasen 1036 cluster-Bildung, Integrine 735 3‘-CMP (Cytidin-3‘-monophosphat) 144 – Cardiolipin, Biosynthese 556 – Sphingomyelin, Biosynthese 560 (F) c-MPL-Rezeptor, Megakaryozyten 976 CMP-N-Acetylneuraminsäure 559 – Aminozucker, Biosynthese 544–545 CMT1, Gendefekte 1047 CMT1B – Gendefekte 1047 – Mutationen 1047 CMTX, Gendefekte 1047 c-myc – Burkitt-Lymphom 1144 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 CNG (cyclic nucleotide gated), Aktivierung durch cAMP 782 cNMP (cyclic nucleotide monophosphate)-Motiv 804 CNP (C-Typ) 925 CNTF (ciliary neurotrophic factor) 759, 794, 1051 – Sekretion 760 CO 7 Kohlenmonoxid CO2 7 Kohlendioxid CoA-SH (Coenzym A) 111, 145, 483, 681, 704 – 1-Alkyl-Phosphatidylcholin, Biosynthese 557 – Ceramid, Biosynthese 560 – Melatonin, Abbau/Biosynthese 1043 – Pantothensäure, Biosynthese 704, 705 (F) – Phosphatidylcholin, Acylierungszyklus 557 coat proteins – Membranbeschichtung 193 – Transport, vesikulärer 193–194 coated pits 176 (F)

– Hyperlipoproteinämie, Typ II 582 – LDL-Rezeptor 578 coated vesicles, LDL-Rezeptor 578 Cobalamin (7a. Vitamin B12) 681–682, 709–711 – Alkylreste, Umlagerung 710 – biochemische Funktion 710 – biochemische Tests 682 – Coenzym 111 – intrinsic factor 710 – Kobalt 672 – Mangel 711 – – Anämie, megaloblastäre/ perniziöse 710 – – Histidinbelastungstest 709 – Methylmalonyl-CoA-Isomerisierung 711 (F) – Methylmalonyl-CoA-MutaseReaktion 711 (F) – neurologische Störungen 711 – Porphyrine 709 – Speicherung in der Leber 1089–1090 – Zufuhr, tägliche 681 Co-Chaperone 302 codierender Strang – Basensequenz 257 – RNA-Synthese 256 Codierung, Proteine, Aminosäuresequenz 288 Codon-Anticodon-Wechselwirkung 290, 296 Codon-Familien 289–290 Codonnutzung (codon usage) 289 Codons 158, 287–289 – Basenpaarung 290 Coenzym A 7 CoA-SH Coenzym A (CoA-SH) 145 Coenzyme 109–111 – 7 Enzyme – Adeninnucleotide 145 – Biotin, Carboxylierung 705 (F)–706 (F) – Funktionen, biochemische 111 – Herkunft 111 – Vitamine 680, 682 Cofaktoren 109–111 – Modifikation, Proteine 312 Cofilin 212–213 coiled-coil-α-(Super-)Helix 194 – Keratine 748 – Motorproteine, Aktin-basierte 213 – Myosinfilamente 1004 Colchicin 1077 – Tubulindynamik, Störungen 214 Colipase – Lipide, Resorption 1070 – Mangel, Pankreasinsuffizienz 1077 Colon – Aldosteronrezeptoren 924

– Bakterien 1076 – Elektrolytresorption 1075 – Nahrungsstoffe, Schicksal 1076 – Wasserresorption 1075 Colonadenom/-karzinom, Progression, genetische Veränderungen 1153 colony stimulating factor 7 CSF colorektale Tumoren 1147 – APC-mRNA 1151 – hereditäre, nicht-polypöse 237, 1152 – – – Familienstammbaum 1152 – ras-Allelverlust/-Mutationen 1153 – sporadische 1152–1154 – – Chromosom 18q21-22, Allelverlust 1153 – – p53, Punktmutationen 1153 COLQ (Kollagen-ähnliches Protein) 313 – Mutationen, Endplatten-Acetylcholinesterase-Defizienz 313 Coma – diabeticum 833–834 – hypoglycaemicum 393 common β (βc)-Kette – Cytokine 794 – Signaltransduktion 759 common γ (γc)-Kette, Cytokine 794 Compactin 570 complement decay acceleratorProteine 312 complementary determining region (CDR), Immunglobuline 1122 complementary-DNA 7 cDNA Complementsystem 7 Komplementsystem COMT 7 Catechol-O-Methyltransferase c-Onc-Proteine, Viren 344 conformationally coupled calcium release 7 CCCR c-Onkogene 1143 Connexin-26-Gen – Mutation, Charcot-MarieTooth-Erkrankung 186 – – Taubheit, sensorineuronale 186 Connexine 180 – Defekte 186 – gap junctions 180 Connexone 181–182 Conn-Syndrom 926–927 Consensus-Sequenz 687 Coomassie-Blaufärbung, Proteine, aufgetrennte 63 COPI – Beschichtung 194 – Transport, vesikulärer 194 COPII-Vesikel 304–306 – Transport 194

core binding factor-1 7 CBFA-1 Core-Enzym 258 Core-Proteine 549 – Proteoglykane 29–30, 727 Corin 925 Cori-Zyklus 444–445, 521 – Muskelarbeit 534 Cornifinen 749 Coronarsklerose 424 Coronaviridae 328 Corpus – luteum 880, 885 – mamillare 843 Corticoliberin 7 CRH Corticosteron 923 Corticotropin 7 ACTH Corticotropin Releasing Hormone 7 CRH Cortisol 759, 846, 863, 868 – Abbau 865–866 – antiinflammatorische Wirkung 867 – Biosynthese 864–866 – Cholesterin 863 – Cushing-Syndrom 869 – Gluconeogenese 866 – Halbwertszeit 849 – Harnstoffzyklus 447 – Insulin, Gegenspieler 866 – Milchdrüsenbildung 543 – Sekretion, circadiane 843 – – Interleukin-1 976 – – Stress 863 – Stoffwechseleffekte 867 – Transport im Blut 865 – Wirkungen, zelluläre 866–868 Cortisolderivate – Osteoblasten 745 – synthetische 867 Cortisolrezeptor 866 Co-Smad (common partner Smad) 790 Costamere 1008–1009 costimulatorische Signale, B-Lymphozyten, Reifung 1125 Cosubstrate 110–111 – Wirkungsweise, NAD+ 110 cotranslationaler Transport 304 Cotransportsysteme, Natriumgekoppelte 906 Cotrimoxazol, Hämolyse 968 covalente Katalyse 118–119 covalente Modifikation – Enzyme 131–133 – Glycogenphosphorylase 380 – Glycogenstoffwechsel 380–382, 384 (F) – Glycogensynthase 382 covered M6-Reste 201 COX 7 Cyclooxygenase Cox17, Kupfertransport 669 CPEO (chronisch progressive externe Ophthalmoplegie) 512 C-Peptid 1008 – Halbwertszeit 849 – Insulin 811

C

1184

Anhang

C-Peptid-Konzentration, Plasma, Insulinreifung 812 C-Propeptid – Abspaltung, Kollagenbiosynthese 719 – Kollagene, fibrilläre 718 CPT1 7 Carnitin-Palmitoyltransferase 1 CPU (colony forming unit) 952 CR1 (CD35) – Bakterienabwehr 1135 – Komplementrezeptoren 1132 CR2 (CD21) – B-Zell-Aktivierung 1126 – Epstein-Barr-Viren 1135 – Komplementrezeptoren 1132 CR3 (CD11b/CD18) – Bakterienabwehr 1135 – Komplementrezeptoren 1132 CR4 (CD11c/CD18), Bakterienabwehr 1135 CRABPI (zelluläres Retinsäurebindendes Protein I) 687 CRABPII (zelluläres Retinsäurebindendes Protein II), Proteine, Regulation 694 CRE (cAMP-response element) 388, 782 – Transkription 276 C-reaktives Protein (CRP) 975, 995–996, 1104 – Akutphase-Proteine 1089 – Funktion/Pathobiochemie 993 – Immunantwort 1134 – Synthese in der Leber 1088–1089 Creatin 7 Kreatin Creatinkinase (CK) 7 Kreatinkinase CREB (cAMP-response-element binding protein) 782–783 – Hämbiosynthese, Regulation 612 – Transkription 276 Creutzfeldt-Jakob-Krankheit 89, 1050 C-Rezeptor 926 CRH (corticotropin releasing hormone, Corticoliberin) 844, 846, 862–863 – Hypercortisolismus 869 – Nahrungsaufnahme, hemmende Wirkung 643 – Präpro-Hormonstruktur 862 CRH-immunoreaktive Zellen 862 CRH-Rezeptoren 862 Crigler-Najjar-Syndrom 543, 626 Crinophagie, Lysosomen 1067 Cristae, Mitochondrien 203, 208 (F) Crk 788 Crohn-Krankheit – Lactasemangel 1077 – TNF-Inhibitor 778 crossing over, Chromosomen 157

Crotonsäure 34 Crotonyl-CoA, Lysinabbau 476 CRP 7 C-reaktives Protein crush-Syndrom, Hämoglobinurie 916 αβ-Crystallin, Retinoidfunktion 687 CSF-1 7 M-CSF CSF-α/-β 7 G-CSF CSF (cerebrospinal fluid) 1026–1028 CSF (colony stimulating factor) 759, 952 CT-1 (cardiotrophin-1) 759, 794 CT (Carbohydrate Deficient)-Transferrin, Alkoholabusus 661 C-terminale Domäne (CTD) 262 – Dephosphorylierung 262 – Phosphorylierung 262 – – Cyclin-abhängige Proteinkinasen (cdks) 262 – Prolyl-cis-trans-Isomerasierung 262 C-Terminus, Guanylatcyclasen 802 CTLA-4 (cytotoxic T lymphocyte antigen) 1114, 1134 – Wechselwirkung, CD80/86 1114 CTP (Cytidintriphosphat) 590, 591 (F) – Acetylneuraminsäurestoffwechsel 540 Ctr1 (copper transporter, SLC31), Kupferaufnahme 669 Cu-ATPase 668 – Kupfertransport 670 Cumarine/Cumarinderivate 696 – γ-Glutamyl-Carboxylierung, Vitamin-K-abhängige 696 – Vitamin-K-Mangel 696 C-Untereinheiten, regulatorische (regulatory), Proteinkinase A 782 Curare 766–767, 1038 Cushing-Syndrom 745, 850 – ACTH-Sekretion 869 – Cortisol-Tagesprofil 869 Cutis laxa 752 – Elastin-Mutation 751–752 – Menkes-Erkrankung 671 CuA-Zentrum, Cytochrom-cOxidase 500 CuZn-Superoxid-Dismutase (SOD) 510 CX3C-Chemokine 759 CX3CL1 (Fractalkin) 759 Cx32, Gendefekte 1047 Cx43 181 CXC-Chemokine (CXCL1 - CXCL15) 333, 759, 779 CXCL-8 (Interleukin-8) 783–785 CXCR1 784 – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 784 CXCR2 784

– G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 784 CXCR-Rezeptor 333 Cyanid, Cytochrom-c-Oxidase, Hemmung 500 Cyanobakterien, Vitamin E 692 Cyanocobalamin 710 (F) cyclic nucleotide gated (CNG), Aktivierung durch cAMP 782 Cyclin A/cdk2 – Hemmung durch p21WAF1 224 – mRNA-Stabilität 281 – pRb, Hyperphosphorylierung 224 Cyclin B/cdk1-Komplex 223–224 – Aktivierung 222 – feed back-Regulation 222 – Phosphorylierung 223 – Regulation 223 – Translokation, Zellkern 223 Cyclin D/cdk4 1148 – Hemmung durch p21WAF1 224 – Proteine, Regulation 694 – Rb-E2F-DP1-Komplex 1148 – Translokation 224–225 – Vitamin E 694 Cyclin E/cdk2 1148 – Hemmung durch p21WAF1 224 – pRb, Hyperphosphorylierung 224 – Proteine, Regulation 694 – Rb-E2F-DP1-Komplex 1148 – Vitamin E 694 Cyclin-abhängige Proteinkinasen (CDKs) 222, 1148 – C-terminale Domäne, Phosphorylierung 262 Cycline, Zellzyklus 221–222, 1147 Cycline/cdk-Komplexe 221–225 – Assoziation, Zellzyklus 223 – Dephosphorylierung 222 – Enzymaktivität 222 – Inhibitorproteine 222 – Phosphorylierung 222 – Regulation 222 – Tumorviren 345 Cyclin-H/cdk7/Mat1-Proteinkinase, Transkription, Elongation 262–263 cyclo-ADP-Ribose 702, 765 – Bildung, NAD+ 702 – elektromechanische Koppelung 1012 – Ryanodinrezeptor 702 cyclo-AMP 7 cAMP 3‘,5‘-cyclo-GMP 7 cGMP Cycloheximid, Proteinbiosynthese, Hemmung 299 2‘,3‘-Cyclonucleotidphosphodiesterase (CNP), Myelinscheiden 1046 Cyclooxygenase, Aktivität, PGHS 420 Cyclooxygenase 2 (COX-2) – Entzündungsmediatoren 791

– Hemmung, Acetylsalicylsäure 134 – – Glucocorticoide 867 – Inhibitoren 424 – γ-Tocopherol 693 Cyclopentano-Perhydrophenanthren 38, 39 (F) Cyclopentenylcytosin 595 (F)–596 (F) Cyclophiline 303 – HIV 340 Cyclophosphamid, Krebstherapie 1160 Cyclosporin A 303 – Transplantatabstoßung 1139 CYP3A, Proteine, Regulation 694 CYP17 (17α-Hydroxylase) 881 – Östradiolbiosynthese 881 CYP19, Östradiolbiosynthese 881 CYP 2E1, Alkoholkonsum, chronischer 1100 Cyproteronacetat, Antiandrogene 877 Cys2/Cys2-Zinkfinger 277 Cys2/His2-Zinkfinger 277 Cys-Gly, Cystein, Umwandlungsreaktionen 466 (F) Cystathionin, Methionin, Abbau 462 Cystathionin-β-Lyase 433 Cystathionin-γ-Lyase – Cysteinumwandlung 466 – Methionin, Abbau 463 Cystathionin-γ-Synthase 433 Cystathionin-β-Synthase – Defekt 464 – Methionin, Abbau 463 – Pyridoxalphosphat 704 Cystatine, Speichel 1054 Cysteamin 410 (F), 438 Cystein 45, 47, 127, 438–439, 443 – Abbau 465 (F) – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Bedarf des Menschen 439 – Codons 289 – Methionin, Abbau 462 – Plasmakonzentration 445 – Sauerstoffspezies, reaktive 510 – Schwefel 941–942 – Stoffwechselbedeutung 462 – Sulfatstoffwechsel 941 (F) – Umwandlungsreaktionen 466 Cystein-Dioxygenase, Cysteinabbau 465 Cysteinpeptidase 315 Cysteinproteasen/-proteinasen 226 – Basalmembran, Abbau 1156 Cystein-Proteinasen 1107 Cysteinseitenketten, Oxidation 306 Cysteinsulfinat 465 Cysteinsulfinat-Decarboxylase, Cysteinabbau 465

1185 Sachverzeichnis

Cysteinyl-Glycin-Dipeptidase, Leukotrienbiosynthese 423 Cysteinylrest, Glycerinaldehyd3-phosphat-Dehydrogenase 361 Cysteinylreste – Cadmium 677 – Palmitoylierung 311 cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 7 CFTR Cystin 465 – Stoffwechselbedeutung 462 Cystinbrücke, Proteine 306 Cystinose 200 Cystintransport, Defekte 200 cystische Fibrose 313, 1032 – CFTR 185, 1076 – Vitamin-E-Mangel 694 Cytidin 143 Cytidin-3-monophosphat 7 3‘-CMP Cytidindiphosphat 7 CDP Cytidindiphosphatcholin 7 CDP-Cholin Cytidinnucleotide 591 – Biosynthese 591 Cytidintriphosphat 7 CTP Cytochalasine 215 Cytochrom a, Standardpotential 103 Cytochrom b 499 – Standardpotential 103 Cytochrom b5, Fettsäuren, ungesättigte, Biosynthese 419 Cytochrom-bc1-Komplex 498–499 Cytochrom c 95–97, 495, 659 – Aminosäuren 95 – – Invarianz 95 – Apoptose 226 – Elektronentransport 494–495 – Freisetzung, Mitochondrien 226 – Mitochondrien 203 – Muskelarbeit 535 – Sequenzanalyse 95, 97 – Standardpotential 103 Cytochrom-c-Oxidase 499–500, 506, 667 – Atmungskette 497 – binukleäres Zentrum 500 – CuA 500 – CuA-Zentrum 500 – Häm a3 500 – Häm a-Zentrum 500 – Hemmung, Azid 500 – – Cyanid 500 – – Kohlenmonoxid 500 – – Stickstoffmonoxid (NO) 500 – Kupfer 667 – Kupferzentren 500 – Säugetiermitochondrien 500 – Untereinheiten 500 Cytochrom-c-Proteine 95–97 Cytochrom P450 507, 509, 659 – 3,4-Benzpyren 1158

– – – – – – – – – – –

Biotransformation 1091 Enzymfamilien 508 Hämbiosynthese 613 – Regulation 613 Hydroxylasen 506 Membranen 177 Monooxigenasen 507–508 Monooxygenasen 57 – Hydroxylierung 507 Oxoferryl-Gruppe 508 Superoxid-Radikale, Bildung 509 (F) Cytochrom P450-AromataseKomplex – Östradiolbiosynthese 881 – Reaktionsmechanismus 882 Cytochrom P450-Reduktase 177 Cytochrom P450-XIXA I (Aromatase) 882 Cytochrom P450-abhängige Monooxigenase, Alkoholkonsum, chronischer 1100 Cytochrome 490, 506 – Oxidoreduktasen, hämhaltige 506 cytochrome P450-side chain cleavage enzyme (P450 SCC) 864 Cytokeratine – basische/saure 213 – Defekte 214 Cytokeratinfilamente 212 (F) Cytokine 110, 760, 777–778, 845, 1144 – Abbau 761 – Akutphase-Proteine 975, 996 – Alkoholkonsum, chronischer 1100 – Allergie, Typ I 1137 – Analyse 760–762 – antiinflammatorische, PGHS-2 420 – Ausscheidung 761 – Bindung, Rezeptoren 770 – biologische Funktion 779 – Biosynthese 760 – Blut-Hirn-Schranke 868 – Cholestase 1101 – common β (βc)-Kette 794 – common γ (γc)-Kette 794 – Cortisolsynthese 863 – 5'-Deiodase 856 – Einteilung 759, 777–779 – Entzündung 975 – Fibronektin-Typ-III-Domänen 770 – Glycoprotein 130 (gp130) 794 – Immunantwort 1133 – inflammatorische 1104 – Inhibitoren 1161 – Interleukin-6-Typ 794 – Knochenbildung 745 – Konzentrationsbestimmung, Methoden 761–762 – Matrix-Metalloproteinasen, Regulation 1157

– – – –

Muskelwachstum 1016 Myosin 1006 Osteoporose 745 Phosphotyrosin-Seitenketten 771 – Pleiotropismus 777 – Produktionshemmung 867 – proinflammatorische 759, 1104–1105 – – Entzündungen, chronische 778 – – Freisetzung 800 – – Immunantwort 1133 – – Multiorganversagen 800 – – SIRS 800 – Redundanz 778, 794 – Rezeptoren 763–765, 778 – – lösliche 778 – Rezeptorketten 794 – Rezeptorkomplex 805 – Sekretion 760 – Signaltransduktion, TGFβ-Rezeptoren 790 – Stoffwechsel 760–762 – Transport im Blut 760 Cytokinetik – chromosomale Bande, Verlust 1145 – Mitose 155 Cytokingene, Einbau, Abwehrmechanismus 1161 Cytomegalievirus – Persistenz 343 – Proteinabbau 323 Cytoplasma 176 cytoplasmatische Domänen, Integrine 734 Cytosin 142–143, 238 (F), 273 – DNA 149 – Pyrimidinabbau 601 (F) Cytoskelett 207–215 – Aktinfilamente 207, 211–214 – Filamente, dicke 207, 213 – – dünne 207, 213 – – intermediäre 207, 213 – Immunfluoreszenz-Mikroskopie 209 (F) – Integrine 734 – Mikrotubuli 207–211 – Muskulatur, quergestreifte 1007–1009 – Neurone 1029 – Proteine, assoziierte 1008 – Proteinkomplexe 1008 – sarkomeres 1008 – Titin 1008 – Tubulin 207 Cytosol 410 – Aminosäureabbau, Verteilung 443 – Chaperone 303 – Hämbiosynthese, Regulation 612 – Proteine, Glycosylierung 312 – und Zellkernmatrix, Beziehungen 188

C–D

cytosolischer Rezeptor, Aldosteron 923 Cytostatika 1160–1161 – 7 Chemotherapie – Krebstherapie 1160 – multidrug resistenz (MDR) 1160 – Resistenz 1160 – Tubulindynamik, Störungen 214 cytotoxic T cells 1116 cytotoxic T lymphocyte antigen (CTLA-4) 1114, 1134 Cytotoxizität – 7 Zytotoxizität – zelluläre, antikörperabhängige 7 ADCC C-Zellen, Calcitonin 851

D Dämpfer (silencer), Transkription, Eukaryoten 262 DAG 7 Diacylglycerin Daidzein, Phytoöstrogene 884 D-Alanin 46, 47 (F) D-Aminooxidasen 307, 437 D-α-Aminosäuren 47 5'-dAMP (Desoxyadenosin5'-monophosphat) 144 Dansylchlorid, Aminosäuren, Derivatisierung 51 Dapson, Methämoglobinbildner 969 D-Arabinose 23 Darm(mucosazellen) – Aminosäurestoffwechsel 451 – Bilirubinabbau 622–623 – Elektrolytaufnahme 1076 – Urease 451 – Wasseraufnahme 1076 Darmsaft – Albumin 1062 – Mucine 1062 Darmtumoren, Hämokkult-Test 1160 Darwin, Charles 6 DBP (Vitamin-D-Bindungsprotein) 689 dcc(deleted in colorectal carcinomas)-Gen 1147, 1153 Dcytb, Ferrireduktase, Downregulation 660 DDB1-Protein (damaged DNA binding protein) 345 – Hepatitis-B-Virus 345 D-Desoxyribose 23 D-(Dihydrouridin-)Schleifen, tRNA 289 D-Dimere, Fibrin 987 D(Diversitäts-)Gen-Segmente, H-Ketten, Antikörper 1121 Deacetylierung, Lysinreste 273

1186

Anhang

death-domain (DD) – Apoptose 791 – MyD88 (myeloid-differentiation) 791 – TNFR1 792 3-Deazauridin 595 (F)–596 (F) debranching enzyme, Glycogenolyse 370 Decarboxylasen 433 – Pyridoxalphosphat 704 Decarboxylierung – Aminosäuren 436 – dehydrierende, Isoleucin 466 – – α-Ketosäuren 943 – – Leucin 466 – – Pyruvat 416, 479 – – Transaminierung 441 – – Valin 466 – Glutamat 1040 – β-Ketosäuren 943 – oxidative 111 – – Aminosäureabbau 441, 467 – – Isoleucin 466 – – Leucin 466 – – Thiaminpyrophosphat 699 – – Valin 466 – Pyridoxalphosphat-abhängige 473, 703 – – Aminosäuren 436, 438 – – 5-Hydroxytryptamin 1043 decay-accelerating-factor (DAF; CD55) 314, 1132 – Erythrozyten, lytischer Angriff, Abwehr 969 Decodierung, Proteinbiosynthese 288 Decorin 721, 728–729 – core-Protein 729 – Haut 751 Defektproteinämien, Hepatitis/ Leberzirrhose 998 Defensine 186 – Bakterienabwehr 1135 Degeneration – DNA-Basencode 158 – genetischer Code 289 Degranulierung, Granulozyten, neutrophile 973 Dehydratase – Desaminierung 435 – Fettsäuresynthase 412 (F) – Pyridoxalphosphat-abhängige 435 Dehydratation/Dehydrierung 11 (F), 920–921 – Fettsäuren, langkettige, Biosynthese 411 – Flavoproteine 700 – Hypernatriämie 920 – intrazelluläre, Typ-1-Diabetes mellitus 833 Dehydroalanin 853 (F) Dehydroascorbat/-ascorbinsäure 103, 697 (F) 7-Dehydrocholesterin 688

Dehydroepiandrosteron (DHEA) 873 – Testosteron, Biosynthese 874, 875 (F) Dehydroepiandrosteron-Sulfat (DHEA-S) 873 Dehydrogenasen 490, 506 – FAD-abhängige 506 – FMN-abhängige 506 – NAD+-abhängige 506 – NADP+-abhängige 506 – Ubichinon, Reduktion 496 Deiodasen – 5‘-Deiodase 855 (F), 856 – Nachweis 858 – Wirkung, Thyroxin 855 Dekapeptid, Definition 58 Demannosylierung 322 Demenz – Alzheimer-Typ 1048 – frontotemporale, Parkinsonismus 1049 Demineralisierung – Karies 674 – Osteoklasten 690 Demyelinisierung 1047 Denaturierung – DNA 166 (F) – Proteine 86–89 – Ribonuclease 86 Dendriten 1029 – AMPA-Glutamatrezeptorvesikel 210 – Mikrotubuli 208 dendritische Zellen 1108 – follikuläre (FDZ) 1126 α-Dendrotoxin 767 Denervation 1018 de-novo-Fettsäuresynthese/ -Lipogenese, Acetyl-CoACarboxylase, Hemmung 647 de-novo-Fettsäuresynthese/ Lipogenese 517, 647, 649 de-novo-Mutationen – Dystrophin-Gen 1018 – Hämophilie A 988 dense bodies 200 dense core vesicles, Katecholamintransmitter 1042 dentato-rubro-pallido-luysianische Atrophie (DRPLA) 1049 DEPC (Diethylpyrocarbonat) 165 Dependovirus 329 Dephospho-Coenzym A 704, 705 (F) Dephosphorylierung – C-terminale Domäne 262 – Cyclin/cdk-Komplexe 222 – Enzyme 132 (F) – Proteinkinasen, Cyclin-abhängige 221, 222 (F) – Serinreste 273 Depolarisation – Neurone 1030 – Stäbchen/Zapfen 686 Depotfett 638

– Mobilisierung 648 Depurinierung – DNA 237 – – Instabilität 237, 238 (F) Derivatisierung, Aminosäuren 51 Dermatansulfat 29, 32 (F), 549, 727 – UDP-Glucuronat 542 Dermatitis – Biotinmangel 706 – seborrhoische, Riboflavinmangel 700 Dermatomyositis 1018 Dermis 747, 749–751 – Elastizität 749 – fibröse Netzwerke 749 – Kollagene 751 – Reißfestigkeit 749 dermo-(epi)dermale Junktionszone 749–750 Desaminierung – Aminosäuren 434–436 – Dehydratase, Pyridoxalphosphat-abhängige 435 – dehydrierende 434 – – Glutamat 456 – DNA 237, 238 (F) – eliminierende 434, 436 – – Histidinabbau 475 – Formen 436 – Glutamat 432, 907–908 – Glutamat-Dehydrogenase (GLDH) 435 – Glutamin 432 – hydrolytische 434, 436 – Imin 435 – oxidative 434, 436 – – Biotransformation 1091 – – Flavoproteine 700 – – O2-abhängige 434 – Serin/Threonin-Dehydratase 435 Desamino-NAD+ 701 Desaturasen 419 – Fettsäuren, ungesättigte, Biosynthese 418, 419 (F) Descemet-Membran, Kupferablagerung 670 Desensitisierung 195 Desmin 213 desmin-storage disease 1018 Desmocollin 197, 199 Desmoglein 197, 199 Desmosin 725 Desmosomen 198–199 – Filamente, intermediäre 214 Desoxyadenosin 143 Desoxyadenosin-5‘-monophosphat (5‘-dAMP) 144 5‘-Desoxyadenosylcobalamin 681, 709, 710 (F) Desoxycholsäure, Gallensäuren, Bildung 1060 (F) 11-Desoxycorticosteron – Aldosteronbiosynthese 923 – Biosynthese 923

– Cholesterin 922 11-Desoxycortisol 866 (F) Desoxycytidin 143 2-Desoxy-D-Ribose 143 (F) Desoxyform, Häm 80 Desoxygenierung, Hämoglobin 959 2‘-Desoxyguanosin 350 (F) Desoxyguanosin-5‘-Phosphat (dpG) 147 Desoxyhämoglobin 83, 961 Desoxyinosin 143 Desoxyribonuclease 1059 – Pankreas 1060 Desoxyribonucleinsäure 7 DNA Desoxyribonucleotide 143 – Biosynthese 591–593 – DNA-Replikation 230–231 Desoxyribose 143 (F) – 2-Desoxy-D-Ribose 143 – D-Ribose 143 – Nucleotide 142 Desoxythymidin 143 Desoxythymidin-5‘-monophosphat (5‘-TMP) 144 Desoxythymidintriphosphat 351 (F) Desoxyuridin 143 Desoxyuridinmonophosphat, Methylierung 592–593 Desoxyxanthosin 143 Desquamation – Darmepithelien, Eisenresorption 663 – Haut 748 Detemir 816, 817 (F) Dexamethason 868 Dextrangel-Chromatographie 27 D-Fructose 23 D-Galactosamin 39 (F) D-Galactose 23, 39 (F), 966 D-Glucose 23, 39 (F) – α-D-Glucose, Derivate 24 – β-D-Glucose 23 (F)–24 (F) – Resorption 1069 D-Glutamin 46 D-Glycerinaldehyd, Fructosestoffwechsel 364, 365 (F) DHEA 7 Dehydroepiandrosteron DHEA-S 7 Dehydroepiandrosteron-Sulfat D-Hexose-6-Phosphotransferase 112 DHOase 594 DHO-Dehydrogenase 594 D-Hormone, Cholesterin 39 D-β-Hydroxybutyrat, Ketonkörper, Abbau 409 D-β-Hydroxybutyrat-Dehydrogenase, NADH/H+-abhängige, Ketonkörper, Abbau 409 Diabetes insipidus – centralis 921 – Dehydration 920 – nephrogener 186 – renalis 921

1187 Sachverzeichnis

Diabetes mellitus 136, 393, 425, 785, 832–838, 850 – advanced glycosylation endproducts (AGEs) 837–838 – Albuminurie 837 – Azidose 529 – Brennstoffmobilisierung/ -verwertung 833 – DR3 1138 – DR4 1138 – Eisenablagerungen 666 – Erkrankungen, assoziierte 836–838 – Glomerulosclerose 837 – Glucagon 832 – Glucosamin 838 – Glucose-Durchsatz, vermehrter 838 – Glucosetoleranz-Test 523, 814 – Glycohämoglobine 838, 969 – HbA1c 394 – Hexosamin-Weg, GlucoseDurchsatz 838 – HLA-DR2-Allel 1138 – β-Hydroxybuttersäure 17 – Hypercholesterinämie 583 – Hyperlipidämie 836 – Hyperlipoproteinämie 581 – Hypertonie, arterielle 836 – Insulin 832 – Insulin-abhängiger 1138 – Insulinmangel 393, 528–529 – Katarakt 837 – Katecholamine 832 – Ketonkörper 529 – – im Urin 916 – Lipolyse 528 – Mikroangiopathie 837 – Nephropathie 837 – Neuropathie 837 – NO-Synthase 838 – PAI-1 838 – Polyolstoffwechsel 837 – Proteinkinase C (PKC), Aktivierung 838 – Retinopathie 837 – TGF-α/TGF-β1 838 – Typ 1 522, 832–834 – – Autoimmunreaktion, β-Zell-zerstörende 832 – – Fettgewebe 832–833 – – Glucosurie 833 – – Insulinitis 832 – – Ketonämie/Ketonurie 833 – – negative 833 – – Stickstoffbilanz 833 – – β-Zellen, Absterben 1116 – Typ 2 834–836, 1108 – – Adiponectin 835 – – Adipositas 640, 834 – – AMP-aktivierte Proteinkinase (AMPK), Aktivierung 835 – – Fettgewebe 834–835 – – Insulinresistenz 834–835 – – PPAR 649

– – thrifty-gene-Hypothese 836 – – TNF-α 835 Diacylglycerin (DAG) 35, 517, 554, 571, 783, 789 – Lipogenese 416 – Lipolyse 399 (F) – Muskelaufbau/-abbau 1016 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 (F) – second messenger 774, 789 – Signalübertragung 1114 – Sphingomyelin, Biosynthese 559, 560 (F) – Synthese 775 – Triacylglycerine, Biosynthese 402 (F) Diacylglycerin-Acyltransferase (DGAT) – Lipogenese 415–416 – Triacylglycerine, Biosynthese 402–403 Diacylglycerin/PKC-Weg 1114 1,2-Diacylphosphoglycerid, Phosphoglyceride, Biosynthese 555 (F) Diät 653–654 – Hyperurikämie 603 diagnostische Verfahren, Signalverstärker, Enzyme 137–138 Diaminooxidase 436 – Histamin, Abbau 474 – Histidinabbau 474 Diarrhoe 800 – Dehydration 920 – Glucose/Galactose-Malabsorption 186 – osmotische 1076, 1078 – sekretorische 1078 Diazepam, Blut-Hirn-Schranke 1027 Diazoreaktion, Bilirubin 622 Dicarboxylat-Carrier 374 Dicarboxylat/Phosphat-Carrier 64, 494 DICER 250 – RNase 3-Aktivität 281 dichte Linie, Myelinscheiden 1046 Dichtegradientenzentrifugation 65 dichtes Tubulussystem (DTS), Thrombozyten 977 Dickdarm, mikrobieller Stoffwechsel, Ballaststoffe 651 Dickdarmmukosa, Butyrat 651 Didesoxy-ATP 171 (F) Didesoxycytosin (Zalcitabin, ddC) 351 Didesoxyinosin (Didanosin, ddI) 352 (2‘,3‘-)Didesoxynucleosidtriphosphat 171 (F) Diethylaminoethyl (DEAE) 60 (F) Difarnesylnaphthochinon (MK6) 111, 681, 695 Differenzierungsstörungen, Tumoren 1142

Diffusion – erleichterte 179–180, 183, 598 – – ΔG 179 – – Glucoseaufnahme 375 – – GLUT-Familie 183 – – Kinetik 180 – Fettsäuren 401 – Nucleosidtransporter 598 – passive, Verdauung 1068 Diffusionsgeschwindigkeit, Hydratationsradius 8 Diffusionsstrecken, Erythrozytenform 956 Digitalisglycoside 7 Herzglykoside dihedraler Winkel, Ramachandran-Diagramm 75 6,7-Dihydrobiopterin 469 (F) 7,8-Dihydrobiopterin 828 (F) Dihydrobiopterinreduktase 828 Dihydroceramid 559, 560 (F) Dihydroceramid-Dehydrogenase, Ceramid, Biosynthese 560 Dihydrofolat 593, 707 (F) Dihydrofolatreduktase 483 Dihydrofolat-Reduktase 593 Dihydrofolatreduktase 709 – Hemmstoff 709 – Hemmung, Trimethoprim/ Methotrexat 134 – Tetrahydrofolat, Bildung 707 Dihydrogenphosphat/Hydrogenphosphat-Puffersystem 17, 944 – Dissoziationskonstante K 15 – pKS-Wert 15 – Tubuluszellen 908–909 – Urin 17 Dihydrolipoatdehydrogenase 481 Dihydroorotase, Pyrimidinbiosynthese 591 Dihydroorotat – Biosynthese, Regulation 594 – Pyrimidinbiosynthese 590 Dihydroorotat-Dehydrogenase 591, 594 – Pyrimidinbiosynthese 591, 594 Dihydrophenylalanin, Tyrosinhydroxylase-Reaktion 828 (F) Dihydropyridin-Rezeptor – elektromechanische Koppelung 1012, 1014 – Muskelkontraktion 1011 Dihydropyrimidinase – Mangel 604 – Pyrimidinabbau 601 Dihydropyrimidin-Dehydrogenase – Mangel 604 – Pyrimidinabbau 601 5α-Dihydrotestosteron (5αDHT) 873, 876 – Umwandlung, periphere 876 Dihydrothymin, Pyrimidinabbau 601

Dihydrouracil, Pyrimidinabbau 601 2,4-Dihydroxy-5-methylpyrimidin 7 Thymin Dihydroxyacetonphosphat 361 (F), 400 – 1-Alkyl-Phosphatidylcholin, Biosynthese 557 (F) – Fructosestoffwechsel 364, 365 (F) – Gluconeogenese 373 – Glucosestoffwechsel 400 (F) – Glycolyse 359, 360 (F), 361, 519 – Lipogenese 415 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 (F) Dihydroxyacetonrest, Hexosemonophosphat-Weg 366 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Calciumreabsorption 932 1,25-Dihydroxycholecalciferol (Calcitriol) 681, 689–690, 937–938 – Biosynthese 688 (F) – – 1α-Hydroxylase 689 – Calciumresorption 933, 937 – Calciumstoffwechsel 933 – Expression, Proteine 690 – Knorpel-/Knochenbildung 741 – Osteoblasten 690 – Parathormon 935 – Phosphatstoffwechsel 933 – Speicherung in der Leber 1090 – Wirkungsmechanismus 690 2,4-Dihydroxy-3-dimethyl-Buttersäure 410 (F) 3,4-Dihydroxyphenylalanin 49 (F), 438, 1042 – Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 468 – Katecholaminbiosynthese 827 3,4-Dihydroxyphenylethylamin 438 17α,20α-Dihydroxyprogesteron 882 2,6-Dihydroxypurin 7 Xanthin 2,4-Dihydroxypyrimidin 7 Uracil 19,19-Dihydroxy-Testosteron, Cytochrom-P450-AromataseKomplex 882 (F) 1,25-Dihydroxy-Vitamin D3, Östrogene 883 Diiodtyrosin (DIT) 857 αβ-Dimere, Mikrotubuli 208 Dimethylallylpyrophosphat – Squalen, Bildung 566 – – Biosynthese 566 (F), 567 7,12-Dimethylbenzanthren 1158 (F) 5,6-DimethylbenzimidazolRibonucleotid 709, 710 (F) Dimethylquecksilber 677

D

1188

Anhang

Dinitrophenol – ATP-Synthese 634 – oxidative Phosphorylierung, Entkoppler 504 (F) DIO1 855 (F), 856 DIO2 855 (F), 856 DIO3 855 (F), 856 – Hypothyreose, konsumptive 861 15,15‘-Dioxygenase, β-Carotin 683 Dioxygenasen 506–507, 698 – Tyrosinabbau 471 (F) Dipeptidasen 316, 1059 – Darmsaft 1062 Dipeptide 58 Dipeptidylpeptidase 316 Diphosphatidylglycerin 7 Cardiolipin Diphtamid, ADP-ribosyliertes 298 (F) Diphtherietoxin, Proteinbiosynthese 301 Dipol, Wassermolekül 8 Dipolmoment, permanentes, statisches, Peptidbindungen 78 Dipyrrole 623 direct repeats, Rezeptoren, nucleäre 763 Disaccharidasen 364, 542 – Mangel 1076–1077 Disaccharide 22, 24–26, 540 – Aufnahme 646 – Glycosaminoglykane 29 – glycosidische Bindung 25 – Maltosetyp 25 – Spaltung, Bürstensaum 1069 – Trehalosetyp 26 Dissé-Raum 1085 Dissoziation, Wasser 12 Dissoziationskonstante 15 Disulfidbrücken – Immunglobuline 1118 – Insulin 810 – Isomerisierung, Proteindomänen, Reorganisierung 306 – Proteine 78, 306 Disulfide 306 – Isomerisierung, PDI 306 Diurese – maximale 905 – osmotische, Typ-1-Diabetes mellitus 833 Diuretika, Dehydration 920 Diversitäts(D-)Gen-Segmente, H-Ketten, Antikörper 1121 D-Mannose 23 D-Methylmalonyl-CoA 943 – Fettsäureabbau 406, 407 (F) DMT1 (divalenter Metall-Transporter 1) – Eisenaufnahme 660 – Ferrireduktase, downregulation 660 – Kupfer, Resorption 668 DNA 143, 146 (F)

– Adenin 149 – Agarose-Gelelektrophorese 169 – Aufbau 147–157 – Basencode, Degeneration 158 – Basensequenz 158 – Basenzusammensetzung 147 – Biosynthese 145 – Cytosin 149 – Denaturierung 166 (F) – Depurinierung 237, 238 (F) – Desaminierung 237, 238 (F) – Einzelstrangbereiche (sticky ends) 169 – Enden, glatte (blunt ends) 169 – Erbinformation 158–162 – eukaryote, Nucleosomenstruktur 273 – fremde, Einschleusung 241–244 – – Klonierung 241, 242 (F) – Guanin 149 – Hybridisierung 167 – hyperchromer Effekt 166 – Information, gespeicherte 158 – Instabilität, Chemikalien/ Strahlung 237 – Klonierung 241 – Konturlänge 149 – lineare Sequenzen 159 – Methylierungsmuster, 5-AzaCytosin 272 – mitochondriale 159, 204 – rekombinante 241 – Renaturierung 166 (F) – Replikation 231 – Schmelzen 166 – Schmelzkurve 166 – Schmelztemperatur 166 – Strukturen, haarnadel- bzw. kreuzförmige 151 (F) – Strukturmerkmale 157 – Superhelix 151 – Superspiralisierung 149, 151 (F) – telomere (endständige) 187 – Thymin 149 – Thymindimere 237 – Topologie 149–152 – Translation 158 – ultraviolette Strahlung 237 – Vorbehandlung, Sequenzaufklärung 169 – Wasserstoffbrücken 166 – Wasserstoffbrückenbindung 147, 148 (F) – Wiederholungssequenzen, umgekehrte (inverted repeats) 149 DnaA/DnaB, DNA-Replikation 229 DNA-Analyse, Genom 159 DNA-Banken – DNA-Sequenzen, Isolierung 246 – screenen 246

DNA-Bibliothek, genomische, Plasmide 244 (F) DNA-bindende Domäne (DBD) – Glucocorticoid-Rezeptor 277 (F) – Hefe-Zwei-Hybrid-System 249 – Leucin-zipper 277 – Zinkfinger 277, 687 DNA-Bindungsproteine – Histone 152 – Leucin-zipper 277 (F) – loop-Motive 278 (F) – Zinkfingerdomäne 276 DNA-Doppelhelix 147–149, 232 (F) – palindromischer Bereich 169 DNA-Erkennungssequenzen, Rezeptoren, nucleäre 687 DNA-Fragmente – bakterielle 244 – Caspasen 793 – Plasmide 244 DNA-Glycosylasen, Basenexcisionsreparatur 238 DNA-Histon-Komplex, Chromatin 154 (F) DNA-Impfstoffe, Virusinfektion 349 DNA-Ligase 233 – DNA-Replikation 233 – Nucleotid-Excisionsreparatur 239 DNA-Methylierung, Differenzierungsmuster 272 DNA-Mikroarrays 250 DNA-mRNA-Hybridisierung, Gen, eukaryotes 264 DNA-Polymerase I 170, 233 (F) DNA-Polymerase α 234 DNA-Polymerase α/PrimaseKomplex 234 DNA-Polymerase γ 234 DNA-Polymerasen 231 – Acycloguanosin 351 – Aktivität 231 – Circoviren 339 – DNA-Replikation 231 – 3‘,5‘-Exonucleaseaktivität 231, 237, 339 – hitzestabile 127 – Matrize 231 – beim Menschen vorkommende 231 – Nucleotid-Excisionsreparatur 239 – Parvo-/Polyomaviren 339 – Prozessivität 231 – Viren 337–339 DNA-Reparatur, Verlust, Caspasen 793 DNA-Reparaturdefekte, Erbkrankheiten 237 DNA-Replikation 149, 158, 228–236 – Desoxyribonucleotide 231 – – radioaktive 230

– – – – –

DNA-Doppelhelix 232 (F) DNA-Ligase 233 DNA-Polymerase I 233 DNA-Polymerasen 231 – 3‘,5‘-Exonucleaseaktivität 237 – Einzelstrangbindungsproteine 231 – Enzymaktivitäten 230–236 – eukaryote 230 – – Multienzymkomplex, Struktur 234 – Faktoren 231 – Führungsstrang (Leitstrang, leading strand) 233–234 – Helicasen 231 – Hemmung, Actinomycin D 236 – – Gyrasehemmstoffe 236 – – Mitomycin 236 – – Tumortherapie 236 – Initiation 230 – Mechanismus 231 (F) – Okazaki-Fragmente 233 – Prokaryoten 230 – – Primase 232 – – Primer 232 – Replikon 229–230 – Replisom 230, 234 – Ribonucleotide 231 – RNA-Primer 232, 234 – semikonservative 228–229 – Telomere, Chromosomen 234, 235 (F) – Topoisomerasen 231 – verzögerter Strang (lagging strand) 233–234 DNA-Schäden – Basenexcisionsreparatur 238 – – Okazaki-Fragmente 238 – Behebung 239 – homologous end-joining (HEJ) 240 (F)–241 (F) – nonhomologous end-joining (NHEJ) 240 (F)–241 (F) – Nucleotid-Excisionsreparatur 239–241 – Rekombination, homologe 240 (F)–241 (F) – Reparatur 237–241 – Sauerstoffspezies, reaktive 510 DNase footprinting 168 DNase protection assay 168 DNasen 167 – Defekte 200 DNA-Sequenz(en) – Amplifizierung, PCR 247 – cDNA-Banken 245 – Isolierung, DNA-Banken 246 – Palindrome 149 – Proteine 68 – spezifische, Herstellung 244–248 – Veränderung 236–237 DNA-Sequenzierung(stechnik) 170–171

1189 Sachverzeichnis

– automatisierte 171, 172 (F) – Primer 171 – nach Sanger und Coulson 170–171 DNA-Sequenzverlust-Analyse, Antionkogene 1145 DNA-Sonden 167 – anonyme 1145 – Proteine 60 DNA-Strang, Rezeptoren, nucleäre 763 DNA-Technologie, rekombinante, Stoffwechselkrankheiten 134 DNA-Transkription 149, 158, 187, 256 DNA-Tumorviren 344 DNA-Viren – doppelsträngige 336–337 – einzelsträngige 337 docking-Proteine 821 – DP-GTP (SRP-Rezeptor) 304 – Insulinrezeptor 821 Dogma, zentrales, Molekularbiologie 158–159 Dolichol 32, 38, 39 (F), 566 Dolicholphosphat 546, 547 (F) Dolicholpyrophosphoryloligosaccharide 312 Domänen – extrazelluläre, Guanylatcyclasen 802 – Immunglobuline 1119 – Proteine 76 – – Strukturelemente 97–98 Donatorkompartiment, Transport, vesikulärer 194 Dopamin 438, 468, 844, 888, 1038, 1041–1042 – Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 468 – Ascorbinsäure 698 – β-Hydroxylierung 698 – Katecholaminbiosynthese 827 (F) – Nahrungsaufnahme, hemmende Wirkung 643 – Reninfreisetzung 911 – TRH-Freisetzung 847 – Tyrosinhydroxylase-Reaktion 828 (F) Dopamin-β-Hydroxylase/ Dopamin-β-Monooxygenase 827, 1041 – Ascorbinsäure 698 – Katecholaminbiosynthese 827–828 – Kupfer 667 – Kupfertransport 669 – Mangel, Menkes-Erkrankung 671 Dopaminagonisten 875 – Prolactinome 889 Dopamin-D2-Rezeptoren 888 – Retinoidfunktion 687 Doppelbindungen – Fettsäuren 33

– Hydratisierung 10 – isolierte 34 – partielle 70 Doppelmembranen – Fusion 563 – Zellkern 188 Doppelschichten, Sphingolipide 40 down-Regulation – Hormone, Defekte 205 – Membranproteine 195 – Rezeptoren, Defekte 205 DP1 – Freisetzung 1148 – Inaktivierung, Rb-Genprodukt 1147 DP2 1108 D-Penicillamin 671 (F) dpG (Desoxyguanosin-5‘-Phosphat) 147 DQ4 1108 DR3, Diabetes mellitus 1138 DR4 1108 – Diabetes mellitus 1138 Dreikompartment-Modell, Ernährungszustand 638 1-D-Ribofuranosyl-1,2,4-triazol3-carboxamid 7 Ribavirin D-Ribose 23, 143 (F) – Desoxyribose 143 – Ribose 143 D-Ribose-5-phosphat 586 (F) – Pyrophosphorylierung 630 D-Ribulose-5-Phosphat 365–366, 943 Drosha 281 Drosophila melanogaster, Methylcytosin 273 Druck – hydrostatischer 11–12 – – Hyperaldosteronismus, sekundärer 927 – kolloidosmotischer (onkotischer), Hyperaldosteronismus, sekundärer 927 – – Plasmaproteine 996 – osmotischer 11–12 Drüsen, endokrine 758 drug-design, Enzyme 134 D-Segmente 1122 Dubin-Johnson-Syndrom 626 – Ikterus, MRP2-Defekt 1101 Duchenne-Muskeldystrophie 1018 – Dystrophin 1009 Dünndarm-Mukosazelle, Eisenresorption 659 Dunkeladaptation 686 Duodenalinhalt, Gallensäuren 1061 Duodenalkarzinom, ADH-Sekretion 921 Duodenalsekret 1062 Duodenalulcus 1067 Duodenum – Enteropeptidase 1062

– Nahrungsstoffe, Resorption 1068 – – Verdauung 1068 – Natriumsekretion 1074 – Wassersekretion 1074 Durchblutung, Niere 895–896 Durchfall 7 Diarrhoe Durchströmungswiderstand – Alkoholkonsum, chronischer 1100 – sinusoidaler 1100 Durstgefühl 920 – ADH-Freisetzung 920 – Natriumhaushalt 922 – Osmorezeptoren 920 D-Vitamine 32, 763 D-Xylitol 542 – Biosynthese 542 D-Xylose 23 D-Xylulose 542 Dynamin-Familie, G-Proteine, cytosolische 194 Dyneine 213 – Cilien 211 – Motorproteine, Mikrotubuli 210 Dynorphine 1044 – κ-Rezeptor 1044 Dynorphinvorläufer 1038 Dysfibrinogenämie 985 Dyskrinie, Allergie vom Typ I 1137 Dyslipidämie 425 Dyslipoproteinämie – Adipositas 640 – metabolisches Syndrom 640 Dysproteinämien 993 – Elektrophoresediagramm 999 – Typen 998 Dyssynchronie, pancreaticocibale 1068 Dystrobrevin 1008 α-Dystroglykan, Virusrezeptor 331 Dystroglykane 733, 1008–1009 Dystrophin (DYS) 1007–1008 – Duchenne-Muskeldystrophie 1009 – Membran-Cytoskelett, Muskelfasern 1009 Dystrophin-Gen 1017 – de-novo-Mutationen 1018 Dystrophin-Komplex, Aktin 214

E ΔE 103 E1B-Protein, Hepatitis-B-Virus 345 E-Cadherine 197–198, 317 ECE (Endothelin-ConversionsEnzym) 318 ECL-Zellen – Histamin 1063–1064

D–E

– Serotonin 1043 ECM 7 extrazelluläre Matrix ECM-Moleküle, Rezeptoren, Integrine 733 Ectoenzyme 318 5‘-Ectonucleotidase 899 EDEM-Mannosidasen 322 Editierungsstelle/-zentrum – Aminoacyl-tRNA-Synthetase 292 – – Aminoacyl-tRNA-Synthetase 292 – Hydrolaseaktivität 292 Edman-Abbau, Aminosäuresequenz, Peptide/Proteine 65–66 EDRF (endothelial derived relaxation factor), Endothelzellen 981 EDTA, Blutgerinnung, Hemmung 987 eEF 294 eEF-1 774 eEF-1A 296 eEF-1A•GTP-Komplex (eEF-1A•GTP) 296 eEF-2 296 eEF-2•GTP-Komplex (eEF-2•GTP) 296 eEFsec (sec=Selenocystein) 299 eEF-Tu 774 E-(Exit-)Stellen, Ribosomen 293, 294 (F) E2F – Freisetzung 1148 – Inaktivierung, Rb-Genprodukt 1147 Effektorcaspasen 226 Effektormoleküle – Apoptose 792 – Bakterienabwehr 1135 Effektorproteine, cytoplasmatische, Rekrutierung 770 Effektorzellen 1105 efferente Signale, Nahrungsaufnahme 642 Effusionslymphome, Humanes Herpesvirus Typ 8 344 EGF (epidermal growth factor) 225, 759, 1143–1144 – Akutphase-Proteine 996 EGFR (epidermal growth factor receptor) 43, 786, 1143–1144 Ehlers-Danlos-Syndrom (EDS) 723, 751–752 – Kollagen-Typ-I-Mutation 752 eIF 294 eIF-1 294 eIF-2 294–295, 300, 774 eIF2-α 797 eIF-2B 300 eIF-2•GTP-Komplex (eIF-2•GTP) 295 eIF-2-Kinase 300 eIF-3 294–295 eIF-4 295

1190

Anhang

eIF-4G 300–301 – Harnblasenkarzinom 301 – Mammakarzinom 301 eIF-5B•GTP-Komplex (eIF-5B•GTP) 295 Eikosanoide 34, 418–425, 759, 1104 – Allergie, Typ I 1137 – Biosynthese, Lipidperoxidation 511 – – pharmakologische Hemmung 424 – Immunantwort 1133 – Synthese 571 Eikosapentaensäure 420 Δ5,8,11,14-Eikosatetraenoyl-CoA 419 Δ5,8,11,14-Eikosatetraensäure 34, 418 Δ8,11,14-Eikosatrienoyl-CoA 419, 420 (F) Eikosatriensäure 420 Ein-Gen-ein-Protein-eine-Funktion, Enzyme 110 Einkompartment-Modell, Ernährungszustand 638 Einschleusung, DNA, fremde 241 Einzelnucleotid-Polymorphismus 161 Einzelstrangbereiche (sticky ends), DNA 169 Einzelstrangbindungsproteine, DNA-Replikation 231 Eisen 4, 658–667 – Abgabe 660 – anorganisches, dreiwertiges, Nahrung 659 – Aufnahme 660 – – unzureichende, Anämie 666 – Ausscheidung 665 – Bedarf, erhöhter 665 – – Schwangerschaft/ Wachstum 667 – Bilirubinabbau 621 – Dosen, orale 660 – dreiwertiges, Transferrin 661 – Erythrozytenabbau 955 – freies 658 – – Hydroxylradikale 658 – – Redoxreaktionen 658 – Freisetzung, Hepcidin 662 – Gehalt, Ferritin 663 – genetische Veränderungen, angeborene 658 – Gesamtbestand 656 – Hämoglobin 659 – Konzentration, Eisen-Transferrin-Sättigung 661 – Mukosablock 660 – Plasmaspiegel 656 – Porphyringerüst 659 – Proteinbindung 661 – Recyclisierung, Hepcidin 662 – Redoxreaktionen 658 – Resorption 659–660, 1076

– – – –

– Darmepithelien 663 – Hepcidin 662 Ribonucleotid-Reduktase 659 als Sauerstoff- oder Elektronentransporteur, Proteine 659 – Speicherung in der Leber 1090 – Tagesbedarf 665–666 – toxische Wirkung 666 – Transport, Blutplasma 659–660 – – transzellulärer 660 – Verluste, Anämie 666 – – Blutungen 665 – – Menstruation 665 – Zellproliferation 659 – Zufuhr, tägliche 666 – zweiwertiges, Häm 79 Eisenablagerungen/-akkumulation 666 – Aderlass 666 – Leberzirrhose 666 – SQUID-Biosuszeptometer 666 – Thalassämie 971 Eisenbelastungstest, oraler 667 Eisenexport, zellulärer, Ferroportin 660 Eisenhomöostase, intrazelluläre, IRP-1/2 664 Eisenmangel, Plasmaferritinspiegel 663 Eisenmangelanämie 955 – Anämie 666 Eisenporphyrin 7 Häm eisenregulatorische Elemente 664 eisenregulatorische Proteine 659, 664 Eisen-Schwefel-Cluster/-Komplexe 203, 665 Eisen-Schwefel-Proteine 490 – Monooxygenasen 508 Eisen-Schwefel-Zentrum 659 – ETF:Ubichinon-Oxidoreduktase 498 – NADH:Ubichinon-Oxidoreduktase 497 Eisenspeicher, leere, Hepcidinproduktion 663 Eisenspeicherkrankheit, Leberzellschädigung 1101 Eisenspeicherprotein 660 Eisenstoffwechsel – Hepcidin 662 – Plasmaeisen 665 – Regulation, hormonelle 662 Eisen-Transferrin-Sättigung 661 Eisenüberladung – chronische 666 – (Plasma-)Ferritinspiegel 663 Eisenumsatz, täglicher 665 EKG-Veränderungen – Hypercalciämie 938 – Hyperkaliämie 929 Elastasen 315, 727, 868, 1059 – Bakterienabwehr 1135 – Pankreas 1058 Elastin 56, 724–726

– – – – – – – – – –

Binde-/Stützgewebe 716 elastisches Verhalten 725 extrazelluläre Matrix 548 Fibrillin 724 Flexibilität 724, 726 Haut 751 hydrophobe Bereiche 724 Mutation, Cutis laxa 751–752 – Hauterkrankungen 752 Quervernetzungs-Domänen 724 – Tropoelastin-Untereinheiten 724 – Wassermantel 725 elastische Fasern 724–727 – Architektur 725 – Biosynthese 725, 727 – Haut 751 – Organe, Wachstumsphase 727 Elastizität, Dermis 749 electrospray ionisation (ESI) 67 elektrische Koppelung, elektrische, gap junctions 180 elektrische Leitfähigkeit, Wasser 12 elektrische Synapsen 1034 elektrogene Carrier 492 Elektrolyte – Durchlässigkeit, Blut-HirnSchranke 1027 – Reabsorption, Niere 899–905 – Resorption 1074–1076 – – Colon/Ileum 1075 – Typ-1-Diabetes mellitus 833 Elektrolytverluste, Schweißdrüsen 1075 Elektrolytzusammensetzung, Plasma 1074 elektromechanische Koppelung – Acylcarnitin 1012 – CCCR (conformationally coupled calcium release) 1012 – CICR (calcium-induced calcium release) 1012 – cyclo-ADP-Ribose 1012 – cytosolische Calciumkonzentration 1012 – Dihydropyridin-Rezeptor 1012 – Muskelfasern, dicke 1011 – Muskelkontraktion 1011–1014 – Ryanodinrezeptor 1012 – Sauerstoffspezies, reaktive (ROS) 1012 Elektronenaffinitäten 103 Elektronenakzeptoren, Säuren 18 Elektronendonatoren, Basen 18 Elektronentransport, Atmungskette 494–500 Elektronenübertragung, Molybdän 671 elektrophil 18 elektrophile Verbindungen 18–20 elektrophiler Angriff, Basenkatalyse 19

Elektrophorese – Ethidiumbromid 165 – Nucleinsäuren, Auftrennung 165 – Plasmaproteine 991 Elemente – chemische 4 – Periodensystem 4 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) 138, 347, 762 (F) – Antikörpernachweis 346 – Virusvermehrung 346 Elliptozytose, hereditäre 968 Elongation – Proteinbiosynthese 287 – – eukaryote 296–298 – Transkription 257, 262–267 – – Prokaryoten 258–259 Elongationskomplex, ternärer 296 Elongationszyklus, cytosolischer, Eukaryoten 296, 297 (F) Embryogenese/Embryonalentwicklung – Fibronectin-Gen, Inaktivierung 732 – Hyaluronsäure 550 – morphogenetische Prozesse 741 – Vitamin A 687 Emery-Dreyfuss-Muskeldystrophie 1018 Emiline 724 Eminentia mediana 843 ENaC (epithelial natrium channel) 197 – Colon 1075 Enamelysin 737 Enamin 361 (F) Enden, glatte (blunt ends), DNA 169 endergone Reaktion 102 Endharn 914–917 2,3-Endiol-L-Gulonsäure-γ-Lacton 697 Endobiotica 1090 endokrine Drüsen 758 endokrine Signaltransduktion 758 Endonucleasen 167 Endopeptidase(n) 316 – neutrale (NEP) 925–926 – Pankreassaft 1058 – Pepsin 1056 endoplasmatischer Transport 209 endoplasmatisches Retikulum, glattes 190 endoplasmatisches Retikulum (ER) 190 – Chaperone 303 – Elektronenmikroskopie 287 – glattes 176 (F), 190 – Glucose-6-phosphat 379 – Kompartiment, intermediäres 190

1191 Sachverzeichnis

– – – – –

Membranbiosynthese 562 Proteine, Faltung 305 raues 176 (F), 190 – LDL-Rezeptor 578 – Transmembran-Proteine, integrale 304 – – – sekretorische 304 – transversale Tubuli 1012 – Übergangselemente (transitional elements) 190 Endoproteinasen 316 β-Endorphin – Halbwertszeit 849 – Nahrungsaufnahme, stimulierende Wirkung 643 – ν-Rezeptor 1044 Endorphine 1038, 1044–1045 – analgetische Wirkung 1044 – Entstehung 1045 – lipotropes Hormon 1044 – Plazenta 884 Endosomen 200 – frühe 202 – MVBs (multivesicular bodies) 195 – späte 195 – Transport, vesikulärer 191 Endosymbiontenhypothese, Mitochondrien 204 Endothel, Thrombozytenaggregation 980–981 endothelial derived relaxation factor 7 EDRF Endothelin-1, Retinopathie, diabetische 837 Endothelin-Conversions-Enzym (ECE) 318 Endotheline, Nierendurchblutung 896 Endothelin-Rezeptoren 43 Endothelzellen – EDRF 981 – fenestrierte, Glomerulus 896 – – Plexuskapillaren 1026 – Prostacyclin (PGl2) 981 – sinusoidale, Leber 1084 – Stickstoffmonoxid (NO) 981 – t-PA 987 endothelzellproduzierter, relaxierender Faktor 7 EDRF endotherme Reaktion 101 Endozytose 906 – Clathrin-beschichtete Vesikel 195 – Clathrin-unabhängige 197 – – Caveolae 197 – Clathrin-vermittelte 195, 1036 – – GLUT 4 375 – – Resorption, tubuläre 906 – – Synapse, chemische 1034 – Lysosomen 200 – Membranproteine, Ubiquitinylierung 196 – Mikrotubuli 209 – Plasmamembran 195 – Proteine 319

– Rezeptoren, Internalisierung 806 – Rezeptor-vermittelte, Viruspartikelaufnahme 333 – Sättigungskinetik 195 – Transport, vesikulärer 191 Endplatten-AcetylcholinesteraseDefizienz, COLQ-Protein, Mutationen 313 Endwert-Methode, Metabolitenbestimmung 116 energetisches Äquivalent 636 – Alanin 637 – Fette 637 – Glucose 637 – Kohlenhydrate 637 – Nährstoffe 637 – Proteine 637 – Sauerstoff 636–637 – Triolein 637 Energie 101 – chemiosmotische Kopplung 104 – chemische Kopplung 104 – innere 101 – Kilojoule (kJ) 633 – Kilokalorie (kcal) 633 – resorbierte 633 – verdauliche 633 energiearme Verbindungen 105 Energieaufnahme, tägliche, Fettaufnahme 648 Energieausbeute – Adipositas 634 – Citratzyklus 484 – Nährstoffoxidation 634 Energiebedarf 635–636 – Glucose 520 – Nahrungskarenz 641 – Skelettmuskulatur, Glycogen 532 – – Triacylglycerine 532 – zellulärer, Citratzyklus 485 Energiebilanz 632–638 – Adenosintriphosphat 632 – ausgeglichene 639–640 – Gehirn 643 – negative 640–641 – oxidative Phosphorylierung 502 – positive, Adipositas 632 – – Übergewicht 632 – Veränderungen 639–642 Energiecarrier, ATP 105 Energiegewinnung – Niere 909–910 – Zelle 104–106 Energieladung 380 energiereiche Verbindungen – Acetyl-CoA 479 – Enthalpie, freie 104 – Pantothensäure 704 Energiespeicherung, Fettgewebe 518–519 Energiestoffwechsel – Aminosäuren 429–430

– Gehirn 1024 Energieträger, Nucleotide 145 Energietransfer – ATP 106 – Transportproteine 494 Energietransformation 100, 104–106 Energieumsatz – experimentelle Ermittlung 636–638 – körperliche Arbeit 532 – Muskelarbeit 532 Energieumwandlung, Mitochondrien 490–506 Energieverbrauch 635–636 – ATP-Synthese, zelluläre 504 – Bestimmung, Isotopendilutionsmethode 637 – beim Gehen und Joggen 532 – motorische Aktivitäten 636 – 24-Stunden-Registrierung 636 Energieversorgung, Wachstum 742 Energiezufuhr – Kontrollmechanismen 642–644 – Wachstum 652 enhancer – Hormonrezeptor-Komplexe 765 – Transkription 275–276 – Transkriptionsfaktoren 806 Enkephalinase 318 Enkephaline 1038, 1044 – δ-Rezeptor 1044 – Vorkommen/Funktion 1063 Enkephalinvorläufer 1038 Enolase, Glycolyse 360, 362 Enolphosphate, Gruppenübertragungspotential 105 Enoyl-CoA-Hydratase, Fettsäuren, β-Oxidation 405 Enoylreduktase 412 (F) Enterochromaffin-ähnliche Zellen 7 ECL-Zellen Enterodiol, Phytoöstrogene 884 Enteroglucagon 823 – Vorkommen/Funktion 1063 enterohepatischer Kreislauf – Aminosäuren 1062 – Gallensäuren 1061, 1066 Enterohormone, Insulinsekretion 815 Enterokinase 7 Enteropeptidase Enterolacton, Phytoöstrogene 884 Enteropathie, Gliadin-induzierte 1078, 1080 Enteropeptidase 132–133, 1059 – Duodenum 1062 – Pankreas 1058 Enterostatin, Nahrungsaufnahme 642–643 Enterotoxin 1078 Enterovirus 328 Enterozyten 1069

– Aminosäurestoffwechsel 451 – Argininsynthese 460 – Calciumkanal, elektrogener 690 – intestinale, GLUT 5 376 – – GLUT 11 376 Enthalpie – freie 102 – – ATP 105 – – energiereiche Verbindungen 104 – – Konzentrationsabhängigkeit 102 – Proteine, Minimum, globales 87 Entkoppler, Atmungskontrolle 503 Entkopplungsprotein 503 Entropie 101–102 – geschlossenes/offenes System 102 Entwicklungsrückstand, Biotinmangel 707 Entzündungen – akute, Zinkmangel 673 – C3a, C4a bzw. C5a 1132 – chronische, Cytokine, proinflammatorische 778 – Granulozyten, neutrophile 972 – Interleukin-8 783, 791 – Plasmaproteine 996 – RANTES 791 – Terminierung 1134 Entzündungshemmer, nichtsteroidale, Prostaglandinbiosynthese 424 Entzündungsmediatoren, Leukotriene 423 Entzündungsreaktion, IgE-vermittelte Reaktionen 1079 env, HIV 336 Enzephalomyelitis, allergische 1046 Enzephalomyopathie, mitochondriale 512, 1021 Enzephalopathie – epileptische, GLUT1, Defekte 186 – hepatische, Lebercirrhose 1101 – OXPHOS-System, Störungen 513 – spongiforme 1050 – – bovine (BSE) 1050 – – Prion-Aggregate 1050 Enzymaktivität – Alles-oder-Nichts-Übergänge 131 – allosterisches Gleichgewicht 131 – Bestimmung 135–136 – Blut 135 – DNA-Replikation 230–236 – Gleichgewicht, allosterisches 131

E

1192

Anhang

Enzymaktivität – hepatozelluläre, Leberzellschädigung 1099 – Kennlinien, sigmoidale 130 – KM, Bestimmung, experimentelle 124 – Maßeinheiten 116 – Nekrose 136 – pH-Optimum 127–128 – Regulation 129–133 – Regulierbarkeit 108 – Temperaturabhängigkeit 127 – Vmax, Bestimmung, experimentelle 124 – Zellmembran, Permeabilitätsstörung 136 Enzym-Antikörper-Konjugaten 137 enzymatische Bestimmung, Metabolitenkonzentrationen 136 enzymatische Reaktionen, Ascorbinsäure 698 Enzymdefekte – intraerythrozytäre 960 – Sphingolipidosen 580 Enzymdiagnostik, Western Blot 138 Enzyme 107 – 7 Coenzyme – 7 Isoenzyme – Aktivatoren 124 – aktives Zentrum 108 – Aktivität 115–117 – allosterische 130–131 – Aminosäuren, essentielle, Biosynthese 443 – Anpassung, induzierte (induced fit) 109 – Atmungskette 497 – Blutgerinnung 984 – Cofaktoren, Metallionen 111–112 – Dephosphorylierung 132 (F) – deubiquitierende 315 – diagnostische Verfahren, Signalverstärker 137–138 – drug-design 134 – Ein-Gen-ein-Protein-eineFunktion 110 – Einheit 116 – Einsatzgebiete in der Medizin 134 – Einteilung 113 – Flexibilität, konformative 109 – Formen, multiple 113–114 – Gewebe, exokrine 135 – als Glycoproteine 27 – Harnstoffzyklus 448 – Hitzedenaturierung 127 – immunologische Signale, Verstärkung 137 – Induktion 129 – interkonvertierbare 114, 132 – – Pyruvatdehydrogenase 482 – Isolierung 112

– – – – – – – –

katalytische Aktivität 116 – maximale 116, 123 – molare 117 katalytisches Zentrum 108 Klassifizierung 112–113 Konzentration 115–117 Kooperativität, negative 131 lysosomale, Thrombozyten 977 – Medikamentenvorstufen, Krebstherapie 1161 – Metabolitkonzentrationen 116, 136 – Metabolitnkonzentrationen 135 – Metallionen-aktivierte 111–112, 657 – multifunktionelle 110 – Nomenklatur 112–113 – oligomere 110 – optischer Test 115–116 – Oxidationsmittel 128 – Oxyanion-Tasche 121 – Phosphorylierung 132 (F) – plasmaspezifische 135 – Primärantikörper 138 – Proteine, rekombinante 112 – Proteinfaltung 108 – Pyrimidinbiosynthese 590 – Quartärstruktur 110 – Reaktionsprodukte, Transfer (substrate channeling) 110 – Reaktionsspezifität 108 – Reinigung 117 – Repression 129 – Sekundärantikörper 138 – sigmoidale Kinetik 130 – spektralphotometrische Messung 115 – Stereospezifität 108 – Substratspezifität 108 – Suizidsubstrate 127 – Sulfhydrylgruppen 128 – Temperaturoptimum 127 – thermostabile 127 – Trivialnamen 112 – vektorielle, Transportproteine 178 – Volumenaktivität 116 – Wechselzahl (turnover number) 117 – zelluläre, DNA-Viren, einzelsträngige 337 enzyme replacement therapy (ERT), Gaucher-Krankheit 206 Enzymeffektoren – Einfluss 129–131 – K-Systeme 131 – V-Systeme 131 enzyme-linked immunosorbent assay 7 ELISA Enzymhemmung 124–127 – antikompetitive 126 – (ir)reversible 124 – kompetitive 124–125 – nichtkompetitive 125–126

– Übergangszustandsanaloga 126 Enzymimmunoassay 7 ELISA Enzyminhibitoren 124–127, 134 – klinische Anwendung 134–135 – pharmakologisch wichtige 134 – Übergangszustandsanaloga 134 Enzymkatalyse 117–121 – Fließgleichgewicht 122 – Geschwindigkeitskonstanten 107 – Kinetik 115 – pre-steady-Phase 122 – quasi-steady state 122 – Substratspezifität 108 Enzymkinetik 121–129 – Kooperativität, hetero-/homotrope 130 – – negative/positive 130 Enzymlösung, Volumeneinheit 116 Enzymmenge – Katal 116 – Veränderung, Substratkonzentration 129 Enzym-Produkt-Komplex (EP) 109 Enzymproteine, Modifikation, covalente 131–133 Enzymreaktionen – Geschwindigkeit 115 – Sättigungskinetik 123 – Übergangszustandsanaloga (transition state analogs) 109, 126–127 Enzymsekretion, Pankreas 1065 Enzym-Substrat-Interaktion 107–108 Enzym-Substrat-Komplex 109 – Fließgleichgewicht (steady state) 122 – Konzentration, quasi-stationäre 122 – Reaktionsgeschwindigkeit 121 Eotaxin 1 (CCL11) 759 Eotaxin 2 (CCL24) 759 Eotaxin 3 (CCL26) 759 Eotaxine 759 Ependymzellen, Hirnventrikel 1026 Ephrine 1051 epidermal growth factor 7 EGF epidermal growth factor receptor 7 EGFR epidermale Wachstumsfaktoren 7 EGF Epidermis 747–749 – Intermediärfilamente 748 – Keratine 748 – Keratinozyten 748 – P-Cadherine 198 – PTHrP 936

Epidermodysplasia verruciformis, Papillomviren 344 Epidermolysis bullosa 750–751 – acquisita, Kollagen Typ VII, Autoantikörper 753 – dystrophica 724, 750–753 – junctionalis 750–753 – simplex 214, 750–753 Epididymitis, Zinkkonzentration 672 Epilepsie – Fieberkrämpfe 1032 – Glucoseaufnahme 1024 Epimerase, Hexosemonophosphat-Weg 367 Epimerisierung – Glucuronat 549 – Iduronat 549 – UDP-Galactose 542 Epinephrin 7 Adrenalin Epiphysenschluss 744 – Östrogene 744 epithelial natrium channel 7 ENaC Epithelzellen, intestinale, Glucosetransport 185 (F) Epitope – Antigene 1106 – diskontinuierliche 1106 – kontinuierliche 1106 – lineare 1106 EPO 7 Erythropoetin Epoxide 1094 – Kohlenwasserstoffe, polycyclische, aromatische 1158 Epoxid-Hydrolase, Leukotrienbiosynthese 423 Epoxidreduktase 696 – γ-Glutamyl-Carboxylierung, Vitamin-K-abhängige 696 E6-Protein, Papillomviren 345 Epstein-Barr-Virus – Burkitt-Lymphom 344 – CD21 1135 – Nasopharynxkarzinom 344 ERα 883 ERβ 883 ERAD-System (ER-assoziierte Proteindegradation) 322 erbA-Onkogen 1143 erbB2, Mammakarzinom 786 Erbinformation, DNA 158–162 Erbkrankheiten, DNA-Reparaturdefekte 237 Erblindung, Diabetes mellitus 837 erb8-Onkogen 1143 Erbrechen – Cytostatika-induziertes 1038 – Dehydration 920 – episodisches, Enzephalomyopathie, mitochondriale 512 – 5-HT2-Rezeptor 1043 erektile Dysfunktionen 803 ERGIC (ER-Golgi intermediary compartment) 190, 305–306 Ergocalciferol 688–691

1193 Sachverzeichnis

Ergosterol 688 Erhaltungsbedarf 635 ERK (extracellular signal regulated kinase/mitogen activated protein kinase) 772–773 – Muskelaufbau/-abbau 1016 Erkrankungen, Stoffwechselveränderung, allgemeine 652 Ernährung 631–654 – Alter 652 – alternative 654 – enterale 653 – kalorisch restriktive 639 – – Grundumsatz 635 – – Körpergewicht 635 – – Nahrungsaufnahme 635 – klinische 652–653 – künstliche 652–653 – – Fettemulsionen 653 – – Proteinversorgung, intravenöse 653 – parenterale 653 – – Zinkmangel 673 – Schwangerschaft 652 – Stillzeit 652 – vegane 654 – Wachstum 652 Ernährungszustand 638–639 – bioelektrische Impedanzanalyse (BIA) 638 – Ein-, Zwei- bzw. Dreikompartment-Modell 638 – Triacylglycerinbiosynthese, Aktivität 415 ER-Oxidase (ERO-1L) 306 Erregbarkeit, muskuläre, Hypoparathyreoidismus 939 Erreger, attenuierte (abgeschwächte), replikationsfähige, Lebendimpfstoffe 348 Erregerkontakt, Virusinfektion 347 Erregungsleitung, Neurone 1030–1033 ER-Stress 322 Erythroblasten – Hämbiosynthese, Regulation 613 – Transferrin, Aufnahme 661 Erythroblastose, fetale 965 – Pigmentsteine 1102 Erythromycin, Proteinbiosynthese, Hemmung 299 Erythropo(i)ese – ineffektive, Thalassämie 971 – Regulation, Erythropoietin 955 Erythropo(i)etin (EPO) 613, 759, 912–913, 953 – ALA-Synthase-2-Gen, Transkription 613 – Anämie 912 – – renale 913 – Bildung, HIF (hypoxia-inducible factor) 913 – Erythropoiese, Regulation 955 – Erythrozyten, Anzahl 955

– Gewebesauerstoffdruck 912 – Hämbiosynthese, Regulation 612 – Hypoxie, arterielle 912 – Interleukine 778 – Nierenerkrankungen, degenerative 913 – Produktion, Androgene 877 – Rezeptoren, Hämbiosynthese, Regulation 612 Erythropo(i)etin-Gen 913 Erythrose 22 Erythrose-4-phosphat, Hexosemonophosphat-Weg 366 (F)–367 (F) Erythrovirus 329 Erythrozyten 952–971 – Abbau, hämolytische Krisen 625 – – Ikterus 625 – Agglutination 965 – Alkalisierung 961 – Antigene 956, 965–967 – Anzahl, Erythropoietin 955 – Aquaporine 12 – Chloridverschiebung 962 – Chrommarkierung 675 – Durchmesser 956 – Eigenschaften 953–957 – Enzyme, Aktivitätsminderung 681 – Form, ATP 955 – – Diffusionsstrecken 956 – Gluconeogenese 372 – Glucose 520, 956 – Hämoglobin 957–965 – Hämolyse, Lysophosphatidylcholin 559 – Höhenanpassung 961 – Hydrogencarbonat, chemische Bindung 962 – Insulinempfindlichkeit 817 – Kohlendioxidtransport 962 – Lebensdauer 665, 954 – lytischer Angriff, Abwehr 969 – Membrandefekte, angeborene, Hämolyse 968 – Oxidation 956 – Phosphoglyceratkinase 363 – pH-Wert 961 – Porphyringerüst, Abbau 955 – Pufferkapazität 945 – Rasterelektronenmikroskopie 954, 968 – Reifung 954 – Stoffwechsel 953–957 – – Sauerstoffaufnahme/ -abgabe 955 – Substratverbrauch 640–641 – Umsatz, erhöhter 967–968 – Verformung 956 – Wasserstoffperoxid 956 Erythrozytenmembran 956 Erythrozytenproteine, glykierte 394

Erythrozytentransfusionen, hämolytische bzw. Unverträglichkeitsreaktionen 965 Escherichia coli 267 – lacZ-Gen, Polyklonierungsstelle 243 E-Selektine 199 – Leukozyten 972 E-Selektin-Liganden, Lymphozyten, Zirkulation 1129 ESI (electrospray ionisation) 67 Eskortine/Eskort-Proteine 193 Esomeprazol 1056 Essigsäure 4, 34 – Titrationskurve 16 ESS-Syndrom 861 Esterase, Defekte 200 Esterbindungen 10 Estergruppe 5 (F) Estradiol 7 Östradiol Estrogene 7 Östrogene Etanercept (Enbrel£) 778 ETF (electron transferring flavoprotein) 294, 498 – Fettsäuren, β-Oxidation 405 ETF:Ubichinon-Oxidoreduktase 496, 498 – Eisen-Schwefel-Zentrum 498 Ethanol (Ethylalkohol) – ADH-Freisetzung 920 – Hefezellen 363 – Metabolisierung, Alkoholkonsum, chronischer 1100 – Stoffwechsel, Leber 1100 – Stoffwechselbedeutung 649–651 Ethanolamin 32, 35, 438, 463, 554 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 Ethansäure 34 Ethidiumbromid, Elektrophorese 165 Ethylalkohol 7 Ethanol Etiocholanolon, Androgene, Abbau 877 Etoposid, Krebstherapie 1160 Euchromatin 187 Eukarya 7 Eukaryote 6–7 – Elongationszyklus, cytosolischer 296, 297 (F) – Intronentfernung 266 – Replikon 230 – Ribosomen 293 – RNA-Polymerasen 259 – Spleißen 266 – Transkription 259–270 Euthyreose 859 euthyroid sick syndrome 861 Evolution, Mitochondrien 204 Evolutionstheorie 6 executive-caspases 792 exergone Reaktion 102 Exon 98 – Ausschalten, Spleißen, alternatives 278

– basengenaue Verknüpfung 264 – Genom 160 – Globingenfamilie 958 – Transkription, Elongation 264 exon shuffling 98 exon skipping, Spleißen, alternatives 278 Exon/Intron-Übergänge, Strukturelemente 264 Exonucleasen 167 – 3‘-5‘-Exonuclease 231, 270, 339 – 5‘-3‘-Exonuclease 233 Exopeptidasen 316 – Pankreassaft 1058 Exophthalmus, endokriner 860 Exoproteinasen 316 Exosomen 203, 205, 281 – Plasmamembran 195 exotherme Reaktion 101 Exozytose – lysosomale, Osteoklasten 203 – Mikrotubuli 209 – Plasmamembran 195 – SNARE-Proteine 194 Exportine/Exportproteine – Glycoproteine 27 – Transport, nucleocytoplasmatischer 189 Exportsignalsequenzen, Transport, nucleocytoplasmatischer 189 Expressions-cDNA-Bank 245 Expressionsplasmide 243, 245 (F) Expressionsvektor – Proteinsynthese, gentechnische 93 – Zellen, tierische 244 Extein, Proteinolyse, limitierte 309 Extra-Arm, tRNA 289 extracellular signal regulated kinases 7 ERK extrafibrilläre Matrix, amorphe, Haut 751 extrahepatisches Gewebe – ATP7B 670 – Lipoproteine, triacylglycerinreiche 576 – Nahrungskarenz 520–522 Extrazellulärdomäne 926 extrazelluläre Matrix (ECM) – Abbau 736–737 – – Matrix-Metalloproteinasen 1156 – Apoptose 730 – Axotomie 1047 – Glycoproteine 548 – Hyaluronsäure 550 – Knochen 738 – Knorpel 737–738 – Polysaccharide 22 – Proteoglykane 30 – Tumorzellen, Wechselwirkungen 1156

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1194

Anhang

extrazelluläre Matrix (ECM) – Zelladhäsion 730 – Zelldifferenzierung 730 – Zellfunktion 730 – Zellproliferation 730 – Zellwanderung 730 – Zusammensetzung 716 extrazelluläre Wirkung, Toxine, bakterielle 206 extrazelluläres Kompartiment, isoliertes, Knochenabbau 743 Extrazellulärflüssigkeit – pH-Wert 14 – Wasserhaushalt, Körper 918 Extrazellulärmasse 638 Extrazellulärraum 917 – Calcium, Einstrom 931 – Kohlendioxid/Hydrogencarbonat-Puffersystem 17 – pH-Wert 943 – Protonen, Verteilung 943–944 – Wasserstoffionenkonzentration 14 Extrazellulärvolumen, Angiotensin II 911 Exzitotoxizität – Glutamatrezeptoren, ionotrope 1039 – Schädel-Hirn-Trauma 1028 – Schlaganfall 1028

F F0, Virusaufnahme, Fusionierung 334 F1, Virusaufnahme, Fusionierung 334 F1-ATP-Synthase, Mitochondrien 208 (F) F1/F0-ATPase 183 F1/F0-ATP-Synthase 500–501 FABPPM (fatty acid binding protein PM) 403 Fabry-Syndrom, β-Galactosidase, Defekt 580 facioscapulohumerale Dystrophie 1018 FACIT-Kollagene (fibril associated collagens with interrupted triple helices) 721–722 FACS(fluorescence activated cell sorting)-Analyse – Antiseren 1127 – Rezeptorexpression, Messung 804 FAD (Flavinadenindinucleotid) 111, 145, 483, 681, 700 – Cirtratzylus 482 FADD (Fas associated protein with a death domain) 792–793 Fadenwurm 790 FADH2 498 – Fettsäuren 408 – β-Oxidation 407–408

– Oxidation 634 – Wasserstoff, Reduktionsäquivalent 491 FAD-Synthetase 700 Faeces, Ballaststoffe 651 Fänger, Hefe-Zwei-HybridSystem 249 Fängerzellen, Hepatozyten 1085 FAICAR (5-Formamidoimidazol4-carboxamid-ribonucleotid), Purinbiosynthese 587 (F), 588 FAK (focal-adhesion-Kinase) 735 F-Aktin(-Filamente) 211–214 – G-Aktin-Untereinheiten 211–214 Faktor I 985, 993 Faktor II 985 Faktor III 985 Faktor IV 985 Faktor IVa 985 Faktor V 981, 984–985 Faktor Va 985 Faktor VII 984–985 – Gla-Domänen 984 – Vitamin-K-Abhängigkeit 695 Faktor-VII-Rezeptor 984 – Blutgerinnung 982 Faktor VIII 980, 984–985 – Aufbau 989 (F) Faktor-VIII-Gen 989 (F) Faktor-VIII-Mangel, Hämophilie A 988–992 Faktor VIIIa 981 Faktor IX 981, 984–985 – Gla-Domänen 984 – Vitamin-K-Abhängigkeit 695 Faktor IXa 981, 985 Faktor X 981, 984–985 – Gla-Domänen 984 – Vitamin-K-Abhängigkeit 695 Faktor-X-Mangel 990 Faktor Xa 981, 985 Faktor XI 984–985 Faktor XIa 985 Faktor XII 981, 985 Faktor XIIa 985 Faktor XIII 983, 985 – Thrombozyten 977 Faktor XIIIa 983 FAK-Weg, Aktivierung, Fusionsproteine 1154 β-Faltblattstruktur 71, 73 (F), 574 – amphipathische, LDL 575 – Immunglobuline 1119 – Membranen 178 – Myoglobin 80, 89 – Proteine 73–74 – Transmembrandomänen 41 – Verteilung 75 Faltung, Proteine 77, 88–89, 288, 302 Faltungscode, Proteine 87 Faltungsdefekte – Proteine, nicht-glycosylierte 322 – – Reglycosylierung 306

Faltungstopologie – Genomik, strukturelle 76–77 – Proteine 57, 76 Faltungstrichter (folding funnel), Proteine 87 familial isolated vitamin-E deficiency (FIVE) 694 Fanconi-Anämie 237 FAP (familiäre adenomatöse Polyposis) 1150–1152 – APC-mRNA 1151 Faraday-Konstante 180 Farnesoid-X-Rezeptor (FXR), canaliculäre Membran 1097 Farnesylierung – H-Ras-Proto-Onkoprotein 311 – Proteine 311, 772 Farnesylpyrophosphat – Isopren, aktives, Biosynthese 567 – Squalen, Biosynthese 566 Farnesylpyrophosphatsynthase, Inhibition, Bisphosphonate 747 Farnesylreste, Proteine 310 Farnesyltransferasen, Hemmstoffe 311 Fas (CD95, Apo-1) 792 – Apoptose, Induktion 1116 – Apoptose-Rezeptor 1116 faserverstärktes Gel, Knorpelmatrix 738 Fas-Ligand (FasL) 792, 1116– 1117 Fas-Rezeptor 226 FAT (fatty acid translocase) 403 FATP (fatty acid transport protein) 401–402, 517, 1071 F-ATPasen 183, 401 fatty acid binding protein PM (FABPPM) 403 fatty acid translocase 7 FAT fatty acid transport protein 7 FATP Fc-Fragment, Immunglobuline 1118 Fc-Rezeptoren 868 Fc-Teile, Immunkomplexe, Zellen 1098 FDZ (follikuläre dendritische Zellen) 1126 feedback inhibition, TGFβ-Signaltransduktion 790 feedback inhibition-Proteine 796 feedback regulation, Cyclin B1/ cdk1-Komplex 222 feedback system, Hypothalamus 848 Fehlgeburten, Cadmium 677 Fenton-Reaktion 658 Ferredoxin 508 Ferrireduktase 660, 662 – downregulation, Dcytb/DMT1 660 Ferritin 659, 663 – Eisengehalt/-speicher 663

– Speicherung 660, 663 Ferrochelatase – Eisenabbau in Protoporphyrin 611 – Hämbiosynthese 610 – Mangel 618 Ferrooxidase I 664, 667–668 – Funktion/Pathobiochemie 992 – Kupferstoffwechsel 664 Ferrooxidase II 664 Ferroportin 660 – Eisenexport, zellulärer 660 – Genmutation 666 – Hemmung 662 Ferroportin/Hepcidin-Komplex 662 Fertilitätsstörungen, Manganmangel 673 Festkörpersynthesetechnik, Peptide 93 α-Fetoprotein (AFP) 995 – Funktion/Pathobiochemie 992 – Synthese in der Leber 1088 – Tumormarker 1159 Fettanteil, Muttermilch 1025 Fettaufnahme, tägliche 648 Fettdepot, viszerales, Vergrößerung, Typ-2-Diabetes mellitus 834 Fette, energetisches Äquivalent 637 Fettemulsionen, Ernährung, künstliche 653 fettfreie Körpermasse (lean body mass) 430, 638 Fettgewebe – braunes 520 – – β3-(Adreno-)Rezeptoren 504, 830 – – Glycerokinase 520 – – Körpertemperatur 520 – – Thermogenese 504, 520 – – uncoupling protein 1 (UDP1) 634, 857 – – Winterschläfer 520 – endokrines Organ 520 – Energiespeicherung 518–519 – Glucagon 825 – Hexosemonophosphat-Weg 368 – Hormone, sezernierte 524 – Insulin 819 – insulinantagonistische Hormone 528 – Insulinempfindlichkeit 817 – Leptin 523–524 – Leptinrezeptoren 523 – Lipase, hormonsensitive 399 – Lipolyse 521 – – gesteigerte 522 – – Nervensystem, sympathisches 528 – – Noradrenalin 528 – Lipoproteinlipase 401

1195 Sachverzeichnis

– – – – – –

Plasmafettsäuren 520 Triacylglycerine 398, 518, 520 – Biosynthese 519 – Speicherung 520 Triacylglycerin-Lipase 399 (F) Typ-1-Diabetes mellitus 832–833 – Typ-2-Diabetes mellitus 835 – Vitamin E 692 Fettleber 425 – Ethanolstoffwechsel, Leber 1100 Fettresorptionsstörungen 649 – Gallensäurekonzentration, intestinale 1077 – Gallensäuremangel 1077 Fettsäurealdehyd, Plasmalogene 36 Fettsäurebiosynthese – Acetyl-CoA 519, 704 – Acetyl-CoA-Carboxylase 416–417 – Citratzyklus 486 – Fettsäuresynthase 410 – Glycolyse, Wechselbeziehungen 413 (F) – Kohlenstoff, Herkunft 413–414 – Multienzymkomplex 410 – Regulation 417 (F) – Substrate, Citratzyklus 412 – – Glycolyse 412 – Wasserstoff, Herkunft 412–413 Fettsäurederivate, Hydroxylierung 508 Fettsäure-Desaturasen 418, 570 Fettsäure-Elongasen 570 Fettsäuren 32–35, 401, 441, 1071 – ω-3-Fettsäuren 34, 648 – ω-6-Fettsäuren 34, 648 – Abbau 403–408 – – Regulation 416–418 – Aktivierung 404 – Aufnahme, Carrier-vermittelte 402 – – durch die Leber 517 – biologische Wirksamkeit 34 – Carboxylgruppe 33 – cis-Konfiguration 407, 649 – de-novo-Biosynthese 647 – Diffusion 401 – Doppelbindungen 33 – einfach ungesättigte 34 – Energiebedarf, Skelettmuskulatur 532 – Energiebilanz, negative 640 – Energiegewinnung, Niere 910 – essentielle 34, 418–419, 1070 – – Mangel 425 – – Stoffwechsel 648 – freie 33 – – Carnitin-Acyl-CarrierSystem 648 – – Genexpression, PPAR 649 – Freisetzung, Stress 636 – gesättigte 34 – – Acylierung 310

– – Biosynthese 410–414 – Kohlenwasserstoffkette 33 – Konzentration, Katecholamine 829 – langkettige, Biosynthese 411 (F) – – Carnitin-Acyltransferase-1 416 – – Fettemulsionen 653 – – gesättigte 648 – – – Fettsäuresynthase 418 – – Kettenverlängerungssystem 419 – – Transport, Carnitin 406 – Leber 521 – Lipolyse 400 – mehrfach ungesättigte 648 – – Sauerstoffspezies, reaktive 510 – mittelkettige, Fettemulsionen 653 – – Stoffwechsel 648 – Nahrungsaufnahme, afferente Signale 642 – nichtveresterte, Serumkonzentrationen 572 – Niere, Energiegewinnung 910 – nutritive Bedeutung 648 – β-Oxidation 403–406, 484, 517 – – Energieausbeute 407 – – FADH2 407–408 – – Matrixraum, mitochondrialer 405 – – NADH/H+ 407–408 – – Nahrungskarenz 529 – – Niere, Energiegewinnung 910 – – peroxisomale 204, 408 – – Regulation 417 (F) – ω-phenylierte 403–404 – Resorption 1071 – Reveresterung 518 – – Triacylglycerine 1071 – Skelettmuskulatur 521, 529 – – Nahrungskarenz 529 – Stoffwechsel 403–414 – synthetisierte, Abspaltung und Aktivierung 411 – trans-Konfiguration 407, 649 – Transkriptionsfaktoren 649 – ungeradzahlige, Abbau, Propionyl-CoA 406 – ungesättigte 33–34, 418–425 – – Biosynthese 418–420 – – – Desaturasen 418, 419 (F) – – Doppelbindungen 33 – – Mangel, SREBP-1a, Aktivierung 570 – – β-Oxidation 408 – – Stoffwechsel 648 Fettsäureoxidation – Acetyl-CoA 485, 522 – Alkoholkonsum 1099 – Citrat 522 – gesteigerte 485

– – – – –

– Glucoseaufnahme 521 – Glycolyse 521 Leber, Nahrungskarenz 521 Peroxisomen 408 Resorptions-/Hungerphase 521, 1086 – Skelettmuskulatur 521 – Transportproteine 494 Fettsäurestoffwechsel, Regulation 414–418 Fettsäuresynthase 410, 412 (F), 417, 570 – dimere 110 – Fettsäurebiosynthese 410, 418 – Glucagon 418 – Induktion 647 – Insulin 417, 819 – Katecholamine 418 – Lipogenese 517 – Teilreaktionen 410 Fettsäuresynthese – Alkoholkonsum 1099 – Insulin 818 – Pyruvatdehydrogenase 416 – Regulation 416–418 Fettsäuretranslokase (FAT) 403 Fettsäuretransportprotein 7 FATP Fettstoffwechsel – Citratzyklus 478 – Erkrankungen 1018 – Insulin 523 – PPAR-Isoformen 649–650 Fettstühle 1071, 1077 Fettsucht 7 Adipositas Fettverdauung, Gallensäuren 1061 Fettzellen – cAMP-Konzentration, Senkung, Insulin 819 – Caveolae 821 – Glucosetransport 180 – gynoide 528 – Insulin 818 – metabolische Aktivitäten 519 – α2-Rezeptoren 528 FGAM (Formylglycinamidinribonucleotid), Purinbiosynthese 587 (F) FGAM-Synthetase, IMP-Biosynthese 589 FGAR (Formylglycinamidribonucleotid), Purinbiosynthese 587 (F), 588 FGF (fibroblast growth factor) 180, 225, 729, 759, 786, 1143–1144 – Chodrozytenproliferation 741 – Knorpel-/Knochenentwicklung 740, 742 – Myosin 1006 – Wachstumsfuge 741 FGF-Rezeptoren (FGFRs) – Knorpel-/Knochenentwicklung 740 – Mutationen, Kraniosynostose 740

E–F

– Tyrosinkinase-Aktivität 729 FG-repeats, Nucleoporine 189 Fibrate, Carnitin-Acyltransferase 416 fibril associated collagens with interrupted triple helices 7 FACIT-Kollagene fibrilläre Kollagene 716–722 Fibrillärproteine 56 Fibrillen – Keratine 748 – Periodizität, Kollagene, fibrilläre 717 Fibrillin 726–727 – Elastin 724 – Mutation, Hauterkrankungen 752 Fibrin – Abbau 987 – Bindungen, nichtcovalente 983 – Polymerisation 983 (F) Fibrinmonomere – Blutgerinnung 983 – Lysyl- und Glutaminylreste, covalente Bindung 984 (F) Fibrinogen 56, 985 – Adipositas 640 – Akutphase-Proteine 1089 – Blutgerinnung 981 – DNA-Sequenz 981 – Funktion/Pathobiochemie 993 – als Glycoproteine 27 – Immunantwort 1134 – Konzentration, Leber 1089 – Polymerisation 984 (F) – Synthese in der Leber 1088 – Wasserstoffbrücken 983 Fibrinogendimer 982 (F) Fibrinogenpeptide A/B 983 Fibrinogenrezeptor – Blutstillung, zelluläre 980 – RGD-Domäne, Blutstillung, zelluläre 980 – Thrombozyten, Adhäsion 980 Fibrinolyse 133, 979, 987–988 – Herzinfarkt 385 – Plasmaproteine 996 – Synthese in der Leber 1088 fibrinolytische Aktivität, Menstruationsblut 883 fibrinolytische Systeme 979 Fibrinspaltprodukte, Fibrinabbau 987 Fibrin-stabilisierender Faktor (FSF) 985 – Mangel 985 – Thrombozyten 977 fibroblast growth factor 7 FGF fibroblast growth factor receptor 7 FGF-Rezeptoren Fibroblasten 716 – Integrin-Rezeptor 721 – Kollagen-Gele, Kontraktion 721

1196

Anhang

Fibroblasten-Kollagenase 737 Fibroblasten-Wachstumsfaktor 7 FGF fibröse Netzwerke, Dermis 749 Fibromodulin 728 Fibronectin 317, 730–732 – Axotomie 1047 – Basalmembran, Glomerulus 896 – Blutstillung, zelluläre 980 – Haut 751 – Knochen 738 – Tumorzelloberflächenrezeptoren 1156 – Typ-III-Domänen, Cytokine 770 Fibronectin-Gen, Inaktivierung 732 Fibronectinrezeptor, Blutstillung, zelluläre 980 Fibrose/Fibrosierung – Alkoholkonsum, chronischer 1100 – interstitielle, Myofibrillenstruktur, ungeordnete 1020 Fibrozyten 716 Fibuline 724 FIC 1 (familiar intrahepatic cholestasis), canaliculäre Membran 1097 Fieber 800 Fieberkrämpfe, Epilepsie 1032 Figlu, Histidinabbau 474 (F), 475 Filaggrin, Keratin-Intermediärfilamente, Differenzierung 748 Filamente – dicke, Cytoskelett 207, 213 – – Muskelkontraktion 1010 – – Myosin 1004 – dünne 211–214 – – Aktin 1006–1007 – – Cytoskelett 207, 213 – – Muskelkontraktion 1010 – Fibrillin 726 – intermediäre 214 – – Cytoskelett 207, 213 Filamin 213 Filopodien 212, 735 – Streckung, Aktin 213 Filoviridae 328 Filtration, Glomerulus/Niere 895–896 Filtrationsbarriere, Proteoglykane 727 Fimbrin 212–213 first messenger 767, 769 – Adenylatcyclase-System 780 Fischer, Edmund 381 Fischschuppenkrankheit 751 FIVE (familial isolated vitamin E deficiency) 694 FK506, Transplantatabstoßung 1139 FK506-bindende Proteine (FKBP) 303 Flagellen 211

Flavinadenindinucleotid 7 FAD Flavinmononucleotid 7 FMN Flaviviridae 328 Flavodoxin, Proteinstrukturen 77 Flavoenzyme, Molybdän 671 Flavoproteine 700 Fleischvergiftungen 1036 Fleming, Alexander 551 Flexibilität – Elastin 724, 726 – konformative, Enzyme 109 Fließgleichgewicht (steady state), Enzym-Substrat-Komplex 122 Flimmerepithel 211 (F) Flippasen 546, 563 Floppasen 183, 563 Flotation(skoeffizient), Proteine 65 Flotilline 43 flüssig geordnet (lo, liquidordered), Mikrodomänen, Membranlipide 177 flüssig ungeordnet (ld, liquiddisordered), Mikrodomänen, Membranlipide 177 Flüssigkeit – Ausscheidung, Nieren 12 – Pinocytose 195 – transzelluläre 917 Fluidität, Lipiddoppelschichten 41 Fluor 4 – Gesamtbestand 656 – Plasmaspiegel 656 Fluoracetat 485 Fluorcitrat 485 Fluordesoxyglucose-(FDG-)Methode, Tumorgewebe, Stoffwechsel 1159 fluorescence-activated cell sorting (FACS)-Analyse, Antiseren 1127 Fluoreszenz, Porphyrine 616 Fluoreszenzmikroskopie 174 Fluorhydroxylapatit 674 Fluorid 673–675 – Karies 673–674 – Osteoporose 674 Fluormalat 485 9α-Fluor-16α-methylprednisolon 868 (F) Fluorochrome, Antikörper, monoklonale 1128 Fluorose 674 Fluorosteroide 673 (5-)Fluorouracil 595 (F)–596 (F) – Krebstherapie 1160 – Thymidylatsynthase-Hemmung 134 5‘-Fluoro-d-Uridin 595 (F) Fluoroxalacetat 485 Fluoxetin 1038 Flutamid – Antiandrogene 877 – Hämolyse 968

FMN (Flavinmononucleotid) 111, 681, 700 – NADH:Ubichinon-Oxidoreduktase 497 – Standardpotential 103 FMNH2, Standardpotential 103 fms-Onkogen 1143 focal-adhesion-Kinase (FAK) 735 Fokal-Kontakte (focal adhesion) – Aktin 213 – Aktinfilamente 212 – Integrine 735 Fokussierung, isoelektrische (IEF) 63 Folat 7 Folsäure Folatreduktase, Tetrahydrofolat, Bildung 707 Follikel, Schilddrüse 850 Follikelphase, Menstruationszyklus, FSH 879 Follikelstimulierendes Hormon 7 FSH follikuläre dendritische Zellen (FDZ) 1126 Follistatin 872–873 Follitropin 7 FSH Folsäure 681–682, 707–709 – biochemische Tests 682 – C1-Gruppen, Übertragung 707, 708 (F) – Coenzym 111 – Inhibitoren, Sulfonamide 125 – Mangel 709 – – Histidinbelastungstest 475, 709 – SLC 19A1-Transporter 707 – Speicherung in der Leber 1089–1090 – Stoffwechsel, Thyminnucleotid, Biosynthese 593 – Tetrahydrofolat, Bildung 707 (F) Folsäureantagonisten 709 – Tumorerkrankungen 682 5-Formamidoimidazol-4-carboxamidribonucleotid 7 FAICAR Formiat (FH4) 4, 708 (F) Formylglycinamidin-Ribonucleotid 7 FGAM Formylglycinamid-Ribonucleotid 7 FGAR Foscarnet 352 fos-Onkogen 1115, 1143 FoxO 530 – Nahrungskarenz 530 FoxO-1 – Hämbiosynthese, Regulation 612 – Muskelaufbau/-abbau 1016–1017 Foxp3 1112 Fractalkin (CX3CL1) 759 Franklin, Rosalind 147 freeze-fracturing 174 – gap junction 181 Fremd-DNA 241

– Aufnahme, Plasmide 243 Fremdstoffe, Hydroxylierung, Monooxygenasen, unspezifische 508 Fructokinase, Fructosestoffwechsel 364–365 Fructose 358, 364, 365 (F), 646 – Abbau 364 – β-D-Fructose 23 (F) – Phosphorylierung, ATP-abhängige 364 – Resorption 1069 – – GLUT5 906, 1070 – Stoffwechsel 358–365, 544 – Synthese, extrahepatische 365 – Wasserresorption 1074 Fructose-1,6-bisphosphat 361 (F) – Glucose-Fettsäurezyklus 522 – Glycolyse 359, 360 (F), 390 Fructose-1,6-Bisphosphataldolase 360, 361 (F) Fructose-1,6-Bisphosphatase 387 – Gluconeogenese 387–388, 391–392 – Hemmung durch Insulin 820 Fructose-1-phosphat, Fructosestoffwechsel 364, 365 (F) Fructose-2,6-bisphosphat 389 – Abbau 389, 390 (F) – Bildung 389, 390 (F) – Biosynthese 389 – cAMP-Abbau 819 – Gluconeogenese 391 – – Regulation 389 – Glycolyse, Regulation 389 – hormonelle Regulation, Leber 390 – Phosphofructokinase-1 (PFK-1) 388–389 Fructose-2,6-Bisphosphatase 389 – Glycolyse 387 – Insulinbiosynthese 819 – Leber 390 Fructose-6-phosphat 544 – Aminozucker, Biosynthese 544–545 – Enthalpie, freie 105 – Fettsäurebiosynthese 413 – Glucose-Fettsäurezyklus 522 – Glycolyse 359, 360 (F) – Hexosemonophosphat-Weg 365, 366 (F)–367 (F) – Phosphofructokinase-1 (PFK-1) 388 Fructose-6-phosphat-1-Kinase 7 Phosphofructokinase-1 (PFK-1) Fructose-6-phosphat-2-Kinase 386, 389–390 – Glycolyse 387 – Nahrungskarenz 527 – Phosphorylierung, AMPabhängige Proteinkinase, Aktivierung 527 – – cAMP-Konzentration, niedrige 819

1197 Sachverzeichnis

Fructoseintoleranz – Aldolase-B-Mangel 395 – hereditäre 395 Fructosestoffwechsel, Leber 365 Fructose-Transporter – GLUT 5 376 – GLUT 11 376 Früherkennung, Tumoren 1159–1160 Frühgeborene – Hypoglykämie 393 – Ikterus, Glucuronyltransferase, Mangel 393 FSF 7 Fibrin-stabilisierender Faktor FSH (Follikel-stimulierendes Hormon, Follitropin) 844–846, 849, 871–872 – Follikelphase, Menstruationszyklus 879 – G-Protein, Aktivierung 780 – Halbwertszeit 849 – Konzentration bei der Frau 878 – Menstruationszyklus 878, 880 – – Follikelphase 879 – Sertoli-Zellen 876 – – Stimulation 875 – Spermiogenese 876 FSH-Dystrophie 1018 Fucose 540, 543–544 – Biosynthese 543–544 Führungsstrang (Leitstrang, leading strand), DNA-Replikation 233–234 Fumarase 484 – Citratzyklus 480 Fumarat 440–441, 443, 480 (F), 484 – Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 468 – Aminosäurestoffwechsel 432 – Aspartatzyklus 448 – Gluconeogenese 448 – Harnstoffzyklus 446 (F), 448 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 – Purinnucleotidzyklus 597 – Schicksal 448 – Standardpotential 103 – Tyrosinabbau 471 (F) Fumarylacetacetat, Tyrosinabbau 471 (F) Fumarylacetacetat-Hydrolase, Tyrosinabbau 471 (F) funktionelle Gruppen 5 Funktionsproteine 56 Furin 309, 320 Fusidinsäure, Proteinbiosynthese, Hemmung 299 Fusionierung, Virusmembran 334 Fusionsgene, Entstehung, Translokationen 1154–1155 Fusionsprotein, Proteinsynthese, gentechnische 93

Fyn 1115 – B-Zell-Aktivierung 1126

G ΔG 102–103, 107 – Diffusion, erleichterte 179 – Membrantransport 179 ΔG0 102, 105 ΔG0‘ 102 – Gluconeogenese 372 G0-Phase, Zellzyklus 221 G1-/G2-Kontrollpunkt, Zellzyklus 221 G1-/G2-Phase, Zellzyklus 221 Gα-interacting proteins (GAIP) 806 GAB 2, Prolactinrezeptor, Tyrosinreste 888 GABA (7a. γ-Aminobutyrat) 49 (F), 438, 615 (F), 759 (F), 765, 1037–1038, 1040–1042 – Methionin, Abbau 463 (F) – Nahrungsaufnahme, hemmende Wirkung 643 – – stimulierende Wirkung 643 – Plasmakonzentration 445 – Stoffwechselbedeutung 454 – TRH-Freisetzung 847 – Vorkommen 615 (F) – ZNS 453, 1025 GABAA-Rezeptoren 765 – Alkohol 615, 1041 – Anästhetika 1041 – Anionenkanäle, ligandengesteuerte 1040 – Barbiturate 1041 – ionotrope 1037 GABAB-Rezeptoren – Adenylatcyclase 1040 – Phosphoinositolstoffwechsel 1040 GABAC-Rezeptoren, Anionenkanäle, ligandengesteuerte 1040 GABA-Nebenweg 1025 GABA-Rezeptoren 73 GABA-Shunt 1025, 1041 GABA-Transporter 1037 Gärung, alkoholische 358 GAF (γ-interferon activated factor) 798 GAG, HIV 336 gag-Proteine 310 – HIV 337 GaINAc-4-Sulfatase, Defekte 200 G-Aktin 212 (F), 1006 – UUntereinheiten, F-AktinFilamente 211–214 GAL4, Hefe-Zwei-Hybrid-System 249 GAL4-DNA-Bindedomäne/-Transaktivierungsdomäne, HefeZwei-Hybrid-System 249

Galactitol 543 Galactokinase, Defekt 543 Galactosämie 543 – Galactokinase-Mangel 395 – Galactose-1-phosphat-Uridyltransferase-Defekt 395 Galactosamin 24 Galactose 23 (F), 28–29, 32, 358, 540, 542 – Biosynthese 543 – Cerebroside 38 – Phosphorylierung 542 – Resorption, tubuläre 906 – Stoffwechsel 542–543 – Transport, SGLT-1 1069 – Wasserresorption 1074 Galactose-1-phosphat 542 Galactose-1-phosphat-Uridyltransferase 542 – Defekt/Mangel 395, 543 – – Galactosämie 395 β-Galactosidase – Defekt, Angiokeratoma corporis diffusum 580 – – Fabry-Syndrom 580 – – Gangliosidose, generalisierte 580 Galactosyl-Ceramid, Cerebrosid, Biosynthese 561 (F) Galactosylcerebrosid 38 (F) (α-)Galactosyltransferase 542, 966 (F) Galanin 643, 844 galanin-like peptide (GALP) 844 Galle 1060–1062 – Gallensäuren 1061 – lithogene 1061 – Lösungsvermittler 1061 – Mizellenbildung 1060 – Sekretion, Choleretica 1066 – – gallensäureabhängige 1096 – – tägliche 1061 Gallebildung 185, 1096–1097 – Cholangiozyten 1098 – Gallensäuren 1066 – hepatozelluläre Transportsysteme 1097 – Hepatozyten 1096–1097 – Störungen 1101 Gallenfarbstoffe – Erythrozytenabbau 955 – Gallensteine 1101 – Hämabbau 621–624 Gallengangsfisteln 1061 Gallensäuren 32, 1059 – Aktivierung 1061 – Ausscheidung 1061 – Bildung 1060 (F) – Cholesterinbiosynthese 39, 568, 1061 – – Hemmung 569 – Cholesterinsteine 1101 – Duodenalinhalt 1061 – enterohepatischer Kreislauf 1061, 1066 – Fettverdauung 1061

F–G

– Gallenbildung 1066 – Gallenflüssigkeit 1061 – Isopren, aktives, Biosynthese 567 – Konzentration, intestinale, Fettresorptionsstörungen 1077 – Lipidresorption 1061 – Mangel, Fettresorptionsstörungen 1077 – Peroxisomen 205 – Rückresorption, Ileum 1061 – Synthese 508 – – Leber 1061 Gallensäurenkonjugate, Bildung 1060 (F) Gallensteine 1061, 1101–1102 – Adipositas 640 Gallenwegserkrankungen, Pankreatitis, akute 1067 GalNAc (N-Acetyl-D-galactosamin) 966 (F) GALP (galanin-like peptide) 844 Gammopathien – monoklonale 994, 999 – polyklonale 998 Ganciclovir 350 (F), 351 Ganglioside 38, 561, 564 – Biosynthese 559, 560 (F) – GM-1 39 (F) Gangliosidose, generalisierte, β-Galactosidase, Defekt 580 GAP (GnRH-assoziiertes Peptid) 870 GAP (GTPase activating protein) 296, 526, 773, 806, 1144 gap junctions 180 – Connexine 180 – Defekte 186 – freeze fracture-elektronenmikroskopische Aufnahme 181 – Koppelung, elektrische 180 – Myokard 180 – Synapsen 180, 1034 GAP-Protein (GTPase activating protein) 192, 1144 – Bindung, Ras, Inaktivierung 1144 Gap-Region 729 GAR (Glycinamidribonucleotid), Purinbiosynthese 587 (F) GAR-Synthetase, IMP-Biosynthese 589 GART-Gen 589 GAR-Transformylase, IMP-Biosynthese 589 Gas-6-Protein, Vitamin-K-Abhängigkeit 695 Gastricin 1056–1057 gastric-insulinotropic peptide 7 GIP (gastroinhibitorisches Peptid) Gastrin 1063 – Halbwertszeit 849 – Salzsäureproduktion, Steigerung 1067 – Salzsäuresekretion 1063

1198

Anhang

gastrin releasing peptide (GRP) 1064 Gastrinrezeptoren 1064 Gastrinzellen (G-Zellen) 1063 Gastritis, Helicobacter pylori 1067 Gastroenteropathie, exsudative 991 gastroinhibitorisches Peptid 7 GIP gastrointestinale Sekrete 1054–1068 – Regulation 1062–1063 Gastrointestinaltrakt 1053–1081 Gastrostomie, perkutane endoskopische (PEG) 653 GATA-2 – Muskelaufbau/-abbau 1017 – Skelettmuskel 1016 GATA-4 – Herzmuskel 1016 – Muskelaufbau/-abbau 1017 gating, Ionenkanäle 1030 Gaucher-Krankheit 200, 206, 580 – enzyme replacement therapy (ERT) 206 – (β-)Glucocerebrosidase, Defekt/Mangel 580 GC-Box – house keeping gene 262 – Thymidinkinasepromotor 261 Gc-Globulin – Funktion/Pathobiochemie 992 – Immunelektrophorese 995 G-CSF (granulocyte colony stimulating factor) 759, 953 GDI (guanine-nucleotide dissociation inhibitor) 782 GDNF (glial-cell line-derived neurotrophic factor) 1051 – Sertoli-Zellen 876 GDP-Fucose 544 (F) – Biosynthese 544 – Blutgruppensubstanzen, antigene Determinanten, Biosynthese 966 (F) GDP-Mannose 544 (F) – Biosynthese 544 Geburtsvorgang, Oxytocin 890 Gedächtniszellen 1110, 1126–1127 GEF (guanine nucleotide exchange factor) 192, 735, 779 – Aktivierung durch cAMP 782 – Proteinbiosynthese, Initiation 300 GEF (guanine-nucleotide exchange factor) – Geranylgeranylreste 193 – Myristoylreste 193 Gefäßwiderstand, peripherer, T3 857 Gefrierpunkt, Wasser 12

Gefrierpunktserniedrigung, Lösungen, osmotisches Verhalten 12 Gehirn – 7 Hirn... – Dimethylquecksilber 677 – Durchblutung 1024 – Energiebilanz 643 – Energiestoffwechsel 1024 – Erythropoietin 912 – GLP-1 823 – GLP-2 823 – Glucosezufuhr 1024 – Glutamin 444 – Hungerzustand 1024–1025 – Kupferablagerung 670 – Leptinrezeptoren 642 – PTHrP 936 – Sauerstoffverbrauch 1024 – Stoffwechsel 1024–1029 – – Aminosäuren 1025 Geißeln 211 – Defekte 214 Gelatinasen 737 Gelcharakter, Kollagen Typ V 738 Gelchromatographie, Proteine 60 Gelelektrophorese – Proteine, Molekülmassebestimmung 62 – zweidimensionale 63–64 Gelenkregion, Guanylatcyclasen 802 Gell-Coombs-Einteilung, Allergien 1137 Gelsolin 213, 974 Genausschaltung – Rekombination, homologe 250–251 – RNA-Interferenz 250 Genbanken – genomische, Herstellung 244 (F)–245 (F) – screenen (Durchmustern), Verfahren 246 Gendefekte, Neuropathien, erbliche 1047 Genduplikationen, Hämoglobin 80 Gene – Aktivierung 271–275 – δ-ALA-Synthase 608 – Ausschalten (knock-down), siRNA 250 – bakterielle, inverted repeat 259 – codierte, Genom, humanes 161 – diskontinuierliche Anordnung 266 – eukaryote, DNA-mRNA-Hybridisierung 264 – – Transkription 272 – Funktionsanalyse, grün fluoreszierendes Protein 249 – HLA-Komplex 1107

– Immunglobuline, L-Ketten, Umlagerung 1122 – Inaktivierung 271–275 – Myosinketten 1004 – prokaryote, Transkription 258 – Regulation, Transaktivierung 275 – regulierte, Transkriptionsgeschwindigkeit 257 – Umlagerung, Immunglobuline, H-Ketten 1122 gene rearrangement 1113 genetische Erkrankung, Krebs 1143 genetische Veränderungen, angeborene, Eisen/Kupfer 658 genetischer Code 288–289 – Basentriplett 287 – Degeneriertheit 289 – Konservierung 289 – Leserahmen, offener 289 – Leseraster 288 – missense-Mutation 288 – Mutation, stille 288 – nonsense-Mutation 289 – open reading frame 289 – Universalität 289 – Verschlüsselungsregeln 289 genetischer Fingerabdruck 134 – Tumorgewebe 1146 Genexpression – Glucagonwirkung 825 – HIV 337 – Prokaryoten, Regulation 271 – Regulation, Vitamin A 687 – Viren 335–339 Genistein 883 Genitalkarzinome, Papillomviren 344 Genkarte, Chromosom 21 160 Genom 159 – DNA-Analyse 159 – Exon 160 – Gene, codierte 161 – Hepatitis-B-Virus 338 – humanes 159–162 – Integrität, p53 1149 – Intron 160 – Methylierungsmuster 272 – mitochondriales, OXPHOSSystem, Störungen 512 – Mycoplasma genitalium 159 – nicht codierter Teil 160 – Organisation, HIV 337 – Proteine 160 – Replikation, DNA-Viren, einzelsträngige 337 – – Hepadnaviren 336 – Sequenzierung 159–160 – Transkription 160 – Viren 327 genomic imprinting 272–273 – IGF-2 (insulin-like growth factor 2) 272 Genomik 94–98 – funktionelle 94–95

– – Proteine 64 – strukturelle 76–77, 94–95 – – Faltungstopologie 76–77 Gentechnik/-technologie 241–252 – DNA-Sequenzen, spezifische, Herstellung 244 – Expressionsplasmide 243 – Grundlagenwissenschaften 248–251 – Luciferase-Gen 248 – Promotoren 248 – Proteine 67 – – Struktur-Funktions-Beziehungen 248 – Reportergene 248 – Restriktionsendonucleasen 169 gentechnisch veränderte Organismen (GVOs) 242 Genträger, Porphyrie 618 Genumlagerung (rearrangement) 1105, 1113 – somatische, Antikörpervielfalt 1121 Geranylgeranylreste – GEF-Proteine 193 – Proteine 310–311 Geranylpyrophosphat – Isopren, aktives, Biosynthese 567 – Squalen, Biosynthese 566 Gerinnung 7 Blutgerinnung Geruchsstoffe – G-Protein, Aktivierung 780 – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 783 Gerüst-(scaffold-)Proteine 772 Gesamtblut, Pufferkapazität 945 Gesamteisenmenge, Blutplasma 661 Gesamtenergieumsatz 635 Gesamtkörpereisen 659 Gesamtkörperkalium, Abschätzungen 929 Gesamtproteinkonzentration – Bestimmung 991 – Liquor cerebrospinalis 1028 Gesamtpufferbasenkonzentration 944 geschlossene Systeme – Entropie 101 – Thermodynamik 100 Geschmacksstoffe, G-Protein, Aktivierung 780 Geschwindigkeitskonstanten, enzymkatalysierte Reaktionen 107 Gestagene, Biosynthese 864 Gewebemakrophagen 975 Gewebeplasminogenaktivator, Fibrinolyse 987 Gewebesauerstoffdruck, Erythropoietin 912 gewebespezifische Wirkungen, PPAR-Isoformen 649–650

1199 Sachverzeichnis

Gewebethromboplastin 985 – Blutgerinnung 981, 984 Gewebethromboplastin-Inhibitor, Blutgerinnung 985 Gewebshormone 758–760 – Aminosäuren 518 GFP (green fluorescent protein), Gene, Funktionsanalyse 249 GFR 7 glomeruläre Filtrationsrate GGA-Proteine (Golgi-lokalisierte, gamma-ear-enthaltende ADP-Ribosylierungsfaktorbindende Proteine) 193, 201 GH (growth hormone, Somatotropin) 759, 770, 844–846, 885 – Aktivierung 887 – Alter 886 – Freisetzung 886 – – Tag-Nacht-Rhythmus 885 – Ghrelin 1066 – Halbwertszeit 849 – Knochenwachstum 742 – – postnatales 744 – Knorpel-/Knochenbildung 741 – Mangel 889 – Neugeborene 886 – Phosphatreabsorption 938 – Proteinsynthese 645 – Rezeptoruntereinheit 770 – Sekretion, Ghrelin 886 – – IGF-1/2 886, 888 – – Inhibition, Somatostatin 887 – – Regulation 885–886 – – TRH 850 GH-IGF-Achse 885–890 – Störungen 889 Ghrelin 642, 886, 1066 – GH-Sekretion 885–886 – Kohlenhydratstoffwechsel 886 – Leptin, Antagonist 1066 – Nahrungsaufnahme 642–643 – Neuropeptid Y 886 Ghrelin-Rezeptoren 1066 GH-Rezeptoren 887 – Chondrozyten 744 – Signaltransduktionskaskade, pleiotrope 887 GHRH (growth hormone releasing hormone) 844, 846, 885 – GH-Sekretion, Regulation 885 – IGF-1 888 – Nahrungsaufnahme, stimulierende Wirkung 643 GH-Sekretagogrezeptor (GHSR) 886 Gibbs-Helmholtz-Gleichung 102 Gibbssche freie Enthalpie 102 Gicht 602 – Adipositas 640 – Familien 603 – Hypercholesterinämie 583 – Therapie 906 Giftung, Biotransformation 1093

Gigantismus 889 Gilbert, Walter 170 Gilbert-Syndrom 543, 625–626 Gingipaine 315 GIP (gastoinhibitorisches Peptid) 1063 GIP (gastroinhibitorisches Peptid) 647, 1063, 1066 – Insulinsekretion 815 – Nahrungsaufnahme 643 – – afferente Signale 642 – Vorkommen/Funktion 1063 Gi-Proteine 781 Gla-Domänen 984 glanduläre Hormone 758–760 Glanzmann-Thrombasthenie 206, 988 Gla-Proteine 695 Glargin 816, 817 (F) GLAST 7 Glutamat-AspartatTransporter glatte Muskulatur 7 unter Muskulatur glattes endoplasmatisches Retikulum 190 GLDH 7 Glutamat-Dehydrogenase Gleichgewicht – allosterisches, Enzymaktivität 131 – thermodynamisches 102 Gleichgewichtskonstante 14–15 Gleitmodell, Muskelkontraktion 1010 Gliadine 1078 Gliadin-induzierte Enteropathie/ Sprue 1078, 1080 Gliaprotein, saures, fibrilläres 213 Gliazell-abgeleiteter neurotrophischer Faktor (GDNF) 1051 – Sertoli-Zellen 876 Gliazellen 1045–1047 Glicentin 823 Gliedergürtel-Muskeldystrophie 1018 Glioblastom 740 Globinanteil, Hämoglobin 958 Globingenfamilie 958 Globinpeptidkette, Häm/Myoglobin 80 Globosid, Virusrezeptor 331 Globuline 993, 995 – α1-Globuline 992–993, 995 – α2-Globuline 992–993, 995 – β-Globuline 992–993, 995 – β1-Globuline, Mangan, Bindung 673 – γ-Globuline 993, 995–996 – – Antikörper 995 – – Funktion/Pathobiochemie 993 glomeruläre Filtrationsrate (GFR) 897 – Erhöhung, ANP 926 – Niere, Energieverbrauch 909 – renaler Blutfluss (RBF) 895

– Sicherungsmechanismen 897 Glomerulosclerose, Diabetes mellitus 837 Glomerulus 899 – Aufbau 896, 897 (F) – Basalmembran 896–897 – Filtration nach Ladung bzw. Molekülgröße 896 Glomerulusfilter, Porenradius, effektiver 896 Glossitis, Riboflavinmangel 700 GLP 7 glucagon-like peptide-1/2 Glucagon 758, 760, 823–826 – biologische Wirkungen 825 – Biosynthese 823–825 – Blutcortisolspiegel 825 – Diabetes mellitus 832 – Fettgewebe 825 – Fettsäuresynthase 418 – Freisetzung, Hypoglykämie 825 – Gluconeogenese 392, 636 – Glucosehomöostase 825 – Glucosekonzentration, Abfall 824 – Glycogenolyse 392, 636 – Glycogenstoffwechsel, Regulation 384, 386 – G-Protein, Aktivierung 780 – Halbwertszeit 849 – Harnstoffzyklus 447 – Hemmung, Somatostatin 887 – Kohlenhydratstoffwechsel 651 – Langerhanssche Inseln, α-Zellen 823 – Leber 825 – metabolische Rate 636 – Nahrungsaufnahme, afferente Signale 642 – – hemmende Wirkung 643 – Plasmakonzentration 825 – proteinreiche Mahlzeit 824 – Reifung 823–825 – Sekretion 824 – – Glucose 824 – – Modulation 825 – – Nahrungsaufnahme 824 – Signal, Weiterleitung 825 – Struktur 823 – Wirkungen, extrahepatische 825 – – langfristige 825 – Wirkungsmechanismus, molekularer 825 – Wirkungsverstärkung, Cortisol 867 – α-Zellen, Langerhanssche Inseln 823 glucagon-like peptide-1 (GLP-1) 647, 823–824, 937 – Appetitzentrum, hypothalamisches 824 – Gehirn 823 – Insulinsekretion 815 – Mukosa, intestinale 823 – Nahrungsaufnahme 643

– Sättigungsfaktor 824 glucagon-like peptide-2 (GLP-2) 823 (F) – Gehirn 823 – Mukosa, intestinale 823 – Nährstoffresorption 824 Glucagonrezeptoren 825–826 – Nebennierenrindenzellen 825 – Signalweiterleitung 825, 826 (F) Glucantransferaseaktivität, Glycogenabbau 370 β-Glucocerebrosidase, Defekt, Gaucher-Krankheit 580 Glucocorticoide 322, 384, 530, 759, 867 – Adipositas 640 – Aminosäurestoffwechsel, Muskulatur 453 – Biosynthese 864 – Gluconeogenese 388 – Immunantwort 1133–1134 – Katecholaminbiosynthese 827 – Knochen, Entmineralisierung 745 – Knochenwachstum 742 – Knorpel-/Knochenbildung 741 – Leber 1086 – Lymphozytenfunktion 867 – Mucinsekretion, Hemmung 1064, 1067 – PGHS-2 420 – Phospholipase A2 424 – Proteinbiosynthese im Skelettmuskel 529 – Resistenz, familiäre 869 – Skelettsystem, Homöostase 745 – synthetische 868 – Transkription 276 – Transplantatabstoßung 1139 – TRH-Freisetzung 847 – Tyrosinhydroxylase, Induktion 828 – Wirkungen 867 – – IGF-1 322 – Zinkaufnahme 672 Glucocorticoidrezeptoren 763, 858 – DNA-Bindungsdomäne 277 (F) – green fluorescent protein 249 – Lokalisation, subzelluläre 249 – Osteoblasten 745 – Transkription 276 glucogene Aminosäuren 441, 521, 644 Glucokinase 384, 386, 516, 570, 814 – Gluconeogenese 372 – Glucoseangebot, erhöhtes 379 – Glucose-Phosphorylierung, Hepatozyten 378 – GLUT 2 375 – Glycolyse 359, 364, 387

G

1200

Anhang

Glucokinase – Insulin 378, 818, 820 – Insulinbiosynthese 819 – Konformation, offene und geschlossene 109 (F) – Nahrungskarenz 379 – Umgehung, Gluconeogenese 373 – β-Zellen 814 Glucokinase-Regulatorprotein (GKRP) 378 – Transport, nucleocytoplasmatischer 189 Gluconat 24 (F) Gluconeogenese 365, 372–374, 1024 – Alanin 444 – Aminosäuren, glucogene 518 – Aminosäurestoffwechsel, Nieren 451 – Citratzyklus 487 – Cortisol 866 – Einzelreaktionen 372 – Energiebilanz, negative 640 – Erythrozyten 372 – Fructose-1,6-Bisphosphatase 387 – Fumarat 448 – Glucagon 392, 636 – Glucose, Bereitstellung 646 – Glucose-6-Phosphatase 387 – Glycerin 372 – Insulin 387 – Katecholamine 392 – Lactat 372 – Leber 391, 521, 1086 – Malat 448 – Muskelarbeit 534 – Nahrungskarenz 529 – Nieren 391 – Nierenmark 372 – nutritive Faktoren 386 – Oxalacetat 448 – PEP-Carboxykinase 387, 391 – Pyruvat-Carboxylase 387 – Regulation, allosterische 391–392 – – cAMP 388 – – Fructose-2,6-bisphosphat 389 – – Glucose 388 – – Insulin 388 – – transkriptionelle, koordinierte 388 – renale, Nahrungskarenz 641 – Schlüsselenzyme, Biosynthese, Repression, Insulin 820 – Serinbiosynthese 458 – Skelettmuskel 372 – Transportproteine 494 – Tubulus, proximaler 910 – Typ-1-Diabetes mellitus 833 – Umsatzgeschwindigkeit 386 Gluconolacton 24 (F) Gluconolactonhydrolase 366 Glucosamin 24 (F), 29

– Diabetes mellitus 838 Glucosamin-6-phosphat, Aminozucker, Biosynthese 544–545 Glucose 22, 28, 358–368, 441, 542, 646, 905 – Abbau 358 – – aerober 478 – – anaerober 478 – – – Muskelarbeit 534 – Acetyl-CoA-Carboxylase 417 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Aminosäurestoffwechsel 432 – – Muskulatur 453 – Angebot, erhöhtes, Glucokinase 379 – – GLUT 2 379 – – Insulin 379 – arteriovenöse Differenz 1024 – Aufnahme/Speicherung 516 – Bedarf, täglicher 521 – Blutzucker 522–523, 836–837, 1024 – Durchsatz, Diabetes mellitus 838 – – vermehrter 186 – energetisches Äquivalent 637 – Energiebedarf 520 – – Skelettmuskulatur 532 – Erythrozyten 520, 956 – extrazelluläre 368 – Fettsäurebiosynthese 413, 417 – Filtrierbarkeit, glomeruläre 896 – Freisetzung, hepatische, Typ-2Diabetes mellitus 834 – Glucagonsekretion 824 – Gluconeogenese 391 – – Regulation 388 – Glycogenabbau 371 – Glycolyse 360 (F), 386, 392 – – Regulation 388 – Harnstoffzyklus 448 – Homöostase, Glucagon 825 – Insulinexpression 812 – Kohlenstoffskelett 22 – Konzentrationsabfall, Glucagon 824 – Liquor cerebrospinalis 1028 – Mangel 825 – – Glycogenstoffwechsel, Regulation 386 – Metabolismus, Insulin 818 – Nahrungsaufnahme, afferente Signale 642 – Nahrungszufuhr 522 – Nervengewebe 520 – Nierenmark 520 – de novo Lipogenese 519 – Phosphorylase a, Inaktivierung 381 – Phosphorylierung 516 – – ATP-abhängige, Glycolyse 359 – – Hepatozyten, Glucokinase 378

– Plasma-Phosphatkonzentration, Erniedrigung 938 – Polyolweg 364 – Regulation 375–380 – Resorption 646, 1069 – – GLUT-4 647 – – tubuläre, GLUT2/SGLT1 906 – Skelettmuskulatur 531 – Spiegel 646 – Umsatz, Kontrolle 647 – Urin 915 – Wasserresorption 1074 – Zufuhr, Gehirn 1024 Glucose-1-phosphat 542 – Enthalpie, freie 105 – Glycogenabbau 370–371 – Glycogenbiosynthese 368 Glucose-1-phosphat-UTP-Transferase, Glycogenbiosynthese 369 Glucose-6-phosphat 24 (F), 366 (F), 385, 518, 544 (F) – Bildung 377–380 – – Hepatozyten 379 – – insulinabhängige Gewebe 378 – Decarboxylierung 366 – endoplasmatisches Reticulum 379 – Enthalpie, freie 105 – Fettsäurebiosynthese 413 – Glucose-Fettsäurezyklus 522 – Glucosestoffwechsel 647 – Glycogenbiosynthese 368, 378, 516 – Glycogenstoffwechsel 516 – – Regulation 384, 386 – Glycolyse 359, 360 (F) – Hepatozyten 378 – Hexokinase II 378 – Lebergewebe 378 – Nierengewebe 378 – Oxidation 366 – Phosphorylierung, Erythrozytenstoffwechsel 955 – regulatorische Funktionen 378 – UDP-Glucose, Bildung 369 – UDP-Glucuronsäure, Biosynthese 540–541 – Verwertung 377–380 – – Hepatozyten 379 – – insulinabhängige Gewebe 378 Glucose-6-Phosphatase 384, 387 – Aktivität, Leber 1086 – Gluconeogenese 373, 387–388 – Glycogenstoffwechsel, Regulation 386 – Hemmung 543 – – durch Insulin 820 – Insulinbiosynthese 819 – Mangel, Glucogenose Typ I 395 Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase 136, 366, 956

– Hemmung 543 – Hexosemonophosphat-Weg 365 – Mangel, Malaria 968 – Sauerstoffspezies, reaktive, Entstehung/Abbau 511 Glucoseaufnahme – Diffusion, erleichterte 375 – epileptischer Anfall 1024 – Fettsäureoxidation, gesteigerte 521 – GLUT4 533 – Hirnregionen, PositronenEmissions-Tomographie (PET) 1024 – Muskelzelle, Hemmung, Fettsäureoxidation, gesteigerte 521 – Regulation 375–380 – Typ-2-Diabetes mellitus 834 Glucosebiosensoren – Blutzuckerbestimmung, elektrochemische 136 – Insulinsekretion 814 Glucosecarrier, zerebraler, Defekte 186 Glucose-Fettsäurezyklus 522 (F) Glucose-Galactose-Malabsorption 1077 – Diarrhö 186 – Zuckertransport, Defekte 186 Glucoseintoleranz, Adipositas 640 Glucosekohlenstoff, Citratzyklus 391 Glucoseoxidase 136 Glucoseoxidation, Insulin 636 Glucosestoffwechsel – Glucose-6-phosphat 647 – Glycerin 400 – Hauptwege 359 – Hepatozyten 379 – Insulin 818 Glucosetoleranz – Chrom 675 – gestörte 523 – metabolisches Syndrom 640 Glucosetoleranz-Test, oraler (oGTT) 523 – Diabetes mellitus 814 – Kohlenhydratstoffwechselstörungen 523 Glucosetransport – Epithelzellen, intestinale 185 (F) – Fettzellen 180 – Muskelzellen 180 – Na+-Ionen-abhängiger, Membranen 177 – natriumabhängiger, sekundär aktiver 375 Glucosetransporter 375–377 – 7 GLUT... – Defekt 1077 – Diffusion, erleichterte 183 – Natrium-abhängige 185, 1069

1201 Sachverzeichnis

Glucosetransportproteine 375–377 α-Glucosidase, Defekte 200 Glucosurie 359, 916 – Transportkapazität, maximale 916 – Typ-1-Diabetes mellitus 833 Glucosyl-Ceramid 559 Glucosylrest, Glycogenabbau 370 (F) Glucuronat/Glucuronsäure 29, 542 – α-D-Glucuronat, Derivate 24 – Ascorbinsäuresynthese 541–542 – Epimerisierung 549 – Glycogen, Biosynthese 540 – Pentosesynthese 541 – Uronsäuresynthese 541 Glucuronat-Transferasen 541 β-Glucuronidase, Defekte 200 Glucuronide – Bildung 541 – Biosynthese, UDP-Glucuronat 541 – Biotransformation 1091 Glucuronidierung 541 Glucuronsäure 7 Glucuronat Glulisin 816 GLUT... 7 Glucosetransporter GLUT 1 375–376, 1069 – Blut-Hirn-Schranke 1027 – Membrantopologie 376 (F) – Vitamin C 697 GLUT 2 375–376, 516, 570, 814 – Glucoseangebot, erhöhtes 379 – Glucoseaufnahme 378 – Glucoseresorption, tubuläre 906 – Insulin 818 – Insulinsekretion 815 – Nahrungskarenz 379 – Transportkapazität 375 GLUT 3 375–376 – Vitamin C 697 GLUT 4 375, 519 – AMP-abhängige Proteinkinase, Aktivierung 527 – Glucose, Resorption 647 – Glucoseaufnahme 533 – Insulin 378 – Insulinbiosynthese 818–819 – Insulinsignal, Weiterleitung 821 – Muskelarbeit 533 – Plasmamembran 377 – Skelettmuskel 820 – SNARE-Proteine 194 – Translokation, Insulin 821 – Vesikel, intrazelluläre 377 GLUT 5 376 – Fructose, Resorption 1070 – – – tubuläre 906 GLUT 11 376 GLUT 14 376

Glutamat 45, 47, 49, 432, 438–439, 441–442, 686, 759, 765, 947, 1028, 1037–1039, 1042 – Abbau 454 – Aminosäurestoffwechsel 432, 440 – – Muskulatur 453 – Ammonium-Assimilation 429 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 454 – Darmschleimhaut 451 – Decarboxylierung 1040 – Desaminierung 432 – – dehydrierende 456 – G-Protein, Aktivierung 780 – Harnstoffzyklus 447–448 – Konzentration, Liquor cerebrospinalis 1039 – – synaptischer Spalt 1039 – Mitochondrien 442 – NAD+/NADP+, Biosynthese 701 – Neurotransmitter 1034 – NH4+-Stoffwechsel 454 – – Zonierung 449 – Plasmakonzentration 445 – Resorption, tubuläre 906 – Stoffwechselbedeutung 454–455 – Transaminierung 432 – Tyrosinabbau 471 – ZNS 453, 1025 Glutamat-Aspartat-Transporter (GLAST) – Defekt 450 – Niere 901 Glutamat-Carrier 494 Glutamatdecarboxylase I, Autoantikörper 1041 Glutamat-Dehydrogenase (GLDH) 111, 429, 454–456, 483 – Aktivitätsmessung 136 – Aminierungsreaktion 909 – Aminosäurestoffwechsel, Leber 445 – – Nieren 452 – ATP/ADP-Verhältnis 457 – Desaminierung 435–436 – KM-Wert 457 – Mitochondrien 434 – Mutationen, Hyperinsulinämie 457 – Regulation 456–457 – Zink 672 Glutamatfamilie 459 Glutamatformimino-Transferase, Histidinabbau 474 (F) Glutamat-Glutamin-Zyklus, ZNS 1025 Glutamatpeptidasen 315 Glutamatrezeptoren 686 – ionotrope 1036, 1038–1040 – metabotrope 1039 – Untereinheiten 1037 Glutamat-γ-semialdehyd 459

Glutamatsynthase 429 Glutamin 45, 47, 439, 443–444, 486, 947, 1025 – Abbau, Protonenausscheidung 908 – – Transportproteine 494 – Aminosäurestoffwechsel 432, 440 – – Muskulatur 453 – – Nieren 451 – Aufnahme 444 – Azidose, metabolische 444 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese, Muskulatur 453 – Carboxylierung 943 – Darmschleimhaut 451 – Desaminierung 432 – – Tubulus, proximaler 907–908 – Gehirn 444 – Harnstoffzyklus 448 – Hydrolyse, enzymatische 908 – Leber 445 – Liquor cerebrospinalis 1027–1028 – Mitochondrien 442 – NAD+/NADP+, Biosynthese 701 – NH2-Donor 454 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 – Nieren 444 – Plasmakonzentration 445 – Postresorptions/Hungerphase 1087 – Purinbiosynthese 586, 631 (F) – Stoffwechsel 455–456 – Stoffwechselbedeutung 455 – Synthese, Ammoniakvergiftung 454 – ZNS 453 Glutaminase 456 – Aminosäurestoffwechsel, Nieren 452 – Desaminierung 436 – Hepatozyten, periportale 448 – Mitochondrien 447 – Reaktion 946 Glutamin-Carrier 493–494 Glutamin-PRPP-Amidotransferase – Defekt 603 – IMP-Biosynthese 589 – Nucleosiddi-/-triphosphate, Synthese 589 Glutamin-Synthetase 429, 455–456 – Aminierungsreaktion 909 – hepatische 1087 – Hepatozyten, perivenöse 449 – Leber 1087 – Postresorptions/Hungerphase 1087 Glutaminylcyclase, TRH-Biosynthese/-Freisetzung 847 γ-Glutamyl-Carboxylierung, Vitamin K 696

γ-Glutamylcystein-Synthetase – Cystein, Umwandlungsreaktionen 466 – Proteine, Regulation 694 γ-Glutamylreste, Carboxylierung 696 Glutamylreste, N-terminale 309 γ-Glutamyltransferase/-peptidase (γ-GT) 454–455 – canaliculäre Membran 1097 – Cysteinumwandlung 466 – Leukotrienbiosynthese 423 γ-Glutamylzyklus, Cystein, Umwandlungsreaktionen 466 Glutaryl-CoA 442–443, 943 – Lysinabbau 476 Glutathion (GSH) 465–466, 941 – Antioxidans 465 – Biosynthese 955 – Leukotrienbiosynthese 423 – oxidiertes 956 – reactive oxygen species (ROS) 466 – reduziertes 956 – Standardpotential 103 – Stoffwechselbedeutung 462 Glutathion-Disulfid (GSSG) 466 Glutathion-Insulin-Transhydrogenase, Insulinabbau 816 Glutathionperoxidasen 676 – Lipidperoxide, Eliminierung 676 – Sauerstoffradikale, Entfernung 511 – Sauerstoffspezies, reaktive, Entstehung/Abbau 511 – Selenocystein 299 Glutathionreduktase 956 – Hexosemonophosphat-Weg 368 Glutathion-S-Transferase 511, 1158 – Chemotherapieresistenz 1161 Glutathionsynthetase, Cystein, Umwandlungsreaktionen 466 Glutenunverträglichkeit 1078 Glycane, Modifikation 727 Glycerin 32 – Energiebilanz, negative 640 – freigesetztes, Lipolyse 1087 – Gluconeogenese 372 – Glucosestoffwechsel 400 – Lipolyse 373, 399 (F) – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 (F) – Triacylglycerine, Spaltung/ Resynthese 1072 (F) Glycerin-3-phosphat, Enthalpie, freie 105 Glycerinaldehyd-3-phosphat 364 – Carbonylgruppe 361 – Fructosestoffwechsel 365 (F) – Glucosestoffwechsel 400 (F) – Glycolyse 359, 360 (F), 361, 362 (F)

G

1202

Anhang

Glycerinaldehyd-3-phosphat – Hexosemonophosphat-Weg 366 (F)–367 (F) – Isomerisierung, Glycolyse 361 – Oxidation, Glycolyse 361 Glycerinaldehyd-3-phosphatDehydrogenase 385, 483, 956 – Apoptose 323 – Cysteinylrest 361 – Erythrozytenmembran 956 – Glycolyse 360–361 – Reaktionsmechanismus 361 Glycerinlipide 35–37 Glycerin-3-phosphat 32, 35 – Phosphoglyceride 35 Glycerinphosphorylcholin, Phosphoglyceride, Abbau 558 Glycerinphosphorylcholinesterase, Phosphatidylcholin, Abbau 558 Glycerokinase 373, 400 – Fettgewebe, braunes 520–521 – Glucosestoffwechsel 400 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 – Triacylglycerine, Biosynthese 403 Glyceroneogenese – PEP-Carboxykinase 391 – Pyruvatcarboxylase 391 α-Glycerophosphat 400, 517, 519, 554 – Cardiolipin, Biosynthese 556 – Gluconeogenese 373 – Glucosestoffwechsel 400 (F) – Phosphatidylcholin, Abbau 558 – Phosphoglyceride, Abbau/ Biosynthese 555 (F), 558 – Reveresterungszyklus 518 – Synthese, Alkoholkonsum 1099 – Triacylglycerine, Biosynthese 402 (F), 403 – – Spaltung/Resynthese 1072 (F) Glycerophosphat-Acyltransferase (GPAT) 570 – Lipogenese 415 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 – Triacylglycerine, Biosynthese 402–403 (α-)Glycerophosphat-Dehydrogenase (GPDH) 400, 498 – cytoplasmatische (GPDHC) 498 – Gluconeogenese 373 – Glucosestoffwechsel 400 – mitochondrienmembranassoziierte (GPDHM) 498 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 – Triacylglycerine, Biosynthese 403 α-Glycerophosphat/Dihydroxyacetonphosphat-Carrier 494

Glycerophosphat:Ubichinon-Oxidoreduktase 496, 498 Glycerophosphatzyklus 498 – Amungskette 498 – Glycolyse 364 – Transportproteine 494 Glycin 45 (F), 47, 439, 486, 759, 765, 1028, 1038, 1040–1042 – Abbau 452, 458 – Aminosäurestoffwechsel 440 – – Nieren 451 – Aufnahme, Insulin 820 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 458 – Hämbiosynthese 609 (F) – Neurotransmitter 1034 – Plasmakonzentration 445 – Resorption, tubuläre 906 – Stoffwechsel 457–459 Glycinamidribonucleotid (GAR), Purinbiosynthese 586, 587 (F) Glycinrezeptoren 765 – Anionenkanäle, ligandengesteuerte 1040 – inhibitorischer, Mutationen 1041 Glycin-spaltendes System (GCS) 458 Glycintransporter 1037 Glycirhetin 866 Glycoasparaginase 315 Glycocalix, Podozyten 896 Glycocholsäure, Gallensäuren, Bildung 1060 (F) Glycogen 26, 365, 369 (F)–370 (F), 441, 518, 632 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Biosynthese, Insulin 818 – Energiebedarf, Skelettmuskulatur 532–533 – intrazelluläres 205 – Kettenverlängerung 369 (F) – Kohlenhydrate, Resorption 1069 – Leber 368, 371, 380 – Muskulatur 368 – phosphorolytische Spaltung 370 – Skelettmuskulatur 371 – Speicherung 384–385 – – Leber 521, 1089 – – Skelettmuskulatur 518 Glycogenabbau 7 Glycogenolyse Glycogenbiosynthese 368–370, 382, 516 – Glucose-6-phosphat 378, 516 – Glucuronsäure 540 – indirekte 516 – – Lactat 516 – Insulin 382 – Muskulatur, Typ-1-Diabetes mellitus 833 Glycogenin 312, 369 (F) Glycogenolyse 27, 370–371, 384–385

– Calciumkonzentration, cytosolische 774 – Glucagon 636 – Glycogenabbau 370 – Herzinfarkt 385 – Hydratation 1088 – Leber 1086 – Muskelarbeit 533 – Myokard-Nekrose 385 – Nahrungskarenz 529 – sekretorische Prozesse 774 – Stress 636 Glycogenose – Typ I 395 – – Glucose-6-PhosphataseMangel 395 – Typ II 200 – Typ III 395 – – Amylo-1,6-GlucosidaseMangel 395 – Typ IV 395 – Typ VI, LeberphosphorylaseMangel 395 Glycogenphosphorylase 380–381, 384 – Aktivierung, hormonell induzierte 381 – covalente Modifikation 380 – Glycogenabbau 370 – Glycogenstoffwechsel, Regulation 386 – Mangel 1021 – Phosphorylierung/Dephosphorylierung 132 – Pyridoxalphosphat 704 Glycogenspeicher – Leber 520 – Wiederauffüllung 380 Glycogenstoffwechsel 368–371 – covalente Modifikation 380–382, 384 (F) – Defekte 395 – Glucose-6-phosphat 516 – Regulation 132, 380–386 Glycogensynthase – Aktivierung, Insulin 382, 383 (F) – covalente Modifikation 382 – Dephosphorylierung 132, 383 – Glycogenbiosynthese 369, 382 – Nahrungskarenz 527 – Phosphorylierung 132 – – AMP-abhängige Proteinkinase, Aktivierung 527 – – Proteinkinasen 382 – Regulation, allosterische 382 Glycogensynthase a 384 Glycogensynthase b 382, 384 Glycogensynthasekinase-3 (GSK3) 382 – cAMP-abhängige 382 – Inaktivierung 382 – Insulinsignal, Weiterleitung 821 Glycogensynthese 111 – Aktivierung, Hydratation 1088

– Glycogensynthase 382 – Hemmung, Nahrungskarenz 529 – Insulin 636 – Nahrungskohlenhydrate 516 Glycogenvorräte, Aufrechterhaltung 380 Glycohämoglobin 969 – Diabetes mellitus 838, 969 Glycohydrolasen, Lysosomen 977 Glycolaldehyd, Hexosemonophosphat-Weg 366 (F) Glycolipide 28, 31 – Immunantwort 1133 – Virusadsorption 330 – Virusrezeptor 331 Glycolipid-PhosphoinositolAnker 7 GPI-Anker Glycolyse 358–365, 478, 516 – 7 Milchsäuregärung – anaerobe 358 – – Energiebilanz 364 – cAMP 390 – Dihydroxyacetonphosphat 519 – Einzelreaktionen 360 (F), 372 – Energiebilanz 363–364 – Fettsäurebiosynthese 412, 413 (F) – Fettsäureoxidation, gesteigerte 521 – Fructose-6-phosphat-2-Kinase 387 – Glucagon 392 – Glucokinase 387 – Gluconeogense 386–392 – Glucose 386, 392 – Granulozyten, neutrophile 972 – Hefezellen 363 – Herzmuskel 390 – Insulin 386, 392, 636, 818 – Katecholamine 392 – Kohlenhydrate, Zufuhr, enterale 516 – Lactat 358 – Leber 391–392 – Muskulatur 392 – nutritive Faktoren 386 – Phosphofructokinase-1 (PFK-1) 387–388 – Phosphoglyceratkinase 106 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 – Pyruvatkinase 387 – Regulation 386–392 – – cAMP 388 – – Fructose-2,6-bisphosphat 389 – – Glucose 388 – – Insulin 388 – Schlüsselenzyme, Regulation, allosterische 388–391 – Serinbiosynthese 458 – Thrombozyten 976

1203 Sachverzeichnis

– Umsatzgeschwindigkeit 386 Glycolyse-spezifische Enzyme, Induktion, Insulin 820 Glycopeptide 30 – Biosynthese, Bakterien 550 Glycopeptid-Transpeptidase 550 Glycophorin A, Erythrozytenmembran 956 Glycoprotein I-IX, Thrombozyten 977 Glycoprotein Ib-V-IX, Blutstillung, zelluläre 980 Glycoprotein IIb-IIIa – Blocker, Thromboseprophylaxe 978 – Thrombozyten 977 Glycoprotein B, Erythrozytenmembran 956 Glycoproteine 27–28, 56, 312 – 7 gp... – α1-Glycoprotein, saures 992, 995 – – Immunelektrophorese 995 – adhäsive, α-Granula 977 – Aminozucker 545 – Asialoglycoprotein-Rezeptor 548 – Aufbaudefekte 552 – biologische Aktivität/Bedeutung 27, 548–549 – Biosynthese 544, 546–552 – Erythrozytenmembran 956 – Exportproteine 27 – extrazelluläre Matrix 548 – glycosidische Bindung 29 – Golgi-Apparat 190 – Haut 751 – HIV 331 – Kohlenhydratanteil 27 – Komplementaktivierung 1130 – komplexer Typ 546 – Lipidanker 546 – Mannose-haltige, GDP-Mannose 544 – Mannose-6-phosphat 548 – Membranen 548–549 – Membranproteine 27 – Monosaccharidbausteine 28 – N-glycosidische Bindung 28, 546–547 – nichtkollagene, Binde-/Stützgewebe 716 – O-glycosidische Bindung 546–547 – Proteinglycosylierung 548–549 – Retentionssignale 548 – sezernierte 548 – sialinfreie 548 – Sialinsäurereste 548 – Thrombozyten 977 – Trimmen 546–547 – zelladhäsive, nichtkollagene 730–736 Glycosaminoglycane 28, 30 (F) – Aminozucker 545

– Basalmembran 732 – Biosynthese 544 – Disaccharide 29 – ECM 728–729 – Sulfatierungsdefekte 552 – Sulfatstoffwechsel 941 Glycoside 24 – α/β-Anomerie 24 – α/β-Isomerie 24 – herzwirksame 25 glycosidische Bindung 23 – Disaccharide 25 – Glycogenbiosynthese 369 – Glycoproteine 29 – hydrolytische Spaltung 10 (F) – Monosaccharide 25 – phosphorolytische Spaltung 370 – Sialoglycoprotein 29 Glycosphingolipide 561 – Golgi-Apparat 190 – Lipiddoppelschichten 41 Glycosylierung 548 – Defekte, kongenitale 552 – Proteine 312, 548 – – Faltung 305 Glycosylphosphatidylinositol, Proteine, Verankerung 310 Glycosyl-Phosphatidyl-Inositolanker 7 GPI-Anker Glycosyl-1-phosphat-NucleotidTransferase 540 Glycosyl-Pyrophosphorylase 540 Glycosylrest, Nucleosiddiphosphat-aktivierte Form 546 Glycosyltransferasen 547, 965 – ABH-Antigen, Biosynthese 965 – Antigene, oligosaccharidhaltige, Biosynthese 965 – Glycogenbiosynthese 369 – Golgi-Apparat 190 glykämischer Index 646 Glykoproteohormone, hypophysäre, Aufbau 849 Glyoxylsäure, Harnsäureabbau 600 Glypican 729 GM2-Aktivatorprotein, Lysosomen 200 GM-CSF (granulocyte macrophage-colony stimulating factor) 794, 953 – mRNA-Stabilität 281 GMP (Guanosinmonophosphat) 588 (F) – Biosynthese 588–590 – cyclisches 7 cGMP – Purinbiosynthese 588 GMP-Synthetase 588 GNAc (N-Acetyl-D-glucosamin) 966 (F) GnRH (gonadotropin releasing hormone, Gonadoliberin) 844, 846, 870 – Dauerapplikation 870

– – – – – – – –

Freisetzung, Hemmung 870 – Östrogene 878 – pulsatile 870 – Testosteron 875 Gonadenfunktion 871 Halbwertszeit 849 Plazenta 884 Sekretion, Menstruationszyklus 878, 880 – – Östrogene 878 – – Progesteron 878 – – pulsatile 878 – – – Störungen 870 GnRH-Analoga 870 – Dauerapplikation 870 – Prostatakarzinom 870 GnRH-assoziiertes Peptid (GAP) 870 GnRH-Neuronen 870 – Aktivität 871 GnRH-Pulsgenerator – hypothalamischer 870–873 – Suppression 872 GnRH-Rezeptoren 870 – Bindung 878 Golgi-Apparat 190–191 – Proteinkinasen, Cyclin-abhängige 225 – Proteinolyse, limitierte 319 Gonaden – Androgene 873 – Entwicklung 873 – GnRH 871 – Östrogene 873 – Progesteron 873 Gonadoliberin 7 GnRH gonadotropin releasing hormone 7 GnRH Gonadotropine – Hoden, Wachstum und Differenzierung 877 – Sekretion bei der Frau 879 – – hypophysäre 871–873 – – pulsatile 878 – Urin 915 – Zielgewebe bei der Frau 878–885 – – beim Mann 874–878 GOT 7 Aspartat-Aminotransferase Gower 1 958 Gower 2 958 gp... 7 Glycopproteine gp41 – HIV 331–332 – Virusaufnahme, Fusionierung 334 gp120 333 – Chemokin-Rezeptoren 333 – HIV 331–332 gp130, Cytokine 794 gp160, Virusaufnahme, Fusionierung 334 GPCR (G-protein-coupled receptors) 767 GPDH 7 Glycerophosphat-Dehydrogenase

GPI-A-Gen, Hämoglobinurie, nächtliche, paroxysmale 969 GPI-Anker (Glycolipid-Phosphoinositol-Anker) 36 (F), 312, 1132 – CD14 799 – C-terminaler, Bildung 312 – Defekt 314 – – Hämoglobinurie 312 – Defekte, Hämoglobinurie, nächtliche, paroxysmale 968–969 – Proteine 311–312 GPR39 886 GPR54-(Kisspeptin-)Rezeptor 872 G-Proteine 43, 311, 773–774 – aktivierte 779 – Calcitoninrezeptoren 937 – cytosolische, Dynamin-Familie 194 – elektromechanische Koppelung, Myokard 1014 – GDP-beladene 773 – Guaninnucleotid-freie 773 – heterotrimere 773–774, 1037 – – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 779–780 – inhibitorische 781 – kleine 773–774, 784 – monomere, Transport, vesikulärer 192 – Phosphatidylinositolphosphate (PIPs) 194 – Ran-Familie 189 – Ras-Superfamilie 192, 773 – Rho-Familie 735, 773 – Signaltransduktion 773 – stimulatorische 781 – – Glucagonsignal, Weiterleitung 825 – trimere 779 – – Einteilung 780 – – Signaltransduktion 781 – – βγ-Untereinheiten 781–782 G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR) 767, 769, 779–780 – Aktivierung 770 – ATP 1044 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – Internalisierung 806 – metabotrope 1042 – Opsin 685 – Phospholipase Cβ (PLCβ), Aktivierung 775 – second messenger 773 G-Protein-gekoppelte Rezeptorkinasen (GRK) 782, 806 Grad Kelvin 12 graft-versus-host (GvH) 1138 Granula 202–203 – α-Granula 977 – β-Granula, Insulinsekretion 814 – azurophile, Bakterienabwehr 1135

G

1204

Anhang

Granula – cytolytische, TC-Zellen 1116 – cytosolische, Monozyten 975 – sekundäre, Bakterienabwehr 1135 – Thrombozyten 977 granulocyte colony stimulating factor 7 G-CSF granulocyte macrophage colony stimulating factor 7 GM-CSF Granulomatose, septische 976 Granulome, Bakterienabwehr 1135 Granulosazellen – Androgene 880 – Östradiol 879 Granulosa-Zellen, Ovarien 878 Granulozyten – Aktivierung, Komplementaktivierung 1131 – – Toxine, bakterielle 799 – basophile, Phagozytose 975 – eosinophile, Phagozytose 975 – L-Selectine 972 – NADPH/H+-Oxidase 974 (F) – NADP/H+-Oxidase 974 – neutrophile 972 – – Bakterienabwehr 1135 – – Degranulierung 973 – – Entzündungen 972 – – Glycolyse 972 – – Phagozytose 975 – – Pyrin 975 – – suicide bag 975 – Pseudopodien 973 – Rekrutierung 972 – Sauerstoffverbrauch, mitochondrialer 974 – Superoxiddismutase 974 Granulozyten-Elastase 1105 Granulysin 1117 Granzym-B 202–203 Granzyme 315, 1116 Graves‘ disease 860, 1138 Grb2 (GRB2) 43, 787–788 – Insulinsignal, Weiterleitung 822 – MAPK-Kaskade, Aktivierung 787 – Prolactinrezeptor, Tyrosinreste 888 Grb7 788 GRE (glucocorticoid-responseelement) 388 – Gluconeogenese 388 – Transkription 276 green fluorescent protein (GFP), Gene, Funktionsanalyse 249 Griscelli-Syndrom 206 GRK (G-Protein-gekoppelte Rezeptor-Kinasen) 782, 806 GROα (CXCL1) 759, 784 GROβ (CXCL2) 759 GROγ (CXCL3) 759 Größenwachstum 744

growth factor receptor binding protein 7 Grb... growth hormone 7 GH growth hormone releasing hormone 7 GHRH growth related oncogenes (GRO) 759 GRP (gastrin releasing peptide) 1064 Grüner Tee, Phytoöstrogene 884 Grundumsatz 635 – Ernährung, kalorisch restriktive 635 – Realimentation 635 Gruppenübertragungspotential 491 GSH 7 Glutathion GSH-Peroxidase 7 Glutathionperoxidasen Gs-Proteine 781 GSSG-Reduktase, Sauerstoffspezies, reaktive, Entstehung/ Abbau 511 γ-GT 7 γ-Glutamyltransferase GTP (Guanosintriphosphat) 483 (F), 773 – Mannosestoffwechsel 540 – Proteinbiosynthese 288 – – eukaryote, Initiation 294 GTPase, Aktivität 773, 780 GTPase-aktivierende Proteine (GAP) 296, 526, 773, 806, 1144 Guaiac-Test 7 Hämokkult-Test Guanase, Purinabbau 599 Guanidine, Urämietoxine 909 Guanidiniumchlorid, Proteindenaturierung 88 Guanidinoacetat (GAA) 461, 463, 532 (F) Guanidinogruppe, Aminosäuren 58 Guanin 142–143, 238 (F), 429 – DNA 149 – Purinabbau 599 (F) – Reutilisierung 597 guanine-nucleotide dissociation inhibitor (GDI) 782 guanine-nucleotide exchange factors (GEF) 735, 773 – Aktivierung durch cAMP 782 Guaninnucleotid-bindende Proteine, membranassoziierte 1143 Guaninnucleotide, Biosynthese, Regulation 594 Guanosin 143 – Purinabbau 599 (F) Guanosinmonophosphat 7 GMP Guanosin-3‘-5‘-Monophosphat, zyklisches (3‘,5‘-cyclo-GMP 7 cGMP Guanosintriphosphat 7 GTP Guanylatcyclasedomäne 802, 926 Guanylatcyclasen 802 – lösliche 801–802

– membrangebundene 802–803, 926 – – Reise-Diarrhöe 802 – Neurotransmitter 802 – second messenger 774 Guanylyl-Transferase, Transkription, Elongation 263 Gürteldesmosom, Zonula adherens 198 Guthrie-Test, Phenylketonurie 470 GvH (graft-versus-host) 1138 GVOs (gentechnisch veränderte Organismen) 242 gynoide Prädilektionsstellen, Fettzellen 528 Gyrasehemmstoffe – DNA-Replikation, Hemmung 236 – Transkription, Hemmung 269 Gyrasen 152

H ΔH 101 H+/K+-ATPase 183 – Struktur 1056 H+-ATPase 183 H+-Uniport 183 H+/K+-Antiport 183 Haarausfall, Biotinmangel 706–707 Haarnadel-Ribozym (hairpin -ribozyme) 114 Häm 79–80, 610 (F), 620 (F) – Apoprotein 496 (F) – Desoxyform 80 – Globinpeptidkette 80 – Hämoglobin 79, 659 – Histidylrest 80, 83 – Myoglobin 79 – Oxyform 80 – Proteinbiosynthese, Initiation, Regulation 300 – Pyrrolringe 79 – Sauerstoffanlagerung 83 Häm a 496 (F) Häm a3, Cytochrom-c-Oxidase 500 (F) Häm-a-Zentrum, Cytochrom-cOxidase 500 (F) Häm b 496 (F) Häm bH 499 Häm bL 499 Häm c 496 (F) Hämabbau – Bilirubin 620 (F), 621–622 – Gallenfarbstoffe 621 (F), 622–624 – intrahepatische Phase 621 – posthepatische Phase 622 – prähepatische Phase 621 Hämagglutinationstest, Virusvermehrung 346

Hämagglutinin – Influenza-A-Virus 340–341 – Influenzaviren 334 – Viren 340 Hämangiom, DIO3, Inaktivierungskapazität 861 Hämatokrit 955 hämatopoetisches System, Calciferole 690 Hämaturie 914, 916 Hämbiosynthese 608–614 – Citratzyklus 487 – Cytochrom-P450-Synthese 613 – Knochenmark 613 – Nahrungskarenz 612 – Regulation 611 – – Erythroblasten 613 – – Knochenmark 613 – – in der Leber 611–613 – Störungen 614–620 Hämeisen 79–80, 659 – Freisetzung, Hämoxygenase 660 Hämeisenproteine 659 Häm-Enzyme 111 Hämgruppe 111 – Hämoglobin 958 – Synthese 611 Hämiglobin 7 Methämoglobin Hämochromatose 661, 663, 666 – Typ I, HFE-Gen, Mutationen 666 Hämocyanin 79 Hämodialyse 909 Hämoerythrin 79 Hämoglobin 79, 957–965 – Absorptionsspektrum 959 – allosterische Effektoren 83 – Anämie 957 – anomales 80 – Biosynthese 953 – 2,3-Bisphosphoglycerat, Bindung 85 – Chrom 675 – Desoxygenierung 959 – Eisen 659 – Eisenporphyrin 659 – embryonales 958 – Erythrozyten 957–965 – fetales 958 – Filtrierbarkeit, glomeruläre 896 – Genduplikation 80 – Genmutationen 960 – Globinanteil 958 – Glykierung 393 – Häm(gruppe) 79, 957–958 – Halbsättigungsdruck 959 – α/β-Ketten 80–81 – Körpereisen 659 – Kohlendioxidtransport 963 – Kohlenmonoxid, Affinität 970 – Konzentration 959 – kooperativer Effekt 82–83 – Oxygenierung 959 – prosthetische Gruppe 79

1205 Sachverzeichnis

– Pseudoperoxidase-Aktivität 667 – Pufferkapazität 945 – Puffersystem 944 – – Blutplasma 964 – räumliche Anordnung 80 – R-Zustand 84 – Sauerstoffaffinität 960 – – Erythrozyten-pH-Wert 961 – Sauerstoffanlagerung 82–85 – Sauerstoffaufnahme, Protonenabgabe 85 – Sauerstofftransport 79, 959 – Signalmetaboliten 83 – Soret-Bande 959 – Stickoxid (NO), Inaktivierung 964 – Strukturebenen und Eigenschaften 79–86 – Tetramerstruktur 81–82 – Titrationskurve 59 – T-Zustand 83–84 – Umsatz 623–624 – Untereinheiten 957–958 Hämoglobinbiosynthese – embryonale 958 – Erwachsene 958 – fetale 958 – Kupfermangel 957 – Transferrin 661 – Vitamin-B6-Mangel 957 Hämoglobinurie 914, 916 – paroxysmale, nächtliche (PNH) 314, 969–970 – – GPI-Ankerprotein 968 Hämojuvelin (HJV) 663 – Genmutation 666 Haemokkult-Test 667 – Darmtumoren 1160 Hämolyse 967–969 – Blutabnahme, langsame 956 – Erythrozyten, Membrandefekte, angeborene 968 hämolytische Krise – Erythrozytenabbau 625 – Erythrozytentransfusionen 965 Hämopexin 995 – Funktion/Pathobiochemie 989 – Immunelektrophorese 995 Hämophilie A 985, 988–992 – CGoTG-Transition 988 – de-novo-Mutationen 988 – missense-Mutation 988 – Punktmutationen 989 Hämophilie B 985, 988, 990 – Leyden-Phänotyp 990 hämorrhagische Diathese 800 – thrombozytäre 206 Hämosiderin 659, 663–664 Hämosiderose 666 Hämostase 7 Blutstillung Hämoxygenase, Hämeisen, Freisetzung 660 Hämproteine 312, 659

Hämzentren 496 (F) Haftstellen, Immunglobuline 1119 Hageman-Faktor 985 – Blutgerinnung 981 – Mangel 985 Halbmembran, Lipidmodifizierung 177 Halbwertszeit (t1/2), Proteine 314 half-sites, Ribosomen 293, 294 (F) Hammerkopf-Ribozym (hammerhead ribozyme) 114 Hand 2 281 Hantavirus 328 H-Antigen 965–966 HA-Protein, Influenzaviren 334 Haptene 1106 Haptoglobin 995 – α2-Haptoglobin 992 – Immunantwort 1134 – Immunelektrophorese 995 Harnblasenkarzinom – ADH-Sekretion 921 – eIF-4G 301 Harnkanalsystem 899 harnpflichtige Substanzen, Ausscheidung 909 Harnsäure 429, 599–600 – Aminosäurestoffwechsel 432 – Ausscheidung/Eliminierung 600 – – Störung 602, 909 – Purinabbau 599 (F) – tubuläre Reabsorption 600 – Urin 915 Harn(säure)steine 916–917 Harnstoff 4, 429, 443–444, 518, 947 – Aminogruppe 445 – Aminosäurestoffwechsel, Leber 447 – Ammonium-Ionen 445 – Carboxylierung 705 (F) – Eliminierung 909 – Filtrierbarkeit, glomeruläre 896 – Harnstoffzyklus 446 (F), 448, 600 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 – Proteindenaturierung 88 – Stickstoff, Ausscheidung 431 – Toxizität 445 – Urin 915 Harnstoffbiosynthese 484 – Protonenhaushalt, Regulation 946 – Regulation 447 – Störungen, Ammoniakvergiftung 453 – Transportproteine 494 Harnstoffkonzentration, Bestimmung, Urease 136 Harnstofftransporter, Niere 901 Harnstoffzyklus 443 – Aminosäureabbau/-stoffwechsel 442, 448

– Arginin 450, 459 – Aspartat-Glutamat-Austausch 448 – Defekte 450 – – angeborene 449–450 – Enzyme 448 – Ornithin 459 – Reaktionen 446–447 Harnvolumen, Oligo-/Anurie bzw. Polyurie 914 Hartnup-Krankheit 1078 Hashimoto-Thyreoiditis 860, 1138 Hasselbalch, Karl Albert 16 Haupthistokompatibilitäts-Komplex 7 HLA- bzw. MHC-Komplex Hauptzellen (Magen) – Hydrolasen 1056 – Pepsin 1054 – Pepsinogen 1056 – Renin 1054 Hausstauballergie 1137 Haut – Aufbau 747 – Autoimmunkrankheiten 753 – Barrierefunktion 747 – Biochemie 747–754 – Desquamation 748 – DIO3 857 – Elastin 751 – elastische Fasern 751 – Funktionen 747 – Gelbfärbung, Ikterus 624 – Glycoproteine 751 – Insulinempfindlichkeit 817 – Keratine 748 – Pathobiochemie 751–753 Hautausschläge, Biotinmangel 707 Hautkrankheiten, Blasenbildende 751 Hautläsionen, Papillomviren 343 HbA 958 HbA1 958, 969 HbA1c 394 – Diabetes mellitus 394 HbF 958 HbH-Erkrankung 970 HbS 971 HBsAg, Totimpfstoffe 349 hCG 7 Choriongonadotropin, humanes HCO3–-Resorption – Azidose, respiratorische 948 – Niere 946 HDJ2-Chaperone 302 HDL (high density lipoproteins) 572–573, 579–580 – Apolipoproteine 574 – Cholesterintransport, reverser 579 – Funktion/Pathobiochemie 992 – HDL1, HDL2 bzw. HDL3 579 – Mangel, ABCA1-Transporter, Defekte 186

G–H

– Partikel, discoidale 579 – Vitamin-E-Stoffwechsel 692 heat shock cognate 302 heat-shock proteins (Hsp) 7 Hitzeschock-Proteine hedgehog-Protein 310 – Proteoglykane als Cofaktoren 729 Hefechromosomen, künstliche 243 – ARS-Element 243 (F) Hefezellen – Acetaldehyd 363 – Chromosomen, künstliche 243 – Glycolyse 363 – Transfektion, ARS-Elemente 243 Hefe-Zwei-Hybrid-System 249 – Beute 249 – Fänger 249 – Genomik, funktionelle 95 Helfer-T-Zellen (TH) 1110–1112 – MHC-Klasse-II-Moleküle 1110 Helicasen – DNA-Replikation 229, 231 – TFIIH 261 Helicobacter pylori, Gastritis 1067 Helix – α-Helix 71 – – amiphiphile 73 – – amphiphatische, LDL 575 – – amphiphile, Apolipoproteine 574 – – – Membranen 178 – – hydrophobe 73, 305 – – α-Keratine 72 – – Myoglobin 80 – – Proteine 71–73, 75 – – – Transmembrandomänen 41 – – – Verteilung 75 – – Wasserstoffbrückenbindungen 71 Helix-loop-Helix-Motive 278 (F) Hemeralopie 688 Hemidesmosomen 198–199, 214 Hemiparesen, Enzephalomyopathien, mitochondriale 512 Hemizellulosen 651 Hemmstoffe – Bindung, Peptidasen 316 – Neurotransmitter 1038 Hemmung – (ir)reversible, Enzyme 124 – Transkription 271–275 Henderson, Lawrence J. 16, 18 Henderson-HasselbalchGleichung 16–17, 49, 948 – Hydrogencarbonatkonzentration 964 – Kohlendioxidpartialdruck 964 Henle-Schleife 899 – dicke, aufsteigende 898, 903

1206

Anhang

Henle-Schleife – – Calciumreabsorption 932 – – Tubulusflüssigkeit 904 – dünne, absteigende 898 – – – Aquaporin 1 904 – – aufsteigende 898, 902–903 – – Wasserkanäle 904 – Reabsorptionsleistung 900 Hepacivirus 328 Hepadnaviren 329 – Genomregulation 336 – reverse Transkriptase 335–336 Heparansulfat 29–30, 549, 727 – UDP-Glucuronat 542 – Virusrezeptor 331 Heparansulfat-Proteoglycane 727 – Lipoproteinlipase, Bindung 401 Heparin 29, 549 – Abbau 986 – Bindung, Antithrombin III 986 – Blutgerinnung, Hemmung 30, 986–987 – Lipoproteinhydrolyse 30 – Mastzellen, Granula, basophile 986 – Thrombin, Hemmung 986 – wachstumshemmender Effekt 729 Heparinasen 986 Hepatitis, Defektproteinämien 998 Hepatitis-B-Virus – Aufbau 336 – Genom 338 – Leberzellkarzinom 343 – Persistenz 343 – X-Protein 345 Hepatitis-C-Virus 328, 339, 343–344 Hepatitis-D-Virus 329 Hepatitis-E-Virus 328 Hepatitis-G-Virus 343 hepatolenticuläre Degeneration 7 Wilson-Syndrom hepatozelluläre Transportsysteme, Gallenbildung 1097 Hepatozyten 1084–1085 – α1-Antitrypsin 997 – cAMP-Konzentration, Senkung, Insulin 818–819 – Cortisolabbau 865 – Fängerzellen 1085 – Fructose-2,6-bisphosphat 390 – Funktionen 1086 – Glucose-6-phosphat 378–379 – Glucosestoffwechsel 379 – GLUT 2 375 – Hydratation 1088 – – Alkoholkonsum 1099 – Insulin 818 – Membransegment, canaliculäres 1085 – – interzelluläres 1085 – periportale 1085 – – Glutaminase 448

– – – – – –

perivenöse 1085 – Glutamin-Synthetase 449 Protein C 984–985 Protein S 984–985 Scavengerzellen 1085 Schädigung, Bilirubinstoffwechsel 625 – Transferrin, Aufnahme 661 Hepcidin 662 – Genmutation 666 – Synthese, Eisenspeicher, leere 663 – – Interleukin-6 663 Hephaestin 660, 668 – Kupfer 667 Heptapeptid-Wiederholung, Keratine 748 Her2 7 erbB2 HER2-Neu-Onkogen, Mammakarzinom 1160 Herceptin£, Brustkrebstherapie 786 hereditary nonpolyposis colorectal cancer (HNPCC) 237 HERG, Mutationen 1021 Hermansky-Pudlak-Syndrom 206 Herpes-simplex-Virus 329 – α-, β-, γ-Herpesvirus 329 – Adsorption, Rezeptor-vermittelte 333–334 – Persistenz 343 Hers, Henry-Geri 389 Herzblock, Enzephalomyopathien, mitochondriale 512 Herzglycoside 25 (F) – 7 Digitalisglycoside – Muskelrelaxation 1014 Herzinfarkt 7 Myokardinfarkt Herzinsuffizienz, Reninhypersekretion 927 Herzkranzgefäße, Arteriosklerose 1016 Herz-Kreislaufsystem, Katecholamine 829 Herzleistung, Anpassung, lastabhängige 1015 Herzmuskel – GATA-4 1016 – Glycolyse 390 – Insulinempfindlichkeit 817 – Lipase, hormonsensitive 399 Herzmuskelschwäche, Eisenablagerungen 666 Herzmuskelzellen, GLUT 4 375 Heterochromatin 187 Heterodimere, Rezeptoren, nichtsteroidale 687 heterogenous nuclear RNA 259–260 – Zellkern 187 Heteroglykane 26–28, 540 – Biosynthese 546–552, 596 Heteroplasmie 204, 512 Heteropolymere, Proteine 78 Heteropolysaccharid-Biosynthese 372

– Defekte 552 Heterozygotie 1146 Heuschnupfen 1137 HEV (high endothelial venule), Lymphozyten, Rezirkulation 1129 HEX, Hypothyreose 860 Hexadecansäure 34 Hexamere, Insulin 816 Hexokinasen 104, 106, 112, 136, 956 – ATP 112 – Gluconeogenese 372 – Glucose-6-phosphat 378 – Glucose-Fettsäurezyklus 522 – Glycolyse 359–360, 363–364 – Insulin 378 Hexosamin 28 Hexosaminidase – Defekte 200 – – Tay-Sachs-Krankheit 580 Hexosamin-Weg, Glucose-Durchsatz, Diabetes mellitus 838 Hexosemonophosphat-Weg 358, 365, 412, 519 – Biosynthese, NADPH-abhängige 368 – Erythrozytenstoffwechsel 955 – Glycolyse 359 – NADPH/H+ 519 – 5-Phosphoribosyl-1α-pyrophosphat (PRPP) 586 (F) Hexosen 22–23 – Resorption 1069 – SGLT-1 1069 Hexosephosphatisomerase, Glycolyse 360 Hexosetransport – Natrium-abhängiger 1070 – Wasserresorption 1074 HFE-Gen 662 – Mutationen, Hämochromatose Typ I 666 – TfR1 661 HGPRT (Hypoxanthin-GuaninPhosphoribosyl-Transferase), Mausmyelomzelle 1127 H2-Histaminrezeptoren, Salzsäuresekretion 1063 HIF (hypoxia inducible factor) 699 – Erythropoietin, Bildung 913 high density lipoproteins 7 HDL high endothelial venule (HEV), Lymphozyten, Rezirkulation 1129 high pressure liquid chromatography (HPLC), Proteine 60–62 hingeregion, Immunglobuline 1119 Hippursäure, Harnstoffzyklusdefekte 450 Hirn... 7 Gehirn Hirnkapillaren 1026 – Blut-Hirn-Schranke 1025 – Stoffaustausch 1026 Hirnödem 1027

Hirnpassage, arteriovenöse Differenzen 1024 Hirn-Typ, Kreatinkinase (CK) 137 Hirnventrikel, Ependymzellen 1026 His-tag, Proteinsynthese, gentechnische 93 Histamin 438, 473, 759, 1076 – Acetylcholinrezeptoren, muscarinische 1064 – Desaminierung, oxidative, O2-abhängige 434 – Funktionen 474–475 – G-Protein, Aktivierung 780 – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 783 – Mastzellen 1080 – Salzsäuresekretion 1063 – – Steigerung 1067 – Sekretion, Vagus 1064 Histatine, Speichel 1054 Histidase 436 – Histidinabbau 474–475 Histidin 45, 47, 49, 438, 463, 473–476, 483 (F) – Abbau 473–475, 942 – Aminosäurestoffwechsel 432 – Aufnahme, Insulin 820 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 473 – Codons 289 – Desaminierung 441 – Plasmakonzentration 445 – Säure-Basen-Katalyse 117, 118 (F) Histidin-57, Oxyanion-Tasche 121 Histidin-195, Wasserstoffbrückenbindung 118 Histidin-237 127 Histidinbelastungstest – Cobalaminmangel 709 – Folsäuremangel 475, 709 Histidin-Decarboxylase 474 – Histidinabbau 474 Histidinreste 58 – Häm 80 – Sauerstoffspezies, reaktive 510 Histokompatibilitätstestung, Transplantation, allogene 1139 Histonacetylierung – Histondeacetylasen 274 – Transkription 273 Histon-Acetyl-Transferasen 274 – Histonacetylierung/-deacetylierung 273–274 – p300/CBP-Familie 274 Histondeacetylasen, Histonacetylierung 274 histone fold 152 Histone/Histonproteine 152, 187, 273 – acetylierte, Bromodomäne 274

1207 Sachverzeichnis

– – – – –

Acetylierung 273–274 – reversible 273 DNA-bindende Proteine 152 H1, H2A, HsB, H3, H4 152–153 methylierte, Chromodomäne 275 – Methylierung 273–274 – Phosphorylierung 273–274 – Schwanz-Domänen 153 Histon-Methylase, Histonacetylierung/-deacetylierung 273–274 Histonmethylierung 274–275 – Methyltransferase 275 Histonoctamer 153 Histonphosphorylierung/ -dephosphorylierung 274 Hitze, Ubiquitinierungssignale 321 Hitzedenaturierung – Enzyme 127 – Proteine 88 Hitzeschock – Proteinbiosynthese, Initiation, Regulation 300 – Transkription 276 Hitzeschock-Proteine 302, 764, 866 – 7 Hsp – Familien 302 – Proteine, Faltung 302 Hitzeschock-Transkriptionsfaktor 276 HIV-1 Proteinase 315 HIV(-Infektion) 332–333 – Ablauf 332 – Adsorption, Rezeptor-vermittelte 333–334 – Aufbau 331 – CCR5 1135 – CD4 1135 – CD4-Rezeptor 332 – CD8 1135 – Chemokinrezeptoren 1135 – Genexpression 337 – Genom-Organisation 337 – NF-κB 337 – Persistenz 343 – Proteine 336 – reverse Transkriptase 331 – RNA, gespleißte 336 – Vpu (viral protein out) 342 HIV-Protease-Hemmung 134 – Ritonavir 134–135 HIV-Protein, TAT(twin arginine translocation)-Sequenz 186 HIV-Provirus, long terminal repeats (LTR) 337 HKI-III, Glycolyse 359 H-Ketten (Antikörper/Immunglobuline) 1118–1119 – C-Gen-Segmente 1121 – D(Diversitäts)-Gen-Segmente 1121 – J-Gen-Segmente 1121 – V-Gen-Segmente 1121

HLA-I-Klasse 305, 1108 HLA-II-Klasse 1108 HLA (Humane Leukozytenantigene) 305, 1106–1107 – Membranstrukturen 1108–1109 – Proteine, Aufbau 1108 HLA-DPα 1108 HLA-DR2, Diabetes mellitus 1138 HLA-DRα 1108 HLA-Haplotypen 1108 HLA-Komplex 1106–1109 HLH-Motiv 278 HMG-CoA (β-Hydroxy-β-Methylglutaryl-CoA) 565 – Hemmung, Lovastatin 134 – Ketonkörper, Biosynthese 409 – Mevalonat, Biosynthese 565 (F) HMG-CoA-Lyase, Ketonkörper, Biosynthese 409 HMG-CoA-Reduktase 321, 565, 568–570, 694 – Aktivität 577 – – LDL-Konzentration 577 – – Plasmacholesterinkonzentration 577 – Cholesterinbiosynthese 864 – – Reaktionsgeschwindigkeit 568 – Dephosphorylierung 132 – Halbwertszeit, Cholesteringehalt, zellulärer 570 – Hyperlipoproteinämie, Typ II 582 – Mevalonat, Biosynthese 565 – Nahrungskarenz 527 – Phosphorylierung 132 – – AMP-abhängige Proteinkinase, Aktivierung 527 – Proteine, Regulation 694 – Regulation 569 HMG-CoA-Synthase 569–570 – Mevalonat, Biosynthese 565 HMIT (H+-coupled myo-inositol transporter) 377 hmlh1, colorektale Tumoren, nicht-polypöse 1152 HMM (heavy meromyosin) 1006 hmsh2, colorektale Tumoren, nicht-polypöse 1152 HMSN (hereditäre motorische und sensible Neuropathie) 1047 HNPCC (hereditary nonpolyposis colorectal cancer) 237 HNPP, Gendefekte 1047 hnRNA (heterogenous nuclear RNA) 259–260 – Zellkern 187 Hochdruckflüssigkeitschromatographie (HPLC), Proteine 60–62 Hoden – Hexosemonophosphat-Weg 368

– Wachstum und Differenzierung, Gonadotropine 877 – Zinkkonzentration 672 Hodendescensus, Störung 876 Hodennekrose, Cadmium 677 Hodentumoren, α1-Fetoprotein 995 Hodgkin-Lymphom, ADH-Sekretion 921 Holocarboxylasen 312 – Carboxylierung 705 (F) – genetische Defekte 706 Holocarboxylase-Synthetase – Biotinzyklus 706 – Defekte 312 Holoenzyme 110, 312 – Vitamine 682 Homeobox 273 Homeobox-Gene, Retinoidfunktion 687 homing, Selektine 199 homing-Rezeptoren, Lymphozyten, Zirkulation 1129 Homocystein 49 (F), 708 (F) – Alzheimer-Demenz 464 – cardiovaskuläre Erkrankungen 464 – Remethylierung 464 – – Methylcobalamin 710 – Vitamin B12 709 Homocysteinämie, Hyperlipoproteinämie 581 Homocysteinthiolacton 465 Homodimere, Rezeptoren, nichtsteroidale 687 homöotische Mutationen 273 Homogentisat, Tyrosinabbau 471 (F) Homogentisatdioxygenase 506 Homogentisat-Dioxygenase, Tyrosinabbau 471 Homoglykane 26 homologous end-joining (HEJ), DNA-Schäden 240, 241 (F) Homoplasmie 204 Homopolymere, Proteine 78 Homozystinurie 464–465 – Apoplex 465 Hop (Hsp70/Hsp90 organizing protein) 303 Hormone – Abbau 761 – adenohypophysäre 844–845 – aglanduläre 759 – Analyse 760–762 – Ausscheidung 761 – Biosynthese 760 – Chondrogenese 739 – down-Regulation, Defekte 205 – gastrointestinale 1062 – gewebespezifische, Biosynthese 845 – glanduläre 758–760 – hemmende, Adenylatcyclase 781

– Hydroxylierung, Monooxygenasen, spezifische 508 – Hypophysenhinterlappen 846 – Hypophysenmittellappen 846 – hypothalamische, Proteolyse, limitierte 843 – Konzentrationsbestimmung 761–762 – long loop feedback 845 – Muskelwachstum 1016 – Nebennierenrinde 863 – Osteogenese 739 – Ovar 880–882 – Plazenta 884–885 – precursors 760 – Proteolyse 761 – Rezeptoren 763–765 – Rückkoppelungshemmung 845 – Sekretion 760 – Sekretvesikel, intrazelluläre 760 – short loop feedback 846 – stimulierende, Adenylatcyclase 781 – Stoffwechsel 760–762 – Transport 760 – Transportproteine 760 – Urin 915 – Vitamine 680 – weibliche, Abbau 882 – – Transport im Blut 882 – – Uterus 882–883 – – Wirkungen, molekulare 883–884 – – – zelluläre 882–883 – Zona fasciculata 863 hormonelle Regulation, Proteinolyse 322 Hormonreifung, Proteinolyse, limitierte 309 Hormonrezeptoren – cytosolische 1143 – intrazellulär lokalisierte 769 Hormonrezeptor-Komplexe, enhancer-Sequenzen 765 house keeping enzyme 608 house keeping gene 257 – GC-Box 262 Hox-Gene 273 HPLC (high pressure liquid chromatography), Proteine 60–62 hpms1/2, colorektale Tumoren, nicht-polypöse 1152 H-Ras-Proto-Onkoprotein, Farnesylierung 311 H1-Rezeptoren 474 Hsc70 302 – Triskelion, Freisetzung 302 HSE (heat shock responsive element), Transkription 276 HSL 7 Lipase, hormonsensitive HSL-knock-out 399 HSL-knock-out-Tiere 400 Hsp 7 Hitzeschock-Proteine Hsp40 302, 304

H

1208

Anhang

Hsp47 302 Hsp70 303–304, 308 HSP70 866 Hsp90 302–303, 764, 866 5-HT1-Rezeptor, glatte Muskulatur, Relaxation 1043 5-HT2-Rezeptor – glatte Muskulatur, Kontraktion 1043 – Plättchenaggregation 1043 5-HT3-Rezeptor 1043 – Erbrechen 1043 HTLV-1 – Persistenz 343 – T-Zell-Leukämie 344 Hühnereialbumin-Gen, Aufbau 264 (F) Hüllmembran, HIV 331 Humane Leukozytenantigene 7 HLA Humanes Herpesvirus Typ 6, Typ 7, Persistenz 343 Humanes Herpesvirus Typ 8 – Castleman-Erkrankung 344 – Kaposi-Sarkome 344 Humaninsulin 810 (F), 816, 817 (F) – rekombinantes 816 Humanmilch, Oligosaccharide 646 Hungergefühl/-phase – Cholecystokinin 1066 – Gehirn 1024–1025 – Leber 1084, 1086 – Nahrungsaufnahme 1066 Huntingtin 1049 Huntington-Krankheit 1049 HuR, mRNA-Stabilität 281 Hutchinson-Gilford-Progerie 205 Hyalektane 728 Hyaluronan, Haut 751 Hyaluronsäure 29, 30 (F), 550 – Aggregate, Aggrecan 728 – Aufbaudefekte 552 – Biosynthese 550 – Halbwertszeit 550 – Knorpel 738 Hyaluronsynthase 550 Hybridisierung 167 – DNA 167 – Nucleinsäuresequenzen 166 – RNA 167 Hybridom-Technik, Antikörper, monoklonale, Herstellung 1127–1128 Hydratationsradius 8 – Diffusionsgeschwindigkeit 8 – Permeationsvermögen 8 Hydratationszustand, Leberzelle 1088 Hydrathüllen 8 Hydratisierung – Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 467 – Doppelbindungen 10, 11 (F) Hydrierung 11 (F)

Hydrochinon, Standardpotential 103 Hydrochinon-Form, Ubichinon 495 Hydrogencarbonat – Anionen 918 – Bildung 942 – Carboanhydrase, intraerythrozytäre 962 – chemische Bindung, Erythrozyten 962 – Dissoziationskonstante K 15 – Elimination 918 – Harnstoffzyklus 447 – Kohlendioxid 961 – Konzentration, HendersonHasselbalch-Gleichung 964 – – Hyper-/Hypoventilation 946 – Pankreassaft 1058 – pKS-Wert 15 – Plasma 942 – Plasmakonzentration 18, 962 – Resorption, Tubulus, proximaler 903 – Sekretion, Pankreas 1065–1066 – – Sammelrohr 907 – Transport, Sammelrohr 906 – – Tubulussystem 906–909 – Tubulus, proximaler 907 – Urin 946 – Wasserresorption 1075 Hydrogencarbonatpuffer 964 – Liquor, pH-Wert 1027 – Lunge 945 Hydrogencarbonat-reabsorbierende-Schaltzelle, Typ A 907 Hydrogenphosphat/Phosphat – Dissoziationskonstante K 15 – pKS-Wert 15 Hydrogensulfid (HS) 465 Hydrolasen 113 – Granulozyten, neutrophile 972 – Hauptzellen, Magen 1056 – lysosomale 200 – neutrale 974 – Pankreas 1058 – Parathormon 935 – saure 974 – – Lysosomen 200 Hydrolyse 10 – Triacylglycerine 517, 648 hydrolytische Spaltung – Bindungen 10 – – glycosidische 10 (F) – Säureamide 10 (F) Hydropathie-Index 46 Hydroperoxidasen 506–507 12-HydroperoxyeikosatetraenSäure 423 hydrophil (wasserliebend) 9 hydrophob (wasserfeindlich) 9 hydrophobe Bereiche, Elastin 724 hydrophobe Wechselwirkungen 9–10

– Lösungen, wässrige 9 (F) – Makromoleküle, Selbstorganisation 10 – Proteinstruktur, dreidimensionale 9 Hydrops fetalis 970 hydrostatischer Druck 11–12 2-Hydroxy-4-aminopyrimidin 7 Cytosin 3-Hydroxy-Anthranilat, Tryptophanabbau 472 (F) 3-Hydroxy-Anthranilat-Dioxygenase, Tryptophanabbau 472 α-Hydroxybiopterin, Phenylalanin, Umwandlungsreaktionen 469 (F) β-Hydroxybutyrat/Hydroxybuttersäure 408, 521 – Diabetes mellitus 17 – Dissoziationskonstante K 15 – Energiestoffwechsel, Gehirn 1024 – Ketonkörper, Biosynthese 409 (F) – Nahrungskarenz 529, 641 – Niere, Energiegewinnung 910 – pKS-Wert 15 – Resorptions-/Hungerphase, Leber 1086 – Standardpotential 103 – Typ-1-Diabetes mellitus 833 β-Hydroxybutyrat-Dehydrogenase 1025 – Ketonkörper, Biosynthese 409 25-Hydroxycholecalciferol 689–690 – Biosynthese 689 – Parathormon 935 18-Hydroxycorticosteron – Aldosteronbiosynthese 923 – 11-Desoxycorticosteron, Biosynthese 923 4-Hydroxycumarin 986, 987 (F) 8-Hydroxydeoxyguanosin 510 16α-Hydroxyepiandrosteronsulfat, Nebennierenrinde, fetale 882 Hydroxyethylthiamin 481 (F) Hydroxyethylthiaminpyrophosphat 479 – Glycolyse 363 α-Hydroxyglycin, TRH-Biosynthese/-Freisetzung 847 Hydroxyharnstoff 595 (F) 5-Hydroxyindolacetaldehyd, Serotonin, Abbau/Biosynthese 1042 (F) 5-Hydroxyindolacetat – Carcinoide 1043 – Serotonin, Abbau/Biosynthese 1042 (F) – Urin 915 3-Hydroxykynurenin,Tryptophanabbau 472 (F) Hydroxylapatit, Knochen 738 Hydroxylase(n)

– 1α-Hydroxylase 690 – – cAMP 689 – – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Bildung 689–690 – – Hemmung, Calcium/ Phospat 689 – – Induktion 689 – – Parathormon, Hydroxylierung 935 – 1α-Hydroxylase-Gen 869 – 17α-Hydroxylase (CYP17) 881 – 21β-Hydroxylase, Cortisolbiosynthese 865 – 21-Hydroxylasedefekt 869 – Ascorbinsäure 698 – Transkription 690 Hydroxylgruppen 5, 10 – Hydroxyprolin 718 – Katalyse 315 – Monosaccharide 23 Hydroxylierung – Biotransformation 1091 – Cytochrom P450-Monooxygenasen 507 – Kollagenbiosynthese 718 – Kollagene 719 – Parathormon 935 Hydroxylierungsreaktionen, Östrogene, Abbau 882 Hydroxylionenkonzentration, Wasser 13 Hydroxylradikale (OH) 510 – Eisen, freies 658 (δ-)Hydroxylysin 48 – Kollagene 716 6-Hydroxymelatonin, Melatonin, Abbau/Biosynthese 1043 (F) Hydroxymethylbilan, Hämbiosynthese 609, 610 (F) β-Hydroxy-β-Methylglutaryl-CoA 7 HMG-CoA Hydroxymethylglutaryl-CoA-Reduktase 321 3-Hydroxy-2-Methylpyridin 703 5-Hydroxy-O-Methyltransferase, Melatonin, Abbau/Biosynthese 1043 4-Hydroxyphenyl-Pyruvathydroxylase, Ascorbinsäure 698 17α-Hydroxypregnenolon, Testosteron, Biosynthese 874, 875 (F) 17α-Hydroxyprogesteron – Cortisol, Biosynthese 865, 866 (F) – Östrogene, Biosynthese 880–881 – Testosteron, Biosynthese 874, 875 (F) Hydroxyprolin 459 – 5-Hydroxyprolin 473 – γ-Hydroxyprolin 48 – Bestimmung 915 – Hydroxylgruppen 718 – Kollagene 716 – Parathormon 935

1209 Sachverzeichnis

– Urin 915 6-Hydroxypurin 7 Hypoxanthin Hydroxysteroid-Dehydrogenase – 3α-Hydroxysteroid-Dehydrogenase, Androgene, Abbau 877 – 3β-Hydroxysteroid-Dehydrogenase 873–874, 880 – – Cortisol, Biosynthese 865–866 – 17β-Hydroxysteroid-Dehydrogenase 873, 875, 881 – – Östrogene, Biosynthese 880–881 – – Progesteron, Biosynthese 874, 880–881 – Testosteron, Biosynthese 875 17-Hydroxysteroide, Urin 915 19-Hydroxy-Testosteron, Cytochrom-P450-AromataseKomplex 882 (F) 5-Hydroxytryptamin (5HT) 7 Serotonin 5-Hydroxytryptophan 49 (F), 438 – Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 468 – Serotonin, Abbau/Biosynthese 1042 (F) 5-Hydroxytryptophandecarboxylase, Serotonin, Abbau/ Biosynthese 1042 (F) Hydroxyverbindungen 10 Hyperaldosteronismus – Hypokaliämie 930 – primärer 926–927 – – Spironolacton 924 – sekundärer 927 Hyperammoniämie 449–450 – GLDH-Mutationen 457 – Typ I 450 – Typ II 450 Hyperargininämie 450 Hyperbilirubinämie 625–626 – angeborene 625–626 – erworbene 625 – Haut/Skleren, Gelbfärbung 624 – persistierende, Säuglinge 1027 – Phototherapie 625 – UDP-GlucosyltransferaseDefekt 626 Hypercalciämie 938 – Tumorerkrankungen, maligne 936, 938 Hypercholesterinämie – Cholestyramin 1061 – familiäre, LDL-Rezeptor 579 – NPC 1 like 1 (Niemann-Pick C 1 like 1), Hemmstoffe 1071 – sekundäre 583 hyperchromer Effekt, DNA, Schmelzen 166 Hypercortisolismus – ACTH 869 – CRH 869 – Tumoren 869

Hyperferritin-Katarakt-Syndrom 663 Hyperglykämie 395 – resorptive, Insulinsekretion 522 – Typ-1-Diabetes mellitus 833 Hyperhydratation 920–921 – Hyponatriämie 921 Hyperinsulinämie – Adipositas 640 – Glutamat-Dehydrogenase (GLDH) 457 Hyperinsulinismus 393 – Inselzelltumoren 393 Hyperkaliämie 929–930 – Arrhythmien 930 – EKG 929 hyperkatabole Zustände, Stickstoffbilanz 431 Hyperkeratose, epidermolytische 752 Hyperkrinie, Allergie vom Typ I 1137 Hyperlipidämie 7 Hyperlipoproteinämie Hyperlipoproteinämie – Diabetes mellitus 836 – familiäre 582 – primäre 581 – Typ I-III 582 – Typ IV-V 583 Hypermutation, somatische, Immunglobuline, Genabschnitte 1122 Hypernatriämie, Dehydration 920 Hyperoxalurie, primäre 313 Hyperparathyreoidismus, primärer/sekundärer 938 Hyperproteinämie 991 Hyperthermie, maligne 1018, 1032 – Ryanodinrezeptor, Funktionsvarianten 1019 Hyperthyreose 859–860 – Cholesterinbiosynthese 568 – subklinische 859 Hypertonie – Adipositas 640 – Angiotensinogen 524 – arterielle, Diabetes mellitus 836 – Conn-Syndrom 927 – Hyperlipoproteinämie 581 – massive, Renin-Überproduktion 911 – metabolisches Syndrom 640 Hypertrichosis, Porphyria cutanea tarda 618 Hyperurikämie 602 – Adipositas 640 – Defekt 603 – Diät 603 – primäre 602 – PRPP-Synthetase 603 – sekundäre 603

hypervariable Regionen, Immunglobuline 1119 Hyperventilation – Hydrogencarbonatkonzentration 946 – Hypoxie 961 – Protonenkonzentration 945–946 Hypervitaminose(n) 682 – Vitamin A 688 – Vitamin D 691 – Vitamin E 695 Hypoaccelerinämie 985 Hypoalbuminurie, Kwashiorkor/ Marasmus 645 Hypoaldosteronismus 927 – Hyperkaliämie 929 Hypocalciämie 938–939 Hypochlorit 800 Hypocortisolismus 869 Hypofibrinogenämie 985 Hypoglycorrhachie, GLUT1, Defekte 186 Hypoglykämie 393, 395, 824 – Alkoholintoxikation 393 – Bewusstlosigkeit 1024 – Frühgeborene 393 – GLDH-Mutationen 457 – Glucagonfreisetzung 825 – hyperinsulinämische (HHI), Kindesalter 457 – Insulinüberdosierung 393 – Insulinüberproduktion 393 Hypokaliämie 930 – Conn-Syndrom 927 – Hypercalciämie 938 Hypo-α-Lipoproteinämie 581 Hypomethylierung, colorektale Tumoren, sporadische 1153 Hyponatriämie, Hyperhydratation 921 Hypoparathyreoidismus 939 – Calcium 939 – Parathormon 939 Hypophosphatämie 938 Hypophyse 845 – Ghrelin-Rezeptoren 1066 – Gonadotropinsekretion 871–873 – Insulinempfindlichkeit 817 – Polypeptide, regulatorische 862, 878–880 – Regulation 845–846, 863 – Selenkonzentration 676 – Verbindungen, vasKuläre und neurale 845 Hypophysenhinterlappen – ADH 919 – Hormone 846 Hypophysenmittellappen, Hormone 846 Hypophysen-Schilddrüsenachse 848 Hypophysenstiel 843 Hypopigmentierung, MenkesErkrankung 671

Hypoproconvertinämie 985 Hypoproteinämie 991 Hypoprothrombinämie 985 Hyposthenurie, Hypercalciämie 938 Hypotaurin, Cysteinabbau 465 (F) Hypotension 800 hypothalamisch-hypophysäres System – Leydig-/Sertoli-Zellen 874 – Regulation 846 Hypothalamus 843 – Feedback-System 848 – Ghrelin-Rezeptoren 1066 – Insulinempfindlichkeit 817 – lateraler, Sättigung 643 – Leptinrezeptoren 523 – Nahrungsaufnahme, Steuerung 643 – Osmorezeptoren 918, 920 – Polypeptide, regulatorische 862, 878–880 – Regulation 845–846, 863 – Verbindungen, vasculäre und neurale 845 Hypothalamus-HypophysenGonadenachse 870–874 Hypothalamus-HypophysenNebennierenrinden-(Zona fasciculata-)Achse 862–870 – Stress 868 Hypothalamus-HypophysenSchilddrüsenhormonachse 847 Hypothyreose 859–860 – Adipositas 640 – Cholesterinbiosynthese 568 – Hypercholesterinämie 583 – subklinische 859 Hypoventilation – CO2-Partialdruck 946 – Hydrogencarbonatkonzentration 946 – Protonenkonzentration 946 Hypovitaminose(n) 680–682 – Vitamin A 688 – Vitamin B1 699 – Vitamin C 699 – Vitamin D 690 – Vitamin E 694 Hypoxanthin 143, 604 (F) – Purinabbau 599 (F) – Reutilisierung 597 Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase (HGPRT) – Defekt, Lesch-Nyhan-Syndrom 602–603 – Mausmyelomzelle 1127 – Purinbasen, Salvage Pathway 597 Hypoxie – arterielle, Erythropoietin 912 – 2,3-Bisphosphoglycerat 961 – Hyperventilation 961 – Phosphorylase b 380 – Sauerstoffmangel 961

H

1210

Anhang

Hypoxie-induzierbarer Faktor (HIF) – Erythropoietingen, Transkriptionsregulation 913 – Erythrozytenverlust 955 – Tumoren, Angiogenese 1155

I IκB, NF-κB-Aktivierung 806 IκB Kinase (IKK) 799 – IKKα/β/γ 791 IκB-Kinase 791 – Histonphosphorylierung/ -dephosphorylierung 274 I-Bande 1002–1003, 1008 ICAM (intracellular adhesion molecules) 1113 – ICAM-1 (CD54) 973, 1113 – – Lymphozyten, Zirkulation 1129 – – Virusrezeptor 331 – ICAM-2 973, 1113 – ICAM-3 1113 ICE (interleukin-1 converting enzyme/Caspase 1) 791 I-cell disease 207 Ichthyosen 751–752 ICOS (inducible costimulator) – B-Zell-Aktivierung 1125 – T-Zellen 1113 Icterus neonatorum 1092 – 7a. Ikterus IDL (intermediate density lipoproteins) 576 Iduronsäure/Iduronat, Epimerisierung 29, 549 IEF (isoelektrische Fokussierung) 63 IFN... 7 Interferone IFN-α 779, 796 – antivirale Wirkung 797–798 – Immunantwort 1133 – Krebstherapie 1160 – mRNA-Abbau 798 – 2‘-5‘-Oligo-A-SynthetaseExpression (2‘-5‘-OASE) 797 – RnaseL, Aktivierung 798 – Virusabwehr 1135 – Wirkung 797 IFN-α-stimulated gene factor (ISGF) 797 IFN-β 759, 779, 796 – antivirale Wirkung 797–798 – Immunantwort 1133 – mRNA-Abbau 798 – 2‘-5‘-Oligo-A-SynthetaseExpression (2‘-5‘-OASE) 797 – RnaseL, Aktivierung 798 – Virusabwehr 1135 – Wirkung 797 IFN-ε 759, 779 IFN-γ 759, 867 – Akutphase-Proteine 996

– – – – – – –

Cytokine, Freisetzung 800 Entzündung 975 Entzündungsmediatoren 791 IgG2 1123 IgG3 1123 Immunantwort 1133 Signaltransduktion, STAT1Homodimere, Bildung 798 – TH1-Zellen 1112 – Virusabwehr 1136 – Wirkung 797 IFN-γ−activated sequences (GAS-Elemente) 798 IFN-γ-induzierte intrazelluläre Abwehrmechanismen 1117 IFN-κ 759, 779 IFN-ω 759, 779 IFNAR1/2 (Interferon-α/β-Rezeptor-1/2) 796–797 Ig... 7 Immunglobuline IgA 1118, 1120–1121 – Funktion/Pathobiochemie 993 – IL-5 1123 – Immunantwort, mukosale 1079 – Immunelektrophorese 995 – joining protein (J-Protein) 1120–1121 – nichtsekretorisches 1120 – sekretorisches 1079, 1120–1121 – Speichel 1054 – TGF-β 1123 – Transport, vesikulärer 192 – Transzytose 1079 IgA1 1121 IgA2 1121 IgA-Mangel, selektiver 1136 IgD 1118, 1120–1121 – Funktion/Pathobiochemie 993 IgE 1118 – Allergie vom Typ I 1137 – Entzündungsreaktion 1079 – Funktion/Pathobiochemie 993 – IL-4 1123, 1125 – IL-13 1125 – Immunantwort, mukosale 1079–1080 – Mastzellen 1079 IgE-Fc-Rezeptoren, Allergie vom Typ I 1137 IGF-I 1143–1144 IGF-1 225, 744, 758, 887–888 – Bindeproteine 887–888 – Fettgewebe 524 – GHRH-Produktion 888 – GH-Sekretion 886, 888 – GH-Wirkung 887 – Glucocorticoide, Wirkungen 322 – Knorpel-/Knochenwachstum 744, 888 – Knorpel-/Knochenbildung 741

– Mangel 889 – – Zwergwuchs 744 – Muskelaufbau/-abbau 1017 – Myosin 1006 – Östrogene 883 – Proteinsynthese 645 – Proteoglykansynthese 888 – Pubertät 888 – Synthese in der Leber 1088 IGF-1-Rezeptor 887 IGF-2 225, 888 – genomic imprinting 272 – GH-Freisetzung 886 – GH-Wirkung 887 – Knorpel-/Knochenbildung 741 – Synthese in der Leber 1088 IGF-2-Rezeptor 887 IGF (insulin-like growth factor) 225, 759, 811, 884 – Knochenwachstum 742 – Wachstums- und Differenzierungsvorgänge 888 IGF-Bindeproteine (IGF-BP) 887–888 – Knochen-/Knorpelwachstum 888 – Proteinsynthese 645 IGF-Rezeptor 744 IgG 1118, 1120 – Aufbau 1118 – Funktion/Pathobiochemie 993 – Immunelektrophorese 995 IgG1, IL-4 1123 IgG2, IFN-γ 1123 IgG2b, TGF-β 1123 IgG3, IFN-γ 1123 IgM 1118, 1120–1121 – Funktion/Pathobiochemie 993 – Immunelektrophorese 995 – schwere Kette 279 – sezerniertes, Spleißen, alternatives 278–279 Ihh (indian hedgehog) 740 – Chondrozytenproliferation 740–741 – Knochenwachstum 742 – Osteoblasten, Bildung 740 – Spongiosa 740 IKK 7 IκB-Kinase Ikterus 624–626, 667 – 7 Icterus neonatorum – 7 Kernikterus – Erythrozytenabbau 625 – Neugeborene 625 – physiologischer 625 IL... 7 Interleukin... Ileum – Elektrolytresorption 1075 – Gallensäurenrückresorption 1061 – Nahrungsstoffe, Resorption 1068 – Wasserresorption 1075 – Zinktransporter 672

Imidazolacetaldehyd, Histidinabbau 474 (F) Imidazolacetat – Histaminaabbau 474 – Histidinabbau 474 (F) Imidazolacrylat, Histidinabbau 474 (F) Imidazolgruppe, Aminosäuren 58 Imidazolonpropionat, Histidinabbau 474 (F) Imidazolonpropionat-Hydrolase, Histidinabbau 474 Imin, Desaminierung 435 α-Iminoglutarat, Desaminierung 436 (F) Iminogruppe 5 (F) α-Iminopropionat 436–437 Imipramin 1038 Immucillin-H 127 Immunabwehr 7 Abwehr Immunantwort 1106 – adaptive 1104 – – klonale Expansion 1110 – – molekulare Instrumente 1105–1106 – – Spezifität 1105 – – T-Zellen, zytotoxische 1115–1117 – allergische, IgE-vermittelte 1112 – angeborene 1104–1105 – Antikörper 1119 – Glucocorticoide 1134 – Immunglobuline 278 – intestinale, IgA-vermittelte 1079 – – IgE-vermittelte 1079 – spezifische 1133 – – Viren 1136 – Spleißen, alternatives 278 – unspezifische 798, 1133 – Wechselwirkung 1133–1134 Immundefekte/-defizienz 1136 – AP3-Defekte 206 – HIV 343 – LYST-Protein-Defekte 206 – primäre oder genetisch bedingte 1136 – Rab27A-Defekte 206 – sekundäre 1136 Immundefizienzvirus, humanes 7 HIV(-Infektion) Immunelektrophorese 993–994 – Antigen-Antikörper-Reaktion 993 – Proteine 63 Immunfluoreszenztest, Virusvermehrung 346 Immunglobuline 1118–1121 – 7 Antikörper – 7 Ig... – biologische Funktionen 1120 – CDR (complementary determining region) 1122 – Disulfidbrücken 1118

1211 Sachverzeichnis

– Domänenstruktur 1119 – Faltblattstrukturen, antiparallele 1119 – Fc-Fragment 1118 – Funktion 1119 – Genabschnitte, Hypermutation, somatische 1122 – als Glycoproteine 27 – Grundstruktur 1118 – vom G-Typ 1120 – Haftstellen 1119 – hingeregion 1119 – H-Kette 1118–1119 – – Gene, Umlagerung 1122 – hypervariable Regionen 1119 – Immunantwort 278 – Isotypen 1120 – Isotypwechsel 1123 – J-Sequenz 1122 – Klassen 1120 – Leader-Sequenz 1122 – Liquor cerebrospinalis 1028 – L-Kette 1118–1119 – – rearrangement 1122 – lösliche 1123 – membrangebundene 1123 – Scharnierregion 1119 – Switchregion/Umstellungsregion 1119 – Virusinfektion 346 – V-Sequenz 1122 Immunglobulin-Superfamilie, Titin 1008 Immunhistochemie 138 Immunihibitionstest, CK-MB 137 Immunisierung 348–349 – aktive/passive 348 Immunität 7 Immunantwort immunkompetente Zellen, Funktion 867 Immunkomplexe, Fc-Teile, Zellen 1098 Immunogen 1106 immunologische Konzentrationsbestimmungen, Hormone 761 immunologische Toleranz 7 Immuntoleranz Immunophiline 303 Immunproteasom, Antigenpräsentierende Zellen 1107 Immunrezeptor-Tyrosin-abhängige Aktivierungs-Motive (ITAMs) 114 Immunsuppression/-suppressiva – Calcineurin, Hemmung 303 – PPIasen 303 – Transplantatabstoßung 1139 Immunsystem 1103–1140 – adaptives, Komponenten, zelluläre 1109–1117 – Calciferole 690 – NNR-Achse, hypothalamischhypophysäre 868 – Toleranz 1105–1106 Immuntoleranz 1111 – hepatische, Kupfferzellen 1098

– periphere 1114 – zentrale 1114 IMP (Inosinmonophosphat) 587 (F), 588, 630 – Biosynthese 588, 630 – – Regulation 593 – Purinbiosynthese 587 (F), 632 IMP-Cyclohydrolase 589 – IMP-Biosynthese 589 IMP-Dehydrogenase 588 – Hemmstoffe 596 Impfstoffe, Proteinkomponenten 349 Impfungen 7 Immunisierung Impfviren 349 Implantation – Retinol 687 – Retinsäure 687 Importine, Transport, nucleocytoplasmatischer 189 Import-Motor 308 Importsignalsequenzen, Transport, nucleocytoplasmatischer 189 IMPS-Gen 589 Inaktivierungstor, Myotonie, kongenitale 1019 Inaktivitätsatrophie, Proteolyse, Skelettmuskulatur 529 inclusion bodies, Bakterien, Fremdproteine, Produktion 243 Indan-1,3-dion 986, 987 (F) indian hedgehog 7 Ihh Indican, Nachweis, serologischer 1076 Indikatorreaktion, optischer Test, gekoppelter 115 Indol 1076 Indolamin-2,3-Dioxygenase 473 – Tryptophan 473 Indomethacin, Prostaglandinbiosynthese 424 Indoxylschwefelsäure, Nachweis, serologischer 1076 induced fit 7 induzierte Passform inducible costimulator (ICOS) – B-Zell-Aktivierung 1125 – T-Zellen 1113 Induktion, Enzyme 129 Induktor, Transkription, Prokaryoten 271 Infektionen – Plasmaproteine 996 – Trijodthyronin, Aufnahme 636 Inferferone Typ 1 779, 796 Inflammasomen 205 Influenza, Pandemie 340 Influenza-A-Virus 328, 340 – reassortment (phenotypic mixing) 340 – Replikation 340 Influenza-B-Virus 328 Influenza-C-Virus 328 Influenzaviren 341 – Hämagglutinin 334 – HA-Protein 334

– M2-Protein(e) 334 – Protonentransportproteine 334 – uncoating 334–335 Infusionslösungen 653 Inhibin(e) 846, 872 – Aufbau 873 – Leydig-Zellen 876 – TGFβ-Superfamilie 872 Inhibitorproteine, Cyclin/ cdk-Komplexe 222 Initiation – Cap-abhängige, Proteinbiosynthese 300 – DNA-Replikation 230 – Proteinbiosynthese 293–296 – – Tumoren 301 – Transkription 257, 271–275 – – Prokaryoten 258–259 – virale 301 Initiationskomplex – Aufbau, RNA-Polymerase II 261 – C-terminale Domäne (CTD) 262 – eukaryoter, Bildung, RNAPolymerase II 260–262 – Polymerase 260 – RNA-Polymerasen, eukaryote 260 – Transaktivatoren, räumliche Beziehungen 262 – Transkription, Prokaryoten 258–259 Initiations-Methionyl-tRNAiMet 295 Initiatorcaspasen 226, 792 Initiator-tRNA, Proteinbiosynthese, eukaryote, Initiation 294 Inklusion, Mukolipidosen 207 Inkubationszeit, Virusinfektion 348 Innenmembran, Mitochondrien 203–204, 208 (F) Inosin 143, 599 (F) – Glycogenolyse, Myokard 385 – Purinabbau 599 Inosin-5‘-monophosphat 7 IMP Inosinmonophosphat 7 IMP Inositol 32, 554, 784 (F) – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 (F) Inositolmonophosphatase 126 Inositol-1,4,5-trisphosphat (IP3) 571, 765, 783, 784 (F) – second messenger 774 – Synthese 775 Inositol-Trisphosphat-Weg 1114 Inselzellen, Zinkkonzentration 672 Inselzelltumoren, Hyperinsulinismus 393 Insertion, Proteinbiosynthese, Termination 299 inside-out-signaling, Integrine 733

H–I

Insig-Protein (insulin induced gene) 569 Insorption 1076 Insulin Aspart 816 Insulin-abhängige Genregulation 819 insulinabhängiges Gewebe – Glucose-6-phosphat, Bildung 378 – – Verwertung 378 insulinähnliche Wachstumsfaktoren 7 IGF (insulin-like growth factor) insulinähnliches Protein 3 884 – Leydig-Zellen 876 Insulinanaloga 816–817 insulinantagonistische Hormone – Fettgewebe 528 – Leber 529 Insulin(e) 384, 758, 760, 810–822 – Abbau 816 – Acetyl-CoA-Carboxylase 417 – antilipolytischer Effekt 819 – Aspartat 816, 817 (F) – Bindung, Insulinrezeptor 820 – biologische Wirkungen 817–820 – Biosynthese 811, 813 (F) – – Proinsulin 811–812 – Blutplasmakonzentration 522 – cAMP-Konzentration, Fettzellen, Senkung 819 – – Hepatozyten, Senkung 818–819 – C-Peptid 811 – Detemir 816 (F)–817 (F) – Diabetes mellitus 832 – dimeres 810 – Disulfidbrücken 810 – Fettgewebe 819 – Fettsäurebiosynthese 417 – Fettstoffwechsel 523 – Fettzellen, cAMP-Konzentration, Senkung 819 – Filtrierbarkeit, glomeruläre 896 – Gegenspieler, Cortisol 866 – Glargin 816, 817 (F) – Gluconeogenese 387 – – Regulation 388 – Glucoseangebot, erhöhtes 379 – Glucosemetabolismus, Wirkungen 818 – Glucoseoxidation 636 – Glucosestoffwechsel 818 – Glukokinase 378 – Glulisin 816, 817 (F) – GLUT-4 378 – – Translokation 821 – Glycogenbiosynthese 382, 636 – Glycogenstoffwechsel, Regulation 386 – Glycolyse 386, 392, 636 – – Regulation 388

1212

Anhang

Insulin(e) – Halbwertszeit 816, 849 – Hepatozyten, cAMP-Konzentration, Senkung 818–819 – Hexamere 810, 816 – Hexokinase II 378 – internationale Einheiten (IE) 816 – Kalium, Resorption 929 – K+-Aufnahme, Stimulierung 819 – kommerzielle, Entwicklung 816 – lang wirkende 816–817 – Leberstoffwechsel 523 – Lipogenese 415–416 – Lipolyse 819 – Lispro 816, 817 (F) – Mangel, absoluter/relativer 832 – –Diabetes mellitus 393, 528–529 – – Lipoproteinlipase 819 – metabolische Rate 636 – Milchdrüsenzellen 543 – Muskelarbeit, Substratoxidation 533 – Muskulatur 523 – Nahrungsaufnahme, afferente Signale 642 – Nahrungskarenz 529 – Nahrungszufuhr 522 – Oligomerisierung 810 – Pankreas, endokrines 811 – Plasmakonzentration 816 – Plasma-Phosphatkonzentration, Erniedrigung 938 – Proteinbiosynthese 529, 645 – Regulation, Lipoproteinlipase 819 – Reifung 812 – Rezeptor-Tyrosinkinasen 767 – schnell wirkende 816 – Signalübertragung, intrazelluläre 821, 822 (F) – Skelettmuskel 820 – SNARE-Proteine 194 – SREBP-1c, Aktivierung 570 – Stoffwechselwirkungen 818 – Struktur 810 – tierische 810 – Überdosierung, Hypoglykämie 393 – Wachstumswirkung 820 – Wirkungen, langfristige 819 – – molekulare 820–822 – Zinkionen 672, 810 Insulin-empfindliche Gewebe 817 Insulingen 811 Insulin-Insulinrezeptor-Komplex 816 Insulinitis, Typ-1-Diabetes mellitus 832 insulin-like growth factor 7 IGF insulinotrope Hormone 815

Insulinresistenz – Adipocytokine 835 – Adipositas 640 – Adipositas-induzierte, Typ-2Diabetes mellitus 835 – Glucosetoleranz-Test 523 – Leptin 643 – metabolisches Syndrom 640 – Typ-2-Diabetes mellitus 834 Insulinrezeptor (INSR) 786, 820, 821 (F) – Aktivierung 820 – Autophosphorylierung 820 – Biosynthese 820 – Docking-Proteine 821 – Muskelaufbau/-abbau 1017 – Phosphotyrosine 821 – Proteinkinase A/C 821 – Rezeptortyrosinkinase 785 – – Modulation 821 Insulinrezeptor-Gen 820 Insulinrezeptorsubstrate (IRS) 821 Insulinsekretion 812–816 – Calciumkonzentration 814 – Enterohormone 815 – gastroinhibitorisches Peptid (GIP) 815, 1066 – Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) 815 – Glucose 812 – Glucosesensor 814 – Glucose-stimulierte 814, 815 (F) – β-Granula 814 – Hemmung 815 – – Somatostatin 815, 887 – Hyperglykämie, resorptive 522 – Kohlenhydrate, Abbau 646 – Modulation 814–815 – Nahrungsaufnahme 824 – Regulation 812 – Störung, Typ-2-Diabetes mellitus 835 – Vinca-Alkaloide 814 – β-Zelle 812 Insulinsekretion-stimulierende Pharmaka 815–816 Insulinsignal, Weiterleitung 821 insulinunempfindliche Organe 817 Integrase – HIV 331 – Viren 335 Integrin α2β1 733 Integrin α5β1 733 Integrin α6β1 733 Integrin α6β4 753 – dermo-dermale Junktion 750 Integrin αvβ3 333 Integrin αvβ5 333 Integrin β3, 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 Integrine 197, 199–200, 730–736 – Aktin-Filamente 734 – Axotomie 1047

– cluster-Bildung 735 – cytoplasmatische Domänen 734 – Cytoskelett 734 – ECM-Moleküle, Rezeptoren 733 – Fokal-Kontakte (focal adhesion) 735 – inside-out-signaling 733 – 8α-/18α-Ketten 733 – Leukozyten 973 – Lymphozyten 1129 – Muskulatur, quergestreifte 1009 – nichtepitheliale, Defekte 206 – outside-in-signaling 734 – Plättchenrezeptor αIIb/β3 733 – Ras, Aktivierung 736 – Rezeptoren, bidirektionale 733 – RGD-Sequenz 733 – Signaltransduktion 734–735 – Signalvermittlung 199 (F) – Struktur 734 – Synergismus 731 – Zelldifferenzierung 735–736 – Zell-Matrix-Kontakte 199 (F) – Zellpolarität 735 – Zell-Zell-Kontakte 199 (F) Integrin-Gene, Mutationen 734 Integrin-Rezeptor, Fibroblasten 721 Intein, Proteinolyse, limitierte 309 Interferon-α/β-Rezeptor-1 (IFNAR1/2) 796–797 Interferon-α/β-Signaltransduktion – Janus-Kinasen 797 – STAT1/-STAT2-Komplexe 797 interferon regulatory factor(IRF)Familie, Interferon-Signaltransduktion 797 Interferon-ähnliche Cytokine 759 Interferone 759, 778–779, 799, 1144 – 7 IFN-... – Biosynthese 796 – Cytokine 760 – Proteinbiosynthese, Initiation, Regulation 300 – Reinigung, RPLC-Säule 61 – Stimulation, Phosphorylierung 806 – Typ 1 759 – Typ 2 759, 779, 796 Interferon-Signaltransduktion 796–798 interferon-stimulated gene factor-3 (ISGF3) 797 interferon-stimulated response element (ISRE) 797 Interkonversion, Proteine 307 Interleukin-1 759, 791, 868, 1104–1105

– – – – – – – – –

ACTH-Sekretion 976 Akutphase-Proteine 996 Cortisolsekretion 976 Cortisolsynthese 863 Entzündungen 778, 975 Immunantwort 1133 Infektionen, bakterielle 798 Leber 1089 Lymphozyten, Zirkulation 1129 – Makrophagen 975 – PGHS-2 420 – Plasmazinkspiegel 672 – rheumatische Erkrankungen 746 – Sekretion 760 Interleukin-1α 791 Interleukin-1β 791 – Cytokine, Freisetzung 800 – Proteine, Regulation 694 Interleukin-1 (IL-1), Knochenumbau 745 interleukin-1-receptor associated kinase (IRAK) 799 interleukin-1-receptor accessory protein (IL-1RAcP) 791 Interleukin-1-Rezeptor-I (IL-1RI) 791 Interleukin-1-Rezeptor-II 792 Interleukin-1-Rezeptoren, T-Lymphozyten 975 Interleukin-1-Signaltransduktion 791–792 Interleukin-2 759, 867 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 – Krebstherapie 1160 – mRNA-Stabilität 281 – Sekretion 975 – TH1-Zellen 1112 Interleukin-3 953 – Allergie Typ I 1137 – mRNA-Stabilität 281 Interleukin-4 759, 1104 – Allergie Typ I 1137 – IgE 1123, 1125 – IgG1 1123 – Immunantwort 1133 – Infektionen, bakterielle 798 – Knochenresorption 745 – Proteine, Regulation 694 – TH2-Zellen 1112 Interleukin-5 – Allergie Typ I 1137 – IgA 1123 – TH2-Zellen 1112 Interleukin-6 759, 794, 868, 1104–1105 – Akutphase-Proteine 996 – Cortisolsynthese 863 – Cytokine 759 – – Freisetzung 800 – Entzündungen 778, 975 – Entzündungsmediatoren 791 – Hepcidin, Synthese 663 – Immunantwort 1133

1213 Sachverzeichnis

– – – – – – –

Infektionen, bakterielle 798 Knochenresorption 745 Kupfferzellen 1098 Leber 1089 Muskelarbeit 534 Plasmazinkspiegel 672 rheumatische Erkrankungen 746 – Serumspiegel nach intravenöser Gabe von LPS-Endotoxin 800 Interleukin-6α 795 Interleukin-6-Cytokine 794 Interleukin-7 759 Interleukin-8 (CXCL-8) 783–785 – Cytokine, Freisetzung 800 – Entzündungen 783, 791, 975 – Immunantwort 1133 – Leukozyten, zirkulierende 973 – Proteine, Regulation 694 – Serumspiegel nach intravenöser Gabe von LPS-Endotoxin 759, 800 – Signaltransduktion 785 (F) Interleukin-8-Rezeptoren, G-Protein-gekoppelte 784 Interleukin-9 – Allergie, Typ I 1137 – TH2-Zellen 1112 Interleukin-9 (IL-9) 759 Interleukin-10 759, 1104, 1112 – Allergie, Typ I 1137 – Infektionen, bakterielle 798 – Knochenresorption 745 – Serumspiegel nach intravenöser Gabe von LPS-Endotoxin 800 – TH2-Zellen 1112 Interleukin-11 759, 794 – Knochenresorption 745 Interleukin-12 1105 – Immunantwort 1133–1134 – Infektionen, bakterielle 798 Interleukin-13 1104 – Allergie Typ I 1137 – IgE 1125 – Knochenresorption 745 – rheumatische Erkrankungen 746 – TH2-Zellen 1112 Interleukin-15 759 – Knochenresorption 745 Interleukin-17 – Knochenresorption 745 – rheumatische Erkrankungen 746 Interleukin-18 1105 – Immunantwort 1133 – Infektionen, bakterielle 798 – Knochenresorption 745 Interleukin-19 759 Intermediärfilament-Proteine 207 Intermediärstoffwechsel – Aminosäuren 430 – Leber 1084

Intermembranraum, Mitochondrien 203, 208 (F), 491 International Union of Biochemistry and Molecular Biology (IUBMB) 112 internationale Einheiten (IE), Insulin 816 Interphase, Zellzyklus 221 interstitieller Raum 917 Intestinaltrakt, Immunsystem 1079–1080 int2-Onkogen 1143 intrazellulär aktivierte Ionenkanäle 765 Intrazellulärraum 917 – pH-Wert 14, 943 – Pufferung 944 – Verteilung, Protonen 943–944 – Wasserstoffionenkonzentration 14 Intron – Entfernung 266 – Genom 160 – Lasso-Struktur (lariat) 265 – Transkription, Elongation 264 Invasion – Tumoren 1155, 1157–1158 – – Proteinasen 1156–1157 Invirase 352 In-vitro-Motilitäts-Assay (IMA), Querbrückenzyklus 1011 In-vitro-Translation, Proteinsynthese, gentechnische 93 Involukrin 748–749 Iodolipide 852 (F) 3-Iodtyrosin, Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 468 Iodtyrosindehalogenase 854 Ionenaustauschchromatographie 51 – Aminosäuren 51 – Proteine 60 Ionenaustauscherharze 1061 Ionenfluss, elektrostatisch unterstützter 1032 Ionengradienten – Ionenkanäle 1030 – Transport-ATPasen 1030 Ionenkanäle – ATP-gesteuerte, P2X-Typ 1037 – cGMP-abhängige 804 – extrazellulär aktivierte 765 – Glutamatrezeptoren, ionotrope 1040 – Inaktivierung 1031 – intrazellulär aktivierte 765 – Ionengradienten 1030 – Ionenselektivität 1032 – Kanalpore, zentrale 1030 – Liganden-regulierte 765, 1036 – – Öffnung 1030 – – Rezeptoren 765–767 – Neurotransmitter-gesteuerte, Quaternärstruktur 1037 – Poren 1031

– Regulation, Phosphorylierung 1032 – Rezeptoren, pentamere 1036 – spannungsregulierte, Membrantopologie 1031 – – Öffnung 1030 – – Selektivitätsfilter 1031 – – Spannungssensor 1031 – Transmembransegmente 1031 – gating 1030 Ionenkanalerkrankungen 1032 Ionenprodukt, Wasser 13 Ionenselektivität, Ionenkanäle 1032 ionotrope Glutamatrezeptoren 1038–1039 ionotrope Rezeptoren 1036 IP3 – 7 Inositol-1,4,5-trisphosphat – 7 Inositol-1,4,5-trisphosphat IP3-aktivierte Calciumkanäle 765, 774 IP3-Rezeptoren 783 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – Muskelaufbau/-abbau 1016 IRAK (Il-1 receptor associated kinase) 799 IRE (insulin-response-element) 388 IRE (iron responsive element) 664 – Hämbiosynthese, Regulation 612–613 IRE-Bp (iron responsive element binding protein) 483 IRF9 (interferon regulatory factor 9) 797 Iris, Zinkkonzentration 672 IRP (iron regulatory proteins) 660, 664 – Eisenhomöostase, intrazelluläre 664 – Hämbiosynthese, Regulation 612–613 IRS-1 821 IRS-2 821 IRS-Proteine, Insulinsignal, Weiterleitung 822 ISGF (interferon-α-stimulated gene factor) 797 I-Smad-Protein (Inhibitory Smad) 790 Isobutyryl-CoA 442, 943 Isocitrat 443, 480 (F), 482 – Decarboxylierung 943 Isocitratdehydrogenase 526 – Aktivierung, ADP 485 – – Calcium 485 – Citratzyklus 480, 482–483 – Fettsäurebiosynthese 412 – NADP+-abhängige 483 Isodesmosin 725 isoelektrische Fokussierung (IEF), Proteine 63 isoelektrischer Punkt – Alanin 49

– Aminosäuren 49 – Aspartat 49 – Gelelektrophorese, zweidimensionale 63–64 – Lysin 49 – Proteine 58, 62–65 Isoenzym-Analytik 134 Isoenzyme 113–114 – 7 Enzyme – diagnostische Bedeutung 137 – Lactatdehydrogenase (LDH) 114 Isoflavonoide, Phytoöstrogene 884 Isoformen, Myofibrillen 1003 Isolatoren, Heterochromatin 187 Isoleucin 45 (F), 47, 290, 440, 442–443, 466–468, 486, 518 – Abbau 466, 467 (F), 468 – Aminosäurestoffwechsel, Muskulatur 453 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 443 – Decarboxylierung, dehydrierende 466 – – oxidative 466 – Plasmakonzentration 445 – Stoffwechsel 459 – Transaminierung 441, 466 Isoleucin-tRNAs 289 Isoleucyl-tRNA-Synthetase 292 isoliertes System, Entropie 101 Isomaltase 1059 – Darmsaft 1062 Isomerase 113, 683 – Hexosemonophosphat-Weg 367 – Triacylglycerine, Spaltung/ Resynthese 1072 Isonicotinsäurehydrazid, Tuberkulose 703 Isopentansäure 34 Isopentenylpyrophosphat 565, 570 – Isopren, Biosynthese 565–567 – Squalen, Biosynthese 566 (F) Isopentenylpyrophosphat-Isomerase, Squalen, Biosynthese 566 Isopeptidbindungen 309, 321 Isopeptidylkopplung, Proteinolyse, limitierte 309–310 Isopren 38 – aktives 565 – – Biosynthese 565, 567 – – Kondensation 566 – Cholesterinbiosynthese 564 – Derivate 32 Isoprenlipide 38–39 – Stoffwechsel 564–571 Isoprenoide, Isoprenreste, Kondensation 38 Isoprenol-Glycolipide 31 Isotop32P, Southern-Blot 167 Isotopendilutionsmethode 637 Isotypwechsel, Immunglobuline 1123

I

1214

Anhang

Isovaleriansäure 34 Isovaleryl-CoA 442, 943 ISRE (interferon-stimulated response element) 797 ITAM (immunoreceptor tyrosinebased activation motif)-Peptidsequenzen 114 – Sequenzmotive, Tyrosinkinase(Tyk)-bindende 1121 – T-Zell-Rezeptor (TZR) 1113 Ito-Zellen 1098 – Vitamin A, Speicherung 684 IUBMB (International Union of Biochemistry and Molecular Biology) 112 I-Zellenkrankheit 548

J Jak (Janus-Kinase) 796 – GH 887 – Interferon-α/β-Signaltransduktion 797 – Interleukin-6-Signaltransduktion 795 – Jak1 796 – – Interferon-Signaltransduktion 797 – Jak2 612, 796 – – Hämbiosynthese 797 Jak/STAT-Signaltransduktion 778 – Fusionsproteine 1154 – IL-6-induzierte 795 – Rezeptor-Tyrosinkinasen 789 – STAT1-Homodimere 798 Janus-Kinase 7 Jak Jejunum – Nahrungsstoffe, Resorption 1068 – – Verdauung 1068 – Wasserrückresorption 1074 – Zinktransporter 672 Jetlag, Melatonininsekretion, Desynchronisierung 1044 JNK (c-Jun-N-terminal kinase) 772 Jod 4, 675 – Versorgung, adäquate 853 Jodidtransporter 675 jodiertes Kochsalz 675 Jodmangel 675 Jodmangelstruma 859–860 – endemische 675 Jodstoffwechsel, Schilddrüsenhormonsynthese 850–854 J-Protein (joining protein) – IgA 1120–1121 – Immunglobuline 1122 Junktionszone, dermo-epidermale 749 jun-Onkogen 1143 juxtaglomerulärer Apparat 899 – Reninsynthese/-sekretion 912 (F)

juxtakrine Signaltransduktion 758 J-(joining-)Gen-Segmente 1122 – H-Ketten, Antikörper 1121 – L-Ketten, Antikörper 1121

K Kachektin 976 Kachexie – Proteinabbau 645 – Proteinmangel 645 – Proteolyse, Skelettmuskulatur 529 Kaffee, Cancerogenese 1157–1158 Kainat-Rezeptoren 1038–1039 Kalium 4, 928 – Aufnahme 928–929 – – Stimulierung, Insulin 819 – Ausscheidung, renale 928–929 – Konzentration, Liquor cerebrospinalis 1027 – Mangel 930 – Membranpotential 929 – Resorption, Insulin 929 – Serum 956 Kaliumferricyanid, Methämoglobin 969 Kaliumhaushalt 928–930 – Regulation 928–929 Kaliumkanäle 182, 816, 1031 (F) – ATP-abhängige, Insulinsekretion 815 – Henle-Schleife, dicke, aufsteigende 903 – Insulinsekretion, Glucosestimulierte 814 – Neurone 1030 – Sammelrohr/Überleitungsstück 903 – spannungsregulierte 1031 Kaliumsekretion, Sammelrohr/ Überleitungsstück 903 Kallidin, Carcinoide 1043 Kallikrein, Carcinoide 1043 Kalorienrestriktion, Effekte, Alterungsprozess 639 Kalorimetrie – direkte 636 – indirekte 636 Kanäle – interzelluläre, β-barrel-Architektur 181 – ligandengesteuerte 182 – nicht-selektive 181 – selektive 181 – spannungsabhängige 182 – substratspezifische 182 Kanalpore, zentrale, Ionenkanäle 1030 Kanalproteine 180, 182 – Kationen-Transport 493 – Neurone 1030

– Segmente 1031 – Transmembransegmente 1030 – – α-helicale 182 Kanalverschluss, ball-and-chainMechanismus 1031 Kandidaten-Antionkogene 1147 kanonische Sekundärstrukturelemente, Proteine 73 Kapillarpermeabilität, gesteigerte 800 Kaposi-Sarkom 344 5‘-Kappengruppe – Anheftung, Transkription, Elongation 263 – mRNA 263 (F) Kardiomyopathie 1021 – dilatative 1018 – hypertrophe 1018, 1020 – X-chromosomale 1018 Kardioplegie 929 kardiovaskuläre Erkrankungen, Cadmium 677 Karies 674 – Fluorid 673–674 Karyopherine, Ran-abhängige 269 karzinoembryonales Antigen 7 CEA Karzinome 1142 – CEA 1028 Kaschin-Beck-Krankheit 676 katabole Stoffwechselsignale, Ubiquitinierungssignale 321 Katal pro Kilogramm, katalytische Enzymaktivität 116 Katalase 111, 506 – kinetische Konstante 123 – peroxisomale, Fettsäureoxidation 408 – Peroxisomen 205 – Sauerstoffradikale, Entfernung, enzymatische 511 – Sauerstoffspezies, reaktive, Entstehung/Abbau 511 Katalysatoren 14, 19, 107 – Basen/Säuren 19 Katalyse 19 – biologische Systeme 107–117 – covalente 118–119 – gemischte, Chymotrypsin 120–121 – kombinierte 120 – Metallionen-vermittelte 119–120 – – Carboanhydrase 120 – – Carbonanhydrase 119, 120 (F) – Serinproteasen 120 katalytische Aktivität – Enzyme 117 – maximale, Enzyme 123 katalytische Antikörper 109–110 katalytische Konstante 122 katalytische Triade – Aminosäuren 108

– Chymotrypsin 121 katalytischer Kreisprozess 109 katalytisches Zentrum, Enzyme 108 Katarakt, Diabetes mellitus 837 Katecholamine 758, 826–832 – α-/β-Adrenozeptoren, Signalweiterleitung 830 – Abbau 831 – ACTH-Sekretion 863 – adrenerges System 829 – biologische Wirkungen 829 – Biosynthese 827–829 – Blutdruck 829 – Desaminierung, oxidative, O2-abhängige 434 – Diabetes mellitus 832 – Fettsäuresynthase 418 – Gluconeogenese 392 – Glycogenstoffwechsel, Regulation 384, 386 – Glycolyse 392 – G-Protein, Aktivierung 780 – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 783 – Herz-Kreislaufsystem 829 – Herzleistung, Anpassung, lastabhängige 1015 – Leber 1086 – Lipolyse 399 – Muskelarbeit, Substratoxidation 533 – pharmakologische Hemmung 829 – Plasmaspiegel 831 – β2-Rezeptoren, Aktivierung 528 – Sekretion 828 – – Acetylcholin 828 – – Stress 636 – Speicherung 828 – Stress 636 – Struktur 826–827 – Vasokonstriktion 830 – Vesikel, elektronendichte 1042 – Wirkungen, metabolische 829 – Wirkungsmechanismus, molekularer 829–831 – dense core visicles 1042 Katecholaminrezeptoren 829 – Funktion 829 – Mechanismus 829 Katecholamin-Transporter 1037 Katechol-Östrogene 882 Katechol-O-Methyltransferase 7 Catechol-O-Methyltransferase (COMT) Kathepsin B 315 – Lyosomen 1068 – Lysosomen 1067 Kathepsin C 1116 – Defekte 200 Kathepsin D 315 – Defekte 200 Kathepsin-D-cDNA 307

1215 Sachverzeichnis

Kathepsin G 315 – Bakterienabwehr 1135 Kathepsin K 315 – Defekte 200, 323 – – Osteochondrodysplasie, Osteosklerose bzw. Pycnodysostosis 323 Kathepsin L 315 Kathepsin S 315 Kathepsine 1105, 1107 – lysosomale 200, 307 – Lysosomen 318 – Mangel 322–323 – Überproduktion 322–323 Kationen – Metalle 4 – organische, Transport, Tubulusepithelien 906 Kationenkanäle – Neurone 1030 – Öffnung, Acetylcholin, Bindung 1040 Kationen-Transport 493 Kationen-Transporter (DCT1), Niere 901 κBRE (κB responsive element) Kayser-Fleischer-Ring, WilsonSyndrom 670 KCNA1/KCNQ1, Mutation 1032 Keimbahninaktivierung, Prädispositionssyndrome 1150 Keimzell-ACE 910 Keimzentrum, Lymphknoten/ Milz 1126 Kennlinien, sigmoidale, Enzymaktivität 130 Keratansulfat 29, 549, 727 Keratin 1 748 – Mutation, Hauterkrankungen 752 Keratin 5 748, 753 – dermo-dermale Junktion 750 Keratin 10 748 – Mutation, Hauterkrankungen 752 Keratin 14 748, 753 – dermo-dermale Junktion 750 Keratine – α-Keratin 56, 71–72 – β-Keratin 56, 73 – coiled-coil-α-Helix 748 – Differenzierung, Filaggrin 748 – Epidermis 748 – Fibrillen 748 – Haut 748 – Heptapeptid-Wiederholung 748 – Retinoidfunktion 688 Keratinozyten, Epidermis 748 Kern 7 Zellkern Kernhülle 176 (F), 188 – Auflösung, Mitose 188 Kernikterus 626, 1027 – 7 Ikterus Kernlamina – Defekte 205

– Filamente, intermediäre 214 Kernporen 176 (F), 189 (F) Kernresonanzspektroskopie, Proteine 91–92 Kerntranslokation, Signaltransduktion, Transkriptionsfaktoren 806 Ketamine 393–394 Ketimin 434, 437 Ketimin 1 435 (F) Ketimin 2 435 (F) β-Keto-1-phosphogluconat, Decarboxylierung 943 3-Ketoacyl-CoA 405 – Fettsäuren, β-Oxidation 405 Ketoacyl-Synthase 410, 412 (F) α-Ketoadipat 442–443 – Decarboxylierung 943 – Lysinabbau 476 – Tryptophanabbau 472 (F) Ketoazidose, diabetische 833, 949 Ketobutyrat – α-Ketobutyrat 442–443, 458 – – Decarboxylierung 943 – – Methionin, Abbau 462, 463 (F) – β-Ketobutyrat, Decarboxylierung 943 α-Ketocapronat 442 Keto-Enol-Tautomerie – Oxypurine/Oxypyrimidine 142 – Thymin 142 (F) α-Ketoglutarat 5, 440–443, 456 (F), 478, 480 (F), 482, 487, 698, 943, 1038 – Aminierung 432 – Aminosäurestoffwechsel 432, 440 – – Leber 445 – – Muskulatur 453 – Citratzyklus 1025 – Decarboxylierung 943 – Desaminierung 436 (F) – Harnstoffzyklus 448 – Tyrosinabbau 471 α-Ketoglutaratdehydrogenase 485 – Aktivierung, Calcium 485 – Citratzyklus 480, 483 α-Ketoglutarat/Malat-Carrier 494 α-Ketoglutarsäure 7 α-Ketoglutarat Ketogruppe 5 α-Ketoisocapronat 440 – Decarboxylierung 943 α-Ketoisovalerat 440, 442 β-Keto-L-Gulonat, Decarboxylierung 943 α-Keto-β-methylvalerat 440, 442 – Decarboxylierung 943 Ketonkörper 22, 408, 517, 521 – Abbau 408–409 – Aktivierung, Succinyl-CoAabhängige 409

– – – – – – –

Biosynthese 408–409 – Acetyl-CoA 704 Diabetes mellitus 529 – Typ 1 833 Energiebilanz, negative 640 Energiegewinnung, Niere 910 Energiestoffwechsel, Gehirn 1024 – Enzymaktivitäten, metabolisierende 1025 – Lipolyse 529 – Nahrungsaufnahme, afferente Signale 642 – Nahrungskarenz 521, 529, 641 – Nervengewebe 520 – Skelettmuskulatur 521, 529 – – Nahrungskarenz 529 – Synthese, Alkoholkonsum 1099 – – Leber 408 – Urin 915–916 Ketonurie – Nahrungskarenz 916 – Typ-1-Diabetes mellitus 833 3-Keto-6-phosphogluconat 366 (F) α-Ketopropionat 478 – Decarboxylierung 943 α-Ketopropionsäure 7 α-Ketopropionat Ketoreduktase, Fettsäuresynthase 412 (F) Ketosäuren – α-Ketosäuren 439, 441, 478, 486 – – Aminosäurestoffwechsel 432 – – Decarboxylierung,dehydrierende 479, 943 – – Transaminierung 435 (F) – β-Ketosäuren, Decarboxylierung 943 – Aminosäuren, Ersatz 439 – Muskulatur 453 3-Keto-Sphinganin 559 – Ceramid, Biosynthese 560 (F) 3-Keto-Sphinganinreductase, Ceramid, Biosynthese 560 3-Keto-Sphinganinsynthase, Ceramid, Biosynthese 560 17-Ketosteroide, Urin 915 Δ4,5-Ketosteroid-Isomerase 880 – Cortisol, Biosynthese 865–866 – Testosteron, Biosynthese 874–875 α-Ketosuccinat 478–479, 482 β-Ketothiolase – Fettsäuren, β-Oxidation 405 – Ketonkörper, Biosynthese 409 α-Ketovalerianat, Decarboxylierung 943 Ketten – leichte, Myosin 1004, 1013 – schwere, Myosin 1004–1005 Kettenverlängerungssystem, Fettsäuren, langkettige 419

Keuchhusten 782 KGF (keratinocyte growth factor) 759 Killerzellen, natürliche (NK) 1129 Kilojoule (kJ), Energie 633 Kilokalorie (kcal), Energie 633 Kinase-assoziierte Rezeptoren 768–769 Kinase-Homologiedomäne, Guanylatcyclasen 802 Kinasekaskaden, organisierte 772–773 Kinasen 113, 482 – Aktivität, intrinsische, Wachstumsfaktoren 778 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – cdk-aktivierte (CAK) 222 – PDH-Komplex 482 Kinesin 213, 760 – Motorproteine, Mikrotubuli 210 – Vesikeltransport, intrazellulärer 210 Kinesin-vermittelter Transport, axonaler 210 Kinetik – enzymkatalysierte Reaktion 115 – sigmoidale, Enzyme, allosterische 130–131 kinetische Stabilität, Adenosintriphosphat (ATP) 105 kinetisches Optimum 123 kinetisch-optischer Test 115 Kinetochoren, Mikrotubuli 209 Kinine, Carcinoide 1043 Kininogen, Synthese in der Leber 1088 Kischan-Beck-Krankheit 676 Kiss1-Gen 871 Kisspeptin 871–872 – Leptin 872 – Östradiol, Rückkopplung 880 – Sexualsteroide, gonadale 872 – Tumormetastasen 871 Kisspeptin-54 871 KIT (Tyrosin-Kinase), Stammzellen, Differenzierung 1124 KIT-Rezeptor, Spermatogonien 876 Kleinhirnkerne 1034 Klon 241 klonale Expansion, Immunantwort, adaptive 1110 Klonierung – DNA 241, 242 (F) – Kontrolle, Resistenzgene 242 KM 7 Michaelis-Menten-Konstante Knallgasreaktion 491 Knochen 738 – BMPs 742 – Calcium-Speicher 744 – Entmineralisierung, Glucocorticoide 745

I–K

1216

Anhang

Knochen – extrazelluläre Matrix 738 – FGFs 742 – Fluorid 674 – IGF-1 744 – Insulinempfindlichkeit 817 – Mineralisierung, Calcium 930 – Parathormon 935 – Resorption, Osteoklasten 744 – TGFβ 742 – Thyreocalcitonin 937 Knochenabbau 742–744 – extrazelluläres Kompartiment, isoliertes 743 – Östrogene 883 – pH-Erniedrigung 743 Knochenbildung 738–742 – BMP-4 740 – BMPs (bone morphogenetic proteins) 740 – Cytokine 745 Knochenerkrankungen 746–747 – entzündliche 746 Knochenmark – B-Gedächtniszellen 1126 – B-Zell-Differenzierung 1125 – Differenzierung 952 – Hämbiosynthese 613 – Plasmazellen 1126 Knochenmark-Blut-Schranke 952 – Aufbau 954 Knochenstoffwechsel 746 – Calciferole 690 Knochenumbau 742–744 – Interleukin 1 (IL-1) 745 – Regulation 745 Knochenwachstum – Faktoren 742 – IGF-1 888 – IGF-BPs 888 – Regulation 744 Knorpel 737–738 – Abbau und Umbau 742–744 – Differenzierung, SOX-9 740 – extrazelluläre Matrix 737–738 – hypertrophierter 723 – Insulinempfindlichkeit 817 – Synthese 738–742 – Wachstum, IGF-1 888 – – IGF-BPs 888 Knorpelmatrix, faserverstärktes Gel 738 Knospenbildung, Transport, vesikulärer 193 Knospung, Viren 340–341 Knudson-Hypothese 1151 Koagulopathien 985 Kobalt 4, 672 – Cancerogenese 1157 – Gesamtbestand 656 – Plasmaspiegel 656 Kochsalz, jodiertes 675 köpfchenfreie Zone (bare zone), Myosin 1006 Körpereisen 663 – Hämoglobin 659

Körperfett 638 Körperflüssigkeiten, pH-Wert 17 Körpergewicht 638 – Entwicklung, motorische Aktivitäten 636 – Ernährung, kalorisch restriktive 635 – Realimentation 635 – Reduktion 634 körperliche Aktivität, Energieumsatz 532 Körpermasse, fettfreie 917 – Körperwasser 918 Körpertemperatur 632 – Aufrechterhaltung, Neugeborenes 504 – Fettgewebe, braunes 520 Körperwasser 917 – Körpermasse, fettfreie 918 Koffein, ATP-Synthese 634 Kohlendioxid – Abatmung 942 – Abgabe, Ruhebedingungen 962 – arterivenöse Differenz 1024 – Blutkonzentration 1024 – Carboxylierung 943 – Decarboxylierung 943 – Hämoglobin, Sauerstoffanlagerungskurven 82 – Hydrogencarbonat 961 – Plasmakonzentration 18 – Stoffwechsel 943 Kohlendioxid-Abatmung, respiratorische Störungen 947 Kohlendioxid-HydrogencarbonatPuffersystem 17, 944 – Extrazellulärraum 17 – Liquor cerebrospinalis 1027 – pH-Wert 18 Kohlendioxid-Partialdruck – Atmung, herabgesetzte 946 – Henderson-HasselbalchGleichung 964 – Hypoventilation 946 – metabolische/respiratorische Störung, primäre 949 – Nomogramm 964 – Sauerstoffanlagerungskurve 960 Kohlendioxidtransport – Erythrozyten 962 – Hämoglobin 963 – Plasma 962 – Protonen, Freisetzung 963 Kohlenhydratantigene, Präsentation 1109 Kohlenhydrate 22–32, 651 – Abbau, Insulinfreisetzung 646 – Bedarf 646 – Brennwert, physiologischer 633 – Citratzyklus 479 – energetisches Äquivalent 637 – Entzug, 5‘-Deiodase 856

– Klassifizierung und Funktionen 22 – komplexe, Nahrungsenergie 646 – Lipazidogenese, Nahrungsfett 647 – Malabsorption 393 – de novo-Lipogenese 517 – Resorption 1069–1070 – Schädigung, Sauerstoffspezies, reaktive 510 – Verdauung 1069–1070 – Verdauungsstörungen 1076–1079 – Vergärung im Colon 1076 – Virusadsorption 330 – Virusrezeptor 331 Kohlenhydratresorption, Störungen 1076–1079 Kohlenhydratstoffwechsel – bakterieller, Fluorid 674 – Bedeutung 646–647 – Carboxylase-Holoenzym 706 – Citratzyklus 478 – Ghrelin 886 – Glucagon 651 – Leber 1086–1087 – PPAR-Isoformen 649–650 – Störungen, angeborene 394–395 – – erworbene 393–394 – – Glucosetoleranz-Test 523 Kohlenmonoxid 969 – Affinität, Hämoglobin 970 – Bilirubinabbau 621 – Cytochrom-c-Oxidase, Hemmung 500 – Myoglobin 969 – Sauerstoffanlagerungskurve, Linksverlagerung 969 Kohlenmonoxid-Hämoglobin 959, 969 Kohlenmonoxidvergiftung, Hämoglobin, desoxygeniertes 959 Kohlensäure – Blut, venöses 962 – Dissoziationskonstante K 15 – pKS-Wert 15 – Produktion, intrazelluläre, Tubulus, proximaler 907 Kohlenstoff 4 Kohlenstoffdoppelbindung, Wasser, Anlagerung 11 (F) 1-Kohlenstoffreste, Übertragung 708 (F) Kohlenwasserstoffe – alicyclische, Cancerogenese 1157 – aliphatische, halogenierte, Cancerogenese 1157 – polycyclische 1158 (F) – – aromatische, Cancerogenese 1157 – – – Epoxide 1158

Kohlenwasserstoffkette, Fettsäuren 33 Kollagen-ähnliches Protein (COLQ) 313 Kollagenasen 737, 868 – interstitielle 317 – Parathormon 935 Kollagen(e) 56, 317, 716–724 – Assemblierung 719 – Basalmembran-assoziierte 717 – Binde-/Stützgewebe 716 – Biosynthese, Ascorbinsäure 698–699 – – extrazelluläre 719 – – Hydroxylierung 718 – Biosyntheseschritte, intrazelluläre 718 – Blutstillung, zelluläre 980 – Dermis 751 – Dicke 721 – ECM-Molekül 722 – Ethanolstoffwechsel, Leber 1100 – Expressionsorte 717 – extrazelluläre Matrix 548 – fibrilläre 716–722 – – Biosynthese 718–721 – – Periodizität 717 – – Polypeptidkette 718 – – Polypeptidketten 717–718 – – Sekretion 719 – Hydroxylierung 719 – Kontraktion, Fibroblasten 721 – Mischfibrillen 721 – Netzwerk-bildende (FACIT) 717 – nichtfibrilläre 722–723 – Pentosidin 394 – Porenfilter, Plexuskapillaren 1026 – Propeptide, N-terminale, Abspaltung 721 – Proteine, glykierte 394 – Querstreifung 719–720 – Quervernetzungsreaktionen 719–720 – tripelhelicale Konformation 716 – Typ I 717 – – Dermis 751 – – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 – – Ehlers-Danlos-Syndrom 752 – – Knochen/Knorpel 738 – – Mutation, Hauterkrankungen 752 – Typ II 717, 722 – – Knochen 739 – – Knorpel 738 – Typ III 717 – – Dermis 751 – – Mutation, Hauterkrankungen 752 – Typ IV 717, 722

1217 Sachverzeichnis

– – Basalmembran, Glomerulus 896 – – Dermis 751 – – Ehlers-Danlos-Syndrom 723 – – Netzwerk, flächiges 722 – – Tripelhelix 896 – – Tumorzelloberflächenrezeptoren 1156 – Typ V 717 – – Dermis 751 – – Ehlers-Danlos-Syndrom 723 – – Gelcharakter 738 – – Knorpel 738 – – Mutation, Hauterkrankungen 752 – Typ VI 717, 722–723 – – Ehlers-Danlos-Syndrom 723 – – Mutation, Hauterkrankungen 752 – Typ VII 717, 722–723, 753 – – Autoantikörper, Epidermolysis bullosa acquisita 753 – – Dermis 751 – – dermo-dermale Junktion 750 – – Ehlers-Danlos-Syndrom 723 – – Integrine 200 – Typ VIII 717 – – Dermis 751 – Typ IX 717, 722 – – Chondroitinsulfat-Proteoglykan-Seitenkette 722 – – Knorpel 738 – Typ X 717, 722–723 – – Knochenbildung 739 – Typ XI 717 – – Knorpel 738 – Typ XII 717, 722 – – Dermis 751 – Typ XIII 717 – Typ XIV 717, 722 – – Dermis 751 – Typ XV 717, 723 – – Angiogenese 723 – – Endostatin 723 – – Makuladegeneration 723 – Typ XVII 717, 723, 753 – – Dermis 751 – – dermo-dermale Junktion 750 – Typ XVIII 723 – – Angiogenese 723 – – Dermis 751 – – Endostatin 723 – – Makuladegeneration 723 – Typ XXV 723 – Typen 717 – Wundränder, Kontraktion 721 – Zellen 1098 – Zusammensetzung 721 Kollagenhelix 7 Kollagentripelhelix

Kollagenstoffwechselstörungen, angeborene 723–724 Kollagentripelhelix 74 kolligative Eigenschaften, Lösungen 10–12 Kollisionstheorie 107 Kolloid, Schilddrüse 760, 850, 852 Koma, diabetisches, hyperosmolares 12 Kommunikation – biologische Systeme 758 – Hemmung, Rückkopplung 758 – Zellen 757–760 Kompartimente 176 – extrazelluläre, Prokollagen, synthetisiertes 721 – intermediäre, endoplasmatisches Retikulum 190 – membranumschlossene, Transportwege 191 – nichtlysosomale, Proteinolyse 319–321 Kompartimentierung 174 – Mitochondrien 208 (F) Kompartment-Modelle 638 Kompetenzfaktoren, Zellzyklus 1143–1144 Komplement 1104 Komplementaktivierung 1130–1131 – alternative 1130–1131 – – Bakterienabwehr 1135 – – Properdin 1131 – Antikörperbindung 1120 – Glycoproteine (C1-C9) 1130 – klassische 1130–1131 – – C3-Konvertase 1131 – – C5-Konvertase 1131 – Opsonin 1105 – Regulation 1132 Komplementrezeptoren 1131–1132 – Bakterienabwehr 1135 Komplementsystem 1130–1132 – Faktoren 995 – Funktionen 1130 – Synthese in der Leber 1088 – Zytolyse 1132 Komponenten, zelluläre, Immunsystem, adaptives 1109–1117 Kondensation 10, 11 (F) – Fettsäuren, langkettige, Biosynthese 411 – Isoprenoide 38 Konformationsänderung, substratinduzierte, Enzyme 109 Konformationsepitope 1106 Konjugate, Biotransformation 1090 Konjugationen – Biotransformation 1091–1092 – Sulfat 941–942 Konservierung, genetischer Code 289

konstitutiver Weg, Transport, vesikulärer 191 Kontakt, Plasmamembran 195 Kontaktdermatitis 1137 kontraktile Ringe, Aktin 213 kontraktiler Apparat, Proteine 1004–1009 Kontraktions-Relaxations-Vorgang, ATP 531–532 Kontrollelement, RNA-Polymerase I 267 Kontrollpunkte (checkpoints) 221 Konzentration, quasi-stationäre, Enzym-Substrat-Komplex 122 konzertiertes Modell, Enzyme, allosterische 130 Kooperativität – Enzymkinetik 130–131 – Hämoglobin 82–83 – Proteine 78 koordinative Bindungen, Zink 672 Kopfregion, Myosin 1004–1005 Kopplung – elektrische, gap junctions 180 – H2O2-katalysierte, Tyrosinreste, iodierte 853 Koproporphyrie, hereditäre 618 – Urinausscheidungsmuster 619 Koproporphyrine 614 – Hämbiosynthese 610 (F), 611 – Koproporphyrin III 613 (F) – Koproporphyrinogen III 613 (F) – Urin 915 Koproporphyrinogen-Oxidase – Hämbiosynthese 610–611 – Mangel 618 Koprostanol 39 (F) Koprosterin 568 Kornberg, Roger G.R. 153 Koronarangioplastie, Herzinfarkt 385 Koronararterien, arteriosklerotische, Hyperlipoproteinämie 581 koronare Herzkrankheit, Adipositas 640 Koshland-Nemethy-FilmerModell 131 kovalente Modifikation 7 covalente Modifikation Kozak-Konsensussequenz, Proteinbiosynthese, eukaryote, Initiation 294 KPP (kleine prolinreiche Proteine) 748–749 Krämpfe/Krampfanfälle – Biotinmangel 707 – generalisierte, Lactatazidose 393 Kraniosynostose, FRG-2-Rezeptor, Mutationen 740 Kreatin 459, 463, 532 (F) – Arginin, Umwandlungsreaktionen 461

– Ausscheidung 532 – Biosynthese, Glycin 571 – Phosphorylierung 531 – Polyamine, Biosynthese 462 – Urin 915 Kreatinin 429, 531, 532 (F) – Eliminierungsmechanismen 909 – Urin 915 Kreatinkinase (CK) 105, 531, 632 – cytosolische 531 – Herzinfarkt 531 – Hirn-Typ 137 – Isoenzyme 137 – mitochondriale 531 – Muskel-Typ 137 – Myokardinfarkt 531 – Myokard-Typ 137 Kreatinphosphat 531 (F), 632 – ATP-Bildung 531–532 – Enthalpie, freie 105 – Skelettmuskulatur 531 Krebs, Edwin 381 Krebserkrankungen – Genetik 1143 – Gentherapie 1161–1162 Krebsgene 1143 Krebsgeschwulste 1142 Krebstherapie 1160–1161 – Antikörper, monoklonale 1160 – Cytostatika 1160 – DNA-Replikation, Hemmstoffe 236 – Enzym-Medikamentenvorstufen 1161 Krebs-Zyklus 7 Citratzyklus Kreislaufschock 7 Schock Kreisprozess, katalytischer 109 Kropf 7 Struma Kryoelektronenmikroskopie 174 Kryptorchismus 876 KS 15 KSS (Kearns-Sayre-Syndrom) 512 K-Systeme, Enzymeffektoren 131 Kupfer 4, 667–671 – Ablagerungen 670 – Aufnahme, Ctr1 (copper transporter, SLC31) 669 – – Leber 668–669 – Bestand des Menschen 668 – freies, Toxizität 669 – genetische Veränderungen, angeborene 658 – Gesamtbestand 656 – Mangel, Hämoglobinsynthese 957 – Plasmaspiegel 656 – Redoxpotential 667 – Resorption 668 – – DMT-1-Transporter 668 – Speicherung in der Leber 1090 – Überschuss, ATP7B 669 kupferarme Kost, Wilson-Syndrom 671 Kupferenzyme 667

K

1218

Anhang

Kupferstoffwechsel – Ferrooxidase I 664 – Leber 668–669 – Störungen 7 Wilson-Syndrom Kupfertransport – Albumin 668 – Atox1 669 – Blut-Hirnschranke 670 – CCS 669 – Cox17 669 – Cu-ATPasen 670 – intrazellulärer 669 – Metallochaperone 669 – Transcuprein 668 Kupferzentren, Cytochrom-cOxidase 500 Kupffer-Zellen 975, 1084, 1098 – Phagozytose 1098 – Transferrin, Aufnahme 661 Kuru-Krankheit 1050 KVLQT1, Mutationen 1021 KW 13 Kwashiorkor 645 – Lactasemangel 1077 Kynurenin, Tryptophanabbau 472 (F) Kynureninase, Tryptophanabbau 472, 704 Kynurenin-Formylase, Tryptophanabbau 472 Kynureninmonooxygenase, Tryptophanabbau 472 Kynurensäure, Tryptophanabbau 472 (F), 473

L Labferment 1057 α-Lactalbumin 543 β-Lactam-Antibiotika, PepT1 1073 β-Lactamase, kinetische Konstante 123 β-Lactamring, Penicillin 550 Lactase 1059 – Kohlenhydrate, Resorption 1069 – Mangel, primärer/sekundärer 1077 Lactat 358, 516, 521 – arteriovenöse Differenz 1024 – Blutkonzentration 1024 – Energiebilanz, negative 640 – Gluconeogenese 372 – Glucosesynthese 516 – Glycogenbiosynthese, indirekte 516 – Glycogenolyse, Myokard 385 – Glycolyse 358, 360 (F) – Konzentration, Katecholamine 829 – Leber 1086 – Liquor cerebrospinalis 1028 – Standardpotential 103

Lactatazidose 393 – Enzephalomyopathien, mitochondriale 512 – Schock 949 Lactatdehydrogenase (LDH) 110, 114, 116, 506 – Glycolyse 360, 362 – H-/M-Typ 114 – Isoenzyme 114 – Proteinstrukturen 77 – Säure-Basen-Katalyse 118 – Serum 956 – Zink 672 Lactation, Oxytocin 890 Lactoferrin 974 Lacton 23 Lactose 26, 542 – Biosynthese 543 – Intoleranz 1077 Lactosesynthase 542 Lactosesynthese 372 lacZ-Gen 243 Ladungskompensation, Ubichinon 496 Lafora-Körperchen, MyoklonusEpilepsie 1049 L-Alanin 47 (F), 456 (F), 472 (F) L-Alloisoleucin, Ahornsirupkrankheit 468 Lambert-Beersches Gesetz 115 Lamellarkörper 202–203 Lamellipodien 212, 735 – Aktin 213 Lamine 176 (F), 213 – Filamente, intermediäre 214 – Zellkern 188 Laminin-1 (α1β1γ1) 732 Laminin-2 (α2β1γ1) 732, 1009 Laminin-4 (α1β2γ1) 732 Laminin-5 (α3β3γ3) 732, 753 – dermo-dermale Junktion 750 – Integrine 200 – Mutation, Hauterkrankungen 752 Laminin-10 (α5β1γ1) 732 Laminine 730–733, 1008, 1156 – Axotomie 1047 – Basalmembran, Glomerulus 896 – Blutstillung, zelluläre 980 – Muskeldystrophie 732 Lamininrezeptor, Blutstillung, zelluläre 980 L-Aminooxidasen 437 L-Aminosäuredecarboxylase, aromatische, Katecholaminbiosynthese 473, 827 L-α-Aminosäuren 47 LAMPs (lysosomen-assoziierte Membranproteine) 202 Landkartenzunge, Riboflavinmangel 700 Langerhanssche Inseln 811, 812 (F) – Sekretgranula 811 – α-Zellen, Glucagon 823

Langerhans-Zellen 747 Lanosterin, Cholesterin, Biosynthese 567 (F) Lansoprazol 1056 L-Arginin 460 (F), 461, 532 (F) Laron-Zwergwuchs 889 L-Ascorbat 7 L-Ascorbinsäure L-Ascorbinsäure (7a. Vitamin C) – biochemische Tests 682 – Biosynthese aus Glucuronat 542 – Vorkommen 697 L-Asparagin 456 (F) L-Aspartat 456 (F) Lasso-Struktur (lariat), Intron 265 α-Latrotoxin 767 LBP (LPS-Bindeprotein) 799 LCAT 7 Lecithin-CholesterinAcyltransferase Lck 1114–1115 L-Cystathion, Methionin, Abbau 463 (F) L-Cystein 463 (F), 465 (F)–466 (F) – Cystein, Umwandlungsreaktionen 466 (F) L-Cysteinsulfinat 465 (F) LDH 7 Lactatdehydrogenase LDL (low density lipoproteins) 572, 576, 864 – Apolipoproteine 574 – Cholesterin 577 – – Transport 577 – Cholesterinester 574, 577 – Eigenschaften 573 – β-Faltblätter, amphiphatische 575 – Funktion/Pathobiochemie 992 – α-Helices, amphipathische 575 – HMG-CoA-Reduktase, Aktivität 577 – Hyperlipoproteinämie Typ II 582 – Proteine, glykierte 394 – Triacylglycerine 574 – Vitamin-E-Stoffwechsel 692 LDL-Apolipoproteine, Zellen 1098 LDL-Bindungsstellen, Defekte, Hyperlipoproteinämie Typ II 582 LDL/LDL-Rezeptor-Komplex 578 LDL-Rezeptor 319, 569–570, 577, 694 – Cholesterinstoffwechsel 579 – Cholesterinsynthese 864 – endoplasmatisches Retikulum, raues 578 – Hypercholesterinämie, familiäre 579 – Kreislauf, intrazellulärer 578 – Proteine, Regulation 694 – Steroide-produzierende Zellen 864 – Virusrezeptor 331

– Vitamin-E-Stoffwechsel 692 – coated pits/coated vesicles 578 L-Dopa 1042 Lebendimpfstoffe 348–349 Lebensformen, Stammbaum 6–7 Leber 1083–1102 – Aminosäurestoffwechsel 444–451, 1087–1088 – Ammoniakeliminierung 1087 – Asialoglycoprotein-Rezeptor 1089 – Aufbau 1084 – Ausscheidungsorgan 1096 – Biotransformation 1090–1095 – Energiebedarf bei Nahrungskarenz 521 – Erythropoietin 912 – Ethanol, Stoffwechsel 1100 – Fettsäuren 521 – Fructose-2,6-bisphosphat, hormonelle Regulation 390 – Fructose-2,6-Bisphosphatase 390 – Funktion 516, 1084 – Gallebildung 1096 – Gallensäurensynthese 1061 – Glucagon 825 – Gluconeogenese 391, 521, 1086 – Glucose-6-PhosphataseAktivität 1086 – Glutamin 445 – Glutaminsynthetase 1087 – Glycogen 368, 371, 380 – Glycogenolyse 1086 – Glycogenspeicherung 520–521 – Glycolyse 391–392 – Hämbiosynthese, Regulation 611–613 – Hexosemonophosphat-Weg 368 – Hungerphase 1084, 1086 – insulinantagonistische Hormone 529 – Insulinempfindlichkeit 817 – Intermediärstoffwechsel 1084 – Ketonkörper, Synthese 408 – Kohlenhydratstoffwechsel 1086–1087 – Kupferaufnahme 668–670 – Kupferstoffwechsel 668–669 – Lipidstoffwechsel 1086–1087 – Nahrungskarenz 520–522 – Nichtparenchymzellen 1085, 1098–1099 – Postresorptionsphase 516, 1084, 1086 – Proteinbiosynthese 1088–1089 – Proteinstoffwechsel 1087–1088 – Proteolyse, autophagische 1088 – Protonenhaushalt, Regulation 946

1219 Sachverzeichnis

– – – – –

PTHrP 936 Pyruvatcarboxylase 391 Pyruvatkinase 391 Resorptionsphase 1084, 1086 Säure-Basen-Ausscheidung 947 – Selenkonzentration 676 – Serumalbumin 994 – als Speicherorgan 1089–1090 – Tryptophan-Dioxygenase 473 – Vitamin-B12-Konzentration 709 – Vitamin E 692 – Zellnekrose, akute 1099 – Zinkkonzentration 672 – Zusammensetzung 1084 Leberacinus 1085 Leberbiopsie, Eisenablagerungen 666 Lebercirrhose 7 Leberzirrhose Lebererkrankungen – Aminosäuren im Urin 914 – Ferritinspiegel 663 Leberfibrose 1098–1099 Leberfunktionsstörungen, Aminosäurelösungen 653 Lebergalle, Zusammensetzung 1060 Lebergewebe, Glucose-6-phosphat 378 Leberglycogen 368 – Glucosebedarf, täglicher 521 Leberinsuffizienz, Ammoniumionen 17 Leberkrebs 7 Leberzellkarzinom Leberparenchymzellen 7 Hepatozyten Leberphosphorylase-Mangel, Glucogenose Typ VI 395 Lebersche hereditäre optische Neuropathie (LHON) 207 Lebersternzellen 1098 Leberstoffwechsel, Insulin 523 Leberversagen, Ammoniakvergiftung 453 Leberzellkarzinom 1149 – α1-Fetoprotein 995 – Hepatitis-B-Virus 343 – Hepatitis-C-Virus 343 – p53-Genmutationen 1150 Leberzellparenchym, Funktionsstörungen 761 Leberzellschädigung 1099–1101 – akute 1099 – Alkoholkonsum 1099 – – chronischer 1100 – chronische 1099 – Eisenspeicherkrankheit 1101 – Ferritinspiegel 663 – Steatohepatitis 1101 – Virushepatitis 1099, 1101 – Zelluntergang, apoptotischer 1099 Leberzirrhose 1098–1099 – Alkoholkonsum, chronischer 1100

α1-Antitrypsinmangel 998 Defektproteinämien 998 Eisenablagerungen 666 Enzephalopathie, hepatische 1101 – Hepatitis-B-Virus 343 – Hepatitis-C-Virus 343 – primär biliäre 482 Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT) 579 – Apolipoproteine 574 – Phosphatidylcholin, Acylierungszyklus 557 Lecithin:Retinol-Acyltransferase (LRAT) 684 Lecitine (7 Phosphatidylcholin) 548 Leckstrom (leak channels), Plasmamembran, neuronale 1030 Lectin-artige Chaperone, Proteine, Faltung 305 Leflunomid 595 (F) Leistungsbedarf 635–636 Leitgeschwindigkeit, Nervenfasern, myelinisierte 1030 Lentiviren 329 – RNA, gespleißte 336 Leptin 523, 642–643, 759 – Adipositas 639 – Antagonist, Ghrelin 1066 – Fettgewebe 523–524 – Fettsucht 524 – Insulinresistenz 643 – Interleukine 778 – Kisspeptin 872 – Nahrungsaufnahme, afferente Signale 642 – TRH-Freisetzung 847 Leptinrezeptoren 642–643, 872 – Fettgewebe 523 – Hypothalamus 523 Leptinrezeptor-Gen, Adipositas 639 Lesch-Nyhan-Syndrom 598, 602–603 – Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase (HGPRT), Defekt 602–603 Leserahmen, offener, genetischer Code 289 Leseraster, genetischer Code 288 Leserasterverschiebung (frameshift), Proteinbiosynthese, Termination 299 Leucin 45 (F), 47, 440–441, 443, 466, 518 – Abbau 466, 467 (F), 468 – Aminosäurestoffwechsel, Muskulatur 453 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 443 – Decarboxylierung 466 – Plasmakonzentration 445 – Transaminierung 441, 466 Leucinaminopeptidase, canaliculäre Membran 1097 – – – –

Leucin-tRNA, Punktmutationen, MELAS-Syndrom 1021 Leucin-zipper 277 – CREB 783 – Proteine 277 – Transkriptionsfaktoren 387 Leukämie 1124, 1142 – akute, lymphatische (ALL), Asparaginase 456 – Asparaginase, mikrobielle 456 – chronische 1144 – chronisch-myeloische (CML) 1154 – – Abl-Onkogen 1154 – – BCR-ABL-Fusionsgen 1154 – – BCR-ABL-TyrosinkinaseInhibitor (STI 571) 1155 – – Philadelphia-Chromosom 1154 – – Tyrosinkinasen 1160 – – breakpoint cluster gen (BCR) 1154 – Mikroarrayanalysen 1160 – Proteasomanalysen 1160 Leukodystrophie – metachromatische 200 – – Sulfatidase, Defekt 580 Leukoseviren der Katze 344 Leukotaxis, Komplementaktivierung 1131 Leukotrien A4 422, 423 (F) Leukotrien B4 423 (F), 424 – Leukozyten, Adhäsion 973 Leukotrien C4 422–424 Leukotrien-C4-Epoxydhydrolase, Leukotrienbiosynthese 423 Leukotrien-C4-Synthase, Leukotrienbiosynthese 423 Leukotrien D4 422, 423 (F), 424 Leukotrien E4 423–424 Leukotriene 33–34, 420–425, 759 – Biosynthese 423 – – Lipoxygenasen 422 – Entzündungsmediatoren 423 – Mastzellen 1080 Leukozyten 867, 952, 972–976 – Adhäsion, C5a 973 – Funktion 972–976 – Insulinempfindlichkeit 817 – Oberflächenantigene 1109 – Rekrutierung, Immunantwort 1133 – Selectine 972 – Stoffwechsel 972–976 – Wanderung, gerichtete 1133–1134 – zirkulierende, Chemokine 973 – – Integrine 973 – – Interleukin-8 973 Leukozytenadhäsion – Defizienz Typ I (LAD I) 206 – Integrine 973 – Leukotrien B4 973 Levinthalsches Paradox 87 Lewis, Gilbert N. 18 Lewis-Base 18

K–L

Lewis-Säure 18 Lewy-Körperchen(-Krankheit) 1049 – Parkinson-Syndrom 1049 Leyden-Phänotyp, Hämophilie B 990 Leydig-Zellen 874–876 – Androgene 874 – Cholesterin, Umwandlung 874 – Inhibin 876 – Insulinähnliches Protein 876 – Pregnenolon 874 – Relaxin ähnlicher Faktor 876 LFA-1 (lymphocyte functionassociated antigen 1) 973 LFA-3 (lymphocyte functionassociated antigen 3) 1113 L-förmige Tertiärstruktur, tRNA 291 L-Form (loose), F1-F0-ATP-Synthase 501 L-Fructose 23, 28 L-Fucose 23 (F), 966 (F) α-L-Fucosyltransferase, Blutgruppensubstanzen, antigene Determinanten, Biosynthese 966 (F) L-Glucose, Resorption 1069 L-Glutamat 456 (F) – Desaminierung 436 (F) – Folsäure 707 – Histidinabbau 474 (F) – Stoffwechsel 460 (F) L-Glutamin 456 (F) – Desaminierung 436 (F) L-Glycin 532 (F) L-Gulonolacton-Oxidase 697 L-Gulonsäure 7 L-Gulonat LH (luteinisierendes Hormon, Luteotropin) 844–846, 849, 871–872 – Androgenbiosynthese 874 – Halbwertszeit 849 – Hemmung, Testosteron 875 – Konzentration bei der Frau 878 – Menstruationszyklus 878, 880 – Ovulationsphase 880 – β-Untereinheit, KeimbahnMutation 877 L-Histamin, Abbau 474 (F) L-Histidin, Histidinabbau 474 (F) L-Homocystein, Methionin, Abbau 463 (F) LHON (Lebersche hereditäre optische Neuropathie) 207 L-3-Hydroxyacyl-CoA, Fettsäuren, β-Oxidation 405 L-3-Hydroxyacyl-CoA-Dehydrogenase, Fettsäuren, β-Oxidation 405 Lichtmikroskopie 174 Liddle-Syndrom, Hypokaliämie 930

1220

Anhang

L-Iduronat 541 (F), 542 – Synthese 541 LIF (leukemia inhibitory factor) 759, 794 Liganden – Affinität, Rezeptoren 763 – Erkennung, Rezeptoren 770 – Signaltransduktion 757 Liganden-Bindedomäne (LBD) 687 Ligandenbindung, Sättigung, Rezeptoren 763 Liganden-regulierte Calciumkanäle 776 Liganden-regulierte Ionenkanäle 765–767 Ligasen 113 Lignocerinsäure 34 LINE (long interspersed nuclear elements) 161 lineare Sequenzen, DNA 159 Linker-DNA 153 Linker-Histone 153 Linker-Proteine 728, 732 Linksverlagerung, Sauerstoffanlagerungskurve 960 Linolensäure 34, 418–419 Linoleyl-CoA 420 (F) – Arachidonyl-CoA, Biosynthese 420 Linolsäure 34, 418–419 – cis-9,trans-11-konjugierte 649 Linse, Insulinempfindlichkeit 817 Linsenproteine, glykierte 394 Lipase 398, 788, 1059 – Defekte 200 – hepatische 401 – – Aktivität 517 – – Triacylglycerine, Spaltung 517 – hormonsensitive 398–399, 519 – – Lipogenese 415 – – Lipolyse 399 (F) – – Perilipin 414 (F) – – Phosphorylierung/Dephosphorylierung 132 – Lipolyse, Fettgewebe 398 – Magen 1057 – Mangel, Pankreasinsuffizienz 1077 – Pankreas 1059–1060 – saure, lysosomale 578 – Triacylglycerine, Abbau 1070 Lipase-Colipase-Komplex 1070 Lipazidogenese 647 Lipidanker – Glycoproteine 546 – Proteine 772 Lipidantigene, Präsentation 1109 Lipidaufnahme, Mizellen, Bildung 1071 Lipidderivate, Signalvermittlung 571 Lipiddoppelschicht – Fluidität 41

– Transmembrandomänen 304 – Zellmembran 41–42 Lipide 22–44, 571–572 – amphiphile 40–41, 554 – Analytik 44 – Brennwert, physiologischer 633 – Energiespeicherung 33 – Fettsäurereste 32 – Funktionen 32, 44 – hydrolysierbare 32 – Klassifizierung 32 – Lösungen, wässrige 39–44 – Membranaufbau 33 – nicht hydrolysierbare 32 – Resorption 1070–1072 – Signalvermittlung 33, 571 – Transport im Blut 572–575 – Vergärung im Colon 1076 – Viren 326 Lipid-Hydroperoxid 510 Lipidkinasen 771–772, 788 Lipidlöslichkeit, Arzneimittel 10 Lipidmediatoren, Cortisolsynthese 863 Lipidosen 580 Lipidperoxidation 511 (F) – Eikosanoide, Bildung 511 – Ethanolstoffwechsel, Leber 1100 – Sauerstoffspezies, reaktive 510 Lipidperoxide – Eliminierung, Glutathionperoxidase 676 – Entstehung 510 Lipidradikale, Vitamin E 693 Lipidresorption, Gallensäuren 1061 lipidspaltende Enzyme 1070 Lipidspeicherkrankheiten 206, 580 – Sphingolipidabbau, Enzymdefekte 580 Lipidspeicherzellen 1098 Lipidstoffwechsel – Acetyl-CoA 704 – Bedeutung 647–649, 652 – Carboxylase-Holoenzym 706 – Leber 1086–1087 Lipidtransfer 177 Lipidtransferproteine 191, 576 – Membranen, mitochondriale 563 – Membranlipide, Transportmöglichkeiten 562 Lipid-Wasser-Mischungen, Cholesterin, Löslichkeit 1062 Lipoat 111 Lipoattransacetylase 479, 481 Lipocaline 684 Lipocortin 424 – Hemmung durch Glucocorticoide 867 Lipofuscin, Lysosomen 203

Lipogenese – Enzyme 415 – Fettgewebe 518 – Insulin 416 – Kohlenhydrate 517 – Regulation 415 – Transportproteine 494 – Triacylglycerine 517–519 Lipolyse 398, 518 – β2-/β3-Adrenozeptoren 830 – Cortisol 867 – Diabetes mellitus 528 – Energiebilanz, negative 640 – Fettgewebe 521 – – Lipasen 398 – – Nervensystem, sympathisches 528 – – Noradrenalin 528 – Fettsäuren 400 – gesteigerte, Fettgewebe 522 – Glycerin 373, 1086 – hormonelle Regulation 528 – Insulin 819 – intrazelluläre 406 – Katecholamine 399 – Muskelarbeit 533 – Nahrungskarenz 524, 528–529, 641 – Regulation 415 – Triacylglycerine 399 (A), 400 lipolytische Hormone 519 α-Liponsäure 479, 483 lipophil 9 Lipopolysaccharid (LPS) 799 – Bakterien, gram-positive 1105 Lipopolysaccharid-Bindeprotein 799 Lipoproteine 56 – α-Lipoproteine 573 – α1-Lipoproteine 992 – – Immunelektrophorese 995 – β-Lipoproteine 573, 992, 1044 – – Immunelektrophorese 995 – Aufbau 572–575 – chemische Zusammensetzung 573 – Golgi-Apparat 190 – Metabolismus, Apolipoproteine 574 – Pathobiochemie 581 – physikalische Eigenschaften 573 – Stoffwechsel 575–580 – – Östrogene 883 – Transport, Serumalbumin 572 – triacylglycerinreiche 519, 576 – – Aufnahme 517 – – Chylomikronen 401 – – VLDL 401 Lipoproteinhydrolyse, Heparin 30 Lipoproteinlipase (LPL) 401, 519, 574, 576 – Bindung, HeparansulfatProteoglykane 401 – Chylomikronen, Abbau 576

– – – –

Insulinbiosynthese 819 Insulinregulation 819 Skelettmuskulatur 518 Triacylglycerine, Abbau/ Spaltung 401, 519 – Vitamin-E-Stoffwechsel 692 Liposomen 40 Lipoteichonsäure, Bakterien, gram-positive 1105 Lipotoxizität, β-Zellen 835 lipotropes Hormon, Endorphine 1044 β-Lipotropin 845 Lipoxygenasen 422 – 5-Lipoxygenase, Leukotrienbiosynthese 423 – – α-Tocopherol 693 – 12-Lipoxygenase 423 – 15-Lipoxygenase 423 – Leukotriene, Biosynthese 422 Liquor cerebrospinalis 1025–1028 – Albumin, Schrankenstörungen 1028 – Aminosäuren 1027–1028 – Filtrat 1026 – Gesamtprotein 1028 – Glucose 1028 – Glutamatkonzentration 1039 – Glutamin 1027–1028 – Immunglobulin 1028 – Ionenkonzentration 1027 – Kaliumkonzentration 1027 – Kohlendioxid-Hydrogencarbonat-System 1027 – Labordiagnostik 1028 – Lactat 1028 – pH-Wert, Hydrogencarbonatpuffer 1027 – Plexus choroideus 1026 – Proteine 1028 – Zellzahl 1028 Liquorfiltration, Plexus choroideus 1027 Liquor-pH, Alkalose/Azidose, respiratorische 1027 Lisinopril 316 Lispro 816 Listeria monocytogenes 215 – Aktinfilamente 214 Lith-Gene, Cholesterinsteine 1101 Lithiumchlorid 126 lithogene Galle 1061 L-Ketten – Antikörper, C-Gen-Segmente 1121 – – joining-(J-)Gen-Segmente 1121 – – V-Gen-Segmente 1121 – Immunglobuline 1118–1119 – – Gene, Umlagerung 1122 L-Lactat, Glycolyse 362 L-Methionin, Abbau 463 (F) L-Methylmalonyl-CoA, Fettsäureabbau 406, 407 (F)

1221 Sachverzeichnis

L-Methylmalonyl-CoA-Mutase, Fettsäureabbau 407 LMM (light meromyosin) 1004–1006 Lösungen – ideale, Druck, osmotischer 12 – kolligative Eigenschaften 10–12 – osmolale 12 – osmolare 12 – osmotisches Verhalten, Gefrierpunktserniedrigung 12 – verdünnte, Wassermoleküle, Konzentration 13 – wässrige 13 – – hydrophobe Wechselwirkungen 9 (F) – – Lipide 39–44 Lösungsmittel, organische, Proteindenaturierung 88 LOH (loss of heterozygosity) 1145 Lokalisierungssignale, Transport, vesikulärer 193 Loki-Lorand-Faktor 985 London-Dispersionskräfte 78 long loop feedback, Hormone 845 long-QT-Syndrom 1032 long term depression, Initiation, Cap-abhängige 300 long terminal repeats (LTR), HIV-Provirus 337 Lorikrin 748–749 L-Ornithin – Arginin, Umwandlungsreaktionen 461 – Stoffwechsel 460 (F) loss of heterozygosity (LOH) 1145–1146 – colorektale Tumoren, sporadische 1152 Lovastatin, HMG-CoA-Hemmung 134 low density lipoproteins 7 LDL β-LPH 1044 L-Phenylalanin, Phenylalanin, Umwandlungsreaktionen 469 (F) L-Prolin, Stoffwechsel 460 L-Pyruvatkinase (L-PK), Induktion 647 LRAT (Lecithin:Retinol-Acyltransferase) 683–684 L-Selectine 199 – Granulozyten 972 – Leukozyten 972 – Lymphozyten, Zirkulation 1129 L-Serin – Desaminierung 436 (F) – Methionin, Abbau 463 (F) L-Threonin 458 L-Tryptophan, Serotonin, Abbau/ Biosynthese 1042 (F) L-Typ-Calciumkanal, Muskelkontraktion 1011 L-Tyrosin 471 (F)

– Phenylalanin, Umwandlungsreaktionen 469 (F) Luciferase-Gen 248 Lumbalpunktion 1028 Lunge – Hämoglobin 83 – Hydrogen-Carbonat-Puffersystem 945 – Protonenkonzentration 945 Lunge , Zinkkonzentration 672 Lungenalveolen, Makrophagen 975 Lungenembolie, t-PA, rekombinantes 988 Lungenemphysem, α1-Antitrypsinmangel 998 Lungenentwicklung, PDGF-A 788 Lungenkapillaren, Kohlendioxidpartialdruck 962 Lungenkrebs 1149 Lungensurfactant 7 Surfactant Lupus erythematodes 1094 – visceralis 1132 Lutealphase, Menstruationszyklus 880 luteinisierendes Hormon 7 LH Luteolyse 880 luteotropes Hormon 7 LH luteotropic hormone releasing hormone 7 LH-RH Luteotropin 7 LH L-Xylulose 542, 943 Lyasen 113 – Histidinabbau 475 Lyme-Disease 1028 Lymphknoten, Keimzentrum 1126 lymphocyte function-associated antigen (LFA-3) 1113 Lymphome 1124 – β2-Mikroglobulin 1028 Lymphosarkom, ADH-Sekretion 921 Lymphotactin (XCL1) 759 Lymphozyten – Antigen-Erkennung 1110 – Blut 1129 – Glucocorticoide 867 – naive 1129 – Rezirkulation 1129 – tumorinfiltrierende (TIL), Krebstherapie 1161 – Zirkulation 1129 Lyn, B-Zell-Aktivierung 1126 Lynch-Syndrom 1152 Lysin 45, 47, 438, 440–443, 473–476, 518 – Abbau 475–476, 942 – Amino-/Carboxylgruppen, Dissoziationsverhalten 50 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 443 – isoelektrischer Punkt 49 – pK-Wert 49 – Plasmakonzentration 445

– Titrationskurve 50–51 – Transaminierung 441 Lysin-48 321 Lysinhydroxylierung, Ascorbinsäure 698 Lysinoxidation, Proteingehalt, erhöhter 476 Lysinreste – Acetylierung 273 – Deacetylierung 273 – Methylierung 273 Lysophosphatidylcholin 35–36, 557 – Erythrozyten, Hämolyse 559 – Phosphatidylcholin, Abbau 558 – – Acylierungszyklus 557 (F) Lysophosphoglyceride 35–36 Lysophospholipase – Allergie Typ I 1137 – Phosphatidylcholin, Abbau 558 – Phosphoglyceride, Abbau 558 lysosomale Speicherkrankheiten 206 Lysosomen 176 (F), 200, 645 – Alterung 203 – Aminopeptidasen 318 – Autophagocytose 200 – Biogenese 200 – Carboxypeptidasen 318 – Crinophagie 1067 – Defekte 395 – Endozytose 200 – Kathepsin B 1067–1068 – Kathepsine 318 – klassische 200 – Kompartimentdefekte 206 – Lipofuscin 203 – Mannose-6-phosphat-Rezeptor 201 (F)–202 (F) – Proteine, Abbau 318–319 – – fehlgefaltete, Erkennung 88 – sekretorische 202 (F), 203 – Thrombozyten 977 Lysosomen-ähnliche bzw. -verwandte Organellen 202–203 Lysosomen-assoziierte Membranproteine (LAMPs) 202 Lysozym 31, 974, 996, 1104 – Bakterienabwehr 1135 – Funktion/Pathobiochemie 993 – Katalyse, covalente 118–119 – Speichel 1054 Lyssavirus 328 LYST-Protein-Defekte, Immundefizienz 206 Lysyloxidase 725 – Kollagenbiosynthese 720 – Kupfer 667 – Polypeptidketten, Vernetzung 310 – Pyridoxalphosphat 704 Lysyloxidasemangel, MenkesErkrankung 671

L–M

M MAC-1 (Leukozyten-Adhäsionsrezeptor) 973 Macrolid-Antibiotika, Proteinbiosynthese, Hemmung 299 macrophage colony stimulating factor 7 M-CSF macrophage inflammatory proteins 7 MIP macrophage migration inhibitory factor (MIF), Sekretion 760 Macula densa 897–899 Mad (mothers against decapentaplegic) 790 männliche Fortpflanzungsorgane, Wachstum und Differenzierung 877 Mäuse – chimäre 252 – transgene, Herstellung 251–252 Magen – Mucine 1057 – Mucinschicht, pH-Gradient 1057 – Natriumsekretion 1074 – PTHrP 936 – Schleimschicht 1057 – Wassersekretion 1074 Magenantrum, Motilität 1057 Magengeschwür 7 Magenulcus Magenlipase 1057 – Triacylglycerine, Abbau 1070 Magenmotorik, Hemmstoff, Cholecystokinin-Pankreozymin (CCK-PZ) 1066 Magensäureproduktion, Hemmung durch Somatostatin 887 Magensaft 1054–1057 – pH-Wert 13 – Protonenkonzentration 1055 – Sekretion, hormonelle Regulation 1063 Magenulcus 1067 – Salzsäure 1055 Magermasse 638 Magnesium 4 – ATPasen 939 – Aufnahme, proteinreiche Ernährung 940 – Ausscheidung 940 – Bedarf 940 – calciumantagonistische Wirkung 939 – Konzentration, extra-/intrazelluläre 940 – Resorption 1076 – – intestinale 940 – Stoffwechsel 940 – tRNA, Spermin 291 – Verteilung im Organismus 940 Magnesium-ATP-Komplex 105 (F)

1222

Anhang

Magnesiumhaushalt 939–941 Magnesiummangel 940 Magnetresonanzspektroskopie (NMR) – pH-Wert 14 – Wasserstoffionenkonzentration 14 MAGPs 724 Maillard-Reaktion 394 major basic protein (MBP), Allergie, Typ I 1137 major breakpoint-cluster region (M-bcr), BCR-Gen 1154 major histocompatibility complex 7 MHC Makroautophagozytose, Proteine 319 α2-Makroglobulin 317 – Funktion/Pathobiochemie 992 – Immunelektrophorese 995 – Plasmin, Bildung 988 – Synthese in der Leber 1088 Makromoleküle 6 – Methylierung 463 – Selbstorganisation 6 – – hydrophobe Wechselwirkungen 10 Makronährstoffe – Oxidation, Netto-ATP-Gewinn 633 – Verbrennung, physiologische 633–635 Makrophagen 975 – Aktivierung, Toxine, bakterielle 799 – Antigene, Präsentation/Prozessierung 975 – Bakterienabwehr 1135 – Interleukin-1 975 – Lungenalveolen 975 – Peritoneum 975 – Phagozytose 975 – TNFα 976 – Transferrin, Aufnahme 661 – ZNS, Mikroglia 1045 – Zytolyse, antigenspezifische 1116 Makrophagen-Vorläuferzellen – Differenzierung, M-CSF 743 – Osteoklasten, Differenzierung 743 Mal (MyD88 adapter-like) 799 Malabsorptionssyndrome – Proteinmangel 645 – Zinkmangel 673 Malaria, Glucose-6-phosphatDehydrogenasemangel 968 Malat 441, 443, 480 (F), 484 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Aminosäurestoffwechsel 432 – Gluconeogenese 448 – Harnstoffzyklus 448 – Standardpotential 103

Malat/Aspartat-shuttle 493, 495 (F) Malat/Aspartat-Zyklus, Transportproteine 494 Malatdehydrogenase 485, 506 – Citratzyklus 480, 484 – cytosolische (MDHc) 374 – – Gluconeogenese 373 – Fettsäurebiosynthese 413–414 – mitochondriale (MDHm) 373–374 – Zink 672 Malatenzym 487, 570 – Fettsäurebiosynthese 412–413 Malat-shuttle 443 – Leber 454 Malatzyklus 364 MALDI (matrix assisted laser desorption ionisation) 67 Maldigestionssyndrome, Proteinmangel 645 Maleylacetacetat, Tyrosinabbau 471 (F) Maleylacetat-cis-trans-Isomerase, Tyrosinabbau 471 Malonat 485 Malonyl/Acetyltransferase (MAT) – Fettsäurebiosynthese 410 – Fettsäuresynthase 412 (F) Malonyl-CoA 410, 517, 601, 943 – Carboxylierung, Biotin-abhängige 410 (F) – Carnitin-Acyltransferase-1, Inhibitor 416 – Fettsäurebiosynthese 413, 417 Malonyltransfer, Fettsäuren, langkettige, Biosynthese 411 Maltase 1059 – Darmsaft 1062 – Kohlenhydrate, Resorption 1069 Maltase-Defizienz, saure 1018 Maltose 26 (F), 646 – Wasserresorption 1074 Maltosetyp, Disaccharide 25 Mamma – Entwicklung, Prolactin 888 – Insulinempfindlichkeit 817 – laktierende,Hexosemonophosphat-Weg 368 – – PTHrP 936 – Östrogene 883 Mammakarzinom 1147 – eIF-4G 301 – erbB2 786 – HER2-Neu-Onkogen 1160 – Östrogene 1159 – postmenopausales, Adipositas 640 – Risiko, Katechol-O-Methyltransferase-Aktivität, niedrige 882 Mangan 4, 673 – Bindung, β1-Globulin 673 – Gesamtbestand 656 – Mangel, Fertilitätsstörungen 673

– – Skelettdeformierungen 673 – Mitochondrien 673 – Plasmaspiegel 656 Mannitol 23 Mannosamin 24 Mannose 28, 540, 543–544 – β-D-Mannose 23 (F) – Biosynthese 543–544 – Stoffwechsel 542–543 – – GTP 540 Mannose-1-phosphat 544 Mannose-6-phosphat 200, 544 (F) – Bildung 544 – Glycoproteine 548 Mannose-6-phosphat-Rezeptor 201, 305, 887 – Kationen-abhängiger 202 – Kationen-unabhängiger 202 – Lysosomen 201 (F)–202 (F) Mannose-Rezeptoren 1105 – Bakterienabwehr 1135 α-Mannosidase, Defekte 200 Mannosidose 200 MAO-A 436 MAO-B 436 MAO-Hemmstoffe/-Inhibitoren 436 – Moclobemid 134 – Parkinson-Erkrankung 436–437 MAPK (mitogen activated protein kinase) 772, 1115 – Aktivierung, Grb2/SOS-Assoziation 787 – Histonphosphorylierung/ -dephosphorylierung 274 MAPK-Kaskade 772, 788 – Insulinsignal, Weiterleitung 822 MAPs (Mikrotubuli-assoziierte Proteine) 213 Marasmus 645 Marfan-Syndrom 751–752 – Fibrillin-1, Defekte 726–727 Marmorknochenkrankheit 184 Maroteaux-Lamy-Erkrankung (MPS VI) 200 Masernvirus – Adsorption, Rezeptor-vermittelte 333–334 – Fusionierung mit der Zellmembran 334 Massenspektrometrie, Proteine 62, 67 Massenwirkungsgesetz 15 Mastadenovirus 329 Mastzellen – Aktivierung, Komplementaktivierung 1131 – Granula, basophile, Heparin 986 – IgE-vermittelte Reaktionen 1079 Matrilline, Knorpel 738 Matrilysin (MMP7) 317, 737

– Prostata-Karzinommetastasen 322 Matrix, mitochondriale 491 matrix assisted laser desorption ionisation (MALDI) 67 Matrix-Gla-Protein – Knochen 738 – Vitamin-K-Abhängigkeit 695 Matrixine 317 Matrix-Metalloproteinasen (MMPs) 315, 317, 737 – extrazelluläre 317 – extrazelluläre Matrix, Abbau 736, 1156 – membrangebundene (MT-MMPs) 737 – perizelluläre 317 – Regulation, Cytokine 1157 – – TIMPs 1157 Matrixproteine – extrazelluläre, Biosynthese, Muskelzellen, glatte 1015 – HIV 331 Matrixraum – mitochondrialer, Fettsäuren, β-Oxidation 405 – Mitochondrien 204 Matrix-Vorläuferprotein 308 Matrize, DNA-Polymerasen 231 matrizelluläre Proteine, Knochen 738 Matrizenstrang – Basensequenz 256–257 – RNA-Synthese 256–257 Maus-Antikörper, humanisierte 1128 Mausmyelomzelle, HGPRT (Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyl-Transferase) 1127 Maxam, Alan 170 M-Bande – Muskulatur, quergestreifte 1003, 1008 – Proteine 1008 MBP (major basic protein), Allergie Typ I 1137 McArdle-Syndrom 1018, 1021 mcc-Gen (mutated in colon carcinomas), colorektale Tumoren, sporadische 1152–1153 MCHeom 1005 MCH-Wert, Anämie, hyperchrome 957 MCP1 (CLC2) 759 – Proteine, Regulation 694 MCP2 (CLC8) 759 MCP3 (CLC7) 759 MCP4 (CLC13) 759 M-CSF (macrophage colony stimulating factor) 759, 868, 953 – Makrophagen-Vorläuferzellen, Differenzierung 743 – Osteoklastogenese 743 M-CSF-Rezeptor 1143 MCV (mittleres korpuskuläres Volumen) 956

1223 Sachverzeichnis

mDNA, Mitochondrien 204 MDR1 1161 (F) – Chemotherapieresistenz 1160 MDR3, Cholesterinsteine 1101 MDR3 Gen 1101 MDR-Protein (multi drug resistance protein) 183 – ABC-Transporter 184 – Chemotherapeutika, Resistenz 184 – Cytostatika 1160 – Floppasen 563 MDR-Transporter 1096 Mechanotransduktor, Cdh23 198 Mediatorproteine 261 Medikamente 7 Arzneimittel Mef2 281 Megakaryonten, Abschnürung, Thrombozyten 976 Megalinrezeptor – Resorption, tubuläre 906 – Tubulusepithelzellen 689 Meiose 156 (F), 157 MEK (mitogen-activated/extracellular signal-activated kinase kinase) 772 – Muskelaufbau/-abbau 1016 MEKK (mitogen-activated/extracellular signal-activated kinase kinase kinase) 772 Melanin 468 Melanocortin-4-Rezeptor-Gen, Adipositas 639 Melanocyten-stimulierendes Hormon 7 MSH Melanom 1147 Melanosomen 202–203 Melanozyten 747 MELAS (mitochondriale Enzephalomyopathie mit Lactatazidose und Schlaganfallähnlichen Episoden) 512, 1018, 1021 – Leucin-tRNA, Punktmutationen 1021 Melatonin 463, 468, 1043–1044 – Abbau/Biosynthese 1043 – – Tryptophan 1025 – circadiane Rhythmik 1044 – jetlag 1044 Membran-Anker 567 – Acylierungen 310 – Prenylierungen 310–311 – Proteine 310 Membranbeschichtung – Adaptine 193 – coat-Proteine 193 Membran-Cytoskelett, Muskelfasern, Dystrophin 1009 Membranen 176–178 – β-barrel-Protein 178 (F) – biologische, Phosphoglyceride 556 – – Stabilisator, Zink 672 – Biosynthese 562–564 – – endoplasmatisches Retikulum 562

– – – – –

Cholesterin 39 Cytochrom-P450-Moleküle 177 Erythrozyten 956 β-Faltblattmotive 178 Glucosetransport, Na+-Ionenabhängiger 177 – Lipiddoppelschicht 176–177 – mitochondriale, Lipidtransferproteine 563 – permeable 11 – Transmembrandomänen 177 – Transport 177 – Verbindungsbogen (hairpin) 177 – zelluläre, Cholesterin 568 – – Pathobiochemie 185 – – Penetration 185 – – Permeabilität 185 – Zwischenräume 177 Membranfluidität 42–43 membrangebundene Guanylatcyclasen 802–803 Membranglycoproteine 548–549 Membranhülle 327 Membraninhibitor, Erythrozyten, lytischer Angriff, Abwehr 969 Membranintegration, Na/H-Austauscher-1 (NHE-1) 903 (F) Membrankanal 180 Membranlipide – Cholesterin 177 – Mikrodomänen 177 – Modifizierung 771 – Peroxidation, Sauerstoffverbindungen 974 – Sauerstoffspezies, reaktive 510 – Transportmöglichkeiten, Lipidtransferproteine 562 – Verteilung 177 Membran-MMPs 737 Membranpotential – Kalium 929 – Neurone 1030–1033 – Stabilisierung, Calcium 930 Membranproteine – amphiphile α-helicale Motive 178 – Assoziation 43 – down-Regulation 195 – Endozytose, Ubiquitinylierung 196 – Funktionen 42 – Glycoproteine 27 – integrale 41, 177 – ohne Kohlenhydratanteil, Erythrozytenmembran 956 – Lipiddoppelschichten 41 – lipidverankerte 42 – periphere 42, 178 (F) – Proteingehalt 41 – zelluläre, Virusadsorption 330 Membranrezeptoren 763–769 – aktivierte 768–769 – lipid rafts 769 – receptor-shedding 805

– scaffold(Gerüst)-Proteine 769 – Signaltransduktion 769–777 – Spaltung, proteolytische 778 – Wachstumsfaktoren 1144 Membransegment – interzelluläres, Hepatozyten 1085 – kanalikuläres, Hepatozyten 1085 Membransysteme, Thrombozyten 977 Membrantransport 177–180 – 7 Transport – ΔG 179 – durch Kanäle 179 – Pumpen 179 – Systeme 180 Membrantransport-Proteine, Niere 901 (F) Membranvesikel 6, 563 Memory-T-Zellen 1105 – Lymphozyten, Zirkulation 1129 Menachinon 695–697 Menadion 695–697 Meningitis, tuberkulöse 1028 Menkes-Erkrankung 671 Menkes-Protein (ATP7A) 668, 670 – Aufbau 670 – Defekte, genetische 670 Menopause, Östradiol/Östron 882 Menstruation, Eisenverluste 665 Menstruationsblut, fibrinolytische Aktivität 883 Menstruationszyklus – Follikelphase 879 – FSH 878–880 – GnRH-Sekretion 878, 880 – LH 878, 880 – Lutealphase 880 – Proliferationsphase, Östrogene 883 – Sekretionsstadium, Progesteron 883 Menten, Maud 121 MEOS (microsomal ethanol oxidizing system), Alkoholkonsum, chronischer 1100 Meprine 317–318 Mercaptoethanol 86 – SDS-Gelelektrophorese 62 Mercaptopurin, Adenylosuccinatsynthetase-Hemmung 134 Merlin 1147 MERRF (myoklonale Epilepsie mit ragged red fibers) 512 Mesangium, extra-/intraglomeruläres 897 Mesangiumzellen, Glomerulus 896 Mesobilifuchsin 623 Mesobilirubin 622, 623 (F) Mesobilirubinogen 622, 623 (F) Mesomerie, Peptidbindung 69–70

messenger-RNA 7 mRNA Messreaktion, optischer Test, gekoppelter 115 metabolische Rate – Glucagon/Insulin 636 – Stress 636 metabolische Regulation, Pyruvatdehydrogenase 416 metabolische Störung, primäre, pCO2 949 metabolisches Syndrom – Adipositas 640 – Angiotensinogen 524 – Typ-2-Diabetes mellitus 834 Metabolisierungsenzym, Induktion, Xenobiotica 1093 Metaboliten – Bestimmung, EndwertMethode 116 – – enzymatische 116, 136 – Enzyme 116 – Konzentrationen, Enzyme 135–136 Metabolon 962 metabotrope Glutamatrezeptoren 1039 metabotrope Rezeptoren 1036 metallaktivierte Enzyme 657 Metalle 4 – Kationen 4 – Proteine, Funktionen, strukturgebende 657 Metallenzyme 7 Metalloenzyme Metallionen – biologische Funktionen 5 – Einteilung 4–5 – Enzyme, Cofaktoren 111–112 – Katalyse 119–120 – Spurenelemente 657 – Substratkonformation, optimale 112 Metallionen-aktivierte Enzyme 111 Metallochaperone, Kupfertransport 669 Metalloelastase 737 Metalloenzyme 111, 657 – Spurenelemente 657 Metalloproteinasen 315 – Basalmembran, Abbau 1156 – extrazelluläre Matrix, Abbau 736 – Inhibitoren, Tumorzellen 1156 – prozessierende, mitochondriale 307 Metalloproteine 56, 658 Metallothioneine, Cadmium/Zink 676 Metanephrin, Katecholaminabbau 831 Metaphase, Mitose 155 Metaphasechromosomen 155 Metapneumovirus 328 Metarhodopsin II 685 (F), 686

M

1224

Anhang

Metastasierung – Aktin 213 – Hyaluronsäure 550 – Mehrschrittprozess 1155 – Tumoren 1155, 1157–1158 – – Proteinasen 1156–1157 Metastin 871 Methämoglobin 969 – Reduktion, Toloniumchlorid 969 Methämoglobinbildner, Dapson 969 Methämoglobinreduktase 969 Methamin 438 Methionin 45 (F), 47, 49, 290, 438, 440, 443, 708 (F) – Abbau 462, 942 – Aufnahme, Insulin 820 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 443 – – Vitamin B12 709 – Codons 289 – Desaminierung 441 – Malabsorption 1078 – Plasmakonzentration 445 – Schwefel 941 – Stoffwechselbedeutung 459, 462 – Sulfatstoffwechsel 941 (F) Methioninreste, Sauerstoffspezies, reaktive 510 Methionin-Synthase, Homocystein, Remethylierung 464 Methioninzyklus 462, 464 Methionylrest, α1-Antitrypsin 998 Methionyl-tRNAiMet – Proteinbiosynthese, eukaryote, Initiation 294 – – Initiation, Regulation 300 Methionyl-tRNA-Synthetase 291 Methotrexat 709 – Dihydrofolatreduktase-Hemmung, humane 134 3-Methoxy-4-hydroxymandelsäure, Katecholaminabbau 831 3-Methoxy-4-hydroxymandelsäurealdehyd, Katecholaminabbau 831 α-Methyl-1-adamantanmethylamin 7 Rimantadin Methylasen 169 2-Methyl-1,3-Butadien 7 Isopren 2-Methylbutyryl-CoA 442, 943 Methylcobalamin 681, 710 (F) – biochemische Funktion 710 – Homocystein, Remethylierung 464, 710 Methylcrotonyl-CoA-Carboxylase 706, 943 Methylcrotonylglycinurie, Biotinmangel 707 Methylcytosin 273 – Drosophila melanogaster 273 2-Methyl-D-1,3-Butadien 7 Isopren

α-Methyldopa, Katecholamine, Hemmung 829 Methylen-THF-Reduktase, N5,N10Methylen-THF-Reduktase 708 Methylen-THF-Reduktase (MTHFR) 464 – Homocystein, Remethylierung 464 α-Methylglucosid 25 (F) β-Methylglutaconyl-CoA 943 Methylgruppen, Steroide 39 7-Methylguanosin, 5'-Kappengruppe, mRNA 263 3-Methylhistidin 48, 312, 473 – Muskelproteinumsatz 915 – Troponinkomplex 1006 – Urin 915 Methylierung 272 – Argininreste 273 – Genom 272 – – Methyltransferase 272 – Histonproteine 273–274 – Lysinreste 273 – Proteine, modifizierte 312 Methylindol 1076 Methylmalonazidämie/-azidurie 459 Methylmalonyl-CoA 601 – Isomerisierung, Kobalt 672 – Vitamin B12 711 (F) Methylmalonyl-CoA-Mutase 111, 459 – Defekt 459 – Vitamin B12 711 (F) Methylmalonyl-CoA-Racemase, Fettsäureabbau 407 2-Methyl-1,4-naphthochinon 695–697 2‘-Methyl-ribosid, 5‘-Kappengruppe, mRNA 263 Methylthioadenosin, Arginin, Umwandlungsreaktionen 461 Methyltransferasen – Histonmethylierung 275 – Methylierungsmuster, Genom 272 – Transkription, Elongation 263 α-Methyltyrosin, Katecholamine, Hemmung 829 Meulengracht-Syndrom 625–626 Mevalonat 565 (F), 570 (F) – Biosynthese 565 – – aus Acetyl-CoA 565 (F) – Cholesterinbiosynthese 564 – Isopren, aktives, Biosynthese 565 (F) Mevalonatkinase, Isopren, aktives, Biosynthese 565 Mevalonsäure 7 Mevalonat Mevinol 570 Mg-ATP-Komplex 112 MHC Iα 1005 MHC-I-Peptidrezeptor 1106 MHC-I-Protein 1108 MHC Iton 1005 MHC II a 1005

MHC II b 1005 MHC II d/x 1005 MHC-II-Protein 1108 MHC IIm 1005 MHC (major histocompatibility complex) 1106–1107 – Aufbau 1108 MHCemb 1005 MHC-Klasse-I-Moleküle, T-Zellen 1110 MHC-Klasse-II-Moleküle 975 – Helfer-T-Zellen 1110 MHC-Moleküle – antigen-präsentierende, Exosomen 203 – invariante Kette 1107 MHCneo 1005 MHC-Peptidrezeptoren, Antigenpräsentation 1107 MHC-Restriktion, T-Zellen, Antigenerkennung 1110 MH-Domänen (MAD homology domains), Smad-Proteine 771 Michaelis, Leonor 121 Michaelis-Menten-Gleichung 121–124 – Linearisierung nach Lineweaver und Burk 124 – Substratkonzentration, Reaktionsgeschwindigkeit 122 – V/S-Charakteristik 122 Michaelis-Menten-Konstante 122, 124 – Erhöhung 124 Michaelis-Menten-Modell 121 Miesmuscheln, Cadmium 677 MIF (macrophage migration inhibitory factor), Sekretion 760 Migräne, hemiplegische, familiäre 1032 Mikroalbuminurie 915 Mikroangiopathie, Diabetes mellitus 837 Mikroarrayanalysen, Leukämie 1160 Mikroautophagozytose, Proteine 319 Mikrodomänen (Membranlipide) 177 – flüssig geordnete (lo, liquidordered) 177 – flüssig ungeordnet (ld, liquiddisordered) 177 – rafts 177 Mikroelemente 7 Spurenelemente Mikrofibrillen, 9+2-Mikrofibrille 72 Mikrofibrillen-assoziierte Glycoproteine 724 Mikroglia, Makrophagen, ZNS 1045 β2-Mikroglobulin 995, 1107 – Lymphome 1028 Mikromoleküle, Methylierung 463

Mikroorganismen – Immunabwehr 1134–1136 – Phagozytose 1105 Mikropartikel, Thrombozyten 977 Mikro-RNA (miRNA) 163–164, 281 Mikrosatelliten – colorektale Tumoren, nichtpolypöse 1152 – DNA 160 – Instabilität, colorektale Tumoren, sporadische 1152 – Sonden 1146 mikrosomales Cytochrom-P450abhängiges ethanoloxidierendes System 7 MEOS Mikrothrombosen 800 mikrotubuläre Transportvorgänge, Acetaldehyd-bedingte Beeinträchtigung, Alkoholkonsum 1099 mikrotubuläres System, Hormone, Transport 760 Mikrotubuli 176 (F), 207–211 – Axone 208 – Centrosomen 208 – Cytoskelett 207–211 – Dendriten 208 – αβ-Dimere 208 – Kinetochoren 209 – Minus-Ende 208 – Mitose 209 – Motorproteine 209–211 – Neurone 1029 – Organisation 208–209 – Plus-Ende 208 – Proteinfilamente 208 – Ran-G-Proteine 209 – Spindelapparat 209 – Thrombozyten 977–978 – treadmilling 208 – α-Tubulin 208 – Verlängerung/Verkürzung, polare 210 (F) Mikrotubuli-assoziierte Proteine (MAPs) 208 Mikrovilli – Aktin 214 – Elektronenmikroskopie 212 (F) Mikrozirkulation, Scherkräfte 980 Milch – Bildung, Progesteron 543 – Fettanteil 1025 Milchsäure 4 Milchsäuregärung 358 – 7 Glycolyse Milchsäure/Lactat – Dissoziationskonstante K 15 – pKS-Wert 15 Milz, Keimzentrum 1126 Milzbrand 777 Mineralocorticoide 759 – Antagonisten, Spironolactone 924

1225 Sachverzeichnis

– Biosynthese 864 – Natriumretention 923 Mineralstoffwechsel, Aldosteron 923 Minisatelliten-DNA 160 Minus-Ende, Mikrotubuli 208 Minusstrang, RNA-Synthese 256 MIP1α (CCL3) 333, 759 MIP1β (CCL4) 333, 759 MIP2 784 MIP3α (CCL20) 759 MIP3β (CCL19) 759 miRNA (Mikro-RNA) 163–164, 281 – Doppelstrang 281 Mischfibrillen, Kollagene 721 Missbildungen, Cadmium 677 missense-Mutationen – genetischer Code 288 – Hämophilie A 988 – p53 1150 mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy 604 mitochondrial permeability transition (MPT), Ammoniakvergiftung 454 mitochondriale Carrier 492 – Anionen 492 – Antiport 492 – Symport 492 mitochondriale Defekte 207 mitochondriale Krankheiten 1018 mitochondriale Matrix 491 – NADPH 504 mitochondriale Proteine, Transport 306–307 mitochondrialer Weg, Apoptose 226 Mitochondrien 176 (F), 203–204, 491 – Aminosäureabbau, Verteilung 443 – Apoptose 203 – Chaperone 303 – Citratzyklus 479 – Cristae 203, 208 (F) – Cytochrom c 203, 226 – Energieumwandlung 490–506 – Evolution 204 – F1-ATP-Synthase 208 (F) – Glutamat-Dehydrogenase (GLDH) 434 – Hämbiosynthese 608 – – Regulation 612 – Innenmembran 203–204 – Inneres 491 – Intermembranraum 203, 208 (F), 491 – Kompartimentierung 208 (F) – Mangan 673 – Matrixraum 204 – Proteinbiosynthese 204, 288 – Protonentransport 499 – Thrombozyten 976 – TIM (transport complex of the inner membrane) 204

– TOM (transport complex of the outer membrane) 203 – Transportproteine 494 – Ubichinon-Zyklus 499 – Vererbung 204 – Zwischenmembranraum 203 Mitochondrienbiogenese, Muskeltraining 534 Mitochondrienmembran – äußere 203, 208 (F), 491 – – Porin 492 – chemiosmotisches Potential 106 – innere 208 (F), 491 – – Atmungskontrolle 503 – – Permeabilität, Ammoniakvergiftung 454 – – Protonendurchlässigkeit 492 – Protonengradienten 490 mitogen activated protein 7 MAP mitogen activated protein kinase (MAPK) 1115 Mitogen-aktivierte Proteinkinase 7 MAP-Kinase Mitomycin, DNA-Replikation, Hemmung 236 Mitose 154–157 – Anaphase 155 – Chromosomen 154–157 – Cytokinese 155 – Kernhülle, Auflösung 188 – Metaphase 155 – Mikrotubuli 209 – Phasen 155 – S-Phase 155 – Zellzyklus 221 Mitosespindel 155 M(ittel)-Bande, Muskulatur, quergestreifte 1002 Mittelmeerfieber, familiäres 975 mittlere zelluläre Hämoglobinkonzentration (MCHC) 978 mittleres korpuskuläres Volumen (MCV) 956 Mizellen 40, 1071 – Bildung, Galle 1060 – Lipidaufnahme-/resorption 1071 – Lipidaufnahme/-resorption 1071 MKK (mitogen-activated protein kinase kinase) 772 MLCK (myosin light chain kinase) 777, 1013 MLH1 237, 1147 MLK (mixed-lineage kinase) 772 MMP-1 bis -10, 7 unter MatrixMetalloproteinasen 737 Mn-Superoxid-Dismutase (SOD2) 510, 673 Mobilferrin 660 Mobilferrin-shuttle 660 Moclobemid, Monoaminooxidase-Hemmung 134

Modifikationen, covalente, Proteine 307–313 MOF (multi organ failure) 798–801 mol 12 molare katalytische Aktivität 117 molare Masse 62 Molekülmasse 62 – Proteine 62–65 – relative 62 Molekularbiologie, Dogma, zentrales 158–159 molekularer Bauplan (molecular ruler), Titin 1008 Molekulargewicht 7 Molekülmasse, relative Molekularsiebchromatographie, Proteine 60 Molluscipoxvirus 329 Molybdän 4, 671–672 – Aldehydoxidase 671 – Elektronenübertragung 671 – Gesamtbestand 656 – Plasmaspiegel 656 – Xanthinoxidase 671 Monoacylglycerin-Acyltransferase 402 Monoacylglycerin(e) 35, 1061 – α-Monoacylglycerin 1072 (F) – β-Monoacylglycerin 1070–1071, 1072 (F) – Lipolyse 399 (F) Monoacylglycerin-Lipase 398, 399 (F), 400 – Triacylglycerin, Resynthese 1072 Mono-ADP-Ribosylierung, Nicotinamid 701 Monoaminoxidase (MAO) 436 – Hemmstoffe 436 – – Moclobemid 134 – Katecholaminabbau 831 – Kupfer 667 – Serotonin, Abbau/Biosynthese 1042 (F) – Typ A 1042 – – 5-Hydroxytryptamin, Abbau 1043 – Typ B 1042 Monocarboxylattransporter 8 (MCT8), Schilddrüsenhormone, Transport 855–856 monocyte chemoattractant proteins 759 Monojodtyroninamin (T1AM) 857 Monojodtyrosin 7 MIT monoklonale Antikörper 1127–1128 Monooxygenasen 506–509, 1061 – Biotransformation 1091 – Cytochrom P450 57, 507 – Eisen-Schwefel-Protein 508 – NO-Bildung 508 – Peptidylglycin-α-amidierende, Ascorbinsäure 698

– spezifische, Hormone, Hydroxylierung 508 – unspezifische, Fremdstoffe, Hydroxylierung 508 Monosaccharide 22–25, 540–543 – Aufnahme 646 – Biosynthese 540–543 – glycosidische Bindung 25 – Hydroxylgruppen 23 – OH-Gruppen 23 – phosphorylierte 23 – Resorption, Niere 905 – – Transportsysteme 1069 – Stoffwechsel 540–543 – Synthese 540 – Transport, Jejunum 1074 – Vorläufer, Aminosäuren 429 Monozyten – α1-Antitrypsin 997 – Granula, cytosolische 975 moonlighting-Proteine 110 Morbillivirus 328 Morbus – Addison 869 – Alzheimer 1048–1049 – Basedow 860 – Gaucher 580 – haemolyticus neonatorum 970 – Hashimoto 860 – Parkinson 1042, 1049–1050 – Waldenström 999 – Wilson 670 Morphin, ADH-Freisetzung 920 Morphogenese, Vitamin A 687 morphogenetic proteins (BMP) 790 morphogenetische Prozesse, Embryonalentwicklung 741 mos-Onkogen 1143 Motilin, Vorkommen/Funktion 1063 Motilität, intestinale, Thyreocalcitonin 937 Motive, Proteine 76 motor neuron disease 1018 motorische Aktivitäten, Energieverbrauch 636 motorische Endplatte 1011 – Acetylcholin 1039 Motorproteine – Aktin-basierte 212–213 – Defekte 214 – Mikrotubuli 209–211 M-Phase, Zellzyklus 221 Mpp11 302 M-Protein 1009 M2-Protein(e) – Influenza-A-Virus 341 – Influenzaviren 334 MPT (mitochondrial permeability transition), Ammoniakvergiftung 454 mRNA (Messenger-RNA) 162–164, 256, 287 – Abbau 269 (F)–270 (F), 281– 282

M

1226

Anhang

mRNA (Messenger-RNA) – – IFN α/β 798 – – RNA-Interferenz 281, 282 (F) – editing 280 – Granula 205 – 5‘-Kappengruppe 263 (F) – NXF1/p15 (heterodimerer Transportrezeptor) 269 – Stabilität 280–282 – – ARE-Bindeproteine 280 – Zellkern 187 MRP (multidrug resistance-related protein ) – Bilirubin, Ausscheidung 622 – canaliculäre Membran 1096–1097 – Cholestase 1101 – Defekt, Dubin-JohnsonSyndrom 1101 – Sinusoidalmembran 1096 α-/β-MSH 846, 863 – Halbwertszeit 849 MSH2 237, 1147 MSH3,6 237 MT1-MMP 737 MT3-MMP 737 MTOC (microtubule organisation center) 208 mTOR (mammalian target of rapamycin) 525, 645 – Proteinbiosynthese 524, 530 – Regulation 525 – Rheb 525 mTOR-Gen 645 mTOR-Signalweg 645–646 mts1 1147 mts2 1147 Mucin 1 1057 (F) – Domänenstruktur 1057 Mucin 6 1057, 1058 (F) Mucine 312 – Antrum, Magen 1054 – Darmsaft 1062 – extrazelluläre Matrix 548 – Magen 1057 – Nebenzellen, Magen 1054 – Produktionshemmung, Aspirin 1067 – – Glucocorticoide 1064, 1067 – – NSAR (nichtsteroidale Antirheumatika) 1067 – – Prostaglandin E 1067 – Sekretion, Regulation 1064–1065 Mucopeptid 30 Mukolipidosen 207 Mukopolysaccharide 7 Glycosaminoglykane Mukopolysaccharidosen 200, 206–207, 552 – Acetyltransferase, Defekte 178 Mukosa – Insulinempfindlichkeit 817 – intestinale, GLP-1/2 823 – – GLUT 2 375 – – Peptide, Aufnahme 1073

Mukosablock, Eisen 660 Mukoviszidose 7 cystische Fibrose Multibrey-Syndrom 1018 Multi-CSF 7 Interleukin-3 Multidrug Resistenz Transporter, MDR-Transporter 1096 multidrug-related protein 7 MRP Multienzymkomplex 110, 483 – Aminosäureabbau 441 – Fettsäurebiosynthese 410 – Struktur, DNA-Replikation, eukaryote 234 multifunktionelle Enzyme 110 Multigenfamilien – Laminine 732 – Myofibrillen 1003 Multimere, Proteine 767 Multiorganversagen (MOF) 798–801 – Cytokine, pro-inflammatorische 800 Multiple Sklerose 1028, 1046, 1138 Multiplexine 717 Multiproteinkomplexe, Atmungskette 494 multivesikuläre Körperchen (MVBs) 176 (F), 200 Mumpsvirus, Adsorption, Rezeptor-vermittelte 333–334 Mundwinkelfissuren, Riboflavinmangel 700 Muraminidase 31 – Funktion/Pathobiochemie 993 – Katalyse, covalente 118–119 Murein 30, 31 (F), 550 – Biosynthese 551 MuRF, Muskelaufbau/-abbau 1017 muscle-liver-lrain-eye nanism 1018 muskarinische Acetylcholinrezeptoren 1040 Muskel, Insulinempfindlichkeit 817 Muskelarbeit 531–535 – Cytochrom c 535 – Energieumsatz 532 – Glucoseabbau, anaerober 534 – GLUT 4 533 – Glycogenolyse 533 – Kontraktions-RelaxationsVorgang, ATP 531–532 – Lipolyse 533 – Substratmobilisierung 532–535 Muskelatrophie – spinale 1018 – spinobulbäre 1049 Muskeldystrophie – Becker-Typ 1017–1018 – congenitale 1018 – Duchenne-Typ 1017–1018 – Laminine 732

– Proteinkinase, AMP-abhängige 1020 Muskelerkrankungen 1017–1021 – angeborene 1017–1021 – erworbene 1021 – myotone 1018–1019 Muskelfasern, dicke, elektromechanische Kopplung 1011 Muskelgewebe 7 Muskulatur Muskelglycogen 368 Muskelkontraktion – ADP/ATP 1010 – Calciumionen 1011–1014 – elektromechanische Kopplung 1011–1014 – Filamente, dicke 1010 – – dünne 1010 – Gleitmodell 1010 – molekularer Mechanismus 1009–1015 – Muskulatur, glatte 1013 – Myokardfasern 1012 – Myosin-Querbrücken 1009 – NRF-1 (nuclear respiratory factor-1) 535 – Phosphat 1010 – Querbrückenzyklus 1009–1011 – sliding filaments 1009 – Transkriptionsfaktor 535 – Troponin-Tropomyosin-System 1013 – Z-Membran 1010 Muskelkrämpfe, Magnesiummangel 940 Muskelproteine – Umsatz, Calpaine 322 – – 3-Methylhistidin 915 Muskelrelaxation – cGMP-abhängige Proteinkinasen 803 – molekularer Mechanismus 1009–1015 Muskelschwäche – Biotinmangel 707 – Enzephalomyopathien, mitochondriale 512 – Hypoparathyreoidismus 939 Muskeltraining, Mitochondrienbiogenese 534 Muskel-Typ, Kreatinkinase (CK) 137 Muskelwachstum – Cytokine 1016 – Hormone 1016 Muskelzellen – Calciumfreisetzung, intrazelluläre 1012 – Carnitin 406 – glatte, Matrixproteine, extrazelluläre, Biosynthese 1015 – Glucosetransport 180 – Hypertrophie 1016 – Insulin 818 – N-Cadherine 198 – Regeneration 1015–1017

– Ruhestoffwechsel 531 – Wachstum 1016 Muskulatur 1001–1022 – Aminosäurestoffwechsel 444, 453 – Aufbau/Abbau, Signalwege 1016 – Feinstruktur 1002–1004 – glatte 1004 – – Caldesmon 1013 – – Muskelkontraktion 1013 – – Relaxation, β2-Adrenozeptoren 830 – – – ANP 926 – – – 5-HT1- bzw. 5-HT2-Rezeptor 1043 – – Tropomyosin 1013 – Glycogen 368 – Glycolyse 392 – Insulin(wirkung) 523 – Kraftentwicklung, molekulares Modell 1010 – Phosphorylasekinase 132 – quergestreifte 1002–1003 – – 7 Skelettmuskulatur – – Cytoskelett 1007–1009 – – elektronenoptische Aufnahme 1003 – Transkriptionsfaktoren 1016 Mutationen – Antionkogene, Inaktivierung 1149–1150 – α1-Antitrypsin 997 – homöotische 273 – Kardiomyopathie 1020 – Protoonkogene 1144–1145 – QT-Syndrom 1021 – somatische, Antikörpervielfalt 1121 – – p53 1150 – stille, genetischer Code 288 – Thrombin, Aktivierung 990 Mutatorgene, colorektale Tumoren, nicht-polypöse 1152 muthls-Komplex, colorektale Tumoren, nicht-polypöse 1152 Muttermilch 7 Milch MVBs (multivesicular bodies) 176 (F), 200 – Endosomen 195 Myasthenia gravis 766, 1018 – Acetylcholinrezeptor, nikotinischer, Antikörper 1040 myb-Onkogen 1143 MyBP-C 1007–1009 – Mutationen 1020 myc-Onkogen 1143 Mycophenolat, Transplantatabstoßung 1139 Mycophenolsäure 595 (F) Mycoplasma genitalium, Genom 159 MyD88 (myeloid differentiation 88kDa) 799 – death-domain (DD) 791 – TIR-Domäne 791

1227 Sachverzeichnis

Myelin 1045–1047 – Bildungsstörungen 1047 Myelin-assoziiertes Glycoprotein (MAG) 394, 1046, 1051 Myelin-Oligodendrozyten-assoziiertes Glycoprotein (MOG) 1046 Myelinproteine – basische (BMP) 1046 – Mutationen, Gene 1047 – periphere (PMP22) 1046 Myelinscheiden 1045–1047 – Aufbau 1046 – Axone 1045 – Bildung 1046 – 2‘,3‘-Cyclonucleotidphosphodiesterase (CNP) 1046 – dichte Linie 1046 – Nerven, periphere 1046 – ZNS 1046 – Zwischenraumlinien 1046 Myelom 999 Myeloperoxidase – Bakterienabwehr 1135 – Chloridionen, Oxidierung 974 – Granulozten, neutrophile 972 MYF2, Muskelaufbau/-abbau 1017 Myocardinfarkt 7 Myokardinfarkt MyoD 281 – Muskelaufbau/-abbau 1017 Myofibrillen/Myofilamente – dicke 1002, 1004–1006 – dünne 1002, 1006–1007 – Isoformen 1003 – Kette, leichte, essentielle und regulatorische 1004 – Ketten, schwere 1004 – Multigenfamilien 1003 – Muskulatur, quergestreifte 1002–1003 – Spleißen, alternierendes 1003 – Titin 1008 – ungeordnete, Fibrose, interstitielle 1020 myogene Reaktion, Nierendurchblutung 899 Myoglobin 79–86 – Fibrillen, amyloidähnliche 89 – Filtrierbarkeit, glomeruläre 896 – Häm 79 – Kohlenmonoxid 969 – prosthetische Gruppe 79 – Röntgenbeugungsdiagramm 80, 91 – Sauerstoffanlagerungskurven 81 – Sauerstofftransport 79 – Tertiärstruktur 81 Myokard – β1-Adrenozeptoren 830 – Calciumkonzentration, cytosolische, Regulation 1014 – Energiespeicher 385 – gap junctions 180

– Muskelkontraktion 1012 – Regeneration 1015 Myokardinfarkt – akuter, Zell-Enzyme 136 – CK/CK-MB 137 – Fibrinolyse 385 – Glycogenolyse 385 – Hyperlipoproteinämie 581 – Koronarangioplastie 385 – Kreatinkinase 531 – LDH-MB 137 – Phosphorylase b 380 – t-PA, rekombinantes 988 Myokardnekrose – Calciumüberladung 385 – Glycogenolyse 385 Myokard-Typ, Kreatinkinase (CK) 137 Myokinase 491 Myoklonien, Enzephalomyopathien, mitochondriale 512 Myoklonusepilepsie 1032, 1049 Myomesin 1007–1009 Myopathien – distale 1018 – durch Drogen, Toxine und Nahrungsdefizienzen 1018 – endokrine 1018 – mitochondriale 1021 – OXPHOS-System, Störungen 513 Myosin 56, 212–213, 1004–1006, 1008 – ATPase-Aktivität 1004 – Bindung an Aktin 1011 – Filamente, dicke 1004 – HMM (heavy meromyosin) 1006 – Isoformen 1004 – Kette, leichte, regulatorische 1013 – Ketten, schwere 1005 – köpfchenfreie Zone (bare zone) 1006 – Kopfregion 1004–1005 – LMM (light meromyosin) 1004–1006 – Motorproteine, Mikrotubuli 210 – Muskulatur, quergestreifte 1002 – Nomenklatur 1005 – proteolytische Spaltprodukte 1006 – Querbrücken 1006, 1009–1010 – S1/2 (Subfragment 1/2) 1006 – Stressfasern 735 Myosin-II-abhängige Zellteilung, Aktin 213 Myosin-V, Aktin 213 myosin heavy chain (MHC), Myosinfilamente 1004 myosin light chain kinase (MLCK) 777, 1013 Myosin-ATPase 183 – Querbrückenzyklus 1010

Myosin-Bindungsprotein C, Phosphorylierung, Muskelrelaxation 1015 Myosinfilamente 7 Myofibrillen/ Myofilamente Myosinhexamere – Aufbau 1005 – Myofilament, dickes 1007 Myosinketten, Gene 1004 Myosinkopf – Aktinbindungsstelle 1011 – Substratbindungsregion 1011 Myosin-leichte-Ketten-Kinase 7 MLCK Myosin-Schaft 1005 Myosin-β-Schwerketten-Gen, Mutationen 1020 Myositis 1018 Myostatin, Myosin 1006 Myotonia congenita 1032 Myotonie 1018–1019 – dystrophe 1018–1019 – paradoxe 1019 Myozyten, Dehnung, ANP 926 Myristinsäure 34, 817 Myristoylierung – N-terminale, Proteine 310 – Proteine 772 Myristoylreste, GEF-Proteine 193 Myristoylschalter 310 Myxödem, T3-Mangel 857 Myxothiazol, UbihydrochinonOxidationszentrum, Blockade 499

N Na+-abhängige Transportsysteme, Aminosäuren, Aufnahme 1073 NAADP-+ (nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate) 702 Na+-/Ca2+-Gegentransportsystem, Muskelrelaxation 1014 N-Acetyl-5-methoxyserotonin 463 N-Acetylgalactosamin 28–29, 39 (F) – Aminozucker, Biosynthese 544–545 – Proteoglykane 549 α-N-Acetylgalactosaminyltransferase, Blutgruppenantigene, Biosynthese 966 (F) N-Acetylglucosamin 24 (F), 28 (F), 29–30, 31 (F), 313 – Aminozucker, Biosynthese 544–545 – Proteoglykane 549 N-Acetylglucosamin-1-phosphat, Glycoproteinsynthese 546 N-Acetylglucosamin-6-phosphat, Aminozucker, Biosynthese 544–545

M–N

N-Acetylglucosaminyl-pyrophosphoryl-Dolichol 546 N-Acetylglutamat – Harnstoffzyklus 446–448 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 N-Acetylglutamat-Synthetase, Defekt/Mangel 450–451 N-Acetyl-5-hydroxytryptamin, Melatonin, Abbau/Biosynthese 1043 (F) N-Acetylmannosamin, Aminozucker, Biosynthese 545 N-Acetylmannosamin-6-phosphat, Aminozucker, Biosynthese 544–545 N-Acetylmuraminsäure 30, 31 (F) N-Acetylneuraminat-9-phosphat, Aminozucker, Biosynthese 544–545 N-Acetyl-Neuraminsäure 39 (F), 559 – Aminozucker, Biosynthese 544–545 – Viren 340, 342 – Virusrezeptor 331 N-Acetyl-Procainamid 1094 (F) N-Acetylserotonin 463 Nachkommenviren, Freisetzung 340–342 Nachtblindheit – Retinolmangel 686 – Rhodopsinregenerierung, Störung 688 NaCl-Resorption, elektroneutrale 1075 NaCl-Symport, Tubulus, distaler 903 NAD+ 111, 145, 483, 681, 700–703 – Biosynthese 473, 701 – – Nucleolus 188 – Cosubstrat, Wirkungsweise 110 – cyclo-ADP-Ribose, Bildung 702 – Poly-ADP-Ribosylierung 702 (F) – Standardpotential 103 – Synthese, Tryptophan 701 NADH 391 – Alkoholkonsum 1099 – Atmungskette 364 – Citratsynthase, Hemmung 485 – Glycolyse 362 – Pyruvatdehydrogenase (PDH), Hemmung 484–485 – Wasserstoff, Reduktionsäquivalent 491 NADH/H+ – Alkoholintoxikation 393 – Fettsäuren 408 – Myokard 385 – β-Oxidation 407–408 – Oxidation 634 – Standardpotential 103 NADH-Dehydrogenase 506 NADH/NAD+, Redoxpotentiale 502

1228

Anhang

NADH:Ubichinon-Oxidoreduktase 496–497, 498 (F) – Atmungskette 497 – Eisen-Schwefel-Zentren 497 NAD-Isocitratdehydrogenase 485 NADP+ 111, 681, 700–703 – Biosynthese 701 NADP+-Isocitratdehydrogenase, extramitochondriale 487 NADPH 508 – Hexosemonophosphat-Weg 365, 366 (F) – mitochondriale Matrix 504 NADPH:Cytochrom-P450-Reduktase 882 NADPH/H+, Erythrozytenstoffwechsel 955 NADPH/H+-Cytochrom b5-Reduktase, Fettsäuren, ungesättigte, Biosynthese 419 NADPH-Oxidase 974 – Granulozyten 974–975 – α-Tocopherol 693 Nährstoffdichte, Alter 652 Nährstoffe – energetisches Äquivalent 637 – Herkunft, Umwandlung und Verbrauch 640 – mitochondriale Oxidation, Wasser 917 – Oxidation, Energieausbeute 634 – respiratorischer Quotient 637 – Schicksal im Colon 1076 – Speicherung 516 – Stoffwechselbedeutung 644–654 – Zufuhr, Kontrollmechanismen 642–644 Nährstoffoxidation, Energieausbeute 634 Nährstoffresorption, GLP-2 824 Na+/H+-Austauscher-1 (NHE-1) – Membranintegration 903 (F) – Tubulus, proximaler 902, 907 Nahrungsaufnahme 642–644 – afferente Signale 642 – Alkoholresorption 650 – efferente Signale 642 – Ernährung, kalorisch restriktive 635 – Hungergefühl 1066 – Neuromodulatoren 643 – Nucleus paraventricularis 643 – Realimentation 635 – Sättigungsgefühl 1066 – Steuerung, Hypothalamus 643 – Wahrnehmung, sensorische 642 Nahrungsbestandteile – essentielle, Vitamine 680 – Resorption 1068–1079 – Verdauung 1068–1079 Nahrungsenergie – absorbierte, Umwandlung 633–634

– Kohlenhydrate, komplexe 646 Nahrungsfette 7 Nahrungslipide Nahrungskarenz 515–530 – Acetacetat 641 – ATGL 399 – Energiebedarf 641 – extrahepatisches Gewebe 520–522 – Fettgewebe 528–529 – Fettsäureoxidation, Leber/Muskulatur 521 – Glucokinase 379 – GLUT 2 379 – Hämbiosynthese 612 – β-Hydroxybutyrat 641 – Ketonkörper 641 – Ketonurie 916 – Leber 520–522, 529 – Lipolyse 524, 528–529, 641 – Proteolyse 521, 641 – Skelettmuskulatur 521, 529–530 – Substratmobilisierung, hormonelle Regulation 526–530 Nahrungskohlenhydrate – Blutzuckerwirksamkeit 646 – Glycogensynthese 516 – de novo-Lipogenese 517 Nahrungslipide 647 – Chylomikronen 518 – Triacylglycerine 398 Nahrungsmittelallergie 1137 Nahrungsmittelzusatz, Cancerogenese 1158 Nahrungsstoffe 7 Nährstoffe Nahrungszufuhr 515–530 – hormonelle Regulation 562 – Restriktion 634 – Stoffwechselregulation, hormonelle 522–526 – Triacylglycerinbiosynthese 524 Nairovirus 328 Na+/K+-2Cl–-Symport, HenleSchleife, dicke, aufsteigende 903 Na+/K+-Antiport 183 Na+/K+-ATPase 183, 185, 852, 924, 1039 – Aktivität, Neuronen 1030 – – Ruheumsatz 632 – ATP-abhängige, SGLT-1 1069 – Belegzellen, Magen 1055 – Katalysezyklus 1055 – Muskelrelaxation 1014 – Sinusoidalmembran 1096 – T3 857 – Tubulus, distaler 903 – Wärmeproduktion, obligatorische 632 Naloxon 1038 Nanoturbinen 183 Naphthochinon (Vitamin K), Coenzym 111 β-Naphthylamin 1158 (F) NaPi 7 Natriumcotransport

Na+/Pi-Symporter 690 nascierende HDL, Synthese in der Leber 1088 Nasopharynxkarzinom, EpsteinBarr-Virus 344 Natrium 4, 918 – Aufnahme, elektrogene, Natriumkanal, epithelialer 1075 – Ausscheidung 927 – – Erhöhung, Wasserausscheidung 922 – – Urin 921 – Bilanzierung 921–922 – Reabsorption, elektroneutrale/ elektrogene 1075 – Rückresorption, Aldosteron 923 – Sekretion, Magen 1074 – Transport, aktiver 1074 – – Jejunum 1074 Verluste, tägliche, Schweißproduktion 921 Nairovirus 328 Na+/K+-2Cl--Symport, HenleSchleife, dicke, aufsteigende 903 Na+/K+-Antiport 183 Na+/K+-ATPase 183, 185, 852, 924, 1039 – Aktivität, Neuronen 1030 – – Ruheumsatz 632 – ATP-abhängige, SGLT-1 1069 – Belegzellen, Magen 1055 – Katalysezyklus 1055 – Muskelrelaxation 1014 – Sinusoidalmembran 1096 – T3 857 – Tubulus, distaler 903 – Wärmeproduktion, obligatorische 632 Naloxon 1038 Nanoturbinen 183 Naphthochinon (Vitamin K), Coenzym 111 β-Naphthylamin 1158 (F) NaPi 7 Natriumcotransport Na+/Pi-Symporter 690 nascierende HDL, Synthese in der Leber 1088 Nasopharynxkarzinom, EpsteinBarr-Virus 344 Natrium 4, 918 – Aufnahme, elektrogene, Natriumkanal, epithelialer 1075 – Ausscheidung 927 – – Erhöhung, Wasserausscheidung 922 – – Urin 921 – Bilanzierung 921–922 – Reabsorption, elektroneutrale/ elektrogene 1075 – Rückresorption, Aldosteron 923 – Sekretion, Magen 1074

– Transport, aktiver 1074 – – Jejunum 1074 – Verluste, tägliche, Schweißproduktion 921 Natrium-Calcium-Austauscher, Niere 901 Natriumcotransport (NaPi) 906 – Calcitonin 935 – Parathormon 935 – Phosphatausscheidung, renale 933 Natrium-Dicarboxylat-Cotransporter (SDCT1/2), Niere 901 Natrium-Dodecylsulfat, SDSGelelektrophorese 62 Natrium-Glucose-Cotransporter (SGLT1/2), Niere 901 Natriumhaushalt 921–928 – ADH-Freisetzung 922 – Aldosteron 922, 924 – Angiotensin II 922, 924 – atriales natriuretisches Peptid (ANP) 922, 924 – Durstgefühl 922 – hormonelle Regulation 922–926 – Natriumresorption 922 – Pathobiochemie 926–927 – Renin-Angiotensin-Aldosteron-System (RAAS) 922 – Salzappetit 922 Natrium-HydrogencarbonatCotransporter, Niere 901 Natrium/Iodid-Symporter (NIS) 675 – Thyrozyten 851 Natrium-Kalium-Pumpe 7 Na+/ K+-ATPase Natriumkanäle 924, 1031 (F) – Aktivierung 1031 – cGMP-abhängige 803 – epitheliale, Natriumaufnahme, elektrogene 1075 – Neurone 1030 – Öffnung/Schließung 1031 – Retina 765 – Sammelrohr/Überleitungsstück 903 – spannungsregulierte 1031 Natriumkanalproteine – Mutationen 1021 – – Paralyse, hyperkaliämische 1019 Natriummangel, Schock, hypovolämischer 927 Natriumresorption – Aldosteron 1075 – Angiotensin II 1075 – ANP 926 – Natriumhaushalt 922 – Niere 902 – – Sauerstoffverbrauch 910 – Sammelrohr 903 – Tubulus, proximaler 902 – Überleitungsstück 903

1229 Sachverzeichnis

Natriumretention – Aldosteron, Bildung 924 – Mineralocorticoide 923 Natriumsekretion, Duodenum 1074 Natrium-Selenit 676 Natriumstoffwechsel 922 Natrium-unabhängige Transportsysteme, Aminosäuren, Aufnahme 1073 Natrium-Vitamin-C-Cotransporter (SVCT1), Niere 901 natürliche antisense-Transkripte (NAT‘s) 164 natural killer cells (NK-Zellen) 1104–1105 – Aktivierung, Virusabwehr 1135 – Bakterienabwehr 1135 Na+-Uniport 183 NBT-Test, Granulomatose, septische 976 n-Buttersäure 34 NC, HIV 336 N-Cadherine 197–198 N-CAM (neural cell adhesion molecule) 197, 199, 1051 Nck 788 ncRNA (noncoding-RNA) 162 N-Dealkylierung, Biotransformation 1091 N-Degron, Proteine 321 Nebennieren – Entwicklung 873 – Hormone 846 – Pyruvatcarboxylase 391 – Vitamin E 692 Nebenniereninsuffizienz, Hypoaldosteronismus 927 Nebennierenrinde 873 – Androgenbiosynthese 874 – fetale, 16α-Hydroxyepiandrosteronsulfat 882 – Glucagonrezeptoren 825 – Hexosemonophosphat-Weg 368 – Hormone 863 – Progesteron 865 Nebennierenrindenadenom/ -karzinom, Conn-Syndrom 927 Nebennierenrindenfunktion, Muskelerkrankungen 1021 Nebenschilddrüsen – Parathormon 933 – PTHrP 936 Nebenzellen, Magen, Mucin 1054 Nebulin 56, 1007 Nectine 197 – Zonula adherens 198 Nedd4-Ubiquitinyl-Transferase 196 NEF, HIV 336 Negativ-Selektion, T-Lymphozyten 1110–1111 Nekrose 800 – Enzymaktivität 136

– Virusinfektion 342 – zelluläre Vorgänge 226 Nemaline-Rod-Myopathie 1018 N-end-rule, Proteine 321 Neoendorphine 1044 Neomycin 1077 neoplastisch veränderte Zelle 1142 Nephrocalcin, Calciumoxalatsteine 917 Nephrocalcinose 691 – Hyperoxalurie 313 Nephrolithiasis 916 Nephron 899 – Anordnung 898 – Aquaporin-2 182 – Reabsorptionsleistung 900 Nephropathie – diabetische 837 – hyperurikämische, familiäre, juvenile 602 nephrotisches Syndrom 992 – Hypercholesterinämie 583 – Proteinurie 915 Neprilysin 318 Nernst-Potential 929 Nernstsche Gleichung 103 nerve growth factor 7 NGF Nerven(fasern/-gewebe) – autonomes, Acetylcholin 1039 – Energiebilanz, negative 640 – Glucose(bedarf ) 520 – Ketonkörper 520 – myelinisierte, Leitgeschwindigkeit 1030 – parasympathisches, pankreatische Enzymsekretion 1065 – periphere 1047–1048 – – Insulinempfindlichkeit 817 – – Myelinscheiden 1046 – – Regeneration 1047 – sympathisches, Fettgewebe, Lipolyse 528 – – Lipolyse 528 Nervenwachstumsfaktor 7 NGF (nerve growth factor) Nervenzellen 7 Neurone Nervonsäure 34, 418 NES (nuclear export signal) 189 Nestin 213 Netrine 1051 Netto-ATP-Gewinn, Makronährstoffe, Oxidation 633 Neugeborene – GH-Konzentrationen 886 – Harnstoffzyklusdefekte 450 – Ikterus, pathologischer 625 – Körpertemperatur/Thermogenese 504 – Proteine, Resorption 1073 Neuraminidase – Hemmung, Zanavir 134 – Influenzaviren 340–342 Neuraminsäure 23 (F), 28 Neuriten, Neurone 1029 Neuroborreliose 1028

neurodegenerative Krankheiten 1048–1050 neuroendokrine Zellen 843 neurofibrillary tangels/neurofibrilläre Bündel – Alzheimer-Demenz 214, 1048 – Tauopathien 1049 Neurofibromatose 1147 Neurofibromin 1147 Neurofilamente 1046 – Neurone 1029 Neurofilamentproteine 213 Neuroglia 1045 Neurohypophyse 845 neurologische Erkrankungen – Cobalamin 711 – Tryptophanmetabolite 473 Neuromedin U 844 Neuromodulatoren, Nahrungsaufnahme 643 neuromuskuläre Endplatte, Acetylcholinrezeptor, nikotinischer 1039 neuronale Aktivität, ATP 1024 Neurone 1029–1036, 1038 – adrenerge 1038 – Aktinfilamente 1029 – Aktionspotentiale 1030, 1032 – Anionen-, Calcium- bzw. Chloridkanäle 1030 – cholinerge 1038 – Cytoskelett 1029 – Depolarisation 1030 – DIO3 857 – Erregungsleitung 1029–1033 – gabaerge 1038 – GLUT 3 375 – glycinerge 1038 – Kaliumkanäle 1030 – Kanalproteine 1030 – Kationenkanäle 1030 – Membranpotential 1030–1033 – Mikrotubuli 1029 – Natriumkanäle 1030 – N-Cadherine 198 – Neuriten 1029 – Neurofilamente 1029 – peptiderge 1038 – Ruhepotential 1030 – serotoninerge 1038 – Signalübertragung, chemische 1036–1045 – Struktur 1029 – Zellfortsätze 1029 – Zellkörper (Soma) 1029 Neuropathie – diabetische 837 – erbliche, Gendefekte 1047 – hereditäre, motorische und sensible (HMSN) 1047 – periphere, erbliche 1047 Neuropeptid Y 523, 1045 – Ghrelin 886 – Nahrungsaufnahme, stimulierende Wirkung 643

Neurophysin I/II, Wasserhaushalt, Regulation 918 Neuropoetin (NP) 759, 794 Neurotensin 1045 – Nahrungsaufnahme, hemmende Wirkung 643 – Vorkommen/Funktion 1063 Neurotoxine 206, 767 Neurotransmitter 1034–1036, 1038 – Abbau, enzymatischer 1037 – Aminosäuren 453, 518 – Freisetzung, aktive Zonen 1035 – gastrointestinale 1063 – Guanylatcyclasen 802 – Hemmstoffe 1038 – Nahrungsaufnahme, Wirkung 643 – Nierendurchblutung 896 – peptiderge 1044–1045 – Synapsen 1034 – Transporter 1037 – Wiederaufnahme 1037 Neurotransmitter-Rezeptoren – Isoformen 1037 – metabotrope 1037 neurotrophe Faktoren 1051 – Axotomie 1047 – Schwann-Zellen 1045 Neurotrophine 1051 – Axotomie 1047 neutrale Endopeptidase 24.11 318 Neutralpunkt, Wasser 13 Neutralschwefel 915, 942 Neutrophile 972 – 7 Granulocyten, neutrophile – α1-Antitrypsin 997 – chemotaktischer Reiz 973 – Kollagenase 737 Nexin 213 N-Extein, Proteine, selbstspleißende, autokatalytische Reifung 309 (F) nf1 213, 1147 nf2 1147 NF-κB (nuclear factor κB) 278, 791, 799, 1114–1115 – Aktivierung, IκB 806 – – TNFR1 792 – HIV 337 – Muskelaufbau/-abbau 1017 – Paget-Krankheit 746 – Signaltransduktionsweg, TNF 792 NF-AT (nuclear factor of activated T cells) 1114–1115 NF-ATc 1016–1017 NF-ATn 1016 NFh 213 NFm 213 N-Formiminoglutarat, Histidinabbau 474 (F) N5-Formimino-Tetrahydrofolat 708 (F)

N

1230

Anhang

N-Formylglutamat (FH4) 708 (F) N-Formylkynurenin, Tryptophanabbau 472 (F) N-Formylmethionin 298 (F) N5-Formyl-Tetrahydrofolat 708 (F) N10-Formyltetrahydrofolat, Purinbiosynthese 587 (F), 588 NFR1-Rezeptorkomplex, Aktivierung, Apoptose 792 NFT 7 neurofibrillary tangles NGF (nerve growth factor) 759, 1051 – Axotomie 1047 N-Glycoside 24 N-glycosidische Bindung – ADP-Ribose 701 – Glycoproteine 28, 546 – Nucleinsäuren 147 N-glycosidische Modifikationen, Proteine 312 NH3 7 Ammoniak NH4+ 7 Ammonium-Ionen NH2-Donor – Aspartat 454 – Glutamat 454 – Glutamin 454 Nω-Hydroxyarginin 461 N-Hydroxy-Procainamid 1094 (F) Niacin 7 Nicotinsäure Niacin(amid) 681, 700–703 – Mangel 702 – NAD+/NADP+, Biosynthese 701 Nichthämeisen 659 Nichthämeisenproteine 659 – absolute und relative 659 – Konzentrationen 659 Nicht-HFE-Hämochromatose 666 Nicht-Histonproteine 153 – Zellkern 187 Nicht-Hydrogencarbonatpuffer 944 Nichtmatrizenstrang, RNA-Synthese 257 Nichtmetalle 4 nichtneuronale Zahlen 1045–1048 nichtnucleosidischer Hemmstoff 350, 352 Nichtparenchymzellen, Leber 1085, 1098–1099 nichtproteinogene Aminosäuren 48 Nichtstrukturproteine, Viren 338 Nickel – Cancerogenese 1157 – Gesamtbestand/Plasmaspiegel 656 Nicotinamid – ADP-Ribosylierung 701 – Mono-ADP-Ribosylierung 701 – Poly-ADP-Ribosylierung 702 (F) Nicotinamid-Adenindinucleotid 7 NAD+

Nicotinamid-Adenindinucleotidphosphat 7 NADP+ Nicotinamidmononucleotid (NMN) – NAD+/NADP+, Biosynthese 701 – NAD+-Synthese 473 – Nucleolus 188 – Tryptophanabbau 472 Nicotinamidring 468 Nicotinat 7 Niacin(amid) nicotinische Acetylcholinrezeptoren 765, 766 (F), 1039 – neuromuskuläre Endplatte 1039 Nicotinsäure – Coenzym 111 – Speicherung in der Leber 1089 – Synthese, Tryptophan 473 – Zufuhr, tägliche 681 Nicotinsäure-AdenindinucleotidPhosphat (NAADP+) 702 Nidation, Progesteron 883 Nidogen 732 Nieder-T3-Syndrom 861 Niemann-Pick C 1 like 1 (NPC 1 like 1) 1071 Niemann-Pick-Erkrankung – Cholesterin, Speicherung 174, 175 (F) – Sphingomyelinase, Defekt 580 – Typ C (NPC1 bzw. NPC2) 206 Nieren 895–914 – Aminosäurestoffwechsel 451, 905 – Aquaporine 12 – Calciferol, Wirkung 690 – CD10-Protein 138 – Elektrolyte, Reabsorption 899–905 – endokrines Organ 910 – Energiegewinnung 909–910 – Energieverbrauch, glomeruläre Filtrationsrate (GFR) 909 – Erythropoietin 912 – Extrazellulärraum 899 – Filtration 895 – Flüssigkeitsausscheidung 12 – Gluconeogenese 391 – Glucose-6-phosphat 378 – GLUT 2 375 – Glutamin 444 – HCO3–, Rückresorption 946 – Insulinempfindlichkeit 817 – Membrantransport-Proteine 901 (F) – Monosaccharide, Reabsorption 905 – Natriumresorption 902 – Osmolarität 900 – Peptide, Reabsorption 905 – Protonenausscheidung 908, 946 – Protonenkonzentration 945 – Pyruvatcarboxylase 391

– Säure-Basen-Ausscheidung 947 – Säure-Basen-Haushalt 452 – Säure-Basen-Transport 906 – Salzreabsorption 895 – Sammelrohrsystem 899 – Sauerstoffdruck 900 – Sauerstoffverbrauch, Natriumresorption 910 – Sauerstoffversorgung 910 – Wasser, Reabsorption 899–905 – Zonen 898 Nierenarteriendruck, Angiotensin II/Renin 899 Nierenarterienstenose – Reninhypersekretion 927 – Renin-Überproduktion 911 Nierendurchblutung 895–896 – α1-Rezeptoren 896 – Autoregulation 895 – myogene Reaktion 899 – Neurotransmitter 896 – Phospholipase-C-(PLC-)Signalweg 896 – tubulo-glomeruläres Feedback (TGF) 899 Nierenerkrankungen – Aminosäurelösungen 653 – Cadmium 677 – degenerative, Erythropoietin 913 Nierenkrebs, chromosomale Abschnitte, Verlust 1147 Nierenmark 898 – Blutversorgung 895 – Gluconeogenese 372 – Glucose(bedarf ) 520 Nierennervenfasern, sympathische, Reninfreisetzung 911 Nierenrinde 898 – Selenkonzentrationen 676 Nierensteine 916–917, 932 – Gla-Proteine 695 – Zusammenstellung 916 Nikotin – ADH-Freisetzung 920 – ATP-Synthese 634 nikotinische Acetylcholinrezeptoren 1040 Ninhydrin 51 (F) – Aminosäuren, Derivatisierung 51 Nitrat, Urin 914 Nitrat-/Nitrit-haltige Medikamente, Viagra£ 803 Nitroblautetrazolium 7 NBT Nitrosamine 1158 (F) – alicyclische, Cancerogenese 1157 5-Nitro-γ-Tocopherol 693 Nitroverbindungen, Methämoglobin 969 Nitroxid 7 NO Nitroxid-Synthase 7 NO-Synthase NK-T-Zellen 1133 NKX2.1, Hypothyreose 860

NK-Zellen (natural killer cells) 1104–1105 – Aktivierung, Virusabwehr 1135 – Bakterienabwehr 1135 NLS (nuclear localization signal) 189 NMDA-(N-Methyl-D-Aspartat) Rezeptoren 1038–1039 – Initiation, Cap-abhängige 300 N5-Methyl-Tetrahydrofolat 707–708 – Homocystein, Remethylierung 464 NMN 7 Nicotinamidmononucleotid NMR-Spektroskopie – Peptidbindung 70 – Proteine 91–92 N5,N10-Methylen-Tetrahydrofolat 452, 458, 592, 593 (F), 707, 708 (F) – Histidinabbau 475 NNR-Achse, hypothalamisch-hypophysäre, Immunsystem 868 NO 7 Stickstoffmonoxid noncoding-RNA (ncRNA) 162 non-disjunction, chromosomale 1145 non-exercise activity thermogenesis 636 nonhomologous end-joining (NHEJ), DNA-Schäden 240 (F)–241 (F) nonsense-Mutationen – genetischer Code 289 – Proteinbiosynthese, eukaryote, Termination 298 Noradrenalin 463, 468, 758, 826, 1034, 1038, 1041–1042 – Abbau 831 – Aufnahme, Reserpin 1038 – Biosynthese, Ascorbinsäure 698 – elektromechanische Kopplung, Myokard 1014 – Fettgewebe, braunes 520 – – Lipolyse 528 – Katecholaminabbau/-biosynthese 827 (F), 831 (F) – Lipolyse 520, 528 – Nahrungsaufnahme, Wirkung 643 – Reninfreisetzung 911 – Rückkopplung, negative 828 – Stress 636 – TRH-Freisetzung 847 – Urin 915 Norepinephrin 7 Noradrenalin Normetanephrin, Katecholaminabbau 831 Norovirus 328 Northern-Blot 167 NO-Synthase (NOS) 460, 801 – Diabetes mellitus 838 – endotheliale (eNOS) 310, 460, 801

1231 Sachverzeichnis

– – Proteine, Regulation 694 – Hemmung durch Glucocorticoide 867 – induzierbare (iNOS) 460 – Induzierbare (iNOS) 801 – neuronale (nNOS) 460, 801, 1008 Notch-Gene 318 notch-signalling, γ-Sekretasen 318 NPC 1 like 1 (Niemann-Pick C 1 like 1) 1071 NPC (nuclear pore complex) 189 N-Propeptid, Kollagenbiosynthese 718–719 NRAMP-2 (natural resistance associated macrophage protein 2), Eisenaufnahme 660 NRF-1 (nuclear respiratory factor-1) – Hämbiosynthese, Regulation 611 – Muskelkontraktion 535 NSAID/NSAR (nonsteroidal antiinflammatory drugs bzw. Antirheumatika) – Mucinproduktion, Hemmung 1067 – Prostaglandinbiosynthese 424 NSF (N-Ethylmaleimid sensitver factor), Transport, vesikulärer 194 NT-3 (Neurotrophin-3) 1051 NT-4 (Neurotrophin-4) 1051 Ntcp – Cholestase 1101 – Sinusoidalmembran 1096 N-Terminus, Guanylatcyclasen 802 NTI (non thyroidal illness) 861 nucleäre Rezeptoren 763–765 nuclear accessory bodies 188 nuclear export signal 7 NES nuclear factor κB 7 NF-κB nuclear factor of activated T cells 7 NFAT nuclear location signal 7 NLS nuclear magnetic resonance 7 NMR Nucleasen 167, 168 (F) – d-/p-Typ 168 – Aktivität 1114 – DNA-Schäden, NucleotidExcisionsreparatur 239 – Verdauung 168 Nucleinsäuren – Auftrennung, Elektrophorese 165 – Charakterisierung 165–170 – Eigenschaften, chemische/ physikalische 165–172 – Freisetzung, Viren 334–335 – N-glycosidische Bindung 147 – 3‘-OH-Ende 146 – Pentosen 23 – 5‘-Phosphatende 146

– Phosphodiesterasebindung 147 – Primärstruktur 146–147 – Reinigung 165–170 – Säuren, mehrbasische 147 – Sequenzen, Blotten 166 – – Hybridisieren 166 – virale, Polymerase-Kettenreaktion (PCR) 346 – Viren 326 – Wasserstoffbrückenbindungen 9 – Zusammensetzung 146–147 Nucleocapside, Viren 326 nucleocytoplasmatischer Transport 189 Nucleolus 176 (F), 188 nucleophile Verbindungen 18–20 nucleophiler Angriff, Basenkatalyse 19 Nucleoplasma 188 Nucleoporine 189 Nucleoproteine 56 – HIV 331 Nucleosidanaloga 350 Nucleosidase 1059 Nucleosiddiphosphat-aktivierte Form, Glycosylrest 546 Nucleosiddiphosphate 144 – Bildung 589–590 – Derivate 543 Nucleosiddiphosphat-Kinasen 592 – Citratzyklus 483 Nucleosiddiphosphat-Monosaccharide 540 Nucleoside 142–145 – Aufbau 142–144 – Carrier 144 – Nomenklatur 143 – Phosphatester 143 – Purinabbau 599 – Veresterung 143 Nucleosid-Phosphorylase, Purinabbau 599 Nucleosidtransporter, Plasmamembran 598 Nucleosidtriphosphate 144 – Bildung 589–590 Nucleosomen 152–153 – Core 153 (F) – DNA, eukaryote 273 Nucleosomencore 153 (F) 5‘-Nucleotidase, Glycogenolyse, Myokard 385 Nucleotidasen, Purinabbau 599 Nucleotide 25, 142–145 – Abbau 599–601 – Aminosäuren 429 – Aufbau 142–144 – Biosynthese, Hexosemonophosphat-Weg 365–366 – Energieträger 145 – Funktionen 144 – Pentosen 23

– Phosphate, energiereiche 144 – Thrombozytengranula 977 – Wasserlöslichkeit 142 Nucleotid-Excisionsreparatur 239–241 Nucleotidtransferase 268 Nucleus(-i) – arcuatus 872 – caudatus 1042 – – Parkinsonsche Krankheit 1049 – paraventricularis 843, 862, 920 – – anteroventraler (AVPV) 844, 872 – – Nahrungsaufnahme 643 – preoptici 843 – supraopticus 843, 891, 920 – ventromedialis 843 NXF1/p15 (heterodimerer Transportrezeptor), mRNA 269

O OAT1 (organic anion transporter) – Bilirubinaufnahme 622 – Tubulusepithelien 906 OATPC1 855–856 Oatp-Familie, Sinusoidalmembran 1096 ob/ob-Mäuse 523 Oberflächenantigene, Leukocyten 1109 Obestatin 886 – Ghrelinvorläufer 886 Occludine 198 OCT2 (organic cation transporter), Tubulusepithelien 906 Δ9,12-Octadecadiensäure 34, 418 Octadecansäure 33 (F), 34 Δ6,9,12-Octadecatrienoyl-CoA 420 (F) Δ9,12,15-Octadecatriensäure 34, 418 oculopharyngeale Muskeldystrophie 1018 O-Dealkylierung, Biotransformation 1091 Ödeme – Conn-Syndrom 927 – Marasmus 645 Ölsäure 34, 418 Östradiol 759, 872, 879 – Biosynthese, CYP17/CYP19 881 – Cytochrom-P450-AromataseKomplex 882 (F) – Granulosazellen 879 – Menopause 882 – Progesteron, Biosynthese 881 (F) – Rückkoppelung, Kisspeptin 880 – TRH-Abbau 848

N–O

– Wirkungen, molekulare 883 Östradiolrezeptor α/β 883–884 Östriol – Schwangerschaft 882 – Syncytiotrophoblasten 882 Östrogene 846, 872 – Abbau 882 – Befruchtung 883 – Biosynthese 864, 877, 879, 881 (F) – – Aromatasehemmer 881 – 1,25-Dihydroxy-Vitamin D3 883 – endogene, Verstoffwechselung 882 – Epiphysenschluss 744 – Fettgewebe 524 – GnRH-Sekretion 878 – Gonaden 873 – IGF-1 883 – Knorpel-/Knochenbildung 741, 883 – lipophiler Charakter 883 – Lipoproteine, Stoffwechsel 883 – Mamma 883 – Mammakarzinom 1159 – Menstruationszyklus, Proliferationsphase 883 – Ovar 878, 880–882 – Phosphatausscheidung, renale 933 – Prohormone, Androgene 880 – Skelettsystem, Homöostase 745 – synthetische 884 – Uterus 883 – Vagina 883 – Wirkungen, zelluläre 882–883 Östrogenrezeptor 763 – Transkriptionsfaktor 884 Östrogen-Rezeptor-Modulatoren selektive (SERMs) 884 – Osteoporose 746 Östron 881 (F), 882 offene Systeme – Entropie 102 – Thermodynamik 100 O-Form (open), F1-F0-ATP-Synthase 501 O-Glycoside 24 O-glycosidische Bindung, Glycoproteine 546 O-glycosidische Modifikationen, Proteine 312 1,25(OH)2D3 7 1,25-Dihydroxycholecalciferol 3‘-OH-Ende, Nucleinsäuren 146 OH-Gruppen, Monosaccharide 23 OH-Gruppen-Sulfatierung, Biotransformation 1091 Okazaki-Fragmente – DNA-Replikation 233 – DNA-Schäden, Basenexcisionsreparatur 238

1232

Anhang

Oleyl-CoA 419 2‘-5‘-Oligo-A-Synthetase-Expression (2‘-5‘-OASE), Interferon α/β 797 Oligodendroglia-Zellen 1045 Oligodendrozyten 1046 oligomere Enzyme 110 Oligomycin, F1-F0-ATP-Synthase 501 Oligopeptide – Abbau 322 – Resorption 1073 Oligosaccharide 22, 26–32 – Humanmilch 646 – Virusadsorption 330 Oligurie, Harnvolumen 914 Omega-3-Fettsäuren 1134 Omega-6-Fettsäuren 1134 Omeprazol 1056 F – Protonenpumpe, Hemmung 1055–1056 – Ulcusleiden 1067 OMP (Orotidin-5‘-monophosphat), Pyrimidinbiosynthese 590 OMP-Decarboxylase (OCT) – Mangel 604 – Pyrimidinbiosynthese 591 OMP-Decase 594 Oncostatin M (OSM) 759, 794 – rheumatische Erkrankungen 746 Ondansetron 1038 Onkogene 1143–1145 – Aktivierung, konstitutive 1143 – – kumulative, Tumorigenese 1150 – dominante 1144 – Mutation, Signaltransduktionsweg, konstitutive Anschaltung 1144 – virale 344, 1143 – Wirkmechanismen 1143 Onkogenese, Pin1-Isomerase 303 open reading frame (ORF), genetischer Code 289 Operonmodell, Prokaryoten, Transkription 271 OPG (Osteoprotegrin) 743, 868 Ophthalmoplegie, Enzephalomyopathien, mitochondriale 512 Opiate/Opioide – G-Protein, Aktivierung 780 – Nahrungsaufnahme, stimulierende Wirkung 643 Opiatrezeptoren – Isoformen 1044 – körpereigene 1044–1045 OPLG (Osteoprotegrin-Ligand) 7 RANK OPRTase 7 Orotat-Phosphoribosyltransferase Opsin 684–686 – G-Protein, Aktivierung 780

– G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 685 Opsonierung 1120 – Komplementaktivierung 1131 Opsonin, Komplementaktivierung 1105 optischer Test – Enzyme 115–116 – Funktionsprinzip 115 (F) – gekoppelter 115–116 Orbivirus 329 Orchiektomie 876 ORF (open reading frame), genetischer Code 289 Organe, Wachstumsphase, elastische Fasern 727 Organellen 176, 187–207 Organellentransport, Mikrotubuli 209 Organismen – heterotrophe 100 – Stickstoff-fixierende 428 Organversagen, multiples 798–801 Orgasmus, Oxytocin 891 Ornithin 49 (F), 438, 443, 532 (F) – Abbau 459 – Aminosäurestoffwechsel, Leber 447 – Biosynthese 459 – Harnstoffzyklus 446 (F), 447–448, 459 – NH4+-Stoffwechsel, Zonierung 449 – Plasmakonzentration 445 – Polyamine, Biosynthese 462 – Stoffwechsel 459–462 – Stoffwechselbedeutung 460 Ornithin-Carbamyltransferase – Defekt 450 – Harnstoffzyklus 447 Ornithin-Carrier 494 Ornithin-Citrullin-Antiporter (ORNT1) 442–443 – Harnstoffzyklus 442, 447–448 Ornithin-Decarboxylase 322 Ornithin-Transcarbamylase (OTC), Harnstoffzyklus 446 ORNT1 7 Ornithin-Citrullin-Antiporter (ORNT1) Orosomucoid – Funktion/Pathobiochemie 992 – Synthese in der Leber 1088 Orotacidurie, hereditäre 604 Orotat, Pyrimidinbiosynthese 590 (F), 591 Orotat-Phosphoribosyltransferase 591, 594 – Mangel 604 – Pyrimidinbiosynthese 635 Orotidin-5‘-monophosphat 7 OMP Orotidylatdecarboxylase, Geschwindigkeitskonstante 107 Orthohepadnavirus 329

Orthomyxoviren 328 – RNA-Genom 335 Orthopoxviren 329 Orthoreovirus 329 Oseltamivir 352 OSM (Oncostatin M) 759, 794 osmolal/osmolale Lösungen 12 osmolar/osmolare Lösungen 12 Osmolarität – effektive 918 – Extrazellulärraum 918 – Nierenzonen 900 – Tubulus, proximaler 904 – Wasserhaushalt, Körper 918 Osmolaritätsgradient, Wasserresorption 899 Osmorezeptoren – Durstgefühl 920 – Hypothalamus 918, 920 Osmose 11–12 osmotische Kräfte, Wasserbewegungen 12 osmotischer Druck 11–12 osmotischer Gradient – Blut-Hirn-Schranke 1027 – Wasser, Resorption 1074 Ossifikation – bone sialoprotein 738 – direkte oder desmale 738 – enchondrale, Röhrenknochen 739 – indirekte oder enchondrale 738 – Osteopontin 738 Osteoblasten 716, 738 – Bildung, Ihh 740 – BMP-Proteine 740 – Cortisolderivate 745 – Differenzierung, CBFA-1 (core binding factor-1) 740 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol 690 – Glucocorticoid-Rezeptoren 745 – Osteoklastogenese 743 – Progenitorzellen 739 – RANKL 743 Osteocalcin 695 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 – Knochen 738 – Vitamin-K-Abhängigkeit 695 – Vitamin-K-Mangel 696 Osteochondrodysplasie, Kathepsin-K-Mangel 323 Osteogenese – Hormone 739 – parakrine Faktoren 741 – Schlüsseltranskriptionsfaktoren 739 – Wachstumsfaktoren, parakrine 739 Osteogenesis imperfecta (OI) 313, 723 Osteoklasten 738, 742–743 – Demineralisierung 690

– Differenzierung 742–744 – – Makrophagen-ähnliche Vorläufer 743 – Exozytose, lysosomale 203 – Knochenresorption 744 – Parathormon 935 – Progenitorzellen 743 – Thyreocalcitonin, Signaltransduktion 937 – V-ATPasen, Defekte 183 Osteoklasten-aktivierender Faktor (OAF), Knochenbildung 745 Osteoklastogenese – M-CSF 743 – RANKL 743 Osteolyse – Hemmung, Thyreocalcitonin 937 – Riesenzelltumoren, ossäre 322 – Tumor-assoziierte 322 Osteomalacie, Vitamin-D-Mangel 691 Osteopetrose – maligne, infantile 200 – V-ATPasen, Defekte 184 Osteopontin 730 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol 690 – Knochen 738 – Ossifikation 738 Osteoporose 744, 746, 883 – Bisphosphonate 747 – Cytokine 745 – Fluorid 674 – Glucocorticoide 868 – SERMs 746 – Vitamin-K-Mangel 696 Osteoprotegrin (OPG) 743 – Transkription, Glucocorticoide 868 Osteosarkom 1147 Osteosklerose, Kathepsin-KMangel 323 Osteozyten 716, 738 OTC 7 Ornithintranscarbamylase OTC XP21.1, Defekt 450 outside-in-signaling, Integrine 734 Ovalbumin, Filtrierbarkeit, glomeruläre 896 Ovalzellen, Leber 1084 Ovarialcarcinom 1147 Ovarien – Granulosa-Zellen 878 – Hexosemonophosphat-Weg 368 – Östrogene/Progesterone 878, 880–882 – Relaxin 884 – Theca-Interna 878 – Zinkkonzentration 672 ovo-lacto-vegetabile Kost 654 Ovulation 879–880 – LH-Anstieg 880

1233 Sachverzeichnis

Oxalacetat 5, 373 (F), 441–443, 456 (F), 478, 480 (F), 482, 484, 486, 943 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Aminosäurestoffwechsel 432 – Fettsäurebiosynthese 417 – Gluconeogenese 372, 448 – Glucose-Fettsäurezyklus 522 – Harnstoffzyklus 448 – Rückgewinnung aus Succinat 484 – Standardpotential 103 Oxalat, Eliminierungsmechanismen 909 Oxalcrotonat, Tryptophanabbau 472 (F) Oxaliplatin 669 Oxalose, Hyperoxalurie 313 Oxalsäure, Calciumresorption, intestinale 931 Oxalsuccinat 480 (F) Oxidasen 506–507 Oxidation 11 (F), 100 – β-Oxidation 490 – – Acetyl-CoA 704 – – Acyl-CoA-Dehydrogenase 498 – – Fettsäuren 403–407, 484, 517 – – – ungesättigte 408 – – peroxisomale 408 – biologische 104 – Erythrozyten 956 – Flavoproteine 700 – Katecholaminabbau 831 Oxidationsmittel, Enzyme 128 Oxidationsschutz, Aminosäuren 430 Oxidationswasser 918 oxidative Abspaltung, Biotransformation 1091 oxidative burst 509 oxidative Endstrecke, Citratzyklus 478 oxidative Phosphorylierung (OXPHOS) 490, 491 (F) – Besonderheit 492 – Citratzyklus 505 – Defekte 512–513 – Energiebilanz 502 – Entkoppler, 2,4-Dinitrophenol 504 (F) – Innenmembran, mitochondriale 204 – Komplexe 495 – Kontrolle 503–506 – Regulation 503–506 – Voraussetzungen 490–494 – Wirkungsgrad 502 oxidative Umwandlungen, Biotransformation 1091 oxidativer Stress 509–512 – Alkoholkonsum, chronischer 1100

– Ethanolstoffwechsel, Leber 1100 Oxidoreduktasen 112–113, 506–509 – hämhaltige 506 Oxodicarboxylatcarrier (ODC) 442–443 Oxoferryl-Gruppe, Cytochrom P450 508 Oxo-Testosteron, CytochromP450-Aromatase-Komplex 882 (F) OXPHOS-Defekte/-Erkrankungen 512–513 Oxyanion-Tasche – Enzyme 121 – Histidin-57 121 Oxyform, Häm 80 Oxygenasedomäne 461 Oxygenierung, Hämoglobin 959 Oxyhämoglobin 83, 962 – Spektralkurve 959 Oxyntomodulin 823 Oxypurine, Keto-Enol-Tautomerie 142 Oxypyrimidine, Keto-Enol-Tautomerie 142 Oxytocin 890–891, 918 – Geburt/Laktation 890 – Halbwertszeit 849 – Orgasmus 891 – Uteruskontraktion 918 – Wasserhaushalt, Regulation 918

P P0, Gendefekte 1047 p15 1147 p15INK4B, Kinasen, Cyclin-abhängige, Inhibitoren 223 p16 1147 p16INK4A, Kinasen, Cyclin-abhängige, Inhibitoren 223 p17, HIV 331 p18INK4C, Kinasen, Cyclin-abhängige, Inhibitoren 223 p19INK4D, Kinasen, Cyclin-abhängige, Inhibitoren 223 p21 1148 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 p21WAF1 223–224 – Aktivierung 224 – p53 224 p24, HIV 331 p27, Proteine, Regulation 694 p38α, p38β bzw. p38δ 772 p38-Kinasen 772 p40, NAPDH-Oxidase 974 p47, NAPDH-Oxidase 974 p53 224, 323, 345, 1147–1150 – Apoptose 227

– Cancerogenese, chemische 1157 – colorektale Tumoren, sporadische 1153 – Genom, Integrität 1149 – Inaktivierung, PapillomvirusGenprodukte 1149 – Leberkrebs 1150 – Mutationen, somatische 1149 – Papillomviren 345 – Proteinkinasen, Cyclin-abhängige 224 – Thymidylatsynthase, Regulation 595 – Transkription, Regulator 224 – Viren, Tumor-erzeugende 344 p56Lck 1115 p57KIP2, Kinasen, Cyclin-abhängige, Inhibitoren 223 p59Fyn 1115 p67, NAPDH-Oxidase 974 P170-1-Glycoprotein 1161 (F) p190BCR-ABL 1154 p210BCR-ABL 1154 p230BCR-ABL 1154 p300 274, 275 (F) P450c11β-Hydroxylase 880 P450c21-Hydroxylase 880 Pacchioni-Granulationen 1026–1027 P1-Adenosinrezeptoren, ATP 1044 PAF (platelet activating factor) 558 (F), 800 – Allergie vom Typ I 1137 Paget-Krankheit 746 PAI-1, Diabetes mellitus 838 paired helical filaments (PHF), Alzheimer-Demenz 214 Palindrome 169 – DNA-Sequenzen 149 Palmitaldehyd 562 Palmitinsäure 34 Palmitoleinsäure 34, 418 Palmitoylierung – Cysteinreste 311 – Proteine 772 – – myristoylierte 310 Palmityl-CoA 419, 559 – Ceramid, Biosynthese 560 (F) – Sphingomyelin, Biosynthese 560 (F) PALP 7 Pyridoxalphosphat PAM (Peptidylglycin-α-amidierende Monooxygenase) – Ascorbinsäure 698 – Kupfer(transport) 667, 669 – TRH-Biosynthese/-Freisetzung 847 p-Aminobenzoesäure 125 (F) PAMP 7 Pyridoxaminphosphat pancreatic polypeptide, Nahrungsaufnahme, stimulierende Wirkung 643 Panenzephalitis, subakute sklerosierende, Masernvirus 343

O–P

Pankreas – Cholecystokinin 1065 – endokrines, Insulin 811 – – Zellen 811 – Enzymsekretion 1065 – – Hemmung durch Somatostatin 887 – – Nervensystem, parasympathisches 1065 – – Regulation 1065–1066 – Hydrogencarbonat-Sekretion 1065 – Hydrolase 1058 – Insulinempfindlichkeit 817 – Proteasen 1058 – Sekretin 1065 – Selenkonzentration 676 – Wassersekretion 1065 Pankreasamylase 1058 Pankreascarboxypeptidase, Zink 672 Pankreasinsuffizienz 1067–1068 – Colipase-/Lipasemangel 1077 Pankreaskarzinom – ADH-Sekretion 921 – Thyreocalcitoninüberproduktion 939 Pankreaslipase 398, 1059–1061 – Resorption 575 – Triacylglycerine, Abbau 1070 – – Spaltung/Resynthese 1072 – Triacylglycerin-spezifische 1070 Pankreassekret 1057–1060 – Endopeptidasen 1058 – Exopeptidasen 1058 – Hydrogencarbonat 1058 – pH-Wert 13 – Produktion, tägliche 1058 Pankreatitis – akute 1067 – chronische 1068 – – Vitamin-E-Mangel 694 – Hypercholesterinämie 583 Pankreozymin – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 783 – Vorkommen/Funktion 1063 Pansen, Vitamin-B12-Konzentration 709 P2Y-Antagonisten 1044 Pantoprazol 1056 Pantothensäure 681, 704–705 – Acetylierung 704 – Acylierung 704 – chemische Struktur 704 – Coenzym A 111 – – Biosynthese 704, 705 (F) – Speicherung in der Leber 1089 Papillomviren 329 – E6-/E7-Protein 345 – Genitalschleimhaut, Karzinome 344 – p53 345 – Persistenz 343 – Zervixkarzinom 344

1234

Anhang

Papillomvirus-Genprodukte, p53/Rb105, Inaktivierung 1149 Papillon-Lefèvre-Syndrom 200 PAPS (3‘-Phosphoadenosyl-5‘Phosphosulfat) 111, 550 – Cerebrosid/Sulfatid, Biosynthese 561 Paracelsus, Theophrastus 656 Paracetamol 1094 (F) – Biotransformation 1093 – Stoffwechsel 1094 parakrine Sekretion 1062 Paralyse – hyperkaliämische, Natriumkanalprotein, Domänen, Mutationen 1019 – – periodische 1018–1019, 1032 Paramyotonia congenita 1018–1019 Paramyxoviren 328 – Adsorption 335 – – Rezeptor-vermittelte 333–334 – Fusionierung mit der Zellmembran 334 Paraproteinämien 994, 998 – Immunglobuline, monoklonale 999 Parathormon (PTH) 689, 760, 934 (F) – Adenylatcyclase 936 – Biosynthese 934 – Calciumreabsorption 932 – Calciumrezeptor-Protein 934 – Calciumstoffwechsel 933–934 – cAMP 934 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol 935 – – Expression 690 – Freisetzung, cAMP 935–936 – Hydrolasen 935 – 25-Hydroxycholecalciferol 935 – Hydroxylierung 935 – Hydroxyprolin 935 – Hypoparathyreoidismus 939 – Knochen 935 – Knochenwachstum 742 – Kollagenasen 935 – Natriumcotransport (NaPi) 935 – Nebenschilddrüsen 933 – Osteoklasten 935 – Phosphatausscheidung, renale 933 – Phosphatstoffwechsel 933, 938 – Rezeptor, heptahelicaler 936 – Sekretion 934 – Stoffwechsel 934 – Thyreocalcitonin 936–937 – Vitamin-D-Stoffwechsel 689 parathormon-related-peptide 7 PTHrP Paresen, Pyridoxinmangel 703 Parietalzellen, Salzsäuresekretion 1055

Parkin 323 – Parkinson-Syndrom 1049 Parkinson-Syndrom 207, 1042, 1049–1050 – Demenz, frontotemporale 1049 – OXPHOS-System, Störungen 513 p-Arme, Chromosomen 155 Parotis, Fluoridspeicherung 674 PARs (proteinolytisch aktivierte Rezeptoren) 319 Partikel – intrazelluläre 205 – Zellen 187–207 Parvoviren 329 – DNA-Polymerasen 329, 339 Pasteur, Louis 389 Pasteur-Effekt 389 P-ATPasen 184 PAX8, Hypothyreose 860 Paxillin 1008 PBG 7 Porphobilinogen PBG-Desaminase – Hämbiosynthese 609–611 – Mangel 617 PBG-Synthase-Mangel, Porphyrie 617 P-bodies, Intrazellularraum 205 PC1 309, 848 – TRH-Biosynthese/-Freisetzung 847 PC2 309, 848 – TRH-Biosynthese/-Freisetzung 847 PCABs (potassium competitive acid inhibing blockers) 1056 P-Cadherine 197–198 PCNA (proliferating cell nuclear antigen), Führungsstrang, DNA-Replikation 234 pCO2 7 Kohlendioxid-Partialdruck PCR 7 Polymerase-Kettenreaktion PDGF (platelet derived growth factor) 225, 759, 1143–1144 – Alkoholkonsum, chronischer 1100 – Hemmung durch Glucocorticoide 867 – Lebersternzellen 1098 PDGF-A 786 – Lungenentwicklung 788 PDGF-B 786, 788 PDGF-B-Homodimer 786 PDGF-C 786, 788 PDGF-C-Homodimer 786 PDGF-D 786 PDGF-D-Homodimer 786 PDGF-induzierte Rezeptoraktivierung 788 PDGF-induzierte Signalkaskaden 788 PDGF/PDGF-Rezeptor-Interaktion 786–788

PDGFR (platelet-derived growth factor receptor) 786 – Rezeptortyrosinkinase-Signaltransduktion 786 – Signaltransduktionsmoleküle 43, 788 PDGF-Signaltransduktion 787 PDH 7 Pyruvatdehydrogenase PDI (Proteindisulfidisomerase) 306 – Thioredoxindomänen 306 PDK1 (phospholipid-dependent kianse 1) 525–526, 787 PeCAM 197 Pellagra 473, 702 pelvifemorale Muskeldystrophie 1018 Pem-Gen 876 Pemphigoid, bullöses 206, 753 Pendrin 675, 852 Penicillin 550–551 – bakteriostatischer Effekt 550 – Glycopeptid-Transpeptidase 550 – β-Lactamring 550 – PepT1 1073 – Quervernetzung 550 Penicilloyl-Enzym-Komplex 550, 551 (F) Pentaglycinpeptid 30 Pentosen 22–23 – Nucleinsäuren 23 – Nucleotide 23 Pentosephosphat-Weg 7 Hexosemonophosphat-Weg Pentosidin, Kollagen 394 PEP-Carboxykinase (PEP-CK) 373, 387, 487 – Aminosäurestoffwechsel, Nieren 452–453 – cAMP, Erhöhung 387 – Cortisol 867 – Gluconeogenese 373, 387–388, 391 – Hemmung durch Insulin 820 – Insulinbiosynthese 819 – Mangan 673 – Retinoidfunktion 688 PEP-Carboxykinase-Promotor, Aufbau 388 Pepsin 127, 133, 315, 1056, 1059 – Endopeptidase 1056 – Magensaft 1054 – Zymogengranula 1056 Pepsininhibitor 1056 Pepsinogen 133, 1056, 1059 – Sekretion, Regulation 1065 Peptid YY (PYY) – Nahrungsaufnahme 643 – – stimulierende Wirkung 643 Peptidantibiotika, Aufnahme, PepT1 1073 Peptidasen 315–316, 906 – canaliculäre Membran 1097 – Defekte 200 – Hemmstoffe, Bindung 316

– ω-Stelle 312 Peptidbindung(en) 57–58, 69–70 – cis-/trans-Form 70 – Dipolmoment, permanentes, statisches 78 – gestaffelte Form 69–70 – Mesomerie 69–70 – NMR-Spektroskopie 70 – Proteinbiosynthese 288 – – Elongation 296 – Säurechlorid, Bildung 92 – Säurehydrolyse, Proteine 65 – Spaltung 315 – – Pepsin 1056 – Spektrum 92 – ω-Stelle 311 – Synthese 293 – Transamidase 311 – verdeckte Form 69–70 Peptide – Aminosäuresequenz, EdmanAbbau 65–66 – Aufnahme, Mukosazelle 1073 – – PepT1 1073 – Festkörpersynthesetechnik 93 – kurz-/langkettige 57 – Neurotransmitter 1034 – Re(ab)sorption 1073 – – Niere 905 – Synthese 92–93 – – Peptidyltransferasezentrum (PTZ) 293 – tryptische 66 – Umkehrphasen-HPLC-Auftrennung 66 Peptidhormone – gastrointestinale 1063 – als Glycoproteine 27 – Herstellung, Ascorbinsäure 698 – Nahrungsaufnahme, Wirkung 643 Peptidhydrolyse, Spezifität 315 Peptidoglykane 28, 30–31 Peptid-Transporter 1 (PepT1) 1073 Peptid-Transporter 2 (PepT2), Niere 901 Peptidylcholesterin 310 Peptidylglycin-α-amidierende Monooxygenase 7 PAM Peptidylglycin-Monooxygenase 309 Peptidylpeptidasen 316 Peptidyl-Prolyl-cis-trans-Isomerasen (PPIasen) 302–303 – Geschwindigkeitskonstante 107 – HIV 340 – Immunsuppression 303 – Proteinfaltung 88 Peptidyl-Prolyl-Peptidbindungen, Cis-trans-Isomerie 303 Peptidyl-Prolyl-Peptidisomerase 302

1235 Sachverzeichnis

Peptidyltransfer, intramolekularer, Proteinolyse, limitierte 309 Peptidyltransferasezentrum (PTZ) 296 – Peptidsynthese 293 – Proteinbiosynthese 288 Peptidyl-tRNA 296 Peptone 1056 Perforin 202–203, 1116 Perhydroxylradikal 510 Perichromatingranula, Zellkern 187 Perilipin 414 (F), 415 Perineuritis 1018 Periodensystem, Elemente 4 Periodontitis 315 Peritonealdialyse 909 Peritoneum, Makrophagen 975 Perlecan 727–728 – Basalmembran 732 permeability transition pore, OXPHOS-Defekte 513 Permeationsvermögen, Hydratationsradius 8 Peroxidasen 506 – Aktivität, PGHS 420 – Allergie Typ I 1137 Peroxine 307 peroxisomale Transportsignale (PTS) 307 Peroxisomen 176 (F), 204–205 – Fettsäuren, β-Oxidation 204, 408 – Katalase 205 – Proliferatoren 323 Peroxisomen-Proliferator-aktivierte Rezeptoren 7 PPAR Peroxy-Enzym-Intermediat, Cytochrom-P450-AromataseKomplex 882 (F) Peroxyl-Radikale 510 – Vitamin E 693 Pertechnat, Schilddrüsenszintigraphie 852 Pest 966 PEST-Sequenzen, Proteine 321 Pestvirus 328 pET 245 Pex3 307 Pex19 307 PEX-Importkomplex 307 P2X-Familie, ATP-Rezeptoren, trimäre 1036 PFIC 3 1101 PFK 7 Phosphofructokinase Pfortader 516 PGE2 7 Prostaglandin E2 PGI2 7 Prostacyclin (PGI2) P-Glycoprotein 1160 – ABC-Transporter 184 – Blut-Hirn-Schranke 1027 pH-Abhängigkeit, Enzymaktivität 128 pH-Änderungen, Proteindenaturierung 88

Phänotyp, zell- oder gewebetypischer, Expression 271 Phagendisplay, Genomik, funktionelle 95 Phagosom 973 Phagozytose 195 – Bakterienabwehr 1135 – Granulozyten, basophile, eosinophile bzw. neutrophile 975 – Kupfferzellen 1098 – Makrophagen 975 – Mikroorganismen 1105 – Vakuole 973 Phalloidin 215 Pharmakogenetik 1093 PH-Domänen (pleckstrin-homologie domains), Transport, vesikulärer 194 PH-Domänen (pleckstrin-homology domains) – Proteine 772 – Transport, vesikulärer 194 Phenole, Urämietoxine 909 Phenylacetat 403–404, 469 (F) – Harnstoffzyklusdefekte 450 – Phenylalanin, Umwandlungsreaktionen 469 (F) – Phenylketonurie 470 Phenylacetyl-CoA – Phenylalanin, Umwandlungsreaktionen 469 (F) – Phenylketonurie 470 Phenylacetylglutamin – Harnstoffzyklusdefekte 450 – Phenylketonurie 470 Phenylalanin 45 (F), 47, 438, 440–441, 518 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 443 – Katecholaminbiosynthese 827 (F) – Plasmakonzentration 445 – Serotoninabbau/-biosynthese 1042 – Stoffwechselbedeutung 468 – Transaminierung 441 – Umwandlungsreaktionen 469 (F) phenylalaninarme Diät, Phenylketonurie 470 Phenylalanin-Hydroxylase 506 – Aminosäuren, aromatische, Abbau 468 – Defekt 469 – – Mutationen 470 – Katecholaminbiosynthese 827 – Phenylalanin, Umwandlungsreaktionen 469 – Tyrosinsynthese 468 Phenylessigsäure 7 Phenylacetat Phenylethanolamin-N-Methyltransferase 827–828, 1041 – Katecholaminbiosynthese 827

Phenylethylamin – Phenylalanin, Umwandlungsreaktionen 469 (F) – Phenylketonurie 470 ω-Phenylfettsäuren 403 Phenylisothiocyanat (PITC) 66 Phenylketonurie 469–471 – Guthrie-Test 470 – phenylalaninarme Diät 470 Phenylpyruvat 440, 469 (F) – Phenylketonurie 470 pH-Erniedrigung, Knochenabbau 743 Phesamicol 1035 pH-Gradient, Magen, Mucinschicht 1057 Philadelphia-Chromosom, Leukämie, chronisch-myeloische (CML) 1154 Phlebovirus 328 pH-Optimum, Enzymaktivität 127–128 Phorbolester 789 Phoshpat, 1α-Hydroxylase, Hemmung 689 Phosphat 483 (F), 932 – anorganisches 933 – Ausscheidung 933 – – renale 933 – Bedarf, täglicher 932 – Blut 932 – energiereiches 104–105 – – Nucleotide 144 – Freisetzung, Querbrückenzyklus 1011 – Muskelkontraktion 1010 – organische Verbindungen 932 – organisches 918 – Protonenquelle 943 – Puffer 932 – Resorption 1076 – – intestinale 932 – Urin 915 – Verteilung im Organismus 932 Phosphatase, alkalische, Tumormarker 1159 Phosphatase(n) 262, 482, 806, 1059 – alkalische, Darmsaft 1062 – – Phosphatidylinositol, Verankerung 312 – – Tumormarker 1159 – Calcium-regulierte 776 – Inhibierung, Signalproteine, Phosphorylierung 806 – PDH-Komplex 482 – saure, Lysosomen 200 – Zellkern 806 Phosphat-Carrier 493–494 5‘-Phosphatende, Nucleinsäuren 146 Phosphatester, Nucleoside 143 Phosphatgruppentransferreaktion, Citratcyklus 483

Phosphathaushalt 932–933 – Parathormon 933 – Pathobiochemie 938–939 Phosphatidat 35, 36 (F) – Triacylglycerine, Biosynthese 402 (F), 403 Phosphatidat-Cytidyl-Transferase, Phosphoglyceride, Biosynthese 555 Phosphatidat-Phosphohydrolase 517 – Lipogenese 415–416 – Triacylglycerine, Biosynthese 402–403 Phosphatidylcholin 35, 36 (F), 204, 517, 556 (F), 558, 1061 – Abbau 558 – Acylierungszyklus 557 (F) – – Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT) 557 – Biosynthese 111 – Ladung, positive 40 – Lipiddoppelschichten 41 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 (F) – Sphingomyelin, Biosynthese 559, 560 (F) Phosphatidylethanolamin 35, 36 (F), 204, 556 (F), 557 – Ladung, positive 40 – Lipiddoppelschichten 41 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 (F) Phosphatidylglycerophosphat, Cardiolipin, Biosynthese 556 Phosphatidylgycerin, Cardiolipin, Biosynthese 556 Phosphatidylinositol-3,4,5-triphosphat (PIP3) 571, 788 Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K) 525–526, 571, 772, 785, 787–789, 888 – Insulinsignal, Weiterleitung 821 – Rezeptortyrosinkinase 786 Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2) 784 (F) Phosphatidylinositol (PI) 35, 36 (F), 784 (F) – endoplasmatisches Retikulum 190 – Lipiddoppelschichten 41 – Phosphoglyceride, Biosynthese 555 (F) – Phosphorylierung 783 – Verankerung, Acetylcholinesterase 312 – – Phosphatase, alkalische 312 – Zyklus 422 Phosphatidylinositolanker, AcChEH 313 Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2) 571, 783 – Phosphorylierung 788 – Synthese 775

P

1236

Anhang

Phosphatidylinositolkaskade, Aktivierung, Angiotensin IIWirkungen 911 Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K) 571 – Aktivierung von Fusionsproteinen 1154 – p85-Untereinheit 43 – Signalweg 772 Phosphatidylinositolphosphate (PIPs) 772 – G-Proteine 194 Phosphatidylserin 35, 36 (F), 556 (F), 557 – Lipiddoppelschichten 41 Phosphationen, Knochen 738 Phosphatreabsorption, Wachstumshormon 938 Phosphatreste, Nucleotide 142 Phosphatstoffwechsel – 1,25-Dihydroxycholecalciferol 933 – hormonelle Regulation 933–938 – Parathormon (PTH) 933 – Thyreocalcitonin (CT) 933 Phosphat-Transfer, Transportproteine 494 3‘-Phosphoadenosyl-5‘-Phosphosulfat (PAPS) 111, 550, 559, 941–942 2-/3-Phospho-D-Glycerat 458 Phosphodiesterase (PDE) 167, 239, 383, 519 – Bindung, Nucleinsäuren 147 – cAMP-abbauende 819 – cGMP-abbauende 686, 803 – Defekte 200 – Insulinsignal, Weiterleitung 821 – Nahrungskarenz 529 Phosphoenolpyruvat (PEP) 373 (F), 458, 486 – Bildung 374 – Enthalpie, freie 105 – Fettsäurebiosynthese 413 – Gluconeogenese 372 – Glycolyse 360 (F), 362 Phosphoenolpyruvat-Carboxykinase 7 PEP-Carboxykinase (PEP-CK) Phosphofructokinase-1 (PFK-1) – Aktivatoren, allosterische 388 – Fructose-2,6-bisphosphat 388 – Glycolyse 359, 387–388 – Inhibitoren, allosterische 388 – Kooperativität 130 – Umgehung, Gluconeogenese 373 Phosphofructokinase-2 (PFK-2), Insulinsignal, Weiterleitung 822 Phosphofructokinase (PFK) 106, 111, 386, 522 – Gluconeogenese 372, 391–392

– Glucose-Fettsäurezyklus 522 – Glycolyse 360, 363–364, 387 – Insulin 820 – Insulinbiosynthese 819 Phosphoglucomutase 542 – Glycogenbiosynthese 368–369 – Hemmung 543 6-Phosphogluconat 366 (F) 6-Phosphogluconat-Dehydrogenase 366 – Hexosemonophosphat-Weg 365 6-Phosphogluconolacton 366 (F) – Hexosemonophosphat-Weg 365 Phosphoglycerat – 2-Phosphoglycerat, Glycolyse 360 (F), 362 – 3-Phosphoglycerat, Aminosäurestoffwechsel 365 – – Glycolyse 360 (F), 362 – – Nieren 452 – – Serinbiosynthese 458 Phosphoglyceratkinase – Erythrozyten 363 – Glycolyse 106, 360, 362, 364 Phosphoglyceratmutase, Glycolyse 362, 363 (F) Phosphoglyceride 32, 35, 36 (F), 571 – Abbau 558–559 – amphiphile Verbindungen 40 – Austauschmechanismus 563 – Biosynthese 554–558 – – Enzyme 562 – Glycerin-3-phosphat 35 – Ladung, negative 40 – Membranen, biologische 556 – N-haltige, Umwandlungen 556 (F) – Pathobiochemie 580–581 – Phosphorsäurediester-Bindung 554 – Resorptionsphase, Leber 1086 – Serumkonzentrationen 572 – Signaltransduktion 571 – Stoffwechsel 554–583 3-Phosphoglycerinaldehyd, Hexosemonophosphat-Weg 365 Phosphoguanidine, Gruppenübertragungspotential 105 Phosphohexose-Isomerase 544 – moonlighting-Proteine 110 Phosphohistidin 483 (F) Phosphohydrolase 571 3-Phosphohydroxypyruvat 458 Phosphoinositid-abhängige Kinase 1 (PDK1) 571 – Insulin, metabolische Effekte 821 Phosphoinositol, Stoffwechsel, GABAB-Rezeptor 1040 Phosphokreatin 505 – Myokard 385 Phospholamban

– Muskelrelaxation 1014–1015 – T3 857 Phospholipase 36, 557 – Darmsaft 1062 Phospholipase A 1070 – Bienengift 559 – Schlangengift 559 Phospholipase A1 559 Phospholipase A2 420, 558–559, 571, 799 – Aktivität 425 – cytosolische 424 – Hemmung durch Glucocorticoide 867 – Immunantwort 1134 – Inhibitoren 424 – Leukotrienbiosynthese 423 – Phosphatidylcholin, Abbau 558 – Phosphoglyceride, Abbau 558 – α-Tocopherol 693 Phospholipase C 558–559, 571, 787 – Calcitoninrezeptoren 937 – GH-Freisetzung 886 – Nierendurchblutung 896 – Phospholipase Cβ 571, 775, 783, 886, 937, 1064–1065 – – Aktivierung 774, 780 – – Salzsäureproduktion 1064 – Phospholipase Cβ2 784 – Phospholipase Cγ 571, 783, 788–789, 1114 – – Rezeptortyrosinkinase 786 – Rezeptoren 783 – Serotoninrezeptoren 1043 Phospholipase D 558–559, 571 Phospholipasen 783 – Defekte 200 – Phosphoglyceride, Abbau 558 – Schlangengifte 36 Phospholipide 398, 647 – Acylglycerine, Spaltung 1070 – Assemblierung 1072 – chemische Zusammensetzung 573 – Cholesterinsteine 1101 – LDL 575 – physikalische Eigenschaften 573 – Synthese, CDP-Cholin 145 – – Enzyme, Lokalisation 562 Phospholipidtransporter, ATP-abhängiger 563 3-Phosphomevalonat 565 (F) Phosphomevalonatkinase 565 4-Phosphopanthetein 410 (F), 681, 704, 705 (F) 4-Phosphopantothensäure, Coenzym A, Biosynthese 704, 705 (F) 4-Phosphopantothenylcystein, Coenzym A, Biosynthese 704, 705 (F) Phosphoproteinkinase, Modifikation, covalente 132

Phosphoprotein-Phosphatase-1 (PP-1) 381–382, 384 – Aktivität, Regulation 383 (F) – Inhibitor 384 Phosphoprotein-Phosphatase-2A, Glycolyse 387 Phosphoprotein-Phosphatase-3, Aktivierung 384 Phosphoprotein-Phosphatasen 383 – Dephosphorylierung 387 3-Phospho-5-Pyrophosphomevalonat 565 (F), 566 Phosphor 4 5-Phosphoribosyl-1β-amin (PRA), Purinbiosynthese 586, 587 (F) 5-Phosphoribosyl-1α-pyrophosphat (PRPP) 586 (F) – Biosynthese 586 – Hexosemonophosphatweg 586 – NAD+/NADP+, Biosynthese 701 – Purinbiosynthese 586, 587 (F), 632 Phosphorsäure 942 Phosphorsäureanhydrid – Bindung, ATP 144 – 1,3-Bisphosphoglycerat 362 – Glycolyse 362 – Gruppenübertragungspotential 105 Phosphorylase 312, 542 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – Defizienz 1018 – Dephosphorylierung 383 – Glycogenabbau 370 Phosphorylase a 381, 383 Phosphorylase b 380, 383 – R-Form 380 – T-Form 380 Phosphorylasekinase 381, 777 – Calmodulin 382 – Dephosphorylierung 383 – Glycogenstoffwechsel, Regulation 381 – Muskel 132 – Phosphorylierung/Dephosphorylierung 132 Phosphorylasekinase a 381, 384 Phosphorylasekinase b 381, 384 Phosphorylcholin 32, 560 (F), 562 Phosphorylcholin-Cytidyl-Transferase 555 Phosphorylgruppen 5 (F) – Übertragungspotentiale 104 Phosphorylierung 381 – cAMP-abhängige, Perilipin 414 (F) – Citratzyklus 482 – C-terminale Domäne 262 – Cyclin B 223 – Cyclin/cdk-Komplexe 222 – Enzyme 132 (F)

1237 Sachverzeichnis

– – – – –

Glucose 516 Histonproteine 273–274 Interferone, Stimulation 806 Interleukine, Stimulation 806 Ionenkanäle, Regulation 1032 – oxidative 7 oxidative Phosphorylierung – P-ATPasen 184 – Proteinkinasen 106 – – Cyclin-abhängige 221, 222 (F) – reversible, Signalmoleküle 806 – Rezeptoren 806 – Serinreste 273 – Wachstumsfaktoren, Stimulation 806 Phosphoryltransfer-Reaktionen 104 Phosphoserin 48 Phosphothreonin 48 Phosphotyrosin 48 – Insulinrezeptor 821 Phosphotyrosin-Motive, Proteine 771 Phosphotyrosin-Seitenketten, Cytokinrezeptor 771 Phospolipid-Transferprotein (PLTP), Vitamin-E-Stoffwechsel 692 Photobilirubin 625 Photonen, G-Protein, Aktivierung 780 Photorezeption, molekulare Vorgänge 684 Photorezeptormembran, Belichtung 686 Photosensibilität, Porphyrine/ Protoporphyrie 618 photosensible Zellen, Reizübertragung 686 Photosynthese 100 photosynthetisch-autotrophe Organismen 100 Phototherapie, Hyperbilirubinämie 625 ph-response element, Aminosäurestoffwechsel, Nieren 453 pH-Wert 12–14 – Alkalose 949 – Aminosäuren 50 – Azidose 949 – biologische Systeme 13 – Blut(plasma) 13, 18 – Calcium, Bindung 932 – Ermittlung, Nomogramm 964 – Extrazellulärflüssigkeit 14 – Extrazellulärraum 943 – Flüssigkeiten 13 – H+-Ionenkonzentration 943 – Intrazellulärraum 14, 943 – Körperflüssigkeiten 17 – Kohlendioxid/Hydrogencarbonat-Puffersystem 18 – Magensaft 13

– Magnetresonanzspektroskopie (NMR) 14 – Pankreassaft 13 – Puffersystem 16 – Sauerstoffanlagerungskurve 960 – Urin 914 p-Hydroxyphenylalanin 469 p-Hydroxyphenylpyruvat, Tyrosinabbau 471 (F) p-Hydroxyphenylpyruvat-Oxygenase, Tyrosinabbau 471 Phyllochinon(e) 32, 38, 681, 695–697 – biochemische Tests 682 – Mangel 696 physikalische Cancerogenese 1158 Physostigmin 1040 Phytinsäure, Calciumresorption, intestinale 931 Phytol, Peroxisomen 205 Phytoöstrogene 883–884 PI3-Kinase 7 Phosphatidylinositol-3-Kinase PIAS (protein inhibitors of activated STATs) 806 Picornaviridae 328 Pigmentsteine 1101–1102 Pikrotoxin 1038 Pin1 303 Pin1-Isomerase – Apoptose 303 – Onkogenese 303 Pinocytose, adsorptive 195 PIP2 7 Phosphatidylinositol-4,5bisphosphat PI(4,5)P2-5‘-Phosphatase (Synaptojanin-1), Plasmamembran 195 PIP3-dependent kinase 7 Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K) PIP-bindende Module, Transport, vesikulärer 194 Pitressin 7 ADH Pit-Zellen, Leber 1084 PKC-Proteine – Calcium 789 – Diacylglycerin 789 31 P-Kernspinresonanzspektroskopie 571 pKS-Wert – Blutplasma 18 – Säuren 15, 571 pK-Wert 16 – Alanin 49 – Aminosäuren 49 – Ammonium-/AmmoniakPuffersystem 909 – Aspartat 49 – Lysin 49 – Proteine 59 – Puffersystem 17 PLA2 Bzw. PLC 7 Phospholipase A2 bzw. C

Plättchenaggregation 5-HT2-Rezeptor 1043 Plättchen-aktivierender Faktor 7 PAF Plättchenaktivierungsfaktor 7 PAF Plättchenrezeptor αII/β3, Integrine 733 Plättchenstaub 977 Plättchen-Wachstumsfaktor 7 PDGF Plaques, Alzheimer-Demenz 1048 Plasma – Elektrolytzusammensetzung 1074 – Fettsäuren 520 – Hydrogencarbonat 942, 962 – Kohlendioxidtransport 962 – Transferrinkonzentration 661 plasma thromboplastin antecedent (PTA) 985 Plasmaaldosteron, PlasmaKaliumkonzentration 929 Plasmabicarbonat, Pufferkapazität 945 Plasmacalcium – Fraktionen 931 – Nebenschilddrüsen 932 – Parathormon 934 – Thyreocalcitoninfreisetzung 933 – Vitamin D 690 Plasmacholesterin, HMG-CoAReduktase, Aktivität 577 Plasmacortisolspiegel 863, 865 – Rhythmik, circadiane 866 Plasmaeisen – Eisenstoffwechsel 665 – Schwankungen, tageszeitliche 661 Plasmaferritinspiegel – Eisenmangel 663 – Eisenüberladung 663 Plasmafettsäuren, Fettgewebe 520 Plasmafibronectin, Wundheilung 731 Plasmafluoridkonzentration 673 Plasmahydrogencarbonatkonzentration, Ermittlung, Nomogramm 964 Plasmainsulin, Konzentration 814 Plasmakaliumkonzentration, Aldosteronsynthese 924, 929 Plasmakupfer, Caeruloplasmin 664 Plasmalemma 7 Plasmamembran Plasmalogen(e) 36, 37 (F), 557 (F) – Fettsäurealdehyd 36 Plasmamembran 176, 195–197, 563 – Asymmetrie, Phospholipidtransporter, ATP-abhängige 563

– Cholesterin-reiche Mikrodomänen 312 – Clathrin-beschichtete Grübchen (coated pits) 201 – Effektorproteine, cytoplasmatische, Rekrutierung 770 – Endozytose 195 – GLUT 4 377 – lipid rafts 312 – neuronale, Leckstrom (leak channels) 1030 – Nucleosidtransporter 598 – Proteine, Abbau 319 – rafts 310 Plasmamembranproteinasen 318 Plasmaosmolarität, ADH-Freisetzung 919 Plasmaphosphat 933 – Ausscheidung 933 – Erniedrigung 938 – Pufferkapazität 945 Plasmaproteine 991–999 – Abbau 991 – Akutphase-Proteine 996 – Biosynthese 991 – Blutgerinnung 996 – Chrommarkierung 675 – Druck, kolloidosmotischer (onkotischer) 996 – dynamisches Gleichgewicht 991 – Elektrophorese 991 – Entzündungen 996 – Fibrinolyse 996 – Fraktionen, Normalwerte 993 – Infektionen 996 – intravasale 991 – isoelektrische Punkte 944 – Konzentration 991 – Ladung 963, 991 – Plasmavolumen 996 – Pufferkapazität 945 – Puffersystem 944 – Teilchengröße 991 – Thrombozyten 977 – Trennung, Celluloseacetatfolie 994 – – Einzelfraktionen 991–992 Plasmarhythmus, Stress 863 Plasmavolumen, Plasmaproteine 996 Plasmazellen 1126–1127 – Antikörper-produzierende 1125 – Knochenmark 1126 Plasmazinkspiegel, circadiane Rhythmik 672 Plasmide 241 – bakterielle 241, 244–245 – DNA-Bibliothek, genomische 244 (F) – DNA-Fragmente 244 – Fremd-DNA, Aufnahme 243 – Polyklonierungsstelle 242 – Selektion 246 – Vermehrung 246

P

1238

Anhang

Plasmidvektor, pUC18 242 (F) Plasmin 315 – extrazelluläre Matrix, Abbau 736 – Fibrinolyse 987–988 Plasminogen 992 – extrazelluläre Matrix, Abbau 736 – Synthese in der Leber 1088 Plasminogenaktivator – Blutgerinnung 985 – Fibrinolyse 987 Plasmozytom 999 – Bence-Jones-Protein 915 platelet activating factor 7 PAF PlateLeT count (PLT) 978 platelet-derived growth factor 7 PDGF platelet-derived growth factor Rezeptor (PDGFR) 786 Platinderivate 669 Plazenta – DIO3 857 – Hormone 884–885 – P-Cadherine 198 – PTHrP 936 – Steroidhormone 873 plazentares Lactogen 7 Chorionsomatomammotropin Pleckstrin-Homologie-Domäne (PH-Domäne) 788 Plectin 753 – dermo-dermale Junktion 750 Pleiotropismus, Cytokine 777 Plexus choroideus 1025 – Basalmembran 1026 – Liquor cerebrospinalis 1026 – Liquorfiltration 1027 Plexusendothel 1026 – Astrozyten 1027 – Basalmembran 1027 – Schlussleisten (tight junctions) 1027 PLTP (Phospholipid-Transferprotein), Vitamin-E-Stoffwechsel 692 Plus-Ende, Mikrotubuli 208 PMP22, Gendefekte 1047 PMS2 237 Pneumokokken 1105 Pneumolysin 185 Pneumovirus 328 Podocalixin 896 Podozyten 896–897 POL, HIV 336 PolII 276 Polioviren, Adsorption 335 Poly(A)--Ende/-Schwanz 267 Poly(A)-bindendes Protein (PABP) 295 Polyacrylamidgel, SDS-Gelelektrophorese 62–63 Polyadenylierung – prä-mRNA 267 – Prozessierung, posttranskriptionale 243

– Sequenz 267 Poly-ADP-Ribosylierung 702 Poly(A)-Ende/-Schwanz, Proteinbiosynthese, eukaryote, Initiation 294 Polyamine 459, 462 Polyanionen, Proteoglykane 30 Polydesoxyribonucleotid 143 Polydipsie, Hypercalciämie 938 Polyglucosane, MyoklonusEpilepsie 1049 Polyglutamin-Krankheiten 1049 Poly-Immunglobulinrezeptor (PIGR) 1079 Polyklonierungsstelle – lacZ-Gen, Escherichia coli 243 – Plasmide 242 Polymerase, Initiationskomplex 260 Polymerase-Kettenreaktion (PCR) 167, 247 – DNA-Sequenz, Amplifizierung 247 – Nucleinsäuren, virale, Nachweis 346 – Taq-Polymerase 127 – Thermophilus aquaticus 127 polymerase-switching, Führungsstrang, DNA-Replikation 234 Polymyositis 1018 Polynucleotidase 1059 – Darmsaft 1062 Polynucleotide 25 Polyoldehydrogenase 364–365 Polyolstoffwechsel, Diabetes mellitus 837 Polyolweg, Glucose 364 Polyomaviren 329 – DNA-Polymerasen 339 Polypeptide 57–58, 758 – Faltung 301–303 – Neurotransmitter 1034 – Plazenta 884 – regulatorische, Hypophyse 862, 878–880 – – Hypothalamus 862, 878–880 – Transport, cotranslationaler 304 – – posttranslationaler 306–307 Polypeptidkette(n) – Bindungslängen und -winkel 71 – Calciumkanäle, spannungsregulierte 1031 – Hauptkette 57 – Kollagene, fibrilläre 718 – naszierende 301–302 – Natriumkanäle, spannungsregulierte 1031 – Proteine 287 – Seitenkette 57 – Vernetzung 310 – – Transglutaminase 310 Polypeptid-Wachstumsfaktoren, Thrombozyten 977

Polyplasmie 204 Polyposis 1147 – familiäre adenomatöse (FAP) 1151–1152 Polyprenole 32 – Peroxisomen 205 Polyproteine, Viren 335 Polyribonucleotid 143 Polyribosomen 7 Polysomen Polysaccharide 22, 24, 26–32 Polysomen – Elektronenmikroskopie 296 – Proteinbiosynthese, eukaryote, Initiation 295 – ribosomale Untereinheiten 205 Polyubiquitinierung, Proteine 320 (F)–321 (F) polyunsaturated fatty acids (PUVA) 419 Polyurie – Harnvolumen 914 – Hypercalciämie 938 Polyzythämie 955 POMC 7 Proopiomelanocortin Pompe-Krankheit 200 Poolfunktion, Ubichinon 496 Poppers 803 P/O-Quotient 502 Poren – Glomerulusfilter 896 – Ionenkanäle 1031 Porine 178, 182 – Mitochondrienmembran, äußere 492 – Transport 182 – VDAC (voltage dependent anion-selective channel) 182 Porphobilinogen (PBG) 609 (F) – Hämbiosynthese 609 – Urin 915 – Urinausscheidung, Porphyrie, erworbene 619 Porphobilinogensynthase, Hämbiosynthese 609 Porphyria/Porphyrie – akute, intermittierende (AIP) 616–617 – angeborene 614–619 – – Zwischenprodukte, akkumulierende 615 – cutanea tarda (PCT) 616, 618 – – Urinausscheidungsmuster 619 – erworbene 619–620 – Genträger 618 – hepatoerythropoetische (HPP) 616, 618 – Heterogenität, molekulare 618 – kongenitale, erythropoetische (KEP) 616 – Molekularpathologie 615–617 – PBG-Synthase-Mangel 617 – Urin, Rotfärbung 618

– Urinausscheidungsmuster 619 – variegata (PV) 616, 618 – – Stuhlporphyrie 619 – – Urinausscheidungsmuster 619 Porphyrine 486, 608 – Aminosäuren 429 – Ausscheidung 614 – Cobalamin 709 – Eigenschaften 616 – Fluoreszenz 616 – Photosensibilität 616 – Porphyrie, angeborene 615 – Soret-Bande 615 Porphyringerüst, Abbau, Erythrozyten 955 Porphyrinogene, Porphyrie, angeborene 615 Porphyrinurie 914, 916 Porphyrinvorstufen – Ausscheidung 614 – Molekularpathogenese 615 – Wasserlöslichkeit 614 portales Signal, Glycogenbiosynthese 516 Positronen-Emissions-Tomographie (PET), Glucoseaufnahme, Hirnregionen 1024 Postaggressionsstoffwechsel 653 postkapilläre Venolen 972 Postresorptionsphase, Leber 1084, 1086 postsynaptische Membran 1034 posttranslationaler Transport 304 Potentiale 492 Poxviridae 329 PP-1A 387 PP-2A1 387 PPAR-α 416, 649 PPAR-β 649 PPAR-γ 649 – Proteine, Regulation 694 PPAR (Peroxisomen-Proliferationaktivierte Rezeptoren) 687 – Arteriosklerose 649 – Fettsäurebiosynthese 417 – Fettsäuren, freie, Genexpression 649 – Isoformen, Fettstoff-/Kohlenhydratwechsel 649–650 – – gewebespezifische Wirkungen 649–650 – Lipidstoffwechsel 649 – Typ-II-Diabetes 649 P-(Peptidyl-)Stellen, Ribosomen 293, 294 (F) PPIasen (Peptidyl-Prolyl-cistrans-Isomerasen) 302 – Geschwindigkeitskonstante 107 – HIV 340 – Immunsuppression 303 – Proteinfaltung 88, 302–303

1239 Sachverzeichnis

P1-(Proteaseinhibitor-)Typ, α1Antitrypsin 997 PP-Zellen, Pankreas, endokrines 811 PR, HIV 336 PRA (5-Phosphoribosylamin), Purinbiosynthese 587 (F), 588 Prä-β-Lipoproteine, Eigenschaften 573 Präalbumin – Funktion/Pathobiochemie 992 – Immunelektrophorese 995 präbiotische Phase 4 Prädispositionssyndrome, Keimbahninaktivierung 1150 Präkallikrein, Akutphase-Proteine 1089 prä-miRNA, Spaltung 282 prä-mRNA 160 – cotranskriptionale Modifikation 262–267 – Polyadenylierung 267 – Spleißen 264 Prä-PDGF-C/-D 786 Prä-Proglucagon 823 Prä-Prohormonstruktur, CRH 862 Prä-Proinsulin 811, 813 (F) Prä-Proopiomelanocortin 845 Prä-Proproteine 305 Prä-Pro-PTH-Gen 934, 935 (F) Präsentation – Antigene 1107 – Kohlenhydratantigene 1109 – Lipidantigene 1109 Präsequenz-Translokase 308 präsynaptisches Axonende 1034 Präzipitate, Antikörper 1119 pRb – E2F, Bindung 224 – Hyperphosphorylierung 224 – Proteinkinasen, Cyclin-abhängige 224 precursors, Hormone 760 Prednisolon 868 Pregnan-X-Rezeptor – Biotransformation 1092, 1093 (F) – Hämbiosynthese, Regulation 613 Pregnenolon 880 – Aldosteronbiosynthese 923 – Cortisol, Biosynthese 866 (F) – 11-Desoxycorticosteron, Biosynthese 923 – Leydig-Zellen 874 – Östrogene, Biosynthese 880–881 – Progesteron, Biosynthese 865 (F), 880–881 – Testosteron, Biosynthese 874, 875 (F) Prenylierungen – Membran-Anker 310–311 – Proteine 310–311 Prenylreste, Proteine, Verankerung 310–311

Prenyltransferase 569–570 – Reaktionsmechanismus 566 (F) – Squalen, Bildung 566 – – Biosynthese 566 Presenilin 318 – Mutationen, Alzheimersche Krankheit 1048 P2X-Rezeptoren 1044 – ATP 1044 Primärantikörper, Enzyme 138 Primärfollikel, Selektion 879 Primärharn 896 Primär-Immunantwort 1110 Primärstruktur, tRNA 289 primary mikro RNA (miRNA) 281–282 Primase, DNA-Replikation, Prokaryoten 232 Primer – DNA-Replikation, Prokaryoten 232 – DNA-Sequenzierung 170–171 Prionen (proteinaceous infectious particles) 89, 313, 1050 – Enzephalopathien, spongiforme 1050 Prionprotein PrPC 89 PRNP-Gen 89 Pro-δ-ALA-Synthase-1, Hämbiosynthese, Regulation 612 Pro-ACTH, Tumormarker 1159 Pro-ANP 925 proapoptotische (Apoptosefördernde) Faktoren 227 Procainamid 1094 Procarboxypeptidase 1058 Procarboxypeptidasen 133, 1058–1059 Pro-Caspasen 792–793 Proconvertin 985 Prodynorphin 1044 Proelastase 1059 Proenkephalin 1044 Proenzyme 132, 307 – Blutgerinnung 984 Proerythroblasten 953 Profaktoren, Blutgerinnung 984 professionelle APZ (antigenpräsentierende Zellen) 1113 Profibrinolysin, Funktion/Pathobiochemie 992 Profilin 211, 213, 974 Progenitorzellen, Leber 1084 Progenoten 6 Progerie 205 Progesteron 846, 879–880 – Aldosteronbiosynthese 923 – Befruchtung 883 – Biosynthese 879–881 – Cortisol, Biosynthese 865, 866 (F) – 11-Desoxycorticosteron, Biosynthese 923 – GnRH-Sekretion 878 – Gonaden 873 – Milchbildung 543

– Nebennierenrinde 865 – Nidation 883 – Östrogene, Biosynthese 880–881 – Ovar 878, 880–882 – Rezeptor 884 – Sekretionsstadium, Menstruationszyklus 883 – synthetisches 884 – Testosteron, Biosynthese 874, 875 (F) – Wirkungen, zelluläre 882–883 – Zona-fasciculata-Zellen 865 Proglucagon 823 Progressionsfaktoren, Zellzyklus 1143–1144 Prohormon 309 Prohormon-Convertasen 305, 309, 315, 320, 823, 848 – Insulinreifung 812 – TRH-Biosynthese/-Freisetzung 847 Proinsulin 309, 811 – Halbwertszeit 849 – Insulinbiosynthese 811–812, 813 (F) Prokaryoten 7 – Genexpression, Regulation 271 – Replikon 230 – Ribosomen 293 – RNA-Polymerase, Untereinheiten 258 – Transkription 257–259, 271 – – AT-reiche Regionen 258 – – Initiation 258 – – Operonmodell 271 – – Regulation 271 – Translation 271 Prokathepsin D 307 Prokollagen 718 – Golgi-Apparat 190 – Prozessierung 721 – synthetisiertes, Kompartimente, extrazelluläre 721 prolactin inhibiting factor (PIF) 888 Prolactin (PRL) 845–846, 888–889 – Brustdrüsenepithel, Entwicklung 888 – Halbwertszeit 849 – LH, Wirkung auf Leydig-Zellen 875 – Milchdrüsenzellen 543 – Überproduktion 875 Prolactinome 875, 889 – Dopaminagonisten 889 – Testosteronsynthese 875 Prolactinrezeptor 888 – Tyrosinreste 888 Proliferation – autokrine Stimulation 1144 – mTOR 525 Prolin 45 (F), 47, 72, 439, 486 – Abbau 459

– Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Aminosäurestoffwechsel 432 – Aufnahme, Insulin 820 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 459 – Hydroxylierung, Ascorbinsäure 698 – Kollagene 716 – Malabsorption 1078 – Plasmakonzentration 445 – Stoffwechsel 459–462 Prolinamid, TRH-Biosynthese/ -Freisetzung 847 Prolin-Hydroxylase 506 Prolinreiche Proteine (PRPs), Speichel 1054 Prolyl-4-Hydroxylase 698 Prolyl-cis-trans-Isomerasen 262 Prolylhydroxylase 111, 698 – Ascorbinsäure 698 Prolylhydroxylierung, Mechanismus 698 Promotoren – Funktionsanalyse, LuciferaseGen 248 – gentechnische Verfahren 248 – RNA-Polymerase I/III 267 – Transkription 257 Pro-Opiomelanocortin (POMC) 309, 863, 1038, 1044 – Proteolyse, limitierte 1045 Propansäure 34 Propeptide, N-terminale, Abspaltung, Kollagene 721 Properdin 995 – Komplementaktivierung, alternative 1131 Propionacidämie 459 Propionat (Propionsäure) 4, 34 – Ballaststoffe 651 – Gluconeogenese 374 Propionyl-CoA 441–442, 459, 478, 486, 943 – Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 467–468 – Carboxylierung 407, 943 – Fettsäureabbau 406, 407 (F) – Methionin, Abbau 463 (F) – Stoffwechsel 459 – Valin, Abbau 468 Propionyl-CoA-Carboxylase 706 – Defekt 459 – Fettsäureabbau 406–407 Prostacyclin (PGI2) 420, 422 – Endothelzellen 981 – Nierendurchblutung 896 Prostaglandin D2 420–421 Prostaglandin E2 420–422 – G-Protein, Aktivierung 780 – Knochenwachstum 742 – Mucinproduktion, Hemmung 1067 – Mucinsekretion 1064 – Nierendurchblutung 896

P

1240

Anhang

Prostaglandin E2 – Rezeptoren 422 – Synthese, Hemmung 1067 Prostaglandin F2α 420, 422 Prostaglandin H2 420 Prostaglandin-H-Synthase (PGHS) 420 Prostaglandin I2 7 Prostacyclin (PGI2) Prostaglandine 32–34, 420–425, 759 – Befruchtung 883 – biologische Effekte 420 – Biosynthese 421 – Effekte 421 – Hemmung durch Glucocorticoide 867 – Mastzellen 1080 – Mucinsekretion 1064 – PPAR-α 649 – Synthesehemmung 424 – Thrombozyten 977 Prostaglandinrezeptoren 421–422 Prostanoide 420 Prostatakarzinom – GnRH-Analoga 870 – metastasiertes, Androgenrezeptorgen, Mutationen 877 Prostata-Karzinommetastasen – Matrilysin (MMP7) 322 – RANKL 322 Prostata-spezifisches Antigen (PSA), Tumormarker 1159 prosthetische Gruppe – Apoenzym 111 – Hämoglobin 79 – Modifikation, Proteine 312 – Myoglobin 79 Protamin, Insulin 816, 817 (F) Proteasehemmer/-inhibitoren 352 – α-Granula 977 – Knorpel 738 Proteasen 645, 1104 – Aktivität, Proteoglykane 728 – Allergie Typ I 1137 – HIV 331 – Pankreas 1058 – saure, Lysosomen 977 – Signalmoleküle, Abbau 806 – Viren 339 – Zink-abhängige, extrazelluläre Matrix, Abbau 736 Proteasomen 205, 315, 321 – AAA-ATPase-Aktivität 321 – Antigene 1107 – Proteine, fehlgefaltete, Erkennung 88 – Proteolyse 88, 320, 529 – – Ubiquitin-unabhängige 322 – Transkriptionsfaktoren, Abbau 806 14-3-3-Protein, cdc25C, Bindung 224 Protein 3 962

– Erythrozytenmembran 956 Protein 4.1 – Erythrozytenmembran 956 – Fehlen 968 Protein C 986 – Aktivator 986 – aktiviertes (APC) 986 – Blutgerinnung 984 – Hepatozyten 984–985 – Mangel 990 – Stoffwechsel 986 – Vitamin-K-Abhängigkeit 695 – Vitamin-K-Antagonisten 986 Protein-codierte Gene (NAT‘s), antisense-Transkription 163 Protein Null (P0) 1046 Protein S 695, 986 – Bindungsprotein 986 – Blutgerinnung 984 – Hepatozyten 984–985 – Mangel 990 – Vitamin-K-Abhängigkeit 695 Protein Z, Vitamin-K-Abhängigkeit 695 Proteinabbau 7 Proteolyse proteinaceous infectious particles 7 Prionen Proteinase 3 1105 – Bakterienabwehr 1135 Proteinaseinhibitoren 317 – Speichel 1054 Proteinasen 315–318 – Kompartiment 316–318 – Metastasierung, Tumoren 1156 – Proteinbiosynthese 288 – Spezifität 315–316 – Tumoren 1156–1157 Proteinatpuffer 944 Proteinbedarf 431–432 – minimaler 644 Proteinbilanz, ausgeglichene 644 Proteinbiosynthese 92–93, 287–301, 313, 941 – Aminoacyl-tRNA 288 – Chloroplasten 288 – Decodierung 288 – Diphtherietoxin 301 – Einzelschritte 293–299 – Elongation, C-Terminus 287 – eukaryote, Elongation 296–298 – – Initiation 295 (F) – – Reinitiation 295 (F) – – Termination, non-senseMutationen 298 – – – RF (release factors) 298 – – – Suppression 298 – – – Suppressor-tRNA 298 – Faltung 288 – gentechnische 93 – GTP 288 – Hemmstoffe 299–300 – Hemmung 797 – Initiation 293–296

– – – – – –

– Cap-abhängige 300 Leber 1088 mitochondriale 204, 288 mTOR 524, 530 Peptidbindung 288 Peptidyltransferase-Zentrum 288 – Proteinasen 288 – Regulation 300–301 – Ribosomen 287, 293 – Sortierungssignale 288 – Start-Codon 287 – Termination, Insertion 299 – – Leserasterverschiebung (frame-shift) 299 – Transkriptionsfaktoren (TF) 288 – Translation 287 – Transportsignale 288 Proteindegradation, ER-assoziierte 322 Proteindisulfidisomerasen (PDI) 306 – Chylomikronen, Assemblierung 1072 – Proteinfaltung 88 Proteindomänen, Reorganisierung, Disulfidbrücken, Isomerisierung 306 Proteine 56–98, 285–323, 918, 941 – α-Proteine 77 – β-Proteine 77 – Abbau 7 Proteolyse – Acylierungen 310 – Affinitätschromatographie 60 – Aminosäuresequenz 57, 65, 97 – – Codierung 288 – – Edman-Abbau 65–66 – – Massenspektrometrie 67 – Argininrest, N-terminale 321 – assoziierte, Cytoskelett, sarkomeres 1008 – β-barrel- Proteine 307 – Basalmembran 732 – bifunktionelle 483 – biologische Aktivität 58 – biologische Wertigkeit 644, 651 – Blutplasma 992–993 – Calmodulin-bindende 777 – γ-Carboxyglutamylreste 312 – γ-Carboxylierung 312 – Charakterisierung 59–69 – Cofaktoren, Modifikation 312 – Cystinbrücke 306 – Cytoskelett 1008 – Denaturierung 86–89 – Dichtegradientenzentrifugation 65 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 – Disulfidbrücken 78, 306 – DNA-Sequenzdaten 68 – DNA-Sonden 60

– Domänen, funktionelle/strukturelle 76 – dreidimensionale 75 – – hydrophobe Wechselwirkungen 9 – einfache 56–57 – Eisen als Sauerstoff- oder Elektronentransporteur 659 – eisenabhängige, Translation 659 – eisenregulatorische 664 – Endozytose 319 – energetisches Äquivalent 637 – Enthalpie, Minimum, globales 87 – ERAD-System (ER-assoziierte Proteindegradation) 322 – Ernährung, künstliche 653 – Evolution 95–98 – Expression, SREBPs 570 – Fäulnisvorgang, bakteriell induzierter 1076 – β-Faltblattstruktur 73–74 – Faltung 77, 87, 301–303 – – Chaperone 302 – – Chaperonine 303 – – Defekte 313 – – endoplasmatisches Retikulum 305 – – Enzyme 108 – – Hitzeschock-Proteine 302 – – Topologie 57, 76 – Faltungshelfer 88–89 – Faltungstrichter (folding funnel) 87 – Farnesylierung 310–311, 772 – fehlgefaltete 88–89 – fibrilläre 56 – – β-Faltblattstruktur 73 – – α-Helix 73 – Flotation(skoeffizient) 65 – Funktionen, strukturgebende, Metalle 657 – Gelchromatographie 60 – Genom 160 – Genomik, funktionelle 64 – gentechnologische Verfahren 67 – Geranylgeranylreste 310–311 – globuläre 56 – – β-Faltblattstruktur 73 – glycosylierte, Exportkompetenz 305 – – Faltung 305 – Glycosylierung 312, 548–549 – – Cytosol 312 – – nicht-enzymatische 393 – GPI-Anker 43, 311–312 – Halbwertszeit (t1/2) 314, 321 – α-Helix 71–72, 305 – heptahelicale 305 – Heteropolymere 78 – histidinreiche, Speichel 1054 – Hitzedenaturierung 88 – Hochdruckflüssigkeitschromatographie 60–62

1241 Sachverzeichnis

– hochmolekulare, Ultrazentrifugation 64 – homopolymere 78 – Immunelektrophorese 63 – inhibitorische, Signaltransduktion 806 – Interkonvertierung 307 – Ionenaustauscherchromatographie 60 – isoelektrische Fokussierung (IEF) 63 – isoelektrischer Punkt 58, 62–65 – Isolierung 59–62 – Kernresonanzspektroskopie 91–92 – Klassifizierung 58 – kleine, Faltungscode 87 – Konformationsraum 87 – kontraktiler Apparat 1004–1009 – Kooperativität 78 – Lipidanker 772 – Liquor cerebrospinalis 1028 – Lysinoxidation 476 – lysosomale 201 – Makroautophagozytose 319 – Membran-Anker 310 – Methylierung 312 – Mikroautophagozytose 319 – mitochondriale, Transport 306–307 – Modifikationen, Biosynthese, cotranslationale 307 – – covalente 307–313 – Molekülmasse 62–65 – – Massenspektrometrie 67 – – SDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese 62 – – Svedberg-Koeffizient 64 – Molekularsiebchromatographie 60 – Motive 76 – Multimere 78, 767 – Myristoylierung 310, 772 – N-Degron 321 – N-end-rule 321 – N-glycosidische Modifikationen 312 – nicht-glycosylierte, Faltungsdefekte 322 – NMR-Spektroskopie 91–92 – O-glycosidische Modifikationen 312 – Palmitoylierung 772 – Pathobiochemie 89–90 – Peptidbindungen 57–58, 69–70 – – Säurehydrolyse 65–69 – PEST-Sequenzen 321 – PH-Domänen 772 – Phosphotyrosin-Motive 771 – pK-Werte 59 – Plasmamembran, Abbau 319 – Polypeptidketten 287

– Polyubiquitinierung 320 (F)–321 (F) – Prenylierung 310–311 – Primärstruktur 69–70 – prolinreiche, kleine (KPP) 749 – prosthetische Gruppen, Modifikation 312 – τ-Proteine 208 – Proteolyse 88, 314–315 – Protomere 78 – Protonierungs-Deprotonierungsgleichgewicht 58–59 – PTB-Domänen 771, 786 – Quartärstruktur 78–79 – räumliche Struktur 69–86 – Ramachandran-Diagramm 74–75 – regulatorische, Blutgerinnung 984 – rekombinante, Enzyme 112 – Renaturierung 86 – Resorption 1073 – Rezeptoren 763 – ribosomale 293 – Röntgenbeugungsmuster 91 – Röntgenkristallographie 90–91 – Röntgenstrukturanalyse 90–91 – β-Schleifen 73 – Schleifenregionen 73 – Sekundärstruktur 70–75 – selbstspleißende, autokatalytische Reifung 309 – Selenocystein 676 – separierte, Abklatsch (blot) 63 – Sequenzanalyse 67–68 – Sequenzierung, Phenylisothiocyanat 66 – Serumfraktionen 994–996 – sezernierte, Glycoproteine 548 – SH2-Domänen 771, 786 – SH3-Domänen 771 – Signalpeptid, Abspaltung 307 – Signal-Peptidase 305 – SODD-Domänen 771 – Standard-Proteomanalyse 68 – Stoffwechselbedeutung 644–646 – Struktur, Bestimmungsmethoden 90–92 – – Elemente, ähnliche 98 – – Hierarchie 77 – Struktur-Funktions-Beziehungen, Gentechnik 248 – Supersekundärstruktur 76 – S-Wert 65 – Syntheserate, endogene, biologische Wertigkeit 644 – – Leber 1088–1089 – synthetisierte, Import in die Mitochondrien 308 – Tertiärstruktur 75–86, 306 – Todes-Domänen 771 – Trägerelektrophorese 63

– transformationsaktive, Viren 344 – Transport, cotranslationaler 304 – – posttranslationaler 306–307 – Transportdefekte 313 – Tropfen, geschmolzener (molten globule) 87 – Ubiquitinierung 319–321 – Ultrazentrifugation, präparative 65 – Umkehrphasen-Hochdruck(flüssigkeits)chromatographie 61 – Urin 915 – Van-der-Waals-Wechselwirkung 78 – Verankerung, Prenylreste 311 – Verdauungsdefekte 1077–1078 – Viren 326 – Vitamin-K-Abhängigkeit 695 – Wasserstoffbrückenbindungen 9, 78 – Wechselwirkungen, elektrostatische (ionische) 77–78 – – hydrophobe 78 – zelladhäsive 730 – Zinkfingermotiv 276 – Zufuhr, tägliche 644 Proteinfaktor – induzierbarer, regulierender, Transkription 276 – Transkription, Prokaryoten 258–259 Proteinfamilien 56 Proteinfilamente, Mikrotubuli 208 Proteingerüst, Proteoglykane 727 Proteinhydrolyse, Spezifität 315 protein inhibitors of activated STATs (PIAS) 806 Proteinkinase 79, 262 – AMP-abhängige (AMP-PK) 525, 645 – – Aktivierung, Adiponectin 527 – – Fettsäurebiosynthese 415–417 – – Kohlenhydratstoffwechsel 647 – – Muskeldystrophie 1020 – cAMP-abhängige 382, 387, 390 – – β2-Adrenozeptoren 830 – – Aktivierung 528 – – Effekte 526 – – Nahrungskarenz 526 – cGMP-abhängige 382, 803, 1076 – Cyclin-abhängige (cdks) 132, 221–225, 262, 1148 – – Centrosomen 225

– – Dephosphorylierung 221, 222 (F) – – Golgi-Apparat 225 – – Inhibitoren 223 – – p53 224 – – Phosphorylierung 221, 222 (F) – – pRb 224 – – Zellzyklus 221 – Glycogensynthase, Phosphorylierung 382 – Histonacetylierung/-deacetylierung 273–274 – Modifikation, covalente 132 – Phosphorylierungsreaktionen 106 Proteinkinase A (PKA) 110, 383, 1037 – β2-Adrenozeptoren 830 – Aktivierung 381, 782–783 – – cAMP 782 – CRTR-Chloridkanal, Aktivierung 1076, 1078 – C-Untereinheiten, regulatorische (regulatory) 782 – elektromechanische Koppelung, Myokard 1014 – GH-Freisetzung 886 – Glycogenstoffwechsel, Regulation 381, 384 – Glycolyse 387 – Herzleistung, Anpassung, lastabhängige 1015 – Histonphosphorylierung/ -dephosphorylierung 274 – inaktive 381 – Insulinrezeptor 821 – Lipogenese 415 – R-Untereinheiten, regulatorische (regulatory) 782 – second messenger 774 Proteinkinase B (PKB) 382, 525–526, 787–789 – Insulin, metabolische Effekte 821 – TSC1/TSC2, Phosphorylierung 526 Proteinkinase C (PKC) 43, 693, 783, 789, 974 – Aktivierung 571 – – Diabetes mellitus 838 – atypische (aPKC) 789 – cAMP-abhängige 382 – CFTR-Protein 1076 – Familie 789 – Hemmung 571 – Insulinrezeptor 821 – konventionelle (cPKC) 789 – neue (nPKC) 789 – Stimulation, Angiotensin IIWirkungen 911 – Tumorpromotoren 789 Proteinkinase R (PKR), Virusreplikation 797 Proteinkinase-ähnliche Domäne 926

P

1242

Anhang

Proteinkomponenten, Impfstoffe 349 Proteinkonzentration – Blut, Calciumionen 932 – katalytische Aktivitäten, spezifische 116 Proteinmangel – Kachexie 645 – Malabsorptionssyndrome 645 – Maldigestionssyndrome 645 Protein-Membranlipid-Wechselwirkungen 771–772 proteinogene Aminosäuren 45–47 Proteinolyse 7 Proteolyse proteinolytisch aktivierte Rezeptoren (PARs) – Abbau 319 – Aktivierung 319 protein-only-Hypothese 1050 Proteinphosphatase – calciumabhängige 1016 – Muskelaufbau/-abbau 1016 Proteinphosphatase 2A (PP2A) – Glycolyse 647 – Lipacidogenese 647 – α-Tocopherol 693 Protein-Protein-Interaktionen – Analyse, Hefe-Zwei-HybridSystem 249 (F) – Bioinformatik 95 – Signaltransduktion 771 proteinreiche Ernährung – Glucagon 824 – Magnesiumaufnahme 940 – Stickstoffbilanz 431 Proteinstoffwechsel – Carboxylase-Holoenzym 706 – Citratzyklus 478 – Leber 1087–1088 Proteinstrukturgene 287 Protein-Synthese-Initiationsfaktor 7 eIF Protein-Synthese-Initiationsfaktor 2α (eIF2α) 797 Protein-Tyrosin-Phosphatase, Interleukin-6-Signaltransduktion 795 Proteinurie 915, 991 – nephrotisches Syndrom 915 Proteobacteria 7 Proteoglykane 28–30, 190, 312, 727–730, 737 – Aufbaudefekte 552 – Binde-/Stützgewebe 716 – biophysikalische Eigenschaften 727 – Biosynthese 111, 549–550 – core-Proteine 29–30, 727 – extrazelluläre Matrix 30 – Filtrationsbarriere in den Glomeruli 727 – Haut 751 – Knochen 738 – Knorpel 738 – leucinreiche, kleine 728–729

– membrangebundene 728–730, 733 – Polyanionen 30 – Porenfilter, Plexuskapillaren 1026 – Proteingerüst 727 – Serylgruppe 549 – Sulfat 942 – Sulfatierung 549–550 – Synthese, IGF-1 888 – Thrombozytengranula 977 – Zellen 1098 Proteolipidprotein (PLP) 1046 Proteolyse 314–315 – Aminosäuren 1073 – autophagische, Leber 1088 – Bromcyan 66 – Chymotrypsin 66 – Cytomegalievirus 323 – ERAD-System 322 – Hemmung, Hydratation 1088 – Hormone 761 – hormonelle Regulation 322 – intrazelluläre, Apoptose 226 – Kachexie 645 – Kompartimente, nichtlysosomale 319–321 – limitierte 114, 132, 307, 309, 315 – – Aktivierung 133, 307 – – Amidbildung, C-terminale 309 – – Aminosäuren, terminale, Entfernung bzw. Addition 309 – – Extein 309 – – Golgi-Apparat 319 – – Hormone, hypothalamische 843 – – Hormonreifung 309 – – Intein 309 – – Isopeptidylkopplung 309–310 – – Peptidyltransfer, intramolekularer 309 – – Proteinspleißen 309 – – Pyroglutamatreste 309 – – releasing hormone 309 – Lysosomen 318–319 – Myosin 1006 – Nahrungskarenz 521, 641 – Proteasomen 320, 322, 529 – Proteine 88 – Säuren, nicht flüchtige 943 – Skelettmuskulatur 521 – – Nahrungskarenz 529–530 – Trypsin 66 – Ubiquitin-unabhängige 322 – Virus-induzierte 323 Proteom 94 Proteomanalyse 286 – Leukämie 1160 – Standardverfahren 94 Proteomik 76–77, 94–98 Prothrombin 985

– Aktivierung, Blutgerinnung 981 – Akutphase-Proteine 1089 – Biosynthese 111 – Blutgerinnung 984 – Funktion/Pathobiochemie 992 – Gla-Domänen 984 – Vitamin-K-Abhängigkeit 695 Prothrombinase, Blutgerinnung 981 Protomere 79 – Proteine 78 Protonen 13, 492 – Abspaltung 14 – Addition 19 – Anlagerung 14 – Ausscheidung, Glutaminabbau 908 – – Nieren 908, 946 – Azidose, respiratorische 948 – Basen 14 – Extrazellulärraum, Verteilung 943–944 – Intrazellulärraum, Verteilung 943–944 – Regenerierung, Tubulus, proximaler 903 – Säuren 14 Protonen-ATPase 334 protonengekoppelter Transport 906 Protonengradienten 491 – Mitochondrienmembran 490 Protonenhaushalt – Regulation, Harnstoffsynthese 946 – – Leber 946 Protonenkonzentration 13 – Änderung 14 – Hämoglobin, Sauerstoffanlagerungskurven 82 – Hyperventilation 945–946 – Hypoventilation 946 – Konstanthaltung 942 – Magensaft 1055 – Regulation 945–946 – Urin 916 – Ventilation, erhöhte 945 Protonenpuffer, Phosphatausscheidung, renale 933 Protonenpumpe 1055–1056 – Aktivität 1056 – Aminosäuresequenz 1055 – Salzsäureproduktion 1055 – α-/β-Untereinheit 1056 Protonenpumpenhemmer 1056 – Omeprazol 1055–1056 Protonenquelle, Phosphat 943 Protonensekretion, Niere 907 Protonentransport – Atmungskette 494–500 – Mitochondrien 499 – Niere 906–909 – Ubichinon-Zyklus 499 Protonentransportproteine, Influenzaviren 334

Protonenübertragung 14 Protonierungs-Deprotonierungsgleichgewicht, Proteine 58–59 Protoonkogene 1143 – Glycogensynthasekinase-3 382 – Mutationen 1144–1145 – Viren 344 – Wachstumssignale, Transduktion 1143 Protoporphyrie (PP) 616 – Photosensibilität 618 Protoporphyrin – Eisenabbau 611 – Hämvorstufe 608 Protoporphyrin IX – Akkumulation 618 – Hämbiosynthese 610 (F), 611 Protoporphyrinogen IX, Hämbiosynthese 610 (F), 611 Protoporphyrinogen-Oxidase, Hämbiosynthese 610–611 Provirus 336 Provitamin A 683 Provitamin D3 688 (F) Prozessierung, Antigene 1107 Prozessierungspeptidase, mitochondriale (MPP) 308 Prozessivität, DNA-Polymerasen 231 PrPC (Prion Protein cellular) 1050 PRPP (α5-Phosphoribosyl-1pyrophosphat), Purinbiosynthese 587 (F), 632 PRPP-Amidotransferase, IMP-Biosynthese, Regulation 593 PRPP-Synthetase, Defekt, Hyperurikämie 603 PrPSC (Prion Protein Scrapie) 1050 PSA (Prostata-spezifisches Antigen), Tumormarker 1159 P-Selektine 199 – Leukozyten 972 – Lymphozyten, Zirkulation 1129 Pseudocholinesterase, Funktion/ Pathobiochemie 992 Pseudohypoparathyreoidismus 939 Pseudoperoxidase-Aktivität, Hämoglobin 667 Pseudopodien, Granulozyten 973 Pseudouridin 143 (F) PSGL-1 (P-Selektin-Glycoproteinligand 1) 199 PTA (plasma thromboplastin antecedent) 985 PTA-Mangel 985 PTB-Domänen (phosphotyrosine binding domains), Proteine 771, 786 Pteridinkern, Folsäure 707 PTHR (PTH-Rezeptor) 689

1243 Sachverzeichnis

– 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 PTHrP (parathormon-relatedpeptide) 740–741, 936 – Chondrozytenproliferation/ -reifung 740–741 – Knochenwachstum 742 – rheumatische Erkrankungen 746 – Tumorerkrankungen 938 – – maligne 936 – Wirkungen 936 PTHrP-Gen, knockout 936 PTS (peroxisomale Transportsignale) 307 Ptyalin 1059 – Speichel 1054 P2X-Typ, Ionenkanäle, ATP-gesteuerte 1037 Pubertät, IGF-1 888 pUC18 242 PUFA (polyunsaturated fatty acids) 419 Pufferkapazität 17, 944 – Blut 944–945 Puffer(systeme) 492, 942, 944–945 – Dihydrogenphosphat/Hydrogenphosphat-Puffersystem 17 – Hämoglobinprotein 964 – Kohlendioxid/Hydrogencarbonat-Puffersystem 17 – Phosphat 932 – pH-Wert 16 – pK-Wert 17 – Transferrin 661 – Urin 908 Pufferung 16 – Intrazellulärraum 944 Pulsgenerator – GnRH-Netzwerk 870 – releasing hormone 843 PUMP-1 737 Pumpen, Membrantransport 179 Punktmutationen 1144 – Hämophilie A 989 Purinbasen 518 – salvage pathway 597 Purinbiosynthese 587 – Energieverbrauch 589 – Hemmstoffe 595 (F), 596 – Regulation 593–594 Purinderivate, Nucleotide 142 Purin(e) 585–605 – Kohlenstoffatome 586 – Nucleosidtransporter 598 – Stickstoffatome 586 – Wiederverwertung 597–598 Purinnucleoside 144 Purinnucleosid-Phosphorylase 126 Purinnucleotide – Abbau 599–601 – Biosynthese 111, 586–590, 593, 595

– – Regulation 593–595 Purinnucleotidzyklus 434, 597–598 – Adenylosuccinat-Synthetase 597 – anaplerotische Reaktion 597 Purinrezeptoren 1035 Purinstoffwechel, Pathobiochemie 602–604 Puromycin 299, 300 (F) Putamen 1042 – Parkinson-Krankheit 1049 Putrescin 438, 460, 462, 1076 – Arginin, Umwandlungsreaktionen 461 – Polyamine, Biosynthese 462 PXR, Biotransformation 1092, 1093 (F) Pyknodysostose 200 – Kathepsin-K-Mangel 323 Pyridin-3-Carboxylsäure 700–703 Pyridinolin-Derivate, Urin 915 Pyridoxalphosphat (PALP) 111, 433, 437, 681, 703 (F), 703, 704 – aktives Zentrum 434 – δ-Aminolävulinat, Synthese 609 (F) – Aminosäurestoffwechsel 433, 703 – Anämie, sideroblastische 614 – chinoide Form 433, 434 (F) – Decarboxylierung 703 – Eliminierung 703 – Glycogenabbau 370 – Schiffsche Base 703 – Transaminierung 435 (F), 703 Pyridoxalphosphat-abhängige Reaktionen 703–704 Pyridoxamin 703 (F) Pyridoxaminphosphat (PAMP) 434 (F)–435 (F) – Cerebrosid/Sulfatid, Biosynthese 561 Pyridoxin (7a. Vitamin B6) 681–682, 703 (F), 704 – biochemische Tests 682 – Coenzym 111 – Magnesiumresorption 940 – Mangel 472, 703 – – Hämobiosynthese 608 – – Tryptophanabbau 473 – Speicherung in der Leber 1089 – Tuberkulose 703 – Zufuhr, tägliche 681 Pyridoxol 703 (F) Pyrimidinbasen 518 Pyrimidinbiosynthese – CAD-Protein 594 – Dihydroorotat-Dehydrogenase 594 – Enzyme 590 – Hemmstoffe 595 (F), 596 – Regulation 594 Pyrimidinderivat, Nucleotide 142

Pyrimidin(e) 585–605 – Nucleosidtransporter 598 – Wiederverwertung 597–598 – – als Nucleoside 598 Pyrimidinnucleotide – Abbau 601 – Biosynthese 590–591, 593, 595, 5910 – – Regulation 593–595 Pyrimidinring, Thiamin 699 Pyrimidinstoffwechsel, Pathobiochemie 604–605 Pyrin, Granulozyten, neutrophile 975 Pyringen, Mutationen 975 Pyroglutamatreste, Proteolyse, limitierte 309 Pyroglutamin, TRH-Biosynthese/ -Freisetzung 847 Pyroglutamylaminopeptidase II, TRH-Abbau 848 Pyrophosphat 932 – Analogon, Foscarnet 352 – Enthalpie, freie 105 – Fettsäureabbau 404 – Squalen, Bildung 566 Pyrophosphatasen 104, 404, 932 – Sulfat, Aktivierung 941 5-Pyrophosphomevalonat, Isopren, aktives, Biosynthese 565 Pyrophosphomevalonat-Decarboxylase, Isopren, aktives, Biosynthese 565 Pyrrolidincarboxylat 7 L-Prolin Δ1-Pyrrolincarboxylat 459 – Stoffwechsel 460 (F) Pyrrolizidinalkaloide, Cancerogenese 1157 Pyrrolringe, Häm 79 Pyruvat 5, 373 (F), 374, 440–443, 456 (F), 458, 465, 478, 480 (F)–481 (F), 486 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Aminosäurestoffwechsel, Muskulatur 453 – arterivenöse Differenz 1024 – Blutkonzentration 1024 – Carboxylierung 943 – – biotinabhängige 373 – Cysteinabbau 465 (F) – Decarboxylierung, dehydrierende 416, 479, 481 (F), 521 – Desaminierung 436 (F) – Dissoziationskonstante 15 – Familie 443 – Fettsäurebiosynthese 413 – Glucose-Fettsäurezyklus 522 – Glycolyse 360 (F) – Harnstoffzyklus 448 – pKS-Wert 15 – Reduktion, Glycolyse 362 – Standardpotential 103 – Transaminierung 364, 534 Pyruvatcarboxylase 373, 387, 487, 706

– Biotinabhängigkeit 487 – Fettsäurebiosynthese 413 – Gluconeogenese 372, 387–388 – Glyceroneogenese 391 – Glycolyse 389 – Harnstoffzyklus 448 – Hemmung durch Insulin 820 – Insulinbiosynthese 819 – Leber 391 – Mangan 673 – Nebenniere 391 – Nieren 391 – Reaktion 706 – Warmblüter 706 Pyruvat-Carrier 374, 493–494 Pyruvatdecarboxylase 481 – Glycolyse 363, 389 Pyruvatdehydrogenase (PDH) 111, 485, 490, 522 – Acetyl-CoA 522 – Aktivierung/Hemmung 485 – Citratzyklus 480 – dephosphorylierte 416 – E1-/E2-/E3-Komponente 479, 482 – E3BP-Komponente 479, 482 – Enzyme, interconvertierbare 482 – Fettsäurebiosynthese 413–414, 416–417, 519 – Gluconeogenese 391–392 – Glucose-Fettsäurezyklus 522 – Hemmung, Acetyl-CoA 484–485 – – NADH 484–485 – inaktive 416 – Interconvertierung 482 – Lipogenese 517 – metabolische Regulation 416 – Molekulargewicht 482 – Phosphorylierung/Dephosphorylierung 132 – Untereinheit X 522 Pyruvatdehydrogenase-Komplex (PDH-Komplex) 110, 479, 481 (F) – Glycolyse 363 – Insulin 818 – Kinase 482 – Phosphatase 482 Pyruvatdehydrogenase-Phosphatase 485 – Akivierung, Calcium 485 Pyruvatkinase – cAMP, Erhöhung 387 – Citratzyklus 391 – Defekt 395 – Fettsäurebiosynthese 413 – Gluconeogenese 372, 391 – Glycolyse 360, 363–364, 387, 390 – Insulin 820 – Insulinbiosynthese 819 – Leber 391

P

1244

Anhang

Pyruvatkinase – Mangel, Anämie, hämolytische 395 – Umgehung, Gluconeogenese 372

Q ΔQ 101 Q10, Enzyme 127 q-Arme, Chromosomen 155 QT-Syndrom 1018, 1021 Quarantäne, Virusinfektion 348 Quartärstruktur – Enzyme 110 – Ionenkanäle, Neurotransmitter-gesteuerte 1037 – Proteine 78–79 Quecksilber 677 Querbrücken, Myosin 1006 Querbrückenzyklus – In-vitro-Motilitäts-Assay 1011 – Muskelkontraktion 1009–1011 quergestreifte Muskulatur 1002–1003 Querschnittslähmung 1051 Querstreifung, Kollagene 719–720 Quervernetzungs-Domänen, Elastin 724–725 Quervernetzungsreaktionen, Kollagene 719–720 Quinacrin 155 Q-Zyklus 499

R RAAS 7 Renin-Angiotensin-Aldosteron-System Rab3 1035 Rab5, Plasmamembran 195 Rab27A-Defekte, Immundefizienz 206 Rabeprazol 1056 Rab-Proteine 192, 194, 311, 774 Rac-2 974 RAC (ribosome associated complex) 302 Racemasen 433 – Fettsäureabbau 406 Rachitis 688, 690 Rac-Proteine, Aktin-Cytoskelett, Aufbau und Umbau 212 Radikale, reaktionsfähige 509 radioimmunoassay (RIA) 761 (F)–762 (F) radioimmunologische Bestimmung 7 RIA Raf-1 773 raf-mil-Onkogen 1143 rafts 43, 177, 197 (F), 310 RAGE (receptors for AGE) 394

ragged red fibers, Enzephalomyopathien, mitochondriale 512 RAIDD (RIP-associated ICH-1/ CED-3 homologous protein with a death domain) 792–793 Ramachandran-Diagramm 74–75 Ran-abhängige Karyopherine 269 Ran-Familie, G-Proteine 189, 774 Ran-G-Proteine, Mikrotubuli 209 RANK (receptor for activation of nuclear faktor kappa B) 743 – Paget-Krankheit 746 RANKL (Ligand für RANK) – Osteoblasten 743 – Osteoklastogenese 743 – Prostata-Karzinommetastasen 322 RANTES (regulates on activation, normal T-cell-expressed and secreted) 759 – Entzündungen 791 Ranvierscher Schnürring 1030, 1046 Rapamycin (Sirolimus) 524 (F), 525 – Transplantatabstoßung 1139 RAR (all-trans-Retinsäurerezeptor) 687 RAS 7 Renin-Angiotensin-System Ras 77, 773–774, 1016, 1114, 1143–1144, 1154 – Aktivierung, Integrine 736 – Inaktivierung 1144 – Insulinsignal, Weiterleitung 822 Ras-aktivierte Raf-Kinase, Muskelaufbau/-abbau 1016 ras-Allelverluste, colorektale Tumoren 1153 Ras-Familie, G-Proteine 773 Ras/Fos-Weg, T-Lymphozyten 1114 ras-Onkogene 310, 1143 – colorektale Tumoren 1153 – – sporadische 1152–1153 Ras/Raf/MAPK-Weg, Rezeptortyrosinkinase 786 Ras-Superfamilie, G-Proteine 192 Rasterelektronenmikroskopie 174 raues endoplasmatisches Retikulum (RER) 190 – Kollagenbiosynthese 718 – Signalpeptidasen 319 Rb105 1147 – Inaktivierung durch Papillomvirus-Genprodukte 1149 – Papillomviren 345 – Viren, Tumor-erzeugende 344 Rb107, Viren, Tumor-erzeugende 344 Rb-E2F-DP1-Komplex 1148 RBF (renaler Blutfluss) 895 Rb-Gen 1145, 1147 – E2F, Inaktivierung 1147

RBP (Retinol-Bindeprotein) 684 – Retinoblastom 224 reactive oxygen species 7 ROS Reaktionsenthalpie 101 Reaktionsgeschwindigkeit – Enzyme 115 – Enzym-Substrat-Komplex 121 Reaktionskaskaden, intrazelluläre 767 Reaktionsprodukte, Transfer (substrate channeling), Enzyme 110 Reaktionsspezifität, Enzyme 108 reaktive Gruppen, Biotransformation 1090 Realimentation, Grundumsatz/ Körpergewicht 635 rearrangement (Genumlagerung) 1105 – Antikörpervielfalt 1121 – Immunglobuline, L-Ketten 1122 Reassortments (phenotypic mixing), Influenza-A-Virus 340 (F)–341 (F) receptor crosstalk 786 receptor-shedding, Membranrezeptoren 805 Rechtsverlagerung, Sauerstoffanlagerungskurve 960 recycling – Rezeptoren 806 – Transport, vesikulärer 194 recycling Endosome 191, 195, 201 red blood cell count (RBC) 978 red cell distribution width (RDW) 978 Redox-Katalysator, Selen 676 Redoxpaar – konjugiertes 103 – korrespondierendes 103 – Standard-Redoxpotential 103 Redoxpotential 103 Redoxreaktionen 103 – Eisen 658 Redoxsysteme – Ascorbinsäure 697 – biologische, Standardpotentiale 103 Redox-Wippe 499 Redoxzustand, intramitochondrialer, Ammoniakvergiftung 454 5α-Reduktase 873 – Mangel 877 Reduktionsäquivalent – Transport 493, 495 (F) – Wasserstoff 491 Reduktions-Oxidations-Reaktionen 103 reduktive Umwandlungen, Biotransformation 1091 Redundanz, Cytokine 778, 794 Refluxösophagitis, Salzsäure 1055

Regeneration – Muskelzelle 1015–1017 – Myokard 1015 – Nerven, periphere 1047 Reglucosylierung, Proteine, Faltungsdefizite 306 regulated on activation, normal T-cell expressed and secreted 7 RANTES Regulation, allosterische, Glycogenstoffwechsel 384 (F) Regulatorgene, HIV 336 regulatorische T-Zellen 1111–1112 regulatorischer Weg, Transport, vesikulärer 191 regulators of G-protein signaling (RGS) 806 REH (Retinylesterase) 683–684 Reinitiation, Proteinbiosynthese, eukaryote 295 (F) Reise-Diarrhöe 802 Reißfestigkeit, Dermis 749 Reizübertragung, photosensible Zellen 686 Rekombination – homologe, Chromosomen 157 – – DNA-Schäden 240 (F)–241 (F) – – Genausschaltung 250–251 Rekrutierung, Granulozyten 972 Relaxin 811 – Ovarien 884 Relaxin-ähnlicher Faktor, LeydigZellen 876 releasing-hormone (RH, Liberine) 843–844 – Proteolyse, limitierte 309 rel-Onkogen 1143 Remethylierung, Homocystein 464, 710 renaler Blutfluss (RBF) 895 Renaturierung – DNA 166 (F) – Proteine 86 – Ribonuclease 86 Renin 315, 910, 1059 – Herzinsuffizienz 927 – Magensaft 1054, 1057 – Nierenarteriendruck 899 – Nierenarterienstenose 927 – Sekretion, juxtaglomeruläre Epitheloidzellen 912 (F) – Überproduktion/-sekretion 911 Renin-Angiotensin-AldosteronSystem (RAAS), Natriumhaushalt 922 Renin-Angiotensin-System (RAS) 899, 910 – Aktivität, Rückkopplung 911 Reningenexpression – Calcium 911 – cAMP 911 Reoviridae 329

1245 Sachverzeichnis

replica shadowing 174 Replikation – DNA 158, 228–236 – Mechanismus, konservativer 335 – Viren 330–342 Replikationsenzyme, virale, Fehlerquote 339 Replikationsgabel, DNA-Replikation 229 Replikon 229–230 – DNA-Replikation 229–230 Replisom, DNA-Replikation 230, 234 Reportergene, gentechnische Verfahren 248 Repression – Enzyme 129 – Schilddrüsenhormone 858 Repressorprotein, Transkription, Prokaryoten 271 Reproduktion, Vitamin A 687 Reserpin 1035, 1038 Resistenz, Cytostatika 1160 Resistenzgene, Klonierung, Kontrolle 242 Resonanzspektroskopie, kernmagnetische 7 Kernresonanzspektroskopie Resonanzstrukturen 70 Resorption – Arzneimittel 10 – Elektrolyte 1074–1076 – intestinale, Calcium 931 – – Magnesium 940 – – Phosphat 932 – Kohlenhydrate 1069–1070 – Leber 1084, 1086 – Lipide 1070–1072 – Oligopeptide 1073 – Sterole 1071 – Wasser 1074–1076 Resorptions-Gestations-Test, Vitamin E 693 respiratorische Insuffizienz/ Störungen – akute 800 – CO2-Abatmung 947 – primäre, pCO2 949 respiratorischer Quotient 637, 964, 1024 – Nährstoffe 637 – Sauerstoff 637 respiratory burst 974 – Bakterienabwehr 1135 respiratory distress syndrome (RDS) 800 Respirovirus 328 Restriktionsendonucleasen 169 Restriktionsenzyme – Bakteriophagen 244 – Schnittstellen 169 – Symmetrieachsen 169 Restriktionskarte, Simian Virus 40 (SV40) 169

Retentionssignale – Glycoproteine 548 – Transport, vesikulärer 195 Reticulum, endoplasmatisches 7 endoplasmatisches Reticulum Retikulozyten 954 Retina – Na+-Kanal 765 – Stäbchen/Zapfen 685–686 – Zinkkonzentration 672 Retinablutungen, Diabetes mellitus 837 Retinadegeneration, Enzephalomyopathie, mitochondriale 512 Retinal 681, 684 – Stereoisomerisierung, photoinduzierte 686 Retinaloxidase 683 Retinitis pigmentosa, Vitamin-EMangel 694 Retinoat 681 Retinoatrezeptoren 649 Retinoblastom (RB) 1145, 1147 – Rb-Protein 224 Retinoblastom-Proteine – Papillomviren 345 – Viren, Tumor-erzeugende 344 retinoic acid receptor (RAR) 687 Retinoide 683–688 – Homeobox-Gene 687 – Speicherung in der Leber 1089 Retinol (7 Vitamin A) 32, 38, 684–688 – Genexpression, Regulation 687 – Hypervitaminosen 682, 688 – Hypovitaminosen 688 – Isopreneinheiten 683 – Mangel, Nachtblindheit 686 – Reproduktion 687 – Resorption 684 – Speicherung, Ito-/Stern-Zellen 684 – Zufuhr, tägliche 681 Retinol-Bindeprotein (RBP) 684 – Retinoidfunktion 687 Retinoldehydrogenase 683 – Zink 672 Retinopathie, Diabetes mellitus 837 Retinsäure 763 – Funktion 684 – Implantation 687 – Rezeptoren 763 – – nukleäre 687 Retinsäurerezeptor 690 Retinsäure-X-Rezeptor (RXR) 858 – Isoformen 687 Retinylester 683–684 Retinylesterase (REH) 683–684 – Vitamin A, Resorption 684 retrieval-Signale 195 Retrotranslokation 322 Retroviren 158, 329

– α-, β-, γ- bzw. δ-Retrovirus 329 – reverse Transkriptase 335 – Sarkome 344 Reutilisierung 7 salvage pathway REV, HIV 336 Reveresterungszyklus, Fettsäuren 518 reverse Transkriptase 245, 335–336 – cDNA, Herstellung 245 (F) – Hepadnaviren 335–336 – HIV 331–332, 336 – Retroviren 335 – Telomerase 235 – Viren 338 reversed phase high pressure liquid chromatography (RP-HPLC) 61 reversed phase liquid chromatography (RPLC) 52 Rezeptoren 1036 – α1-Rezeptoren, Nierendurchblutung 896 – α2-Rezeptoren 528 – β1-Rezeptoren 770 – β2-Rezeptoren, adrenerge, G-Protein-gekoppelte 195 – β3-Rezeptoren 504 – – cyclo-AMP 504 – δ-Rezeptoren, Enkephaline 1044 – κ-Rezeptoren, Dynorphin 1044 – Adenylatcyclase-System 780–783 – Aktivierung 770 – – PDGF-induzierte 788 – ANP 926 – mit assoziierten Kinasen, Signaltransduktion 791–798 – bidirektionale, Integrine 733 – Cytokine 763–765, 805 – – Bindung 770 – Cytokin-Familien 794 – cytosolische, Aldosteron 923 – down-Regulation, Defekte 205 – G-Protein-gekoppelte 767, 769–770 – heptahelicale, Parathormon 936 – Herzleistung, Anpassung 1015 – Hormone 763–765 – Internalisierung, Endozytose 806 – Ionenkanäle, Liganden-regulierte 765–767 – ionotrope 1036 – Kinasen 768 – Liganden, Affinität 763 – – Erkennung 770 – Ligandenbindung, Sättigung 763 – lösliche 778 – – Biosynthese 805

P–R

– – Cytokin-Inhibitoren 778 – membranständige 7 Membranrezeptoren – metabotrope 1036 – nicht-steroidale, Hetero-/ Homodimere 687 – nucleäre 763–765 – – direct/inverted repeats 763 – – Domänenaufbau 687 – – Ligandenbeladene 687 – – Signaltransduktion 763–764 – pentamere 1036 – Phospholipase Cβ 783 – Phosphorylierung 806 – postsynaptische 1037 – Prostaglandine 422 – Proteine 763 – recycling 806 – Serin-Phosphorylierung 771 – Signaltransduktion 757, 763, 804–805 – TGF-β 767 – Tyrosinkinasen, assoziierte 768–770 – vascular endothelial growth factor (VEGFR) 785 Rezeptorexpression – Messung 804 – Scatchard-plots 804 Rezeptorkinasen 770 Rezeptorproteine, spezifische 763 Rezeptor-Serin/Threoninkinasen 767–768, 778, 790 – Signaltransduktion 759, 790 Rezeptor-Tyrosinkinasen 767–768, 771, 778, 783, 785–789 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – Insulinrezeptor 785, 820–821 – JAK/STAT-Signalweg 789 – Muskelaufbau/-abbau 1016 – Phosphatidylinositid-3-Kinase (PI3K)-Weg 786 – Phospolipase Cγ (PLCγ)-Weg 786 – Ras/Raf/MAPK-Weg 786 – Signaltransduktion 759, 785–789 – – PDGF-Rezeptoren 786 – Tyrosinkinase-Domäne 785 – Wachstumsfaktoren, Rezeptoren 225 Rezeptor-vermittelte Endozytose, Viruspartikelaufnahme 333 Rezeptorxpression, FACS-(fluorescence activated cell sorting)Analyse 804 Rezeptor-zerstörende Eigenschaften, Viren 340 Rezirkulation, Lymphozyten 1129 RF (release factors), Proteinbiosynthese, eukaryote, Termination 298

1246

Anhang

RFC (eukaryotic replication factor C), Führungsstrang, DNA-Replikation 234 RGD-Domäne/-Sequenz – Fibrinogenrezeptor, Blutstillung, zelluläre 980 – Integrine 733 Rhabdoviridae 328 Rheb 525 Rhesusantigene, Codierung 967 Rhesus-CcEe-Gen 967 Rhesus-D-Gen 967 Rhesussystem – Antigene, Codierung 967 – Bluttransfusion 965 rheumatische Erkrankungen 1138 – Gelenkknorpel, Zerstörung 746 Rhinovirus 328 Rhodopsin 684, 685 (F) – aktives 686 – G-Protein, Aktivierung 780 – Regenerierungsstörung, Nachtblindheit 688 – Stäbchen/Zapfen 685 Rho(-Familie) 1016 – Aktin-Cytoskelett, Aufbau und Umbau 212 – G-Proteine 735, 773 – RhoA 784–785 – Transkription, Prokaryoten 258–259 Rho-Kinase, Aktivierung 780 Rho/Rac/Cdc42-Proteine 774 RIA 7 radioimmunoassay Ribavirin 352, 595 (F) Riboflavin (7 Vitamin B2) 681–682, 700 – biochemische Tests 682 – Coenzym 111 – Flavoproteine, Wasserstoff übertragene 700 – Mangel 700 – Speicherung in der Leber 1089 – Stoffwechsel 700 – Zufuhr, tägliche 681 Riboflavin-5‘-Phosphat 700 Ribonuclease 1059 – Denaturierung 86 – mRNA, Abbau 270 – Pankreas 1060 – Renaturierung 86 Ribonuclease P 114 Ribonuclease-P-RNA 163–164 Ribonucleinsäure 7 RNA Ribonucleotide 143, 205, 586 – DNA-Replikation 231 – tRNA 289 Ribonucleotid-Reductase 591 – Eisen 659 – Hemmstoffe 596 – SH-Gruppe 592 – Thiolgruppen 591 – Tyrosylradikal 591, 592 (F)

Ribose 143 (F) – 2-Desoxy-D-Ribose 143 Ribose-1-phosphat, Purinabbau 599 Ribose-5-phosphat 586 – Hexosemonophosphat-Weg 366 (F)–367 (F) ribosomale Proteine 293 ribosomale RNA 7 rRNA ribosomale Untereinheiten, Polysomen 205 Ribosomen 176 (F), 293 – A-(Aminoacyl-)Stellen 293, 294 (F) – Biogenese, mTOR 525 – E-(Exit-)Stellen 293, 294 (F) – Eukaryoten 293 – half-sites 293, 294 (F) – Mitochondrien 204 – P-(Peptidyl-)Stellen 293, 294 (F) – Prokaryoten 293 – Proteinbiosynthese 287, 293 – Ribozyme 114 – Zerfall 298 Ribozyme 114, 293 – Biokatalysatoren 114 – Ribosom 114 – RNase P 268 – Spleißen 265 – Spleißosomen 114 Ribulose-5-phosphat 365, 366 (F)–367 (F) Ribulose-5-phosphat-Epimerase 366–367 Ribulose-5-phosphat-Ketoisomerase 366–367 Riesenzelltumoren, ossäre, Osteolyse 322 Rieske-Eisen-Schwefel-Zentrum, Ubihydrochinon 499 Rifampicin, Transkription, Hemmung 269 Rimantadin 352 Rinderwahnsinn 1050 RIP (receptor interacting protein), TNFα-Signaltransduktion 792 RISC-Komplex 250, 281 Ritonavir, HIV-Protease-Hemmung 134–135 RNA 143, 146 (F), 162–164 – Basenzusammensetzung 147 – codierte 162 – heteronucleäre 7 hnRNA – Hybridisierung 167 – Klassifizierung 163 – Lokalisierung 272 – nichtcodierte 162 – – mit regulatorischen Funktionen 164 – regulatorische Funktionen 256 – ribosomale 7 rRNA – signal recognition particel (SRP) 162 – small nuclear 7 snRNA

– Synthese, codierender Strang 256 – – Matrizenstrang 256–257 – – Minusstrang 256 – – Nichtmatrizenstrang 257 – – Transkriptionsauge 257 – Transport 272 RNA-Biosynthese 145, 258 – RNA-Polymerasen 258 (F) RNA-editing 272 – Apo B48, Entstehung 280 – Apo B100, Entstehung 280 – Viren 335 RNA-Genom, Virusproteine 335 RNA-induced silencing complex (RISC) 250 RNA-Interferenz (RNAi) 250 – Genausschaltung 250 – mRNA-Abbau 281, 282 (F) RNA-Molekül – doppelsträngiges (dsRNA) 250 – 5‘-Triphosphatende 258 RNA-Polymerase I 259 – Kontrollelement 267 – Nucleolus 188 – Promotoren 267 – Transkription 267–268 RNA-Polymerase II 259, 336, 793 – Initiationskomplex, Aufbau 261 – – eukaryoter, Bildung 260–262 – Pri-miRNA-Transkripte 281 – Promotorregionen, Strukturmerkmale 260 – zelluläre 336 RNA-Polymerase III 260 – Promotoren 267 – Transkription 267–268 RNA-Polymerasen – CREB 783 – DNA-abhängige, Transkription 256 – eukaryote 259 – – Initiationskomplex 260 – – Transkriptionsfaktoren 260 – Hemmung, Amanitin 260 – prokaryote 260 – – Untereinheiten 258 – RNA-abhängige, Viren 335, 338 – RNA-Biosynthese 258 (F) – Transkription 257 – Viren 335 RNA-Primer, DNA-Replikation 234 RNase 3, Aktivität, Dicer 281 RNase D 268 RNase L 798 RNase P 268 RNasen 167 – Defekte 200 – mRNA, Abbau 270 RNA-Triphosphatase, Transkription, Elongation 263

RNA-Viren – RNA-Genom 335 – Tumor-erzeugende 344 Röhrenknochen, Ossifikation, enchondrale 739 Röntgenbeugungsdiagramm, Myoglobin 80 Röntgenkristallographie, Proteine 90–91 ROS (reactive oxygen species) 800, 1105 – Abbau 509–511 – Alterung 203 – elektromechanische Kopplung 1012 – Gluthation 466 – mitochondriale Membran, oxidativer Stoffwechsel 204 – OXPHOS-Erkrankungen 512 Rotavirus 329 Rotenon 207, 497 Rot-Grün-Blindheit 685 Rotor-Syndrom 626 Rous-Sarkom-Viren 344 RP-HPLC (reversed phase high pressure liquid chromatography) 61 RPLC (reversed phase liquid chromatography) 52 rRNA (ribosomale RNA) 97, 162–163, 256, 293 – Analysen, Stammbaum 7 – mitochondriale 293 – Nucleolus 188 – Transkripte, Prozessierung 267 rRNA-Präkursor, Nucleolus 188 R-Smad-Proteine (receptoractivated Smads) 790 – BMP-Signaltransduktion 790 rT3 855 (F), 856 RT-PCR (reverse Transkriptase-PCR) 247 Rubellavirus 328 Rubivirus 328 Rückkopplung – Hemmung, Kommunikation 758 – Hormone 845 – Renin-Angiotensin-System (RAS) 911 – Signaltransduktion 805–807 ruffles, Aktin 213 Ruheenergieumsatz 635 – Abhängigkeit vom Alter 635 Ruhepotential, Neurone 1030 Ruhestoffwechsel, Muskelzelle 531 Ruheumsatz, Na+/K+-ATPase 632 R-Untereinheiten, regulatorische (regulatory), Proteinkinase A 782 Runx-2 (runt related transcription factor-2) – Chondrozyten, Differenzierung 740

1247 Sachverzeichnis

– Knochenwachstum 742 RXR (9-cis-Retinsäure-X-Rezeptor) 687 – Isoformen 687 – Lipidstoffwechsel 649 Ryanodinrezeptor 765, 774 – cyclo-ADP-Ribose 702 – elektromechanische Koppelung 1012 – – Myokard 1014 – Funktionsvarianten, Hyperthermie, maligne 1019 R-Zustand, Hämoglobin 84

S ΔS 101 S1/S2 (Subfragment 1/2), Myosin 1006 S1P-/S2P-Protease 570 Saccharase 1059 – Darmsaft 1062 – Kohlenhydrate, Resorption 1069 Saccharide 7 Kohlenhydrate Saccharidsynthese, Glycolyse 359 Saccharomyces cerevisiae 492 Saccharopin, Lysinabbau 476 Saccharopin-Dehydrogenase, Lysinabbau 475 Saccharopin-Weg, Lysinabbau 475 Saccharose 26 (F), 364, 646 S-Acetylhydrolipoat 479 S-Acetylhydrolipoylenzym 481 (F) S-Adenosylhomocystein (SAH) 532 – Melatonin, Abbau/Biosynthese 1043 – Methionin, Abbau 463 (F) – Transmethylierung 464 S-Adenosylmethionin (SAM, AdoMet) 111, 308, 438, 462, 557 – Arginin, Umwandlungsreaktionen 461 – decarboxyliertes, Polyamine, Biosynthese 462 – Melatonin, Abbau/Biosynthese 1043 – Methionin, Abbau 463 (F) – Stoffwechselbedeutung 462 – Transmethylierung 463 – Verbindungen 463 Sättigung, Hypothalamus, lateraler 643 Sättigungsfaktor, GLP-1 824 Sättigungsgefühl – Cholecystokinin 1066 – Nahrungsaufnahme 1066 Sättigungskinetik – Endozytose 195

– Enzymreaktion 123 Säugetiermitochondrien, Cytochrom-c-Oxidase 500 Säugling – Blutglucosekonzentration 1025 – Hyperbilirubinämie, persistierende 1027 Säureamide – Bindungen 10, 57 – hydrolytische Spaltung 10 (F) Säureanhydrid 1056 Säureanionen, Transport, Tubulusepithelien 906 Säure-Basen-Ausscheidung – Leber 947 – Niere 947 Säure-Basen-Eigenschaften, Aminosäuren 48–52 Säure-Basen-Haushalt 942–949 – Aminosäuren 430 – Elimination 945 – Nieren 452 – Pathobiochemie 946–949 – Störungen, nichtrespiratorische 948 – – respiratorische 948 Säure-Basen-Katalyse 58, 117–118 – Histidin 117, 118 (F) – Lactatdehydrogenase (LDH) 118 Säure-Basen-Transport – Niere 906 – Tubulusepithelien 906 Säurechlorid, Bildung, Peptidbindung 92 Säurehydrolyse 65 Säurekatalyse 19–20 Säurekonstante 15 Säuren 14–15 – Elektronenakzeptoren 18 – Entstehung, Stoffwechsel 942–943 – Katalysatoren 19 – nichtflüchtige, Aminosäuren, Abbau 942 – – Proteinabbau 943 – organische 942 – pKS-Werte 15 – Protonen 14 – Pufferwirkungen 16 – schwache, Titrationskurve 17 – Stärke 14 – titrierbare, pH-Wert, Urin 914 SAICAR (5-Aminoimidazol-4-Nsuccinylcarboxamidribonucleotid) 587 (F), 588 – Purinbiosynthese 587 (F), 588 SAICAR-Synthetase, IMP-Biosynthese 589 Salla-Krankheit 200 salvage pathway, Purinbasen 597 Salzappetit, Natriumhaushalt 922

Salze, Proteindenaturierung 88 Salzreabsorption, Niere 895 Salzsäure(sekretion) – Belegzellen, Magen 1054, 1064 – Hemmstoff, Somatostatin 1064 – intrinsic factor 1056 – Magen-/Zwölffingerdarmgeschwür 1055 – Magensaft 1054 – Parietalzellen 1055 – Reflux-Ösophagitis 1055 – Regulation 1063–1064 – Steigerung 1067 Salzverlustsyndrom, kongenitales, Hypokaliämie 930 SAM 7 S-Adenosylmethionin Samenblase, Insulinempfindlichkeit 817 Sammelrohr 898, 903 – Aldosteronrezeptoren 924 – Hydrogencarbonat, Transport 906 – Hydrogencarbonatsekretion 907 – Protonensekretion/-transport 906–907 – Reabsorptionsleistung 900 – Vasopressin, Wirkungsmechanismus 905 – Wasserdurchfluss 905 – Wasserkanal-Molekül (Aquaporin 2) 905 Sammelrohrsystem 899 Sandhoff-Krankheit 200 Sanfilippo-Erkrankungen 200, 207 Sanger, Frederick 170 Saposine, Lysosomen 200 Sapovirus 328 Saquinavir 352 Sar1/Arf-Proteine 774 SARA (Smad anchor for receptor activation) 790 Sarkoglykane 1008–1009 Sarkome 1142 – Retroviren 344 Sarkomer 1002–1003, 1009 sarkoplasmatisches Retikulum 1012 – Ca2+-ATPase 1014 – Cisterne, terminale 1012 – elektromechanische Kopplung, Myokard 1014 – transversale Tubuli 1012 – Triaden 1012 Sarkospan S 1008 Sar-Proteine 192 Satelliten-DNA 241 – klassische 160 Satellitenviren 7 Virusoide Satellitenzellen, Skelettmuskel 1015 Sauerstoff 4 – arteriovenöse Differenz 1024

R–S

– Blutkonzentration 1024 – energetisches Äquivalent 636–637 – Erythrozytenverlust 955 – respiratorischer Quotient 637 – Standardpotential 103 Sauerstoffaffinität – Blut 959 – Hämoglobin 83–85, 960 – pH-induzierte Änderung 961 Sauerstoffanlagerungskurve – 2,3-Bisphosphoglycerat 960 – CO2-Druck 960 – Hämoglobin 82, 961 – Linksverlagerung 960 – – Kohlenmonoxid 969 – Myoglobin 81 – pH-Wert 960 – Rechtsverlagerung 960 – – Höhenaufenthalt 961 – Temperatur 960 Sauerstoffaufnahme und -abgabe, Erythrozytenstoffwechsel 955 Sauerstoffaustausch, Erythrozytenform 956 Sauerstoffbindung, kooperative, Hämoglobin 83 Sauerstoffdissoziationskurve 83 Sauerstoffdruck, Nierenzonen 900 Sauerstoffkapazität, Blut 959 Sauerstoffmangel – Gewebe 389 – Hypoxie 961 Sauerstoffpartialdruck 82 Sauerstoffradikale – Antioxidantien 511 – α1-Antitrypsin, Oxidation 975 – Ascorbat (Vitamin C) 511 – Entfernung, enzymatische, Glutathionperoxidase 511 – – – Katalase 511 – – – Superoxid-Dismutase 511 – α-Tocopherol (Vitamin E) 511 Sauerstoffspezies, reaktive 7 ROS (reactive oxygen species) Sauerstofftransport – Hämoglobin 79, 959 – Myoglobin 79 Sauerstoffverbindungen, Membranlipide, Peroxidation 974 Sauerstoffverbrauch – beim Gehen und Joggen 532 – Gehirn 1024 Sauerstoffversorgung, Niere 910 scaffold-(Gerüst)-Proteine, Membranrezeptoren 769 Scap (SREBP cleavage-activating protein) 569 scapulohumerale Muskeldystrophie 1018 Scatchard-plots, Rezeptorexpression, Messung 804 Scatol 1076

1248

Anhang

scavenger-Rezeptoren 692, 694, 1105 – Hyperlipoproteinämie Typ III 582 scavenger-Zellen, Hepatozyten 1085 SCF 7 stem cell factor Schädel-Hirn-Trauma – Exzitotoxität 1028 – Glutamatfreisetzung 1039 Schaltzellen 907 Scharnierregion, Immunglobuline 1119 Schiff-Base 361 (F), 393–394 – Pyridoxalphosphat 703 Schilddrüse – apikaler Jodtransporter (AIT) 852 – Autoimmunerkrankungen 860 – Chloridkanal 852 – CIC5 852 – Follikel 850 – Größe 850 – Kolloid 760, 850, 852 – Selenkonzentrationen 676 Schilddrüsenfunktion – Muskelerkrankungen 1021 – Selenmangel 676 Schilddrüsenhormonbiosynthese 851, 853 – Jodstoffwechsel 850–854 – Thyreoglobulin (Tg) 852 – Thyronine, Kopplung 852 Schilddrüsenhormone 758, 763, 846, 852 – Aktivierung 855–857 – Aufnahme, regulierte 855–857 – Carnitin-Acyltransferase 416 – Decarboxylierung, oxidative 857 – Freisetzung 850 – Inaktivierung 855–857 – Knorpel-/Knochenbildung 741 – Konjugation 857 – Proteinsynthese 645 – Regulation, TSH-Rezeptor 850 – Repression 858 – Rezeptoren 763, 856, 1143 – Serumkonzentrationen 858 – Stimulation 858 – Transport 854–855 – – Monocarboxylattransporter 8 (MCT8) 855–856 – TSH-regulierte Synthese 850 – Verteilung im Blut 854–855 – Wirkungen, rezeptorvermittelte, molekulare 856, 858–859 – – zelluläre 857 Schilddrüsenkarzinom, Thyreocalcitoninüberproduktion 939 Schilddrüsenszintigraphie, Pertechnetat 852 Schilddrüsenunterfunktion, Cholesterinbiosynthese 568

Schimmelpilze – Aflatoxin 1094 – Cancerogenese 1158 Schlafapnoe, Adipositas 640 Schlaganfall – Adipositas 640 – Exzitotoxizität 1028 – Glutamatfreisetzung 1039 Schlangengift, Phospholipasen 36, 559 β-Schleifen, Proteine 73 Schleimschicht, Magen 1057 Schlussleisten (tight junctions), Plexusendothel 1027 Schmelzen – DNA 166 – Membranfluidität 43 Schmelztemperatur – DNA 166 – Wasser 8 Schmid-Chondrodysplasie, metaphysäre 724 Schock – anaphylaktischer 1137 – hypovolämischer, Natriummangelzustände 927 – Lactatazidose 393, 949 – septischer 798–801 – toxischer 1135 Schrankenstörungen, Liquor/ Serum, Albumin 1028 Schreckreaktion 1041 Schutzgruppen – Aminosäuren, Kopplung 92 – Peptidsynthese 92 Schwangerschaft – Eisenbedarf, erhöhter 667 – Ernährung 652 – Hypercholesterinämie 583 – Ketonkörper im Urin 916 – Östriol 882 Schwann-Zellen 1045–1046 – neurotrophe Faktoren 1045 Schwefel 4, 941–942 schwefelhaltige Substanzen, Urin 915 Schwefelhaushalt 941–942 Schwefelsäure 942 Schweine-Insulin 810 Schweißdrüsen – Aldosteronrezeptoren 924 – Elektrolytverluste 1075 – Sekretion 1075 Schwesterchromatiden 154–155 Schwitzen – Dehydration 920 – – Natriumverluste, tägliche 921 SCM-1β (XCL2) 759 SCN1A/B, Mutation 1032 Scramblasen 562–563 Scrapie 1050 screenen (Durchmustern), DNA-/ Gen-Banken 246 scr-Proteinkinasen 43

SDF1 (CXCL12, stromal derived factor) 333, 759 SDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese 62–63 SECIS (Selenocystein-InsertionsSequenz) 289 SECIS-bindendes Protein (SBP2) 299 second messenger 765, 767, 769, 773–777, 872 – cAMP 781 – Diacylglycerin 789 – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR) 773 – Synapsen 1034 – Synthese 775 second messenger-aktivierte Kinasen 806 Secretin 7 Sekretin SEC-Rezeptor 317 Sec-tRNAsec 676 Sedoheptulose-7-phosphat 22 – Hexosemonophosphat-Weg 366 (F)–367 (F) Sehvorgang – all-trans-Retinal 686 – 11-cis-Retinal 686 Seide 73 Sekretasen 318 – α-/β-Sekretasen 318 – γ-Sekretasen 318 – Alzheimer-Demenz 1048 Sekrete – gastrointestinale 1054–1068 – – Regulation 1062–1063 Sekretgranula, Langerhanssche Inseln 811 Sekretin 937, 1063, 1066 – Gallebildung, Cholangiozyten 1098 – Hemmung durch Somatostatin 887 – Mucinsekretion 1064 – Pankreas 1065 – Pankreassekretion 1065 – Vorkommen/Funktion 1063 Sekretion – unkonventionelle 180 – vesikuläre, Plasmamembran 195 – Viren 340 Sekretionsstadium, Menstruationszyklus, Progesteron 883 sekretorische Prozesse, Glycogenabbau 774 Sekretvesikel, intrazelluläre, _ Hormone 760 Sekundärantikörper, Enzyme 138 Sekundär-Immunantwort 1110 Sekundärstruktur, tRNA 289–290 Sekundärstrukturelemente, kanonische, Proteine 73 Selbst-Organisation (selfassembly), Viren 339 Selektine 197, 199, 548

– homing 199 – Leukozyten 972 – Signalvermittlung 199 (F) – Zell-Matrix-Kontakte 199 (F) – Zell-Zell-Kontakte 199 (F) Selektion, positive, T-Lymphozyten 1110 Selektionsvorteil, Blutgruppenantigene 966 selektive Estrogen-RezeptorModulatoren 7 SERMs Selektivitätsfilter, Kaliumkanäle 1031 Selen 4, 676 – Gesamtbestand/Plasmaspiegel 656 – Mangel 676 – Redox-Katalysator 676 Selen-haltige Peroxidase 956 Selenmethionin 676 Selenocystein 45, 298 (F), 299, 676 – Biosynthese 676 – Glutathionperoxidase 299 – Proteine 676 – Synthese 289 Selenocysteinbindeprotein 2 (SBP2) 861 Selenocystein-tRNASec 299 Selenoenzyme 676 Selenoprotein P 676 Selenoproteine, Biosynthese 289 Semaphorine 1051 Semichinon 496 semikonservativer Mechanismus, DNA-Replikation 228–229 sense strand 256 Sepsis, Proteolyse, Skelettmuskulatur 529 septischer Schock 798–801 sequentielles Modell 131 Sequenzanalyse, Proteine 67–68 Sequenziergel 171 Sequenzierung, DNA 170–171 SER (smooth endoplasmatic reticulum) 190 SERCA-ATPase 184 Serin 28 (F), 32, 35, 45, 47, 437–439, 486, 554, 559, 708, 1038, 1070 – Abbau 458 – Aminosäuren, nicht essentielle, Stoffwechsel 440 – Aminosäurestoffwechsel, Nieren 451–452 – Aufnahme, Insulin 820 – Bedarf 439 – Ceramid, Biosynthese 560 (F) – Desaminierung 459 – Lipase-Colipase-Komplex 1070 – Plasmakonzentration 445 – Sphingomyelin, Biosynthese 560 (F) – Stoffwechsel 457–459 Serindehydratase 433, 459

1249 Sachverzeichnis

Serin-Hydroxymethyltransferase (SHMT) 458 – Pyridoxalphosphat 704 Serin-Palmityl-Transferase, Pyridoxalphosphat 704 Serinpeptidasen 315 Serin-Phosphorylierung, Rezeptoren 771 Serinproteasen 120, 317 – Basalmembran, Abbau 1156 – extrazelluläre Matrix, Abbau 736 – Inhibitoren 317 – Katalyse 120 Serinproteinasen 7 Serinproteasen Serin-Pyruvat-Transaminase 459 Serinreste – Dephosphorylierung 273 – Phosphorylierung 273 Serin/Threonin-Dehydratase 459 – Desaminierung 435 – Reaktionsmechanismus 437 Serin/Threonin-Hydroxymethyltransferase 433 Serin/Threoninkinasen 806 – cytosolische 1143 Serin-/Threoninkinasen, MAPK 772 SERMs (selektive EstrogenRezeptor-Modulatoren) 884 – Osteoporose 746 Serotonin 438, 468, 758–759, 765, 1037–1038, 1042–1044 – Abbau 1042 (F) – – Monoaminoxidase (5HT), Typ A 1043 – Biosynthese 1042 (F) – Carcinoide 1043 – Decarboxylierung, Pyridoxalphosphat-abhängige 1043 – enterochromaffine Zellen, Tumoren 1043 – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 783 – Mastzellen 1080 – Melatonin, Abbau/Biosynthese 1043 (F) – Nahrungsaufnahme, Wirkung 643 – Nierendurchblutung 896 – Thrombozyten 977 – Tryptophan 1025 – – Decarboxylierung 1042 – Urin 915 Serotoninrezeptoren 1043 – Adenylatcyclase 1043 – Phospholipase C 1043 Serotonin-Transporter 1037 serpin enzyme-complex 317 Serpine 317 Sertoli-Zellen 874–876 – FSH 876 – Funktionen 874–876 – Gliazell-abgeleiteter neurotrophischer Faktor (GDNF) 876

– hypothalamisch-hypophysäres System, Wirkung 874 – stemcell factor 876 – Stimulation, FSH 875 – – Testosteron 875 – Testosteron 876 Serum – Kaliumkonzentration 956 – LDH-Aktivität 956 – Proteinfraktionen 994–996 – Transkription 276 Serum-Akutphase-Protein, verändertes 800 Serumalbumin – Leber 994 – Lipoproteine, Transport 572 Serumcholinesterase, Funktion/ Pathobiochemie 992 Serumfettsäuren 518 Serumkrankheit 1137 Serumlipoproteine – Eigenschaften 573 – Einteilung 573 Serumproteine, Immunelektrophorese 995 Serum-Response Faktor (SRF), Transkription 276 Serum-TSH-Werte 858 Serylgruppe, Proteoglykane 549 Seryl-tRNAsec 299 Sexhormon-bindendes Globulin (SHBG) 876, 882 Sexualhormone/-steroide – gonadale, Kisspeptin 872 – Produktion, Stimulierung 872 – Skelettsystem, Homöostase 745 SGLT-1 (sodium-dependent glucose transporter 1) 905, 1069 – Defekt 1077 – Galaktose, Transport 1069 – Glucoseresorption, tubuläre 906 – Hexosen 1069 – Hexosetransport, Natriumabhängiger 1070 (F) – Isoformen 1069 – Natrium-Kalium-Pumpe, ATP-abhängige 1069 SGLT-2 (sodium-dependent glucose transporter 2) 905 SGLT (sodium dependent glucose transporter) 185, 905 – Kohlenhydrate, Resorption 1069 SH2-containing tyrosine phosphatase (SHP2) 788 SH2-Domänen (src-homology 2 domains) – Adapter-Proteine 735 – Proteine 786 SH3-Domänen (src-homology 3 domains) – Adapter-Proteine 735 – Proteine 771

SHBG (Sexhormon-bindendes Globulin) 876, 882 Shc-Adaptorprotein 788 – Prolactinrezeptor, Tyrosinreste 888 Sheddasen 318 shedding-Enzyme 318 Shigella, Aktinfilamente 214 Shikimat-Familie 443 short loop feedback 846 – Hormone 846 SHP2 796 SIADH (syndrome of inappropriate antidiuretic hormone secretion) 921 Siah1, Apoptose 323 Sialinsäur, Reste, Glycoproteine 548 Sialinsäure – Transportdefekte 200 – Viren 340, 342 – Virusrezeptor 331 Sialoglycoprotein, glycosidische Bindung 29 Sichelzellanämie 971 – Pigmentsteine 1102 Sichelzellgen 971 Sichelzellkrankheit 7 Sichelzellanämie Siderophilin, Funktion/Pathobiochemie 993 Siedetemperatur, Wasser 8 Siewert-Kartagener-Syndrom 214 sIgA (sekretorisches IgA) 1120–1121 sigmoidale Kinetik, Enzyme 130 signal recognition particle (SRP) 304 – RNA 162–163 signal transducers and activators of transcription 7 STAT Signalamplifikation 769 Signale, extrazelluläre, Dekodierungssystem, Hox-Gene 273 Signalentstehung 758 Signalintegration 769 Signalkaskaden, PDGF-induzierte 788 Signalmetabolite – 2,3-Bisphosphoglycerat 960 – Hämoglobin 83 Signalmoleküle 571–572 – Abbau, Proteasen 806 – extrazelluläre 757–760 – Phosphorylierung, reversible 806 Signalosomen 43 Signalpeptid, Abspaltung, Proteine 307 Signal-Peptidasen 307 – endoplasmatisches Retikulum, raues 319 – mitochondriale, Proteolyse 319 – Proteine 305

Signalproteine, Phosphorylierung, Phosphatasen, Inhibierung 806 Signalsequenz 304 Signalstoffe, Aminosäuren 429 Signaltransduktion 571 – Adiuretin-abhängige, Aquaporin-2 182 – Aminosäuren 430 – autokrine 758 – B-Zell-Aktivierung 1126 – chemische, Neuronen 1036–1043, 1045 – Cholesterin 572 – endokrine 758 – GPCR-vermittelte 783–785 – G-Proteine 773, 781 – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 779 – humoraler Weg 757 – Integrine 199 (F), 735 – Interleukin-8 785 (F) – interzelluläre, Mechanismen 757 – juxtakrine 758 – konstitutive Anschaltung, Onkogenmutation 1144 – Ligand 757 – Lipidderivate 571 – Lipide 33, 571 – Membranrezeptoren 769–777 – Muskelaufbau/-abbau 1016 – parakrine 757 – PDGF-Rezeptor 788 – Phosphoglyceride 571 – Plasmamembran 195 – Proteine, inhibitorische 806 – Protein-Protein-Wechselwirkungen 771 – Regulation 804–807 – Rezeptoren 757, 763 – – mit assoziierten Kinasen 791–798 – – homodimere 759 – Rezeptorexpression 804–805 – Rezeptor-Serin-/Threoninkinasen 759, 790 – Rezeptor-Tyrosinkinasen 759, 785–789 – Rückkopplungsmechanismen 805–807 – Selektine 199 (F) – Signalamplifikation 769 – Sphingosin 572 – Sphingosin-1-phosphat 572 – T-Lymphozyten 1114 Signalübertragung 7 Signaltransduktion Signalverarbeitung 758 Signalvermittlung 7 Signaltransduktion Signalweiterleitung 758 Silberfärbung, Proteine, aufgetrennte 63 Sildenafil (Viagra£) 803 silent information regulators 639

S

1250

Anhang

Silicium 4 – Gesamtbestand/Plasmaspiegel 656 Simian Virus 40 (SV40), Restriktionskarte 169 SINE (short interspersed nuclear elements) 161 single nucleotide polymorphism 7 SNP Sinusoidalmembran, Transportsysteme 1096 SIR2.1 639 siRNA (small interfering RNA) 163–164 – Gene, Ausschalten (knockdown) 250 Sirolimus (Rapamycin), Transplantatabstoßung 1139 SIRS (systemic inflammatory response syndrome) 798, 801 – Cytokine, pro-inflammatorische 800 SIRT1 639 – Apoptose, p53-vermittelte 639 Sirtuine 639 – Alterungsprozess 639 sis-Onkogen 1143 site-1/2-Proteinasen 320 Sitosterol 39 (F), 1071 Sitosterolämie 186 – Arteriosklerose/Xanthome 1077 Skelettdeformierungen, Manganmangel 673 Skelettmuskulatur 1002–1003 – 7a. Muskulatur, quergestreifte – Aminosäurefreisetzung, Nahrungskarenz 529 – Atrophie 529 – Energiebedarf, Deckung 532 – Fettsäuren 521, 529 – GATA-2 1016 – Gluconeogenese 372 – Glucoseaufnahme 531 – GLUT 4 375, 820 – Glycogen, Speicherung 518 – Hypertrophie 529 – Insulin 820 – Insulinempfindlichkeit 817 – Ketonkörper 521, 529 – Kreatinphosphat 531 – Lipase, hormonsensitive 399 – Lipoproteinlipase 401 – Nahrungskarenz 529 – – Proteolyse 521, 529–530 – Satellitenzellen 1015 – Triacylglycerine, Speicherung 518 Skelettsystem – Biochemie 737–745 – Homöostase 744–745 Skelettwachstum, postnatales, GH 744 Skleren, Gelbfärbung, Ikterus 624

43S-Komplex, Proteinbiosynthese, eukaryote, Initiation 294 Skorbut 699, 719 SLAM-Protein (CD150), Virusrezeptor 331 SLC19A1, Folsäureaufnahme 707 SLC30-Transporter 672 sliding filaments, Muskelkontraktion 1009 slow reacting substance (SRS) 423 – Allergie vom Typ I 1137 Smad-Proteine 790 – MH-Domänen 771 small nuclear RNA 7 snRNA small nucleolar RNA 7 snoRNA small ubiquitin-like modifier (SUMO) 309 Smith-Lemli-Opitz-Syndrom 314 smooth ER 7 glattes endoplasmatisches Retikulum SMVT (sodium-dependent multivitamin transporter), Biotin 706 SNAP25 194, 1035 SNARE-Proteine (soluble N-ethylmaleimide sensitive fusion protein attachment protein receptors) 1035 – Exozytose 194 snoRNA (small nucleolar RNA) 163–164, 188, 205 SNP (single nucleotide polymorphism) 161 snRNA (small nuclear RNA) 163–164, 205, 265 – Spleißen 265 – Zellkern 187 SOCS-Familie (suppressors of cytokine signaling) 796 SOCS-Proteine (suppressors of cytokine signaling) 806 SODD-Domänen (silencer of death domains), Proteine 771 sodium dependent glucose transporter 7 SGLT Solenoid 153 soluble-carrier Proteine (SLC19A) 699 soluble-carrier (SLC), Biotin 706 solvent drag, Tubulus, proximaler 902, 904 Somatoliberin 7 growth hormone releasing hormone Somatostatin 844, 846 – ECL-Zellen, Histaminfreisetzung 1064 – GH-Sekretion, Inhibitor 887 – – Regulation 885 – G-Protein, Aktivierung 780 – Insulinsekretion, Hemmung 815 – Nahrungsaufnahme, hemmende Wirkung 643 – Plazenta 884

– Salzsäureproduktion, Hemmstoff 1064 – TRH-Freisetzung 847 – Vorkommen/Funktion 1063 somatotropes Hormon (Somatotropin) 7 GH Sonden – 7 DNA-Sonden – anonyme, Antionkogene 1145 – Mikrosatelliten 1146 Sondennahrung, Osmolarität 653 Sonnenlicht, Vitamin-D-Stoffwechsel 688 Sorbitol 23, 24 (F), 364, 365 (F) Sorbitoldehydrogenase 364–365 Soret-Bande – Hämoglobine 959 – Porphyrine 615 Sortierung – importierter Produkte, GolgiApparat 191 – Transport, vesikulärer 194 Sortierungssignale – Proteinbiosynthese 288 – Transport, vesikulärer 192 SOS, Insulinsignal, Weiterleitung 822 Southern, Edwin 167 Southern-Blot 167 (F) – Isotop 32P 167 – Rot-Grün-Blindheit 685 SOX-9 – Knochenwachstum 742 – Knorpelzellen, Differenzierung 740 SOX-Expression, BMPs 740 Spannungssensor – Ionenkanäle 1031 – Myotonie, kongenitale 1019 SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 730 Spectrin – Aktin 214 – Erythrozytenmembran 956 Speichel 1054 – Mucine 1054 – pH-Wert 1054 Speisebrei, hypertoner, Wassersekretion 1074 Speiseflüssigkeit, isotone 1074 spektralphotometrische Messung, Enzyme 115 Spender-gegen-EmpfängerReaktion (GvHR) 1138 Spermatogonien 876 – KIT-Rezeptor 876 Spermatozoen 7 Spermien Spermatozyten 876 – GLUT 5/GLUT 11 376 Spermidin 462 – Arginin, Umwandlungsreaktionen 461 – Polyamine, Biosynthese 462

Spermien – Produktion, tägliche 876 – Zinkkonzentration 672 Spermin 462 – Arginin, Umwandlungsreaktionen 461 – Magnesiumionen, tRNA 291 – Polyamine, Biosynthese 462 Spermiogenese – FSH 876 – Testosteron 876 Spezifität, Immunantwort, adaptive 1105 Sphärozyten 968 Sphärozytose, hereditäre 968 S-Phase – Mitose 155 – Zellzyklus 154, 221 Sphinganin, Ceramid, Biosynthese 560 (F) Sphingoglycolipide 31 Sphingolipidaktivatorproteine (SAPs) 561 Sphingolipide 32, 37–38, 398, 559, 571–572, 647, 965 – Abbau 561–562 – – Enzymdefekte, Lipidspeicherkrankheiten 580 – amphiphile Verbindungen 40 – bilayers 40 – Biosynthese 559–561 – – Ceramid 559 – Ceramid 965 – Doppelschichten 40 – Pathobiochemie 580–581 – Resorptionsphase, Leber 1086 – Stoffwechsel 559–564 Sphingolipidosen 580 Sphingomyelin 38, 564, 571 – Abbau 561, 562 (F) – Biosynthese 559, 560 (F) – Lipiddoppelschichten 41 Sphingomyelinasen 561–562, 571 – alkalische, neutrale bzw. saure 561 – Defekt, Niemann-Pick-Krankheit 580 Sphingosin 32, 38, 559, 562 (F), 571 – Signaltransduktion 572 Sphingosin-1-Kinase 571–572 Sphingosin-1-phosphat 562, 571 – Signaltransduktion 572 – Sphingomyelin, Abbau 562 (F) Sphingosin-1-phosphat-Lyase 562 Sphingosin-1-phosphat-Phosphatase, Sphingomyelin, Abbau 562 Spindelapparat 188 – Mikrotubuli 209 Spironolacton 924 Spleißen 264–267 – Abschluss 265 – alternatives 267, 272, 278–280

1251 Sachverzeichnis

– – Acetylcholinesterase 313 – – Calcitonin, Entstehung 278–279 – – CGRP (calcitonin gene related peptide) 278–279 – – exon skipping 278 – – IgM-Moleküle, sezernierte 278–279 – – Immunantwort 278 – – Möglichkeiten 279 – alternierendes, Myofibrillen 1003 – Eukaryote 266 – Intron-Entfernung, chemischer Mechanismus 265 – Mechanismus 264–267 – prä-mRNA 264 – Ribozyme 265 – snRNA (small nuclear RNA) 265 – Umesterungen 264 Spleiß-enhancer 280 Spleißosomen – Aufbau 265–267 – Ribozyme 114 – Zellkern 187 Spleiß-silencer 280 Spongiosa, indian hedgehog 740 Sprue – Folsäuremangel 709 – Gliadin-induzierte 1078 – – Lactasemangel 1077 – intrinsic-factor-Mangel 711 – Vitamin-E-Mangel 694 Spumavirus 329 Spurenelemente 655–678 – Mangel 656–657 – Metallenzyme 657 – (nicht-)essentielle 656 – Speicherung in der Leber 1089 Squalen 38, 565, 566 (F), 570, 688 – Bildung 566 – Cholesterin, Biosynthese 567 (F) – – Synthese 564, 567 – Isopren, aktives, Biosynthese 567 Squalen-Synthase 566, 570 SQUID-Biosuszeptometer, Eisenablagerungen 666 SR-B1 (scavenger-Rezeptor B1), Vitamin-E-Stoffwechsel 692 Src 788 – Familie 310 SRE (sterol responsive element) 569 – Transkription 276 SREBP (sterol response element binding protein) 569 – Fettsäurebiosynthese 417 – Lipogenese 415 – Proteine, Expression 570 – Transport, nucleocytoplasmatischer 190

SREBP-1a (sterol responsive element binding protein 1a) 569 – Aktivierung, Fettsäuren, ungesättigte, Mangel 570 SREBP-1c (sterol responsive element binding protein 1c) 386, 569, 647 – Aktivierung, Insulin 570 – Glycolyse 387 – Kohlenhydratstoffwechsel 651 – Lipidstoffwechsel 649 – Lipogenese 415 SREBP-2 (sterol responsive element binding protein 2) 569–570 – Aktivierung 569 18 S-RNA, Entstehung 268 (F) SRP (signal recognition particle) 205, 304 – GTP 304 – RNA 162–163 SRP-Rezeptor (docking-protein DP-GTP) 304 SR-Proteine 280 SRS (slow reacting substance) 423 SRS-A (slow reacting substance-A), Allergie vom Typ I 1137 SSB (single strand binding protein), DNA-Replikation 229 Stäbchen (Retina) 685–686 – Depolarisierung 686 – Rhodopsin 685 Stammzellen 952, 1142 – CD34 952 – Differenzierung 1124 – embryonale 252 – neuronale 1051 – pluripotente 952–953 Standardbedingungen (ΔG0), Enthalpie, freie 102 Standardpotentiale, Redoxsysteme, biologische 103 Standard-Proteomanalyse, Proteine 68 Staphylokokkeninfektion, Schock, toxischer 1135 StAR (steroid acute regulatory protein) 864, 873 Start-Codon 288 – Proteinbiosynthese 287 Startle-Syndrom 1041 STAT (signal transducer and activator of transcription) 788, 796–797 – Hämbiosynthese, Regulation 612 – Interferon-Signaltransduktion 797 – Interleukin-6-Signaltransduktion 795 – Rezeptorbindung 771 – Signaltransduktionskaskade 887 – Tyrosin-Phosphorylierung 789

STAT1 (signal transducer and activator of transcription 1) 788 – Interferon-Signaltransduktion 797–798 – Jak/STAT-Signaltransduktionskaskade 798 STAT2 (signal transducer and activator of transcription 2), Interferon-Signaltransduktion 797 STAT3 (signal transducer and activator of transcription 3) 788 Statherine, Speichel 1054 Statine 570 Stearinsäure 34 Stearyl-CoA-Desaturasen 419 Steatohepatitis, Leberzellschädigung 1101 Steatorrhoe 1077 Steinkohlenteer, Cancerogenese 1158 ω-Stelle, Peptidbindung 311 stem cell factor (SCF) 759 – Sertoli-Zellen 876 – Stammzellen, Differenzierung 1124 Stercobilin 622, 623 (F) – Bilirubinabbau 622 Stercobilinogen 622, 623 (F) Stereocilien, Aktin 214 Stereoisomerisierung, photoinduzierte, Retinal 686 Stereospezifität, Enzyme 108 Sterine, pflanzliche, Ausscheidung, Transporter 177 Sternzellen – Leber 1084 – Vitamin A, Speicherung 684 Steroide 7 Steroidhormone Steroidhormon produzierende Zellen – Entwicklung 873–874 – LDL-Rezeptoren 864 Steroidhormone 32–33, 759, 763 – Aktivierung 873 – Biosynthese 864 – Cholesterin 39, 568 – Inaktivierung 873 – Isopren, aktives, Biosynthese 567 – Methylgruppen 39 – Nebennierenrinde, Biosynthese 873 – Nomenklatur 39 – Plazenta 873 – Proteinsynthese 645 – Skelettsystem, Homöostase 745 – Urin 915 – Zyklisierung 38 Steroidhormonrezeptoren 277, 687 – Aldosteron 923 Steroid-Hydroxylase(n) – 11β-Steroid-Hydroxylase 865

– 17α-Steroid-Hydroxylase 865, 866 (F) – 21-Steroid-Hydroxylase 866 (F) steroidogenic acute regulatory protein (StAR-Protein) 864, 873 sterol regulatory element 7 SRE Sterole 647 – Resorption 1071 Sterolregulationselement 1 (SRE-1) 569 Sterol-responsive Elemente bindendes Protein 7 SREBP STI 571, Leukämie, chronischmyeloische (CML) 1160 Stickstoff 4 – Ausscheidung 429 – Elimination, Nahrungskarenz 641 – Fixierung 428 – Homöostase 430–431 – Stoffwechsel 428–430 Stickstoffbilanz 431–432 – ausgeglichene 644 – Bestimmung 431 – negative, Typ-1-Diabetes mellitus 833 – proteinreiche Ernährung 431 Stickstoffdonator 432 stickstoffhaltige Substanzen, Biosynthese, AmmoniumIonen 445 Stickstoffhaushalt des Menschen 430 Stickstoffkreislauf 428 Stickstoffmonoxid (NO) 459, 759, 800–802, 1104–1105 – Arginin, Umwandlungsreaktionen 461 – Bildung, Monooxygenasen 508 – Cytochrom-c-Oxidase, Hemmung 500 – Donatoren, Viagra£ 803 – Endothelzellen 981 – Inaktivierung, Hämoglobin 964 – Induktion, Bakterienabwehr 1135 – Nierendurchblutung 896 – second messenger 774 – Synthese 460–461 – Überproduktion, Apoptose 323 – Wirkungsweise 801 stickstoffreiche Kost, Urinausscheidung 914 Stickstofftransport, Aminosäuren 430 Stickstoffverluste 431 stiff-person-syndrom 1041 Stigmatellin, UbihydrochinonOxidationszentrum, Blockade 499 Stillzeit, Ernährung 652

S

1252

Anhang

Stoffwechsel – Säuren, Entstehung 942–943 – Tumorgewebe 1159 Stoffwechselkrankheiten, DNA-Technologie, rekombinante 134 Stopp-Codon 288 (γ-)Strahlung, DNA-Schädigung 237, 1148 Strangbrüche, Sauerstoffspezies, reaktive 510 Straßenstaub, Cancerogenese 1158 Stratum basale, corneum, granulare bzw. spinosum 748 Streptokinase 988 Streptokokkeninfektion – Schock, toxischer 1135 – Streptokinase, Antikörper 988 Streptomyces hygroscopius 525 Streptomycin 25 – Proteinbiosynthese, Hemmung 299 Stress – CRH 862 – Hypothalamus-HypophysenNNR-System 868 – Katecholamine 636 – Proteinbiosynthese, Initiation, Regulation 300 – Ubiquitinierungssignale 321 – zellulärer, Apoptose 323 Stressfasern/-filamente 212, 735 – Aktin 213 Stress-Granula, Intrazellularraum 205 Stresshormone, Stickstoffbilanz 431 stromal derived factor (SDF1, CXCL12) 759 Stromelysine 317, 737 Strontium, Gesamtbestand/ Plasmaspiegel 656 Strophanthin g (Ouabain) 25 (F) Strukturfett 638 Strukturgene, HIV 336 Strukturglykoproteine 27 Strukturproteine 56 – Viren 338 – Zerstörung, Caspasen 793 Struma 859 – endemische, Jodmangel 675 Struvit-Steine, Nierensteine 916 Strychnin 1038 Strychnos toxifera 766 Stuart-Prower-Faktor 985 – Mangel 985 Stuhl, Verfärbung, grünliche 623 Stuhlporphyrine, Bestimmung, quantitative 619 Subkutis 747 Submandibularis, Fluoridspeicherung 674 Substantia nigra, OXPHOS-Defekte 513 Substanz P 1045, 1063

Substratbindungsregion, Myosinkopf 1011 Substrate, Bindung, Peptidasen 316 Substratkettenphosphorylierung 106, 483 – Glycolyse 362 Substratkonformation, optimale, Metallionen 112 Substratkonzentration – Enzymmenge, Veränderung 129 – Reaktionsgeschwindigkeit, Michaelis-Menten-Gleichung 122 Substratmangel 825 Substratoxidation 646 – Atmungskontrolle 503 Substrat-shuttle 493 Substratspezifität, Enzyme 108 Succinat 443, 480 (F), 482, 483 (F) – Ketonkörper, Biosynthese 409 (F) – Oxidation 483 – Standardpotential 103 Succinatdehydrogenase 485, 506 – Aktivierung/Hemmung 485 – Citratzyklus 480, 484 Succinatsemialdehyd 698 Succinat:Ubichinon-Oxidoreduktase 496–498 – Atmungskette 497 Succinyl-CoA 440–443, 458–459, 480 (F), 483, 526, 704, 710, 711 (F), 943 – δ-Aminolävulinat, Synthese 609 (F) – Aminosäuren, verzweigtkettige, Abbau 467 – Aminosäurestoffwechsel, Muskulatur 453 – Fettsäureabbau 406, 407 (F) – Gluconeogenese 374 – Ketonkörper, Biosynthese 409 (F) – Kobalt 672 – Methionin, Abbau 462, 463 (F) Succinyl-CoA-Acetacetyl-CoATransferase – Ketonkörper, Abbau 409 – – Biosynthese 409 Succinyl-CoA-Synthetase – Citratzyklus 480, 483 – Reaktionszyklus 483 (F) Succinyl-CoA-Transferase 1025 Succinylphosphat 483 (F) Sucrose 7 Saccharose suicide bag, Granulozyten, neutrophile 975 Suizidsubstrate 127 – Enzyme 127 Sulfamethoxazol 125 Sulfaminidase, Defekte 200 Sulfanilamid 125 Sulfat 941

– – – –

anorganisches, Urin 915 Ausscheidung, tägliche 941 Konjugationsreaktionen 942 Phosphoadenosylphosphosulfat (PAPS) 942 – Proteoglykane 942 Sulfatasen 942 – Defekte/Defizienz 200 Sulfatgruppen 10 Sulfatidasen 561 – Defekt, Leukodystrophie, metachromatische 580 Sulfatide 38, 561, 564 – Biosynthese 559, 561 (F) Sulfatierungen – Golgi-Apparat 191 – Proteoglykane 549–550 Sulfattransferase, Mangel 728 Sulfhydrylgruppen 5 (F) – Blei, Bindung 677 – Enzyme 128 Sulfinylpyruvat 465 (F) Sulfitoxidase 465 – Molybdän 671 Sulfonamide 125 – Folsäure, Inhibitoren 125 – Hämolyse 968 Sulfonylharnstoffe 815 (F) Sulfonylharnstoff-Rezeptor 815 – ABC-Transporter-Familie 816 Sulfotransferasen, Sulfatstoffwechsel 941 SUMO (small ubiquitin-like modifier) 309 SUMO-Proteine 310 Sumoylierungen 310 Superantigene 1115 – T-Zellen, Aktivierung 1115 Superfamilien, Proteinstrukturen 77 superhelicale Strukturen, Entwindung, Topoisomerasen 151 Superhelix, DNA 151 Superkomplexe 494 Superoxidanion (O2–) 800, 974 Superoxiddismutase 509 – Granulozyten 974 – kinetische Konstante 123 – KM-Wert 123 – Kupfer 667 – Sauerstoffradikale, Entfernung, enzymatische 511 – Sauerstoffspezies, reaktive, Entstehung/Abbau 511 Superoxid-Radikale 509 Supersekundärstruktur, Proteine 76 Superspiralisierung, DNA 149, 151 (F) Suppression, Proteinbiosynthese, eukaryote, Termination 298 suppressors of cytokine signalling 7 SOCS-Proteine Suppressor-tRNA, Proteinbiosynthese, eukaryote, Termination 298

Suppressorzellen 1106 supramolekulare Assoziate 6 SUR (sulfonyl-urea receptor) 815 SV40-ähnliche Viren 329 SVCT (sodium dependent vitamin C transporter) 697 Svedberg-Koeffizient, Proteine, Molekülmasse 64 S-Wert, Proteine 65 switchregion, Immunglobuline 1119 Syk, B-Zell-Aktivierung 1126 Symmetriemodell, Enzyme, allosterische 130 Symport – Membrantransport 179 (F) – mitochondriale Carrier 492 – Tubulus, proximaler 902 Synapsen 1034–1036 – Aufbau 1034 – chemische 1034 – – Endozytose, Clathrinvermittelte 1034 – cholinerge, Acetylcholin 1039 – elektrische 1034 – Funktion 1034 – gap junctions 180, 1034 – immunologische, Tc-Lymphozyten 203 – neuromuskuläre, Acetylcholin, Synthese 1039 – Neurotransmitter 1034 – second messenger 1034 Synapsin 1035 synaptische Vesikel 1034–1035 synaptischer Spalt 1034 – Glutamatkonzentration 1039 Synaptobrevin 1035 Synaptophysin 1035 Synaptotagmin 1035–1036 Syncytiotrophoblasten – Choriongonadotropin 884 – Chorionsomatomammotropin 885 – Östriol 882 – Transferrin, Aufnahme 661 Syndecane 728–729 Syntaxin 1035 Synthetasen 113 Syntrophin 1008 α-Synuclein, Parkinson-Syndrom 1049 Système International d‘Unités (SI), Enzymaktivität 116

T T3 7 Trijodthyronin T4 7 Thyroxin TAAR (trace-amine associated receptors) 857 TAB (TAK binding protein) 791, 799 Tabakmosaikvirus 79

1253 Sachverzeichnis

TACE (TNF-alpha converting enzyme) 318, 792 Tacrolimus (FK506), Transplantatabstoßung 1139 TAK binding protein (TAB) 799 TAK (TGFβ-activated kinase) 772, 791, 799 – TNFα-Signaltransduktion 792 Talin 1008 Tamm-Horsfall-Glycoprotein, Calciumoxalatsteine 917 Tamoxifen 884 Tandem-MS 68 Tangier-Erkrankung 186, 581 tangles, Tau-Pathien 1049 TAP1 1107–1108 TAP (transporter associated with antigen processing)-Transporter 184, 322, 1107–1108 Tapasin 322 Taq-Polymerase 127, 247 TATA-Box, Thymidinkinasepromotor 261 TATA-Box-Bindeprotein 260 TAT(twin arginine translocation)Sequenz, HIV 186, 336 Taubheit, sensorineuronale, Connexin-26-Gen, Mutation 186 Tau-Pathien 213–214, 1049 – Alzheimer-Demenz 214 Taurin 462, 465 (F) – Plasmakonzentration 445 – Synthese 465 Taurinchloramin 465 Taurocholsäure, Gallensäuren, Bildung 1060 (F) Taxol, Tubulindynamik, Störungen 214 Tay-Sachs-Krankheit 200 – Hexosaminidase, Defekt 580 TBG (Thyroxin-bindendes Globulin) 854–855 – Funktion/Pathobiochemie 992 TBI (TSH-Rezeptor-blockierendes Ig) 1138 tBid (truncated bid) 227 TC10, Insulinsignal, Weiterleitung 821 TC-Lymphozyten/-Zellen 1116 – Synapse, immunologische 203 – Tc-Lymphozyten, Synapse 203 Telomerase 235 – Apoptose 236 Telomerase-RNA 163–164 Telomere – Chromosomen 155, 234, 235 (F) – DNA-Replikation 235 Telopeptide, Kollagene, fibrilläre 718 Temperatur(abhängigkeit) – Enzymaktivität 127 – Proteine, Denaturierung 88

– Sauerstoffanlagerungskurve 960 Temperaturkoeffizient, Enzyme 127 Temperaturoptimum, Enzyme 127 Tenascin-C, -R, -W, -X, -Y 730 Tenase, Blutgerinnung 981 Tenside, Fluorid 673 terminal web, Zonula occludens 198 Termination – Proteinbiosynthese, eukaryote 298–299 – Transkription 257 – – Prokaryote 258–259 Terminationssignale, Transkription, Prokaryote 259 Terpene 32 Tertiärstruktur – Proteine 77, 306 – tRNA 291 Testes 7 Hoden Testosteron 759, 846, 876–877 – Aktivierung, periphere 876–877 – Biosynthese 874, 875 (F) – Cytochrom-P450-AromataseKomplex 882 (F) – GnRH-/LH-Freisetzung, Hemmung 875 – Östrogene, Biosynthese 877, 880–881 – Pregnenolon, Biosynthese 875 (F) – Produktion, tägliche 875 – Progesteron, Biosynthese 880–881 – Prolactinom 875 – Sertoli-Zellen 875–876 – Spermiogenese 876 Testosteron-Östrogen-bindendes Protein 876 Testosteron-Paradox 876 Tetanie, Hypoparathyreoidismus 939 Tetanustoxin 206 tethering-Proteine 194 TETRAC (Tetraiodthyro-Essigsäure) 857 Tetracosansäure 34 Tetradecansäure 34 5,6,7,8-Tetrahydrobiopterin (BH4) 468 – Katecholaminbiosynthese 827 – Phenylalanin, Umwandlungsreaktionen 469 (F) – Tyrosinhydroxylase-Reaktion 828 (F) Tetrahydrofolat/Tetrahydrofolsäure (THF) 111, 681, 707, 708 (F) – Histidinabbau 475 Tetraiodthyro-Essigsäure 7 TETRAC Tetrajodthyronin 7 Thyroxin (T4)

β4/-γ4-Tetramere, α-Thalassämie 970 Tetrapeptid 30 Tetrapyrrol, Hämbiosynthese 608 Tetrazykline, Proteinbiosynthese, Hemmung 299 TEV, HIV 336 TF 7 Transkriptionsfaktoren Tfam 535 T-Form (tight), F1-F0-ATP-Synthase 501 TFPI (tissue factor pathway inhibitor), Blutgerinnung 985 TfR1 (Transferrin-Rezeptor 1) 661, 662 (F) TfR2 (Transferrin-Rezeptor 2) 661 – Genmutation 666 TGA-Codon 289 TGF-1 1112 TGF-α 1143–1144 – Diabetes mellitus 838 TGF-β 225, 759, 790, 1104, 1144 – Akutphase-Proteine 996 – Alkoholkonsum, chronischer 1100 – Betaglykan 729 – Entzündung 975 – IgA 1123 – IgG2b 1123 – Isoformen 790 – Knochen 742 – Knochenresorption 745 – Lebersternzellen 1098 – Myosin 1006 – Proteine, Regulation 694 – Proteoglykane als Cofaktoren 729 – Rezeptor 767, 790 – Signaltransduktion 771, 790 – Superfamilie, Aktivine/Inhibine 872 TGF-β1 790, 1112 – Diabetes mellitus 838 – knockout-Mäuse 790 TGF-β3 790 TGF-β-activated kinase (TAK) 799 Thalassämia major/minor 970 – Apoptose 971 Thalassämie – α-/β-Thalassämie 970 – Pigmentsteine 1102 Theca interna, Ovarien 878 Theca-Interna, Androstendion 879 T-Helferzellen 1110–1112 Thermodynamik 100–106 – Hauptsätze 100 – offene/geschlossene Systeme 100 thermodynamisches Gleichgewicht 102 Thermogenese 632 – biochemische Prozesse 633 – essentielle 632–633 – Fettgewebe, braunes 504, 520

S–T

– Induktion, Kältereiz 505 – Neugeborenes 504 – obligatorische 632–633 – postprandiale 635 – regulatorische 632–633 – Transportproteine 494 Thermogenin 494, 503–504, 520, 634 – Adipositas 634 – Entkopplungsprotein, Atmungskette 503–504 – Fettgewebe, braunes 520, 857 – Genloci 634 – Isoformen 505 Thermophilus aquaticus 247 – Polymerase-Kettenreaktion 127 THF 7 Tetrahydrofolat/Tetrahydrofolsäure Thiamin (7 Vitamin B1) 681–682, 699–700 – biochemische Tests 682 – Coenzym 111 – Hypovitaminose 699 – – Wernicke-KorsakoffSyndrom 700 – Magnesiumresorption 940 – Mangel 699 – Pyrimidinring 699 – Speicherung in der Leber 1089 – Vorkommen 699 – Zufuhr, tägliche 681 Thiaminpyrophosphat 111, 479, 481 (F), 483, 681, 699 – Decarboxylierung, oxidative 699 – Glycolyse 363 – Hexosemonophosphat-Weg 366 (F) – Transketolase 699 Thiamintransporter-2 (THTR2) 699 Thiocystein, Umwandlungsreaktionen 466 (F) Thioester – Glycolyse 361–362 – Gruppenübertragungspotential 105 – Pantothensäure 704 Thioesterase, Fettsäuresynthase 412 (F) Thioestertransfer, Proteine, selbstspleißende, autokatalytische Reifung 309 (F) Thioether 511 Thiohalbacetal, Glycolyse 361–362 Thiokinase 7 Acyl-CoA-Synthetase Thiolase, Mevalonat, Biosynthese 565 Thiole, Oxidierung, PDI 306 Thiolgruppen 591 Thiolyse, Proteine, selbstspleißende, autokatalytische Reifung 309 (F)

1254

Anhang

Thiophanring, Carboxylierung 705 (F) Thioredoxin 591, 592 (F), 696 Thioredoxin-Reduktasen 676 TH0-Lymphozyten/-Zellen 1111–1112 Threonin 45, 47, 440–441, 443 – Aufnahme, Insulin 820 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 443 – Desaminierung 441 – Plasmakonzentration 445 – Stoffwechsel 457–459 Threonin 14/161 222 Threoninaldolase, Pyridoxalphosphat 704 Threonin-Kinase-PDK1 (phospholipid-dependent kinase) 789 Threoninpeptidasen 315 Threonyl-AMP 292 thrifty-gene-Hypothese, Typ-2Diabetes mellitus 836 Thrombasthenie Glanzmann 206, 988 Thrombin 315, 986 – Aktivierung, Mutationen 990 – Blutgerinnung 981, 983 – Hemmung, Heparin 986 Thrombinschnittstelle, Proteinsynthese, gentechnische 93 Thrombocytopenie 800 Thrombomodulin 985–986 Thrombopoietin (TPO) 759, 953, 976 – Interleukine 778 Thrombosen 314, 990 – Prophylaxe, Acetylsalicylsäure 978 – – Glycoprotein-IIb-IIIa-Blocker 978 Thrombospondine 730 – Knochen 738 Thrombosthenin, Blutgerinnung 984 Thromboxan, Nierendurchblutung 896 Thromboxan A2 420, 422 – Blutstillung, zelluläre 980 Thromboxane 34, 420–425 – biologische Effekte 420 – Biosynthese 421 – Thrombozyten 977 Thrombozyten 952, 976–978 – Adhäsion, Blutstillung 980–981 – – Fibrinogenrezeptor 980 – – von-Willebrand-FaktorRezeptor 980 – Aggregation 980–981 – Aktinfilamente 977 – aktivierte, Formveränderung, Aktin 214 – – von-Willebrand-Faktor-VIIIKomplex, Bindung 980 – autokrine Stimulation 977 – Blutstillung 976

– Cytoskelett 977 – dichtes Tubulussystem (DTS) 977 – Elektronenmikroskopie 978 – Glycolyse 976 – Glycoproteine 977 – α-Granula 977 – kanikuläres System, offenes 977 – Lysosomen 977 – Megakaryozyten, Abschnürung 976 – Membransysteme 977 – Mikropartikel 977 – Mikrotubuli 977–978 – Mitochondrien 976 – ruhende 977 – Thromboxan 977 – Zahl 978 Thrombus(bildung) – Blutstillung, zelluläre 980 – Intravitalmikroskopie 984 TH1-/TH2-Lymphozyten/-Zellen 1111–1112 THTR1 (Thiamintransporter-1) 699 THTR2 (Thiamintransporter-2) 699 Thymidinkinase, Acycloguanosin 350–351 Thymidinkinase 2, mitochondriale, Mangel 604 Thymidinkinasepromotor 261 – CAAT-, GC- TATA-Box 261 Thymidinphosphorylase, mitochondriale, Mangel 604 Thymidylatsynthase 483, 592–593, 595 – Hemmung 596 – – Fluorouracil 134 – p53 595 Thymin 142–143, 592 – DNA 149 – Keto-Enol-Tautomerie 142 (F) – Pyrimidinabbau 601 (F) Thymindimere – Bildung, Sauerstoffspezies, reaktive 510 – DNA 237 – ultraviolette Strahlung 237, 238 (F) Thyminnucleotide, Biosynthese 592–593 Thyminreste, Dimerisierung, UV-Licht 238 (F) Thyminribosid 143 Thymosin 211, 213 Thymus – Funktion 1110 – T-Lymphozyten 1110–1111 Thyreocalcitonin (Calcitonin) 844, 851, 937 – Calciumstoffwechsel 933, 936–937 – cAMP 937 – C-Zellen 851

– 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 – Halbwertszeit 849 – Knochen 937 – Knorpel-/Knochenbildung 741 – Motilität, intestinale 937 – Nahrungsaufnahme, Wirkung 643 – Natriumcotransport (NaPi) 935 – Osteoklasten 937 – Osteolyse, Hemmung 937 – Parathormon 936–937 – Phosphatausscheidung, renale 933 – Phosphatstoffwechsel 933 – Plasma-Phosphatkonzentration, Erniedrigung 938 – Spleißen, alternatives 278–279 – Tumormarker 1159 – Überproduktion, Hypocalciämie 938 – – Schilddrüsenkarzinome 939 Thyreocalcitonin-Präkursor 937 (F) Thyreoglobulin (Tg) 319 – Schilddrüsenhormonbiosynthese 852 – Tyrosylreste, Iodierung 852 Thyreoidea-stimulierendes Hormon 7 TSH Thyreoperoxidase (TPO) 852–853 – Inhibitoren, antithyroidale Substanzen 854 thyreotrope Zellen 848 Thyreozyten, Stimulation 853 Thyreozyten-stimulierendes Ig (TSI) 1138 Thyroidea-stimulierendes Hormon 7 TSH Thyroliberin 7 TRH Thyroliberinase 848 – TRH-Abbau 848 Thyronamin, jodfreies (TOAM) 857 Thyrooxidase 852 Thyrostimulin 850 Thyrotropin 7 TSH thyrotropin releasing hormone 7 TRH Thyrotropin-Rezeptor-Thyrotropin-Interaktion 849 Thyroxin (Tetraiodthyronin, T4) 319, 758, 850 (F), 851–852 – Deiodasen, Wirkung 855 – Freisetzung 854 – Halbwertszeit 849 – Jod 675 – Monodeiodierung, enzymatische, reduktive 856 – Phosphatausscheidung, renale 933 Thyroxin-bindendes Globulin 7 TBG Thyroxin-Dejodasen 676

Thyrozyten 851 TH-Zellen 7 T-Helferzellen tight junctions, Zonula occludens 198 TIL (tumorinfiltrierende Lymphozyten), Krebstherapie 1161 TIM (transport complex of the inner membrane) 307 – Mitochondrien 204 – Tim9 308 – Tim10 308 TIM-Barrel 1031 TIMP (tissue inhibitors of metalloproteinases) 318, 737 – Matrix-Metalloproteinasen, Regulation 1157 – Tumorzellen 1156–1157 Tim9•10-Translokase 308 TIP47-Adaptin 201 TIPSS (transjugulärer intrahepatischer portosystemischer stentshunt) 1076 TIR (Toll/IL-1 receptor)-Domäne 791 tissue factor pathway inhibitor (TFPI), Blutgerinnung 985 tissue factor (TF) 984 – Blutgerinnung 981 tissue inhibitors of metalloproteinases 7 TIMP Titin 56, 1007–1008 – molekularer Bauplan (molecular ruler) 1008 – Muskulatur, quergestreifte 1002 – Myofibrillen 1008 Titin-assoziierte Proteine 1009 Titrationskurve – Aminosäuren 50 – Hämoglobin 59 Säuren, schwache 17 TLR (toll like receptor) 1105–1105, 1135 TLR-4 (toll like receptor-4) 799 T-Lymphozyten 1104, 1110–1117 – γδ-T-Zellen 1111 – Aktivierung, Superantigene 1115 – Antigenerkennung 1106 – – MHC-Restriktion 1110 – Entwicklung, Thymus 1110–1111 – ICOS (inducible costimulator) 1113 – Immunantwort, Terminierung 1113 – Interleukin-1-Rezeptoren 975 – MHC-Klasse-I-Moleküle 1110 – regulatorische 1106, 1111–1112 – Reifung, Thymus 1111 – Selektion 1110–1111 – Signalübertragung 1114–1115 – Toleranz, zentrale 1111 – zytotoxische 1110, 1114–1117, 1135

1255 Sachverzeichnis

TM, HIV 336 5‘-TMP (Desoxythymidin-5‘monophosphat) 144 TNF (tumor necrosis factor) 759, 792 – Entzündungen 778 – Interleukine 778 – Knochenumbau 745 – lösliche Form 792 – Membran-gebundene Form 792 – NF-κB-Signaltransduktionsweg 745 – Sekretion 760 – Signaltransduktion 792–794 TNF-α 868, 1104–1105, 1108, 1144 – Akutphase-Proteine 996 – Alkoholkonsum, chronischer 1100 – Cholestase 1101 – Cortisolsynthese 863 – Cytokine, Freisetzung 800 – Entzündung 975 – Fettgewebe 524 – Immunantwort 1133 – Infektionen, bakterielle 798 – Kupfferzellen 1098 – Lebersternzellen 1098 – Lymphozyten, Zirkulation 1129 – Makrophagen 976 – mRNA-Stabilität 281 – PGHS-2 420 – Rezeptor 226 – Serumspiegel nach intravenöser Gabe von LPS-Endotoxin 800 – Tumoren 938 – Typ-2-Diabetes mellitus 835 TNF-α-Conversions-Enzym (TACE) 318, 792 TNF-β, TH1-Zellen 1112 TNF-γ, Knochenresorption 745 TNF-Inhibitor, Crohn-Krankheit 778 TNFR (tumor necrosis factor receptor) 792 – death-domain (DD) 792 – NF-κB, Aktivierung 792 – RANK/RANKL 743 – Superfamilie 792 – – Apoptose 226 TNF-receptor-associating factor (FRAF6) 791 Tocopherol (7 Vitamin E) 32, 38, 511 (F), 566, 681–682, 691 (F), 692–695 – α-Tocopherol 511 (F), 681, 692 – – Blutgerinnung 693 – – Plasmaspiegel 692 – – Proteine, Regulation 694 – β-Tocopherol 692 – δ-Tocopherol 692, 694 – γ-Tocopherol 694 – Antioxidans 691, 693–694

– – – – – – – – – – – – –

Chylomikronen 692 Cyanobakterien 692 Fettgewebe 692 Gene, Aktivität 694 ω-Hydroxylierung 693 Hypervitaminose 695 Hypovitaminose 694 Leber 692 Lipidradikale (LO) 693 Mangel 694–695 Metabolismus 691 (F), 693 Nebenniere 692 nicht-antioxidative Funktionen 693 – Peroxyl-Radikale 693 – Resorption 692 – Resorptions-Gestations-Test 693 – Sauerstoffradikale 511 – Transport 692 – Verteilung 692 – Vitamin-E-Stoffwechsel 692 – Vorkommen 692 – Zufuhr, tägliche 681 Tocopherol-Radikal 511 (F) α-Tocopherol-Transferprotein (α-TTP) 692 Tocopherol-Transporterprotein 694 Tocopheroxyl-Radikal 691 (F) Tocotrienole 691 (F), 692 Todes-Domänen (DD, death domains), Proteine 771 TOF(time of flight)-MS 67 Togaviridae 328 tolerable upper intake level, Vitamine 680 Toleranz – HLA-vermittelte (zentrale) 1106 – immunologische 1105–1106 – zentrale, T-Lymphozyten 1111 – zentrale und periphere, Bruch 1138 Toll-like-Rezeptoren (TLR) 799, 1104–1105 – Bakterienabwehr 1135 – Immunantwort 1133 Toloniumchlorid, Methämoglobin, Reduktion 969 TOM (transport complex of the outer membrane) 307 – Mitochondrien 203 Topoisomerase I 152 – Reaktionsmechanismus 152 Topoisomerase II 152 – Chemotherapieresistenz 1161 Topoisomerasen 152 – DNA-Replikation 231 – superhelicale Strukturen, Entwindung 151 – Transkription 257 TOR (target of rapamycin) 525 Totimpfstoffe 348–349 Toxine 305

– bakterielle, extrazelluläre Wirkung 206 – – Granulozyten/Makrophagen, Aktivierung 799 – – intrazelluläre Wirkung 205–206 – Eliminierungsmechanismen 909 t-PA (tissue-type plasminogen aktivator) – Abbau 987 – Affinität 987 – arterielle Verschlüsse 988 – Endothelzellen 987 – extrazelluläre Matrix, Abbau 736 – Fibrinolyse 987 – Herzinfarkt 988 – Lungenembolie 988 TPM1, 3, 4 1006 TPO 7 Thrombopoetin TPO (Thyreoperoxidase) 852–853 TR (T3-Rezeptor) 687 – TRα1, β1, β2 858 trace-amine associated Rezeptoren (TAAR) 857 TRADD (TNF-receptor associated protein with a death domain) 792–793 Träger-DNA 241 Trägerelektrophorese 993 – Proteine 63 Trägermolekül, Blutgruppenantigene 965 TRAF (TNF-receptor associated factor) 791, 799 TRAM (translocating chain associating membrane protein) 304 TRANCE 7 RANKL Transaktivierung, Genregulation 275 Transaktivierungsdomäne, HefeZwei-Hybrid-System 249 Transaldolase, Hexosemonophosphat-Weg 366, 367 (F) Transaminasen 7 Aminotransferasen Transaminierung 432, 434 – Aminosäuren 432–434, 435 (F), 466–467 – Decarboxylierung, dehydrierende 441 – Lysinabbau 475 – Proteine, selbstspleißende 309 (F) – Pyridoxalphosphat 703 – Pyruvat 364 trans-Butensäure 34 Δ2-trans-Δ4-cis-Dienoyl-CoA, Fettsäureabbau 407, 408 (F) Transcobalamin II 710 – Rezeptoren 711 Transcortin 865, 882 – Funktion/Pathobiochemie 992 – Synthese in der Leber 1088

Transcriptase, reverse 7 reverse Transkriptase Transcuprein, Kupfertransport 668 Transdesaminierung 432 Transducin 686 Δ2-trans-Enoyl-CoA 405 – Fettsäureabbau 407, 408 (F) – Fettsäuren, β-Oxidation 405 Transfektion 241 Transferasen 113 Transferrin 659–660, 995 – Eisen, dreiwertiges 661 – Eisen-Transferrin-Sättigung 661 – Funktion/Pathobiochemie 993 – genetische Varianten 661 – Hämoglobinbiosynthese 661 – immunchemische Methoden 661 – Immunelektrophorese 995 – Plasmakonzentration 661 – Puffer 661 – Synthese in der Leber 1088 Transferrin-Rezeptor 1/2 (TfR1/2) 661, 662 (F) Transferrin-Rezeptor-mRNA 613 transfer-RNA 7 tRNA Transfettsäuren 649 Transformation 241 transforming growth factor 7 TGF transgene Mäuse, chimäre, Herstellung 252 transgene Tiere, Herstellung 251–252 transgener Organismus 251–252 Transglutaminase – Antikörper 1078 – Keratin-Intermediärfilamente, Differenzierung 749 – Polypeptidketten, Vernetzung 310 Transglutaminase K (TGK) 749 trans-Golgi-Netzwerk (TGN) 190–191 Transhydrogenase 504, 505 (F) Transhydrogenierung, Flavoproteine 700 trans-Isomere, Fettsäuren, ungesättigte 34 Transketolase – Hexosemonophosphat-Weg 366–367 – Thiaminpyrophosphat 699 Transkriptase, reverse 7 reverse Transkriptase Transkripte – Prozessierung, rRNA 267 – – tRNA-Gene 268 Transkription 256–282 – Bedeutung 256 – DNA 158, 187, 256 – Elongation 257, 262–267 – enhancer 275 – enhancer 276

T

1256

Anhang

Transkription – Eukaryote 259–270, 272 – Gene, regulierte 257 – Genom 160 – Geschwindigkeit, cis-aktivierende Elemente 275 – Hemmung 271–275 – – Actinomycin D 268–269 – – α-Amanitin 269 – – Gyrase-Hemmer 269 – – Rifampicin 269 – Histonacetylierung/-deacetylierung 273 – 1α-Hydroxylase-Gen 690 – Initiation 257, 271–275 – konstitutive 257 – Prokaryote 257–259, 271 – Promotoren 257 – Regulation 257, 276 – Regulator, p53 224 – RNA-Polymerasen 256–257, 267–268 – Termination 257 – Topoisomerasen 257 Transkriptionsaktivatoren 275–278 – enhancer 275 – Liganden-induzierbare 276 Transkriptionsauge, RNA-Synthese 257 Transkriptionsfaktoren 168, 224, 260–262, 278, 785, 788, 796, 1016, 1143 – Abbau 806 – allgemeine 260 – CREB 783 – enhancer-Sequenzen 806 – Fettsäuren 649 – genregulatorische 672 – Glycogensynthasekinase-3 382 – induzierbare 275–276 – Kerntranslokation, Signaltransduktion 806 – Liganden, Vitamine 680 – ligandenaktivierte 769 – Muskelkontraktion 535 – Muskulatur 1016 – Östrogenrezeptor 884 – Proteinbiosynthese 288 – regulierbare 275 – Rezeptorbindung 771 – RNA-Polymerasen, eukaryote 260 – Viren 339 – Zink 672 Transkriptom 158, 160 Translation – DNA 158 – mTOR 525 – Prokaryote 271 – Proteinbiosynthese 287 – Proteine, eisenabhängige 659 Translationsfaktoren 773–774 Translations-Repressor-Bindeprotein (4E-BP1) 645

Translocon 304 Translokationen – chromosomale 1144 – Fusionsgene, Entstehung 1154–1155 Transmembrandomänen 73, 926 – Bildung 305 – Chloridkanäle, spannungsregulierte 1032 – β-Faltblätter 41 – α-Helix 41 – Lipiddoppelschicht 304 – Membranen 177 Transmembrankollagene 717 Transmembranprotein F1, Virusaufnahme, Fusionierung 334 Transmembranproteine – endoplasmatisches Retikulum, raues 304 – Typ-I 767 Transmembranregion, Guanylatcyclasen 802 Transmembransegmente (S1-S6) – α-helicale, Kanalproteine 182 – – Membranen 177 – Ionenkanäle 1031 – – spannungsregulierte 1030 – Kanalproteine 1030 Transmethylierung, S-Adenosylmethionin (SAM) 463 Transmissionselektronenmikroskopie 174 Transmitter, inhibitorische 1040 Transmitter-Protonen-Antiport 1034 Δ3-trans-Octadecansäure 33 (F) Transphosphorylierungen 105 Transplantatabstoßung 1138–1139 Transplantation, allogene 1138 Transport 194 – 7 Membrantransport – aktiver, Verdauung 1069 – axoplasmatischer, Mikrotubuli 209 – Carrier-vermittelter 179, 183 – cotranslationaler 304 – dendroplasmatischer, Mikrotubuli 209 – erleichterter, Blut-HirnSchranke 1027 – gap junctions 180–183 – Hormone, weibliche 882 – durch Kanäle 179 – Kinesin-vermittelter, axonaler 210 – Kompartimente, membranumschlossene 191 – Membranen 177 – natriumabhängiger, sekundär aktiver 598 – nucleocytoplasmatischer 189 (F) – Nucleosidtransporter 598 – passiver 179 – peroxisomaler, Defekt 313

– – – –

Plasmamembran 195 Porine 182 posttranslationaler 304 – Polypeptide/Proteine 306–307 – primär aktiver 180, 183–185 – sekundär aktiver 180, 185 – – Adenosinnukleotidtranslokase 185 – – Carrier, elektrogene 492 – transzellulärer, Eisenresorption 660 – tubulärer 191–195 – vesikulärer 191–195 – – Hormone 760 Transport-ATPasen – Ionengradienten 1030 – Sinusoidalmembran 1096 Transporter – Cholesterin, Ausscheidung 177 – lysosomale 200 – Phosphatausscheidung, renale 933 – Sterine, pflanzliche, Ausscheidung 177 Transportine, nucleocytoplasmatischer Transport 189 Transportkapazität, maximale, Glucosurie 916 Transportkompartimente, tubuläre/vesikuläre 191 Transportmoleküle, Aminosäuren 429 Transportproteine 183 – 7 Carrierproteine Transportsignale – peroxisomale (PTS) 307 – Proteinbiosynthese 288 Transportsysteme – canaliculäre Membran 1096 – Innenmembran, mitochondriale 204 – Monosaccharidresorption 1069 – Sinusoidalmembran 1096 – synaptische Vesikel 1035 – Tubulusepithelien 906 Transportvesikel 202 trans-Position, Fettsäuren 649 Transsulfurierung, Methionin, Abbau 462 Transthyretin, Schilddrüsenhormone, Transport 854 transversale Tubuli, endo-/sarkoplasmatisches Retikulum 1012 Transzytose – Plasmamembran 195 – Transport, vesikulärer 192 TRAP (translocon associated protein) 304 TRE (T3-response-element) 388 treadmilling, Mikrotubuli 208 Trehalose 26 Tremor, Vitamin-E-Mangel 694

TRH (thyrotropin releasing hormone, Thyroliberin) 309, 844, 846, 847 (F)–848 (F) – Abbau, hypothalamischer 848 – Biosynthese 847–850 – Freisetzung 847–850 – G-Protein-gekoppelte Rezeptoren 783 – Halbwertszeit 849 – Plazenta 884 – TSH-Bildung 848 – Wachstumshormon, Sekretion 850 TRH-Rezeptoren – Aktivierung 848 – Mutationen 850 Triacylglycerine 35, 398, 441, 632, 647 – Abbau, Glucose, Bereitstellung 646 – – intrazellulärer 398–400 – Alkohol 650, 1099 – Assemblierung 1072 – Aufnahme, Lipoproteinlipase 819 – Biosynthese 402–403, 518 – – Alkohol 650 – – Ernährungszustand 415 – – Nahrungszufuhr 524 – chemische Zusammensetzung 573 – Chylomikronen 398, 519 – Doppelbindungen 40 – Energiebedarf, Skelettmuskulatur 532 – Energiespeicher(ung) 518 – Ethanolstoffwechsel, Leber 1100 – Fettgewebe 398, 518, 520 – Fettsäuren, Reveresterung 1071 – Funktionen 398 – Hydrolyse 517–518, 648 – Hyperlipoproteinämie Typ II 582 – Insulin 818 – LDL 574–575 – Lipase, hepatische 517 – Lipogenese 517–519 – Lipolyse 399 (A), 400 – Lipoproteine 519 – Lipoproteinlipase 519 – Löslichkeit 39 – Nahrungslipide 398 – Pankreaslipase 1070 – physikalische Eigenschaften 573 – Resorptionsphase, Leber 1086 – Resynthese 1071, 1072 (F) – Serum 400, 572 – Spaltung 517, 520, 1072 (F) – – intestinale 1072 – – Lipoproteinlipase 401 – Speicherung, Fettgewebe 520 – – in der Leber 1089 – – Skelettmuskulatur 518

1257 Sachverzeichnis

– Stoffwechsel 398–403, 648 – – Regulation 414–418 – VLDL 519 Triacylglycerin-Lipase 398, 415 – Fettgewebe 399 – hepatische 517 Triacylglycerin-Transferproteine 517, 575, 1077 – Chylomikronen, Assemblierung 1072 Triaden, sarkoplasmatisches Retikulum 1012 TRiC (TCP1 ring complex) 303 Tricarbonsäurezyklus 7 Citratzyklus Tricarboxylat-Carrier 374 – Fettsäurebiosynthese 417 Triiodthyro-Essigsäure (TRIAC) 857 Trijodthyronin (T3) 319, 758, 850 (F), 851–852, 855 (F) – Aufnahme, Infektion 636 – Cholesterinstoffwechsel 857 – Halbwertszeit 849 – Jod 675 – Knochenwachstum 742 – Mangel, Myxödem 857 – Na+/K+-ATPase 857 – Resistenz 859 – reverses 855–856 – Rezeptoren 857–858 – β3-Rezeptoren, Stimulation 857 – Speicherung in der Leber 1090 – TRH-Abbau 848 Trimethoprim, Dihydrofolatreduktase-Hemmung, bakterielle 134 Trimethyllysin, Hydroxylierung, Ascorbinsäure 698 Trimmen, Glycoproteine 545–546 trinucleotid repeats, PolyglutaminKrankheiten 1049 Triolein, energetisches Äquivalent 637 Triosekinase, Fructosestoffwechsel 365 Triosephosphatisomerase 1031 – Geschwindigkeitskonstante 107 – Glucosestoffwechsel 400 – Glycolyse 361 – kinetische Konstante 123 Tripalmitoylglycerin 35 (F) tripelhelicale Domäne, Kollagene 716, 718 Tripeptid 58 Tripeptidylepeptidase II, Tumorzellen 1107 5‘-Triphosphatende, RNA-Molekül 258 Triskelion 195 tRNA (Transfer-RNA) 162–163, 256, 287, 289–292 – Akzeptorarm 289 – aminoacylierte 291 (F)–292 (F)

– Anticodon-Codon-Wechselwirkung 289–290 – Basenpaarung 290 – cytosolische 290 – Entstehung 268 – Extra-Arm 289 – isoakzeptierende 289 – Magnesiumionen, Spermin 291 – Proteinbiosynthese, Regulation 300 – Transkripte, Prozessierung 268 – Zellkern 187 tRNAiMet 291 tRNAMet 291 tRNA-Nucleotidtransferase 268 tRNASec 299 tRNAVal 292 Tropfen, geschmolzener (molten globule), Proteine 87 Tropine 844 Tropoelastin 724, 726 Tropomyosin 694, 1006–1007 – Aktin-assoziierte Proteine 1006 – Muskulatur, glatte 1013 Tropomyosingen, Mutationen 1020 Troponin I 1013 – Phosphorylierung, Muskelrelaxation 1015 Troponin C 1013 Troponin T 1013 – Mutationen 1020 Troponine 776 – Aktin-assoziierte Proteine 1006 – Calciumstoffwechsel, Regulation 776 – kardiale 137 Troponinkomplex 1006–1007 Troponin-Tropomyosin-System, Muskelkontraktion 1013 Trypsin 133 (F), 315, 1058–1059 – Pankreas 1058 – Proteinspaltung 66 Trypsinogen 133 (F), 1058–1059 – Aktivierung 132 Tryptamin 438 Tryptophan (5-Hydroxytryptamin) 45 (F), 47, 290, 438, 440–441, 443, 518, 1038, 1042 – Abbau 472 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 443 – Codons 289 – Decarboxylierung, Serotonin 1042 – Melatoninbiosynthese 1025 – Metabolite, neurologische Erkrankungen 473 – NAD+, Synthese 700 (F), 701 – Nicotinsäuresynthese 473 – physiologische Bedeutung 473

– Plasmakonzentration 445 – Sauerstoffspezies, reaktive 510 – Serotoninabbau/-biosynthese 1025, 1042 – Stoffwechselbedeutung 468 – Synthase 433 – Umwandlung durch Darmbakterien 1076 Tryptophan-Dioxygenase 506 – Leber 473 – Tryptophanabbau 472 Tryptophanhydroxylase, Serotoninabbau/-biosynthese 1042 TSC1/TSC2 526 – Nahrungskarenz 527 – Phosphorylierung, AMP-abhängige Proteinkinase, Aktivierung 527 TSH (Thyreoidea-stimulierendes Hormon, Thyrotropin) 844–846, 848–850 – Bildung, TRH 848 – Freisetzungshemmung, Somatostatin 887 – G-Protein, Aktivierung 780 – Halbwertszeit 849 TSH-releasing hormone 7 TRH TSH-Rezeptor 850 – Schilddrüsenhormonproduktion, Regulation 850 TSH-Rezeptor-blockierendes Immunglobulin (TBI) 1138 TSI (Thyreozyten-stimulierendes Ig) 1138 tSNARE-Proteine 194 TTF1, Hypothyreose 860 TTP, mRNA-Stabilität 281 α-TTP, Proteine, Regulation 694 Tuberkulose 703 tubulärer Transport 191–195 Tubulin 302 – α-Tubulin 213 – – Mikrotubuli 208 – β-Tubulin 210, 213 – – Mikrotubuli 208 – Cytoskelett 207 – Dynamikstörungen, Colchicin, Cytostatika, Taxol bzw. VincaAlkaloide 214 tubulo-glomeruläres feedback (TGF), Nierendurchblutung 899 Tubulus – distaler 898–900, 903 – proximaler 898–899, 902 – – Calciumreabsorption 932 – – Gluconeogenese 910 – – Glutamat, Desaminierung 907–908 – – Glutamin, Desaminierung 907–908 – – Hydrogencarbonat-Resorption 903 – – Na+/H+-Austausch 907 – – Osmolarität 904

– – Protonen, Regenerierung 903 – – Reabsorptionsleistung 900 – – solvent drag 904 – transversaler, Muskelfasern, dicke 1011 Tubulusepithelien/-epithelzellen – Aldosteron 923 (F) – Ammonium-/AmmoniakSystem 908–909 – Calcium-Sensorprotein 689 – Dihydrogenphosphat-Hydrogenphosphat-System 908–909 – Megalinrezeptor 689 – Natriumresorption 902 (F) – Säure-Basen-Transport 906 – Transportsysteme 906 – Wasserresorption 904 Tubulusflüssigkeit, Henle-Schleife, dicke, aufsteigende 904 Tubulusnekrose, renale 800 Tubulussystem – dichtes (DTS), Thrombozyten 977 – Funktion 899 – Hydrogencarbonat, Transport 906–909 – Protonen, Transport 906–909 tumor necrosis factor 7 TNF tumor necrosis factor receptor 7 TNFR Tumoren/Tumorentstehung 1141–1162 – Antionkogene, Inaktivierung 1150 – Apoptose, Fehler 227 – benigne 1142 – Cancerogene 1157–1158 – Choriongonadotropin 885 – Differenzierung 1142 – eIF-4G 301 – Ferritinspiegel 663 – Folsäureantagonisten 682 – Früherkennung 1159–1160 – genetischer Fingerabdruck 1146 – Hypercalciämie 938 – Hypercortisolismus 869 – Initiation, Proteinbiosynthese 301 – Invasion 1155, 1157–1158 – invasive, Basalmembran 1156 – maligne 1142 – – Hypercalciämie 936 – – PTH-related-protein (PTHrP) 936 – Metastasierung 1155, 1157–1158 – – Kisspeptin 871 – Onkogene, Aktivierung 1150 – Stoffwechsel 1159 – – Fluordesoxyglucose-(FDG)Methode 1159 – Viren 343–345 – Wachstum, Fehlregulation 1142

T

1258

Anhang

tumorinfiltrierende Lymphozyten (TIL), Krebstherapie 1161 Tumormarker 1159–1160 – Choriongonadotropin 885 Tumorpatienten, Stickstoffbilanz 431 Tumorpromotoren, Proteinkinase C 789 Tumorsuppressor-Gene – Viren, Tumor-erzeugende 344 – Zellzyklus 1147 Tumortherapie 7 Krebstherapie Tumorviren 343–345 – Cycline 345 Tumorzellen – Anti-Gentherapie 1161 – Bindung, Basalmembranoberfläche 1156 – Ferritinspiegel 663 – Metalloproteinase-Inhibitoren 1156 – Motilität 1156 – Oberflächenrezeptoren 1156 – Tripeptidylpeptidase II 1107 – Wechselwirkungen, extrazelluläre Matrix 1156 Tunnel, Proteinbiosynthese, eukaryote, Elongation 296 Tyk2 796 Typ-1/2-Diabetes 7 unter Diabetes mellitus Typ1 bzw. Typ 2 Typ-1/2-Interferone 7 unter Interferone Typ-I-XXV-Kollagen 7 unter Kollagene Tyramin 438, 1076 tyraminarme Diät, MAO-Hemmer, nicht-selektive, irreversible 437 Tyrosin 45, 47, 49, 222, 438–439, 441, 469, 486, 1025, 1038, 1041 – Abbau 468, 471–473 – – Ascorbinsäure 698 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 443 – – Phenylalanin-Hydroxylase 468 – Hydroxylierung, Tetrahydrobiopterin 828 – iodierte Reste, Kopplung, H2O2-katalysierte 853 – Katecholaminbiosynthese 827 (F) – Plasmakonzentration 445 – Serotoninabbau/-biosynthese 1042 – Stoffwechselbedeutung 468 – Tyrosinhydroxylase-Reaktion 828 (F) Tyrosin-Aminotransferase 321 – Tyrosinabbau 471 Tyrosinase 506 – Kupfer 667 – Mangel, Menkes-Erkrankung 671

Tyrosinhydroxylase 827–828 Tyrosinkinasen 735, 788, 806, 1115 – assoziierte, Rezeptoren 770 – B-Zell-Aktivierung 1126 – FGF-Rezeptor 729 – Inhibitor STI 571, CML 1160 – Leukämie, chronisch-myeloische (CML) 1160 – membranassoziierte 1143 – Phytoöstrogene 884 – Stammzellen, Differenzierung 1124 Tyrosinkinaserezeptoren – Knorpel-/Knochenentwicklung 740 – Signalkaskaden, intrazelluläre 645 Tyrosinphosphatase 788, 796 Tyrosin-Phosphorylierung 735 Tyrosylphosphat 48 (F) Tyrosylradikal, RibonucleotidReductase 591, 592 (F) Tyrosylreste – Glycogenbiosynthese 369 – Iodierung, Thyreoglobulin 852 – Topoisomerase I 152 Tyrosyl-tRNA-Synthetase 292 T-Zell-Aktivierung – erster Signal 1113 – Indolamin-2,3-Dioxygenase 473 – molekulare Mechanismen 1112 – Schritte 1113 – Signal 1114 – Terminierung 1114 T-Zell-Antigen-Rezeptor-Komplex 1112–1113 T-Zellen 7 T-Lymphozyten T-Zell-Leukämie 344 T-Zell-Rezeptoren (TZR) 1110–1111, 1113 (F) – α/β-T-Zell-Rezeptoren 1111–1113 – γ/δ-T-Zell-Rezeptoren 1112–1113 – Immunantwort 1133 – ITAM (immunoreceptor tyrosine-based activation motif )Peptidsequenzen 1113 TZR-CD3-Komplex 1121 T-Zustand, Hämoglobin 84

U ΔU 101 U1-6, snRNP 265 Ubichinon 111, 495–496, 497 (F), 499, 566 – Elektronentransport 494–495 – Innenmembran, mitochondriale 204

– Redoxstufen 497 (F) – Reduktion, Dehydrogenase 496 – Standardpotential 103 Ubichinon-Reduktionszentrum, Blockade, Antimycin 499 Ubichinon-Zyklus – Mitochondrien 499 – Protonentransport 499 Ubihydrochinon 497 (F) – Rieske-Eisen-SchwefelZentrum 499 Ubihydrochinon:Cytochrom-cOxidoreduktase 498–499 – Atmungskette 497 Ubihydrochinon-Oxidationszentrum – Blockade, Myxothiazol 499 – – Stigmatellin 499 Ubiquitin 309–310, 792 Ubiquitinfaltung (ubiquitin fold) 77 Ubiquitin-Ligasen (E3) 320 – Apoptose 323 Ubiquitinylierung – Endozytose, Membranproteine 196 – Membranproteine, Endzytose 196 – PDGF-R 806 – Proteine 319–321 Ubiquitinyl-Transferasen 196 Ubisemichinon 497 (F), 509 UCP (uncoupling protein) 7 Thermogenin UDP (Uridindiphosphat) 111, 590 – Cerebrosid, Biosynthese 561 (F) – Sulfatid, Biosynthese 561 (F) UDP-D-Galacturonat 541 (F), 542 – Synthese 541 UDP-Galactose 542, 559, 966 (F) – Cerebrosid, Biosynthese 561 – Epimerisierung 542 – Sulfatid, Biosynthese 561 UDP-Galactose-4-Epimerase 542–543 UDP-Glucose (UDPG) 145, 369, 540 (F), 559 – Bildung, Glucose-6-phosphat 369 – Oxidation 541 UDP-Glucose-Dehydrogenase 541 UDP-Glucose-Pyrophosphorylase, Glycogenbiosynthese 369 UDP-Glucosyltransferase-Defekt – Hyperbilirubinämie 626 – Promotoranteil, Mutationen 626 UDP-Glucuronat/-Glucuronsäure 540 (F)–541 (F) – Biosynthese 540 (F), 541 UDP-Glucuronat-Transferasen 541

UDP-Glycogen-Transglucosylase 369 UDP-N-Acetylgalactosamin 966 (F) UDP-N-Acetylglucosamin 545 Übergangselemente (transitional elements), endoplasmatisches Retikulum 190 Übergangszustand 107 – Biokatalysatoren 107 Übergangszustandsanaloga (transition state analogs) – Enzyminhibitoren 134 – Enzymreaktionen 109, 126–127 Übergewicht 7 Adipositas Überlebensfaktoren 225 Überleitungsstück 903 UGA-Stopp-Codon 299 UGT (UDP-Glucuronat-Transferasen) 541 Ulcusleiden, Omeprazol 1067 Ullrich-(Turner-)Syndrom 752 ultraviolette Strahlung 7 UV-Licht/-Strahlung Ultrazentrifugation – analytische 64 – – Proteine 62 – präparative 65 – Proteine, hochmolekulare 64 Umesterungen, Spleißen 264 Umgebungstemperaturen 632 Umkehrphasen-Hochdruckflüssigkeitschromatographie (HPLC) 52 – Aminosäuren 52 – Peptide 66 – Proteine 61 UMP (Uridin-5’-monophosphat), Pyrimidinbiosynthese 590, 591 (F) UMP-Synthase 591, 594 – Pyrimidinbiosynthese 591 Umstellungsregion, Immunglobuline 1119 uncoating, Influenzaviren 334–335 uncoupling protein 1 (UCP1), Fettgewebe, braunes 634 unfolded protein response (UPR) 322 Uniport(er) 179 (F), 183 – polyspezifische, Tubulusepithelien 906 Unit pro Milligramm, Enzymaktivität 116 Unverträglichkeitsreaktionen, Erythrozytentransfusionen 965 uPA (urokinase-type plasminogen activator), extrazelluläre Matrix, Abbau 736 UPR (unfolded protein response) 322 upstream regulatory factors (URFs) 261

1259 Sachverzeichnis

Uracil 142–143, 238 (F), 289 – Pyrimidinabbau 601 (F) Urämie 909 Urämietoxine 909 URAT-Protein 600 Urease 600 – Darmbakterien 451 – Harnstoffkonzentration, Bestimmung 136 Ureidoisobutyrat, Pyrimidinabbau 601 Ureidopropionase – Mangel 604 – Pyrimidinabbau 601 Ureidopropionat, Pyrimidinabbau 601 Ureidosuccinat 7 Carbamylaspartat Uricosurica, Hyperurikämie 603 uricotelische Form, Stickstoffausscheidung 429 Uridin 143 Uridindiphosphat 7 UDP Uridindiphosphatglucose 7 UDPG Uridindiphosphat-Glucose 7 UDP-Glucose Uridin-5‘-monophosphat 7 UMP Uridinnucleotide, Biosynthese 591 Uridintriphosphat 7 UTP Urin 914–917 – Acidität, titrierbare 908 – Aminosäurederivate 915 – Aminosäuren, freie 914 – Ammonium/AmmoniakPuffersystem 17 – Ammoniumionen, Elimination 946 – Ausscheidung, Porphyrien 619 – – stickstoffreiche Kost 914 – cAMP 936 – chemische Zusammensetzung 914–915 – Dihydrogenphosphat/Hydrogenphosphat-Puffersystem 17 – Farbe 914 – Geruch 914 – Gewicht, spezifisches 914 – Hormone 915 – Hydrogencarbonatelimination 946 – Hydroxyprolin 915 – hypotoner, Dehydration 920 – Ketonkörper 916 – Konzentration, osmotische 905 – konzentrierter, Gefrierpunktserniedrigung 12 – – Osmolalität 12 – Methylhistidin 915 – Natriumausscheidung 921 – Nitrat 914 – organische Bestandteile 915 – Pathobiochemie 915–916

– – – – – – – – –

Phosphat 915 Phosphatausscheidung 933 pH-Wert 914 Proteine 915 Protonenkonzentration 916 Puffer 908 Pyridinolin-Derivate 915 rotverfärbter, Porphyrie 618 schwefelhaltige Substanzen 915 – Sulfat, anorganisches 915 – Urochrome A/B 914 – verdünnter, Gefrierpunktserniedrigung 12 – – Osmolalität 12 – Verfärbungen, medikamentös und alimentär bedingte 914 – Vitamine 915 – Volumen, ADH-Sekretion 905 Urobilin 623 Urobilinogen 623 Urocanase, Histidinabbau 474 Urochrome A/B 914 Urodilatin 925 Urokinase 987–988 Urolithiasis 916 – Hyperoxalurie 313 Uronsäuren 23, 28, 540 – Synthese, Glucuronat/-Glucuronsäure 541 Uropepsinogen 1056 Uropontin, Calciumoxalatsteine 917 Uroporphyrin III 613 (F) Uroporphyrine, Urin 915 Uroporphyrinogen III 613 (F) – Hämbiosynthese 610 (F), 611, 613 (F) Uroporphyrinogen-III-Synthase – Hämbiosynthese 610–611 – Mangel 617 Uroporphyrinogen-Decarboxylase – Hämbiosynthese 610–611 – Mangel 618 Ursodesoxycholsäure, canaliculäre Membran 1097 Usher-Syndrom IB 214 Uterus – Hormone 882–883 – Kontraktion, Oxytocin 918 – Östrogene 883 UTP (Uridintriphosphat) 540, 590 – Glycogenbiosynthese 369 UV-Licht/-Strahlung – Cancerogenese 1158 – DNA-Schäden 237, 1148 – Thymindimere 237, 238 (F) – Vitamin-D-Stoffwechsel 688

V V1-Myosin 1006 V1-Rezeptoren 905

V2-Rezeptoren 905 – ADH 919 V3-Myosin 1006 Vacciniaviren 349 Vagina, Östrogene 883 Vagus – Histaminproduktion 1064 – Pankreassekretion 1065 – Salzsäureproduktion, Steigerung 1067 Valeriansäure, Carboxylierung 705 (F) Valin 45 (F), 47, 440, 442–443, 466–468, 486 – Abbau 466, 467 (F) – Aminosäurestoffwechsel, Muskulatur 453 – Bedarf des Menschen 439 – Biosynthese 443 – Decarboxylierung, dehydrierende 466 – – oxidative 466 – Plasmakonzentration 445 – Stoffwechsel 459 – Transaminierung 441, 466 Valyl-AMP 292 Valyl-tRNA-Synthetase 292 van‘t Hoff, Jacobus Henricus 12 Vanadium 4 – Gesamtbestand 656 – Plasmaspiegel 656 van-der-Waals-Wechselwirkungen 770 – Proteine 78 Vanillinmandelsäure – Katecholaminabbau 831 – Urin 915 Varizella-Zoster-Virus, Persistenz 343 vascular cellular adhesion molecules 7 VCAM-1 vascular endothelial growth factor 7 VEGF Vaskulitis 1138 vasoaktives intestinales Peptid 7 VIP Vasokonstriktion, Katecholamine 830 Vasopressin 7 ADH V-ATPasen 183 – Ansäuerung, luminale 183 – Defekte 200 – – Osteoklasten 183 – – Osteopetrose 184 – Lysosomen 200 – synaptische Vesikel 1035 vaults (Bögen, Gewölbe), Intrazellularraum 205 VCAM-1 (vascular cellular adhesion molecule 1) – Lymphozyten, Zirkulation 1129 – Stammzellen, Differenzierung 1124 VDAC (voltage dependent anionselective channel) 178

T–V

– Porine 182 VDR (Vitamin-D-Rezeptor) 687, 689 vegane Ernährung/Vegetarismus 654 VEGF (vascular endothelial growth factor) 759, 837, 1051 – Knochenbildung 739 – Rezeptor 785 – Tumoren, Angiogenese 1155 VEGF-Rezeptoren, Tumoren, Angiogenese 1155 Veitstanz 7 Chorea Huntington Vektoren – DNA, fremde, Einschleusung 241–244 – Träger-DNA-Moleküle 241 Venolen, postkapilläre 972 Ventilation, erhöhte, Protonenkonzentration 945 Verankerungsfibrillen/-filamente, dermo-dermale Junktion 750 Verbindungen, aktivierte 10 Verbindungsbogen (hairpin), Membranen 177 Verbindungs-DNA 153 Verbindungs-Histone 153 Verbindungstubulus 899 Verbrauchskoagulopathie 992 Verbrennung, physiologische, Makronährstoffe 633–635 Verdauung – Diffusion, passive 1068 – Kohlenhydrate 1069–1070 – Transport, aktiver 1069 Verdauungsenzyme, gastrointestinale 1059 Verdunstungswärme 8 Verschlussikterus, Hypercholesterinämie 583 Versican 728, 751 Verstärker (enhancer), Transkription, Eukaryoten 262 Verteilungschromatographie 52 – Aminosäuren 52 verzögerter Strang (lagging strand), DNA-Replikation 233 (F), 234 Verzweigtketten-Dehydrogenase-Komplex 441 – Aminosäuren, Abbau 466 Verzweigtkettenkrankheit 468 v-(vesicular)SNARE-Proteine 1035 Vesiculovirus 328 Vesikel – elektronendichte, Katecholamintransmitter 1042 – intrazelluläre, GLUT 4 377 – synaptische 1034 – Trennung, Transport, vesikulärer 194 Vesikel-Knospung (vesicle budding) 774 vesikulärer Transport (vesicle trafficking) 191–195, 774

1260

Anhang

vesikuläres System, Salzsäureproduktion 1055 V-Gen-Segmente, H-/L-Ketten, Antikörper 1121 Viagra£ (Sildenafil) 803 Vibrio cholerae 782, 1078 VIF, HIV 336 Villin 213 Vimentin 213 Vinca-Alkaloide – Insulinsekretion 814 – Krebstherapie 1160 – Tubulindynamik, Störungen 214 Vinculin 213, 734, 1008 VIP (vasoaktives intestinales Peptid) 937 – Hemmung durch Somatostatin 887 – Pankreassekretion 1065 – Vorkommen/Funktion 1063 Virämie, Vermehrungsphase, erste 348 Viren 325–353 – Adsorption 330–333 – Aufbau 326–330 – Aufnahme 333–334 – Capside 326 – – Symmetrieform 327 – Chaperone 340 – DNA-Polymerasen 337, 339 – Familien 327–329 – Freisetzung 340–342 – Genexpression 335–339 – Genom 327 – Hämagglutinin 340 – Immunabwehr 1135–1136 – Immunantwort, spezifische 1136 – Knospung (budding) 340 – membranumhüllte 326–327 – Morphogenese 339–340 – N-Acetyl-Neuraminsäure 340, 342 – Neuraminidase-Aktivität (NA) 342 – Nichtstrukturproteine 338 – Nucleinsäuren, Freisetzung 334–335 – Nucleocapside 326 – Onkogene 344 – Parasiten, intrazelluläre 330 – Polyproteine 335 – Proteasen 339 – Proteinabbau 323 – rekombinante, Lebendimpfstoffe 349 – Replikation 330–342 – – Integrase 335 – – Proteinkinase R (PKR) 797 – Rezeptor-zerstörende Eigenschaften 340 – RNA-Editing 335 – RNA-Polymerasen, RNA-abhängige 335, 338 – Sekretion 340

– Selbst-Organisation (selfassembly) 339 – Sialinsäure 340, 342 – Strukturproteine 338 – Transkriptionsfaktoren 339 – Tumor-erzeugende, v-/onc-Gene 344 – Vermehrung 330–342 – Wechselwirkung mit der Wirtszelle 326 – Zusammenbau, Ungenauigkeit 340 Virionen 326 Virostatika 350–352 Virushepatitis, Leberzellschädigung 1099, 1101 virus-host shut-off 340, 342 Virusinfektion – Abwehrmechanismen 342, 1135–1136 – Apoptose 340, 342 – Chemotherapie 350 – chronisch-persistierende 343 – Diagnostik 346–348 – DNA-Impfstoffe 349 – ELISA-Test (enzyme linked immunosorbent assay) 346 – Erregerkontakt 347 – Folgen 342–345 – Hämagglutinationstest 346 – Immunfluoreszenztest 346 – Immunglobuline 346 – Impfung 348–349 – Inkubationszeit 348 – latente 343 – Nachweis, direkter 346 – Nekrose 342 – Persistenz 342–343 – Prophylaxe 348–353 – Proteinbiosynthese, Initiation 300 – Quarantäne 348 – serologischer Verlauf 347 – Therapie 348–353 – virus-host-shut-off-Faktoren 342 – Western-Blot 346 – Zellzerstörung 342 Virusmembran 326 – Fusionierung 334 Virusoide 329 Virusproteine – Biosynthese 339 – Immunantwort, Bestimmung 346–348 – RNA-Genom 335 – Zusammenbau 339 Virusrezeptor – Typenbildung, neue 340 – Zelloberflächenmoleküle 331 Vitamin A (7a. Retinol) 32, 38, 681, 683–688 – Derivate 683 (F) – Genexpression, Regulation 687 – Hypervitaminosen 682, 688

– – – – – –

Hypovitaminosen 688 Isopreneinheiten 683 Mangel, Nachtblindheit 686 Reproduktion 687 Resorption 684 Speicherung, Ito-/Stern-Zellen 684 – Zufuhr, tägliche 681 Vitamin B1 (7 Thiamin) 681–682, 699–700 – biochemische Tests 682 Coenzym 111 – Hypovitaminose 699 – – Wernicke-KorsakoffSyndrom 700 – Magnesiumresorption 940 – Mangel 699 – Pyrimidinring 699 – Speicherung in der Leber 1089 – Vorkommen 699 – Zufuhr, tägliche 681 Vitamin B2 (7 Riboflavin) 681–682, 700 – biochemische Tests 682 – Coenzym 111 – Flavoproteine, Wasserstoffübertragende 700 – Mangel 700 – Speicherung in der Leber 1089 – Stoffwechsel 700 – Zufuhr, tägliche 681 Vitamin B6 (7 Pyridoxin) 681–682, 703 (F), 704 – biochemische Tests 682 – Coenzym 111 – Magnesiumresorption 940 – Mangel 472, 703 – – Hämbiosynthese 608 – – Hämoglobinsynthese 957 – – Tryptophanabbau 473 – Speicherung in der Leber 1089 – Tuberkulose 703 – Zufuhr, tägliche 681 Vitamin B12 (7 Cobalamin) 681, 709–711 – intrinsic factor 710 – Kobalt 672 – Lysosomen 200 – Mangel 955 – Methylmalonyl-CoA-Isomerisierung 711 (F) – Methylmalonyl-CoA-MutaseReaktion 711 (F) – Speicherung in der Leber 709, 1089–1090 – Zufuhr, tägliche 681 Vitamin C (7 Ascorbinsäure) 111, 511 (F), 681, 697–699 – biochemische Funktion 697–699 – chemische Struktur 697 – Coenzym 111 – enzymatische Reaktionen 698

– – – – – – – – – – –

GLUT1/GLUT3 697 Hypovitaminose 699 Kollagenbiosynthese 699 Mangel 719 – Skorbut 719 Redoxpotential 697 Sauerstoffradikale 511 Speicherung in der Leber 1089 Standardpotential 103 Synthese 542 – Glucuronat/-Glucuronsäure 541–542 – Transporter 697 – Tyrosinabbau 471 (F) – Vorkommen 697 – Zufuhr, tägliche 681 Vitamin D 681, 688–691 – Bindungsprotein (DBP) 689 – Hypervitaminose 682, 691 – Hypovitaminose 690 – Knochenwachstum 742 – Mangel 688 – – Osteomalacie 691 – Stoffwechsel 688 – – Sonnenlicht/UV-Strahlung 688 – Vorkommen 688 – Wirkungen 690 – Zufuhr, tägliche 681 Vitamin D2 688–691 Vitamin D3 688–691 – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Synthese 688 (F) – Rezeptoren 763 Vitamin-D-Bindeprotein (DBP) 689 Vitamin-D-Rezeptor (VDR) – 1,25-Dihydroxycholecalciferol, Expression 690 – Heterodimer 690 Vitamin E (7 Tocopherol) 32, 38, 511 (F), 566, 681–682, 691 (F), 692–695 – α-Tocopherol 511 (F), 681, 692 – – Blutgerinnung 693 – – Plasmaspiegel 692 – – Proteine, Regulation 694 – β-Tocopherol 692 – δ-Tocopherol 692, 694 – γ-Tocopherol 694 – Antioxidans 691, 693–694 – Antioxidanz 693 – Chylomikronen 692 – Cyanobakterien 692 – Fettgewebe 692 – Gene, Aktivität 694 – ω-Hydroxylierung 693 – Hypervitaminose 695 – Hypovitaminose 694 – Leber 692 – Lipidradikale (LO) 693 – Mangel 694–695 – Metabolismus 691 (F), 693 – Nebenniere 692 – nicht-antioxidative Funktionen 693

1261 Sachverzeichnis

– Peroxyl-Radikale 693 – Resorption 692 – Resorption-Gestations-Test 693 – Sauerstoffradikale 511 – Transport 692 – Verteilung 692 – Vorkommen 692 – Zufuhr, tägliche 681 Vitamin H 7 Biotin Vitamin K 681, 695–697 – biochemische Funktion 695 – Blutgerinnung 695 – Carboxylase 986 – γ-Glutamyl-Carboxylierung 696 – Stoffwechsel 695 – Vorkommen 695 – Zufuhr, tägliche 681 Vitamin-K-abhängige Proteine 695 Vitamin-K-Alkoxid 696 Vitamin-K-Antagonisten 696, 986–987 – Protein C 986 Vitamin-K-Chinon 696 Vitamin-K-Epoxid 696 Vitamin-K-Hydrochinon 696 Vitamin-K-Mangel 696 – Cumarinderivate 696 – Osteocalcin 696 – Osteoporose 696 vitaminähnliche Substanzen 711 Vitamine – Bedarf, täglicher 680 – Coenzyme 682 – Definition 680 – Einteilung 680–681 – fettlösliche 681, 683–697, 1070 – Holoenzyme 682 – katalytische 680 – Nahrungsbestandteile, essentielle 680 – regulatorische 680 – Resorption 1076 – Speicherung in der Leber 1089 – tolerable upper intake level 680 – Transportproteine 682 – Urin 915 – wasserlösliche 681, 697–711 – Zufuhr, tägliche, Referenzwerte 681 Vitaminmangel – Belastungstests 681–682 – biochemische Tests 682 Vitronectin 730 Vitronectin-Rezeptor 331 VKD-Proteine (Vitamin-K-dependent) 695 VLA-4 973 – Lymphozyten, Zirkulation 1129 VLDL (very low density lipoproteins) 517, 572, 576–579

– – – – – –

Alkohol 650 Apolipoproteine 574 Bindung 576 Eigenschaften 573 Hyperlipoproteinämie, Typ III 582 Lipoproteine, Triacylglycerinreiche 401 Resorptionsphase, Leber 1086 Synthese in der Leber 1088 Triacylglycerine 519 Vitamin-E-Stoffwechsel 692

– – – – VMAX – Enzymaktivität 124 – Enzyme, allosterische 131 Vollantigen 1106 Volumenaktivität – Enzyme 116 – katalytische, spezifische 116 Volumenmangel, ADH-Freisetzung 920 v-Onc-Proteine, Viren, Tumorerzeugende 344 v-Onkogene 1143 von-Willebrand-Faktor 988 – Blutstillung, zelluläre 980 von-Willebrand-Faktor-VIII-Komplex, Bindung, Thrombozyten, Aktivierung 980 von-Willebrand-Faktor-Rezeptor, Thrombozyten, Adhäsion 980 Vorhofdruck, ANP 926 Vorläufergen, Blutgerinnungfaktoren 984 VPR, HIV 336 Vpu (viral protein out), HIV 336, 342 V-Sequenz, Immunglobuline 1122 v-SNARE(vesicle-associated soluble N-ethylmaleimid sensitive factor attachement protein receptor)Proteine 193–194 V-Systeme, Enzymeffektoren 131 V-Typ-ATPase 1034

W Wachse 32 Wachstum – Eisenbedarf, erhöhter 667 – Energieversorgung 742 – Energiezufuhr 652 – Ernährung 652 – Folsäuremangel 709 – IGFs 888 – Insulin 820 – Koordination 742 – Stoffwechsellage 742 – T3 857 Wachstumsfaktoren 778, 845, 1143 – Corezeptoren, Proteoglykane 728

– – – – – – –

Cytokine 760 epidermale 7 EGF α-Granula 977 hämatopoietische 953 – rekombinante 953 Insulin-ähnliche 7 IGF Kinaseaktivität, intrinsische 778 – Knochenwachstum 742 – Membranrezeptor 1144 – Nahrungskarenz 529 – parakrine, Chondrogenese 739 – – Osteogenese 739 – Proteinbiosynthese, Initiation, Regulation 300 – – im Skelettmuskel 529 – Rezeptor-Tyrosinkinasen 225, 767 – Sekretion, autokrine 758 – Serum 225 – Stimulation, Phosphorylierung 806 – vaskuläre, endotheliale 7 VEGF – Zellzyklus 221, 225 Wachstumsfaktorrezeptoren, transmembranäre 1143 Wachstumsfuge, BMPs/FGFs 741 wachstumshemmender Effekt, Heparin 729 Wachstumshormon 7 GH (growth hormone, Somatotropin) Wachstumshormon-IGF-Achse 885–890 Wachstumsstörungen – Chrommangel 675 – Spurenelemente, Mangel 656 Wärme, Nahrungsenergie, absorbierte, Umwandlung 633–634 Wärmekapazität, Wasser 8 Wärmeproduktion 7 Thermogenese Waldenström-Syndrom 999 Warburg, Otto H. 115 Warmblüter – Acetyl-CoA-Carboxylase 706 – Pyruvatcarboxylase 706 Warzen, Papillomviren 343 Wasser 8–20 – Anlagerung, Kohlenstoffdoppelbindung 11 (F) – Aquaporine 904–905, 921, 1075 – Ausscheidung, Natriumausscheidung, erhöhte 922 – Bewegungen, osmotische Kräfte 12 – Dissoziation 12 – elektrische Leitfähigkeit 12 – Filtrierbarkeit, glomeruläre 896 – Gefrierpunkt 12 – glomerulär filtriertes 903 – Hydroxylionenkonzentration 13 – Ionenprodukt 13

V–W

– als Lösungsmittel 8–10 – Nahrungsstoffe, mitochondriale Oxidation 917 – Natriumtransport, aktiver 1074 – Neutralpunkt 13 – Polarität 8 – Reabsorption, Niere 899–905 – als Reaktionspartner 10 – Resorption 1074–1076 – – osmotischer Gradient 1074 – Schmelztemperatur 8 – Siedetemperatur 8 – Standardpotential 103 – Verlust, Dehydration 920 – – täglicher 918 – Wärmekapazität 8 – Zufuhr, tägliche 918 Wasserbilanz 917–918 Wasserdiffusion, transzelluläre, Aquaporin-2-Kanäle 905 Wasserdurchfluss, Sammelrohr 905 Wassereinstrom, osmotisch bedingter, Proteoglykane 728 Wasserhaushalt 917–920 – Extrazellularflüssigkeit 918 – hormonelle Regulation 918 – Osmolarität 918 – Pathobiochemie 920–921 Wasserkanäle – Defekte 186 – Henle-Schleife, dünne, absteigende 904 Wasserkanal-Molekül (Aquaporin 2), Sammelrohr 905 Wassermantel, Elastin 725 Wassermoleküle 8 – Konzentration, Lösungen, verdünnte 13 Wasserresorption 895 – ADH 919 – Aldosteron 1075 – Angiotensin II 1075 – ANP 926 – Colon 1075 – Hexosetransport 1074 – Hydrogencarbonat 1075 – Ileum 1075 – Jejunum 1074 – Osmolaritätsgradient 899 – Tubulusabschnitte 904 Wasserretention, Conn-Syndrom 927 Wassersekretion – Duodenum/Magen 1074 – pankreatische 1065–1066 – Speisebrei, hypertoner 1074 Wasserstoff 4 – Herkunft, Fettsäurebiosynthese 412–413 – NADPH/H+ 412 – Reduktionsäquivalent 491 Wasserstoffbrückenbindung 8, 9 (F) – Anziehungskräfte 72

1262

Anhang

Wasserstoffbrückenbindung – Cellulose 26 – DNA 147, 148 (F), 166 – Elektronenspindichte 72 – Fibrin 983 – α-Helix 71 – Histidin-195 118 – intramolekulare, Proteine 78 – Nucleinsäuren 9 – Proteine 9 Wasserstoffionenkonzentration – Extra-/Intrazellulärraum 14 – Magnetresonanzspektroskopie (NMR) 14 Wasserstoffperoxid 509 – Erythrozyten 956 – Methämoglobin 969 Wechselwirkungen – elektrostatische (ionische), Proteine 77–78 – hydrophobe, Proteine 78 Wechselzahl (turnover number), Enzyme 117 Werner-Syndrom 237 Wernicke-Korsakoff-Syndrom, Thiamin, Hypovitaminose 700 Western-Blot 63, 347 – Antikörpernachweis 346 – Enzymdiagnostik 138 white blood cell count (WBC) 978 Wiederholungssequenzen, umgekehrte (inverted repeats), DNA 149 Wilkins, Maurice 147 Wilms-Tumor 1147 Wilson, Kinnier 670 Wilson-Protein (ATP7B) 668, 670 – Defekte, genetische 670 – Kupferüberschuss 669 Wilson-Syndrom 670, 992 – ATP7B 670 – – Mutation 671 – D-Penicillamin 671 – Kayser-Fleischer-Ring 670 – kupferarme Kost 671 – Laborbefunde 671 Windeln, rotgefärbte, Uroporphyrinogen-III-Synthase, Mangel 617 Winterschläfer 504, 520 – Fettgewebe, braunes 520 Wnt, Proteoglykane als Cofaktoren 729 wobble-Hypothese 290 – Anticodon-Codon-Wechselwirkung 290 Wolmansche Erkrankung 200 WT-1 1147 Wucherungen 1142 Wundheilung – Aktin 213 – Hyaluronsäure 550 – Plasma-Fibronectin 731 – Störungen, Glucocorticoide 868

Wundränder, Kontraktion, Kollagene 721 Wundstarrkrampf 1036

X Xanthin 143 – Purinabbau 599 (F) Xanthindehydrogenase 599 Xanthinoxidase 506 – Hemmung, Allopurinol 127, 134 – Molybdän 671 Xanthin-Oxidoreductase, Purinabbau 599 Xanthome, Sitosterolämie 1077 Xanthosin 143 – Purinabbau 599 (F) Xanthosinmonophosphat 588 – GMP-Biosynthese 588 Xanthurensäure, Tryptophanabbau 472 (F), 473 Xanthylsäure 7 Xanthosinmonophosphat XC-Chemokine 759 XCL2 (SCM-1β) 759 Xenobiotica 508, 1090 – Ethanolstoffwechsel, Leber 1100 – Metabolisierungsenzym, Induktion 1093 Xeroderma pigmentosum (XP) 237, 239, 241 Xerophthalmie 688 Xist-RNA 163–164 X-Protein, Hepatitis-B-Virus 345 Xylulose-5-phosphat – Glycolyse 647 – Hexosemonophosphat-Weg 366 (F)–367 (F) – Lipacidogenese 647

Y YACs (yeast artificial chromosomes) 243 yeast two hybrid system 249 Y-Modell, Antikörper 1119

Z Zähne, Zinkkonzentration 672 Zahlen, nicht-neuronale 1045–1048 Zahnfluorose 674 Zahnhartgewebe, Fluorid 674 Zahnpasta, Fluorid 673 Zanamivir 352 – Neuraminidase-Hemmung 134

ZAP70 1115 Zapfen (Retina) 685–686 – Depolarisierung 686 – Rhodopsin 685 Z-DNA 149, 150 (F) – Struktureigenschaften 149 Zelladhäsion, extrazelluläre Matrix 730 Zelladhäsionsmoleküle (cell adhesion molecules) 197, 199, 317 – APC-Protein 1151 Zellaktivierung, Calcium 930–931 Zellarchitektur, korrekte, Ausbildung, Integrine 735 zellbiologische Methoden, Entwicklung 174–175 Zelldifferenzierung – extrazelluläre Matrix 730 – Integrine 736 – mTOR 525 Zellen 6 – α-Zellen, Langerhanssche Inseln, Glucagon 823 – – Pankreas, endokrines 811 – β-Zellen, Depolarisierung, Insulinsekretion, Glucosestimulierte 814 – – Diabetes mellitus, Typ I 1116 – – Glucokinase 814 – – GLUT 2 375 – – Insulinsekretion 812 – – Lipotoxizität 835 – – Pankreas, endokrines 811 – – Sulfonylharnstoff-Rezeptor 815 – δ-Zellen, Pankreas, endokrines 811 – Adenohypophyse 845 – differenzierte, Zellzyklus 221 – Differenzierung 1142 – – Vitamin A 687 – Energiegewinnung 104–106 – epidermale, Differenzierung, Calciferole 690 – epitheliale, Cadherine 198 – Kommunikation 757–760 – myofibroblastenähnliche/ -artige, Alkoholkonsum, chronischer 1100 – – Lebersternzellen 1098 – neuronale 1029–1036 – nicht terminal differenzierte, Zellzyklus 221 – Organellen 187–207 – Partikel 187–207 – perisinusoidale 1098 – photosensible 7 photosensible Zellen – Teilungsrate 220 – tierische, Expressionsvektor 244 – Wachstum, Vitamin A 687 Zell-Enzyme 135–136 – Lokalisation, intrazelluläre 136

– organspezifische 136 Zellfortsätze, Neurone 1029 Zellfunktion, extrazelluläre Matrix 730 Zellhüllproteine 748 Zellkern 176, 187–190 – Cajal bodies 188 – Chromatin 187 – Cyclin B/cdk, Translokation 223 – und Cytosol, Beziehungen 188 – DNA 187 – Kernhülle 188 – mRNA, Export 269–270 – Nucleolus 188 – Phosphatasen 806 – Schrumpfung, Apoptose 225 – Territorien 187 (F) Zellkörper (Soma), Neurone 1029 Zellmasse 638 Zell-Matrix-Interaktion/-Kontakte – Fibronectin-vermittelte 732 – Integrine/Selektine 199 (F) – Proteoglykane 728 Zellmembran – Cholesterin 43 – Lipiddoppelschicht 41–43 – Permeabilitätsstörung, Enzymaktivität 136 Zellnekrose, akute, Leber 1099 Zelloberflächenmoleküle, Virusrezeptor 331 Zellpolarität, Ausbildung, Integrine 735 Zellproliferation – Eisen 659 – extrazelluläre Matrix 730 – Polyamine 462 Zellteilung, Folsäuremangel 709 Zelltod, programmierter 7 Apoptose Zellulose 7 Cellulose Zellwand, Peptidoglykane 30 Zellwanderung 212 – Aktin 213 – extrazelluläre Matrix 730 – Hyaluronsäure 550 Zellweger-Syndrom 313 Zellzahl, Liquor cerebrospinalis 1028 Zell-Zell-Interaktion/-Kontakte – Integrine/Selektine 199 (F) – Proteoglykane 728 Zellzyklus 220–228 – Ablauf 220–221 – Cycline 221–223, 1147 – Faktoren, exogene 225 – G0-, G1-, G2-Phase 221 – G1-, G2-Kontrollpunkt 221 – Interphase 221 – Kompetenzfaktoren 1143–1144 – Mitose 221 – M-Phase 221 – Progressionsfaktoren 1143–1144

1263 Sachverzeichnis

– Proliferation, kontinuierliche 221 – Proteinkinase, Cyclin-abhängige 221 – Regulation 221 – S-Phase 154, 221 – Stopp, Caspasen 793 – Tumorsuppressor-Gene 1147 – Wachstumsfaktoren 221, 225 zentralnervöse Funktionsstörungen, Pyridoxinmangel 703 Zentroblasten 1126 Zentrozyten 1126 – bcl-2-Gen 1126 Zervixkarzinom, Papillomviren 344 Zigarettenrauch – α1-Antitrypsinmangel 998 – Cancerogenese 1157–1158 zincins 315 Zink 4, 672–673 – Aufnahme, Glucocorticoide 672 – Gesamtbestand 656 – Insulin 672, 810, 816, 817 (F) – Mangel 673 – – chronische Zustände 673 – Membranen, biologische 672 – Metallothionine 676

– Plasmaspiegel 656 – Transkriptionsfaktoren 672 Zink-abhängige Proteasen 736 – Clostridien 1036 – extrazelluläre Matrix, Abbau 736 Zinkfinger 276 (F) – DNA-Bindungsdomäne 276–277, 687 Zinkfingermotiv, Proteine 276 Zinktransporter – Defekt 673 – Ileum 672 – Jejunum 672 Zinktransport-Systeme 672 ZIP-Transporter 672 – Defekt 673 Z-Membran, Muskelkontraktion 1010 ZNS (Zentralnervensystem) – Aminosäurestoffwechsel 453–454 – ATP 1044 – Glutamat-Glutamin-Zyklus 1025 – Myelinscheiden 1046 ZnT1 672 Zöliakie 1078 Zona fasciculata – Hormone 863

– Progesteron 865 Zonierung 448 Zonula – adhaerens 198 – – Stabilisierung, Aktin 214 – occludens 198 – – Plexusepithelien 1026 Z-Scheibe, Muskulatur, quergestreifte 1002–1003, 1008 Zuckerkrankheit 7 Diabetes mellitus Zuckernucleotide 312 – Transportsysteme, GolgiApparat 190 Zuckertransferasen 305 Zuckertransport, Defekte, Glucose/Galactose-Malabsorption 186 Zufallsknäuel, Proteine, denaturierte 74 Zusatzgene, HIV 336 Z-Variante, α1-Antitrypsin 997 Zweikompartment-Modell, Ernährungszustand 638 Zwergwuchs 889 – IGF-1 744 Zwischenmembranraum, Mitochondrien 203 Zwischenräume, Membranen 177

W–Z

Zwischenraumlinien, Myelinscheiden 1046 Zwitterionen, Aminosäuren 49 Zwölffingerdarmgeschwür, Salzsäure 1055 Zyklooxygenase 7 Cyclooxygenase Zyklosporin A 7 Cyclosporin A Zymogene 132 Zymogengranula, Pepsin 1056 Zymosterin, Cholesterin, Biosynthese 567 (F) Zystin 7 Cystin Zystinsteine 916 Zystinurie 1078 Zytokine 7 Cytokine Zytolyse – antigenspezifische, Makrophagen 1116 – komplementabhängige 1132 zytolytischer Komplex (C5-9), Komplementaktivierung 1131 Zytomegalievirus – Persistenz 343 – Proteinabbau 323 zytotoxische Zellen 1111 Zytotoxizität, zelluläre, antikörperabhängige (ADCC) 1116–1117, 1120